CN108260530A

CN108260530A - 一种白芨壮苗生根的培养基及其应用

Info

Publication number: CN108260530A
Application number: CN201810059583.3A
Authority: CN
Inventors: 黄刚; 付燕; 周黎; 万新屏; 郑晓峰; 何宪江; 李�杰
Original assignee: QIANDONGNAN NATIONAL POLYTECHNIC
Current assignee: QIANDONGNAN NATIONAL POLYTECHNIC
Priority date: 2018-01-22
Filing date: 2018-01-22
Publication date: 2018-07-10

Abstract

本发明涉及一种白芨壮苗生根的培养基，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+IBA0～0.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30～40g/L+琼脂4～7g/L，所述培养基pH5.6～5.8。本发明的培养基使得所培养的试管苗植株的生根率较好、植株高度较高、假鳞茎直径较大、单株须根较多。最好的生根率能达到97.9％，且诱导出来的根长势较好，植株的健壮度也很好，对下一步的移栽及提高成活率打下坚实的基础，利用本发明的培养基得到的试管苗植株假鳞茎直径能达0.7cm以上。

Description

一种白芨壮苗生根的培养基及其应用

技术领域

本发明属于药用植物栽培技术领域，涉及一种白芨壮苗生根的培养基及其应用。

背景技术

白芨(Bletilla striata)为兰科(Orchidaceae)白芨属(Bletilla)多年生草本植物，白芨不仅具有较高观赏价值，也是我国常用的中药材之一(中国植物志，1999)。白芨假鳞茎为传统止血药，其药效成分包括白芨胶质、白芨多糖，具有收敛止血、消肿生肌等功效(中国药典,2015)，常用于治疗咳血吐血、疮疡肿毒等疾病；因具有特殊的黏度特性，还可作为增稠剂、混悬剂、保湿剂和助乳化剂等应用于化妆品中，具有良好的效果(刘光斌等，2005；马世宏等，2009)，使用范围广，需求量呈现不断上升态势。野生白芨因需求被过度采挖，导致其野生自然资源急剧减少，濒临灭绝，被国家列为重点保护的野生药用植物之一，传统的人工栽培繁殖方式通常以分株法繁殖，繁殖系数低(黄泰康和孔令义,2002)。为保护白芨野生资源，人工繁育和栽培白芨成了研发人员大力研究方向，如白芨的无菌萌发与组织培养，但其分为使用了三种培养基培养各个阶段，且萌发和生根效率都有待于进一步提高。为得到更高的萌发率及更快速繁殖白芨。因白芨假鳞茎是储藏养分、水分和孕育叶芽与花芽的重要器官，也是主要的入药部位，所以通过组织培养的方法在瓶内直接诱导假鳞茎形成和膨大，不仅有利于组培苗炼苗成活，还可缩短种植年限。本发明从培养基的优化及一次性成苗的方法研究中，利用植物组织培养技术探讨快速繁殖白芨种苗的壮苗生根培养基。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种白芨壮苗生根的培养基及其应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.一种白芨壮苗生根的培养基，其特征在于，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+IBA 0～0.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30～40g/L+琼脂4～7g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

进一步，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30～40g/L+琼脂4～7g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

进一步，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+香蕉泥100g/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.5g/L+蔗糖30～40g/L+琼脂4～7g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

进一步，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+香蕉泥100g/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

2.以上任一项所述的培养基在白芨壮苗生根培养中的应用。

进一步，将萌发的白芨幼苗接种在所述培养基中，培养条件：培养温度25±1℃,光照强度1500-2000Lx，光照时间10h·d-1。

本发明的有益效果在于：1.本发明的一种白芨壮苗生根的培养基使得所培养的试管苗植株的生根率较好、植株高度较高、假鳞茎直径较大、单株须根较多。最好的生根率能达到97.9％，且诱导出来的根长势较好，植株的健壮度也很好，对下一步的移栽及提高存活率打下坚实的基础。2.白芨假鳞茎是储藏养分、水分和孕育叶芽与花芽的重要器官，也是主要的入药部位，通过组织培养的方法在瓶内直接诱导假鳞茎形成和膨大，不仅有利于组培苗炼苗成活，还可缩短种植年限；利用本发明的培养基得到的试管苗植株假鳞茎宽度能达0.7cm以上。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：

