JPWO2020045524A1 - クロマトグラフキットおよびクロマトグラフ方法 - Google Patents
クロマトグラフキットおよびクロマトグラフ方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2020045524A1 JPWO2020045524A1 JP2020539557A JP2020539557A JPWO2020045524A1 JP WO2020045524 A1 JPWO2020045524 A1 JP WO2020045524A1 JP 2020539557 A JP2020539557 A JP 2020539557A JP 2020539557 A JP2020539557 A JP 2020539557A JP WO2020045524 A1 JPWO2020045524 A1 JP WO2020045524A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substance
- chromatographic
- binding
- silver
- labeling substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 43
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 351
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 151
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims abstract description 121
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 101
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims abstract description 87
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims abstract description 87
- -1 silver ions Chemical class 0.000 claims abstract description 60
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 51
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 50
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract description 48
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 39
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 claims abstract description 33
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims abstract description 32
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 239000006173 Good's buffer Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 89
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 63
- SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methylglycine Chemical compound OCC(CO)(CO)[NH2+]CC([O-])=O SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 31
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 25
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical group [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 22
- FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N N,N-bis(2-hydroxyethyl)glycine Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)=O FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 claims description 18
- 239000007998 bicine buffer Substances 0.000 claims description 18
- UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N Syringetin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical group [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 13
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 13
- GIZQLVPDAOBAFN-UHFFFAOYSA-N HEPPSO Chemical compound OCCN1CCN(CC(O)CS(O)(=O)=O)CC1 GIZQLVPDAOBAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- MKWKNSIESPFAQN-UHFFFAOYSA-N N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCNC1CCCCC1 MKWKNSIESPFAQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 12
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 11
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000008000 CHES buffer Substances 0.000 claims description 8
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 8
- 208000034953 Twin anemia-polycythemia sequence Diseases 0.000 claims description 8
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 7
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 claims description 6
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 6
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 claims description 6
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 claims description 5
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 claims description 5
- YNLCVAQJIKOXER-UHFFFAOYSA-N N-[tris(hydroxymethyl)methyl]-3-aminopropanesulfonic acid Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCCS(O)(=O)=O YNLCVAQJIKOXER-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 claims 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 99
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 89
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 89
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 54
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 29
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 25
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 24
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 22
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 22
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 22
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 21
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 20
