CN107683413B - 利用液体样本使吸水介质吸水的方法和装置 - Google Patents
利用液体样本使吸水介质吸水的方法和装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107683413B CN107683413B CN201680032894.XA CN201680032894A CN107683413B CN 107683413 B CN107683413 B CN 107683413B CN 201680032894 A CN201680032894 A CN 201680032894A CN 107683413 B CN107683413 B CN 107683413B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- water
- liquid sample
- absorbing
- well
- container
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/12—Well or multiwell plates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56911—Bacteria
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
- B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
- B01L3/508—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above
- B01L3/5085—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates
- B01L3/50853—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates with covers or lids
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
- B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
- B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
- B01L3/5025—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures for parallel transport of multiple samples
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/26—Conditioning fluids entering or exiting the reaction vessel
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
- C12Q1/06—Quantitative determination
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56961—Plant cells or fungi
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/04—Closures and closing means
- B01L2300/046—Function or devices integrated in the closure
- B01L2300/047—Additional chamber, reservoir
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
- B01L2300/0627—Sensor or part of a sensor is integrated
- B01L2300/0636—Integrated biosensor, microarrays
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
- B01L2300/069—Absorbents; Gels to retain a fluid
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
- B01L2300/0825—Test strips
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
- B01L2300/0829—Multi-well plates; Microtitration plates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
- B01L2300/0864—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices comprising only one inlet and multiple receiving wells, e.g. for separation, splitting
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0887—Laminated structure
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2400/00—Moving or stopping fluids
- B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
- B01L2400/0403—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces
- B01L2400/0406—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces capillary forces
Abstract
本发明涉及一种用于对液体样本进行吸水的装置,该装置包括:容器(4),用于接纳至少一个液体样本;以及盖(5),所述盖具有下部面(5i),至少一个吸水载体(3)附接到该下部面以便具有一吸收面(31)用于吸收液体样本。根据本发明,借助至少一个井(6)而使得容器(4)具有用于接纳液体样本的校准容积,至少所述井(6)具有由至少所述井的顶边缘(8)限定的一校准的开放吸水部,用以使吸水载体(3)进行吸水,所述校准的开放吸水部的一表面低于吸水载体(3)的吸收面的表面,以便控制吸水载体通过毛细作用而对液体样本的吸收。
Description
技术领域
本发明涉及通过液体样本使吸水载体(hydrating support,吸水支撑体)吸水(吸液)的技术领域,所述吸水载体包括一般意义上的反应介质。
背景技术
本发明的主题实现了需要使用液体来活化(激活)事先包含在吸水载体中的反应介质的很多领域中的有利应用。
例如,本发明的主题实现了如下的吸水载体领域中特别有利的应用:这些吸水载体中浸有反应介质并且需要在使用前立即进行再吸水(rehydration,再湿润)以使反应介质活化并使其易于使用。
一个特别有利的应用在于微生物测定试验。需要实施能够检测微生物(例如,用于检测目的和/或枚举目的)的技术,并且需要尽可能快地返回其结果。一般而言,所述微生物不必是致病性的,例如技术上有益的细菌,如发酵剂或质量指示物;这些微生物用于验证从原材料或原料物质加工到最终产品的生产过程。然而,经过微生物测定试验的微生物常常是致病性的,因此需要快速且准确的检测,以便尽快采取适当的纠正措施。当然,还可以寻找由这样的致病性物生物产生的毒素(并且作为其全部或部分致病性质)。
无论何种情况,并且不论经过微生物测定试验的样本的来源为何,评估该试验的有效性的重要因素在于:敏感性、特异性和时效性。
因此,本发明的一个特别有利的应用在于,检测和/或鉴定和/或枚举可能包含有机体的液体样本中的至少一个有机体。
本发明的主题的一个有利的应用旨在确定液体样本中可能含有的至少一种微生物的至少一种抗生素的敏感性和抗性。
现有技术已提供了多种用于鉴定或检测液体样本中的活体或分析物的技术方案。
因此,专利EP 0319294中描述了一种确定液体样本中是否存在分析物的方法和装置。该装置首先包括具有由吸收性材料携带的微孔膜的反应单元,其次还包括液体样本涂抹器,该液体样本涂抹器呈具有孔口的管的形式,其开口面积基本上小于膜的面积。该装置还具有试剂系统,该试剂系统包括能够与保持在微孔膜中的分析物起反应以产生视觉信号的成分。该涂抹器通过其孔口与膜发生接触,以使样本的分析物和/或试剂的成分集中于接触区域,以便产生具有孔口尺寸的视觉信号。虽然这样的装置能够使反应集中以提高可见度,但已发现,特别是关于控制液体样本向膜上的转移以及放置试剂系统以便得到与样本的分析物的反应的方面,这样的装置难以实施。
专利US 8343726描述了一种用于检测在液体中存在的物质的装置。该装置首先包括一容器,其包含用于接纳液体样本的多孔材料,其次还包括浸有培养基的多孔膜。该多孔膜放置在容器上方的叠置位置,以便与扩散到膜中的液体样本接触。这样的装置存在着不能通过液体样本控制多孔膜的吸水的缺点。遗憾的是,需要很好地控制液体样本在吸水载体内的移动才能避免干扰到反应介质在吸水载体中的分配(因为这将改变反应条件)。相反地,液体样本需要能够使所有吸水载体进行吸水,而使其实现其最佳反应能力。
相同的原则下,专利申请EP 1415788描述了一种用于生化分析的微流体装置,在该申请的图5的实施例中,其首先包括具有井(well)的微流体部件,其次还包括设有携带试剂基体的基板的盖。当盖被置于微流体部件上方时,基板被放置在由井形成的腔室中,以便被包含在微流体部件中的流体介质浸湿。
这一微流体装置的实施例没有给出关于控制通过液体介质基质的吸水(浸湿)的能力的指示。然而,在图4所示的实施例中,携带试剂矩阵的基质完全被放在孔内,而没有控制基质通过液体介质的浸湿。
在生物传感器的技术领域中,专利申请EP 1174716描述了一种具有带电极的基质且具有提供有试验试剂的液体样本接收井的生物传感器。该生物传感器设有在使用之前及使用之后使试验区得到保护的盖。在图9至图11所示的实施例中,盖设有用于吸收多余液体的基质。该装置(其旨在将液体介质倒入井中)不可能控制基质通过液体介质的浸湿。
在膜的技术领域中,专利申请WO 2005/012549描述了一种用于评估膜的阻隔性能的装置。该装置包括安装在供体板与接收体板之间的测试膜。该供体板被设置为包括多个具有液体样本井,其具有被安装为相互关联的电极。该装置(其旨在具有膜的特点)并不控制膜通过液体样本进行的吸水。
本发明的主题旨在通过提出一种新的技术来改善现有技术的缺陷,该技术能够以简单而可靠的方式控制使吸水载体利用液体样本吸水,但不会在吸水载体的反应介质中产生干扰,同时利用液体样本优化反应介质的反应条件。
发明内容
为了实现这一目的,本发明提供了一种利用液体样本使含有反应介质的吸水载体吸水的装置,该装置包括:
-容器,用于接纳至少一个液体样本,该容器包括在顶边缘处向上打开的至少一个容置井;以及
-盖,其具有一底面,该底面具有紧固到其上的至少一个吸水载体,以形成一吸收面,用以在盖和容器处于吸水位置时用于吸收液体样本,在该吸水位置中吸水载体经由吸水界面与液体样本接触。
根据本发明,借助至少一个井而使得该容器形成用于接纳液体样本的校准容积(calibrated volume,标定容积),至少所述井形成吸水校准开放部,该吸水校准开放部由至少所述井的顶边缘限定,用以使吸水载体进行吸水,该吸水校准开放部具有的面积小于吸水载体的吸收面的面积,以便控制由吸水载体通过毛细作用而对液体样本的吸收。
本发明的装置首先能够以简单而准确的方式量配(按量配给)需要与吸水载体的所有反应介质反应的液体样本的体积,其次还能够控制液体样本与反应介质发生接触所需的条件,以便优化活化和/或反应条件。
在一有利的实施例中,由至少一个井限定的用于利用液体样本使吸水载体进行吸水的校准开放部的面积为:用于利用液体样本使吸水载体进行吸水的校准部的面积与吸水载体的吸收面的面积的比介于40%至80%的范围内,优选地介50%至75%的范围内,以及有利地,介于55%至65%的范围内。
在一优选变型实施例中,容器包括用于多个液体样本的容置井,并且盖装设有多个吸水载体,这些吸水载体通过分隔通道(separation corridor,分隔廊)相互间隔,且在吸水位置中利用相应的液体样本使每个吸水载体进行吸水。
这个变型实施例能够使多个吸水载体进行吸水且同时避免吸水载体之间的交叉污染,并因此避免液体样本之间的交叉污染。这些分隔通道还能够使空气在吸水载体之间流动,以便在培养(incubation)期间促进某一细菌的生长。
在一个实施例中,利用液体样本使吸水载体进行吸水的校准开放部的面积由多个井限定,每个井形成一吸水校准开放部,该吸水校准开放部与其它井部相结合而构成与用于使吸水载体进行吸水的校准开放部的面积相对应的总面积。这个实施例通过依据吸水载体的面积大小来选择井的数量,能够分配液体样本与吸水载体的表面之间的接触前部(contact front)。而且,将液体样本分配在多个井中优化了液体样本的量配。
在另一有利实施例中,每个井包括用于液体样本的相应部分的多个容置腔,所述容置腔至少经由吸水校准开放部而相互连通,该吸水校准开放部呈具有多个叶(lobe)形的轮廓。将液体样本分配在多个腔中能够更好地按量配给用于分析的液体,这在液体有些许粘性(适用于例如乳状物或稀释的液体样本)时是很重要的。
在另一实施例中,用于液体样本的容器的校准开放部的面积由单个井限定。这个实施例能够提高读取步骤期间通过该装置的试验的可见性。
根据一有利实施例特征,容器包括与馈给微通道连通的至少一个井,该微通道的一部分位于吸水界面之外,井和微通道限定用于接纳液体样本的校准容置容积(calibrated reception volume)并且形成由井的顶边缘和微通道的顶边缘的至少一部分限定的吸水校准开放部。由此,这些微通道使液体样本能够更容易地馈给到井。在吸水之后,空的微通道用于允许空气在井中流动,从而提供了限制在井的底部上产生冷凝作用的优点,以便于通过这些井来进行读取。
有利地,每个井形成由位于微通道之外的轮廓限定的吸水校准开放部,从而在吸水位置中使外围带部(peripheral belt)保留在吸水载体的吸收面上,该带部位于所述轮廓与吸水载体的外围边缘之间。因此,液体样本被吸收,且不存在各井之间泄漏和污染的风险。
在一变型实施例中,盖设有多个吸水载体,利用相应的液体样本使每个吸水载体进行吸水,并且面向每个吸水载体的井的数量和容积对于所有的吸水载体而言是相同的。这样的变型实施例能够使多个吸水载体同时且以相同方式吸水,从而能够执行微生物的多重检测。
为了改善液体样本转移到吸水载体上的条件,至少一个井形成从其顶边缘向外倾斜的轮廓。
根据一有利实施例特征,容器包括一板件,井和微通道被设置在该板件中以便被相应的外围缘部(peripheral rim)围绕,这些外围缘部在吸水位置中作为用于吸水载体的邻接表面。
在一优选实施例中,容器包括一板件,上述井设置在该板件中,并且围绕着这些井的一外围边沿(peripheral margin)从该板件向上突出,使得该外围边沿在内部限定用于分配液体样本的至少一个分配碗。这样的容器有助于在一单步操作中实现分配液体样本的操作且不存在溢出的风险。
当液体样本为透明时,每个井有利地提供用于液体样本的染色物以辅助填充所述井。
在变型实施例中,容器具有至少一个分隔板以限定至少两个分配碗,每个分配碗对应一种液体样本,且一个碗中的液体样本与另一个碗中的不同。在这个实施例中,该装置能够提供不同的吸水条件,例如以不同方式稀释的液体样本,从而例如能够具有一参考吸水载体。
有利地,盖具有适于接合在容器的外围边沿上的外围槽。
在一变型实施例中,盖和容器配合以获得一密封接合部,以便阻止空气通入到该装置的内侧,以此在培养期间防止蒸发并防止吸水载体变干。
在另一变型方案中,盖和容器被设置为使得在接合位置中,空气可在盖与容器之间流动,以便获得吸水载体的可控通风并因而促进微生物生长。
根据本发明的特征,该装置包括用于使盖与容器之间相对对中的对中系统,以便将每个吸水载体定位在相对于接纳相应的液体样本的一个或多个井叠置的位置。这样的系统有助于包括使盖与容器相互靠近的吸水操作,使得每个吸水载体与液体样本接触,并且这对于所有吸水载体来说是同时发生的。
在一有利的变型实施例中,对中系统使盖能够被安装在容器上且不具有组装方向,使得井和吸水载体之间的相对定位是对称的。当然,盖和/或容器可以设有键控装置,由此可以仅沿一个方向将盖组装到容器上。
有利地,本发明的装置包括锁定系统,用以将盖和容器锁定在与吸水位置对应的一稳固位置。这一锁定系统还能够重新打开该装置,以便获得用于其它一些分析的材料。该锁定系统还可被设计成提供不容易重新打开的永久组装。在另一变型实施例中,锁定系统可以提供基于盖被安装在容器上的方向的不同而不同的锁定,即,沿一个组装方向可以容易地打开而沿另一组装方向难以打开。而且,盖可具有键控装置,以便确保仅具有一个锁定方向。
根据一优选实施例的特征,容器和/或盖由透明或半透明的材料制成。因此,这样的装置提供了这样优点:能够不需要操控而直接读取通过使液体样本与吸水载体接触而得到的反应。
本发明的吸水装置具有用于检测和/或鉴定和/或枚举可能包含微生物的液体样本中的至少一种微生物的特别有利的用途。
本发明的装置的一个优选的用途是确定至少一个微生物对至少一个抗生素的敏感性和抗性。
本发明还提供了一种通过使用根据本发明的装置而利用液体样本使至少一个吸水载体进行吸水的方法。为了检测和/或鉴定和/或枚举可能含有目标微生物的液体样本中的至少一种目标微生物,该方法包括以下步骤:
-将至少一个液体样本分配在容器的一个或多个井中;
-将盖和容器置于其吸水位置,在该吸水位置中每个吸水载体与液体样本接触;
-使盖和容器保持在吸水位置中,以便执行培养步骤;以及
-读取每个吸水载体,以便检测和/或鉴定和/或枚举所述至少一个目标微生物。
因此,本发明的方法使得利用液体样本使吸水载体进行吸水变得容易且简单。
术语“检测”被用于指代用裸眼或在光学设备的帮助下检测目标微生物是否存在或目标微生物是否生长。
当需要从其中检测目标微生物的反应介质包括显色基质或荧光基质时,使用荧光基质的光学设备、通过裸眼或通过显色基质的光学设备可以执行检测。
术语“枚举”是指计数和/或量化目标微生物的数量,例如,当目标微生物是细菌时计数和/或量化细菌的菌落数。
术语“培养”是指升高到适当的温度,该温度通常在20℃到50℃的范围内,优选地在30℃到45℃的范围内,以及维持该温度一段时间,此时间介于1至48小时的范围内,优选地介于4至24小时的范围内。
在一个实施方式中,该方法包括通过将液体样本倒入容器中以及通过搅动容器来分配每个液体样本,以确保每个液体样本完全装满容置井。
有利地,本发明的方法包括执行通过容器和/或盖读取每个吸水载体的步骤。应观察到的是,在培养步骤之后,该方法还能够将容器替换为透明或半透明的平底部,并通过该平底部执行读取每个吸水载体的操作。
附图说明
从参照附图给出的以下说明中能够获得多个其它特征,其中附图作为非限制性示例而示出了本发明的主题的实施例。
图1是根据本发明的利用液体样本使吸水载体吸水的吸水装置的平面图。
图2是图1所示的吸水装置的侧视图。
图3是如图2所示的吸水装置的局部剖视图。
图4是在图1中示出、且形成根据本发明的吸水装置的一部分的容器的实施例的立体图。
图5是图4所示的容器的细节的平面图。
图6是沿图5的线VI-VI截取的剖视图,详细示出了井的形状。
图7是容器的另一实施例的平面图,其包括多个倾斜的椭圆形状的容置井。
图8示出具有椭圆形状的容置井的容器的另一实施例,这些容置井被定向为平行于容器的一侧。
图9是具有方形形状的井的容器的另一实施例的平面图,每个井用于接纳液体样本。
图10是容器的另一实施例的平面图,该容器具有每四个组合在一起的方形形状的井,而每组井用于接纳液体样本。
图11是容置井的实施例的平面图,该容置井具有圆形截面的四个腔,且这些腔通过其底部相互连通。
图12是容置井的实施例的平面图,该容置井具有圆形截面的四个腔且,这些腔通过其顶边缘相互连通。
图13是容置井的另一实施例的平面图,该容置井具有方形截面的四个腔,且这些腔通过其顶边缘而在中心区中相互连通。
图14是容置井的另一实施例的平面图,该容置井具有方形截面的四个腔,且这些腔通过其顶边缘成对地相互连通。
图15是具有井的容器的另一实施例的立体图,每个井具有在中心设置有岛部的多个腔。
图15A是设置在图15所示的容器中的井的平面图。
图16是根据本发明的吸水装置的另一实施例的立体图,其中该容器具有容置井,每个容置井具有连接在一起的两个腔。
图17A是示出容器的立体图,其中井装满液体样本。
图17B是示出吸水操作的剖视图,吸水载体在吸水操作期间被设置成与液体样本接触。
图17C是示出通过液体样本对吸水载体进行吸水的操作结束时该装置的剖视图。
具体实施方式
从图1至图6可以更清楚地看出,本发明的主题涉及一种通过液体样本2对吸水载体3进行吸水的装置1,该吸水载体包括适合于液体样本2的反应介质。因此,本发明的装置1包括用于接纳至少一个液体样本2的接纳容器4和装有至少一个吸水载体3的盖5。在以下说明中将进行详细描述,该装置1用于占据多个位置,即,容器4尚未包含液体样本2的待吸水位置、以及用于对吸水载体3进行吸水的吸水位置。
在吸水位置中,液体样本2已被倒入容器4中之后,盖5被放置在容器4上方的叠置位置中,以便使每个吸水载体3与液体样本2发生接触。下文中,吸水载体3与液体样本2之间的接触区被称为“吸水界面”。在有利实施例中,容器4和盖5被保持在闭合位置,而使装置1占据培养位置,此后能够执行读取每个吸水载体的操作。
因此,包括容器4和盖5的本发明的装置1为能够容易地用于对吸水载体3进行吸水的套件形式。在附图所示的示例中,装置1呈矩形形状,具有小尺寸的两个相对的边以及较大尺寸的另两个相对的边。本发明的装置1实现了多种应用领域中的用途。
作为示例,本发明的装置1可用于使吸水载体能够被浸湿,该吸水载体在使用之前需要立即进行再吸水以使吸水载体的反应介质活化,从而使事先已浸有反应介质的吸水载体作好使用的准备。
本发明的装置1还能够使浸有反应介质的吸水载体进行吸水,以便能够在培养之后执行微生物测定试验。
当然,反应介质是根据应用、所使用的液体样本以及待检测或鉴定和/或枚举的分析物和/或微生物来选择的。
在本发明中,生物样本可以有多种来源,例如以下来源:食物;环境资源(水);兽用药;临床药物;化妆品;或药品。
临床药物来源的生物样本可以对应从生物体液(全血、血清、血浆、尿液、脑脊液等)得到的样本、粪便、从鼻子、喉咙、皮肤、伤口、器官、组织或分离细胞中得到的样本。这个列表当然是不详尽的。
一般的方式下,术语“样本”是指从一个或多个实体得到的用于分析目的的一部分或一定量(更特别地,一小部分或少量)。可选地,样本可以受到前期处理,例如,涉及混合、稀释或实际的研磨的步骤,特别是初始实体为固定状态的情况。
所得到的生物样本通常易于包含至少一个目标微生物,或者被怀疑包含至少一个目标微生物。在大部分情况下,微生物是需要为公共卫生用途检测的致病性微生物(如沙门氏菌或霍乱弧菌)。目标微生物可以良好且等同地包含抵抗抗生素(抗生素抗性)的细菌。
作为其性质及应用,本发明特别适用于稳健地分析潜在地对大的(甚至可能是极大的)致病力的生物样本,如霍乱腹泻的样本。
在本发明的本质意义上,术语“微生物”包含革兰氏阳性(Gram positive)或革兰氏阴性(Gram negative)细菌、酵母菌、霉菌以及更普遍的是裸眼可见且在实验室中可以被控制或产生繁殖的单细胞有机体。
在本发明的优选实施例中,微生物是革兰氏阴性或革兰氏阳性细菌。
关于革兰氏阳性细菌,可能会提及以下类型的细菌:肠球菌、链球菌属、乳酸菌、双歧杆菌、葡萄球菌、杆菌、李斯特菌、梭状芽孢杆菌、分枝杆菌、诺卡氏菌属、棒状杆菌、微球菌和异常球菌属。
关于革兰氏阴性细菌,可能会提及以下类型的细菌:沙门氏菌、大肠杆菌、假细胞菌和霍乱弧菌。
关于酵母,可能会提及以下类型的细菌:假丝酵母、隐球菌、酵母属和毛孢子菌数。
关于霉菌,可能会以下类型的细菌:曲霉属真菌、青霉菌和枝孢属。
选择和预处理生物性质、工业性质或环境性质的液体样本是本领域中总所周知的操作,因此不再更详细地描述。同样,浸渍吸水载体3的反应介质可以具有适合所需应用的性质。例如,反应介质可以是能够使所寻找的微生物类型具有特定颜色的发色体培养基,或者仅是发展所感兴趣的分析物而无需提供营养的介质,因为微生物生物学所需的营养是由用于分析的液体(关于乳状物)提供的。
术语“反应介质”被用于指代包括微生物生存和/或生长所需的所有元素的介质。反应介质可以单独地作为发展介质(developing medium,生长介质),或者作为培养及发展介质。在第一种情况下,微生物预先被培养,而在第二种情况下,反应介质还构成培养基。
术语“发展介质”被用于指代包含能够与微生物或所述微生物的粘合伴侣(bonding partner)结合且通过其转换性能(荧光、染色、放射性等)可能显示所述微生物是否存在的任何介质。目标微生物可以被发展为(裸眼)可见或通过可选地读取所有载体或一部分载体上的染色剂或荧光剂而可见。
术语“培养基”被用于指代包括微生物生存和生长所需的所有元素。实际上,本领域技术人员根据目标微生物使用总所周知且在本领域技术人员的能力范围内的准则来选择培养基。
本发明的反应介质可以包含可选添加剂,例如:蛋白胨、一个或多个生长因素、糖类、一个或多个选择剂、缓冲液、染色剂、一个或多个凝胶、水凝胶、黏性剂等。
这样的反应介质以任何本领域技术人员已知的方式浸渍吸水载体3。因此,吸水载体可以被放入水或溶剂的溶液中,然后被干燥。吸水载体还可以浸有脱水的反应介质,如申请人提交的国际专利申请PCT/FR2015/050035中所述。吸水载体3由适合于积集并保存其中的反应介质的任何材料,使其随后能够由液体样本吸水。为此,吸水载体3基于具有很强的保水效力的多种吸收剂化合物制得,如纤维胶、人造丝、棉花、当然或化学改性的变形纤维素,该变形纤维素例如羧甲基纤维素、吸收剂或如聚丙烯酸酯、丙烯酸盐/丙烯酰胺共聚物的盐等超强吸收能力的化学聚合物。吸水载体具有大量织物或非织物纤维(存在纤维或丝状体矩阵、或具有开气孔的泡沫)形式的适当的多孔性。
根据待吸水的吸水载体3的数量,本发明的装置的容器4适于接纳一个或多个液体样本2。在附图中所示的示例中,容器4适于接纳多个液体样本2,每个液体样本与相应的吸水载体3发生接触。在多个附图所示的示例中,盖5设有十二个吸水载体3,使得容器4用于接纳十二个液体样本2。当然,盖5可以具有一些其它数量的吸水载体3。同样,容器4可以接纳一些其它数量的液体样本。
每个液体样本2被包含在设置于容器4中的一个或多个井6中。因此,容器4依据选择为接纳每个液体样本的井6的数量以及依据所使用的液体样本的数量(通常等于吸水载体3的数量)来构造,即使有可能设想到不对容器4的一个或多个吸水载体3进行吸水。接纳液体样本2的井6因此被设置成为面向或对准待由所述液体样本吸水的吸水载体3。
在接纳液体样本的位置中,容器4被定位在水平面中,而使每个井6向上开放,以重新获得液体。每个井6在井的顶边缘8处具有进入孔口或进口开口7,至少一个腔61从此处向下延伸。按照定义,认为每个井6具有由顶边缘8形成的轮廓C的进入孔口7,该轮廓C闭合,即形成环。
在所示示例中,容器4包括板件9,井6被设置在该板件中而形成凹部。每个井6具有至少一个腔61,上述至少一个腔具有在闭合底部11与环绕井的顶边缘8的外围缘部12之间延伸有限高度的壁10。壁10在外围缘部12下方延伸或从外围缘部12回缩,外围缘部12作为肩台和在吸水位置的吸水载体3的支承面,这一点可以从下文描述中理解到。每个井6具有在其顶边缘8的水平处限定的校准容量或容积,其中井在被装满液体样本之前是空的。同样,每个井6在孔口7处具有准确校准的面积。
根据有利实施例特征,容器4被设置成限定用于将液体样本分配到井6中的至少一个分配碗13。为此,容器4具有从板件9向上延伸且环绕所有井6而限定的外围边沿14(碗13形成在其中)。从附图中可以看出,容器4因而在其外围处具有从多个外围缘部12向上延伸且环绕多个井的外围边沿14,这些缘部12在井6所位于的平面中延伸。这个外围边沿14使液体样本能够被约束,且在填充井的操作期间不具有溢出的风险。
液体样本2以简单的方式分配在井6中,因为足以将相对于分配在多个井中的液体样本的总体积倾倒在碗13的内侧中,使得液体被安置在多个井中。
可以可选地通过搅拌容器4的阶段来促进这种分配,以便保证每个液体样本全部装入所设置的容置井。如果样本是透明的,则每个井6可以额外设有用于液体样本的染色物,以便辅助填充所述井。
根据另一有利实施例特征,井6的至少一部分设有微通道16,以使得容易将液体样本馈给到井。
有利地,邻近外围边沿14的所有井6设有微通道16。因此,从图15中可以看出,邻近外围边沿14的每个井6包括设置在容器4的板件9中以在井6的顶边缘处开放的至少一个微通道16(所示示例中为两个)。每个微通道16具有顶边缘8,微通道与所述井6自身的顶边缘8相连续,使得包括微通道16的井的轮廓C闭合。应当认为,考虑到每个微通道在与连通井的端部相对的端部处闭合,井6和微通道16限定用于接纳液体样本2的校准容置容积。同样,每个微通道16在其顶边缘8处具有准确校准的面积。
有利地,每个微通道16从井的顶边缘8朝向外围边沿14延伸,并且优选地向延伸至外围边沿14,使得在液体沿着外围边沿流动时,通过微通道重新获得液体,以便被送入到井6中。
因此,微通道16至少部分位于吸水界面外侧,使得在吸水位置中微通道16从吸水载体3突出。通常,每个微通道16从吸水载体3突出至少1毫米(mm)。除了微通道使其易于将液体样本分配在井中的情况之外,微通道16在吸水操作之后还具有便于装置1内的空气交换的作用。
在图1、图7和图10中所示的实施例中,每个液体样本2被分配在一组四个井6中,使得可接纳十二个液体样本2的容器4具有四十八个井6。在图8、图9和图16分别示出的实施例中,形成液体样本接收组的井6的数量分别为六、一和二。在图8、图9和图16所示的这些实施例中,容器4可以接纳十二个液体样本2。
当然,接纳液体样本且随后对吸水载体3进行吸水的井6的数量可以与所示示例不同。而且,在属于所给定的组的井均没有与任何其它井连通的范围内,属于相同的液体样本接收组的井6彼此独立。然而,可以规定液体样本容置井6的腔61通过连续导管15相互连通,而每个井6在其顶边缘8处保持闭合轮廓。如图11所示,连接导管15将四个井的腔61的底部11成对地连接在一起,这四个井在一起接纳一个液体样本。
当然,井6可以接纳适应于对吸水载体3进行吸水的不同的可能形状。因此,从附图可以看出,井6可以具有例如可以是半球形、椭圆形、圆锥形或棱柱状的形状。
按照同样的原则,每个井6的进口开口7可以具有多种形状,以此保证吸水载体3均匀吸水。因此,每个井6的进口开口7可以具有圆形(图1)、椭圆形(图7、图8)或方形(图9、图10)的形状。
作为示例,图12至图16示出井6的进口开口7的多个其它实施例。在这些示例中,每个井6的进口开口7具有闭合轮廓C,闭合轮廓C具有设置成圆弧或其它方式的多个轮廓的多个叶形。在图12和图13所示的示例中,每个井6具有设置在方形的四个角处的四个腔61,彼此间隔很小一段距离。通过井6具有由形成闭合环的连续顶边缘8限定的单个进入孔口7的方式,这些四个腔61通过方形的中心部连接在一起。井6的孔口7具有三叶草形状。
在图12所示的实施例中,四个腔61的每个腔具有3/4个圆形式的截面,且这些腔通过引导孔口7的中心区63中的连通通道62彼此连通。例如,每个连通通道62的宽度大于限定腔的圆的半径且小于所述圆的直径。
在图13所示的示例中,四个腔61的每个腔具有方形截面且这些腔通过设置在所述腔的相邻角中的连通通道62彼此连通,以便打开至孔口7的中心区63中,其中该中心区具有与其中一个腔61的方形截面限定的面积同阶的面积。
在图14所示的实施例中,四个腔61同样是方形截面且设置在方形的四个角处,但是腔61通过连通通道62成对地彼此连接。因此,孔口7具有在孔口7的中心形成岛部的闭合外部轮廓Ce和闭合内部路模块Ci。当然,井6的开放吸水部位于外部轮廓Ce与内部轮廓Ci之间。
图15和图15A示出基本上类同于图14所示实施例的另一实施例,但腔61是圆形截面且它们通过曲形轮廓连接在一起不同。在这个示例中,每个井6的孔口7具有在孔口7的中心形成岛部的闭合外部轮廓Ce和闭合内部路模块Ci。在孔口7的中心形成岛部的闭合外部轮廓Ce和闭合内部路模块Ci。在参考图12至图15所述的实施例中,每个井6具有相互连接的四个腔61。当然,形成井的腔的数量可以不是四。
图16示出基本上类同于图12所示的实施例的另一实施例,但四个液体样本容置腔61被设置为成对的。每个井6包括连接在一起的两个腔61。两个腔61一对通过连通通道62彼此连通。因此,井6的孔口7具有大体的长方形,因为在每个端部具有3/4个圆形式的截面,而在其中心部具有直线型截面的连通通道62,其宽度小于3/4个圆形状的截面的直径。
有利地,这个连通通道62相对于3/4个圆形状的截面居中。
应看到的是,在变型实施例中,所有井6设有微通道16。更确切地说,靠近外围边沿14的每个井的腔61设有朝向外围边沿14延伸的微通道16。
有利地,井6的孔口7被设置成长方形平行于具有较小尺寸的容器的一侧定向。因此,在将液体样本分配到井中的操作期间相对于容器的较长侧振动容器能够使液体很好地被分配在井中。
根据有利实施例特征,至少一个井6具有从其边缘8向外变窄的轮廓。因此,从图3和图6更明确地看出,井6的壁10以钝角从缘部12延伸,使得井具有朝向其顶边缘8成喇叭形的形状。朝向底部边窄的井6的轮廓可以被局限于壁10的一部分高度,或者可以在顶边缘与壁的底部之间连续。在另一实施例变型中,可以将壁10设置成相对于外围缘部12基本上以直角延伸,可选地在其顶边缘8的水平处设有喇叭形形状。
如上所述,每个液体样本2由一个或多个容置井6接纳。在图1、图7、图10和图11所示的示例中,每个液体样本2由四个井6接纳,而在图16所示的示例中,每个液体样本2由两个井6接纳。换言之,在这些示例中,液体样本2的总体积或者被分配在四个指定井6中,或者在两个井6中,且实际上还在馈给它们的微通道16中。当盖5和容器4被放置在吸水位置中时,每个液体样本2由吸水载体3吸收。
为此,盖5具有底面51,至少一个吸水载体3被紧固于底面51上以具有用于液体样本2的吸收面31。这个吸收面31放置在容器4上方,以便通过吸水界面与液体样本2发生接触。使用任何已知紧固系统将吸水载体3紧固在盖5上。例如,可使用热密封方法或使用置于盖5与吸收面31相反的吸水载体3之间的粘合剂的膜或胶水紧固每个吸水载体3。为了便于组装,盖的底面51可以具有部分接纳吸水载体3的壳体。
按照本发明的特征,每个吸水载体3具有一吸收面31,其面积大于能够通过液体样本2对吸水载体进行吸水的容器4的校准开放部的面积。由容器4所具有的此吸水校准部相对于每个样本的液体表面,该液体表面在吸水位置与吸水载体发生接触且与井6的顶边缘8并且可选地与微通道16对齐。应看到的是,这个吸水校准部并非必须对应于井6的和微通道16的校准开放部,而该整个部分并非必须与吸水载体3的吸收面31接触,如下文的说明所述。
当液体样本2被接纳于单个井6中时,用于液体样本的容器的校准开放部的吸水面积相对于井6的校准开放部的面积,这个开放部由井6的孔口7限定。应看到的是,井6可以具有一个或多个腔61。
当液体样本2共享于多个井6中时,用于接纳液体样本的校准开放部的吸水面积相当于多个井6的校准开放部的总和,这些开放部由多个井6的孔口7限定。应看到的是,这些井6每个均可以具有通过一个或多个腔61,所述腔通过其底部独立或彼此连接。
当井6设有至少一个馈给微通道16时,井6和微通道16一起限定用于液体样本的校准容置容积,其对应井和微通道的容积的总和。井6和微通道16具有由井6的顶边缘8和微通道16的至少一部分的顶边缘8(待与载体的吸收面31接触)限定的吸水校准开放部。当然,位于吸水载体的吸收面31外侧的一部分微通道16并不形成此吸水校准开放部的一部分。
在一实施例特征中,能够通过液体样本对吸水载体3进行吸水的校准开放部的面积使得通过液体样本对吸水载体进行吸水的这个校准开放部在吸水载体3的吸收面31的面积上的比例处于40%至80%的范围内,优选地50%至75%的范围内,以及更有利地55%至65%的范围内。换言之,吸水载体3的吸收面31的表面被设计成与基本上2/3面积的液体样本发生接触。例如,每个吸水载体3的吸收面31具有400平方毫米(mm2)的面积,而由分别与图12、图13、图14和图15所示实施例的轮廓对应的轮廓的井6限定的吸水开放部的面积分别是278mm2、260mm2、266mm2和270mm2。同样,由图16所示实施例的两个井6限定的吸水开放部的面积是222mm2,其中吸收面31具有400mm2的面积。因此,吸收面31上由井所具有的吸水面积的比例在图12、图13、图14、图15和图16所示示例中分别为70%、65%、67%、68%和55%。
应看到的是,由孔口7限定的井6的开放部的形状和尺寸以及孔口7相对于吸水载体3的定位被选择为以避免液体移动前线(liquid migration front)而出现在吸水载体3内侧的方式优化对吸水载体3的吸水。因此,孔口7在图1、图7和图10分别示出的示例中分别具有圆形、长方形或方形的形状。而且,在图8所示的示例中,长方形形状的孔口7被设置成平行于吸水载体的一个边缘定向,而在图7所示的示例中,长方形形状的孔口7被设置成相对于吸水载体的边缘倾斜定向。
在图12至图16所示的实施例中,井6的孔口7被设置有限制液体在吸水载体内的横向移动的形状。为此,每个井6具有由轮廓C、Ce、Ci限定的吸水校准开放部,轮廓的形状被选择为处于所述部的外侧与所述吸收面31的轮廓之间的点均没有位于与最靠近所述面或所述部的轮廓相距超过3mm的直线距离处。换言之,孔口7的形状被选择为使吸水界面尽可能均匀地分散在吸水载体的吸收面31上。因此,液体行进以对所有吸水载体进行吸水的距离被局限于最大值,以避免产生液体移动前线。而且,液体从井的轮廓C开始行进的距离在所有点处基本上相同。应理解的是,每个吸水载体具有能够使其吸收面31完全覆盖容器的吸水校准开放部的表面面积。因此,例如,当液体样本2共享于四个井6中时,在吸水位置的每个吸水载体3具有其吸收面31,该吸收面31完全覆盖四个井的四个孔口7。
有利地,每个吸水载体3完全覆盖用于接纳液体样本2的校准开放部,同时使外围的带部17保留在所述部与吸水载体的外围边缘32之间的吸收面31上,该带部(在吸水位置且远离微通道16)并不与井的开放部接触。因此,每个吸水载体3在吸水位置中被定位成使得井6的孔口7被定位在此外围带部17外侧,即从外围边缘32回缩,使得井的及微通道的液体被吸水载体完全吸收而不存在任何从吸水载体的边缘泄漏的风险。
从上述说明可以看出,由井(可能还有微通道)限定的吸水校准开放部的轮廓或形状被选择为以避免在吸水载体中形成液体移动前现。而且,井6的形状和/或尺寸被选择为能够使由这样的井接纳的液体样本能够被准确校准。有利地,每个井6具有用于接纳一部分液体样本的多个腔61,这些容置腔至少通过具有多个叶形的轮廓C的吸水校准开放部彼此连通。因此,井6具有由轮廓限定的吸水校准开放部,该轮廓的形状被选择为使得所述吸水校准开放部内的点与所述部的最靠近的轮廓相距均超过4mm的直线距离。这样的特征避免需要太大尺寸的容置腔(因为这将使样本不能被准确测量)。
通过互补的方式,每个井6具有由轮廓C限定的吸水校准开放部,轮廓C的形状被选择为该部的最小尺寸大于1.5mm。换言之,这样的特征避免使容置腔61具有太小的尺寸(因为这将导致难以使用样本填充井)。
根据有利特征,应该认为,容置井6(可选地包括馈给微通道16)限定一校准容积,使得在吸水位置,每个液体样本2被吸水载体3完全吸收。因此,根据接纳液体样本的井6的数量,井的容积尺寸被设定为保证液体样本被吸水载体3完全吸收。为此,每个井6具有通常限制在1mm至5mm范围内、更优选地在2mm至3mm范围内的深度。而且,根据一有利特征,容置井6(可选地包括微通道16)的校准容积被确定为通过液体样本2完全地使每个吸水载体3进行吸水。
根据本发明的有利实施例特征,吸水载体3通过分隔通道18彼此间隔,以使吸水载体彼此分离并进而分离液体样本。这样的设置防止了吸水载体之间的交叉污染。通常,吸水载体3彼此分离大约3mm的距离。而且,设置在吸水载体3之间设置通道18,使空气能够在吸水载体之间循环,并特别是在培养阶段提供良好的通风,如下文的说明所述。
在优选实施例中,当盖5具有多个吸水载体3时,每个吸水载体通过液体样本而被浸湿(吸水),面向每个吸水载体的井6的数量和容积对于所有吸水载体均是相同的。这样的设置能够执行与反应介质的反应相关的比较。当然,还可以设想一些其它设置,其中对于多个吸水载体而言面向每个吸水载体的井6的数量和容积是不同的。
当然,容器4可包括至少一个分离隔板,以便限定用于将不同的液体样本分配到不同碗中的至少两个碗13。这个分离隔板被设置为将外围边沿14的两个区(位于容器的两个相对或相邻侧)连接在一起。碗13可接纳不同成分和/或稀释的液体样本。同样,碗13可被设计为接纳具有供吸水载体进行吸水的功用的液体样本,以便保持装置1内的所确定的湿度。
在上述变型实施例中,在板件9和外围边沿14不包括孔的情况下,每个碗13被设置成能限制液体样本。在另一变型实施例中,应看到的是,碗13可包括能够排除过量倾倒的液体样本的至少一个出口孔口。在这样的情况下,倾倒大于井的总容积的体积的液体样本,并且通过定位在吸水载体内的贯穿井清除过量的样本。这一实施例变型实现了用以检测霍乱的示例的有利应用。
根据本发明的装置1的一有利实施例特征,盖5具有适于接合在吸水位置的容器的外围边沿17上的外围槽19。
有利地,本发明的装置1包括用于在盖5与容器4之间相对对中的系统23,以便将每个吸水载体3定位在一个或多个液体样本叠置的位置中。在一优选实施例特征中,该对中系统由接合在容器的外围边沿14上的外围槽19提供。因此,将盖5和容器4组装在一起能够实现吸水载体3的准确定位,使得每个吸水载体完全覆盖包含液体样本的井的孔口。
在一变型实施例中,外围槽19和外围边沿14被调节为实现密封接合。
在另一实施例变型中,外围槽19和外围边沿14被设置成使空气能够在盖与容器之间流动,以便得到吸水载体的可控通风。例如,从图16中可以看出,外围槽19局部设有承载容器的外围边沿14的肩台191,使得空气能够在肩台之间流动。
应理解的是,通过外围槽19与外围边沿14之间的配合使盖5接合在容器4上,在适于使每个吸水载体3与液体样本发生接触的相对接近期间提供引导。为此,每个吸水载体3被设计为与井的外围缘部12发生接触或者邻接井的外围缘部12,使得每个吸水载体的吸收面31被定位在井的顶边缘8处。在此“吸水”位置中,通过面向液体样本放置的吸水载体产生的毛细管作用来吸收液体样本。
应看到的是,本发明的装置1可包括锁定系统24,该锁定系统24用于将盖5与容器4一起锁定在与吸水位置对应的稳定位置,以便使盖和容器保持在闭合位置。这样的锁定系统24可以例如通过形成在容器的外围边沿14上的凸耳(其用于在闭合位置时将盖5挡在容器4上)来提供。
根据有利的实施例特征,容器4和/或盖5由透明或半透明的材料制成,以此使执行以直接读取的吸水或活化。例如,通过传统热成型或注塑成型技术,容器4和盖5可以由聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)制成,或者在另一示例中,使用可再生且可降解的植物成因的聚氯乙烯(PVC)或实际上聚丙烯(PP)或聚乳酸塑料(polylacticbioplastic,PLA)。此外,容器4和/或盖5可包含用于提供吸水载体3的可见质量的光学系统。而且,容器4和盖5具有互补的形状,特别是具有所示示例中的矩形形状,但应清楚的是,容器和盖可具有某些其它形状。最终,容器4和盖5可以绕铰链铰接在一起,或者它们能以两个独立部件的形式存在。
本发明的装置1使得通过液体样本的吸水载体的方法能够以简单的方式被执行。
第一步骤包括将每个液体样本完全分配到容器4的一个或多个井6中。在图17A所示的示例中,每个样本用于分配到包括四个腔的井6中,这四个腔以图13所示的方式相互连接。当然,当盖5被定位在容器上时,移除盖5以使样本体积能够被倒入液体分配碗13的内侧。在所考虑的示例中,每个液体样本2具有500微升(μL)的体积,其被分配在井6的四个相互连接的腔中。盖5具有十二个吸水载体3,使得容器4接纳十二个液体样本体积,即,6毫升(mL)的总体积。6mL的液体体积被倒入容器3的碗13。这种分配由井6所具有的容积限定。
每个液体样本的分配通过少量倾斜和/或搅动容器4来执行,以便能够将液体分配到多个井中。这种搅动被手动地或通过使用自动机构与手动交替地执行。这样的搅动在所有井6被液体样本填充满时停止,即,当液体的水平达到井的顶边缘8时停止。
在这一步骤结束时,应看到的是,在井之间没有残余液体,进而提供每个井之间的物理分离并避免任何吸水载体之间的交叉污染的风险。由于增强了井中保持液体的形状和特殊几何特征,以及由于构成容器4的材料的吸水性能,使液体被保持在井中。这种分配液体样本的操作是简单、易于适当实施、准确且没有溢出风险的操作,其中液体由于外围边沿14而保持为局限于碗16的内侧。
以下的步骤包括将盖5和容器4定位在吸水位置,其中每个吸水载体3与液体井接触。为此,盖5和容器4朝向彼此移动,使得吸水载体3进入叠置的位置,然后与井7的外围缘部12接触。在这个邻接位置,如图17B所示,每个吸水载体3通过其吸收面31接触填充于井的液体样本,从而使每个液体样本能够通过毛细管作用而被吸收到面向液体样本放置的吸水载体中。包含在井6中的每个液体样本2通过毛细管作用瞬时且同时地被转移到所有吸水载体3(图17C)。液体样本向吸水载体3中的转移被执行而不会出现任何液体移动前现。浸湿吸水载体3的反应介质的均匀性因此并未被改变。由于吸水载体3通常是分隔开的,因此任何交叉污染的风险非常有限。
盖5和容器4被保持在这一吸水位置中,以使培养步骤能够被执行。随着液体样本2浸入到吸水载体3中,可利用该装置在任何位置执行培养并且没有液体样本流失的风险。应看到的是,设置在吸水载体3之间的通道18使空气能够穿过,以此促进培养期间的生长。同样,空的井6留有可用于促进培养期间生长的空气的容积。一旦馈给微通道16被清空,则它们使空气能够流入已清除样本的腔中。容器4和盖5被调节为根据所需应用来控制装置内的空气流动。因此,可设置为或者提供密封以限制培养期间的蒸发并限制吸水载体的干燥,或是提供吸水载体的可控的通风,以此促进例如培养期间的微生物生长。
在培养步骤结束时,可执行读取步骤以读取每个吸水载体3,以此检测和/或鉴定和/或枚举可能包含目标微生物的液体样本中的至少一个目标微生物。有利地,通过容器和/或盖用裸眼或者使用成像系统或使用读取部件,执行这一读取每个吸水载体3的步骤。在另一变型实施例中,应看到的是,培养步骤之后,可以用透明或半透明平底部来替换容器4,通过平底部来执行读取每个吸水载体的操作。
Claims (29)
1.一种利用液体样本(2)使含有反应介质的吸水载体(3)进行吸水的装置,所述反应介质包括微生物生存和/或生长所需的所有元素,所述装置包括:
-容器(4),用于接纳至少一个液体样本(2),所述容器包括至少一个容置井(6),所述容置井在顶边缘(8)处向上开放;以及
-盖(5),其具有底面(51),所述底面具有紧固到其上的至少一个吸水载体(3)以形成一吸收面(31),用以当所述盖和所述容器处于吸水位置时吸收所述液体样本,在所述吸水位置中所述吸水载体(3)经由吸水界面而与所述液体样本接触;
所述装置的特征在于,借助至少一个井(6)而使所述容器(4)形成用于接纳液体样本的校准容积,所述至少一个井形成由所述至少一个井的顶边缘(8)限定的吸水校准开放部,用以使吸水载体(3)进行吸水,所述吸水校准开放部具有的面积小于所述吸水载体(3)的吸收面的面积,以便控制由所述吸水载体通过毛细作用而对液体样本的吸收。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,由所述至少一个井限定的、用于利用液体样本(2)使所述吸水载体进行吸水的所述校准开放部的面积为:该面积与所述吸水载体(3)的吸收面(31)的面积之比介于40%至80%的范围内。
3.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述校准开放部的面积与所述吸水载体(3)的吸收面(31)的面积之比介于55%至65%的范围内。
4.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述容器(4)包括用于多个所述液体样本的容置井(6),以及所述盖(5)装设有多个所述吸水载体(3),所述吸水载体通过分隔通道相互间隔,并且在所述吸水位置中利用相应的液体样本(2)使每个所述吸水载体进行吸水。
5.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,利用所述液体样本使所述吸水载体(3)进行吸水的所述校准开放部的面积由多个井(6)限定,每个井形成一吸水校准开放部,该吸水校准开放部与其它井部相结合,形成与用于使所述吸水载体进行吸水的所述校准开放部的面积相对应的总面积。
6.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,利用所述液体样本(2)使所述吸水载体进行吸水的所述校准开放部的面积由单个井(6)限定。
7.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,每个井(6)包括用于所述液体样本的相应部分的多个容置腔(61),所述容置腔至少经由所述吸水校准开放部而彼此连通,所述吸水校准开放部呈具有多个叶形的轮廓。
8.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述容器(4)包括与馈给微通道(16)连通的至少一个井(6),所述微通道的一部分处于所述吸水界面之外,所述井(6)和所述微通道(16)限定用于接纳液体样本的校准容置容积,并形成由所述井(6)的顶边缘(8)和所述微通道(16)的顶边缘的至少一部分限定的吸水校准开放部。
9.根据权利要求8所述的装置,其特征在于,每个井(6)形成由位于所述微通道(16)之外的轮廓限定的吸水校准开放部,从而在所述吸水位置中使外围带部保留在所述吸水载体的吸收面上,所述带部处于所述轮廓与所述吸水载体的外围边缘之间。
10.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,每个所述井(6)形成由一轮廓限定的吸水校准开放部,所述轮廓的形状被选择为使得在所述吸水校准开放部的内侧的点与所述吸水校准开放部的最靠近的轮廓相距的直线距离均不超过4mm。
11.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,每个井(6)形成由一轮廓限定的吸水校准开放部,所述轮廓的形状被选择为使得所述吸水校准开放部的最小尺寸大于1.5mm。
12.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,每个所述井(6)具有由一轮廓限定的吸水校准开放部,所述轮廓的形状选择被选择为使得处于所述吸水校准开放部的外侧与所述吸水载体的吸收面(31)的轮廓之间的点与最靠近所述吸收面或所述吸水校准开放部的轮廓相距的直线距离均不超过3mm。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,所述盖(5)设有多个吸水载体(3),利用相应的液体样本使每个所述吸水载体进行吸水,并且对于全部所述吸水载体而言,面向每个所述吸水载体的井(6)的数量和容积是相同的。
14.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,包括所述液体样本接收微通道的所述井(6)限定一合适的校准容积,使得在所述盖(4)和所述容器(5)的吸水位置中,所述液体样本被所述吸水载体(3)完全吸收。
15.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,包括液体样本接收微通道(16)的所述井(6)限定一合适的校准容积,使得在所述盖(4)和所述容器(5)的吸水位置中,所述吸水载体(3)完全被吸水。
16.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,至少一个井(6)形成从其顶边缘(8)向外倾斜的轮廓。
17.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,所述容器(4)包括一板件(9),所述井和所述微通道被设置在所述板件中以便被相应的外围缘部(12)围绕,所述外围缘部在所述吸水位置中作为用于所述吸水载体的邻接表面。
18.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,所述容器(4)包括一板件(9),并且围绕所述井的外围边沿(14)从所述板件向上突出,使得所述外围边沿在内部限定用于分配所述液体样本的至少一个分配碗(13)。
19.根据权利要求18所述的装置,其特征在于,所述盖(5)具有外围槽(19),所述外围槽适于接合在所述容器(4)的所述外围边沿(14)上,以便提供密封的接合部或者包括可控通风的接合部。
20.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,所述装置包括用于使所述盖(5)与所述容器(4)之间相对对中的对中系统(23),以便将每个吸水载体(3)定位在相对于接纳相应的液体样本(2)的一个或多个井(6)叠置的位置。
21.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,所述装置包括锁定系统(24),用以将所述盖(5)和所述容器(4)锁定在与所述吸水位置对应的稳固位置。
22.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,所述容器(4)和/或所述盖(5)由透明或半透明的材料制成。
23.根据权利要求1至12中任一项所述的装置,其特征在于,每个所述井(6)提供用于所述液体样本的染色物以便辅助填充所述井。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的装置(1)的使用,以便检测和/或鉴定和/或枚举可能含有微生物的液体样本(2)中的至少一个微生物。
25.根据权利要求1至23中任一项所述的装置(1)的使用,以便确定至少一个微生物对至少一种抗生素的敏感性和抗性。
26.一种通过使用根据权利要求1至23任一项所述的装置(1)而利用液体样本(2)使至少一个吸水载体进行吸水的方法,以便检测和/或鉴定和/或枚举可能含有目标微生物的液体样本中的至少一种目标微生物,所述方法的特征在于包括以下步骤:
-将每个液体样本(2)完整分配在一个或多个井(6)中;
-将所述盖(5)和所述容器(4)置于其吸水位置,在所述吸水位置中每个吸水载体(3)与所述液体样本(2)接触;
-使所述盖(5)和所述容器(4)保持在所述吸水位置中,以便执行培养步骤;以及
-读取每个所述吸水载体(3),以便检测和/或鉴定和/或枚举所述至少一种目标微生物。
27.根据权利要求26所述的方法,其特征在于,所述方法包括通过将所述液体样本倒入所述容器(4)中以及通过搅动所述容器(4)来分配每个所述液体样本(2),以确保每个液体样本(2)完全装满所述容置井(6)。
28.根据权利要求26所述的方法,其特征在于,所述方法包括执行通过所述容器(4)和/或所述盖(5)读取每个吸水载体(3)的步骤。
29.根据权利要求26至28任一项所述的方法,其特征在于,在培养步骤之后,所述方法包括将所述容器(4)替换为透明或半透明的平底部,通过所述平底部执行读取每个吸水载体(3)的操作。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR1555145 | 2015-06-05 | ||
FR1555145A FR3037079B1 (fr) | 2015-06-05 | 2015-06-05 | Procede et dispositif pour hydrater par un echantillon liquide un support hydratant |
PCT/FR2016/051346 WO2016193647A1 (fr) | 2015-06-05 | 2016-06-06 | Procede et dispositif pour hydrater par un echantillon liquide un support hydratant |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107683413A CN107683413A (zh) | 2018-02-09 |
CN107683413B true CN107683413B (zh) | 2020-11-06 |
Family
ID=54015011
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201680032894.XA Active CN107683413B (zh) | 2015-06-05 | 2016-06-06 | 利用液体样本使吸水介质吸水的方法和装置 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11060053B2 (zh) |
EP (1) | EP3302803B1 (zh) |
CN (1) | CN107683413B (zh) |
FR (1) | FR3037079B1 (zh) |
WO (1) | WO2016193647A1 (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR3094722B1 (fr) | 2019-04-08 | 2024-01-19 | Biomerieux Sa | Dispositif de culture microbiologique |
EP3964290A1 (en) * | 2020-09-04 | 2022-03-09 | Scienion GmbH | Apparatus and method for preparing liquid samples for a sample analysis |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1174716A2 (en) * | 2000-07-20 | 2002-01-23 | Roche Diagnostics GmbH | Recloseable biosensor |
EP1415788A1 (en) * | 2002-10-31 | 2004-05-06 | Agilent Technologies, Inc. | Integrated microfluidic array device |
WO2005012549A2 (en) * | 2003-08-01 | 2005-02-10 | Fqubed, Inc. | Apparatus and methods for evaluating the barrier properties of a membrane |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4818677A (en) | 1987-12-03 | 1989-04-04 | Monoclonal Antibodies, Inc. | Membrane assay using focused sample application |
AU2005309443B2 (en) | 2004-11-24 | 2011-03-03 | Techlab, Inc. | Device and method for detection of analytes |
-
2015
- 2015-06-05 FR FR1555145A patent/FR3037079B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2016
- 2016-06-06 WO PCT/FR2016/051346 patent/WO2016193647A1/fr active Application Filing
- 2016-06-06 US US15/579,648 patent/US11060053B2/en active Active
- 2016-06-06 CN CN201680032894.XA patent/CN107683413B/zh active Active
- 2016-06-06 EP EP16739203.4A patent/EP3302803B1/fr active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1174716A2 (en) * | 2000-07-20 | 2002-01-23 | Roche Diagnostics GmbH | Recloseable biosensor |
EP1415788A1 (en) * | 2002-10-31 | 2004-05-06 | Agilent Technologies, Inc. | Integrated microfluidic array device |
WO2005012549A2 (en) * | 2003-08-01 | 2005-02-10 | Fqubed, Inc. | Apparatus and methods for evaluating the barrier properties of a membrane |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FR3037079B1 (fr) | 2020-10-23 |
EP3302803B1 (fr) | 2019-12-11 |
US11060053B2 (en) | 2021-07-13 |
FR3037079A1 (fr) | 2016-12-09 |
CN107683413A (zh) | 2018-02-09 |
US20190119617A1 (en) | 2019-04-25 |
EP3302803A1 (fr) | 2018-04-11 |
WO2016193647A1 (fr) | 2016-12-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI93147C (fi) | Kertakäyttölaite, joka on tarkoitettu käytettäväksi kemiallisissa, immunokemiallisissa ja mikro-organismien analyyseissä | |
US5182082A (en) | Multiple aliquot device for distributing a liquid solution into a well | |
AU756412B2 (en) | Device and methods for determination of analyte in a solution | |
US7781185B2 (en) | Apparatus and method for testing liquid samples | |
US4591556A (en) | Apparatus and associated methods for use in microbiological, serological, immunological, clinical-chemical and similar laboratory work | |
JP4350897B2 (ja) | 試料担体 | |
US4324859A (en) | Apparatus and associated methods for use in microbiological, serological, immunological, clinical-chemical and similar laboratory work | |
US7582472B2 (en) | Apparatus and method for liquid sample testing | |
JP2004004074A (ja) | 試料の一部を自動的に貯蔵するプレート | |
CN107683413B (zh) | 利用液体样本使吸水介质吸水的方法和装置 | |
US20190054460A1 (en) | Disposable bioassay cartridge and method of performing multiple assay steps and fluid transfer within the cartridge | |
US6627432B2 (en) | Liquid flow and control in a biological test array | |
JP2004520593A (ja) | 微生物検査アレイ内の検査の統一性を維持する方法 | |
US20210222105A1 (en) | A Microfluidic Cartridge, A Kit And An Assay | |
KR101614333B1 (ko) | 미세유체 혼합장치 | |
WO2023086372A1 (en) | Wellplate apparatus and method for filling same | |
MXPA00005934A (en) | Device and methods for determination of analyte in a solution | |
ZA200601608B (en) | Apparatus and method for liquid sample partitioning | |
MXPA00004131A (en) | Device and methods for determination of analyte in a solution |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |