CN103408370A

CN103408370A - 一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基配方

Info

Publication number: CN103408370A
Application number: CN201310352495XA
Authority: CN
Inventors: 陈贤良
Original assignee: NINGBO FENGKANG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: NINGBO FENGKANG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2013-08-14
Filing date: 2013-08-14
Publication date: 2013-11-27

Abstract

本发明公开了一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基，属于仿野生植物栽培技术领域。该培养基的配方是由以下含量的原料制成：1/2MS培养基，蔗糖20-40g/L，α-NAA 0.1-0.3mg/L，Pro0.1-0.5g/L，AC0.5-3g/L，香蕉泥60-150g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计，其中所述培养基的pH为4.7-6.7。使用本发明的配方的苗长势更高且较整齐，茎杆粗、叶色浓绿、叶片宽大肥厚，根系发达且根量多，萌发新芽的几率显著提高，新生嫩梢的长势也更好，生长速度快。

Description

一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基配方

技术领域

本发明涉及一种仿野生植物栽培技术领域，尤其是涉及一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基配方。

背景技术

铁皮石斛是珍稀名贵中药材，素有“千金草”、“植物黄金”、“健康软黄金”之称，因其效验如神、极其稀少、生存环境特殊和卓著的滋补功效而名列“中华九大仙草”之首，被国际药用植物界称为“药界大熊猫”。现代临床应用和药理研究证实：铁皮石斛对咽喉疾病、肠胃疾病、白内障、心血管疾病、糖尿病和抑制肿瘤生长具有显著疗效；对增强免疫力、扩张血管、抗血小板凝集、提高肌体免疫机能、抗衰老、刺激唾液分泌、抗疲劳、耐缺氧、养颜美发、明目强身等具有显著功效。特别是滋阴润肺、养胃生津、健脑明目、补五脏之虚劳；对烟酒过度、劳累过度、夜生活过度、用眼用脑过度、声带嘶哑等有特殊疗效；对人的肺癌细胞、萎缩性胃炎、糖尿病有极大的抑制作用，抑制率高达74.7％～97.2％。对于我国上千万咽喉炎、气管炎、肺癌患者、4000多万糖尿病患者，1千多万教师队伍，3亿多烟民来说是极好的防病、治病、保健良药；石斛对抗氧化和延缓衰老也有显著作用，能显著提高SOD的水平，使LPO显著下降，并能有效地降低血糖，为众多糖尿病患者开辟了一条新的治疗途径，受到医学界的重视！

然而，铁皮石斛因具有独特而神奇的功效，在国内外市场供不应求。长期以来，人们用此药都是依靠采挖收集野生资源，高额利润的诱惑使野生铁皮石斛成为世界珍稀濒危植物，因而受到国家的重视和保护。因此，若能人工养殖铁皮石斛，则会大大缓解这种状况，近年来，虽然有人进行人工养殖，但是产量低，质量参差不齐，因此，研究出一种仿野生培育铁皮石斛的培养基意义重大。

例如：现有配方：MS，80g/L香蕉、0.3/L肌醇、30g/L蔗糖、琼脂粉/卡拉胶(PH值5.3-5.5)。问题和缺点：该培养基质普遍性较强，对于仿野生栽培得来的种苗没有针对性，因此不能很好地适应仿野生种苗培育。产量和质量存在缺陷。同时由于仿野生种苗对自然环境的要求苛刻，因此使用该培养基影响存活率。

由于现有配方基质不能很好的与仿野生种苗相适应，导致产量偏低，质量不高，存活率也要低于普通种苗。因此，亟需研究出一种既可以增加产量，又能保持仿野生种苗的原生态品质的配方。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基，可以有效提高人工繁殖下的铁皮石斛苗在相同培养环境下培育出优质的种苗，提高出苗量与存活率；同时，也能保持仿野生种苗的原生态品质。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基，其特征是，该培养基是由以下含量的原料制成：

1/2MS培养基，蔗糖20-40g/L，α-NAA 0.1-0.3mg/L，Pro0.1-0.5g/L，AC0.5-3g/L，香蕉泥60-150g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计，其中，AC是活性炭粉。

