CN103207246A - 一种用液相色谱法分离测定鲁拉西酮及其光学异构体的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属分析化学领域，涉及鲁拉西酮及其光学异构体(杂质)的分离测定。本发明用高效液相色谱法，在一定的色谱条件下，分离测定鲁拉西酮的光学异构体的含量，通过该方法能快速准确地分离和测定鲁拉西酮及含鲁拉西酮制剂的光学异构体杂质。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。

Description

一种用液相色谱法分离测定鲁拉西酮及其光学异构体的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定鲁拉西酮及其光学异构体的方法。

背景技术

盐酸鲁拉西酮(lurasidone hydrochloride)，是双重作用的新型抗精神病药物，它对5-HT_2A受体和多巴胺D₂受体均具有高度亲和力，对精神病患者的阳性和阴性症状均具有显著疗效，其用于精神分裂症的治疗，同时可以改善认知功能。其化学名为(3aR，4S，7R，7aS)-2{(4R，2R)-2-[4-(1，2-苯并异噻唑-3-基)哌嗪-1-基甲基]环己基甲基}六氢-1H-4，7-甲基异吲哚-1，3一二酮盐酸盐，即鲁拉西酮为药效成分，CAS号：367514-88-3。

鲁拉西酮分子中含用多个手性中心，在化学合成中会同时生成六个立体构型不同的光学异构体。除鲁拉西酮外，其它五个光学异构体被列为鲁拉西酮的杂质。鲁拉西酮的光学异构体杂质的结构如下图所示，本发明简称为P1、P2、P3、P4、P5。

对于鲁拉西酮的五种光学异构体，作为杂质，在生产鲁拉西酮过程中需要进行质量控制。含有多个手性碳原子的化合物的光学异构体的分离，一直是手性药物质量控制的难点，在药物合成过程及稳定性考察过程中需要对光学异构体过行质量控制。因此，实现鲁拉西酮及其它五种光学异构体的分离测定在在鲁拉西酮的质量控制方面具有重要的现实意义。

采用CHIRALPAK-OJ手性色谱柱(250mm×4.6mm)为分离柱，以正己烷∶乙醇溶液(含0.5％二乙胺)∶四氢呋喃＝85∶15∶0.5为流动相，可以将鲁拉西酮与其它五个光学异构体进行有效分离，从而可以准确控制鲁拉西酮的质量，本发明的方法能简单、快速、准确地分离、检测出鲁拉西酮及其它五个光学异构体杂质。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用手性色谱柱分离测定鲁拉西酮及其光学异构体的高效液相方法，从而实现鲁拉西酮与其光学异构体杂质(P1、P2、P3、P4、P5)的分离和测定。

本发明所述的用液相色谱法分析鲁拉西酮及其光学异构体(杂质)的方法，是采用以纤维素三(4-甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液-四氢呋喃三相混合溶液为流动相，其中低级醇溶液中包含有机碱。这里所说的液相色谱法包括高效液相色谱法或高效液相色谱法-质谱法联用。

上述所说的手性色谱柱以纤维素三(4-甲苯基甲酸酯)为填料，选自牌号为CHIRALCEL OJ和CHIRALCEL OJ-H的色谱柱。

上述所说的低级醇选自以下化合物：甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，优选为乙醇或异丙醇。

上述所说的方法，其流动相正己烷-低级醇溶液-四氢呋喃体积比为75∶25∶0.5～90∶10∶0.5，优选体积比为85∶15∶0.5，更优选的是正己烷-乙醇溶液-四氢呋喃的体积比为85∶15∶0.5。

上述所说的方法中，低级醇溶液中包含的有机碱选自乙二胺、二乙胺和三乙胺中的一种有机碱，优选为二乙胺。

其中低级醇溶液中包含有机碱，其含有机碱的浓度(V/V)为0.1～1.0％，优选浓度为0.5％，最优为含0.5％的二乙胺。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1)取鲁拉西酮或含鲁拉西酮的制剂样品适量，用乙醇或流动相溶解样品，配制成含鲁拉西酮0.2～10mg的样品溶液。

2)设置流动相流速为0.4～1.0mL/min，流动相流速优选为0.5mL/min，检测波长为210～250nm，最佳检测波长为230nm，色谱柱柱箱温度为20～40℃，柱箱柱温最佳为30℃。

3)取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成鲁拉西酮与光学异构体的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津岛津：

LC-10ATvp，SPD-M10Avp

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL 250×4.6mm)

流动相：正己烷-乙醇溶液(含0.5％二乙胺)-四氢呋喃＝85∶15∶0.5

流速：0.5mL/min

检测波长：230nm

柱温：30℃

进样体积：20μL

本发明采用OJ-H(CHIRALCEL 250×4.6mm)，能够有效的分离鲁拉西酮及其光学异构体。本发明解决了鲁拉西酮及其光学异构体的分离测定问题，从而确保了鲁拉西酮及其制剂的质量可控。

附图说明

图1空白溶剂的高效液相色谱图

图2鲁拉西酮消旋体的高效液相色谱图

图3鲁拉西酮的高效液相色谱图

图4鲁拉西酮片辅料空白的高效液相色谱图

图5鲁拉西酮片的高效液相色谱图

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp；

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL 250×4.6mm)；

流动相：正己烷-乙醇溶液(含0.5％二乙胺)-四氢呋喃＝85∶15∶0.5；

流速：0.5mL/min；

检测波长：230nm；

柱温：30℃；

进样体积：20μL。

实验步骤

取鲁拉西酮消旋体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图1、图2。

图2中保留时间为29.87min的色谱峰为鲁拉西酮的色谱峰，27.10min的色谱峰为鲁拉西酮对映体，24.05min、26.36min、33.94min、45.68min的四个色谱峰为鲁拉西酮的另外四个光学异构体，它们互为对映体。

实施例2

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp；

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL 250×4.6mm)；

流动相：正己烷-乙醇溶液(含0.5％二乙胺)-四氢呋喃＝85∶15∶0.5；

流速：0.5mL/min；

检测波长：230nm；

柱温：30℃；

进样体积：20μL。

实验步骤

取鲁拉西酮原料约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图3。

图3中保留时间为30.03min的色谱峰为鲁拉西酮的色谱峰，由图可以证明，鲁拉西酮的光学纯度达到原料药的要求，本法可以用于鲁拉西酮的质量监测。

实施例3

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp；

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL 250×4.6mm)；

流动相：正己烷-乙醇溶液(含0.5％二乙胺)-四氢呋喃＝85∶15∶0.5；

流速：0.5mL/min；

检测波长：230nm；

柱温：30℃；

进样体积：20μL。

实验步骤

取鲁拉西酮片适量，约相当于鲁拉西酮12.5mg，置25mL量瓶中，加流动相超声处理溶解，并用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，并同法进行空白辅料试验，结果见图4、图5。

图4证明，空白辅料不干扰本品的测定，图5证明本法可以用于鲁拉西酮制剂的质量监测。30.21min的色谱峰为鲁拉西酮的色谱峰。

从图1-图5表明：本发明的方法，可以清楚地将鲁拉西酮与其光学异构体分离，并可以准确进行检测定量，以计算出光学异构体的含量，从而有效控制鲁拉西酮及其制剂产品质量。

Claims (9)

1.一种液相色谱法分离测定鲁拉西酮或/和其光学异构体的方法，其特征在于：采用以纤维素三(4-甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液-四氢呋喃混合溶液为流动相，其中低级醇溶液中包含选自乙二胺、二乙胺、三乙胺中的一种有机碱，其浓度(V/V)为0.1～1.0％，正己烷-低级醇溶液-四氢呋喃体积比为75∶25∶0.5～90∶10∶0.5。

2.根据权利要求1所述的分离测定方法，手性色谱柱选自牌号为CHIRALCEL OJ或/和CHIRALCEL OJ-H的色谱柱。

3.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的低级醇为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇中的一种。

4.根据权利要求3所述的分离测定方法，所说的低级醇为乙醇或异丙醇。

5.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的正己烷-低级醇溶液-四氢呋喃的体积比为85∶15∶0.5。

6.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的低级醇溶液中包含的有机碱为二乙胺。

7.根据权利要求6方法中，所说的低级醇溶液中所含有机碱二乙胺的浓度最优为0.5％。

8.根据权利要求1所述的分离测定方法，其特征在于，包括以下几个步骤：

1)取鲁拉西酮或含鲁拉西酮的制剂样品适量，分别用乙醇或流动相溶解样品，配制成每1mL含鲁拉西酮及其中间体0.2～10mg的样品溶液；

2)设置流动相流速为0.4～1.0mL/min，检测波长为210～250nm，色谱柱柱箱温度为20～40℃。

3)取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成鲁拉西酮与其光学异构体的分离测定。

9.根据权利要求8所述的分析分离方法，步骤2)所说的流动相流速优选为0.5mL/min，色谱柱柱箱温度为30℃，检测波长为230nm。

Images