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 20
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 18
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 18
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 17
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 17
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 description 15
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 14
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 14
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 10
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 10
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 10
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 9
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 8
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 8
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 6
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- GGCZERPQGJTIQP-UHFFFAOYSA-N sodium;9,10-dioxoanthracene-2-sulfonic acid Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(=O)C3=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C3C(=O)C2=C1 GGCZERPQGJTIQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 5
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 4
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 4
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical group C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229940081735 acetylcellulose Drugs 0.000 description 3
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 3
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 3
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001746 injection moulding Methods 0.000 description 3
- 229910052976 metal sulfide Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 3
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N Bipyridyl Chemical group N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1 ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-isoascorbic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 2
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 2
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 2
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 2
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- JRBPAEWTRLWTQC-UHFFFAOYSA-N dodecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCN JRBPAEWTRLWTQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- ZBKIUFWVEIBQRT-UHFFFAOYSA-N gold(1+) Chemical compound [Au+] ZBKIUFWVEIBQRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- MVFCKEFYUDZOCX-UHFFFAOYSA-N iron(2+);dinitrate Chemical compound [Fe+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O MVFCKEFYUDZOCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VCJMYUPGQJHHFU-UHFFFAOYSA-N iron(3+);trinitrate Chemical compound [Fe+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O VCJMYUPGQJHHFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000011133 lead Substances 0.000 description 2
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 239000010970 precious metal Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 2
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229910052718 tin Inorganic materials 0.000 description 2
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 2
- ILBBPBRROBHKQL-SAMGZKJBSA-N (2s)-3,4-dihydroxy-2-[(1r,2r)-1,2,3-trihydroxypropyl]-2h-furan-5-one Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(=O)C(O)=C1O ILBBPBRROBHKQL-SAMGZKJBSA-N 0.000 description 1
- 150000005206 1,2-dihydroxybenzenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000005208 1,4-dihydroxybenzenes Chemical class 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-UHFFFAOYSA-N 2-(1,2-dihydroxyethyl)-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one Chemical compound OCC(O)C1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFOCOVNPZDVGDV-UHFFFAOYSA-N 3,4,5-trihydroxy-2-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=C(O)C(O)=C(O)C=C1C(O)=O CFOCOVNPZDVGDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JCYPECIVGRXBMO-UHFFFAOYSA-N 4-(dimethylamino)azobenzene Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1N=NC1=CC=CC=C1 JCYPECIVGRXBMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLIKAWJENQZMHA-UHFFFAOYSA-N 4-aminophenol Chemical class NC1=CC=C(O)C=C1 PLIKAWJENQZMHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UJAQYOZROIFQHO-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-1,10-phenanthroline Chemical compound C1=CC=C2C(C)=CC3=CC=CN=C3C2=N1 UJAQYOZROIFQHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PDDBTWXLNJNICS-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-1,10-phenanthroline Chemical compound C1=CC=C2C([N+](=O)[O-])=CC3=CC=CN=C3C2=N1 PDDBTWXLNJNICS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000000996 L-ascorbic acids Chemical class 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 239000004820 Pressure-sensitive adhesive Substances 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- ZSILVJLXKHGNPL-UHFFFAOYSA-L S(=S)(=O)([O-])[O-].