图1为实施例7中步骤(1)萌发培养基接种后10天种子萌发状态；

图2为实施例7中步骤(1)萌发培养基接种后20天种子萌发状态；

图3为实施例7中培养基繁殖的白芨苗；

图4为实施例7中培养基繁殖的白芨苗植株高度测量图；

图5为实施例7中培养基繁殖的白芨苗驯化移栽图。

具体实施方式

下面将结合附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

实验材料：白芨种子，取自贵州黔康生态科技农业发展有限公司白芨种植基地。

实施例1

快速繁殖白芨的方法：

(1)种子无菌萌发：挑选未开裂成熟的白芨蒴果，用洗洁精水清洗蒴果表面，自来水冲洗干净，在超净工作台上，75％酒精的浸泡30S，无菌水冲洗3-4遍，用0.1％升汞灭菌8～10min，再用无菌水冲洗7-8遍，用无菌纸吸干蒴果表面水分，从蒴果中部剥开，取出种子，迅速接种在萌发培养基上，每个处理接种10瓶，每瓶接种4个团块，定期观察记录，20d后分析统计结果；培养条件：培养温度25±1℃,光照强度1500Lx，光照时间10h·d-1；萌发培养基为：MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.8mg/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.3g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.8。如图1所示，白芨种子在接种10d左右，种子就开始萌发，如图2所示，20d后大部分都已经萌发，其萌发率为97.6，且植株幼叶健康偏绿。

(2)壮苗生根培养：将步骤(1)中长至1cm左右的植株，接种在MS+NAA 1mg/L+IBA0g/L+香蕉泥0g/L+AC 0g/L+脯氨酸0.3g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.8的培养基上(培养基编号为1)；每个处理接种10瓶，每瓶接种20苗，定期观察记录，70d后分析统计试验结果。培养条件：培养温度25±1℃,光照强度1500Lx，光照时间10h·d-1；

(3)试管苗驯化移栽：将长至10cm以上生根的试管苗，置于常温条件下的室内，炼苗3-4天，打开瓶盖，将苗拿出洗净琼脂，用50％多菌灵可湿性粉剂500倍液浸泡30min，移栽于配制好以腐质土∶珍珠岩＝3∶1的基质中，起小拱棚，搭上遮光率为80％的遮阳网，保持土壤水分60％左右，移栽1周后喷施营养液一次,2周后，用0.1％磷酸二氢钾+尿素进行叶面喷施,每周2次。

实施例2-11

与实施例1步骤基本相同，实施例2-11步骤(2)中壮苗生根培养阶段以表1所列培养基组合进行试验统计，最后以生根率、植株高度、假鳞茎直径、单株须根数来考察培养基的优劣，未标明的组分同实施例1，其余步骤不再赘述。

表1白芨壮苗生根培养基筛选表

表1中的生根率、苗高、假鳞茎直径、须根数的数据为10瓶数据平均值,其健壮度从差到好用“+”、“++”、“+++”、“++++”级表示。

由表1可以看出其中实施例7中的培养基，生根率达到97.9％，诱导出来的根长势很好，须根数最低达8条以上，平均能达13条以上，为后续的植株移栽及其提高成活率打下坚实基础，实施例7中的白芨苗经驯化移栽后成活率达80％以上，移栽效果如图5所示；如图3和图4所示，实施例7中的白芨植株高度最高达15.1cm、最低的也有10.6cm，且植株颜色偏绿，其假鳞茎直径最低也达到0.52cm以上，植株健壮。蔗糖的作用是提供碳源，琼脂的作用是固化培养基，所以蔗糖在30～40g/L，琼脂在4～7g/L之间都不影响本发明的效果。所以快速繁殖白芨的壮苗生根培养阶段培养基为：MS+NAA1.5mg/L+IBA 0～0.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8，优选的：MS+NAA1.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8；更优选的MS+NAA1.5mg/L+香蕉泥100g/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，pH5.6～5.8。由本发明的壮苗生根培养基结合优良的白芨种子萌发培养基，从白芨种子萌发到10cm以上的白芨苗整个过程只需90天左右，且植株健壮，就可进行驯化移栽，其生长量相当于基质直播白芨种子一年的生长量，这结果有利于快速繁殖白芨种苗，有利于白芨规模化种植及产业化发展。

白芨假鳞茎是储藏养分、水分和孕育叶芽与花芽的重要器官，也是主要的入药部位，通过组织培养的方法在瓶内直接诱导假鳞茎形成和膨大，不仅有利于组培苗炼苗成活，还可缩短种植年限；利用本发明的培养基得到的试管苗植株假鳞茎直径能达0.7cm以上。

发明人除了以上实施例所述的配方组合外，还尝试过其他添加物的组合，但其效果均不如此理想，所以不再赘述。

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+香蕉泥60～100g/L+AC0.3～0.5g/L+脯氨酸0.3～0.5g/L+蔗糖30～40g/L+琼脂4～7g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+香蕉泥100g/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.5g/L+蔗糖30～40g/L+琼脂4～7g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述培养基为在基础培养基MS上加入如下组分：NAA1.5mg/L+香蕉泥100g/L+AC0.5g/L+脯氨酸0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L，所述培养基pH5.6～5.8。

5.权利要求1-4任一项所述的培养基在白芨壮苗生根培养中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，将萌发的白芨幼苗接种在所述培养基中，培养条件：培养温度25±1℃,光照强度1500-2000Lx，光照时间10h·d-1。