CN102448955A - 氨基嘧啶抗癌化合物 - Google Patents

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Abstract

式(1)的化合物，如以下示出和本文定义；和药学上可接受的盐、合成、中间体、制剂和用其治疗疾病的方法，所述疾病包括至少部分由FAK调节的癌症。

Description

氨基嘧啶抗癌化合物
本申请要求美国申请号61/182898(2009年6月1日)和61/298349(2010年1月26日)的优先权，它们的内容通过在此引用以其整体并入本文。
技术领域和背景技术
本申请主要涉及癌症治疗、靶向疗法、一些化学化合物、制备和用这些化合物治疗肿瘤和癌症的方法。
黏着斑激酶(FAK)是在由整联蛋白——细胞黏着的异源二聚体受体的家族——传递的信号转导中起到主要作用的胞质酪氨酸激酶。FAK和整联蛋白在称为黏着斑的膜周部(perimembrane)结构中共存。
通过ERK、PI3K和p130cas的FAK信号传导在癌细胞增殖、存活和迁移中是重要的。在多种癌症肿瘤中已经报道了pFAK和/或FAK过度表达。在人的星形胶质细胞瘤细胞中诱导表达FAK后，观察到了体内肿瘤细胞增殖的增加。Cary等人，J.Cell Sci.，109：1787-94(1996)。FAK在前列腺癌、乳腺癌、甲状腺癌、结肠癌、黑色素瘤、脑癌和肺癌中过度表达，FAK的表达水平与显示为最恶性的表型直接相关。Weiner等人，Lancet，342(8878)：1024-25(1993)；Owens等人，Cancer Res.，55：2752-55(1995)；Maung等人，Oncogene，18：6824-28(1999)；Wang等人，J.Cell Sci.，113：4221-30(2000)。FAK在人的上皮细胞和间质肿瘤如黑色素瘤、淋巴瘤和多发性骨髓瘤中是高度活跃的。增加的FAK与增加侵袭力和癌症转移的增加的能力相关。
体外的FAK信号传导的抑制诱导细胞生长停止、减少细胞运动性和可以引起细胞死亡。KD-FAK和DN-FAK已经显示抑制体内肿瘤生长。FAK也称为PTK2。
在肝细胞中，TGFβ诱导了FAK的Src-依赖的激活；并且有证据表明FAK信号传导需要间质细胞和侵袭性标记物的转录上调和膜结合的E-钙黏着蛋白的离域。Exp.Cell Res.，314，143-52(2008)。
多个出版物公开了说明具有FAK或其它激酶抑制活性的化合物例如，CancerRes.，68(6)，1935-1944(2008)、US6649608、US6878697、US7109335、US7109337、US7122670、US7230098、US7351712、US7514446、US7521457、US2004/0220177、US2005/0124637、US2005/0203114、US2005/0256144、US2005/0256145、US2006/0252748、US2007/0015207、US2007/0203161、US2008/0039447、US2008/0132504、US2008/0176881、US2008/0182840、US2008/0293708、US2009/0054395、US2009/0149438、WO2001/64655、WO2001/070741、WO02/096888、WO2006/021454、WO2007/021937、WO2008/051547、WO2008/094602、WO2008/094737、WO2008/129380、WO2009/020990、WO2009/071535、WO2009/105498、WO2009/143389。
仍然存在对于具有达到临床和监管部门批准用于治疗疾病诸如癌症的效力的FAK抑制剂的需求。
发明概述
在一些方面，本申请涉及如下示出的式1的化合物：
Figure BPA00001479300900021
其中R是任选取代的芳基或杂芳基；R1是卤素、CF3、CCH或其它合适取代基；R6是任选的取代基；Q1至Q4独立地为＞CH、＞CF、＞N或＞N-氧化物；除了Q2至Q4中的至少一个包括取代基之外，所述取代基包亚膦酸酯(phosphinate)、膦酸酯或氧化膦。
在一些方面，本发明的化合物是包括FAK的激酶的抑制剂。在一些方面，本发明的化合物是FAK的选择性抑制剂。
在一些方面，本发明包括治疗增殖性疾病——特别是癌的方法，所述癌包括至少部分地由FAK单独或者其与其它治疗剂结合的治疗方案调节的癌。
本发明包括这些化合物和其盐、包括溶剂合物和水合物的其任何物理形式、这些化合物的制备、中间产物和药物组合物及其制剂。
具体实施方式
化合物
在一些方面，本发明包括以上式1的化合物，其中(亚类1)：
R1是卤素、-CF3或-CCH；
Q2至Q4中的至少一个是＞C-X1-R2；
Q1和剩下的Q2至Q4独立是＞CH、＞CF、＞N或＞N-氧化物；
X1和X2独立地是-(CR7R8)0-2-；
R7和R8中的每一个独立地是卤素、C0-3脂肪族或-OC0-3脂肪族，两个中的任一个为任选地卤素取代的，除了在X2、R7和R8不是卤素或-OC0-3脂肪族的情况之外；
R6是卤素、-OC0-3脂肪族或C0-3脂肪族，两个中任一个由一个或多个卤素或由-OCF3取代；
R2是-P(O)R9R10；
R9和R10独立地是C0-3脂肪族，两个中的任一个可以在它们原子的任一原子处结合在一起以形成环，其中前述的任一个可以被一个或多个卤素、C0-6脂肪族或3-6环进一步地取代；
R是
Figure BPA00001479300900031
Q6、Q7、或A中的一个是＞CR4；
Q5和剩下的Q6至Q7以及A独立地是＞CH、＞CF、＞N或＞N-氧化物；
R3是C0-6脂肪族、-S(O)2R11、-S(O)2NR11R12、-C(O)NR11R12、-C(O)OR11；-NR11S(O)2R12或-NR11R12；
R11和R12独立地是C0-6脂肪族，其可以在它们的原子的任一个处结合在一起以形成含有1-3个杂原子的环；
或可选地R3和A限定任意任选取代的含有一个或多个杂原子的5-6环；
R4是4-6环、-OC0-6脂肪族或C0-6脂肪族，每一个任选地被取代，或者卤素；
或其药学上可接受的盐。
在式1或亚类1(亚类2)的一些实施方式中：
Q3是＞C-CH2-R2；以及R9和R10独立地为C0-3烷氧基。
在式1或亚类1或2(亚类3)的一些实施方式中：R4为任选取代的环己基。
在式1或亚类1化合物或盐的一些实施方式中具有式1a(亚类4)：
Figure BPA00001479300900032
其中：
X1和X2独立为-(CR7R8)0-1-；
R是
A是CH或N；
R1是卤素、-CF3或-CCH；
R2是-P(O)R9R10；
R3是-S(O)2R11、-S(O)2NR11R12、-C(O)NR11R12、-C(O)OR11；-NR11S(O)2R12，或-NR11R12；
R4是-x-y-z，其中：
x是4-6环；y不存在或是4-6杂环；和z不存在或是1-2羟基任选取代的C1-3烷基或C1-6烷氧基，或者z是羟基或者-C(O)O-C0-3烷基；或
-x-y-z是C0-6烷氧基、C2-6链烯基、C2-6炔基、或C0-6烷基，每一个任选地被1-2个羟基取代；
R5是C0-2烷基，其任选地被1-3个独立的羟基或卤素基团取代；
R6是卤素、-C0-3烷氧基、被卤素任选取代的-C0-3烷基、或-OCF3；
R7和R8每一个独立地是H或-CH3；
R9和R10独立地是羟基、C1-6烷氧基、或C0-6烷基——它们中的任一个在它们原子的任一个处结合在一起以形成环——、或芳基、-O-芳基、或4-6杂环，其中前述的任一个可以被3-6环进一步取代；
R11和R12独立地是C0-6烷基，它们可以在它们的原子的任一个处结合在一起以形成含有1-3个杂原子的环；R11或R12可以在它们的原子的任一个处与R3所连接的环结合以形成环。
在其一些实施方式中，R的一个或多个H原子用氘(D)取代。
在式1或亚类1-4(亚类5)的一些实施方式中：
X1和X2独立地是键或亚甲基，且X1是N连接的位置的间位或对位；
R是
A是CH或N；
R1是Cl、Br或-CF3；
R3是-N(CH3)S(O)2CH3或-C(O)NHCH3；和
R6是H或甲氧基。
在式1或亚类4或5(亚类6)的一些实施方式中：R9和R10独立地是C0-4烷氧基。
在式1或亚类4-6(亚类7)的一些实施方式中：X1是位于R6间位的亚甲基。
在式1或亚类4-7(亚类8)的一些实施方式中：
A是CH；
X2是键；
R1是-CF3；和
R3是-C(O)NHCH3.
在式1或亚类1(亚类9)的一些实施方式中，权利要求1的化合物或盐，具有式(亚类9)：
Figure BPA00001479300900051
其中R6是H或甲氧基；和
R9和R10独立地是C0-3烷氧基。
在式1或亚类4(亚类10)的一些实施方式中：
X1和X2独立地是键或亚甲基，且X1是氮连接的位置的间位或对位；
R是
Figure BPA00001479300900052
R1是Br、Cl或-CF3；
R4是-x-y-z，其中
x是C4-6环烷基、苯基、吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、或哌嗪基；y不存在、哌啶基、或哌嗪基；和z不存在、被1-2羟基任选取代的C1-3烷基、或z是羟基或-C(O)O-C0-3烷基；或
-x-y-z是C0-6烷氧基、C2-6链烯基、C2-6炔基、或C0-6烷基，每一个被1-2羟基任选地取代；
R5是甲基；和
R6是H或甲氧基。
在式1或亚类10(亚类11)的一些实施方式中：R9和R10独立地是C0-3烷氧基。
在式1或亚类10或11(亚类12)的一些实施方式中：
R4是任选地被羟基取代的C4-6环烷基、任选地被N-甲基取代的哌嗪基、-C(O)O-C0-3烷基或任选地被1-2羟基取代的C1-3烷基。
在式1或亚类10或11(亚类13)的一些实施方式中：
X1是位于R6间位的亚甲基；
X2是键；
R1是-CF3；和
R4是-x-y-z，其中
x是C4-6环烷基、苯基、吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、或哌嗪基；
y不存在；和
z不存在、任选地被1-2羟基取代的C1-3烷基、羟基、或-C(O)O-C0-3烷基。
式1或其任何亚类的一些实施方式中，化合物以基本纯形式的物质存在。
在一些实施方式中，化合物选自本文的任一的实施例或其药学上可接受的盐。
以上每个变量定义包括其任何子集，且式1的化合物包括这种变量或变量子集的任何组合。
在一些方面，本发明包括本文化合物实施例的任一个和其药学上可接受的盐。
本发明包括：化合物和其盐和它们的物理形式，化合物的制备，有用中间体，和药物组合物以及其制剂。
本发明的化合物和权利要求中术语“化合物”包括任何药学上可接受的盐或溶剂合物，和任何无定形或晶体形式，或互变异构体，无论在上下文中是否特定地说明。
本发明包括化合物的异构体。化合物可以具有一个或多个不对称碳原子，可以作为两个或两个以上立体异构体存在。当本发明的化合物含有链烯基或亚链烯基时，几何(顺/反)(或Z/E)异构体是可能的。当化合物例如含有酮基或肟基或芳族部分时，互变异构现象(′互变异构′)可以发生。单个化合物可以显示多种类型的异构。
本发明包括任何立体异构体——即使没有特定地示出、单独地以及混合物，几何异构体和其药学上可接受的盐。当没有明确的立体化学描述或示出化合物或立构中心时，它应该被认为包含所有可能的单独异构体、构型和其混合物。因此，含有立体异构体的混合物的材料样品将被立体异构体的列举或者没有明确立体化学的列举所包含。同样考虑它们是描述化合物的任何顺/反异构体或者互变异构体。
在本发明的范围内包括本发明化合物的所有的立体异构体、几何异构体和互变异构形式，包括显示多种类型的异构的化合物以及它们的一种或多种的混合物。
当式(I)的化合物的互变异构体存在时，本发明的式(I)的化合物包括任何可能的互变异构体和其药学上可接受的盐，除了当具体说明之外。
本发明的化合物不限于含有以它们天然同位素丰度的所有原子的那些。本发明包括其中一个或多个氢、碳或其它原子被它们的不同同位素取代的化合物。这些化合物作为代谢药物动力学研究和结合分析中的研究和诊断工具可以是有用的。化合物或化合物内原子的列举包括同位素(isotopologs)，即，其中化合物或化合物仅关于同位素富集和/或同位素富集的位置中变化的种类。对于非限制性实例，在一些情况中可以期望富集具有氘(D)的一个或多个氢原子或富集具有13C的碳。适合于在本发明的化合物中包含的同位素的其它实例包括氢、氯、氟、碘、氮、氧、磷和硫的同位素。本发明的一些同位素标记的化合物在药物和/或底物组织分布研究中可能是有用的。具有较重同位素如氘的取代可以提供由更大的代谢稳定性产生的某些治疗优点，例如，增加体内半衰期或减小的剂量要求，因此在一些情况下可以是优选地。具有正电子发出的同位素的取代可以在研究受体受体占据(substrate receptor occupancy)的正电子发射断层扫描(PET)研究中有用。
进一步地，化合物可以是无定形的或者可以以各种晶体形式或多晶型物存在或进行制备，包括溶剂合物和水合物。本发明包括以任何纯度级别在本文提供的任何形式。化合物自身的列举意味着不论任何非特定的立体化学、物理形式以及不论是否与溶剂或水结合的化合物。
本发明的化合物可以以非溶剂化和溶剂化形式存在。在本文使用术语“溶剂合物”描述包括本发明的化合物和一种或多种药学上可接受的溶剂分子如乙醇的分子络合物。当溶剂是水时使用术语“水合物”。根据本发明药学上可接受的溶剂化物包括水合物和溶剂合物，其中结晶的溶剂可以是同位素取代的，例如，D2O、d6-丙酮、d 6-DMSO。
在本发明的范围内也包括络合物诸如包合物、药物-宿主包含络合物(drug-hostinclusion complexes)，其中与前述溶剂合物相比，药物和宿主以化学计量或非化学计量的量存在。也包括含有可以是化学计量或非化学计量的量的两种或更多种有机和/或无机成分的药物的络合物。得到的络合物可以是电离的、部分电离或非电离的。
本发明包括本发明化合物的前药，当给与患者时，所述前药可以转化成本发明化合物，例如通过水解裂解。根据本发明的前药例如可以通过用本领域技术人员已知在本领域已知作为‘前-部分’的某些部分取代本发明化合物中存在的合适官能度产生。本发明的特别有利的衍生物和前药是那些：当这些化合物给与患者时增加化合物的生物利用度、增加母体化合物递送到特定的生物腔、增加溶解度以允许通过注射给药、改变代谢或改变排泄速度的化合物。
本发明化合物的药学上可接受盐可以通过化合物的溶液和期望的酸或碱混合在一起容易地制备，视情况而定。盐可以从溶液中沉淀和通过过滤收集，或者可以通过蒸发溶剂进行回收。盐中电离的程度可以从完全电离的变为为几乎非电离的。
是碱的化合物能够与不同的无机和有机酸形成各种不同的盐。可以用于制备这些碱性化合物的药学上可接受的酸式加成盐的酸是形成可接受的酸加成盐的那些。当本发明的化合物是碱时，其对应的盐可以由药学上可接受的无毒的酸便利地制备，包括无机和有机酸。这些酸例如包括醋酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙基磺酸(ethanesulfonic)、甲酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸(isethionic)、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、扑酸(pamoic)、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等等。其他盐是天冬氨酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸钙、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、右旋樟脑磺酸盐(camsylate)、乙二磺酸盐(edisylate)、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡糖醛酸盐(glucuronate)、六氟磷酸盐、羟苯酰苯酸盐(hibenzate)、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、丙二酸盐、硫酸二甲酯(methylsulfate)、萘酸盐、2-萘磺酸盐(2-napsylate)、烟酸盐、乳清酸盐(orotate)、草酸盐、棕榈酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、磷酸盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。
当本发明的化合物是酸时，其相应的盐可以由药学上可接受的碱方便地制备，无机碱和有机碱。衍生自这些无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜(高氧化态和低氧化态)、铁、亚铁、锂、镁、锰(高氧化态和低氧化态)、钾、钠、锌等等的盐。来自药学上可接受的有机碱的盐包括伯胺盐、仲胺盐和叔胺盐，以及环胺盐和取代的胺盐，诸如天然存在和合成的取代胺。可以形成盐的其它药学上可接受的有机碱包括离子交换树脂诸如，例如，精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N′、N′-二苄乙烯二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨乙醇、1，2-乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡胺(methylglucamine)、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等等。其他的例子包括：苄星、二乙醇胺(diolamine)、甘氨酸、葡甲胺和吡酮胺乙醇胺(olamine)。
合成
本发明包括在此描述的化合物、中间体、实例和合成方法。
膦酸酯：
方案1
二烷基膦酸酯的制备可以经过多种方法实现。例如，一种二烷基膦酸酯可以方便地转化成为另一种如在方案1中示出的不同的二烷基膦酸酯。在酸性条件下如浓盐酸下的二烷基膦酸酯的水解提供相应的膦酸。其它酸试剂可以用于实现这种转变，包括但不限于HBr和HBr/HOAc。该转变也可以使用碱性条件实现，例如通过用NaOH/甲醇或者通过使用试剂——诸如但不限于在溶剂丙酮、乙腈、DCM、氯仿和二氧杂环己烷中——处理。在该方案中，X-Y代表芳基、芳烷基或其它部分，如在本文中描述，具有特定的磷基团。具体地，Y对应于式1中的X1。每个R、Rw、Rv表示如在本文描述和限定的磷取代基，诸如在式1中的R9、R10。
方案2
芳基膦酸可以由芳基卤化物/三氟甲磺酸(triflates)在过渡金属催化作用下通过与次膦酸加合物反应、然后用试剂诸如高氯酸盐或过氧化氢氧化(方案2)进行制备。
二烷基膦酸酯水解为膦酸通常经过中间产物烷基氢膦酸酯进行(方案1)，如果该反应在完全转化发生之前停止，那么烷基氢膦酸酯可以被分离。特别是使用碱催化条件有助于中间产物烷基氢膦酸酯的有效分离。
因此获得的膦酸和烷基氢膦酸酯可以通过多个方法在与醇反应之前进行活化以分别提供期望的二烷基膦酸酯或烷基烷基亚膦酸。活化的一种方法包括卤化，例如使用试剂诸如纯的或在合适溶剂诸如DCM和DCE中的草酰氯、亚硫酰氯、氯化磷和三溴化磷。如果期望的，催化的DMF也可以加入混合物中。用醇处理由此产生的膦酸二卤化物提供期望的二烷基膦酸酯。活化的另一种方法包括通过与试剂诸如DCC和PyBOP反应形成‘活化酯’。本领域技术人员将意识到大数量的其它偶联试剂可用于以类似方法活化膦酸。使用Mitsunobu条件例如PPh3/DEAD或等同试剂是活化膦酸/烷基氢膦酸酯系统的进一步方法，当用合适醇处理后其分别提供期望的二烷基膦酸酯或烷基烷基亚膦酸酯。膦酸在烷基醇存在下通过酸催化例如TsOH也可以转化为烷基膦酸酯。
方案3
Figure BPA00001479300900092
二烷基膦酸酯根据方案3中示出的Michaelis-Arbuzov方法也可以制备，通过烷基卤化物或或磺酸酯(例如，Hal＝Br，I，Cl，OMs；Y＝CR7R8)与三烷基亚磷酸酯加热。
方案4
Figure BPA00001479300900101
膦具有P-H的酸酯可以与烷基卤化物或磺酸酯(例如，Hal＝Br，I，Cl，OMs；Y＝CR7R8)在碱存在下在合适溶剂中反应以提供经过SN2-类型化学的P-取代产物，所述碱包括但不限于Na2CO3、K2CO3、NaOH、Cs2CO3、Et3N、DIPEA和DBU，所述溶剂例如乙腈、DMF、二氧杂环乙烷、DMA(方案4)。另外，具有P-H的膦酸酯可以与芳基卤化物或三氟磺酸(例如，Hal＝Cl，Br，I，OTf；Y＝键)在过渡金属催化条件下反应。这些条件的实例包括但不限于Pd2(dba)3/XantPhos/Cs2CO3/二氧杂环乙烷。如同多种Pd(0)或过渡金属催化反应，催化剂、催化剂配体、碱、溶剂和温度对于研究优化这些反应时可能是重要的变量。
亚膦酸酯：
方案5
烷基亚膦酸酯可以通过烷基膦酸酯的以上描述的多个方法进行制备。例如，使用Michaelis-Arbuzov条件，通过烷基二烷氧基亚磷酸酯与烷基卤化物或磺酸酯(例如，Hal＝Br，I，Cl，OMs；Y＝CR7R8)反应。
方案6
Figure BPA00001479300900103
与膦酸酯类似，当与芳基卤化物或三氟甲磺酸(例如，Hal＝Br、I、Cl、OMs；Y＝键)反应时，具有P-H的亚膦酸酯的过渡金属也可以提供衍生的亚膦酸酯。具有P-H的亚膦酸酯与烷基卤化物或磺酸酯(例如，Hal＝Br，I，Cl，OMs；Y＝CR7R8)在碱存在下的反应也可以与膦酸酯一样经过SN2进行(方案6)。
氧化膦：
方案7
Figure BPA00001479300900104
氧化膦可以经过多个方法制备，包括通过二烷基膦酸酯与碳亲核试剂——包括但不限于格利雅(Grignard)试剂——的反应(方案7)。
方案8
Figure BPA00001479300900111
如在膦酸酯和亚膦酸酯情况下，具有P-H的二烷基氧化膦可以与烷基卤化物或磺酸酯(例如，Hal＝Br，I，Cl，OMs；Y＝CR7R8)在碱性条件下或芳基卤化物(例如，Hal＝Br、I、Cl、OTf；Y＝键)在过渡金属催化下反应形成P-取代的衍生物(方案8)。
方案9
Figure BPA00001479300900112
获取氧化膦的其它方法包括用氧化剂诸如但不限于过氧化氢氧化膦(方案9)。
方案10
Figure BPA00001479300900113
另外，二烷基烷氧基膦可以与烷基卤化物或磺酸酯(例如，Hal＝Br，I，Cl，OMs；Y＝CR7R8)反应以通过Michaelis-Arbuzov化学形成氧化膦(方案10)。
方案11
Figure BPA00001479300900114
膦酸酯可以用强碱脱保护、然后用碳亲电子试剂处理在α碳上进行烷基化，其中tBuOK、nBuLi、NaH和LDA是强碱的非限制性实例，碳亲电子试剂例如MeI、DMF和氯甲酸酯(方案11)(Rm和/或Rn可以是甲基)。控制反应组分的化学计量可以提供单或双烷基化产物。另外，顺序地使用碱、亲电子试剂、碱和亲电子试剂#2是有效控制二烷基化的另一种方法。
5-取代的2，4-二氨基嘧啶衍生物：
2，4-二-氨基嘧啶可以通过多种方法合成以提供药理学感兴趣的目标分子。以下是各种方法的非限制性实例，本领域技术人员可以使用它实现在本文档中公开类型的目标分子和实例。
方案12
Figure BPA00001479300900121
商业上可得到的5-取代-2，4-二氯嘧啶(A)可以与苯胺或胺在SNAr反应中直接反应以提供单取代产物Bi和Bii的混合物(方案12)。根据使用的条件和苯胺/胺和X基团的性质，可以形成主要的异构体。在这些情形或在最小区域选择性的条件下，异构体通过使用色谱和/或结晶可以分离(完全或部分地)。每个纯的异构体的结构确定可以通过NMR实验进行，特别是通过使用HMBC实验，其可以揭露在4-取代产物情况下，在C4-NH和C5-C之间的3个H-C键相互关系。可选地，区域异构体(Bi/Bii)的混合物可以与仲苯胺/胺反应以提供产物Ci/Cii的混合物。结构的确定可以通过与通过以上描述的先前方法制备的异构体的光谱数据比较或直接通过实验确定。
除了如上示出的2-和4-氯基团的SNAr置换外，本领域技术人员将意识到其它基团也可以作为在合适条件下可以被胺和苯胺置换的良好的离去基团。可置换基团的实例包括但不限于硫代烷基、烷基磺酰基(alkylsulphonyl)、溴、三氯甲基、氟、磺酰氧基(sulphonyloxy)和N-苯并三唑氧基(benzotriazolyloxy)，并且在每一种情况下2-和4-离去基团可以是相同的或不同的。实际上，在某些情况下优选地是2-和4-可置换的基团是不同的，因为这提供了利用不同离去基团潜能和因此控制SNAr反应的区域化学。
方案13
Figure BPA00001479300900131
获得2-苯胺基、4-苯胺基或2、4-二苯胺基-嘧啶衍生物的另一种方法涉及氨基嘧啶的过渡金属催化芳基化。在典型步骤中，2-或4-氨基嘧啶与芳基、杂芳基溴化物或碘化物在碘化亚铜(I)、乙二胺配体和碳酸钾碱存在下在二氧杂环乙烷中加热。其它通常使用的试剂是Ph2-戊二烯酮-Pd、NaOPh和XantPhos。取决于在5-位的X基团(对应于式1中R1)的性质，这些反应可以在2，4-二氨基嘧啶上进行，并且一个或其它氨基基团的一些优先选择性观察到。Ra可以对应于式1的氨基NH-X2R或前体；Ar-Rb可以对应于式1的取代的苯基；Rc可以对应于式1的氨基或前体；Ar-Rd或HetAr-Rd可以对应于式1的NH-X2R或前体。
除了重新功能化活化的嘧啶系统外，一个人通过嘧啶环自身的构建也可以获得期望的衍生物。
方案14
Figure BPA00001479300900132
例如，合适取代的胍与合适取代的β-甲酰酯、β-(二甲基氨基)丙烯酸酯或β-(烷氧基)丙烯酸酯的反应产生如在以上方案中示出的羟基嘧啶。这些羟基嘧啶可以使用试剂诸如POCl3氯化形成类似于在方案17(Bii)中描述的那些的中间产物。根据需要反应物中的Q’取代可以与式1的最终R1基团(Q)相同或者不同，以使得环化和/或卤化化学是成功的。当Q’与R1不同时，Q’到R1的互变可以通过本领域技术人员已知的多种方法进行，该方法的非限制的清单在该文档中随后进行描述。
方案15
获得合适功能化的嘧啶衍生物的其它方法包括商业可得到的尿嘧啶或硫尿嘧啶的修饰。使用碘甲烷和碱的硫尿嘧啶的S-甲基化提供了在C5位置可以功能化引入Q或Q的前体Q’的中间产物。这种C5-功能化的实例是使用在乙酸中溴、在DMF中N-碘代丁二酰亚胺或在乙酸中N-氯代丁二酰亚胺的卤化，其分别引入C5溴、碘或氯基团。基团诸如CF3可以通过与CF3I在FeSO4、H2O2和DMSO存在下的反应引入。
通过与试剂如POCl3的反应，类似的C5化学也可以使用在尿嘧啶自身和转化为4-氯的(对于硫尿嘧啶衍生物)的衍生物或2，4-二氯嘧啶衍生物上。
官能团互变：
在目标分子和实例中出现的不同官能度(例如，在嘧啶系统的5-位、或者在侧基N-芳基或N-苄基基团上的X)可以通过原材料的合适选择引入，或当最终的官能度通过该方法不能直接得到，或者当这种官能度在随后的化学期间可以被折衷以构建最终的分子时，可以使用可选的官能度而通过方法随后转变为最终期望的官能度，并且在随后的点上，本领域技术人员容易确定。
例如，这种转变的非穷尽的列举包括以下转化：Ar/HetAr-OMe→Ar/HetAr-OH(BBr3)，Ar/HetAr-NH2→Ar/HetAr-Cl(NaNO2，CuCl)，Ar/HetAr-Br→Ar/HetAr-CN(Pd2(dba)3，Zn(CN)2，DPPF)，Me→CO2H(KMnO4)，CO2H→CO2Me(甲醇，H2SO4)，OH→O烷基(烷基卤化物，碱)，CO2H→CONR’R”(EDC，HOAt，DIPEA，HNR’R”)，Ar/HetAr-Br→Ar/HetAr-CO2Me(Pd2(dba)3，DPPF，CO(g)，甲醇)，Br→CO2H(tBuLi，CO2)，Ar/HetAr-H→Ar/HetAr-Br(NBS)，CN→CO2H(浓H2SO4)，Ar/HetAr-Br→Ar/HetAr-NR’R”(Pd2(dba)3，DPPF，HNR’R”)，Ar/HetAr-I/Br→Ar/HetAr-CF3(CF3CO2Na，CuI，NMP)。涉及生成苯胺和苄胺合成子生成的其它官能团互变(FGI)实例在以下示出，所述合成子用于2，4-二氯嘧啶或具有其它可置换的离去基团的嘧啶的SNAr化学。
方案16
Figure BPA00001479300900151
如在方案16中示出，硝基或叠氮基苯在一定范围的条件下可以还原为期望的苯胺化合物。典型地，在Pd/C催化剂存在下在溶剂诸如甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的氢化将产生期望的产物。在叠氮还原的情况下，可以使用具有Ph3P的斯托丁格条件。多种苯胺前体是商业可得到的，用于转化为苯胺自身。N-酰基衍生物诸如酰胺在酸性或碱性条件下可以被水解以提供苯胺。在氨基甲酸酯情况下，例如叔丁氧羰基(BOC)保护的苯胺，酰基基团可以在溶剂诸如二氧杂环乙烷中用HCl除去或者通过使用在DCM中的TFA。FMOC保护的苯胺需要碱性条件——典型地是在DMF中哌啶——除去酰基部分。
当R是吸电子基团和/或当芳香系统是-缺乏的杂环时，氟(或其它卤素或三氟甲磺酸)——理想地结合至所述氟——可以在SNAr条件下用氨或氨等同物或前体置换。
芳基或杂芳基卤化物和三氟磺酸也可以在过渡金属催化下与氨等同物或前体反应以允许引入氮官能性。本领域技术人员将意识到在大量文献中引用的众多催化剂、配体、碱和溶剂，并且它们是商业可获得的用于这种转化。
方案17
Figure BPA00001479300900161
苄胺作为在SNAr反应中与2，4-二氯嘧啶或具有其它可置换2-和4-离去基团的嘧啶也可以经过多种不同方法制备。一些更通常使用的路径的一些实例在方案22中示出。伯酰胺可以用还原剂诸如LiAlH4和硼烷络合物还原为目标苄胺；醛在还原剂诸如NaCN(BH3)和Na(OAc)3BH存在下用氨等同物进行还原氨化；苄基卤化物用氨等同物或前体进行典型的SN2置换，而苄腈可以用多种还原剂还原，阮内镍和LiAlH4是所述还原剂的非限制性实例。
从其它烷基膦酸酯合成烷基(4-氨基苄基)膦酸酯的实例：
方案18
Figure BPA00001479300900162
二烷基(4-氨基苄基)膦酸酯的实例可以根据方案18制备。例如，商业可得到的二乙基(4-硝基苄基)膦酸酯I使用浓盐酸可以水解为相应的膦酸II。该酸可以用草酰氯转化为膦酸二氯化物，然后与烷基醇反应以提供二烷基膦酸酯IV。硝基可以在钯催化剂存在下通过多种方法包括氢化进行还原以提供二烷基(4-氨基苄基)膦酸酯V。
经过Michaelis-Arbuzov化学合成二烷基(3-氨基苄基)膦酸酯的实例
方案19
Figure BPA00001479300900171
二烷基苄基膦酸酯可以根据Michaelis-Arbuzov化学制备，通过加热三烷基亚磷酸酯VI与1-溴甲基-3-或4-硝基苯VII直接提供二烷基(3-或4-硝基苄基)膦酸酯VIII(方案19)。硝基可以本领域技术人员已知的各种条件下进行还原——包括但不限于在木碳上的钯存在下的催化氢化——以生成二烷基(3-或4-氨基苄基)膦酸酯IX。
经过Pd(0)偶联化学合成二烷基(3-和4-氨基苯基)膦酸酯的实例：
方案20
Figure BPA00001479300900172
二烷基3-或4-氨基苯基膦酸酯可以如方案20中示出就行制备。对或间溴硝基苯XI与二乙基膦酸酯X的钯催化的反应提供二乙基3-或4硝基苯基膦酸酯XII。这些膦酸酯可以用浓盐酸水解为响应的膦酸XIII，然后用亚硫酰氯处理生成膦酸二氯化物XIV。这些二氯化物与醇反应提供二烷基3-或4-硝基苯基膦酸酯XV，其通过氢化可以被还原成为相应苯胺。
经过Michaelis-Arbuzov化学合成烷基(3-和4-氨基苄基)烷基亚膦酸酯的实例：
方案21
烷基亚膦酸酯中间产物的实例可以根据方案21使用Michaelis-Arbuzov化学就行制备例如，对-或间硝基苄基溴XVIII可以与纯的二乙氧基甲基膦XVII(即，R＝Et，Rw＝Me)反应提供乙基甲基(4-或3-硝基苄基)亚膦酸酯XIX。生成的硝基物质可以通过各种方法包括在钯催化剂存在下的氢化还原以提供合适的氨基苄基亚膦酸酯XX，在这种情况下是乙基(3-或4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯。
经过二烷基膦酸酯合成烷基氢膦酸酯和膦酸的实例：
方案22
Figure BPA00001479300900182
如在方案22中示出，烷基氢膦酸酯XXI和膦酸XXII可以由相应的二乙基膦酸酯用浓盐酸通过水解合成。在完全水解发生之前停止该反应允许通过色谱技术例如制备HPLC分离烷基氢膦酸酯和膦酸。
通过Michaelis-Arbuzov化学合成二烷基(3-和4-氨基苄基)氧化膦的实例：
方案23
Figure BPA00001479300900183
二烷基苄基氧化膦可以根据方案23通过二烷基膦氯化物XXIII如二甲基氯化膦与醇盐如乙醇钠的反应形成中间产物烷基二烷基氧膦XXIV就行制备，在这个实例中是乙基二甲基氧膦。这个中间产物氧膦可以在不分离或不纯化下情况下与苄基卤化物例如3-或4-硝基苄基溴化物在升高温度下利用Michaelis-Arbuzov化学进行反应，以提供期望的二烷基苄基氧化膦XXV，在这种情况下为二甲基(3-或4-硝基苄基)氧化膦。该实例的硝基可以使用不同条件还原，例如，在活性碳上钯催化剂存在下的氢化提供二烷基(3-和4-氨基苄基)氧化膦XXVI。
经过Pd(0)介导的偶联化学合成二烷基(3-和4-氨基苯基)氧化膦的实例
方案24
Figure BPA00001479300900191
二烷基(3-和4-氨基苯基)氧化膦可以如方案24中示出进行制备。二乙基膦酸酯XXVII与烷基镁溴化物(例如，甲基溴化镁)在0℃至室温的反应提供二烷基氧化膦XXVIII(例如，二甲基氧化膦)，其可以发生与3-或4-硝基碘苯XXIX钯催化的偶联，以生成二烷基3-或4-硝基苯基氧化膦XXX(例如，二甲基3-或4-硝基苯基氧化膦)。硝基可以通过多个方法还原，包括催化氢化，以提供期望的苯胺中间产物XXXI。
二烷基苄基膦酸酯的二烷基化的合成实例：
方案25
Figure BPA00001479300900192
通过与强碱反应——其中LDA是非限制性实例，然后引入合适的烷基卤化物诸如碘甲烷，二烷基苄基膦酸酯诸如二乙基(4-硝基苄基)膦酸酯I可以在苄型碳进行单烷基化。因此形成的单烷基化产物XXXII通过用氢化钠脱保护和与烷基卤化物诸如碘甲烷反应可以在苄型碳进行第二次烷基化，以生成衍生物XXXIII。如在该方案中示出的情况中，硝基衍生的产物经过方法诸如催化氢化可以还原为相应的苯胺XXXIV和XXXV。
2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮衍生物的合成实例：
方案26
Figure BPA00001479300900201
氨基内酰胺衍生物可以根据方案26制备。2-甲基-6-硝基苯甲酸甲酯可以用NBS在苄型位置溴化以提供衍生物衍生物XXXVI。该酯可以用甲胺环化以生成硝基内酰胺XXXVII，其可以还原为苯胺衍生物XXXVIII。在低温溴化XXXVIII提供7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮XXXIX。该物质可以与4-氯嘧啶衍生物反应，然后进行本领域技术人员已知的化学，其将溴官能度转化为其它有用基团，其中烷氧基、烷基、芳基、杂芳基、杂环基和环烷基是非限制性实例。
合成2-取代的N-甲基-N-[3-({[5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基甲基)吡啶-2-基]甲磺酰胺的步骤实例：
例如，N-[3-({[2-({4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900202
在二异丙基乙胺存在下，2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶XL与N-[3-(氨基甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺(WO2007/072158，WO2008/115369)反应提供N-[3-({[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺XLIa和其区域异构体N-[3-({[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺XLIb的溶液。在0℃较大规模搅拌时，纯的4-取代异构体XLIa的沉淀出现。N-[3-({[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺的纯的混合物的样品与苯胺类诸如4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺在TFA和TFE存在下、在微波照射下反应生成2-取代-甲基-N-[3-({[5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]甲磺酰胺(例如，N-[3-({[2-({4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺，实施例10)。
例如，二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(实施例1)
Figure BPA00001479300900211
在二异丙基乙胺存在下，2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶XL与N-[3-(氨基甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺(WO2007/072158，WO2008/115369)反应提供N-[3-({[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺和其区域异构体N-[3-({[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺XLIa/XLIb的混合物。该混合物与苯胺类诸如商业可得的二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯在TFA和TFE存在下、在微波条件下反应生成2-取代N-甲基-N-[3-({[5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]甲磺酰胺和通过制备HPLC可分离的区域异构体，以提供例如二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯，实施例1。
2-取代N-甲基-2-{[5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}苯甲酰胺的合成步骤的实例：
例如，二乙基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例20)
Figure BPA00001479300900221
2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶XL与商业可得的2-氨基-N-甲基-苯甲酰胺和二异丙基乙胺在室温过夜反应提供2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺和2-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(XLIIIa/XLIIIb)的混合物。用二氯甲烷研制该混合物提供期望的4-取代产物XLIIIa的纯的样品。浓缩母液和在二氧化硅上通过色谱使用二氯甲烷中5％EtOAc作为洗脱液进行纯化分离较小极性物质进一步提供纯的4-取代异构体加上异构体的混合物，如果需要，所述异构体可以进一步进行色谱。纯的2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺XLIIIa与苯胺类诸如二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯在TFA和TFE存在下、在微波照射下生成期望的产物(例如，二乙基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯，实施例20)。
合成2-取代N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺的步骤实例：
例如，二乙基(4-{[4-{[3-(甲磺酰)苄基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯，实施例25
Figure BPA00001479300900222
2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶XL与商业可得的1-[3-(甲磺酰)苯基]甲胺和二异丙基乙胺在0℃过夜反应提供2-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺和4-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺XLIVa/XLIVb。该粗混合物由二氯甲烷结晶提供纯的、未取代的2-取代异构体XLIVb。母液在使用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脱硅胶上进行色谱生成进一步纯化样品2-取代异构体加上期望的2-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺XLIVa的样品。该后者异构体与苯胺类诸如二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯在TFA和TFE存在下、在微波照射下生成期望产物(例如，二乙基(4-{[4-{[3-(甲磺酰)苄基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯，实施例25)。
合成2-取代N-[3-(甲基亚磺酰基)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺的步骤实例：
例如，二乙基(4-{[4-{[3-(甲基亚磺酰基)苄基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯，实施例47
Figure BPA00001479300900231
2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶XL与1-[3-(甲基亚磺酰基)苯基]甲胺盐酸盐(Bioorg.Med.Chem.Lett.2005，15，4136-4142)和二异丙基乙胺在0℃反应过夜，提供2-氯-N-[3-(甲基亚磺酰基)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺和4-氯-N-[3-(甲基亚磺酰基)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺XLVa/XLVb的混合物。纯的、期望的4-取代异构体XLVa通过在用1∶3己烷∶乙酸乙酯洗脱的硅胶上进行色谱分离为非极性成分。该后者异构体与苯胺类诸如二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯在TFA和TFE存在下、在微波条件下反应生成期望的产物(例如，二乙基(4-{[4-{[3-(甲基亚磺酰基)苄基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯，实施例47)。
合成2-{[5-氯溴-2-(芳氨基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺的步骤实例：
Figure BPA00001479300900241
5-氯和5-溴-2，4-二氨基-衍生物嘧啶可以通过先前描述用于5-三氟甲基变体那些相关的化学进行制备，例如，如在方案12中使用5-氯或5-溴变体的XLIIIa，即分别是LVIa和XLVIIa。
方案27
根据以下示出的方法经过对应于式1的R的前体获得本发明的各种不同的化合物，其中R的非限制性情况可以是：
Figure BPA00001479300900242
初始的中间产物可以是R的任何溴芳基或杂芳基前体，R可以在任何阶段连接至嘧啶，如在本文描述通过胺。通用的稠环表述任选取代的环或其它取代基，如以上对于R描述。
方案27的反应1描述用合适的硼烷或硼酸盐——诸如在本文实施例63和其它实施例中描述——、或任何适用的其变体在Suzuki条件下钯交联到任何芳基或杂芳基。
反应2、3和10也描述用于实现不同环状取代基中的进一步多样性的Pd偶联物。初始的溴化合物可以如在反应2中用合适功能化的硼酸盐处理，如在化合物232F中。在合适的情况中，得到的化合物可以通过氢化还原，如在化合物232E中。可选地，试剂的官能度可以逆转，如在反应3和10中，在化合物205E中示例。R′和R″代表如在本文考虑的任何取代基。
反应3的硼酸盐产物可以如在反应4中功能化，在诸如实施例205中的条件下通过用KHF2和然后烷基化处理。
根据反应5-7，氨基烷基和酰胺官能度可以被引入到基团R中。如在化合物109E中描述，合适的芳基溴化物可以与苯乙基硼酸偶联，然后还原氨基化或酰胺偶联，如在实施例116和117中。
根据反应的修饰可以用于引入官能团的不饱和炔间隔基，如在实施例75-77中，经过Pd介导的与炔偶联。
进一步，溴可以用胺替代，例如在实施例199和208中。当然，本领域技术人员将理解化学是通用的，且实施例不是限制的。
Figure BPA00001479300900261
制备
二乙基(3-氨基苄基)膦酸酯
3-硝基苄基溴(648mg，3.00mmol)和三乙膦(0.669mL，3.90mmol)的混合物在140℃、在氮气下搅拌16h。在减压下除去过量的三乙膦，且残留物通过在用二氯甲烷中2％甲醇洗脱的硅胶上色谱就行纯化，以提供二乙基(3-硝基苄基)膦酸酯，0.80g(收率：98％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.27(t，J＝6.8Hz，6H)，3.43(d，J＝22.0Hz，2H)，4.08(q，J＝6.8Hz，4H)，7.58(t，J＝8.0Hz，1H)，7.72(d，J＝7.6Hz，1H)，8.15(d，J＝8.4Hz，1H)，8.22(d，J＝2.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 273.99(MH+)。HPLC：tR＝2.92min(ZQ3，极性_5min)。
如以上描述制备的二乙基(3-硝基苄基)膦酸酯在甲醇(5mL)中溶液在10％Pd/C(100mg)存在下氢化过夜。反应混合物过滤，且滤液在真空浓缩以提供期望的产物二乙基(3-氨基苄基)膦酸酯(0.690g；收率：95％)，其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.24(t，J＝7.2Hz，6H)，3.04(d，J＝21.6Hz，2H)，3.66(s，br，2H)，4.01(q，J＝7.2Hz，4H)，6.57(d，J＝8.8Hz，1H)，6.67-6.68(m，2H)，7.08(t，J＝7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 244.00(MH+)。HPLC：tR＝2.24min(ZQ3，极性_5min)。
二乙基(2-氨基苄基)膦酸酯
根据描述的步骤制备二乙基(3-氨基苄基)膦酸酯。以97％收率获得作为褐色油的中间产物二乙基(3-硝基苄基)膦酸酯。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.23(t，J＝7.2Hz，6H)，3.79(d，J＝22.8Hz，2H)，4.01(q，J＝7.2Hz，4H)，7.48-7.53(m，2H)，7.64(t，J＝8.0Hz，1H)，7.99(d，J＝8.0Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 273.99(MH+)。HPLC：tR＝2.89min(ZQ3，极性_5min)。
以94％收率获得二乙基(2-氨基苄基)膦酸酯，其不纯化直接在进一步化学中使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.24(t，J＝7.2Hz，6H)，3.12(d，J＝20.8Hz，2H)，3.98(q，J＝7.2Hz，4H)，4.25(s，br，2H)，6.70-6.75(m，2H)，7.01-7.08(m，2H)。MS(ES+)：m/z 244.00(MH+)。HPLC：tR＝2.63min(ZQ3，极性_5min)。
二乙基[1-(4-氨基苯基)乙基]膦酸酯
在THF中的2M LDA(1.83mL，3.66mmol)在氮气下逐滴加入到在THF(10mL)中、-78℃的二乙基(4-硝基苄基)膦酸酯(1.00g，3.66mmol)的搅拌溶液。在1小时后，碘代甲烷(0.456mL，7.32mmol)逐滴加入并且混合物在-78℃搅拌30分钟，然后使其在3-4h期间升温到室温。缓慢加入水(10mL)，然后加入EtOAc(20mL)。层被分开，然后水相用EtOAc(3x 20mL)萃取。有机相被合并、干燥(MgSO4)、在真空浓缩，并且残留物通过用己烷中的10％EtOAc洗脱的硅胶上色谱就行纯化，提供180mg纯的二乙基[1-(4-硝基苯基)乙基]膦酸酯(收率：17％)以及680mg的二乙基(4-硝基苄基)膦酸酯和二乙基[2-(4-硝基苯基)丙-2-基]膦酸酯的混合物。
二乙基[1-(4-硝基苯基)乙基]膦酸酯：1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.19(t，J＝7.2Hz，3H)，1.29(t，J＝7.2Hz，3H)，1.57(d，J＝7.2Hz，1.5H)，1.61(d，J＝7.2Hz，1.5H)，3.52(q，J＝7.6Hz，0.5H)，3.57(q，J＝7.6Hz，0.5H)，3.93-4.00(m，2H)，4.06-4.10(m，2H)，7.60(dd，J＝2.4，8.8Hz，2H)，8.20(dd，J＝1.2，8.8Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 288.09(MH+)。HPLC：tR＝1.36min(UPLC TOF，极性)。
在甲醇(5mL)中的二乙基[1-(4-硝基苯基)乙基]膦酸酯(180mg)溶液在10％Pd/C(50mg)存在下氢化4h。过滤反应混合物，且滤液在真空浓缩提供150mg期望的二乙基[1-(4-氨基苯基)乙基]膦酸酯(收率：94％)。其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.16(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)，1.50(d，J＝7.6Hz，1.5H)，1.53(d，J＝7.6Hz，1.5H)，3.01-3.10(m，1H)，3.76-3.82(m，1H)，3.89-3.93(m，1H)，3.97-4.03(m，2H)，6.66-6.68(m，2H)，7.12-7.15(m，2H)。MS(ES+)：m/z 258.04(MH+)。HPLC：tR＝2.20min(ZQ3，极性_5min)。
二乙基[2-(4-氨基苯基)丙-2-基]膦酸酯
THF(5mL)中的二乙基[1-(4-硝基苯基)乙基]膦酸酯(206mg，0.717mmol)的溶液在室温、氮气下用NaH(在矿物油中60％，143mg，3.58mmol)分批处理。得到的混合物搅拌5min，然后逐滴加入碘代甲烷(0.268mL，4.30mmol)，并且混合物进一步搅拌5h。水(10mL)缓慢加入，然后加入EtOAc(20mL)。层被分离，和水相用EtOAc(3x 20mL)萃取。有机相被合并、干燥(MgSO4)、在真空浓缩，并且残留物通过在用二氯甲烷中的5％甲醇洗脱的硅胶色谱上纯化，提供103mg期望的二乙基[2-(4-硝基苯基)丙-2-基]膦酸酯(收率：48％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.22(t，J＝7.2Hz，6H)，1.64(s，3H)，1.69(s，3H)，3.94-4.01(m，4H)，7.78(dd，J＝2.4，9.2Hz，2H)，8.21(dd，J＝0.8，8.8Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 302.11(MH+)。HPLC：tR＝1.44min(UPLC TOF，极性)。
如上描述制备的二乙基[2-(4-硝基苯基)丙-2-基]膦酸酯(103mg)在甲醇(5mL)中10％Pd/C(50mg)存在下氢化4h。过滤混合物，然后滤液在真空中浓缩提供92.5mg期望的二乙基[2-(4-氨基苯基)丙-2-基]膦酸酯(收率：99％)，其不纯化在进一步化学中使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.20(t，J＝7.2Hz，6H)，1.54(s，3H)，1.59(s，3H)，3.65(s，br，2H)，3.80-3.94(m，2H)，6.66(d，J＝8.8Hz，2H)，7.32(dd，J＝2.4，8.8Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 272.02(MH+)。HPLC：tR＝2.45min(ZQ3，极性_5min)。
3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺
THF(0.7mL)中的二甲基氯化膦(250mg，2.60mmol)溶液逐滴加入到在0℃、THF(0.8mL)中的乙醇钠(194mg，2.85mmol)的搅拌悬浮液。得到的混合物在室温搅拌30min。然后用1-(溴甲基)-3-硝基苯(560mg，2.59mmol)处理。混合物然后在氮气下、100℃在密封管中搅拌2h，在真空浓缩，然后残留物通过在用二氯甲烷中5％甲醇洗脱的硅胶上色谱就行纯化，提供153mg的二甲基(3-硝基苄基)氧化膦(收率：28％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.53(d，J＝12.4Hz，6H)，3.27(d，J＝14.0Hz，2H)，7.55(t，J＝7.6Hz，1H)，7.71(d，J＝7.6Hz，1H)，8.11(d，J＝2.0Hz，1H)，8.16(dd，J＝0.8，7.2Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 214.00(MH+)。HPLC：tR＝2.16min(ZQ3，极性_5min)。
如以上描述生产的二甲基(3-硝基苄基)氧化膦(153mg)在甲醇(5mL)中10％Pd/C(100mg)存在下氢化过夜。过滤混合物，然后滤液在真空中浓缩，提供128mg期望的3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺(收率：96％)，其不纯化在进一步化学中使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.44(d，J＝12.8Hz，6H)，3.06(d，J＝15.6Hz，2H)，3.81(s，br，2H)，6.55-6.58(m，3H)，7.08(t，J＝7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z184.02(MH+)。HPLC：tR＝0.58和0.90min(ZQ3，极性_5min).
4-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺
根据以上描述的3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺步骤、使用1-(溴甲基)-4-硝基苯进行制备。以21％收率获得硝基中间产物二甲基(4-硝基苄基)氧化膦。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.51(d，J＝12.8Hz，6H)，3.27(d，J＝14.4Hz，2H)，7.47(dd，J＝2.4，8.8Hz，2H)，8.22(d，J＝8.4Hz，2H)。MS(ES+)：m/z214.00(MH+)。HPLC：tR＝2.17min(ZQ3，极性_5min)。
以95％收率获得4-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺，和其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.41(d，J＝12.4Hz，6H)，3.05(d，J＝15.2Hz，2H)，3.74(s，br，2H)，6.65(d，J＝7.2Hz，2H)，6.99(dd，J＝2.0，8.0Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 184.01(MH+)。HPLC：tR＝0.56和0.75min(ZQ3，极性_5min)。
3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺
根据以上描述的3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺步骤使用二乙基氯化膦进行制备。以80％收率获得硝基中间产物二乙基(3-硝基苄基)氧化膦。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.13(t，J＝7.6Hz，3H)，1.17(t，J＝8.0Hz，3H)，1.73-1.85(m，4H)，3.40(d，J＝13.2Hz，2H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，8.16(d，J＝8.0Hz，1H)，8.23(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z242.01(MH+)。HPLC：tR＝2.45min(ZQ3，极性_5min)。
以97％收率获得苯胺衍生物3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺，且其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.12-1.20(m，6H)，1.62-1.71(m，4H)，3.03(d，J＝14.4Hz，2H)，3.72(s，br，2H)，6.56-6.62(m，3H)，7.08(t，J＝7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 212.02(MH+)。HPLC：tR＝1.62min(ZQ3，极性_5min)。
3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺
根据3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺的以上描述步骤、使用二乙基氯化膦和1-(溴甲基)-4-硝基苯进行制备。以70％收率获得硝基中间产物二乙基(4-硝基苄基)氧化膦。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.13(t，J＝7.6Hz，3H)，1.17(t，J＝8.0Hz，3H)，1.74-1.84(m，4H)，3.40(d，J＝13.6Hz，2H)，7.55(dd，J＝1.6，8.8Hz，2H)，8.21(d，J＝8.4Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 241.99(MH+)。HPLC：tR＝2.45min(ZQ3，极性_5min)。
以97％收率获得苯胺衍生物4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺，且其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.12-1.20(m，6H)，1.59-1.68(m，4H)，3.02(d，J＝14.4Hz，2H)，6.64(d，J＝8.8Hz，2H)，7.02(dd，J＝1.6，8.0Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 212.02(MH+)。HPLC：tR＝1.14min(ZQ3，极性_5min).
3-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯胺
根据以上描述制备3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺的步骤、使用二丙-2-基氯化膦(dipropan-2-ylphosphinous cloride)进行制备。
以75％收率获得硝基中间产物(3-硝基苄基)(二丙-2-基)氧化膦。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.13-1.21(m，12H)，2.08-2.18(m，2H)，3.42(d，J＝11.6Hz，2H)，7.58(t，J＝8.0Hz，1H)，7.78(d，J＝7.2Hz，1H)，8.14(d，J＝8.0Hz，1H)，8.29(d，J＝1.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 270.04(MH+)。HPLC：tR＝2.74min(ZQ3，极性_5min).
以91％收率获得苯胺衍生物3-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯胺，且其不纯化在进一步化学中使用。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.12-1.19(m，12H)，2.05-2.13(m，2H)，3.12(d，J＝12.8Hz，2H)，6.60-6.70(m，3H)，7.03(t，J＝7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 240.04(MH+)。HPLC：tR＝2.07min(ZQ3，极性_5min)。
4-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯胺
根据以上描述步骤制备3-[(二甲基磷酰基)甲基]的步骤、使用二丙-2-基氯化膦基和1-(溴甲基)-4-硝基苯苯胺进行制备。以85％收率获得硝基中间产物(4-硝基苄基)(二丙-2-基)氧化膦。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.14-1.21(m，12H)，2.08-2.18(m，2H)，3.41(d，J＝12.8Hz，2H)，7.61(dd，J＝2.0，8.8Hz，2H)，8.19(d，J＝8.8Hz，2H)。MS(ES+)：m/z270.04(MH+)。HPLC：tR＝2.74min(ZQ3，极性_5min)。
以92％收率获得苯胺衍生物4-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯胺，且其不纯化在进一步化学中使用。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.10-1.17(m，12H)，2.02-2.10(m，2H)，3.10(d，J＝12.4Hz，2H)，6.69(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(dd，J＝2.0，8.0Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 240.04(MH+)。HPLC：tR＝1.91min(ZQ3，极性_5min).
二甲基氧化膦
二乙基亚磷酸酯(1.29mL，10mmol)缓慢地逐滴加入到0℃、THF中的甲基溴化镁(1.4M，21.4mL，30mmol)的溶液。在室温搅拌5h后。小心地加入饱和碳酸氢钠(10mL)水溶液，然后加入甲醇(10mL)。通过过滤除去产生的白色固体，然后滤液在真空中浓缩以提供为透明油的期望的二甲基氧化膦(0.45g，收率：58％)。在随后化学中使用之前，该物质通过使用甲苯共沸除去水进一步干燥。
1H-NMR(D2O，400MHz)：δ＝1.68(dd，J＝4.0，14.4Hz，6H)，7.09(dq，J＝4.0，489.2Hz，1H)。
4-(二甲基磷酰基)苯胺
1-碘-4-硝基苯(90mg，0.36mmol)、二甲基氧化膦(29.2mg，0.38mmol)、双(二亚苄基丙酮)钯(3.31mg，0.0036mmol)、XantPhos(6.27mg，0.0108mmol)和Cs2CO3(165mg，0.506mmol)在干燥的二氧杂环乙烷(0.4mL)中的脱气悬浮液在密封管中90℃加热4h。过滤冷却的混合物，滤液在真空中浓缩，并且残留物在用二氯甲烷中的5％甲醇洗脱的硅胶上进行色谱，提供26mg的二甲基(4-硝基苯基)氧化膦(收率：36％)。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.86(d，J＝13.6Hz，6H)，8.06(dd，J＝8.8，10.8Hz，2H)，8.38(dd，J＝1.6，8.8Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 199.96(MH+).HPLC：tR＝1.96min(ZQ3，极性_5min)。
如上描述生产的二甲基(4-硝基苯基)氧化膦)在甲醇(5mL)中10％Pd/C(15mg)存在下氢化2h。然后过滤混合物，和滤液在真空中浓缩，产生19mg期望的4-(二甲基磷酰基)苯胺(收率：86％)，其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.67(d，J＝12.8Hz，6H)，4.11(s，br，2H)，6.73(dd，J＝2.0，8.4Hz，2H)，7.48(dd，J＝8.4，11.2Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 170.04(MH+)。HPLC：tR＝1.23min(ZQ3，极性_5min)。
3-(二甲基磷酰基)苯胺
根据以上描述用于4-(二甲基磷酰基)苯胺的步骤、使用1-碘-3-硝基苯进行制备。以27％收率获得硝基中间产物二甲基(3-硝基苯基)氧化膦)。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.87(d，J＝13.6Hz，6H)，7.83(dt，J＝2.4，7.6Hz，1H)，8.19(t，J＝8.8Hz，1H)，8.45(d，J＝8.0Hz，1H)，8.66(dt，J＝1.6，12.0Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 199.96(MH+)。HPLC：tR＝2.06min(ZQ3，极性_5min)。
以96％收率获得苯胺衍生物3-(二甲基磷酰基)，且其不纯化在进一步化学中使用。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.69(d，J＝12.8Hz，6H)，3.91(s，br，2H)，6.81(dt，J＝1.2，8.0Hz，1H)，6.97(dd，J＝7.6，11.6Hz，1H)，7.12(dt，J＝2.0，13.2Hz，1H)，7.23-7.28(m，1H)。MS(ES+)：m/z 170.02(MH+)。HPLC：tR＝1.27min(ZQ3，极性_5min).
二乙基(4-氨基苯基)膦酸酯
Pd(PPh3)4(3.0g，25mmol)、对-溴硝基苯(50g，250mmol)、二乙基膦酸酯(51.5g，370mmol)和三乙胺(50g，500mmol)在乙醇中(1.5L)的混合物脱气3次，然后搅拌回流过夜。
过滤生成的混合物，滤液在真空中浓缩，并且残留物用石油醚∶EtOAc 5∶1洗脱的硅胶上进行色谱，提供60g的二乙基(4-硝基苯基)膦酸酯(收率：94％)。
二乙基(4-硝基苯基)膦酸酯(150mg，0.58mmol)、EtOH(40ml)和10％Pd/C(30mg)的混合物在50psi的氢压下40℃氢化6h。在冷却至室温后，过滤反应混合物，并且滤液在真空中浓缩，提供130mg期望的二乙基(4-氨基苯基)膦酸酯(收率：98％)，其不纯化在进一步化学中直接使用。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.17-1.27(m，6H)，3.91-4.07(m，4H)，6.62(dd，J＝3.6，8.4Hz，2H)，7.51(dd，J＝8.4，12.8Hz，2H)。MS：m/z 230.05[MH+]。
二乙基(3-氨基苯基)膦酸酯
根据以上描述用于二乙基(4-硝基苯基)膦酸酯的步骤、使用间溴硝基苯制备二乙基(3-硝基苯基)膦酸酯(收率：49％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.35(t，J＝6.8Hz，6H)，4.10-4.23(m，4H)，7.68(m，1H)，8.15(m，1H)，8.39(m，1H)，8.76-8.75(d，1H)。
二乙基(3-硝基苯基)膦酸酯(520mg，2.0mmol)和SnCl2(1.8g，8mmol)在乙醇(50mL)中的溶液加热回流12h。然后过滤混合物，并且滤液在真空中浓缩以产生粗产品，其通过制备HPLC纯化提供320mg的期望的二乙基(3-氨基苯基)膦酸酯(收率：69％)。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.20(m，6H)，3.91-4.00(m，4H)，5.39(s，br，2H)，6.73-6.81(m，2H)，6.91(dd，J＝1.6，16.4Hz，1H)，7.11-7.16(m，1H)。MS：m/z230.10[MH+].
(4-硝基苯基)膦酸
二乙基(4-硝基苯基)膦酸酯(60g，230mmol)在250mL的浓HCl(aq)中溶液搅拌回流过夜。过量HCl在减压下除去，并且产物不纯化在进一步化学中直接使用(46.8g，收率：100％)。
(3-硝基苯基)膦酸
使用二乙基(3-硝基苯基)膦酸酯根据描述用于(4-硝基苯基)膦酸的步骤就行制备(收率：76％)。
(4-硝基苯基)膦酰二氯
在SOCl2(30ml)中的(4-硝基苯基)膦酸(1.0g，5mmol)的溶液搅拌回流5h。反应混合物在减压下浓缩至干燥，并且分离的粗(4-硝基苯基)膦酰二氯不纯化在进一步化学中直接使用。
(3-硝基苯基)膦酰二氯
根据描述用于(4-硝基苯基)膦酰二氯的步骤、使用(3-硝基苯基)膦酸就行制备。二丙-2-基(4-硝基苯基)膦酸酯
蒸馏和干燥的丙-2-醇(20ml)和三乙胺(1.0g，10mmol)的溶液在0℃逐滴加入(4-硝基苯基)膦酰二氯(1.2g，5mmol)。得到的混合物搅拌回流过夜，过滤混合物，并且滤液在减压下浓缩产生粗产物，其通过在用石油醚∶EtOAc：5∶1洗脱的二硅胶上就行色谱纯化，提供360mg期望的二丙-2-基(4-硝基苯基)膦酸酯(收率：25％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.18(d，J＝6.0Hz，6H)，1.33(d，J＝6.4Hz，6H)，4.65-4.73(m，2H)，7.93(dd，J＝8.8，12.8Hz，2H)，8.22(dd，J＝3.2，8.8Hz，2H)。
二丙-2-基(3-硝基苯基)膦酸酯
根据描述用于二丙-2-基(4-硝基苯基)膦酸酯的步骤、使用(3-硝基苯基)膦酰二氯就行制备(收率：41％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.19(d，J＝6.0Hz，6H)，1.34(d，J＝6.4Hz，6H)，4.68-4.73(m，2H)，7.60(m，1H)，8.08(dd，J＝7.6，12.8Hz，1H)，8.32(d，J＝8.4Hz，1H)，8.57(d，J＝14.0Hz，1H)。
根据以上描述用于二丙-2-基(4-硝基苯基)膦酸酯和二丙-2-基(3-硝基苯基)膦酸酯的步骤、使用相应的膦酰二氯和醇制备以下两个膦酸酯。
5，5-二甲基-2-(4-硝基苯基)-1，3，2-二氧环己膦(dioxaphosphinane)2-氧化物
收率：75％。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.07(s，3H)，1.10(s，3H)，3.84(dd，J＝11.2，13.6Hz，2H)，4.28(dd，J＝9.6，10.8Hz，2H)，7.95-8.00(m，2H)，8.26-8.29(m，2H)。
5，5-二甲基-2-(3-硝基苯基)-1，3，2-二氧磷杂环己烷2-氧化物
收率：76％。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.07(s，3H)，1.13(s，3H)，3.86(dd，J＝11.2，13.6Hz，2H)，4.31(dd，J＝9.6，10.8Hz，2H)，7.66(d，J＝4.0Hz，1H)，8.12(d，J＝12.8Hz，1H)，8.38(m，1H)，8.61(d，J＝14.4Hz，1H)。
二丙-2-基(4-氨基苯基)膦酸酯
二丙-2-基(4-硝基苯基)膦酸酯(287mg，1.0mmol)、i-PrOH(30ml)和10％Pd/C(30mg)的混合物在50psi氢压下40℃氢化6h。然后过滤反应混合物，并且滤液在真空浓缩提供238mg期望的二丙-2-基(4-氨基苯基)膦酸酯(收率：92％)，其不纯化在进一步化学中直接使用。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.11(d，J＝6.0Hz，6H)，1.21(d，J＝6.4Hz，6H)，4.38-4.43(m，2H)，5.74(s，br，2H)，6.56-6.59(m，2H)，7.27-7.32(m，2H)。MS：m/z 257.90[MH+]。
二丙-2-基(3-氨基苯基)膦酸酯
根据描述用于二丙-2-基(4-氨基苯基)膦酸酯的步骤、使用二丙-2-基(3-硝基苯基)膦酸酯就行制备。收率：45％。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.15(d，J＝6.4Hz，6H)，1.24(d，J＝6.4Hz，6H)，4.45-4.50(m，2H)，5.35(s，br，2H)，6.70-6.77(m，2H)，6.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.10-7.25(m，1H)。MS：m/z 257.97[MH+]。
4-(5，5-二甲基-2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)苯胺
根据描述用于二丙-2-基(4-氨基苯基)膦酸酯的步骤、使用5，5-二甲基-2-(4-硝基苯基)-1，3，2-二氧磷杂环己烷2-氧化物就行制备。收率：41％。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝0.97(s，3H)，1.02(s，3H)，3.78(m，2H)，4.08(m，2H)，5.91(s，br，2H)，6.61(dd，J＝3.6，8.4Hz，2H)，7.34(m，2H)。MS：m/z 242.10[MH+]。
3-(5，5-二甲基-2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)苯胺
根据描述用于二丙-2-基(4-氨基苯基)膦酸酯的步骤、使用5，5-二甲基-2-(3-硝基苯基)-1，3，2-二氧磷杂环己烷2-氧化物就行制备。收率：63％。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝0.94(s，3H)，1.07(s，3H)，3.84(dd，J＝9.6，10.8Hz，2H)，4.07(dd，J＝11.2，14.0Hz，2H)，5.43(s，br，2H)，6.75-6.78(m，2H)，6.88(d，1H)，7.16(m，1H)。MS：m/z242.11[MH+]。
乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯
(3-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇(0.5g，2.73mmol)和亚硫酰氯(0.3mL，4.09mmol)的混合物加热回流12h。然后混合物在真空中浓缩提供0.55g的4-(氯甲基)-2-甲氧基-1-硝基苯(收率：100％收率)，其不纯化在进一步化学中使用。
1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝4.00(s，3H)，4.60(s，2H)，7.05(dd，J＝8.34，1.77Hz，1H)，7.14(d，J＝1.52Hz，1H)，7.86(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 202.0264[MH+](TOF，极性)。
4-(氯甲基)-2-甲氧基-1-硝基苯(1.1g，5.46mmol)和二乙基甲基亚膦酸酯(0.89g，1.2mmol)的混合物在密封管中100℃加热16h。反应混合物在真空中浓缩，且残留粗品使用在DCM中0→5％甲醇作为洗脱液洗脱的Isco Combiflash系统纯化，提供0.641g的乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基亚膦酸酯(收率：43％收率)。MS(ES+)：m/z273.99[MH+](ZQ3，polar 5min)。
乙醇中的乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基亚膦酸酯(0.64g，2.34mmol)的溶液(5.0mL)加入在活性炭(0.25g)上10％wt的钯。反应混合物抽空，并且用氢气(3x)换气，和使其在氢气下搅拌16h。反应混合物通过硅藻土垫过滤，和滤液在真空中浓缩提供0.54g的乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯(收率：95％收率)。该物质不纯化在连续反应中使用。MS(ES+)：m/z 244.01[MH+](ZQ3，polar 5min)。
二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯
该物质根据以上描述用于乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯的步骤、使用在第一步骤中的三乙基亚磷酸酯制备。MS(ES+)：m/z 274.01[MH+](ZQ3，polar 5min)。
甲基2-(溴甲基)-6-硝基苯甲酸酯(XXXVI)
在1，2-二氯乙烷(250mL)中的甲基2-甲基-6-硝基苯甲酸酯(TL(1996)375425，15.6g，80mmol)、NBS(21.4g，120mmol)和过氧化苯甲酰(200mg，0.82mmol)的溶液回流加热8h。反应混合物浓缩至干燥，并且粗混合物通过用2％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶色谱上纯化，提供10.5g的甲基2-(溴甲基)-6-硝基苯甲酸酯(XXXVI，收率：65％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ3.98(s，3H)，4.57(s，2H)，7.59(dd，1H，J＝7.8，8.4Hz)，7.78(d，1H，J＝7.8Hz)，8.1(d，1H，J＝8.4Hz)。
2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(XXXVII)
乙醇中甲胺的溶液(10mL，80mmol，乙醇中8M溶液)加入到THF(30mL)中的甲基2-(溴甲基)-6-硝基苯甲酸酯(8.1g，29.6mmol)溶液。在搅拌2h后，反应混合物浓缩至干燥，然后在快速搅拌下加入水(30mL)。产生的固体通过过滤分离和干燥给出4.35g的2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(XXXVII，收率：78％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ3.21(s，3H)，4.44(s，2H)，7.64(m，2H)，7.73-7.74(m，1H)。
7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(XXXVIII)
DCM∶乙醇(8∶2)中的2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(6.09g，31mmol)的溶液在5％Pd/C(500mg)存在下在40psi的H2下氢化直到停止吸收H2。过滤反应混合物，并且干燥滤液(Na2SO4)和在真空中浓缩给出4.45g的7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(XXXVIII，收率：73％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ3.11(s，3H)，4.27(s，2H)，5.19(bs，2H)，5.5(d，1H，J＝7.8Hz)，6.71(d，1H，J＝7.2Hz)。
7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(XXXIX)
NBS(2.3g，12.96)加入DCM(40mL)中7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(2g，12.4mmol)的冷(-8℃至-10℃)溶液，并且混合物在-8℃至-10℃搅拌1h。10％的硫代硫酸钠(30mL)的水溶液然后加入到反应混合物，并且连续搅拌另一个20分钟。分层和水层用DCM(2x20mL)萃取。合并的有机层用水(3x 40mL)和盐水(30mL)洗涤，并且有机层就行干燥(Na2SO4)和在真空中浓缩，产生3.2g的粗产物。该物质用乙酸乙酯(10mL)研制给出2.2g的纯7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(XXXIX，收率：74％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ3.14(s，3H)，4.20(s，2H)，5.20(bs，2H)，5.49(d，1H，J＝8.4Hz)，5.79(d，1H，J＝8.4Hz)。
2-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(XLIVa)
二异丙基乙胺(31.5mL，180mmol)加入0℃的THF(300mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(XL，15.0g，69.4mmol)和1-[3-(甲磺酰)苯基]甲胺盐酸盐(13.3g，60mmol)的悬浮液，并且得到的混合物在室温搅拌过夜。混合物然后蒸发干燥，残留物在二氯甲烷(100mL)中吸收，然后得到的溶液用水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥、过滤和在真空中浓缩。得到的粗残留物在热的二氯甲烷(35mL)中吸收，然后在室温保留搅拌过夜。分离的固体通过过滤分离(9.4g)，确定为更极性成分的产物混合物(4-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺XLIVb)的纯样品。母液吸附在硅胶之上并且在用己烷∶乙酸乙酯50∶50洗脱的硅胶上进行色谱，提供8.5g纯的非极性物质(2-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺XLIVa)和另外的0.7g的极性成分。
XLIVa：1H NMR(DMSO-d6)δ：8.63(t，J＝5.9Hz，1H)，8.46(s，1H)，7.92(s，1H)，7.83(dt，J＝7.1，1.8Hz，1H)，7.66(dt，J＝7.7，1.8Hz，1H)，7.63(t，J＝7.3Hz，1H)，4.72(d，J＝6.0Hz，2H)，3.20(s，3H)。13C NMR(DMSO-d6)δ：162.58，158.33，155.80(q，J＝5Hz)，140.89，139.87，132.40，129.56，125.86，125.67，123.42(q，J＝272Hz)，105.24(q，J＝32Hz)，43.65，43.51.HMBC 3-键相互关系在8.63ppm的C4-N-质子和～105ppm的C5-碳之间观察到。
2-氯-N-[3-(甲基亚磺酰基)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(XLVa)
根据以上描述用于2-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(XLIVa)的步骤、使用在THF(10mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(XL，324mg，1.5mmol)、1-[3-(甲基亚磺酰基)苯基]甲胺盐酸盐(249mg，1.2mmol)和二异丙基乙胺(0.65mL，3.75mmol)就行制备。通过用己烷∶乙酸乙酯25∶75洗脱的色谱分离作为非极性成分的纯的期望的2-氯-N-[3-(甲基亚磺酰基)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(XLVa，162mg)。1H NMR(DMSO-d6)：8.61(t，J＝5.7Hz，1H)，8.44(s，1H)，7.67(s，1H)，7.49-7.58(m，2H)，7.45(dt，J＝6.6，2.0Hz，1H)，4.70(d，J＝5.9Hz，2H)，2.72(s，3H)。13CNMR(DMSO-d6)：162.59，158.35，155.74(q，J＝5Hz)，146.49，139.73，129.47，129.24，123.43(q，J＝272Hz)，122.40，122.36，105.16(q，J＝32Hz)，43.84，43.23。HMBC 3-键相互关系在8.61ppm的C4-N-质子和～105ppm的C5-碳之间观察到。
2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(XLIIIa)
THF(50mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(XL，9.5g，44.0mmol)和2-氨基-N-甲基苯甲酰胺(6.0g，40mmol)溶液用DIPEA(15mL，8.6mmol)处理，并且生成的混合物在室温搅拌过夜。
产物混合物在真空中浓缩，且残留物用二氯甲烷研制提供白色固体，其是非极性成分的混合物(2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺XLIIIa)的纯的样品。浓缩二氯甲烷母液，和残余物在二氯甲烷中5％EtOAc洗脱的硅胶上进行色谱给出纯的非极性异构体的进一步样品(0.6g)、含有90％非极性加上10％极性异构体的样品(XLIIIb，0.7g)和两种异构体1∶1的混合物(3g)。两种异构体的总产量：9.3g(70％)。
XLIIIa：1H NMR(DMSO-d6)：12.06(s，1H)，8.86(q，J＝4.3Hz，1H)，8.68(s，1H)，8.38(d，J＝8.2Hz，1H)，7.78(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，7.59(td，J＝7.9，1.3Hz，1H)，7.26(td，J＝7.6，0.9Hz，1H)，2.80(d，J＝4.5Hz，3H)。13C NMR(DMSO-d6)：168.60，162.19，156.78(q，J＝5Hz)，156.42，137.52，131.57，128.02，123.14(q，J＝272Hz)，123.87，122.31，107.25(q，J＝32Hz)，26.24.在HMBC实验中，3-键相互关系在12.06ppm的C4-N-质子和～107ppm的C5-碳之间观察到。
二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
醚(4.07mL，4.07mmol)中的1.0M氯化锌加入到1，2-二氯乙烷中(6.7mL)和t-BuOH(6.7mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(0.803g，3.70mmol)溶液。在30分钟后，加入二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(1.01g，3.70mmol)，然后加入三乙胺(0.567mL，4.07mmol)，同时保持温度在～25℃。在用饱和NaHCO3(10mL)水溶液淬灭之前，使反应混合物在室温搅拌过夜。生成的混合物用EtOAc(15mL)萃取，然后有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水NaSO4干燥、过滤和在减压下浓缩提供黄色油。该原料使用用DCM中0→5％甲醇作为洗脱液洗脱的Isco Combiflash系统初始纯化，然后通过制备HPLC(MDP)纯化提供1.09g的二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯，(70％收率)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.28(t，J＝7.07Hz，6H)，3.23-3.29(m，2H)，3.90-3.95(m，3H)，4.01-4.13(m，4H)，6.90-6.96(m，1H)，7.03(m，J＝2.00Hz，1H)，8.02(d，J＝8.34Hz，1H)，8.62(s，1H).MS(ES+)。
乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯
二乙氧基甲膦(2.0g，15mmol)中的对-硝基苄基溴(2.4g，11mmol)的溶液在密封管中在140℃在氮气下搅拌16h。反应混合物在真空中浓缩，和残留物通过在用己烷中25％EtOAc洗脱的硅胶上进行色谱，提供2.4g(87％收率)的乙基甲基(4-硝基苄基)亚膦酸酯。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.29(t，J＝7.1Hz，3H)，1.44(d，J＝13.9Hz，3H)，3.25(d，J＝17.7Hz，2H)，3.96-4.18(m，2H)，7.47(dd，J＝9.0，2.4Hz，2H)，8.20(d，J＝8.1Hz，2H).MS(ES+)：m/z：244.0745[MH+].HPLC：tR＝1.13min(TOF MS：极性_3min)。
该物质(2.4g，9.9mmol)在甲醇(10mL)中的溶液加入在活性碳上的钯(10％wt)(0.52g，0.49mmol)，和抽空并且用氢气换气(3x)。混合物在氢气气氛下在室温搅拌16h，然后通过硅藻土垫过滤和在真空中浓缩提供2.0g(95％收率)的标题化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.29(t，J＝7.1Hz，3H)，1.34(d，J＝13.6Hz，3H)，3.04(d，J＝17.4Hz，2H)，3.97-4.12(m，2H)，6.65(d，J＝7.8Hz，2H)，7.04(dd，J＝8.6，2.5Hz，2H).MS(ES+)：m/z：214.0976[MH+].HPLC：tR＝0.76min(TOF MS：极性_3min)。
乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯
使用乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯替代二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯、如以上描述用于二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯就行制备。在色谱后，半纯的产物由乙酸乙酯结晶提供1.1g(61％收率)的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.64(s，1H)，8.79(d，J＝0.51Hz，1H)，7.62(d，J＝8.34Hz，2H)，7.25(dd，J＝2.27，8.59Hz，2H)，3.86-4.01(m，2H)，3.15(d，J＝17.68Hz，2H)，1.31(d，J＝13.64Hz，3H)，1.19(t，J＝6.95Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：396.0708[MH+].HPLC：tR＝1.41min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
醚(4.07mL，4.07mmol)中的1.0M氯化锌加入到1，2-二氯乙烷(6.7mL)和t-BuOH(6.7mL)中的商业可得到的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(0.803g，3.70mmol)的溶液。在30分钟后，加入二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(1.01g，3.70mmol)，然后加入三乙胺(0.567mL，4.07mmol)，同时保持在～25℃的温度。在用饱和NaHCO3(10mL)水溶液淬灭之前，使反应混合物在室温搅拌过夜。生成的混合物用EtOAc(15mL)萃取，和有机层用盐水洗涤(10mL)，用无水NaSO4干燥，过滤和在减压下浓缩，提供黄色油。该原料使用DCM中的0→5％甲醇作为洗脱液的IscoCombiflash系统初步纯化，然后通过制备HPLC(MDP)纯化提供1.09g(70％收率)的二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯。1HNMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.28(t，J＝7.07Hz，6H)，3.23-3.29(m，2H)，3.90-3.95(m，3H)，4.01-4.13(m，4H)，6.90-6.96(m，1H)，7.03(m，J＝2.00Hz，1H)，8.02(d，J＝8.34Hz，1H)，8.62(s，1H)。
乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(顺式异构体)
乙基反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(反式异构体)
乙醇(2.6mL，45mmol)中的乙基4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-3-烯-1-羧酸酯(1.03g，2.99mmol)的溶液加入在活性碳上的10％钯(0.1∶0.9，钯∶碳，0.11g，0.10mmol)。反应混合物抽空和用氢气换气(3x)。使反应混合物在氢气下在室温搅拌16h。通过硅藻土垫过滤反应混合物。收集滤液，然后在真空中浓缩为油。两种异构体通过SFC纯化就行拆分，提供544mg(58％收率)的顺式目标化合物和232mg(25％收率)的反式目标化合物。顺式：1H NMR(400MHz，甲醇-d)δppm 7.06(d，J＝8.34Hz，1H)，6.61(d，J＝8.34Hz，1H)，4.37(s，2H)，4.20(q，J＝7.07Hz，2H)，3.11(s，3H)，2.72(d，J＝2.53Hz，1H)，2.46-2.56(m，1H)，2.22-2.29(m，2H)，1.60-1.75(m，6H)，1.29(t，3H).MS(ES+)：m/z317.14/319.18(100/15)[MH+].HPLC：tR＝1.41min(微质量TOF：极性_3min)。反式：1H NMR(400MHz，甲醇-d)δppm 7.15(d，J＝8.34Hz，1H)，6.62(d，J＝8.34Hz，1H)，4.38(s，2H)，4.13(q，J＝7.16Hz，2H)，3.11(s，3H)，2.34-2.54(m，2H)，2.04-2.11(m，2H)，1.82-1.92(m，2H)，1.48-1.64(m，4H)，1.26(t，3H).MS(ES+)：m/z317.15/319.16(100/7)[MH+].HPLC：tR＝1.38min(UPLC TOF，极性_3min)。
乙基4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-3-烯-1-羧酸酯.
在1，4-二氧杂环乙烷(12.0mL，154mmol)和H2O(3.00mL，166mmol)中的2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.50g，4.72mmol)、乙基4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧代}环己-3-烯-1-羧酸酯(1.57g，5.19mmol)、碳酸钾(1.95g，14.1mmol)和与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.385g，0.472mmol)的混合物抽空，和用Ar(g)((3x)再充满并在微波中100℃照射30分钟。粗混合物在真空中浓缩为固体和通过CombiFlashRf4X有机纯化系统[120g RediSep
Figure BPA00001479300900382
正相GOLD二氧化硅闪柱，干燥装载，梯度洗脱：DCM中的0→40％EtOAc]纯化，提供1.03g(63％收率)期望的产物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.71(d，J＝8.08Hz，1H)，7.45(d，1H)，5.93-5.99(m，1H)，4.20(q，J＝7.07Hz，2H)，2.65-2.75(m，1H)，2.49-2.56(m，2H)，2.36-2.49(m，2H)，2.16-2.24(m，1H)，1.87-2.00(m，1H)，1.54(br.s.，3H)，1.31(t，J＝7.20Hz，3H).MS(ES+)：m/z 346.15/347.15(100/15)[MH+].HPLC：tR＝1.43min(UPLCTOF，极性_3min)。
2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
加入Pd2(dba)3(2.02g，2.21mmol)和三环己基膦(2.48g，8.85mmol)到二氧杂环乙烷(375mL)的氮气脱气溶液，并且搅拌30分钟。4-溴-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮，20.0g，73.8mmol)、双戊酰二硼(24.4g，96mmol)和KOAc(11.58g，118.1mmol)加入到该混合物并加热回流6h。冷却至室温和滤去沉淀固体。滤液蒸发至干燥，和残留物用二异丙醚(100mL)研制和过滤给出作为黄色固体的2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(16.0g，68％)。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.34(s，12H)，3.24(s，3H)，4.58(s，2H)，7.68(d，J＝7.5Hz，1H)，8.06(d，J＝7.5Hz，1H)。
4-溴-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
将预冷却的浓硝酸(12.5mL，265mmol)和浓硫酸(60mL)在20分钟加入到浓硫酸(60mL)中的4-溴-2-甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮(60g，265mmol)的悬浮液。反应混合物在0℃搅拌30分钟和在室温搅拌2h。反应混合物倒在冰-水混合物(300mL)上。滤出沉淀，用水洗涤(3x100mL)和在异丙醇(200mL)中悬浮。淤浆在蒸汽浴上加热和冷却。过滤固体和在空气中干燥，给出53g(74％)的标题化合物。1HNMR(CDCl3，300MHz)δ3.22(s，3H)，4.36(s，2H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，7.78(d，J＝8.4Hz，1H)。
4-溴-2-甲基--2，3二氢-1H-异吲哚-1-酮
乙醇中的甲胺(10mL，80mmol，乙醇中8M溶液)的溶液加入到THF(30mL)中的甲基3-溴-2-(溴甲基)苯甲酸酯的溶液。在搅拌2h后，反应混合物浓缩至干燥，且快速搅拌下加入(30mL)的水。通过过滤分离产生的固体，然后干燥给出期望的产物。
甲基3-溴-2-(溴甲基)苯甲酸酯
该物质由商业的3-溴-2-甲基苯甲酸通过首先制成甲基酯、然后NBS溴化进行制备。
乙基4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧代}环己-3-烯-1-羧酸酯。
环己烷(2.15mL，3.23mmol)中的1.50M的二异丙基酰胺单(四氢呋喃)锂加入-78℃的THF(19.1mL，235mmol中的4-(乙氧基羰基)环己酮(0.500g，2.94mmol)的溶液，然后搅拌1小时，在此后，加入三氟甲烷磺酸酐(0.912g，3.23mmol)。使反应混合物搅拌，同时升温至室温。反应用水淬灭。有机层用EtOAc稀释，然后用水(2x)和盐水(1x)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤和然后在真空中浓缩。粗混合物通过CombiFlash
Figure BPA00001479300900391
Rf4X有机纯化系统[12g RediSep
Figure BPA00001479300900392
正相二氧化硅闪柱，干燥装载，梯度洗脱：庚烷中的0→15％EtOAc]纯化，以提供0.30g(33％收率)期望产物。该产物没有任何进一步纯化在下个步骤中使用。MS(ES+)：m/z304.05/305.05(100/65)[MH+].HPLC：tR＝1.37min(UPLC TOF，极性_3min)。
7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(反式异构体)
7-氨基-4-(顺-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(顺式异构体)
7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.35g，5.23mmol)的溶液在甲醇(30mL)中溶解，然后冷却至0℃，随后加入硼氢化钠(0.198g，5.23mmol)。反应混合物在0℃搅拌1小时。反应用饱和NH4Cl水溶液淬灭、用EtOAc稀释、用盐水洗涤和在无水硫酸钠上干燥。该化合物在用EtOAc中的0至4％甲醇洗脱的Isco Combiflash上纯化，提供反式异构体和顺式异构体。反式-异构体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.05(d，J＝8.34Hz，1H)，6.51(d，J＝8.34Hz，1H)，5.83(s，2H)，4.53(d，J＝4.29Hz，1H)，4.33(s，2H)，3.38-3.48(m，1H)，2.98(s，3H)，2.28-2.38(m，1H)，1.90(d，J＝9.35Hz，2H)，1.68(d，J＝12.38Hz，2H)，1.38-1.51(m，2H)，1.19-1.32(m，2H)；MS(ES+)：m/z：262.1674[MH+].HPLC：tR＝0.98min(UPLC TOFMS：极性_3min).顺式-异构体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.07(d，J＝8.34Hz，1H)，6.54(d，J＝8.34Hz，1H)，5.83(s，2H)，4.33(s，3H)，2.99(s，3H)，2.34-2.43(m，1H)，1.70-1.87(m，4H)，1.38-1.57(m，4H)；MS(ES+)：m/z：262.1693[MH+].HPLC：tR＝1.04min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
3.0M HCl(1.81mL)的水溶液加入THF(60mL)中的7-氨基-4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.64g，5.42mmol)的溶液，得到的混合物在室温搅拌过夜。混合物到0℃，用水稀释和用1M NaOH碱化至pH～10。水溶液混合物用EtOAc(3X)萃取，和合并的有机部份用盐水洗涤，硫酸钠干燥、过滤和浓缩以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.11(d，J＝8.34Hz，1H)，6.53(d，J＝8.34Hz，1H)，5.88(s，2H)，4.41(s，2H)，3.00(s，3H)，2.56(dt，J＝6.06，14.15Hz，2H)，2.21-2.30(m，2H)，1.96-2.04(m，2H)，1.78-1.91(m，2H)；MS(ES+)：m/z：260.1517[MH+].HPLC：tR＝1.06min(UPLC TOF MS：极性_3min).
7-氨基-4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
活性碳(0.60g，0.57mmol)上10％钯上加入乙醇(100mL)中的7-氨基-4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.7g，5.7mmol)的溶液。反应混合物抽空和用氢气换气(3X)，然后在室温搅拌过夜。反应混合物通过硅藻土过滤和在真空中浓缩以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.04(d，J＝8.34Hz，1H)，6.52(d，J＝8.08Hz，1H)，5.85(s，2H)，4.34(s，2H)，3.86-3.89(m，4H)，2.98(s，3H)，2.42-2.48(m，1H)，1.52-1.80(m，8H)；MS(ES+)：m/z：303.1516[MH+].HPLC：tR＝1.21min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
7-氨基-4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
1，4-二氧杂环乙烷(40mL)和H2O(10mL)中的7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.7g，7.0mmol)、1，4二氧-杂螺[4，5]癸-7-烯-8-硼酸和频哪醇酯(2.2g，8.5mmol)(制备：WO 2007/141517)、碳酸钾(2.9g，21mmol)和与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.57g，0.69mmol)的混合物抽空，和用氮气(3X)重新充满和在微波中100℃照射30min。反应混合物在EtOAc和盐水之间分配和分离。水层用EtOAc(3X)萃取和合并有机部份用硫酸钠干燥、过滤和浓缩。化合物在用庚烷中30至100％EtOAc洗脱的Isco Combiflash上纯化以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.14(d，J＝8.34Hz，1H)，6.55(d，J＝8.59Hz，1H)，6.08(s，2H)，5.60-5.66(m，1H)，4.39(s，2H)，3.91(s，4H)，2.98(s，3H)，2.50(td，J＝1.86，3.60Hz，1H)，2.42-2.48(m，2H)，2.31-2.37(m，2H)，1.77(t，J＝6.44Hz，2H)；MS(ES+)：m/z：302.1621[MH+].HPLC：tR＝1.21min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
使用商业可得的二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯替代二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯以类似于二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯方式进行制备。在色谱之后，半纯化的产物由乙酸乙酯结晶以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)d ppm 1.22-1.32(m，6H)，3.17-3.28(m，2H)，3.98-4.10(m，4H)，7.30(dd，J＝8.72，2.65Hz，2H)，7.65(d，J＝7.83Hz，2H)，8.63(s，1H)。
7-氨基-2-甲基-4-[顺-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(顺式异构体)
7-氨基-2-甲基-4-[反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(反式异构体)
1，2-二氯乙烷(2-0mL)中的7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(100.0mg，0.3871mmol)的溶液加入1-甲基哌嗪(58.16mg，0.5807mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(164.1mg，0.7743mmol)。反应混合物在室温搅拌24小时。反应混合物用NaHCO3(10mL)淬灭和用EtOAc(20mL)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤、用Na2SO4干燥、过滤和在减压下浓缩产生淡黄色油。纯化粗物质，通过使用甲醇(100∶0→90∶10)中的DCM/7M NH3作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱提供顺式异构体(76.5mg，58％，第一洗脱产物)和反式异构体(30.0mg，23％，第二洗脱产物)。顺式异构体：1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.42-1.56(m，4H)，1.82-1.96(m，2H)，2.06(d，J＝11.87Hz，2H)，2.27(br.s.，1H)，2.34(s，3H)，2.38-2.78(m，9H)，3.14(s，3H)，4.31(s，2H)，5.08(s，2H)，6.58(d，J＝8.34Hz，1H)，7.18(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 343.25[MH+].反式异构体：1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.35-1.75(m，7H)，1.91(d，J＝12.13Hz，2H)，2.03-2.13(m，2H)，2.34(s，3H)，2.47-2.82(m，7H)，3.14(s，3H)，4.28(s，2H)，5.09(s，2H)，6.56(d，J＝8.34Hz，1H)，7.09(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 343.26[MH+]。
4-氯-N-(2-甲氧基苯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺
该物质使用商业可得的原料(2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶和2-甲氧基苯胺)以类似于二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯方式进行制备。该反应的粗产物使用MeCN重结晶以提供白色固体，610mg，46％收率。1HNMR(CDCl3)：3.93(s，3H)，6.94(dd，J＝8.1Hz，1.5Hz，1H)，7.03(td，J＝7.8Hz，1.5Hz，1H)，7.10(td，J＝7.6Hz，1.8Hz，1H)，8.14(br s，1H)，8.41(dd，J＝8.1Hz，1.8Hz，1H)，8.56(s，1H)。MS(ES+)：m/z＝304.00[MH+]。HPLC：tR＝3.89min(ZQ3，极性_5min)。
实施例
实施例1：二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900411
N-[3-({[(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIa)。N-[3-(氨基甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺(5g，23.25mmol)逐滴加入到0℃的甲醇(80mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(XL，6.5g，30mmol)的溶液。在30分钟后，DIPEA(8.25mL，47.5mmol)通过注射器加入，和在0℃连续搅拌1h。沉淀的固体(3g)通过过滤收集和通过TLC示出为起始混合物的纯的非极性成分(XLIa)。蒸发滤液和残留物在用DCM中的5％EtOAc洗脱的硅胶上色谱，产生另一批纯的非极性异构体(0.3g)、两种异构体的混合物(1.7g)和纯的极性异构体(XLIb，1.3g)。XLIa：1H NMR(DMSO-d6)：8.54(t，J＝5.7Hz，1H)，8.46(dd，J＝5.2，1.6Hz，1H)，8.45(s，1H)，7.77(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.44(dd，J＝7.7，4.8Hz，1H)，4.74(d，J＝5.2Hz，2H)，3.28(s，3H)，3.12(s，3H)。未归属的峰：1.29(m)。
HMBC实验显示在8.54ppm的C4-N-质子和C5-碳之间的3-键H-C相关性，其只有对于以上示出的区域异构体可观察的。
1∶1的N-[3-({[(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIa)和N-[3-({[(4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIb)(30mg，0.08mmol)的混合物和商业可得的二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯(22.1mg，0.091mmol)三氟醋酸(6.8μL，0.1mmol)和三氟乙醇(0.5mL)中的溶液在N2下、在Biotage微波反应器中105℃搅拌75min。溶剂在真空除去和得到的混合物使用制备HPLC(MDP)分离以提供14.2mg的二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(实施例1)(收率：31％)和9.5mg的区域异构体XLIIb(收率：21％)。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.14(t，J＝7.2Hz，6H)，3.08(d，J＝21.2Hz，2H)，3.16(s，3H)，3.17(s，3H)，3.88-3.94(m，4H)，4.81(s，d，J＝6.0Hz，2H)，7.01(d，J＝6.8Hz，2H)，7.36-7.38(m，2H)，7.41(dd，J＝4.8，7.6Hz，1H)，7.66(d，J＝6.4Hz，2H)，8.26(d，J＝0.8Hz，1H)，8.43(dd，J＝1.6，4.4Hz，1H)，9.60(s，br，1H)。MS(ES+)：m/z 603.43(MH+)。HPLC：tR＝3.18min(ZQ3，极性_5min)。XLIIb：1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.14(t，J＝6.8Hz，6H)，2.96(s，3H)，3.17(d，J＝8.4Hz，3H)，3.89-3.98(m，4H)，4.46(d，J＝5.2Hz，3H)，4.59(s，2H)，7.06(d，J＝6.8Hz，1H)，7.21(d，J＝8.0Hz，2H)，7.38(m，1H)，7.56(m，1H)，8.21(m，1H)，8.32(s，1H)，8.42(m，1H)，8.82(s，1H)。MS(ES+)：m/z603.03(MH+)。HPLC：tR＝3.06min(ZQ3，极性_5min)。
实施例2：二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900421
使用二乙基(4-氨基苯基)膦酸酯、根据实施例1描述的步骤和纯化技术进行制备(收率2.5％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz，400MHz)：δ＝1.31(dt，J＝0.8，7.2Hz，6H)，3.31(s，3H)，3.32(s，3H)，4.07(m，4H)，4.96(s，2H)，7.36(dd，J＝4.4，7.6Hz，1H)，7.53-7.58(m，2H)，7.65-7.68(m，2H)，7.78(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H)，8.24(d，J＝0.4Hz，1H)，8.43(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)，8.56(s，2H)。MS(ES+)：m/z 589.06(MH+)。HPLC：tR＝3.22min(ZQ3，极性_5min)。不期望的极性异构体(收率：13.5％)：1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.32(dt，J＝0.4，7.2Hz，6H)，3.06(s，br，6H)，4.11(m，4H)，4.71(s，2H)，7.33(dd，J＝4.8，7.2Hz，1H)，7.49-7.58(m，3H)，7.71(m，1H)，7.84(m，1H)，8.24(s，1H)，8.41(d，J＝3.2Hz，1H)，8.55(s，1H)。MS(ES+)：m/z589.06(MH+)。HPLC：tR＝3.12min(ZQ3，极性_5min)。
实施例3：二乙基[2-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900431
使用二乙基(2-氨基苄基)膦酸酯、根据实施例1描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：18％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz，400MHz)：δ＝1.20(t，J＝7.2Hz，6H)，3.04(s，3H)，3.07(s，3H)，3.25(d，J＝21.6Hz，2H)，3.94-4.04(m，4H)，4.75(s，2H)，7.09-7.15(m，2H)，7.29-7.34(m，3H)，7.63(d，J＝6.0Hz，1H)，8.12(s，1H)，8.41(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 602.95(MH+)。HPLC：tR＝3.28min(ZQ3，极性_5min)。不期望的极性异构体(收率：14％)：1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.23(t，J＝7.2Hz，6H)，2.93(s，3H)，3.06(s，3H)，3.24(d，J＝21.2Hz，2H)，3.99-4.05(m，4H)，4.50(s，2H)，7.17(d，J＝6.8Hz，1H)，7.23-7.31(m，3H)，7.38(d，J＝7.2Hz，1H)，7.43(d，J＝7.2Hz，1H)，8.27(s，1H)，8.40(dd，J＝1.2，4.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z602.95(MH+)。HPLC：tR＝3.16min(ZQ3，极性_5min)。
实施例4：二乙基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900432
使用二乙基(3-氨基苄基)膦酸酯、根据实施例1描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：24％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz，400MHz)：δ＝1.23(t，J＝7.2Hz，6H)，3.08(s，1.5H)，3.11(s，3H)，3.14(s，1.5H)，3.20(s，2H)，3.95-4.03(m，4H)，4.91(s，2H)，6.92(d，J＝7.6Hz，1H)，7.11(t，J＝7.6Hz，1H)，7.33-7.38(m，2H)，7.48(s，1H)，7.79(dd，J＝2.0，8.4Hz，1H)，8.17(s，1H)，8.41(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 602.98(MH+)。HPLC：tR＝3.21min(ZQ3，极性_5min).不期望的极性异构体(收率：19％)：1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.23(t，J＝7.2Hz，6H)，3.05(s，3H)，3.07(s，3H)，3.11(d，J＝21.2Hz，2H)，3.99-4.02(m，4H)，4.61(s，2H)，7.07(m，1H)，7.13-7.17(m，2H)，7.27-7.32(m，2H)，7.62(m，1H)，8.16(s，1H)，8.39(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 602.73(MH+)。HPLC：tR＝3.07min(ZQ3，极性_5min)。
实施例5：二乙基{1-[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]乙基}膦酸酯
Figure BPA00001479300900441
使用二乙基[1-(4-氨基苯基)乙基]膦酸酯、根据实施例1描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：5％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz，400MHz)：δ＝1.14(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)，1.49(d，J＝7.2Hz，1.5H)，1.54(d，J＝7.2Hz，1.5H)，3.10(s，3H)，3.17(s，3H)，3.25(q，J＝7.2Hz，1H)，3.82-3.96(m，2H)，4.00-4.07(m，2H)，4.96(s，2H)，7.29(dd，J＝1.6，8.4Hz，2H)，7.35-7.40(m，3H)，7.72(d，J＝7.2Hz，1H)，8.24(s，1H)，8.45(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 616.97(MH+)。HPLC：tR＝3.27min(ZQ3，极性_5min)。不期望的极性异构体(收率：5％)：1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.12(t，J＝7.2Hz，3H)，1.25(t，J＝7.2Hz，3H)，1.52(d，J＝7.6Hz，1.5H)，1.57(d，J＝7.6Hz，1.5H)，3.06(s，3H)，3.07(s，3H)，3.38(q，J＝7.2Hz，1H)，3.84-3.93(m，2H)，4.01-4.05(m，2H)，4.61(s，2H)，7.29(dd，J＝3.6，7.2Hz，1H)，7.36-7.41(m，4H)，7.45(d，J＝6.0Hz，1H)，8.30(s，1H)，8.43(dd，J＝1.6，4.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 616.97(MH+)。HPLC：tR＝3.16min(ZQ3，极性_5min)。
实施例6：[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸
Figure BPA00001479300900442
使用P-(4-氨基苯基)-N，N′-二丙基膦酰二胺、根据实施例1描述的步骤和纯化技术进行制备。膦酰二胺部分在反应期间水解以提供相应的膦酸(收率：2.7％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝3.11(s，3H)，3.18(s，3H)，4.91(s，2H)，7.16-7.35(m，3H)，7.51(m，1H)，7.62(m，1H)，7.73(m，1H)，8.23(s，1H)，8.40(m，1H)。MS(ES+)：m/z 532.84(MH+)。HPLC：tR＝2.75min(ZQ3，极性_5min)。不期望的极性异构体(收率：3.2％)：1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝3.03(s，3H)，3.08(s，3H)，4.61(s，2H)，7.23-7.35(m，3H)，7.53-7.67(m，3H)，8.18-8.23(m，1H)，8.35-8.40(m，1H)。MS(ES+)：m/z 532.43(MH+)。HPLC：tR＝2.42min(ZQ3，极性_5min).
也通过用过量的浓盐酸、在100℃加热二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸酯(实施例2)加热6h进行制备。反应混合物在真空浓缩和通过制备HPLC(MDP)纯化残留物提供标题化合物。
实施例7：二乙基{2-[4-({4-[({2-[二乙基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]丙-2-基}膦酸酯
Figure BPA00001479300900451
三氟醋酸(17.5μL，0.227mmol)和三氟乙醇(0.5mL)混合物中的N-[3-({[(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIa 30mg，0.08mmol)和二乙基[2-(4-氨基苯基)丙-2-基]膦酸酯(XXXV，24.7mg，0.091mmol)的溶液在Biotage微波反应器中、在105℃氮气下搅拌75min。该混合物在真空中浓缩，和残留物通过制备HPLC(MDP)纯化，提供4.6mg的实施例7(收率：10％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.18(t，J＝7.2Hz，6H)，1.56(s，3H)，1.60(s，3H)，3.11(s，3H)，3.18(s，3H)，3.85-3.94(m，4H)，4.97(s，2H)，7.36(dd，J＝4.8，8.0Hz，1H)，7.40-7.46(m，4H)，7.73(d，J＝6.8Hz，1H)，8.22(s，1H)，8.45(dd，J＝1.6，4.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 631.02(MH+)。HPLC：tR＝3.40min(ZQ3，极性_5min).
实施例8：N-[3-({[2-({4-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900461
三氟醋酸(17.5μL，0.227mmol)和三氟乙醇(0.5mL)混合物中的N-[3-({[(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIa 30mg，0.08mmol)和4-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯胺(21.8mg，0.091mmol)的溶液在Biotage微波反应器中、在N2下105℃搅拌45min。混合物在真空中浓缩和残留物在DCM(5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)之间分配。除去有机相和水相用DCM(3x 5mL)萃取。合并的有机相经硫酸镁干燥和在真空中浓缩以提供粗产物，该产物通过用在DCM中甲醇中的5％7N ammonia洗脱的硅胶上色谱进行纯化，以产生38.6mg的实施例8(收率：80％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.11-1.19(m，12H)，1.96-2.06(m，2H)，3.07(d，J＝12.4Hz，2H)，3.07(s，3H)，3.29(s，3H)，4.94(d，J＝5.2Hz，2H)，6.10(s，br，1H)，7.24-7.29(m，3H)，7.51(d，J＝8.4Hz，2H)，7.61(s，br，1H)，7.81(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H)，8.18(s，1H)，8.41(dd，J＝1.6，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 598.98(MH+)。HPLC：tR＝3.10min(ZQ3，极性_5min)。
实施例9：N-[3-({[2-({3-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900462
使用3-[(二丙-2-基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例描述的步骤和纯化技术进行制备8(收率：89％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.12-1.18(m，12H)，1.99-2.05(m，2H)，3.07(d，J＝12.4Hz，2H)，3.07(s，3H)，3.28(s，3H)，4.95(d，J＝4.8Hz，2H)，6.06(s，br，1H)，7.00(d，J＝7.2Hz，1H)，7.21(t，J＝8.0Hz，1H)，7.27(dd，J＝4.8，7.6Hz，1H)，7.41(s，br，1H)，7.48(s，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.85(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)，8.19(s，1H)，8.41(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z598.89(MH+)。HPLC：tR＝3.14min(ZQ3，极性_5min)。
实施例10：N-[3-({[2-({4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900471
使用4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例描述的步骤和纯化技术进行制备8(收率：70％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.12-1.20(m，6H)，1.61-1.70(m，4H)，3.08(d，J＝14.0Hz，2H)，3.08(s，3H)，3.29(s，3H)，4.95(d，J＝5.6Hz，2H)，6.08(s，br，1H)，7.19(dd，J＝1.6，8.4Hz，2H)，7.27(dd，J＝4.8，8.0Hz，1H)，7.46(s，br，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，2H)，7.80(dd，J＝1.2，7.6Hz，1H)，8.19(s，1H)，8.42(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z570.98(MH+)。HPLC：tR＝2.91min(ZQ3，极性_5min).
实施例11：N-[3-({[2-({3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900472
使用3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例描述的步骤和纯化技术进行制备8(收率：90％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.11-1.19(m，6H)，1.63-1.71(m，4H)，3.10(d，J＝14.0Hz，2H)，3.08(s，3H)，3.28(s，3H)，4.94(d，J＝5.2Hz，2H)，6.06(br，t，J＝2.4Hz，1H)，6.92(d，J＝7.2Hz，1H)，7.22(t，J＝8.0Hz，1H)，7.28(dd，J＝4.8，8.0Hz，1H)，7.43(s，br，1H)，7.48(s，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，1H)，7.83(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)，8.19(s，1H)，8.42(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z570.86(MH+)。HPLC：tR＝2.94min(ZQ3，极性_5min)。
实施例12：N-[3-({[2-({4-[(二甲基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
使用4-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例描述的步骤和纯化技术进行制备8(收率：81％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.43(d，J＝12.8Hz，6H)，3.08(s，3H)，3.12(d，J＝14.8Hz，2H)，3.28(s，3H)，4.95(d，J＝5.2Hz，2H)，6.06(s，br，1H)，7.16(d，J＝8.4Hz，2H)，7.27(dd，J＝4.8，7.6Hz，1H)，7.51(s，br，1H)，7.52(d，J＝7.6Hz，2H)，7.80(d，J＝8.0Hz，1H)，8.19(s，1H)，8.42(dd，J＝2.0，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 543.01(MH+)。HPLC：tR＝2.74min(ZQ3，极性_5min)。
实施例13：N-[3-({[2-({3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900482
使用3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例8描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：78％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.45(d，J＝12.8Hz，6H)，3.08(s，3H)，3.12(d，J＝15.2Hz，2H)，3.28(s，3H)，4.94(d，J＝5.6Hz，2H)，6.03(s，br，1H)，6.91(d，J＝7.2Hz，1H)，7.22-7.29(m，2H)，7.45(d，J＝6.0Hz，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，7.83(d，J＝7.6Hz，1H)，8.19(s，1H)，8.42(d，J＝4.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z543.01(MH+)。HPLC：tR＝2.77min(ZQ3，极性_5min).
实施例14：N-[3-({[2-{[4-(二甲基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900483
使用4-(二甲基磷酰基)苯胺、根据实施例8描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：43％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.73(d，J＝13.2Hz，6H)，3.14(s，3H)，3.23(s，3H)，4.95(s，2H)，7.35(dd，J＝4.8，7.2Hz，1H)，7.55-7.60(m，2H)，7.69-7.71(m，2H)，7.78(dd，J＝0.8，7.6Hz，1H)，8.23(s，1H)，8.42(dd，J＝0.8，7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 528.97(MH+)。HPLC：tR＝2.80min(ZQ3，极性_5min).
实施例15：N-[3-({[2-{[3-(二甲基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺
Figure BPA00001479300900491
使用4-(二甲基磷酰基)苯胺、根据实施例8描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：41％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.74(d，J＝13.2Hz，6H)，3.12(s，3H)，3.22(s，3H)，4.93(s，2H)，7.33-7.37(m，3H)，7.79-7.83(m，2H)，7.90(d，J＝13.6Hz，1H)，8.21(s，1H)，8.41(dd，J＝2.4，4.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 528.95(MH+)。HPLC：tR＝2.80min(ZQ3，极性_5min).
实施例16：2-{[2-({4-[(二甲基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺
Figure BPA00001479300900492
三氟醋酸(24.5μL，0.318mmol)和三氟乙醇(0.5mL)的混合物中的2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(XLIIIa，35mg，0.106mmol)和4-二甲基磷酰基甲基)苯基胺(23.3mg，0.127mmol)的溶液在Biotage微波反应器中、105℃、N2下搅拌45min。混合物在真空中浓缩和残留物在DCM(5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)之间分配。除去有机相和用DCM(3x 5mL)萃取水相。合并有机相经硫酸镁干燥和在真空中浓缩以提供粗产物，该产物经过DCM中的甲醇中5％7N氨洗脱的硅胶色谱上进行纯化，以产生34.6mg的实施例16(收率：68％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.44(d，J＝12.8Hz，6H)，2.97(d，J＝4.8Hz，3H)，3.10(d，J＝14.8Hz，2H)，6.65(d，J＝8.4Hz，1H)，6.75(d，J＝4.4Hz，1H)，6.99(dd，J＝2.0，8.4Hz，1H)，7.03(t，J＝7.2Hz，1H)，7.12(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，7.41(dt，J＝0.8，8.4Hz，1H)，7.49(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(s，br，1H)，8.34(s，1H)，8.38(d，J＝8.4Hz，1H)，10.90(s，br，1H)。MS(ES+)：m/z478.00(MH+)。HPLC：tR＝2.84min(ZQ3，极性_5min)。
实施例17：2-{2-[3-(二甲基磷酰基甲基)苯基氨基]-5-三氟甲基嘧啶-4-基氨基}-N-甲基苯甲酰胺
Figure BPA00001479300900501
该化合物使用3-[(二甲基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例16描述的步骤和纯化技术进行制备(产率：53％)。1H-NMR(CDCl3/CD3OD(5∶1)，400MHz)：δ＝1.27(d，J＝12.8Hz，6H)，2.96(s，3H)，3.01(d，J＝16.4Hz，2H)，6.83(d，J＝6.8Hz，1H)，7.17-7.25(m，2H)，7.29-7.33(m，1H)，7.44(t，J＝8.4Hz，1H)，7.59(d，J＝7.2Hz，1H)，7.71(s，1H)，8.21(d，J＝8.4Hz，1H)，8.32(s，1H)。MS(ES+)：m/z 477.74(MH+)。HPLC：tR＝2.89min(ZQ3，极性_5min)。
实施例18：2-{[2-{[4-(二甲基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺
Figure BPA00001479300900502
使用4-(二甲基磷酰基)苯胺(收率：44％)、根据实施例16描述的步骤和纯化技术进行制备。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.76(d，J＝13.2Hz，6H)，2.90(s，3H)，7.20(dd，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.51(dt，J＝1.6，7.2Hz，1H)，7.61-7.66(m，3H)，7.84(dd，J＝2.8，8.8Hz，2H)，8.39(s，1H)，8.42(d，J＝8.0Hz，1H)。MS(ES+)：m/z463.97(MH+)。HPLC：tR＝2.87min(ZQ3，极性_5min)。
实施例19：2-{[2-{[4-(二甲基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺
Figure BPA00001479300900503
使用3-(二甲基磷酰基)苯胺、根据实施例16描述的步骤和纯化技术进行制备(收率：46％)。1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.72(d，J＝13.6Hz，6H)，2.90(s，3H)，7.16(dt，J＝1.2，7.2Hz，1H)，7.42-7.45(m，3H)，7.63(dd，J＝1.6，8.0Hz，1H)，7.89-7.97(m，2H)，8.38(s，1H)，8.41(m，1H)。MS(ES+)：m/z 463.92(MH+)。HPLC：tR＝2.89min(ZQ3，极性_5min)。
实施例20：二乙基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
Figure BPA00001479300900511
TFA(34mg，0.30mmol)和TFE(1mL)中的2-(2-氯-5-三氟甲基-嘧啶-4-基氨基)-N-甲基-苯甲酰胺(33mg，0.10mmol)和二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯(29mg，0.12mmol)的溶液在CEM微波中100℃加热30min。反应混合物在真空中浓缩，和残留物通过制备HPLC(MDP；0.1％甲酸使用作为洗脱缓冲液)进行纯化，提供30mg的实施例20(收率：56％)。
1H NMR(DMSO-d6)：1.17(t，J＝7.1Hz，6H)，2.78(d，J＝4.5Hz，3H)，3.17(d，J＝21.4Hz，2H)，3.94(m，4H)，7.15-7.19(m，3H)，7.49(t，J＝7.6Hz，1H)，7.57(d，J＝8.1Hz，2H)，7.72(dd，J＝8.1Hz，1.5Hz，2H)，8.44(s，1H)，8.50(br s，1H)，8.73(d，J＝4.5Hz，1H)，9.82(s，1H)，11.33(s，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，tR＝3.29min)：537.97(MH+)。
实施例21：二乙基[2-(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900512
使用二乙基[2-(4-氨基苯基)丙-2-基]膦酸酯、根据实施例20描述的步骤和纯化技术进行制备。1H NMR(DMSO-d6)：1.13(t，J＝7.1Hz，6H)，1.49(s，3H)，1.53(s，3H)，2.79(d，J＝4.5Hz，3H)，3.84(m，4H)，7.19(td，J＝7.6Hz，1.2Hz，1H)，7.37(dd，J＝8.8Hz，2.0Hz，2H)，7.50(t，J＝7.6Hz，1H)，7.60(d，J＝8.1Hz，2H)，7.73(dd，J＝7.8Hz，1.5Hz，2H)，8.45(s，1H)，8.50(br s，1H)，8.74(d，J＝4.5Hz，1H)，9.84(s，1H)，11.38(s，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，tR＝3.53min)：566.00(MH+)。
实施例22：乙基甲基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯
Figure BPA00001479300900521
使用乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯、根据实施例20描述的步骤和纯化技术进行制备。1H NMR(DMSO-d6)：1.20(t，J＝7.1Hz，3H)，1.30(d，J＝13.9Hz，3H)，2.78(d，J＝4.5Hz，3H)，3.12(d，J＝17.7Hz，2H)，3.94(m，2H)，7.15-7.18(m，3H)，7.48(t，J＝7.6Hz，1H)，7.57(d，J＝7.6Hz，2H)，7.71(dd，J＝8.1Hz，1.5Hz，2H)，8.43(s，1H)，8.50(br s，1H)，8.73(d，J＝4.5Hz，1H)，9.82(s，1H)，11.32(s，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，tR＝3.06min)：507.97(MH+)。
实施例23：2-{[2-({3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺
使用3-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例20描述的步骤和纯化技术进行制备。1H NMR(CD3OD)：1.08(t，J＝7.8Hz，3H)，1.12(t，J＝7.8Hz，3H)，1.65-1.74(m，4H)，2.90(s，3H)，3.14(d，J＝14.4Hz，2H)，6.98(d，J＝7.6Hz，1H)，7.18(td，J＝7.6Hz，1.0Hz，1H)，7.24(t，J＝7.6Hz，1H)，7.45(t，J＝7.6Hz，1H)，7.51(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(s，1H)，7.64(dd，J＝7.8Hz，1.5Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.44(m，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，tR＝3.05min)：506.02(MH+).
实施例24：2-{[2-({4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺
Figure BPA00001479300900531
使用4-[(二乙基磷酰基)甲基]苯胺、根据实施例20描述的步骤和纯化技术进行制备。1H NMR(CD3OD)：1.13(t，J＝7.4Hz，3H)，1.24(t，J＝7.4Hz，3H)，1.70-1.79(m，4H)，2.90(s，3H)，3.20(d，J＝13.9Hz，2H)，7.15-7.22(m，3H)，7.48(td，J＝7.8Hz，1.5Hz，1H)，7.58(d，J＝8.6Hz，2H)，7.64(dd，J＝7.8Hz，1.2Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.43(m，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，tR＝3.02min)：506.02(MH+)。
实施例25：二乙基(4-{[4-{[3-(甲磺酰)苄基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
Figure BPA00001479300900532
使用2-氯-N-[3-(甲磺酰)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(XLIVa)、根据实施例20以上描述的步骤进行制备。1H NMR(CD3OD)：1.25(t，J＝7.1Hz，6H)，3.02(s，3H)，3.17(d，J＝21.4Hz，2H)，4.02(m，4H)，4.80(s，2H)，7.15(dd，J＝8.6Hz，2.5Hz，2H)，7.39(d，J＝8.4Hz，2H)，7.56-7.66(m，2H)，7.81(d，J＝7.8Hz，1H)，7.93(s，1H)，8.15(s，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，tR＝3.11min)：572.96(MH+)。
实施例26：二丁基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
二乙基(4-硝基苄基)膦酸酯(I，700mg，2.56mmol)和5mL浓HCl的混合物在120℃加热6小时。冷却的混合物然后用水稀释，通过过滤分离悬浮的固体，用水洗涤和在真空中干燥，提供500mg的(4-硝基苄基)膦酸(II)，其不进一步纯化进行使用。该物质与草酰氯(5mL)混合和在氮气下65℃加热12hr，在该时间之后，混合物在真空中浓缩以提供粗的(4-硝基苄基)膦酰二氯(III)。该二氯化物在干燥的二氯甲烷(5mL)中溶解、在氮气下冰中冷却和用正丁醇(1.05mL，11.5mmol)和DIPEA(0.88mL，5.07mmol)处理。在1小时后，混合物在室温下在真空中浓缩和在用EtOAc∶己烷30-70％洗脱的硅胶上进行色谱，产生498mg的二丁基(4-硝基苄基)膦酸酯(IV，R＝nBu)收率：66％)。甲醇中该膦酸酯的溶液在5％Pd/C(32mg)的存在下氢化2h。过滤该悬浮液和滤液在真空中浓缩提供368mg的二丁基(4-氨基苄基)膦酸酯(收率：82％)。
二丁基(4-氨基苄基)膦酸酯(18mg，0.06mmol)、N-[3-({[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基磺酰胺XLIa(20mg，0.05mmol)、TFA(12uL，0.15mmol)和TFE(0.5mL)的混合物在微波反应器中在氮气下105℃加热40分钟。得到的混合物在真空中浓缩，和残留物通过制备HPLC(MDP)进行纯化以提供24mg的二丁基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯三氟乙酸酯(实施例26，收率73％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝0.91(t，J＝7.5Hz，6H)，1.30-1.42(m，4H)，1.53-1.65(m，4H)，3.11(s，3H)，3.17(s，3H)，3.22(d，J＝21.7Hz，2H)，3.91-4.02(m，4H)，4.94(s，2H)，7.25(dd，J＝8.5，2.4Hz，2H)，7.33-7.41(m，3H)，7.73(d，J＝7.3Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.45(dd，J＝4.7，1.9Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 659.30(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.16min(UPLC，纯度)。
使用合适的醇、以类似于实施例26描述的方式制备以下化合物。
Figure BPA00001479300900541
Figure BPA00001479300900551
实施例35：二丙-2-基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
三异丙基亚磷酸酯(500mg，2.31mmol)和1-溴甲基-3-硝基苯(506mg，2.43mmol)的混合物在氮气下100℃加热3h。因此形成的二丙-2-基(3-硝基苄基)膦酸酯在甲醇(5mL)中溶解和在5％Pd/C(49mg)存在下氢化2h。过滤该混合物和在真空中浓缩，且二丙-2-基(3-氨基苄基)膦酸酯残留物在微波反应器中与N-[3-({[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺XLIa(20mg，0.051mmol)、TFA(12uL，0.15mmol)和0.5mL TFE在一起在氮气下105℃加热40分钟。该混合物蒸发至干燥和通过制备HPLC进行纯化以提供11mg的二丙-2-基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯三氟乙酸酯(实施例35，收率：34％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.19(d，J＝6.1Hz，6H)，1.28(d，J＝6.1Hz，6H)，3.06-3.12(m，4H)，3.12-3.19(m，4H)，4.51-4.63(m，2H)，4.96(s，2H)，7.14(d，J＝7.3Hz，1H)，7.21-7.28(m，1H)，7.29-7.33(m，1H)，7.35-7.43(m，2H)，7.76(d，J＝7.6Hz，1H)，8.21(s，1H)，8.45(dd，J＝4.8，1.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 631.27(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.03min(UPLC，纯度)。
使用合适的三烷基亚磷酸酯、以类似于实施例35描述方式制备以下化合物。
Figure BPA00001479300900561
实施例36：二甲基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900562
三氟醋酸(12μL，0.15mmol)和三氟乙醇(0.5mL)混合物中的N-[3-({[(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIa，20mg，0.051mmol)和二甲基(4-氨基苯基)膦酸酯(12.2mg，0.061mmol)的溶液在Biotage微波反应器中在氮气下、在105℃搅拌40min。混合物在真空中浓缩和残留物通过制备HPLC(MDP)纯化以提供9mg的二甲基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸酯三氟乙酸酯(实施例36，收率：30％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝3.13(s，3H)，3.21(s，3H)，3.72(s，3H)，3.74(s，3H)，4.98(s，2H)，7.37(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，7.55-7.67(m，4H)，7.76(dd，J＝7.8，1.8Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.45(dd，J＝4.8，1.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z561.16(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.86min(UPLC，纯度)。
使用合适的二烷基(3-或4-氨基苯基)膦酸酯酯、以类似于实施例36描述方式制备以下化合物。
Figure BPA00001479300900571
实施例40：乙基氢[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900572
二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苯基]膦酸酯(实施例2)在过量浓HCl(37％)中和80℃加热5h。反应混合物在真空中浓缩和残留物通过制备HPLC(MDP)纯化，以提供标题化合物(实施例40)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.15(t，J＝6.9Hz，3H)，3.16(s，6H)，3.81(ddd，J＝14.7，7.3，7.1Hz，2H)，4.83(d，J＝5.6Hz，2H)，7.34-7.45(m，3H)，7.55(dd，J＝8.2，3.2Hz，2H)，7.64-7.73(m，2H)，8.31(d，J＝0.8Hz，1H)，8.45(dd，J＝4.7，1.9Hz，1H)，9.86(s，1H)；MS(UPLC TOF)：m/z 562.14[MH+]；HPLC：tR＝1.15min(极性-3)。
实施例41：[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸
Figure BPA00001479300900581
使用实施例40以上描述的方法在100℃加热和使用二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(实施例1)合成。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.84(d，J＝21.2Hz，2H)，3.12(s，3H)，3.15(s，3H)，4.81(d，J＝5.6Hz，2H)，7.00(d，J＝7.6Hz，2H)，7.26(d，J＝7.6Hz，2H)，7.42(dd，J＝7.6，4.8Hz，1H)，7.66(d，J＝7.3Hz，1H)，8.04(br.s.，1H)，8.33(s，1H)，8.45(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，9.93(br.s.，1H)；MS(ES+)：m/z 546.95(MH+)。HPLC：tR＝2.58min(ZQ3；极性_5min)。
实施例42：乙基氢[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900582
使用二乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯、使用实施例40以上描述的方法100℃加热进行合成。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.14(t，J＝6.9Hz，3H)，2.93(d，J＝21.0Hz，2H)，3.15(s，3H)，3.16(s，3H)，3.85(qd，J＝7.3，7.1Hz，2H)，4.81(d，J＝5.8Hz，2H)，6.99(d，J＝8.3Hz，2H)，7.33(d，J＝6.1Hz，2H)，7.42(dd，J＝7.8，4.8Hz，1H)，7.60-7.68(m，2H)，8.25(s，1H)，8.44(dd，J＝4.8，1.8Hz，1H)，9.55(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3 tR＝1.11min；m/z 576.15[MH+]。
实施例43：[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸
Figure BPA00001479300900591
使用实施例40以上描述的方法在100℃加热和和使用二乙基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(实施例4)进行合成。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.75-2.85(m，2H)，3.12(s，3H)，3.15(s，3H)，4.80(d，J＝5.6Hz，2H)，6.83(d，J＝7.3Hz，1H)，6.92-7.00(m，1H)，7.27(br.s.，1H)，7.37(d，J＝7.8Hz，1H)，7.41(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，7.61-7.72(m，2H)，8.27(s，1H)，8.43(dd，J＝4.5，1.8Hz，1H)，9.59(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3tR＝1.05min；m/z 548.12[MH+].
