CN105993964A - 一种采用白及种子进行组培育种的技术 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者1/2MS、6‑BA1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6‑BA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者MS+6‑BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;该采用白及种子进行组培育种的技术具有种子萌发率高,增殖倍数高,生根快、多、粗壮,移栽成活率高,容易实现工业化的优点。
Description
技术领域
本发明具体涉及一种采用白及种子进行组培育种的技术。
背景技术
白及,拉丁学名【Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.】,为兰科白及属植物,别名:白根、地螺丝、羊角七。具有补肺止血、消肿生肌等功能的常用中药。主治肺结核咳血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症;外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等症。白及止血效果很好,用白及做的胶膜块可用于肝脾手术贴在伤口处,代替血钳子,效果非常好,具有快速凝血作用,多用于外科手术。主产于四川、云南、陕西、甘肃等省,全国各地有栽培。
白及多为野生,人工种植较少,主要是因为其很难通过种子繁殖进行大批量育苗,但白及作为名贵中药,近年来越来越多的应用到医药领域,目前的白及种植现状已不适应发展的需求;国内对白及的繁殖技术研究颇多。
目前,现有的采用白及种子进行组培育种的技术不能实现工业化,培养基太单一,组培苗成活率较低,难以炼苗或移栽。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种种子萌发率高,增殖倍数高,生根快、多、粗壮,移栽成活率高,容易实现工业化的采用白及种子进行组培育种的技术。
为解决上述问题,本发明采用如下技术方案:
一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者1/2MS、6-BA1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
所述的采用白及种子进行组培育种的技术,其特征在于:包括如下步骤:
1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
本发明的有益效果是:由于采用诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,能够有效的提高了移栽成活率,减低培养基成本;由于只需经过白及种子萌发培养、增值培养和生根培养三个过程的控制,就可达到炼苗移栽,培养过程比较简单,且成活率高;同时易实现工业化生产,提高了白及资源可持续性利用程度。
具体实施方式
实施例一:
一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
所述的采用白及种子进行组培育种的技术,其特征在于:包括如下步骤:
1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
实施例二:
一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、6-BA1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
所述的采用白及种子进行组培育种的技术,包括如下步骤:
1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
实施例三:
一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
所述的采用白及种子进行组培育种的技术,包括如下步骤:
1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
实验例:
以下各组试验,提供如下不同培养阶段培养基配方作对比试验,培养条件相同,即:培养温度,光照度,光照时间在各培养阶段相同;实验时间为2个月。
实验组1:实施例一的采用白及种子进行组培育种的技术所用的方法;
实验组2:实施例二的采用白及种子进行组培育种的技术所用的方法;
实验组3:实施例三的采用白及种子进行组培育种的技术所用的方法;
对照组1:除省略步骤2)之外,按实施例一相同的实施方式进行实施;
对照组2:除省略步骤3)之外,按实施例二相同的实施方式进行实施;
对照组3:除省略步骤4)之外,按实施例三相同的实施方式进行实施;
表一:对比实验结果:
转接苗数(颗) | 成活数(颗) | 成活率(%) | |
对照组1 | 100 | 50 | 50 |
对照组2 | 100 | 60 | 60 |
对照组3 | 100 | 65 | 65 |
实验组1 | 100 | 90 | 90 |
实验组2 | 100 | 95 | 95 |
实验组3 | 100 | 97 | 97 |
由表1表明接种2个月后,采用诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基可使培养成活率提高90%以上,甚至可达到97%,效果佳,容易实现工业化,具有较好的应用前景。
本发明的有益效果是:由于采用诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,能够有效的提高了移栽成活率,减低培养基成本;由于只需经过白及种子萌发培养、增值培养和生根培养三个过程的控制,就可达到炼苗移栽,培养过程比较简单,且成活率高;同时易实现工业化生产,提高了白及资源可持续性利用程度。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何不经过创造性劳动想到的变化或替换,都应涵盖在本实用新保护范围为准。
Claims (2)
1.一种采用白及种子进行组培育种的技术,其特征在于:包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者1/2MS、6-BA1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
2.如权利要求1所述的采用白及种子进行组培育种的技术,其特征在于:包括如下步骤:
1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161012 |