CN102378913A - 用于分析的方法和装置 - Google Patents

用于分析的方法和装置 Download PDF

Info

Publication number
CN102378913A
CN102378913A CN2010800152790A CN201080015279A CN102378913A CN 102378913 A CN102378913 A CN 102378913A CN 2010800152790 A CN2010800152790 A CN 2010800152790A CN 201080015279 A CN201080015279 A CN 201080015279A CN 102378913 A CN102378913 A CN 102378913A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
carrier
soluble
separating
device part
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2010800152790A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102378913B (zh
Inventor
森干永
片田顺一
小山田孝嘉
唐木英行
小西正康
寺田大树
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujifilm Corp
Original Assignee
Fujifilm Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujifilm Corp filed Critical Fujifilm Corp
Publication of CN102378913A publication Critical patent/CN102378913A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102378913B publication Critical patent/CN102378913B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
    • G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing

Abstract

本发明公开了一种用于分析的装置，所述装置可以使溶液均匀地显影，并且执行高度准确和灵敏的测量。第一装置部分(10)将第二不可溶解载体(12)和第三不可溶解载体(13)保持为使得所述第二不可溶解载体和所述第三不可溶解载体在第一不可溶解载体(11)的检测部分(14)处彼此重叠。这三个载体(11)、(12)和(13)以彼此不接触的方式容纳。具有平行于检测部分(14)的推压表面(18a)的推压单元(18)设置在第二装置部分(20)的面向检测部分(14)的内表面上。推压表面(18a)通过被推压向检测部分(14)而移动，并且从第一不可溶解载体(11)的上侧将第二不可溶解载体(12)和第三不可溶解载体(13)推压到第一不可溶解载体(11)上。第一装置部分(10)和第二装置部分(20)连结在一起。