实施例44：乙基氢化[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
Figure BPA00001479300900592
使用实施例40以上描述的方法加热、使用二乙基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯进行合成。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.14(t，J＝7.1Hz，3H)，2.84-2.94(m，2H)，3.12(s，3H)，3.15(s，3H)，3.85(ddd，J＝14.9，7.3，7.1Hz，2H)，4.80(d，J＝5.6Hz，2H)，6.83(d，J＝7.8Hz，1H)，6.98(t，J＝8.3Hz，1H)，7.32-7.39(m，2H)，7.41(dd，J＝7.8，4.8Hz，1H)，7.60(t，J＝5.4Hz，1H)，7.69(d，J＝6.8Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.43(dd，J＝4.5，1.8Hz，1H)，9.58(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3tR＝1.12min；m/z 576.16[MH+]。
实施例45：乙基甲基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]亚膦酸酯
Figure BPA00001479300900593
二乙氧基甲膦(15mmol)中的对-硝基苄基溴(11mmol)的溶液和在密封管中在氮气下120℃搅拌搅拌16h。该反应混合物在真空中浓缩以提供粗的乙基甲基(4-硝基苄基)亚膦酸酯。该物质的0.1M甲醇中的溶液在碳上的10％钯(0.50mmol)氢化过夜，然后过滤和滤液在真空中浓缩。残留物使用DCM中的0→10％甲醇洗脱的DCM Isco Combiflash系统进行纯化，以提供乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯。TFE(0.15M)中的N-[3-({[(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}甲基)吡啶-2-基}-N-甲基甲磺酰胺(XLIa，0.13mmol)、乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯(0.152mmol)和TFA(0.379mmol)溶液在微波反应器中100℃加热30min。反应混合物在EtOAc和水之间分配，层分离和水相用EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤、经硫酸钠干燥和在真空中浓缩。残留物使用DCM中的0→5％甲醇洗脱的IscoCombiflash系统进行纯化以提供乙基甲基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]亚膦酸酯。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.17(t，J＝6.9Hz，3H)，1.25(d，J＝13.9Hz，3H)，3.04(d，J＝17.4Hz，2H)，3.16(s，6H)，3.89(dd，J＝13.1，7.3Hz，2H)，4.81(d，J＝5.6Hz，2H)，6.99(d，J＝7.3Hz，2H)，7.34-7.44(m，3H)，7.58(t，J＝5.6Hz，1H)，7.66(d，J＝7.8Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.43(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，9.54(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3tR＝1.30min；m/z 573.13[MH+]。
实施例46：乙基甲基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]亚膦酸酯
Figure BPA00001479300900601
使用间-硝基苄基溴、如实施例45以上描述进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.16(t，J＝6.9Hz，3H)，1.26(d，J＝13.9Hz，3H)，3.00(d，J＝17.7Hz，2H)，3.13(s，3H)，3.15(s，3H)，3.83-3.94(m，2H)，4.81(d，J＝5.8Hz，2H)，6.84(d，J＝7.3Hz，1H)，7.02(t，J＝8.0Hz，1H)，7.34-7.39(m，2H)，7.42(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，7.62(t，J＝5.1Hz，1H)，7.70(d，J＝6.3Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.44(dd，J＝4.7，1.9Hz，1H)，9.60(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3tR＝1.31min；m/z 574.18[MH+]。
实施例47：二乙基(4-{[4-{[3-(甲基亚磺酰基)苄基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
Figure BPA00001479300900611
使用2-氯-N-[3-(甲基亚磺酰基)苄基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(XLVa)、根据实施例20描述的步骤进行制备。1H NMR(CD3OD)：1.25(t，J＝7.1Hz，6H)，2.70(s，3H)，3.18(d，J＝21.5Hz，2H)，4.02(m，4H)，4.79(s，2H)，7.15(dd，J＝8.6Hz，2.5Hz，2H)，7.42(d，J＝8.3Hz，2H)，7.52-7.56(m，3H)，7.69(s，1H)，8.14(s，1H).LC-MS(ZQ3，极性-5min，保留时间＝2.87min)：556.94(MH+)。
实施例48：二乙基{4-[(5-氯-4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}嘧啶-2-基)氨基]苄基}膦酸酯
Figure BPA00001479300900612
THF(5.0mL)中的2，4，5-三氯嘧啶(1.0g，5.4mmol)和2-氨基-N-甲基苯甲酰胺(0.98g，6.5mmol)的溶液加入DIPEA(1.42mL，8.18mmol)和使该混合物在室温搅拌16h。反应用NaHCO3(10mL)淬灭和用EtOAc(15mL)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤、经NaSO4干燥、过滤和真空中浓缩，以产生黄色固体，其由EtOAc重结晶以提供422mg的2-[(2，5二氯嘧啶-4-基)氨基]-N-甲基苯甲酰胺(收率：26％收率*)。如果需要，另外的物质可以从母液中回收。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝2.93(s，3H)，7.21(td，J＝7.64，1.14Hz，1H)，7.56(ddd，J＝8.53，7.26，1.64Hz，1H)，7.71(dd，J＝7.83，1.26Hz，1H)，8.30(s，1H)8.63(dd，J＝8.59，0.76Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 296.90[MH+](ZQ3，极性_5min)。
2-[(2，5-二氯嘧啶-4-基)氨基]-N-甲基苯甲酰胺(29.7mg，0.100mmol)、二乙基(4-氨基苄基)膦酸酯(29.2mg，0.120mmol)、TFA(23uL，0.30mmol)和TFE(1.0mL)的溶液在微波反应器中100℃加热30分钟。该反应混合物然后用饱和碳酸氢钠(15mL)淬灭和用EtOAc(20mL)萃取。有机层用盐水(15mL)洗涤、经无水NaSO4干燥、过滤和在真空中浓缩，以提供黄色固体。该物质通过制备HPLC(MDP)进行纯化，以提供12mg的二乙基{4-[(5-氯-4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}嘧啶-2-基)氨基]苄基}膦酸酯(收率：24％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.26(t，J＝7.07Hz，6H)，2.92(s，3H)，3.15-3.24(m，2H)，3.99-4.08(m，4H)，7.12(td，J＝7.64，1.14Hz，1H)，7.21(dd，J＝8.59，2.53Hz，2H)，7.48(ddd，J＝8.53，7.26，1.64Hz，1H)，7.55(d，J＝8.08Hz，2H)，7.65(dd，J＝7.83，1.52Hz，1H)，8.06(s，1H)，8.70(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 506.15[MH+](TOF，极性)。
实施例49：二乙基{4-[(5-溴-4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}嘧啶-2-基)氨基]苄基}膦酸酯
Figure BPA00001479300900621
使用2-[(5-溴-2-氯嘧啶-4-基)氨基]-N-甲基苯甲酰胺、根据实施例48以上描述的步骤进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝2.93(s，1H)，7.21(td，J＝7.64，1.14Hz，1H)，7.70(dd，J＝7.83，1.26Hz，1H)，8.40(s，1H)，8.58(dd，J＝8.59，0.76Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 342.80[MH+](ZQ3，极性5min)。
实施例49：1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.26(t，J＝7.07Hz，6H)，2.92(s，3H)，3.16-3.24(m，2H)，3.99-4.08(m，4H)，7.13(td，J＝7.58，1.26Hz，1H)，7.21(dd，J＝8.59，2.53Hz，2H)，7.49(ddd，J＝8.53，7.26，1.64Hz，1H)，7.55(d，J＝8.59Hz，2H)，7.64(dd，J＝7.83，1.52Hz，1H)，8.16(s，1H)，8.63(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z550.09[MH+](TOF，极性)。
实施例50：乙基[4-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]苯基亚膦酸酯
该化合物使用二乙氧基甲基膦替代二乙氧基苯膦、根据实施例45描述步骤进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.15(t，J＝7.1Hz，3H)，3.13(s，3H)，3.17(s，3H)，3.28(d，J＝17.4Hz，2H)，3.71-3.81(m，1H)，3.83-3.94(m，1H)，4.78(d，J＝5.6Hz，2H)，6.82(d，J＝7.1Hz，2H)，7.26(br.s.，2H)，7.40(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，7.43-7.51(m，2H)，7.54-7.68(m，5H)，8.24(s，1H)，8.42(dd，J＝4.7，1.9Hz，1H)，9.48(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3tR＝1.41min；m/z 636.18[MH+]。
实施例51：乙基[3-({4-[({2-[甲基(甲磺酰)氨基]吡啶-3-基}甲基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]苯基亚膦酸酯
Figure BPA00001479300900631
除了使用二乙氧基苯基膦和使用间硝基苄基溴之外，如实施例45相同步骤。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.14(t，J＝7.1Hz，3H)，3.10(s，3H)，3.12(s，3H)，3.24(dd，J＝5.6，2.3Hz，2H)，3.69-3.81(m，1H)，3.82-3.93(m，1H)，4.79(d，J＝5.8Hz，2H)，6.63(d，J＝7.6Hz，1H)，6.86-6.93(m，1H)，7.26-7.35(m，2H)，7.41(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，7.43-7.50(m，2H)，7.50-7.64(m，4H)，7.66-7.71(m，1H)，8.23(s，1H)，8.42(dd，J＝4.5，1.8Hz，1H)，9.51(br.s.，1H)；UPLC TOF：极性_3tR＝1.44min；m/z636.18[MH+]。
实施例52：乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯
Figure BPA00001479300900632
使用(2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺和乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯、根据实施例48描述的步骤进行制备(收率：57％)。1HNMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.32(t，J＝7.07Hz，3H)，1.44(d，J＝13.89Hz，3H)，2.90(s，3H)，3.24(d，J＝17.68Hz，2H)，3.91(s，3H)，4.07(m，J＝7.20，7.20，7.20，7.20，1.52Hz，2H)，6.79(dt，J＝8.21，2.08Hz，1H)，6.99(t，J＝2.02Hz，1H)，7.18(td，J＝7.58，1.01Hz，1H)，7.47(td，J＝7.96，1.52Hz，1H)，7.63(dd，J＝7.83，1.52Hz，1H)，7.97(d，J＝8.08Hz，1H)，8.29-8.35(m，2H)。MS(ES+)：m/z 538.1789[MH+](TOF，极性)。
实施例53：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
使用(2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺和二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯、根据实施例48描述的步骤进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.27(t，J＝7.07Hz，6H)，2.90(s，3H)，3.20-3.28(m，2H)，3.91(s，3H)，4.01-4.11(m，4H)，6.80(dt，J＝8.21，2.21Hz，1H)，6.99(t，J＝2.15Hz，1H)，7.19(td，J＝7.58，1.26Hz，1H)，7.48(ddd，J＝8.46，7.20，1.52Hz，1H)，7.64(dd，J＝7.83，1.52Hz，1H)，7.96(d，J＝8.08Hz，1H)，8.30-8.36(m，2H)。MS(ES+)：m/z 568.1542[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300900642
实施例61：乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]甲基亚膦酸酯
TFE(2.0mL)中的乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯(230mg，584mmol)和7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(169mg，701mmol)的溶液加入TFA(200mg，1.75mmol)，且反应混合物在微波反应器中在105℃照射1小时。得到的混合物在减压下浓缩和残留物使用DCM中0→5％甲醇作为洗脱液洗脱的Isco Combiflash系统进行纯化，提供标题化合物337.5mg(96.6％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.33(t，J＝6.95Hz，3H)，1.45(d，J＝13.64Hz，3H)，3.22(s，1H)，3.24(s，3H)，3.26(s，1H)，4.03-4.15(m，2H)，4.34(s，2H)，7.36-7.41(m，2H)，7.50(d，J＝8.08Hz，4H)，7.54(d，J＝8.84Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.30(d，J＝9.35Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 600.0844[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300900651
实施例62：二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
该实施例使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯、根据实施例61以上描述的步骤进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.21(t，J＝6.95Hz，6H)，3.08(s，3H)，3.27-3.37(m，2H)，3.74(s，3H)，3.97-4.08(m，4H)，4.40(s，2H)，6.94(d，J＝8.08Hz，1H)，7.08(s，1H)，7.55(d，J＝8.59Hz，1H)，8.42(s，1H)，9.21(s，1H)，10.53(s，1H).MS(ES+)：m/z 660.1093[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300900652
实施例63：乙基甲基(4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯
乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]甲基亚膦酸酯(实施例61，10mg，0.017mmol)与1-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)1H-吡唑(6.9mg，0.034mmol)、碳酸钾(6.9mg，0.050mmol)、二氧杂环乙烷(0.6mL)、水(0.1mL)以及与二氯甲烷络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1∶1)(1.4mg，0.0017mmol)混合，且该混合物在微波反应器中在氮气下100℃照射30分钟。该粗混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd残留物，然后通过制备HPLC(MDP)进行纯化以提供乙基甲基(4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯TFA盐(5.2mg，52％收率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.29(t，J＝6.9Hz，3H)，1.47(d，J＝13.9Hz，3H)，3.20(s，3H)，3.30(d，J＝17.5Hz，2H)，3.97(s，3H)，4.02-4.13(m，2H)，4.59(s，2H)，7.37(dd，J＝8.6，2.3Hz，2H)，7.58(d，J＝8.1Hz，2H)，7.68(d，J＝8.6Hz，1H)，7.89(s，1H)，8.02(s，1H)，8.36(s，1H)，8.66(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 600.23(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.92min(UPLC，纯度)。
以下化合物使用实施例61作为前体(如在以上实施例中)或实施例62、以类似方式制备以下化合物。
Figure BPA00001479300900661
Figure BPA00001479300900671
实施例75：乙基(4-{[4-{[7-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯
乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]甲基亚膦酸酯(实施例61，10mg，0.017mmol)与2-甲基-3-丁-2-醇(8.2μL，0.084mmol)、三苯膦(1.3mg，0.0050mmol)、DIPEA(58μL，0.334mmol)、二氧杂环乙烷(1.0mL)、CuI(0.3mg，0.00017mmol)以及与二氯甲烷(1∶1)络合的1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1.4mg，0.0017mmol)混合。该混合物在微波反应器中在氮气下105℃照射1小时。该粗混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd残留物和然后通过制备HPLC(MDP)纯化以提供乙基(4-{[4-{[7-(3-羟基-3-甲基丁-1-基-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯TFA盐(3.8mg，38％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.22(t，J＝6.9Hz，3H)，1.34(d，J＝13.9Hz，3H)，1.50(s，6H)，3.10(s，3H)，3.19(d，J＝17.7Hz，2H)，3.93-4.02(m，2H)，4.47(s，2H)，7.27(d，J＝6.8Hz，2H)，7.44(br.s.，1H)，7.57(br.s.，2H)，8.50(s，1H)，8.70(br.s.，1H)，9.96(s，1H).MS(ES+)：m/z 602.24(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.99min(UPLC，纯度)。
以下化合物以类似方式进行制备。
Figure BPA00001479300900681
Figure BPA00001479300900682
实施例78：乙基甲基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(丙-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯
乙基甲基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(丙-1-烯-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯(实施例68，5mg，0.009mmol)和1mL甲醇中的1.0mg的Pd/C的混合物在氢气气氛下搅拌过夜。该混合物然后过滤和通过制备HPLC(MDP)进行纯化以提供乙基甲基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(丙-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯TFA盐21(1.2mg，24％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.20(t，J＝7.1Hz，3H)，1.25(d，J＝6.8Hz，6H)，1.34(d，J＝13.6Hz，3H)，2.95(ddd，J＝13.8，6.8，6.7Hz，1H)，3.18(d，J＝17.9Hz，2H)，3.89-4.02(m，2H)，4.52(s，2H)，7.19-7.29(m，2H)，7.37(d，J＝8.1Hz，1H)，7.58(br.s.，2H)，8.42-8.54(m，2H)，9.88(s，1H)，10.58(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z562.29(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.08min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900691
实施例79：乙基(4-{[4-{[7-(4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯
乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]甲基亚膦酸酯(实施例61，15mg，0.025mmol)、4-氢哌啶(127mg，1.25mmol)、Pd(dba)2(2.9mg，0.0050mmol)、BINAP(15.6mg，0.025mmol)、碳酸铯(24.5mg，0.075mmol)和二氧杂环乙烷(1.0mL)的混合物在氮气下100℃加热16hr。粗反应混合物通过硫羟-SPE cartridge以除去Pd残留物，和然后通过制备HPLC(MDP)纯化以提供乙基(4-{[4-{[7-(4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯TFA盐(1.2mg，7.7％收率)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.32(t，J＝6.9Hz，3H)，1.49(d，J＝13.9Hz，3H)，1.69-1.83(m，2H)，2.01-2.12(m，2H)，3.05(t，J＝9.9Hz，2H)，3.19(s，3H)，3.31(d，J＝17.2Hz，2H)，3.39-3.48(m，2H)，3.85(dt，J＝8.4，4.3Hz，1H)，4.03-4.15(m，2H)，4.56(s，2H)，7.22(d，J＝8.6Hz，1H)，7.37(dd，J＝8.6，2.3Hz，2H)，7.55(d，J＝8.3Hz，2H)，8.34(s，1H)，8.58(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 619.41(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.84min(UPLC，纯度)。
以下化合物使用实施例61作为前体(如在以上实施例中)或实施例62以类似方式进行制备。
Figure BPA00001479300900692
Figure BPA00001479300900701
实施例87：乙基顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸酯
TFE(2.39mL，32.8mmol)中的二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(119.5mg，0.26mmol)和乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸酯(100mg，0.32mmol)的溶液用TFA(90.1mg，0.790mmol)处理和在微波上105℃照射30分钟。反应混合物在减压下浓缩为固体。该物质在CombiFlash
Figure BPA00001479300900703
Rf 4X有机纯化系统[24g RediSep
Figure BPA00001479300900704
正相GOLD二氧化硅闪柱，干燥装载，梯度洗脱：1∶1DCM/EtOAc中的0→5％甲醇]上纯化，以提供74mg(38％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.46(br.s.，1H)，8.35(s，1H)，7.89(d，J＝8.08Hz，1H)，7.26(d，J＝8.84Hz，1H)，7.08(t，J＝2.02Hz，1H)，6.94(dt，1H)，4.52(s，2H)，4.26(q，J＝7.07Hz，2H)，4.11(quin，J＝7.26Hz，4H)，3.92(s，3H)，3.36(br.s.，1H)，3.30(br.s.，1H)，3.20(s，3H)，2.79(br.s.，1H)，2.68(br.s.，1H)，2.28-2.33(m，2H)，2.30(d，J＝6.82Hz，2H)，1.77(d，J＝5.81Hz，6H)，1.27-1.37(m，9H).MS(ES+)：m/z＝734.23[MH+].HPLC：tR＝1.77min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300900711
实施例88：乙基反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸酯
该化合物以类似于实施例87的方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和乙基反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸酯进行制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.51(d，J＝8.84Hz，1H)，8.36(s，1H)，7.89(d，J＝8.08Hz，1H)，7.40(d，J＝8.84Hz，1H)，7.08(t，J＝2.02Hz，1H)，6.97(dt，1H)，4.53(s，2H)，4.06-4.20(m，6H)，3.92(s，3H)，3.35-3.36(m，1H)，3.29-3.31(m，1H)，3.20(s，3H)，2.44-2.68(m，2H)，2.14(d，J＝10.61Hz，2H)，1.91-1.98(m，2H)，1.57-1.77(m，4H)，1.30(q，9H).MS(ES+)：m/z＝734.84[MH+].HPLC：tR＝1.74min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300900712
实施例89：顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸
乙基顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸酯(实施例87，64.0mg，0.087mmol)吸收在THF(0.50mL，6.2mmol)和甲醇(0.50mL，12mmol)中。这个用H2O(0.50mL，28mmol)中的氢氧化锂单水合物(18.3mg，0.44mmol)的溶液处理，并使其在室温搅拌30小时，在搅拌期间，反应化合物从稠的淤浆转变为均匀的溶液。反应物在真空中浓缩至固体。粗产物通过CombiFlash
Figure BPA00001479300900721
Rf4X有机纯化系统[12g RediSep正相GOLD二氧化硅闪柱、干燥装载、梯度洗脱：1∶1EtOAc/DCM中0→7.5％甲醇]纯化以提供4.0mg(6％收率)期望的产物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.95(s，1H)，8.38(s，1H)，7.52(br.s.，1H)，7.19(br.s.，1H)，7.05(s，1H)，6.90(d，J＝8.59Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.95-4.06(m，4H)，3.77(s，3H)，3.21-3.29(m，2H)，3.08(s，3H)，2.67(br.s.，1H)，2.60(br.s.，1H)，2.15(d，J＝7.83Hz，2H)，1.55-1.69(m，6H)，1.21(t，6H)。MS(ES+)：m/z＝706.81[MH+].HPLC：tR＝1.55min(UPLC TOF，极性_3min)。实施例89可以进一步地制备为盐。非限制性实施例包括钠盐、钾盐、铵盐、1，3-二羟基-2-(羟甲基)丙-2-铵盐[氨丁三醇]、赖氨酸盐和胆碱盐。这通过当合适时混合固体或通过合并任一种或两种成分的已知浓度的溶液，可以通过将该化合物与氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、或2-氨基-2-(羟甲基)丙烷-1，3-二醇[氨丁三醇]、赖氨酸或胆碱结合在一起。已知的技术包括过滤悬浮液(如果盐沉淀)或、浓缩或冻干盐溶液。该化合物可以配制成为溶液，例如使用水、环糊精诸如羟基丙基-β-环糊精(HPBCD)、表面活性剂诸如十二烷基硫酸钠(SLS)、PEG醚诸如PEG-400、丙二醇(PG)和调节pH的缓冲液诸如碳酸氢钠、碳酸钠或或氢氧化盐(或其组合)的组合。其一些非限制性实施例是含有以下的水溶液混合物：缓冲到pH 9.5的5-10％SLS，10％SLS+30％PEG400+15％PG，40％HPBCD，和缓冲至pH 9.5的20-40％HPBCD。本领域技术人员将意识到有其它的赋形剂和包括固体、悬浮液或其它溶液形式的组合。
Figure BPA00001479300900723
实施例90：反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸
乙基反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷碳酸酯(实施例88，40.0mg，0.055mmol)吸收在THF(0.073mL，0.90mmol)和甲醇(0.073mL，1.8mmol)中。其用H2O(0.073mL，4.1mmol)中的氢氧化锂单水合物(11.4mg，0.27mmol)进行处理，并使其在室温搅拌30小时，在搅拌期间，反应混合物从稠的淤浆转变为均匀的溶液。反应物在真空中浓缩至固体。该产物通过CombiFlashRf 4X有机纯化系统[24g RediSep
Figure BPA00001479300900732
正相GOLD二氧化硅闪柱，干燥装载，梯度洗脱：DCM中的0→5％甲醇]纯化提供38.7mg(100％收率)期望的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.95(s，1H)，8.38(s，1H)，7.52(br.s.，1H)，7.19(br.s.，1H)，7.05(s，1H)，6.90(d，J＝8.59Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.95-4.06(m，4H)，3.77(s，3H)，3.21-3.29(m，2H)，3.08(s，3H)，2.67(br.s.，1H)，2.60(br.s.，1H)，2.15(d，J＝7.83Hz，2H)，1.55-1.69(m，6H)，1.21(t，6H)。MS(ES+)：m/z 706.22[MH+].HPLC：tR＝1.55min(UPLC TOF，极性_3min)。实施例90可以进一步制备为盐。非限制性实施例包括钠盐、钾盐、铵盐和1，3-二羟基-2-(羟甲基)丙-2-铵盐。其可以通过以下实现：在甲醇或者乙醇与合适的共溶剂诸如DCM或THF中溶解混合物，然后用必要量的已知浓度的氢氧化钠、氢氧化钾、或2-氨基-2-(羟甲基)丙烷-1，3-二醇的水性储备溶液处理得当的溶液。得到的混合物可以充分地搅拌或超声以实现溶解和混合。溶剂然后可以在减压下除去提供合适的盐。
Figure BPA00001479300900733
实施例91：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
该化合物以类似于实施例87的方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。纯化：ISCO Combi-flash Rf系统，用EtOAc中的0至5％甲醇洗脱。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.57(s，1H)，9.87(s，1H)，8.45(s，1H)，7.56(br.s.，1H)，7.38(d，J＝8.59Hz，1H)，7.26(dd，J＝2.15，8.46Hz，2H)，4.58(d，J＝4.55Hz，1H)，4.52(s，2H)，3.91-4.01(m，4H)，3.46-3.54(m，1H)，3.17-3.27(m，2H)，3.08(s，3H)，1.94(d，J＝9.85Hz，2H)，1.76(d，J＝12.13Hz，2H)，1.53-1.65(m，2H)，1.23-1.36(m，2H)，1.18(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z：648.1830[MH+].HPLC：tR＝1.44min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
Figure BPA00001479300900741
实施例92：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
该化合物以类似于实施例87的方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(顺-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。纯化：ISCO Combi-flash Rf系统，用EtOAc中的0至5％甲醇洗脱。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.58(br.s.，1H)，9.87(s，1H)，8.46(s，1H)，7.37(d，J＝8.34Hz，1H)，7.25(dd，J＝2.53，8.59Hz，3H)，4.52(s，3H)，4.40(d，J＝4.04Hz，2H)，3.89-4.02(m，5H)，3.17-3.26(m，2H)，3.08(s，3H)，1.91(q，J＝12.80Hz，1H)，1.78(d，J＝13.64Hz，2H)，1.48-1.62(m，4H)，1.18(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z：648.22[MH+].HPLC：tR＝3.46min(微质量ZQ3：极性_5min)。
Figure BPA00001479300900742
实施例93：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯盐酸盐
该化合物以类似于实施例7的方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。纯化：ISCO Combi-flash RF系统，用EtOAc中的0至5％甲醇洗脱。该纯的产物溶解在1mL的12M HCl中，然后在真空中浓缩提供作为HCl的标题化合物：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.60(s，1H)，9.10(br.s.，1H)，8.37(s，1H)，7.43(br.s.，1H)，7.31(d，J＝8.59Hz，1H)，7.07(s，1H)，6.92(d，J＝7.83Hz，1H)，4.48(s，2H)，3.92-4.05(m，7H)，3.44-3.56(m，1H)，3.23-3.35(m，2H)，3.06(s，3H)，1.92(d，J＝10.36Hz，2H)，1.54-1.75(m，4H)，1.23-1.33(m，2H)，1.19(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z：678.24[MH+].HPLC：tR＝3.37min(微质量ZQ3：极性_5min)。
Figure BPA00001479300900751
实施例94：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯：
该化合物以类似于实施例87方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(顺-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。纯化：ISCO Combi-flash Rf系统，用EtOAc中的0至5％甲醇洗脱。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.56(s，1H)，9.00(s，1H)，8.37(s，1H)，7.47(br.s.，1H)，7.29(d，J＝8.34Hz，1H)，7.06(s，1H)，6.91(d，J＝8.08Hz，1H)，4.49(s，2H)，4.40(d，J＝4.80Hz，1H)，3.95-4.07(m，4H)，3.91(br.s.，1H)，3.75(s，3H)，3.07(s，3H)，1.84-1.97(m，2H)，1.77(d，J＝12.38Hz，2H)，1.43-1.61(m，4H)，1.20(t，J＝6.95Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：678.24[MH+].HPLC：tR＝3.52min(ZQ3：极性_5min)。
Figure BPA00001479300900752
实施例95：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-({2-甲基-7-[顺-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
该化合物以类似于实施例87方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-[顺-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.29(t，J＝7.07Hz，6H)，1.72(dd，J＝12.76，3.66Hz，2H)，1.77-1.89(m，2H)，1.92-2.04(m，2H)，2.21(d，J＝12.13Hz，2H)，2.81-2.91(m，2H)，2.93(s，3H)，3.19(s，3H)，3.33-3.41(m，2H)，3.45(br.s.，3H)，3.91(s，3H)，4.05-4.15(m，4H)，4.55(s，2H)，6.99(ddd，J＝7.96，2.40，2.27Hz，1H)，7.13(t，J＝2.02Hz，1H)，7.45(d，J＝8.59Hz，1H)，7.70(d，J＝8.08Hz，1H)，8.36(s，1H)，8.41(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z 760.30[MH+]；HPLC：tR＝1.18分钟(UPLC TOF MS：极性_3min)。
Figure BPA00001479300900761
实施例96：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-({2-甲基-7-[反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
该化合物以类似于实施例87方式、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-[反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.25-1.30(m，6H)，1.40-1.55(m，2H)，1.62(q，J＝12.80Hz，2H)，1.97(d，J＝12.63Hz，2H)，2.13(d，J＝11.87Hz，2H)，2.37(s，3H)，2.50(d，J＝12.13Hz，2H)，2.61(br.s.，2H)，2.77(br.s.，3H)，3.14-3.20(m，2H)，3.22(s，3H)，3.93(s，3H)，4.00-4.10(m，4H)，4.38(s，2H)，6.89(dt，J＝8.15，2.24Hz，1H)，6.94(t，J＝2.02Hz，1H)，7.34(d，J＝8.59Hz，1H)，7.63(s，1H)，8.29(d，J＝8.59Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.63(d，J＝8.59Hz，1H)，10.50(s，1H)。MS(ES+)：m/z 760.32[MH+]；HPLC：tR＝1.20min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
Figure BPA00001479300900762
实施例97：二乙基(4-{[4-({7-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(10.0mg，0.0159mmol)、1-(2-甲氧基乙基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(8.02mg，0.0318mmol)、碳酸钾(6.60mg，0.0477mmol)、1，4-二氧杂环乙烷(0.4mL)，H2O(0.1mL)以及络合二氯甲烷的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1∶1)(1.30mg，0.00159mmol)的混合物抽空和用N2换气。该混合物在微波反应器中100℃照射30分钟。该粗混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd和通过MDP纯化以得到标题化合物(2.1mg，19.6％收率)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.25(t，J＝7.1Hz，6H)，3.21(s，3H)，3.30(d，J＝22.7Hz)，3.35(s，3H)，3.79(t，J＝5.2Hz，2H)，4.01-4.13(m，4H)，4.37(t，J＝5.2Hz，2H)，4.60(s，2H)，7.37(dd，J＝8.6，2.3Hz，2H)，7.57(d，J＝8.6Hz，2H)，7.72(d，J＝8.8Hz，1H)，7.94(s，1H)，8.08(s，1H)，8.36(s，1H)，8.68(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z674.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.05min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900771
实施例98：二乙基(4-{[4-({7-[1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
该标题化合物使用实施例97的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和化合物98A进行制备。MS(ES+)：m/z 718.56(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.04min(UPLC，纯度)。
化合物98A：2-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]丙-2-醇
氢化钠(58.74mg，0.002448mol)加入到室温的DMF(5mL)中的4-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(500.0mg，0.002577mol)溶液。在气体放出停止后，加入2，2-二甲基-环氧乙烷(0.46mL，0.0052mol)。该混合物加热至100℃、1小时。该物质用EtOAc萃取，和用水洗涤(3x)。有机层在真空中浓缩提供为棕褐色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.04(s，6H)，1.25(s，12H)，4.03(s，2H)，4.68(s，1H)，7.56(s，1H)，7.84(s，1H)。
Figure BPA00001479300900781
实施例99：二乙基(4-{[4-{[7-(1-氨基甲酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
该标题化合物使用实施例97的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和化合物99A进行制备。MS(ES+)：m/z 704.45(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.96min(UPLC，纯度)。
化合物99A：4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-酰胺
三甲基甲硅烷基异氰酸酯(0.2205mL，1.629mmol)加入DCM(10mL)中的4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1，2，3，6-四氢吡啶(200.0mg，0.8145mmol)和DIPEA(0.5675mL，3.258mmol)的室温溶液。该混合物搅拌3小时，在搅拌之后，其在DCM和饱和NaHCO3之间分配。有机层在真空浓缩提供为棕褐色固体的标题化合物。
MS(ES+)：m/z 253.07(100)[MH+]；HPLC：tR＝2.61min(ZQ3，极性_5min)。
化合物99B：4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1，2，3，6-四氢吡啶
4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基(Tetrahedron Letters，2000，44，pp3705-3708，500mg，1.617mmol)加入2mL DCM和2mL TFA。该混合物在室温搅拌3小时。溶剂真空蒸发提供标题化合物(323mg，96％收率)。该产物不进一步纯化用于接下来的步骤。MS(ES+)：m/z210.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.55min(UPLC，分析的)。
Figure BPA00001479300900791
实施例100：二乙基(4-{[4-({7-[1-(3-羟基环丁基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和化合物100A进行制备。在Suzuki反应和SPE预纯化后，干燥物质在DCM和醚中1.0M HCl中溶解。该混合物在室温搅拌半小时。粗物质使用MDP进行纯化。MS(ES+)：m/z 716.56(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.00min(UPLC，纯度)。
化合物100A：1-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环丁基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
在5分钟期间中，THF(0.13084mL，0.26168mmol)中的2.00M异丙基氯化镁的溶液逐滴加入冰冷却的THF(0.33mL)中的1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环丁基]-4-碘-1H-吡唑(化合物100B，30.00mg，0.07930mmol)的溶液。该反应混合物在0℃搅拌另外一个小时。2-甲氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷(0.057933mL，0.33939mmol)在0℃加入，然后混合物在室温搅拌另一个小时。反应混合物冷却回到0℃、用饱和NH4Cl水溶液淬灭、和用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤、经无水Na2SO4干燥、过滤和在真空中浓缩至干燥，给出为无色油状物的标题化合物。得到的混合物没有进一步纯化用于下一个步骤。MS(ES+)：m/z379.04(100)[MH+]；HPLC：tR＝3.85min(ZQ3，极性_5min)。
化合物100B：1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环丁基]-4-碘-1H-吡唑
3-(4-碘-吡唑-1-基)-环丁醇(化合物100C，75.00mg，0.2840mmol)、4-二甲基氨基吡啶(6.940mg，0.05680mmol)、1H-咪唑(58.01mg，0.8521mmol)、叔丁基二甲基氯硅烷(0.08562g，0.5680mmol)和DCM(4mL)的混合物在室温搅拌20分钟。该物质转移至用DCM提取、用NaHCO3饱和水溶液洗涤的分液漏斗。有机层干燥装载在二氧化硅上，用于己烷中的3％EtOAc洗脱的柱色谱上，以提供为无色油状物的59mg(55％收率)的标题化合物。MS(ES+)：m/z 378.94(100)[MH+]；HPLC：tR＝4.35min(极性_5min，ZQ3)。
化合物100C：3-(4-碘-1H-吡唑-1-基)环丁醇
3-(4-碘-吡唑-1-基)-环丁酮(化合物100D，1.000g，3.816mmol)、硼氢化钠(145.8mg，3.854mmol)和乙醇(22.28mL，381.6mmol)加入圆底烧瓶，和该反应混合物在0℃搅拌3h。反应混合物在真空中浓缩和用水洗涤DCM萃取物。有机层经无水Na2SO4干燥和在真空中浓缩，提供956mg的为无水油状物的最终化合物。化合物没有进一步纯化用于下一个步骤之上。MS(ES+)：m/z 264.86(100)[MH+]；HPLC：tR＝2.50min(极性_5min，ZQ3)。
化合物100D：3-(4-碘-吡唑-1-基)-环丁酮
二氧杂环乙烷-水(140mL的1∶1混合物)中的1-(5，8二氧-杂螺[3.4]辛-2-基)-4-碘-1H-吡唑(化合物100E，8.8g，29mmol)和对甲苯磺酸吡啶鎓(21g，87mmol)的溶液在85℃搅拌12h。反应混合物浓缩和用乙酸乙酯(100mL)稀释，有机层用水洗涤(2×50mL)、干燥(Na2SO4)和浓缩给出6.5g(收率：86％)的3-(4-碘-1H-吡唑-1-基)环丁酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝.3.53-3.57(m，2H)，3.73-3.77(m，2H)，5.0-5.02(m，1H)，7.56(s，1H)，7.58(s，1H)。
化合物100E：1-(5，8二氧-杂螺[3.4]辛-2-基)-4-碘-1H-吡唑
粉末化的K2CO3(41.4g，300mmol)和18-冠醚-6醚(5.3g，20mmol)加入到DMF(100mL)中的2-溴-5，8二氧-杂螺[3.4]辛烷(化合物100F，19g，100mmol)和4-iodo吡唑(38.6g，200mmol)的溶液。该反应混合物在85-90℃搅拌2小时。反应混合物用乙酸乙酯(400mL)稀释和用水洗涤(4×100mL)。合并的有机层用盐水洗涤和浓缩，残留物通过柱色谱(乙酸乙酯/DCM：5∶95)进行纯化，提供8.8g(29％)的1-(5，8二氧-杂螺[3.4]辛-2-基)-4-碘-1H-吡唑。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝2.87-2.89(m，4H)，3.92-3.96(m，4H)，4.64-4.68(m，1H)，7.53(s，2H)。
化合物100F：2-溴-5，8二氧-杂螺[3.4]辛烷
苯(40mL)中的3-溴环丁酮(化合物100F，5.9g，39.6mmol)、1，2-乙二醇(8.6mL，158.4mmol)和PPTS(1.9g，7.92mmol)的混合物在迪-斯二氏法装置中加热至回流。在12h后，使反应混合物冷却和用水洗涤(2×30mL)。干燥有机相(Na2SO4)和浓缩，残留物通过柱色谱(乙酸乙酯/己烷：1∶5)纯化，给出984mg的2-溴-5，8二氧-杂螺[3.4]辛烷。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝2.77-2.82(m，2H)，2.95-3.00(m，2H)，4.19-4.23(m，1H)。
化合物100F：3-溴环丁酮
CCl4(20mL)中的溴(0.51mL，10mmol)的溶液加热至70℃，然后在30分钟中加入3-氧杂环丁酸(1.14g，10mmol)和红色氧化汞(1.56g，7.9mmol)的混合物。在1h后，反应混合物变为无色。滤除固体和溶剂使用旋转蒸发器在30℃除去(产物是挥发性的，22℃/0.5mmHg)。残留物在己烷中溶解和通过二氧化硅垫过滤和浓缩给出3-溴环丁烷，其含有CCl4。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝3.44-3.50(m，2H)，3.72-3.80(m，2H)，4.51-4.55(m，1H)。
Figure BPA00001479300900811
实施例101：二乙基[4-({4-[(7-{1-[(2S)-2，3-二羟基丙基]-1H-吡唑-4-基}-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、使用[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和1-{[(4S)-2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基]甲基}-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑进行制备。在Suzuki反应和SPE预纯化后，干燥物质溶解在DCM和醚中1.0MHCl中。混合物在室温搅拌半小时。粗物质使用MDP纯化。1H NMR(DMSO-d6)δppm：10.74(s，1H)，9.91(s，1H)，8.70(br s，1H)，8.47(s，1H)，8.18(s，1H)，7.97(s，1H)，7.77(d，J＝8.6Hz，1H)，7.55(br s，2H)，7.30(d，J＝6.8Hz，2H)，5.00(d，J＝5.3Hz，1H)，4.76(t，J＝5.6Hz，1H)，4.64(s，2H)，4.27(dd，J＝13.8，4.2Hz，1H)，4.02-4.07(m，1H)，3.93-4.02(m，4H)，3.84-3.92(m，1H)，3.35-3.43(m，2H)，3.20-3.29(m，2H)，3.13(s，3H)，1.17(td，J＝7.0，1.9Hz，6H).MS(ES+)：m/z 690.11[MH+]；HPLC：tR＝3.04min(ZQ3，极性_5min)。
化合物101A：1-{[(4S)-2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基]甲基}-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
无水DMF(236mL)中的4-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(9.24g，47.6mmol)、(R)-(-)-(2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲基对-甲苯磺酸酯(15.00g，52.38mmol)和CsHCO3(23.3g，71.4mmol)加热至100℃持续16h。反应混合物冷却至室温和在EtOAc和H2O之间分配。水层用EtOAc(3x)重新萃取和合并的有机部分用H2O(2x)和盐水(2x)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和在真空中浓缩，得到为橙色油状物的标题化合物，其不进一步纯化在下个步骤中使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝1.31(s，12H)，1.33(s，3H)，1.39(s，3H)，3.78(dd，J＝8.8，5.9Hz，1H)，4.07(dd，J＝8.8，6.2Hz，1H)，4.23-4.35(m，2H)，4.47(quint，J＝5.8Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.81(s，1H)。
Figure BPA00001479300900821
实施例102：二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
TFE(1.00mL)中的二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(50.0mg，0.110mmol)和2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺(化合物102A，22.24mg，0.1322mmol)的溶液加入TFA(37.7mg，0.330mmol)。该反应混合物在微波上105℃照射1小时。该反应混合物在减压下浓缩产生橙色油。该物质通过在使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的ISCO Combi-flash Rf系统上得硅胶色谱进行纯化。合并含有产物的该部份和在减压下浓缩产生白色固体21.4mg(33％收率)。该物质仍然含有杂质，因此其被提交用于质量定向的纯化。合并含有产物的部份和在冷冻干燥机上干燥产生白色固体10.9mg(17％收率)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.19(t，J＝7.07Hz，6H)，2.76(d，J＝4.55Hz，3H)，3.21-3.28(m，2H)，3.76(s，3H)，3.92-4.04(m，4H)，6.84(d，J＝6.57Hz，1H)，7.01(br.s.，1H)，7.24(br.s.，1H)，7.38-7.65(m，2H)，8.24-8.55(m，2H)，8.79(br.s.，2H)，11.25(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 586.19[MH+](TOF，极性)。
化合物102A：2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺
乙醇(10.0mL)中的5-氟-N-甲基-2-硝基苯甲酰胺(化合物102B)的溶液加入活性碳(0.316g，0.297mmol)上的10％钯。反应混合物抽空和用氢气气体换气(3次)。使反应混合物在氢气下室温搅拌16h。反应混合物通过硅藻土垫过滤。滤液在减压下浓缩产生淡黄色半固体。该物质通过使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的硅胶色谱上进行纯化。合并含有产物的部份，并在减压下浓缩产生白色固体0.500g(100％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝2.98(d，J＝4.80Hz，3H)，5.30(d，J＝5.31Hz，1H)，6.64(dd，J＝8.84，4.80Hz，1H)，6.96(ddd，J＝8.91，7.89，2.91Hz，1H)，7.02(dd，J＝9.22，2.91Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 169.08[MH+](TOF，极性)。
化合物102B：5-氟-N-甲基-2-硝基苯甲酰胺
DCM(10.0mL)中的5-氟-2-硝基苯甲酸(0.550g，2.97mmol)、甲胺盐酸盐(0.241g，3.56mmol)、TBTU(0.954g，2.97mmol)和DIPEA(1.15g，8.91mmol)的溶液在室温搅拌30分钟。反应用饱和NaHCO3(10mL)淬灭和用DCM(15mL)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥、过滤和在减压下浓缩产生黄色半固体。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.06(d，J＝5.05Hz，3H)，7.20-7.26(m，1H)，8.16(dd，J＝8.84，4.55Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 199.05[MH+](TOF，极性)。
实施例103：二乙基(4-{[4-{[5-氟-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和2-氨基-4-氟-N-甲基苯甲酰胺进行制备。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.19(t，J＝7.07Hz，6H)，2.77(d，J＝4.55Hz，3H)，3.16-3.24(m，2H)，3.78(s，3H)，3.92-4.01(m，4H)，6.83(d，J＝7.83Hz，1H)，6.93(br.s.，1H)，6.99(s，1H)，7.53(br.s.，1H)，7.78(t，J＝7.33Hz，1H)，8.25-8.48(m，2H)，8.62-9.04(m，2H)，11.86(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 586.18[MH+](TOF，极性)。
化合物103A：2-氨基-4-氟-N-甲基苯甲酰胺
标题化合物使用化合物102A、用4-氟-N-甲基-2-硝基苯甲酰胺(化合物103B)进行制备。MS(ES+)：m/z 169.07[MH+](TOF，极性)。
化合物103B：4-氟-N-甲基-2-硝基苯甲酰胺
标题化合物使用5-氟-N-甲基-2-硝基苯甲酰胺(化合物102B)的步骤、用商业可得的4-氟-2-硝基苯甲酸的步骤进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.04(d，J＝4.80Hz，3H)，5.88(br.s.，1H)，7.39(ddd，J＝8.46，7.45，2.53Hz，1H)，7.55(dd，J＝8.59，5.31Hz，1H)，7.78(dd，J＝8.34，2.53Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 199.05[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300900832
实施例104：二乙基(3-氯-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(0.060g，0.18mmol)和二乙基(4-氨基-3-氯苄基)膦酸酯(化合物104A，0.101g，0.363mmol)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.56(s，1H)，9.40(s，1H)，8.70(d，J＝4.55Hz，1H)，8.38(s，1H)，7.66(dd，J＝1.39，7.96Hz，1H)，7.50(d，J＝8.08Hz，1H)，7.46(t，J＝2.27Hz，1H)，7.29-7.34(m，1H)，7.24-7.29(m，2H)，7.04(t，J＝7.20Hz，1H)，3.94-4.05(m，4H)，2.77(d，J＝4.55Hz，3H)，1.19(t，J＝6.95Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：572.08[MH+].HPLC：tR＝3.42min(微质量ZQ3：极性_5min)。
化合物104A：2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺
2-氨基-N-甲基苯甲酰胺(350mg，2.3mmol)在室温加入干燥CH3CN(40mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(500mg，2.3mmol)的溶液。反应混合物使用干冰冷却至-30℃。加入粉末状的KOH(1.0g，17.8mmol)和反应混合物在-30℃搅拌1h，然后升温至-10℃至-5℃和搅拌另2h，然后用水淬灭(200mL)。该混合物用EtOAc(3×100mL)萃取，合并的有机层经MgSO4干燥，浓缩，和残留物通过柱色谱纯化给出213mg的标题化合物(收率：28％)。1H NMR(DMSO，400MHz)：δ＝2.75(d，J＝4.4Hz，3H)，7.20-7.24(m，1H)，7.53-7.58(m，1H)，7.74(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H)，8.33(dd，J＝1.2，8.4Hz，1H)，8.85(s，br，1H)，12.0(s，br，1H).
化合物104B：二乙基(4-氨基-3-氯苄基)膦酸酯
乙醇(10mL)中的二乙基(3-氯-4-硝基苄基)膦酸酯(化合物104C，0.500g，1.62mmol)溶液加入铁(0.454g，8.12mmol)并加热至回流。当反应混合物达到回流时，加入0.1N HCl(0.500mL，0.0812mmol)的水溶液且搅拌10min。反应混合物通过硅藻土垫过滤和滤液在真空中浓缩。该化合物在用庚烷中40至90％EtOAc洗脱的Isco Combiflash上进行纯化，提供标题化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.19(t，J＝2.40Hz，1H)，7.01(td，J＝2.27，8.08Hz，1H)，6.71(dd，J＝0.63，8.21Hz，1H)，3.96-4.08(m，4H)，2.96-3.06(m，2H)，1.26(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：278.0633[MH+].HPLC：tR＝1.18min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物104C：二乙基(3-氯-4-硝基苄基)膦酸酯
三乙膦(2.6mL，15mmol)中的4-(溴甲基)-2-氯-1-硝基苯(化合物104D，2.9g，12mmol)的溶液在氮气下120℃搅拌16h。反应混合物真空浓缩和残留物在庚烷中在50至90％EtOAc洗脱的Isco Combiflash上纯化，提供标题化合物。MS(ES+)：m/z：308.0416[MH+].HPLC：tR＝1.33min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物104D：4-(溴甲基)-2-氯-1-硝基苯
在α，α，α-三氟甲苯(200mL)中的3-氯-4-硝基甲苯(2.0g，12mmol)、NBS(2.62g，14.6mmol)和2，2′-偶氮-二-异丁腈(0.195g，1.16mmol)溶液在氮气气氛下80℃加热3h。溶剂在真空除去，然后残留物在EtOAc和水之间分配和分离。水层用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩。粗产物没有纯化用于下个步骤。
Figure BPA00001479300900851
实施例105：二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-1，3-二氧-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的4-氨基-2-甲基-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮进行制备。MS(ES+)：m/z 594.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.17min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900852
实施例106：二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和化合物106A进行制备。MS(ES+)：m/z 618.23(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.11min(UPLC，纯度)。
化合物106A：2-氨基-5-溴-N-甲基苯甲酰胺
甲基2-氨基-5-溴苯甲酸酯(化合物106B，65g)和CH3NH2.H2O(1000mL)的混合物在压力管中80℃搅拌过夜。混合物用H2O(1000mL)稀释和用EtOAc(3×500mL)萃取。合并的有机层经MgSO4干燥、浓缩给出为灰色固体的标题化合物(55g，收率：87％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝2.93(d，J＝5.2Hz，3H)，5.48(s，br，2H)，6.04(s，br，1H)，6.54(d，J＝8.4Hz，1H)，7.24(dd，J＝2.0，8.4Hz，1H)，7.38(d，J＝2.0Hz，1H)。
化合物106B：甲基-2-氨基-5-溴苯甲酸酯
2-氨基-5-溴苯甲酸(80g，0.37mmol)溶解在甲醇(600mL)中，然后H2SO4(50mL)的溶液缓慢地加入。反应混合物回流72h，然后浓缩。NaOH溶液加入以调节pH至10-11。混合物用EtOAc(3×500mL)萃取。合并的有机层经MgSO4干燥，浓缩以提供为无色油状物的期望的化合物(65g，收率：76％)，其不纯化直接在下个步骤中使用。
Figure BPA00001479300900861
实施例107：二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物106A进行制备。MS(ES+)：m/z646.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.14min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900862
实施例108：二乙基(3-溴-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(0.300g，0.907mmol)和化合物108A进行制备，以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.56(s，1H)，9.38(s，1H)，8.69(d，J＝4.55Hz，1H)，8.37(s，1H)，7.65(dd，J＝1.39，7.96Hz，1H)，7.63(t，J＝2.15Hz，1H)，7.47(d，J＝8.08Hz，1H)，7.31(td，J＝2.24，8.15Hz，1H)，7.25-7.29(m，1H)，7.03(t，J＝7.71Hz，1H)，3.95-4.04(m，4H)，2.76(d，J＝4.55Hz，3H)，1.19(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：616.08，618.06[MH+].HPLC：tR＝3.46min(微质量ZQ3：极性_5min)。
化合物108A：二乙基(4-氨基-3-溴苄基)膦酸酯
二-叔丁基[2-溴-4-(溴甲基)苯基]亚氨二羧酸酯(化合物108B，6.0g，13mmol)吸收在三乙膦(5.0mL，29mmol)中，且在120℃搅拌16h。反应混合物转移至微波小瓶中，然后在微波中190℃照射4h。反应混合物在真空浓缩。化合物在用庚烷中10至100％EtOAc洗脱的Isco Combiflash上纯化。产物在EtOAc和水和separated。水相用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩提供标题化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.33(t，J＝2.27Hz，1H)，7.04(ddd，J＝2.27，2.40，8.21Hz，1H)，6.71(dd，J＝0.76，8.08Hz，1H)，3.97-4.06(m，4H)，2.96-3.04(m，2H)，1.26(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：322.00，323.96[MH+].HPLC：tR＝2.83min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物108B：二-叔丁基[2-溴-4-(溴甲基)苯基]亚氨二羧酸酯
α，α，α-三氟甲苯(16mL)中的二-叔丁基(2-溴-4-甲基苯基)亚氨二羧酸酯(化合物108C，5.0g，13mmol)、NBS(2.56g，14.2mmol)和2，2′-偶氮-二-异丁腈(0.217g，1.29mmol)的溶液在氮气气氛下80℃加热3h。溶剂在真空中除去，然后残留物在在EtOAc和水之间分配和分离。水相用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩至标题化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.64(d，J＝1.77Hz，1H)，7.34(dd，J＝2.02，8.08Hz，1H)，7.19(d，J＝8.08Hz，1H)，4.44(s，2H)，1.41(s，18H)；MS(ES+)：m/z：N/A[MH+].HPLC：tR＝1.83min(UPLC TOFMS：极性_3min)。
化合物108C：二-叔丁基(2-溴-4-甲基苯基)亚氨二羧酸酯
THF(50mL)中的3-溴-4-氨基甲苯(4.0g，21mmol)溶液加入二-叔丁基二羧酸酯(4.7g，21mmol)，且回流搅拌24h。反应混合物在EtOAc和水之间分配和分离。水层用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩。化合物在用庚烷中10至100％EtOAc洗脱的Isco Combiflash上以两批纯化，以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.40-7.44(m，1H)，7.08-7.10(m，2H)，2.35(s，3H)，1.41(s，18H)。
Figure BPA00001479300900871
实施例109：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基甲基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和化合物109A进行制备。MS(ES+)：m/z 633.45(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.72min(UPLC，纯度)。
化合物109A：7-氨基-2-甲基-4-(吡咯烷-1-基甲基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DCM(0.5mL)和TFA(0.5mL，6mmol)加入叔丁基[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基甲基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯(化合物109B)。溶液在室温搅拌20分钟。粗产物在真空总干燥，且不进一步纯化在下个步骤中直接使用。MS(ES+)：m/z246.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.29min(UPLC，分析级)。
化合物109B：叔丁基[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基甲基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯
THF(0.5mL)中的叔丁基(7-甲酰-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基甲酸酯(化合物109C，23.0mg，0.0792mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(101mg，0.475mmol)的混合物在室温搅拌20分钟。加入吡咯烷(39.7uL，0.475mmol)，然后得到的混合物在室温搅拌过夜。THF在真空中除去，然后粗产物在EtOAc和盐水之间分配。有机层经MgSO4干燥和在真空中浓缩以放出期望的产物。MS(ES+)：m/z346.32(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.76min(UPLC，分析级)。
化合物109C：叔丁基(7-甲酰-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基甲酸酯
叔丁基{2-甲基-3-氧代-7-[(E)-2-苯乙烯基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基甲酸酯(化合物109D，1.0E2mg，0.27mmol)以一部分加入到DMF(1.35mL)中的锇酸钾二水合物(1.0mg，0.0027mmol)和单过硫酸钾(170mg，1.1mmol)的预先搅拌的混合物(室温，45min)。在室温搅拌过夜后，反应混合物用1.35mL的饱和的Na2SO3水溶液处理。得到淤浆用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机层用1N HCl(3X)和盐水洗涤，然后在真空中浓缩。在使用ISCO Combiflash单元(庚烷中的0-15％EtOAc)色谱后得到为23mg的棕褐色固体的期望产物(29％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.51(s，9H)，3.08(s，3H)，4.74(s，2H)，8.12(d，J＝8.6Hz，1H)，8.21(d，J＝8.6Hz，1H)，9.95(s，1H)，10.01(s，1H).MS(ES+)：m/z 291.28(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.27min(UPLC，分析级)。
化合物109D：叔丁基{2-甲基-3-氧代-7-[(E)-2-苯基乙烯基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基甲酸酯
7-氨基-2-甲基-4-[(E)-2-苯基乙烯基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物109E，1.3g，4.9mmol)、二-叔丁基二羧酸酯(5.4g，24mmol)、4-二甲基氨基吡啶(60mg，0.49mmol)和乙腈(20mL)混合并在50℃加热，直到反应混合物变得澄清(～5分钟)。反应物然后在室温搅拌18小时。反应混合物浓缩并在柱色谱后分离期望产物(两个步骤的收率：47％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.50(s，9H)，3.10(s，3H)，4.69(s，2H)，7.11-7.26(m，2H)，7.26-7.32(m，1H)，7.39(t，J＝7.6Hz，2H)，7.61-7.67(m，2H)，7.84(d，J＝8.8Hz，1H)，8.05(d，J＝8.6Hz，1H)，9.71(s，1H)。
MS(ES+)：m/z 365.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.37min(UPLC，分析级)。
化合物109E：7-氨基-2-甲基-4-[(E)-2-苯基乙烯基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
10mL 1，4-二氧杂环乙烷和2.5mL H2O中的7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.0g，4.1mmol)、E-苯基乙烯基硼酸(921mg，6.22mmol)、碳酸钾(1.72g，12.4mmol)、与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(169mg，0.207mmol)的混合物在微波反应器中100℃照射30分钟。粗混合物在EtOAc和饱和NaHCO3之间分配。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。粗产物不进一步纯化在下个步骤中使用。MS(ES+)：m/z 265.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.24min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300900891
实施例110：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基甲基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物109A进行制备。MS(ES+)：m/z663.51(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.74min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900892
实施例111：二乙基(4-{[4-{[2-(二甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和商业可得的2-氨基-N，N-二甲基苯甲酰胺进行制备。MS(ES+)：m/z 552.38(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.96min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900901
实施例112：二乙基(4-{[4-{[2-(二甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的2-氨基-N，N-二甲基苯甲酰胺进行制备。MS(ES+)：m/z 582.40(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.01min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900902
实施例113：双(2-羟基乙基)(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、使用双(2-羟基乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物113A，30mg，0.1mmol)和2-(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基氨基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A，33mg，0.1mmol)进行制备。反应混合物在真空浓缩和残留物通过HPLC纯化以提供标题化合物。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝2.83(s，3H)，3.35(d，J＝21.6Hz，2H)，3.60(dd，J＝5.2，10.4Hz，4H)，3.84(s，3H)，3.99-4.03(m，4H)，4.95(t，J＝5.2Hz，2H)，6.92(d，J＝7.6Hz，1H)，7.11(s，1H)，7.16(t，J＝7.6Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.61(d，J＝8.0Hz，1H)，7.73(dd，J＝1.2，8.0Hz，1H)，8.43(s，1H)，8.48(m，1H)，8.80(m，2H)，11.49(s，1H).MS(ES+)：m/z 600.11[MH+]；HPLC：tR＝2.80min(ZQ3，极性_5min)。
化合物113A：双(2-羟基乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯
乙醇(80mL)中的双(2-羟基乙基)(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯(化合物133B，1.2g，3.58mmol)和5％Pd/C(0.2g)的混合物在50psi氢压下40℃氢化6h。过滤反应混合物，和浓缩滤液给出期望的产物(0.9g，82％)。
化合物113B：双(2-羟基乙基)(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯
在0℃，THF(300mL)中的3-甲氧基-4-硝基苄基膦酰二氯(1.72g，6.07mmol)的溶液逐滴加入到THF中的乙二醇(1.5g，24mmol)和TEA(2.4g，24mmol)的溶液。反应混合物升温至室温并在70℃搅拌12h。除去溶剂，和残留物通过柱色谱纯化给出1.2g期望的产物(收率：59％)。
Figure BPA00001479300900911
实施例114：双(2，2，2-三氟乙基)(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用双(2，2，2-三氟乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物114A，38mg，0.1mmol)和2-(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基氨基)-N-甲基苯甲酰胺(33mg，0.1mmol)进行制备。反应混合物在真空中浓缩，和残留物通过HPLC纯化提供标题化合物。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝2.73(s，3H)，3.52(d，J＝21.6Hz，2H)，3.73(s，3H)，4.60-4.65(m，4H)，6.81(d，J＝7.6Hz，1H)，6.98(s，1H)，7.05(t，J＝7.6Hz，1H)，7.34(t，J＝7.2Hz，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.65(dd，J＝1.2，7.6Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.38(s，1H)，8.68(d，J＝4.4Hz，1H)，8.71(s，1H)，11.42(s，1H).MS(ES+)：m/z 676.05[MH+]；HPLC：tR＝3.69min(ZQ3，极性_5min)。
化合物114A：双(2，2，2-三氟乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯：
标题化合物根据化合物113A的步骤、使用双(2，2，2-三氟乙基)(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯(化合物114B，2.8g，6.81mmol)进行制备。过滤反应混合物，和滤液浓缩给出期望的产物(2g，77％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝3.29(d，J＝21.2Hz，2H)，3.68(s，3H)，4.50-4.61(m，4H)，4.64(s，br，2H)，6.50-6.60(m，2H)，6.67(s，1H)。
化合物114B：双(2，2，2-三氟乙基)(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯
在0℃，THF(30mL)中的3-甲氧基-4-硝基苄基膦酰二氯(化合物114C，4.0g，14.2mmol)溶液逐滴加入到THF(30mL)中的2，2，2-三氟乙醇(5.7g，57mmol)和TEA(5.7g，57mmol)的溶液。反应混合物升温至室温，并在70℃搅拌12h。除去溶剂，然后残留物通过柱色谱纯化给出2.8g期望的产物(收率：52％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.85(dd，J＝8.3，1.0Hz，1H)，7.04(t，J＝2.0Hz，1H)，6.95(dq，J＝8.3，1.8Hz，1H)，4.29-4.41(m，4H)，3.97(s，3H)，3.39(d，J＝22.7Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 411.96(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.31min(ZQ3，极性_5min)。
化合物114C：(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酰二氯
亚硫酰氯(100mL)中的(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸(化合物114D，30g，66mmol)溶液回流18h。在减压下除去过量的亚硫酰氯留下残留物(20g，82％)，其不纯化在下个步骤中使用。
化合物114D：(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸
在浓HCl(50.0mL，1630mmol)中的二乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯(化合物114E，5.04g，16.6mmol)的悬浮液在120℃加热总共16h小时。在冷却至环境温度后，反应混合物在真空中浓缩。在真空下干燥数个小时，当静止时固体沉淀，给出为黄色固体的标题物质4.1398g(96％，15.913mmol)。1H NMR(DMSO-d6)δppm7.81(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，7.23(t，J＝1.9Hz，1H)，6.99(dt，J＝8.3，1.9Hz，1H)，5.75(br s，3H)，3.89(s，5H)，3.10(d，J＝22.0Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 248.02(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.68min(ZQ3，极性_5min)。
化合物114E：二乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯
在密闭的试管中，4-(溴甲基)-2-甲氧基-1-硝基苯(4.22g，17.2mmol)和三乙膦(3.5g，21mmol)的混合物加热至100℃持续16h。反应物冷却至环境温度、转移至圆底烧瓶，和在真空中浓缩。粗油吸附到预填充固体装载柱[RediSepRf25克]，和使用0-5％甲醇∶CH2Cl2洗脱的Teledyne/ISCO系统[RediSepRf二氧化硅40克]进行纯化。合并期望的部份和在真空中浓缩，给出为黄色油的标题化合物5.0439g(87％，14.970mmol)。1H NMR(CDCl3)δppm 7.83(dd，J＝8.2，0.9Hz，1H)，7.08(t，J＝1.9Hz，1H)，6.94(dt，J＝8.3，2.0Hz，1H)，4.07(ddd，J＝8.3，7.1，1.3Hz，4H)，3.97(s，3H)，3.14-3.25(m，2H)，1.29(t，J＝7.1Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 304.00(100)[MH+]。HPLC：tR＝2.89min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300900931
实施例115：二乙基[(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)(2，2，2-三氟乙氧基)甲基]膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(40mg，0.12mmol)和二乙基[(4-氨基苯基)(羟基)甲基]-膦酸酯(37.6mg，0.15mmol)进行制备。粗产物通过制备TLC(DCM中的5％的甲醇中的7N氨)进行纯化，给出13.8mg期望的产物(收率：18％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.22(t，J＝7.6Hz，3H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H)，2.90(s，3H)，3.91-4.08(m，4H)，4.12-4.18(m，2H)，4.95(d，J＝14.8Hz，1H)，7.18(t，J＝7.2Hz，1H)，7.36(d，J＝8.4Hz，2H)，7.49(dt，J＝2.4，7.6Hz，1H)，7.64(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)，7.68(d，J＝7.6Hz，2H)，8.35(s，1H)，8.43(m，1H)。MS(ES+)：m/z 636.14[MH+]。HPLC：tR＝1.59min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物115A：二乙基[(4-氨基苯基)(羟基)甲基]膦酸酯
THF(30mL)中的对-硝基苯甲醛(3.022g，20mmol)、二乙基亚磷酸酯(2.762g，20mmol)和MgO(2.0g，49.6mmol)的混合物在室温搅拌5天。过滤反应混合物，浓缩滤液，和通过硅胶色谱(EtOAc/己烷：1∶4)纯化残留物给出4.53g的二乙基[(4-硝基苯基)(羟基)甲基]膦酸酯(收率：78％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.27(m，6H)，4.08-4.18(m，4H)，5.18(d，J＝12.0Hz，1H)，7.67-7.70(m，2H)，8.24(dd，J＝0.8，8.8Hz，2H)。MS(ES+)：m/z290.07[MH+]。HPLC：tR＝1.15min(UPLC TOF，极性_3min)。该物质(4.53g)在甲醇(20mL)中的10％Pd/C(200mg)的存在下、在1个大气压下氢化4h。滤除催化剂，浓缩滤液，然后通过硅胶色谱(DCM中的2％甲醇)纯化残留物给出3.93g的标题化合物(收率：72％)。MS(ES+)：m/z 242.08[MH+-H2O]。HPLC：tR＝0.8min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300900941
实施例116：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基羰基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和化合物116A进行制备。MS(ES+)：m/z 647.49(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.97min(UPLC，纯度)。
化合物116A：7-氨基-2-甲基-4-(吡咯烷-1-基羰基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DCM(0.5mL)和TFA(0.5mL)加入到叔丁基[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基羰基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯(化合物116B)。反应混合物在室温搅拌30分钟，在其之后反应混合物浓缩至干燥和不进一步纯化使用。MS(ES+)：m/z260.30(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.69min(UPLC，分析级)。
化合物116B：叔丁基[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基羰基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯
混合7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸(化合物116C，45mg，0.15mmol)、吡咯烷(123uL，1.47mmol)、TBTU(236mg，0.734mmol)、DIPEA(128uL，0.734mmol)和DMF(1mL)，和在室温搅拌2小时。反应混合物用EtOAc稀释，并用水(2X)和盐水洗涤。粗产物通过柱色谱纯化。MS(ES+)：m/z360.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.20min(UPLC，分析级)。
化合物116C：7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸
锇酸钾二水合物(10.1mg，0.0274mmol)和单过硫酸钾(270mg，1.8mmol)加到DMF(1.35mL)，和该混合物在室温一起搅拌45分钟。叔丁基{2-甲基-3-氧代-7-[(E)-2-苯基乙烯基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基甲酸酯(100mg，0.27mmol)以一部分加入，得到的混合物在室温搅拌过夜。加入锇酸钾和单过硫酸钾的另一部分，然后得到的混合物在室温搅拌周末。饱和Na2SO3(1.35mL)水溶液加入至粗混合物，然后淤浆通过EtOAc(3X)萃取。用1N HCl(3X)和盐水洗涤合并的有机层。粗产物在下个步骤中直接使用。MS(ES+)：m/z 307.26(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.14min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300900951
实施例117：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(吡咯烷-1-基羰基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物116A进行制备。MS(ES+)：m/z677.46(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.98min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900952
实施例118：甲基7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和化合物118A进行制备。MS(ES+)：m/z 608.32(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.08min(UPLC，纯度)。
化合物118A：甲基7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸酯甲基
混合7-[双(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸酯(化合物118B，40.0mg，0.0951mmol)、DCM(0.4mL)和TFA(0.4mL)，然后在室温搅拌30分钟。蒸发溶剂和粗产物在下个步骤中直接使用。MS(ES+)：m/z221.26(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.77min(UPLC，分析级)。
化合物118B：甲基7-[双(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸酯
甲醇(5mL)和THF(10mL)中的二-叔丁基(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)亚氨二羧酸酯(化合物118C，500mg，1.13mmol)、Pd(PPh3)4(131mg，0.113mmol)的混合物抽空，用一氧化碳重新充满(3x)，然后在65℃加热过夜。在真空中除去溶剂，和粗产物在EtOAc中吸收，和用水、然后用盐水连续洗涤。期望的产物通过柱色谱纯化。MS(ES+)：m/z 321.28(100)[(M-Boc)H+]；HPLC：tR＝1.32min(UPLC，分析级)。
化合物118C：二-叔丁基(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)亚氨二羧酸酯
MeCN(20.0mL)中的7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.0g，4.1mmol)、二-叔丁基二羧酸酯(5.43g，24.9mmol)、4-二甲基氨基吡啶(507mg，4.15mmol)的混合物在50℃加热10分钟，和然后在室温搅拌2小时。产物通过色谱纯化给出期望产物(1.2g，66％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.34(s，18H)，3.05(s，3H)，4.40(s，2H)，7.23(d，J＝8.3Hz，1H)，7.77(d，J＝8.3Hz，1H).MS(ES+)：m/z 341.17，343.18(100)[(M-Boc)H+]；HPLC：tR＝1.16min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300900961
实施例119：甲基7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物118A进行制备。MS(ES+)：m/z638.24(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.09min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900962
实施例120：乙基氢[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
37％HCl(1mL)中的二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(14.7mg，0.0254mmol)的溶液在80℃加热3.5h。反应混合物在真空中浓缩。残留物在DMSO中溶解，和提交用于质量定向的纯化(在碱性条件下；碳酸氢铵缓冲液，pH 9)。含有产物的部份进行合并和在真空中浓缩，产生为白色固体的标题物质4.5mg(32％)。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm：8.50(br s，1H)，8.32(s，1H)，7.71(d，J＝8.1Hz，1H)，7.47(t，J＝8.0Hz，1H)，7.16(d，J＝7.3Hz，1H)，7.12(t，J＝1.6Hz，1H)，6.94(dt，J＝8.1，1.9Hz，1H)，4.45(s，2H)，3.89(s，3H)，3.88(quin，J＝6.9Hz，2H)，3.16(s，3H)，3.02(d，J＝20.2Hz，2H)，1.20(t，J＝7.1Hz，3H).MS(ES+)：m/z 552.15[MH+]；HPLC：tR＝2.81min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300900971
实施例121：二乙基(4-{[4-{[7-(六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]
Figure BPA00001479300900972
嗪-8(1H)-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和化合物121A进行制备。MS(ES+)：m/z 690.38(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.78min(UPLC，纯度)。
化合物121B：7-氨基-4-(六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]嗪-8(1H)-基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物使用化合物210A步骤、用化合物121B进行制备。
MS(ES+)：m/z 303.35(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.29min(UPLC，分析级)。
化合物121C：4-(六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]
Figure BPA00001479300900974
嗪-8(1H)-基)-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物使用化合物210B步骤、用化合物121D进行制备。MS(ES+)：m/z333.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.15min(UPLC，分析级)。
化合物121D：八氢吡嗪并[2，1-c][1，4]
Figure BPA00001479300900975
嗪二-盐酸
根据WO2006/120478进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ
Figure BPA00001479300900976
3.09-3.26(m，2H)，3.32-3.42(m，3H)，3.52-3.56(m，2H)，3.62-3.74(m，4H)，3.95-3.98(m，2H)。
Figure BPA00001479300900981
实施例122：二乙基(4-{[4-{[7-(六氢吡嗪并[2，1-c][1，4]
Figure BPA00001479300900982
嗪-8(1H)-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物121A进行制备。MS(ES+)：m/z720.47(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.79min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300900983
实施例123：二乙基[4-({4-[(5-溴-2-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-8-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(166.9mg，0.3939mmol)和8-氨基-5-溴-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(化合物123A，120mg，0.47mmol)进行制备。该粗物质吸附在预填充的二氧化硅装载柱之上，并使用首选用0-100％EtOAc∶CH2Cl2、然后15％甲醇∶EtOAc洗脱的ISCO Combiflash系统纯化。期望部份合并在一起和在真空中浓缩。该物质通过在CH2Cl2和庚烷中研制进一步纯化给出标题产物(158.3mg62％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 13.28(br s，1H)，9.90(s，1H)，8.82(br s，1H)，8.50(s，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，1H)，7.70(d，J＝7.6Hz，1H)，7.58(br d，J＝5.6Hz，2H)，7.25(dd，J＝8.6，2.3Hz，2H)，6.82(d，J＝7.6Hz，1H)，3.90-4.03(m，4H)，3.55(s，3H)，3.21(d，J＝21.2Hz，2H)，1.19(t，J＝6.9Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 640.03/642.05(96/100)[MH+]。HPLC：tR＝3.90min(ZQ3，极性_5min)。
化合物123A：8-氨基-5-溴-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮
铁粉(0.5g)和2N HCl(3mL)加入到乙醇中(15mL)的5-溴-8-硝基-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(化合物123B，0.350g，1.2mmol)的溶液。得到的混合物加热回流2h。TLC(EtOAc/CH2Cl2：1∶9)显示反应完全。在冷却至室温后，过滤反应混合物，用乙醇/CH2Cl2混合物洗涤固体。合并的滤液蒸发至干燥，用Na2CO3水溶液(20mL)中和，且用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有机层用水(20mL)洗涤，干燥和蒸发给出残留物，其通过在二氧化硅上的柱色谱(EtOAc/CH2Cl2：1∶9))纯化提供为固体的期望产物(0.120g，39％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝3.51(s，3H)，6.44(d，J＝7.8Hz，1H)，6.53(br，2H)，6.71(d，J＝7.8Hz，1H)，7.03(d，J＝7.5Hz，1H)，7.49(d，J＝8.7Hz，1H)。
化合物123B：5-溴-8-硝基-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮
Na2CO3水溶液(5％，400mL)和过氧化氢(30％，20mL)加入到CH2Cl2(400mL)中的5-溴-2-甲基-8-硝基异喹啉甲苯磺酸鎓盐(20.0g)的溶液。得到的混合物在室温搅拌16h，分离有机层，和水层用CH2Cl2(5×100mL)萃取。合并的有机层用水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥和蒸发给出粗产物，该粗产物通过在二氧化硅上的柱色谱(EtOAc/CH2Cl2(1∶9))纯化给出2.2g期望的产物(收率：8％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝3.60(s，3H)，6.90(d，J＝7.8Hz，1H)，7.28(d，J＝7.2Hz，1H)，7.30(d，J＝7.2Hz，1H)，7.92(d，J＝7.8Hz，1H)。
Figure BPA00001479300900991
实施例124：双(2，2，2-三氟乙基)[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用双(2，2，2-三氟乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物124A，67.0mg，0.119mmol)和7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(制备XXXVIII，26.9mg，0.166mmol)进行制备。该粗产物吸附在预填充固体装载柱之上，并使用0-5％甲醇∶CH2Cl2洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统纯化。期望部份合并在一起和在真空中浓缩。该物质通过MDP进一步纯化(在碱性条件下；碳酸氢铵缓冲液，pH 9)，其提供为非纯白色固体的标题物质54.8mg(64％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.60(s，1H)，9.13(s，1H)，8.40(s，1H)，8.37(br s，1H)，7.49(br d，J＝7.1Hz，1H)，7.37(br t，J＝7.1Hz，1H)，7.15(d，J＝7.6Hz，1H)，7.06(s，1H)，6.92(d，J＝8.1Hz，1H)，4.60-4.74(m，4H)，4.45(s，2H)，3.74(s，3H)，3.61(d，J＝22.2Hz，2H)，3.06(s，3H)。MS(ES+)：m/z688.08(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.72min(ZQ3，极性_5min)。
化合物124A：双(2，2，2-三氟乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
该化合物使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯的步骤、用双(2，2，2-三氟乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物114A)和2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶进行制备。使用用庚烷中w/20-100％EtOAc和然后MDP(碳酸氢铵碱性缓冲液pH9)洗脱的ISCO Combiflash系统进行纯化。1HNMR(DMSO-d6)δppm 9.73(s，1H)，8.69(s，1H)，7.47(d，J＝8.0Hz，1H)，7.03(s，1H)，6.90(d，J＝7.9Hz，1H)，4.67(quin，J＝8.5Hz，4H)，3.76(s，3H)，3.56(d，J＝22.1Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 562.00/564.02(100/38)[MH+]。HPLC：tR＝3.86min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901001
实施例125：二乙基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用实施例106和商业可得的1-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑的步骤制备。MS(ES+)：m/z618.24(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.93min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901011
实施例126：二乙基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-4-基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用实施例106和商业可得的1-丙基-1H-吡唑-4-硼酸的频哪醇酯进行制备。MS(ES+)：m/z 646.29(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.14min(UPLC，纯度)
Figure BPA00001479300901012
实施例127：二乙基(4-{[4-({4-[1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-(甲基氨基甲酰基)苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用使用实施例97的步骤、用实施例106和化合物98A进行制备。MS(ES+)：m/z 676.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.04min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901013
实施例128：7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和化合物128A进行制备。MS(ES+)：m/z 594.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.05min(UPLC，纯度)。
化合物128A：7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸
标题化合物通过用TFA脱保护化合物116C进行制备。粗产物不纯化用于下个步骤。
Figure BPA00001479300901021
实施例129：7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-羧酸
标题化合物使用实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物128A进行制备。MS(ES+)：m/z624.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.07min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901022
实施例130：二乙基(2-氟-5-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
TFE(1.1mL)中的2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A，75.0mg，0.227mmol)和二乙基(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物130A，79.0mg，0.271mmol)的溶液加入TFA(77.3mg，0.678mmol)。反应混合物在微波上105℃照射30分钟。该反应混合物在减压下浓缩产生黄色油。该反应产物通过在使用EtOAc/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的combi-flash Rf上的硅胶色谱纯化。合并含有产物的部份和在减压下浓缩产生白色固体71.3mg(54％收率)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.20(t，J＝7.07Hz，6H)，2.77(d，J＝4.55Hz，3H)，3.16-3.25(m，2H)，3.79(s，3H)，3.95-4.04(m，4H)，7.01(d，J＝5.05Hz，1H)，7.10-7.17(m，1H)，7.42(t，J＝7.58Hz，1H)，7.70(d，J＝7.58Hz，2H)，8.40(br.s.，1H)，8.44(s，1H)，8.67(s，1H)，8.73(d，J＝3.79Hz，1H)，11.41(s，1H)。MS(ES+)：m/z586.19[MH+](TOF，极性)。
化合物130A：二乙基(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据化合物102A的步骤、使用化合物130B进行制备。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.25-1.30(m，6H)，3.06-3.14(m，2H)，3.84(s，3H)，4.01-4.09(m，4H)，6.56(d，J＝10.36Hz，1H)，6.80(dd，J＝6.57，2.27Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 292.11[MH+](TOF，极性)。
化合物130B：二乙基(2-氟-5-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯
1-(氯甲基)-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(化合物130C，1.578g，7.186mmol)和三乙膦(1.43g，8.62mmol)的混合物在密闭试管中、100℃加热16h。在减压下浓缩该反应混合物，粗产物通过使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的ISCOcombi-flash系统上的硅胶色谱纯化，给出橙色油800mg(35％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝7.07Hz，6H)，3.20-3.27(m，2H)，3.97(s，3H)，4.11(dd，J＝8.08，7.07Hz，4H)，7.17(dd，J＝5.94，2.65Hz，1H)，7.67(dd，J＝8.72，0.88Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 322.09[MH+](TOF，极性)。
化合物130C：1-(氯甲基)-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯
无水DCM(17.0mL)中的(2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇(化合物130D，1.45g，7.21mmol)的溶液加入亚硫酰氯(1.055mL，14.5mmol)。并且在搅拌下回流16h。该反应混合物在减压下浓缩产生为褐色固体。该物质不进行任何进一步纯化使用。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.99(s，3H)，4.65(d，J＝1.01Hz，2H)，7.19(d，J＝5.81Hz，1H)，7.65(d，J＝8.84Hz，1H)。
化合物130D：(2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇
THF(23.6mL)中的2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯甲酸(化合物130E，1.60g，7.44mmol)的溶液被缓慢加入硼氢化钠(0.633g，16.8mmol)，然后搅拌5分钟。THF(7.85mL)中三氟化硼-乙醚络合物(0.895mL，7.26mmol)加入到该反应混合物。得到的溶液在回流下加热4h。该反应混合物冷却至0℃，然后用冰(15mL)淬灭，然后用醚(25mL)和2N NaOH(10mL)稀释。醚层用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和在减压下浓缩产生非纯白色固体1.45g(97％收率)。该物质不进行任何纯化使用。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.99(s，3H)，4.86(s，2H)，7.29(d，J＝5.81Hz，1H)，7.64(d，J＝9.09Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 202.05[MH+](TOF，极性)。
化合物130E：2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯甲酸
甲醇(18.8mL)中的2，5-二氟-4-硝基苯甲酸(1.88g，9.26mmol)的溶液分两批加入氢氧化钾(1.55g，27.7mmol)。该反应混合物在80℃搅拌1小时。该反应混合物在减压下浓缩，然后用HCl酸化。过滤得到的沉淀，用水洗涤和干燥给出为灰色粉末的产物1.61g(81％收率)。该物质不进行任何纯化在连续反应中使用。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝3.92(s，3H)，7.47(d，J＝5.56Hz，1H)，7.83(d，J＝9.09Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 214.01[MH-](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901041
实施例131：二乙基[4-({4-[(2-甲基-1-氧代-1，2-二氢异喹啉-8-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(203.1mg，0.4793mmol)和8-氨基-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(化合物131A，100.0mg，0.5740mmol)进行制备。该粗产物使用用0-5％甲醇∶CH2Cl2洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统进行纯化。期望的部份合并在一起并在真空中浓缩，产生为黄色固体的标题物质225.9mg(82％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 13.23(br s，1H)，9.88(s，1H)，8.87(br s，1H)，8.48(s，1H)，7.55-7.68(m，3H)，7.53(d，J＝7.1Hz，1H)，7.31(d，J＝7.1Hz，1H)，7.24(dd，J＝8.6，2.3Hz，2H)，6.70(d，J＝7.3Hz，1H)，3.91-4.01(m，4H)，3.53(s，3H)，3.20(d，J＝21.2Hz，2H)，1.18(t，J＝6.9Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 562.11(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.58min(ZQ3，极性_5min)。
化合物131A：8-氨基-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮
甲醇(120mL)和乙酸(5mL)的混合物中的8-氨基-5-溴-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(化合物123A，2.83g，10.0mmol)的溶液在5％Pd/C(500mg)上、在压力下氢化24h。另一批5％Pd/C(400mg)加入到该反应混合物，继续氢化另外24h。TLC(CH2Cl2中的5％甲醇)显示该反应完全。过滤除去催化剂，和滤液蒸发至干燥给出残留物，该残留物通过在二氧化硅上柱色谱(CH2Cl2中5％甲醇)纯化给出为固体的标题化合物(0.40g，23％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝3.50(s，3H)，6.32(d，J＝7.5Hz，1H)，6.48(br，2H)，6.54(d，J＝7.8Hz，1H)，6.67(d，J＝7.8Hz，1H)，6.91(d，J＝7.5Hz，1H)，7.29(d，J＝7.8Hz，1H)。
Figure BPA00001479300901051
实施例132：二乙基[4-({4-[(2-甲基-1-氧代-1，2，3，4-四氢异喹啉-8-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
该标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(52.9mg，0.125mmol)和8-氨基-2-甲基-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物132A，25mg，0.14mmol)进行制备。该粗物质吸附在预填充固体装载柱之上，并使用用0-5％甲醇∶CH2Cl2洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统进行纯化。期望的部份合并在一起和在真空中浓缩，给出为白色固体的标题物质42.0mg(59％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.55(br s，1H)，9.82(br s，1H)，8.44(s，1H)，8.56(br s，1H)，7.58(d，J＝7.8Hz，2H)，7.40(t，J＝8.0Hz，1H)，7.19(dd，J＝8.6，2.3Hz，2H)，6.97(d，J＝7.3Hz，1H)，3.95(qd，J＝7.4，7.2Hz，4H)，3.56(t，J＝6.7Hz，2H)，3.18(d，J＝21.2Hz，2H)，3.06(s，3H)，2.97(t，J＝6.6Hz，2H)，1.18(t，J＝7.1Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 564.16(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.50min(ZQ3，极性_5min)。
化合物132A：8-氨基-2-甲基-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
乙酸(10mL)中的8-氨基-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(化合物131A，100mg，0.54mmol)的溶液在PtO2(24mg)上、在室温氢化16h。TLC(CH2Cl2中的5％甲醇)显示反应完全。经硅藻土过滤除去催化剂，和滤液蒸发至干燥，给出残留物，其在EtOAc(20mL)中溶解，用饱和NaHCO3(20mL)水溶液、水(10mL)洗涤，干燥和蒸发，残留物通过在二氧化硅上的柱色谱(CH2Cl2中5％甲醇)纯化，给出期望的产物(25mg，25％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝2.96(t，J＝6.6Hz，2H)，2.98(s，3H)，3.55(t，J＝6.9Hz，2H)，6.18(br，2H)，6.45(d，J＝6.9Hz，1H)，6.58(d，J＝7.5Hz，1H)，7.15(t，J＝7.5Hz，1H)。
Figure BPA00001479300901061
实施例133：二乙基[羟基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)甲基]膦酸酯三氟乙酸盐
标题化合物使用实施例102的步骤、用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A，40.0mg，0.12mmol)和二乙基[(4-氨基苯基)(羟基)甲基]膦酸酯(化合物115A，37.6mg，0.15mmol)制备。反应混合物通过MDP纯化。期望的产物获得为40mg的白色固体(TFA盐，60％收率)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.24-1.31(m，6H)，2.89(s，3H)，4.01-4.16(m，4H)，5.03(d，J＝12.8Hz，1H)，7.26(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.45-7.55(m，6H)，7.68(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)，8.35(s，1H)。MS(ES+)：m/z 554.13[MH+]。HPLC：tR＝3.05min(OpenLynx，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901062
实施例134：二乙基(4-{[4-({2-(甲基氨基甲酰基)-4-[1-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和商业可得的1-异丁基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑进行制备。MS(ES+)：m/z 666.20(100)[MH+]；HPLC：tR＝3.60min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901071
实施例135：二乙基(4-{[4-{[4-{1-[(2S)-2，3-二羟基丙基]-1H-吡唑-4-基}-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和1-{[(4S)-2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基]甲基}-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(化合物101A)进行制备。在Suzuki反应和SPE预纯化后，干燥物质在DCM中溶解，和加入醚中的1.0M HCl。混合物在室温搅拌半小时。粗产物通过MDP纯化。MS(ES+)：m/z 678.38(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.87min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901072
实施例136：二乙基(4-{[4-({4-[1-(3-羟基环丁基)-1H-吡唑-4-基]-2-(甲基氨基甲酰基)苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环丁基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(化合物100A)进行制备。在Suzuki反应和SPE预纯化后，干燥物质在DCM中溶解，和加入醚中的1.0M HCl。混合物在室温搅拌半小时。粗产物送至MDP用于纯化。MS(ES+)：m/z 674.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.94min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901081
实施例137：二乙基(4-{[4-({4-[1-(反-4-羟基环己基)-1H-吡唑-4-基]-2-(甲基氨基甲酰基)苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和1-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(化合物137A)进行制备。在Suzuki反应和SPE预纯化后，干燥物质在DCM中溶解，和加入醚中1.0M HCl。混合物在室温搅拌半个小时。粗产物送至MDP用于纯化。MS(ES+)：m/z 702.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.96min(UPLC，纯度)。
137A：1-(反-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环己基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
THF(2.31mL，4.63mmol)中的2.00M的异丙基氯化镁在氮气气氛下在0℃5分钟内逐滴加入到搅拌的1-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基]-4-碘-1H-吡唑(化合物137B，1.1400g，2.8053mmol)的THF(30.00mL)的搅拌溶液。反应混合物在0℃搅拌另外一个小时。2-甲氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷(0.9577mL，5.610mmol)在0℃加入，然后混合物在室温搅拌另一个小时。混合物用饱和NH4Cl(10ml)处理，用EtOAc(20ml x 3)萃取。萃取物用水(10ml)、盐水(15ml)洗涤，经Na2SO4干燥。溶剂在减压下除去给出残留物，所述残留物通过闪色谱(10％EtOAc/己烷)纯化。MS(ES+)：m/z＝407.18[MH+]。HPLC：tR＝3.21min(极性_5min，ZQ3)。
化合物137B：1-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基]-4-碘-1H-吡唑
反-4-(4-碘-吡唑-1-基)-环己醇(化合物137D，1.00g，3.42mmol)、叔丁基二甲基氯硅烷(1.03g，6.85mmol)、4-二甲基氨基吡啶(80mg，0.7mmol)、1H-咪唑(699mg，10.3mmol)和DCM(20mL，300mmol)的混合物在室温搅拌20分钟。该物质转移至分液漏斗，用DCM和NaHCO3萃取。有机层干燥装载在柱色谱的硅胶之上，用3％EtOAc/己烷洗脱。含有纯产物的部份在真空中浓缩给出为透明油的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝0.05(s，6H)，0.86(s，9H)，1.33-1.47(m，2H)，1.70-1.91(m，4H)，1.96(d，J＝11.9Hz，2H)，3.58-3.75(m，1H)，4.11-4.21(m，1H)，7.49(s，1H)，7.92(s，1H).MS(ES+)：m/z＝407.05[MH+]。HPLC：tR＝3.22min(极性_5min，ZQ3)。
化合物137C和137D：顺-和反-4-(4-碘吡唑-1-基)环己醇
硼氢化钠(0.29g，7.6mmol)加入在室温下、在氮气气氛下加入至乙醇(20mL)中的4-(4-碘吡唑-1-基)环己酮(化合物137E，4.5g，15.5mmol)的溶液。混合物在室温下搅拌2h，在其后，蒸发溶剂，和残留物在水中吸收，用EtOAc(3x60mL)萃取。合并的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤和在真空中浓缩，给出非纯白色固体。该物质通过用40％EtOAc/己烷洗脱的二氧化硅上的柱色谱进行纯化。得到的第一(较小极性)点被鉴定为顺式异构体和得到的第二(更低极性)点鉴定为反式异构体。顺式-异构体：1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ＝1.63-1.74(m，4H)，1.87-1.96(m，4H)，2.09-2.19(m，2H)，4.07-4.20(m，2H)，7.50(s，2H)。反式-异构体：无水固体，mp.82-86℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝1.42-1.51(m，2H)，1.79(brs，1H)，1.77-1.99(m，2H)，2.09-2.22(m，4H)，3.74(br.tt，J＝10.8，4.0Hz，1H)，4.13(tt，J＝11.6，3.8Hz.1H)，7.44(d，J＝0.4Hz，1H)，7.50(d，J＝0.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z＝293.11[MH+]。HPLC：tR＝2.58min(极性_5min，ZQ3)。
化合物137E：4-(4-碘吡唑-1-基)环己酮
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-4-碘-1H-吡唑(化合物137F，3.0g，8.9mmol)，对甲苯磺酸吡啶鎓(4.5g，17.9mmol)、丙酮(100mL)和H2O(100mL)的混合物加热至60℃过夜。逐步完成：溶剂蒸发，和残留物用EtOAc(3x60mL)萃取。合并的萃取物用水(3x50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和在真空中浓缩，给出为白色固体的标题化合物。其不进一步纯化在下个步骤中使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ＝2.23-2.63(m，8H)，4.57-4.64(m，1H)，7.51(s，1H)，7.54(s，1H)。MS(ES+)：m/z＝291.09(100)。HPLC：tR＝2.79min(极性_5min，ZQ3)。
化合物137F：1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-4-碘-1H-吡唑
DMF(5mL)中的1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基4-甲基苯磺酸酯(根据US 4,360,531制备)(2.0g，6.4mmol)、4-碘吡唑(1.36g，7.0mmol)、K2CO3(1.06g，7.7mmol)和18-冠醚-6(0.2g，0.7mmol)的混合物在氮气、50℃加热16h。水(50mL)加入反应混合物，其然后用EtOAc(3x40mL)萃取。合并的EtOAc萃取物用水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和在真空中浓缩。残留物通过在使用EtOAc/CH2Cl2(1∶9)的二氧化硅上的柱色谱纯化给出标题化合物。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.67-1.76(m，2H)，1.84-1.91(m，2H)，1.99-2.17(m，4H)，3.95-3.99(m，4H)，4.18-4.27(m，1H)。MS(ES+)：m/z＝334.96(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.26min(极性_5min，ZQ3)。
Figure BPA00001479300901101
实施例138和139：二乙基(4-{[4-{[4-(顺-4-羟基环己基)-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和二乙基(4-{[4-{[4-(反-4-羟基环己基)-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(136mg，0.322mmol)和2-氨基-5-(4-羟基环己基)-N甲基苯甲酰胺(化合物139A，80.0mg，0.322mmol)进行制备。该反应混合物倒入水中，用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤、浓缩和在IscoCombiflash(0-5％甲醇/DCM)上纯化，分离出顺式和反式异构体。较小的(顺式)异构体首先洗脱：22.5mg，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.18(t，J＝6.95Hz，6H)，1.49-1.62(m，4H)，1.72-1.82(m，2H)，1.86-1.99(m，2H)，2.78(d，J＝4.55Hz，3H)，3.08-3.22(m，2H)，3.90-4.00(m，4H)，7.15(dd，J＝8.59，2.02Hz，2H)，7.34(dd，J＝8.59，1.77Hz，1H)，7.58(br.s.，3H)，8.36(br.s.，1H)，8.41(s，1H)，8.75(d，J＝4.55Hz，1H)，9.78(br.s.，1H)，11.23(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z＝636.12(100)[M+1].HPLC：tR＝3.34min(ZQ3，极性_5min)。反式异构体，90.4mg：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.18(t，J＝7.07Hz，6H)，1.27-1.38(m，2H)，1.55(dtd，J＝12.95，12.73，2.78Hz，2H)，1.82(d，J＝11.87Hz，2H)，1.95(dd，J＝12.63，3.28Hz，2H)，2.78(d，J＝4.55Hz，3H)，3.09-3.22(m，2H)，3.95(qd，J＝7.45，7.20Hz，4H)，7.16(dd，J＝8.59，2.27Hz，2H)，7.34(dd，J＝8.59，2.02Hz，1H)，7.56(br.s.，1H)，7.57(d，J＝2.02Hz，2H)，8.36(br.s.，1H)，8.41(s，1H)，8.69(d，J＝4.80Hz，1H)，9.78(br.s.，1H)，11.26(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z＝636.12(100)[M+1].HPLC：tR＝3.23min(ZQ3，极性_5min)。
化合物139A：2-氨基-5-(4-羟基环己基)-N-甲基苯甲酰胺
THF(10mL，200mmol)中的2-氨基-5-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物139B，333mg，1.15mmol)的溶液用3N HCl(2mL)水溶液处理，使其在室温搅拌3.5小时。该混合物冷却至0℃，然后逐滴加入50％的NaOH水溶液碱化至pH～10，随后用EtOAc(30mL)稀释。分离有机层，用盐水洗涤(2x 10mL)，经无水硫酸钠干燥。溶剂在减压下除去，和粗酮在用己烷中80-100％EtOAc、然后5％DCM/甲醇洗脱的ISCO Combiflash上纯化，以分离235mg的白色固体的酮中间产物。MS(ES+)：m/z＝247.07(100)[M+1].LCMS：tR＝2.29min(ZQ3，极性_5min)。甲醇(7mL，200mmol)中的2-氨基-N-甲基-5-(4-氧杂环己基)苯甲酰胺的溶液冷却至0℃，然后用硼氢化钠(43mg，1.1mmol)处理。该混合物在0℃搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl(1mL)水溶液淬灭。从真空浓缩该反应混合物得到的粗残留物在1mL H2O和EtOAc(30m)中吸收。层分离。水层用盐饱和，和用～20mL的EtOAc再次洗涤。用盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。粗固体在DCM/甲醇中吸收，用二氧化硅处理和浓缩。该二氧化硅装载在样品柱上，和在ISCO Combiflash(0-5％然后10％甲醇/DCM)上纯化，分离为80∶20的顺式/反式异构体的混合物的201mg期望的产物。主要产物(反式)：MS(ES+)：m/z＝249.07(100){M+1]；HPLC：tR＝2.10min(ZQ3，极性_5min)。次要产物(顺式)：MS(ES+)：m/z＝249.10(100)[M+1]；HPLC：tR＝2.28分钟(ZQ3，极性_5min)。该混合物在下个步骤中使用。
化合物139B：2-氨基-5-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-N-甲基苯甲酰胺
10％Pd-C(50％H2O w/w)(264mg，0.124mmol)加入到乙醇(30mL，500mmol)中的2-氨基-5-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物139C，357mg，1.24mmol)的溶液。该反应混合物进行三个循环的抽空和N2换气。在第四个抽空后，该混合物用H2吹洗，且使其在氢气下搅拌过夜。通过硅藻垫过滤除去催化剂，和滤液在减压下蒸发给出333mg的桃红色标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.50-1.78(m，8H)，2.34-2.44(m，1H)，2.71(d，J＝4.55Hz，3H)，3.88(t，J＝2.40Hz，4H)，6.20(s，2H)，6.60(d，J＝8.34Hz，1H)，6.98(dd，J＝8.46，1.89Hz，1H)，7.29(d，J＝2.02Hz，1H)，8.16(d，J＝4.55Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝291.08(100)[M+1].HPLC：tR＝2.60min(ZQ3，极性_5min).