优选的，该培养基是由以下含量的原料制成：

1/2MS培养基，蔗糖30g/L，α-NAA0.2mg/L，Pro0.3g/L，AC1g/L，香蕉泥100g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计。

优选的，所述培养基的pH为4.7-6.7。

加入香蕉泥，具有较大的PH值缓冲作用，同时对幼苗的发育有促进作用，在相同激素水平条件下，添加香蕉泥有助于铁皮石斛根系的分化，进而加快了植株对营养的吸收，促进茎叶的生长，达到了壮苗的目的。

AC是活性炭粉，加入AC能促使铁皮石斛苗量增加，在生根培养时加入AC有利于瓶苗的生长，可以促进根系的生长。在培养过程中添加AC，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，可以减少一些有害物质的影响，对形态发生和器官形成有良好作用。

加入蔗糖，是铁皮石斛组织培养中不可缺少的碳源物质，不仅能为外植物体提供能量，而且也能维持一定的渗透压，影响着铁皮石斛植株的分化和嫩梢的生长；但蔗糖浓度不宜过高，过高的话可能会造成渗透势过高时，细胞吸水困难，导致植物生长异常，嫩芽形成率会降低，现最好适用蔗糖的浓度在30g/L。

加入α-萘乙酸，能促使细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加坐果，防止落花等，用于铁皮石斛可由植株表皮进入到植株内，随营养流输导到全株，从而促进根与茎的生长，达到壮苗的效果，但使用萘乙酸不得过浓，过浓就会有抑制效果。

脯氨酸(Pro)是植物蛋白质的组分之一，并可以游离状态广泛存在于植物体中。在干旱、盐渍等胁迫条件下，许多植物体内脯氨酸大量积累。积累的脯氨酸除了作为植物细胞质内渗透调节物质外，还在稳定生物大分子结构、降低细胞酸性、解除氨毒以及作为能量库调节细胞氧化还原势等方面起重要作用。

采用了上述技术方案，本发明的有益效果为：

使用本发明的配方的苗长势更高且较整齐，茎杆粗、叶色浓绿、叶片宽大肥厚，根系发达且根量多，萌发新芽的几率显著提高，新生嫩梢的长势也更好，生长速度快；在提高出苗量与存活率的同时也能保持仿野生种苗的原生态品质。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步说明。

实施例1

配方：1/2MS培养基，蔗糖30g/L，α-NAA0.2mg/L，Pro0.3g/L，AC1g/L，香蕉泥100g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计；pH为5.7。

实施例2

配方：1/2MS培养基，蔗糖20g/L，α-NAA0.3mg/L，Pro0.1g/L，AC1g/L，香蕉泥150g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计；p H为4.7。

实施例3

配方：1/2MS培养基，蔗糖40g/L，α-NAA0.1mg/L，Pro0.5g/L，AC1g/L，香蕉泥50g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计；p H为6.7。

使用上述培养基，进行下列实验。

1、材料和方法：

实验时间与地点：2012年11月12日-2013年3月5日；2013年3月12日-2013年6月10日，供试地点为宁波市象山县贤庠镇宁波枫康生物科技组培中心。

材料：铁皮石斛瓶苗来自浙江省宁波市象山县宁波枫康生物科技有限公司组培中心无菌苗，取生长健壮的，高为2～3cm、叶片数4～5张的种苗，弃去黄化和发育不良的植株。

培养基、培养条件和方法：培养基pH为5.7±1；每个处理接种5瓶，每瓶18颗，培养温度为27℃，光照强度1600～20001ux，光照时间12h/d。90d后分别取出全部植株苗及不定芽，进行计数记录分析。上述含量均以以1/2MS培养基的质量计。

其中NAA为萘乙酸，α-NAA为α萘乙酸。

2、结果与分析：

(1)FKZ1：1/2MS(A)；

1/2MS+NAA0.2mg/L(B)；

1/2MS+NAA1mg/L(C)；

A：苗生长较为缓慢；

B：苗植生长有侧生芽，根系生长较良好，

C：苗植株生长不良。

由此得出添加NAA浓度0.2mg/l的时候对苗生长有显著的促进作用。

(2)1/2MS+NAA0.2mg/L+AC0.5g/l(D)；

1/2MS+NAA0.2mg/L+AC1g/l(E)；

1/2MS+NAA0.2mg/L+AC1.5g/1(F)