[Ag+2] Chemical compound S(=S)(=O)([O-])[O-].[Ag+2] ZSILVJLXKHGNPL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SMEGJBVQLJJKKX-HOTMZDKISA-N [(2R,3S,4S,5R,6R)-5-acetyloxy-3,4,6-trihydroxyoxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O1)O)OC(=O)C)O)O SMEGJBVQLJJKKX-HOTMZDKISA-N 0.000 description 1
- BRZFXXZMJGXMMM-UHFFFAOYSA-N [Ag].S(O)O Chemical compound [Ag].S(O)O BRZFXXZMJGXMMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 238000004630 atomic force microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- SFZULDYEOVSIKM-UHFFFAOYSA-N chembl321317 Chemical compound C1=CC(C(=N)NO)=CC=C1C1=CC=C(C=2C=CC(=CC=2)C(=N)NO)O1 SFZULDYEOVSIKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 125000000664 diazo group Chemical group [N-]=[N+]=[*] 0.000 description 1
- AXCXNCAUYZRGHF-UHFFFAOYSA-N dibutoxy(phenyl)borane Chemical compound CCCCOB(OCCCC)C1=CC=CC=C1 AXCXNCAUYZRGHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000000806 elastomer Substances 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000009532 heart rate measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 229910001092 metal group alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- STZCRXQWRGQSJD-GEEYTBSJSA-M methyl orange Chemical compound [Na+].C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 STZCRXQWRGQSJD-GEEYTBSJSA-M 0.000 description 1
- 229940012189 methyl orange Drugs 0.000 description 1
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229920006284 nylon film Polymers 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 150000004989 p-phenylenediamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 210000004915 pus Anatomy 0.000 description 1
- NDGRWYRVNANFNB-UHFFFAOYSA-N pyrazolidin-3-one Chemical class O=C1CCNN1 NDGRWYRVNANFNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003232 pyrogallols Chemical class 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002683 reaction inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- CQLFBEKRDQMJLZ-UHFFFAOYSA-M silver acetate Chemical compound [Ag+].CC([O-])=O CQLFBEKRDQMJLZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940071536 silver acetate Drugs 0.000 description 1
- LMEWRZSPCQHBOB-UHFFFAOYSA-M silver;2-hydroxypropanoate Chemical compound [Ag+].CC(O)C([O-])=O LMEWRZSPCQHBOB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JKOCEVIXVMBKJA-UHFFFAOYSA-M silver;butanoate Chemical compound [Ag+].CCCC([O-])=O JKOCEVIXVMBKJA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001370 static light scattering Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 125000001174 sulfone group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- PRZSXZWFJHEZBJ-UHFFFAOYSA-N thymol blue Chemical compound C1=C(O)C(C(C)C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C(=CC(O)=C(C(C)C)C=2)C)=C1C PRZSXZWFJHEZBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012780 transparent material Substances 0.000 description 1
- 238000007740 vapor deposition Methods 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000003466 welding Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
- G01N33/54389—Immunochromatographic test strips based on lateral flow with bidirectional or multidirectional lateral flow, e.g. wherein the sample flows from a single, common sample application point into multiple strips, lanes or zones
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2470/00—Immunochemical assays or immunoassays characterised by the reaction format or reaction type
- G01N2470/04—Sandwich assay format
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2470/00—Immunochemical assays or immunoassays characterised by the reaction format or reaction type
- G01N2470/10—Competitive assay format
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2474/00—Immunochemical assays or immunoassays characterised by detection mode or means of detection
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
[1] 被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質と、非イオン性界面活性剤と、グッド緩衝剤と、カゼインと、上記被検物質に対する第二の結合物質または上記第一の結合物質に対する結合物質を有する多孔性担体と、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とを含む、クロマトグラフキット。
[2] グッド緩衝剤が、Tricineとも称するN−[トリス(ヒドロキシメチル)メチル]グリシン、HEPPSOとも称する2−ヒドロキシ−3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸・一水和物、TAPSとも称するN−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸、CHESとも称するN−シクロヘキシル−2−アミノエタンスルホン酸、またはBicineとも称するN,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)グリシンである、[1]に記載のクロマトグラフキット。
[3] 非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート界面活性剤である、[1]または[2]に記載のクロマトグラフキット。
[4] 標識物質が、金属粒子である、[1]から[3]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
[5] 標識物質が、金、銀、白金、またはそれらの化合物である、[1]から[4]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
[6] 銀を含む化合物が硝酸銀である、[1]から[5]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
[7] 銀イオンを還元し得る還元剤が、Fe2+である、[1]から[6]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
[8] 多孔性担体が、
被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質を有する標識物質保持領域と、
被検物質に対する第二の結合物質または上記第一の結合物質に対する結合物質を有する標識物質捕捉領域と、
銀イオンを還元し得る還元剤を検出するための発色試薬を有する発色領域と、
を有する、[1]から[7]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
[9] 多孔性担体がニトロセルロース担体である、[1]から[8]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
[10] 第一の結合物質および第二の結合物質が抗体である、[1]から[9]の何れか一に記載のクロマトグラフキット。
上記標識物質捕捉領域において、上記被検物質と、上記被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質との複合体を捕捉する工程と、
捕捉された上記複合体の標識物質のシグナルを、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とを用いて増幅する工程と、
を含む、クロマトグラフ方法。
[12] グッド緩衝剤が、Tricineとも称するN−[トリス(ヒドロキシメチル)メチル]グリシン、HEPPSOとも称する2−ヒドロキシ−3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸・一水和物、TAPSとも称するN−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸、CHESとも称するN−シクロヘキシル−2−アミノエタンスルホン酸、またはBicineとも称するN,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)グリシンである、[11]に記載のクロマトグラフ方法。
[13] 展開液中の非イオン性界面活性剤の終濃度が0.05〜2.5質量%である、[11]または[12]に記載のクロマトグラフ方法。
[14] 非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート界面活性剤である、[11]から[13]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[15] 標識物質が、金属粒子である、[11]から[14]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[16] 標識物質が、金、銀、白金、またはそれらの化合物である、[11]から[15]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[17] 検出時に1μm以上20μm以下の平均粒径を有する標識物質を検出する、[11]から[16]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[18] 銀を含む化合物が硝酸銀である、[11]から[17]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[19] 銀イオンを還元し得る還元剤がFe2+である、[11]から[18]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[20] 多孔性担体がニトロセルロース担体である、[11]から[19]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
[21] 被検物質を含む試料が、鼻汁、鼻腔拭い液、咽頭拭い液、鼻腔吸引液、または尿である[11]から[20]の何れか一に記載のクロマトグラフ方法。
本明細書において「〜」を用いて示された数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値をそれぞれ最小値および最大値として含む範囲を意味する。
上記標識物質捕捉領域において、上記被検物質と、上記被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質との複合体を捕捉する工程と、
捕捉された上記複合体の標識物質のシグナルを、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とを用いて増幅する工程、
とを含む方法である。
一般には、クロマトグラフ方法とは以下のような手法で被検物質を簡便・迅速・特異的に判定および測定する手法である。すなわち、被検物質と結合可能な結合物質(具体的には抗体など)を有する検出部位の少なくとも1つを有する標識物質捕捉領域を有することが可能なメンブレン(多孔性担体)を固定相として用いる。この多孔性担体上で、被検物質に対する第一の結合物質によって修飾された標識物質を含む液を移動層としてクロマトグラフ的に移動させると共に、被検物質と標識物質とが特異的に結合しながら、検出部位を有する標識物質捕捉領域まで到達する。標識物質捕捉領域の検出部位において、被検物質と標識物質の複合体が、固定化された第二の結合物質に特異的に結合することにより、被検試料中に被検物質が存在する場合にのみ、第二の結合物質に標識物質が濃縮されることを利用し、それらを目視または適当な機器を用いて被検試料中に被検物質が存在することを定性的および定量的に分析する手法である。
本発明のクロマトグラフ方法およびキットを用いて分析することのできる被検試料としては、被検物質を含む可能性のある試料である限り、特に限定されるものではなく、例えば、生物学的試料、特には動物(特にヒト)の体液(例えば、血液、血清、血漿、髄液、涙液、汗、尿、膿、鼻汁、鼻腔拭い液、咽頭拭い液、鼻腔吸引液、または喀痰)若しくは排泄物(例えば、糞便)、臓器、組織、粘膜や皮膚、それらを含むと考えられる擦過検体(スワブ)、または動植物それ自体若しくはそれらの乾燥体を挙げることができる。好ましくは、被検物質を含む試料は、鼻汁、鼻腔拭い液、咽頭拭い液、鼻腔吸引液、または尿である。
被検物質を含む試料を多孔性担体上に展開する際の展開液は、非イオン性界面活性剤と、グッド緩衝剤と、カゼインとを含む。
グッド緩衝剤の具体例を以下の表1に記載する。本発明においてはpH8〜9(例えば、pH8.5)の緩衝能を有するグッド緩衝剤を使用することが好ましい。
本発明のクロマトグラフキットにおいては、クロマトグラフ用ストリップを組み込み使用することができる。使用することのできるクロマトグラフ用ストリップとしては、通常のクロマトグラフ法に用いることができるクロマトグラフ用ストリップである限り、特に限定されるものではない。
本発明で用いる標識物質としては、被検物質に対する第一の結合物質を標識するのに用いる標識として、金属を含む標識物質を用いることが好ましい。標識物質は、金属粒子であることがさらに好ましい。本発明で用いることができる金属の種類としては、好ましくは、金、銀、白金の貴金属や、鉄、鉛、銅、カドミウム、ビスマス、アンチモン、錫、または水銀を用いることができ、それらの化合物を用いることができる。更に好ましくは金、銀、白金の貴金属を用いることができる。本発明において使用できる金属を含む標識物質の好ましい形態としては、金属コロイド標識または金属硫化物標識を用いることができる。本発明においては、金属コロイド標識としては、好ましくは、白金コロイド、金コロイド、銀コロイド、鉄コロイド、または水酸化アルミニウムコロイドなどを用いることができ、金属硫化物標識としては、好ましくは、鉄、銀、鉛、銅、カドミウム、ビスマス、アンチモン、錫、または水銀の各硫化物を用いることができる。本発明においては更に好ましくは、白金コロイド、金コロイド、銀コロイド、最も好ましくは金コロイドを用いることができる。金属コロイド標識として金コロイド粒子を用いる場合には、市販のものを用いてもよい。あるいは、常法、例えば塩化金酸をクエン酸ナトリウムで還元する方法(Nature Physical Science,241(1973)20等)により金コロイド粒子を調製することができる。
本発明では、標識物質は、被検物質に対する第一の結合物質で修飾されている。第一の結合物質とは、例えば被検物質(抗原)に対する抗体、被検物質(抗体)に対する抗原、被検物質(たんぱく質、低分子化合物等)に対するアプタマーなど、被検物質に対して親和性を持つ化合物であれば何でもよい。
本発明で用いることができる多孔性担体としては、特に、ニトロセルロース担体(ニトロセルロース膜など)、セルロース膜、アセチルセルロース膜、ポリスルホン膜、ポリエーテルスルホン膜、ナイロン膜、ガラス繊維、不織布、布、または糸等が好ましい。
本発明においては、標識物質保持領域を有する標識物質保持パッド、好ましくは金コロイド保持パッドをクロマトグラフキットに組み込んで使用する態様が好ましい。標識物質保持パッドの素材としては、例えば、セルロース濾紙、グラスファイバー、および不織布等を好ましく使用することができ、前述のように調製した標識物質を一定量含浸し、乾燥させて標識物質保持領域とすることができる。
本発明のクロマトグラフキットは更に、試料添加パッドを組み込み使用することが好ましい。試料添加パッドは、添加された被検物質を含む試料を受け入れるだけでなく、試料中の不溶物粒子等を濾過する機能をも兼ねる態様が好ましい。試料添加パッドの材質としては、セルロース濾紙、ガラス繊維、ポリウレタン、ポリアセテート、酢酸セルロース、ナイロン、および綿布等の均一な特性を有するものが挙げられる。また、分析の際、試料中の被検物質が試料添加パッドの材質に非特異的に吸着し、分析の精度を低下させることを防止するため、試料添加部を構成する材質は、予め非特異的吸着防止処理して用いることもできる。本発明においては、試料添加パッドは、標識物質保持領域を有する標識物質保持パッドを兼ねていてもよい。
本発明においては、吸水パッドをクロマトグラフキットに好ましく組み込んで用いることができる。吸水パッドは、添加された試料がクロマト移動により物理的に吸収されると共に、クロマトグラフ担体の検出部に不溶化されない未反応標識物質等を吸収除去する部位であり、セルロ−ス濾紙、不織布、布、セルロースアセテート等吸水性材料が用いられる。添加された試料のクロマト先端部が吸水パッドに届いてからのクロマトの速度は、吸水パッドの材質、大きさなどにより異なるので、その選定により被検物質の測定に合った速度を設定することができる。
本発明で用いるクロマトグラフキットにおいては、発色試薬は、多孔性担体に担持されていることが好ましい。
被検試料を含む水溶液または第1の増幅試薬を含む水溶液のいずれかを展開した際に、発色試薬が多孔性担体中を実質的に移動する場合には、発色試薬を吸水パッドに含有させて使用することが好ましい。
標識物質捕捉領域に第1の増幅試薬が到達したことをより小さいタイムラグで表示することを可能とするため、本発明においては発色試薬を多孔性担体に担持させる態様がより好ましい。
以下、本発明のクロマトグラフ方法について、その具体的な実施態様であるサンドイッチ法および競合法について説明する。
サンドイッチ法では、特に限定されるものではないが、例えば、以下の手順により被検物質の分析を実施することができる。まず、被検物質に対する第一の結合物質、および被検物質に対する第二の結合物質を予め調製しておく。また、第一の結合物質で、予め標識物質を修飾しておく。第二の結合物質を、適当なクロマトグラフ担体(多孔性担体)(例えば、ニトロセルロ−ス膜、ガラス繊維膜、ナイロン膜、またはセルロ−ス膜等)上に固定して標識物質捕捉領域とし、被検物質を含む可能性のある被検試料(またはその抽出液)と接触させると、その被検試料中に被検物質が存在する場合には、第二の結合物質との結合(例えば、第二の結合物質との抗原抗体反応)が起こる。被検物質と第二の結合物質との結合と同時または結合後に、更に第一の結合物質で修飾した標識物質を過剰量接触させると、被検試料中に被検物質が存在する場合には、固定化された第二の結合物質と被検物質と第一の結合物質で修飾した標識物質とからなる複合体が形成される。
増幅試薬は、標識物質や被検物質の作用により、触媒的に反応することで、着色した化合物や発光などを生じ、シグナルの増幅を起こすことができる試薬であり、試薬を含有する溶液の状態、即ち増幅液として使用することができる。例えば、金属標識上で、物理現像により金属銀の析出を起こす銀イオン溶液や、ペルオキシダーゼ標識と過酸化水素の作用により色素となる、フェニレンジアミン化合物とナフトール化合物の溶液などが挙げられる。
以下、第1の増幅液に含まれる銀イオンを還元し得る還元剤と第2の増幅液に含まれる銀を含む化合物等について説明する。
銀を含む化合物としては、銀イオン含有化合物、例えば、有機銀塩、無機銀塩、もしくは銀錯体を用いることができる。好ましくは、水などの溶媒に対して溶解度の高い銀イオン含有化合物であり、硝酸銀、酢酸銀、乳酸銀、酪酸銀、チオ硫酸銀などが挙げられる。特に好ましくは硝酸銀である。銀錯体としては、水酸基やスルホン基など水溶性基を有する配位子に配位された銀錯体が好ましく、ヒドロキシチオエーテル銀等が挙げられる。
銀イオンを還元し得る還元剤は、銀イオンを銀に還元することができれば、無機・有機のいかなる材料、またはその混合物でも用いることができる。
無機還元剤としては、Fe2+、V2+、Ti3+、などの金属イオンで原子価の変化し得る還元性金属塩、還元性金属錯塩を好ましく挙げることができる。無機還元剤を用いる際には、酸化されたイオンを錯形成するか還元して、除去するか無害化する必要がある。例えば、Fe2+を還元剤として用いる系では、クエン酸やEDTAを用いて酸化物であるFe3+の錯体を形成し、無害化することができる。本系ではこのような無機還元剤を用いることが好ましく、より好ましくはFe2+の金属塩が好ましい。
増幅液のその他の助剤としては、緩衝剤、防腐剤、例えば酸化防止剤または有機安定剤、速度調節剤を含む場合がある。緩衝剤としては、例えば、酢酸、クエン酸、水酸化ナトリウムまたはこれらの塩、またはトリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンを用いた緩衝剤、その他一般的化学実験に用いられる緩衝剤を用いることができる。これら緩衝剤を適宜用いて、その増幅溶液に最適なpHに調整することができる。また、カブリ防止剤としてアルキルアミンを添加剤として用いることができ、特に好ましくはドデシルアミンである。またこれら添加剤の溶解性向上のため、界面活性剤を用いることができ、特に好ましくはC9H19-C6H4-O-(CH2CH2O)50Hである。
2種の増幅試薬をクロマトグラフキットに内蔵する方法としては、各増幅試薬を含む溶液を含むポットを、各増幅試薬を点着する部位の上部に配置する方法が挙げられる。還元剤溶液(第1の増幅液)を、還元剤溶液を送液するためのパッドの上部に置き、銀イオン溶液(第2の増幅液)を含むポットを銀イオン溶液充填孔のすぐ上部に設置することが好ましい。このように配置することにより、それぞれのポットを押すことで液が流れ、所定の部位に点着することができる。
本発明のクロマトグラフキットにおいては、被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質を予め多孔性担体上に具えているものでもよいし、あるいは、被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質を多孔性担体とは別に具えているものでもよい。この場合、多孔性担体とは別に具えられた、被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質を、被検試料と混合した後に多孔性担体上を展開するなどの方法で測定を行うことができる。
本発明のクロマトグラフキットはさらに、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とを含む。
本発明のクロマトグラフキットは、破断可能な部材を備えたポットをさらに含み、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とがそれぞれ上記ポットに封入されていてもよい。この場合、上記ポットが、外力によって破断することができる。
図1〜図3に示すように、本実施形態のクロマトグラフキット100は、試料液を展開させる、被検物質の検査領域を有する多孔性担体2を含む検査用ストリップ1と、検査領域における検出シグナルを増幅するための、第1の増幅液41および第2の増幅液46がそれぞれ封入された、シート部材を備えた一面を有する第1のポット40および第2のポット45とがハウジングケース9に内包されてなる。ハウジングケース9は、検査用ストリップ1が配置される収容部21を備えた下部ケース20と、下部ケース20と周縁で接合された上部ケース10と、上部ケース10と下部ケース20との間に配置された中間部材30とを備えてなる。なお、本クロマトグラフキット100を説明するに当たっては、上部ケース10側を上、下部ケース20側を下と定義する。
第2の増幅液46が封入された第2のポット45も同様に、例えば樹脂材料から構成された一面に開口を有する容器47に第2の増幅液46が充填され、その容器47の開口が破断可能なシート部材48により覆われ封止されている。
第1のポット40および第2のポット45における破断可能なシート部材43、48としては、アルミ箔やアルミラミネートシートなどのラミネートフィルムが好適に使用される。ここで、破断とは、破れた後に再生しない状態をいう。
検出時(増幅後)、テストライン部を切り出し、試料裏面をカーボンペーストで試料台に取り付けた後、断面を切り、カーボン蒸着し、走査型電子顕微鏡にて、形状と大きさを観察する。例えば、日立ハイテクノロジーズ製FE-STEM S-5500で、加速電圧10KVで反射電子による試料表面の観察を走査型電子顕微鏡(Scanning Electron Microscope、SEM)で行うことができる。その後、シグナル粒子を100粒子選び、粒子の投影面積の円相当直径を測定し、平均値を算出し、検出時の平均粒径とする。
検出時の標識物質の平均粒径は好ましくは1μm以上20μm以下であり、さらに好ましくは3μm以上20μm以下である。
(1−1)抗体修飾金コロイドの作製
直径50nmの金コロイドを含有する溶液(品番:EM.GC50、BBI社製)9mLに50mmol/LのKH2PO4バッファー(pH7.5)を1mL加えてpHの調整を行い、その後、160μg/mLの抗インフルエンザA型モノクローナル抗体(Anti−Influenza A SPTN−5 7307、Medix Biochemica社製)含有溶液1mLを加えて10分間攪拌した。その後、10分間静置した後に、1質量%のポリエチレングリコール(PEG(polyethylene glycol);重量平均分子量(Mw.):20000、品番:168−11285、富士フイルム和光純薬(株)社製)含有水溶液を550μL加えて10分間攪拌し、続いて10質量%牛血清アルブミン(BSA(Bovine serum albumin);FractionV、品番:A−7906、SIGMA社製)の水溶液を1.1mL加えて10分間攪拌した。この溶液を遠心分離装置(himacCF16RX、日立(株)社製)を用いて、8000×g、4℃の条件で30分間遠心分離した。容器の底に1mLを残して上澄み液を取り除き、超音波洗浄機により容器の底に残った1mL液中に含まれる金コロイドを再分散した。この後、20mLの金コロイド保存液(20mmol/L Tris−HCl(トリス塩酸)バッファー(pH8.2)、0.05%PEG(Mw.20000)、150mmol/L NaCl、1%BSA)に分散し、再び同じ遠心分離装置を用いて同様の条件で遠心分離を行い、上澄み液を取り除き、超音波分散後、金コロイド保存液に分散し、被検物質に結合可能な第1の物質である抗体が修飾された標識物質としての抗インフルエンザA型抗体修飾金コロイド(50nm)溶液を得た。
(1−1)で作製したインフルエンザA型抗体修飾金コロイドを、Tris−HClバッファー(pH8.2)の濃度が20mmol/L、PEG(Mw.20000)の濃度が0.05質量%、スクロースの濃度が5質量%、そして光路長10mmとしたときの金コロイドの520nmの光学濃度が0.2となるように水で希釈し、金コロイド塗布液とした。この塗布液を、5mm×300mmに切ったグラスファイバーパッド(GlassFiber Conjugate Pad、ミリポア社製)1枚あたり0.1mLずつ均一に塗布し、24時間減圧乾燥することで抗インフルエンザA型抗体修飾金コロイド保持パッドを得た。
多孔性担体として、60mm×300mmに切断したニトロセルロースメンブレン(プラスチックの裏打ちあり、HiFlow Plus HF135(キャピラリーフローレート=135秒/cm)、ミリポア社製)を用い、このメンブレン上に以下のような方法により、検査領域、確認領域および増幅指標領域を形成してクロマトグラフ担体を作製した。
バック粘着シート(60mm×300mm(ニップンテクノクラスタ社製))に、(1−3)で作製したクロマトグラフ担体を貼り付けた。次に、クロマトグラフ担体の短辺のうちの下流側から26mmの位置に幅3mmの両面テープ(日東電工)を固定した。その後、両面テープの下流端と8mm×300mmに切ったグラスファイバーパッド(GlassFiber Conjugate Pad、ミリポア社製)の下流端が重なるようにして金コロイド保持パッドをクロマトグラフ担体に固定した。送液用パッド(25mm×300mmに切ったグラスファイバーパッド(Glass Fiber Conjugate Pad、ミリポア社製))をクロマトグラフ担体の上流側に、送液用パッドとクロマトグラフ担体が7mm重なるように貼り付けた。こうして作製した部材を、300mmの長辺と垂直な方向に対して平行に、幅が5mmとなるようにギロチン式カッター(CM4000、ニップンテクノクラスタ社製)で切断し、60本の検査用ストリップ(但し、吸収パッドを含まない。)を作製した。
(1−5−1)第2のポットに封入する増幅液(還元剤溶液)の作製
水290gに、硝酸鉄(III)九水和物(富士フイルム和光純薬(株)社製、095−00995)を水に溶解して作製した1mol/Lの硝酸鉄水溶液23.6mL、クエン酸(富士フイルム和光純薬(株)社製、038−06925)13.1gを溶解させた。全て溶解したら、スターラーで攪拌しながら硝酸(10質量%)溶液を36mL加え、硫酸アンモニウム鉄(II)六水和物(富士フイルム和光純薬(株)社製、091−00855)を60.8g加えた。このように調製した溶液を第2のポットに封入する第2の増幅液である還元剤溶液とした。
水66gに、硝酸銀溶液8mL(10gの硝酸銀を含む)と1mol/Lの硝酸鉄水溶液24mLを加えた。さらに、この溶液と、硝酸(10質量%)5.9mL、ドデシルアミン(富士フイルム和光純薬(株)社製、123−00246)0.1g、界面活性剤C12H25-C6H4-O-(CH2CH2O)50H 0.1gをあらかじめ47.6gの水に溶解した溶液を混合し、これを第1のポットに封入する第1の増幅液である銀イオン溶液とした。
12mm×10mmに切ったグラスファイバーパッド(ガラス濾紙、アドバンテック社製)を60枚準備し、吸収パッドとした。
図1に示すようなクロマトグラフキット100を構成する下部ケース20、上部ケース10、中間部材30、および第1のポット40、第2のポット45を、ポリプロピレンを材料として射出成形によりそれぞれ作製した。上部ケースは住友化学(株)社製オレフィン系エラストマーであるタフセレン(登録商標)を50質量%含有するポリプロピレンを材料として射出成形により作製した。なお、上部ケース10は、2つの変形可能な部位(第1の凸状変形部と第2の凸状変形部と)を備え、この2つの変形部は上部ケース10と分離する部分はなく、すべての境界部で上部ケース10の一部として射出成形で作製した。
なお、上部ケースは、図1および図2等に示す第1の凸状変形部12が2本の突起部を有し、第2の凸状変形部14が1本の突起部を有する構成とした。
下部ケース20、(1−4)で作製した検査用ストリップ1と(1−6)で作製した吸収パッド6を、図1および図2に示すように固定した。次に、第1のポット40、第2のポット45に、それぞれ、(1−5−2)、(1−5−1)で作製した第1のポット40に封入する増幅液41、第2のポット45に封入する増幅液46を充填し、シート部材48としてのアルミ箔でポット45を、シート部材43としてのアルミ箔でポット40をそれぞれ封止し、図1および図2に示すように、第2のポット45を、シート部材48を上にして下部ケース20に、第1のポット40を、シート部材43を下にして中間部材30に装着した。そして、上部ケース10と下部ケース20とを外周同士が接触するように嵌め合わせた状態で、上部ケースと下部ケースとの接触部を超音波溶着により接合させた。このとき、溶着部位は密閉状態で均一にすべての部位で溶着されていることを確認した。このようにして実施例1のクロマトグラフキットを作製した。
0.1質量%カゼイン、1質量%Tween(登録商標)40を含む400mmol/L Tricine緩衝液(pH8.5)の展開液を調製し、1.5mLチューブに100μL添加し、これを鼻汁・痰・咽頭ぬぐい液・尿等の検体を処理するための試薬とした。
(2−1)点着
健常人の鼻汁を含んだPBS(リン酸緩衝生理食塩水)を用いて、市販の不活化インフルエンザAウイルスをタンパク濃度1.0ng/mLとなるように希釈した液100μLを、(1−9)で作製した試薬に添加・溶解させたものを陽性検体試料とした。また不活化インフルエンザAウイルスを含まない、健常人の鼻汁を含んだPBS100μLを、(1−9)で作製した試薬に添加・溶解させたものを陰性検体試料とした。これらの陽性検体試料、陰性検体試料に(1−2)で作製したインフルエンザA型抗体修飾金コロイド保持パッドを5mm×4mmに切ったものを添加し、120分間静置させた。静置した後、各液40μLを点着した。
(2−1)の試料液を点着して30分後に、第2の凸状変形部14を押下することで、第2のポット45に封入した増幅液46を封止しているシート部材48であるアルミ箔を破り、第2のポット45の中に送液用パッド4を浸すことにより、毛細管現象を利用して第2の増幅液46を多孔性担体2に供給した。
増幅指標領域L3が緑からオレンジに変色した後、第1の凸状変形部12(実施例2では第1の凸状変形部114)を押下して第1のポット40を中間部材30のポット収容部32の破断部34に向けて移動させることにより、第1のポット40を封止しているシート部材43であるアルミ箔を破断部34により押し破り、第1の増幅液41である銀イオン溶液を中間部材30の開口部から多孔性担体2に供給して、銀増幅反応を行った。銀増幅反応は数十秒で完了する。
増幅処理済みの実施例1のクロマトグラフキットの検査領域L1および確認領域L2の濃度を目視で観察した。さらに、実施例1のクロマトグラフキットから、クロマトグラフ担体を取り出し、検査領域L1の濃度をLAS4000(Fujifilm(株)社製)で撮影し、濃度差(ΔOD=(検査領域L1の濃度)−(バックグラウンド部の濃度))を算出した。ΔOD≧0.020であれば増幅結果はおおむね良好といえる。
評価結果を表3に示す。
実施例1の(1−9)において、1質量%Tween40の代わりに、1質量%Tween60を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、0.5質量%Tween60になる。評価結果を表3に示す。
実施例1の(1−9)において、1質量%Tween40の代わりに、1質量%Tween80を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、0.5質量%Tween80になる。評価結果を表3に示す
実施例1の(1−9)において、1質量%Tween40を含まないこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。評価結果を表3に示す。
実施例1の(1−9)において、0.1質量%カゼインの代わりに、0.1質量%BSAを使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、0.05質量%BSAになる。評価結果を表3に示す。
ΔODは、以下の基準で判定した。
+:0.020以上(視認可能な領域)
−:0.020未満。(視認不可な領域)
表内の陰性検体試料の欄における()の数値はΔODを示している。
実施例1の(1−9)において、1質量%Tween40の代わりに、5質量%Tween40を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、2.5質量%Tween40になる。評価結果を表4に示す。
実施例1の(1−9)において、1質量%Tween40の代わりに、0.1質量%Tween40を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、0.05質量%Tween40になる。評価結果を表4に示す。
ΔODは、以下の基準で判定した。
+:0.020以上(視認可能な領域)
−:0.020未満。(視認不可な領域)
表内の陰性検体試料の欄における()の数値はΔODを示している。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)の代わりに、400mmol/L Bicine(pH8.5)を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L Bicineになる。評価結果を表5に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)の代わりに、400mmol/L HEPPSO(pH8.5)を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L HEPPSOになる。評価結果を表5に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)の代わりに、400mmol/L TAPS(pH8.5)を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L TAPSになる。評価結果を表5に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)の代わりに、400mmol/L CHES(pH8.5)を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L CHESになる。評価結果を表5に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)の代わりに、400mmol/Lグリシン(pH8.5)を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/Lグリシンになる。評価結果を表5に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)の代わりに、400mmol/Lホウ酸(pH8.5)を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/Lホウ酸になる。評価結果を表5に示す。
ΔODは、以下の基準で判定した。
++:0.040以上(十分に視認可能な領域)
+:0.020以上(視認可能な領域)
−:0.020未満。(視認不可な領域)
表内の陰性検体試料および陽性検体試料の欄における()の数値はΔODを示している。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)と1質量%Tween40の代わりに、400mmol/L Bicine(pH8.5)と1質量%Tween60を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L Bicineと0.5質量%Tween60になる。評価結果を表6に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)と1質量%Tween40の代わりに、400mmol/L Bicine(pH8.5)を使用し、界面活性剤を含まないこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L Bicineとなる。評価結果を表6に示す。
実施例1の(1−9)において、400mmol/L Tricine(pH8.5)と1質量%Tween40の代わりに、400mmol/L Tris(pH8.5)と1質量%Tween60を使用したこと以外は、実施例1と同様の方法で測定を行った。展開時の展開液中に含まれる終濃度は、200mmol/L Trisと0.5質量%Tween60になる。評価結果を表6に示す。
ΔODは、以下の基準で判定した。
++:0.040以上(十分に視認可能な領域)
+:0.020以上(視認可能な領域)
−:0.020未満。(視認不可な領域)
表内の()の数値はΔODを示している。
2 多孔性担体
3 標識保持パッド(グラスファイバーパッド)
4 送液用パッド
6 吸収パッド
7 バック粘着シート
9 ハウジングケース
10 上部ケース
12 第1の凸状変形部
14 第2の凸状変形部
16 試料液滴下用開孔
18 観察窓
20 下部ケース
21 多孔性担体収容部
22 吸収パッド収容部
24 第2のポットの収容部
30 中間部材
32 第1のポットの収容部
34 破断部
35 流路形成部
36 流路形成部35の裏面
40 第1の増幅液用の第1のポット
41 第1の増幅液
42 容器
43 シート部材
45 第2の増幅液用の第2のポット
46 第2の増幅液
47 容器
48 シート部材
100 クロマトグラフキット
L1 検査領域
L2 確認領域
L3 増幅指標領域
D 隙間(クリアランス)
Claims (21)
- 被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質と、非イオン性界面活性剤と、グッド緩衝剤と、カゼインと、前記被検物質に対する第二の結合物質または前記第一の結合物質に対する結合物質を有する多孔性担体と、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とを含む、クロマトグラフキット。
- グッド緩衝剤が、Tricineとも称するN−[トリス(ヒドロキシメチル)メチル]グリシン、HEPPSOとも称する2−ヒドロキシ−3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸・一水和物、TAPSとも称するN−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸、CHESとも称するN−シクロヘキシル−2−アミノエタンスルホン酸、またはBicineとも称するN,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)グリシンである、請求項1に記載のクロマトグラフキット。
- 非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート界面活性剤である、請求項1または2に記載のクロマトグラフキット。
- 標識物質が、金属粒子である、請求項1から3の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。
- 標識物質が、金、銀、白金、またはそれらの化合物である、請求項1から4の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。
- 銀を含む化合物が硝酸銀である、請求項1から5の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。
- 銀イオンを還元し得る還元剤が、Fe2+である、請求項1から6の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。
- 多孔性担体が、
被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質を有する標識物質保持領域と、
被検物質に対する第二の結合物質または前記第一の結合物質に対する結合物質を有する標識物質捕捉領域と、
銀イオンを還元し得る還元剤を検出するための発色試薬を有する発色領域と、
を有する、請求項1から7の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。 - 多孔性担体がニトロセルロース担体である、請求項1から8の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。
- 第一の結合物質および第二の結合物質が抗体である、請求項1から9の何れか一項に記載のクロマトグラフキット。
- 被検物質を含む試料と、被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質と、非イオン性界面活性剤と、グッド緩衝剤と、カゼインとを含む展開液を、被検物質に対する第二の結合物質または前記第一の結合物質に対する結合物質を有する標識物質捕捉領域を有する多孔性担体上に展開する展開工程と、
前記標識物質捕捉領域において、前記被検物質と、前記被検物質に対する第一の結合物質で修飾した標識物質との複合体を捕捉する工程と、
捕捉された前記複合体の標識物質のシグナルを、銀を含む化合物と、銀イオンを還元し得る還元剤とを用いて増幅する工程と、
を含む、クロマトグラフ方法。 - グッド緩衝剤が、Tricineとも称するN−[トリス(ヒドロキシメチル)メチル]グリシン、HEPPSOとも称する2−ヒドロキシ−3−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル]プロパンスルホン酸・一水和物、TAPSとも称するN−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸、CHESとも称するN−シクロヘキシル−2−アミノエタンスルホン酸、またはBicineとも称するN,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)グリシンである、請求項11に記載のクロマトグラフ方法。
- 展開液中の非イオン性界面活性剤の終濃度が0.05〜2.5質量%である、請求項11または12に記載のクロマトグラフ方法。
- 非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート界面活性剤である、請求項11から13の何れか一項に記載のクロマトグラフ方法。
- 標識物質が、金属粒子である、請求項11から14の何れ一項に記載のクロマトグラフ方法。
- 標識物質が、金、銀、白金、またはそれらの化合物である、請求項11から15の何れか一項に記載のクロマトグラフ方法。
- 検出時に1μm以上20μm以下の平均粒径を有する標識物質を検出する、請求項11から16の何れかに記載のクロマトグラフ方法。
- 銀を含む化合物が硝酸銀である、請求項11から17の何れか一項に記載のクロマトグラフ方法。
- 銀イオンを還元し得る還元剤がFe2+である、請求項11から18の何れか一項に記載のクロマトグラフ方法。
- 多孔性担体がニトロセルロース担体である、請求項11から19の何れか一項に記載のクロマトグラフ方法。
- 被検物質を含む試料が、鼻汁、鼻腔拭い液、咽頭拭い液、鼻腔吸引液、または尿である請求項11から20の何れか一項に記載のクロマトグラフ方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018160179 | 2018-08-29 | ||
JP2018160179 | 2018-08-29 | ||
PCT/JP2019/033775 WO2020045524A1 (ja) | 2018-08-29 | 2019-08-28 | クロマトグラフキットおよびクロマトグラフ方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2020045524A1 true JPWO2020045524A1 (ja) | 2021-08-10 |
JP7141458B2 JP7141458B2 (ja) | 2022-09-22 |
Family
ID=69643583
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020539557A Active JP7141458B2 (ja) | 2018-08-29 | 2019-08-28 | クロマトグラフキットおよびクロマトグラフ方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP3845900A4 (ja) |
JP (1) | JP7141458B2 (ja) |
WO (1) | WO2020045524A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4249508A1 (en) * | 2020-11-17 | 2023-09-27 | FUJIFILM Corporation | Sars-cov-2 detection kit and sars-cov-2 detection method |
EP4317988A1 (en) * | 2021-03-24 | 2024-02-07 | FUJIFILM Corporation | Cartridge and immunochromatographic detection apparatus |
CN113740527A (zh) * | 2021-09-08 | 2021-12-03 | 嘉兴康源科泰科技发展有限公司 | 一种采样与检测一体化的快速检测结构及其应用 |
WO2023100825A1 (ja) * | 2021-11-30 | 2023-06-08 | 富士フイルム株式会社 | 検査キット及びクロマトグラフ方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012037253A (ja) * | 2010-08-03 | 2012-02-23 | Tanaka Kikinzoku Kogyo Kk | イムノクロマトグラフィー用試薬組成物およびそれを用いた測定方法 |
JP2012159440A (ja) * | 2011-02-01 | 2012-08-23 | Tanaka Kikinzoku Kogyo Kk | 食品中の動物肉由来タンパク質の免疫クロマト検出方法 |
JP2012211849A (ja) * | 2011-03-31 | 2012-11-01 | Fujifilm Corp | 高感度なイムノクロマトグラフ方法 |
JP2013181935A (ja) * | 2012-03-05 | 2013-09-12 | Fujifilm Corp | クロマトグラフ方法 |
WO2017104143A1 (ja) * | 2015-12-18 | 2017-06-22 | 富士フイルム株式会社 | イムノクロマトグラフキット |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6020117A (en) | 1998-09-30 | 2000-02-01 | Eastman Kodak Company | Thermally processable imaging element |
SE0002820L (sv) * | 2000-08-04 | 2002-02-05 | Jordanian Pharmaceutical Mfg & | Medicinskt kit |
EP3246704B1 (en) * | 2015-01-16 | 2020-01-01 | Fujifilm Corporation | Immunochromatography kit |
WO2016164738A1 (en) * | 2015-04-08 | 2016-10-13 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and systems for the detection of analytes |
-
2019
- 2019-08-28 EP EP19853478.6A patent/EP3845900A4/en active Pending
- 2019-08-28 JP JP2020539557A patent/JP7141458B2/ja active Active
- 2019-08-28 WO PCT/JP2019/033775 patent/WO2020045524A1/ja unknown
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012037253A (ja) * | 2010-08-03 | 2012-02-23 | Tanaka Kikinzoku Kogyo Kk | イムノクロマトグラフィー用試薬組成物およびそれを用いた測定方法 |
JP2012159440A (ja) * | 2011-02-01 | 2012-08-23 | Tanaka Kikinzoku Kogyo Kk | 食品中の動物肉由来タンパク質の免疫クロマト検出方法 |
JP2012211849A (ja) * | 2011-03-31 | 2012-11-01 | Fujifilm Corp | 高感度なイムノクロマトグラフ方法 |
JP2013181935A (ja) * | 2012-03-05 | 2013-09-12 | Fujifilm Corp | クロマトグラフ方法 |
WO2017104143A1 (ja) * | 2015-12-18 | 2017-06-22 | 富士フイルム株式会社 | イムノクロマトグラフキット |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP7141458B2 (ja) | 2022-09-22 |
EP3845900A1 (en) | 2021-07-07 |
EP3845900A4 (en) | 2021-10-27 |
WO2020045524A1 (ja) | 2020-03-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5683543B2 (ja) | クロマトグラフキット及びクロマトグラフ方法 | |
JP5728453B2 (ja) | クロマトグラフ方法及びクロマトグラフキット | |
JP5132664B2 (ja) | イムノクロマトグラフ方法 | |
JP7141458B2 (ja) | クロマトグラフキットおよびクロマトグラフ方法 | |
US8802426B2 (en) | Method and device for assay | |
JP5416159B2 (ja) | 高感度なイムノクロマトグラフ方法 | |
JP5667125B2 (ja) | 高感度なイムノクロマトグラフ方法及びイムノクロマトグラフ用キット | |
JP7130045B2 (ja) | イムノクロマトグラフキットおよび結核菌の検出方法 | |
JP5066498B2 (ja) | アッセイ方法 | |
JP5011244B2 (ja) | 被験物質の検出方法 | |
JP5782533B2 (ja) | クロマトグラフ方法及びクロマトグラフキット | |
JP5827703B2 (ja) | クロマトグラフ方法、クロマトグラフ用キット及びクロマトグラフ用不溶性担体の製造方法 | |
WO2021193792A1 (ja) | イムノクロマトグラフキットおよびイムノクロマトグラフ方法 | |
JP2013181935A (ja) | クロマトグラフ方法 | |
WO2023100825A1 (ja) | 検査キット及びクロマトグラフ方法 | |
JP5265423B2 (ja) | クロマトグラフ方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210203 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210921 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211118 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220215 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220823 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220909 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7141458 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |