CN102884982A

CN102884982A - 金线莲无激素种苗快繁有机生产方法

Info

Publication number: CN102884982A
Application number: CN2012104265799A
Authority: CN
Inventors: 罗晓青; 张显波
Original assignee: GUIZHOU SUBTROPICAL CROP INSTITUTE
Current assignee: GUIZHOU SUBTROPICAL CROP INSTITUTE
Priority date: 2012-10-31
Filing date: 2012-10-31
Publication date: 2013-01-23

Abstract

本发明公开了一种金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，包括以下步骤：步骤一、种子无菌萌发：将金线莲蒴果进行消毒处理后取出种子，将取出的种子接种于培养基Ⅰ上进行培养，至种子萌发成原球茎；步骤二、原球茎增殖分化：将种子萌发形成的原球茎转到培养基Ⅱ上进行增殖分化培养；步骤三、壮苗生根：在原球茎分化出芽长至1.5～2.5cm高时，转入培养基Ⅲ上进行壮苗生根培养，当苗长到5～6cm高、根长2～3cm时进行炼苗移栽。本发明采用“种子→原球茎→种苗”的技术路线，在培养过程中使用的培养基不加入任何激素，在保证金线莲种子能快速出苗的基础上，又能保证产出的种苗不会残留超标，能为生产金线莲有机产品提供优质种苗。

Description

金线莲无激素种苗快繁有机生产方法

技术领域

本发明涉及农业科学领域，尤其是一种金线莲无激素种苗快繁有机生产方法。

背景技术

我国兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus Bl.）有23种左右，其中部分种全草民间作药用，为珍稀名贵中药材，通称金线莲。金线莲为多年生地生草本植物，现研究开发的有：金线兰（Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.），又名花叶开唇兰；台湾银线兰（Anoectochilus formosanus Hayata）又名金线莲（台湾植物志）、台湾金线莲（台湾植物志、台湾兰科植物彩色图志）；兴仁金线莲（Anoectochilus xingrenensis Z.H.Tsi et X.H.Jin）等。民间多用于治疗糖尿病、高血脂、乙型肝炎等疾病，有“药王”“金草”之称。据研究报道，金线莲富含有多糖、微量元素、强心苷类、氨基酸、有机酸、甾体化合物、黄酮类化合物、生物碱等多种成分，其中生物碱有较强的生物活性，如镇痛等。药效学研究证实了金线莲全草水煎液具有优良的降血糖作用，所含丰富的微量元素、氨基酸、多糖等具有抗衰老、提高机体免疫能力的作用。金线莲种子在野外只有在真菌共生的情况下才能萌发，萌发率极低。由于市场需求巨大，野生金线莲受到竭泽而渔式的采挖，已造成野生资源的枯竭。

近年来，金线莲组培技术和人工种植技术获得突破，通过丛生芽培养等组培技术可获得大量种苗。金线莲作为一种价格昂贵的保健类中药材，产品质量和安全更为重要，现有组培技术均添加植物激素，会造成激素富集到金线莲种苗中，由于人工种植金线莲从种植到采收的时间较短，激素残留难以解决，产品质量达不到有机产品的标准。

发明内容

本发明的目的是：提供一种金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，它在培养过程中不添加任何激素，能获得绿色的优质金线莲种苗，产品能达到有机标准。

本发明是这样实现的：金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，包括以下步骤：

步骤一、种子无菌萌发：将金线莲蒴果进行消毒处理后取出种子，将取出的种子接种于培养基Ⅰ上进行培养，至种子萌发成原球茎；

步骤二、原球茎增殖分化：将种子萌发形成的原球茎转到培养基Ⅱ上进行增殖分化培养；

步骤三、壮苗生根：在原球茎分化出芽长至1.5～2.5cm高时，转入培养基Ⅲ上进行壮苗生根培养，当苗长到5～6cm高、根长2～3cm时进行炼苗移栽。

步骤一中所述的培养基Ⅰ为：1/2MS培养基，蔗糖为30g/L，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为6g/L，PH 为5.8。

步骤二中增殖分化培养基Ⅱ为： MS培养基，蔗糖为30g/L ，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为6g/L，马铃薯汁为100～150g/L，PH为 5.8。

步骤三中壮苗生根培养基Ⅲ为： MS培养基，蔗糖为30g/L ，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为6g/L，马铃薯汁为50～100g/L，香蕉泥为100～150g/L，PH为 5.8。

