KR20130055036A - 덴드로비움 속 난초의 ｄｆｒ 유전자 프로모터 - Google Patents

덴드로비움 속 난초의 ｄｆｒ 유전자 프로모터 Download PDF

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KR20130055036A
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황성수
엄완숙
박광우
최경
구자정
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Abstract

본 발명은 꽃 기관에서 특이적으로 발현되는 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 유전자의 특이적인 프로모터, 상기 프로모터를 포함하는 발현벡터, 이 발현벡터로 형질전환된 재조합 식물체, 이 발현벡터를 이용한 식물체 꽃기관의 형질 조절 방법에 관한 것이다. 본 발명에서 제공하는 프로모터는 덴드로비움속 난초의 꽃 기관에서 특이적으로 발현하는 유전자와 깊은 연관이 있는바, 다른 기관에는 영향을 미치지 않으면서 덴드로비움 난초류의 꽃 기관의 형질을 선택적으로 조절할 수 있다.

Description

덴드로비움 속 난초의 ＤＦＲ 유전자 프로모터 {Promoter for DFR gene of Dendrobium}
본 발명은 덴드로비움 (Dendrobium)속 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터에 관한 것이다. 보다 구체적으로 본 발명은 꽃 기관에서 특이적으로 발현되는 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 유전자의 특이적인 프로모터, 상기 프로모터를 포함하는 발현벡터, 이 발현벡터로 형질전환된 재조합 식물체, 이 발현벡터를 이용한 식물체 꽃기관의 형질 조절 방법에 관한 것이다.
프로모터에는 외래 유전자의 발현을 항시 발현하는 항구성 프로모터, 식물체의 전신 및 특별한 조직에만 국한시켜 형질전환 목적을 달성하는데 이용되는 특이성 프로모터들로 구분되는 데 이들은 그 기능에 따라서 다음과 같이 분류할 수 있다.
첫째로 항구성 전신발현 프로모터를 들 수 있다. 식물 항구성 프로모터로는 꽃양배추 모자이크 바이러스(CaMV: cauliflower mosaic virus)의 35S RNA 유전자의 프로모터가 대표적인 쌍떡잎식물용 프로모터로 사용되고 있고, 벼 등의 외떡잎식물용 항구성 프로모터로는 벼 액틴(actin) 및 옥수수 유비퀴틴(ubiquithin) 유전자 프로모터들이 주로 이용되어 왔으며, 최근 벼 시토크롬 C유전자(OsOc1)의 프로모터가 국내 연구진에 의해 개발되어 사용중에 있다(국내 특허등록 제429335호에 기재). 이들은 식물형질전환 기본 운반체 내에 선발마커로 이용되는 항생제나 제초제 저항성 유전자 및 리포터 유전자의 발현을 유도하기 위해 이미 내재되어 있으며, 연구적인 측면에서 목적하는 유전자의 식물체내 기능을 밝히고자 시도할 때 우선적으로 고려되는 프로모터들이다.
둘째로, 종자 특이 프로모터를 들 수 있다. 대표적인 예로서 벼 주요 저장 단백질 유전자의 프로모터들로서 황금쌀(golden rice) 개발에 사용된 벼 글루테린(glutelin) 프로모터가 현재까지 외떡잎 식물의 종자 특이적 발현을 유도하는 경우에 많이 사용되고 있고, 쌍떡잎 식물의 종자 특이적 발현을 유도하는데 주로 사용되는 프로모터로는 콩 유래 렉틴(lectin) 프로모터, 배추 유래 나핀(napin) 프로모터 및 애기장대의 종자에서 감마 토코페롤 메틸기 전이효소(γ-tocopherol methyl transferase:γ-TMT) 유전자 발현을 유도함으로써 비타민 E 생성을 증진시킨 연구에 사용된 당근 유래 DC-3 프로모터, 들깨 유래 올레오신(oleosin) 프로모터의 종자 특이발현 유도 사례가 있다. 상기 종자 특이적 프로모터들은 주로 종자 자체가 식량이나 식품 또는 식품의 원료로 사용되는 주요 작물에서 유용 단백질 축적 및 유용 물질 생성 등을 목적으로 주로 사용되고 있다.
