CN108476982A - 一种黄精试管内无菌生根繁育的方法 - Google Patents

一种黄精试管内无菌生根繁育的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108476982A
CN108476982A CN201810334204.7A CN201810334204A CN108476982A CN 108476982 A CN108476982 A CN 108476982A CN 201810334204 A CN201810334204 A CN 201810334204A CN 108476982 A CN108476982 A CN 108476982A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sealwort
seedling
culture
bud
root
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810334204.7A
Other languages
English (en)
Inventor
陈风雷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hubei Xiang Yuan Ecological Agriculture Technology Co Ltd
Original Assignee
Hubei Xiang Yuan Ecological Agriculture Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hubei Xiang Yuan Ecological Agriculture Technology Co Ltd filed Critical Hubei Xiang Yuan Ecological Agriculture Technology Co Ltd
Priority to CN201810334204.7A priority Critical patent/CN108476982A/zh
Publication of CN108476982A publication Critical patent/CN108476982A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明涉及一种黄精试管内无菌生根繁育的方法，包括以下步骤：（1）黄精种芽选取及消毒；（2）愈伤组织诱导；（3）继代增殖培养；（4）壮苗生根；（5）沙床假植。本发明的有益效果是：本发明黄精种苗培育周期短，五个月就可形成大量黄精苗，利用丛生芽增殖分化可以大大的降低组培成本，缩短培育周期，组培的黄精种苗生长势整齐均匀，药效品质统一；繁殖速度快，不受外界环境因素影响，一年四季都能进行生产；黄精组培苗性状一致，能保持亲本的优良性状和生育期的一致性；黄精组培苗纯度较高，变异少，利于黄精大田标准化生产。

Description

一种黄精试管内无菌生根繁育的方法
技术领域
本发明涉及育苗技术领域，尤其涉及试管内无菌生根繁育，具体为一种黄精试管内无菌生根繁育的方法。
背景技术
黄精为百合科植物，具有补脾、润肺生津的作用，是我国传统名贵中药材。随着黄精用量逐年加大，黄精种植面积也逐年增加。目前黄精育苗基本为传统根茎分切繁育和种子直播繁育，根茎分切繁育方法繁殖效率低、繁殖过程中容易霉变腐烂，且成本较高；种子直播繁育方法周期较长，一般需要一年时间才可萌发成苗，且种苗纯度较差。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黄精试管内无菌生根繁育的方法，以解决目前根茎分切繁育方法繁殖效率低、繁殖过程中容易霉变腐烂，且成本较高；种子直播繁育方法周期较长，一般需要一年时间才可萌发成苗，且种苗纯度较差的问题。
为了实现以上目标，本发明通过以下的技术方案实现：（1）黄精种芽选取及消毒：选取健壮无病虫害感染的黄精块茎，将块茎表面用洗衣粉和次氯酸钠进行消毒处理，随后用清水冲洗15分钟左右，然后将黄精块茎放在无菌培养皿上，喷洒生长素进行催芽处理，待块茎表面长出一公分左右的芽苞时，将种芽用手术刀切下，然后种芽经吐温消毒处理后放入无菌培养皿中；（2）愈伤组织诱导：在超净工作台上将黄精种芽外层表皮用手术刀剥离干净，留0.5公分左右的芽尖，再将芽尖人工接种在预先配制的诱导培养基上；（3）继代增殖培养：黄精芽尖在人工控制的光照、温度、湿度及外源激素作用下，迅速膨大，经过25天左右的培养，黄精芽底部会出现丛生芽和愈伤组织，将新出现的丛生芽接种在继代培养基上进行增殖培养，通过多次的继代增殖培养黄精芽丛数量就成几何级数的增长；（4）壮苗生根：当转接的芽苞或愈伤组织分化出叶子、茎杆和少量根须时，将幼苗接种到壮苗生根培养基上，诱导植株生根和壮苗，生根培养的时间为一个月左右，这样就得到了根、茎、叶俱全的真正意义上的黄精组培苗；（5）沙床假植：将炼过的黄精组培苗用清水洗净培养基及部分老死的黑根，并用普通杀菌剂浸泡之后假植于河沙和椰糠混合的基质上，并用农膜进行覆盖，4-7天后待其重新长出新根后可移去农膜，沙床假植过渡的目的之一是提高成活率，以避免直接将黄精组培苗种到营养杯中容易造成大面积的死亡；目的之二就是提高出圃率，沙床就起到一个分级的作用，大苗和小苗可以分开出圃尽早量减少苗的参差不齐。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明专利黄精种苗培育周期短，五个月就可形成大量黄精苗，利用丛生芽增殖分化可以大大的降低组培成本，缩短培育周期，组培的黄精种苗生长势整齐均匀，药效品质统一；繁殖速度快，不受外界环境因素影响，一年四季都能进行生产；黄精组培苗性状一致，能保持亲本的优良性状和生育期的一致性；黄精组培苗纯度较高，变异少，利于黄精大田标准化生产。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一、操作器材：无菌培养皿、手术刀、超净工作台、农膜等。
二、操作过程：
1、黄精种芽选取及消毒
选取健壮无病虫害感染的黄精块茎，将块茎表面用洗衣粉和次氯酸钠进行消毒处理，随后用清水冲洗15分钟左右，然后将黄精块茎放在无菌培养皿上，喷洒生长素进行催芽处理，待块茎表面长出一公分左右的芽苞时，将种芽用手术刀切下，然后种芽经吐温消毒处理后放入无菌培养皿中。
2、愈伤组织诱导
在超净工作台上将黄精种芽外层表皮用手术刀剥离干净，留0.5公分左右的芽尖，再将芽尖人工接种在预先配制的诱导培养基上。
3、继代增殖培养
黄精芽尖在人工控制的光照、温度、湿度及外源激素作用下，迅速膨大，经过25天左右的培养，黄精芽底部会出现丛生芽和愈伤组织，将新出现的丛生芽接种在继代培养基上进行增殖培养，通过多次的继代增殖培养黄精芽丛数量就成几何级数的增长。
4、壮苗生根
当转接的芽苞或愈伤组织分化出叶子、茎杆和少量根须时，将幼苗接种到壮苗生根培养基上，诱导植株生根和壮苗，生根培养的时间为一个月左右，这样就得到了根、茎、叶俱全的真正意义上的黄精组培苗。
5、沙床假植
将炼过的黄精组培苗用清水洗净培养基及部分老死的黑根，并用普通杀菌剂浸泡之后假植于河沙和椰糠混合的基质上，并用农膜进行覆盖，4-7天后待其重新长出新根后可移去农膜，沙床假植过渡的目的之一是提高成活率，以避免直接将黄精组培苗种到营养杯中容易造成大面积的死亡；目的之二就是提高出圃率，沙床就起到一个分级的作用，大苗和小苗可以分开出圃尽早量减少苗的参差不齐。
三、操作注意事项：
1、诱导培养基配方为：1/2MS+6-BA2.5+NAA0.1，蔗糖3.0%，马铃薯汁20%，PH调至5.6；
2、增殖培养基配方：MS+6-BA3.0+NAA0.1，蔗糖3.0%，香蕉20%，PH调至5.8；
3、壮苗生根培养基配方：MS+NAA1.0，蔗糖3.0%，香蕉20%，PH5.8。
四、实验结果：
1、经过25天左右的培养，黄精芽底部会出现丛生芽和愈伤组织，将新出现的丛生芽接种在继代培养基上进行增殖培养，通过多次的继代增殖培养黄精芽丛数量就成几何级数的增长；
2、生根培养的时间为一个月左右，这样就得到了根、茎、叶俱全的真正意义上的黄精组培苗；
3、五个月就可形成大量黄精苗。
尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.一种黄精试管内无菌生根繁育的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）黄精种芽选取及消毒：选取健壮无病虫害感染的黄精块茎，将块茎表面用洗衣粉和次氯酸钠进行消毒处理，随后用清水冲洗15分钟左右，然后将黄精块茎放在无菌培养皿上，喷洒生长素进行催芽处理，待块茎表面长出一公分左右的芽苞时，将种芽用手术刀切下，然后种芽经吐温消毒处理后放入无菌培养皿中；
（2）愈伤组织诱导：在超净工作台上将黄精种芽外层表皮用手术刀剥离干净，留0.5公分左右的芽尖，再将芽尖人工接种在预先配制的诱导培养基上；
（3）继代增殖培养：黄精芽尖在人工控制的光照、温度、湿度及外源激素作用下，迅速膨大，经过25天左右的培养，黄精芽底部会出现丛生芽和愈伤组织，将新出现的丛生芽接种在继代培养基上进行增殖培养，通过多次的继代增殖培养黄精芽丛数量就成几何级数的增长；
（4）壮苗生根：当转接的芽苞或愈伤组织分化出叶子、茎杆和少量根须时，将幼苗接种到壮苗生根培养基上，诱导植株生根和壮苗，生根培养的时间为一个月左右，这样就得到了根、茎、叶俱全的真正意义上的黄精组培苗；
（5）沙床假植：将炼过的黄精组培苗用清水洗净培养基及部分老死的黑根，并用普通杀菌剂浸泡之后假植于河沙和椰糠混合的基质上，并用农膜进行覆盖，4-7天后待其重新长出新根后可移去农膜，沙床假植过渡的目的之一是提高成活率，以避免直接将黄精组培苗种到营养杯中容易造成大面积的死亡；目的之二就是提高出圃率，沙床就起到一个分级的作用，大苗和小苗可以分开出圃尽早量减少苗的参差不齐。
CN201810334204.7A 2018-04-14 2018-04-14 一种黄精试管内无菌生根繁育的方法 Pending CN108476982A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810334204.7A CN108476982A (zh) 2018-04-14 2018-04-14 一种黄精试管内无菌生根繁育的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810334204.7A CN108476982A (zh) 2018-04-14 2018-04-14 一种黄精试管内无菌生根繁育的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108476982A true CN108476982A (zh) 2018-09-04