Description

用于分析的方法和装置
技术领域
本发明涉及一种用于分析的方法和一种用于分析的装置，所述方法和所述装置可以对含有分析物的样品执行高度灵敏且高度准确的定性分析和定量分析。
背景技术
近年来提出了简单的各种装置，所述装置通过使样品溶液在所述装置中显影可以检测样品溶液中含有的分析物(要检测的物质)。此外，还销售用于毒物检测或类似检测的在活体外部的诊断剂和各种装置。所述实例中的一个是采用免疫层析法的装置。在免疫层析法中，不需要用于执行判断和测量的重型设备/仪器，并且操作简单。在免疫层析法中，可以仅仅通过将可以包含分析物的样品溶液滴到载体上并且保持样品溶液静置大约5-10分钟来获得测量结果。因此，免疫层析法是一种简单且快速的方法，并且可以以高专一性进行判断和测量。因此，免疫层析法广泛地用于例如在医院、用于研究的实验室测试和类似场所的临床实验室试验。
同时，即使诸如天然产物、毒素、激素和杀虫剂的许多生物活性物质的数量极少并且甚至通过使用传统的普通免疫层析法无法检测到，所述物质还作用于生物机体上。因此，需要可以迅速、容易且以高灵敏度检测这种物质的免疫层析法。为此，除简直地将含有分析物的样品溶液滴到载体上之外，例如，还采用以下方法来检测分析物。在含有分析物的样品溶液被滴到载体上以使分析物在载体上固定不动之后，通过洗涤液(清洗液)洗掉样品溶液。此外，固定的分析物被放置成与反应物质溶液、扩增溶液或类似物接触，以检测从分析物输出的放大信号。
例如，日本未经审查专利公开文献第2002-202307号(专利文献1)公开了一种可以以高灵敏度分析分析物的免疫层析法。在所述方法中，诸如金属胶体的扩增溶液被滴到检测部上。此外，日本专利第3309977号(专利文献2)公开了一种用于检测信号的方法。在所述方法中，在含有分析物的样品溶液被放置成与酶标抗体接触之后，样品溶液流向固定相载体，其中分析物捕获试剂已经被结合到所述固定相载体。因此，分析物的酶标抗体结合到载体上。此外，酶底物溶液流向固定相载体以使酶底物发生反映，并且检测信号。
在专利文献1和专利文献2中公开的免疫层析法中，信号可以通过酶或银被放大。因此，可以分析非常少量的分析物。
然而，在专利文献1和专利文献2中公开的免疫层析法中，由于诸如亲水性/疏水性和静电相互作用的分子相互作用与固定相载体不同，因此酶底物溶液、诸如金属胶体扩增溶液的信号放大溶液或诸如洗涤液的其它溶液的成分可能不会被均匀地发送到固定相载体。因此，使所述反应在固定相载体中难以均匀地或一致地发展。因此，限制了高度准确且高度敏度的检测。
发明内容
考虑到上述情况，本发明的一个目的是提供一种分析方法和一种用于分析的装置，所述方法和装置可以使溶液(液体)均匀地显影并执行高度准确且高度灵敏的测量。
本发明的分析方法为一种用于对样品溶液中含有的分析物执行定性分析或定量分析的分析方法，所述方法包括以下步骤：
将含有至少一种分析物的样品溶液发送到不可溶解载体上的检测部，所述检测部包括专门结合到分析物的物质；和
将测试剂溶液、扩增溶液和检测溶液中的至少一个发送到检测部，其中测试剂溶液、扩增溶液和检测溶液中的至少一个被喷射以装载到不可溶解载体与具有面向不可溶解载体的表面的构件之间的空隙中。
本发明的用于分析的装置为下述的用于分析的装置，所述装置包括：
复合部分，所述复合部分包括第一装置部分和第二装置部分，其中第一装置部分包括容纳在所述第一装置部分中的第一不可溶解载体，第一不可溶解载体具有检测部，所述检测部包括专门结合到分析物的物质，并且其中第二装置部分具有用于将溶液注射到第一装置部分中的孔，并且其中第二装置部分包括具有面向第一不可溶解载体的检测部的表面的一部分。
本发明的用于分析的装置可以为下述装置，所述装置包括：
复合部分，所述复合部分包括第一装置部分和第二装置部分，其中第一装置部分包括容纳在该第一装置部分中的第一不可溶解载体，第一不可溶解载体具有检测部，所述检测部包括专门结合到分析物的物质，并且其中第二装置部分具有用于将溶液注射到第一装置部分中的孔，并且其中用于使溶液显影的第二不可溶解载体和用于吸收溶液的第三不可溶解载体被容纳在复合部分中，并且其中第二不可溶解载体和第三不可溶解载体被保持成使得第二不可溶解载体和第三不可溶解载体在第一不可溶解载体的检测部处彼此重叠，并且其中第一不可溶解载体、第二不可溶解载体和第三不可溶解载体以使该第一不可溶解载体、该第二不可溶解载体和该第三不可溶解彼此不接触的方式容纳，并且其中具有面向第一不可溶解载体的检测部的推压表面的推压单元设置在第二装置部分中，从而面向第一不可溶解载体的检测部，并且其中推压表面通过被推压向检测部而移动，并且推压表面从第一不可溶解载体的上侧将第二不可溶解载体和第三不可溶解载体推压到第一不可溶解载体上。
当推压部分已经被推压向检测部时，理想的是检测部与推压表面之间的空隙在0.01-1mm的范围内。
理想的是通过邻接推压单元的一部分调节推压表面的位移的肋部设置在第一装置部分的内表面上，所述内表面面对推压单元。
理想的是可以将溶液发送到检测部与推压表面之间的空隙的溶液贮存罐被设置在第一装置部分和第二装置部分中的至少一个中。此外，理想的是溶液贮存罐通过层压膜被密封，并且含有银离子的扩增溶液已经被喷射到溶液贮存罐中。
在本发明的分析方法中，通过将含有至少一种分析物以及测试剂溶液、扩增溶液和检测溶液中的至少一个的样品溶液发送到不可溶解载体上的检测部对样品溶液中含有的分析物执行定性分析或定量分析。在所述分析方法中，当测试剂溶液、扩增溶液和检测溶液中的至少一个喷射以装载到不可溶解载体与具有面向不可溶解载体的表面的构件之间的空隙中时，可以通过空隙的毛细管作用或间隙的作用力使溶液均匀地显影。因此，可以进行高度准确且高度灵敏的测量。
附图说明
图1是显示根据本发明的实施例的用于分析的装置的分离状态的原理图；
图2是显示不可溶解载体被装载到第一装置部分之前的第一装置部分的结构的原理图；
图3是显示第二装置部分的内表面的结构的原理图；
图4是显示沿着图1中的线IV-IV截得的横截面的示图；和
图5是显示其中推压单元和密封破坏单元已经被推压的状态的示意性横截面图。
具体实施方式
在下文中将参照附图详细说明根据本发明的一个实施例的用于分析的装置。图1是显示本发明的用于分析的装置的一个实例的原理图。图1显示可以执行免疫测定(免疫学测定)的用于分析的装置的独立状态。图2是显示在将不可溶解的载体装载在第一装置部分中之前第一装置部分的结构的原理图。图3是显示第二装置部分内表面的结构的原理图。图4是显示装置的沿着图1中的线IV-IV截得的横截面的示图。在以下的说明中，夹心分析用作免疫测定的一个实例。然而，本发明的实施例不受到夹心分析的特定限制。本发明可以适当地应用于其它种类的免疫测定，例如，竞争分析法。
如图1中所示，本发明的用于分析的装置1包括在垂直方向上连结在一起的第一装置部分10和第二装置部分20。第一装置部分10容纳第一不可溶解载体11、用于显影溶液(撒布或分配溶液或液体)的第二不可溶解载体12以及用于吸收溶液(液体)的第三不可溶解载体。第一不可溶解载体11具有含有专门结合(bind)到分析物的专门结合物质的检测部14。
第一装置部分10通过设置在第一不可溶解载体11的侧部上的肋部15的凹部(切除部或凹口)保持第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13。第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13被保持成使得所述第二不可溶解载体和所述第三不可溶解载体在第一不可溶解载体11的检测部14处彼此重叠。此外，如图4中所示，第一不可溶解载体11、第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13以彼此不接触的方式被容纳。进一步地，如图2中所示，用于从第一装置部分10的外表面(外部)(用于分析的装置1的背面侧或底侧)观察第一不可溶解载体11的检测部14的观察窗16设置在第一不可溶解载体11的下方。此外，洗涤液贮存罐17设置在第二不可溶解载体12下方，并且洗涤液贮存罐17的上部被层压膜密封。
在第二装置部分20的外表面上设置样品溶液喷射孔31和扩增溶液贮存罐容纳部分33。样品溶液喷射孔31用于朝向容纳在第一装置部分10中的第一不可溶解载体11喷射含有分析物的样品溶液。用于将扩增溶液供应到第一不可溶解载体11的扩增溶液贮存罐32被设定在扩增溶液贮存罐容纳部分33中。扩增溶液贮存罐32在扩增溶液贮存罐32装载有扩增溶液的状态下被层压膜密封。扩增溶液贮存罐32以使扩增溶液贮存罐32的密封部分面向下的方式被设置在扩增溶液贮存罐容纳部分33中。此外，破坏密封的突出部分(未示出)设置在扩增溶液贮存罐容纳部分33中。当装载在扩增溶液贮存罐32中的扩增溶液被供应到第一不可溶解载体时，如果扩增溶液贮存罐32被向下推压，则破坏密封的突出部分可以破坏扩增溶液贮存罐32的层压膜。
此外，如图3和图4中所示，具有推压表面18a的推压单元18设置在第二装置部分20的内表面上。推压单元18面向第一不可溶解载体11的检测部14，并且推压表面18a平行于第一不可溶解载体11的检测部14。当推压单元18被朝向检测部14推压时，推压表面18a移动，并且第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13被从第一不可溶解载体11的上侧推压到第一不可溶解载体11上，使得所述第二不可溶解载体12和所述第三不可溶解载体与第一不可溶解载体11接触。进一步地，推压单元18在第一不可溶解载体11与推压表面18a之间形成空隙(间隙)。
