CN102947687B - 用于定量转移分析物的方法 - Google Patents

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Abstract

用于转移定量的分析物的方法，所述分析物如微生物、抗体/抗原、抗微生物作用的物质、核苷酸、抗生素、激素、DNA序列、酶、有机物质、生物物质或生物来源的物质、培养基(cultivating？land)的富集补充剂和选择性补充剂，所述方法至少包括以下阶段：预放置预定起始量的至少分析物和液体的基本均匀的混合物，获得混合物中分析物的浓度值或已知量；至少将具有支撑体(2)的取样装置(1)的收集部分(3)引入到混合物中以在收集部分(3)上收集一部分混合物，所述收集部分(3)包括支撑体(2)的第一部分(2a)和通过植绒(flock)方式附接和排布在支撑体(2)的第一部分(2a)上来限定植绒收集部分(3)或植绒塞头(flockedtampon)的多个纤维(6)；和将取样装置(1)的收集部分(3)从混合物中取出，在收集部分(3)上保留预定已知量的待转移混合物。

Description

用于定量转移分析物的方法
本发明涉及用于定量转移分析物的方法。所述方法适用于例如临床、诊断和一般分析部门，以使得能够取样并且将预定已知量的分析物转移至利用其进行多种性质的分析或测试的位置。
所述方法特别适于收集和转移多种物质，例如微生物、抗体/抗原、抗微生物作用的物质、核苷酸、抗生素、激素、DNA序列、酶、可培养基质(cultivatableterrain)的富集物质或选择性补充剂，以及一般的有机物质、生物物质或生物来源的物质等。
现有技术包括必须将已知量的分析物(例如有机或生物物质)用于多种分析或诊断需求的多种应用。例如，用于验证微生物质量的公司程序，包括使用标准微生物培养物来验证已满足由参照标准指示的要求。为此目的，进行微生物控制以验证和确认实验室方法和程序(其可以包括例如控制微生物培养所用培养基(soil)的选择性和营养性成分的效力)，还验证微生灭活操作的效力，或为了其他目的进行的其他那些。
另一个已知例子是诊断试剂盒，其具有待鉴定物质的阳性对照和阴性对照，其能够控制和验证试剂盒本身，以及测试程序和待分析样品的制备。例如，在旨在诊断现有或之前感染的细菌寻找和鉴定测试中，例如在金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)凝集测试的具体情况中，在分析方案的预定时间内利用细菌样品进行的阳性对照必须提供明显的凝集，而相同细菌的阴性对照必须不凝集。
在另一个例子中，在食品基质抑制剂的研究试剂盒中，例如在乳检验的抗微生物剂研究的具体情况下，利用包含抗生素的溶液进行的阳性对照必须根据检验方法在设定时间中得到阳性结果。
通常，阳性对照以液体形式或冻干丸粒，或者在使用前进行再水化的粉末(因为再水化的阳性对照的有限稳定性显著限制其作用寿命)提供。此外，在于支持物上提供对照的情况下，定量释放通常受限制，所以为了获得阳性测试反应，一般倾向于使用过量的待研究物质的对照样品以超过各测试的定量阈值。
如微生物抗性测试领域已知的，在分离微生物后需要确定哪些物质可以抵抗微生物以及在何浓度抵抗。通常这些测试通过从已知的基质溶液开始制备一系列连续稀释液进行。制备稀释液的程序很费力，因此对在分析实验室中进行的方法的生产力在经济方面有不利作用。一般实验室使用的已知类型的收集和转移装置由例如巴斯德吸管、注射器、垫(pad)或勺构成。
在全部上述例子中，并且通常在所有分析物转移方法及其之后的分析中，有很多的有问题的方面。这些有问题的方面与例如分析物制备程序的复杂性及其转移和保存的困难性相关。应注意，很多的分析物需要(为了长时间保存它们)非常特异和受控的环境条件。同样，分析物的正确量化通常很复杂，尤其是在使用非常少量分析物的情况下，因为获得期望少量的唯一方法是：在需要时制备已知浓度的溶液，并且在制备后立即直接取出一部分溶液。
为了能够进行分析，通常需要长时间、复杂且昂贵的操作。此外，为了进行对比测试或其他分析，多种已知分析方法需要使用极精确的分析物量，如果没有精细且费力的操作，这通常很难实现。换言之，现有技术不能以适于所需应用的量和特定模式在每次需要的时候利用多种类型的分析物。
本发明的主要目的是消除现有技术遇到的一个或更多个问题。本发明的一个目的是提供用于转移定量的分析物的方法，其使得能够获得样品并且数量正确且精确地转移分析物。
本发明的另一个目的是提供定量转移分析物的方法，其对于难以收集、转移、保存或处理的分析物同样非常有效。
本发明的另一个目的是得到降低由使用者带来污染的风险的定量转移分析物的方法。
本发明的另一个目的是得到适用于多种分析物并且对其有效的定量转移分析物的方法。
本发明的另一个目的是得到定量转移分析物的方法，其提供即用于分析或诊断测试并且量非常小且精确的分析物。
本发明的另一个目的是得到定量转移分析物的方法，其能够使负载预定剂量的(pre-dosed)的取样装置给出已知预定量的分析物和/或任何量(甚至非常少量)的分析物和/或其中所述方法对多种分析物可实现和/或其中负载预定剂量的装置在快速使用条件(rapid-usecondition)下给出分析物。
本发明的另一个目的是得到定量转移分析物的方法，其能够显著降低进行多种诊断分析和测试的复杂性、时间和成本。
本发明的另一个目的是得到使用简单且经济的定量转移分析物的方法。
通过一个或更多个所附权利要求中给出定量转移分析物的方法(单独或组合使用或者与一个或更多个所述特征任意组合)，基本实现这些目的和其他目的(其在以下描述中将更加充分展现)。
本发明还涉及根据一个或更多个所附方法权利要求的方法，其中制备基本均匀的混合物的阶段通过涡旋(vortexisation)和/或使用振动装置进行搅拌来完成。
本发明还涉及根据一个或更多个所附方法权利要求的方法，还包括实现提供有预定已知量的分析物的负载预定剂量的装置的阶段。
本发明还涉及一个或更多个所附方法权利要求的方法，其中插入至少收集部分和取出收集部分的阶段由操作者手工完成和/或其中所述方法还至少包括在将收集部分插入到混合物中之前从密封且无菌的包装中取出无菌装置的阶段。
本发明还涉及一个或更多个所附方法权利要求的方法，其中将收集部分插入到混合物中的阶段通过将收集部分直接浸在至少微容器(micro-container)中或通过微体积泵(pumpformicro-volume)的方式进行。
本发明还涉及一个或更多个所附方法权利要求中的装置在进行权利要求1至8方法的阶段中的用途。以非限制性实例的方式，将详细描述本发明的一些优选实施方案，其中：
图1是示意性描述本发明方法的一些实施方案的流程图。
图2是本发明一个实施方案的装置的侧视图。
图2a是图2装置涉及收集部分的细节图。
图3是本发明一个实施方案的容器。
图1描述了本发明定量转移分析物的方法，其至少包括以下阶段：预放置(图1阶段A)基本均匀的混合物，所述混合物至少是预定起始量的至少分析物和液体的混合物；获得(阶段A4)至少混合物中已知浓度的分析物；至少将具有支撑体2的取样装置1的收集部分3插入(阶段B)混合物中，收集部分3包含支撑体2的第一部分2a和通过植绒(flock)附接并且排布在支撑体2的第一部分2a上的多个纤维6，以限定植绒收集部分3或植绒垫，从而在收集部分3上收集一部分混合物。
在本说明书中，表述“基本均匀”是指通常定义为均匀的混合物，其中成分不再可区分且在单一相(例如溶液)中，也指这种类型的混合物，即一般被认为是不均匀，但在任何情况下都表现(在宏观水平)为各成分宏观上不可区分的高水平相互混合。例如，“基本均匀”用于指在足够少的量中基本恒定的各物质，即使这仅在有限的时间内实现(通过有意混合混合物成分的阶段)。换言之，“基本均匀”可以指这样的分析物与液体的混合物，其中可以充分精确地确定包含在确定量的可取样混合物(包含在可用取样装置1的收集部分3收集的确定量混合物中)中的分析物量，以确定所收集的分析物的量。混合物可以是饱和的或不是饱和的，还可以存在底部残余物，因为感兴趣的基本均匀的混合物的部分是期望浓度可确定并且在混合物的各区域基本均一的部分。
该方法还包括将取样装置1的收集部分3从混合物中取出(图1的阶段C)同时在收集部分3上保留预定已知量的待转移混合物的阶段。该方法的目的可以为转移分析物如微生物、抗体/抗原、抗微生物物质、核苷酸、抗生素、激素、DNA序列、酶、有机物质、生物物质或生物来源的物质、培养基的富集补充剂或选择性补充剂等。预放置混合物的阶段可包括以下的的子阶段：预放置(阶段A1)预定起始量的分析物；将预定起始量的分析物与液体混合(阶段A2)以获得预定起始量的分析物与液体的混合物，和/或通过例如涡旋和/或使用振荡装置进行振荡使混合物基本均匀的阶段(阶段A3)。可以将混合物预放置在例如合适的容器中。获得混合物中分析物的已知浓度值的阶段可以通过将已知量的分析物与已知量的液体混合和/或通过测量混合物中分析物的浓度值的阶段来进行。
该方法还包括测量(阶段C1)在将取样装置的收集部分3从混合物中取出的阶段中有效保留在收集部分3上的混合物的量的阶段。该测量阶段可通过比较插入收集部分3前混合物的起始重量与取出收集部分3后混合物的最终重量来进行，或通过比较插入到混合物中之前取样装置1的重量与从混合物中取出后取样装置1的重量来进行。
该方法还可包括至少使具有预定量待转移混合物的收集部分3脱水、干燥(阶段D)或冻干(阶段E)的阶段，以得到在收集部分3上具有预定量的干燥或冻干分析物的负载预定剂量的(pre-dosed)的取样装置1。干燥阶段可以通过例如在烘箱中或通过强制通风(forcedventilation)干燥来进行，或通过已知类型且适于处理特定分析物的其他方法来进行。负载预定剂量的取样装置1包括支撑体2和具有预定已知量的待转移分析物和/或预定且干燥的已知量待转移分析物的植绒收集部分3。
该方法还包括将收集部分3插入到真空容器(类型已知，因此未在图中绘出)并且在容器中产生低压或真空的阶段。该产生低压或真空的阶段可以在干燥或冻干阶段进行，或在与干燥或冻干阶段分开的其他时间进行。
该方法还包括利用例如至少营养溶液和/或水化溶液使收集部分3上预定量的干燥或冻干分析物再活化(revitalising)或再水化(re-hydrating)以在收集部分3上得到预定量的再水化分析物的阶段(阶段F)。
该方法还包括通过直接在皿上接种(seeding)或在液体基质(terrain)稀释来释放至少85％的预定量待转移混合物或预定量的分析物以使得能够对分析物进行分析的步骤。该方法还可包括分析如此释放的分析物的一个或更多个阶段。
该方法还可包括将具有分析物的收集部分3插入到容器7例如试管中，用帽5或封闭盖封闭容器7，以及转移包含收集部分3的容器7的阶段，和/或在容器7中预放置预定量的用于液化和/或保存分析物的物质8的阶段，和/或以预定速率搅拌、振荡或旋转包含具有分析物之收集部分3的容器7以使分析物液化的阶段。
接下来描述本发明的一个实施方案中还用于转移一定量的分析物的取样装置1。
参照附图中的图，1整体表示用于取样和转移具有多种性质和组成的一定量的分析物的手动装置1。取样装置1包括支撑体2，其可以是长的和/或基本为棒形。支撑体2可具有任何截面，其甚至可以沿其纵向可变。支撑体2具有：第一部分2a，例如限定分析物的收集部分3的末端部分；第二部分2b，其位于中央并且基本为棒形；以及第三部分23c，其为操作者可用手握住体2的末端部分，或其可以与另外的抓取元件(grippingelement)4(如试管盖5等)连接。
用于分析物的收集部分3可以制成垫。收集部分3是植绒的，通过在支撑体的第一端2a上植多个纤维6来实现。植在第一端上的纤维6可以由不亲水物质如尼龙制成，但是由于纤维6的性质及其在支撑体2上的分布，所以收集部分3通过毛细作用而亲水。另一方面，收集部分3可以是这样的纤维6的连续层，其由对分析物基本不吸收的物质制成，但是具有有序的多个毛细空隙9，其中通过吸收可以保留预定量的分析物，并且随后可以通过例如将收集部分3在特定的释放表面摩擦来在分析时从中定量释放出所述量的分析物。
这种植绒垫的例子描述在本申请人的专利EP.1,608,268中，为了在本说明中引用的目的，并入植绒垫结构的内容。
如在上述专利中描述的，通过植绒过程的沉积，在取样装置1相关端上产生按序排列的多个纤维6的连续且均匀的层，所述多个纤维6在支撑体2的第一部分2a的每点上基本垂直，并且其每一个与相邻的纤维6基本平行。在纤维6之间限定相应有序的多个毛细空隙9，其中空隙9可以通过毛细作用经过吸收收集并保留预定量的分析物。
通过例如在表面上摩擦或将分析物在稀释剂中稀释的方法，植绒层随后可定量释放所收集的分析物。植绒收集部分3被配置成和将其大小制作成收集足够的已知量分析物和/或混合物，或收集量为例如5至1000微升、10微升至500微升，或50至200微升，或80至120微升的混合物。纤维6可以基本有序的方式排布在支撑体2上从而在收集部分3上形成基本连续的层和/或排布在收集部分3上从而限定多个用于通过毛细作用吸收混合物的毛细空隙9。纤维具有1.7至3.3Dtex的线密度或纤维数，和/或具有0.6至3mm的长度。纤维6可以以例如50至500纤维每mm2，或100至200纤维每mm2的表面密度植在支撑体2的收集部分3上。纤维层可以限定例如至少0.5μl每mm2，或至少0.6μl每mm2，或至少0.7μl每mm2，或至少0.75μl每mm2的吸收能力。纤维6可以由基本不亲水的物质或不吸附混合物或分析物的物质制作，和/或由选自以下的物质制作：聚酰胺、人造丝、聚酯、碳纤维、藻酸或藻酸盐(alginate)、对混合物不吸附的天然物质或上述物质的混合物。
支撑体2可具有2cm至20cm，或3cm至18cm，或6cm至16cm的纵向延伸和/或0.5mm至5mm，或1mm至3mm，或1.5mm至2.5mm的厚度或与其中轴垂直的截面的直径。
收集部分3可具有8cm至0.5cm，或5cm至1cm的纵向延伸和/或10mm至1mm，或8mm至2mm，或5mm至2.5mm的包含纤维6的直径或厚度。
收集部分3可具有用于特定种类的待取样分析物的任何合适形状，例如圆形或具有一个或更多个活边缘(liveedge)。
支撑体2可具有设计为便于在其第一端和第二端之间的中间部分选择性断裂支撑体2的中间弱化部分，以便例如帮助将收集部分3插入到容器7中用于运送。
取样装置1可包括多个支撑体，每个支撑体具有构造或形状不同且被特别地构造来收集特定种类的分析物或收集特定量的分析物的收集部分3。取样装置1还可以包含用于运送分析物的容器7，其具有内部容纳座10和开口(accessopening)11。容器7可以是用于运送生物物质或生物来源物质的样品的试管。取样装置1还可包含封闭帽5，其可移除地安装在开口上，以选择性封闭容器7。
取样装置1还可至少包含位于容器7或其他有用部分中的干燥或除湿元件，例如包含硅胶的袋子。容器7和/或封闭帽5和/或支撑体2可用塑料物质如聚苯乙烯(polystyrol或polystyrene)或聚丙烯和/或适用于生物物质或生物来源物质的物质制成。容器7和/或封闭帽5和/或支撑体2可以是无菌的。
取样装置1还可包括密封包装(作为已知类型在图中未示出)，在用于收集分析物前可以将支撑体2和/或容器7和封闭帽5装于其中。支撑体2、包装、容器7和帽5可以是无菌的。
本发明还能够实现用于进行诊断或化学测试(如阳性或阴性对照)或用于转移用于培养基补充剂的水介质中的易损坏(fragile)物质的试剂盒，其至少包含上述类型的取样装置1，还包含用于干燥或冻干取样装置1的收集部分3上的预定量混合物的部件和/或用于再活化取样装置1的收集部分3上的预定量干燥或冻干分析物的部件，例如含有营养溶液和/或水化溶液的试管。
如之前提到的，本发明使得可以设计和实现用于转移分析物并且在期望使用时刻基本完全释放所收集的分析物的负载预定剂量的装置，可用的分析物的量为所收集样品分析物的至少85％。
负载预定剂量的装置适于多种用途，其中包括诊断、化学、制药、化妆品、食品、水控制等领域。在可进行取样并随后用于实验室的分析物中，可通过举例方式提及以下：
生物和微生物性质的分析物，例如微生物、抗体、抗原、激素作用的物质、寡核苷酸或DNA序列、酶等。
化学性质的分析物，例如抗生素、包含蛋白质的富集补充剂、选择性补充剂等。
为了更好地理解本发明的性质和优点，以下参照一个优选实施方案(其中通过植绒在垫的一端沉积纤维6例如尼龙纤维的层)给出一些实际实施的具体但非限制性的实施例。另一应用是转移来自多种机体或环境区域的有机物质。此外，仅通过非限制性描述本发明的方式给出下表，其中归纳了负载预定剂量的系统的主要应用领域，以及在相应测试中待检验的物质。
实施例1
在发明的第一个实施方案中，本发明被用于转移一定量的活的稳定的微生物，例如用于制备微生物领域的质量控制试剂盒。制备了用于转移活微生物的负载预定剂量的取样装置，其在适当的脱水处理后能够保存并运送活的稳定的微生物类群；同时，垫形式的取样装置1提供了直接将分析物样品接种到皿或固体基质上或在溶剂或液体基质中稀释的合适系统。
所述试剂盒包含植绒垫，其上通过吸收以及随后的冻干处理收集了已知浓度的确定的微生物群落。这些装置的应用领域包括多种临床和食品领域。所述试剂盒包含用于再活化冻干群落的部件，即含有营养溶液和/或水化溶液的试管。
现在描述与大肠杆菌(EscherichiaColi)ATCC25922相关的具体实施例。但是利用其他微生物也可得到类似结果。
在本实施例中，以定量形式制备了冻干微生物的负载预定剂量的植绒垫：将约300UFC的大肠杆菌转移到垫上，进行冻干处理，然后在干燥处理结束时进行恢复。冻干微生物的负载预定剂量的装置可用作多个领域如制药工业、水和废水测试、食品工业、化妆品工业等领域微生物质量控制的参照标准。
制备用于保证分析方法标准化的这些装置的基本要求是，沉积在取样装置1的收集部分3上的样品的释放必需在使用时完全释放。为了制备负载预定剂量的取样装置1，通过使用已知浓度的微生物溶液来使植绒收集部分3吸收，以保证约300UFC的总量转移到每个垫上。在垫的特定情况下，所使用注入的微生物量可以为10至200μL，特定情况下为100μL。所使用的微生物悬液的浓度为约3000UFC/mL；在含有防冻物质和中和剂的保存部件中直接制备期望浓度的微生物悬液能够保存细胞的活力。通过直接浸在微孔板中实现微生物悬液对垫的注入；类似地，可以使用微体积泵。将垫插入到可支持低压技术和冻干的合适低压容器中，将其脱水，并且在处理结束时将其在低压状态下直接封闭。检验取样装置1进行已知量的转移的测试涉及验证被沉积群落的恢复、不同保存条件下随时间的活力和稳定性。通过在固体基质上接种或已知体积的溶液(特别是500μL的水化物质)来直接进行测试。利用借助微移液管收集的样品进行相同接种来实施转移验证的比较。
下表给出了通过将用大肠杆菌负载预定剂量的垫直接接种在固体基质上进行的计数的平均值，其与利用常规体积法转移微生物悬液(例如微量移液管)得到的类似结果进行比较。数据涉及50个负载预定剂量的垫的样品。
该表给出了通过将负载预定剂量的垫在500μLPBS中稀释并将由此重构的全部样品接种在固体基质上进行的计数的平均值，其与利用常规体积法如微量移液管转移微生物悬液得到的结果类似。数据涉及50个负载预定剂量的垫的样品。
已经表明植绒垫是通过冻干处理保持微生物群落的极佳定量转移装置。该系统的可重复性良好并且随时间稳定。
实施例2
在本发明的第二个实施方案中，将取样装置1包含在免疫-酶型测流诊断系统的质量控制试剂盒中，例如用于流感、StrepA、MRSA、HIV、RSV等的试剂盒。在具体情况下，取样装置1用于转移抗原/抗体并且在脱水处理后能够保存并且稳定分析物。其中根据特定测试的LOD(检测限或截断值(cut-off))调节了分析物的量的系统在相应诊断试剂盒中提供可用的阳性对照。
所述试剂盒包含通过吸收和随后的干燥处理在其上放置有已知浓度的确定抗原或抗体的植绒垫。这些装置的应用领域包括多种临床和制药领域。所述试剂盒包含使测试能够完成的部件。这些装置装载有所述试剂盒对其敏感的抗原/或抗体(在阳性对照情况下)或未装载抗原/抗体或装载有与所述试剂盒的靶标不同的抗原/抗体(在阴性对照情况下)。
此外，这些对照具有向最终使用者显示测试的阳性结果和阴性结果应当怎样出现的目的。具有聚合物组合物之连续层的取样装置1能够与转移分析物进行吸附类型的相互作用，保证通过溶剂方式完全收集分析物，而不吸收到层的内部。该表面相互作用机制保证了在使用时分析物的完全释放。
实施例3
在本发明的第三个实施方案中，取样装置1被包含在用于研究乳及衍生物中的抑制物质的质量控制试剂盒中；其他食品基质也可有类似应用。在这种情况下，取样装置1用于转移抗微生物物质，其随后能够适于用于脱水的脱水系统以保存分析物。具有预定量抗微生物物质的负载预定剂量的系统在再水化后提供用于乳样品参照测试中的阳性对照。所述试剂盒包含植绒垫，在其上通过干燥处理粘附有已知浓度的确定抗生素。所述试剂盒包含使测试能够完成的部件。这些装置装载有所述试剂盒对其敏感的抗生素(在阳性对照的情况下)或未装载抗生素或装载有与试剂盒的靶标不同的抗生素(在阴性对照情况下)。此外，这些对照具有为最终使用者显示测试的阳性结果和阴性结果应当怎样出现的目的。
实施例4
在本发明的第四个实施方案中，取样装置1包含在用于验证确定微生物对于抗生素的抗性(MIC，最低抑制浓度)的试剂盒中。在这种情况下，取样装置1用于转移抗微生物物质，随后使得用于脱水的合适系统能够稳定所沉积的抗生素，并且使它们在微生物抗性测试中存活。所述试剂盒包含一系列植绒垫，通过吸收和干燥处理，在其上粘附有已知浓度的不同量的确定的抗微生物物质。
实施例5
在本发明的第二个实施方案中，取样装置被包含在利用生物化学方法进行质量控制的试剂盒中。在这种情况下，取样装置1用于转移核苷酸，并且在适当的脱水处理后能够保存并稳定分析物。负载预定剂量的有一定量(根据特定测试的截断值调节)分析物的系统提供可用于相应诊断方法中的阳性对照。所述试剂盒包括植绒垫，通过吸收和随后的干燥处理，在其上粘附有已知浓度的确定核苷酸。这些装置的应用领域包括多种临床和制药领域。所述试剂盒包含使测试能够完成的部件。这些装置在阳性对照情况下装载有可以与相应仪器起作用的核苷酸，或者在阴性对照情况下不装载核苷酸。此外，这些对照具有向最终使用者显示测试的阳性结果和阴性结果应当怎样出现的目的。
实施例6
在本发明的第六个实施方案中，取样装置1被包含在激素检测测试的质量控制试剂盒中(例如，妊娠测试、兴奋剂测试(anti-doping)等)。在这种情况下，取样装置用于转移激素，其在脱水处理后能够保存并且稳定分析物。具有一定量(根据特定测试的LOD(检测限或截断值)调节)的分析物的系统提供可用于相应诊断试剂盒阳性对照。
所述试剂盒包含植绒垫，通过吸收和随后的干燥处理，在其上粘附有已知浓度的确定激素。这些装置的应用领域包括多种临床和食品领域。
所述试剂盒包含使测试能够完成的装置。这些装置装载有试剂盒对其敏感的激素(在阳性对照的情况下)，或未装载激素或装载有与试剂盒的靶标不同的激素(在阴性对照的情况下)。此外，这些对照具有向最终使用者显示测试的阳性结果和阴性结果应当怎样出现的目的。
实施例7
在本发明的第七个实施方案中，取样装置1被包含在试剂盒中用于定量转移来自于不同机体区域的生物样品或来自于表面收集物的环境样品。特别地，取样装置1用于定量转移临床样本如尿、粪便、支气管灌洗液、鼻孔、阴道、咽、腹股沟等其他表面垫。应用涉及样品微生物污染的控制。
实施例8
在本发明的第八个实施方案中，取样装置1用于定量转移给定量的有机样品，包括精液、唾液、血液。应用涉及样品所包含核酸的分析。
实施例9
在本发明的另一实施方案中，取样装置1包括用于转移、保持和释放用于培养基的确定的富集补充剂和/或选择性补充剂的试剂盒。取样装置1用于定量转移增加培养基的肥力(fertility)的物质(例如氨基酸、糖、蛋白质等)或能够使确定的微生物生长而防止其他的生长的物质(例如盐、抗生素、化学物质等)，特别吸收和脱水使得能够获得在正确体积液体基质中直接可用的负载预定剂量的系统。
用于使富集培养基的很多物质在水化状态的稳定性有限；这限制且损害了基质自身的使用。负载预定剂量的取样装置1的优点是系统可用并且是即用的，使得能够通过简化待采用的测量手段和本身的保存使培养基的使用寿命延长。这些装置的应用领域包括多种临床、食品和制药领域。
本发明提供以下一个或更多个优点。
首先，本发明使得能够实现方法和根据所述方法实现的装置，其消除了现有技术遇到的问题。本发明的方法使得以非常有效的方式获得多种分析物的量准确且精确的样品和转移，甚至对很难取样、转移、保存或处理的分析物也是如此。
此外，由于即用的负载预定剂量的量的实现，本发明提供了量非常少且精确的即用于分析或诊断检验的分析物。
本发明能够显著降低进行大范围诊断分析和测试的复杂性、时间和成本。
利用本发明，可以制备具有不同抗微生物物质的负载预定剂量的系统，由于随后将微生物注入生长基质中，使得负载预定剂量的有多种量的抗微生物剂的系统能够轻易地确定微生物的敏感性和抗性。
此外，本发明能够以适于在特定情况使用的形式得到定量的阳性对照或阴性对照，例如能够使试剂盒的反应与阳性对照的实际浓度相关联，具有避免使用过多的参照样品的优点。
负载预定剂量的有预定量冻干微生物的系统立即可用于应用本身使得相关程序的成本和时间显著降低。
最后，本发明的使用简单经济。

Claims (24)

1.用于定量转移下列的方法：微生物、抗体/抗原、抗微生物作用的物质、核苷酸、抗生素、激素、DNA序列、酶、培养基的富集补充剂或选择性补充剂，所述方法至少包括以下阶段：
预放置预定起始量的至少分析物和液体的基本均匀的混合物，得到所述混合物中所述分析物的已知量；
至少将具有支撑体(2)的取样装置(1)的收集部分(3)引入到所述混合物中以在所述收集部分(3)上收集一部分所述混合物，所述收集部分(3)包括支撑体(2)的第一部分(2a)，和通过植绒方式附接并且排布在所述支撑体(2)的第一部分(2a)上来限定植绒收集部分(3)或植绒拭子的多个纤维(6)；
将所述取样装置(1)的收集部分(3)从所述混合物中取出，在收集部分(3)上保留预定已知量的待转移的所述混合物；以及
实现提供有预定已知量的分析物的负载预定剂量的装置。
2.用于定量转移生物物质或生物来源的物质的方法，所述方法至少包括以下阶段：
预放置预定起始量的至少分析物和液体的基本均匀的混合物，得到所述混合物中所述分析物的已知量；
至少将具有支撑体(2)的取样装置(1)的收集部分(3)引入到所述混合物中以在所述收集部分(3)上收集一部分所述混合物，所述收集部分(3)包括支撑体(2)的第一部分(2a)，和通过植绒方式附接并且排布在所述支撑体(2)的第一部分(2a)上来限定植绒收集部分(3)或植绒拭子的多个纤维(6)；
将所述取样装置(1)的收集部分(3)从所述混合物中取出，在收集部分(3)上保留预定已知量的待转移的所述混合物；以及
实现提供有预定已知量的分析物的负载预定剂量的装置。
3.用于定量转移分析物的方法，所述方法至少包括以下阶段：
预放置预定起始量的至少分析物和液体的基本均匀的混合物，得到所述混合物中所述分析物的已知量；
至少将具有支撑体(2)的取样装置(1)的收集部分(3)引入到所述混合物中以在所述收集部分(3)上收集一部分所述混合物，所述收集部分(3)包括支撑体(2)的第一部分(2a)，和通过植绒方式附接并且排布在所述支撑体(2)的第一部分(2a)上来限定植绒收集部分(3)或植绒拭子的多个纤维(6)；
将所述取样装置(1)的收集部分(3)从所述混合物中取出，在收集部分(3)上保留预定已知量的待转移的所述混合物；以及
实现提供有预定已知量的分析物的负载预定剂量的装置。
4.用于定量转移有机物质的方法，所述方法至少包括以下阶段：
预放置预定起始量的至少分析物和液体的基本均匀的混合物，得到所述混合物中所述分析物的已知量；
至少将具有支撑体(2)的取样装置(1)的收集部分(3)引入到所述混合物中以在所述收集部分(3)上收集一部分所述混合物，所述收集部分(3)包括支撑体(2)的第一部分(2a)，和通过植绒方式附接并且排布在所述支撑体(2)的第一部分(2a)上来限定植绒收集部分(3)或植绒拭子的多个纤维(6)；
将所述取样装置(1)的收集部分(3)从所述混合物中取出，在收集部分(3)上保留预定已知量的待转移的所述混合物；以及
实现提供有预定已知量的分析物的负载预定剂量的装置。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述预放置混合物的阶段包括以下阶段：
预放置所述预定起始量的分析物；
将所述预定起始量的分析物与所述液体混合以得到所述预定起始量的分析物在所述液体中的混合物。
6.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述预放置混合物的阶段包括以下阶段：制备基本均匀的所述混合物。
7.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中通过将已知量的所述分析物与已知量的所述液体混合来进行得到所述混合物中所述分析物的已知量的阶段。
8.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中通过测量所述混合物中所述分析物的浓度值的阶段来进行得到所述混合物中所述分析物的已知量的阶段。
9.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其还包括测量在将所述取样装置(1)的收集部分(3)从所述混合物中取出的阶段中有效保留在所述收集部分(3)上的混合物量的阶段。
10.根据权利要求9所述的方法，其中通过比较插入所述收集部分(3)前所述混合物的起始重量与取出所述收集部分(3)后所述混合物的最终重量或通过比较插入到所述混合物中之前所述取样装置(1)的重量与从所述混合物中取出后所述取样装置(1)的重量来进行所述测量阶段。
11.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其还包括至少脱水或冻干具有所述预定已知量的待转移混合物的所述收集部分(3)以得到在所述收集部分(3)上具有预定量的干燥或冻干分析物的负载预定剂量的取样装置(1)的阶段。
12.根据权利要求11所述的方法，其还包括在所述脱水或冻干阶段期间或独立于所述脱水或冻干阶段将所述收集部分(3)插入到真空容器中并且在所述真空容器中产生基本真空条件的阶段。
13.根据权利要求11所述的方法，其还包括使所述收集部分(3)上的所述预定量的干燥或冻干分析物再活化或再水化或者通过至少营养溶液和/或水化溶液使所述收集部分(3)上的所述预定量的干燥或冻干分析物再活化或再水化以在所述收集部分(3)上得到预定量的再水化分析物的阶段。
14.根据权利要求11所述的方法，其还包括通过在皿上直接接种或在液体基质中稀释来释放至少85％的所述预定量的待转移混合物或所述预定量的分析物以使得能够对所述分析物进行分析的阶段。
15.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述植绒收集部分(3)被配制为接收基本上已知量的所述混合物，或者收集10至500微升的所述混合物的量。
16.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述植绒收集部分(3)被配制为收集至少0.5μl/mm2的量。
17.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述纤维(6)以基本上有序的方式排布在所述支撑体(2)的第一部分(2a)上并且在所述收集部分(3)上形成基本连续的层。
18.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述纤维(6)排布在所述收集部分(3)上以限定多个适于通过毛细作用吸收所述混合物的毛细空隙(9)。
19.根据权利要求15所述的方法，其中所述纤维(6)具有1.7至3.3Dtex的线密度或纤维数。
20.根据权利要求15所述的方法，其中所述纤维(6)具有0.6至3mm的长度。
21.根据权利要求15所述的方法，其中所述纤维(6)具有在所述收集部分(3)上50至500纤维/mm2的所述纤维(6)表面密度。
22.根据权利要求15所述的方法，其中所述纤维(6)由对所述混合物不亲水的物质制作。
23.根据权利要求15所述的方法，其中所述纤维(6)由对所述混合物不吸附的物质制作。
24.根据权利要求15所述的方法，其中所述纤维(6)由选自聚酰胺、人造丝、聚酯、碳纤维、藻酸或藻酸盐、对所述混合物不吸附的天然物质或上述物质的混合物制作。
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