BR112012031294B1 - Metodo para transferencia quantitativa, dispositivo de amostragem previamente dosado e kit para realizaqao de testes - Google Patents
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Abstract
Método para transferência quantitativa de análitos. Um método para transferir uma quantidade de análitos, tais como microorganismos, antibióticos / antígenos, substâncias que atuam de maneira antimicrobiana, nucleotídeos, antibióticos, hormônios, sequências de ADN, enzimas, material orgânico, biológico ou material de origem biológico, suplementos enriquecedores de terrenos ou suplementos seletivos de cultivo de terras, compreendendo pelo menos estágios de: predisposição de uma mistura substancialmente homogênea de uma quantidade inicial predeterminada de pelo menos um análito de um líquido; introdução de um valor de concentração ou quantidade conhecida do análito da mistura; introdução, na mistura, de pelo menos uma porção de coleta (3)de um dispositivo de amostragem (1) apresentando um corpo de suporte (2), e uma pluralidade de fibras (6) por meio de formação de flocos, a fim de definir uma porção de coleta flocada (3) ou um tampão flocado, tal como coletar uma parte da mistura na porção de coleta (3); e estração da porção de coleta (3) do dispositivo de amostragem (1) da mistura; retenção na porção de amostragem (3) de uma quantidade conhecida predeterminada da mistura a ser transferida.
Description
[001] A presente invenção se relaciona a um método para transferência quantitativa de análitos. O método é aplicável, por exemplo, em setores clínicos, de diagnóstico e analíticos em geral, a fim de possibilitar uma amostragem e transferência de quantidades conhecidas predeterminadas de análitos em direção a um lugar de uso dos mesmos, para análise ou testes de várias naturezas.
[002] O método é especificamente aplicável para a coleta e a transferência de várias substâncias, tais como, por exemplo: microorganismos, antibióticos / antígenos, substâncias que atuam de maneira antimicrobiana, nucleotídeos, antibióticos, hormônios, sequências de ADN, enzimas, substâncias de enriquecimento ou suplementos seletivos de terreno cultivável, e material orgânico em geral, material biológico ou material de origem biológica, ou os similares.
[003] A técnica anterior compreende muitas numerosas aplicações, nas quais quantidades conhecidas de análitos têm que ser usadas, tais como substâncias orgânicas ou biológicas, para várias necessidades orgânicas ou biológicas. Por exemplo, programas de companhias para verificação da qualidade microbiológica incluem o uso de culturas de microorganismos padrão para verificação de que os requisitos indicados pelos padrões de referência foram atendidos. Para essa finalidade, controles microbiológicos são realizados para verificação e validação dos métodos e dos procedimentos de laboratório, os quais podem, por exemplo, compreender o controle da eficácia dos componentes seletivos e nutricionais de solo usado para cultura microbiana, e também para verificação da eficácia de operação de inativação de microorganismos, ou outros para outras finalidades.
[004] Um outro exemplo conhecido é dado por kits diagnósticos, que são dotados com controles positivos e negativos de uma substância a ser identificada e que permitem o controle e a validação do próprio kit, assim como do procedimento de teste e da preparação da amostra a ser analisada. Por exemplo, em testes de busca e de identificação de uma bactéria, almejado em diagnose de infecções presentes ou prévias, tal como no caso específico de Staphylococcus aureus em um teste para aglutinação, um controle positivo realizado usando uma amostra da bactéria tem que fornecer aglutinação evidente, enquanto que um controle negativo da mesma bactéria tem que dar nenhuma aglutinação, dentro de tempos predeterminados incluídos no protocolo analítico.
[005] Em um outro exemplo, em kits de pesquisa para inibidores de matriz de alimentos, como no caso específico de pesquisa por agentes antimicrobianos em um teste de leite, um controle positivo realizado usando uma solução contendo um antibiótico tem que fornecer um resultado positivo nos tempos ajustados e de acordo com os procedimentos de teste.
[006] Normalmente, controles positivos são fornecidos em forma líquida ou secados sob congelamento em péletes, ou de pó a ser reidratado antes do uso, uma vez que a estabilidade limitada de controles positivos reidratados limita a vida útil dos mesmos de maneira significativa. Além disso, a liberação quantitativa no caso de controles fornecidos sobre um suporte é, em geral, limitada, de modo a se obter uma resposta de teste positiva, existe uma tendência geral a se usar um excesso de amostra de controle da substância a ser pesquisada, tal como a exceder o limiar quantitativo para cada teste.
[007] Conforme é conhecido no campo dos testes de resistência microbiana, depois de se isolar o micro-organismo, é necessário determinar qual substância pode combater o micro-organismo, e em qual concentração. Normalmente, esses testes são realizados por preparação de uma série de diluições seriais, partindo-se de uma solução de matriz conhecida. O procedimento para a preparação das diluições é laborioso e, portanto, tem efeito econômico negativo sobre a produtividade do processo realizado no laboratório analítico. Os dispositivos de coleta e de transferência dos tipos conhecidos, geralmente usados em laboratórios, são constituídos, por exemplo, por pipetas de Pasteur, seringas, chumaços ou colheres.
[008] Em todos os exemplos citados acima, e, em geral, em todas as metodologias de transferência de análitos e de análise seguinte dos mesmos, existem inúmeras áreas problemáticas. Essas áreas problemáticas estão ligadas, por exemplo, à complexidade dos procedimentos de preparação dos análitos e às dificuldades na transferência e na conservação dos mesmos. É digno de nota o fato de que muitos análitos exigem, para sua conservação ao longo do tempo, condições ambientais muito específicas e controladas. Também a correta quantificação dos análitos é frequentemente complexa, especialmente em um caso de uso de quantidades muito pequenas de análitos, já que a única maneira para a obtenção da quantidade pequena desejada consiste na preparação de uma solução de análito quando necessária tendo uma concentração conhecida e na remoção de maneira direta de uma parte da solução imediatamente depois de a se ter preparado.
[009] Operações, frequentemente longas, complexas e caras, são necessárias a fim de se ser capaz de realizar a análise. Além disso, várias metodologias analíticas conhecidas exigem o uso de quantidades extremamente precisas de análito, para o desempenho de testes comparativos ou outras análises, e isto é frequentemente difícil de se obter, se não com operações delicadas e laboriosas. Em outras palavras, com a técnica anterior não é possível se beneficiar dos vários tipos de análito a cada vez que exista uma demanda pelos mesmos, nas quantidades e nos modos específicos adequados para a aplicação exigida.
[0010] O principal objetivo da presente invenção é solucionar um ou mais dos problemas encontrados na técnica anterior. Um objetivo da presente invenção é fornecer um método para transferência de quantidades de análitos, que possibilite que uma amostra seja obtida, assim como uma transferência a análitos quantitativamente correta e precisa.
[0011] Um outro objetivo da presente invenção e tornar disponível um método para transferência quantitativa de análitos, que reduz o risco de contaminações por parte dos usuários.
[0012] Um outro objetivo da presente invenção e tornar disponível um método para transferência quantitativa de análitos, que seja aplicável e eficaz com uma ampla gama de análitos.
[0013] Um outro objetivo da presente invenção e tornar disponível um método para transferência quantitativa de análitos, que forneça análitos que estejam prontos para uso em testes analíticos ou diagnósticos, também em quantidades que sejam muito pequenas e precisas.
[0014] Um outro objetivo da presente invenção e tornar disponível um método para transferência quantitativa de análitos, que possibilite que um dispositivo de amostragem previamente dosado seja concebido com uma quantidade predeterminada conhecida de análito e/ou para qualquer quantidade, mesmo uma quantidade muito pequena, de análito e/ou em que o método seja concebível para uma ampla gama de análitos e/ou em que o dispositivo previamente dosado exibe análitos em uma condição de uso rápido.
[0015] Um outro objetivo da presente invenção e tornar disponível um método para transferência quantitativa de análitos, que possibilite redução significativa da complexidade, o tempo e os custos envolvidos no desempenho de uma ampla gama de análises e testes diagnósticos.
[0016] Um outro objetivo da presente invenção e tornar disponível um método para transferência quantitativa de análitos, que seja simples e econômico de usar.
[0017] Esses e outros objetivos adicionais, que emergirão mais completamente a partir da descrição seguinte, são substancialmente atingidos por um método para transferência quantitativa de análitos conforme definido em uma ou mais das reivindicações acompanhantes, tomadas uma a uma ou em combinação, ou em qualquer combinação com uma ou mais das características descritas.
[0018] A invenção também se relaciona a um método de acordo com uma ou mais das reivindicações de método apensas, no qual é realizado um estágio de preparação de uma mistura substancialmente homogênea, por sujeição a vórtex e/ou por agitação usando um dispositivo de agitação.
[0019] A invenção também se relaciona a um método de acordo com uma ou mais das reivindicações de método apensas, compreendendo adicionalmente o estágio de concretização de um dispositivo previamente dosado dotado com uma quantidade conhecida predeterminada de análito.
[0020] A invenção se relaciona adicionalmente a um método de acordo com uma ou mais das reivindicações de método apensas, no qual os estágios de inserção de pelo menos uma porção de coleta e de extração da porção de coleta são realizados manualmente por um operador e/ou em que o método compreende adicionalmente pelo menos um estágio de extração do dispositivo estéril de um pacote selado e estéril, antes da inserção da porção de coleta na mistura.
[0021] A invenção se relaciona adicionalmente a um método de uma ou mais das reivindicações de método apensas, no qual o estágio de inserção de uma porção de coleta da mistura é realizado por imersão direta da porção de coleta em pelo menos um microrrecipiente ou por meio de uma bomba para microvolumes.
[0022] A invenção se relaciona adicionalmente à aplicação de um dispositivo, de acordo com uma ou mais das reivindicações de método apensas, para realização das etapas de um método de acordo com as reivindicações 1 a 8. Por meio de exemplo não limitante, uma descrição detalhada de algumas modalidades preferidas da invenção seguir-se-á agora, na qual: - A Figura 1 é uma fluxograma ilustrando esquematicamente algumas modalidades de um método da invenção; - A Figura 2 é uma vista lateral de um dispositivo de acordo com uma modalidade da presente invenção; - A Figura 2a é uma vista de um detalhe do dispositivo da Figura 2, que se relaciona a uma porção de coleta; - A Figura 3 é um recipiente de uma modalidade da presente invenção.
[0023] A Figura 1 ilustra um método para transferência quantitativa de análitos da presente invenção, que compreende pelo menos estágios de predisposição (Estágio A na Figura 1) de uma mistura substancialmente homogênea, de pelo menos uma quantidade inicial predeterminada de pelo menos um análito e de um líquido; de obtenção (Estágio A4) de pelo menos uma concentração conhecida do análito na mistura; de inserção (Estágio B) de pelo menos uma porção de coleta 3, de um dispositivo de amostragem 1, apresentando um corpo de suporte 2, na mistura, a porção de coleta 3 compreendendo uma primeira porção 2a do corpo de suporte 2 e uma pluralidade de fibras 6 fixadas e dispostas sobre a primeira porção 2a, do corpo de suporte 2, por formação de flocos, a fim de se definir uma porção de coleta flocada 3, ou uma almofada flocada, tal como para coletar uma parte da mistura sobre a porção de coleta 3.
[0024] Na presente descrição, a expressão “substancialmente homogênea” se refere a misturas comumente definidas como homogêneas, nas quais os componentes não mais são distinguíveis e estão em uma única fase (por exemplo, soluções), e também a tipos de misturas de maneira geral consideradas heterogêneas, mas que, em qualquer caso, exibem, em nível macroscópico, um elevado nível de mistura recíproca, que preclui uma distinção macroscópica dos vários componentes. Por exemplo, “substancialmente homogênea” é usada para se referir a cada substância que seja substancialmente constante em quantidades suficientemente pequenas, mesmo se isto for obtido somente durante um período limitado de tempo, graças a um estágio deliberado de misturação dos componentes das misturas. Em outras palavras, “substancialmente homogênea” poderia se referir a uma mistura entre um análito e um líquido, em que seja possível determinar, com um suficiente grau de precisão, a quantidade de análito contida em uma determinada quantidade de mistura amostrável, contida em uma determinada quantidade de mistura, que possa ser coletada pela porção de coleta 3, do dispositivo de amostragem 1, a fim de se determinar a quantidade de análito coletado. A mistura pode estar saturado ou não, e também pode exibir um resíduo de fundo, uma vez que a parte da mistura substancialmente homogênea de interesse é aquela, na qual a concentração desejada é definível e substancialmente uniforme em várias zonas da mistura.
[0025] O método compreende adicionalmente um estágio de extração (Estágio C na Figura 1) da porção de coleta 3, do dispositivo de amostragem 1, a partir da mistura, embora retendo, na porção de coleta 3, uma quantidade conhecida predeterminada a ser transferida da mistura. O método pode ser almejado na transferência de análitos, tais como, por exemplo, microorganismos, antibióticos / antígenos, substâncias antimicrobianas, nucleotídeos, antibióticos, hormônios, sequências de ADN, enzimas, materiais orgânicos, materiais biológicos ou materiais de origem biológica, suplementos de enriquecimento ou suplementos seletivos de cultivo de terrenos, ou os similares.
[0026] O estágio de predisposição da mistura pode compreender subestágios de predisposição (Estágio A1) da quantidade inicial predeterminada de análito; de misturação (Estágio A2) da quantidade inicial predeterminada de análito com o líquido, a fim de ser obter uma mistura da quantidade inicial predeterminada de análito e de líquido; e/ou um estágio de tornar a mistura substancialmente homogênea (Estágio A3), por exemplo, por sujeição a vórtex e/ou por agitação usando um dispositivo de agitação. A mistura pode ser predisposta, por exemplo, em um recipiente adequado. O estágio de obtenção de um valor de concentração conhecido do análito na mistura pode ser realizado por misturação de uma quantidade conhecida do análito com uma quantidade conhecida do líquido e/ou via o estágio de medição de um valor de concentração do análito na mistura.
[0027] O método pode compreender adicional mente um estágio de medição (Estágio C1) da quantidade de mistura efetivamente retida na porção de coleta 3, durante o estágio de extração da porção de coleta 3, do dispositivo de amostragem 1, a partir da mistura. O estágio de medição pode ser realizado por meio de uma comparação entre o peso inicial da mistura, antes da inserção da porção de coleta 3, e o peso final da mistura, depois da extração da porção de coleta 3, ou por uma comparação entre o peso do dispositivo de amostragem 1, antes da inserção da mistura, e o peso do dispositivo de amostragem 1, depois da extração a partir da mistura.
[0028] O método pode compreender adicionalmente um estágio de desidratação, secagem (Estágio D) ou de secagem sob congelamento (Estágio E) de pelo menos a porção de coleta 3, dotada com a quantidade predeterminada de mistura a ser transferida, a fim de se obter um dispositivo de amostragem previamente dosado 1 apresentando uma quantidade predeterminada de análito secado ou secado sob congelamento na porção de coleta 3. O estágio de secagem pode ser realizado, por exemplo, por secagem em um forno, ou por ventilação forçada, ou usando outro método de tipo conhecido e adequado para tratamento do análito específico. O dispositivo de amostragem previamente dosado 1 compreende um corpo de suporte 2 e uma porção de coleta flocada 3 dotada com uma quantidade conhecida predeterminada de um análito a ser transferido e/ou de uma quantidade conhecida predeterminada e secada de um análito a ser transferido.
[0029] O método também pode compreender estágios de inserção da porção de coleta 3 em um recipiente com vácuo (de tipo conhecido e, portanto, não ilustrado nas figuras) e de geração de uma depressão ou vácuo no recipiente. Esse estágio de geração de uma depressão ou vácuo pode ser realizado durante o estágio de secagem ou de secagem sob congelamento, ou, em outro momento, separadamente do estágio de secagem ou de secagem sob congelamento.
[0030] O método pode compreender adicionalmente um estágio de revitalização ou de reidratação (Estágio F) da quantidade predeterminada de análito secado ou secado sob congelamento na porção de coleta 3, por exemplo, com pelo menos uma solução nutricional e/ou de hidratação, a fim de se obter uma quantidade predeterminada de análito reidratado na porção de coleta 3.
[0031] O método pode compreender adicional mente um estágio de liberação (Estágio G) de pelo menos 85% da quantidade predeterminada a ser transferida da mistura ou da quantidade de análito predeterminada, por meio de semeadura direta em uma placa, ou diluição em um terreno líquido, a fim de se possibilitar a realização de análise no análito. O método também pode compreender um ou mais estágios de análise do análito assim liberado.
[0032] O método pode compreender adicionalmente estágios de inserção da porção de coleta 3, dotada com o análito, em um recipiente 7, tal como, por exemplo, um tubo de ensaio, de fechamento do recipiente 7 com uma tampa 5 ou cobertura de fechamento e de transferência do recipiente 7 compreendendo a porção de coleta 3 e/ou o estágio de predisposição, no recipiente 7, de uma quantidade predeterminada de uma substância 8 destinado a liquefazer e/ou conservar o análito e/ou um estágio de perturbação, agitação ou rotação do recipiente 7, compreendendo a porção de coleta 3 com o análito, em uma velocidade predeterminada e destinado a liquefazer o análito.
[0033] Segue-se, agora, uma descrição de um dispositivo de amostragem 1, que serve também para transferência de uma quantidade de análito, de acordo com uma modalidade da invenção.
[0034] Com referência às figuras dos desenhos, 1 denota, em sua totalidade, um dispositivo manual para amostragem e transferência de quantidades de análitos de várias naturezas e composições. O dispositivo de amostragem 1 compreende um corpo de suporte 2, que pode ser alongado e/ou substancialmente em formato de haste. O corpo de suporte 2 pode apresentar qualquer seção, a qual pode mesmo ser variável ao longo da sua extensão longitudinal. O corpo de suporte 2 é dotado com uma primeira porção 2a, por exemplo, uma porção terminal, definindo uma porção de coleta 3 para o análito, uma segunda porção 2b, a qual é central e substancialmente em formato de haste, e uma terceira porção 23c, a qual é uma porção terminal na qual o corpo 2 pode ser agarrado manualmente por um operador ou que é conectável a um outro elemento de agarre 4, tal como uma cobertura 5 para um tubo de ensaio ou similar.
[0035] A porção de coleta 3 para o análito pode ser conformada como uma almofada. A porção de coleta 3 é flocada, concretizada por flocagem de uma pluralidade de fibras 6 na primeira extremidade 2 do corpo. As fibras 6 flocadas na primeira extremidade podem ser feitas de um material não hidrofílico, por exemplo, nylon, mas a porção de coleta 3 é hidrofílica por efeito de capilaridade, graças às características das fibras 6 e à distribuição das mesmas no corpo de suporte 2. Em outros termos, a porção de coleta 3 pode exibir uma camada contínua de fibras 6 feitas de um material substancialmente não absorvente do análito, mas conformadas em uma pluralidade de maneira ordenada de interstícios capilares 9, nos quais uma quantidade predeterminada do análito pode ser retida por embebimento, e a partir dos quais a quantidade de análito pode ser subsequentemente liberada de maneira quantitativa no momento da análise, por exemplo, por esfregamento da porção de coleta 3 em uma superfície de liberação especial.
[0036] Um exemplo desse tipo de almofada flocada é ilustrada na patente EP 1.608.268 pertencendo à mesma requerente, o conteúdo da qual na estrutura da almofada flocada é incorporado para finalidades de referência na presente descrição.
[0037] Conforme descrito na patente citada acima, a deposição por flocagem produz, na extremidade envolvida do dispositivo de amostragem 1, uma camada contínua e homogênea de uma pluralidade de fibras 6 em uma disposição ordenada, substancialmente perpendicular em cada ponto da primeira porção 2a do corpo de suporte 2, e cada uma das quais sendo substancialmente paralela às fibras adjacentes 6. Uma pluralidade ordenada correspondente de interstícios capilares 9 é definida entre as fibras 6, em cujos interstícios 9 uma quantidade predeterminada 9 do análito pode ser coletada e retida por embebimento devido à capilaridade.
[0038] A camada flocada pode subsequentemente liberar de maneira quantitativa o análito coletado, por exemplo, por esfregamento em uma superfície ou por meio de diluição do análito em um diluente. A porção de coleta flocada 3 é configurada e dimensionada de modo a coletar uma quantidade substancialmente conhecida de análito e/ou de mistura, ou para coletar uma quantidade de mistura compreendida, por exemplo, entre 5 e 1.000 microlitros, 10 microlitros e 500 microlitros, ou entre 50 e 200 microlitros, ou entre 80 e 120 microlitros.
[0039] As fibras 6 podem ser dispostas sobre o corpo de suporte 2 de uma maneira substancialmente ordenada e de modo a formar uma camada substancial mente contínua sobre a porção de coleta 3 e/ou são dispostas sobre a porção de coleta 3 de modo a definir uma pluralidade de interstícios 9 destinados a absorver a mistura por capilaridade. As fibras apresentam uma densidade linear ou contagem de fibras entre 1,7 e 3,3 Dtex, e/ou apresentam um comprimento compreendido entre 0,6 e 3 mm. As fibras 6 podem ser flocadas na porção de coleta 3, do corpo de suporte 2, com uma densidade de superfície, por exemplo, compreendida entre 50 e 500 fibras por mm2, ou entre 100 e 200 fibras por mm2. A camada de fibras pode definir uma capacidade de absorção, por exemplo, de pelo menos 0,5 pL por mm2, ou de pelo menos 0,6 pL por mm2, ou de pelo menos 0,7 pL por mm2, ou de pelo menos 0,75 pL por mm2. As fibras 6 podem ser feitas de um material substancialmente não hidrofílico, ou um material que não absorva a mistura ou o análito, e/ou de um material selecionado dentre: poliamida, rayon, poliéster, fibra de carbono, alginato, um material natural que seja não adsorvente com respeito à mistura, ou uma mistura dos materiais acima.
[0040] O corpo de suporte 2 pode exibir uma extensão longitudinal, que está compreendida entre 2 cm e 20 cm, ou entre 3 cm e 18 cm, ou entre 6 cm e 16 cm e/ou uma espessura ou diâmetro em uma seção perpendicular em relação ao eixo central do mesmo que está compreendido entre 0,5 mm e 5 mm, ou entre 1 mm e 3 mm, ou entre 1,5 e 2,5 mm.
[0041] A porção de coleta 3 pode exibir uma extensão longitudinal que está compreendida entre 8 cm e 0,5 cm, ou entre 5 cm e 1 cm e/ou um diâmetro ou espessura, compreendendo as fibras 6, entre 10 mm e 1 mm ou entre 8 mm e 2 mm ou entre 5 mm e 2,5 mm.
[0042] A porção de coleta 3 pode exibir qualquer formato adequado para o tipo específico de análito a ser amostrado, por exemplo, arredondado ou com uma ou mais bordas vivas.
[0043] O corpo de suporte 2 pode ser dotado com uma porção de enfraquecimento intermediária destinada a facilitar um rompimento seletivo do corpo 2 em uma posição intermediária do mesmo, entre a primeira extremidade e a segunda extremidade, por exemplo, a fim de facilitar a inserção da porção de coleta 3 em um recipiente 7 para transporte.
[0044] O dispositivo de amostragem 1 pode compreender uma pluralidade de corpos de suporte, cada um dotado com uma porção de coleta 3 apresentando uma conformação ou formato, que seja diferente e especificamente configurado para coleta de um tipo específico de análito, ou para coleta de uma quantidade específica de análito. O dispositivo de amostragem 1 pode compreender adicionalmente um recipiente 7 para transporte do análito apresentando um assento de contenção interno 10 e uma abertura de acesso 11. O recipiente 7 pode ser um tubo de ensaio para transporte de amostras de material biológico ou material de origem biológica. O dispositivo de amostragem 1 pode compreender adicionalmente uma tampa de fechamento 5, que seja montável de maneira removível em relação ao acesso de abertura, a fim de se fechar seletivamente o recipiente 7.
[0045] O dispositivo de amostragem 1 pode compreender adicionalmente pelo menos um elemento de secagem ou de desumidificação, por exemplo, uma bolsa contendo gel de silício, abrigada no recipiente 7 ou em outra posição útil. O recipiente 7 e/ou a tampa de fechamento 5 e/ou o corpo de suporte podem ser concretizados em uma material plástico, por exemplo, poliestirol ou poliestireno ou polipropileno e/ou em um material adequado para uso com materiais biológicos ou materiais de origem biológica. O recipiente 7 e/ou a tampa de fechamento 5 e/ou o corpo de suporte 2 podem ser esterilizados.
[0046] O dispositivo de amostragem 1 pode compreender adicionalmente um pacote selado (não ilustrado nas figuras como de tipo conhecido), no qual o corpo de suporte 2 e/ou o recipiente 7 e a tampa de fechamento 5 podem ser abrigados antes do uso para coleta de um análito. O corpo de suporte 2, o pacote, o recipiente 7 e a tampa 5 podem ser estéreis.
[0047] A invenção permite adicionalmente a concretização de um kit para realização de testes diagnósticos ou químicos, tais como controles positivos e negativos, ou para transferência de substâncias frágeis em meio aquoso para suplementação de terreno de cultivo, compreendendo pelo menos um dispositivo de amostragem 1 do tipo acima descrito, e compreendendo adicionalmente meios para secagem ou secagem sob congelamento de uma quantidade predeterminada de mistura em uma porção de coleta 3, do dispositivo de amostragem 1 e/ou meios para revitalização de uma quantidade predeterminada de análito secado ou secado sob congelamento ou na porção de coleta 3, do dispositivo de amostragem 1, tais como, por exemplo tubos de ensaio contendo soluções nutricionais e/ou de hidratação.
[0048] Conforme mencionado previamente, a invenção torna possível projetar e concretizar dispositivos previamente dosados para transferência de análitos com liberação substancialmente completa do análito coletado no momento de uso desejado, a quantidade de análito usável sendo de pelo menos 85% do análito de amostra coletada.
[0049] Os dispositivos previamente dosados são aplicáveis a vários usos, dentre os quais os campos da diagnose, da química, farmacêutico, de cosméticos, alimentício, controle de águas, etc. Dentre os análitos que podem ser amostrados e, depois disto, tornados disponíveis para uso em laboratório, os seguintes podem ser mencionados por meio de exemplo:
[0050] análitos de uma natureza biológica ou microbiológica, tais como, por exemplo, microorganismos, anticorpos, antígenos, substâncias que atuam de maneira hormonal, oligonucleotídeos ou sequências de ADN, enzimas, etc.;
[0051] análitos de uma natureza química, tais como, por exemplo, antibióticos, suplementos de enriquecimento compreendendo proteínas, suplementos seletivos, etc.
[0052] Para uma melhor compreensão das características e vantagens da invenção, são dados aqui, abaixo, alguns exemplos específicos, porém não limitantes, de atuação prática, com referência à modalidade preferida constituída por uma almofada, em uma extremidade da qual uma camada de fibras 6 é depositada, tais como, por exemplo, fibras de nylon, por flocagem. Uma aplicação adicional é a transferência de material orgânico proveniente de várias áreas do corpo ou do meio ambiente. Além disso, puramente por meio de ilustração não limitante da invenção, é apresentada a Tabela 1, na qual os principais campos de aplicação do sistema previamente dosado são resumidos, em relação à substância a ser examinada nos respectivos testes.
[0053] Em uma primeira modalidade da invenção, a invenção é aplicada a uma transferência de uma quantidade de micróbios vivos e estabilizados, por exemplo, para a concretização de um kit de controle de qualidade no campo microbiológico. Um dispositivo de amostragem previamente dosado é concretizado para transferência de microorganismos vivos, os quais, seguindo-se um processo de desidratação adequado, permite a conservação e o transporte de populações de micróbios vivos e estáveis; ao mesmo tempo, o dispositivo de amostragem 1, na forma de uma almofada, fornece um sistema adequado para semeadura direta da amostra de análito em uma placa ou substrato sólido ou para diluição em um solvente ou em terreno líquido.
[0054] O kit compreende uma almofada flocada, sobre a qual, via embebimento e processo se secagem sob congelamento subseqüente, é coletada uma determinada colônia de micróbios, em uma concentração conhecida. O campo de aplicação desses dispositivos cobre várias áreas clínicas e alimentícias. O kit inclui meios para a revitalização da colônia secada sob congelamento, isto é, tubos de ensaio contendo soluções nutricionais e/ou de hidratação.
[0055] Um exemplo específico será descrito agora, em relação à Escherichia coli ATCC 25922. No entanto, resultados similares podem ser obtidos com outros microorganismos.
[0056] No presente exemplo, as almofadas flocadas previamente dosadas de microorganismos secados sob congelamento são concretizadas em uma forma quantitativa; cerca de 300 UFC de Escherichia coli são transferidas por sobre a almofada, submetidas a um processo de secagem sob congelamento e, então, recuperadas no final do processo de secagem. Os dispositivos previamente dosados de microorganismos secados sob congelamento podem ser usados como padrões de referência em controle de qualidade microbiológica em vários campos, tais como, por exemplo, na indústria farmacêutica, na testagem de água e de águas residuais, na indústria de alimentos, na indústria de cosméticos, e em outras mais.
[0057] Um requisito essencial para a concretização desses dispositivos, para garantia de padronização dos métodos analíticos, é que a liberação da amostra depositada na porção de coleta 3, do dispositivo de amostragem 1, tem que ser completamente liberada durante o uso. Afim de concretizar dispositivos de amostragem previamente dosados 1, a porção de coleta flocada é embebida por uso de uma solução microbiológica em concentração conhecida, de modo a garantir que a quantidade total de cerca de 300 UFC seja transferida por sobre cada almofada. A quantidade de injeção microbiana a ser usada, no caso particular da almofada, pode estar compreendida em uma faixa de 10 a 200 pL, e, no caso específico, 100 pL. A concentração da suspensão microbiana usada é de cerca de 3.000 UFC/mL; a suspensão microbiana na concentração desejada é diretamente concretizada no meio de conservação, que contém substâncias crioprotetoras e agentes de neutralização, que sejam capazes de conservar a viabilidade das células. A injeção das almofadas com as suspensão microbiana é conseguida por imersão direta em microcavidades; similarmente, pode ser usada uma bomba de microvolume. A almofada é inserida em um recipiente de depressão adequado, que pode suportar tecnologia de depressão e secagem sob congelamento, a qual é desidratação, e, no final do processo, ela é selada diretamente em um estado de depressão. Os testes realizados para qualificar o dispositivo de amostragem 1, para transferência de quantidade conhecida, se referem à verificação da recuperação das colônias depositadas, da vitalidade e da estabilidade ao longo do tempo sob diferentes condições de conservação. Os testes foram realizados diretamente por semeadura sobre terreno sólido ou por solução em um volume conhecido, especificamente 500 pL de substância hidratante. A comparação, para verificação da transferência, foi realizada usando a mesma semeadura da amostra coletada usando-se uma micropipeta.
[0058] A Tabela 2, a seguir, relata os valores médios das contagens realizadas por semeadura direta sobre terreno sólido das almofadas previamente dosadas com Escherichia coli, comparados com resultados similares obtidos usando-se um método volumétrico convencional para a transferência da suspensão microbiana, tal como a micropipeta. Os dados se relacionam a uma amostra de 50 almofadas previamente dosadas.
[0059] A Tabela 3, a seguir, relata os valores médios das contagens realizadas por diluição da almofada previamente dosada em 500 pL de PBS e semeadura em terreno sólido da amostra inteira assim reconstituída com resultados similares obtidos usando-se, para a transferência da suspensão microbiana, um método volumétrico convencional, tal como a micropipeta. Os dados se referem a uma amostra de 50 almofadas previamente dosadas.
[0060] A almofada flocada tem se mostrado como sendo um excelente dispositivo de transferência de quantidade para a manutenção das colônias de micróbios por um processo de secagem sob congelamento. A reprodutibilidade do sistema é boa, conforme é a sua estabilidade ao longo do tempo.
[0061] Em uma segunda modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 está compreendido em um kit de controle de qualidade, em sistemas de diagnóstico de escoamento lateral do tipo imuno-enzimático, tais como kits para gripe, Strep A, MRSA, HIV, RSV e os similares. No caso particular, o dispositivo de amostragem 1 é usado para transferência de antígenos / anticorpos, que, seguindo um processo de desidratação, permite a conservação e a estabilização do análito. O sistema previamente dosado com a quantidade de análito modulada de acordo com o LOD (limite de detecção, ou valor de corte) do teste específico fornece um controle positivo usável no kit diagnóstico de referência.
[0062] O kit compreende uma almofada flocada, sobre a qual é colocado um determinado antígeno ou anticorpo em uma concentração conhecida, por um embebimento e subseqüente processo de secagem. O campo de aplicação desses dispositivos cobre vários âmbitos clínicos e farmacêuticos. O kit inclui meios que permitam que o teste seja completado. Esses são dispositivos carregados com antígenos ou anticorpos aos quais o kit seja sensível (no caso de controles positivos) ou sem qualquer antígeno / anticorpo ou com antígenos / anticorpos que sejam diferentes dos alvos do kit (no caso de controles negativos).
[0063] Além disso, esses controles têm o objetivo de ilustrar, para o usuário final, como os resultados positivos e negativos do teste devem se apresentar. O dispositivo de amostragem 1, dotado com uma camada contínua de composição de polímero, possibilita a interação de um tipo adsorvente com os análitos transferidos, garantindo a coleta completa do análito pelo meio solvente, sem absorção internamente da camada. Esse mecanismo de interação em superfície é uma garantia da liberação completa do análito durante o uso.
[0064] Em uma terceira modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 está compreendido em um kit de controle de qualidade para pesquisa, para inibir substâncias no leite e derivados; aplicações similares são também possíveis para outras matrizes alimentícias. Nesse caso, o dispositivo de amostragem 1 é para a transferência de substâncias antimicrobianas, o que permite, de maneira bem sucedida, que um sistema de desidratação adequado para desidratação, conserve o análito. O sistema previamente dosado com uma quantidade predefinida de substância antimicrobiana fornece, depois da reidratação, um controle positivo para o teste de referência na amostra de leite. O kit compreende uma almofada flocada, à qual, por um processo se secagem, é aderido um determinado antibiótico com uma concentração conhecida. O kit inclui meios que permitem que o teste seja realizado. Esses são dispositivos carregados com antibióticos, aos quais o kit seja sensível (no caso de controles positivos) ou sem qualquer antibiótico ou com antibióticos que sejam diferentes dos alvos do kit (no caso de controles negativos). Além disso, esses controles têm o objetivo de ilustrar, para o benefício do usuário final, como o resultado positivo e negativo do teste deve ser apresentado.
[0065] Em uma quarta modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 está compreendido em um kit para verificação da resistência a antibióticos de determinados microorganismos (MIC, inibidor de concentração mínima). Nesse caso, o dispositivo de amostragem 1, para a transferência de substâncias antimicrobianas, permite, subsequentemente, que um sistema apropriado para desidratação estabilize os antibióticos depositados e os torne disponíveis em testes para resistência de micróbios. O kit compreende uma série de almofadas flocadas, sobre as quais, via um processo de embebimento e de secagem, é aderida uma determinada quantidade diferente de substância antimicrobiana, de concentração conhecida. O campo de aplicação desses dispositivos cobre vários campos clínicos e farmacêuticos.
[0066] Em uma segunda modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 está compreendido em um kit de controle de qualidade com métodos bioquímicos. Nesse caso, o dispositivo de amostragem 1 é para transferência de nucleotídeos e permite, seguindo- se um processo de desidratação adequado, a conservação e a estabilização do análito. O sistema, previamente dosado com uma quantidade de análito modulado de acordo com o valor de corte do teste específico, fornece um controle positivo, que pode ser usado no método diagnóstico de referência. O kit compreende uma almofada flocada, sobre a qual, via um processo de embebimento e de subseqüente secagem, é aderido um determinado nucleotídeo em uma concentração conhecida. O campo de aplicação desses dispositivos cobre vários âmbitos clínicos e farmacêuticos. O kit inclui meios que permitem que o teste seja completado. Esses são dispositivos carregados com nucleotídeos, que podem reagir com os entes reativos dos instrumentos de referência, no caso de controles positivos, ou sem nucleotídeos, no caso de controles negativos. Além disso, esses controles têm o objetivo de ilustrar, ao usuário final, como o resultado positivo e negativo do teste deve ser apresentado.
[0067] Em uma sexta modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 está compreendido em um kit para controle de qualidade em testes para detecção de hormônios (por exemplo, testes de gravidez, anti-doping, etc.). Nesse caso, o dispositivo de amostragem 1 é para transferência de hormônios, o qual, seguindo-se um processo de desidratação, permite a conservação e a estabilização do análito. O sistema previamente dosado, com uma quantidade de análito modulado de acordo com LOD (limite de detecção ou valor de corte) do teste específico, fornece um controle positivo usável no kit diagnóstico de referência.
[0068] O kit compreende uma almofada flocada, sobre a qual, por um processo de embebimento e de subseqüente secagem, adere um determinado hormônio, em uma concentração conhecida. O campo de aplicação desses dispositivos cobre várias áreas clínicas e alimentícias.
[0069] O kit inclui meios, que permitem que o teste seja completado. Esses são dispositivos carregados com hormônios, aos quais o kit seja sensível (no caso de controles positivos) ou sem quaisquer hormônios ou com hormônios diferentes dos hormônios alvos do kit (no caso de controles negativos). Além disso, esses controles têm o objetivo de ilustrar, para o usuário final, como os resultados de teste positivos e negativos devem ser apresentados.
[0070] Em uma sétima modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 está compreendido em um kit para transferência quantitativa de amostras biológicas provenientes de várias áreas do corpo, ou de amostras ambientais a partir de coletas de superfícies. Em particular, o dispositivo de amostragem 1 é usado para transferência quantitativa de amostras clínicas, tais como urina, fezes, lavagens bronquiais, narinas, vagina, faringe, virilha e outras almofadas de superfície. A aplicação se relaciona ao controle de contaminação microbiana das amostras.
[0071] Em uma oitava modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 é usado para transferência quantitativa de uma dada quantidade de amostra orgânica, compreendendo esperma, saliva, sangue. A aplicação se relaciona à análise de ácidos nucléicos contidos na amostra.
[0072] Em uma outra modalidade da invenção, o dispositivo de amostragem 1 compreende um kit para transferência, conservação e liberação de determinados suplementos de enriquecimento e/ou suplementos seletivos para terreno cultivado. O dispositivo de amostragem 1, para transferência quantitativa de substâncias para aumentar a fertilidade de terreno de cultivo (por exemplo, aminoácidos, açúcares, proteínas, etc.) ou que permitam o crescimento de determinados microorganismos, enquanto evitem o crescimento de outros (tais como, por exemplo, sais, antibióticos, substâncias químicas, etc.), quando especialmente embebido e desidratado, possibilita que um sistema previamente dosado seja obtido, o qual é diretamente usável no volume correto de terreno líquido. Muitas das substâncias usadas para o enriquecimento de terreno de cultivo apresentam estabilidade limitada no estado hidratado; isto limita e compromete o uso do próprio terreno. A vantagem de um dispositivo de amostragem previamente dosado 1 é que o sistema está disponível e pronto para usar, possibilitando o prolongamento da vida útil do terreno de cultivo, por simplificação do gerenciamento das medidas a serem tomadas e pela conservação do próprio terreno. O campo de aplicação desses dispositivos cobre várias clínicas, alimentícias e farmacêuticas.
[0073] A presente invenção fornece uma ou mais das seguintes vantagens.
[0074] Em primeiro lugar, a invenção permite a concretização de um método e de um dispositivo concretizado de acordo com o método, que soluciona os problemas encontrados na técnica anterior.
[0075] Um método da invenção conduz à obtenção de uma amostra e de uma transferência, que sejam quantitativamente corretas e precisas, de vários tipos de análito, e, de uma maneira muito eficiente, mesmo com análitos que sejam difíceis de amostrar, transferir, conservar ou tratar.
[0076] Além disso, a invenção fornece análitos que estejam prontos para uso em exames analíticos e diagnósticos, em quantidades que possam ser muito pequenas e precisas, graças à concretização de quantidades previamente dosadas, que estejam prontas para uso.
[0077] A invenção possibilita significativas reduções de complexidade, tempo e custos envolvidos na realização de uma ampla gama de análises e testes diagnósticos.
[0078] Com a invenção, sistemas previamente dosados, com diferentes substâncias antimicrobianas podem ser concretizados, graças aos quais a injeção subseqüente dos microorganismos ao terreno de crescimento, aditivos com sistemas previamente dosados com entes antimicrobianos em várias quantidades permite uma fácil definição da sensibilidade e da resistência do micro-organismo.
[0079] Além disso, a invenção possibilita a obtenção de um controle positivo ou negativo quantitativo em uma forma que seja adequada para aplicação em casos específicos, de modo a ser capaz de correlacionar a resposta do kit à concentração real do controle positivo, resultando na vantagem de evitar o uso de uma amostra de referência excessiva.
[0080] A aplicação de um sistema previamente dosado com uma quantidade predefinida de microorganismos secados sob congelamento, em um formato que seja imediatamente adaptável à própria aplicação, conduz a uma redução significativa em custos e tempo dos procedimentos relativos.
[0081] Finalmente, a invenção é simples e econômica de usar.
Claims (24)
1. Método para transferência quantitativa de analitos, microorganismos, antibióticos / antígenos, substâncias que atuam de maneira antimicrobiana, nucleotídeos, antibióticos, hormônios, sequências de ADN, enzimas, material orgânico, material biológico ou material de origem biológica, suplementos enriquecedores de terrenos ou suplementos seletivos de cultivo de terras, caracterizado pelo fato de compreender pelo menos estágios de: predisposição de uma mistura substancialmente homogênea de uma quantidade inicial predeterminada de pelo menos um analito e um líquido; obtenção de um valor de concentração ou quantidade conhecida do analito na mistura; introdução, na mistura, de pelo menos uma porção de coleta (3) de um dispositivo de amostragem (1) apresentando um corpo de suporte (2), a porção de coleta (3) compreendendo uma primeira porção (2a) do corpo de suporte (2) e uma pluralidade de fibras (6) fixadas a e dispostas sobre a primeira porção (2a) do corpo de suporte (2) por meio de formação de flocos, a fim de definir uma porção de coleta flocada (3) ou uma haste flocada, para coletar uma parte da mistura na porção de coleta (3); e extração da porção de coleta (3) do dispositivo de amostragem (1) da mistura; retenção na porção de amostragem (3) de uma quantidade conhecida predeterminada da mistura a ser transferida, e realização de um dispositivo pré-dosado provido com uma quantidade conhecida predeterminada de analito.
2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o estágio de predisposição da mistura compreende estágios de: predisposição da quantidade inicial predeterminada de analito; mistura da quantidade inicial predeterminada de analito com o líquido, a fim de se obter uma mistura da quantidade inicial predeterminada de analito no líquido.
3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o estágio de preparação da mistura compreende realizar a mistura substancialmente homogênea.
4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que o estágio de obtenção de um valor de concentração conhecido do analito na mistura é realizado por mistura de uma quantidade conhecida do analito com uma quantidade conhecida do líquido.
5. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o estágio de obtenção de um valor de concentração conhecido do analito na mistura é realizado por meio de um estágio de medição de um valor de concentração do analito na mistura.
6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que compreender adicional mente um estágio de medição de uma quantidade de mistura que seja efetivamente retida na porção de coleta (3) durante o estágio de extração da porção de coleta (3) do dispositivo de amostragem (1) a partir da mistura.
7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que o estágio de medição é feito por meio de uma comparação entre o peso inicial da mistura antes da inserção na porção de coleta (3) e o peso final da mistura depois da extração da porção de coleta (3), ou por meio de uma comparação entre o peso do dispositivo de amostragem (1) antes da inserção na mistura e o peso do dispositivo de amostragem (1) depois da extração a partir da mistura.
8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que compreender adicionalmente um estágio de dessecagem ou de liofilização pelo menos da porção de coleta (3), dotado com a quantidade predeterminada de mistura a ser transferida, a fim de se obter um dispositivo de amostragem previamente dosado (1) apresentando uma quantidade predeterminada de analito secado ou liofilizado na porção de coleta (3).
9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente estágios de inserção da porção de coleta (3) em um recipiente de vácuo e a geração de uma condição de vácuo substancial no recipiente de vácuo, durante o estágio de dessecagem ou de liofilização ou de maneira independente do estágio de dessecagem ou de liofilização.
10. Método, de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente um estágio de revitalização ou de reidratação da quantidade predeterminada de analito secado ou liofilizado na porção de coleta (3), ou um estágio de revitalização ou reidratação da quantidade predeterminada de analito dessecado ou liofilizado na porção de coleta (3) por meio de pelo menos um nutriente e/ou solução de hidratação, a fim de se obter uma quantidade predeterminada de analito reidratado na porção de coleta (3).
11. Método, de acordo com a reivindicação 8 ou 9 ou 10, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente um estágio de liberação de pelo menos 85% ou de pelo menos 90% ou de pelo menos 95% da quantidade predeterminada a ser transferida da mistura ou da quantidade predeterminada de analito, por meio de semeadura direta em uma placa, ou diluição em terreno líquido, a fim de se possibilitar a análise no analito a ser realizado.
12. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que a porção de coleta flocada (3) está configurada de modo a receber uma quantidade substancialmente conhecida da mistura, ou a coletar uma quantidade compreendida entre 5 e 1.000 microlitros da mistura, ou entre 10 e 500 microlitros da mistura, ou entre 50 e 200 microlitros da mistura, ou entre 80 e 120 microlitros da mistura.
13. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de a porção de coleta flocada (3) ser configurada de forma a coletar uma quantidade de pelo menos 0,5 pL por mm2, de pelo menos 0,6 pL por mm2, ou de pelo menos 0,7 pL por mm2, ou de pelo menos 0,75 pL por mm2.
14. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado em que as fibras (6) estão dispostas na primeira porção (2a) do corpo de suporte (2) de uma maneira substancialmente ordenada e de uma maneira tal como a formar uma camada substancialmente contínua na porção de coleta (3).
15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelas fibras (6) estarem dispostas na porção de coleta (3) de modo a definir uma pluralidade de interstícios capilares (9) adaptados para absorverem a mistura por capilaridade.
16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 15, caracterizado pelo fato que as fibras (6) apresentam uma densidade linear ou contagem de fibras compreendida entre 1,7 e 3,3 Dtex.
17. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 16, caracterizado pelo fato que as fibras apresentam um comprimento compreendido entre 0,6 e 3 mm.
18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 17, caracterizado pelo fato de as fibras(6) apresentam uma densidade de superfície das fibras (6) na porção de coleta (3) compreendida entre 50 e 500 fibras por mm2 ou entre 100 e 200 mm2 e/ou são feitas de um material substancialmente não hidrofílico e não adsorvente com respeito à mistura, e/ou de um material selecionado a partir de: poliamida, rayon, poliéster, fibra de carbono, alginato, um material natural que seja não adsorvente com respeito à mistura, ou uma mistura dos materiais acima.
19. Dispositivo de amostragem previamente dosado (1), caracterizado pelo fato de compreender um corpo de suporte (2) e uma porção de coleta flocada (3), a porção de coleta (3) sendo dotada com uma quantidade conhecida predeterminada de um analito a ser transferido, realizado por meio do método conforme descrito em qualquer uma das reivindicações 1 a 18.
20. Dispositivo de amostragem previamente dosado (1), de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que a quantidade conhecida de um analito obtido na porção de coleta, é secado.
21. Dispositivo de amostragem previamente dosado (1), de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que uma quantidade conhecida de um analito a ser transferido, obtido na porção de coleta, é liofilizado.
22. Kit para realização de testes diagnósticos ou clínicos, tais como controles positivos ou negativos, ou para transferência de substâncias labeis em uma fase hidratada para cultivo de terrenos, caracterizado pelo fato de compreender pelo menos um dispositivo de amostragem (1), concretizado conforme descrito em qualquer uma das reivindicações 1 a 18.
23. Kit de acordo com reivindicação 22, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente meios para secagem ou liofilização de uma quantidade predeterminada de uma mistura em uma porção de coleta (3) do dispositivo de amostragem (1).
24. Kit de acordo com a reivindicação 22 ou 23, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente meios para revitalização de uma quantidade predeterminada de analito secado ou liofilizado na porção de coleta (3) do dispositivo de amostragem (1), tais como, tubos de ensaio contendo soluções de nutrientes e/ou de hidratação.
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