所有的培养条件均为：温度为25±2℃，光照为1500～2500Lx，光照时间为12h/d。

由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本发明采用“种子→原球茎→种苗”的技术路线，在培养过程中使用的培养基不加入任何激素，在保证金线莲种子能快速出苗的基础上，又能保证产出的种苗不会残留超标，能为生产金线莲有机产品提供优质种苗。本发明方法简单，易于产业化，使用效果好。

具体实施方式

本发明的实施例：金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，包括以下步骤：

步骤一、种子无菌萌发：在金线莲开花后，选择健壮的植株，通过人工辅助受粉获得蒴果，在受粉5个月后，蒴果尖部开如变黄时即可取下进行播种，暂时不用的蒴果可对表面进行消毒，用保鲜袋保存于冰箱里；将用于播种的金线莲蒴果用自来水洗净，用75%的酒精表面消毒30s，再用0.1%的升汞液消毒15min，无菌水冲洗5次，再浸入95%的酒精1s，取出后于酒精灯上点燃，烧尽表面酒精后，在超净工作台上剖开蒴果取出种子，将取出的种子接种于1/2MS培养基上进行培养，培养20天胚开始萌发，变绿，逐步膨大成原球茎。采用的1/2MS培养基中，蔗糖为30g/L，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为4～6g/L，PH 为5.8；

步骤二、原球茎增殖分化：当原球茎长至在培养基表面形成致密的颗粒状后，转到培养基Ⅱ上及时进行增殖分化培养；转接的次数和时间视情况而定，主要依据一是当培养瓶里的原球茎或芽过密时要及时转瓶，确保有足够的生长空间；二是培养超过3个月或培养基明显减少，养分不足时要及时转瓶；增殖分化培养采用的培养基Ⅱ为MS培养基，其中蔗糖为30g/L ，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为4～6g/L，马铃薯汁为100～150g/L，PH为 5.8；

步骤三、壮苗生根：当金线莲芽长至2～3cm时，及时转入培养基Ⅲ进行壮苗生根培养；接种要选择生长一致的芽接在一瓶，芽之间的间距1.5cm，确保有足够的生长空间；培养基Ⅲ为MS培养基，其中蔗糖为30g/L ，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为4～6g/L，马铃薯汁为50～100g/L，香蕉泥为100～150g/L，PH为 5.8；

步骤四、炼苗移栽：当苗长至5～6cm，根长2～3cm时，将培养瓶移到常温大棚炼苗10天左右，从瓶里小心将苗取出，清洗干净植株上的培养基后进行移栽；种植基质以草炭土或腐殖土为最佳；

以上所有的培养条件均为：温度为25±2℃，光照为1500～2500Lx，光照时间为12h/d。

培养基配制可用自来水、纯净水或深井水。琼脂用量可根据其质量酌情调整，有的琼脂粉每升用4g就足够了，蔗糖用食用白砂糖。

马铃薯汁和香蕉泥的制备：选品质较好不变质的马铃薯，将皮削净，去除芽眼，切成适当小块，用家用打浆机打出汁液（要过滤汁液）；香蕉泥直接用打浆机打碎即可。

MS培养基的配制（见表1），1/2MS培养基的配制在MS的基础上大量元素减半，微量元素及其他不变（见表2）

表1 MS（Murashige和Skoog,1962）培养基

表2 1/2MS培养基

Claims

1.一种金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，其特征在于：步骤一中所述的培养基Ⅰ为：1/2MS培养基，蔗糖为30g/L，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为6g/L，PH 为5.8。

3.根据权利要求1所述的金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，其特征在于：步骤二中增殖分化培养基Ⅱ为： MS培养基，蔗糖为30g/L ，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为6g/L，马铃薯汁为100～150g/L，PH为 5.8。

4.根据权利要求1所述的金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，其特征在于：步骤三中壮苗生根培养基Ⅲ为：MS培养基，蔗糖为30g/L ，活性炭为0.5～1g/L，琼脂为6g/L，马铃薯汁为50～100g/L，香蕉泥为100～150g/L，PH为 5.8。

5.根据权利要求1所述的金线莲无激素种苗快繁有机生产方法，其特征在于：所有的培养条件均为：温度为25±2℃，光照为1500～2500Lx，光照时间为12h/d。