化合物139C：2-氨基-5-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-N-甲基苯甲酰胺
2-氨基-5-溴-N-甲基-苯甲酰胺(化合物106A，645.0mg，2.816mmol)、1，4-二氧杂螺[4，5]癸-7-烯-8-硼酸频哪醇酯(899.2mg，3.379mmol)和与二氯甲烷络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1∶1)(229.9mg，0.2816mmol)加入到20mL微波管，和在1，4-二氧杂环乙烷(8mL，100mmol)中吸收。该混合物用H2O(3mL，200mmol)中碳酸钾(1167mg，8.447mmol)的溶液处理。在用N2喷射1分钟后，该管密封和在Biotage微波反应器中100℃照射30分钟。该混合物倒入水中，并用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和浓缩至黑色黏性物。该黏性物在DCM中吸收，用二氧化硅处理和浓缩至塞状物(plug)。该塞状物装载进入样品柱，和在ISCO Combiflash单元(0-40％-70％EtOAc/己烷)上纯化，以分离出为白色固体的359mg的期望产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.78(t，J＝6.44Hz，2H)，2.33(br.s.，2H)，2.50-2.51(m，J＝1.80Hz，2H)，2.72(d，J＝4.55Hz，3H)，3.91(s，4H)，5.85(t，J＝3.92Hz，1H)，6.41(s，2H)，6.63(d，J＝8.59Hz，1H)，7.23(dd，J＝8.59，2.02Hz，1H)，7.48(d，J＝2.27Hz，1H)，8.23(d，J＝4.29Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝289.06(100)[M+1].HPLC：tR＝2.62min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901121
实施例140和141：二乙基(4-{[4-{[4-(顺-4-羟基环己基)-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和二乙基(4-{[4-{[4-(反-4-羟基环己基)-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
这些化合物使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和2-氨基-5-(4-羟基环己基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物139A)类似于实施例138和139进行制备。这些化合物经在ISCO Combiflash单元(0-5％甲醇/DCM)上的正向色谱进行分离。在这些条件下该顺式异构体是首先被洗脱。顺式：异构体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.34(s，1H)，8.72(d，J＝4.29Hz，1H)，8.64(s，1H)，8.35(s，1H)，8.31(br.s.，1H)，7.59(d，J＝8.08Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.25(d，J＝7.83Hz，1H)，7.01(s，1H)，6.82(d，J＝8.08Hz，1H)，4.38(d，J＝3.79Hz，1H)，3.98(quin，J＝7.33Hz，4H)，3.90(br.s.，1H)，3.77(s，3H)，3.23(d，J＝21.40Hz，2H)，2.77(d，J＝4.55Hz，3H)，1.83-1.96(m，2H)，1.76(d，J＝11.37Hz，2H)，1.47-1.62(m，4H)，1.19(t，J＝6.95Hz，6H).M2.5(1H)被DMSO遮盖。MS(ES+)：m/z＝666.14(100)[M+1].HPLC：tR＝3.44min(ZQ3，极性_5min)。反式异构体在足够乙醇中吸收以保证溶解。93μL的乙醇中的0.5M的MeSO3H的溶液加入到其中。该混合物充分地搅拌，在减压下浓缩和在真空干燥过夜，分离出为甲磺酸盐的期望产物(35.4mg)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.54(s，1H)，8.86(br.s.，1H)，8.69(d，J＝4.55Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.27(br.s.，1H)，7.52-7.57(m，2H)，7.26(dd，J＝1.01，8.84Hz，1H)，7.03(s，1H)，6.84(td，J＝2.02，8.08Hz，1H)，3.94-4.04(m，4H)，3.77(s，3H)，3.42-3.53(m，1H)，3.25(d，J＝21.50Hz，2H)，2.77(d，J＝4.55Hz，2H)，2.40-2.47(m，1H)，2.31(s，3H)，1.94(dd，J＝2.65，12.25Hz，2H)，1.78(d，J＝13.14Hz，2H)，1.54(dq，J＝2.40，12.84Hz，2H)，1.26-1.36(m，2H)，1.30(br.s.，2H)，1.16-1.23(m，2H)，1.20(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z＝666.14(100)[M+1].HPLC：tR＝3.34min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901131
实施例142：二乙基(4-{[4-({7-[1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-3-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据化合物97A的步骤、用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(30.0mg，0.0477mmol)和[1-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}乙基)-1H-吡唑-3-基]硼酸(化合物142A，46.7mg，0.173mmol)进行制备。提供的中间产物二乙基(4-{[4-({7-[1-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}乙基)-1H-吡唑-3-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯，使用ISCO Combiflash系统(用0-100％EtOAc∶CH2Cl2洗脱)进行纯化。由此得到的产物在CH2Cl2(2mL)中溶解，用二氧杂环乙烷(0.5mL)中的4.0M的HCl处理，和在室温搅拌2h。过滤出固体，用CH2Cl2/庚烷的混合物冲洗，给出为非纯白色固体的标题物质24.6mg(77％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.89(s，1H)，10.03(br s，1H)，8.89(br s，1H)，8.49(s，1H)，7.91(d，J＝8.6Hz，1H)，7.81(d，J＝2.3Hz，1H)，7.57(br s，2H)，7.30(br d，J＝6.6Hz，2H)，6.93(br s，1H)，4.72(s，2H)，4.21(t，J＝5.6Hz，2H)，3.97(quin，J＝7.4Hz，4H)，3.81(t，J＝5.7Hz，2H)，3.25(d，J＝21.5Hz，2H)，3.13(s，3H)，1.16(t，J＝7.1Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 660.22(100)[MH+]。HPLC：tR＝2.72min(ZQ3，non极性_5min)。
化合物142A：[1-(2-{[叔丁基((二甲基)甲硅烷基]氧代}乙基)-1H-吡唑-3-基]硼酸
在密封管中，DMF(3mL)中的3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷e)-吡唑(100.0mg，0.5154mmol)、叔丁基-(2-碘乙氧基)-二甲基硅烷(196mg，0.685mmol)和Cs2CO3(271mg，0.832mmol)的悬浮液在100℃搅拌16h。样品在EtOAc和水之间悬浮，然后分层。有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤和在真空中浓缩，给出为硼酸、为黄色油的标题物质(203.4mg)。MS(ES+)：m/z270.18/271.13/272.15(19/79/15)[MH+]。HPLC：tR＝3.33min(CAD，ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901141
实施例143：乙基氢(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
37％HCl(1mL)中的二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例53，44.3mg，0.0781mmol)的溶液在80℃总共加热3.5h。反应在真空中浓缩。残留物在DMSO中溶解，然后提交用于质量定向的纯化(在碱性条件下；碳酸氢铵缓冲液，pH 9)。合并含有产物的部份和在真空中浓缩，给出为白色固体的标题物质11.6mg(27％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm：8.33(d，J＝8.3Hz，1H)，8.29(s，1H)，7.85(d，J＝8.1Hz，1H)，7.62(dd，J＝7.8，1.3Hz，1H)，7.49(ddd，J＝8.5，7.4，1.5Hz，1H)，7.18(td，J＝7.6，1.0Hz，1H)，7.05(t，J＝1.8Hz，1H)，6.79(ddd，J＝8.1，2.0，1.8Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.79-3.88(m，2H)，2.96(d，J＝20.2Hz，2H)，2.89(s，3H)，1.19(t，J＝6.9Hz，3H)。MS(ES+)：m/z 540.14(100)[MH+]。HPLC：tR＝2.63min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901142
实施例144：二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(50.0mg，0.118mmol)和7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(34.14mg，0.1416mmol)进行制备。该反应混合物在减压下浓缩产生黄色油，其在使用(DCM/甲醇100∶0→95∶5)作为洗脱液的ISCO Combiflash系统上纯化，分离出28.1mg的标题化合物(38％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.19(t，J＝7.07Hz，6H)，3.09(s，3H)，3.18-3.27(m，2H)，3.92-4.03(m，4H)，4.43(s，2H)，7.23-7.33(m，8H)，7.55(br.s.，5H)，7.63(d，J＝8.84Hz，4H)，8.50(s，4H)，9.95(s，4H)，10.54(br.s.，3H).MS(ES+)：m/z 627.95/629.93(91/100)[MH+].HPLC：tR＝3.72min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901151
实施例145：二乙基(4-{[4-({4-[1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-(甲基氨基甲酰基)苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例97的步骤、用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和商业可得的1-(羟乙基)-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧代)-乙基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑进行制备。粗产物通过MDP纯化。MS(ES+)：m/z 648.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.91min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901152
实施例146：二乙基(3-氟-5-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯)的步骤、用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A)和二乙基(4-氨基-3-氟-5-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物146A)进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝7.07Hz，6H)，2.90(s，3H)，3.33-3.40(m，2H)，3.85(s，3H)，4.06-4.18(m，4H)，6.88(dt，J＝10.11，2.02Hz，1H)，6.95(s，1H)，7.17(br.s.，1H)，7.37(br.s.，1H)，7.64(d，J＝6.82Hz，1H)，8.29(br.s.，2H)。MS(ES+)：m/z 586.21[MH+](TOF，极性)。
化合物146A：二乙基(4-氨基-3-氟-5-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用化合物102A(2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺)的步骤、用二乙基(3-氟-5-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯(化合物146B)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.27(t，J＝7.07Hz，6H)，2.99-3.08(m，2H)，3.87(s，3H)，4.00-4.06(m，4H)，6.59(s，1H)，6.63(dt，J＝10.74，2.21Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 292.06[MH+](TOF，极性)。
化合物146B：二乙基(3-氟-5-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯
标题化合物使用化合物104C(二乙基(3-氯-4-硝基苄基)膦酸酯)的步骤、用5-(氯甲基)-1-氟-3-甲氧基-2-硝基苯(化合物146C)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.31(t，J＝7.07Hz，6H)，3.11-3.18(m，2H)，3.94(s，3H)，4.07-4.13(m，4H)，6.77(dt，J＝9.79，1.93Hz，1H)，6.82(s，1H)。
化合物146C：5-(氯甲基)-1-氟-3-甲氧基-2-硝基苯
标题化合物使用化合物130C(1-(氯甲基)-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯)的步骤、用(3-氟-5-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇(化合物146D)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.96(s，3H)，4.55(s，2H)，6.87-6.90(m，2H)。
化合物146D：(3-氟-5-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇
标题化合物使用化合物130E(2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯甲酸)的步骤、用3-氟-5-甲氧基-4-硝基苯甲酸(化合物146E)进行制备。
1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.95(s，3H)，4.76(s，2H)，6.81-6.86(m，1H)，6.88(s，1H)。MS(ES+)：m/z 202.05[MH+](TOF，极性)。
化合物146E：3-氟-5-甲氧基-4-硝基苯甲酸
在(2.4mL)和H2O(2.4mL)中的3-氟-5-甲氧基-4-硝基苄腈(化合物146F，1.15g，5.86mmol)的悬浮液在100℃搅拌16小时。使反应混合物冷却至室温，在此时间期间中沉淀形成。过滤固体和用水进行洗涤。该固体在50℃真空中干燥，产生为白色固体的产物1.097g(87％收率)。MS(ES+)：m/z 214.01[MH-](TOF，极性).
化合物146F：3-氟-5-甲氧基-4-硝基苄腈
5-溴-1-氟-3-甲氧基-2-硝基苯(1.75g，7.00mmol)、Pd(PPh3)4(1.132g，0.9798mmol)和氰化锌(0.8222g，7.002mmol)加入到微波小瓶中。该小瓶进行密封，然后加入DMF(28mL)。该小瓶抽空和用N2气换气(3次)。该反应混合物在微波上150℃照射3-5分钟。该反应混合物用水(30mL)淬灭，然后用EtOAc(60mL)萃取。有机层用水(30mL)、盐水(2x 20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和在减压下浓缩产生黄色油，该粗物质通过在使用庚烷/EtOAc(100∶0→55∶45)作为洗脱液的ISCOcombi-flash Rf上的硅胶色谱进行纯化，以产生为浅黄色固体的期望产物1.15g(84％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.01(s，3H)，7.14(t，J＝1.52Hz，1H)，7.19(dd，J＝8.21，1.39Hz，1H)。
化合物146G：5-溴-1-氟-3-甲氧基-2-硝基苯
甲醇(15.0mL)中的5-溴-1，3-二氟-2-硝基苯(化合物146H，2.00g，8.40mmol)的溶液加入氢氧化钾(504mg，8.98mmol)。该反应在90℃搅拌1小时。该反应混合物在减压下浓缩。残留物用EtOAc(15mL)稀释，用水(10mL)洗涤，用盐水洗涤(10mL)，经Na2SO4干燥，过滤和在减压下浓缩，产生黄色固体。该粗物质通过庚烷/EtOAc(100∶0→70∶30)作为洗脱液的ISCO combi-flash Rf系统上的硅胶色谱进行纯化，产生为浅黄色固体的期望产物1.75g(83％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.95(s，3H)，7.01(s，1H)，7.05(dd，J＝8.59，1.77Hz，1H)。
化合物146H：5-溴-1，3-二氟-2-硝基苯
TFA(50.2mL)和AcOH(50.2mL)中的4-溴-2，6-二氟苯胺(4.75g，22.8mmol)的溶液加入过硼酸钠四水合物(16.0g，104mmol)。该反应升温至60℃和加热24h。该反应用水(10mL)淬灭，和用EtOAc(15mL)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤，和经Na2SO4干燥。有机层在减压下浓缩，产生黄色固体。该物质通过庚烷/EtOAc(100∶0→90∶10)作为洗脱液的ISCO combi-flash Rf系统上的硅胶色谱进行纯化。含有产物的部份进行合并，然后在减压下浓缩产生白色固体2.28g(42％收率)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝7.31-7.35(m，2H)。
Figure BPA00001479300901171
实施例147：二乙基(2-氟-3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、使用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A)和二乙基(4-氨基-2-氟-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物147A)进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.26-1.36(m，6H)，1.44(t，J＝6.95Hz，3H)，3.32-3.39(m，2H)，4.04-4.15(m，4H)，4.22(q，J＝7.07Hz，2H)，7.00(dd，J＝8.34，1.77Hz，1H)，7.21(d，J＝1.77Hz，1H)，7.75(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 586.14[MH+](TOF，极性)。
化合物147A：二乙基(4-氨基-2-氟-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用化合物102A(2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺)的步骤、用二乙基(2-氟-3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯进行制备。
(化合物147B).1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.29(t，J＝6.95Hz，6H)，3.13-3.21(m，2H)，3.93(d，J＝1.52Hz，3H)，4.04-4.12(m，4H)，6.55(d，J＝8.34Hz，1H)，6.83(td，J＝7.96，2.78Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 292.11[MH+](TOF，极性)。
化合物147B：二乙基(2-氟-3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯
标题化合物使用化合物104C(二乙基(3-氯-4-硝基苄基)膦酸酯)的步骤、用1-(氯甲基)-2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯进行制备。
(化合物147C)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.28-1.32(m，6H)，3.19-3.31(m，2H)，7.14-7.22(m，1H)，7.54-7.61(m，1H)。MS(ES+)：m/z 322.08[MH+](TOF，极性)。
化合物147C：1-(氯甲基)-2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯
标题化合物使用化合物130C(1-(氯甲基)-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯)的步骤、用(2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇(化合物147D)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.10(d，J＝1.77Hz，3H)，4.64(d，J＝1.52Hz，2H)，7.62(dd，J＝8.59，1.77Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 220.00[MH+](TOF，极性)。
化合物147D：(2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇
标题化合物使用化合物130D((2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯基)甲醇)的步骤、用2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(化合物147E)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.08(d，J＝1.77Hz，3H)，4.85(s，2H)，7.29-7.35(m，1H)，7.64(dd，J＝8.46，1.89Hz，1H)。
化合物147E：2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸
HCl(1.5mL)和H2O(1.5mL)中的2-氟-3-甲氧基-4-硝基苄腈(0.700g，3.57mmol)的悬浮液在100℃搅拌16分钟。过滤沉淀和用水洗涤。使固体在50℃真空干燥过夜，产生为白色固体的产物736mg(96％收率)。该物质不进行任何进一步纯化在连续反应中使用。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.13(d，J＝1.52Hz，3H)，7.61(dd，J＝8.72，1.89Hz，1H)，7.83(dd，J＝8.72，6.44Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 213.99[MH-](TOF，极性)。
化合物147F：2-氟-3-甲氧基-4-硝基苄腈
标题化合物根据3-氟-5-甲氧基-4-硝基苄腈(化合物146F)的步骤、使用1-溴-2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯进行制备。(化合物147G)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.15(d，J＝2.27Hz，3H)，7.45(dd，J＝8.59，5.56Hz，1H)，7.64(dd，J＝8.59，1.77Hz，1H)。
化合物147G：1-溴-2-氟-3-甲氧基-4-硝基苯
标题化合物根据5-溴-1，3-二氟-2-硝基苯(化合物146H)的步骤、使用4-溴-3-氟-2-甲氧基苯胺(化合物147H)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.10(d，J＝1.77Hz，3H)，7.37-7.43(m，1H)，7.53(dd，J＝8.97，1.89Hz，1H)。
化合物147H：4-溴-3-氟-2-甲氧基苯胺
AcOH(45.0mL)中的2-甲氧基-3-氟苯胺(化合物147I，7.70g，54.6mmol)的溶液逐滴加入AcOH(45.0mL)中的溴(6.98g，43.6mmol)溶液。该反应混合物在室温搅拌30分钟。过滤得到的固体，并用醋酸洗涤给出HBr盐期望的产物。固体在水(15mL)中溶解，通过加入KOH进行碱化和用EtOAc(20mL)萃取。有机层经Na2SO4干燥和在减压下浓缩，给出白色固体。该粗物质通过使用庚烷/EtOAc(100∶0→70∶30)作为洗脱液的ISCO combi-flash Rf系统上的硅胶色谱进行纯化，产生为白色固体的期望产物6.536mg(54％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.93(d，J＝1.52Hz，3H)，6.42(dd，J＝8.84，1.77Hz，1H)，7.01(dd，J＝8.72，6.95Hz，1H)。MS(ES+)：m/z221.98[MH+](TOF，极性)。
化合物147I：2-甲氧基-3-氟苯胺
标题化合物根据化合物102A(2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺)的步骤、用1-氟-2-甲氧基-3-硝基苯(化合物147J)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.92(d，J＝1.52Hz，3H)，6.44-6.53(m，2H)，6.80(td，J＝8.15，5.68Hz，1H)。MS(ES+)：m/z142.07[MH+](TOF，极性)。
化合物147J：1-氟-2-甲氧基-3-硝基苯
DMF(25.0mL)中的2-氟-6-硝基苯酚(10.0g，63.6mmol)的溶液加入甲基碘(5.94mL，95.5mmol)和碳酸钾(13.2g，95.5mmol)。该反应混合物在室温搅拌16h。该反应用水(30mL)淬灭和用EtOAc(30mL)萃取。有机层用水(25mL)洗涤，用盐水洗涤(25mL)，经无水Na2SO4干燥，过滤和在减压下浓缩产生褐色油，11.0g(101％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝4.08(d，J＝2.02Hz，3H)，7.14(td，J＝8.34，4.80Hz，1H)，7.35(ddd，J＝10.74，8.34，1.64Hz，1H)，7.58(dt，J＝8.27，1.55Hz，1H)。
Figure BPA00001479300901191
实施例148：二乙基[3-甲氧基-4-({5-(三氟甲基)-4-[(1，1，2-三甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物使用实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-2，3，3-三甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物148A)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm：9.00(br s，1H)，8.33(s，1H)，7.92(s，1H)，7.38-7.45(m，1H)，7.32(br s，1H)，7.07-7.16(m，2H)，6.84(s，1H)，6.31(br s，1H)，3.91(quin，J＝7.3Hz，4H)，3.77(s，3H)，3.13(s，3H)，3.06(d，J＝21.2Hz，2H)，1.27(s，6H)，1.16(t，J＝7.1Hz，6H).MS(ES+)：m/z 608.24[MH+]HPLC：tR＝1.31min(UPLC，分析级)。
化合物148A：7-氨基-2，3，3-三甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
20mg的5％Pd/C小心地加入到乙醇(5mL)中2，3，3-三甲基-7-硝基异吲哚啉-1-酮(化合物148B，0.15g，0.68mmol)的溶液，在氢气气氛下室温搅拌过夜。浓缩该反应混合物以除去乙醇，提供80mg的纯的标题化合物(62％)。1H NMR(CDCl3，500MHz).：δ1.36(s，6H)，3.58(s，3H)，3.60(brs，2H)，6.58(d，J＝8.0Hz，1H)，6.69(d，J＝7.0Hz，1H)，6.84(dd，J＝7.0，8.0Hz，1H)。
化合物148B：2，3，3-三甲基-7-硝基异吲哚啉-1-酮
THF(5mL)中的3，3-二甲基-7-硝基异吲哚啉-1-酮(化合物148C，100mg，0.48mmol)的溶液用60％NaH(58mg，1.44mmol)处理和搅拌15分钟。甲醇(.078mL，1.92mmol)和碘代甲烷(0.12mL，1.92mmol)加入到该溶液，并在50℃搅拌过夜。加入冷水(3mL)，该反应混合物浓缩除去THF，然后用EtOAc(3x 5mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)和浓缩提供70mg的标题化合物(66％)。1H NMR(CDCl3，600MHz).：δ1.45(s，6H)，3.56(s，3H)，7.13(dd，J＝7.8，84Hz，1H)，7.40(d，J＝7.8Hz，1H)，8.02(d，J＝8.4Hz，1H)。
化合物148C：3，3-二甲基-7-硝基异吲哚啉-1-酮
甲基2-(2-氰丙-2-基)-6-硝基苯甲酸酯(化合物148D，1g，4.03mmol)的溶液在10mL的20％乙醇KOH(35.64mmol)中室温搅拌24小时。在分液瓶中，溴(0.5mL，9.7mmol)加入到H2O(40mL)中的NaOH(1.9g，47.5mmol)的溶液以生成NaOBr。20mL的该溶液缓慢地加入到室温的第一溶液，然后搅拌过夜。剩余的NaOBr溶液然后加入，并连续搅拌另一个24小时。该反应用饱和的亚硫酸钠(10mL)饱和溶液淬灭，然后搅拌20分钟。该溶液然后用硫酸氢钾酸化，并用EtOAc(3x 25mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)、浓缩和进行色谱(己烷中的20％EtOAc)，提供为黄色标题化合物，0.1g(12％)。1H NMR(CDCl3，600MHz).：δ1.44(s，6H)，7.13(dd，J＝7.2，8.4Hz，1H)，7.45(d，J＝7.2Hz，1H)，8.03(d，J＝8.4Hz，1H)，9.0(brs，1H)。
化合物148C：甲基2-(2-氰丙-2-基)-6-硝基苯甲酸酯
碘代甲烷(1.44mL，22.5mmol)和13.62mL的1M叔-BuOK的溶液加入到0℃的THF(10mL)中甲基2-(氰甲基)-6-硝基苯甲酸酯(化合物148D，1g，4.5mmol)的溶液。该混合物使其在室温搅拌过夜，在其之后，该混合物用1M HCl(20mL)淬灭，然后用EtOAc(3x 20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)和浓缩，提供为油状液态的标题化合物1g(89％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ1.89(s，6H)，3.95(s，3H)，7.65(dd，J＝7.2，8.0Hz，1H)，7.83(d，J＝8Hz，1H)，8.05(d，J＝7.2Hz，1H)。
化合物148C：甲基2-(氰甲基)-6-硝基苯甲酸酯
水(1mL)中的KCN(474mg，7.2mmol)的溶液缓慢加入到甲醇(20mL)中的甲基2-(溴甲基)-6-硝基苯甲酸酯(1g，3.6mmol)的溶液。使该混合物在50℃搅拌4h。该反应混合物浓缩除去甲醇，用水(20mL)稀释，然后用EtOAc(2x 20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩和经快速柱色谱纯化(己烷中的25％EtOA)，给出为油状液体的标题化合物0.5g(62％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)：δ3.9(s，2H)，3.97(s，3H)，7.65(t，J＝7.8Hz，1H)，7.85(d，J＝7.8Hz，1H)，8.09(d，J＝7.8Hz，1H)。
Figure BPA00001479300901211
实施例149：二乙基[4-({5-(三氟甲基)-4-[(1，1，2-三甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-2，3，3-三甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物148A)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm：9.71(br s，1H)，8.94(br s，1H)，8.35(s，1H)，7.43(dd，J＝6.2，1.9Hz，1H)，7.06-7.30(m，4H)，6.80(br s，2H)，3.80-3.95(m，4H)，3.13(s，3H)，3.01(d，J＝21.5Hz，2H)，1.27(s，6H)，1.14(t，J＝7.1Hz，6H).MS(ES+)：m/z578.16[MH+]HPLC：tR＝3.27min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901212
实施例150：二乙基(4-{[4-{[4-氰基-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-苄基)膦酸酯)的步骤、用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(10.0mg，0.0236mmol)和2-氨基-5-氰基-N-甲基苯甲酰胺(化合物150A，8.3mg，0.0472mmol)进行制备。粗混合物通过MDP纯化，以得到为白色固体的标题化合物(2.9mg，22％收率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.28(t，J＝7.1Hz，6H)，2.92(s，3H)，3.26(d，J＝21.5Hz，2H)，4.07(qd，J＝7.3，7.1Hz，4H)，7.28(dd，J＝8.8，2.5Hz，2H)，7.56(d，J＝6.3Hz，2H)，7.76(d，J＝8.6Hz，1H)，8.04(d，J＝1.8Hz，1H)，8.42(s，1H)，8.88(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z563.17(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.04min(UPLC，纯度)。
化合物150A：2-氨基-5-氰基-N-甲基苯甲酰胺
DMF(1.5mL)中的2-氨基-5-溴-N-甲基苯甲酰胺(100.0mg，0.4365mmol)、氰化锌(51.26mg，0.4365mmol)、Pd(PPh3)4(75.67mg，0.06548mmol)的混合物用氮气吹洗，和在微波反应器中150℃照射5分钟。该反应混合物倒入水中，然后用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，在真空中浓缩，在ISCO Combiflash单元上纯化，以分离期望产物(37.0mg，48％收率)。
Figure BPA00001479300901221
实施例151：二乙基(4-{[4-{[4-氰基-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)-苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯)的步骤、使用(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和2-氨基-5-氰基-N-甲基苯甲酰胺(化合物150A)进行制备。MS(ES+)：m/z 593.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.08min(UPLC，纯度)。
实施例152：二乙基(4-{[4-{[2-(乙基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物使用实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)-苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯)的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和商业可得的2-氨基-N-乙基苯甲酰胺进行制备。
MS(ES+)：m/z 552.51(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.05min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901231
实施例153：二乙基(4-{[4-{[2-(乙基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)-苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯)的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的2-氨基-N-乙基苯甲酰胺进行制备。MS(ES+)：m/z 582.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.09min(UPLC，纯度)。
实施例154：二乙基(4-{[4-{[2-氟-6-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)-苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯)的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的2-氨基-3-氟-N-甲基苯甲酰胺进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.26(t，J＝7.07Hz，6H)，2.92(d，J＝4.80Hz，3H)，3.03-3.12(m，2H)，3.86(s，3H)，3.95-4.07(m，4H)，6.21(q，J＝4.97Hz，1H)，6.57(d，J＝9.09Hz，1H)，6.81(t，J＝1.89Hz，1H)，7.28-7.36(m，3H)，7.73(br.s.，1H)，7.85(br.s.，1H)，8.34(s，1H)，8.89(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 586.14[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901241
实施例155：二乙基(4-{[4-{[3-氟-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102(二乙基(4-{[4-{[4-氟-2-(甲基氨基甲酰基)-苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯)的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和2-氨基-6-氟-N甲基苯甲酰胺(化合物155A)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.19(t，J＝7.07Hz，6H)，2.76(d，J＝4.80Hz，3H)，3.19-3.27(m，2H)，3.76(s，3H)，3.93-4.02(m，4H)，6.78-6.83(m，1H)，6.97-7.03(m，2H)，7.38(d，J＝7.07Hz，1H)，7.49(d，J＝6.82Hz，1H)，8.00(br.s.，1H)，8.38(s，1H)，8.62(d，J＝3.79Hz，1H)，8.80(br.s.，1H)，9.78(s，1H)。MS(ES+)：m/z 586.14[MH+](TOF，极性)。
化合物155A：2-氨基-6-氟-N-甲基苯甲酰胺
标题化合物根据化合物102A(2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺)的步骤、使用2-氟-N-甲基-6-硝基苯甲酰胺(化合物155B)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝2.99(dd，J＝4.80，1.26Hz，3H)，6.35(ddd，J＝12.88，8.08，1.01Hz，1H)，6.44-6.49(m，1H)，7.09(td，J＝8.21，6.57Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 169.08[MH+](TOF，极性)。
化合物155B：2-氟-N-甲基-6-硝基苯甲酰胺
标题化合物根据化合物102B(5-氟-N-甲基-2-硝基苯甲酰胺)的步骤、使用2-氟-6-硝基苯甲酸进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.09(d，J＝5.05Hz，3H)，7.45(td，J＝8.34，1.01Hz，1H)，7.56(td，J＝8.27，5.43Hz，1H)，7.94(dt，J＝8.08，1.01Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 199.05[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901242
实施例156：二乙基(4-{[4-({7-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例97的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(WO2008/001076)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm：10.74(br s，1H)，9.93(s，1H)，8.47(s，1H)，8.40-9.11(m，1H)，8.24(s，1H)，7.96(s，1H)，7.77(d，J＝8.6Hz，1H)，7.46-7.62(m，2H)，7.30(d，J＝6.8Hz，2H)，4.64(s，2H)，4.22(t，J＝7.1Hz，2H)，3.97(quin，J＝7.2Hz，4H)，3.43(q，J＝6.1Hz，2H)，3.26(d，J＝22.0Hz，2H)，3.12(s，3H)，1.97(qd，J＝6.7，6.6Hz，2H)，1.16(t，J＝6.9Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 674.22[MH+].HPLC：tR＝1.39min(UPLC TOF，极性_3min)。
实施例157：二乙基[4-({4-[(1，2-二甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(179.0mg，0.4224mmol)和7-氨基-2，3-二甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物157A，83.7mg，0.475mmol)进行制备。该反应混合物倒入含有饱和NaHCO3的分液漏斗中，并用EtOAc萃取。该合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，和在真空中浓缩。使用40-100％EtOAc∶庚烷和随后0-15％甲醇∶CH2Cl2洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统纯化粗产物。该产物通过MDP(在碱性条件下；碳酸氢铵缓冲液(pH 9))再次纯化，提供为非纯白色固体(158.3mg，65％)的标题产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.61(br s，1H)，9.93(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.48(s，1H)，7.38-7.80(m，3H)，7.15-7.33(m，3H)，4.59(q，J＝6.6Hz，1H)，3.90-4.02(m，4H)，3.22(d，J＝21.5Hz，2H)，3.01(s，3H)，1.43(d，J＝6.6Hz，3H)，1.18(t，J＝6.9Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 564.17(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.56min(TOF，极性_3min)。
化合物157A：7-氨基-2，3-二甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
3-羟基-2，3-二甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物157B，500mg)、AcOH(12mL)和5％Pd/C(60mg)的混合物在1atm的氢气气氛下氢化14h。滤除催化剂，和浓缩滤液，残留物通过柱色谱纯化以提供200mg的标题化合物(收率：50％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.43(d，J＝6.8Hz，3H)，3.04(s，3H)，4.33(q，J＝6.3Hz，1H)，5.20(s，br，2H)，6.55(d，J＝8.1Hz，1H)，7.21-7.26(m，2H)。化合物157B：3-羟基-2，3-二甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮：
乙醇(10mL)中的甲基2-乙酰基-6-硝基苯甲酸酯(2g，8.96mmol)和33％甲胺的混合物回流搅拌14h。在减压下除去溶剂以提供1.7g期望的产物(收率：85％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.80(s，3H)，3.05(s，3H)，7.78(m，2H)，7.95(m，1H)。
实施例158：二乙基[4-({4-[(1，2-二甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用TFE(5mL)中的二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(230.1mg，0.5071mmol)和7-氨基-2，3-二甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物157A，95.1mg，0.540mmol)进行制备。该反应混合物倒入含有NaHCO3的分液漏斗中，并用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，和在真空中浓缩。粗产物吸附在预填充固体装载柱[RediSepRf2.5克]上，使用首先用40-100％EtOAc∶庚烷和然后用0-15％甲醇∶CH2Cl2洗脱的ISCO Combiflash单元[RediSepRf 4克二氧化硅]纯化。该产物通过MDP[在碱性条件下；碳酸氢铵缓冲液(pH 9)]再次纯化，以提供为白色固体的标题产物(103.1mg，34％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.57(s，1H)，9.13(s，1H)，8.39(s，1H)，7.64-8.90(m，1H)，7.41(br s，2H)，7.18(d，J＝7.3Hz，1H)，7.05(s，1H)，6.91(d，J＝7.8Hz，1H)，4.55(q，J＝6.5Hz，1H)，3.91-4.06(m，4H)，3.74(s，3H)，3.29(d，J＝22.5Hz，2H)，2.99(s，3H)，1.40(d，J＝6.6Hz，3H)，1.20(t，J＝7.1Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 594.17(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.59min(TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300901271
实施例159：二乙基[乙氧基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)甲基]膦酸酯
在N2下，TFA(28uL，0.36mmol)和乙醇(0.5mL)的混合物中的2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(40.0mg，0.12mmol)和二乙基[(4-氨基苯基)(羟基)甲基]-膦酸酯(37.6mg，0.15mmol)在Biotage微波反应器中105℃搅拌45min。溶剂在减压下除去，并将饱和NaHCO3(aq)(2mL)和DCM(5mL)加入到残留物中。分层，然后水层用DCM(3×5mL)萃取。合并的有机相经MgSO4干燥，浓缩和通过硅胶色谱(DCM中的5％的甲醇中的7N NH3)纯化，以提供为白色固体的期望产物(8.4mg，收率：12％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.22(dt，J＝0.8，7.6Hz，6H)，1.30(t，J＝7.2Hz，3H)，2.90(s，3H)，3.47-3.57(m，2H)，3.95-4.15(m，4H)，4.72(d，J＝16.0Hz，1H)，7.18(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.35(dd，J＝2.0，8.4Hz，2H)，7.49(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)，7.63-7.65(m，3H)，8.34(s，1H)，8.45(m，1H)。MS(ES+)：m/z 582.17[MH+]。HPLC：tR＝3.44min(OpenLynx，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901272
实施例160：二乙基[甲氧基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)甲基]膦酸酯
在N2下，TFA(28uL，0.36mmol)和甲醇(0.5mL)的混合物中的2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(40.0mg，0.12mmol)和二乙基[(4-氨基苯基)(羟基)甲基]-膦酸酯(37.6mg，0.15mmol)的溶液在Biotage微波反应器、在105℃搅拌45min。在减压下除去溶剂，向残留物中加入饱和NaHCO3(水溶液)(2mL)和DCM(5mL)。分层和水层用DCM(3×5mL)萃取。合并的有机层经MgSO4干燥，浓缩，和通过硅胶色谱(DCM中的5％的甲醇中的7N NH3)纯化，以提供为白色固体的期望产物(18.5mg，收率：27％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.21(dt，J＝0.8，7.2Hz，3H)，1.30(t，J＝7.2Hz，3H)，2.90(s，3H)，3.35(s，3H)，3.93-4.14(m，4H)，4.61(d，J＝15.2Hz，1H)，7.18(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.34(dd，J＝2.0，8.4Hz，2H)，7.49(dd，J＝1.6，8.4Hz，1H)，7.62-7.66(m，3H)，8.34(s，1H)，8.46(m，1H)。MS(ES+)：m/z 568.11[MH+]。HPLC：tR＝3.31min(OpenLynx，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901281
实施例161：二乙基[4-({4-[(7-氰基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
DMF(0.5mL)中的二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(20.0mg，0.0318mmol)、氰化锌(3.74mg，0.0318mmol)、Pd(PPh3)4(5.52mg，0.00477mmol)的混合物抽空，并用N2换气三次。该混合物在微波反应器中、在150℃照射5分钟。粗混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd，和随后通过MDP纯化。得到为白色固体的标题化合物(13.5mg，74％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.29(t，J＝7.1Hz，6H)，3.20(d，J＝21.5Hz，2H)，3.24(s，3H)，4.09(quin，J＝7.3Hz，4H)，4.54(s，2H)，7.31-7.39(m，2H)，7.49(d，J＝8.1Hz，2H)，7.56(br.s.，1H)，7.70(d，J＝8.8Hz，1H)，8.44(s，1H)，8.70(d，J＝8.3Hz，1H)，10.85(s，1H).MS(ES+)：m/z 575.21(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.08min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901291
实施例162：二乙基[4-({4-[(7-氰基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
标题化合物根据二乙基[4-({4-[(7-氰基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(实施例161)的步骤、使用[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯进行制备。MS(ES+)：m/z 605.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.09min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901292
实施例163：二乙基(4-{[4-({4-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-(甲基氨基甲酰基)苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据二乙基(4-{[4-({7-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例97)的步骤、使用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和1-(2-甲氧基乙基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑进行制备。MS(ES+)：m/z 662.36(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.00min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901301
实施例164：二乙基(4-{[4-({7-[1-(反-4-羟基环己基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例97的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(化合物137A)进行制备。在Suzuki反应之后，粗物质使用SPE柱预纯化。随后干燥的物质在DCM中溶解，然后加入醚中的1.0M HCl。该混合物在室温搅拌半小时。粗、脱保护的物质通过MDP纯化。MS(ES+)：m/z 714.42(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.01min(UPLC，纯度)。
实施例165：双(2，2，2-三氟乙基)(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用双(2，2，2-三氟乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(化合物165A，35.7mg，0.0671mmol)和7-氨基-4-(4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(18.5mg，0.0711mmol)进行制备。该粗物质首先在用50-100％EtOAc∶庚烷、然后MDP(在酸性条件下；甲酸)洗脱的Teledyne/ISCO系统上纯化。收集期望的部份，并在真空中浓缩，给出为非纯白色固体的标题物质24.3mg(47％，0.0315mmol)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.59(br s，1H)，9.93(s，1H)，8.47(s，1H)，8.15-9.25(m，1H)，7.63(d，J＝6.1Hz，2H)，7.34(d，J＝8.6Hz，1H)，7.26(dd，J＝8.6，2.5Hz，2H)，4.58-4.72(m，5H)，4.53(s，2H)，3.43-3.61(m，3H)，3.08(s，3H)，1.94(dd，J＝11.7，2.1Hz，2H)，1.77(d，J＝11.6Hz，2H)，1.56(dtd，J＝12.9，12.7，2.1Hz，2H)，1.21-1.37(m，2H)。MS(ES+)：m/z756.16(100)[MH+]。HPLC：tR＝4.14min(ZQ3，极性_5min)。
化合物165A：双(2，2，2-三氟乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯：
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用(4-氨基苄基)膦酸双-(2，2，2-三氟乙基)酯(化合物165B)和2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶进行制备。期望的产物使用MDP(碳酸氢铵碱性缓冲液pH 9)分离。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.69(s，1H)，8.81(s，1H)，7.65(d，J＝8.1Hz，2H)，7.26(dd，J＝8.7，2.7Hz，2H)，4.56-4.72(m，4H)，3.51(d，J＝22.2Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 532.01/534.02(100/64)[MH+]。HPLC：tR＝1.70min(TOF，极性_3min)。
化合物165B：(4-氨基苄基)膦酸双-(2，2，2-三氟乙基)酯
标题化合物根据化合物114E-114A的步骤、以商业可得的二乙基(4-硝基苄基)膦酸酯开始进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝3.27(d，J＝21.2Hz，2H)，4.45-4.65(m，4H)，5.20-5.40(br，2H)，6.51(d，J＝8.0Hz，2H)，6.85-6,95(m，2H)。
Figure BPA00001479300901311
实施例166：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-乙氧基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(40.0mg，0.0944mmol)和7-氨基-4-(顺-4-乙氧基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物166A，32.67mg，0.1133mmol)进行制备。该反应混合物在减压下浓缩产生黄色油。该物质通过使用1∶1EtOAc-DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱上进行纯化。合并含有产物的部分，然后在减压下浓缩产生白色固体44.3mg(69％收率)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.13-1.22(m，9H)，1.46-1.59(m，4H)，1.70-1.84(m，2H)，1.91-2.01(m，2H)，2.56-2.68(m，1H)，3.08(s，3H)，3.16-3.24(m，2H)，3.45(q，J＝6.91Hz，2H)，3.61(br.s.，1H)，3.91-4.01(m，4H)，4.53(s，2H)，7.25(dd，J＝8.59，2.27Hz，2H)，7.30(d，J＝7.58Hz，1H)，7.60(d，J＝4.55Hz，2H)，8.46(s，1H)，8.51-8.88(m，1H)，9.87(br.s.，1H)，10.58(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 676.30[MH+](TOF，极性)。
化合物166A：7-氨基-4-(顺-4-乙氧基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和化合物166B：7-氨基-4-(反-4-乙氧基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
碳上的钯(10％)(50mg)小心地加入到含有乙醇(30mL)中的4-(4-乙氧基环己-1-烯基)-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(化合物166C，300mg，0.78mmol)的溶液的氢化瓶中，然后该混合物在40psi下氢化24小时。过滤该混合物和浓缩给出残留物，该残留物通过闪柱色谱(甲醇∶DCM 0.5∶99.5)进行纯化，以分离顺式和反式异构体。化合物166A，首先洗脱的顺式异构体：90mg：1H NMR(CDCl3，500MHz)：1.22(t，3H，J＝7.5Hz)，1.41-1.6(m，2H)，1.82(q，2H)，2.1(m，2H)2.40(m，1H)3.15(s，3H)，3.45(q，2H，J＝7.5Hz)，3.62(s，1H)，4.36(s，2H)，5.08(s，2H)，6.6(d，1H，J＝8Hz)，7.18(d，1H，J＝8Hz).化合物166B，在此之后洗脱的反式异构体：50mg：1HNMR(CDCl3，500MHz)：1.22(t，3H，J＝7.5Hz)，1.28(q，2H)，1.38(q，2H)，1.82(d，2H)2.2(d，2H)2.40(m，1H)3.18(s，3H)，3.38(m，1H)，3.6(q，2H，J＝7.5Hz)，4.38(s，2H)，5.1(s，2H)，6.6(d，1H，J＝8Hz)，7.18(d，1H，J＝8Hz)。
化合物166C：4-(4-乙氧基环己-1-烯基)-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
二氧杂环乙烷(20mL)和水(5mL)加入配备氮气进口和温度计的三劲圆底烧瓶中。使用氮气对溶剂脱氧15分钟。加入三氟-甲磺酸4-乙氧基-环己-1-烯基酯(化合物166D，300mg，1.1mmol)、2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(化合物205E，630mg，1.64mmol)、四三苯膦钯催化剂(114mg，0.01mmol)和碳酸铯(889mg，2.7mmol)。该反应混合物加热至60℃持续3小时。蒸发溶剂和使用(甲醇∶二氯甲烷：1∶99)的二氧化硅进行纯化。收率：300mg(86％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ1.2(t，3H，J＝7Hz)，1.8-2.4(m，6H)，3.15(s，3H)，3.50-3.64(m，3H)，4.36(s，2H)，5.79(m，1H)，7.4(d，1H，J＝8.1Hz)，7.63(d，1H，J＝8.1Hz)。
化合物166D：三氟-甲磺酸4-乙氧基-环己-1-烯基酯
4-乙氧基环己酮(化合物166E，0.8gm，5.6mmol)和2，6-二-叔丁基吡啶(2.1gm，11.26mmol)吸收在二氯甲烷(20mL)中和冷却至0℃。三氟甲磺酸酐(1.58gm(5.6mmol)逐滴加入到冷却的溶液，使其在室温搅拌24小时。在真空中除去溶剂，用醚研制残留物并过滤。在减压下浓缩滤液，然后通过闪柱色谱(己烷∶乙酸乙酯9∶1)进行纯化。收率：300mg(20％).1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ1.2(t，3H，J＝7.5Hz)，1.8-2.0(m，2H)，2.18-2.45(m，4H)，3.45-3.6(m，3H)，5.62(m，1H)。
化合物166E：4-乙氧基环己酮
8-乙氧基-1，4二氧-杂螺[4.5]癸烷(化合物166F，2gm，10.7mmol)和对甲苯磺酸吡啶嗡盐(5.4gm，21.5mmol)的混合物吸收在1∶1的丙酮和水(150mL)的混合物中，并在50℃搅拌过夜。随后在减压下除去丙酮，然后用乙酸乙酯萃取水溶液。用水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)，和蒸发给出粗物质，该粗物质不进一步纯化在下个步骤中使用。收率：0.8gm(53％).1H NMR(CDCl3，500MHz)：δ1.24(t，J＝7.1Hz，3H)，1.95(m，2H)，2.05(m，2H)，2.24(m，2H)，2.6(m，2H)，3.6(q，J＝7.1Hz 2H)，3.7(m，1H)。化合物166F：8-乙氧基-1，4二氧-杂螺[4.5]癸烷
氢化钠(506mg，12.65mmol)加入到0℃、干燥的THF(20mL)中的1，4二氧-杂螺[4.5]癸-8-醇(2gm，12.65mmol)的溶液中。在15分钟后，加入乙基碘(2gm，12.65mmol)，然后使该混合物在室温搅拌过夜。在减压下除去THF后，该混合物倒入冰冷水中，并萃取进入乙酸乙酯。通过闪柱色谱(EtOAc∶己烷5∶95)纯化粗产物以分离标题化合物(1.3gm，55％)。1H NMR(CDCl3，500MHz)：δ1.2(t，3H，J＝7)，1.45-1.92(m，8H)，3.4(m，1H)，3.45(m，2H)，3.98(m，4H)。
Figure BPA00001479300901331
实施例167：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-乙氧基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(顺-4-乙氧基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物166A)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.15-1.22(m，9H)，1.44-1.56(m，4H)，1.69-1.82(m，2H)，1.95(d，J＝11.62Hz，2H)，2.53-2.63(m，1H)，3.07(s，3H)，3.22-3.30(m，2H)，3.45(q，J＝6.99Hz，2H)，3.60(br.s.，1H)，3.75(s，3H)，3.94-4.04(m，4H)，4.49(s，2H)，6.91(d，J＝7.58Hz，1H)，7.06(s，1H)，7.18(br.s.，1H)，7.49(br.s.，1H)，8.22-8.48(m，2H)，9.00(br.s.，1H)，10.56(s，1H)。MS(ES+)：m/z 706.30[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901332
实施例168：7-{[2-{[3-(二丙基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-[1-(3-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据实施例102的步骤、使用4-氯-N-[3-(二丙基磷酰基)苯基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(化合物168B，50.0mg，0.123mmol)和7-氨基-2-甲基-4-{1-[2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧代)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物168A，43.9mg，0.123mmol)进行制备。在柱色谱后，在乙醇中重新结晶期望产物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.90(t，J＝7.20Hz，6H)，1.33(br.s.，2H)，1.48(br.s.，2H)，1.76-2.01(m，4H)，3.13(s，3H)，3.79(q，J＝5.73Hz，2H)，4.21(t，J＝5.56Hz，2H)，4.65(s，2H)，4.96(t，J＝5.31Hz，1H)，7.39(t，J＝8.34Hz，1H)，7.52(t，J＝8.59Hz，1H)，7.68(d，J＝8.34Hz，1H)，7.85-7.97(m，2H)，8.07(br.s.，1H)，8.15(s，1H)，8.51(s，1H)，8.80(br.s.，1H)，10.12(s，1H)，10.78(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z＝642.16[MH+].HPLC：tR＝3.61min(ZQ3，极性_5min)。
化合物168A：7-氨基-2-甲基-4-{1-[2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧代)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
微波管中的[A]7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1.0g，4.1mmol)和1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧代)-乙基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑[US 2007265272](1.6g，5.0mmol)和与二氯甲烷络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1∶1)(0.17g，0.21mmol)的混合物吸收在1，4-二氧杂环乙烷(12mL)中。该混合物用H2O(3.0mL，170mmol)中的碳酸钾(1.7g，12mmol)溶液处理，用N2吹洗、封闭和在CEM中100℃照射30分钟。加入另一个1g的硼酸酯以及另一个0.05相等的催化剂。该混合物用N2冲洗，密闭和照射45分钟。这个逐步地完成和纯化。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.36-1.50(m，4H)，1.57(td，J＝9.22，3.03Hz，1H)，1.63-1.71(m，1H)，3.03(s，3H)，3.35-3.41(m，1H)，3.57(ddd，J＝11.31，8.40，3.03Hz，1H)，3.75(dt，J＝10.80，5.34Hz，1H)，3.91-3.99(m，1H)，4.27-4.33(m，2H)，4.44(s，2H)，4.55(t，J＝3.28Hz，1H)，6.06(s，2H)，6.62(d，J＝8.34Hz，1H)，7.43(d，J＝8.34Hz，1H)，7.74(d，J＝0.51Hz，1H)，7.95(d，J＝0.51Hz，1H)。
化合物168B：4-氯-N-[3-(二丙基磷酰基)苯基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用3-(二丙基磷酰基)苯胺(化合物168C)和2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶进行制备。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ1.00(td，J＝7.26，0.88Hz，6H)，1.47-1.58(m，2H)，1.64-1.77(m，2H)，1.82-1.94(m，2H)，1.97-2.10(m，2H)，7.33-7.40(m，1H)，7.51(td，J＝7.83，3.28Hz，1H)，8.00(d，J＝8.34Hz，1H)，8.08(d，J＝12.13Hz，1H)，8.60(s，1H).MS(ES+)：m/z＝405.97(100)[MH+].HPLC：tR＝3.47min(极性_5min)。
化合物168C：3-(二丙基磷酰基)苯胺
甲醇(3mL)中的(3-硝基苯基)(二丙基)氧化膦(0.801g，3.14mmol)的溶液加入在活性碳上的10％重量钯(0.17g，0.16mmol)，并且进行3个循环的抽空和用N2换气。在第四个抽空后，烧瓶用H2换气。该反应在室温搅拌过夜。该反应混合物通过硅藻土的垫过滤，然后浓缩滤液，并经过柱色谱纯化给出329mg期望的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.90(t，J＝7.33Hz，6H)，1.21-1.36(m，2H)，1.36-1.52(m，2H)，1.67-1.91(m，4H)，5.30(s，2H)，6.67(dt，J＝8.02，1.17Hz，1H)，6.72-6.79(m，1H)，6.88-6.95(m，1H)，7.11(td，J＝7.71，3.54Hz，1H)。
化合物168D：(3-硝基苯基)(二丙基)氧化膦
1，4-二氧杂环乙烷(13mL)中的间-碘硝基苯(1.98g，7.95mmol)和二-N-丙基氧化膦(化合物168E，1.12g，8.35mmol)的溶液加入在密闭管中的双(二亚苄基丙酮)钯(0.0728g，0.0795mmol)、Xantphos(0.138g，0.238mmol)和碳酸铯(3.63g，11.1mmol)。小瓶用氮气吹洗2分钟、密闭和在90℃搅拌4h。该反应混合物在EtOAc和水之间分配，然后分离。水相用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，和浓缩。该化合物在Isco Combiflash(50-70％EtOAc/己烷，然后5％甲醇/DCM)上纯化，提供0.799g的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 0.89(t，J＝7.07Hz，6H)，1.21-1.34(m，2H)，1.40-1.53(m，2H)，1.89-2.07(m，4H)，7.82(td，J＝7.89，2.40Hz，1H)，8.17(ddt，J＝9.63，7.55，1.14Hz，1H)，8.36-8.42(m，1H)，8.48-8.54(m，1H)。
化合物168E：二-N-丙基氧化膦
Et2O中的2.0M丙基氯化镁(15.000mL，30.000mmol)的溶液用6mL的无水THF稀释和冷却至0℃。该混合物用二乙基亚磷酸酯(1.2870mL，9.9998mmol)逐滴加入处理，和使其搅拌2h，缓慢升温至室温。H2O(2.0mL)中的碳酸钾(1.3820g，9.9998mmol)的溶液仔细加入。该反应混合物剧烈起泡。当气体放出已经沉降，加入乙醇(10.0mL)，然后过滤该混合物。滤液在真空中浓缩，在高真空下O/N干燥。该混合物在DCM中重新溶解，然后通过硅藻土过滤。滤液为澄清溶液，当浓缩和进一步干燥后，其给出为透明油的1.12g期望的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d ppm 0.99(t，J＝7.3Hz，6H)，1.45-1.63(m，4H)，1.66-1.81(m，4H)，6.73(d，J＝443.0Hz，1H).
Figure BPA00001479300901351
实施例169：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-乙氧基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(40.0mg，0.0944mmol)和7-氨基-4-(反-4-乙氧基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物166B)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.11(t，J＝6.95Hz，3H)，1.18(t，J＝6.95Hz，6H)，1.21-1.33(m，2H)，1.54-1.68(m，2H)，1.80(d，J＝12.63Hz，2H)，2.09(dd，J＝12.63，3.28Hz，2H)，3.08(s，3H)，3.18-3.27(m，2H)，3.49(q，J＝6.99Hz，2H)，3.91-4.01(m，4H)，4.52(s，2H)，7.26(dd，J＝8.72，1.89Hz，2H)，7.40(d，J＝8.59Hz，1H)，7.56(br.s.，2H)，8.45(s，1H)，8.67(s，1H)，9.89(s，1H)，10.58(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 676.25[MH+](TOF，极性)。
实施例170：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-乙氧基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(40.0mg，0.0944mmol)和7-氨基-4-(反-4-乙氧基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物166B)进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.19-1.32(m，9H)，1.34-1.46(m，2H)，1.58-1.69(m，2H)，1.92(d，J＝12.88Hz，2H)，2.23(d，J＝10.11Hz，2H)，2.51(t，J＝12.00Hz，1H)，3.14-3.21(m，2H)，3.22(s，3H)，3.31-3.43(m，1H)，3.59(q，J＝6.99Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.99-4.12(m，4H)，4.40(s，2H)，6.89(d，J＝8.08Hz，1H)，6.94(s，1H)，7.34(d，J＝8.59Hz，1H)，7.70(br.s.，1H)，8.28(d，J＝7.58Hz，1H)，8.39(br.s.，1H)，8.62(d，J＝8.59Hz，1H)，10.54(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 706.26[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901362
实施例171：7-{[2-{[3-(二丙基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题产物根据实施例102的步骤、使用4-氯-N-[3-(二丙基磷酰基)苯基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(化合物168B)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.93(t，J＝7.33Hz，6H)，1.24-1.40(m，4H)，1.42-1.58(m，4H)，1.79(d，J＝12.88Hz，2H)，1.82-1.89(m，2H)，1.89-1.98(m，4H)，3.08(s，3H)，3.42-3.54(m，1H)，4.54(s，2H)，4.64(br.s.，1H)，7.26(br.s.，1H)，7.63-7.72(m，2H)，7.79(d，J＝6.57Hz，2H)，8.52(s，1H)，8.62(br.s.，1H)，10.14(s，1H)，10.59(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z＝630.27[MH+].HPLC：tR＝3.17min(ZQ3，极性_5min).
实施例172：二乙基[氟(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)甲基]膦酸酯
DCM(3mL)中的二乙基[羟基(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)甲基]膦酸酯(实施例133，8.00mg，0.014mmol)和DAST(7mg，0.043mmol)的溶液在0℃搅拌1h。溶液用饱和的NaHCO3水溶液(3mL)处理。分层和水层用DCM(3×5mL)萃取。合并有机层，经MgSO4干燥，过滤，浓缩，和残留物通过制备TLC(DCM中的5％的甲醇中的7N氨)纯化，给出1.5mg期望的产物(收率：19％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.24(t，J＝7.6Hz，3H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H)，2.90(s，3H)，4.00-4.17(m，4H)，5.82(dd，J＝7.2，44.0Hz，1H)，7.20(dt，J＝1.2，8.4Hz，1H)，7.39(d，J＝8.4Hz，2H)，7.50(dt，J＝2.0，8.8Hz，1H)，7.64(dd，J＝1.2，8.0Hz，1H)，7.69(d，J＝8.0Hz，2H)，8.36(s，1H)，8.43(d，J＝7.2Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 556.14[MH+]。HPLC：tR＝1.50min(UPLC TOF，极性_3min).
Figure BPA00001479300901381
实施例173：二乙基(4-{[4-{[2-(二甲基氨基甲酰基)-4-(反-4-羟基环己基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯：
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(20mg，0.46mmol)和2-氨基-5-(4-羟基环己基)-N，N-二甲基苯甲酰胺(化合物173A，120mg，0.46mmol)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.81(s，1H)，8.37(s，1H)，7.51(br.s.，1H)，7.33(dd，J＝2.02，8.34Hz，1H)，7.25(d，J＝2.02Hz，1H)，7.07(br.s.，1H)，3.92(dq，J＝7.07，7.33Hz，4H)，3.06-3.15(m，2H)，2.83-2.96(m，6H)，1.81-1.94(m，1H)，1.71-1.80(m，1H)，1.57(br.s.，2H)，1.16(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：650.2354[MH+].HPLC：tR＝1.42min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物173A：2-氨基-5-(4-羟基环己基)-N，N-二甲基苯甲酰胺：
THF(2mL)中的2-氨基-5-(4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环己基)-N，N-二甲基苯甲酰胺(化合物173B，0.320g，0.850mmol)的溶液加入在THF(8.50mL)中的1.0M的氟化四正丁基铵，并在室温搅拌过夜。该反应混合物在EtOAc和水之间分配，和分离。水相用EtOAc(3X)萃取，然后合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，和浓缩。该化合物在用庚烷中的75至100％EtOAc洗脱的IscoCombiflash单元上纯化，以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.91-6.97(m，1H)，6.80-6.85(m，1H)，6.59-6.64(m，1H)，4.94(s，2H)，4.30(d，J＝3.79Hz，1H)，2.91(s，6H)，2.24-2.39(m，1H)，1.62-1.80(m，4H)，1.34-1.54(m，4H)，1.20-1.32(m，1H)；MS(ES+)：m/z：263.15[MH+].HPLC：tR＝2.84min(微质量ZQ3：极性_3min)。
化合物173B：2-氨基-5-(4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环己基)-N，N-二甲基苯甲酰胺
在活性碳上的10％wt钯(0.091g，0.085mmol)加入到乙醇(20mL)中的2-氨基-5-(4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环己-1-烯-1-基)-N，N-二甲基苯甲酰胺(实施例173，0.320g，0.854mmol)的溶液中。该反应混合物抽空，和用氢气(3X)换气，并在室温搅拌过夜。该反应混合物通过硅藻垫过滤，和在真空浓缩给出标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.92(dd，J＝2.15，8.21Hz，1H)，6.79(d，J＝2.02Hz，1H)，6.63(d，J＝8.34Hz，1H)，2.91(br.s.，6H)，2.29-2.41(m，1H)，1.62-1.79(m，4H)，1.43-1.59(m，4H)，0.83-0.93(m，9H)；MS(ES+)：m/z：377.2605[MH+].HPLC：tR＝2.04min(UPLC TOF MS：极性_3min).
化合物173C：2-氨基-5-(4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环己-1-烯-1-基)-N，N-二甲基苯甲酰胺
1，4-二氧杂环乙烷(4mL)和H2O(1mL)中的2-氨基-N，N-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯甲酰胺(化合物173D：0.500g，1.72mmol)和三氟-甲磺酸4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己-1-烯基酯(WO 2005092863，0.745g，2.07mmol)的溶液加入到在微波容器中的与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.063g，0.086mmol)和碳酸钾(0.71g，5.2mmol)。该反应混合物抽空和用氮气(3X)换气，并在微波中100℃照射30分钟。该反应混合物在EtOAc和水之间分配和分离。水相用EtOAc(3X)萃取，并用盐水洗涤合并的有机部份，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩。该化合物在庚烷中50至100％EtOAc洗脱的IscoCombiflash上纯化，以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.17(dd，J＝2.27，8.59Hz，1H)，7.00(d，J＝2.27Hz，1H)，6.64(d，J＝8.59Hz，1H)，5.83(d，J＝2.02Hz，1H)，5.16(s，2H)，3.89-3.98(m，1H)，2.91(br.s.，6H)，2.32-2.44(m，2H)，2.00-2.09(m，1H)，1.85(d，J＝10.86Hz，1H)，1.55-1.67(m，1H)，0.87(s，12H)，0.06(d，J＝2.27Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：375.2372[MH+].HPLC：tR＝1.96min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物173D：2-氨基-N，N-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯甲酰胺
DMF(10mL)中的2-氨基-5-溴-N，N二甲基苯甲亚胺(化合物106A，1.0g，4.1mmol)和双戊酰二硼(2.1g，8.2mmol)的溶液加入AcOK(0.81g，8.2mmol)和与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.15g，0.20mmol)。该反应混合物抽空和用氮气(3X)换气，并在100℃加热过夜。该反应混合物在EtOAc和水之间分配和分离。水相用EtOAc(3X)萃取，并用盐水洗涤合并的有机部份，经硫酸钠干燥，过滤，和浓缩。该化合物在用DCM中的0至5％甲醇洗脱的IscoCombiflash单元中纯化，以提供标题混合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.35(dd，J＝1.52，8.08Hz，1H)，7.27(d，J＝1.26Hz，1H)，6.65(d，J＝8.08Hz，1H)，5.57(s，2H)，1.24(s，12H)，1.16(s，6H)；MS(ES+)：m/z：291.1895[MH+].HPLC：tR＝1.31min(UPLCTOF MS：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901401
实施例174：乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯：标题产物根据实施例102的步骤、使用[4-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基氨基)苄基]甲基次膦酸乙基酯(化合物174A，53mg，0.14mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(35mg，0.13mmol)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.57(br.s.，1H)，9.89(s，1H)，8.45(s，1H)，7.33(d，J＝8.34Hz，1H)，7.26(d，J＝6.57Hz，3H)，4.62(d，J＝4.55Hz，1H)，4.52(s，2H)，3.96(dddt，J＝3.16，7.01，7.23，7.34Hz，2H)，3.45-3.55(m，1H)，3.18(d，J＝17.43Hz，2H)，3.08(s，3H)，1.93(d，J＝9.85Hz，2H)，1.76(d，J＝12.13Hz，2H)，1.50-1.63(m，2H)，1.34(d，J＝13.89Hz，3H)，1.21(t，J＝7.07Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：618.2039[MH+].HPLC：tR＝1.34min(UPLC TOF MS：极性_3min).
化合物174A：[4-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基氨基)苄基]甲基次膦酸乙基酯
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯(化合物174B，1.08g，5.07mmol)和2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(1.0g，4.6mmol)进行制备。该化合物在用EtOAc中的0至10％甲醇洗脱的Isco Combiflash上纯化。该化合物在EtOAc(～20mL)中重结晶，以提供1.1g的标题混合物，61％收率。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.64(s，1H)，8.79(d，J＝0.51Hz，1H)，7.62(d，J＝8.34Hz，2H)，7.25(dd，J＝2.27，8.59Hz，2H)，3.86-4.01(m，2H)，3.15(d，J＝17.68Hz，2H)，1.31(d，J＝13.64Hz，3H)，1.19(t，J＝6.95Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：396.0708[MH+].HPLC：tR＝1.41min(UPLC TOF MS：极性_3min).
化合物174B：乙基(4-氨基苄基)甲基亚膦酸酯
甲醇(10mL)中的乙基甲基(4-硝基苄基)亚膦酸酯(化合物174C，2.4g，9.9mmol)的溶液加入在活性碳上的10％wt钯，和抽空并用氢气(3X)换气。该反应在室温搅拌16小时。该反应混合物通过硅藻垫过滤，和在真空中浓缩，以提供2.0g的标题化合物，95％收率。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.29(t，J＝7.1Hz，3H)，1.34(d，J＝13.6Hz，3H)，3.04(d，J＝17.4Hz，2H)，3.97-4.12(m，2H)，6.65(d，J＝7.8Hz，2H)，7.04(dd，J＝8.6，2.5Hz，2H).MS(ES+)：m/z：214.0976[MH+].HPLC：tR＝0.76min(TOF MS：极性_3min)。
化合物174C：乙基甲基(4-硝基苄基)亚膦酸酯
二乙氧基甲膦(2.0g，15mmol)中的对硝基苄基溴(2.4g，11mmol)的溶液在密封管中、氮气下140℃下搅拌16h。该反应混合物在真空浓缩，和残留物通过用己烷中25％EtOAc洗脱的二氧化硅上的柱色谱进行纯化，提供2.4g的标题化合物，87％收率。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.29(t，J＝7.1Hz，3H)，1.44(d，J＝13.9Hz，3H)，3.25(d，J＝17.7Hz，2H)，3.96-4.18(m，2H)，7.47(dd，J＝9.0，2.4Hz，2H)，8.20(d，J＝8.1Hz，2H).MS(ES+)：m/z：244.0745[MH+].HPLC：tR＝1.13min(TOFMS：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901411
实施例175：二乙基[4-({4-[(7-{1-[2-(二乙基氨基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例97的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和N，N-二乙基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]乙胺(化合物175A)进行制备。MS(ES+)：m/z 715.47(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.75min(UPLC，纯度)。
化合物175A：N，N-二乙基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]乙胺
(2-氯乙基)二乙基胺(化合物175B，0.6g，4mmol)和K2CO3(1.38g，10mmol)加入到DMF(10mL)中的4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(500mg，2.5mmol)的溶液。该反应混合物在微波反应器中在140℃搅拌1.5h，然后浓缩，残留物通过HPLC纯化，提供100mg的标题化合物(收率：12％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.1-1.2(m，9H)，1.25(s，12H)，2.72(s，0.5H)，2.75(s，1H)，3.00-3.10(s，4H)，3.1-3.2(m，2H)，3.44(s，3H)，4.58-4.59(br，3H)，7.74(s，1H)，7.82(s，0.5H)，8.05(s，0.5H)，8.09(s，1H)。
化合物175B：(2-氯乙基)二乙基胺：2-二乙基氨基乙醇(1.17g，10mmol)和SOCl2(100mL)的混合物加热回流5h。在减压下除去过量的SOCl2，给出期望的产物，其在下个步骤中直接使用。
Figure BPA00001479300901421
实施例176：二乙基(4-{[4-{[2-(吡咯烷-1-基羰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和商业可得的2-(吡咯烷-1-基羰基)苯胺进行制备。MS(ES+)：m/z578.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.02min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901422
实施例177：二乙基(4-{[4-({2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和商业可得的(2-氨基苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮进行制备。MS(ES+)：m/z 607.37(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.66min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901423
实施例178：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(吡咯烷-1-基羰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的2-(吡咯烷-1-基羰基)苯胺进行制备。MS(ES+)：m/z 608.35(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.07min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901431
实施例179：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-({2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的(2-氨基苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮进行制备。MS(ES+)：m/z 637.40(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.69min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901432
实施例180：二乙基(4-{[4-{[4-{1-[2-(二乙基氨基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例97的步骤、使用二乙基(4-{[4-{[4-溴-2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例106)和N，N-二乙基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]乙胺(化合物175A)进行制备。MS(ES+)：m/z 703.45(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.73min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901433
实施例181：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(2H-四唑-5-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-(2H-四唑-5-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物181A)进行制备。
MS(ES+)：m/z 618.33(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.13min(UPLC，纯度)。化合物181A：7-氨基-2-甲基-4-(2H-四唑-5-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DMF(6mL)中的7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-腈(化合物181B，25.0mg，0.134mmol)、叠氮钠(104mg，1.60mmol)和氯化铵(85.7mg，1.60mmol)的混合物进行混合物，并在微波中120℃加热9小时。过滤该粗混合物，并通过MDP直接纯化以获得标题化合物(12.0mg，39％收率)。MS(ES+)：m/z 231.23(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.59min(UPLC，分析级)。
化合物181B：7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-腈
DMF(1.5mL，19mmol)中的7-氨基-4-溴-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(100.0mg，0.4148mmol)、氰化锌(48.71mg，0.4148mmol)和Pd(PPh3)4(71.90mg，0.06222mmol)的混合物抽空，并用N2换气三次。该混合物在微波中150℃加热5分钟。该粗混合物用乙酸乙酯稀释，然后用水和盐水洗涤。蒸发有机层，在ISCOCombiflash单元上纯化，以分离标题化合物(50.0mg，64％收率)。MS(ES+)：m/z188.14(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.00min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300901441
实施例182：乙基(4-{[4-({7-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸钠
MEK(6mL)中的实施例156(172mg，0.255mmol)的混合物用NaI(165mg，1.102mmol)处理，并在微波上120℃照射6小时。过滤冷却的反应混合物，用冰冷却的丙酮洗涤该固体，和在真空中干燥以提供为浅棕色固体的标题化合物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.64(br s，1H)，9.72(s，1H)，9.19(br s，1H)，8.47(brs，1H)，8.40(s，1H)，8.19(br s，1H)，7.75(br s，1H)，7.28(br s，4H)，6.34(br s，1H)，4.63(s，2H)，4.20(t，J＝6.2Hz，2H)，3.60(quin，J＝7.1Hz，2H)，3.42-3.51(m，2H)，3.11(s，3H)，2.73(d，J＝19.5Hz，2H)，1.94(quin，J＝6.1Hz，2H)，0.94(t，J＝6.9Hz，3H).MS(ES+)：m/z 646.20(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.12min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300901451
实施例183：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物183B)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.13-1.20(m，9H)，1.43(td，J＝13.26，3.54Hz，2H)，1.53(d，J＝11.12Hz，2H)，1.65(d，J＝12.63Hz，2H)，1.89(qd，J＝12.80，2.78Hz，2H)，3.08(s，3H)，3.17-3.25(m，2H)，3.92-4.01(m，4H)，4.51(s，2H)，6.97(s，1H)，7.10(s，1H)，7.23(s，1H)，7.25(dd，J＝8.46，2.15Hz，2H)，7.38(d，J＝8.34Hz，1H)，7.59(d，J＝4.80Hz，2H)，8.46(s，1H)，8.66(br.s.，1H)，9.89(s，1H)，10.58(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 662.28[MH+](TOF，极性)。
化合物183A和183B：7-氨基-4-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和7-氨基-4-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
THF(4.5mL)中的7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(68.5mg，0.265mmol)的溶液在0℃冷却，然后加入Et2O(0.526mL，1.58mmol)中的3.0M的甲基溴化镁。该反应混合物在0℃搅拌45分钟，并使其升温至室温搅拌48h。该反应混合物用NH4Cl(10mL)水溶液淬灭，然后用EtOAc(15mL)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，和在减压下浓缩以产生黄色固体。该物质通过在使用1∶1EtOAc-DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上进行硅胶色谱纯化。洗脱的第一产物是顺式-醇(化合物182A)：(14.8mg，20％收率)1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.30(s，3H)，1.47-1.58(m，2H)，1.63(d，J＝12.38Hz，2H)，1.73-1.95(m，4H)，2.40(tt，J＝12.22，3.19Hz，1H)，3.16(s，3H)，4.34(s，2H)，6.87(d，J＝8.08Hz，1H)，7.25(s，1H)。MS(ES+)：m/z 275.16[MH+](TOF，极性)。在此后洗脱的反式-醇(化合物182B)：11.8mg(16％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.27(d，J＝3.28Hz，1H)，1.36(s，3H)，1.55-1.66(m，4H)，1.74-1.87(m，4H)，3.15(s，3H)，4.31(s，2H)，6.65(d，J＝8.34Hz，1H)，7.14(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 275.16[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901461
实施例184：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物182A)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.16(t，J＝6.95Hz，6H)，1.25(s，3H)，1.46-1.73(m，8H)，3.08(s，3H)，3.17-3.26(m，2H)，3.90-3.99(m，4H)，4.52(s，2H)，6.97(s，1H)，7.10(s，1H)，7.22(s，1H)，7.25-7.31(m，2H)，7.43(d，J＝8.59Hz，1H)，7.54(br.s.，2H)，8.45(s，1H)，8.58(br.s.，1H)，9.89(s，1H)，10.60(s，1H)。MS(ES+)：m/z 662.27[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901462
实施例185：双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A，0.050g，0.15mmol)和双(2-甲氧基乙基)(4-氨基苄基)膦酸酯(化合物185A，0.0917g，0.302mmol)进行制备，以提供标题化合物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.75(d，J＝4.80Hz，1H)，8.44(s，1H)，7.69-7.74(m，1H)，7.57(d，J＝7.58Hz，2H)，7.50(t，J＝7.96Hz，1H)，7.13-7.21(m，3H)，3.94-4.05(m，4H)，3.46(t，J＝4.55Hz，4H)，3.21-3.26(m，6H)，3.18(s，2H)，2.78(d，J＝4.55Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：598.1695[MH+].HPLC：tR＝1.32min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物185A：双(2-甲氧基乙基)(4-氨基苄基)膦酸酯
乙醇(150mL)中的双(2-甲氧基乙基)(4-硝基苄基)膦酸酯(化合物185B，6.0g，18mmol)和5％Pd/C(0.8g)的混合物在40psi氢压下、40℃氢化6h。过滤该反应混合物，和浓缩该滤液，给出期望的产物(5.3g，97％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝3.04(d，J＝21.2Hz，2H)，3.28(s，6H)，3.42-3.46(m，4H)，3.97-4.03(m，4H)，6.55(d，J＝8.4Hz，2H)，6.99-7.02(m，2H)。
化合物185B：双(2-甲氧基乙基)(4-硝基苄基)膦酸酯：在0℃，THF(60mL)中的4-硝基苄基膦酰二氯(参见化合物165B，10g，40mmol)的溶液逐滴加入到THF(60mL)中的2-甲氧基乙醇(7.60g，100mmol)和TEA(10g，100mmol)的溶液。该反应混合物升温至室温并在70℃搅拌12h。除去溶剂和通过柱色谱纯化残留物，给出6.0g期望的产物(收率：46％)。
Figure BPA00001479300901471
实施例186：二乙基[4-({4-[(2-羟基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯三氟乙酸盐
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(50.0mg，0.11mmol)和7-氨基-2-羟基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物186A，21.70mg，0.13mmol)进行制备。该反应混合物通过MDP纯化，以分离为TFA盐的期望产物(4.6mg，收率：7％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.29(t，J＝7.2Hz，6H)，3.33(d，J＝21.2Hz，2H)，3.89(s，3H)，4.06-4.13(m，4H)，4.63(s，2H)，4.96(dt，J＝2.8，8.4Hz，1H)，7.10(t，J＝2.0Hz，1H)，7.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.36(dd，J＝0.8，8.0Hz，0.5H)，7.52(m，1H)，7.66(d，J＝8.0Hz，1H)，8.32(d，J＝8.0Hz，0.5H)，8.37(s，1H)。MS(ES+)：m/z 582.17[MH+]。HPLC：tR＝3.64min(OpenLynx，极性_5min)。
化合物186A：7-氨基-2-羟基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
200mg的5％Pd/C加入到帕尔氢化瓶中的甲醇(30mL)中的7-硝基-2-苄氧基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物186B，2.3g，1.2mmol)的溶液。该混合物在40psi室温氢化过夜。该反应混合物通过玻璃过滤纸过滤，然后滤液浓缩提供1.2g的纯产物(90％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)：δ＝4.57(s，2H)，5.04(br，2H)，6.57(d，J＝7.8Hz，1H)6.65(d，J＝7.5Hz，1H)，7.25(dd，J＝7.5，7.8Hz，1H)，10.2(s，br，1H)。
化合物186B：7-硝基-2-苄氧基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
水(20mL)中的苄氧基胺盐酸盐(7.8g，48.87mmol)的溶液用碳酸钠(6.0g，48.87mmol)碱化以得到游离胺。该混合物然后加入到THF中的甲基2-溴甲基-6-硝基苯甲酸酯(4.46g，16.29mmol)的溶液。得到的混合物在60℃搅拌过夜，浓缩以除去THF和用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)和浓缩给出为非纯白色固体的3.2g期望的产物(70％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)：δ＝4.24(s，2H)，5.2(s，2H)，7.3-7.9(m，8H)。
Figure BPA00001479300901481
实施例187：二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲氧基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯三氟乙酸盐
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(50.0mg，0.11mmol)和7-氨基-2-甲氧基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物187A，23.56mg，0.13mmol)进行制备。在通过MDP纯化后，得到为TFA盐的29.4mg期望的产物(45％)1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝7.2Hz，6H)，3.34(d，J＝21.2Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.91(s，3H)，4.07-4.14(m，4H)，4.68(s，2H)，6.95(dt，J＝2.0，8.0Hz，1H)，7.11(t，J＝2.4Hz，1H)，7.27(dd，J＝0.4，7.6Hz，1H)，7.53(t，J＝8.0Hz，1H)，7.59(d，J＝7.6Hz，1H)，8.38(s，1H)。MS(ES+)：m/z596.16[MH+]。HPLC：tR＝4.01min(OpenLynx，极性_5min)。
化合物187A：7-氨基-2-甲氧基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
乙醇(5mL)中的7-硝基-2-甲氧基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物187B，0.25g，1.2mmol)的溶液经5％Pd/C(30mg)在室温氢化过夜。通过玻璃过滤纸滤去催化剂，和浓缩滤液给出0.18g的纯产物(收率：85％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)：δ＝3.93(s，3H)，4.48(s，2H)，6.56(d，J＝8.5Hz，1H)6.63(d，J＝7.0Hz，1H)，7.24(dd，J＝7.5，8.5Hz，1H)。
化合物187B：7-硝基-2-甲氧基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮：水(5mL)中的甲氧基胺盐酸盐(0.76g，9.12mmol)的溶液用碳酸钠(0.96g，9.12mmol)碱化以得到游离胺。该混合物然后加入到THF中的甲基2-溴甲基-6-硝基苯甲酸酯(0.25g，0.91mmol)的溶液。该反应混合物在60℃搅拌过夜，浓缩除去THF，残留物用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)和浓缩给出为非纯黄色固体的0.15g期望的产物(79％)。1H NMR(CDCl3，600MHz)：δ＝3.98(s，3H)，4.64(s，2H)，7.60-7.90(m，3H)。
Figure BPA00001479300901491
实施例188：二乙基[二氟(4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)-嘧啶-2-基]氨基}苯基)甲基]膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A，40.0mg，0.12mmol)和二乙基[(4-氨基苯基)(二氟)甲基]-膦酸酯(化合物188A，40.5mg，0.15mmol)进行制备。粗产物通过硅胶色谱(DCM中的5％的甲醇中的7N NH3)纯化，以提供为白色固体的期望产物(4.1mg，收率：6％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.32(t，J＝7.2Hz，6H)，2.90(s，3H)，4.14-4.25(m，4H)，7.22(t，J＝8.4Hz，1H)，7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，7.51(dt，J＝1.2，7.2Hz，1H)，7.66(dd，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.79(d，J＝8.8Hz，2)，8.39(s，1H)，8.47(d，J＝8.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 574.12[MH+]。HPLC：tR＝4.13min(OpenLynx，极性_5min)。
化合物188A：二乙基[(4-氨基苯基)(二氟)甲基]-膦酸酯
二乙基[(4-硝基苯基)(二氟)甲基]膦酸酯(化合物188B，267mg)在甲醇(10mL)中的10％Pd/C(30mg)存在下、在1大气压下氢化4h。滤去催化剂，浓缩滤液，和通过硅胶色谱(DCM中的2％甲醇)纯化残留物以提供201mg期望的产物(收率：83％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.35(t，J＝7.6Hz，6H)，4.08(s，br，2H)，4.31(q，J＝7.6Hz，4H)，6.64(d，J＝8.8Hz，2H)，7.86(d，J＝8.0Hz，2H)。
化合物188B：二乙基[(4-硝基苯基)(二氟)甲基]膦酸酯
在N2下，DMF(0.5mL)中的溴二氟甲基二乙基膦酸酯(0.427g，1.6mmol)和Cd粉末(180mg，1.6mmol)的混合物在室温搅拌2h。大部分的Cd消失。然后加入4-碘-1-硝基苯(249mg，1.00mmol)和CuCl(115mg，1.16mmol)。该混合物在室温再次搅拌3h。乙醚(20mL)加入到该反应混合物，滤出沉淀的固体，用10mL的乙醚洗涤。用NH4Cl水溶液洗涤合并的醚层，经MgSO4干燥，和蒸发给出标题产物(267mg，收率：86％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.33(t，J＝7.2Hz，6H)，4.20-4.28(m，4H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)，8.39(d，J＝8.4Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 310.06[MH+]。HPLC：tR＝3.92min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901501
实施例189：双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(化合物189A，39.5mg，0.0816mmol)和7-氨基-4-(4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(24.7mg，0.0949mmol)进行制备。浓缩该反应产物，通过MDP[在碱性条件下；碳酸氢铵碱性缓冲液(pH 9)]纯化。得到为白色固体的标题化合物36.2mg(61％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.58(br s，1H)，9.89(s，1H)，8.46(s，1H)，8.65(br s，1H)，7.57(br s，2H)，7.38(d，J＝8.8Hz，1H)，7.26(dd，J＝8.6，2.0Hz，2H)，4.56-4.65(m，1H)，4.52(s，2H)，3.94-4.09(m，4H)，3.49-3.55(m，1H)，3.44-3.49(m，4H)，3.27(d，J＝13.4Hz，2H)，3.24(s，6H)，3.08(s，3H)，1.93(d，J＝9.9Hz，2H)，1.70-1.80(m，2H)，1.47-1.66(m，2H)，1.22-1.38(m，2H)。MS(ES+)：m/z 708.26(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.61min(ZQ3，极性_5min)。
化合物189A：双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯：
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用双(2-甲氧基乙基)(4-氨基苄基)膦酸酯(化合物185A)和2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶进行制备。该粗产物通过MDP(碳酸氢铵碱性缓冲液pH 9)纯化。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.65(s，1H)，8.80(s，1H)，7.61(d，J＝8.1Hz，2H)，7.26(dd，J＝8.7，2.4Hz，2H)，3.95-4.06(m，4H)，3.46(dd，J＝5.4，3.9Hz，4H)，3.17-3.29(m，8H)。MS(ES+)：m/z 484.07/486.09(100/95)[MH+]。HPLC：tR＝1.43min(TOF，极性_3min)。
实施例190：二乙基[4-({4-[(2-氨基甲酰基苯基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和商业可得的2-氨基苯甲酰胺进行制备。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.19(t，J＝7.07Hz，6H)，3.25(d，J＝21.50Hz，2H)，3.76(s，3H)，3.93-4.03(m，4H)，6.85(dt，J＝8.08，2.15Hz，1H)，7.02(s，1H)，7.06(t，J＝7.83Hz，1H)，7.38(t，J＝8.21Hz，1H)，7.52(d，J＝8.34Hz，1H)，7.75(dd，J＝7.96，1.39Hz，1H)，7.77(br.s.，1H)，8.27(br.s.，1H)，8.36(s，1H)，8.47(br.s.，1H)，8.80(s，1H)，11.82(s，1H).MS(ES+)：m/z 406.04(100)[MH+]。HPLC：tR＝4.01min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901512
实施例191：(A)乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯和
化合物192：(B)乙基(4-{[2-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯(0.120g，0.283mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(0.0811g，0.312mmol)进行制备。该反应产物通过MDP纯化，合并纯的部份，用1M NaOH中和，和用EtOAc(3X)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，和浓缩以提供标题化合物。首先洗脱的实施例191(A)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.55(s，1H)，9.05(br.s.，1H)，8.37(s，1H)，7.25(d，J＝7.58Hz，1H)，7.07(s，1H)，6.91(d，J＝8.08Hz，1H)，4.60(d，J＝4.29Hz，1H)，4.49(s，2H)，4.01(dq，J＝7.07，7.24Hz，2H)，3.75(s，3H)，3.43-3.56(m，1H)，3.06(s，3H)，1.92(d，J＝9.60Hz，2H)，1.71(d，J＝10.61Hz，2H)，1.57(q，J＝13.05Hz，2H)，1.36(d，J＝13.89Hz，3H)，1.23(t，J＝7.07Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：648.32[MH+].HPLC：tR＝3.64min(ZQ3：极性_5min)。第二洗脱的化合物192(B)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.21(s，1H)，8.37(s，1H)，7.20(d，J＝8.34Hz，1H)，7.12(s，1H)，6.93-7.01(m，1H)，4.60(d，J＝4.55Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.03(dq，J＝7.07，7.33Hz，2H)，3.72(s，3H)，3.42-3.54(m，1H)，3.28(d，J＝4.04Hz，1H)，3.05(s，3H)，2.41(t，J＝11.87Hz，1H)，1.92(d，J＝10.11Hz，2H)，1.64-1.73(m，2H)，1.56(q，J＝12.72Hz，2H)，1.38(d，J＝13.89Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：648.31[MH+].HPLC：tR＝3.80min(微质量ZQ3：极性_5min)。
Figure BPA00001479300901521
实施例193：二乙基{4-[7-({2-[(2-甲氧基苯基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基}氨基)-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]环己基}膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用4-氯-N-(2-甲氧基苯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(7.2mg，0.024mmol)和二乙基[4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己基]膦酸酯(化合物193A，9.0mg，0.024mmol)进行制备。该反应混合物通过MDP(碱性缓冲液)纯化，给出白色固体。该物质通过硅胶色谱(ISCOCombi-flash系统，用0-8％甲醇/DCM洗脱)进一步纯化，提供为白色固体的标题化合物5mg。(4∶1混合物，顺式和反式未指定)。1H NMR(CDCl3)：1.40(t，J＝7.1Hz，6H)，1.11(t，J＝7.6Hz，3H)，1.70-1.84(m，4H)，2.09-2.28(m，5H)，2.58(m，1H)，3.23(s，3H)，3.94，3.95(2xs，3H)，4.14-4.23(m，4H)，4.39，4.43(2xs，2H)，6.95-7.02(m，2H)，7.10(m，1H)，7.35(d，J＝8.6Hz，1H)，7.93(m，1H)，8.26(m，1H)，8.38(s，1H)，8.58(d，J＝8.3Hz，1H)，10.64(s，1H)。MS(ES+)：m/z＝648.33[MH+]。HPLC：tR＝4.53min(ZQ3，极性_5min)。
化合物193A：二乙基[4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-基)环己基]膦酸酯
加入的二乙基[4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-1，3-二烯-1-基]膦酸酯(化合物193B)和乙醇(10mL)中的10％Pd-C(40mg)的混合物在氢气的1个大气压下在室温搅拌过夜。通过硅藻土的垫过滤除去催化剂。在减压下蒸发溶剂，和残留物通过硅胶色谱(ISCO Combi-flash系统)纯化，提供期望产物和部分还原的副产物的混合物(10mg)。该混合物不进一步纯化在下个步骤中使用。MS(ES+)：m/z＝381.16[MH+]。HPLC：tR＝3.38min(ZQ3，极性_5min)。
化合物193B：二乙基[4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-1，3-二烯-1-基]膦酸酯
五氯化磷(21mg，0.099mmol)加入到PhMe(2mL)和DCM(2mL)中的二乙基[1-羟基-4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-3-烯-1-基]膦酸酯(化合物193C，42mg，0.099mmol)的溶液。该混合物在室温搅拌2h，在其之后，加入另一个相同的PCl5，然后该混合物在室温搅拌3h。该混合物用DCM(30mL)稀释，用饱和的NaHCO3(10mL)水溶液、盐水(10mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。蒸发提供双烯，其不进一步纯化在下个步骤中使用。MS(ES+)：m/z＝407.08[MH+]。HPLC：tR＝3.44min(ZQ3，极性_5min)。
化合物193C：二乙基[1-羟基-4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-3-烯-1-基]膦酸酯
2-甲基-7-硝基-4-(4-氧代环己-1-烯-1-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物193D)溶解在DCM(10mL)中，然后在0℃、氮气下加入三乙膦(520mg，3.1mmol)和1N HCl/Et2O(3.1mmol，3.1mL)。得到的混合物缓慢升温至室温并在室温搅拌过夜。蒸发溶剂，和通过硅胶色谱(ISCO Combi-flash系统，用0-10％甲醇/DCM洗脱)纯化给出为黄色固体的标题化合物470mg，71％收率(经过两个步骤)。1HNMR(CDCl3)：1.39(t，J＝7.1Hz，6H)，2.02(m，1H)，2.20(m，1H)，2.30-2.47(m，2H)，2.65-2.83(m，2H)，3.20(s，3H)，4.21-4.29(m，4H)，4.42，4.48(AB，JAB＝18.0Hz，2H)，5.86(m，1H)，7.48(d，J＝8.3Hz，1H)，7.71(d，J＝7.3Hz，1H)。MS(ES+)：m/z＝425.12[MH+]。HPLC：tR＝3.19min(ZQ3，极性_5min)。
化合物193D：2-甲基-7-硝基-4-(4-氧代环己-1-烯-1-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物193E，515mg，1.56mmol)溶解在THF(10mL)和3N HCl(3mL)的水溶液中。得到的混合物在室温搅拌4h。该混合物用EtOAc(40mL)稀释，用盐水(2x 10mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。蒸发提供黄色油，其不进一步纯化用于下个步骤。MS(ES+)：m/z＝287.10[MH+]。HPLC：tR＝3.13min(ZQ3，极性_5min)。
化合物193E：4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题产物根据7-氨基-4-(1，4-二氧杂螺[4，5]癸-7-烯-8-基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮的步骤、使用4-溴-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和1，4-二氧杂螺[4，5]癸-7-烯-8-硼酸频哪醇酯进行制备。
Figure BPA00001479300901541
实施例194：(A)二乙基(4-{[4-{[2-(二甲基氨基甲酰基)-4-(顺-4-羟基环己基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和
实施例195：(B)二乙基(4-{[4-{[2-(二甲基氨基甲酰基)-4-(反-4-羟基环己基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(0.20g，0.45mmol)和2-氨基-5-(4-羟基环己基)-N，N-二甲基苯甲酰胺(化合物173A，0.130g，0.496mmol)进行制备。该反应混合物在EtOAc和水之间分配和分离。水相用EtOAc(3X)萃取，和合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，和浓缩。该化合物在DCM中0至5％甲醇洗脱的IscoCombiflash单元上纯化，以提供单独的反式和顺式异构体。顺式：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.85(s，1H)，8.43(s，1H)，8.32(s，1H)，7.86(d，J＝8.34Hz，1H)，7.60(d，J＝7.83Hz，1H)，7.26(dd，J＝1.77，8.59Hz，1H)，7.22(d，J＝2.02Hz，1H)，6.96(t，J＝1.89Hz，1H)，6.73(d，J＝7.83Hz，1H)，3.92-4.01(m，4H)，3.89(br.s.，1H)，3.77(s，3H)，3.13-3.23(m，2H)，2.91(d，J＝15.16Hz，6H)，2.56(t，J＝11.87Hz，1H)，1.79-1.92(m，2H)，1.70-1.78(m，2H)，1.49-1.61(m，4H)，1.18(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：681.2723[MH+].HPLC：tR＝1.45min(UPLC TOF MS：极性_3min)。反式：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.44(s，1H)，8.32(s，1H)，7.85(d，J＝8.84Hz，1H)，7.58(d，J＝8.08Hz，1H)，7.26(dd，J＝2.02，8.34Hz，1H)，7.22(d，J＝2.02Hz，1H)，6.96(s，1H)，6.73(d，J＝7.83Hz，1H)，4.57(d，J＝4.55Hz，1H)，3.91-4.01(m，4H)，3.76(s，3H)，3.40-3.54(m，1H)，3.14-3.23(m，2H)，2.91(d，J＝18.95Hz，6H)，1.93(d，J＝9.35Hz，2H)，1.79(d，J＝12.38Hz，2H)，1.45-1.58(m，2H)，1.22-1.35(m，2H)，1.19(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：680.2332[MH+].HPLC：tR＝1.40min(UPLCTOF MS：极性_3min)。
实施例196：二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(反-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物183B)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.16-1.20(m，6H)，1.27(s，3H)，1.46-1.57(m，2H)，1.64(br.s.，6H)，2.46(br.s.，1H)，3.07(s，3H)，3.25-3.34(m，2H)，3.74(s，3H)，3.94-4.03(m，4H)，4.49(s，2H)，6.94(d，J＝7.83Hz，1H)，7.08(s，1H)，7.37(d，J＝8.59Hz，1H)，8.38(s，1H)，9.10(br.s.，1H)，10.60(s，1H)。MS(ES+)：m/z 692.29[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901552
实施例197：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物183A)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.15(s，3H)，1.20(t，J＝7.07Hz，6H)，1.37-1.55(m，4H)，1.64(d，J＝12.13Hz，2H)，1.81-1.96(m，2H)，2.40-2.48(m，1H)，3.07(s，3H)，3.23-3.34(m，2H)，3.76(s，3H)，3.96-4.06(m，4H)，4.49(s，2H)，6.92(d，J＝8.08Hz，1H)，7.07(s，1H)，7.31(d，J＝7.83Hz，1H)，8.38(s，1H)，9.06(br.s.，1H)，10.58(s，1H)。MS(ES+)：m/z 692.29[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901561
实施例198：7-{[2-{[4-(二丙基磷酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据实施例102的步骤、使用4-氯-N-[4-(二丙基磷酰基)苯基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺化合物198A，(75.0mg，0.185mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(48.1mg，0.185mmol)进行制备。该反应混合物在真空中浓缩，在ISCO Combiflash单元(0-5％甲醇/DCM)上纯化，以分离66mg的白色固体的期望产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 0.93(t，J＝7.33Hz，6H)，1.24-1.40(m，4H)，1.42-1.58(m，4H)，1.79(d，J＝12.88Hz，2H)，1.82-1.89(m，2H)，1.89-1.98(m，4H)，3.08(s，3H)，3.42-3.54(m，1H)，4.54(s，2H)，4.64(br.s.，1H)，7.26(br.s.，1H)，7.63-7.72(m，2H)，7.79(d，J＝6.57Hz，2H)，8.52(s，1H)，8.62(br.s.，1H)，10.14(s，1H)，10.59(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z＝630.27[MH+].HPLC：tR＝3.17min(ZQ3，极性_5min)。
化合物198A：4-氯-N-[4-(二丙基磷酰基)苯基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(101.6mg，0.4681mmol)和4-(二丙基磷酰基)苯胺(化合物198B：116mg，0.515mmol)进行制备。这个在ISCO Combiflash单元(0-5％甲醇/DCM)上纯化，以分离75mg为白色固体的期望的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.90(t，J＝7.3Hz，6H)，1.30(br.s.，2H)，1.46(br.s.，2H)，1.76-2.00(m，4H)，7.69(dd，J＝10.1，8.6Hz，2H)，7.84(dd，J＝8.7，1.9Hz，2H)，8.87(s，1H)，10.89(s，1H).MS(ES+)：m/z＝406.04(100)408.01(35)[MH+].HPLC：tR＝4.01min(ZQ3，极性_5min)。
化合物198B：4-(二乙基磷酰基)苯胺
标题化合物根据产生3-(二丙基磷酰基)苯胺(化合物168C)的步骤、用商业可得的二乙基氧化膦和4-碘硝基苯开始进行制备。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.47(dd，J＝8.46，10.48Hz，2H)，6.74(dd，J＝2.27，8.59Hz，2H)，3.97(br.s.，2H)，1.76-2.02(m，4H)，1.11(td，J＝7.71，16.67Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：198.0939[MH+].HPLC：tR＝0.83min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901571
实施例199：二乙基(4-{[4-{[7-(4-乙酰哌嗪-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
1，4-二氧杂环乙烷(5mL)中的二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(50.0mg，0.0796mmol)、1-乙酰哌嗪(0.510g，3.98mmol)、双(二亚苄基丙酮)钯(0)(9.15mg，0.0159mmol)和Cs2CO3(77.8mg，0.239mmol)的混合物抽空，然后用N2换气三次，和在100℃搅拌过夜。粗混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd，和随后通过MDP纯化以分离标题化合物(10.5mg，20％收率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.28(t，J＝7.1Hz，6H)，2.17(s，3H)，3.04-3.10(m，2H)，3.11-3.15(m，2H)，3.19(s，3H)，3.23(d，J＝21.5Hz，2H)，3.68-3.73(m，2H)，3.73-3.79(m，2H)，4.02-4.14(m，4H)，4.54(s，2H)，7.15(d，J＝8.8Hz，1H)，7.38(dd，J＝8.6，2.5Hz，2H)，7.53(d，J＝8.1Hz，2H)，8.34(s，1H)，8.52(br.s.，1H)。
MS(ES+)：m/z 676.35(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.97min(UPLC，纯度)。
实施例200：乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯
在可密闭微波管中的乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯(44.8mg，0.106mmol)和7-氨基-4-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物183A，29.0mg，0.106mmol)的溶液用TFA(24.4uL，0.317mmol)处理，密封和在CEM上95℃照射15分钟。该反应混合物倒入水中，和用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和浓缩。该粗物质在ISCO Combiflash单元(0-5％甲醇/DCM)上纯化，给出～20mg的物质，其是3.5∶1的区域异构体的混合物。该物质煮沸/在EtOAc中研制，以分离主要的区域异构体(假定为顺式区域异构体)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.55(br.s.，1H)，9.04(br.s.，1H)，8.37(s，1H)，7.44(br.s.，1H)，7.29(d，J＝7.33Hz，1H)，7.06(br.s.，1H)，6.92(d，J＝7.70Hz，1H)，4.47(s，2H)，4.25(br.s.，1H)，4.00(td，J＝7.33，14.66Hz，2H)，3.74(s，3H)，3.25(d，J＝17.96Hz，2H)，3.06(s，3H)，2.37-2.47(m，1H)，1.80-1.95(m，2H)，1.63(d，J＝12.10Hz，2H)，1.44-1.53(m，2H)，1.40(d，J＝13.56Hz，5H)，1.22(t，J＝6.97Hz，3H)，1.14(s，3H).MS(ES+)：m/z＝662.27(100)[MH+].HPLC：tR＝3.39(ZQ3，non极性_5min)。
Figure BPA00001479300901581
实施例201：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据二乙基(4-{[4-{[7-(4-乙酰哌嗪-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例199)的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和商业可得的N-甲基哌嗪进行制备。MS(ES+)：m/z 648.35(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.70min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901582
实施例202：乙基乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)亚膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)乙基亚膦酸酯(化合物202A，0.075g，0.18mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(0.0527g，0.202mmol)进行制备。该化合物通过MDP纯化，以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.58(br.s.，1H)，9.89(s，1H)，8.45(s，1H)，7.36(d，J＝8.59Hz，1H)，7.26(d，J＝6.57Hz，2H)，4.52(s，2H)，3.87-4.00(m，2H)，3.18(dd，J＝4.55，16.93Hz，2H)，3.08(s，3H)，1.93(d，J＝9.35Hz，2H)，1.76(d，J＝12.38Hz，2H)，1.51-1.68(m，4H)，1.23-1.36(m，2H)，1.19(t，J＝7.07Hz，3H)，1.00(td，J＝7.71，17.68Hz，3H)；MS(ES+)：m/z：632.2089[MH+].HPLC：tR＝1.35min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物202A：乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)乙基亚膦酸酯
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(0.150g，0.691mmol)和乙基(4-氨基苄基)乙基亚膦酸酯(化合物202B，0.173g，0.760mmol)进行制备。在标准的萃取工作完成后，化合物在庚烷中80至100％EtOAc洗脱的ISCO Combiflash单元纯化，以提供标题化合物和区域异构体的混合物。MS(ES+)：m/z：410.0876[MH+].HPLC：tR＝1.46min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物202B：乙基(4-氨基苄基)乙基亚膦酸酯
甲醇(4mL)中的乙基乙基(4-硝基苄基)亚膦酸酯(化合物202C，0.98g，3.8mmol)的溶液加入在活性碳上10％wt钯(0.20g，0.19mmol)，和抽空并用氢气(3X)换气三次。该反应在室温搅拌过夜。该反应混合物通过硅藻土的垫过滤，和滤液在真空中浓缩，提供0.848g标题化合物，98％收率。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.90(dd，J＝2.15，8.46Hz，2H)，6.48(d，J＝8.08Hz，2H)，3.80-3.93(m，2H)，2.93(dd，J＝3.66，16.29Hz，2H)，1.17(t，J＝7.07Hz，3H)，1.05(t，J＝6.95Hz，2H)，0.88-1.00(m，4H)；MS(ES+)：m/z：229.1305[MH+].HPLC：tR＝0.83min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物202C：乙基乙基(4-硝基苄基)亚膦酸酯
THF(11mL)中的二氯乙基膦(2.5g，19mmol)的溶液在0℃缓慢加入乙醇钠(2.86g，42.0mmol)，并搅拌15分钟。该反应混合物加入在密封管中的对-硝基苄基溴(4.1g，19mmol)，然后在100℃搅拌过夜。该反应混合物在真空中浓缩，和残留物在用DCM中0至5％甲醇洗脱的ISCO Combiflash单元上纯化，以提供标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.19(d，J＝8.34Hz，2H)，7.55(dd，J＝2.02，8.84Hz，2H)，3.83-4.04(m，2H)，3.41(d，J＝16.93Hz，2H)，1.58-1.73(m，2H)，1.16(t，J＝7.07Hz，3H)，0.94-1.06(m，3H)。
Figure BPA00001479300901601
实施例203：二乙基[4-({4-[(3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-5-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和5-氨基-3-甲基喹啉-4(1H)-酮(化合物203A)进行制备。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.18(t，J＝7.07Hz，6H)，2.00(s，3H)，3.15-3.25(m，2H)，3.96(qd，J＝7.37，7.20Hz，4H)，7.16(d，J＝7.83Hz，1H)，7.24(dd，J＝8.59，2.27Hz，2H)，7.51(t，J＝7.96Hz，1H)，7.61(d，J＝6.82Hz，2H)，7.97(d，J＝5.81Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.71(br.s.，1H)，9.84(s，1H)，12.01(d，J＝6.06Hz，1H)，14.42(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z 562.13[MH+](TOF，极性).
化合物203A：5-氨基-3-甲基喹啉-4(1H)-酮
标题化合物根据2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺(化合物102A)的步骤、使用3-甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮(Eur J Med Chem.1992，37，547-570)进行制备。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.87(d，J＝0.76Hz，3H)，6.21(dd，J＝7.83，1.01Hz，1H)，6.40(dd，J＝8.08，1.01Hz，1H)，7.12(t，J＝8.08Hz，1H)，7.62(dd，J＝5.94，0.88Hz，1H)，11.19(d，J＝5.05Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 175.07[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901602
实施例204：二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-5-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和5-氨基-3-甲基喹啉-4(1H)-酮(化合物203A)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.20(t，J＝7.07Hz，6H)，1.98(s，3H)，3.24-3.31(m，2H)，3.75(s，3H)，3.94-4.04(m，4H)，6.90(d，J＝7.83Hz，1H)，7.04(s，1H)，7.08(d，J＝8.34Hz，1H)，7.34-7.44(m，1H)，7.50(d，J＝7.83Hz，1H)，7.94(s，1H)，8.37(s，1H)，8.48(br.s.，1H)，8.91(s，1H)，11.86(br.s.，1H)，14.41(s，1H)。MS(ES+)：m/z 592.14[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901611
实施例205：二乙基[4-({4-[(7-甲氧基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-4-甲氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205A).MS(ES+)：m/z 581.20(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.08min(UPLC，纯度)。化合物205A：7-氨基-4-甲氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
Pd/C(7.67mg，0.0720mmol)加到甲醇(2mL)和EtOAc(2mL)中的4-甲氧基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮的溶液，然后该混合物氢化搅拌过夜。过滤该溶液，且标题化合物不进一步纯化。MS(ES+)：m/z 193.14(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.65min(UPLC，分析级)。
化合物205B：4-甲氧基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DMF(2mL，20mmol)中的4-羟基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205C，50.0mg，0.240mmol)、碳酸钾(49.8mg，0.360mmol)的混合物用甲基碘(22.4μL，0.360mmol)处理，和使其在室温搅拌过夜。该反应物倒入EtOAc中，和用水和盐水洗涤，并且粗物质使用ISCO Combiflash单元(甲醇in DCM：0-1％)进行纯化，以得到为固体的标题产物(27mg，50％收率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝3.17(s，3H)，4.02(s，3H)，4.44(s，2H)，7.27(d，J＝8.8Hz，1H)，7.94(d，J＝8.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 223.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.76min(UPLC，分析级)。
化合物205C：4-羟基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
三氟(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)硼酸钾(化合物205D，100.0mg，0.3355mmol)用H2O(30mL，270mmol)中的9M过氧化氢和H2O(6mL，12mmol)中2.0M的氢氧化钠以3部分经7天(在室温)处理。该混合物用EtOAc和水稀释，在其后，酸化水层至pH 1-2。产物沉淀，然后通过过滤收集。浓缩EtOAc层，且发现也含有产物。合并的产物不进一步纯化。MS(ES+)：m/z 209.12(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.61min(UPLC，分析级)。
化合物205D：三氟(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)硼酸钾
水中的氟化氢钾(4.5M，9.0mL，40.5mmol)加入到甲醇(25mL)中的2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(化合物205E，2.0g，6.29mmol)的溶液。得到的混合物在室温搅拌2h。通过过滤收集形成的固体，用热丙酮(25mL)洗涤，和在空气中干燥提供1.75g的标题化合物(收率：94％)。1H NMR(D2O，300MHz)：δ＝2.94(s，3H)，4.30(s，2H)，7.50(m，2H)。化合物205E：2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
Pd2(dba)3(2.02g，2.21mmol)和三环己基膦(2.48g，8.85mmol)在二氧杂环乙烷(375mL)的氮气脱气的溶液中搅拌30分钟。向该溶液中加入4-溴-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(20.0g，73.8mmol)、双戊酰二硼(24.4g，96mmol)和KOAc(11.58g，118.1mmol)，然后该混合物加热回流6h。在冷却至室温后，通过过滤除去沉淀物。蒸发滤液至干燥，然后用二异丙基醚(100mL)研制残留物，和过滤给出为黄色固体的2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(16.0g，68％)。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.34(s，12H)，3.24(s，3H)，4.58(s，2H)，7.68(d，J＝7.5Hz，1H)，8.06(d，J＝7.5Hz，1H)。
Figure BPA00001479300901621
实施例206：二乙基[4-({4-[(7-乙氧基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-4-乙氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物206A)进行制备。MS(ES+)：m/z 594.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.14min(UPLC，纯度)。
化合物206A：7-氨基-4-乙氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据7-氨基-4-甲氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205A)的步骤、使用4-乙氧基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物206B)进行制备。MS(ES+)：m/z 207.16(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.78min(UPLC，分析级)。
化合物206B：4-乙氧基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据4-甲氧基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205B)的步骤、使用4-羟基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和碘乙烷(化合物205C，28.8uL，0.360mmol)进行制备。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.47(t，J＝7.1Hz，3H)，3.17(s，3H)，4.27(q，J＝6.9Hz，2H)，4.43(s，2H)，7.23(d，J＝8.8Hz，1H)，7.90(d，J＝8.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 251.21(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.06min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300901631
实施例207：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物207A)进行制备。MS(ES+)：m/z 608.27(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.18min(UPLC，纯度)。
化合物207A：7-氨基-2-甲基-4-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据7-氨基-4-甲氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205A)的步骤、使用2-甲基-7-硝基-4-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物207B)进行制备。MS(ES+)：m/z 222.21(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.93min(UPLC，分析级)。
化合物207B：2-甲基-7-硝基-4-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据4-甲氧基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205B)的步骤、使用4-羟基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和4-羟基-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205C，50.0mg，0.240mmol)和2-碘丙烷进行制备。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1.40(d，J＝6.1Hz，6H)，3.15(s，3H)，4.37(s，2H)，4.80-4.87(m，1H)，7.22(d，J＝8.8Hz，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 237.18(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.94min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300901632
实施例208：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-7-(吗啉-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-(吗啉-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物208A)进行制备。MS(ES+)：m/z 636.24(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.05min(UPLC，纯度)。
化合物208A：7-氨基-2-甲基-4-(吗啉-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据7-氨基-4-甲氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205A)的步骤、使用2-甲基-4-(吗啉-4-基)-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物208B)进行制备。MS(ES+)：m/z 248.23(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.62min(UPLC，分析级)。
化合物208B：2-甲基-4-(吗啉-4-基)-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DMF(4mL)中的4-溴-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(100.0mg，0.3689mmol)、吗啉(321.7uL，3.689mmol)、DIPEA(642.6uL，3.689mmol)的混合物在氩气下在密封管中混合，并在90℃加热4天。粗物质通过MDP直接纯化，在碱性条件下期望的产物。MS(ES+)：m/z 278.24(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.81min(UPLC，分析级)。
实施例209：二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(7-甲氧基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-甲氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物205A)进行制备。MS(ES+)：m/z 610.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.10min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901651
实施例210：二乙基[4-({4-[(7-乙氧基-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-乙氧基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物206A)进行制备。MS(ES+)：m/z 624.28(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.16min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901652
实施例211：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯。标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-(丙-2-基氧代)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物207A)进行制备。MS(ES+)：m/z 638.26(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.21min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901653
实施例212：二乙基(4-{[4-{[7-(1，1-二氧化硫代吗啉-4-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯以及硫代吗啉-1，1-氧化物和用K3PO4替代Cs2CO3进行制备。MS(ES+)：m/z683.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.98min(UPLC，纯度).
实施例215：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-7-(吗啉-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-(吗啉-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物208A)进行制备。MS(ES+)：m/z 665.33(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.07min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901662
实施例216：2-甲氧基乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)甲基亚膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用2-甲氧基乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯和2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A)进行制备。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.33(d，J＝14.15Hz，3H)，2.76(d，J＝4.55Hz，3H)，3.21(d，J＝17.94Hz，2H)，3.26(s，3H)，3.48-3.52(m，2H)，3.77(s，3H)，4.03(ddt，J＝6.19，4.48，3.13，3.13Hz，2H)，6.81-6.87(m，1H)，7.02(s，1H)，7.07(t，J＝7.45Hz，1H)，7.38(t，J＝8.08Hz，1H)，7.51(d，J＝7.33Hz，1H)，7.64-7.70(m，1H)，8.37(s，1H)，8.72(d，J＝4.29Hz，1H)，8.79(br.s.，1H)，11.43(s，1H)。MS(ES+)：m/z 568.15[MH+](TOF，极性).
化合物216A：2-甲氧基乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)甲基亚膦酸酯
标题化合物根据2-氨基-5-氟-N-甲基苯甲酰胺(化合物102A)的步骤、使用2-甲氧基乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基亚膦酸酯(化合物216B)进行制备。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.39(d，J＝13.64Hz，3H)，3.10(d，J＝17.43Hz，2H)，3.39(s，3H)，3.54-3.59(m，2H)，3.87(s，3H)，4.09-4.14(m，2H)，6.66-6.71(m，1H)，6.76-6.79(m，1H)，6.80(t，J＝1.89Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 274.11[MH+](TOF，极性)。
化合物216B：2-甲氧基乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基亚膦酸酯
DMF(3.0mL)中的(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基次膦酸(化合物216C：0.250g，1.02mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(0.287mL，3.06mmol)的混合物加入碳酸钾(0.169g，1.22mmol)和n-Bu4NI(0.188g，0.510mmol)。使该反应混合物在50℃加热搅拌16小时。该反应混合物用水(10mL)淬灭和用EtOAc(15mL)萃取。有机层用水(10mL)洗涤，用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩以产生黄色油。该粗物质经过在使用1∶1EtOAc-DCM/甲醇(100∶0→90∶10)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化。合并含有产物的部份，和在减压下浓缩产生黄色油，0.140g(45％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.47(d，J＝13.89Hz，3H)，3.24(dd，J＝17.43，3.79Hz，2H)，3.39(s，3H)，3.51-3.62(m，2H)，3.98(s，3H)，4.14(ddd，J＝8.27，4.42，4.23Hz，2H)，6.93(dt，J＝8.34，1.89Hz，1H)，7.12(t，J＝1.77Hz，1H)，7.85(dd，J＝8.21，0.63Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 304.08[MH+](TOF，极性)。
化合物216C：(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基次膦酸
37％HCl(5.00mL)中的乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基亚膦酸酯(化合物216D，0.500g，1.83mmol)的溶液在100℃搅拌6小时。该反应混合物在减压下浓缩，产生为黄色泡沫的期望产物457.2mg(102％收率)。该物质不进行任何纯化在连续反应中使用。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.41(d，J＝13.89Hz，3H)，3.13(d，J＝16.42Hz，2H)，3.97(s，3H)，6.89(d，J＝8.08Hz，1H)，7.02(s，1H)，7.82(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 246.05[MH+](TOF，极性)。
化合物216D：乙基(3-甲氧基-4-硝基苄基)甲基亚膦酸酯
4-(溴甲基)-2-甲氧基-1-硝基苯(1.50g，6.10mmol)和二乙氧基甲膦(1.00g，7.34mmol)的混合物在密封管中、100℃加热16h。该反应混合物在减压下浓缩产生暗黄色油。该粗物质通过使用1∶1DCM-EtOAc/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的ISCOcombi-flash Rf系统上的硅胶色谱进行纯化。合并含有产物的部份和在减压下浓缩产生黄色固体0.622g(37％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.32(t，J＝7.07Hz，3H)，1.45(d，J＝13.89Hz，3H)，3.20(dd，J＝17.31，5.94Hz，2H)，3.98(s，3H)，4.01-4.12(m，2H)，6.92(ddd，J＝8.21，2.02，1.89Hz，1H)，7.09(t，J＝1.89Hz，1H)，7.85(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 274.07[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901681
实施例217：(A)双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和化合物218：(B)双(2-甲氧基乙基)(4-{[2-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据化合物102的步骤、使用双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(实施例217A/B，107mg，0.208mmol)和7-氨基-4-(4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(73.2mg，0.281mmol)进行制备。该反应混合物在真空中浓缩，和在使用0-15％7N NH3(甲醇)∶EtOAc洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统上纯化。收集的物质仍然不是纯的，和通过MDP(在酸性条件下；甲酸)再次纯化，其成功地分离两个区域异构体。
实施例217(A)是由LCMS(tR＝1.36min)洗脱的第一个，和分离出作为白色固体(49.5mg，32％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.56(s，1H)，9.05(br s，1H)，8.37(s，1H)，8.27-8.43(m，1H)，7.44(br s，1H)，7.30(d，J＝8.6Hz，1H)，7.06(s，1H)，6.92(d，J＝7.8Hz，1H)，4.49(s，2H)，4.01-4.09(m，4H)，3.75(s，3H)，3.46-3.49(m，4H)，3.33(d，J＝21.7Hz，2H)，3.24(s，6H)，3.06(s，3H)，2.38-2.47(m，1H)，1.92(dd，J＝12.0，2.1Hz，2H)，1.66-1.76(m，2H)，1.60(q，J＝11.8Hz，2H)，1.21-1.34(m，2H)。MS(ES+)：m/z 738.22(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.36min(TOF，极性_3min)。[1H NMR中次甲基环己醇移动和醇质子与H2O移动(或DMSO)重叠]。
化合物218(B)是由LCMS(tR＝1.43min)洗脱的第二个，和分离作为非纯白色固体(41.0mg，26％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(s，1H)，8.47(br s，1H)，8.37(s，1H)，7.78(br s，1H)，7.39(br s，1H)，7.25(d，J＝8.3Hz，1H)，7.12(s，1H)，6.98(dt，J＝8.1，2.0Hz，1H)，4.58(d，J＝3.8Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.01-4.13(m，4H)，3.72(s，3H)，3.47-3.51(m，4H)，3.41(d，J＝22.2Hz，2H)，3.25(s，6H)，3.04(s，3H)，2.35-2.46(m，1H)，1.91(d，J＝9.3Hz，2H)，1.52-1.74(m，4H)，1.17-1.33(m，2H)。MS(ES+)：m/z738.28(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.43min(TOF，极性_3min)。[1H NMR中次甲基环己醇与DMSO和水移动重叠]。
实施例217A和217B：双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯[A]和双(2-甲氧基乙基)(4-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯[B]
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用双(2-甲氧基乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物217C)和2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶进行制备。[A]和[B]在随后的步骤之上作为混合物进行。
化合物217C：双(2-甲氧基乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯
甲醇(100mL)中的双(2-甲氧基乙基)(4-硝基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物217D，4.5g，12.4mmol)和5％Pd/C(2g，湿的)的混合物在50psi氢压下、在50℃氢化18h。过滤该反应混合物，和浓缩该滤液，给出期望产物(4g，97％)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝3.11(d，J＝21.2Hz，2H)，3.34(s，6H)，3.49(m，4H)，3.81(s，3H)，4.05(m，4H)，6.12(d，J＝8.4Hz，2H)，6.20(dd，J＝8.4Hz，1H)，6.78(s，1H)。
化合物217D：双(2-甲氧基乙基)(3-甲氧基-4-硝基苄基)膦酸酯：在0℃，THF(100mL)中的3-甲氧基-4-硝基苄基二氯膦酰(化合物114C，20g)的溶液逐滴加入到2-甲氧基乙醇(6g，78.9mmol)和TEA(14g，120mmol)的溶液。该反应混合物升温至室温，和在70℃搅拌18h。除去溶剂，和残留物通过柱色谱纯化给出4.5g期望的产物(收率：44％)。
Figure BPA00001479300901691
实施例219：(A)双(2-甲氧基乙基)[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和
化合物220：(B)双(2-甲氧基乙基)[3-甲氧基-4-({2-[(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据化合物102的步骤、使用双(2-甲氧基乙基)(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(217A/B，107mg，0.208mmol)和7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(56.2mg，0.346mmol)进行制备。真空中浓缩该反应产物，和首先在0-15％7N NH3(甲醇)∶EtOAc洗脱、然后MDP(在酸性条件下；甲酸)的Teledyne/ISCO Combiflash系统上纯化，其成功地分离两个区域异构体。实施例219(A)是第一个被洗脱的(LCMS(tR＝1.39min)。提供白色固体(48.4mg，36％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.57(s，1H)，9.13(s，1H)，8.39(s，1H)，8.33(br s，1H)，7.41(dd，J＝6.8，6.3Hz，2H)，7.15(d，J＝7.3Hz，1H)，7.06(s，1H)，6.91(d，J＝7.8Hz，1H)，4.45(s，2H)，3.99-4.11(m，4H)，3.74(s，3H)，3.44-3.52(m，4H)，3.33(d，J＝21.5Hz，2H)，3.25(s，6H)，3.06(s，3H)。MS(ES+)：m/z 640.15(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.39min(TOF，极性_3min)。化合物220(B)是LCMS(tR＝1.49min)第二个洗脱的，提供非纯白色固体(43.4mg，32％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.21(s，1H)，8.53(br s，1H)，8.39(s，1H)，7.84(br s，1H)，7.39(d，J＝5.6Hz，1H)，7.31(t，J＝7.8Hz，1H)，7.12(t，J＝1.9Hz，1H)，7.04(d，J＝7.6Hz，1H)，6.97(dt，J＝7.9，2.1Hz，1H)，4.41(s，2H)，4.02-4.10(m，4H)，3.71(s，3H)，3.45-3.52(m，4H)，3.38(d，J＝22.0Hz，2H)，3.25(s，6H)，3.04(s，3H)。MS(ES+)：m/z 640.16(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.49min(TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300901701
实施例221：双(2-甲氧基乙基)(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102、使用2-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-N-甲基苯甲酰胺(化合物104A，50.0mg，0.15mmol)和双(2-甲氧基乙基)(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(化合物217C，55.4mg，0.17mmol)进行制备。在纯化后，得到58.1mg(61％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.24-8.35(m，2H)，7.95(d，J＝8.08Hz，1H)，7.62(dd，J＝7.83，1.52Hz，1H)，7.46(ddd，J＝8.53，7.39，1.52Hz，1H)，7.16(td，J＝7.58，1.01Hz，1H)，6.96(t，J＝2.02Hz，1H)，6.72-6.80(m，1H)，4.05-4.16(m，4H)，3.87(s，3H)，3.50-3.57(m，4H)，3.33(s，6H)，3.20-3.29(m，2H)，2.89(s，3H).MS(ES+)：m/z 628.16/629.20(100/98)[MH+].HPLC：tR＝1.39min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901702
实施例223：二乙基(4-{[4-{[7-(4-乙酰哌嗪-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和1-乙酰哌嗪进行制备。MS(ES+)：m/z 706.38(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.99min(UPLC，纯度).
Figure BPA00001479300901711
实施例224：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和N-甲基哌嗪进行制备。MS(ES+)：m/z 678.34(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.71min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901712
实施例225：叔丁基[4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-1-基]乙酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和哌嗪-1-乙酸叔丁基酯进行制备。MS(ES+)：m/z 748.41(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.85min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901721
实施例226：叔丁基[4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-1-基]乙酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和哌嗪-1-乙酸叔丁基酯进行制备。MS(ES+)：m/z 778.42(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.86min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901722
实施例227：二乙基(4-{[4-{[7-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和3-羟基氮杂环丁烷进行制备。MS(ES+)：m/z 621.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.89min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901731
实施例228：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-({2-甲基-3-氧代-7-[反-4-(膦酰基氧)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
TFA(1mL)加入到THF(2mL)中的二乙基[4-({4-[(7-{反-4-[(二叔丁基氧磷酰基)氧代]环己基}-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯(化合物228A，38.5mg，0.044mmol)的溶液。该反应混合物在室温搅拌1h。然后在真空中除去溶剂，和残留物通过MDP(甲酸条件)纯化得到31.9mg期望的产物(收率：95％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.19(t，J＝7.6Hz，6H)，1.41-1.46(m，2H)，1.66-1.76(m，4H)，2.12-2.15(m，2H)，2.49(m，1H)，3.04(s，3H)，3.29(d，J＝21.20Hz，2H)，3.73(s，3H)，3.96-4.03(m，4H)，4.12(m，1H)，4.47(s，2H)，6.89(d，J＝7.6Hz，1H)，7.05(s，1H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H)，7.43(s，br，1H)，8.36(d，J＝0.8Hz，1H)，8.98(s，1H)，10.54(s，1H)。MS(ES+)：m/z758.21[MH+]。HPLC：tR＝1.27min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物228A：二乙基[4-({4-[(7-{反-4-[(二-叔丁氧磷酰基)氧代]环己基}-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
DCM(5mL)中的二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(100.0mg，0.15mmol)、二(叔丁基)N，N-二乙基氨基磷酸酯(367.9mg，1.48mmol)和1H-四唑(113.7mg，1.62mmol)的溶液在室温搅拌18h。该混合物然后冷却至-78℃，和加入mCPBA(43.65mg，0.18mmol)。使得到的混合物在1个小时期间中升温至室温，并另外搅拌14h。该混合物在真空中浓缩，和残留物通过硅胶色谱(DCM中的5％的甲醇中的7N氨)纯化，提供38.5mg期望的产物。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.27(t，J＝7.2Hz，6H)，1.51(s，18H)，1.60-1.71(m，4H)，1.90-1.93(m，2H)，2.30-2.32(m，2H)，2.52(dt，J＝2.4，7.2Hz，1H)，3.18(d，J＝21.60Hz，2H)，3.22(s，3H)，3.93(s，3H)，4.00-4.09(m，4H)，4.38(s，2H)，6.88(dt，J＝2.0，8.4Hz，1H)，6.95(t，J＝2.0Hz，1H)，7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.65(s，1H)，8.28(d，J＝7.6Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.64(d，J＝8.8Hz，1H)，10.51(s，1H)。MS(ES+)：m/z 870.39[MH+]。HPLC：tR＝4.67min(ZQ3，极性_5min)。
实施例229：二乙基(4-{[4-{[7-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例199的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和3-羟基氮杂环丁烷进行制备。MS(ES+)：m/z 651.24(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.91min(UPLC，纯度).
化合物230：(以上A)4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-7-{[4-({4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮。
实施例230：(以上B)4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-7-{[2-({4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题化合物根据化合物102的步骤、使用4-氯-N-{4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(化合物230A，22.8mg，0.0559mmol)和7-氨基-4-(4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(22.0mg，0.0845mmol)进行制备。粗物质使用0-15％7N NH3(甲醇)∶EtOAc洗脱的Teledyne/ISCOCombiflash系统进行纯化。收集的物质是区域异构体的混合物，和通过超临界流体色谱法(SFC)再次纯化。
化合物230(A)首先洗脱，作为更大非极性化合物(tR＝1.29min)和分离作为白色固体9.4mg(26％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.12(br s，1H)，8.93(br s，1H)，8.31(br s，1H)，7.97(br s，1H)，7.34(br s，4H)，7.20(d，J＝8.3Hz，1H)，4.48-4.60(m，3H)，4.44(s，2H)，4.29-4.41(m，2H)，3.42-3.54(m，3H)，3.04(s，3H)，2.34-2.44(m，1H)，2.01-2.14(m，1H)，1.87-1.96(m，J＝9.6Hz，2H)，1.82(dd，J＝14.5，2.4Hz，1H)，1.51-1.70(m，4H)，1.19-1.32(m，2H)。MS(ES+)：m/z 632.18(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.29min(TOF，极性_3min)。
实施例230(B)在后洗脱，作为更大极性的化合物(tR＝1.27min)和分离11.7mg白色固体(33％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.57(br s，1H)，9.87(br s，1H)，8.55(br s，1H)，8.45(s，1H)，7.55(d，J＝2.3Hz，2H)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H)，7.28(d，J＝7.1Hz，2H)，4.56-4.86(m，1H)，4.41-4.56(m，4H)，4.27-4.40(m，2H)，3.46-3.55(m，1H)，3.36-3.44(m，2H)，3.08(s，3H)，2.07(ddd，J＝14.6，10.5，10.3Hz，1H)，1.93(d，J＝10.1Hz，2H)，1.67-1.84(m，3H)，1.51-1.64(m，2H)，1.21-1.36(m，2H)。MS(ES+)：m/z632.18(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.27min(TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300901751
化合物230A：4-氯-N-{4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺和
化合物230B：2-氯-N-{4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺[B]
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯胺(化合物230C)和2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶进行制备。
化合物230C：4-[(2-氧桥-1，3，2-二氧磷杂环己烷-2-基)甲基]苯胺
10％Pd/C(10mg)加入到无水THF中的2-(4-硝基苄基)-1，3，2-二氧磷杂环己烷2-氧化物(化合物230D，70mg，0.27mmol)的溶液。得到的混合物在50psi H2气压下在50℃加热6h。滤去催化剂，和浓缩该滤液给出期望产物(50mg，收率：80％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.72-1.76(m，1H)，1.98-2.02(m，1H)，3.19(d，J＝20.4Hz，2H)，4.28-4.40(m，4H)，6.68(d，J＝8.0Hz，2H)，7.03(d，J＝8.4Hz，2H)。化合物230D：2-(4-硝基苄基)-1，3，2-二氧磷杂环己烷2-氧化物
以上粗(4-硝基苄基)二氯膦酰(化合物230E)溶解在无水THF(20mL)中。TEA(840mg，7.5mmol)和1，3-丙-二醇(190mg，2.5mmol)在0℃加入到该溶液。得到的混合物在室温搅拌过夜，浓缩，和通过柱色谱进行纯化给出目标产物(70mg)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝2.85(d，J＝20.0Hz，2H)，3.28-3.30(m，2H)，3.55-3.58(m，2H)，3.75-7.78(m，2H)，6.64(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(d，J＝8.4Hz，2H)。
化合物230E：(4-硝基苄基)二氯膦酰
亚硫酰氯(20mL)中的(4-硝基苄基)膦酸(500mg，2.3mmol)的溶液回流过夜。在减压下除去过量的亚硫酰氯留下残留物，其不纯化在下个步骤中使用。
Figure BPA00001479300901761
实施例231：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(30.0mg，0.0661mmol)和3-氨基-N-甲基吡啶-2-酰胺(化合物231C，15.0mg，0.0992mmol)吸收在TFE(2.7mL，37mmol)中和用TFA(15.3uL，0.198mmol)处理。该混合物在CEM上100℃照射120分钟。然后该混合物倒入水中，和用EtOAc萃取两次经Na2SO4干燥合并的有机层，浓缩，和在ISCO CombiFlash系统(用0-4％甲醇/DCM洗脱)上纯化以分离，在浓缩相关部份和在真空中干燥之后，给出为白色固体的期望产物20.8mg。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.19(t，J＝7.07Hz，6H)，2.81(d，J＝4.80Hz，3H)，3.28(d，J＝20.50Hz，2H)，3.74(s，3H)，3.94-4.04(m，4H)，6.90(dt，J＝8.15，1.99Hz，1H)，7.05(s，1H)，7.33-7.51(m，2H)，8.21(d，J＝3.54Hz，1H)，8.41(s，1H)，9.08(br.s.，1H)，9.11(q，J＝4.21Hz，1H)，12.45(s，1H).MS(ES+)：m/z＝569.10(100)[M+1].HPLC：tR＝1.52min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物231A：3-氨基-N-甲基吡啶-2-酰胺
DMF(2.0mL，26mmol)中的3-氨基吡啶甲酸(0.3g，2mmol)的溶液冷却至0℃，用DIPEA(7.57mL，43.4mmol)、甲胺盐酸盐(1.47g，21.7mmol)和TBTU(0.837g，2.61mmol)处理。密封烧瓶，和使混合物到达室温搅拌3小时。该反应混合物倒入水中，和用EtOAc萃取三次。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤和浓缩为油，该油通过离子交换柱(SCX)。合并甲醇/NH3洗液，以分离108mg的棕色油，当静止时其结晶。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 2.76(d，J＝4.80Hz，3H)，6.81(br.s.，2H)，7.13(dd，J＝8.30，1.50Hz，1H)，7.22(dd，J＝8.30，4.30Hz，1H)，7.77(dd，J＝4.17，1.39Hz，1H)，8.52(d，J＝3.79Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝152.04[MH+]。
Figure BPA00001479300901771
实施例232：二乙基(4-{[4-{[6-(反-4-羟基环己基)-2-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例231的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(44.9mg，0.0989mmol)和3-氨基-6-(反-4-羟基环己基)-N-甲基吡啶-2-酰胺(实施例232A，37mg，0.15mmol)进行制备。该反应混合物倒入水中，和EtOAc萃取两次。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，浓缩，在ISCOCombiFlash系统(eluting with 0-4％甲醇/DCM)上纯化以分离，在浓缩和真空中干燥后，得到为白色固体的期望产物44.5mg。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 1.20(t，J＝7.07Hz，6H)，1.23-1.33(m，2H)，1.59-1.72(m，2H)，1.77-1.86(m，2H)，1.94(dd，J＝13.01，3.66Hz，2H)，2.56-2.67(m，1H)，2.83(d，J＝4.80Hz，3H)，3.28(d，J＝17.94Hz，2H)，3.45-3.55(m，1H)，3.74(s，3H)，3.94-4.04(m，4H)，4.57(d，J＝4.29Hz，1H)，6.89(ddd，J＝8.02，2.27，2.08Hz，1H)，7.05(s，1H)，7.35(d，J＝8.84Hz，1H)，7.41(br.s.，1H)，8.38(s，1H)，8.88-8.95(m，1H)，9.01(br.s.，1H)，12.33(s，1H).HRMS(ES+)：m/z＝667.2100(100)[M+1].HPLC：tR＝1.50min(ZQ2，极性_3min)。
化合物232A：3-氨基-6-(反-4-羟基环己基)-N-甲基吡啶-2-酰胺
甲醇(3mL，70mmol)中的3-氨基-N-甲基-6-(4-氧代环己基)吡啶-2-酰胺(化合物232B，53mg，0.21mmol)的溶液冷却至0℃和用硼氢化钠(8.1mg，0.21mmol)处理。该混合物在0℃搅拌20分钟。该反应用饱和NH4Cl(1mL)水溶液淬灭和浓缩。残留物在1mL H2O和EtOAc(30m)中吸收。分层。水层用盐饱和，并用～20mL的EtOAc再次洗涤。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤和浓缩。粗固体吸收在DCM中，用二氧化硅处理和浓缩。该二氧化硅装载在样品柱之中，并在ISCOCombiflash单元(0-7％甲醇/DCM)上纯化，以分离主要为反式异构体的混合物的产物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)
Figure BPA00001479300901772
1.37-1.57(m，4H)，1.92-2.01(m，2H)，2.07-2.16(m，2H)，2.55(tt，J＝11.87，3.54Hz，1H)，2.99(d，J＝5.05Hz，3H)，3.63-3.77(m，1H)，5.81(br.s.，2H)，6.95(d，J＝8.40Hz，1H)，7.04(d，J＝8.40Hz，1H)，8.11(br.s.，1H)。
化合物232B：3-氨基-N-甲基-6-(4-氧代环己基)吡啶-2-酰胺
AcOH(1.0mL，18mmol)和H2O(0.2mL，10mmol)中的3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-N-甲基吡啶-2-酰胺(化合物232C，0.160g，0.549mmol)的混合物升温至75℃持续2.5小时，在其之后，反应冷却和真空中浓缩。残留物吸收在水中，并用饱和K2CO3的水溶液碱化。该混合物用DCM萃取三次，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤和浓缩至褐色焦油。其吸收在DCM中，用二氧化硅处理和浓缩，并装载进入样品柱中。在ISCO Combiflash单元(用0-4％甲醇/DCM洗脱)上纯化后，该产物分离为53mg的白色晶体固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)
Figure BPA00001479300901781
1.97-2.13(m，4H)，2.26(dt，J＝14.40，2.02Hz，2H)，2.52-2.59(m，2H)，2.77(d，J＝5.05Hz，3H)，3.05(tdd，J＝11.43，3.79，3.66Hz，1H)，6.65(s，2H)，7.09(d，J＝8.30Hz，1H)，7.20(d，J＝8.30Hz，1H)，8.42(d，J＝4.80Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝247.87(90)[M+1].HPLC：tR＝2.95min(ZQ3，极性_5min)。
化合物232C：3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-N-甲基吡啶-2-酰胺
DMF(2.0mL，26mmol)中的3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)吡啶-2-羧酸(化合物232D，0.229g，0.823mmol)的溶液冷却至0℃，用DIPEA(2.87mL，16.4mmol)、甲胺盐酸盐(0.556g，8.23mmol)和TBTU(0.396g，1.23mmol)处理。密封烧瓶和使该混合物升温至室温，并搅拌过夜。真空中除去DMF和DIPEA，和残留物吸收在水中，用EtOAc和DCM萃取多次。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤和浓缩至黄色油。其在使用0-4％甲醇/DCM的ISCO Combiflash单元上纯化，分离145mg的油。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.51-1.87(m，8H)，2.54-2.64(m，1H)，2.79(d，J＝4.80Hz，3H)，3.88(s，4H)，6.62(s，2H)，7.05-7.10(m，1H)，7.11-7.16(m，1H)，8.29(d，J＝4.55Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝292.01(100)[M+1].HPLC：tR＝3.31min(ZQ3，极性_5min)。
化合物232D：3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)吡啶-2-羧酸
乙基3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)吡啶-2-羧酸酯(化合物232E，228mg，0.744mmol)吸收在THF(1.0mL)和甲醇(1.0mL，25mmol)中。其用H2O(1.0mL)中的氢氧化锂一水合物(156mg，3.72mmol)的溶液处理，并使其在室温搅拌4小时。在真空除去THF和用1N HCl逐滴处理，直到获得～5的pH。该水溶液用EtOAc(3X50mL)萃取，和用盐饱和并用～100mL DCM搅拌。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤和浓缩至粗黄色油，其不进一步纯化使用。MS(ES+)：m/z＝278.86[MH+].HPLC：tR＝2.39min(ZQ3，极性_5min).
化合物232E：乙基3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)吡啶-2-羧酸酯
10％Pd/C(345mg，0.0812mmol)加入到乙醇(5.0mL)中的乙基3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)吡啶-2-羧酸酯(化合物232F，247mg，0.812mmol)的溶液。含有该混合物的烧瓶进行3个循环的抽空，和N2换气。在第四个抽空后，烧瓶用H2换气，和使其搅拌24小时。反应混合物通过硅藻土过滤，滤饼用甲醇和DCM洗涤。浓缩合并的滤液至228mg的黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.30(t，J＝7.07Hz，3H)，1.59(dd，J＝12.51，5.43Hz，2H)，1.63-1.70(m，2H)，1.70-1.79(m，4H)，2.59(tt，J＝11.15，3.51Hz，1H)，3.87(s，4H)，4.28(q，J＝7.07Hz，2H)，6.50(s，2H)，7.17(s，2H).MS(ES+)：m/z＝306.91(100)[M+1].HPLC：tR＝3.19min(ZQ3，极性_5min)。
化合物232F：乙基3-氨基-6-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)吡啶-2-羧酸酯
(1)在35mL可密封的微波管中的3-氨基-6-溴吡啶-2-羧酸乙基酯(化合物232G，0.31g，1.3mmol)、1，4-二氧杂螺[4，5]癸-7-烯-8-硼酸频哪醇酯(0.406g，1.52mmol)和与二氯甲烷(1∶1)络合[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.10g，0.12mmol)的混合物吸收在1，4-二氧杂环乙烷(4.9mL)中。该混合物用H2O(1mL)中的碳酸钾(0.52g，3.8mmol)的溶液处理，用氮气冲洗，密封，和在微波反应器中100℃照射30分。该混合物倒入水中，和用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤和浓缩至棕色残留物。其吸收在DCM中，用二氧化硅处理和浓缩。得到的二氧化硅塞状物装载到样品柱上，和在ISCO Combiflash系统(0-50％EtOAc/庚烷)上纯化，以分离为油的247mg的期望产物，当静置时，其结晶。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 1.30(t，J＝7.20Hz，3H)，1.77(t，J＝6.44Hz，2H)，2.32-2.40(m，2H)，2.60(td，J＝6.44，1.52Hz，2H)，3.91(s，4H)，4.28(q，J＝7.07Hz，2H)，6.25(t，J＝4.04Hz，1H)，6.65(s，2H)，7.17(d，J＝8.84Hz，1H)，7.52(d，J＝8.84Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝305.12(100)[M+1].HPLC：tR＝3.50min(ZQ3，极性_5min)。
化合物232G：3-氨基-6-溴吡啶-2-羧酸乙基酯
H2O(30.0mL)中的乙基3-氨基吡啶甲酸酯(化合物232H，4.15g，25.0mmol)的悬浮液用足够的硫酸处理，以实现溶解(～1mL)。在该反应中将使用的总的10.7mL的HOAC中的2mL加入，以使得该混合物大部分均匀的。剧烈搅动的混合物然后用剩余的AcOH(10.7mL)中的溴(1.29mL，25.0mmol)的溶液处理。该Br2/HOAc溶液逐滴加入。当加入时，ppt形成。使其搅拌15分钟，而该反应混合物变为橙黄色悬浮液。过滤该混合物，以收集黄色ppt。滤液用饱和的K2CO3水溶液中和，形成更多ppt。也收集其，和黄色ppt合并。其在过滤器上干燥，和使O/N保留在黑暗中。分离5.15g的黄色固体。其在乙醇中重结晶，以分离4.236g的浅橙色晶体。浓缩母液，在DCM/甲醇中吸收，用二氧化硅处理，和重新浓缩。其装载到样品柱中，和在用0-5％甲醇/DCM洗脱的ISCO Combiflash系统上纯化。在那浓缩该部份之后，分离579mg的为黄色固体的期望产物。合并收率79％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 1.30(t，J＝7.07Hz，3H)，4.29(q，J＝7.07Hz，2H)，6.90(br.s.，2H)，7.21(d，J＝8.59Hz，1H)，7.44(d，J＝8.84Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝244.94(100)，246.92(100)[M+1，Br isotopes].HPLC：tR＝3.45min(ZQ3，极性_5min)。来自柱物质：579mg，HNMR纯化和晶体相同。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 1.30(t，J＝7.20Hz，3H)，4.29(q，J＝7.07Hz，2H)，6.90(s，2H)，7.21(d，J＝8.59Hz，1H)，7.44(d，J＝8.59Hz，1H)，合并这些产物。
化合物232H：乙基3-氨基吡啶甲酸酯
乙醇(70mL)中的3-氨基吡啶甲酸(5.00g，36.2mmol)和浓硫酸的(6.0mL，110mmol)溶液加热至100℃和搅拌5天。冷却的混合物浓缩至～20mL和倒在冰之上。该混合物用氨水溶液(NH4OH，浓)处理，直到pH＞7。其用100mL EtOAc萃取两次。碱化的水层用盐饱和，和用2X 100mL EtOAc再次萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤和浓缩至4.15g的非纯白色固体(69％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.30(t，J＝7.07Hz，3H)，4.27(q，J＝7.07Hz，2H)，6.67(br.s.，2H)，7.17-7.22(m，1H)，7.24-7.29(m，1H)，7.84(dd，J＝4.04，1.52Hz，1H).MS(ES+)：m/z＝167.06(100)[M+1].HPLC：tR＝2.76min(ZQ3，vv极性_5min)。
Figure BPA00001479300901801
实施例233：二乙基(4-{[4-({7-[4-(二甲基氨基)环己基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-[4-(二甲基氨基)环己基]-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物233A)进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝7.07Hz，6H)，1.75-1.85(m，2H)，1.85-2.02(m，4H)，2.39(d，J＝14.15Hz，2H)，2.77-2.88(m，1H)，3.04(s，6H)，3.18(s，3H)，3.38-3.50(m，3H)，3.86(s，3H)，4.07-4.20(m，4H)，4.51(s，2H)，7.01-7.07(m，1H)，7.12(t，J＝2.15Hz，1H)，7.62(d，J＝8.59Hz，2H)，8.32-8.42(m，2H)。MS(ES+)：m/z 705.26[MH+](TOF，极性)。
化合物233A：7-氨基-4-[4-(二甲基氨基)环己基]-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
1，2-二氯乙烷(2.0mL)中的7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(100.0mg，0.3871mmol)的溶液加入THF(0.2903mL，0.5807mmol)中的2.0M的二甲基胺和三乙酰氧基硼氢化钠(164.1mg，0.7743mmol)。该反应混合物在室温搅拌24小时。该反应混合物用NaHCO3(10mL)淬灭和用EtOAc(20mL)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩，产生淡黄色油。该粗物质通过使用甲醇中的DCM/7M NH3(100∶0→90∶10)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化。合并的含有产物的部份，和在减压下浓缩，以产生淡黄色固体64.7mg(58％收率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.53(d，J＝11.12Hz，4H)，1.91(d，J＝11.12Hz，2H)，2.08(d，J＝14.65Hz，2H)，2.31(br.s.，6H)，2.45(br.s.，1H)，2.48-2.58(m，1H)，3.14(s，3H)，4.30(s，2H)，5.07(br.s.，2H)，6.57(d，J＝8.34Hz，1H)，7.26(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 288.21[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901811
实施例236：二乙基[4-({4-[(7-{4-[乙基(甲基)氨基]环己基}-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
该化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-4-{4-[乙基(甲基)氨基]环己基}-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物236A)进行制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm1.28(t，J＝7.07Hz，6H)1.39(t，J＝7.33Hz，3H)1.70-1.86(m，4H)2.04(br.s.，2H)2.19(d，J＝7.83Hz，2H)2.71(br.s.，1H)2.86(s，3H)3.17-3.19(m，3H)3.33(s，1H)3.34-3.37(m，2H)3.39(s，1H)3.43-3.52(m，1H)3.89(s，3H)4.05-4.14(m，4H)4.55(s，2H)7.01(dt，J＝8.02，2.31Hz，1H)7.15(t，J＝2.02Hz，1H)7.42(d，J＝8.34Hz，1H)7.57(d，J＝8.08Hz，1H)8.36(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z719.25/720.29(100/20)[MH+].HPLC：tR＝1.17min(UPLC TOF：极性_3min)。
化合物236A：7-氨基-4-{4-[乙基(甲基)氨基]环己基}-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题产物根据化合物233A的步骤、使用7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和乙基-甲胺进行制备。不纯化在下个步骤中使用。
Figure BPA00001479300901812
实施例237：二乙基(4-{[4-({7-[顺-4-(4-乙酰哌嗪-1-基)环己基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和
实施例238二乙基(4-{[4-({7-[反-4-(4-乙酰哌嗪-1-基)环己基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和4-[4-(4-乙酰哌嗪-1-基)环己基]-7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物237A)进行制备。该反应混合物通过MDP纯化。实施例237是洗脱的第一个峰。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.28(t，J＝6.95Hz，6H)，1.50-1.73(m，7H)，2.02(s，2H)，2.12(s，3H)，2.50(br.s.，2H)，2.62(br.s.，3H)，3.13-3.21(m，2H)，3.22(s，3H)，3.42-3.75(m，4H)，3.93(s，3H)，3.99-4.10(m，4H)，4.38(s，2H)，6.90(dt，J＝8.08，2.15Hz，1H)，6.94(t，J＝2.02Hz，1H)，7.34(d，J＝8.84Hz，1H)，7.63(s，1H)，8.28(d，J＝7.58Hz，1H)，8.40(s，1H)，8.64(d，J＝8.59Hz，1H)，10.51(s，1H)。MS(ES+)：m/z 788.31[MH+](TOF，极性)。在其后洗脱的实施例238：1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.28(t，J＝7.07Hz，6H)，1.87(d，J＝4.04Hz，2H)，1.91-2.03(m，2H)，2.12-2.25(m，7H)，2.84(br.s.，2H)，3.21(s，3H)，3.23-3.33(m，4H)，3.86(s，3H)，3.93(br.s.，2H)，4.04(qdd，J＝7.31，7.31，7.31，7.14，1.77Hz，4H)，4.38(s，2H)，6.94-7.00(m，2H)，7.36(d，J＝7.83Hz，1H)，7.71(br.s.，1H)，8.23(br.s.，2H)，11.20(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 788.31[MH+](TOF，极性)。
化合物237A：4-[4-(4-乙酰哌嗪-1-基)环己基]-7-氨基-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题产物根据化合物233A的步骤、使用7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和1-乙酰哌嗪进行制备。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.80-1.98(m，3H)，2.01-2.14(m，6H)，2.25(d，J＝19.20Hz，1H)，2.42-2.62(m，5H)，3.12-3.17(m，3H)，3.45-3.70(m，4H)，4.28-4.33(m，2H)，5.10(br.s.，2H)，6.58(d，J＝8.08Hz，1H)，7.17(d，J＝8.34Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 371.26[MH+](TOF，极性)。
Figure BPA00001479300901821
实施例242：二乙基(4-{[5-氯-4-({2-甲基-3-氧代-7-[4-(吡咯烷-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题产物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯和7-氨基-2-甲基-4-[4-(吡咯烷-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物242A)进行制备。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.27(t，J＝6.95Hz，6H)，1.58-1.71(m，2H)，1.98-2.08(m，4H)，2.13(br.s.，4H)，2.29(d，J＝9.85Hz，3H)，2.57-2.67(m，2H)，2.93-3.06(m，2H)，3.15-3.22(m，2H)，3.23(s，3H)，3.93(s，3H)，3.99-4.10(m，4H)，4.37(s，2H)，6.87-6.92(m，1H)，6.93(t，J＝2.02Hz，1H)，7.30(d，J＝8.84Hz，1H)，7.68(s，1H)，8.25(d，J＝8.34Hz，1H)，8.39(s，2H)，8.63(d，J＝8.59Hz，1H)，10.53(s，1H).MS(ES+)：m/z 731.32[MH+]；HPLC：tR＝1.22min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物242A：7-氨基-2-甲基-4-[4-(吡咯烷-1-基)环己基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
标题产物根据化合物233A的步骤、使用7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和吡咯烷进行制备。在下个步骤中使用粗产物。
实施例243：二乙基(4-{[4-({7-[-3，4-二羟基环戊基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(43mg，0.095mmol)和7-氨基-4-(3，4-二羟基环戊基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮三氟乙酸盐(盐)(化合物243A，36mg，0.096mmol)进行制备。该反应混合物用EtOAc(30mL)萃取，用饱和的NaHCO3(2x 10mL)水溶液、盐水(10mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂，残留物通过硅胶色谱(ISCO Combi-flash系统，用0-10％甲醇∶DCM洗脱)纯化，给出为白色固体的标题化合物34mg，52％收率。1H NMR(CDCl3)：1.26(t，J＝7.1Hz，6H)，1.95-2.01(m，2H)，2.23-2.29(m，2H)，3.17(d，J＝21.7Hz，2H)，3.21(s，3H)，3.53(m，1H)，3.91(s，3H)，3.97-4.07(m，4H)，4.35(s，2H)，4.39-4.43(m，2H)，6.84(s，1H)，6.94(m，1H)，7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.67(s，1H)，8.26(d，J＝8.1Hz，1H)，8.38(s，1H)，8.54(d，J＝8.6Hz，1H)，10.31(s，1H)。MS(ES+)：m/z＝680.14[MH+]。HPLC：tR＝3.60min(ZQ3，极性_5min)。
化合物243A：7-氨基-4-(3，4-二羟基环戊基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮三氟乙酸盐
TFA(1mL)加入到DCM(2mL)中的叔丁基[7-(3，4-二羟基环戊基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯(化合物243B，36mg，0.099mmol)的溶液。得到的混合物在室温搅拌30分钟，然后在减压下蒸发，给出期望的产物。该TFA盐在下个步骤中直接使用。MS(ES+)：m/z＝263.09[MH+]。HPLC：tR＝0.78min(ZQ3，极性_5min)。
化合物243B：叔丁基[7-(3，4-二羟基环戊基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯
N-甲基吗啉N-氧化物(14mg，0.12mmol)和锇酸钾二水合物(0.37mg，0.0010mmol)加入到在t-BuOH(1mL)和H2O(1mL)中的叔丁基[7-(环戊-3-烯-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯(化合物243C：33mg，0.10mmol)的溶液。生成的混合物在室温搅拌过夜。该混合物用EtOAc(30mL)稀释，用盐水(10mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。在减压下蒸发溶剂，给出为白色固体的标题化合物36mg，99％收率。1H NMR(CDCl3)：1.52(s，9H)，1.90-1.94(m，2H)，2.14-2.19(m，2H)，2.34(br s，2H)，3.17(s，3H)，3.56(m，1H)，4.33(s，2H)，4.39(m，2H)，7.26(d，J＝8.6Hz，1H)，8.14(d，J＝8.6Hz，1H)，9.50(br s，1H)。MS(ES+)：m/z＝363.16[MH+]。HPLC：tR＝3.44min(ZQ3，极性_5min)。
化合物243C：叔丁基[7-(环戊-3-烯-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯
(亚苄基)双(三环己基膦)二氯化钌(IV)(21mg，0.025mmol)加入到DCM(10mL)中的叔丁基[7-(庚-1，6-二烯-4-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯(化合物243D，180mg，0.50mmol)的溶液。得到的混合物在室温氮气下搅拌。在减压下蒸发溶剂，和残留物通过硅胶色谱(ISCO Combi-flash系统，用10-30％EtOAc/庚烷洗脱)纯化，给出为白色固体的标题化合物150mg，90％收率。1HNMR(CDCl3)：1.54(s，9H)，2.43-2.48(m，2H)，2.81-2.86(m，2H)，3.18(s，3H)，3.45(m，1H)，4.32(s，2H)，5.80-5.84(m，2H)，7.35(d，J＝8.6Hz，1H)，8.12(d，J＝8.6Hz，1H)，9.53(br s，1H)。MS(ES+)：m/z＝329.13[MH+]。HPLC：tR＝4.65min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901841
化合物243D：叔丁基[7-(庚-1，6-二烯-4-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯
三溴化铟(85mg，0.24mmol)加入到DCM(30mL)中的1-{7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}丁-3-烯-1-基乙酸酯(化合物243E，895mg，2.39mmol)的溶液，然后加入DCM(0.5mL)中的烯丙基三甲基硅烷(550mg，4.8mmol)。得到的混合物在氮气下回流过夜。蒸发溶剂，和残留物通过硅胶色谱(ISCOCombi-flash系统，用10-50％EtOAc/庚烷)纯化，给出为白色固体的期望产物180mg。回收未反应的原料，并使用2.0相等烯丙基三甲基硅烷和0.2相等InBr3重新进行该反应。该混合物回流过夜。蒸发溶剂，和残留物通过硅胶色谱(ISCOCombi-flash系统，用10-50％EtOAc/庚烷洗脱)纯化，给出为白色固体的期望产物125mg。总的为305mg，36％收率。1H NMR(CDCl3)：1.53(s，9H)，2.34-2.47(m，4H)，2.67(m，1H)，3.16(s，3H)，4.27(s，2H)，4.92-4.99(m，4H)，5.55-5.64(m，2H)，7.29(d，J＝8.6Hz，1H)，8.16(d，J＝8.6Hz，1H)，9.52(br s，1H)。MS(ES+)：m/z＝379.13[MNa+]。HPLC：tR＝4.83min(ZQ3，极性_5min)。
化合物243E：1-{7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}叔-3-烯-1-基乙酸酯
烯丙基-MgBr(0.72mmol，0.72mL，Et2O中的1M溶液)在-78℃、在氮气下加入到THF(5mL)中的叔丁基(7-甲酰-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基甲酸酯(化合物243F，105mg，0.362mmol)的溶液。得到的混合物在-78℃搅拌1h，然后用NH4Cl(2mL)水溶液淬灭和升温至室温。该混合物用EtOAc(30mL)稀释，用盐水(2x 10mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。在减压下蒸发溶剂，给出期望的醇叔丁基[7-(1-羟基叔-3-烯-1-基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基甲酸酯。该粗醇在DCM(3mL)和吡啶(0.292mL，3.62mmol)中吸收，并用乙酸酐(73.8mg，0.723mmol)处理。该混合物在室温搅拌过夜。加入另一个5相等乙酸酐，和该混合物在室温搅拌另一天。该混合物用EtOAc(30mL)稀释，用1N HCl(2x 10mL)稀释，饱和NaHCO3水溶液(2x 10mL)，盐水(10mL)，和经无水硫酸钠干燥。该粗物质经硅胶色谱(ISCO Combi-flash系统，用20-50％EtOAc/庚烷洗脱)纯化，给出为白色固体的标题化合物。110mg，经过两个步骤81％收率。1H NMR(CDCl3)：1.52(s，9H)，2.06(s，3H)，2.57(m，1H)，2.71(m，1H)，3.17(s，3H)，4.35(d，J＝17.2Hz，1H)，4.54(d，J＝17.2Hz，1H)，5.05-5.11(m，2H)，5.62(m，1H)，5.72(t，J＝7.3Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，1H)，8.19(d，J＝8.6Hz，1H)，9.60(br s，1H)。MS(ES+)：m/z＝397.13[MNa+]。HPLC：tR＝4.40min(ZQ3，极性_5min)。
化合物243F：叔丁基(7-甲酰-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基甲酸酯
锇酸钾二水合物(10.6mg，0.0288mmol)加入t-BuOH(30mL)和H2O(30mL)中的叔丁基{2-甲基-3-氧代-7-[(E)-2-苯基乙烯基]-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基甲酸酯(化合物109D，1.05g，2.88mmol)、铁氰化钾(III)(2.84g，8.64mmol)、碳酸钾(1.19g，8.64mmol)、(DHQD)2PHAL(22.4mg，0.0288mmol)的混合物。得到的混合物在室温搅拌过夜。加入亚硫酸钠(2.18g，17.3mmol)，和该反应混合物在室温搅拌1h。该混合物用EtOAc(100mL)稀释，用盐水(30mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。在减压下蒸发提供为淡黄色固体的二醇，其不进一步纯化用于下个步骤。
偏高碘酸钠(0.924g，4.32mmol)加入到THF(20mL)和H2O(6mL)中的以上粗二醇的溶液。得到的混合物在室温搅拌4h。该混合物用EtOAc(100mL)稀释，用盐水(20mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。残留物通过硅胶色谱(ISCO Combi-flash系统，用20-50％EtOAc/庚烷洗脱)纯化，提供为白色固体的标题化合物795mg，经过2个步骤95％收率。1H NMR(CDCl3)：1.55(s，9H)，3.20(s，3H)，4.70(s，2H)，7.89(d，J＝8.6Hz，1H)，8.37(d，J＝8.6Hz，1H)，9.93(br s，1H)，9.99(s，1H)。MS(ES+)：m/z＝235.06[MH+-56]。HPLC：tR＝4.04min(ZQ3，极性_5min)。
Figure BPA00001479300901861
实施例244：乙基顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-乙氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-乙氧基苄基)膦酸酯(化合物244A 123.2mg，0.26mmol)和乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(100.0mg，0.32mmol)。该反应混合物在真空浓缩，和通过在ISCO CombiFlash
Figure BPA00001479300901862
Rf系统[用DCM中的0→5％甲醇洗脱]上纯化，以提供143.3mg(73％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.44(d，J＝10.36Hz，1H)，8.35(s，1H)，7.89(d，J＝8.34Hz，1H)，7.24(d，J＝8.59Hz，1H)，7.06(t，J＝2.15Hz，1H)，6.92(dt，J＝8.21，2.21Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.26(q，J＝7.16Hz，2H)，4.05-4.19(m，6H)，3.29(s，2H)，3.19(s，3H)，2.79(br.s.，1H)，2.63-2.73(m，1H)，2.30(d，J＝7.33Hz，2H)，1.76(d，J＝6.06Hz，6H)，1.42(t，J＝6.95Hz，3H)，1.27-1.38(m，9H).MS(ES+)：m/z 749.30/750.31(100/25)[MH+].HPLC：tR＝1.82min(微质量TOF：极性_3min)。
化合物244A：二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-乙氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用二乙基(4-氨基-3-乙氧基苄基)膦酸酯和2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶进行制备。该粗物质在ISCO CombiFlash
Figure BPA00001479300901863
Rf4X有机纯化系统[用1∶1EtOAc-DCM/甲醇(100∶0→95∶5)洗脱]上纯化，提供两个区域异构体的混合物。该产物通过MDP进一步纯化，提供514mg(30％)期望的产物区域异构体。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.62(s，1H)，8.02(d，J＝8.08Hz，1H)，7.03(t，J＝2.15Hz，1H)，6.92(td，J＝2.34，8.21Hz，1H)，4.04-4.22(m，6H)，3.28(s，1H)，3.23(s，1H)，1.41(t，J＝6.95Hz，3H)，1.27(t，J＝7.07Hz，7H).MS(ES+)：m/z 468.07/470.09(100/90)[MH+].HPLC：tR＝1.66min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901871
实施例245：乙基反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-乙氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-乙氧基苄基)膦酸酯(化合物244A，29.84mg，0.064mmol)和乙基反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(22.2mg，0.070mmol)进行制备。在逐步完成/色谱后，分离31.2mg(65％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.48(d，J＝7.83Hz，1H)，8.35(s，1H)，7.87(d，J＝8.08Hz，1H)，7.38(d，J＝8.84Hz，1H)，7.05(s，1H)，6.94(dt，J＝8.08，2.27Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.04-4.22(m，8H)，3.28(s，2H)，3.19(s，3H)，2.63(t，J＝11.62Hz，1H)，2.42-2.54(m，1H)，2.13(d，J＝14.15Hz，2H)，1.90-1.99(m，2H)，1.54-1.77(m，4H)，1.41(t，J＝6.95Hz，3H)，1.24-1.33(m，9H).MS(ES+)：m/z 748.26/749.29(100/98)[MH+].HPLC：tR＝1.80min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901872
实施例246：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
二氯甲烷(1mL)和三氟醋酸(1mL)加入到叔丁基4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯(化合物246A，180mg，0.25mmol)。该混合物在室温搅拌1小时，在其之后，浓缩该反应产物，和通过MDP纯化。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.27(t，J＝6.9Hz，6H)，2.77-2.85(m，2H)，3.19(s，3H)，3.29(d，J＝21.5Hz，2H)，3.50(t，J＝6.1Hz，2H)，3.88-3.94(m，2H)，4.01-4.17(m，4H)，4.59(s，2H)，6.02(dt，J＝3.3，1.7Hz，1H)，7.35(dd，J＝8.5，2.4Hz，2H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.57(d，J＝8.1Hz，2H)，8.35-8.43(m，1H)，8.72(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 631.23(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.68min(UPLC，纯度)。
化合物246A：叔丁基4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯
二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(200.0mg，0.3183mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酯(Tetrahedron Letters，2000，44，pp3705-3708，147.6mg，0.4774mmol)、碳酸钾(132.0mg，0.9548mmol)、与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(26.0mg，0.03183mmol)、1，4-二氧杂环乙烷(1.0mL)和水(0.25mL)进行混合，和在微波中100℃加热30分钟。该粗混合物用乙酸乙酯、水和盐水逐步完成。使用色谱纯化标题化合物(二氯甲烷中的0-3％甲醇)。MS(ES+)：m/z 731.33(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.53min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300901881
实施例247：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(哌啶-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
乙酸乙酯(2mL)中的二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例246，30.0mg，0.0476mmol)和二氧化铂(32.4mg，0.143mmol)的混合物在氢气的1个大气压下在室温搅拌过夜。该粗混合物通过MDP纯化，以得到作为三氟醋酸盐的标题化合物(2.7mg，9.0％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.26(t，J＝7.1Hz，6H)，1.95-2.14(m，4H)，2.99(td，J＝10.5，5.4Hz，1H)，3.20(s，5H)，3.29(d，J＝21.5Hz，2H)，3.55(d，J＝12.9Hz，2H)，3.97-4.13(m，4H)，4.55(s，2H)，7.34(dd，J＝8.6，2.5Hz，2H)，7.42(d，J＝8.8Hz，1H)，7.58(d，J＝8.1Hz，2H)，8.33-8.41(m，1H)，8.71(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 633.20(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.70min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901891
实施例248：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
二乙基(4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例246，20.0mg，0.0317mmol)、甲酸(5uL，0.1mmol)和甲醛(3.0uL，0.11mmol)在甲醇(1.0mL)中在室温混合30分钟。加入氰基硼氢化钠(20.0mg，0.318mmol)，并且该混合物在室温搅拌过夜。该粗混合物通过MDP纯化以得到作为三氟醋酸盐的标题化合物(7.3mg，35.7％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.27(t，J＝7.1Hz，6H)，2.87(br.s.，1H)，2.93(br.s.，1H)，3.05(s，3H)，3.19(s，3H)，3.29(d，J＝21.5Hz，2H)，3.36-3.46(m，1H)，3.73(br.s.，1H)，3.80-3.90(m，1H)，4.00-4.16(m，5H)，4.59(s，2H)，5.95-6.04(m，1H)，7.34(dd，J＝8.6，2.5Hz，2H)，7.50(d，J＝8.6Hz，1H)，7.58(d，J＝8.1Hz，2H)，8.36-8.43(m，1H)，8.75(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 645.23(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.69min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901892
实施例249：乙基氢(4-{[4-{[2-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例254的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯和N-甲基哌嗪进行制备。MS(ES+)：m/z 620.28(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.61min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901901
实施例250：二乙基{4-[(5-氯-4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}嘧啶-2-基)氨基]-3-甲氧基苄基}膦酸酯
TFE(4mL)中的二乙基(4-氨基-3-甲氧基苄基)膦酸酯(75.1mg，0.275mmol)和7-[(2，5-二氯嘧啶-4-基)氨基]-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(49.7mg，0.122mmol)的溶液加入TFA(65.3mg，0.573mmol)和在微波加热下照射[Biotage，105℃]2h。该反应混合物转移至圆底烧瓶和在真空中浓缩。该粗物质吸附在预填充固体装载柱(RediSepRf 2.5g)之上和使用Teledyne/ISCO系统(RediSepRf 24g silica)进行纯化，用40-100％EtOAc∶庚烷和然后用0-5％7NNH3(甲醇)∶EtOAc洗脱。使用质量定向的纯化(在酸性条件下；TFA)进行另外的纯化。合并的期望部份和在真空中浓缩。该物质通过SPE柱[Phenomenex Strata SCX，1克/6mL尺寸]，首先用甲醇和然后用1∶17N NH3(甲醇)∶甲醇混合物进行洗脱，其给出为黄色固体的标题物质29.6mg(37％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm8.52(d，J＝8.6Hz，1H)，8.07(s，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，7.38(d，J＝8.8Hz，1H)，7.02(t，J＝2.0Hz，1H)，6.93(dt，J＝8.3，2.3Hz，1H)，4.50(s，2H)，4.01-4.14(m，4H)，3.92(s，3H)，3.67(tt，J＝10.9，4.4Hz，1H)，3.28(d，J＝19.7Hz，2H)，3.17(s，3H)，2.57(tt，J＝12.0，3.3Hz，1H)，2.09(dd，J＝12.0，2.7Hz，2H)，1.89(d，J＝12.6Hz，2H)，1.67(dtd，J＝13.2，12.9，2.8Hz，2H)，1.38-1.52(m，2H)，1.29(t，J＝7.1Hz，6H)。[由于溶剂三个可交换的质子不存在。]MS(ES+)：m/z 644.21/646.23(100/81)[MH+]。HPLC：tR＝1.39min(TOF，极性_3min)。
化合物250A：7-[(2，5-二氯嘧啶-4-基)氨基]-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DMA(8mL)中的2，4，5-三氯嘧啶(550.5mg，3.001mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(166.6mg，0.6400mmol)的溶液加入DIPEA(1mL，6mmol)，和然后加热至100℃过夜。该反应混合物冷却至环境温度，用EtOAc稀释，和倒入水中。该物质用EtOAc萃取两次，然后合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤和在真空中浓缩。该粗物质吸附在预填充固体装载柱[RediSepRf 25克]之上，和使用Teledyne/ISCO系统[RediSepRf 12克二氧化硅，首先用0-100％EtOAc∶CH2Cl2和然后用0-5％甲醇∶CH2Cl2洗脱]进行纯化。期望的部份收集在一起，和在真空中浓缩，给出为棕色固体的标题物质173.0mg。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.07(s，1H)，8.52(s，1H)，8.43(d，J＝8.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.6Hz，1H)，4.60(d，J＝4.5Hz，1H)，4.57(s，2H)，3.48(ddd，J＝15.0，6.4，4.4Hz，1H)，3.10(s，3H)，1.93(br s，2H)，1.77(br d，J＝12.4Hz，2H)，1.55(dtd，J＝13.0，12.7，2.5Hz，2H)，1.22-1.37(m，3H)。MS(ES+)：m/z407.10/409.10(100/72)[MH+]。HPLC：tR＝1.40min(TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300901911
实施例251：[4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-1-基]乙酸
1，4-二氧杂环乙烷(20mL)中的二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(200.0mg，0.3183mmol)、哌嗪-1-乙酸叔丁基酯(382mg，1.91mmol)、双(二亚苄基丙酮)钯(58.29mg，0.06366mmol)、2，2′-双-二苯基苯膦基(phosphanyl)-[1，1′]联二萘基(118.9mg，0.1910mmol)、Cs2CO3(0.3111g，0.9548mmol)的混合物抽空，和用氮气换气三次。该混合物在100℃搅拌2天。该粗混合物通过MDP纯化。纯化的酯在二氯甲烷(1.2mL)和三氟醋酸(0.6mL)中吸收，然后该混合物在室温搅拌3小时。该粗产物通过MDP纯化以得到作为三氟醋酸盐的标题化合物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.27(t，J＝7.1Hz，6H)，3.19(s，3H)，3.29(d，J＝21.5Hz，2H)，3.41(br.s.，4H)，3.60(br.s.，4H)，4.07(qd，J＝7.2，6.9Hz，4H)，4.17(s，2H)，4.51(s，2H)，7.26(d，J＝9.1Hz，1H)，7.34(d，J＝6.6Hz，2H)，7.57(d，J＝7.8Hz，2H)，8.36(s，1H)，8.69(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 692.27(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.78min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901912
实施例252：[4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-1-基]乙酸(OSIP759590AE1/6822-29-2)
标题化合物根据实施例251的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和哌嗪-1-乙酸叔丁基酯进行制备。MS(ES+)：m/z 722.28(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.80min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901921
实施例253：二乙基(4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基哌啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例247的步骤、使用二乙基(4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯(实施例248，24mg，0.037mmol)进行制备。在纯化MDP后，标题化合物被分离为其三氟醋酸盐(12.0mg，50％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.26(t，J＝7.1Hz，6H)，2.01-2.19(m，4H)，2.96(s，4H)，3.11-3.25(m，5H)，3.29(d，J＝21.5Hz，2H)，3.62-3.72(m，2H)，3.98-4.13(m，4H)，4.55(s，2H)，7.34(dd，J＝8.5，2.4Hz，2H)，7.40(d，J＝8.8Hz，1H)，7.58(d，J＝8.3Hz，2H)，8.38(s，1H)，8.70(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 647.27(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.70min(UPLC，纯度)。
实施例254：乙基氢(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
1，4-二氧杂环乙烷(20mL)中的二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯(200.0mg，0.3038mmol)、1-甲基哌嗪(202uL，1.82mmol)，双(二亚苄基丙酮)钯(0)(34.9mg，0.0608mmol)、Cs2CO3(297mg，0.911mmol)的混合物抽空和用氮气换气三次，并使其在100℃搅拌过夜。该反应混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd，然后该粗物质通过MDP纯化。得到的物质二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯吸收在浓HCl(2.0mL)中，和在80℃加热2小时。该粗物质通过MDP再次纯化，以得到标题化合物(2.3mg，1.2％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.26(t，J＝6.9Hz，3H)，2.99(s，3H)，3.17(s，3H)，3.18(d，J＝20.7Hz，2H)，3.24-3.29(m，2H)，3.33-3.36(m，2H)，3.38-3.46(m，2H)，3.58(br.s.，2H)，3.88(s，3H)，4.03(quin，J＝7.1Hz，2H)，4.48(s，2H)，7.00(d，J＝8.1Hz，1H)，7.10(s，1H)，7.21(d，J＝8.8Hz，1H)，7.60(d，J＝7.6Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.39(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z650.29(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.63min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901931
实施例255：乙基氢{4-[7-({2-[(2-甲氧基苯基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基}氨基)-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]环己基}膦酸酯三氟乙酸盐
2-丁酮(2mL)中的二乙基{4-[7-({2-[(2-甲氧基苯基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基}氨基)-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]环己基}膦酸酯(实施例193，20.0mg，0.0309mmol)和碘化钠(27.5mg，0.183mmol)的溶液进行6h的微波加热[Biotage，120℃]。固体沉淀出，滤出该固体，和用冰冷的丙酮洗涤数次。该物质提交用于质量定向的纯化(在酸性条件下；TFA)。合并期望的部份和在真空中浓缩，给出为浅黄色固体的标题物质，作为顺式和反式异构体的混合物，8.4mg。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 8.35(br s，2H)，7.68-7.82(m，1H)，7.21-7.40(m，2H)，7.14(d，J＝8.1Hz，1H)，6.95-7.09(m，1H)，4.51(s，2H)，4.05-4.21(m，2H)，3.88(s，3H)，3.18(s，3H)，2.58-2.76(m，1H)，2.02-2.33(m，4H)，1.77-2.00(m，2H)，1.55-1.74(m，2H)，1.26-1.43(m，4H)。MS(ES+)：m/z 620.18(100)[MH+]。HPLC：tR＝1.51min(TOF，极性_3min)。**[NMR只是峰应该落入位置的粗估计；积分是偏离的，因为该物质是顺式和反式异构体的混合物。]
Figure BPA00001479300901941
实施例256：1-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌啶-4-羧酸
二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(30.0mg，0.0661mmol)、甲基1-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌啶-4-羧酸酯(化合物256A，20.0mg，0.0659mmol)、三氟醋酸(15.2uL，0.198mmol)和三氟乙醇(1.0mL，14mmol)的混合物在微波反应器中105℃照射30分钟。该粗物质浓缩至干燥，吸收在THF(0.1mL)和甲醇(0.1mL)中和用水(0.1mL)中的氢氧化锂单水合物(27.7mg，0.659mmol)的溶液处理。该混合物在室温搅拌过夜。该粗物质通过MDP纯化以得到为三氟醋酸盐的标题化合物(7.2mg，15.5％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.29(t，J＝7.1Hz，6H)，1.83-1.97(m，2H)，2.03-2.14(m，2H)，2.46-2.57(m，1H)，2.93(t，J＝10.5Hz，2H)，3.18(s，3H)，3.34(d，J+18.7Hz，2H)，3.40(d，J＝12.1Hz，2H)，3.90(s，3H)，4.10(quin，J＝7.3Hz，4H)，4.52(s，2H)，6.94-7.01(m，1H)，7.09-7.17(m，2H)，7.67(d，J＝8.1Hz，1H)，8.27-8.47(m，2H)。MS(ES+)：m/z707.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.01min(UPLC，纯度)。
化合物256A：甲基1-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌啶-4-羧酸酯
甲醇(1.0mL)中的甲基1-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌啶-4-羧酸酯(化合物256B，33mg，0.099mmol)和钯/C的混合物在氢气的1个大气压下室温搅拌过夜。该反应混合物通过硅藻土过滤，在真空中浓缩和不进一步纯化在下个步骤中使用(20mg，72％收率)。MS(ES+)：m/z 304.20(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.58min(UPLC，分析级)。
化合物256B：甲基1-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌啶-4-羧酸酯
4-溴-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(320.0mg，1.180mmol)、4-哌啶甲酸甲酯(1.595mL，11.80mmol)、DIPEA(2.056mL，11.80mmol)和DMF(5mL)进行混合和在密封管中90℃加热3天。该粗混合物通过在碱性条件下下MDP纯化得到标题化合物(33mg，8.4％收率)。MS(ES+)：m/z 334.16(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.80min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300901951
实施例257：顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-乙氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸
乙基顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-乙氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(实施例244，72.0mg，0.096mmol)吸收在THF(0.13mL，1.60mmol)和甲醇(0.13mL，3.20mmol)中。这个用H2O(0.13mL，7.2mmol)中的氢氧化锂单水合物(20.2mg，0.48mmol)的溶液处理，并使其在室温搅拌30小时。该反应物在真空中浓缩至固体和通过CombiFlash
Figure BPA00001479300901952
Rf4X有机纯化系统[24g RediSep
Figure BPA00001479300901953
正向GOLD二氧化硅闪柱，干燥装载，梯度洗脱：DCM中的0→5％甲醇]进行纯化，提供68.6mg(99％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.43(d，J＝9.09Hz，1H)，8.34(s，1H)，7.88(d，J＝8.34Hz，1H)，7.26(d，J＝8.84Hz，1H)，7.03(t，J＝2.02Hz，1H)，6.90(dt，J＝8.21，2.21Hz，1H)，4.51(s，2H)，4.03-4.17(m，6H)，3.27(s，2H)，3.18(s，3H)，2.74(br.s.，1H)，2.61-2.70(m，1H)，2.30(d，J＝12.38Hz，2H)，1.66-1.82(m，6H)，1.41(t，J＝6.95Hz，3H)，1.28(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z720.22/721.26(100/98)[MH+].HPLC：tR＝1.62min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901954
实施例258：反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-乙氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸。
乙基反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-乙氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(实施例245，23.4mg，0.031mmol)吸收在THF(0.042mL，0.52mmol)和甲醇(0.042mL，1.0mmol)中。这个用H2O(0.042mL，2.30mmol)中的氢氧化锂单水合物(6.57mg，0.16mmol)的水溶液处理和使其在室温搅拌30小时。该反应物在真空中浓缩为固体，和通过CombiFlash
Figure BPA00001479300901961
Rf 4X有机纯化系统[24g RediSep
Figure BPA00001479300901962
正向GOLD二氧化硅闪柱，干燥装载，梯度洗脱：DCM中的0→5％甲醇]纯化，以提供22.3mg(99％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 4.54(s，1H)，4.05-4.21(m，6H)，3.29(s，2H)，3.20(s，3H)，2.60-2.69(m，1H)，2.38-2.48(m，1H)，2.15(d，J＝11.87Hz，2H)，1.91-1.98(m，2H)，1.56-1.77(m，4H)，1.43(t，J＝6.95Hz，3H)，1.30(t，6H).MS(ES+)：m/z 720.22/721.25(100/98)[MH+].HPLC：tR＝1.54min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300901963
实施例259：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-(甲氧基氨基甲酰基)苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(0.060g，0.13mmol)和2-氨基-N-甲氧基苯甲酰胺(化合物259A，0.0242g，0.145mmol)进行制备。该粗物质在使用DCM中的0-5％甲醇作为洗脱液的ISCO Combiflash单元上纯化，以提供55.7mg的标题化合物(72％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.95(s，1H)，10.70(br.s.，1H)，8.79(br.s.，1H)，8.38(s，1H)，7.48-7.57(m，2H)，7.42(t，J＝7.71Hz，1H)，7.09(t，J＝7.33Hz，1H)，7.01(s，1H)，6.83(td，J＝2.02，8.08Hz，1H)，3.91-4.04(m，4H)，3.76(s，3H)，3.70(s，3H)，3.18-3.28(m，2H)，1.19(t，J＝7.07Hz，6H)；MS(ES+)：m/z：585.1915[MH+].HPLC：tR＝1.41min(UPLC TOF MS：极性_3min)。
化合物259A：2-氨基-N-甲氧基苯甲酰胺
乙醇(100mL)和H2O(10mL)中的靛红酸酐(5.0g，31mmol)和甲氧基胺盐盐酸盐(3.8g，46mmol)的混合物加入三乙胺(6.4mL，46mmol)和回流搅拌4h。该反应混合物在真空中浓缩，和在EtOAc和水之间分配和分离。水层用EtOAc(3X)萃取和合并的有机部分用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩。得到的固体用醚和己烷洗涤，以提供为棕色固体的4.5g，88％收率。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.40(br.s.，1H)，7.30(dd，J＝1.14，7.96Hz，1H)，7.09-7.19(m，1H)，6.70(dd，J＝0.76，8.34Hz，1H)，6.45-6.52(m，1H)，6.30(br.s.，2H)，3.67(s，3H)；MS(ES+)：m/z：167.0783[MH+].HPLC：tR＝0.83min(UPLC TOF：极性_3min)。
实施例260：二乙基[(5-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}吡啶-2-基)甲基]膦酸酯和
化合物261：二乙基[(5-{[2-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}吡啶-2-基)甲基]膦酸酯
Figure BPA00001479300901971
THF(0.5mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(59mg，0.27mmol)、二乙基[(5-氨基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯盐酸盐(化合物260A，76.6mg，0.27mmol)和DIPEA(0.14mL，0.82mmol)的溶液在60℃搅拌2h，在其之后，在真空中除去溶剂。残留物用7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(71.1mg，0.27mmol)、TFA(0.063mL，0.82mmol)、TFE(0.8mL)处理。得到的混合物在微波反应器中在100℃照射45分钟。溶剂在真空中除去，和残留物在DCM(5mL)中溶解和用饱和NaHCO3(aq.)(5mL)中和。分离有机相，用DCM(2×5mL)萃取水相。合并有机相，经MgSO4干燥，过滤，浓缩，和残留物通过制备TLC(DCM中的5％的甲醇中7N氨)纯化，给出1.3mg的二乙基[(5-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-吡啶-2-基)甲基]膦酸酯(实施例260)，作为TLC上更大极性点(收率：0.73％)，和3.8mg的二乙基[(5-{[2-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}吡啶-2-基)甲基]膦酸酯(化合物261)，作为TLC上较小极性点(收率：2.1％)。
对于实施例260：1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.29(t，J＝7.2Hz，6H)，1.46(m，2H)，1.60(m，2H)，1.89(m，2H)，2.15(m，2H)，2.49(m，1H)，3.22(s，3H)，3.44(d，J＝22.0Hz，2H)，3.75(m，1H)，4.06-4.14(m，4H)，4.39(s，2H)，7.17(s，1H)，7.34(d，J＝8.4Hz，1H)，7.40(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，8.17(d，J＝7.6Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.51(d，J＝7.6Hz，1H)，8.60(d，J＝2.4Hz，1H)，10.61(s，1H)。MS(ES+)：m/z649.17[MH+]。HPLC：tR＝3.18min(OpenLynx，极性_5min)。
对于化合物261：1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝6.8Hz，6H)，1.58-1.67(m，4H)，1.87(m，2H)，2.14(m，2H)，2.46(m，1H)，3.19(s，3H)，3.47(d，J＝22.0Hz，2H)，3.75(m，1H)，4.08-4.15(m，4H)，4.35(s，2H)，6.82(s，1H)，7.28(d，J＝8.8Hz，1H)，7.48(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，8.12(m，1H)，8.30(s，br，1H)，8.42(s，1H)，8.56(d，J＝2.4Hz，1H)，10.33(s，1H)。MS(ES+)：m/z 649.17[MH+]。HPLC：tR＝3.24min(OpenLynx，极性_5min)。
化合物260A：二乙基[(5-氨基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯盐酸盐
EtOAc中HCl溶液逐滴加入到干燥EtOAc(150mL)中的二乙基({5-[双(叔丁氧羰基)氨基]吡啶-2-基}甲基)膦酸酯(化合物260B，2.5g，5.6mmol)的溶液。该反应化合物在室温搅拌1h。通过过滤收集固体，干燥给出为白色固体的2.1g期望的产物。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.16(t，J＝7.2Hz，6H)，3.64(d，J＝22.0Hz2H)，3.97-4.04(m，4H)，7.50(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，7.64(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，7.95(d，J＝2.4Hz，1H).
化合物260B：二乙基({5-[双(叔丁氧羰基)氨基]吡啶-2-基}甲基)膦酸酯
三乙膦(6.0g，36mmol)加入到干燥二甲苯(100mL)中二-叔丁基[6-(溴甲基)吡啶-3-基]亚氨二羧酸酯(化合物260C，3.0g，7.7mmol)的溶液。该反应混合物在140℃搅拌4h，然后浓缩。残留物通过柱色谱纯化给出为液体的期望的化合物(2.5g，收率：92％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.34(t，J＝7.6Hz，6H)，1.39(s，18H)，3.43(d，J＝22.0Hz 2H)，4.09-4.18(m，4H)，7.43(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H)，7.67(s，1H)，8.33(d，J＝8.0Hz，1H).
化合物260C：二-叔丁基[6-(溴甲基)吡啶-3-基]亚氨二羧酸酯
CCl4(200mL)中的二-叔丁基(6-甲基吡啶-3-基)亚氨二羧酸酯(化合物260D，15g，49mmol)，NBS(8.2g，49mmol)和AIBN(1.0g)的混合物在100℃搅拌过夜。TLC示出该反应完全。该反应混合物浓缩，和残留物通过柱色谱纯化给出为黄色固体的期望化合物(5.0g，收率：26％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.41(s，18H)，4.53(s，2H)，7.44(dd，J＝2.4，8.0Hz，1H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，8.33(dd，J＝2.4，8.0Hz，1H).
化合物260D：二-叔丁基(6-甲基吡啶-3-基)亚氨二羧酸酯
三乙胺(60mL)和(Boc)2O(100g)、然后DMAP(8g，66mmol)部分地加入到DCM(500mL)中的6-甲基吡啶-3-基胺(20g，0.18mol)的溶液。得到的混合物在室温搅拌36h。该混合物用水(400mL)洗涤，和水相用DCM(2×500mL)萃取。合并的有机层经MgSO4干燥，浓缩，和通过柱色谱纯化提供为固体的期望化合物(10g，35％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.41(s，18H)，2.55(s，3H)，7.14(d，J＝8.0Hz，1H)，7.34(dd，J＝2.4，8.0Hz，1H)，8.27(d，J＝2.4Hz，1H)。
Figure BPA00001479300901981
实施例262：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例246的步骤、使用叔丁基4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯(化合物262A)进行制备。MS(ES+)：m/z 661.33(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.71min(UPLC，纯度)。
化合物262A：叔丁基4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯
标题化合物根据化合物246A的步骤、使用二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯和4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酯(Tetrahedron Letters，2000，44，pp3705-3708)进行制备。MS(ES+)：m/z761.33(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.56min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300901991
实施例263：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-3-氧代-7-(哌啶-4-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例247的步骤、使用实施例262进行制备。MS(ES+)：m/z663.33(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.73min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300901992
实施例264：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例248的步骤、使用实施例262进行制备。MS(ES+)：m/z675.32(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.72min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300902001
实施例267：顺-4-(7-{[2-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸
THF(0.5mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(59mg，0.27mmol)、二乙基[(5-氨基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯盐酸盐(化合物260A，76.6mg，0.27mmol)和DIPEA(0.14mL，0.82mmol)的溶液在60℃搅拌2h，在此之后，真空中除去溶剂。乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(86.38mg，0.273mmol)、TFA(0.063mL，0.82mmol)和TFE(0.8mL)加到残留物中。得到的混合物在微波反应器中100℃照射45分钟。溶剂再次在真空中除去，且残留物溶解在DCM(5mL)中，并用饱和NaHCO3(5mL)水溶液中和。分离有机相，用DCM(2×5mL)萃取水相。合并有机相，经MgSO4干燥，过滤，浓缩，和残留物通过制备TLC(DCM中的5％的甲醇中的7N氨)纯化，给出25mg的产物乙基顺-4-(7-{[2-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯和乙基顺-4-(7-{[4-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯的混合物，其如下进行水解：LiOH.H2O(14.9mg，0.355mmol，10相等)、甲醇(0.5mL)和THF(0.5mL)加入到该混合物。得到的混合物在室温搅拌5h。除去溶剂，和残留物通过制备TLC(DCM中5％甲醇)纯化，给出2.5mg的标题化合物顺-4-(7-{[2-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸(收率：1.4％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝7.6Hz，6H)，1.69-1.76(m，6H)，2.28(m，2H)，2.61(m，1H)，2.73(m，1H)，3.15(s，3H)，3.58(d，J＝22.0Hz，2H)，4.12-4.20(m，4H)，4.44(s，2H)，7.13(d，J＝8.8Hz，1H)，7.55(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，7.95-7.98(m，2H)，8.37(d，J＝0.4Hz，1H)，8.59(d，J＝2.8Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 677.20[MH+]。HPLC：tR＝1.34min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902011
实施例268：反-4-(7-{[2-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸
THF(0.5mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(59mg，0.27mmol)、二乙基[(5-氨基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯盐酸盐(76.6mg，0.273mmol)和DIPEA(0.43mL，0.82mmol)的溶液在60℃搅拌2h。LC-MS表明反应完全。除去溶剂，和乙基反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯(86.38mg，0.273mmol)、TFA(0.063mL，0.82mmol)和TFE(0.8mL)加入到该残留物。得到的混合物在Biotage微波上、用微波100℃加热45分钟。溶剂在真空中除去，和残留物在DCM(5mL)中溶解，并用饱和NaHCO3水溶液(5mL)中和。分离有机相；用DCM(2×5mL)萃取水相。合并有机相，经MgSO4干燥，过滤，浓缩和残留物通过制备TLC(DCM中的5％的甲醇中的7N氨)纯化，给出19mg的乙基反-4-(7-{[2-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯和顺-4-(7-{[4-({6-[(二乙氧基磷酰基)甲基]吡啶-3-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯的混合物，其如下进行水解：LiOH.H2O(11.3mg，0.27mmol)、甲醇(0.5mL)和THF(0.5mL)加入到混合物。得到的混合物在室温搅拌5h。除去溶剂和残留物通过制备TLC(DCM中5％甲醇)纯化，提供4mg的标题化合物(收率：2.2％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝7.6Hz，6H)，1.56-1.69(m，4H)，1.88(m，2H)，2.12(m，2H)，2.40(m，1H)，2.55(m，1H)，3.15(s，3H)，3.58(d，J＝22.0Hz，2H)，4.15-4.19(m，4H)，4.45(s，2H)，7.30(d，J＝8.4Hz，1H)，7.57(dd，J＝2.8，8.8Hz，1H)，7.98(dd，J＝3.0，8.4Hz，1H)，8.03(s，br，1H)，8.37(s，1H)，8.59(d，J＝2.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 677.25[MH+]。HPLC：tR＝1.32min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902012
实施例269：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-{[2-甲基-7-(1-甲基哌啶-4-基)-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例247的步骤、使用实施例264进行制备。MS(ES+)：m/z677.29(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.73min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300902021
实施例270：4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)苯甲酸
二乙基[4-({4-[(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯(20.0mg，0.0304mmol)、4-(二羟基硼基)苯甲酸(10.1mg，0.0608mmol)、碳酸钾(12.6mg，0.0911mmol)、与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(2.48mg，0.00304mmol)、1，4-二氧杂环乙烷(0.6mL)和水(0.15mL)进行混合，和在微波中100℃加热30分钟。该粗混合物通过硫羟-SPE柱以除去Pd，和随后通过MDP纯化得到标题化合物(5.7mg，27％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.13(t，J＝7.1Hz，6H)，3.08(s，3H)，3.34(d，J＝21.5Hz，2H)，3.75(s，3H)，3.85-4.02(m，4H)，4.67(s，2H)，6.94(d，J＝8.1Hz，1H)，7.08(br.s.，1H)，7.43(br.s.，1H)，7.58(d，J＝8.6Hz，1H)，7.75(m，J＝8.3Hz，2H)，8.02(m，J＝8.6Hz，2H)，8.42(s，1H)，9.20(s，1H)，13.05(s，1H)。MS(ES+)：m/z700.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.07min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300902022
实施例271：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-({2-甲基-7-[顺-4-(甲基氨基甲酰基)环己基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸(10.0mg，0.0142mmol)、TBTU(9.1mg，0.0283mmol)和DMF(0.8mL)进行混合，和该混合物在室温搅拌30分钟。加入甲基氯化铵(9.6mg，0.142mmol)和DIPEA(24.7μL，0.142mmol)，并且混合物在室温搅拌2小时。该粗物质通过MDP纯化，得到标题化合物(4.4mg，43％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.29(t，J＝7.1Hz，6H)，1.67-1.81(m，4H)，1.87-2.01(m，2H)，2.15(d，J＝12.4Hz，2H)，2.60(br.s.，1H)，2.71(t，J＝11.2Hz，1H)，2.79(s，3H)，3.18(s，3H)，3.37(d，J＝21.7Hz，2H)，3.90(s，3H)，4.10(quin，J＝7.3Hz，4H)，4.53(s，2H)，6.99(d，J＝7.8Hz，1H)，7.13(s，1H)，7.34(br.s.，1H)，7.67(d，J＝8.1Hz，1H)，8.33(br.s.，2H)。MS(ES+)：m/z 719.36(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.04min(UPLC，纯度)。
以下化合物以类似方式、使用顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸和和合适的胺进行制备。
Figure BPA00001479300902031
实施例272：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-氨基甲酰基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
MS(ES+)：m/z 705.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.00min(UPLC，纯度).
Figure BPA00001479300902032
实施例273：二乙基(4-{[4-({7-[顺-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
MS(ES+)：m/z 733.36(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.13min(UPLC，纯度).
Figure BPA00001479300902041
实施例274：2-(二甲基氨基)乙基顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸酯
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.29(t，J＝7.1Hz，6H)，1.76(d，J＝6.1Hz，6H)，2.24-2.39(m，8H)，2.70(t，J＝5.6Hz，3H)，2.83(br.s.，1H)，3.18(s，3H)，3.32(d，J＝22.7Hz，2H)，3.90(s，3H)，4.09(quin，J＝7.3Hz，4H)，4.31(t，J＝5.7Hz，2H)，4.51(s，2H)，6.92(d，J＝8.1Hz，1H)，7.06(s，1H)，7.26(d，J＝8.1Hz，1H)，7.88(d，J＝7.6Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.46(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 777.32(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.79min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300902042
实施例275：二乙基(4-{[4-({7-[顺-4-(羟基氨基甲酰基)环己基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
另外的DMF(0.5mL)、DIPEA(9.9μL，0.0567mmol)和顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己烷羧酸(10.0mg，0.0142mmol)加入到DMF(9.9μL，0.017mmol)中50％1-丙基膦酸环酸酐。该混合物在室温搅拌30分钟。加入胲基盐酸盐(2.0mg，0.0283mmol)，和该混合物在室温搅拌过夜。该粗混合物通过MDP纯化，以得到标题化合物(5.2mg，51％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)d ppm1.29(t，J＝7.1Hz，6H)，1.68-1.82(m，4H)，2.00-2.16(m，4H)，2.52(br.s.，1H)，2.73(t，J＝11.1Hz，1H)，3.19(s，3H)，3.38(d，J＝21.7Hz，2H)，3.90(s，3H)，4.11(qd，J＝7.3，7.1Hz，4H)，4.55(s，2H)，6.95-7.04(m，1H)，7.14(s，1H)，7.39(br.s.，1H)，7.65(d，J＝8.1Hz，1H)，8.33(br.s.，2H)。MS(ES+)：m/z 721.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.97min(UPLC，纯度)。
实施例276：二乙基(3-甲氧基-4-{[4-({7-[顺-4-(甲氧基氨基甲酰基)环己基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例275的步骤、用甲氧基胺盐酸盐替代胲基盐酸盐进行制备。MS(ES+)：m/z 735.36(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.03min(UPLC，纯度)。
Figure BPA00001479300902052
实施例278：4-(7-{2-[4-(二乙氧基-磷酰基甲基)-2-甲氧基-苯基氨基]-5-三氟甲基-嘧啶-4-基氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-羟基-环己烷羧酸
TFE(3mL)中的二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(105mg，0.23mmol)和甲基4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}环己烷羧酸酯(化合物278A，110mg，0.26mmol)的溶液加入TFA(75mg，0.66mmol)和在微波上100℃照射30min。该反应混合物用EtOAc(30mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(2x 10mL)、盐水(10mL)洗涤和经无水硫酸钠干燥。溶剂在减压下蒸发，和粗物质不进一步纯化在下个步骤中使用。以上物质溶解在THF(6mL)中，然后加入TBAF(2.0mL，2.0mmol，THF中的1M溶液)。得到的混合物在室温搅拌过夜。该反应混合物用EtOAc(30mL)稀释，用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤和经无水硫酸钠干燥。溶剂在减压下蒸发，和粗物质不进一步纯化在水解中使用。以上粗酯溶解在THF(2mL)、甲醇(2mL)和H2O(2mL)中，然后加入氢氧化锂单水合物(48.5mg，1.16mmol)。得到的混合物在室温搅拌1h。混合物用1M HCl水溶液酸化至pH＝3，然后用EtOAc(3x 10mL)萃取，合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。溶剂在加压下蒸发和残留物通过硅胶色谱(ISCO系统：甲醇/DCM＝0-10％)纯化，给出为白色固体的标题化合物62mg，经过三个步骤36％收率。LC-MS和1H NMR示出其是单个异构体。1HNMR(DMSO-d6)：1.20(t，J＝7.0Hz，6H)，1.55-1.65(m，2H)，1.74-1.99(m，6H)，2.58(m，1H)，3.07(s，3H)，3.24(d，J＝21.2Hz，2H)，3.76(s，3H)，3.95-4.04(m，4H)，4.51(s，2H)，4.99(s，1H)，6.90(d，J＝7.8Hz，1H)，7.05(s，1H)，7.26(m，1H)，7.51(m，1H)，8.38(s，1H)，8.98(s，1H)，10.57(s，1H)，12.38(s，1H)。MS(ES+)：m/z＝722.17[MH+]。HPLC：tR＝3.43min(ZQ3，极性_5min).
化合物278A：4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己烷羧酸甲基酯
4-二甲基氨基吡啶(12mg，0.10mmol)加入到甲醇(10mL)中的{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧代}丙二腈(390mg，2.0mmol)[其根据文献制备：Nemoto，H.；Li，X.；Ma，R.；Suzuki，I.；Shibuya，M.Tetrahedron Lett.2003，44，73-75]和7-氨基-2-甲基-4-(4-氧代环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(258mg，1.0mmol)的混合物。得到的混合物在室温搅拌30分钟。在减压下蒸发溶剂，和残留物悬浮在DCM(10mL)中，滤除淡黄色固体，浓缩滤液，和通过硅胶色谱(ISCO系统：EtOAc∶庚烷＝30-90％)纯化给出为淡黄色固体的标题化合物160mg，37％收率。1H NMR(CDCl3)：0.12(s，6H)，0.98(s，9H)，1.63-1.66(m，2H)，1.82-2.00(m，6H)，2.44(m，1H)，3.14(s，3H)，3.74(s，3H)，4.31(s，2H)，6.66(d，J＝8.1Hz，1H)，7.13(d，J＝8.1Hz，1H)。MS(ES+)：m/z＝433.17[MH+]。HPLC：tR＝4.35min(ZQ3，non极性_5min)。
Figure BPA00001479300902061
实施例282：反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸
标题化合物根据实施例102的步骤、使用反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸(化合物282A，90mg，0.28mmol)和二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(126mg，0.28mmol)进行制备。浓缩该反应混合物和通过柱色谱(99∶1，甲醇/二氯甲烷)纯化给出标题化合物，其在异丙醇中重结晶提供11mg(收率：6％)的纯产物。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.26(t，J＝7.2Hz，6H)，1.42(s，3H)，1.77-1.81(m，4H)，1.90-1.92(m，4H)，2.50-2.52(m，1H)，3.18(d，J＝21Hz，2H)，3.22(s，3H)，3.92(s，3H)，4.0-4.08(m，4H)，4.38(s，2H)，6.91(d，J＝7.8Hz，1H)，6.94(s，1H)，7.39(d，J＝7.8Hz，1H)，7.80(bs，1H)，8.22(bs，1H)，8.38(s，1H)，8.60(d，J＝8.4Hz，1H)，10.55(s，1H)。MS(ES+)：m/z720.24[MH+]。HPLC：tR＝1.48min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物282A：反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸
乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸酯(化合物282B)和乙基反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸酯(化合物282C)(198mg，0.6mmol)的以上混合物加入到THF/乙醇/水(1/1/1，3mL)中的LiOH.H2O(252mg，6mmol)的溶液。该反应混合物在回流下加热8h，然后浓缩。残留物吸收进入水中，和用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(Na2SO4)和浓缩给出未反应的乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸酯(化合物282B，100mg)。水层用醋酸酸化和用二氯甲烷(3×20mL)萃取。干燥合并的二氯甲烷1层(Na2SO4)和浓缩给出70mg的标题化合物。1HNMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.20-1.46(m，4H)，1.67-1.70(m，2H)，1.84-1.87(m，2H)，2.09(s，3H)，2.39(m，1H)，3.13(s，3H)，4.27(s，2H)，6.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)。
化合物282B乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸酯和
化合物282C：乙基反-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸酯
二氯甲烷/甲醇混合物(20mL/6mL)中的乙基1-甲基-4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-3-烯-1-羧酸酯(化合物282D，278mg，0.78mmol)的溶液在50psi下、在活性碳(50mg)上10％Pd氢化48h。过滤该反应混合物，浓缩，和粗残留物不纯化在下个步骤中使用。
化合物282D：乙基1-甲基-4-(2-甲基-7-硝基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己-3-烯-1-羧酸酯
二氧杂环乙烷和水(15mL，4∶1)的混合物脱气30分钟。然后加入2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(373mg，1.19mmol)、乙基1-甲基-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧代}环己-3-烯-1-羧酸酯(化合物282E，300mg，0.92mmol)、Pd(PPh3)4(106mg，0.092mmol)和碳酸铯(747mg，2.3mmol)。该反应混合物在70℃加热2h。在冷却至室温后，过滤该混合物和浓缩至干燥，残留物通过柱色谱(SiO2，5％乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化，给出278mg(收率：77％)期望的产物化合物。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.26(t，J＝6.9Hz，3H)，1.76-1.78(m，1H)，2.07-2.22(m，3H)，2.40(m，1H)，2.80-2.42(m，1H)，3.21(s，3H)，4.15(q，J＝6.9Hz，2H)，5.92(s，1H)，7.44(d，J＝8.5Hz，1H)，7.70(d，J＝8.5Hz，1H)。
化合物282E：乙基1-甲基-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧代}环己-3-烯-1-羧酸酯
三氟甲磺酸酐(1.2mL，7.17mmol)经过20分钟加入二氯甲烷(40mL)中的乙基1-甲基-4-氧代-环己烷羧酸酯(化合物282F，1.2g，6.52mmol)和2，6-二-叔丁基吡啶(2.27g，11.08mmol)的冷溶液。使得到的混合物升温至室温和搅拌16h。浓缩该反应混合物至干燥和残留物用醚处理。滤除固体(2，6-二-叔丁基吡啶的盐)，然后浓缩滤液，残留物通过柱色谱(SiO2，5％乙酸乙酯/己烷)纯化，给出300mg(收率：14％)期望的产物。1H NMR(CDCl3，600MHz)：δ＝1.25(t，J＝6.9Hz，3H)，1.72-1.76(m，1H)，2.06-2.09(m，2H)，2.13-2.17(m，1H)，2.36-2.42(m，2H)，2.71-2.75(m，1H)，3.20(s，3H)，4.13-4.16(q，J＝6.9Hz，2H)，5.71(s，1H)。
化合物282F：乙基1-甲基-4-氧代-环己烷羧酸酯
8-甲基-1，4二氧-杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙基酯(化合物282G)溶解在THF(20mL)和3N HCl的水溶液(30mL)中。得到的混合物在室温搅拌过夜。该混合物用EtOAc(50mL)稀释，用盐水(20mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。1H NMR(CDCl3)：1.28(t，J＝7.1Hz，3H)，1.29(s，3H)，1.63-1.70(m，2H)，2.30-2.74(m，6H)，3.94(s，4H)，4.19(q，J＝7.1Hz，2H)。
化合物282G：8-甲基-1，4二氧-杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙基酯
THF(5mL)中的1，4二氧-杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙基酯(化合物282H，2.14g，9.99mmol)的溶液在-78℃在氮气下加入到THF(10mL)中的LDA(7.0mL，14mmol，THF/乙基苯中的2M溶液)的溶液。得到的混合物在该温度搅拌30分钟，然后加入在THF(5mL)中的甲基碘(1.98g，14.0mmol)的溶液。得到的混合物缓慢升温至室温过夜。该反应用饱和NH4Cl(20mL)水溶液淬灭和用EtOAc(50mL)稀释。有机层用盐水(30mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。溶剂在减压下蒸发，给出为淡黄色油的化合物2.30g，100％收率。该物质不进一步纯化在下个步骤中使用。1HNMR(CDCl3)：1.20(s，3H)，1.26(t，J＝7.1Hz，3H)，1.52-1.68(m，6H)，2.12-2.17(m，2H)，3.94(s，4H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)。
化合物282H：1，4二氧-杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙基酯(2，6930-8)：甲苯(60mL)中的4-乙氧基羰基-环己酮(11.0g，64.6mmol)、1，2-乙二醇(6.02g，96.9mmol)和对-TsOH·H2O(620mg，3.2mmol)的混合物使用迪-斯二氏法回流收集水过夜。该混合物冷却至室温，然后用饱和NaHCO3(30mL)水溶液淬灭和用EtOAc(100mL)稀释。有机层用盐水(30mL)洗涤，和经无水硫酸钠干燥。溶剂在减压下蒸发，给出为淡黄色油的标题化合物13.8g，100％收率。该物质不进一步纯化在下个步骤中使用。1H NMR(CDCl3)：1.25(t，J＝7.1Hz，3H)，1.52-1.60(m，2H)，1.76-1.83(m，4H)，1.92-1.97(m，2H)，2.34(m，1H)，3.95(s，4H)，4.13(q，J＝7.1Hz，2H)。
Figure BPA00001479300902091
实施例283：二乙基(4-{[4-{[7-(顺-4-氰基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
在25mL Schlenk管中，在DMF(13.0mL，168mmol)中溶解反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己基甲磺酸酯(化合物283A，130.0mg，0.17mmol)，和用氩气加入脱气(3x)。该反应在100℃在氩气气氛下加热7小时。该反应物溶解在EtOAc中，并用水(2x)和盐水(1x)分别洗涤。收集有机层，和在真空中浓缩，并通过CombiFlash
Figure BPA00001479300902092
Rf4X有机纯化系统[干燥装载在12g二氧化硅装载柱上，40g RediSep正向GOLD二氧化硅闪柱，梯度洗脱：DCM中的0→4％甲醇]纯化，提供37.4mg(31.7％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.49(br.s.，1H)，8.33(s，1H)，7.85(d，J＝7.58Hz，1H)，7.33(d，J＝8.59Hz，1H)，7.03-7.09(m，1H)，6.93(td，J＝2.27，8.08Hz，1H)，4.51(s，2H)，4.08(quin，J＝7.26Hz，4H)，3.90(s，3H)，3.33(s，1H)，3.27(s，1H)，3.17(s，4H)，2.68(d，J＝5.56Hz，1H)，2.10(d，J＝10.36Hz，2H)，1.75-1.93(m，6H)，1.28(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z687.17/688.20(100/70)[MH+].HPLC：tR＝1.54min(微质量TOF：极性_3min)。
化合物283A：反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己基甲磺酸酯
乙胺(0.185mL，1.33mol)、然后甲磺酰氯(0.13mL，1.66mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.81mg，6.60μmol)缓慢加入到DCM(1.68mL)中的二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(0.45g，0.66mmol)、冷却至0℃的搅拌溶液。该混合物在室温搅拌过夜。在16小时后，沉淀形成。有机层在DCM中重新溶解和用水(2x)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和在真空中浓缩为固体该粗产物通过CombiFlash
Figure BPA00001479300902094
Rf4X有机纯化系统[干燥装载，3x 12g RediSep
Figure BPA00001479300902095
正相GOLD二氧化硅闪柱，梯度洗脱：0→DCM中的4％7N NH3]纯化，提供220mg(44％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.48(br.s.，1H)，8.33(s，1H)，7.82(d，J＝8.08Hz，1H)，7.40(d，J＝8.59Hz，1H)，7.06(d，J＝2.02Hz，1H)，6.96(d，J＝7.58Hz，1H)，4.74-4.80(m，1H)，4.51(s，2H)，4.09(quin，J＝7.20Hz，4H)，3.89(s，3H)，3.34(s，1H)，3.29(br.s.，2H)，3.18(s，3H)，3.10(s，3H)，2.64(br.s.，1H)，2.29(d，J＝11.37Hz，2H)，1.69-2.00(m，6H)，1.28(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z 756.19/757.23(100/90)[MH+].HPLC：tR＝1.53min(微质量TOF：极性_3min)。
实施例284：顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸
标题化合物根据实施例102的步骤、使用顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸(化合物284A，42mg，0.13mmol)和二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(58mg，0.131mmol)进行制备。浓缩该反应混合物和通过柱色谱(99∶1，甲醇/二氯甲烷)纯化，给出标题化合物，其在异丙醇中重结晶提供25mg(27％)的纯产物。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.27-1.32(m，11H)，1.78-1.85(m，4H)，2.30(d，J＝12.6Hz，2H)，2.58(m，1H)，3.20(s，3H)，3.33(d，J＝22Hz，2H)，3.87(s，3H)，4.09-4.13(m，4H)，4.37(s，2H)，6.78(s，1H)，6.91(d，J＝8.4Hz，1H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(bs，1H)，8.07(d，J＝5.4Hz，1H)，8.34-8.36(m，2H)，10.15(s，1H)。MS(ES+)：m/z 720.26[MH+]。HPLC：tR＝1.48min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物284A：顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸
乙基顺-4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-甲基环己烷羧酸酯(化合物282B，100mg，0.30mmol)加入到二氧杂环乙烷/乙醇/水(1/1/1，3mL)中的KOH(2mL，2mmol)的水溶液中。该反应混合物加热回流6h，然后浓缩和残留物使用醋酸酸化(pH＝5)。该混合物用二氯甲烷(3×10mL)萃取，和合并的二氯甲烷层干燥(Na2SO4)和浓缩给出42mg的标题化合物。1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ＝1.28-1.30(m，2H)，1.59-1.62(m，2H)，1.72-1.73(m，2H)，2.10(s，3H)，2.32-2.34(m，3H)，3.13(s，3H)，4.27(s，2H)，6.54(d，J＝8.4Hz，1H)，7.07(d，J＝8.4Hz，1H)。
Figure BPA00001479300902102
实施例285：顺-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-(二甲基氨基)环己烷羧酸
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(50.0mg，0.105mmol)和4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-(二甲基氨基)环己烷羧酸(化合物285A，38.2mg，0.115mmol)进行制备。浓缩该反应混合物和在用DCM中的0-5％-10％-20％甲醇洗脱的ISCO Combiflash单元上纯化，分离为异构体的96∶04混合物的期望产物。该顺式异构体最可能为主要的(参见Tetrahedron Letters 2006，62，10000-10004和文献在此引用)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.41(d，J＝8.84Hz，1H)，8.34(s，1H)，7.66(d，J＝8.08Hz，1H)，7.61(d，J＝8.59Hz，1H)，7.08(s，1H)，7.01(td，J＝2.34，7.96Hz，1H)，4.50(s，2H)，4.04-4.17(m，4H)，3.86(s，3H)，3.41(d，J＝21.40Hz，2H)，3.18(s，3H)，3.16(s，6H)，2.75-2.82(m，1H)，2.46(d，J＝14.40Hz，2H)，2.20-2.31(m，2H)，1.83-1.92(m，4H)，1.28(t，J＝6.95Hz，6H).MS(ES+)：m/z＝749.3107[MH+].HPLC：tR＝1.23min(UPLC，极性_5min)。
化合物285A：4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1-(二甲基氨基)环己烷羧酸
1-氨基-4-{7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}环己烷羧酸钠(化合物285B，50.0mg，0.118mmol)在甲醇(1.0mL，25mmol)中吸收，和在大约5天的期间，用甲醛(52.5uL，0.705mmol)和甲酸(26.6uL，0.705mmol)行重复处理，接着数小时的搅拌和然后加入氰基硼氢化钠(73.8mg，1.18mmol)。最终使该反应完全，在其后，该反应混合物变为悬浮液。过滤该悬浮液，和固体用少量甲醇洗涤。甲醇滤液浓缩产生蜡状物质，其用DCM研制和过滤。DCM滤液浓缩至透明的油和在真空中干燥。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d 9.52(s，1H)，8.10-8.15(m，1H)，7.42(d，J＝8.59Hz，1H)，4.36(s，2H)，3.18(s，3H)，2.93(s，6H)，2.82(dd，J＝4.67，8.72Hz，1H)，2.23(t，J＝4.55Hz，4H)，1.97-2.07(m，2H)，1.83-1.94(m，2H)，1.50(s，9H).MS(ES+)：m/z＝432.2303[MH+].HPLC：tR＝1.12min(UPLC TOF，极性_3min)。该粗产物在DCM中吸收和用TFA处理，搅拌15分钟。浓缩该反应混合物为油，和不进一步纯化和表征进行使用。
化合物285B：1-氨基-4-{7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}环己烷羧酸钠
二-叔丁基8-{7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，4-二氧-1，3-二氮杂螺[4.5]癸烷-1，3-二羧酸酯(化合物285C，0.904g，1.44mmol)吸收在DME(20mL，200mmol)中，和升温以实现溶解。在反应混合物已冷却至室温后，加入水(13mL，13mmol)中的1.0M的氢氧化钠。在数分钟内白色ppt形成。在60分钟后，在真空中除去DME，和过滤反应化合物以收集ppt，其用水，然后丙酮洗涤。在干燥后，分离出451.7mg的白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.55(br.s.，1H)，7.94(d，J＝9.09Hz，1H)，7.39(d，J＝7.33Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.05(s，3H)，2.45(br.s.，1H)，1.60-1.97(m，6H)，1.48(s，9H)，1.35(br.s.，2H).MS(ES+)：m/z＝304.1487(M-BOC)。
化合物285C：二-叔丁基8-{7-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，4-二氧-1，3-二氮杂螺[4.5]癸烷-1，3-二羧酸酯
二-叔丁基二羧酸酯(3640mg，16.7mmol)以一部分加入到DME(25mL，240mmol)中的8-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1，3-二氮杂螺[4.5]癸烷-2，4-二酮(化合物285D，1059mg，3.225mmol)的悬浮液。其冷却至0℃和用～1mLDME中的4-二甲基氨基吡啶(7.09mg，0.0580mmol)的溶液处理，然后用三乙胺(454uL，3.26mmol)处理。除去冰浴，和混合物搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，在DCM中吸收和用1M HCl、饱和NaHCO3溶液和盐水连续洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤和浓缩至黄色固体。其在DCM中重新溶解，用二氧化硅处理，和浓缩。这个装载到样品柱上，和在用0-50％EtOAc/庚烷洗脱的褐色ISCOCombiflash单元上纯化。该纯化部份浓缩给出904mg的白色固体。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ9.54(s，1H)，8.17(d，J＝8.59Hz，1H)，7.55(d，J＝8.59Hz，1H)，4.36(s，2H)，3.17(s，3H)，2.87-2.95(m，1H)，2.57(ddd，J＝4.93，8.46，13.89Hz，2H)，2.13-2.23(m，2H)，2.03-2.13(m，2H)，1.92-2.02(m，2H)，1.61(s，9H)，1.58(s，9H)，1.53(s，9H)。
化合物285D：8-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)-1，3-二氮杂螺[4.5]癸烷-2，4-二酮
甲醇(15mL，370mmol)中的7-氨基-2-甲基-4-(4-氧杂环己基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(1000.0mg，3.8712mmol)和碳酸铵(818mg，8.52mmol)的悬浮液用H2O(10mL)中的氰化钾(529mg，8.13mmol)的溶液处理。该混合物——其开始转变为白色——加热至80℃持续16小时。在早上，该反应混合物是稠的白色淤浆。其转移至圆底烧瓶，和浓缩为固体，该固体悬浮在水中和经过滤收集。滤饼用水洗多于二次和用丙酮洗涤一次。该固体在真空下干燥数小时，提供1.059g的为浅米色固体的标题产物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.57(br.s.，1H)，8.65(s，1H)，7.23(d，J＝8.34Hz，1H)，6.54(d，J＝8.34Hz，1H)，5.85(s，2H)，4.36(s，2H)，2.99(s，3H)，2.40-2.48(m，1H)，1.54-1.86(m，8H).MS(ES+)：m/z＝329.1119[MH+].HPLC：tR＝0.96min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902131
实施例286：二乙基[(5-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-6-甲氧基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基[(5-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-6-甲氧基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯(化合物286A，100mg，0.22mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(115mg，0.44mmol)进行制备。该粗物质通过MDP纯化，得到标题化合物(82mg，55％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.31(t，J＝6.9Hz，6H)，1.38-1.53(m，2H)，1.62-1.77(m，2H)，1.84-1.93(m，2H)，2.04-2.14(m，2H)，2.53-2.64(m，1H)，3.17(s，3H)，3.44(d，J＝21.7Hz，2H)，3.62-3.72(m，1H)，4.01(s，3H)，4.10-4.21(m，4H)，4.51(s，2H)，6.99(dd，J＝8.1，2.8Hz，1H)，7.39(d，J＝8.6Hz，1H)，8.15(d，J＝7.3Hz，1H)，8.37(s，2H)。MS(ES+)：m/z 679.31(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.06min(UPLC，纯度)。
化合物286A：二乙基[(5-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-6-甲氧基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯
标题化合物根据二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}苄基)膦酸酯的步骤、使用2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶和二乙基[(5-氨基-6-甲氧基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯(化合物286B)进行制备。该粗物质通过柱色谱(二氯甲烷∶CH3CN＝0-20％)纯化，以得到比例大约为4∶1的2个区域异构体的混合物(主要一个是期望的标题化合物[364mg，61％收率])。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.22(t，J＝6.9Hz，6H)，3.35(d，J＝21.7Hz，2H)，3.87(s，3H)，4.00-4.07(m，4H)，6.98(dd，J＝7.8，2.8Hz，1H)，7.83(d，J＝7.6Hz，1H)，8.72(s，1H)，9.90(s，1H)。MS(ES+)：m/z 455.21(100)，457.15(33)[MH+]；HPLC：tR＝1.41min(UPLC，分析级)。
化合物286B：二乙基[(5-氨基-6-甲氧基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯
3mL甲醇中的二乙基[(6-甲氧基-5-硝基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯(化合物286C，750mg，2.465mmol)和Pd/C(0.247mmol)的混合物在氢气的1个大气压下、在室温搅拌过夜。通过硅藻土过滤该粗混合物，和该产物(630mg，93％收率)在下个步骤中直接使用。1H NMR(DMSO-d6)δ＝6.82(d，J＝7.6Hz，1H)，6.66(dd，J＝7.7，2.8Hz，1H)，4.81(s，2H)，3.97(quin，J＝7.3Hz，4H)，3.84(s，3H)，3.13(d，J＝21.2Hz，2H)，1.18(t，J＝7.1Hz，6H).MS(ES+)：m/z 275.19(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.81min(UPLC，分析级)。
化合物286C：二乙基[(6-甲氧基-5-硝基吡啶-2-基)甲基]膦酸酯
40mL DMSO中的2-甲氧基-3-硝基吡啶(6.92g，44.9mmol)和二乙基氯甲基膦酸酯(7.00mL，44.9mmol)的溶液逐滴加入到叔丁氧钾(15.1g，134.6mmol)和40mLDMSO的搅拌混合物中。该混合物在室温搅拌30分钟，在其之后，它倒入1N HCl/冰混合物中，并用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩和通过柱色谱(DCM∶EtOAc1∶1)纯化。收集较慢洗脱的区域异构体，和确认是期望的产物(750mg，5.5％收率)。MS(ES+)：m/z 305.16(100)[MH+]；HPLC：tR＝1.16min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300902141
实施例287：4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-2-羧酸二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(18mg，0.039mmol)、甲基4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-2-羧酸酯(化合物287A，6.0mg，0.020mmol)、三氟醋酸(4.6μL，0.060mmol)和0.5mL三氟乙醇进行混合。该混合物在微波中105℃加热30分钟。蒸发溶剂。0.1mL THF、0.1mL甲醇、0.1mL水和氢氧化锂单水合物(8.3mg，0.20mmol)加入到该粗固体。该混合物在室温搅拌过夜。该粗物质通过MDP纯化，得到为三氟醋酸的标题化合物(1.1mg，7.9％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝1.28(t，J＝7.3Hz，6H)，3.18(s，3H)，3.21-3.24(m，1H)，3.33(d，J＝21.7Hz，2H)，3.37-3.43(m，2H)，3.45-3.51(m，1H)，3.55-3.61(m，2H)，3.90(s，3H)，4.06-4.11(m，4H)，4.32-4.39(m，1H)，4.44-4.59(m，2H)，6.99(d，J＝7.8Hz，1H)，7.09(s，1H)，7.25(d，J＝8.8Hz，1H)，7.75(d，J＝8.3Hz，1H)，8.35(s，1H)，8.49(br.s.，1H)。MS(ES+)：m/z 708.26(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.77min(UPLC，纯度)。
化合物287A：甲基4-(7-氨基-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)哌嗪-2-羧酸酯
8mL甲苯中的二-叔丁基(7-溴-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)亚氨基二羧酸酯(400mg，0.906mmol)、N-1-boc-2-哌嗪羧酸甲基酯(1.00g，4.09mmol)、双(三-叔丁基膦)钯(0)(46mg，0.09mmol)、十六烷基三甲基溴化铵(20mg，0.05mmol)和50％KOH水溶液(152mg，1.36mmol)的混合物抽空和用氩气换气三次。该混合物在105℃加热2天。该反应混合物进行滗析，和该固体用甲苯洗涤。合并的甲苯洗液进行蒸发，提供棕色油，其在二氯甲烷中吸收和用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水进行洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩和通过柱色谱(庚烷中的二氯甲烷：0-40％)纯化，提供1-叔丁基2-甲基4-{7-[双(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}哌嗪-1，2-二羧酸酯。1mL二氯甲烷和1mL三氟醋酸加入到1-叔丁基2-甲基4-{7-[双(叔丁氧羰基)氨基]-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}哌嗪-1，2-二羧酸酯。该混合物在室温搅拌过夜。蒸发溶剂，和该物质通过MDP纯化进行纯化，得到为甲基酯的产物(6.0mg，2.2％收率)。MS(ES+)：m/z 305.25(100)[MH+]；HPLC：tR＝0.39min(UPLC，分析级)。
Figure BPA00001479300902151
实施例288：{[反-4-(7-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-2-甲基-1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)环己基]氧代}甲基磷酸盐
NIS(47mg，0.21mmol)加入到在0℃的含有THF(1.40mL，17.3mmol)中的二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-7-{反-4-[(甲基硫烷基)甲氧基]环己基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(化合物288A，100.0mg，0.11mmol)、磷酸(93.4mg，0.95mmol)和磨碎的分子筛的溶液，和该混合物溶液在室温搅拌2小时。该反应混合物通过硅藻土的垫过滤，和该固体用甲醇洗涤。滤液用1M Na2S2O3处理，直到该溶液变为透明的。在其之后，Na2CO3的饱和溶液加入到该溶液，直到pH＝10。固体沉淀析出，和通过过滤除去。该滤液在真空中浓缩，和该残留物通过CombiFlash
Figure BPA00001479300902152
Rf 4X有机纯化系统[干燥装载在硅藻土上，40g RediSep
Figure BPA00001479300902153
反相GOLD二氧化硅闪柱，梯度洗脱：水中的0→100％乙醇]纯化，提供51mg(60％)期望的产物化合物。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.53(d，J＝7.33Hz，1H)，8.32(s，1H)，7.93(d，J＝8.08Hz，1H)，7.35(d，J＝8.59Hz，1H)，7.05(s，1H)，6.91(td，J＝2.15，8.08Hz，1H)，5.12(d，J＝6.57Hz，2H)，4.51(s，2H)，4.07(quin，J＝7.33Hz，4H)，3.83-3.95(m，4H)，3.26(s，2H)，3.17(s，3H)，2.51-2.67(m，1H)，2.28(d，J＝9.35Hz，2H)，1.89(d，J＝12.13Hz，2H)，1.61-1.77(m，2H)，1.36-1.51(m，2H)，1.28(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z 788.22/789.25(100/50)[MH+].HPLC：tR＝1.34min(微质量TOF：极性_3min)。
化合物288A：二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-7-{反-4-[(甲基硫烷基)甲氧基环己基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
过氧化苯甲酰(343mg，1.42mmol)以四等部分经过20分钟加入到0℃的MeCN(9.56mL，183mmol)和DMF(4.78mL，61.7mmol)中的二乙基(4-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(239mg，0.35mmol)和二甲硫(0.209mL，2.85mmol)的溶液，和该混合物在0℃搅拌1小时，然后在在室温搅拌4小时。在4个小时之后，该反应没有完全。该反应仍然保留半悬浮。1ml的DMF、8相等的二甲硫和4相等的过氧化苯甲酰加入到该反应混合物。该反应保留在室温搅拌过夜。在16小时后，该反应完全。该混合物用乙酸乙酯稀释，和用10％Na2CO3(1x)和然后用盐水(2x)洗涤。有机相进行干燥，过滤和然后蒸发。该粗产物通过CombiFlash
Figure BPA00001479300902161
Rf4X有机纯化系统[用DCM干燥装载，12g RediSep
Figure BPA00001479300902162
正相GOLD二氧化硅闪柱，梯度洗脱：DCM中0→5％甲醇]纯化，提供177mg(68％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.42-8.50(m，1H)，8.32(d，J＝0.51Hz，1H)，7.82-7.89(m，1H)，7.35(d，J＝8.84Hz，1H)，7.05(t，J＝2.02Hz，1H)，6.93(d，J＝8.08Hz，1H)，4.72(s，2H)，4.48(s，2H)，4.03-4.14(m，4H)，3.90(s，3H)，3.70-3.81(m，1H)，3.32(s，1H)，3.27(s，1H)，3.16(s，3H)，2.52-2.65(m，1H)，2.12-2.20(m，5H)，1.90(d，J＝12.38Hz，2H)，1.61-1.76(m，2H)，1.42(d，J＝14.65Hz，2H)，1.25-1.32(m，6H).MS(ES+)：m/z 738.26/739.26(100/35)[MH+].HPLC：tR＝1.56min(微质量TOF：极性_3min)。
实施例289：二乙基(4-{[4-({7-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(897mg，1.98mmol)和7-氨基-4-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物289A，633.5mg，2.212mmol)进行制备。在TFE(12mL)中加入TFA(654.2mg，5.737mmol)和通过微波加热[Biotage，105℃]照射1h。该反应混合物转移至圆底烧瓶和在真空中浓缩。该残留物溶解在甲醇(未测量的量)中，冷却至0℃，和加入甲醇中的7.0M的NH3(5mL，40mmol)。在0℃至室温搅拌，经过1小时45分钟搅拌后，悬浮液在真空中浓缩，和粗产物使用用0-10％甲醇∶CH2Cl2的溶剂系统洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统纯化，提供为白色固体的标题物质1.1017g(78％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.72(s，1H)，9.12(s，1H)，8.38(s，1H)，8.27(s，1H)，8.06-8.63(m，1H)，7.96(s，1H)，7.70(d，J＝8.84Hz，1H)，7.41(d，J＝7.07Hz，1H)，7.10(br.t，J＝2.00Hz，1H)，6.96(br td，J＝2.30，8.00Hz，1H)，4.53-4.67(m，3H)，4.21(t，J＝7.20Hz，2H)，4.00(qd，J＝7.06，8.12Hz，4H)，3.74(s，3H)，3.43(q，J＝6.06Hz，2H)，3.36(d，J＝19.96Hz，2H)，3.11(s，3H)，1.97(quin，J＝6.63Hz，2H)，1.17(t，J＝6.95Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 704.23(100)[MH+]。HPLC：tR＝3.73min(ZQ3，极性_5min)。
化合物289A：7-氨基-4-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
Pd/C(10％，50％H2O)(1.41g，0.662mmol)加入到乙醇(85mL)的4-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物289B，920.0mg，2.908mmol)的悬浮液，和该混合物抽空，和首先加入氮气和然后H2气体加入数次。悬浮液在室温搅拌2h，在其之后，悬浮液通过硅藻土的床过滤和用甲醇和EtOAc彻底地洗涤。滤液在真空中浓缩，使用用0-5％甲醇∶CH2Cl2洗脱的Teledyne/ISCO Combiflash系统纯化，提供633.7mg为浅棕色固体的标题物质(76％，)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.93(d，J＝0.51Hz，1H)，7.71(d，J＝0.76Hz，1H)，7.43(d，J＝8.34Hz，1H)，6.61(d，J＝8.34Hz，1H)，6.05(s，2H)，4.59(t，J＝5.05Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.17(t，J＝6.95Hz，2H)，3.41(q，J＝6.06Hz，2H)，3.03(s，3H)，1.94(quin，J＝6.57Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 287.13(100)[MH+]。HPLC：tR＝0.89min(TOF，极性_3min)。
化合物289B：4-[1-(3-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基-7-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
4∶1的二氧杂环乙烷(20mL)与H2O(5mL)中的2-甲基-7-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物289C，1.825g，5.736mmol)，3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(1.449g，7.066mmol)，与二氯甲烷(1∶1)络合的[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(509.5mg，0.6239mmol)、和碳酸钾(2.397g，17.34mmol)的悬浮液抽空，和用氮气充入数次。样品在微波条件[Biotage，100℃]下照射45min。该反应混合物转移至分液漏斗，加入盐水，和反应物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，和在真空中浓缩。该粗物质吸附在预填充固体装载柱[RediSepRf 25克]之上，并使用Teledyne/ISCO系统[RediSepRf 40克二氧化硅GOLD]进行纯化，用0-15％甲醇∶CH2Cl2缓慢洗脱。收集含有产物的部份在一起，和在真空中浓缩，产生微黄色固体的标题物质，920.0mg(50％，2.850mmol)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.35(s，1H)，8.05(s，1H)，7.99(d，J＝8.34Hz，1H)，7.88(d，J＝8.34Hz，1H)，4.72(s，2H)，4.63(t，J＝5.05Hz，1H)，4.25(t，J＝7.07Hz，2H)，3.43(q，J＝6.06Hz，2H)，3.11(s，3H)，1.98(quin，J＝6.63Hz，2H)。MS(ES+)：m/z 317.11(100)[MH+]。HPLC：tR＝0.91min(TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902181
实施例290：2-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}苯甲酸
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(50.0mg，0.110mmol)和邻氨基苯甲酸(15.1mg，0.110mmol)进行制备。在减压下浓缩该反应产物，和在ISCO Combiflash系统(DCM/甲醇100∶0→95∶5)上纯化两次。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ11.65(br.s.，1H)，9.74(s，1H)，8.48(d，J＝8.84Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.08(dd，J＝1.39，7.96Hz，1H)，7.81(br.s.，1H)，7.47(t，J＝7.71Hz，1H)，7.12(t，J＝7.58Hz，1H)，6.94(s，1H)，6.88(dd，J＝2.02，8.08Hz，1H)，4.06-4.17(m，4H)，3.85(s，3H)，3.18-3.29(m，2H)，1.30(t，J＝7.07Hz，6H).MS(ES+)：m/z 555.1432(MH+).HPLC：tR＝1.47min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物299A：5-氨基-1，3-二甲基喹啉-4(1H)-酮
甲醇(150mL)中的1，3-二甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮和1，3-二甲基-7-硝基喹啉-4(1H)-酮化合物299B，2.2g，10mmol)的混合物经5％Pd/C(0.8g)在40℃、40psi氢亚下氢化过夜。滤除催化剂，和浓缩滤液，通过HPLC纯化给出为纯的区域异构体的标题化合物(540mg，28％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.92(s，3H)，3.69(s，3H)，6.63(d，J＝8.0Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，7.40(t，J＝8.0Hz，1H)，7.91(s，1H).
化合物299B：1，3-二甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮和1，3-二甲基-7-硝基喹啉-4(1H)-酮
在0℃，NaH(3.6g，60mmol)加入到THF(100mL)中的3-甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮和3-甲基-7-硝基喹啉-4(1H)-酮(Eur.J.Med.Chem.1997，32，547，3g，15mmol)的混合物，和得到的混合物在室温搅拌30mi，然后加入CH3I(2.4g，17mmol)和在室温继续搅拌过夜。该反应混合物用水(20mL)小心地淬灭，和用EtOAc提取3次。浓缩合并的有机层，和通过柱色谱纯化，产生：2.2g期望的产物(收率：68％)。
实施例300：二乙基[4-({4-[(1，3-二甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-5-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)-3-甲氧基苄基]膦酸酯
标题化合物根据化合物102A、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(99.5mg，0.219mmol)和5-氨基-1，3-二甲基喹啉-4(1H)-酮(化合物299A，49.2mg，0.261mmol)进行制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 14.66(s，1H)，8.88(s，1H)，8.60(br s，1H)，8.38(s，1H)，8.07(s，1H)，7.43-7.63(m，2H)，7.18(d，J＝8.6Hz，1H)，7.05(s，1H)，6.90(d，J＝7.8Hz，1H)，3.95-4.05(m，4H)，3.80(s，3H)，3.76(s，3H)，3.28(d，J＝21.5Hz，2H)，1.98(s，3H)，1.20(t，J＝6.9Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 606.16(60)[MH+]。HPLC：tR＝1.46min(TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902192
实施例301：乙基[5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基]乙酸酯
标题化合物根据化合物102A、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(50.0mg，0.110mmol)和乙基(5-氨基-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基)乙酸酯(实施例301A，31.5mg，0.121mmol)进行制备。1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.24-1.32(m，9H)，2.12(s，3H)，3.29(d，J＝21.2Hz，2H)，4.05-4.16(m，6H)，4.84(s，2H)，6.91(dt，J＝2.8，8.4Hz，1H)，7.04(t，J＝2.0Hz，1H)，7.40(d，J＝8.8Hz，1H)，7.60(t，J＝8.4Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.98(d，J＝8.0Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.66(d，J＝7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 678.17[MH+]。HPLC：tR＝1.50min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物301A：乙基(5-氨基-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基)乙酸酯
乙醇和二氯甲烷(10mL/20mL)中的(3-甲基-5-硝基-4-氧代-4H-喹啉-1-基)-乙酸乙基酯(化合物301B，250mg，0.86mmol)的溶液小心地用活性炭上钯(10％)(30mg)处理，并在大气压下氢化1小时。过滤该混合物，并浓缩该滤液至残留物，当用叔丁基甲基醚研制时，残留物给出150mg为淡黄色固体的期望产物(67％)。化合物C的1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ1.24(t，3H，J＝7.5Hz)，2.04(s，3H)，4.22(q，2H，J＝7.5Hz)，4.58(s，2H)，6.18(d，J＝8.4Hz，1H)，6.35(d，J＝8.5Hz，1H)，7.24(m，3H)。
化合物301B：(3-甲基-5-硝基-4-氧代-4H-喹啉-1-基)-醋酸乙基酯和
甲苯(50mL)中的3-甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮和3-甲基-7-硝基喹啉-4(1H)-酮(Eur.J.Med.Chem.1997，32，547，500mg，2.45mmol，)和碳酸铯(800mg(2.45mmol)的悬浮液用溴乙酸乙酯(0.3mL，2.45mmol)处理，并在室温搅拌3天。过滤该固体(原料的铯盐)，并用二氯甲烷洗涤。浓缩该滤液给出400mg的粗物质，其使用闪柱色谱(DCM∶甲醇，99∶1)纯化，以分离期望的区域异构体：100mg1H NMR(CDCl3，300MHz)：δ1.3(m，3H，J＝7.2Hz)，2.08(s，3H)，4.25(q，2H，J＝7.2Hz)，4.8(s，2H)，7.3(m，2H)，7.4(s，1H)，7.65(t，J＝8Hz，1H)。回收的其它异构体：70mg。
Figure BPA00001479300902201
实施例302：[5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基]乙酸
甲醇(0.5mL)和THF(0.5mL)中的乙基[5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基]乙酸酯(实施例300，41mg，0.061mmol)的溶液加入LiOH·H2O(25.6mg，0.61mmol)。得到的混合物在室温搅拌5h。该反应混合物在减压下浓缩。该物质通过制备TLC(DCM中的5％甲醇)纯化，给出24.1mg期望的产物(收率：61％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.20(m，6H)，1.99(s，3H)，3.24(d，J＝21.2Hz，2H)，3.78(s，3H)，3.99(m，2H)，6.90(d，1H)，7.03(s，1H)，7.43(s，br，1H)，7.61(d，J＝7.2Hz，1H)，7.94(s，br，1H)，8.36(s，1H)，8.51-8.56(m，2H)。MS(ES+)：m/z 651.19[MH+]。HPLC：tR＝1.32min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902211
实施例303：二乙基{[5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基]甲基}膦酸酯
标题化合物根据化合物102A、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(45.4mg，0.100mmol)和二乙基[(5-氨基-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基)甲基]膦酸酯盐酸盐(化合物303A，39.7mg，0.110mmol)进行制备。1HNMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.24(t，J＝7.2Hz，6H)，1.28(t，J＝7.2Hz，6H)，2.12(s，3H)，3.28(d，J＝21.2Hz，2H)，3.91(s，3H)，4.06-4.11(m，8H)，4.86(s，2H)，6.91(d，J＝8.4Hz，1H)，7.04(m，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，1H)，7.62(m，1H)，7.92(s，1H)，7.96(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.67(d，J＝8.0Hz，1H)。MS(ES+)：m/z742.18[MH+]。HPLC：tR＝1.44min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物303A：二乙基[(5-氨基-3-甲基-4-氧代喹啉-1(4H)-基)甲基]膦酸酯盐酸盐
甲醇(5mL)中的(3-甲基-5-硝基-4-氧代-4H-喹啉-1-基甲基)-膦酸二乙基酯(化合物303B，20mg；0.05mmol)的溶液在氮气下加入Pd/C(5mg)和醚(1mL)中的1MHCl，然后在氢气的1个大气压下在室温搅拌过夜。过滤该溶液，浓缩该滤液给出最终的化合物(收率20mg；99％；tlc 1∶9甲醇∶DCM)；1H NMR(300MHz，CDCl3)，δppm，8.12(s，1H)，8.01(d，6Hz，1H，)7.88-7.83(m，1H)7.40(d，J＝9Hz，1H)4.12-4.13(m，4H，)3.31-3.29(m，2H)，2.14(s，3H)，1.27-1.25(m，6H)
化合物303B：3-甲基-5-硝基-4-氧代-4H-喹啉-1-基甲基)-膦酸二乙基酯
氢化钠(40mg；1.6mmol)加到0℃的DMF(20mL)中的3-甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮和3-甲基-7-硝基喹啉-4(1H)-酮(Eur.J.Med.Chem.1997，32，547；150mg；0.7mmol)。在该混合物搅拌30分钟后，加入二乙基碘甲基膦酸酯(750mg；2.6mmol)和溶液在室温搅拌过夜。蒸发溶剂以得到粗产物，其进行闪色谱(1∶9甲醇∶DCM)以得到标题化合物(20mg；17.8％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)，δppm，7.66(s，2H)，7.49(s，1H)7.25(s，1H)4.45(d，J＝15Hz，2H)4.05-4.12(m，4H)，2.06(s，3H)，1.27-1.23(m，6H)。
实施例304：乙基反-4-(5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯
标题化合物根据化合物102A、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(233.0mg，0.44mmol)和乙基反-4-(5-氨基-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯(化合物304A，172.0mg，0.52mmol)进行制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.26-1.35(m，9H)1.69-1.94(m，6H)2.14(s，3H)2.31(d，J＝13.64Hz，2H)2.83(br.s.，1H)2.97-3.06(m，1H)3.33(s，1H)3.39(s，1H)3.91(s，3H)4.10(quin，J＝7.26Hz，4H)4.24(q，J＝7.24Hz，2H)6.93(m，J＝6.06Hz，1H)7.11(t，J＝2.02Hz，1H)7.35(d，J＝7.83Hz，1H)7.81(d，J＝7.83Hz，1H)7.87(s，1H)8.31(s，1H)8.49(br.s.，1H).MS(ES+)：m/z：746.20/747.19(100/40)[MH+].HPLC：tR＝4.42min(微质量ZQ3：极性_5min)。
化合物304A：(1)乙基反-4-(5-氨基-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯和
化合物304B：(2)乙基顺-4-(5-氨基-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯
乙醇(2.17mL)中的乙基4-(5-氨基-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己-3-烯-1-羧酸酯(化合物304C，0.270g，0.83mmol)和在活性碳上10％wt钯(88.0mg，0.083mmol)的混合物抽空，和用氢气(3x)换气，并随后在氢气的一个大气压下室温搅拌16小时。过滤该反应混合物，和滤液在真空中浓缩为橙色油。该产物通过质量定向纯化进行纯化，其分离成为顺式和反式异构体。化合物304A，首先洗脱的反式异构体：1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.27(t，J＝7.07Hz，3H)1.53-1.73(m，4H)1.79(d，J＝4.29Hz，2H)2.02(d，J＝0.76Hz，3H)2.26(d，J＝13.14Hz，2H)2.70-2.82(m，2H)4.17(q，J＝7.07Hz，2H)6.38(d，J＝8.34Hz，1H)7.12(d，J＝8.34Hz，1H)7.63(s，1H).MS(ES+)：m/z 329.16/329.36(100/70)[MH+].HPLC：tR＝1.28min(微质量TOF：极性_3min)。化合物304B，在之后洗脱的顺式异构体：1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 1.25(t，J＝7.07Hz，3H)1.54(br.s.，1H)1.70(d，J＝12.63Hz，1H)1.87(br.s.，1H)2.02(d，J＝0.51Hz，1H)2.07(br.s.，1H)2.35-2.45(m，1H)2.69-2.81(m，1H)4.12(q，J＝7.07Hz，1H)6.39(d，J＝8.34Hz，1H)7.20(d，J＝8.34Hz，1H)7.64(d，J＝0.76Hz，1H).MS(ES+)：m/z 329.14/329.35(100/70)[MH+].HPLC：tR＝1.30min(微质量TOF：极性_3min)。
化合物304C：乙基4-(5-氨基-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己-3-烯-1-羧酸酯
乙醇(50mL)中的乙基4-(3-甲基-5-硝基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己-3-烯-1-羧酸酯(化合物304D，600mg，1.69mmol)的溶液加入SnCl2(1.2g，5.33mmol)。得到的混合物在回流下搅拌18h。在减压下浓缩该反应混合物。残留物用NaHCO3水溶液(500mL)淬灭和用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤和在减压下浓缩。该物质通过制备TLC纯化，提供期望的化合物(270mg，收率：49％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.22(t，J＝7.2Hz，3H)，1.99(s，3H)，2.03(m，1H)，2.11-2.13(m，2H)，2.19-2.21(m，2H)，2.34-2.39(m，2H)，2.78(m，1H)，3.42(d，J＝3.2Hz，1H)，4.12(q，J＝7.2Hz，2H)，5.71(s，1H)，6.20(d，J＝8.0Hz，1H)，6.71(s，br，2H)，6.93(d，J＝8.0Hz，1H)，7.36(d，J＝6.0Hz，1H)，8.91(s，br，1H)。
化合物304D：乙基4-(3-甲基-5-硝基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己-3-烯-1-羧酸酯
1，4-二氧杂环乙烷/H2O(150mL，4∶1)中的8-溴-3-甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮(化合物304E，700mg，2.47mmol)、乙基4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二杂氧戊硼烷-2-基)环己-3-烯羧酸酯(1.8g，6.43mmol，商业可得或可以根据WO2008/099221制备)、Pd(PPh3)4(20mg)和Na2CO3(1g，9.43mmol)的混合物抽空，和用N2换气。该反应混合物在N2下100℃搅拌18h。过滤该反应混合物，和在减压下浓缩滤液。该物质通过闪柱色谱纯化，提供期望的化合物(600mg，收率：67％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.22(t，J＝7.2Hz，3H)，1.85(m，1H)，1.96(s，3H)，2.08(m，1H)，2.26(m，1H)，2.38-2.49(m，3H)，2.78(m，1H)，4.12(q，J＝7.2Hz，2H)，5.84(s，1H)，7.46(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.83(d，J＝6.0Hz，1H)，10.94(d，J＝6.0Hz，1H).
化合物304E：8-溴-3-甲基-5-硝基喹啉-4(1H)-酮
甲基3-[(2-溴-5-硝基苯基)氨基]-2-甲基丙-2-烯酸酯(化合物304F，10g，3.2mmol)和PhOPh(6mL)的混合物在250℃搅拌2h。使该反应混合物冷却至室温。石油醚(60mL)加入到该反应混合物，和过滤沉淀。该物质通过柱色谱纯化，以提供为固体的2.8g期望的产物(收率：28％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.95(s，3H)，7.48(d，J＝8.0Hz，1H)，7.91(s，1H)，8.12(d，J＝8.0Hz，1H)，11.46(s，br，1H)。
化合物304F：甲基3-[(2-溴-5-硝基苯基)氨基]-2-甲基丙-2-烯酸酯
甲苯(200mL)中的甲基3，3-二甲氧基-2-甲基丙酸酯(10g，46mmol，商业可得或可以根据Org.Biomol.Chem.2006，4，2945制备)、2-溴-5-硝基苯基胺(12g，74mmol)和p-TsOH(50mg，0.29mmol)的混合物回流搅拌24h。使该反应混合物冷却至室温。在减压下浓缩该反应混合物。残留物由DCM重结晶，提供为固体的期望的产物(9.8g，收率：67.5％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.86(s，3H)，3.29(s，3H)，7.64(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.88(d，J＝8.4Hz，1H)，8.24(d，J＝2.4Hz，1H)。
Figure BPA00001479300902241
实施例305：乙基顺-4-(5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯
标题化合物根据化合物102A、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(94.83mg，0.18mmol)和乙基顺-4-(5-氨基-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯(化合物304B，70.0mg，0.213mmol)进行制备。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 8.57(br.s.，1H)，8.32(s，1H)，7.82-7.88(m，2H)，7.48(d，J＝8.6Hz，1H)，7.09(d，J＝3.8Hz，1H)，6.96(dt，J＝8.1，2.2Hz，1H)，4.16(q，J＝7.2Hz，2H)，4.05-4.13(m，4H)，3.91(s，3H)，3.35(s，1H)，3.33(br.s.，1H)，2.92-3.03(m，1H)，2.51(td，J＝11.7，3.4Hz，1H)，2.44-2.56(m，1H)，2.17(br.s.，5H)，1.98(d，J＝10.1Hz，2H)，1.63-1.83(m，4H)，1.25-1.33(m，9H).MS(ES+)：m/z：746.20/747.19(100/40)[MH+]。HPLC：tR＝4.44min(微质量ZQ3：极性_5min)。
Figure BPA00001479300902242
实施例306：顺-4-(5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸
THF(0.11mL)和甲醇(0.11mL)中的乙基顺-4-(5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯(实施例305，61.7mg，0.083mmol)的溶液加入H2O(0.11mL)中的氢氧化锂单水合物(17.4mg，0.41mmol)的溶液，和使其在室温搅拌30小时。该反应物在减压下浓缩。该物质在使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的Iscocombi-flash单元上纯化，提供22.3mg(38％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.24-1.30(m，6H)1.76-1.89(m，6H)2.11-2.15(m，3H)2.34(d，J＝4.80Hz，2H)2.73(br.s.，1H)2.99(s，1H)3.29(br.s.，1H)3.34(s，1H)3.89-3.94(m，3H)4.02-4.13(m，4H)6.87(dt，J＝8.21，2.34Hz，1H)7.03(t，J＝2.02Hz，1H)7.41(d，J＝8.59Hz，1H)7.84(d，J＝0.76Hz，1H)8.03(d，J＝8.34Hz，1H)8.33(s，1H)8.49(d，J＝6.32Hz，1H).MS(ES+)：m/z 718.15/719.19(100/98)[MH+].HPLC：tR＝1.47min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300902251
实施例307：反-4-(5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸
THF(0.125mL)和甲醇(0.129mL)中的乙基反-4-(5-{[2-({4-[(二乙氧基磷酰基)甲基]-2-甲氧基苯基}氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-3-甲基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-8-基)环己烷羧酸酯(实施例304，72.0mg，0.097mmol)的溶液加入H2O(0.129mL)中的氢氧化锂单水合物(20.2mg，0.48mmol)的溶液，和使其在室温搅拌30小时。该反应物在减压下浓缩。该物质在使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的Iscocombi-flash单元上纯化，提供45mg(60％)期望的产物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.24-1.33(m，6H)1.66-1.86(m，4H)1.96-2.04(m，2H)2.12-2.14(m，3H)2.15-2.22(m，2H)3.39-3.43(m，1H)3.46-3.50(m，1H)3.91-3.94(m，3H)4.05-4.11(m，4H)6.88-6.94(m，1H)7.03-7.07(m，1H)7.47-7.52(m，1H)7.83-7.86(m，1H)8.01-8.06(m，1H)8.33-8.35(m，1H)8.50-8.59(m，1H).MS(ES+)：m/z718.22/719.26(100/98)[MH+].HPLC：tR＝1.43min(微质量TOF：极性_3min)。
Figure BPA00001479300902252
实施例308：二乙基[(6-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯
干燥二氧杂环乙烷(1.2mL)中的7-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物308C，130.0mg，0.29mmol)、二乙基[(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯(化合物308A，80.9mg，0.29mmol)、Pd(OAc)2(3.31mg，0.015mmol)、Xantphos(17.1mg，0.029mmol)和Cs2CO3(192.2mg，0.59mmol)的悬浮液冒氮气泡2min。该混合物然后在CEM微波反应器中160℃照射40min。在冷却至室温后，过滤该反应混合物，和浓缩该滤液，并通过硅胶色谱(DCM中1-5％甲醇)纯化，给出1.9mg的标题化合物(收率：1％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.29(t，J＝7.2Hz，6H)，1.45(m，2H)，1.63(m，2H)，1.90(m，2H)，2.16(m，2H)，2.50(m，1H)，3.18(d，J＝21.2Hz，2H)，3.22(s，3H)，3.77(m，1H)，3.94(s，3H)，4.04-4.10(m，4H)，4.39(s，2H)，7.41(d，J＝8.4Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.45(s，1H)，9.33(d，J＝8.0Hz，1H)，10.86(s，1H)。MS(ES+)：m/z 679.23[MH+]。HPLC：tR＝1.21min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物308A：二乙基[(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯
二乙基[(5-甲氧基-6-硝基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯(化合物308B，102.6mg)在甲醇(5mL)中的10％Pd/C(20mg)存在下、在1个大气压下氢化4h。滤除该催化剂，浓缩滤液，和残留物(85mg，92％收率)不纯化在下个步骤中使用。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.27(dt，J＝2.0，6.8Hz，6H)，3.02(d，J＝20.8Hz，2H)，3.84(s，3H)，4.01-4.08(m，4H)，4.74(s，2H)，6.98(t，J＝2.0Hz，1H)，7.52(t，J＝2.0Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 275.10[MH+]。HPLC：tR＝0.77min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物308B：二乙基[(5-甲氧基-6-硝基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯
DMSO(4mL)中的2-硝基-3-甲氧基吡啶(300mg，1.95mmol)和二乙基氯甲基膦酸酯(363mg，1.95mmol)的溶液逐滴加入到在室温剧烈搅拌的DMSO(4mL)中的t-BuONa(0.561g，5.84mmol)的溶液。该反应混合物立刻变为深橙色。继续搅拌30min，然后该混合物倒入1M HCl(水溶液)(10mL)中。该产物用萃取进入乙醚(3×30mL)中，经MgSO4干燥，浓缩，和通过硅胶色谱(DCM中的3％甲醇)纯化，提供102.6mg的二乙基[(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯(收率：17％)。1HNMR(CD3OD，400MHz)：δ＝1.30(t，J＝6.8Hz，6H)，3.45(d，J＝22.4Hz，2H)，4.00(s，3H)，4.09-4.17(m，4H)，7.79(t，J＝2.4Hz，1H)，7.97(t，J＝2.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z305.07[MH+]。HPLC：tR＝1.17min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物308C：7-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮和7-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮
DIPEA(0.48mL，2.76mmol)加入到无水二氧杂环乙烷(2mL)中的2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(300mg，1.38mmol)和7-氨基-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(360mg，1.38mmol)的悬浮液。得到的混合物在80℃搅拌2h，以提供为带棕色的透明溶液。在冷却至室温后，溶剂在真空中除去，和残留物通过硅胶色谱(DCM中5％甲醇)纯化，提供64∶36比例两种产物的380mg期望的产物，较少的是期望的7-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(收率：62％)。混合物的1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝1.25-1.35(m，2H)，1.50-1.60(m，2H)，1.76-1.79(m，2H)，1.93-1.95(m，2H)，2.48-2.54(m，1H)，3.10(s，1.92H)，3.46(s，1.08H)，3.45-3.51(m，1H)，4.56(d，J＝6.8Hz，1.28H)，4.63(d，J＝4.0Hz，0.72H)，7.49(d，J＝8.4Hz，0.64H)，7.53(d，J＝8.4Hz，0.36H)，8.30(d，J＝8.8Hz，0.64H)，8.46(d，J＝8.8Hz，0.36H)，8.73(s，0.36H)，8.91(s，0.64H)，10.79(s，br，0.64H)，11.10(s，br，0.36H)。较少的产物MS(ES+)：m/z441.12[MH+，35Cl]，443.13[MH+，37Cl]。HPLC：tR＝1.47min(UPLC TOF，极性_3min)。较多产物MS(ES+)：m/z 441.12[MH+，35Cl]，443.13[MH+，37Cl]。HPLC：tR＝1.61min(UPLC TOF，极性_3min)。
Figure BPA00001479300902271
实施例309：二乙基[(6-{[4-{[7-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}吡啶-3-基)甲基]膦酸酯
干燥二氧杂环乙烷(2.8mL)中的7-{[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}-4-(反-4-羟基环己基)-2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-1-酮(化合物308C，200mg，0.45mmol。36∶64区域异构体的混合物，其中较少的为期望的一个)、二乙基[(6-氨基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯(化合物309A，111mg，0.45mmol)、Pd(OAc)2(5.09mg，0.023mmol)、Xantphos(26.2mg，0.045mmol)和Cs2CO3(296mg，0.91mmol)的悬浮液氮气冒泡2min。该混合物然后在CEM微波反应器中160℃照射40min。在冷却至室温后，过滤该反应混合物，和浓缩滤液，并通过硅胶色谱(DCM中1-5％甲醇)纯化，给出32.6mg的标题化合物(收率：11％)，在TLC上两种区域异构体的较大极性的。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.28(t，J＝7.2Hz，6H)，1.44(m，2H)，1.63(m，2H)，1.91(m，2H)，2.16(m，2H)，2.50(m，1H)，3.12(d，J＝21.2Hz，2H)，3.22(s，3H)，3.77(m，1H)，4.02-4.10(m，4H)，4.39(s，2H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68(d，J＝8.4Hz，1H)，7.98(s，1H)，8.22(s，1H)，8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.62(d，J＝8.4Hz，1H)，10.59(s，1H)。MS(ES+)：m/z 649.18[MH+]。HPLC：tR＝3.38min(ZQ3，极性_5min)。
化合物309A：二乙基[(6-氨基吡啶-3-基)甲基]膦酸酯
二氧杂环乙烷(2mL)中的二-叔丁基[5-(溴甲基)吡啶-2-基]亚氨二羧酸酯(化合物309B，1.162g，3mmol)和三乙膦(0.598g，3.6mmol)的混合物在110℃搅拌4h。冷却的反应混合物(室温)用二氧杂环乙烷(5mL)和DCM(10mL)中的4N HCl处理和使其在室温搅拌6h。加入饱和NaHCO3(水溶液，15mL)和该混合物用DCM(3×40mL)萃取。合并的有机相经MgSO4干燥，浓缩，和通过硅胶色谱(DCM中的5％的甲醇中的7N氨)纯化，提供227mg的标题化合物(收率：31％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.29(t，J＝6.8Hz，6H)，2.98(d，J＝20.8Hz，2H)，4.02-4.09(m，4H)，5.65(s，br，2H)，6.58(d，J＝8.8Hz，1H)，7.51(dt，J＝2.4，8.8Hz，1H)，7.82(t，J＝2.4Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 245.09[MH+]。HPLC：tR＝0.70min(UPLC TOF，极性_3min)。
化合物309B：二-叔丁基[5-(溴甲基)吡啶-2-基]亚氨二羧酸酯
CCl4(30mL)中的二-叔丁基(5-甲基吡啶-2-基)亚氨二羧酸酯(化合物309C，5.66g，18.4mmol)、NBS(3.92g，22mmol)和过氧化苯甲酰(0.444g，1.84mmol)的混合物在80℃加热6h。该混合物冷却至室温，滤除该固体，和浓缩滤液。残留物通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷：1∶1)纯化，给出4.66g的二-叔丁基[5-(溴甲基)吡啶-2-基]亚氨二羧酸酯(收率：65％)。
化合物309C：二-叔丁基(5-甲基吡啶-2-基)亚氨二羧酸酯
DCM(20mL)中的2-氨基-5-甲基吡啶(2g，18.5mmol)、二-叔丁基二羧酸酯(8.88g，40.7mmol)、4-二甲基氨基吡啶(0.452g，3.7mmol)和DIPEA(7.09mL，40.7mmol)的混合物在室温搅拌18h。除去溶剂和残留物通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷：1∶1)纯化，提供～3∶1的双-Boc和单-Boc-保护的产物的混合物4.89g(收率：85％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ＝1.44(s，18H)，2.35(s，3H)，7.10(d，J＝8.4Hz，1H)，7.54(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，8.32(d，J＝2.4Hz，1H)。
Figure BPA00001479300902281
实施例310：二乙基[4-({4-[(2-甲基-5-氧桥-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
标题化合物根据实施例102的步骤、使用二乙基(4-{[4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苄基)膦酸酯(204mg，0.381mmol)和4-氨基-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮5-氧化物(化合物310A，68.3mg，0.381mmol)进行制备。在减压下浓缩该反应混合物，产生深黄色油，其通过在使用DCM/甲醇(100∶0→90∶10)的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化，产生白色固体(38.4mg，17％)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝8.99(br.s.，1H)，8.47-8.55(m，3H)，7.47(d，J＝6.57Hz，1H)，7.24(d，J＝7.58Hz，1H)，6.85(s，1H)，6.56(d，J＝8.08Hz，1H)，4.45(s，2H)，3.90-3.99(m，4H)，3.70(s，3H)，3.12-3.21(m，2H)，2.86-2.89(m，3H)，1.17(t，J＝7.07Hz，6H)。MS(ES+)：m/z 597.10[MH+](TOF，极性)。
化合物310A：4-氨基-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮5-氧化物
丙酮(10.0mL)中的4-氨基-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮(化合物310B，62.5mg，0.383mmol)和间-氯过氧苯甲酸(145mg，0.843mmol)的混合物在室温搅拌90分钟。在减压下浓缩该反应混合物，提供灰白色的固体。该粗物质通过在使用甲醇(100∶0→90∶10)中的DCM/7N NH3作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化。含有产物的部份进行合并，和在减压下浓缩，产生白色固体(68.3mg，99.5％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝8.19(d，J＝6.57Hz，1H)，7.02(br.s.，2H)，6.82(d，J＝6.57Hz，1H)，4.41(s，2H)，3.01(s，3H)。MS(ES+)：m/z180.07[MH+](TOF，极性)。
化合物310C：4-氨基-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮
37％HCl(7.0mL)中的4-[(2，4-二甲氧基苄基)氨基]-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮(1.8g，5.7mmol)的溶液在室温搅拌16小时。该反应混合物用NaOH中和，和用EtOAc(15mL)萃取。有机层用水(10mL)洗涤，用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩产生红色固体。粗物质在使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化。合并含有产物的部份，和在减压下浓缩产生橙色固体(319mg，34％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝2.99(s，3H)，4.37(s，2H)，6.54(br.s.，2H)，6.73(d，J＝5.05Hz，1H)，8.04(d，J＝5.05Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 164.07[MH+](TOF，极性)。
化合物310D：4-[(2，4-二甲氧基苄基)氨基]-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮
N-甲基吡咯烷酮(20mL)中的4-氯-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮(化合物310E，1.5g，8.2mmol)的溶液加入2，4-二甲氧基苄基胺(2.5mL，16mmol)，和在微波中160℃照射40min。该反应化合物用水(15mL)淬灭和用EtOAc(20mL)萃取。水层用EtOAc(3x 10mL)反萃取。合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，和在减压下浓缩产生红色固体。该粗物质通过在使用庚烷/EtOAc(70∶30→0∶100)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化。合并含有产物的部分，和在减压下浓缩产生橙色固体。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝8.10(d，J＝5.30Hz，1H)，7.11(d，J＝8.34Hz，1H)，7.01-7.07(m，1H)，6.72(d，J＝5.31Hz，1H)，6.57(d，J＝2.27Hz，1H)，6.44(dd，J＝2.53，8.34Hz，1H)，4.53(d，J＝6.06Hz，2H)，4.37(s，2H)，3.81(s，3H)，3.73(s，3H)，2.98(s，3H)。MS(ES+)：m/z 314.14[MH+](TOF，极性)。
化合物310E：4-氯-2-甲基-1，2-二氢-3H-吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮
硝基苯(76mL)中的4，6-二氯-N-甲基-N-(丙-2-炔-1-基)嘧啶-5-酰胺(化合物310F，7.6g，31mmol)的溶液抽空和用氩气(3x)换气。该反应混合物在微波中250℃照射1.5分钟。该反应化合物通过硅藻土的垫过滤。该硝基苯溶液通过硅胶塞(silica gelplug)，和用DCM洗涤以除去硝基苯。二氧化硅然后用用DCM/甲醇溶液(90∶10洗涤。过滤的物质在减压下浓缩产生红色固体。该粗物质通过在使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的combi-flash Rf系统上的硅胶色谱进行纯化。合并含有产物的部份，和在减压下浓缩，产生橙色固体(3.1598g，56％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝8.53(d，J＝5.05Hz，1H)，7.70(d，J＝5.05Hz，1H)，4.53(s，2H)，3.05(s，3H)。MS(ES+)：m/z 183.02[MH+](TOF，极性)。
化合物310F：4，6-二氯-N-甲基-N-(丙-2-基-1-基)嘧啶-5-酰胺
4，6-二氯嘧啶-5-羧酸(化合物310G，15.0g，77.7mmol)和亚硫酰氯(28.3mL，389mmol)的溶液在DCM(100mL)中回流2h。在真空中浓缩该反应混合物，在DMF(200mL)中吸收，和在-60℃逐滴加入DMF中的N-甲基-2-丙基(丙炔)-1-胺(5.4g，78mmol)和三乙胺(21.7mL，155mmol)的溶液，和在室温搅拌24h。该反应混合物在EtOAc和水之间分配以及分离。该水层用EtOAc(3X)提取，和合并的有机部份用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤和浓缩。该化合物在Isco Combiflash上纯化，提供7.66g的标题化合物，40％收率。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝9.04(s，1H)，4.37(d，J＝2.53Hz，2H)，3.08(s，1H)，2.95(s，3H)。MS(ES+)：m/z 246.0039[MH+](TOF，极性)。
化合物310G：4，6-二氯嘧啶-5-羧酸
DMF(360mL)中的4，6-二氯-5-嘧啶甲醛(15.0g，84.8mmol)的溶液加入单过硫酸钾(38.9g，254mmol)和在室温搅拌过夜。通过硅藻土的垫过滤，和在EtOAc和水之间分配和分离。水相用EtOAc(3X)提取和合并的有机部分用水(2X)、盐水洗涤，和经硫酸钠干燥，过滤，和浓缩提供标题化合物。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝9.02(s，1H)。
Figure BPA00001479300902301
实施例311：二乙基[4-({4-[(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯
乙醇(2.0mL)中的二乙基[3-甲氧基-4-({4-[(2-甲基-5-氧桥-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡咯并[3，4-c]吡啶-4-基)氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基}氨基)苄基]膦酸酯(实施例310，35.0mg，0.0587mmol)的溶液加入铁(6.9mg，0.12mmol)和加热至回流。该反应混合物加入H2O(0.07mL，0.07mmol)中的1M的HCl和在回流下搅拌10分钟。另外的H2O中的1M的HCl(0.03mL，0.03mmol)加入至该反应混合物，和在回流下搅拌10分钟。该反应混合物通过硅藻土的垫过滤。滤出液用NaHCO3(10mL)淬灭和用EtOAc(15mL)提取。该有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩为黄色固体。该粗物质通过在使用DCM/甲醇(100∶0→95∶5)作为洗脱液的ISCO Combi-flash Rf系统上的硅胶色谱纯化。合并含有产物的部份和在减压下浓缩产生白色固体(17.0mg，50％)。该物质通过HPLC重新纯化。合并含有产物的部份和浓缩产生白色固体(4.3mg，13％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝8.71(br.s.，1H)，8.60(d，J＝5.05Hz，1H)，8.54(s，1H)，8.47(br.s.，1H)，8.32(s，1H)，7.41(d，J＝5.05Hz，1H)，6.95(s，1H)，6.85-6.92(m，1H)，4.57(s，2H)，3.90-4.01(m，4H)，3.84(s，3H)，3.21(s，1H)，3.06(s，3H)，1.19(t，J＝6.95Hz，6H)。MS(ES+)：m/z581.10[MH+](TOF，极性)。                手性
本发明进一步包括以下实施例：
Figure BPA00001479300902311
Figure BPA00001479300902321
Figure BPA00001479300902331
Figure BPA00001479300902341
Figure BPA00001479300902351
除非另外说明，所有物质/试剂从商业供应商得到，并且不进一步纯化使用。1H NMR(400MHz或300MHz)和13C NMR(100.6MHz)光谱在Bruker或Varian设备上、在环境温度记录，其中TMS或残留溶剂峰作为内标。线位置或多重峰以ppm(δ)给出，和耦合常数(J)以赫兹(Hz)作为绝对值给出。1H NMR光谱中峰裂数缩写如下：s(单峰)，d(双峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，quint(五重峰)，m(多重峰)，mc(中心多重峰)，br或宽(broad)(加宽)，AA’BB’。13C NMR光谱中单个峰裂数使用DEPT135脉冲序列测定和缩写如下：+(CH或CH3)，-(CH2)，Cquart(C)。通过预先涂布铝箔和使用UV光可见的硅胶60F254(0.2mm)上的薄层色谱监测反应。闪色谱用硅胶(400-230目)实现。制备性TLC Whatman LK6F硅胶
Figure BPA00001479300902352
上实现，大小20×20cm板、具有1000μm的厚度。硅藻土填料(Hydromatrix)(＝硅藻土)从Varian购买。
制备HPLC纯化在Waters
Figure BPA00001479300902361
质量定向的纯化系统上实现，所述系统装备2525二元梯度模块(Binary Gradient Module)、2767样品管理器、柱流控技术管理器(CFO)、2996光电二极管阵列检测器、515柱再生泵、补充流动的试剂管理器、515柱稀释泵、ZQTM配备电喷雾接口的单-四级质量检测器，由具有FractionLynxTM软件的MassLynxTM版4.1控制。所有的纯化工作使用平行的双用柱Luna C18(2)21x150mm、5μm LC/MS系统和ARW(加速保留出口)完成。流动相是水(0.1％TFA)和乙腈(0.1％TFA)；所有使用的试剂是HPLC级。流速是30mL/min。在柱之后，1∶1000LC填料流动分配器允许转移小部分的洗脱液进入US检测器中，并且随后10％部分进入ZQ MS中。
电喷雾源设定在3.0kV毛细管电压、30V锥孔电压、110℃源温度、350℃去溶剂温度、600L/h脱溶剂气流和60L/h锥孔气流。对于分析器，对于制备调整方法，倍增器设定在550。
分析的LC-MS数据收集在ZQ2、ZQ3或UPLC-ACQUITY上。ZQ2是Agilent1100HPLC，其装备Gilson 215液体处理器、Gilson 819注射模块和离子化Waters微质量ZQ2000。ZQ3是Agilent 1100HPLC，其装备HP系列1100自动注射器和离子化Waters微质量ZQ2000。两个系统都使用Xterra MS C18、5μ粒子大小、4.6x 50mm，其中流动相为HPLC水(B)中的乙腈(A)和0.01％甲酸的流动相。流速是1.3mL/min，运行时间是5min，和梯度情况是：对于极性_5min是0.00min 5％A、3.00min 90％A、3.50min 90％A、4.00min 5％A、5.00min 5％A，而对于非极性_5min是0.00min 25％A、3.00min 99％A、3.50min 99％A、4.00min 25％A、5.00min 25％A。所有Waters微质量ZQ2000设备使用正(ES+)或负(ES-)模式的电喷雾电离。ZQ3的Waters微质量ZQ2000设备也可以使用正(AP+)或负(AP-)模式的大气压化学电离。Waters UPLC-ACQUITY系统由连接至ACQUITY SQ MS的ACQUITY样品管理器和ACQUITY PDA检测器组成。它使用ACQUITY UPLC BEH
Figure BPA00001479300902362
C182.1×50mm 1.7μm柱，其中流动相为水(A)中的0.1％甲酸和乙腈(B)中0.1％甲酸。流速是1.0mL/min，运行时间是2min，和梯度情况是：用于分析的0.00min 95％A、1.50min 1％A、1.85min 1％A、2.0min 95％。UV检测是在254nm，和MS使用正模式(ES+)中的电喷雾电离。所有的熔点使用Mel-Temp II装置测定，和未校正。元素分析通过Atlantic Microlab，Inc.，Norcross，GA得到。
生物性质
在本发明的一些方面，本发明的化合物是激酶-包括FAK的抑制剂。
本发明包括式1的化合物或者其药学上可接受的盐，在任一的上述列举或实施例中，其在生化分析(诸如本文描述)中显示抑制FAK，具有大约1μM或更小的IC50，或大约100nM或更小的IC50，或大约10nM或更小的IC50。
本发明包括式1的化合物或其药学上可接受的盐，在任一的上述列举或实施例中，其在细胞分析(诸如本文描述，例如，MIA-PaCa2)中显示抑制FAK，具有大约1μM或更小的IC50，或大约100nM或更小，或大约10nM或更小。
在本发明的一些方面，本发明的化合物是FAK的选择性抑制剂。在一些实施方式中，化合物是超过其它激酶靶标的FAK的选择性抑制剂。在一些实施方式中，化合物在细胞基分析中是超过极光B至少50倍的FAK的选择性。在一些实施方式中，化合物在细胞基分析中是超过Src和/或KDR至少1000-倍的FAK选择性。
本发明包括式1的化合物或其药学上可接受的盐，其对于有效的口服人给药是充分地口服可生物利用的。例如，化合物可以具有至少约30％、40％或50％生物利用度(F)。
发明包括式1的化合物或者其药学上可接受的盐，其对于有效的人给药，口服或其它方式，具有合适的治疗窗口，。
本发明包括式1的化合物或其药学上可接受的盐，其在小鼠中对于20mg/kg口服剂量给药显示至少大约2μg·h/mL的口服暴露AUC(0-∞)。
生化HTRF(FRET)测定方案
化合物抑制重组的FAK酶的激酶活性的能力通过使用生物素化的PGT(B*PGT)作为多肽底物的HTRF(FRET)测定测定。测定测定化合物在室温、在ATP存在下通过重组FAK酶抑制PGT的磷酸化的能力。该反应在1h之后停止，并且生物素*PGT的磷酸酪氨酸的含量使用抗-磷酸酪氨酸专一的Eu3+-穴状化合物(Cisbio)Mab和XL665标记的链酶抗生物素(Cisbio)通过均相时间分辨荧(HTRF)方法进行测量。储备试剂如下：
激酶反应缓冲液：75mM HEPES，pH 7.4(Gibco)；19mM MgCl2(Sigma M1028)；0.938mM MnCl2(Sigma M1787)；1.5％甘油；1.5mM DTT(新鲜加入)。
酶缓冲液：反应缓冲液加上0.03％BSA。
显色缓冲液：1份200mM EDTA/50mM Tris-HCl pH 7.4；2份1M KF；0.07％BSA。
其它试剂：生物素化的PGT(Cisbio，Cat#61GT0BLD)，0.5mg/mL，在50％DMSO中；FAK(PTK2)酶(Invitrogen PV4085)；氟化钾(VWR VW3456-1)；ATP(10mM原液)；DTT(1M原液)；10％BSA；PT-66穴状化合物(Cisbio，Cat#61T66KLB)；偶联的链酶抗生物素XL-665(Cisbio Cat#611SAXLB)。
材料：384孔白色ProxiPlate(Perkin Elmer，Cat#6006280)。
测定方案：该化合物在含有3％DMSO的激酶缓冲液(1x)中从10uM至5pM进行连续稀释，并加入5uL到384孔板的每个孔中，除了阴性和阳性对照孔外。只将DMSO加入到阳性对照孔和阴性对照孔。对于阴性对照孔，不加入ATP，但只加入5uL的B*PGT。B*PGT(最终浓度7.5ng/孔)和ATP(最终浓度100uM)以5uL加入到所有的孔，除了阴性对照孔外。反应通过加入FAK酶(最终浓度0.2ng/孔)开始，每个孔中5ul的酶缓冲液，并在室温温育1h。B*BGT的磷酸酪氨酸含量通过以7.5uL显色缓冲液加入PT66-穴状化合物(1∶100稀释)和偶联链酶抗生物素的XL665(1∶100稀释)到每个孔进行检测，并在室温温育1h。该板在Victor机器上读数。
在化合物与阳性和阴性对照的那些的存在下得到的测定信号的比较使得PGT的磷酸化的程度在一个范围的化合物浓度上被确定。这些抑制值拟合为反曲形剂量-应答曲线以确定IC50值(即，以50％抑制PGT的磷酸化作用的化合物的浓度)。生化Omnia测定方案
已经最优化了GST-标记的全长FAK酶(PTK2，Invitrogen PV4085)的Omnia测定(Invitrogen)。在这个测定系统中，Omnia Y肽3(Invitrogen KNZ3031)起到作为FAK底物的作用。该含有SOX的肽通过FAK磷酸化作用产生了当在360nm激发时，485nm的荧光增加。测定在384孔OptiPlates(Perkin Elmer 6007290)中进行，总体积为20μL，含有FAK(25nM)、Omnia Y肽3(10μM)、ATP(50μM)和测试化合物(变量)，在具有1％DMSO的测定缓冲液(50mM HEPES，pH 7.5，5mM MgCl2，0.15mM MnCl2，1％甘油，1mM DTT，1mM EGTA，0.01％BSA)中。
测试化合物的IC50典型地使用11点、3倍系列稀释进行确定，其中最终的测定浓度范围为0.17nM至10μM。所有化合物浓度两次测定。初始化合物稀释在100％DMSO中的100X浓度从10mM储存溶液进行制备。化合物在测定缓冲液中1∶25进一步地稀释，产生4X浓度的溶液。
在进行测定中，5μL的以上4X浓度化合物溶液(或阳性对照4％DMSO)加入到测定板，然后加入在测定缓冲液中的5μL的含有肽(40μM)和ATP(200μM)的溶液。反应通过在测定缓冲液中加入10μL的FAK(50nM)开始，或者对于阴性对照只加入测定缓冲液。由于肽磷酸化作用的荧光的增加进行连续监测，作为时间的函数，使用装备SoftMax Pro 5.2软件的Spectramax M5板读数器(MolecularDevices)。
IC50值从使用GraphPad Prism 5(GraphPad Software，Inc.)通过非线性曲线拟合的线性进度曲线的斜率确定。IC50的值进行两次测定(n＝2)。
在表1中，以下的定义适用：A：＜1μM；B：1-10μM；C：＞10μM。
表1：
Figure BPA00001479300902391
抑制FAK自磷酸化作用的细胞基测定：MiaPaCa2和U87MG
在细胞基捕获ELISA测定中使用MiaPaCa2胰腺癌细胞(ATCC，Cat#CRL-1420)和Invitrogen(KHO0441)的FAK[pY397]ELISA试剂盒测定化合物抑制FAK自磷酸化作用的能力。测定确定化合物阻断由纤连蛋白刺激的内源性自磷酸化作用的能力。覆盖在纤连蛋白包被的96孔板上的细胞与各种浓度的化合物在完全培养基中温育2h。然后制备细胞裂解产物，并且FAK蛋白被捕获在FAK抗体包被的96-孔ELISA板之上。FAK蛋白的磷酸酪氨酸含量然后通过在捕获蛋白质内在Y397只识别磷酸化的FAK的抗体的结合程度的定量进行监测。使用的抗体具有共价连接的报道酶(例如，辣根过氧化物酶，HRP)，使其结合到磷酸化FAK可以通过与合适的HRP底物温育进行定量确定。
储备试剂：
细胞裂解缓冲液(Biosource)：10mM Tris-HCl，pH 7.4；100mM NaCl；1mMEDTA；1mM EGTA；1mM NaF；20mM Na4P207；2mM Na3VO4；1％Triton X-100；10％甘油；0.1％SDS；0.5％脱氧胆酸；1mM PMSF(原液是DMSO中的0.3M)；蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktail)(Sigma，P-2714)。
在Biosource FAK[pY397]免疫测定试剂盒(Cat#KHO0441]中提供的试剂盒：标准的稀释缓冲液；FAK抗体包被的孔，每个板96孔；兔抗-FAK[pY397]检测抗体；山羊抗-兔IgG-辣根过氧化物酶(HRP)浓度(100x)；HRP稀释液；洗涤缓冲液浓度(25x)；稳定的色原(TMB)；终止液；平板盖片，粘合带。
测定方案：
MiaPaca2细胞在具有10％小牛血清的DMEM中生长的培养物通过胰蛋白酶-EDTA分开。细胞然后覆盖在纤连蛋白(600ng/孔)-包被的96-孔平底板上，每个孔4x 105细胞，在60uL细胞生长培养基中，并在37℃在CO2培养箱中温育。
化合物稀释物从10mM DMSO原液通过在细胞生长培养基中稀释进行制备，在测定中DMSO的最终浓度是1％。60μL的测试化合物作为2x浓度(化合物在10μM至3nM之间浓度进行测定)加入到化合物温育孔；60μL的含2％DMSO细胞测定培养物加入到阳性对照孔。细胞然后与化合物在37℃温育2h。培养物通过抽出除去，和细胞通过在每个孔中加入20uL冰冷却的细胞裂解缓冲液进行裂解。平板保持在冰上20min，并在每个孔中加入35uL的标准稀释液。每个孔的50uL的细胞裂解物转移至测定平板中的各个孔，并且50uL的检测抗体加入到所有孔中，除了不是抗体对照孔的H1-H6。捕获测定板在冷房间中温育过夜。
在温育细胞裂解物和在ELISA板中检测抗体之后，该孔用120uL的洗涤缓冲液(1x)洗涤4次，然后加入100uL的稀释的HRP偶联的抗体(在稀释液中1∶100稀释)到每个孔，并且该平板在室温温育30min。该孔然后用120uL的洗涤缓冲液(1x)洗涤4次，和100uL的色原加入到每个孔，并在黑暗中在室温下温育20-30min。每个孔中加入10uL的终止液和在450nm测量吸收。
在化合物存在下与阳性和阴性对照(没有化合物的细胞和没有检测抗体被加入)得到的测定信号的比较使得在一个范围的化合物浓度上的二氧磷基-FAK[Y397]的抑制程度被测定。这些抑制值拟合为弯曲的剂量-应答抑制曲线以确定IC50值(即，50％抑制FAK磷酸化作用的化合物的浓度)。以上描述的测定进行修改以确定50％(v/v)小鼠或人血浆中内含物的影响。在该测定中，化合物板制备为100uL的100％小鼠或人血浆中2x浓度，并且其60uL加入到60uL的培养基中，和在37℃培养箱中温育2h。测定的剩余部分如以上描述进行。
化合物抑制FAK自磷酸化作用的能力在细胞基捕获ELISA测定中测定，使用U87MG胶质母细胞瘤细胞(ATCC，Cat#HTB-14)和Invitrogen(KHO0441)的FAK[pY397]ELISA试剂盒。该测定确定化合物阻断由纤连蛋白刺激的内源性自磷酸化作用的能力。覆盖在纤连蛋白包被的96孔板上的细胞在完全的生长培养基中与各自浓度化合物温育2h。然后制备细胞裂解物，且FAK蛋白捕获在FAK抗体包被的96孔ELISA板上。FAK蛋白的磷酸酪氨酸含量然后通过抗体的结合程度的定量进行监测，所述抗体在捕获蛋白内在Y397只识别磷酸化FAK。使用的抗体具有共价连接的报道酶(例如，辣根过氧化物酶，HRP)，使其结合到磷酸化FAK可以通过与合适的HRP底物温育进行定量确定。
储备试剂：
细胞裂解缓冲液(Biosource #FNN0011)：10mM Tris-HCl，pH 7.4；100mMNaCl；1mM EDTA；1mM EGTA；1mM NaF；20mM Na4P207；2mM Na3VO4；1％Triton X-100；10％甘油；0.1％SDS；0.5％脱氧胆酸；1mM PMSF(原液是乙醇中的0.1M，Sigma#93482)；蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitorcocktail)(Sigma，P-2714)。
在Biosource FAK[pY397]免疫测定试剂盒(Cat#KHO0441]中提供的试剂盒：标准的稀释缓冲液；FAK抗体包被的孔，每个板96孔；兔抗-FAK[pY397]检测抗体；山羊抗-兔IgG-辣根过氧化物酶(HRP)浓度(100x)；HRP稀释液；洗涤缓冲液浓度(25x)；稳定的色原(TMB)；终止液；平板盖片，粘合带。
测定方案：
在含有非必须氨基酸、丙酮酸钠(1mM)、L-谷氨酸(1％)和10％小牛血清的MEM(Earles)中生长的U87MG细胞的培养物通过胰蛋白酶-EDTA分开，并悬浮在细胞生长培养基中。细胞然后铺板在纤连蛋白(600ng/孔)-包被的96-孔平底板上，每个孔1.7x 104细胞，在60uL细胞生长培养基中，和在CO2培养箱中37℃温育过夜。
化合物稀释物由10mM DMSO原液通过在细胞培养基中稀释进行制备，在测定中DMSO的最终浓度为0.6％。60uL的测试化合物作为2x浓度(化合物在4μM-1.3nM之间浓度进行测定)加入到化合物温育孔中；60μL含有1.3％DMSO的细胞测定培养基加入到阳性对照。细胞然后与混合物在37℃温育2h。培养物通过抽出除去，和细胞通过在每个孔中加入20uL冰冷却的细胞裂解缓冲液进行裂解。平板保持在冰上20min，并在每个孔中加入50uL的标准稀释液。每个孔的50uL的细胞裂解物转移至测定平板中的各个孔，并且50uL的检测抗体加入到所有孔中，除了不是抗体对照孔的H1-H6。捕获测定板在冷房间中温育过夜。
在温育细胞裂解物和在ELISA板中检测抗体之后，该孔用120uL的洗涤缓冲液(1x)洗涤4次，然后加入100uL的稀释的HRP偶联的抗体(在稀释液中1∶100稀释)到每个孔，并且该平板在室温温育30min。该孔然后用120uL的洗涤缓冲液(1x)洗涤4次，和100uL的色原加入到每个孔，并在黑暗中在室温下温育5-10min。每个孔中加入100uL的终止液和在450nm、0.1s测量吸收。
在化合物存在下与阳性和阴性对照(没有化合物的细胞和没有检测抗体被加入)得到的测定信号的比较使得在一个范围的化合物浓度上的二氧磷基-FAK[Y397]的抑制程度被测定。这些抑制值拟合为弯曲的剂量-应答抑制曲线以确定IC50值(即，50％抑制FAK磷酸化作用的化合物的浓度)。以上描述的测定进行修改以确定50％(v/v)小鼠或人血浆中内含物的影响。在该测定中，化合物板制备为100uL的100％小鼠或人血浆中2x浓度，并且其60uL加入到60uL的培养基中，和在37℃培养箱中温育2h。测定的剩余部分如以上描述进行。
在表2和3中，以下定义适用：A：＜1μM；B：1-10μM；C：＞10μM。
表2
Figure BPA00001479300902411
Figure BPA00001479300902421
表3
Figure BPA00001479300902441
Figure BPA00001479300902451
Figure BPA00001479300902461
Figure BPA00001479300902471
表4示出在人和小鼠血浆中化合物的U87MG细胞机理数据。
表4
Figure BPA00001479300902481
组合物
本发明包括含有本发明的化合物或其药学上可接受盐的药物组合物，其被制剂用于给与的期望模式，具有或不具有一种或多种药学上可接受和有用的载体。化合物也可以包括在药物组合物中，结合一种或多种其它治疗活性化合物。
本发明的药物组合物包括作为活性化合物的本发明的化合物(或其药学上可接受盐)、任选的药学上可接受载体(一种或多种)以及任选的其它治疗成分或佐剂。组合物包括适合于口服、直肠、局部和肠胃外(包括皮下、肌肉内和静脉内)给与，虽然在任何特定情况中的最合适途径将取决于具体的受体、活性成分被给与的状况的性质和严重性。药物组合物可以以单位剂量形式方便地存在，并且通过药学领域任一熟知的方法进行制备。
本发明的化合物可以与根据常规药学上配合技术结合作为固有混合物中的活性成分。根据期望用于给与的制剂的形式，例如口服或肠胃外(包括静脉内)，载体可以采用各种不同形式。因此，本发明的药物组合物可以呈现为适合于口服给与给与的分离单元，诸如胶囊、扁囊剂或片剂，每个含有预定量的活性成分。进一步地，组合物可以呈现为粉剂、颗粒剂、溶液剂、水性液体中的悬浮液、非水性液体、水包油乳剂或者油包水液体乳剂。除了以上说明的通常的剂型之外，式1表示的化合物或其药学上可接受的盐业也可以通过控释装置和/或递送设备给与。一般而言，这些方法包括使活性成分与载体结合的步骤，所述载体构成一种或多种必要成分。一般而言，组合物通过均匀和密切地混合活性成分与液体载体或精细分割的固体载体或者两者进行制备。产物然后可以便利地形成为期望呈现的形状。
使用的药物载体例如可以是固体、液体或气体。固体载体的实例包括乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明胶、琼脂、阿拉伯胶、刺槐、硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体的实施例是糖浆、花生油、橄榄油和水。气态载体的实施例包括二氧化碳和氮气。
含有本发明的组合物的片剂可以通过压缩或模制进行制备，任选地与一种或多种附属的成分或佐剂在一起。压缩的片剂可以通过在合适机器中压缩进行制备，自由流动形式诸如粉末或颗粒的活性成分任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂进行混合。模制片剂可以通过在合适机器中模制、用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物进行制备。每个片剂优选地含有约0.05mg至约5g的活性成分，和每个扁囊剂或胶囊优选地含有约0.05mg至约5g的活性成分。
意欲用于口服给与到人的制剂可以包含约0.05mg至约5g的活性成分，与合适和方便量的载体材料进行配合，所述载体材料可以占总的组合物的约5％至约95％。单位剂量形式一般含有约1mg至约2g之间的活性成分，典型地为25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
本发明的化合物可以高纯度地被提供用于制剂，例如按重量计至少90％、95％或98％纯。
适合于肠胃外给与的本发明的药物组合物可以制备为水中的活性化合物的溶液或悬浮液。合适的表面活性剂可以包括例如，诸如，羟丙基纤维素。分散体也可以在甘油、液体聚乙二醇和在油中的其混合物进行制备。进一步地，防腐剂可以被包括，以防止微生物的有害生长。
适合于可注射使用的本发明的药物组合物包括无菌水溶液或分散体。而且，组合物可以是以这种无菌可注射溶液或分散体的临时准备的无菌粉剂的形式。在所有情况中，最终的可注射形式必须是无菌的，和必须是容易可注射(syringability)有效流动的。药物组合物在制造和贮存的条件下必须是稳定的；因此，优选地应该预防微生物诸如细菌和真菌的污染作用地被保存。载体可以是溶剂或者分散介质，例如含有水、乙醇、多羟基化合物(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、植物油和其合适的混合物。
本发明的药物组合物可以是适合于局部使用的形式，诸如，例如，气雾剂、乳膏、软膏、洗剂、爽身粉(dusting powder)等等。进一步地，组合物可以是适合于在透皮装置中使用的形式。这些制剂可以使用本发明的式1或其药学上可接受的盐经过常规加工方法进行制备。作为实施例，乳膏或软膏通过混合亲水物质和水进行制备，在一起它们占化合物的约5wt％至约10wt％，以产生具有期望稠度(consistency)的乳膏或软膏。
本发明的药物组合物可以是以适合于直肠给与的形式，其中载体是固体。优选地是混合物形成单位剂量栓剂。合适载体包括可可脂和其它在本领域中通常使用的材料。栓剂可以通过首先将组合物与软化或熔融的载体(一种或多种)混合、然后在模中冷却和成形方便地形成。
除了前述载体成分之外，以上描述的药物制剂适当时可以包括一种或多种另外的载体成分，诸如稀释剂、缓冲剂、矫味剂、粘合剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等等。而且，其它佐剂可以被包括，以使得制剂与意欲的接受者的血液等渗。含有式1描述的化合物或其药学上可接受盐的组合物也可以以粉剂或者浓缩液形式进行制备。
用途
本发明的化合物抑制动物——包括人中的酪氨酸激酶的活性，和在治疗和/或预防各种疾病和状况——诸如增生过多的病症，例如癌症——中是有用的。具体地，本发明的化合物和其组合物是FAK的抑制剂，并在治疗至少部分由FAK调节的状况中是有用的。
在一些方面，本发明包括治疗癌症的方法，包括给与需要其的哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或盐。
在一些方面，本发明包括治疗至少部分地由FAK调节的癌症的方法，包括给与需要其的哺乳动物治疗有效量的式1的化合物或盐。
在一些方面，本发明包括治疗的方法或者制造用于治疗癌症的药物的方法，诸如以上那些，所述癌症至少部分地由FAK调节，包括给与需要其的哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或盐。
本发明的式1的化合物在治疗各种癌症中是有用的，所述癌症包括但不限于：实体瘤，肉瘤，纤维肉瘤，骨瘤，恶性黑色素瘤，视网膜母细胞瘤，横纹肌肉瘤，胶质母细胞瘤，神经母细胞瘤，畸胎瘤，造血恶性肿瘤，和恶性腹水。更具体地说，癌症包括但不限于：肺癌，膀胱癌，胰腺癌，肾癌，胃癌，乳腺癌，结肠癌，前列腺癌(包括骨转移瘤)，肝细胞癌，卵巢癌，食管鳞状细胞癌，黑色素瘤，间变性大细胞淋巴瘤，炎症性肌纤维母细胞瘤，和胶质母细胞瘤。
在一些方面，上述方法用于治疗一种或多种膀胱癌、大肠癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、或胰腺癌。在一些方面，上述方法用于治疗一种或多种卵巢癌、胃癌、头和颈部癌、前列腺癌、肝细胞癌、肾癌、神经胶质瘤或肉瘤癌。
在一些方面，本发明包括方法，包括以上的方法，其中所述化合物用于抑制细胞上皮间质转化(cellular epithelial to mesenchymal transition)(EMT)。
在一些方面，方法还包括给与至少部分另外活性剂。在一些方面，本发明包括治疗癌症的方法，包括给与需要其的哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或盐，其中至少一种另外的活性抗癌剂用作为所述方法的部分。
在一些方面，本发明包括治疗癌症的方法，包括给与需要其的哺乳动物治疗有效的方案，所述方案包括式1的化合物或盐以及至少一种另外的活性剂。
一般而言，在每天约0.01mg/kg至约150mg/kg体重级别的剂量水平在治疗上述状况是有用的，或可选地为每个病人每天约0.5mg至约7g。例如，炎症、癌症、牛皮癣、过敏/哮喘、免疫系统的疾病和状况、中枢神经系统(CNS)的疾病和状况可以通过给与每天每公斤的体重的约0.01至50mg的化合物是有用的，或可选地每个病人每天约0.5mg至约3.5g。
但是，应该理解，任何具体病人的具体剂量将取决于各种因素，包括年龄、体重、总体健康、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物组合和进行治疗的具体疾病的严重性。
总的定义和缩写
除非另外指出，以下总的惯例和定义适用。除了在本文另外指出，语言和术语给与如本领域技术人员所理解的它们最宽的合理解释。给出的任何实施例是非限制性的。
本文的任何标题或副标题是为了阅读者的方面和/或形式顺从，并不是限制的。
本文化合物的列举是开放的，和包含含有列举化合物的任何物质或组合物(例如，含有消旋异构体、互变异构体、差向异构体、立体异构体、不纯的混合物等等)。由于化合物的盐、溶剂合物或、水合物、多晶形物、或其它络合物包括化合物自身，化合物的列举包括含有这些形式的物质。同位素标记的化合物也被包括，除了当特定排除之外。例如，氢不限于含有零个中子的氢。
本发明的术语″活性剂″指以任何盐、多晶形物、晶体、溶剂合物或水合形式的化合物。
术语“药学上可接受的盐(一种或多种)”在本领域是已知的，和包括酸或碱基团的盐，其可以在化合物中存在和被制备，或者由药学上可接受的碱或酸产生。
在本文术语“取代的”和在式中含有的取代指用指定的基团替代特定结构中的一个或多个氢基团，或者，如果没有指定，用任何化学上可行的基团替代。当在特定结构中的多于一个位置可以用多于一个的选自指定基团的取代基取代时，取代基在每一个位置可以是相同的或不同的(独立地选择)，除非另外指出。在一些情况中，特定结构中的两个位置可以用一个共同的取代基取代。应该理解化学上不可能或者高度不稳定的结构是不期望的或意欲的，如本领域技术人员所意识到。
在说明书和权利要求书中，当主题(例如，在特定分子位置的取代)被列举为选自可能性的组时，列举特定意欲包括列举基团的任何子集。在多个可变位置或取代基的情况下，也考虑组或可变子集的任何组合。
除非另外指出，取代基、双基或其它基团在本文可以通过任何合适位置结合到引用的主题分子。例如，术语“吲哚基”包括1-吲哚基、2-吲哚基、3-吲哚基等等。
描述某些部分的碳含量的惯例是″(Ca-b)″或“Ca-Cb”，指该部分可以含有“a”至“b”个碳原子的任何数量。C0烷基指：当其是连接部分时，单共价化学键，和当是末端部分时，氢。类似地，″x-y″可以指含有x至y个原子的部分，例如，5-6杂环烷基指具有5个或6个环成员的杂环烷基。″Cx-y″可以用于定义基团中碳的数量。例如，“C0-12烷基”指具有0-12个碳原子的烷基，其中C0烷基指：当是连接基团时，单个共价化学键，和当是末端基团时，氢。
术语“不存在”，如本文使用描述可变的结构(例如，“-R-是不存在”)指双基R不具有原子，和仅代表在其它邻接原子之间的键，除非另外指出。
除非另外指出(例如通过连接″-″)，化合物名称部分的连接是在最右边的列举部分。即，取代基名称开始于末端部分，以任何桥连部分继续，和以连接部分结束。例如，″杂芳基硫代C1-4烷基”是通过通过硫代硫连接至C1-4烷基的杂芳基，该烷基连接至具有取代基的化学种类。
术语″脂肪族″指任何烃部分，和可以包含直链、支链和环状部分，并可以是饱和或未饱和的。
术语″烷基″指是直链或支链的任何饱和烃基团。烷基的实施例包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基等等。
术语″链烯基″指任何烯键式不饱和直链或支链烃基。代表性的实施例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等等。
术语″炔基″指任何炔键式不饱和直链或支链烃基。代表性的实施例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等等。
术语“烷氧基”指-O-烷基、-O-链烯基或-O-炔基。″卤代烷氧基″指--O-(卤代烷基)基团。代表性实施例包括但不限于三氟甲氧基、三溴甲氧基等等。
″卤代烷基″指用一个或多个相同或不同卤原子取代的烷基，优选为低级烷基。
″羟基烷基″指用一个、两个或三个羟基取代的烷基，优选为低级烷基；例如，羟甲基，1或2-羟基乙基，1，2-，1，3-，或2，3-二羟基丙基等等。
术语“烷酰基”指-C(O)-烷基、-C(O)-链烯基或-C(O)-炔基。
″烷基硫代″指--S-(烷基)或--S-(未取代的环烷基)基团。代表性的实施例包括但不限于甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基、环丙基硫基、环戊基硫基、环己基硫基等等。
术语″环″指具有或不具有杂原子(N，O，或S(O)0-2)的任何环系统，且可以是饱和的或未饱和的。环系统可以是桥环的，和可以包括稠环。环系统的实例可以使用术语诸如″x-y环″，其指可以具有x至y个环原子的环状系统。例如，术语“9-10碳环”指可以是饱和的、未饱和的或芳香的5，6或6，6稠双环碳环系统。它也可以指稠合一个5或6员饱和或未饱和的碳环基团的苯基。这些基团的非限制性实施例包括萘基、1，2，3，4四氢萘基、茚基、2，3-二氢化茚基等等。
术语“碳环”指在环(一个或多个)中只含有碳原子的环状环部分，不考虑芳香性。3-10员碳环指化学上可行的具有3至10个环原子的单环和稠合双环碳环。类似地，4-6员碳环指具有4至6个环碳的单环碳环环部分，和9-10员碳环指具有9至10个环碳的稠合双环碳环环部分。
术语″环烷基″指非芳香3-12个碳单环、双环、或多环脂肪族环部分。环烷基可以是双环烷基、多环烷基、桥环或螺环烷基。一个或多个环可以含有一个或多个双键，但是没有一个环具有完全共轭的π-电子系统。环烷基基团的没有限制的实例是环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己二烯、金刚烷、环庚烷、环庚三烯等等。
术语″未饱和碳环″指含有至少一个双键或三键的任何环烷基。术语″环链烯基″指在环部分具有至少一个双键的环烷基。
术语“双环烷基”和“多环烷基”指由具有两个或更多个共同的原子的两个或更多个环烷基部分组成的结构。如果环烷基部分正好具有两个共同的原子的，它们被称为是“稠合的”。实例包括但不限于双环[3.1.0]己基、全氢萘基等等。如果环烷基部分具有多于两个的共同原子，它们称为是“桥连的”。实施例包括但不限于双环[2.2.1]庚基(“降莰基”)、双环[2.2.2]辛基等等。
术语“螺烷基”指由恰好具有一个共同原子的两个环烷基部分组成的结构。实例包括但不限于螺[4.5]癸烷、螺[2.3]己基等等。
术语“芳族”指含有4n+2pi电子的平面环部分，其中n是整数。
术语“芳基”指在其环系统中只含碳原子的芳香族部分。非限制性实施例包括苯基、萘基和蒽基。术语“芳基-烷基”或″芳基烷基″或“芳烷基”指与末端芳基形成桥连部分的任何烷基。
″芳烷基″指烷基，优选为低级烷基，其被如上定义的芳基取代；例如，--CH2苯基、--(CH2)2苯基、--(CH2)3苯基、CH3CH(CH3)CH2苯基等等，以及其衍生物。
术语″杂环″指含有至少一个杂原子(N，O，或S(O)0-2)的环状环部分，包括杂芳基、杂环烷基——包括不饱和的杂环环。
术语“杂环烷基”指3-12个环原子的非芳香单环、双环、或多环杂环环部分，含有至少一个具有一个或多个杂原子的环。环也可以具有一个或多个双键。但是，环不具有完全共轭的π-电子系统。杂环烷基环的实例包括：氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢吡喃、氧杂环戊烷、氧杂环辛烷、硫杂环丁烷、噻唑烷、
Figure BPA00001479300902541
唑烷、氧氮杂环丁烷、吡唑烷、异
Figure BPA00001479300902542
唑烷、异噻唑烷、四氢噻吩、四氢噻喃、硫杂环戊烷、硫杂环己烷、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、N-甲基哌啶、氮杂环戊烷、1，4-二氮杂草、氮杂环己烷、[1，3]二氧杂环乙烷、
Figure BPA00001479300902543
唑烷、哌嗪、高哌嗪、吗啉、硫代吗啉、1，2，3，6-四氢吡啶等等。杂环烷基环的其它实例包括含硫环的氧化形式。因此，四氢噻吩-1-氧化物、四氢噻吩-1，1-二氧化物、硫代吗啉-1-氧化物、硫代吗啉-1，1-二氧化物、四氢噻喃-1-氧化物、四氢噻喃-1，1-二氧化物、噻唑烷-1-氧化物和噻唑烷-1，1-二氧化物也被认为是杂环烷基环。术语“杂环烷基”也包括稠合环系统和可以包括部分或全部不饱和的碳环环，诸如苯环，以形成苯并稠合杂环烷基环。例如，3，4-二氢-1，4-苯并二氧环己烯、四氢喹啉、四氢异喹啉等等。术语“杂环烷基”也包括杂双环烷基、杂多环烷基或杂螺烷基，其是双环烷基、多环烷基、或螺烷基，其中一个或多个碳原子被一个或多个选自O、N和S的杂原子替代。例如，2-氧杂-螺[3.3]庚烷、2，7-二氮杂-螺[4.5]癸烷、6-氧杂-2-硫杂-螺[3.4]辛烷、八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪、7-氮杂-双环[2.2.1]庚烷、2-氧杂-双环[2.2.2]辛烷等等是这样的杂环烷基。
饱和杂环基团的实施例包括、但不限于：环氧乙烷基、环硫杂乙烷基(thiaranyl)、吖丙啶基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基(thiatanyl)、氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吡咯烷基、1，4-二氧杂环己基、1，4-氧硫杂环己基、吗啉基、1，4-二噻烷基、哌嗪基、1，4-吖噻烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氮杂环庚烷基、1，4-二氧杂环庚烷基、1，4-氧硫杂环庚烷基、1，4-氧氮杂环庚烷基、1，4-二硫杂环庚烷基、1，4-氧硫氮杂环庚烷基、1，4-二氮杂环庚烷基。
非芳基杂双环基团包括饱和和不饱和系统，和可以包括在它们的环系统中只有4个原子的基团。杂环基团包括苯并-稠合环系统和用一个或多个氧代部分替代的环系统。硫环的列举被理解是当可行时包括硫醚、亚砜或砜。杂环基团也包括部分不饱和或全饱和的4-10员环系统，例如，大小为4至8个原子的单环和双环系统，包括芳香的6-员芳基或稠合非芳香环的杂芳基环。也包括是4-6员环系统(“4-6员杂环”)，其包括5-6员杂芳基，和包括基团诸如氮杂环丁烷基和哌啶基。杂环可以是当这种是可能时的杂原子连接的。例如，衍生自吡咯的基团可以是吡咯-1-基(N-连接的)或吡咯-3-基(C-连接的)。其它杂环包括咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基和苯并咪唑-1-基。
杂环基团的实例包括吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫吗啉代(thiomorpholino)、噻
Figure BPA00001479300902544
烷基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁基(thietanyl)、高吡咯烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂环戊基(oxazepinyl)、二氮杂环戊基(diazepinyl)、硫氮杂环戊基(thiazepinyl)、1，2，3，6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己基、1，3-二氧杂环戊基(dioxolanyl)、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊基(dithiolanyl)、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑啶基、咪唑啶基、咪唑啉基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基、喹嗪基等等。
术语″不饱和杂环″指含有至少一个不饱和键的杂环烷基。术语“杂双环烷基”指其中至少一个碳原子用杂原子替代的双环烷基结构。术语“杂螺烷基”指其中至少一个碳原子用杂原子替代的螺烷基结构。
部分未饱和杂脂环的实例包括但不限：3，4-二氢-2H-吡喃基、5，6-二氢-2H-吡喃基、2H-吡喃基、1，2，3，4-四氢吡啶基，和1，2，5，6-四氢吡啶基。
术语“杂芳基”(″heteroaryl″或“hetaryl”)表示单环的、双环的或多环的5-12个环原子的基团。这样的杂芳基环的实例包括、但不限于：呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、
Figure BPA00001479300902551
唑基、异唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、
Figure BPA00001479300902553
二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、和三嗪基。术语“杂芳基”也包括具有部分或完全不饱和的稠合的碳环系统的杂芳基环，诸如苯环，以形成苯并稠合的杂芳基。例如，苯并咪唑、苯并
Figure BPA00001479300902554
唑、苯并噻唑、苯并呋喃、喹啉、异喹啉、喹喔啉等。此外，术语”杂芳基”包括稠合的5-6、5-5、6-6环系统，其任选地具有1个在环接头处的氮原子。这样的杂芳基环的实例包括、但不限于：吡咯并嘧啶基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑并[4，5-b]吡啶、吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪基等。如果适用，杂芳基可以通过它们的碳原子或杂原子连接到其它基团上。例如，吡咯可以在氮原子或在任意碳原子处连接。
杂芳基包括例如5和6员单环，诸如吡嗪基和吡啶基，和9和10员稠合双环部分，诸如喹啉基。杂芳基的其它实施例包括喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、和吡啶-2-基。杂芳基的其它实例包括吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异
Figure BPA00001479300902555
唑基、噻唑基、
Figure BPA00001479300902556
唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、肉啉基、吲唑基、二氢吲哚基(indolizinyl)、2，3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、
Figure BPA00001479300902557
二唑基、噻二唑基、呋咕基、苯并呋咕基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并
Figure BPA00001479300902558
唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基、呋吡啶基(furopyridinyl)等等。5-6员杂芳香基的实例包括：噻吩基、异
Figure BPA00001479300902559
唑基、1，2，3-三唑基、1，2，3-
Figure BPA000014793009025510
二唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-三唑基、1，3，4-二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-
Figure BPA000014793009025512
二唑基、1，2，5-噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1，2，4-
Figure BPA000014793009025513
二唑基、1，2，5-三嗪基、1，3，5-三嗪基等等。
″杂芳烷基″基团指烷基，优选为低级烷基，其被杂芳基取代；例如，--CH2吡啶基、--(CH2)2嘧啶基、--(CH2)3咪唑基等等，以及其衍生物。
药学上可接受的杂芳基是足够稳定地连接到本发明的化合物、制剂成为药物组合物和随后给与到需要其的患者的一种。
单杂芳香基的实例包括、但不限于：吡咯基、呋喃基，噻吩基、吡唑基、咪唑基，异
Figure BPA00001479300902561
唑基、
Figure BPA00001479300902562
唑基、异噻唑基、噻唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、1-氧杂-2，3-二唑、1-氧杂-2，4-二唑、1-氧杂-2，5-二唑、1-氧杂-3，4-二唑、1-硫杂-2，3-二唑、1-硫杂-2，4-二唑、1-硫杂-2，5-二唑、1-硫杂-3，4-二唑、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基。
稠合环杂芳基的实例包括、但不限于：苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[3，2-c]吡啶基、吡咯并[3，2-b]吡啶基、咪唑并[4，5-b]吡啶基、咪唑并[4，5-c]吡啶基、吡唑并[4，3-d]吡啶基、吡唑并[4，3-c]吡啶基、吡唑并[3，4-c]吡啶基、吡唑并[3，4-b]吡啶基、异吲哚基、吲唑基、嘌呤基、二氢吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[1，5-a]吡啶基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、吡咯并[1，2-b]哒嗪基、咪唑并[1，2-c]嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、肉啉基、氮杂喹唑啉(azaquinazoline)、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基、1，6-二氮杂萘基、1，7-二氮杂萘基、1，8-二氮杂萘基、1，5-二氮杂萘基、2，6-二氮杂萘基、2，7-二氮杂萘基、吡啶并[3，2-d]嘧啶基、吡啶并[4，3-d]嘧啶基、吡啶并[3，4-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-b]吡嗪基、吡啶并[3，4-b]吡嗪基、嘧啶并[5，4-d]嘧啶基、嘧啶并[2，3-b]吡嗪基、嘧啶并[4，5-d]嘧啶基。
″芳硫基″指如本文定义的--S-芳基或--S-杂芳基基团。代表性实施例包括但不限于苯硫基、吡啶硫基、呋喃硫基、噻吩硫基、嘧啶硫基等等，以及其衍生物。
术语“9-10员杂环”指稠合的5，6或6，6双环杂环环部分，其可以是饱和的、不饱和的或芳香性的。术语“9-10员稠合的双双杂环”也指苯基稠合一个5或6员杂环基。实例包括苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并
Figure BPA00001479300902563
唑基、3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-基、二氢酞嗪基、1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基、咪唑并[4，5-b]吡啶基、1，3-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、2H-苯并二氢吡喃基、异苯并二氢吡喃基、5-氧代-2，3二氢-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶基、1，3-苯并噻唑基、1，4，5，6四氢哒嗪基、1，2，3，4，7，8六氢化蝶啶基、2-硫代-2，3，6，9-四氢-1H-嘌呤-8-基、3，7-二氢-1H-嘌呤-8-基、3，4-二氢嘧啶-1-基、2，3-二氢-1，4-苯并二氧己烯基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、2H-色烯基、苯并二氢吡喃基、3，4-二氢2，3-二氮杂萘基、2，3-二氢-1H-吲哚基、1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基、2，4，7-三氧代-1，2，3，4，7，8-六氢化蝶啶-基、噻吩并[3，2-d]嘧啶基、4-氧代-4，7-二氢-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-基、1，3-二甲基-6-氧代-2-硫代-2，3，6，9-四氢-1H-嘌呤基、1，2-二氢异喹啉基、2-氧代-1，3-苯并
Figure BPA00001479300902564
唑基、2，3-二氢-5H-1，3-噻唑并-[3，2-a]嘧啶基、5，6，7，8-四氢-喹唑啉基、4-氧代苯并二氢吡喃基、1，3-苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、嘌呤基、呋喃并吡啶基、噻吩并嘧啶基、噻吩并吡啶基、吡咯并吡啶基、
Figure BPA00001479300902565
唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、3，4-二氢嘧啶-1-基咪唑基吡啶基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基、吡唑并[3，4]吡啶、1，2-二氢异喹啉基、肉啉基、2，3-二氢-苯并[1，4]二氧环己烯4-基、4，5，6，7-四氢-苯并[b]-噻吩基-2-基、1，8-二氮杂萘基、1，5-二氮杂萘基、1，6-二氮杂萘基、1，7-二氮杂萘基、3，4-二氢-2H-1，4-苯并噻嗪、4，8-二羟基-喹啉基、1-氧代-1，2-二氢-异喹啉基、4-苯基-[1，2，3]噻二唑基等等。
″芳氧基″指如本文定义的--O-芳基或--O-杂芳基。代表性实施例包括、但不限于：苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基等等，以及其衍生物。
本领域技术人员理解“氧代”需要与氧代连接的原子的第二个键。因此，应该理解氧代不可以被取代在芳基或杂芳基环之上。
术语“卤素”(″halo″或″halogen″)指氟、氯、溴或碘。
″酰基″指-C(O)R基团，其中R可以选自以下非限制的基团：氢、或任选取代的低级烷基、三卤素化甲基、未取代的环烷基、芳基。″硫代酰基″或″硫代羰基″指--C(S)R″基团，其中R为如上定义。
术语“保护基团”指可以连接至官能团和在稍后阶段中除去以暴露完整的官能团的合适的化学基团。各种官能团的合适的保护基团的实例在以下描述：OrganicSynthesis，第二版，John Wiley和Sons(1991和稍后版本)；L.Fieser和M.Fieser，Fieser和Fieser′s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley和Sons(1994)；和L.Paquette，ed.Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley和Sons(1995)。除非另外指出，如本文使用的术语“羟基保护基团”包括Ac、CBZ和本领域技术人员熟知的各种羟基保护基团，包括在Greene中提到的基团。
如本文使用，术语″药学上可接受的盐″指保持母体化合物的生物有效性和性质、并不呈现难以克服的安全性或毒性问题的那些盐。
术语“药物组合物”指以任何形式适合于有效给与到对象的活性化合物，例如，混合物和至少一种药学上可接受的载体的混合物。
如本文使用，生理上/药学上可接受的载体”指不会引起对生物体的显著的刺激并且不取消给与化合物的生物活性和性质的载体或稀释剂。
″药学上可接受的赋形剂″指加入到药物组合物中以进一步促进化合物的给与的惰性物质。赋形剂的非限制的实例包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖和各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。
术语“治疗”(“treat，”“treatment，”和“treating”)指逆转、减轻、抑制这种术语应用的病症或状况的进展，或部分或完全地阻止这种术语应用的病症或状况，或这种病症或状况的一种或多种症状。“预防”指在感染出现之前治疗。
“治疗有效量”指被给与的化合物的量，其将在一定程度上缓解被治疗的病症的一种或多种的症状，或导致该进展的抑制或状况的至少部分的逆转。
以下缩写被使用：
min. 分钟(一分钟或多分钟)
h 小时(一小时或多小时)
d 天(一天或多天)
RT或rt 室温
tR 保留时间
L 升
mL 毫升
mmol 毫摩尔
μmol 微摩尔
equiv.或eq.相等
NMR 核磁共振
MDP(S) 质量定向的HPLC纯化(系统)
LC/MS 液相色谱法质谱法
HPLC 高效液相色谱
TLC 薄层色谱法
CDCl3 氘化的氯仿
CD3OD或MeOD 氘化的甲醇
DMSO-d6 氘化的二甲基亚砜
LDA 异丙胺基锂
DCM 二氯甲烷
THF 四氢呋喃
EtOAc 乙酸乙酯
MeCN 乙腈
DMSO 二甲基亚砜
Boc 叔丁氧基羰基
DME 1，2-二甲氧基乙烷
DMF N，N-二甲基基甲酰胺
DIPEA 二异丙基乙胺
PS-DIEA 聚合物-支撑的二异丙基乙胺
PS-PPh3-Pd 聚合物支撑的Pd(PPh3)4
EDC 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺
HOBt 1-羟基苯并三唑
DMAP 4-二甲基氨基吡啶
TBTU O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基氢化脲(uranium)四氟硼酸
TEMPO 2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基
TFA 三氟乙酸

Claims (20)

1.式1的化合物：
Figure FPA00001479300800011
其中：
R1是卤素、-CF3、或-CCH；
Q2至Q4的至少一个是＞C-X1-R2；
Q1和剩下的Q2至Q4独立地是＞CH、＞CF、＞N、或＞N-氧化物；
X1和X2独立地是-(CR7R8)0-2-；
R7和R8中的每一个独立地是卤素、C0-3脂肪族或-OC0-3脂肪族，两个中的任一个为任选的卤素取代，除了在X2、R7和R8不是卤素或-OC0-3脂肪族的情况之外；
R6是卤素、-OC0-3脂肪族或C0-3脂肪族，两个中任一个由一个或多个卤素或由-OCF3取代；
R2是-P(O)R9R10；
R9和R10独立地是C0-3脂肪族，两个中的任一个可以在它们原子的任一原子处结合在一起以形成环，其中前述的任一个可以被一个或多个卤素、C0-6脂肪族或3-6环进一步地取代；
R是
Figure FPA00001479300800012
Q6、Q7、或A中的一个是＞CR4；
Q5和剩下的Q6至Q7以及A独立地是＞CH、＞CF、＞N或＞N-氧化物；
R3是C0-6脂肪族、-S(O)2R11、-S(O)2NR11R12、-C(O)NR11R12、-C(O)OR11；-NR11S(O)2R12、或-NR11R12；
R11和R12独立地是C0-6脂肪族，其可以在它们的原子的任一个处结合在一起以形成含有1-3个杂原子的环；
或可选地，R3和A限定任意任选取代的含有一个或多个杂原子的5-6环；
R4是4-6环、-OC0-6脂肪族或C0-6脂肪族，每一个任选地被取代，或者卤素；
或其药学上可接受的盐。
2.权利要求1所述的化合物或盐，其中：
Q3是＞C-CH2-R2；和R9和R10独立地是C0-3烷氧基。
3.权利要求1或2任一所述的化合物或盐，其中R4是任选取代的环己基。
4.权利要求1所述的化合物或盐，具有式1a：
Figure FPA00001479300800021
其中：
X1和X2独立地是-(CR7R8)0-1-；
R是
Figure FPA00001479300800022
X1和X2独立为-(CR7R8)0-1-；
R是
Figure FPA00001479300800023
A是CH或N；
R1是卤素、-CF3或-CCH；
R2是-P(O)R9R10；
R3是-S(O)2R11、-S(O)2NR11R12、-C(O)NR11R12、-C(O)OR11；-NR11S(O)2R12、或-NR11R12；
R4是-x-y-z，其中：
x是4-6环；y不存在或是4-6杂环；和z不存在或是1-2羟基任选取代的C1-3烷基或C1-6烷氧基，或者z是羟基或者-C(O)O-C0-3烷基；或
-x-y-z是C0-6烷氧基、C2-6链烯基、C2-6炔基、或C0-6烷基，每一个任选地被1-2个羟基取代；
R5是C0-2烷基，其任选地被1-3个独立的羟基或卤素基团取代；
R6是卤素、-C0-3烷氧基、被卤素任选取代的-C0-3烷基、或-OCF3；
R7和R8每一个独立地是H或-CH3；
R9和R10独立地是羟基、C1-6烷氧基、或C0-6烷基——它们中的任一个在它们原子的任一个处结合在一起以形成环——、或芳基、-O-芳基、或4-6杂环，其中前述的任一个可以被3-6环进一步取代；
R11和R12独立地是C0-6烷基，它们可以在它们的原子的任一个处结合在一起以形成含有1-3个杂原子的环；R11或R12可以在它们的原子的任一个处与R3所连接的环结合以形成环。
5.权利要求1-4任一所述的化合物或盐，其中：
X1和X2独立地是键或亚甲基，且X1是氮连接位置的间位或对位；
R是
Figure FPA00001479300800031
A是CH或N；
R1是Cl、Br或-CF3；
R3是-N(CH3)S(O)2CH3或-C(O)NHCH3；和
R6是H或甲氧基。
6.权利要求4或5任一所述的化合物或盐，其中R9和R10独立地是C0-4烷氧基。
7.权利要求4-6任一所述的化合物或盐，其中X1位于R6间位的亚甲基。
8.权利要求4-7任一所述的化合物或盐，其中：
A是CH；
X2是键；
R1是-CF3；和
R3是-C(O)NHCH3.
9.权利要求1所述的化合物或盐，具有下式：：
Figure FPA00001479300800041
其中R6是H或甲氧基；和
R9和R10独立地是C0-3烷氧基。
10.权利要求4所述的化合物或盐，其中：
X1和X2独立地是键或亚甲基，且X1是氮连接位置的间位或对位；
R是
Figure FPA00001479300800042
R1是Br、Cl或-CF3；
R4是-x-y-z，其中
x是C4-6环烷基、苯基、吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、或哌嗪基；y不存在、哌啶基、或哌嗪基；和z不存在、被1-2羟基任选取代的C1-3烷基、或z是羟基或-C(O)O-C0-3烷基；或
-x-y-z是C0-6烷氧基、C2-6链烯基、C2-6炔基、或C0-6烷基，每一个被1-2羟基任选地取代；
R5是甲基；和
R6是H或甲氧基。
11.权利要求10所述的化合物或盐，其中R9和R10独立地是C0-3烷氧基。
12.权利要求1所述的化合物或盐，其中R4是任选地被羟基取代的C4-6环烷基、任选地被N-甲基取代的哌嗪基、-C(O)O-C0-3烷基或任选地被1-2羟基取代的C1-3烷基。
13.权利要求10或11所述的化合物或盐，其中：
X1是位于R6间位的亚甲基；
X2是键；
R1是-CF3；和
R4是-x-y-z，其中
x是C4-6环烷基、苯基、吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、或哌嗪基；
y不存在；和
z不存在、任选地被1-2羟基取代的C1-3烷基、羟基、或-C(O)O-C0-3烷基。
14.化合物，其选自本文实施例1-329的任一个或其药学上可接受的盐。
15.权利要求1-14任一的化合物或盐，其是作为以基本纯的形式的物质存在。
16.权利要求1-15任一的化合物或盐，其在MIA-PaCa2或U87MG测定中显示具有大约1μM或更小的IC50的抑制。
17.权利要求1-16任一的化合物或盐，其具有至少约30％的口服生物利用度(F)。
18.权利要求1-17任一的化合物或盐，其在小鼠中对于20mg/kg剂量显示至少约2μgh/mL的口服暴露AUC(0-∞)。
19.药物组合物，包括权利要求1-18任一的化合物或盐，用或不用一种或多种药物载体进行制剂。
20.治疗至少部分由FAK调节的癌症的方法，包括给与需要其的哺乳动物治疗有效量的权利要求1-18任一的化合物或盐。
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