此外，扩增溶液喷射孔35设置在第二装置部分20的内表面上。扩增溶液喷射孔35设置在与扩增溶液贮存罐容纳部分33相对应的位置处。当破坏密封的突出部分破坏扩增溶液贮存罐32的层压膜时，扩增溶液贮存罐32中的扩增溶液通过扩增溶液喷射孔35被放出到形成在第一不可溶解载体11与推压表面18a之间的空隙。扩增溶液喷射孔35设置在使得扩增溶液被发送到第一装置部分10中的第一不可溶解载体11的检测部14的位置处。
推压部分34设置在第二装置部分20的外表面上。推压部分34设置在推压单元18的相应位置处。此外，用于破坏密封洗涤液贮存罐17的上部的层压膜的密封破坏部分19a设置在第二装置部分20的内表面上。密封破坏部分19a设置在第一装置部分10中的面对洗涤液贮存罐17的位置处。此外，用于向下推压密封破坏部分19a的密封破坏单元19设置在第二装置部分20的外表面上。
第一不可溶解载体11包括样品添加垫21、标记物质保持垫22、层析载体23和吸收垫24。样品溶液被滴到样品添加垫21上。可以结合到分析物或专门结合到分析物的专门结合物质的标记物质在标记物质保持垫22中已经固定不动。层析载体23包括含有专门结合到分析物的物质的检测部14。吸收垫24吸收发送到吸收垫24的样品溶液。这里，为了简化说明，将说明仅单个检测线14a设置在检测部14中的情况。然而，也可以设置多个检测线，其中每一个检测线都含有不同的专门结合物质。当设置多个检测线时，样品溶液中含有的多种分析物可以在一个分析(过程)中进行检测。此外，如果需要，其中用于控制的专门结合物质已经固定不动的部分(控制部分或区域)可以设置在层析载体23中。
接下来，将说明用于通过使用本发明的用于分析的装置检测分析物的方法的过程。这里，将作为实例说明其中样品溶液用作溶液且洗涤液和扩增溶液用作测试剂溶液的情况。首先，样品溶液通过第二装置部分20的样品溶液喷射孔31喷射，并且通过点施被滴到容纳在第一装置部分10中的第一不可溶解载体11的样品添加垫21上。滴落的样品溶液通过第一不可溶解载体11的毛细管作用力被朝向标记物质保持垫22发送。由于标记物质保持垫22包含可以结合到分析物的标记物质，因此样品溶液中的分析物被标记物质标记，同时样品溶液通过标记物质保持垫22发送。
标记分析物通过毛细管作用力进一步朝向层析载体23移动，并且在检测线14a处被捕获，所述检测线是其中专门结合物质已经固定不动的部分。具体地，(专门结合物质)-分析物-(标记物质)的复合体(complex)形成在检测线14a处。在检测线14a处还没有被捕获的分析物、还没有结合到分析物的未反应的的标记物质和类似物被吸收垫24吸收。在发送样品溶液的步骤中，第一不可溶解载体11既不与第二不可溶解载体12接触，也不与第三不可溶解载体13接触，如图4中所示。由于第一不可溶解载体11既不与第二不可溶解载体12，也不与第三不可溶解载体13接触，因此可以仅将样品溶液发送到第一不可溶解载体11。样品溶液不会渗入到第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13中。因此，可以在检测线14a处捕获样品溶液而不会浪费样品溶液，所述样品溶液的量少且受到限制。
接下来，还没有专门结合到分析物并留在检测线14a和类似部分处的未反应的标记物质通过清洗从层析载体23被移除。将参照图5说明所述过程。图5是显示图4中的推压单元和密封破坏单元都被推压的状态的示意性横截面图。在清洗步骤中，设置在第二装置部分20的外表面上的推压部分34被朝向第一装置部分10推压。因此，设置在第二装置部分20的内表面上的推压单元18的推压表面18a移动，并且层析载体23变得与第二不可溶解载体和第三不可溶解载体13部分接触。
此时，调节推压表面18a的位移，这是因为形成在推压单元18中的凹部18b邻接肋部15。因此，在层析载体23与推压表面18a之间形成空隙(间隙)P。理想的是空隙P大约在0.01-1mm的范围内。当空隙小于0.01mm时，所述空隙难以使稍后将说明的扩增溶液或类似物渗入到空隙中。当空隙大于1mm时，毛细管作用力不会发生作用，并且难以均匀地显影洗涤液、扩增溶液和类似物。因此，理想的是肋部15和推压单元18被构造成使得层析载体23与推压表面18a之间的空隙在上述范围内。
同时，第一装置部分10中的洗涤液贮存罐17装载有洗涤液。当设置在第二装置部分20的外表面上的密封破坏单元19被推压时，密封破坏部分19a破坏密封洗涤液贮存罐17的上部的层压膜。此外，第二不可溶解载体12的端部浸入洗涤液贮存罐17中的洗涤液中。进一步地，洗涤液被从第二不可溶解载体12发送到第一不可溶解载体11，并且通过第二不可溶解载体12、第一不可溶解载体11和第三不可溶解载体13的毛细管作用力被发送到第三不可溶解载体13。
此外，如上所述，样品溶液(第一不可溶解载体11)的流动路径与洗涤液(第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13)的流动路径之间的重叠度最小。因此，在发送样品溶液时，即使样品溶液中含有的未被结合的分析物和杂质在发送样品溶液的方向上积聚在下游区域(吸收垫24)中，所述分析物和杂质也不会再次流向检测部。因此，可以在不使用大量洗涤液的情况下有效地洗涤检测部并执行高度准确的检测。
接着，扩增溶液从设置在第二装置部分20中的扩增溶液贮存罐32发送到检测部14。扩增溶液通过朝向第一装置部分10推压扩增溶液贮存罐32被发送。当扩增溶液贮存罐32被推压时，设置在扩增溶液贮存罐容纳部分33中的破坏密封的突出部分破坏扩增溶液贮存罐32的底部处的层压膜。因此，扩增溶液通过设置在第二装置部分20的内表面上的扩增溶液喷射孔35朝向第一不可溶解载体11的检测部14发送。此时，层析载体23与推压表面18a之间存在空隙P。由于存在空隙P，因此扩增溶液被均匀地发送到层析载体23。因此，在检测部14处捕获的复合体中的标记物质被均匀地放大。此外，扩增溶液被垂直发送到检测部14。当扩增溶液以这种方式发送时，可以减少要使用的扩增溶液量。
在放大之后，通过第一装置部分10的观察窗在视觉上进行观察和测量，或者通过使用光源或类似物进行观察和测量。因此，可以以高精度和高灵敏度检测分析物。
在上述的实例中，说明了使用多种溶液(在该情况下为三种溶液)，即，样品溶液、洗涤液(测试剂溶液)和扩增溶液的情况。然而，多种溶液的组合不受到限制，只要包括样品溶液即可。本发明可以例如应用于样品溶液、扩增溶液和检测溶液的组合或者样品溶液、测试剂溶液和检测溶液的组合或类似组合。
接下来将说明本发明的用于分析的装置中使用的各种溶液，例如，样品溶液和测试剂溶液、标记物质、不可溶解载体和类似溶液。
(样品溶液)
可以通过本发明的用于分析的装置分析的样品溶液不受到特定限制，只要所述样品溶液可以含有分析物(诸如天然产物、毒素和激素的生物活性物质，环境污染物或类似物)即可。例如，样品溶液可以为生物样品溶液。具体地，通过使用稍后将说明的稀释剂可以获得的生物样品的稀释液或干燥生物样品的稀释液。例如，生物样品可以为动物(尤其是人)的体液(例如，血液、血清、血浆、脑脊髓液、泪水流体、汗水、尿、脓液、鼻涕和唾液)；排泄物(例如，粪便)；内脏器官；组织；粘膜；皮肤；可以含有内脏器官、组织、粘膜或皮肤的药签样品(药签)；漱口样品；植物；动物和类似物。
可以在不需要进一步处理的情况下直接使用样品溶液。可选地，可以通过使用适当的溶剂来提取从样品溶液获得提取溶液来使用提取溶液。此外，可以通过使用适当的稀释剂稀释提取溶液来使用提取溶液的稀释液。可选地，可以通过使用适当的方法使提取溶液冷凝来使用提取溶液的冷凝溶液。可以使用免疫测定中通常使用的溶剂(例如，水、生理盐水、缓冲溶液或类似物)作为用于提取的溶剂。可选地，可以使用水可混溶的有机溶剂，所述水可混溶的有机溶剂可以通过由上述的稀释剂稀释直接执行专门结合反应(例如，抗原-抗体反应)。
(标记物质)
本发明中可以使用的标记物质没有受到特定限制，只要所述物质通过颜色可辨别或者通过反应可检测出即可。例如，可以使用免疫层析法中通常使用的金属微颗粒、彩色胶乳粒子、酶和类似物。当使用采用标记物质作为催化剂的金属离子的还原反应来将金属沉积在标记物质上以放大信号时，理想的是标记物质为金属微颗粒，这是因为金属微颗粒的催化剂活性高。
对于金属微颗粒，可以使用金属胶体、金属硫化物、其它金属合金、含有金属的聚合物颗粒标记或类似物。理想的是所述颗粒(或者胶体)的平均粒径在1nm到10μm的范围内。金属微颗粒的实例是金胶体、银胶体、铂胶体、铁胶体、氢氧化铝胶体及其复合胶体和类似物。理想的是金属微颗粒为金胶银胶铂胶体或其复合胶体。可选地，由于具有适当直径的金胶体和银胶体分别为红色和黄色且容易识别和辨别，因此可以使用金胶体和银胶体。理想的是金胶体的平均直径在大约1-500nm的范围内。可选地，所述平均直径可以在1-100nm的范围内。
(专门结合物质)