Family

ID=63315978

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810334204.7A Pending CN108476982A (zh) 2018-04-14 2018-04-14 一种黄精试管内无菌生根繁育的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108476982A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109349116A (zh) * 2018-12-12 2019-02-19 云南山里红生物科技有限公司 一种滇黄精组织培养预处理方法
CN110431953A (zh) * 2019-08-30 2019-11-12 贵州大学 一种多花黄精种茎催芽方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102550409A (zh) * 2011-12-29 2012-07-11 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 黄精组培繁殖方法
CN102771395A (zh) * 2012-08-13 2012-11-14 安徽农业大学 一种黄精的组织培养方法
CN106106187A (zh) * 2016-08-24 2016-11-16 泰安市泰山林业科学研究院 一种建立泰山黄精高频再生体系的方法及培养基

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102550409A (zh) * 2011-12-29 2012-07-11 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 黄精组培繁殖方法
CN102771395A (zh) * 2012-08-13 2012-11-14 安徽农业大学 一种黄精的组织培养方法
CN106106187A (zh) * 2016-08-24 2016-11-16 泰安市泰山林业科学研究院 一种建立泰山黄精高频再生体系的方法及培养基

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘保财等: "多花黄精种苗繁育技术", 《福建农业科技》 *
尹宏等: "黄精无性系建立的研究 ", 《西南农业学报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109349116A (zh) * 2018-12-12 2019-02-19 云南山里红生物科技有限公司 一种滇黄精组织培养预处理方法
CN109349116B (zh) * 2018-12-12 2020-05-22 云南山里红生物科技有限公司 一种滇黄精组织培养预处理方法
CN110431953A (zh) * 2019-08-30 2019-11-12 贵州大学 一种多花黄精种茎催芽方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105706900B (zh) 杂交兰与西藏虎头兰杂交种子无菌播种育苗的方法
CN104041273A (zh) 一种中药材甜叶菊的盆栽驯化方法
CN101116424B (zh) 高效诱导培养百合小鳞茎的方法
CN102884982A (zh) 金线莲无激素种苗快繁有机生产方法
CN1255022C (zh) 兜兰的无菌播种和组织培养方法
CN102960252A (zh) 朝鲜蓟的培育方法
CN115281081A (zh) 一种微型试管脱毒种姜的繁育方法
CN101180950B (zh) 春石斛组织培养快繁方法
CN101695280B (zh) 红树莓的组织培养与快速繁殖方法
CN108476982A (zh) 一种黄精试管内无菌生根繁育的方法
CN106613079A (zh) 一种半夏种茎生产方法
CN105706872A (zh) 白芨种子直播自然繁殖育苗方法
CN105519448A (zh) 一种黄芪组培苗的培养方法
CN101015280B (zh) 滇北球花报春的组培快繁方法
CN110741937B (zh) 一种黄精快速繁殖的方法
CN110402818B (zh) 一种优种板栗成熟胚组织培养快繁育苗的方法
JPH02231023A (ja) Ｐｉｎｅｌｌｉａｅ属またはＡｎｇｅｌｉｃａ属植物の育苗方法
CN111480578A (zh) 一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法
CN115152352A (zh) 一种工业大麻无菌实生苗繁育方法
CN115024221A (zh) 一种大叶种巴戟天组培苗快速繁殖的方法及其应用
CN108260530A (zh) 一种白芨壮苗生根的培养基及其应用
CN104145825B (zh) 朝鲜蓟试管实生苗茎尖快繁育苗的方法
CN1541518A (zh) 独角石斛兰无菌播种和试管育苗技术
CN112293251A (zh) 一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法
CN112616663A (zh) 一种大幅度缩短兰州百合种植周期和种苗快速繁殖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180904

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication