CN104304017A - 一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明研究了一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法，包括种子的消毒、无菌苗的获得、芽的诱导、生根诱导等步骤。本发明方法为保护野生资源，满足人们的需求，本发明对点花黄精的组织培养及无性系的建立展开了探索，确立了无菌苗的培育、腋芽诱导、生根的理想培养条件，最终成功建立了点花黄精植株的无性再生系，为实现对点花黄精野生资源的保护、栽培，对种苗的需求以及基因库的建立奠定了技术基础。
Description
技术领域
本发明涉及点花黄精的组织培养，属于生物技术领域。
背景技术
点花黄精，Polygonatum punctatum，百合科，分布在印度、越南、不丹、锡金、尼泊尔以及中国大陆的广东、云南、贵州、四川、西藏、广西等地，根状茎呈连珠状，直径1-1.5厘米，密生肉质须根，茎高30-70厘米，通常具紫红色斑点，有时上部生乳头状突起，叶互生，有时二叶可较接近，幼时稍肉质而横脉不显，老时厚纸质或近革质而横脉较显，常有光泽，卵形、卵状矩圆形至矩圆状披针形，长6-14厘米，宽1.5-5厘米，先端尖至渐尖，具短柄，花序具2-6花，常呈总状，总花梗长5-12毫米，上举而花后平展，花梗长2-10毫米，苞片早落或不存在，花被白色，全长7-9毫米，花被筒在口部稍缢缩而略呈坛状，裂片长1.5-2毫米，花丝长0.5-1毫米，花药长1.5-2毫米，子房长2-2.5毫米，花柱长1.5-2.5毫米，柱头稍膨大，浆果红色，直径约7毫米，具8-10余颗种子，花期4-6月，果期9-11月。点花黄精是一种药用植物，性味辛，平，清热解毒，外用于肿毒，疔疮，生长于海拔1100米至2700米的地区，多生在岩石上、林下和附生树上，尚未由人工引种栽培。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是点花黄精组织培养的方法，本发明方法为保护野生资源，满足人们的需求，本研究对点花黄精的组织培养及无性系的建立展开了探索，确立了无菌苗的培育、腋芽诱导、生根的理想培养条件，最终成功建立了点花黄精植株的无性再生系，为实现对点花黄精野生资源的保护、栽培，对种苗的需求以及基因库的建立奠定了技术基础。
为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：
将点花黄精的种子放入500ml磨口广口瓶中，先用自来水反复震荡洗涤15min，在超净工作台上先用75%乙醇震荡灭菌2min，之后迅速用无菌水洗涤3次，再用0.05%的升汞溶液反复震荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的点花黄精的种子接种到ZW+3.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA的培养基中进行无菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±2℃，光照强度3500lx，光照时间12h/d，诱导出来的无菌苗切去根部接入1/2MS+0.2-0.3mg/L6-BA+1.0-1.5mg/LNAA培养基中进行腋芽的诱导和继代，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期12h/d，温度25±2℃，将培养室培养的点花黄精拿到薄膜大棚中炼苗3天，打开瓶盖，取出试管苗，洗净培养基，种植于泥炭土：珍珠岩：椰糠=1:1:1的基质中，将基质置于塑料网筛中，每网筛中30株，网筛置于荫棚中，加盖塑料薄膜，荫棚温度25℃，相对湿度90%。
采用本发明制备的点花黄精生根率高，利用率大，利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
将点花黄精的种子放入500ml磨口广口瓶中，先用自来水反复震荡洗涤15min，在超净工作台上先用75%乙醇震荡灭菌2min，之后迅速用无菌水洗涤3次，再用0.05%的升汞溶液反复震荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的点花黄精的种子接种到ZW+3.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA的培养基中进行无菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±2℃，光照强度3500lx，光照时间12h/d，诱导出来的无菌苗切去根部接入1/2MS+0.2mg/L6-BA+1.0mg/LNAA培养基中进行腋芽的诱导和继代，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期12h/d，温度25±2℃，将培养室培养的点花黄精拿到薄膜大棚中炼苗3天，打开瓶盖，取出试管苗，洗净培养基，种植于泥炭土：珍珠岩：椰糠=1:1:1的基质中，将基质置于塑料网筛中，每网筛中30株，网筛置于荫棚中，加盖塑料薄膜，荫棚温度25℃，相对湿度90%，成活率89%。
实施例2
将点花黄精的种子放入500ml磨口广口瓶中，先用自来水反复震荡洗涤15min，在超净工作台上先用75%乙醇震荡灭菌2min，之后迅速用无菌水洗涤3次，再用0.05%的升汞溶液反复震荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的点花黄精的种子接种到ZW+3.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA的培养基中进行无菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±2℃，光照强度3500lx，光照时间12h/d，诱导出来的无菌苗切去根部接入1/2MS+0.3mg/L6-BA+1.5mg/LNAA培养基中进行腋芽的诱导和继代，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期12h/d，温度25±2℃，将培养室培养的点花黄精拿到薄膜大棚中炼苗3天，打开瓶盖，取出试管苗，洗净培养基，种植于泥炭土：珍珠岩：椰糠=1:1:1的基质中，将基质置于塑料网筛中，每网筛中30株，网筛置于荫棚中，加盖塑料薄膜，荫棚温度25℃，相对湿度90%，成活率90%。
实施例3
将点花黄精的种子放入500ml磨口广口瓶中，先用自来水反复震荡洗涤15min，在超净工作台上先用75%乙醇震荡灭菌2min，之后迅速用无菌水洗涤3次，再用0.05%的升汞溶液反复震荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的点花黄精的种子接种到ZW+3.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA的培养基中进行无菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±2℃，光照强度3500lx，光照时间12h/d，诱导出来的无菌苗切去根部接入1/2MS+0.3mg/L6-BA+1.0mg/LNAA培养基中进行腋芽的诱导和继代，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期12h/d，温度25±2℃，将培养室培养的点花黄精拿到薄膜大棚中炼苗3天，打开瓶盖，取出试管苗，洗净培养基，种植于泥炭土：珍珠岩：椰糠=1:1:1的基质中，将基质置于塑料网筛中，每网筛中30株，网筛置于荫棚中，加盖塑料薄膜，荫棚温度25℃，相对湿度90%，成活率91%。
Claims (3)
1.一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法，包括种子的消毒、无菌苗的获得、芽的诱导、生根诱导，其主要步骤如下：
（1）取点花黄精的种子，进行消毒处理；
（2）将步骤（1）消毒处理过的点花黄精的种子接种到ZW+3.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA的培养基中进行无菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±2℃，光照强度3500lx，光照时间12h/d；
（3）取步骤（2）诱导出来的无菌苗切去根部接入1/2MS+0.2-0.3mg/L6-BA+1.0-1.5mg/LNAA培养基中进行腋芽的诱导和继代，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期12h/d，温度25±2℃；
（4）将步骤（3）培养出来的丛生芽进行生根诱导。
2.按照权利要求1所述的一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述点花黄精无菌种子的获得为将点花黄精的种子放入500ml磨口广口瓶中，先用自来水反复震荡洗涤15min，在超净工作台上先用75%乙醇震荡灭菌2min，之后迅速用无菌水洗涤3次，再用0.05%的升汞溶液反复震荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5次。
3.按照权利要求1所述的一种点花黄精组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）中所述点花黄精生根诱导的方法为将培养室培养的点花黄精拿到薄膜大棚中炼苗3天，打开瓶盖，取出试管苗，洗净培养基，种植于泥炭土：珍珠岩：椰糠=1:1:1的基质中，将基质置于塑料网筛中，每网筛中30株，网筛置于荫棚中，加盖塑料薄膜，荫棚温度25℃，相对湿度90%。
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| CN109479652A (zh) * | 2018-10-30 | 2019-03-19 | 云南农业大学 | 一种简易高效滇黄精种子育苗方法 |
| CN110463590A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-11-19 | 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所 | 一种多花黄精生根苗促芽的方法 |
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| CN111434218A (zh) * | 2019-01-15 | 2020-07-21 | 湖北民族学院 | 一种黄精品种复壮的组培快繁方法 |
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2014
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Application publication date: 20150128 |
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