专门结合物质没有受到特别限制，只要所述物质对分析物具有亲合力即可。专门结合物质的一个实例为抗体。例如，可以使用从对分析物免疫的动物血清制备的抗血清、从抗血清提纯出来的免疫球蛋白部分、通过使用对分析物免疫的动物的脾细胞通过细胞融合获得的单克隆抗体及其段片(例如，F(ab’)2、Fab、Fab’或Fv)。这种抗体可以通过使用普通方法制备。
(标记物质的信号放大)
当通过使用金属胶体标记、金属硫化物标记、金属合金标记、含有金属的聚合物颗粒标记或类似物作为标记物质执行分析时，可以放大金属基标记的信号。具体地，在形成分析物和标记物质的复合体之后，所述复合体与银离子和还原剂接触。从含有银的诸如无机银盐和有机银盐的化合物供应银离子。通过还原剂还原银离子并形成银颗粒。银颗粒作为芯体沉积在金属基标记上。因此，来自金属基标记的信号被放大，并且可以进行分析物的高灵敏度分析。
(第一不可溶解载体)
如图1中所示，第一不可溶解载体(在下文中也称为用于免疫层析法的条带)包括至少一个检测线，所述检测线包含可以结合到分析物的专门结合物质。第一不可溶解载体从显影的上游侧朝向下游侧被分成样品添加垫、标记物质保持垫、层析载体和吸收垫。样品添加垫、标记物质保持垫、层析载体和吸收垫以此顺序布置在粘附板上。理想的是多孔材料用作用于免疫层析法的条带。例如，可以使用硝化纤维膜、纤维素膜、乙酰纤维素膜、聚砜膜、聚醚砜膜、尼龙膜、玻璃纤维、非编织物、布、棉纱或类似物(稍后将说明用于所述垫和层析载体中的每一个的材料)。
在层析载体中，通过固定专门结合到分析物的专门结合物质形成检测线。任选地，如果需要，控制部分也可以形成在层析载体中。专门结合物质可以通过物理结合(吸附或类似方法)或者通过化学结合直接固定在层析载体的一部分上。可选地，专门结合物质可以物理或化学结合到诸如胶乳粒子的微颗粒，并且微颗粒可以被捕捉和固定在层析载体的一部分处。任选地，在专门结合物质固定在层析载体上之后，可以通过使用钝化蛋白质或类似物处理层析载体以例如防止非专性吸附。
可以通过制备含有上述标记物质的悬浮液、通过用所述悬浮液涂敷适当的垫(例如，玻璃纤维垫)并通过干燥上面已经涂覆有悬浮液的垫来制造标记物质保持垫。标记物质保持垫的材料例如可以为纤维素滤纸、玻璃纤维、非编织物或类似物。
样品添加垫为含有分析物的测试样品通过点施或类似操作滴落到的部分。样品添加垫还具有用于过滤样品中的不溶性颗粒和类似物的功能。样品添加垫的材料可以为诸如纤维素滤、玻璃纤维、聚氨基甲酸酯、聚醋酸盐、醋酸纤维素、尼龙和棉布的具有均匀特性的材料。然而，样品添加垫的材料不局限于这些材料。任选地，可以预先在样品添加垫上执行防止非专性吸附处理。执行防止非专性吸附处理以防止存在于样品中的分析物在分析期间被非专性吸附到样品添加部分(垫)的材料上，并且防止分析的准确度下降。
吸收垫为用于通过色谱迁移物理吸收添加样品的部分。此外，吸收垫除去未固定在层析载体的检测部上的未反应的标记物质或类似物。吸收垫的材料可以为例如吸水材料，例如，纤维素滤纸、非编织物、布和醋酸纤维素。添加样品的前端到达吸收部分(垫)之后的层析速度根据吸收材料的材料种类、尺寸或类似物而不同。因此，可以通过适当地选择吸收垫来设置适合于测量分析物的速度。
(第二不可溶解载体-用于发送溶液的不可溶解载体)
第二不可溶解载体没有受到特定限制，只要洗涤液或类似物可以通过毛细管作用力被发送到第一不可溶解载体即可。例如，可以使用玻璃纤维垫、纤维素膜、硝化纤维膜或类似物。
(第三不可溶解载体-用于吸收的不可溶解载体)
第三不可溶解载体没有受到特定限制，只要已经渗入到第一不可溶解载体中的洗涤液或类似物可以被吸收即可。例如，可以使用细胞膜质、硝化纤维、玻璃纤维或其混合物。
(测试剂溶液)
术语“测试剂溶液”表示含有对扩增溶液或检测溶液具有补充功能的试剂(化学制品或类似物)的溶液。在分析中具有清洗功能的溶液，即，洗涤液，也为测试剂溶液。例如，当如稍后所述扩增溶液为银离子溶液时，用作用于银离子的还原剂的对苯二酚溶液、亚铁离子溶液或类似物可以用作测试剂溶液。当过氧化物酶(过氧化物酶酵素)用于放大时，过氧化氢溶液为测试剂溶液。此外，在分析系统中具有清洗功能的洗涤液也为测试剂溶液。
洗涤液没有受到特定限制，只要可以清洗在不需要专门结合的情况下保持在层析载体中的标记物质，换句话说，非专门保持在层析载体中的标记物质即可。例如，可以仅仅使用简单的水或例如乙醇的溶剂。可选地，可以使用含有1％BSA的PBS缓冲剂、表面活性剂(表面活化剂)的溶液或类似溶液。此外，可以使用稍后所述的含有银离子的溶液或含有银离子的还原剂的溶液作为洗涤液。在显影期间，洗涤液洗清非专门保持的标记物质。因此，标记物质在显色过程中变得包含在洗涤液中。然而，由于洗涤液的清洗效果在不含有标记物质时较高，因此使用在显影之前不含有标记物质的洗涤液。此外，可以调节洗涤液的pH以增加清洗效果。可选地，可以使用含有表面活性剂、例如BSA的蛋白质、例如聚乙二醇的高聚物或类似物的洗涤液。
(扩增溶液)
扩增溶液通过溶液中的试剂或化学制品或类似物与标记物质或分析物的催化反应产生有色化合物、光发射或类似物。扩增溶液可以放大信号。扩增溶液例如为银离子溶液、苯二胺化合物和萘酚化合物的溶液或类似溶液。银离子溶液通过物理现象使金属银沉淀在金属标记上。苯二胺化合物和萘酚化合物的溶液通过过氧化物酶标记和过氧化氢的作用变成染料。
具体地，可以使用照相化学领域中普通公开文献中所述的通常所说的显影剂(显影液)(例如，日本摄影科技协会，Colona Publishing有限公司的“Revised Basic Photographic Engineering，Silver Salt Photography”；A.Sasai，Shashin Kogyo Shuppan的“photographic chemistry”；或者S.Kikuchi等人、Amiko Shuppan的“Latest Formulation Handbook”)。在本发明中，扩增溶液没有受到特定限制。任何类型的通常所说的物理显影液或者含有银离子且其中溶液中的银离子利用作为显影核的金属胶体或类似物被减少的显影剂可以用作扩增溶液。
接下来将说明用于扩增溶液的含有银离子的化合物、银离子的还原剂和类似物。
(含有银离子的化合物)
可以使用有机银盐、无机银盐或银络合物作为含有银离子的化合物。任选地，例如，可以使用为含有在诸如水的溶剂中具有高溶解度的化合物的银离子的硝酸银、乙酸银、乳酸银、硫代硫酸银或类似物。理想的是硝酸银用作所述化合物。理想的是银络合物由配体包围，所述配体包括诸如羟基或砜基的水溶基。例如，可以使用羟基硫醚银(hydroxythioether silver)。理想的是无机银盐和银络合物中的银通常在每个检测区域面积为0.001mol/m2到0.2mol/m2，任可选为0.01mol/m2到0.05mol/m2。
(银离子的还原剂)
可以使用任何种类的无机材料或有机材料或者其混合物作为银离子的还原剂，只要银离子可以被还原成银即可。
理想的是使用可还原的金属盐或可还原的金属络合物盐作为无机还原剂，所述盐的原子价可以通过诸如Fe2+、V2+和Ti3+的金属离子而改变。当使用无机还原剂时，必须通过与氧化离子形成复合体或者通过还原氧化离子来移除或除去氧化离子。例如，在使用Fe+2作为还原剂的系统中，氧化离子可以通过使用柠檬酸或EDTA与为氧化物的Fe3+形成复合体而被除去。在本发明的系统中，理想的是如上所述使用无机还原剂。可选地，可以使用含有Fe2+的金属盐。
可以使用用于湿式卤化银感光材料的显影碱性试剂(例如，没食子酸甲酯、对苯二酚、取代对苯二酚、3-吡唑烷酮、对-氨基酚类、对-苯二胺类、受阻酚类、偕胺肟类、吖嗪类、邻苯二酚类、连苯三酚类、抗坏血酸(或其衍生物)和无色染料)。可选地，也可以使用本领域的技术人员所公知的诸如美国专利第6,020,117号中公开的材料的其它材料。
理想的是使用抗坏血酸还原剂作为还原剂。有效的抗坏血酸还原剂可以为抗坏血酸、该抗坏血酸的类似物、该抗坏血酸的异构体以及该抗坏血酸的衍生物。例如，可以使用D-抗坏血酸或L-抗坏血酸及其糖衍生物(例如，γ-乳糖型抗坏血酸(γ-lactoascorbic acid)、葡糖型抗坏血酸、海藻糖型抗坏血酸(fucoascorbic acid)、葡庚糖抗坏血酸和麦芽糖抗坏血酸(maltoascorbicacid))、抗坏血酸钠、抗坏血酸钾、异抗坏血酸(或L-赤藻糖抗坏血酸)以及其盐(例如，碱金属盐、铵盐或本领域公知的盐)、以及烯二醇型抗坏血酸、烯胺醇(enaminol)型抗坏血酸、硫代烯醇(thioenol)型抗坏血酸或类似物。在这些还原剂中，D-抗坏血酸、L-抗坏血酸和D，L-抗坏血酸(以及其碱金属盐)以及异抗坏血酸(以及其碱金属盐)是理想的。此外，钠盐为理想的盐。另外，如果需要，则可以使用这些还原剂的混合物。
(检测溶液)
术语“检测溶液”表示含有与标记物质、分析物或类似物起反应的试剂的溶液，并且检测溶液通过这种反应变化。例如，检测溶液的颜色通过溶液中含有的试剂的颜色的变化而变化，或者通过在溶液中产生有色化合物而变化，或者发生光发射或类似现象。例如，检测溶液可以为通过与作为分析物的钙离子形成复合体表现出颜色的邻-甲酚酞络合剂。可选地，检测溶液可以为作为分析物的通过与蛋白质起反应而改变其颜色的铜离子溶液。此外，专门结合到分析物的标记复合体的溶液可以用作检测溶液。例如，可以使用用于通过杂化检测DNA和RNA的标记DNA和标记RNA、抗体敏化颗粒和用于检测抗原的抗体标记酶或类似物。
(其它助剂)
除了所述测试剂溶液、所述检测溶液和所述扩增溶液之外，还可以使用其它助剂。作为助剂，溶液可以包含缓冲剂、诸如抗氧化剂或有机稳定剂的杀菌剂或者调速器。缓冲剂的实例为使用乙酸、柠檬酸、氢氧化钠及其盐或者三(羟甲基)甲胺的缓冲剂以及通常化学实验中使用的其它缓冲剂。通过使用缓冲剂可以将扩增溶液的pH调节成适当的值。
接下来将详细说明本发明的用于分析的装置的实例。
[实例1]
(1)用于A型及B型流行性感冒使用的免疫层析法的条带的制备
(1-1)抵抗A型流行性感冒和抵抗B型流行性感冒的抗体改进的金胶体的制备
(1-1-1)抵抗A型流行性感冒的抗体改进的金胶体的制备
1ml的50mM KH2PO4缓冲剂(pH为7.5)被添加到9ml的50nm直径的金胶体溶液(EM.GC 50，BBI，Ltd.)以调节溶液的pH。此外，1ml的90μg/ml的抵抗A型流行性感冒的单克隆抗体(抵抗流行性感冒的A SPTN-57307，Medix Biochemica)溶液被添加到金胶体溶液并搅拌。在搅拌之后，混合物保持静置10分钟，并且550μl的1％聚乙二醇(PEG Mw.20000，第168-11285号产品，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)水溶液被添加到混合物中并搅拌。此外，1.1ml的10％牛血清清蛋白(BSA Fraction V，第A-7906号产品，SIGMA)水溶液被添加并搅拌。所述溶液在4℃下以8000×g被离心分离30分钟(himacCF 16RX，Hitachi)。上层清液被移除，使得将剩余大约1ml的溶液。金胶体通过使用超声洗涤机再次散开。之后接着溶液散布在20ml的金胶体储备溶液(20mM的Tris-HCl缓冲剂(pH为8.2)，0.05％的PEG(Mw.20000)，150mM NaCl，1％的BSA和0.1％的NaN3)中，并且再次在4℃下以8000×g被离心分离30分钟。上层清液被移除，使得将剩余大约1ml的溶液。金胶体通过使用超声洗涤机再次散开，并且获得抗体改进的金胶体(50nm)溶液。
(1-1-2)抵抗B型流行性感冒的抗体改进的金胶体的制备
1ml的50mM KH2P04缓冲剂(pH为8.0)被添加到9ml的50nm直径的金胶体溶液(EM.GC 50，BBI，Ltd.)以调节溶液的pH。此外，1ml的80μg/ml的抵抗B型流行性感冒的单克隆抗体(MONOTYPE aby流行性感冒B病毒(核)Purified 1131，ViroStat，Inc.)溶液被添加到金胶体溶液并被搅拌。在搅拌之后，混合物保持静置10分钟，并且550μl的1％聚乙二醇(PEG Mw.20000，第168-11285号产品，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)水溶液被添加到混合物中并被搅拌。此外，1.1ml的10％牛血清清蛋白(BSA Fraction V，第A-7906号产品，SIGMA)水溶液被添加并搅拌。所述溶液在4℃下以8000×g被离心分离30分钟(himacCF 16RX，Hitachi)。上层清液被移除，使得将剩余大约1ml的溶液。金胶体通过使用超声洗涤机再次散开。之后接着溶液散布在20ml的金胶体储备溶液(20mM Tris-HCl缓冲剂(pH为8.2)，0.05％的PEG(Mw.20000)，150mM NaCl，1％的BSA和0.1％的NaN3)中，并且再次在4℃下以8000×g被离心分离30分钟。上层清液被移除，使得将剩余大约1ml的溶液。金胶体通过使用超声洗涤机再次散开，并且获得抗体改进的金胶体(50nm)溶液。
(1-2)金胶体抗体保持垫(标记物质保持垫)的制备
上述过程(1-1)中制备的抵抗A型流行性感冒的抗体改进的金胶体溶液和抵抗B型流行性感冒的抗体改进的金胶体溶液以1∶1混合，并且通过用于金胶体的涂敷溶液(20mM Tris-Hcl缓冲剂(pH为8.2)，0.05％的PEG(Mw：20000)和5％的蔗糖)和水被烯释，使得稀释溶液在520nm下的OD(光学密度)将变成3.0。该溶液被均匀地涂覆到被裁切成8mm×150mm大小的玻璃纤维垫(玻璃纤维共轭垫，Millipore)，并且0.8ml的溶液被涂覆到每一个垫。所述垫整夜在减小的压力下被干燥以获得金胶体抗体保持垫。
(1-3)抗体固定膜(层析载体)的制备
抗体固定膜通过将抗体固定在裁切成25mm×200mm大小的硝化纤维膜(具有塑料衬里的HiFlow Plus HF 120，Millipore)上制备而成，如下所述。膜的长侧被放置在下侧，而以1.5mg/ml制备的用于固定的抵抗A型流行性感冒的单克隆抗体的溶液(抵抗流行性感冒的A SPTN-57307，MedixBiochemica)被从其底部以7mm涂覆到膜的位置。所述溶液通过使用喷墨式涂敷器(BioDot Ltd.)以具有大约0.7mm的宽度的行形式被涂覆。类似地，以1.5mg/ml制备的用于固定的抵抗B型流行性感冒的单克隆抗体的溶液(MONOTYPE aby influenza BVirus(nuclear)Purified 1131，ViroStat，Inc.)被从其底部以10mm涂覆到膜的位置。所述溶液以具有大约0.7mm宽度的行形式被施加。类似地，用于控制以0.5mg/ml制备的溶液的抗鼠的IgG抗体(抗鼠的IgG(H+L)，兔F(ab’)2，产品第566-70621号，Wako Pure ChemicalIndustries，Ltd.)被以行形式从底部以13mm涂覆到膜的位置。通过热风干燥剂在50℃下干燥30分钟。涂敷膜被浸入大桶中的500ml的50mm硼酸盐缓冲剂(pH为8.5)中，所述缓冲剂含有封闭液(0.5wt％的酪素(乳制副产品，产品第030-01505号，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.))，并且所述膜被保持静置30分钟。然后，所述膜移动到与上述大桶相似的另一个大桶，并且浸入所述大桶中的500ml的洗涤稳定液(含有0.5wt％的蔗糖和0.05wt％的胆酸钠的50mm的Tris-HCl(pH为7.5)缓冲剂)，并且保持静置30分钟。所述膜被从溶液中去除，并且在室温下整夜被干燥以提供抗体固定膜(线性涂敷或涂覆)。
(1-4)用于免疫层析法的条带的制备
在上述过程(1-3)中制备的抗体固定膜被贴附到背面粘附板(20mm×150mm，ARcare 9020，NIPPN TechnoCluster，Inc.)，而使得所述膜和所述背面粘附板彼此重叠3mm。此时，背面粘附板被贴附到所述膜的在抵抗A型流行性感冒的抗体侧的较长侧。接下来，在上述过程(1-2)中制备的金胶体抗体保持垫被贴附到抗体固定膜，而使得所述垫和所述膜彼此重叠3mm。样品添加垫(裁切成18mm×150mm的玻璃纤维垫(玻璃纤维共轭垫，Millipore))被设置到背面粘附板的较长侧，所述膜没有贴附到所述较长侧，所述样品添加垫以通过样品添加垫保持或覆盖金胶体抗体保持垫的方式被贴附。此外，背面粘附板(20mm×150mm)和吸收垫(20mm×150mm)被贴附到用于所述膜的控制线侧的抗鼠的IgG抗体，而使得所述膜的一部分保持在背面粘附板与吸收垫之间。通过如上所述一个接一个地放置这些元件获得的构件(免疫层析主构件)通过使用轧刀(CM 4000，NIPPNTechnoCluster，Inc.)来裁切。平行于所述构件的短侧来切割所述构件，使得获得的条带的宽度为7mm。因此，制造出具有7mm×60mm大小的用于免疫层析的条带。
(1-5)银扩增溶液的制备
(1-5-1-1)还原剂溶液A的制备
通过将九水合硝酸铁(III)(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，095-00995)溶解在290g的水中来制备23.6ml的1mol/l的硝酸铁水溶液。此外，13.1g的柠檬酸(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，038-06925)溶解在所述溶液中。在所述硝酸铁水溶液和所述柠檬酸都被溶解之后，通过使用搅拌器进行搅拌添加36ml的硝酸(10wt％)。此外，60.8g的六水合硫酸铁(II)铵(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，091-00855)被添加到所述溶液，并且获得还原剂溶液A。
(1-5-1-2)还原剂溶液B的制备
通过将九水合硝酸铁(III)(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，095-00995)溶解在290g的水中来制备23.6ml的1mol/l的硝酸铁水溶液。此外，13.1g的柠檬酸(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，038-06925)、0.2g的十二烷基胺(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，123-00246)以及0.2g的1，12-二氨基十二烷(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，042-25702)被溶解在所述溶液中。在所述硝酸铁水溶液、所述柠檬酸、十二烷基胺和1，12-二氨基十二烷都被溶解之后，通过使用搅拌器进行搅拌添加36ml的硝酸(10wt％)。此外，40.5g的六水合硫酸铁(II)铵(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，091-00855)被添加到所述溶液，并且获得还原剂溶液B。
(1-5-1-3)还原剂溶液C的制备
36ml的硝酸(10w％)、0.2g的十二烷基胺(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，123-00246)以及0.2g的1，12-二氨基十二烷(Wako Pure ChemicalIndustries，Ltd.，042-25702)溶解在320g的水中。在硝酸、十二烷基胺和1，12-二氨基十二烷都被溶解之后，通过使用搅拌器进行搅拌添加30.4g的六水合硫酸铁(II)铵(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，091-00855)，并且获得还原剂溶液C。
(1-5-2-1)银离子溶液A的制备
8ml的硝酸银试液(含有10g的硝酸银)和24ml的l mol/l硝酸铁水溶液被添加到66g的水。此外，该溶液与预先已经通过将5.9ml的硝酸(10wt％)、0.1g的十二烷基胺(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.，123-00246)和0.1g的表面活性剂C12H25-C6H4-O-(CH2CH2O)50H溶解在47.6g的水中制备的溶液混合，并且获得银离子溶液A。
(1-5-2-2)银离子溶液B的制备
8ml的硝酸银试液(含有10g的硝酸银)被添加到90g的水。此外，该溶液与预先已经通过将5.9ml的硝酸(10wt％)和0.1g的表面活性剂C12H25-C6H4-O-(CH2CH2O)50H溶解在47.6g的水中制备的溶液混合，并且获得银离子溶液B。
(1-5-2-3)银离子溶液C的制备
16ml的硝酸银试液(含有10g的硝酸银)被添加到82g的水。此外，该溶液与预先已经通过将5.9ml的硝酸(10wt％)和0.1g的乙二醇基表面活性剂、Surfinol 465(Nisshin Chemical Industry Co.，Ltd.)溶解在47.6g的水中制备的溶液混合，并且获得银离子溶液C。
<实例1>
(用于分析的装置的制造)
如图1中所示，用于免疫层析的条带被装载到图2中所示的第一装置部分10(由聚丙烯制成并通过注射成型制造)中。此外，玻璃纤维垫(玻璃纤维共轭垫，Millipore)作为第二不可溶解载体12和第三不可溶解载体13被装载到第一装置部分10中。同时，已经在上述过程(1-5-1)中制备的150μl的还原剂溶液被倾注到洗涤液贮存罐17中，并且洗涤液贮存罐17通过使用铝层压板的热叠层(NewADM，Sunrise Co.)被密封。此外，第二装置部分20与第一装置部分10装配。同时，已经在上述过程(1-5-2)中制备的110μl的银离子溶液被倾注到扩增溶液贮存罐32中，并且扩增溶液贮存罐32通过铝层压板被密封。扩增溶液贮存罐32安装在罐容纳部分33中，如图1中所示。
(抗原溶液的点施和显影)
使用Quick S-Influ A·B“Seiken”负/正控制溶液(产品第322968号，DENKA Seiken Co.，Ltd.)作为样品溶液。正控制溶液通过含有1质量百分比的BSA的PBS缓冲剂被烯释。通过使用在市场上可获得的免疫层析检测工具对Quick S-Influ A·B“Seiken”检测极限对于A型和B型为1/40。这里，使用含有1质量百分比的BSA的PBS缓冲剂，并且1/80、1/160、1/320、1/640、1/1280、1/2560和1/5120的A型正控制连续稀释液被制备成为样品溶液。此外，140μ1的制备样品溶液通过样品溶液喷射孔滴落并保持静置10分钟。(推压第二不可溶解载体和第三不可溶解载体)
在样品溶液显影10分钟之后，第二装置部分20的推压部分34被10N的力推压以使第二装置部分20弯曲，从而将用于发送溶液的不可溶解载体(第二不可溶解载体12)推压到膜上。此时，推压的大小(通过推压移动的距离)受到第一装置部分10的肋部15和第二装置部分20之间的接触的限制。肋部15的高度被调节，使得用于发送通过第二装置部分20被放置成与用于免疫层析的条带(第一不可溶解载体11)的膜的表面接触的溶液的不可溶解载体的一部分将被向下推到0.2mm的厚度。此外，第二装置部分20的推压单元的形式被调节成，使得用于免疫层析的条带(第一不可溶解载体11)的膜表面与第二装置部分的推压表面18a之间的空隙将变成0.005mm。
(洗涤)
当在推压用于发送溶液的不可溶解载体之后过去30秒时，第二装置部分20的密封破坏单元19被推压。密封破坏单元19与用于发送溶液的不可溶解载体一起破坏铝板，并且不可溶解载体12被浸入还原剂溶液中。因此，还原剂溶液在用于免疫层析的条带中显影，并且溶液继续被发送三分钟。通过该步骤，用于免疫层析的条带被浸入还原剂溶液A中。此外，还没有特定被吸收的材料被洗清掉。
(通过扩增溶液放大信号)
安装在第二装置部分20中的溶液贮存罐32被向下推压以通过突出部分破坏所述溶液贮存罐的密封。因此，银离子溶液A被从溶液贮存罐32排出并通过喷射孔倾倒。银离子溶液A被装载到膜表面与第二装置部分的推压单元之间的空隙中，并且将检测线处吸收的金胶体标记放大一分钟。
对于还原剂溶液B和银离子溶液B的组合，在与上述过程相似的情况中执行(洗涤)和(通过扩增溶液对信号的放大)。此外，对于还原剂溶液C和银离子溶液C的组合，在与上述过程相似的情况中执行(洗涤)和(通过扩增溶液对信号的放大)。
<实例2>
除了第二装置部分的推压单元被调节成使得用于免疫层析的条带(第一不可溶解载体11)的膜表面与第二装置部分的推压单元之间的空隙将变成0.2mm之外，以与实例1相似的方式执行放大。
<实例3>
除了第二装置部分的推压单元被调节成使得用于免疫层析的条带(第一不可溶解载体11)的膜表面与第二装置部分的推压单元之间的空隙将变成1mm之外，以与实例1相似的方式执行放大。
<实例4>
除了第二装置部分的推压单元被调节成使得用于免疫层析的条带(第一不可溶解载体11)的膜表面与第二装置部分的推压单元之间的空隙将变成1.2mm之外，以与实例1相似的方式执行放大。
<比较实例1>
除了第二装置部分的推压单元被移除，没有与膜表面形成空隙，以及通过将银离子溶液滴到膜表面上供应110μl的银离子溶液之外，以与实例1相似的方式执行放大。
<比较实例2>
除了不从溶液贮存罐供应银离子溶液，而是通过直接将银离子溶液滴到样品垫上供应110μl的银离子溶液之外，以与实例1相似的方式执行放大。
<比较实例3>
除了不从溶液贮存罐供应银离子溶液，而是通过直接将通过将银离子溶液和还原剂溶液以1∶4混合制备的110μl的扩增溶液滴到样品垫上来供应扩增溶液之外，以与实例1相似的方式执行放大。
<评价>
在放大之后，可从第一装置部分10的观察窗16在视觉上观察装置。其中确认正反应的样品的连续稀释的最低浓度被判定作为检测灵敏度极限。所述结果显示在表格1中。
Figure BPA00001445449700231
如表格1清楚显示，实例1-4的检测灵敏度在1/2560到1/5120的范围之内，这表示极高的灵敏度。此外，扩增溶液被均匀地装载到空隙部分P中。在实例1中，空隙部分的间隙(距离)为0.005mm，该间隙窄。因此，虽然非常少，但是扩增溶液在一些情况下不会扩散到一定部分。在实例4中，空隙部分的间隙(距离)为1.2mm，该间隙宽。因此，毛细管作用力不能充分作用。因此，虽然非常少，但是扩增溶液在一些情况下不会扩散到一定部分。该结果显示理想的是空隙部分P被调节到0.01-1mm的范围。
相比之下，在比较实例1中，没有提供空隙部分P，并且扩增溶液从第一装置部分10的上侧被滴落。在比较实例1中，检测灵敏度基本上与所述实例的检测灵敏度相同。然而，在比较实例1中，扩增溶液没有均匀地扩散，并且检测线处留有未放大部分。在其中扩增溶液被直接滴到样品垫上的比较实例2中，没有执行放大，这是因为在作为第一不可溶解载体的膜中流动的扩增溶液和存在于所述膜中的还原剂溶液被推开到吸收垫。因此，还原反应没有发生，并且不可能执行放大。此外，当测试剂溶液和扩增溶液的混合物被滴到样品垫上时，执行放大，但是所述放大非常不均匀。放大不均匀的原因在于还原剂和扩增溶液中含有的成分没有均匀地分配在膜上，这是因为分子与膜的相互反应不同，并且所述反应没有均匀地进行。
如上所述，在本发明的用于分析的装置中，具有推压表面的推压单元被设置在第二装置部分的面向第一不可溶解载体的检测部的内表面上。此外，平行于第一不可溶解载体的检测部的推压表面通过朝向检测部被推压而移动，并且从第一不可溶解载体的上侧将第二不可溶解载体和第三不可溶解载体推压到第一不可溶解载体上。因此，当推压部分从第二装置部分的外表面朝向第一装置部分推压时，推压单元的推压表面移动，并且推压部分的推压表面与检测部之间形成空隙。因此，通过空隙的毛细管作用力可以使溶液均匀地显影。因此，可以进行高度准确且高度灵敏的测量。

Claims (7)

1.一种用于对样品溶液中含有的分析物执行定性分析或定量分析的分析方法，所述方法包括以下步骤：
将含有至少一种分析物的所述样品溶液发送到不可溶解载体上的检测部，所述检测部包括专门结合到所述分析物的物质；和
将测试剂溶液、扩增溶液和检测溶液中的至少一个发送到所述检测部，其中所述测试剂溶液、所述扩增溶液和所述检测溶液中的所述至少一个被喷射以装载到所述不可溶解载体与具有面向所述不可溶解载体的表面的构件之间的空隙中。
2.一种用于分析的装置，所述装置包括：
复合部分，所述复合部分包括第一装置部分和第二装置部分，
其中所述第一装置部分包括容纳在所述第一装置部分中的第一不可溶解载体，所述第一不可溶解载体具有检测部，所述检测部包括专门结合到分析物的物质；以及
其中所述第二装置部分具有用于将溶液注射到所述第一装置部分中的孔，并且其中所述第二装置部分包括具有面向所述第一不可溶解载体的所述检测部的表面的一部分。
3.一种用于分析的装置，所述装置包括：
复合部分，所述复合部分包括第一装置部分和第二装置部分，其中：
所述第一装置部分包括容纳在所述第一装置部分中的第一不可溶解载体，所述第一不可溶解载体具有检测部，所述检测部包括专门结合到分析物的物质；
所述第二装置部分具有用于将溶液注射到所述第一装置部分中的孔；
用于使所述溶液显影的第二不可溶解载体和用于吸收所述溶液的第三不可溶解载体被容纳在所述复合部分中；
所述第二不可溶解载体和所述第三不可溶解载体被保持成使得所述第二不可溶解载体和所述第三不可溶解载体在所述第一不可溶解载体的所述检测部处彼此重叠；
所述第一不可溶解载体、所述第二不可溶解载体和所述第三不可溶解载体以使该第一不可溶解载体、该第二不可溶解载体和该第三不可溶解彼此不接触的方式容纳；
具有面向所述第一不可溶解载体的检测部的推压表面的推压单元设置在所述第二装置部分中，从而面向所述第一不可溶解载体的检测部；以及
所述推压表面通过被推压向所述检测部被推压而移动，并且所述推压单元从所述第一不可溶解载体的上侧将所述第二不可溶解载体和所述第三不可溶解载体推压到所述第一不可溶解载体上。
4.根据权利要求3所述的用于分析的装置，其中，当所述推压单元已经被推压向所述检测部时，所述检测部与所述推压表面之间的空隙在0.01-1mm的范围内。
5.根据权利要求3或4所述的用于分析的装置，其中，通过邻接所述推压单元的一部分调节所述推压表面的位移的肋部设置在所述第一装置部分的内表面上，所述内表面面向所述推压单元。
6.根据权利要求4或5所述的用于分析的装置，其中：
能够将溶液发送到所述检测部与所述推压表面之间的所述空隙的溶液贮存罐设置在所述第一装置部分和所述第二装置部分中的至少一个中；以及
所述溶液贮存罐通过层压膜被密封。
7.根据权利要求6所述的用于分析的装置，其中，含有银离子的扩增溶液已经被喷射到所述溶液贮存罐中。
CN201080015279.0A 2009-03-30 2010-03-30 用于分析的方法和装置 Active CN102378913B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2009081388A JP5430995B2 (ja) 2009-03-30 2009-03-30 アッセイ方法およびアッセイ用デバイス
JP2009-081388 2009-03-30
PCT/JP2010/056121 WO2010114145A1 (en) 2009-03-30 2010-03-30 Method and device for assay

