CN104322372A - 一种蓝雪花的组织培养快繁方法 - Google Patents

一种蓝雪花的组织培养快繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104322372A
CN104322372A CN201410622376.6A CN201410622376A CN104322372A CN 104322372 A CN104322372 A CN 104322372A CN 201410622376 A CN201410622376 A CN 201410622376A CN 104322372 A CN104322372 A CN 104322372A
Authority
CN
China
Prior art keywords
illumination
culture
breeding method
simple bud
tissue culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410622376.6A
Other languages
English (en)
Inventor
梁彩英
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201410622376.6A priority Critical patent/CN104322372A/zh
Publication of CN104322372A publication Critical patent/CN104322372A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种蓝雪花的组织培养快繁方法，即以茎段为外植体建立了蓝雪花离体快繁体系，为实现蓝雪花组织培养工厂化生产提供技术支持。本发明以茎段为外植体，通过单芽诱导、丛生芽增殖、生根培养以及试管苗驯化移栽等过程实现了蓝雪花的组织培养快速繁殖，本发明的实施既能丰富花卉品种，又能为工厂化育苗带来经济效益，也可为蓝雪花新品种培育提供研究材料。

Description

一种蓝雪花的组织培养快繁方法
技术领域
    本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种蓝雪花的组织培养快繁方法。
背景技术
蓝雪花（Plumbago auriculata）又名蓝花丹、蓝茉莉、蓝雪丹等，为白花科白花丹属多年生常绿灌木，一种观赏价值与药用价值俱佳的新型花卉。蓝雪花富含白花丹素，对风湿关节炎、血瘀经闭、跌打损伤、肿毒恶疮以及疥癣具有良好的治疗效果。
蓝雪花是一种集观赏价值与药用价值于一体的新型花卉，具有优良的市场应用前景。由于蓝雪花结实率低，种子价格昂贵，扩繁系数低，靠种子繁殖已无法满足蓝雪花种苗的需求。另外，由于实验材料的缺乏，目前对蓝雪花的研究严重滞后，关于蓝雪花植物组织培养方面的研究尚未有任何的报道。因此，非常有必要建立系统的蓝雪花离体快繁体系，为今后利用遗传转化技术对蓝雪花进行新品种选育和品质改良奠定基础。
发明内容
    本发明的目的在于提供一种蓝雪花的组织培养快繁方法，本发明以茎段为外植体，通过单芽诱导、丛生芽增殖、生根培养以及试管苗驯化移栽等过程实现了蓝雪花的组织培养快速繁殖，本发明的实施既能丰富花卉品种，又能为工厂化育苗带来经济效益，也可为蓝雪花新品种培育提供研究材料。
本发明的一种蓝雪花的组织培养快繁方法，包括以下的工艺步骤：
（1）单芽诱导：选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡10～20min，置于自来水中冲洗30～60min,于超净工作台中以75～80%乙醇溶液浸泡10～30s，无菌水冲洗3～5次，再用0.1～0.5%升汞溶液消毒5～10min，无菌水冲洗3～5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成1cm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照10～11小时，光照强度为1500～2500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至生出芽体。
（2）丛生芽诱导：当单芽长至2～3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～5天，然后置于每天光照10～16小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至形成丛生芽。
（3）生根培养：将分化出的丛生芽长至3～4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养5～7天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为2000～3500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至长出根。
（4）试管苗移栽：将长至8～10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥（1：3）混合成的基质中并定植于大田中。
上述步骤（1）所述的茎段是指以茎节为界，上半部分保留0.4cm，下半部分保留0.6cm的长度为1cm带节茎段。
上述步骤（1）所述的单芽诱导培养基为：MS+0.1～0.8mg/L6－BA+2.5%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%琼脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值为5.4～5.8。
上述步骤（2）所述的增殖培养基为：MS+0.1～0.5mg/L NAA+1.0～2.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L IAA+1.5%～3.5%蔗糖+0.4%～0.7%琼脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值为5.4～5.8。
上述步骤（3）所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～0.5mg/L NAA+2.0%～2.5%蔗糖+0.4%～0.7%琼脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值为5.4～5.8。
目前对蓝雪花的研究严重滞后，关于蓝雪花植物组织培养方面的研究尚未有任何的报道。因此，非常有必要建立系统的蓝雪花离体快繁体系，为今后利用遗传转化技术对蓝雪花进行新品种选育和品质改良奠定基础。
具体实施方式
     以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
     实施例1
（1）单芽诱导：选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡10min，置于自来水中冲洗30min,于超净工作台中以75%乙醇溶液浸泡10s，无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒5min，无菌水冲洗3次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成1cm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照10小时，光照强度为1500x，培养温度为25℃的条件下培养32天即可生出芽体。所述的茎段为以茎节为界，上半部分保留0.4cm，下半部分保留0.6cm的长度为1cm带节茎段。所述的单芽诱导培养基为：MS+0.4mg/L6－BA+2.5%蔗糖+0.35%琼脂+0.1%活性炭，pH值为5.8，诱导率达86%。
（2）丛生芽诱导：当单芽长至2～3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25℃条件下全暗培养3天，然后置于每天光照10小时，光照强度为2000lx，培养温度为25℃的条件下培养21天即形成丛生芽。所述的增殖培养基为MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+1.5%蔗糖+0.4%琼脂+0.05%活性炭，pH值为5.8。
（3）生根培养：将分化出的丛生芽长至3～4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25℃条件下全暗培养5天，然后置于每天光照16小时，光照强度为2000lx，培养温度为25℃的条件下培养18天即可长出根，生根率达93%。所述的生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA+2.0%蔗糖+0.4%琼脂+0.05%活性炭，pH值为5.8。
（4）试管苗移栽：将长至8～10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥（1：3）混合成的基质中并定植于大田中，移栽成活率达95%。
    实施例2
（1）单芽诱导：选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡20min，置于自来水中冲洗40min,于超净工作台中以78%乙醇溶液浸泡13s，无菌水冲洗5次，再用0.3%升汞溶液消毒7min，无菌水冲洗5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成1cm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照12小时，光照强度为2000x，培养温度为25℃的条件下培养30天即可生出芽体。所述的茎段为以茎节为界，上半部分保留0.4cm，下半部分保留0.6cm的长度为1cm带节茎段。所述的单芽诱导培养基为：MS+0.6mg/L6－BA+3%蔗糖+0.35%琼脂+0.1%活性炭，pH值为5.8，诱导率达83%。
（2）丛生芽诱导：当单芽长至2～3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25℃条件下全暗培养5天，然后置于每天光照12小时，光照强度为2500lx，培养温度为25℃的条件下培养23天即形成丛生芽。所述的增殖培养基为MS+0.5mg/L NAA+1.3mg/L 6-BA+0.4mg/L IAA+2%蔗糖+0.4%琼脂+0.05%活性炭，pH值为5.8。
（3）生根培养：将分化出的丛生芽长至3～4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25℃条件下全暗培养7天，然后置于每天光照16小时，光照强度为3000lx，培养温度为25℃的条件下培养21天即可长出根，生根率达93%。所述的生根培养基为1/2MS+0.4mg/L NAA+2.0%蔗糖+0.4%琼脂+0.05%活性炭，pH值为5.8。
（4）试管苗移栽：将长至8～10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥（1：3）混合成的基质中并定植于大田中，移栽成活率达91%。

Claims (5)

1.一种蓝雪花的组织培养快繁方法，其特征在于包括以下工艺步骤：
（1）单芽诱导：选取长势良好无病害的一年生细嫩枝条，以洗洁精水溶液浸泡10～20min，置于自来水中冲洗30～60min,于超净工作台中以75～80%乙醇溶液浸泡10～30s，无菌水冲洗3～5次，再用0.1～0.5%升汞溶液消毒5～10min，无菌水冲洗3～5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，将枝条上的叶片切除后，切成1cm的茎段，并接种于单芽诱导培养基中于每天光照10～11小时，光照强度为1500～2500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至生出芽体；
（2）丛生芽诱导：当单芽长至2～3cm时，剪下单芽并接种到增殖培养基上进行丛生芽诱导，接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～5天，然后置于每天光照10～16小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至形成丛生芽；
（3）生根培养：将分化出的丛生芽长至3～4cm后接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养5～7天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为2000～3500lx，培养温度为25～28℃的条件下培养直至长出根；
（4）试管苗移栽：将长至8～10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由松树皮和火碳泥（1：3）混合成的基质中并定植于大田中。
2.根据权利要求1所述的一种蓝雪花的组织培养快繁方法，其特征在于步骤（1）所述的茎段是指以茎节为界，上半部分保留0.4cm，下半部分保留0.6cm的长度为1cm带节茎段。
3.根据权利要求1所述的一种蓝雪花的组织培养快繁方法，其特征在于步骤（1）所述的单芽诱导培养基为：MS+0.1～0.8mg/L6－BA+2.5%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%琼脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值为5.4～5.8。
4.根据权利要求1所述的一种蓝雪花的组织培养快繁方法，其特征在于步骤（2）所述的增殖培养基为：MS+0.1～0.5mg/L NAA+1.0～2.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L IAA+1.5%～3.5%蔗糖+0.4%～0.7%琼脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值为5.4～5.8。
5.根据权利要求1所述的一种蓝雪花的组织培养快繁方法，其特征在于步骤（3）所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～0.5mg/L NAA+2.0%～2.5%蔗糖+0.4%～0.7%琼脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值为5.4～5.8。
CN201410622376.6A 2014-11-07 2014-11-07 一种蓝雪花的组织培养快繁方法 Pending CN104322372A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410622376.6A CN104322372A (zh) 2014-11-07 2014-11-07 一种蓝雪花的组织培养快繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410622376.6A CN104322372A (zh) 2014-11-07 2014-11-07 一种蓝雪花的组织培养快繁方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104322372A true CN104322372A (zh) 2015-02-04

Family

ID=52397302

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410622376.6A Pending CN104322372A (zh) 2014-11-07 2014-11-07 一种蓝雪花的组织培养快繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104322372A (zh)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104686353A (zh) * 2015-03-02 2015-06-10 刘祖英 一种蓝雪花组织培养技术
CN105191796A (zh) * 2015-09-28 2015-12-30 江苏农林职业技术学院 一种蓝雪花组织培养外植体消毒方法
CN106417013A (zh) * 2016-08-31 2017-02-22 罗余基 蓝雪花的组织培养方法
CN107667865A (zh) * 2017-11-10 2018-02-09 四川农业大学 一种岷江蓝雪花高效继代快繁方法
CN107691222A (zh) * 2017-11-10 2018-02-16 四川农业大学 一种蓝花丹高效扦插快繁的方法
WO2020063955A1 (zh) * 2018-09-29 2020-04-02 江苏农林职业技术学院 一种提高组培植株诱导率的培养基及制备方法与应用
CN112715366A (zh) * 2021-01-29 2021-04-30 四川农业大学 一种岷江蓝雪花组培苗高效快速生根及壮苗的方法
CN113951139A (zh) * 2021-11-08 2022-01-21 四川农业大学 一种小蓝雪花抗逆新种质的创制方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USPP13953P3 (en) * 2001-04-05 2003-07-08 Monrovia Nursery Company Plumbago auriculata named ‘Monite’
CN103444501A (zh) * 2013-08-29 2013-12-18 四川农业大学 蓝花丹扦插繁殖方法
CN103609436A (zh) * 2013-10-17 2014-03-05 四川农业大学 蓝花丹快繁技术

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USPP13953P3 (en) * 2001-04-05 2003-07-08 Monrovia Nursery Company Plumbago auriculata named ‘Monite’
CN103444501A (zh) * 2013-08-29 2013-12-18 四川农业大学 蓝花丹扦插繁殖方法
CN103609436A (zh) * 2013-10-17 2014-03-05 四川农业大学 蓝花丹快繁技术

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
陈毅: "蓝雪花（Plumbago auriculata）植物组织培养技术研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》, no. 3, 15 March 2014 (2014-03-15), pages 048 - 215 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104686353A (zh) * 2015-03-02 2015-06-10 刘祖英 一种蓝雪花组织培养技术
CN105191796A (zh) * 2015-09-28 2015-12-30 江苏农林职业技术学院 一种蓝雪花组织培养外植体消毒方法
CN106417013A (zh) * 2016-08-31 2017-02-22 罗余基 蓝雪花的组织培养方法
CN107667865A (zh) * 2017-11-10 2018-02-09 四川农业大学 一种岷江蓝雪花高效继代快繁方法
CN107691222A (zh) * 2017-11-10 2018-02-16 四川农业大学 一种蓝花丹高效扦插快繁的方法
WO2020063955A1 (zh) * 2018-09-29 2020-04-02 江苏农林职业技术学院 一种提高组培植株诱导率的培养基及制备方法与应用
CN112715366A (zh) * 2021-01-29 2021-04-30 四川农业大学 一种岷江蓝雪花组培苗高效快速生根及壮苗的方法
CN113951139A (zh) * 2021-11-08 2022-01-21 四川农业大学 一种小蓝雪花抗逆新种质的创制方法
CN113951139B (zh) * 2021-11-08 2023-04-07 四川农业大学 一种小蓝雪花抗逆新种质的创制方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104322372A (zh) 一种蓝雪花的组织培养快繁方法
CN102204512B (zh) 细叶百合的组织培养方法
CN104686345A (zh) 一种甘草的组织培养快繁方法
CN104782486A (zh) 一种多肉植物玉露的组织培养快速繁殖方法
CN103392597B (zh) 一种北美海棠的组织培养方法
CN104686338A (zh) 一种白芷花药离体培养技术
CN104663449A (zh) 一种黄檗组织培养快繁方法
CN104663455A (zh) 一种土沉香组织培养再生体系的建立方法
CN104663442A (zh) 一种鹿角蕨组培快繁的方法
CN103828719A (zh) 一种美国红枫的组织培养方法
CN103651141B (zh) 亳菊工厂化试管苗快繁的方法
CN105145363B (zh) 一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法
CN105532467B (zh) 一种濒危羊踯躅离体组织培养繁殖与保存的方法
CN107691221A (zh) 一种蝴蝶兰组织培养方法
CN104782497A (zh) 一种观赏铁线莲离体培养方法
CN104686357A (zh) 一种头花蓼离体快繁体系的建立方法
CN104686351A (zh) 一种连香树离体快速繁殖方法
CN103155869A (zh) 甜樱桃砧木Colt组织培养方法
CN104285817A (zh) 一种黄麻的组织培养快繁方法
CN104686334A (zh) 一种长叶点地梅组织培养快繁方法
CN108142281A (zh) 一种杜仲组织培养方法
CN105519445A (zh) 一种猪笼草离体快繁方法
CN104285816A (zh) 一种文冠果的组织培养快繁方法
CN104705186A (zh) 一种曙箣竹组培快繁方法
CN104663445A (zh) 一种高产脂湿地松的离体快繁技术

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150204