셋째로 뿌리 특이 발현 프로모터이다. 아직 상용화된 사례는 없으나 애기장대 퍼옥시다제(peroxidase, prxEa)가 분리되어 뿌리 특이적 발현을 확인하였고, 최근 고구마 유래의 매즈 유전자(ibMADS)와 당 유도성 에이디피 글루코즈 파이로포스파타제(ADP-glucose pyrophosphatase, AGPase) 유전자가 분리되어 해당 프로모터가 뿌리에서 특이 발현을 유도하며 당근, 무에서 뿌리 특이적 일시적 발현을 유도함을 확인하여 특허 등록(대한민국 등록번호 제10-0604186호, 제10-0604191호)된 바 있다. 이들 프로모터는 식량이나 식품, 또는 식품의 원료로 사용되는 주요 뿌리작물에서 농업적 형질 개량이나 유용 단백질 축적 및 유용 물질 생성 등을 목적으로 주로 사용이 기대될 수 있다.
넷째로, 잎 등의 기타 조직 특이 프로모터를 들 수 있다. 잎 등의 광합성 조직에서만 강력한 유전자의 발현을 유도하는 벼와 옥수수 유래의 알비씨에스 (rbcS: ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit)프로모터, 아그로박테리움 유래의 식물 뿌리 발현을 유도하는 RolD 프로모터, 감자 유래 괴경 특이 발현 유도 파타틴 (patatin) 프로모터, 토마토 유래의 과실 성숙 특이 발현 유도 피디에스 (PDS: phytoene synthase) 프로모터가 있다.
마지막으로 화분과 약에 특이적으로 발현하는 프로모터로 단백질 합성을 억제하는 유전자를 연결하여 inbred 라인을 만들거나 특정 목적을 위하여 웅성불임 등을 유도하기 위한 목적으로 화분 특이 프로모터가 개발되었고 꽃의 웅성기관 약의 융단조직 특이 BcA9 프로모터를 세포에 독성을 갖는 Bt 단백질 유전자의 발현을 유도케 함으로써 웅성불임 작물을 개발한 바 있다.
한편, 이러한 프로모터들은 개발자의 의도에 따라서 보다 정밀한 유전자 발현 조절을 위하여 더욱 다양한 기능을 갖는 외래 유전자 형질전환 식물체 개발이 요구되고 있으나, 아직 국내 개발된 프로모터의 이용이 부진한 것이 현실이다.
본 출원의 발명자들은 다른 기관에는 영향을 미치지 아니하면서 꽃 기관의 형질을 선택적으로 조절하기 위한 방법을 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, DFR (Dihydroflavonol 4-reductases)이 꽃 기관에 특이적으로 발현됨을 바탕으로, DFR유전자의 프로모터 및 이를 이용하여 덴드로비움속 난초의 꽃 기관의 형질 조절 방법을 개발하기에 이르렀다.
따라서, 본 발명의 목적은 덴드로비움 (Dendrobium)속 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터를 제공하고자 함이다.
또한, 본 발명의 목적은 상기 프로모터를 포함하는 발현벡터 및 상기 발현벡터로 형질전환된 재조합 식물체를 제공하고자 함이다.
또한, 본 발명의 목적은 상기 발혁벡터를 이용하여 식물체 꽃기관의 형질을 조절하는 방법을 제공하고자 함이다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명 서열번호5의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 덴드로비움 (Dendrobium)속 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터를 제공한다.
바람직하게는 상기 덴드리비움속 난초는 석곡 (Dendrobium monile)일 수 있으며, 바람직하게는 상기 프로모터는 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 유전자의 특이적 프로모터일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 프로모터를 포함하는 발현벡터를 제공하며, 바람직하게는 도 4에 개시된 개열지도를 갖는 발현벡터일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 발현벡터로 형질전환된 재조합 식물체를 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 발혁벡터로 형질전환 시키는 단계를 포함하는 식물체 꽃기관의 형질 조절 방법를 제공한다. 바람직하게는 상기 식물체는 덴드로비움속 난초일 수 있다.
본 발명에서 제공하는 프로모터는 덴드로비움속 난초의 꽃 기관에서 특이적으로 발현하는 유전자와 깊은 연관이 있는바, 다른 기관에는 영향을 미치지 않으면서 덴드로비움 난초류의 꽃 기관의 형질을 선택적으로 조절할 수 있다.
도 1은 확보된 DFR 유전자로 제작된 Inverse PCR primer를 나타내는 그림이다.
도 2는 DFR 유전자 와 프로모터의 물리지도이다.
도 3은 DFR 유전자 와 프로모터 염기서열이다. 붉은색은 open reading frame; 밑줄은 프로모터 클로닝에 사용한 프라이머와 제한효소이다.
도 4는 pDFR-K::GL3300의 개열지도이다.
본 발명 서열번호5의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 덴드로비움 (Dendrobium)속 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터를 제공한다.
본 발명에 있어서 “프로모터”란 특정한 숙주 세포에서 작동 가능하게 연결된 핵산 서열의 발현을 조절하는 DNA 서열을 의미하며, ??작동 가능하게 연결된다(operably linked)??는 것은 하나의 핵산 단편이 다른 핵산 단편과 결합되어 그의 기능 또는 발현이 다른 핵산 단편에 의해 영향을 받는 것을 말한다. 아울러, 전사를 조절하기 위한 임의의 오퍼레이터 서열, 적합한 mRNA 리보좀 결합부위를 코딩하는 서열 및 전사 및 해독의 종결을 조절하는 서열을 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 프로모터는 바람직하게는 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 유전자의 특이적 프로모터일 수 있다. 본 발명자들은 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases)유전자가 덴드로비움 (Dendrobium)속 난초의 꽃 기관에서 특이적으로 발현됨을 발견하였으며, 이를 기초로 프로모터 서열을 발견하였다.
본 발명의 꽃 기관 특이적 발현 프로모터는 서열번호 5의 일부 염기가 치환, 결실 또는 부가되더라도 꽃 기관 특이적 발현 프로모터 활성을 나타내는 경우, 이러한 변형 염기서열도 포함할 수 있다.
보다 구체적으로 변형 염기서열은 서열번호 2의 염기서열과 70% 이상, 더욱 바람직하게는 80% 이상, 더 더욱 바람직하게는 90% 이상, 가장 바람직하게는 95% 이상의 서열 상동성을 가지는 염기 서열을 포함할 수 있다. 폴리뉴클레오티드에 대한 "서열 상동성의 %"는 두 개의 최적으로 배열된 서열과 비교 영역을 비교함으로써 확인되며, 비교 영역에서의 폴리뉴클레오티드 서열의 일부는 두 서열의 최적 배열에 대한 참고 서열(추가 또는 삭제를 포함하지 않음)에 비해 추가 또는 삭제(즉, 갭)를 포함할 수 있다. 상기 %는 동일한 핵산 염기가 두 서열 모두에 존재하는 위치의 수를 확인하여 정합 위치의 수를 산출하고, 그 정합 위치의 수를 비교 영역 내의 위치의 총 수로 나누고, 그 결과에 100을 곱하여 서열 상동성 %를 산출함으로써 계산된다. 비교를 위한 서열의 최적 배열은 공지된 연산방식의 컴퓨터에 의한 임플러먼테이션에 의해 (예를 들면, GAP, BESTFIT, FASTA 및 TFAST in the Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group (GCG), 575 Science Dr., Madison, WI, or BlastN and BlastX available from the National Center for Biotechnology Information), 또는 검사에 의해 이루어질 수 있다.
본 발명의 “덴드로비움 속 난초”는 석곡, 고귀석곡, 덴드로비움 핌브리아툼, 덴드로비움 덴시플로룸 등의 덴드로비움을 모두 포함할 수 있으며, 바람직하게는 석곡일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 프로모터를 포함하는 발현벡터를 제공하며, 바람직하게는 도 4에 개시된 개열지도를 갖는 발현벡터일 수 있지만, 반드시 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 사용하는 용어인 본 발명에서 용어 “벡터”는 숙주 세포에서 목적 재조합 단백질의 유전자를 발현시키기 위한 수단으로 플라스미드 벡터, 코즈미드 벡터, 박테리오파아지 벡터 및 아데노바이러스 벡터, 레트로바이러스 벡터, 아데노-연관 바이러스 벡터 같은 바이러스 벡터 등을 포함하며, 바람직하게는 플라스미드 벡터이다.
또한, 본 발명은 상기 발현벡터로 형질전환된 재조합 식물체를 제공할 수 있다.
본 발명에서 사용하는 용어인 "재조합"은 세포가 이종의 핵산을 복제하거나, 상기 핵산을 발현하거나 또는 펩티드, 이종의 펩티드 또는 이종의 핵산에 의해 암호된 단백질을 발현하는 세포를 지칭하는 것이다. 재조합 세포는 상기 세포의 천연 형태에서는 발견되지 않는 유전자 또는 유전자 절편을, 센스 또는 안티센스 형태 중 하나로 발현할 수 있다. 또한 재조합 세포는 천연 상태의 세포에서 발견되는 유전자를 발현할 수 있으며, 그러나 상기 유전자는 인위적인 수단에 의해 세포 내 재도입된 것이다.
본 발명에서의 식물체는 본 발명의 발현벡터로 인하여 형질전환이 될수 있는 모든 식물체를 포함하여, 꽃 기관이 존재하는 식물체인 것이 바람직하다. 더욱 바람직하게는 “덴드로비움 속 난초”인석곡, 고귀석곡, 덴드로비움 핌브리아툼, 덴드로비움 덴시플로룸 등의 덴드로비움을 모두 포함할 수 있으며, 가장 바람직하게는 석곡일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 발혁벡터로 형질전환 시키는 단계를 포함하는 식물체 꽃기관의 형질 조절 방법를 제공한다. 바람직하게는 상기 식물체는 덴드로비움 속 난초일 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의거하여 보다 구체적으로 설명한다. 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
< 실시예 >
1. DFR 유전자의 꽃 기관 특이적 발현
본 발명자는 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 유전자가 꽃 기관 특이적으로 발현됨을 보고하였다 (Whang et al. J. Plant Biol. (2011) 54:209-218).
2. Inverse PCR (I- PCR )을 이용한 예상 DFR 프로모터 클로닝
DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 프로모터를 클로닝하기위해 기 보고한 전장 (full-length) DFR cDNA (Gengank No. HQ412559) 유전자의 염기서열을 바탕으로 nested primer를 제작하였다. PCR에 사용한 primer는 iDFR 5, iDFR 5-2, iDFR3-BgXb이며, 그 서열정보는 아래 표1과 같다. 전장 DFR cDNA에서의 프로모터의 좌위는 도1에 나타내었다.
프라이머 서열 서열번호
iDFR 5 5‘-GTGGTGACTGGAGCCAGTGGCTACGTGG-3‘ 서열번호1
iDFR 5-2 5‘-GGGTTATGAGGTTAGGGCAACAGTGAGAGATCC-3‘ 서열번호2
iDFR3-BgXb 5‘-CCTCGCGCCCTCTAGGTCGTTTCCG-3‘ 서열번호3
석곡의 genomic DNA를 Bgl II 제한효소로 자른 후 T4 DNA 연결효소를 이용해 genomic DNA 단편을 self-ligation 하여 주형으로 사용하였다. PCR 조건은 94℃에서 30초, 65℃에서 30초, 72℃에서 3분 동안 모두 35회전을 반응시켰다. 특이적으로 증폭된 PCR 산물은 전기영동을 통해 회수한 뒤 염기서열을 결정하였다 (서열번호4) (도2, 3). 도2에서는 DFR 유전자 와 프로모터의 물리지도를 나타내었으며, 도3에서는 예상 DFR 프로모터 및 open reading frame의 유전자 정보와, 유전자 정보상의 프라이머와 제한효소 자리를 표현하였다.
3. DFR promoter 분석
발굴한 DFR promoter의 분석을 위해 DFR promoter를 GUS-Luciferase fusion (Koo et al., 2007)에 cloning 하였다. DFR promoter는 서열번호 4 및 도면 3의 1217 에서 3465 b에 해당되는 부위 (서열번호5)를 cloning을 통해 증폭하여 GUS-Luciferase와 fusion 시켰고 vector의 이름을 pDFR-K::GL3300으로 명명하였다 (도4).
<110> NATIONAL ARBORETUM, KOREA FOREST SERVICE <120> Promoter for DFR gene of Dendrobium <160> 5 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 28 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> iDFR 5 <400> 1 gtggtgactg gagccagtgg ctacgtgg 28 <210> 2 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> iDFR 5-2 <400> 2 gggttatgag gttagggcaa cagtgagaga tcc 33 <210> 3 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> iDFR3-BgXb <400> 3 cctcgcgccc tctaggtcgt ttccg 25 <210> 4 <211> 3729 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of DFR gene and promoter thereof <400> 4 agatcttttg ctgctatctt gatctgagaa agcctgagga gagggagaaa gaggattttt 60 tgaggggggg cttgtaaggg agtttcacaa gggttgctcc aagcattgtt ctacttcttc 120 ttcttccact atagtctctt gtccttggaa ggttgagaga ggtctcttca gtaatctatc 180 aaggttctct gcctgtttca ggaggaagca aaatgagttg ggttctctgc ctcgtcgggg 240 tcggcggaaa aaagttttgt gagggattct ccgccttgct atgagcaaaa ggagagtcac 300 ggtgtttagt gcaataccca gaggacgcct ccggggagtg gacgtaggcc 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tcatgttctg gtacctataa gacatgcttt ggtggaaaat atcatattat agtgctcata 1260 agtatgttct ggcgctataa gtacaaagag agttataaga ggccaaaatc cttcgagatt 1320 ctatctgagt ttggagaaat atgtaatatg ttattctgtg atgtgaattt caattcattt 1380 gaatactcaa tattattact ctttggataa cttttatact cttattactt tgctcgacat 1440 agtgatttat tatactacag gaaatttaaa ttaagatata aaaatatatc atttagtgtt 1500 tgacatcacg gtgctacaaa ccacaacacc acaactttgc atgcaggagt tctggttact 1560 taagattaga gaaaagccac cgtgcacaat tctaaggccg ctcaactatt atccaaattt 1620 tttatatttt aaaattaatc tattttaaat ttttggttat tacaaacaaa ctactaaaat 1680 cttattcatt tcaactttat tttattacta atcatttatg gaaatttgtc tctcagatta 1740 tataaattca atgtaggtat gtctttccta gtatcctttg tgatatttta gtcacgatga 1800 gttcattctc cacctcttaa tttcaggata agttattacg tccggacaaa aaatcggaaa 1860 ttcgaacgta taccgagtaa taccgagtgc tcggtactga gctccaagtg acgtggcgcg 1920 ttgttattga tctctgcaca cgttcggtgt ccgtacacaa taattactcc aatttcagcc 1980 ggacgtctta aatctctaat tgatggccta aaattatcag tcatgaagca tcgtataaaa 2040 tacccaaacc aaaatttatt ttcttaggga caacttcaaa tatgaggcct atatatatag 2100 atttttgata atataaaatg ggattaattt tatcctataa tatgtaattt gttataagtt 2160 aacatttcga caaaatacag ggcttttaag aatttaaaca tttggtggtt agaaaaataa 2220 atttaaagtt aaattttaaa gttttgaaac taatcatgta actttatttt ggtgtcaacc 2280 aatacaagaa atttcgaaca aactgcatca tcttcctcac atatagtcgg tcatcaccgt 2340 ccatcgtcgt cgtatgctag agatgctatc agtcaccaca tgtcaccaat cgtcacctct 2400 cacggccagt cgcaaaccac cgtcagtctt gccatggggt gtcaaaatgg gttgaagagt 2460 tgggttcgga taaacctgaa attgacatga tttaaatcca tcaaccctaa tctaacccgc 2520 ttaataaaag aatctaaaag accaactcat aaaatatgat atttattgat tttagaaaaa 2580 aaaaatcaaa aagaccaact cgaacctgag ctgttaacat ttttaattaa ttttttatga 2640 cttattaatt ataaagttta agatatttgt aaaaaaaata agaatactat agccacatgt 2700 aaaaaaaatt aaaccggtga tttttagggt caaaagaggg tttctaggtc aaaccaattc 2760 cgaatcgttt attcaatcca agctcaaatt ttctaggcgg ggtttgggtc gaattgacga 2820 gtcagatcat ttattgacac ccatagttgg ccataactca ctaatagtca tcactcacca 2880 ccagccactc aacgtcatca tcttctagtt gttattcacc accattgttt cccactatca 2940 cccaccatcg tcatcttctg ccatctgttg ctattcacca ccatttgctc caactaccgc 3000 gcacgacaac catcactatc agtcaccatt tgttgccaga caccatcgag catcaccatt 3060 acgatcagtt gccaccgccg cttctctccc atcggccaca atcattgcca aacattagtt 3120 ttattttaaa agctaacaaa ttaaaaaaaa accttaaatt tattttataa ataatcaaaa 3180 atcacaaaat atttcaaata taaaaattct actattttaa atacatccaa ttttcaaata 3240 aatattgcgt ccaaacagtc agtcaactac cacgccccaa tttcaaccgc cattccctat 3300 ccgacggtca acgatttcga ttcatcgttt gaaagttaga atttcaaaga cttgccgatc 3360 gaactcacgc aacaaaaccc aagcaaaatg tccatgtgtc agatgcataa actggtgtca 3420 ttactgctgg tgcagacgac aagtatattt ctttctataa attgatctca tcgttgtgct 3480 gtgtgtgagt tgaactgaaa tggagaaaga gaggaagggt ccagtagtgg tgactggagc 3540 cagtggctac gtgggctcat ggctggtgat gaagcttctt cagaagggtt atgaggttag 3600 ggcaacagtg agagatccgg gttatgaggt tagggcaaca gtgagagatc caacaaatct 3660 caagaaagtg aagcctttgc tggatctccc gcgctccaat gaactgctca gcatttggaa 3720 agcagatct 3729 <210> 5 <211> 2249 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> putative promoter sequence <400> 5 ataagacatg ctttggtgga aaatatcata ttatagtgct cataagtatg ttctggcgct 60 ataagtacaa agagagttat aagaggccaa aatccttcga gattctatct gagtttggag 120 aaatatgtaa tatgttattc tgtgatgtga atttcaattc atttgaatac tcaatattat 180 tactctttgg ataactttta tactcttatt actttgctcg acatagtgat ttattatact 240 acaggaaatt taaattaaga tataaaaata tatcatttag tgtttgacat cacggtgcta 300 caaaccacaa caccacaact ttgcatgcag gagttctggt tacttaagat tagagaaaag 360 ccaccgtgca caattctaag gccgctcaac tattatccaa attttttata ttttaaaatt 420 aatctatttt aaatttttgg ttattacaaa caaactacta aaatcttatt catttcaact 480 ttattttatt actaatcatt tatggaaatt tgtctctcag attatataaa ttcaatgtag 540 gtatgtcttt cctagtatcc tttgtgatat tttagtcacg atgagttcat tctccacctc 600 ttaatttcag gataagttat tacgtccgga caaaaaatcg gaaattcgaa cgtataccga 660 gtaataccga gtgctcggta ctgagctcca agtgacgtgg cgcgttgtta ttgatctctg 720 cacacgttcg gtgtccgtac acaataatta ctccaatttc agccggacgt cttaaatctc 780 taattgatgg cctaaaatta tcagtcatga agcatcgtat aaaataccca aaccaaaatt 840 tattttctta gggacaactt caaatatgag gcctatatat atagattttt gataatataa 900 aatgggatta attttatcct ataatatgta atttgttata agttaacatt tcgacaaaat 960 acagggcttt taagaattta aacatttggt ggttagaaaa ataaatttaa agttaaattt 1020 taaagttttg aaactaatca tgtaacttta ttttggtgtc aaccaataca agaaatttcg 1080 aacaaactgc atcatcttcc tcacatatag tcggtcatca ccgtccatcg tcgtcgtatg 1140 ctagagatgc tatcagtcac cacatgtcac caatcgtcac ctctcacggc cagtcgcaaa 1200 ccaccgtcag tcttgccatg gggtgtcaaa atgggttgaa gagttgggtt cggataaacc 1260 tgaaattgac atgatttaaa tccatcaacc ctaatctaac ccgcttaata aaagaatcta 1320 aaagaccaac tcataaaata tgatatttat tgattttaga aaaaaaaaat caaaaagacc 1380 aactcgaacc tgagctgtta acatttttaa ttaatttttt atgacttatt aattataaag 1440 tttaagatat ttgtaaaaaa aataagaata ctatagccac atgtaaaaaa aattaaaccg 1500 gtgattttta gggtcaaaag agggtttcta ggtcaaacca attccgaatc gtttattcaa 1560 tccaagctca aattttctag gcggggtttg ggtcgaattg acgagtcaga tcatttattg 1620 acacccatag ttggccataa ctcactaata gtcatcactc accaccagcc actcaacgtc 1680 atcatcttct agttgttatt caccaccatt gtttcccact atcacccacc atcgtcatct 1740 tctgccatct gttgctattc accaccattt gctccaacta ccgcgcacga caaccatcac 1800 tatcagtcac catttgttgc cagacaccat cgagcatcac cattacgatc agttgccacc 1860 gccgcttctc tcccatcggc cacaatcatt gccaaacatt agttttattt taaaagctaa 1920 caaattaaaa aaaaacctta aatttatttt ataaataatc aaaaatcaca aaatatttca 1980 aatataaaaa ttctactatt ttaaatacat ccaattttca aataaatatt gcgtccaaac 2040 agtcagtcaa ctaccacgcc ccaatttcaa ccgccattcc ctatccgacg gtcaacgatt 2100 tcgattcatc gtttgaaagt tagaatttca aagacttgcc gatcgaactc acgcaacaaa 2160 acccaagcaa aatgtccatg tgtcagatgc ataaactggt gtcattactg ctggtgcaga 2220 cgacaagtat atttctttct ataaattga 2249

Claims (8)

  1. 서열번호 5의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 덴드로비움 (Dendrobium)속 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터.
  2. 제1항에 있어서, 상기 덴드로비움속 난초는 석곡(Dendrobium monile)인 것을 특징으로 하는 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터.
  3. 제1항에 있어서, 상기 프로모터는 DFR (Dihydroflavonol 4-reductases) 유전자의 특이적 프로모터인 것을 특징으로 하는 난초의 꽃 기관 특이적 프로모터.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 프로모터를 포함하는 발현벡터.
  5. 제4항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 4에 개시된 개열지도를 갖는 것을 특징으로 하는 발현 백터.
  6. 제4항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 4에 개시된 개열지도를 갖는 것을 특징으로 하는 발현 백터.
  7. 제4항의 발현벡터로 식물체를 형질전환 시키는 단계를 포함하는 식물체 꽃기관의 형질 조절 방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 식물체는 덴드로비움속 난초인 것을 특징으로 하는 식물체 꽃기관의 형질 조절 방법.
KR1020110118015A 2011-11-14 2011-11-14 덴드로비움 속 난초의 ｄｆｒ 유전자 프로모터 KR20130055036A (ko)

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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103408370A (zh) * 2013-08-14 2013-11-27 宁波枫康生物科技有限公司 一种铁皮石斛仿野生栽培种苗的培养基配方
CN105706868A (zh) * 2015-02-15 2016-06-29 汪凡越 一种促进人工栽培铁皮石斛生长的方法

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