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102378913A true CN102378913A (zh) 2012-03-14
CN102378913B CN102378913B (zh) 2014-08-27

Family

ID=42828429

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201080015279.0A Active CN102378913B (zh) 2009-03-30 2010-03-30 用于分析的方法和装置

Country Status (6)

Country Link
US (1) US8802426B2 (zh)
EP (1) EP2414834B1 (zh)
JP (1) JP5430995B2 (zh)
KR (1) KR101636804B1 (zh)
CN (1) CN102378913B (zh)
WO (1) WO2010114145A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107110858A (zh) * 2015-01-16 2017-08-29 富士胶片株式会社 免疫层析试剂盒
CN108369228A (zh) * 2015-12-18 2018-08-03 富士胶片株式会社 免疫层析试剂盒
CN108367504A (zh) * 2015-12-18 2018-08-03 富士胶片株式会社 超声波焊接方法及利用超声波焊接方法的树脂制容器的制造方法

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5117928B2 (ja) 2008-05-27 2013-01-16 富士フイルム株式会社 イムノクロマトグラフデバイス
JP5728453B2 (ja) 2012-09-27 2015-06-03 富士フイルム株式会社 クロマトグラフ方法及びクロマトグラフキット
CA2932269C (en) * 2013-12-06 2022-01-25 Ortho Clinical Diagnostics, Inc. Assay device having a wash port
JP6321963B2 (ja) * 2014-01-09 2018-05-09 地方独立行政法人神奈川県立産業技術総合研究所 吸液材の吸液力を利用した検出装置
JP6498420B2 (ja) 2014-11-25 2019-04-10 株式会社ミズホメディー 検査キット
JP2018048811A (ja) * 2015-01-30 2018-03-29 京セラ株式会社 検出対象のセンシング方法
GB2535998A (en) * 2015-02-27 2016-09-07 Intelligent Fingerprinting Ltd A device for receiving and analysing a sample
JP6779433B2 (ja) * 2015-07-22 2020-11-04 地方独立行政法人神奈川県立産業技術総合研究所 検出装置及び検出方法
WO2022107737A1 (ja) 2020-11-17 2022-05-27 富士フイルム株式会社 ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出キットおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0281201A1 (en) * 1987-03-03 1988-09-07 PB Diagnostic Systems, Inc. Self contained immunoassay element
US5399316A (en) * 1992-03-13 1995-03-21 Olympus Optical Co., Ltd. Reaction vessel for conducting an immunological assay
US6017494A (en) * 1996-09-30 2000-01-25 Fujirebio Inc. Liquid supply device and analytical test device
WO2003025573A1 (en) * 2001-09-17 2003-03-27 Pharmacia Diagnostics Ab Multi-analyte assay device with multi-spot detection zone
CN1781022A (zh) * 2003-04-25 2006-05-31 拜奥迪吉特实验室技术公司 用于进行现场测试的膜条生物传感器系统
CN1938577A (zh) * 2004-03-31 2007-03-28 欧姆龙株式会社 局域等离子共振传感器和检查装置
CN101098956A (zh) * 2002-12-26 2008-01-02 梅索磅秤技术有限公司 检定盒及其使用方法
JP2009014690A (ja) * 2007-07-09 2009-01-22 Otsuka Pharmaceut Co Ltd 試験紙測定容器

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5137808A (en) * 1987-04-07 1992-08-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Immunoassay device
US5726010A (en) 1991-07-31 1998-03-10 Idexx Laboratories, Inc. Reversible flow chromatographic binding assay
JP3859027B2 (ja) * 1996-12-18 2006-12-20 日本化薬株式会社 乳頭分泌液中の特定物質の測定方法
JP2001021562A (ja) * 1999-07-09 2001-01-26 Nitto Denko Corp 酵素免疫クロマトグラフ用検査片
JP2002202307A (ja) * 2000-12-27 2002-07-19 Iatron Lab Inc イムノクロマトグラフ法
JP3484180B2 (ja) * 2002-08-19 2004-01-06 オリンパス株式会社 反応容器
US7507374B2 (en) * 2005-06-28 2009-03-24 American Bio Medica Corp. Saliva sample testing device
JP2008286590A (ja) 2007-05-16 2008-11-27 Fujifilm Corp イムノクロマトグラフ方法
JP5066498B2 (ja) 2008-09-19 2012-11-07 富士フイルム株式会社 アッセイ方法
JP5011244B2 (ja) 2008-09-19 2012-08-29 富士フイルム株式会社 被験物質の検出方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0281201A1 (en) * 1987-03-03 1988-09-07 PB Diagnostic Systems, Inc. Self contained immunoassay element
US5399316A (en) * 1992-03-13 1995-03-21 Olympus Optical Co., Ltd. Reaction vessel for conducting an immunological assay
US6017494A (en) * 1996-09-30 2000-01-25 Fujirebio Inc. Liquid supply device and analytical test device
WO2003025573A1 (en) * 2001-09-17 2003-03-27 Pharmacia Diagnostics Ab Multi-analyte assay device with multi-spot detection zone
CN101098956A (zh) * 2002-12-26 2008-01-02 梅索磅秤技术有限公司 检定盒及其使用方法
CN1781022A (zh) * 2003-04-25 2006-05-31 拜奥迪吉特实验室技术公司 用于进行现场测试的膜条生物传感器系统
CN1938577A (zh) * 2004-03-31 2007-03-28 欧姆龙株式会社 局域等离子共振传感器和检查装置
JP2009014690A (ja) * 2007-07-09 2009-01-22 Otsuka Pharmaceut Co Ltd 試験紙測定容器

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHANGJIN CUI ET AL: "A chromatographic strip test for rapid detection of one lineage of the H5 subtype of highly pathogenic avian influenza", 《J VET DIAGN INVEST》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107110858A (zh) * 2015-01-16 2017-08-29 富士胶片株式会社 免疫层析试剂盒
CN107110858B (zh) * 2015-01-16 2019-03-08 富士胶片株式会社 免疫层析试剂盒
CN108369228A (zh) * 2015-12-18 2018-08-03 富士胶片株式会社 免疫层析试剂盒
CN108367504A (zh) * 2015-12-18 2018-08-03 富士胶片株式会社 超声波焊接方法及利用超声波焊接方法的树脂制容器的制造方法
CN108369228B (zh) * 2015-12-18 2020-11-17 富士胶片株式会社 免疫层析试剂盒

Also Published As

Publication number Publication date
US8802426B2 (en) 2014-08-12
EP2414834B1 (en) 2015-04-22
EP2414834A4 (en) 2013-05-22
KR20110137384A (ko) 2011-12-22
JP2010230634A (ja) 2010-10-14
CN102378913B (zh) 2014-08-27
WO2010114145A1 (en) 2010-10-07
US20120058465A1 (en) 2012-03-08
EP2414834A1 (en) 2012-02-08
KR101636804B1 (ko) 2016-07-06
JP5430995B2 (ja) 2014-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102378913B (zh) 用于分析的方法和装置
US8999730B2 (en) Immunochromatography method
JP5276568B2 (ja) アッセイ用デバイス
JP5683543B2 (ja) クロマトグラフキット及びクロマトグラフ方法
JP5416159B2 (ja) 高感度なイムノクロマトグラフ方法
EP2713164B1 (en) Chromatography method and kit
US20030045001A1 (en) Immunochromatographic test strip with arcuate sample application zone for ease-of-use in the field
UA19871U (en) Diagnostic device for detecting analyte
KR101919330B1 (ko) 고감도의 면역크로마토그래프 방법 및 면역크로마토그래프용 키트
JP7130045B2 (ja) イムノクロマトグラフキットおよび結核菌の検出方法
EP4040151A1 (en) Immunological test method and jig for condensation
JPWO2020045524A1 (ja) クロマトグラフキットおよびクロマトグラフ方法
KR20120028914A (ko) 고체상 기반 바이오어세이에 있어서 시그널 판독성을 향상시키기 위한 시그널생성 및 시그널 국소화 방법
JP5066498B2 (ja) アッセイ方法
JP5011244B2 (ja) 被験物質の検出方法
EP2784509B1 (en) Chromatography method, and chromatography kit
JP7425883B2 (ja) 濃縮デバイス、検体液の濃縮方法、検体液の検査方法、及び、検査キット
WO2023008128A1 (ja) 検査用カートリッジ
JP5265423B2 (ja) クロマトグラフ方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant