CN105052737A - 一种滇黄精种子一步成苗的组培方法 - Google Patents

一种滇黄精种子一步成苗的组培方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种滇黄精种子一步成苗的组培方法。该方法包括滇黄精果实选取，滇黄精种子处理、滇黄精种子一步成苗培养，炼苗移栽。选取8成熟果实，置于4℃冰箱中7天；将经处理的种子接种于盛有MS+BA？0.5mg/L培养基的培养瓶中，在温度为25℃±2℃，光照时间为12-14h/天，光照强度为150lx条件下培养至黄精种子萌发2片真叶时，将培养瓶置于培养温度为25℃±2℃，光照时间为12h/天，光照强度为1500lx条件下继续培养至生根。本发明方法从种子接种一步培养成苗仅需90-99天，萌芽期从两个冬季缩短到1个月，繁育周期大大缩短，种子萌芽率达到90～95％，炼苗成活率达100％。

Description

一种滇黄精种子一步成苗的组培方法
技术领域
本发明属中药材种植技术领域，特别涉及一种滇黄精种子一步成苗的组培方法。
背景技术
滇黄精(PolygonatumkingianumColl.etHemsl.)是百合科黄精属草本植物，是常用中药黄精三种基原植物之一。黄精作为常用中药，在我国已有2000多年的用药历史，其性味甘平，入肺、脾、肾经。功效补中益气，润心肺，强筋骨。治虚损寒热，肺痨咯血，病后体虚食少，筋骨软弱，风湿疼痛，风癞癣疾,为补阴之品。近年来药理研究表明,除上述功效外,黄精还有抗菌作用,尤其是对结核杆菌和真菌有显著的效果，同时又有降低血压的作用。近期研究结果还表明黄精对增加冠状动脉血流量，减轻动脉粥样硬化程度，提高肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性有明显的作用。长期以来，由于人工栽培量较小，黄精药材来源主要以野生采集为主。随着市场对药材黄精需求量的增加和野生资源的急剧减少,采集野生黄精不但不能满足市场需求,更破坏了生态环境和黄精野生资源。由于黄精种子在自然条件下发芽率较低，自然条件下,黄精种子要经历2个冬季休眠后,才能长出一片真叶,目前在黄精人工栽培中多采用块茎进行无性繁殖。繁殖周期长、繁殖系数低。
申请号为：201110450738.4，名称为“黄精组培繁殖方法”的中国专利申请公开了一种黄精组培繁殖方法，具体为：黄精组培繁殖方法，包括引种灭菌、组织诱导、继代培养、分化培养、壮苗培养和生根培养，其有益效果是通过组织培养，可以大量生产种苗，从块茎到培养成生根苗，只需7个月，大大缩短了种苗生产时间和成本，提高了扩繁速度。
申请号为：201210085056.2，名称为“九华黄精的组培快繁方法”的中国专利申请公开了一种黄精组培繁殖方法，具体为：以黄精根状茎为外植体，经过不定芽的诱导阶段，丛芽增殖阶段，生根阶段和炼苗移栽阶段，调配和优选各培养阶段的培养基配方和培养条件，形成了每年扩繁速度为106倍的组培技术，实现了九华黄精的组织培养和快速稳定繁殖，可以有效解决九华黄精的优质种苗供应问题。
申请号为：201310532853.5，名称为“黄精根茎的组织培养基及离体再生方法”的中国专利申请公开了一种黄精根茎的组织培养基及离体再生方法；该黄精根茎的组织培养基包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基；使用所述黄精根茎的组织培养基进行黄精根茎离体再生的方法，包括芽的诱导、芽的增殖培养和生根培养三个步骤。该发明利用植物组织培养技术建立了黄精离体再生体系，并对涉及的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基进行了选择优化，具有芽诱导率高、增殖系数高、生根率高、芽苗健壮、叶形叶色正常等优点，能够满足市场对优质黄精种苗的需要。
申请号为：201410130683.2，名称为“一种黄精的快速繁殖技术方法”的中国专利公开了一种黄精快速繁殖的方法，具体为：采用变温处理加激素处理打破种子休眠，以及利用打破休眠，已经萌发的种子作材料进行离体诱导培养愈伤组织，经过分化培养和根诱导，无性繁殖黄精种苗。采用该技术能大大提高黄精繁殖倍数，缩短生产周期，减少用种量，降低生产成本。
上述技术，显示了组织培养技术在黄精种苗繁育应用的可能性，申请号为：201410130683.2，名称为“一种黄精的快速繁殖技术方法”的中国专利与本发明类似，但该专利技术存在前处理、使用已经萌发的种子作离体诱导、培养愈伤组织、芽的诱导、芽的增殖培养和生根培养等复杂程序，不但工序复杂、技术难度高、时间周期长，而且生产成本较高，不利于滇黄精种苗的大规模生产。
经文献检索，未见与本发明相同的公开报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在工序复杂、技术难度高、时间周期长，而且生产成本较高的缺陷，提供一种新的滇黄精种子一步成苗的组培方法。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种滇黄精种子一步成苗的组培方法，包括以下步骤如下：
(1)滇黄精果实的选取
在10月，选取8成成熟的新鲜、无病虫害的滇黄精果实，放置于4℃冰箱中保存7天；
(2)滇黄精种子的处理
将选取的滇黄精果实剥去果皮，取出种子置入烧杯中，用体积分数为75％的酒精消毒1min后，无菌水冲洗2～3次，转入无菌工作台，用质量分数为0.1％HgCl2溶液浸泡14～15min，再无菌水冲洗3～4次；
(3)滇黄精种子一步成苗培养
将经步骤(2)处理的滇黄精种子，接种于盛有MS+BA0.5mg/L培养基的培养瓶中，在培养温度为25℃±2℃，光照时间为12-14h/天，光照强度为150lx条件下培养至黄精种子萌发2片真叶时，将培养瓶置于培养温度为25℃±2℃，光照时间为12h/天，光照强度为1500lx条件下继续培养至生根；
(4)炼苗移栽
将培养瓶塞打开后，置于2000lx的光照下炼苗3～4d，取出生根苗，洗净培养基，移栽到混合土中，并覆盖保鲜膜，移栽后7d内保持没有直射光照射，保鲜膜内温度在15～30℃之间、且湿度在80％，7d后去膜，即得到滇黄精种苗；所述混合土由蛭石、黑土和珍珠岩按蛭石：黑土：珍珠岩的体积比为(10～14)：(1.5～2.5)：1混合而成。
步骤(3)中所述的滇黄精种子的接种于培养瓶中,滇黄精种子的密度优选为10～15粒/瓶，培养瓶的直径为7cm,高为11cm。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提出了新的技术方案，省略了离体诱导、培养愈伤组织、芽的增殖培养等复杂工序，从种子接种一步培养即可成苗，从收集种子至种子接种一步培育成生根组培苗，仅需90天-99天，繁育周期大大缩短，种子萌芽率达到90～95％，培育的苗壮，根系发达，炼苗成活率达100％，取得了预料不到的技术效果。
本发明方法能够打破滇黄精种子休眠期，缩短滇黄精种子的萌芽期，促进滇黄精种子萌发，种子置于培养基25天-32天快速生成2片真叶，把滇黄精的萌芽期从两个冬季缩短到1个月，萌芽率从大田种植的10～20％提高到90～95％，形成膨大根茎，生长出3～10cm长的根系，苗壮，直接可应用于黄精生产。
本发明方法简便易行，成本低廉，为滇黄精的繁殖和规模化种植提供了技术保障。
附图说明
图1是滇黄精种子接种图。
图2是滇黄精种子萌发图。
图3是滇黄精组培苗图。
图4是滇黄精组培苗植株图。
图5是滇黄精组培苗炼苗图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述，各实施例无特殊说明为常规方法。
实施例1
本实施例在云南省昆明市云南省农业科学院药用植物研究所实验室实施。
(1)滇黄精果实的选取
在10月，选取8成成熟的新鲜、无病虫害的滇黄精果实，放置于4℃冰箱中保存7天。
(2)滇黄精种子的处理
将选取的滇黄精果实剥去果皮，取出种子置入烧杯中，用体积分数为75％的酒精消毒1min后，无菌水冲洗2次，转入无菌工作台，用质量分数为0.1％HgCl2溶液浸泡14min后，无菌水冲洗3次；
(3)滇黄精种子一步成苗培养
将经步骤(2)处理的滇黄精种子，接种于盛有MS+BA0.5mg/L培养基的培养瓶中，在培养温度为27℃，光照时间为12h/天，光照强度为150lx条件下培养至黄精种子萌发2片真叶时，将该黄精种子已萌发2片真叶的培养瓶置于培养温度为27℃，光照时间为12h/天，光照强度为1500lx条件下继续培养至生根；
(4)炼苗移栽
将培养瓶塞打开后，置于2000lx的光照下炼苗3d，取出生根苗，洗净培养基，移栽到混合土中，并覆盖保鲜膜，移栽后7d内保持没有直射光照射，保鲜膜内温度在15～30℃之间、且湿度在80％，7d后去膜，即得到滇黄精种苗；所述混合土由蛭石、黑土和珍珠岩按蛭石：黑土：珍珠岩的体积比为10：1.5：1混合而成。
实施例2
实施例2除以下参数不同外，其余步骤与实施例1相同，不再赘述。
(2)滇黄精种子的处理
取出的种子用体积分数为75％的酒精消毒1min后用无菌水冲洗3次；转入无菌工作台，用质量分数为0.1％HgCl2溶液浸泡15min，用无菌水冲洗4次；
(3)滇黄精种子一步成苗培养
将经步骤(2)处理的滇黄精种子，接种于盛有MS+BA0.5mg/L培养基的培养瓶中，培养瓶中滇黄精种子的密度为10或15粒/瓶，种子密度过密不利于植株的生长，过稀则浪费培养基。培养瓶的直径为7cm，高为11cm，在培养温度为23℃，光照时间为14h/天，光照强度为150lx条件下培养至黄精种子萌发2片真叶时，将该黄精种子已萌发2片真叶的培养瓶置于培养温度为23℃，光照时间为12h/天，光照强度为1500lx条件下继续培养至生根；
