CN102908363A - 小牛血去蛋白提取物及制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种小牛血去蛋白提取物及制备工艺，采1-6个月幼牛静脉血，用物理方法将血液凝固，采用压榨法将血液中的蛋白去除，得到的液体进行酸碱处理，将其中的酸及碱性蛋白质杂质除净，将所得血清进行超滤灭菌，最后进行灌装。本发明完善小牛血去蛋白提取物生产工艺，其呼吸活力提高了80%，提高了药品质量标准降低成本、减少污染、缩短生产周期、提高产品的质量标准，实现产业化生产目标。

Description

小牛血去蛋白提取物及制备工艺

技术领域

本发明涉及小牛血去蛋白提取物及制备工艺，完善小牛血去蛋白提取物的生产工艺，属于医药技术领域。

背景技术

小牛血去蛋白提取物(protein-free calf blood extract)是小牛血去蛋白提取物注射液的主要原料。小牛血去蛋白提取物是1-6个月的幼牛血经过除蛋白后得到的小分子生物活性物质，其主要成分为氨基酸、小肽、核酸及其它含氮化合物。

小牛血去蛋白提取物可显著提高网状内皮系统活力，提高酶活性，加速细胞的氧化磷酸化反应和ATP的合成，激活细胞呼吸，促进新陈代谢，加快组织再生。该药物对脑神经损伤、脑卒中及脑梗塞等疾病有积极的治疗效果,同时还具有眼角膜修复、增强记忆力等作用，在临床上应用广泛。

目前，国内生产小牛血去蛋白提取物的制备方法是有机溶剂提取法。如中国发明专利（CN200710194950.2）所公开的方法：：(1)将小牛血搅拌、离心得到血清；(2)将离心得到的血清加热去除蛋白，过滤后浓缩滤液；(3)向浓缩后的滤液中加入乙醇进行醇沉，过滤去除沉淀出的蛋白，滤液浓缩回收乙醇，得到醇沉后的滤液；(4)向醇沉后的滤液中加入酸调节PH值为酸性，加入活性炭并加热进行脱色和水解，过滤收集滤液；(5)将收集的滤液用碱调节PH至6.8～8，冷冻除蛋白，过滤得到滤液，再冷冻、过滤，反复2～5次，所述冷冻温度为-50～0℃，时间为12～72小时；(6)将冷冻除蛋白后得到的滤液用纤维膜超滤除高分子物质，得到小牛血去蛋白提取物。但采用上述方法进行提取不仅造成环境污染、生产成本高，更重要的是有机溶剂导致了具有生物活性化合物的变性失活，使药效学活性下降。

发明内容

本发明提供一种小牛血去蛋白提取物，其呼吸活力提高了80%，提高了药品质量标准。

本发明提供一种小牛血去蛋白提取物的制备工艺，完善小牛血去蛋白提取物生产工艺，降低成本、减少污染、缩短生产周期、提高产品的质量标准，实现产业化生产目标。

 本发明公开的小牛血去蛋白提取物注射液的制备工艺，解决方案如下：采1-6个月幼牛静脉血，用物理方法将血液凝固，采用压榨法将血液中的蛋白去除，得到的液体进行酸碱处理，将其中的酸及碱性蛋白质杂质除净，将所得血清进行超滤灭菌，最后进行灌装。

本发明小牛血去蛋白提取物注射液的具体工艺，包括以下步骤：

在无菌条件下，采取1-6个月幼牛静脉血，搅拌，加热灭菌，经压榨后，上清液经无机膜（陶瓷膜7μ）过滤，滤液中加入盐酸调节PH值3~4为酸性，不断搅拌，超滤后，收集滤液，向收集的滤液中加入氢氧化钠调节为碱性8~10，再超滤（20000），收集滤液并调节至中性；反渗透膜浓缩；5000分子量超滤除蛋白，然后灭菌，灌装。

根据国家食品药品监督管理局颁布暂行的小牛血去蛋白注射液质量标准，采用“呼吸活力测定法”测定该药物活力，并以刺激指数（SI）作为质量控制参数。本发明工艺生产的小牛血去蛋白提取物注射液SI（活力指标）为4.3~4.8，而规定的SI为2.5，其呼吸活力提高了80%，提高了药品质量标准。

发明的积极效果在于：采用物理方法代替了有机溶剂沉淀蛋白质的方法，降低成本、减少污染、缩短生产周期；保持了制剂的药理学活性在实验室研究阶段，产物的呼吸活力活性比有机溶剂法提高了80%；大大提高了药品的质量标准。

具体实施方式

实施例1

在无菌条件下，采取5个月幼牛静脉血100kg，搅拌，加热灭菌，经压榨后，上清液经无机膜（陶瓷膜7μ）过滤；50kg滤液中加入盐酸调节PH值3~4为酸性，不断搅拌，超滤后，收集滤液，向收集的滤液中加入氢氧化钠调节为碱性8~10，再超滤（20000道尔顿），收集滤液并调节至中性；反渗透膜浓缩25kg；5000分子量超滤除蛋白，然后灭菌，灌装。检测活性指标SI为4.5。

实施例2

在无菌条件下，采取6个月幼牛静脉血100kg，搅拌，加热灭菌，经压榨后，上清液经无机膜（陶瓷膜7μ）过滤；55kg滤液中加入盐酸调节PH值4为酸性，不断搅拌，超滤后，收集滤液，向收集的滤液中加入氢氧化钠调节为碱性10，再超滤（20000道尔顿），收集滤液并调节至中性；反渗透膜浓缩28kg；5000分子量超滤除蛋白，然后灭菌，灌装。检测活性指标SI为4.3。

实施例3

在无菌条件下，采取2个月幼牛静脉血100kg，搅拌，加热灭菌，经压榨后，上清液经无机膜（陶瓷膜7μ）过滤；48kg滤液中加入盐酸调节PH值3为酸性，不断搅拌，超滤后，收集滤液，向收集的滤液中加入氢氧化钠调节为碱性9，再超滤（20000道尔顿），收集滤液并调节至中性；反渗透膜浓缩22kg；5000分子量超滤除蛋白，然后灭菌，灌装。检测活性指标SI为4.8。

Claims (2)

1.一种小牛血去蛋白提取物，是通过以下方法制成的：在无菌条件下，采取1-6个月幼牛静脉血，搅拌，加热灭菌，经压榨后，上清液经无机膜（陶瓷膜7μ）过滤，滤液中加入盐酸调节PH值3~4为酸性，不断搅拌，超滤后，收集滤液，向收集的滤液中加入氢氧化钠调节为碱性8~10，再超滤（20000），收集滤液并调节至中性；反渗透膜浓缩；5000分子量超滤除蛋白，然后灭菌，灌装。

2. 一种小牛血去蛋白提取物的制备工艺，包括以下步骤：

在无菌条件下，采取1-6个月幼牛静脉血，搅拌，加热灭菌，经压榨后，上清液经无机膜（陶瓷膜7μ）过滤，滤液中加入盐酸调节PH值3~4为酸性，不断搅拌，超滤后，收集滤液，向收集的滤液中加入氢氧化钠调节为碱性8~10，再超滤（20000），收集滤液并调节至中性；反渗透膜浓缩；5000分子量超滤除蛋白，然后灭菌，灌装。