CN102854261A - 一种用液相色谱法分离测定度洛西汀及其光学异构体的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用液相色谱法分离测定度洛西汀及其光学异构体的方法，该方法以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以一定比例的正己烷-低级醇溶液的混合溶剂为流动相，可以定量测定度洛西汀的光学异构体的含量，从而有效控制度洛西汀及含度洛西汀制剂产品的质量，本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。

Description

一种用液相色谱法分离测定度洛西汀及其光学异构体的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定度洛西汀及其光学异构体的方法。

背景技术

度洛西汀是一种5-羟色胺和去甲肾上腺素再提取双重抑制剂，用于治疗各种抑郁症和焦虑症，以及缓解中枢性疼痛如糖尿病外周神经病性疼痛和妇女纤维肌痛等的药物，其化学名为(S)-(+)-N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩)丙胺盐酸盐，分子式为C₁₈H₁₈NOS·HCl。度洛西汀结构式为：

度洛西汀分子中含有手性碳原子，在药物合成过程及稳定性考察过程中需要对光学异构体过行质量控制。光学异构体的分离已知是手性药物合成和制剂进程中质量控制的难点。因此，实现度洛西汀及其手性异构体的分离在度洛西汀的合成和制剂的研究、生产过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离测定度洛西汀及其光学异构体的高效液相方法，从而实现度洛西汀与其光学异构体的分离和测定。保证度洛西汀及含度洛西汀制剂的质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析度洛西汀及其光学异构体的方法，是采用以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相，其中低级醇溶液中包含有机碱。这里所说的液相色谱法包括高效液相色谱法或高效液相色谱法-质谱法联用。

上述所说的手性色谱柱以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料，选自牌号为CHIRALCEL OJ和CHIRALCEL OJ-H的色谱柱。

上述所说的低级醇选自以下化合物：甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，优选为乙醇或异丙醇。上述所说的方法，其流动相正己烷-低级醇溶液体积比为98∶2～70∶30，优选体积比为90∶10，更优选的是正己烷-乙醇或异丙醇的体积比为90∶10。

上述所说的方法中，低级醇溶液中包含的有机碱选自乙二胺、二乙胺和三乙胺中的一种有机碱，优选为二乙胺。

其中低级醇溶液中包含有机碱，其含有机碱的浓度(V/V)为0.05～0.5％，优选浓度为0.1％，最优为含0.1％的二乙胺。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1)取度洛西汀或含度洛西汀的制剂样品适量，用乙醇或流动相溶解样品，配制成含度洛西汀0.1～1.5mg的样品溶液。

2)设置流动相流速为0.4～1.0mL/min，流动相流速优选为0.5mL/min，检测波长为210～250nm，最佳检测波长为230nm，色谱柱柱箱温度为20～40℃，柱箱柱温最佳为20℃。

3)取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成度洛西汀与光学异构体的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL250×4.6mm)

流动相：正己烷-异丙醇(含0.1％二乙胺)＝90∶10

流速：0.5mL/min

检测波长：230nm

柱温：20℃

进样体积：20μL

本发明采用OJ-H(CHIRALCEL250×4.6mm)，能够有效的分离度洛西汀及其光学异构体。本发明解决了度洛西汀及其光学异构体的分离测定问题，从而确保了度洛西汀及其制剂的质量可控。

附图说明

图1：空白溶剂的高效液相色谱图。

图2：度洛西汀消旋体的高效液相色谱图。

图3：度洛西汀原料的高效液相色谱图。

图4：度洛西汀片辅料空白的高效液相色谱图。

图5：度洛西汀片的高效液相色谱图。

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp；

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL250×4.6mm)；

流动相：正己烷-异丙醇(含0.1％二乙胺)＝90∶10；

流速：0.5mL/min；

检测波长：230nm；

柱温：20℃；

进样体积：20μL。

实验步骤

取度洛西汀消旋体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图1、图2。

图2中保留时间为23.508min的色谱峰为度洛西汀对映异构体的色谱峰，28.140min的色谱峰为度洛西汀的色谱峰，由图可以看出，度洛西汀与其对映体能够达到基线分离，符合中国药典的要求。

实施例2

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp；

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL250×4.6mm)；

流动相：正己烷-异丙醇(含0.1％二乙胺)＝90∶10；

流速：0.5mL/min；

检测波长：230nm；

柱温：20℃；

进样体积：20μL。

实验步骤

取度洛西汀原料约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图3。

图3中保留时间为29.114min的色谱峰为度洛西汀的色谱峰，由图可以证明，度洛西汀的光学纯度达到原料药的要求，本法可以用于度洛西汀的质量监测。

实施例3

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp；

色谱柱：OJ-H(CHIRALCEL250×4.6mm)；

流动相：正己烷-异丙醇(含0.1％二乙胺)＝90∶10；

流速：0.5mL/min；

检测波长：230nm；

柱温：20℃；

进样体积：20μL。

实验步骤

取度洛西汀片适量，约相当于度洛西汀12.5mg，置25mL量瓶中，加流动相超声处理溶解，并用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，并同法进行空白辅料试验，结果见图4、图5。

图4证明，空白辅料不干扰本品的测定，图5证明本法可以用于度洛西汀片的质量监测。29.218min的色谱峰为度洛西汀的色谱峰。

从图1-图5表明：本发明的方法，可以清楚地将度洛西汀与其光学异构体分离，并可以准确进行检测定量，以计算出光学异构体的含量，从而有效控制度洛西汀的产品质量。

Claims (10)

1.一种液相色谱法分离测定度洛西汀和其光学异构体的方法，其特征在于：采用以纤维素三(对甲苯基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相，其中低级醇溶液中包含选自乙二胺、二乙胺和三乙胺中的一种有机碱，其浓度(V/V)为0.05～0.5％，正己烷-低级醇溶液体积比为98∶2～70∶30。

2.根据权利要求1所述的分离测定方法，手性色谱柱选自牌号为CHIRALCEL OJ和CHIRALCEL OJ-H的色谱柱。

3.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的低级醇选自以下化合物中的一种：甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇。

4.根据权利要求3所述的分离测定方法，所说的低级醇为乙醇或异丙醇。

5.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的正己烷-低级醇溶液的体积比为90∶10。

6.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的低级醇溶液中包含的有机碱为二乙胺。

7.根据权利要求6方法中，所说的低级醇溶液中所含有机碱二乙胺的浓度最优为0.1％。

8.根据权利要求1所述的分离测定方法，其特征在于，包括以下几个步骤：

1)取度洛西汀或含度洛西汀的制剂样品适量，分别用乙醇或流动相溶解样品，配制成每1mL含度洛西汀及其中间体0.1～1.5mg的样品溶液；

2)设置流动相流速为0.4～1.0mL/min，检测波长为210～250nm，色谱柱柱箱温度为20～40℃；

3)取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成度洛西汀与其光学异构体的分离测定。

9.根据权利要求8所述的分析分离方法，步骤2)所说的流动相流速优选为0.5mL/min。

10.根据权利要求8所述的分析分离方法，步骤2)所说的检测波长为230nm。

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