D：植株的芽增值、茎生长加快，根系变多，新生根明显增多

E：植株的茎非常粗壮、叶片肥厚，宽大，根系粗且量广，苗生长非常好。

F：植株的芽较多、茎生长较快，根系较多

根据D、E、F苗的生长结果分析出，1/2MS+NAA0.2mg/L+AC1g/1(E)效果最好。

(3)1/2MS+NAA0.2mg/L+AC1g/1+蔗糖30g/L+Pro0.3g/L+香蕉泥100g/L(G)；

1/2MS+NAA0.2mg/L+AC1g/l+蔗糖100g/L+Pro0.3g/L+香蕉泥50g/L(H)；

1/2MS+NAA0.2mg/L+AC1g/l+蔗糖100g/L+Pro0.3g/L+香蕉泥100g/L(Q)

G：植株的芽量大，且芽饱满，没有干瘪、萎焉现象，新生嫩梢长势旺盛。

H：部分植株芽分化弱，嫩梢长势低，叶片颜色偏淡

Q：植株出现萎焉现象，整个植株长势弱，植株茎、叶、根都出现不同程度的衰败。

根据上面分析得出当蔗糖浓度在30g/l的时候对植物的生长有良好的促进作用。

FKG：1/2MS+蔗糖30g/L+a-NAA0.2mg/L+Pro0.3g/L+AC1g/L+香蕉泥100g/L。

本发明的壮苗培养基成份的试用结果表明：

香蕉泥的加入，具有较大的PH值缓冲作用，同时对幼苗的发育有促进作用，在相同激素水平条件下，添加香蕉泥有助于铁皮石斛根系的分化，进而加快了植株对营养的吸收，促进茎叶的生长，达到了壮苗的目的。

AC的加入，添加AC能促使铁皮石斛苗量增加，在生根培养时加入AC有利于瓶苗的生长，可以促进根系的生长。在培养过程中添加AC，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，可以减少一些有害物质的影响，对形态发生和器官形成有良好作用。

蔗糖的加入，是铁皮石斛组织培养中不可缺少的碳源物质，不仅能为外植物体提供能量，而且也能维持一定的渗透压，影响着铁皮石斛植株的分化和嫩梢的生长；但蔗糖浓度不宜过高，过高的话可能会造成渗透势过高时，细胞吸水困难，导致植物生长异常，嫩芽形成率会降低，现最好适用蔗糖的浓度在30g/L。

α-萘乙酸的加入，能促使细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加坐果，防止落花等，用于铁皮石斛可由植株表皮进入到植株内，随营养流输导到全株，从而促进根与茎的生长，达到壮苗的效果，但使用萘乙酸不得过浓，过浓就会有抑制效果，现我公司在用控制在0.1～0.3mg/L范围内。

新配方的苗形态表述：对照之前配方的铁皮石斛苗，新配方的苗长势更高且较整齐，茎杆粗、叶色浓绿、叶片宽大肥厚，根系发达且根量多，萌发新芽的几率显著提高，新生嫩梢的长势也更好，生长速度快。

本发明不局限于上述具体的实施方式，本领域的普通技术人员从上述构思出发，不经过创造性的劳动，所作出的种种变换，均落在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基，其特征是，该培养基是由以下含量的原料制成：

1/2MS培养基，蔗糖20-40g/L，α-NAA 0.1-0.3mg/L，Pro0.1-0.5g/L，AC0.5-3g/L，香蕉泥60-150g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计，其中AC是活性炭粉。

2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基，其特征是，该培养基是由以下含量的原料制成：

1/2MS培养基，蔗糖30g/L，α-NAA 0.2mg/L，Pro O.3g/L，AC1g/L，香蕉泥100g/L，上述含量均以以1/2MS培养基的质量计。

3.根据权利要求1或2所述的一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基，其特征是，所述培养基的pH为4.7-6.7。