CN106613079A - 一种半夏种茎生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种半夏种茎生产方法，属于中药材种植领域，包含外植体处理、离体球茎诱导和大棚驯化等步骤，选择叶柄为外植体进行组织培养，污染较低且诱导效果好，离体球茎诱导培养诱导效果好，经过诱导培养100~120天可得到用于大棚驯化的带芽离体球茎。这种半夏种茎生产方法实现从外植体直接诱导得到离体球茎，减少了愈伤组织、胚状体、生根等诱导过程，只需要一步操作，大大简化离体球茎诱导步骤。大棚驯化采用无土栽培，减少外界病菌的侵染，降低病害，具有较强的抗逆性。离体球茎播种于一定规格的网上，提高了采收效率。驯化栽培一季即可收获大量优质的半夏种茎供应大田大面积栽培，整个生产工艺简单易行，操作简单，较大地适用于大规模生产。

Description

一种半夏种茎生产方法
技术领域
本发明涉及中药材种植领域，具体为一种半夏种茎生产方法。
背景技术
半夏又叫三步跳、守田等，属天南星科。广泛分布于中国长江流域以及东北、华北等地区。药用植物，具有燥湿化痰，降逆止呕，生用消疖肿作用，兽医用以治锁喉癀。
半夏的繁殖分为块茎繁殖、珠芽繁殖和种子繁殖。半夏雌雄花序在同一个佛焰苞中，属同株异花传粉，一般只有较大块茎才能抽出佛焰苞，其形成的种子在自然条件下萌发率非常低。经过长期采挖，野生半夏种源日益减少。而人工种植的自留种由于长期病菌积累，容易引起像软腐病一类的病害发生。
发明内容
本发明的目的在于利用植物组织培养技术，提供一种半夏种茎生产方法。
为达到上述目的，采用的技术方案为：一种半夏种茎生产方法，其步骤如下：
1）、外植体叶柄处理：
取健壮半夏叶柄，进行清洗和灭菌，然后切成0.5~1 cm小段；
2）、离体球茎诱导：
将切段的叶柄接种于离体球茎诱导培养基，pH 5.8~6.0，25~27 ℃，光照度1600 Lx，光照12 h/d，培养100~120天后待瓶内培养基全部失水干燥，再将离体球茎取出用于大棚驯化；
3）、大棚驯化：
大棚苗床长宽高为1000 cm×150 cm×10 cm，苗床分为三层，底层为5 cm厚的育苗基质；中层为播种层，在底层上铺一层网，将半夏离体球茎播于网上，株距为1~3 cm，行距为8~10 cm ；上层为3~5 cm厚的育苗基质覆盖层；驯化控制大棚内光照度3500~4500 Lux、空气湿度60~75%、温度25~28 ℃，驯化栽培100~120天后即可采收半夏种茎；
所述离体球茎诱导培养基为：1/2MS+6-BA 0.3~0.5 mg/L+IBA 0.05~0.1 mg/L+白糖3%+琼脂0.3% 。
所述步骤1）中，清洗和灭菌是用75%乙醇擦洗半夏叶柄表面, 再用自来水冲洗，再用75% 乙醇浸泡30 s，再用灭菌去离子水涮洗3次，再用0.1% HgCl2 浸泡8~10 min，再用灭菌去离子水涮洗5次，最后用无菌滤纸吸干材料表面水份即可。
所述步骤3）中，苗床中层的网为尼龙网，线径为1.5-2 mm，网孔大小为5 mm 。
所述步骤3）中，采收的半夏种茎按大小分级再进行保存或移栽。
采用上述方案的有益效果为：这种半夏种茎生产方法实现从外植体直接诱导得到离体球茎，减少了愈伤组织、胚状体等诱导过程，简化了离体球茎诱导步骤。大棚驯化采用无土栽培，可减少生产过程外界病菌对种茎的侵染，降低了栽培后的病害，具有较强的抗逆性。驯化过程中离体球茎播种于网上，提高了采收效率。驯化栽培一季即可收获大量优质的半夏种茎供应大田大面积栽培，整个生产工艺简单易行，操作简单，较大地适用于大规模生产。
具体实施方式
下面结合实施例进一步介绍本发明，但本发明不仅限于下述实施例，可以预见本领域技术人员在结合现有技术的情况下，实施情况可能产生种种变化。
实施例1
一种半夏种茎生产方法，其步骤如下：
1）、外植体叶柄处理：选用叶片还未展开的健壮半夏叶柄作为外植体，用75%乙醇擦洗半夏叶柄表面, 再用自来水冲洗，再用75% ( V/V，体积比) 乙醇浸泡30 s，再用灭菌去离子水涮洗3次，再用0.1% ( M/V，体积质量比) HgCl2 浸泡8~10 min，再用灭菌去离子水涮洗5次，最后用无菌滤纸吸干材料表面水份完成清洗和灭菌处理，然后切成0.5~1 cm小段。
2）、离体球茎诱导：将切段的叶柄接种于离体球茎诱导培养基：1/2MS+6-BA 0.3mg/L+IBA 0.05 mg/L+白糖3%+琼脂0.3% ，pH 5.8~6.0，25~27 ℃，光照度1600 Lx，光照12h/d，培养100~120天后待瓶内培养基全部失水干燥，可形成带芽的离体球茎，再将离体球茎取出用于大棚驯化。
3）、大棚驯化：大棚苗床长宽高为1000 cm×150 cm×10 cm，为了便于采收，苗床设计为三层，底层为5 cm厚的育苗基质。中层为播种层，在底层上铺一层尼龙网，线径为1.5-2 mm，网孔大小为约为5 mm，将半夏离体球茎播于网上，株距为1~3 cm，行距为8~10cm。上层为3~5 cm厚的育苗基质覆盖层。驯化控制大棚内光照度3500~4500 Lux、空气湿度60~75%、温度25~28 ℃，驯化栽培100~120天后即可采收半夏种茎。采收时缓慢揭起尼龙网，慢慢抖下基质，即可快速的采收半夏种茎。采收的半夏种茎按大小分级再进行保存或移栽。
上述步骤1）中，外植体还可以选择半夏叶片、块茎、株芽等进行培养，经过反复试验选择叶柄为外植体进行组培污染较低且诱导效果好，是最优选的方案。
实施例2
在实施例1中，步骤2）、离体球茎诱导，所用的培养基替换为：1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+白糖3%+琼脂0.3% ，其余步骤相同。
经试验证明，上述离体球茎诱导培养基：1/2MS+6-BA 0.3~0.5 mg/L+IBA 0.05~0.1 mg/L+白糖3%+琼脂0.3% ，用于半夏叶柄组织培养其诱导效果好，经过诱导培养100~120天可得到用于大棚驯化的离体球茎。病菌感染率小，生产工艺简单，产值高，适于大规模生产。

Claims (4)

1.一种半夏种茎生产方法，其特征步骤如下：
1）、外植体叶柄处理：
取健壮半夏叶柄，进行清洗和灭菌，然后切成0.5~1 cm小段；
2）、离体球茎诱导：
将切段的叶柄接种于离体球茎诱导培养基，pH 5.8~6.0，25~27 ℃，光照度1600 Lx，光照12 h/d，培养100~120天后待瓶内培养基全部失水干燥，再将离体球茎取出用于大棚驯化；
3）、大棚驯化：
大棚苗床长宽高为1000 cm×150 cm×10 cm，苗床分为三层，底层为5 cm厚的育苗基质；中层为播种层，在底层上铺一层网，将半夏离体球茎播于网上，株距为1~3 cm，行距为8~10 cm ；上层为3~5 cm厚的育苗基质覆盖层；驯化控制大棚内光照度3500~4500 Lux、空气湿度60~75%、温度25~28 ℃，驯化栽培100~120天后即可采收半夏种茎；
所述离体球茎诱导培养基为：1/2MS+6-BA 0.3~0.5 mg/L+IBA 0.05~0.1 mg/L+白糖3%+琼脂0.3% 。
2. 根据权利要求1所述的半夏种茎生产方法，其特征是：所述步骤1）中，清洗和灭菌是用75%乙醇擦洗半夏叶柄表面, 再用自来水冲洗，再用75% 乙醇浸泡30 s，再用灭菌去离子水涮洗3次，再用0.1% HgCl2 浸泡8~10 min，再用灭菌去离子水涮洗5次，最后用无菌滤纸吸干材料表面水份即可。
3. 根据权利要求1所述的半夏种茎生产方法，其特征是：所述步骤3）中，苗床中层的网为尼龙网，线径为1.5-2 mm，网孔大小为5 mm 。
4.根据权利要求1所述的半夏种茎生产方法，其特征是：所述步骤3）中，采收的半夏种茎按大小分级再进行保存或移栽。
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