(4)炼苗移栽
将培养瓶塞打开后，置于2000lx的光照下炼苗4d；移栽后7d内保鲜膜内温度在20～30℃之间；所述混合土由蛭石、黑土和珍珠岩,按蛭石：黑土：珍珠岩的体积比为14：2.5：1混合而成。
上述实施例，种子置于培养基25天-32天即可快速萌发成2片真叶，2片真叶的滇黄精继续培养58天-60天，形成生根壮苗即可移栽，表明采用本发明方法，从种子放置于4℃冰箱中保存至培育成生根组培苗仅需90天-99天(图3、图4)，且90～95％的种子都出现萌芽或芽点。本发明方法省略了离体诱导、培养愈伤组织、芽的增殖培养等步骤，从种子接种一步即可培育成苗，其方法工序简化，成本低廉，种子萌发时间短，仅仅30天左右，成苗所需时间仅需90天-99天，大大低于土培法(两个冬季)和沙培法(6个月)。本发明方法培育的苗壮，根系发达，简单炼苗后可直接用于滇黄精的栽培中，深受滇黄精种植户的欢迎。

Claims (1)

1.一种滇黄精种子一步成苗的组培方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)滇黄精果实的选取
在10月，选取8成成熟的新鲜、无病虫害的滇黄精果实，放置于4℃冰箱中保存7天；
(2)滇黄精种子的处理
将选取的滇黄精果实剥去果皮，取出种子置入烧杯中，用体积分数为75％的酒精消毒1min后，无菌水冲洗2～3次，转入无菌工作台，用质量分数为0.1％HgCl2溶液浸泡14～15min，再无菌水冲洗3～4次；
(3)滇黄精种子一步成苗培养
将经步骤(2)处理的滇黄精种子，接种于盛有MS+BA0.5mg/L培养基的培养瓶中，在培养温度为25℃±2℃，光照时间为12-14h/天，光照强度为150lx条件下培养至黄精种子萌发2片真叶时，将培养瓶置于培养温度为25℃±2℃，光照时间为12h/天，光照强度为1500lx条件下继续培养至生根；
(4)炼苗移栽
将培养瓶塞打开后，置于2000lx的光照下炼苗3～4d，取出生根苗，洗净培养基，移栽到混合土中，并覆盖保鲜膜，移栽后7d内保持没有直射光照射，保鲜膜内温度在15～30℃之间、且湿度在80％，7d后去膜，即得到滇黄精种苗；所述混合土由蛭石、黑土和珍珠岩按蛭石：黑土：珍珠岩的体积比为(10～14)：(1.5～2.5)：1混合而成。
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Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106134996A (zh) * 2016-06-30 2016-11-23 恩施州源惠科技开发有限公司 一种黄精一次成苗的方法
CN106718880A (zh) * 2016-11-24 2017-05-31 宣威市绿隆农业有限公司 一种滇黄精的组培快繁方法
CN107182780A (zh) * 2017-04-28 2017-09-22 玉溪市祥馨农业技术开发有限公司 滇黄精的育苗方法
CN107980634A (zh) * 2017-12-15 2018-05-04 贵州大学 一种获得天门冬组培快繁适宜外植体的方法
CN108260532A (zh) * 2018-04-19 2018-07-10 安发（福建）生物科技有限公司 一种黄精的种子组培繁育方法
CN110521325A (zh) * 2019-09-04 2019-12-03 昆明坤地农业开发有限公司 一种滇黄精种子快速育苗的方法
CN110583411A (zh) * 2019-10-30 2019-12-20 怀化市九天界生态农业科技有限公司 一种黄精育苗方法
CN110809938A (zh) * 2019-11-18 2020-02-21 湖南省中医药研究院 黄精种子快速萌发的装置及方法
CN110833077A (zh) * 2019-11-25 2020-02-25 云南中医药大学 一种滇黄精种子包衣剂及其应用
CN111543277A (zh) * 2020-06-24 2020-08-18 怀化林泉药业有限公司 一种黄精种子种苗集成化繁育方法
CN111937747A (zh) * 2020-08-24 2020-11-17 三明市农业科学研究院 一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法
CN115349445A (zh) * 2022-09-29 2022-11-18 黄山仙寓山农业科技有限公司 一种祁源黄精高效离体快繁的方法
CN115644067A (zh) * 2022-12-09 2023-01-31 云南省农业科学院药用植物研究所 一种生产滇黄精双单倍体的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2466653C (en) * 2001-11-15 2012-02-21 Council Of Scientific And Industrial Research Media compositions for faster growth of polygonatum cirrhifolium royle
CN102630562A (zh) * 2012-03-28 2012-08-15 青阳县九华黄精产业化协会 九华黄精的组培快繁方法
CN103858769A (zh) * 2014-04-03 2014-06-18 张旺凡 一种黄精的快速繁殖技术方法
CN104304017A (zh) * 2014-10-17 2015-01-28 南京帝道农业科技有限公司 一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2466653C (en) * 2001-11-15 2012-02-21 Council Of Scientific And Industrial Research Media compositions for faster growth of polygonatum cirrhifolium royle
CN102630562A (zh) * 2012-03-28 2012-08-15 青阳县九华黄精产业化协会 九华黄精的组培快繁方法
CN103858769A (zh) * 2014-04-03 2014-06-18 张旺凡 一种黄精的快速繁殖技术方法
CN104304017A (zh) * 2014-10-17 2015-01-28 南京帝道农业科技有限公司 一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
周建金等: ""多花黄精种子繁殖技术的研究"", 《种子》 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106134996A (zh) * 2016-06-30 2016-11-23 恩施州源惠科技开发有限公司 一种黄精一次成苗的方法
CN106134996B (zh) * 2016-06-30 2018-06-29 恩施州源惠科技开发有限公司 一种黄精一次成苗的方法
CN106718880A (zh) * 2016-11-24 2017-05-31 宣威市绿隆农业有限公司 一种滇黄精的组培快繁方法
CN107182780A (zh) * 2017-04-28 2017-09-22 玉溪市祥馨农业技术开发有限公司 滇黄精的育苗方法
CN107980634A (zh) * 2017-12-15 2018-05-04 贵州大学 一种获得天门冬组培快繁适宜外植体的方法
CN108260532A (zh) * 2018-04-19 2018-07-10 安发（福建）生物科技有限公司 一种黄精的种子组培繁育方法
CN110521325A (zh) * 2019-09-04 2019-12-03 昆明坤地农业开发有限公司 一种滇黄精种子快速育苗的方法
CN110583411A (zh) * 2019-10-30 2019-12-20 怀化市九天界生态农业科技有限公司 一种黄精育苗方法
CN110809938A (zh) * 2019-11-18 2020-02-21 湖南省中医药研究院 黄精种子快速萌发的装置及方法
CN110833077A (zh) * 2019-11-25 2020-02-25 云南中医药大学 一种滇黄精种子包衣剂及其应用
CN111543277A (zh) * 2020-06-24 2020-08-18 怀化林泉药业有限公司 一种黄精种子种苗集成化繁育方法
CN111937747A (zh) * 2020-08-24 2020-11-17 三明市农业科学研究院 一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法
CN111937747B (zh) * 2020-08-24 2021-10-01 三明市农业科学研究院 一种形成多花黄精多芽健壮发育根茎的繁育方法
CN115349445A (zh) * 2022-09-29 2022-11-18 黄山仙寓山农业科技有限公司 一种祁源黄精高效离体快繁的方法
CN115644067A (zh) * 2022-12-09 2023-01-31 云南省农业科学院药用植物研究所 一种生产滇黄精双单倍体的方法

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