CN101932601B - 胰岛素衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及在生理pH值下可溶的且具有延长作用特性的新型人胰岛素衍生物。本发明还涉及含有这类衍生物的药物组合物，和涉及应用本发明的胰岛素衍生物治疗糖尿病和高血糖症的方法。

Description

胰岛素衍生物
技术领域
本发明涉及在生理pH值下可溶的且具有延长作用特性的新型人胰岛素衍生物。本发明还涉及含有本发明胰岛素衍生物的药物组合物，和涉及应用本发明的胰岛素衍生物治疗糖尿病和高血糖症的方法。
背景技术
目前，对糖尿病包括1型糖尿病和2型糖尿病的治疗以不断增加的程度依赖于所谓的强力胰岛素治疗。按照该方案，患者每天进行多次胰岛素注射治疗，包括每天进行一次或两次长效胰岛素注射治疗，以覆盖基本的胰岛素需求，并补充快速浓注速效胰岛素以覆盖与膳食相关的胰岛素需求。
长效胰岛素组合物是本领域众所周知的。因此，一种主要类型的长效胰岛素组合物包含可注射的胰岛素晶体或非晶形胰岛素的水混悬液。在这些组合物中，所用胰岛素化合物一般为鱼精蛋白胰岛素、锌胰岛素或鱼精蛋白锌胰岛素。
应用胰岛素混悬液伴有某些缺陷。因此，为了保证精确给药，在从小瓶中抽取或从药筒中放出确定体积的混悬液之前必须进行轻度振摇以使胰岛素颗粒均匀混悬。此外，就胰岛素混悬液的存储而言，必须将温度保持在比胰岛素溶液更窄的范围内以避免成块或凝结。
国际专利申请WO2006/082204(NovoNordiskA/S)公开了侧链上具有芳基的胰岛素衍生物。
专利申请WO2006/082205(NovoNordiskA/S)公开了侧链上具有PEG的胰岛素衍生物。
国际专利申请号EP2007/054444(NovoNordiskA/S)公开了取代基上具有荷电末端基团的胰岛素衍生物。
然而，仍然需要具有比迄今为止已知胰岛素衍生物更加延长的作用特性的胰岛素。
发明概述
在发明的一个方面中，涉及具有下式的胰岛素衍生物：
其中Ins是母体胰岛素部分和Q1-Q2-[CH2]n-X1-[CH2]n-Q3-[CH2]n-X2-[CH2]n-Q4-[CH2]n-X3-[CH2]n-Q5-[CH2]n-Z是取代基，且其中Ins经由Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基或者Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基与该取代基的Q1或Q2中的CO基之间的酰胺键连接到该取代基上；
各个n独立地为0、1、2、3、4、5或6；
Q1、Q2、Q3、Q4、和Q5可各自独立地为：
·氨基酸残基，该残基用其羧酸基团与Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基一起或与Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基一起形成酰胺基团，或者
·由如上所述的经由酰胺键连接在一起的二、三或四个α-氨基酸残基组成的链，该链-经由酰胺键-连接在Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基上或连接在Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基上，或者
·-CO-(CH2)p-NR1-(CH2)p-，其中各个p独立地为1、2、3、4、5、或6；和其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
·-CO-(CH2)p-Ar-(CH2)p-，其中Ar可为亚芳基或亚杂芳基(heteroarylene)，其被至少一个选自-NR1R2、-(CH2)P-NR1R2-的基团取代，和Ar也可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3的基团取代，其中各个p独立地为1、2、3、4、5、或6；且其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
·-(CH2)m-，其中m是6到32的整数；
·二价烃链，其包含1、2或3个-CH＝CH-基团和足以使链中碳原子总数达到4～32个的多个-CH2-基团；
·-CO-((CR5R6)1-6-NH-CO)-；
·-(CO-(CR5R6)1-6-CO-NH)1-4-，其中R5可独立地为H、-CH3、-(CH2)1-6CH3或-CONH2和R6可独立地为H、-CH3、-(CH2)1-6CH3；
·-CO-(CH2)0-3-Ar-(CH2)0-3-，其中Ar可为亚芳基或杂亚芳基，其可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3、-NR1R2、-CONR1R2或-SO2NR1R2的基团取代，其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
·(CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-或(CH2CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-；-(CH2OCH2)y-，其中y为1-20；
·亚芳基或杂亚芳基，其可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3、-CONR1R2或-SO2NR1R2的基团取代，其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
·式-(CH2)s-Y1-(Ar)v1-Y2-(CH2)w-Y3-(Ar)v2-Y4-(CH2)t-Y5-(Ar)v3-Y6-(CH2)Z-的链，其中Ar如上所定义，Y1-Y6可各自独立地为O、S、S＝O、SO2或键；其中s、w、t和z各自独立地为0或1到10的整数，以使s、w、t和z的总和为4～30，并且v1、v2和v3可各自独立为0或1，条件是Y1-Y6彼此不相连和不存在结构-O-(CH2)1-O-；或
·键；
条件是Q1-Q5中的至少一个不为键；
X1、X2和X3各自独立地为
·O；
·-C＝O；
·键；
·NCOR1，其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
其中R是氢、C1-3-烷基、C2-3-链烯基或C2-3-炔基；
条件是
-X1、X2和X3不接在Z上，和
-当X1、X2和X3为O时，则X1、X2和X3不能直接连接到Q1、Q2、Q3、Q4、和Q5中的O上
和
Z为：
-COOH；
-CO-Asp；
-CO-Glu；
-CO-Gly；
-CO-Sar；
-CH(COOH)2；
-N(CH2COOH)2；
-SO3H
-OSO3H
-OPO3H2
-PO3H2
-四唑-5-基
-0-W1或
-W1
其中W1是亚芳基或亚杂芳基，其可以被一个或两个选自四唑-5-基、-COOH、-SO3H、-(CH2)1-6-SO3H、-(CH2)1-6-O-PO3H2、-CONR3R4或-SO2NR3R4的基团所取代，其中R3和R4可各自独立地为H、-(CH2)1-6-SO3H或-(CH2)1-6-O-PO3H2；
及其任意Zn2+复合物，
条件是取代基中存在至少一个胺或正电荷氨基酸。
本发明进一步涉及胰岛素衍生物的锌复合物，包含胰岛素衍生物或锌复合物的药物组合物，通过应用胰岛素衍生物或锌复合物治疗糖尿病患者的方法。
定义
本文所用的“胰岛素类似物”指的是多肽，其具有在形式上可以通过缺失和/或交换至少一个在天然存在胰岛素中存在的氨基酸残基和/或通过添加至少一个氨基酸残基而衍生自天然存在的胰岛素例如人胰岛素结构的分子结构。添加和/或交换的氨基酸残基可以为可编码的氨基酸残基或其它天然存在的残基或纯合成的氨基酸残基。
胰岛素类似物可以为这样的类似物：其中B链的28位可以由天然的Pro残基修改成Asp、Lys、或Ile之一。在另一个方面中，B29位上的Lys被修改为Pro。另外，A21位上的Asn可被修改为Ala、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val，尤其为Gly、Ala、Ser、或Thr和优选为Gly。此外，B3位上的Asn可被修改为Lys或Asp。胰岛素类似物的进一步实例为：des(B30)人胰岛素；des(B30)人胰岛素类似物；其中PheB1已缺失的胰岛素类似物；其中A-链和/或B-链具有N-末端延伸的胰岛素类似物；和其中A-链和/或B-链具有C-末端延伸的胰岛素类似物。因此，可以将一个或两个Arg添加到B1位上。
在本发明的方面中，最多17个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多15个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多10个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多8个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多7个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多6个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多5个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多4个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多3个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，最多2个氨基酸得到修改。在本发明的方面中，1个氨基酸得到修改。
“desB30胰岛素”、“desB30人胰岛素”指的是缺少B30氨基酸残基的天然胰岛素或其类似物。类似地，“desB29desB30胰岛素”或“desB29desB30人胰岛素”指的是缺少B29和B30氨基酸残基的天然胰岛素或其类似物。
“B1”、“A1”等分别指的是胰岛素B-链中1位上的氨基酸残基(从N-末端计数)和胰岛素A-链中1位上的氨基酸残基(从N-末端计数)。具体位置上的氨基酸残基还可以表示为例如PheB1，PheB1是指B1位置上的氨基酸残基是苯丙氨酸残基。
本文所用的“胰岛素”指的是在CysA7与CysB7之间以及在CysA20与CysB19之间具有二硫桥键和在CysA6和CysA11之间具有内二硫桥键的人胰岛素、猪胰岛素或牛胰岛素。
“母体胰岛素”指的是天然存在的胰岛素，例如人胰岛素或猪胰岛素。替代选择地，母体胰岛素可为胰岛素类似物。
表述形式“正电荷”指的是存在至少一个基团或多个基团，所述基团在4到9的pH区间内将会带正电荷。
当根据本发明的胰岛素衍生物被指明是“在生理pH值下可溶”时，它是指该胰岛素衍生物可以用于制备在生理pH值下完全溶解的胰岛素组合物。这类有利的溶解性可能是仅由于胰岛素衍生物自身的内在特性，或者可能是胰岛素衍生物与一种或多种包含在媒介物中的成分之间的有利相互作用的结果。
本文所用的术语“非钝化”是指在将速效胰岛素和酰化胰岛素配制在一个制剂中时，其作用特性与将速效胰岛素和酰化胰岛素以分开的制剂给药时的作用特性相同或基本相同。
表述形式“高分子量胰岛素”或“hmw”是指人胰岛素复合物、胰岛素类似物或胰岛素衍生物的分子量大于人血清白蛋白的分子量，大于胰岛素类似物或胰岛素衍生物的十二聚复合物的分子量，或者大于约72k道尔顿。
表述形式“中分子量胰岛素”或“mmw”是指人胰岛素复合物、胰岛素类似物或胰岛素衍生物的分子量在约胰岛素六聚物到约胰岛素十二聚物之间，为24到80k道尔顿。
表述形式“低分子量胰岛素”或“1mx”是指人胰岛素、胰岛素类似物或胰岛素衍生物的分子量低于24k道尔顿。
表述形式“取代基”是指结合至胰岛素肽的化学部分，且不是胰岛素氨基酸序列的部份。
以下缩写用于说明书和实施例中：
CV柱体积
HPLC高效液相色谱
HAS人血清白蛋白
LC液相色谱
MALDI基质辅助激光解吸电离
MS质谱
RT室温
SEC尺寸排阻色谱
SPA闪烁迫近分析(ScitillationProximityAssay)
Tris三(羟甲基)氨基甲烷
O.D.光学密度＝吸光度
X2单体AspB9GluB27人胰岛素
DIEA：N，N-二异丙基乙胺
DMF：N，N-二甲基甲酰胺
Sar：肌氨酸(N-甲基-甘氨酸)
tBu：叔丁基
TSTUO-(N-琥珀酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟
硼酸盐
THF：四氢呋喃
EtOAc或AcOEt：乙酸乙酯
DIPEA：二异丙基乙胺
TEA：三乙胺
TFA：三氟乙酸
DCM：二氯甲烷
PEG：聚乙二醇
GIR：葡萄糖输注速率
DAP2，3-二氨基丙酸
DAB2，4-二氨基丁酸
Orn鸟氨酸或2，5-二氨基-戊酸
发明描述
本发明基于以下认识：胰岛素衍生物分子和带电末端基团中具有胺或正电荷取代基，对于长效胰岛素(prolonged-actinginsulins)体内的作用持续时间以及对于长效胰岛素与速效胰岛素的非钝化的混合性，起重要的作用。胰岛素衍生物具有形成高分子量复合物的趋势，且因此显示出拖长的作用特性。
有利地，根据本发明的胰岛素衍生物在生理pH值下是可溶的，
具有与人胰岛素相当的效能，并且能与速效胰岛素非钝化地混合。
本发明概述在以下段落中：
1.具有下式的胰岛素衍生物
其中Ins是母体胰岛素部分和Q1-Q2-[CH2]n-X1-[CH2]n-Q3-[CH2]n-X2-[CH2]n-Q4-[CH2]n-X3-[CH2]n-Q5-[CH2]n-Z是取代基，且其中Ins经由Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基或者Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基与该取代基的Q1或Q2中的CO基之间的酰胺键连接到该取代基上；
各个n独立地为0、1、2、3、4、5或6；
Q1、Q2、Q3、Q4、和Q5可各自独立地为；
·氨基酸残基，该残基用其羧酸基团与Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基一起或与Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基一起形成酰胺基团，或者
·由如上所述的经由酰胺键连接在一起的二、三或四个α-氨基酸残基组成的链，该链-经由酰胺键-连接在Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基上或连接在Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基上，或者
·-CO-(CH2)p-NR1-(CH2)p-，其中各个p独立地为1、2、3、4、5、或6；和其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；；
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
·-CO-(CH2)p-Ar-(CH2)p-，其中Ar可为亚芳基或杂亚芳基，其被至少一个选自-NR1R2、-(CH2)P-NR1R2-的基团取代，和Ar也可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3的基团取代，其中各个p独立地为1、2、3、4、5、或6；且其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
·-(CH2)m-，其中m是6到32的整数；
·二价烃链，其包含1、2或3个-CH＝CH-基团和足以使链中碳原子总数达到4～32个的多个-CH2-基团；
·-CO-((CR5R6)1-6-NH-CO)-；
·-(CO-(CR5R6)1-6-CO-NH)1-4-，其中R5可独立地为H、-CH3、-(CH2)1-6CH3或-CONH2和R6可独立地为H、-CH3、-(CH2)1-6CH3；
·-CO-(CH2)0-3-Ar-(CH2)0-3-，其中Ar可为亚芳基或杂亚芳基，其可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3、-NR1R2、-CONR1R2或-SO2NR1R2的基团取代，其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
·(CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-或(CH2CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-；-(CH2OCH2)y-，其中y为1-20；
·亚芳基或杂亚芳基，其可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3、-CONR1R2或-SO2NR1R2的基团取代，其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
·式-(CH2)s-Y1-(Ar)v1-Y2-(CH2)w-Y3-(Ar)v2-Y4-(CH2)t-Y5-(Ar)v3-Y6-(CH2)Z-的链，其中Ar如上所定义，Y1-Y6可各自独立地为O、S、S＝O、SO2或键；其中s、w、t和z各自独立地为0或1到10的整数，以使s、w、t和z的总和为4～30，并且v1、v2和v3可各自独立为0或1，条件是Y1-Y6彼此不相连和不存在结构-O-(CH2)1-O-；或
·键；
条件是Q1-Q5中的至少一个不为键；
X1、X2和X3各自独立地为
·O；
·-C＝O；
·键；
·NCOR1，其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
其中R是氢、C1-3-烷基、C2-3-链烯基或C2-3-炔基；
条件是
-X1、X2和X3不接在Z上，和
-当X1、X2和X3为O时，则X1、X2和X3不能直接连接到Q1、Q2、Q3、Q4、和Q5中的O上
和
Z为：
-COOH；
-CO-Asp；
-CO-Glu；
-CO-Gly；
-CO-Sar；
-CH(COOH)2；
-N(CH2COOH)2；
-SO3H
-OSO3H
-OPO3H2
-PO3H2
-四唑-5-基
-0-W1或
-W1
其中W1是亚芳基或亚杂芳基，其可以被一个或两个选自四唑-5-基、-COOH、-SO3H、-(CH2)1-6-SO3H、-(CH2)1-6-O-PO3H2、-CONR3R4或-SO2NR3R4的基团所取代，其中R3和R4可各自独立地为H、-(CH2)1-6-SO3H或-(CH2)1-6-O-PO3H2；
及其任意Zn2+复合物，
条件是取代基中存在至少一个胺或正电荷氨基酸。
2.根据段落1的具有下式的胰岛素衍生物：
其中Ins是母体胰岛素部分和Q1-Q2-[CH2]n-X1-[CH2]n-Q3-[CH2]n-X2-[CH2]n-Q4-[CH2]n-X3-[CH2]n-Q5-[CH2]n-Z是取代基，且其中Ins经由Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基或者Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基与该取代基的Q1或Q2中的CO基之间的酰胺键连接到该取代基上；
各个n独立地为0、1、2、3、4、5或6；
Q1为：
·氨基酸残基，该残基用其羧酸基团与Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基一起或与Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基一起形成酰胺基团，或者
·由如上所述的经由酰胺键连接在一起的二、三或四个α-氨基酸残基组成的链，该链-经由酰胺键-连接在Ins的B链N-末端氨基酸残基的α-氨基上或连接在Ins的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基上，或者
·键
Q2为：
·-CO-(CH2)p-NR1-(CH2)p-，其中各个p独立地为1、2、3、4、5、或6；和其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
·-CO-(CH2)p-Ar-(CH2)p-，其中Ar可为亚芳基或杂亚芳基，其被至少一个选自-NR1R2、-(CH2)P-NR1R2-的基团取代，和Ar也可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3的基团取代，其中各个p独立地为1、2、3、4、5、或6；且其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
其中n＝1-6，和其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
·键
Q3、Q4、和Q5可各自独立地为
·-(CH2)m-，其中m是6到32的整数；
·二价烃链，其包含1、2或3个-CH＝CH-基团和足以使链中碳原子总数达到4～32个的多个-CH2-基团；
·-CO-((CR5R6)1-6-NH-CO)-；
·-(CO-(CR5R6)1-6-CO-NH)1-4-，其中R5可独立地为H、-CH3、-(CH2)1-6CH3或-CONH2和R6可独立地为H、-CH3、-(CH2)1-6CH3；
·-CO-(CH2)0-3-Ar-(CH2)0-3-，其中Ar可为亚芳基或杂亚芳基，其可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3、-NR1R2、-CONR1R2或-SO2NR1R2的基团取代，其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；
·(CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-或(CH2CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-；-(CH2OCH2)y-，其中y为1-20；
·亚芳基或杂亚芳基，其可以被一个或两个选自-CH3、-(CH2)1-6-CH3、-CONR1R2或-SO2NR1R2的基团取代，其中R1和R2可各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
·式-(CH2)s-Y1-(Ar)v1-Y2-(CH2)w-Y3-(Ar)v2-Y4-(CH2)t-Y5-(Ar)v3-Y6-(CH2)Z-的链，其中Ar如上所定义，Y1-Y6可各自独立地为O、S、S＝O、SO2或键；其中s、w、t和z各自独立地为0或1到10的整数，以使s、w、t和z的总和为4～30，并且v1、v2和v3可各自独立为0或1，条件是Y1-Y6彼此不相连和不存在结构-O-(CH2)1-O-；或
·键；
条件是Q3-Q5中的至少一个不为键；
X1、X2和X3各自独立地为
·O；
·-C＝O；
·键；
·NCOR1，其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
其中R是氢、C1-3-烷基、C2-3-链烯基或C2-3-炔基；
条件是
-X1、X2和X3不接在Z上，和
-当X1、X2和X3为O时，则X1、X2和X3不能直接连接到Q3、Q4、和Q5中的O上
和
Z为：
-COOH；
-CO-Asp；
-CO-Glu；
-CO-Gly；
-CO-Sar；
-CH(COOH)2；
-N(CH2COOH)2；
-SO3H
-OSO3H
-OPO3H2
-PO3H2
-四唑-5-基
-0-W1或
-W1
其中W1是亚芳基或亚杂芳基，其可以被一个或两个选自四唑-5-基、-COOH、-SO3H、-(CH2)1-6-SO3H、-(CH2)1-6-O-PO3H2、-CONR3R4或-SO2NR3R4的基团所取代，其中R3和R4可各自独立地为H、-(CH2)1-6-SO3H或-(CH2)1-6-O-PO3H2；
及其任意Zn2+复合物，
条件是取代基中存在至少一个胺或正电荷氨基酸。
3.根据段落1-2的胰岛素衍生物，其中Q1选自赖氨酸、精氨酸、高精氨酸、DAP、DAB和鸟氨酸。
4.根据段落1-2的胰岛素衍生物，其中Q1为键
5.根据段落1-4的胰岛素衍生物，其中Q2为-CO-(CH2)2-NH-(CH2)2-、-CO-CH2-NH-CH2-或
6.根据段落1-5的胰岛素衍生物，其中X1、X2和X3各自独立地为：
·O；
·-C＝O；
·键；
·NCOR1，其中R1可为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
其中R是氢、C1-3-烷基、C2-3-链烯基或C2-3-炔基；
条件是
-X1、X2和X3不接在Z上，和
-当X1、X2和X3为O时，则X1、X2和X3不能直接连接到Q3、Q4、和Q5中的O上
7.根据段落1-6的胰岛素衍生物，其中X1是其中R为氢的
8.根据段落1-7的胰岛素衍生物，其中Q3为-(CH2)m-，其中m是6到32或8到20的整数。
9.根据段落8的胰岛素衍生物，其中m为12、13、14、15或16。
10.根据段落1-9的胰岛素衍生物，其中Q4、Q5、X2和X3为键且所有的n为0。
11.根据段落1-10中任一的胰岛素衍生物，其中Z为-COOH。
12.根据段落1-7的胰岛素衍生物，其中Q3为键。
13.根据段落1-7或12的胰岛素衍生物，其中Q4为二价烃链，其包含1、2或3个-CH＝CH-基团和足以使链中碳原子总数达到4～32个的多个-CH2-基团。
14.根据段落1-7或12的胰岛素衍生物，其中Q4为-(CH2)s-Y1-(Ar)v1-Y2-(CH2)w-Y3-(Ar)v2-Y4-(CH2)t-Y5-(Ar)v3-Y6-(CH2)Z-，其中Ar如上所定义，Y1-Y6可各自独立地为O、S、S＝O、SO2或键；其中s、w、t和z各自独立地为0或1到10的整数，以使s、w、t和z的总和为4～30，并且v1、v2和v3可各自独立为0或1，条件是Y1-Y6彼此不相连和不存在结构-O-(CH2)1-O-。
15.根据段落1-7和14中任一的胰岛素衍生物，其中v1、v2和v3中的至少两个为0。
16.根据段落1-7和14-15中任一的胰岛素衍生物，其中Y1-Y6为键。
17.根据段落1-7和14-15中任一的胰岛素衍生物，其中Y1-Y6中的至少一个为O或S。
18.根据段落1-7和14-15和17中任一的胰岛素衍生物，其中Y1为O或S且V1为1。
19.根据段落1-7和14-18中任一的胰岛素衍生物，其中s为6、7、8、9或10。
20.根据段落1-7和14-19中任一的胰岛素衍生物，其中Ar为C6H4。
21.根据段落1-7和13-20中任一的胰岛素衍生物，其中X1、X2、X3、和Q5为键且所有的n为0。
22.根据段落1-7中任一的胰岛素衍生物，其中Q3、Q4、或Q5中的一个为(CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2CH2CH2O)y-；(CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-或(CH2CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y-；-(CH2OCH2)y-，其中y为1-20。
23.根据段落1-7和22的胰岛素衍生物，其中Q3、Q4、或Q5中的一个为(CH2CH2O)y-或(CH2CH2OCH2CH2CH2CH2O)y，其中y为1-12、2-4或2-3。
24.根据段落1-7和22-23的胰岛素衍生物，其中y为1。
25.根据段落1-7和22-24中任一的胰岛素衍生物，其中n为0、1、2或3。
26.根据段落1-7和22-25中任一的胰岛素衍生物，其中Z为-COOH。
27.根据前述段落中任一的胰岛素衍生物，其中取代基连接在母体胰岛素的A或B链中存在的Lys残基上的ε-氨基上。
28.根据前述段落中任一的胰岛素衍生物，其中取代基连接在母体胰岛素B链中存在的B29位Lys残基上的ε-氨基上。
29.根据前述段落中任一的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为人胰岛素或猪胰岛素。
30.根据段落1-28的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为胰岛素类似物。
31.根据前述段落中任一的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素B30位的氨基酸残基为Lys或缺失。
32.根据段落1-28和30-31的胰岛素衍生物，其中取代基连接在desB30人胰岛素中B29位Lys残基上的ε-氨基上。
33.根据段落1-28和30-32的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为AspB28人胰岛素、GlyA21人胰岛素或GlyA21desB30人胰岛素、GlyA21ArgB31ArgB32人胰岛素、LysB28ProB29人胰岛素、ThrB29LysB30人胰岛素或LysB3GluB29人胰岛素。
34.根据前述段落中任一的胰岛素衍生物的锌复合物，其中胰岛素衍生物每六个分子结合两个锌离子、三个锌离子、四个锌离子、五个锌离子、六个锌离子、七个锌离子、八个锌离子、九个锌离子或十个锌离子。
35.一种用于在需要这种治疗的患者中治疗糖尿病的药物组合物，其包含治疗有效量的根据段落1-33的胰岛素衍生物或者根据段落34的锌复合物。
36.根据段落35的药物组合物，其中组合物包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。
37.根据段落35-36的药物组合物，其中组合物包含快速起效的胰岛素类似物。
38.根据段落35-37的药物组合物，其中速效胰岛素类似物选自AspB28人胰岛素；LysB28ProB29人胰岛素和LysB3GluB29人胰岛素。
39.一种在需要这种治疗的患者中治疗糖尿病的方法，其通过应用治疗有效量的根据段落1-33的胰岛素衍生物或者根据段落34的锌复合物或根据段落35-38的药物组合物。
40.根据段落39的方法，用于肺部治疗糖尿病。
41.如实施例中确定的胰岛素衍生物。
根据本发明的胰岛素衍生物和速效胰岛素类似物可以以约90/10％、约70/30％或约50/50％的比率混合。
在一个方面中，本发明涉及药物组合物，其包含在生理pH值下可溶的根据本发明的胰岛素衍生物。
在一个方面中，本发明涉及药物组合物，其包含在约6.5～约8.5区间内的pH值下可溶的根据本发明的胰岛素衍生物。
在一个方面中，本发明涉及具有延长作用特性的药物组合物，其包含根据本发明的胰岛素衍生物。
在一个方面中，本发明涉及药物组合物，其为溶液，包含约120nmol/ml～约2400nmol/ml、约400nmol/ml～约2400nmol/ml、约400nmol/ml～约1200nmol/ml、约600nmol/ml～约2400nmol/ml、或约600nmol/ml～约1200nmol/ml的根据本发明的胰岛素衍生物或根据本发明的胰岛素衍生物与速效胰岛素类似物的混合物。
用于酰化的起始产品，母体胰岛素或胰岛素类似物或其前体既可以通过众所周知的肽合成方法制备，也可以在适宜转录的微生物中通过众所周知的重组生产方法制备。因此，胰岛素起始产品可以通过以下方法制备，所述方法包括在允许表达肽的条件下在适宜的营养基中培养含有编码肽且能表达肽的DNA序列的宿主细胞，然后从培养物中收集所产生的肽。
培养细胞所用的培养基可以是适于宿主细胞生长的任何常规培养基，例如含有适当添加物的基本或复合培养基。适宜的培养基既可以从供应商处获得也可以按照公开的配方(例如在美国标准培养收集所(AmericanTypeCultureCollection目录中的))制备。然后，可以通过常规方法从培养基中收集细胞所产生的肽，所述常规方法包括通过离心或过滤将宿主细胞从培养基中分离，借助于盐例如硫酸铵将上清液或滤液中的蛋白质性组分沉淀析出，通过多种色谱方法例如离子交换色谱、凝胶过滤色谱或亲和色谱等根据所考虑肽的类型进行纯化。
编码母体胰岛素的DNA序列可合适地为基因或cDNA起源的，例如其是通过制备基因或cDNA库并且按照标准技术应用合成寡核苷酸探针通过杂交对编码全部或部分多肽的DNA序列筛选而获得的(例如参见，Sambrook，J，Fritsch，EF和Maniatis，T，MolecularCloning：ALaboratoryManual，ColdSpringHarborLaboratoryPress，NewYork，1989)。编码母体胰岛素的DNA序列也可以由已经确定的标准方法通过合成制备，例如由Beaucage和Caruthers，TetrahedronLetters22(1981)，1859-1869中描述的亚磷酰胺(phosphoamidite)方法，或由Matthes等人，EMBOJournal3(1984)，801-805中描述的方法制备。DNA序列也可以通过应用特殊引物的聚合酶链式反应，例如US4,683,202或Saiki等人，Science239(1988)，487-491中所描述的方法而制备。
DNA序列可以被插入到任何载体中，所述载体可以方便地接受重组DNA程序，并且载体的选择通常取决于其所要被引入的宿主细胞。因此，所述载体可以是自主复制载体，即以染色体外实体存在的载体，其复制与染色体的复制无关，例如质粒。替代选择地，当引入到宿主细胞中时，所述载体可以是结合到宿主细胞基因组中并与所结合的染色体(们)一起复制的载体。
所述载体例如是表达载体，其中编码母体胰岛素的DNA序列能够连接到需要DNA转录的其它片段例如启动子上。所述启动子可以是在所选宿主细胞中显示转录活性的任何DNA序列，并且可以来源于与宿主细胞同源或异源的编码蛋白质的基因。用于在多种宿主细胞中编码母体胰岛素的直接转录DNA的合适启动子的实例是本领域中众所周知的，例如参照Sambrook等人，上文。
如果需要，编码母体胰岛素的DNA序列也能够连接到合适的终止子、聚腺苷酸化信号、转录增强子序列、以及翻译增强子序列上。本发明的重组体载体可以进一步包含能使载体在所考虑的宿主细胞中复制的DNA序列。
所述载体还可以包含选择性标记，例如基因，其产品补充了宿主细胞中的缺陷或者能赋予药物抗性，所述药物例如氨苄青霉素、卡那霉素、四环素、氯霉素、新霉素、潮霉素或氨甲喋呤。
为了将本发明的肽引入到宿主细胞的分泌途径中，可以在重组体载体中提供分泌信号序列(也称作前导序列、初前序列或前序列)。所述分泌信号序列被连接到在正确阅读框中编码肽的DNA序列上。分泌信号序列通常在5′位置上连接到编码肽的DNA序列上。所述分泌信号序列可以正常地与肽连接，或者可以通过编码另一个分泌蛋白的基因与肽连接。
分别用于连接编码母体胰岛素的DNA序列、启动子和任选终止子和/或分泌信号序列，以及用于将它们插入到含有复制所需信息的合适载体中的方法，是本领域技术人员众所周知的(例如参照Sambrook等人，上文)。
引入DNA序列或重组体载体的宿主细胞可以是能够产生本发明肽的任何细胞，包括细菌、酵母、真菌和高级真核细胞。本领域公知且使用的合适宿主细胞的非限定性实例是大肠杆菌(E.coli)、酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)或哺乳动物BHK或CHO细胞株。
然后通过在B1位置或在B-链所选择的Lys位置上引入相关的取代基，将母体胰岛素分子转化成本发明的胰岛素衍生物。所述取代基可以通过任何便利的方法引入，且在用于氨基酰化的现有技术中公开了许多方法。更多的细节将出现在以下实施例中。
药物组合物
本发明要求保护的通式胰岛素衍生物可以例如通过皮下、口服或经肺给药。
对于皮下给药来说，通式的化合物可按照类似已知胰岛素制剂的方式制备。而且，对于皮下给药来说，通式的化合物可按照类似已知胰岛素给药的方式给药，通常医生是熟悉给药方法的。
本发明的胰岛素衍生物可以以剂量有效的方式通过吸入给药，以增加循环胰岛素的水平和/或降低循环葡萄糖的水平。这样的给药对于治疗例如糖尿病或高血糖症的病症可能是有效的。为达到有效剂量的胰岛素，需要施用超过约0.5μg/kg～约50μg/kg吸入剂量的本发明的胰岛素衍生物。治疗有效量可以由有知识的从业者确定，其将会考虑包括胰岛素水平、血糖水平、患者的身体条件、患者的肺部状态等的因素。
通过吸入给药可以产生与胰岛素皮下给药相当的药代动力学。当类似粒子大小和类似肺部沉积水平相比较时，不同的吸入装置一般会提供类似的药代动力学。
根据本发明，本发明的胰岛素衍生物可以通过本领域已知的用于治疗剂吸入给药的各种吸入装置中的任意一种进行递送。这些装置包括定量吸入器(metereddoseinhalers)、雾化器(nebulizers)、干粉发生器(drypowdergenerators)、喷雾器(sprayers)等。本发明的胰岛素衍生物通过干粉吸入器或喷雾器递送。用于本发明胰岛素衍生物给药的吸入装置具有几种合意的特点。例如，通过吸入装置进行递送在可靠性、可重现性和精确性方面是有利的。为了很好地适应呼吸，吸入装置应当递送小粒子，例如小于约10μm，例如约1-5μm的粒子。适于实施本发明的可商购获得的吸入装置的一些具体实例为TurbohalerTM(Astra)、(Glaxo)、(Glaxo)、SpirosTM吸入器(Dura)-由InhaleTherapeutics上市的装置、AERxTM(Aradigm)、雾化器(Mallinckrodt)、雾化器(MarquestMedicalProducts)、定量吸入器(Glaxo)、或粉末吸入器(Fisons)等。
如同本领域技术人员所认识到的，本发明的胰岛素衍生物制剂、递送制剂的量以及单剂量给药的持续时间均取决于所用吸入装置的类型。对于一些气雾剂递送系统来说，例如雾化器，给药的频率以及系统激活的持续时间主要取决于气雾剂中胰岛素结合物(insulinconjugate)的浓度。例如，在雾化器溶液中的胰岛素结合物浓度较高时，可以使用较短的给药时间。诸如定量吸入器的装置可以产生较高的气雾剂浓度，可操作较短的时间以递送所需量的胰岛素结合物。诸如粉末吸入器的装置只有在约定量的试剂从装置中排出后才能递送活性试剂。在这种类型的吸入器中，在约定量粉末中的本发明胰岛素衍生物的量决定单次给药中递送的剂量。
在通过吸入装置递送的制剂中，本发明胰岛素衍生物的粒子大小对于胰岛素进入肺部以及进入更下级的气道或肺泡中的能力来说是至关重要的。可以配制本发明的胰岛素衍生物，以递送至少约10％，例如约10到约20％或更多的胰岛素结合物沉积在肺部。已知，用约2μm到约3μm的粒子大小能获得人经口呼吸最大的肺部沉积效率。当粒子大小大于约5μm时，肺部沉积明显降低。粒子大小低于约1μm会导致肺部沉积降低，且难以递送足以达到治疗有效量的粒子。因此，通过吸入递送的胰岛素衍生物的粒子具有小于约10μm的粒子大小，例如约1μm～约5μm的粒子大小。选用胰岛素衍生物的制剂，以在所选吸入装置中产生期望的粒子大小。
对于干粉给药，有利地将本发明的胰岛素衍生物制备成具有小于约10μm例如约1μm～约5μm粒子大小的颗粒形式。该粒子大小可有效递送至患者肺部的肺泡中。干粉主要包含为使大部分粒子具有期望大小而制备的粒子。有利地，至少约50％的干粉由直径小于约10μm的粒子构成。这样的制剂可以通过对含有胰岛素结合物和其它期望成分的溶液进行喷雾干燥、研磨或或临界点凝聚(condensation)而实现。适于产生本发明所用粒子的其它方法也是本领域中已知的。
粒子通常从容器中的干粉制剂中分离，然后经由载体气流运输至肺。通常，在当前的干粉吸入器中，破碎固体的力仅由患者的吸入提供。在另一类型的吸入器中，患者吸入产生的气流激活叶轮马达，从而使粒子解聚。
用于干粉吸入器给药的本发明胰岛素衍生物的制剂一般包括含有所述衍生物的精细粉碎的干粉，但该粉末还可以包括填充剂、载体、赋性剂或其它添加剂等。添加剂可包括在胰岛素结合物的干粉制剂中，例如用于按特定粉末吸入器递送的需要稀释粉末、促进制剂加工、提供制剂的有利粉末性质、促进来自吸入装置的粉末的分散、稳定制剂(例如抗氧化剂或缓冲剂)、提供制剂的味道等。有利地，所述添加剂不会对患者的气路造成不利的影响。胰岛素衍生物可与添加剂在分子水平上混合，或者所述固体制剂可包括与添加剂粒子混合或者涂敷在添加剂粒子上的胰岛素结合物的粒子。一般地，添加剂包括单-糖、二-糖和多糖；糖醇以及其它多元醇，例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麦芽糖醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇、淀粉或它们的组合物；表面活性剂，例如山梨糖醇、二磷脂酰胆碱、或卵磷脂等。一般地，添加剂(例如填充剂)以对上述目的有效的量存在，通常为制剂重量的约50％到约90％。本领域中已知的用于诸如胰岛素类似物蛋白质的蛋白质制剂的其他药剂也可以包含在制剂中。
包括本发明胰岛素衍生物的喷雾可以通过在压力下迫使胰岛素结合物的悬浮液或溶液通过喷嘴而产生。可以选择喷嘴的尺寸和构造、所施加的压力以及液体供料速率，以达到所需的输出量和粒子大小。电喷射可以例如通过与毛细管或喷嘴供料口连接的电场产生。有利地，通过喷雾器递送的胰岛素结合物粒子具有小于约10μm的粒子大小，例如约1μm～约5μm的粒子大小。
适用于喷雾器的本发明胰岛素衍生物的制剂一般包括在水溶液中的胰岛素衍生物，其浓度为每ml溶液约1mg到约20mg胰岛素结合物。制剂可以包括例如赋形剂、缓冲剂、等渗剂、防腐剂、表面活性剂以及例如锌的试剂。制剂还可以包含赋形剂或用于稳定胰岛素衍生物的试剂，例如缓冲剂、还原剂、填充蛋白(Bulkproteins)、或碳水化合物。在配制胰岛素结合物中所用的填充蛋白包括白蛋白、鱼精蛋白等。一般地，在配制胰岛素结合物中所用的碳水化合物包括蔗糖、甘露醇、乳糖、海藻糖、或葡萄糖等。胰岛素衍生物制剂还可以包括表面活性剂，其可以减少或防止在形成气溶胶中溶液雾化而引起的胰岛素结合物的表面诱导的聚集。可以采用多种常规的表面活性剂，例如聚氧乙烯脂肪酸酯和醇、和聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯。其量通常介于制剂重量的约0.001至约4％之间。
含有根据本发明的胰岛素衍生物的药物组合物还可以经肠胃外给需要这种治疗的患者施用。肠胃外给药可以通过皮下、肌肉或静脉注射，借助注射器，任选地为笔型注射器的方式来进行。替代选择地，肠胃外给药可以通过输注泵的方式进行。其它的选择为例如在为特定目的设计的组合物、粉末或液体中通过鼻部或肺部给予所述胰岛素。
本发明胰岛素衍生物的可注射组合物可应用制药工业的常规技术制得，其包括适当溶解和混合成分以得到所需终产物。因此，根据一种方法，将根据本发明的胰岛素衍生物溶于一定量的水中，其体积略小于要制备组合物的最终体积。根据需要加入等渗剂、防腐剂和缓冲剂，并且如果必要，按需要应用酸例如盐酸或碱例如氢氧化钠水溶液来调节溶液的pH值。最后用水调节溶液的体积以得到所需组分的浓度。
在本发明进一步的方面中，缓冲剂选自乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、和三(羟甲基)-氨基甲烷、N-二(羟乙基)甘氨酸、N-三(羟甲基)甲基甘氨酸(tricine)、苹果酸、琥珀酸盐、马来酸、富马酸、酒石酸、天冬氨酸或其混合物。这些具体缓冲剂中的每一种构成了本发明的一个可选的方面。
在本发明进一步的方面中，所述制剂进一步包含药学上可接受的防腐剂，其可以选自苯酚、邻甲酚、间甲酚、对甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯基乙醇、苯甲醇、氯丁醇和硫柳汞、溴硝丙二醇、苯甲酸、咪脲、氯己定、脱氢醋酸钠、氯甲酚、对羟基苯甲酸乙酯、苄索氯铵、氯苯甘醚(3p-氯苯氧基丙烷-1，2-二醇)或其混合物。在本发明进一步的方面中，防腐剂存在的浓度为0.1mg/ml到20mg/ml。在本发明进一步的方面中，防腐剂存在的浓度为0.1mg/ml到5mg/ml。在本发明进一步的方面中，防腐剂存在的浓度为5mg/ml到10mg/ml。在本发明进一步的方面中，防腐剂存在的浓度为10mg/ml到20mg/ml。这些具体防腐剂中的每一种构成了本发明的一个可选的方面。在药物组合物中应用防腐剂是本领域技术人员众所周知的。为方便起见，可参照Remington：TheScienceandPracticeofPharmacy，第19版，1995。
在本发明进一步的方面中，所述制剂进一步包括等渗剂，其可以选自盐(例如氯化钠)、糖或糖醇(sugaralcohol)、氨基酸(例如甘氨酸、L-组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)、多羟糖醇(alditol)(例如甘油(glycerol)(丙三醇(glycerine))、1，2-丙二醇(丙二醇)、1，3-丙二醇、1，3-丁二醇)、聚乙二醇(例如PEG400)或其混合物。可应用任何的糖，例如单糖、二糖或多糖或水溶性葡聚糖，所述糖包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、普鲁兰糖(pullulan)、糊精、环糊精、可溶性淀粉、羟乙基淀粉和羧甲基纤维素-Na。在一个方面中，糖添加剂为蔗糖。糖醇定义为具有至少一个--OH基团的C4-C8碳氢化合物，包括例如甘露醇、山梨醇、肌醇、半乳糖醇、卫矛醇、木糖醇、和阿拉伯糖醇。在一个方面中，糖醇添加剂为甘露醇。上述提到的糖或糖醇可以单独或组合使用。对用量没有固定的限制，只要所述糖或糖醇可溶于液体制剂中且不会不利地影响所用本发明方法达到的稳定效果即可。在一个方面中，糖或糖醇的浓度为约1mg/ml到约150mg/ml。在本发明进一步的方面中，等渗剂以1mg/ml到50mg/ml的浓度存在。在本发明进一步的方面中，等渗剂以1mg/ml到7mg/ml的浓度存在。在本发明进一步的方面中，等渗剂以8mg/ml到24mg/ml的浓度存在。在本发明进一步的方面中，等渗剂以25mg/ml到50mg/ml的浓度存在。这些具体等渗剂中的每一种构成了本发明的一个可选的方面。在药物组合物中应用等渗剂是本领域技术人员众所周知的。为方便起见，可参照Remington：TheScienceandPracticeofPharmacy，第19版，1995。
一般的等渗剂为氯化钠、甘露醇、二甲基砜和甘油，和一般的防腐剂为苯酚、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯和苯甲醇。
合适缓冲剂的实例为乙酸钠、甘氨酰甘氨酸、HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)、和磷酸钠。
用于经鼻给药的根据本发明胰岛素衍生物的组合物可以例如按照欧洲专利No.272097(授予NovoNordiskA/S)中的描述制备。
含有本发明胰岛素衍生物的组合物可用于治疗对胰岛素敏感的状态。因此，它们可用于治疗1型糖尿病、2型糖尿病和高血糖症，例如，正如有时在受到严重损伤的人和经历大手术的人中所观察到的。用于任意患者的最佳剂量水平取决于多种因素，包括所用具体胰岛素衍生物的效力、患者的年龄、体重、身体活动和膳食；取决于与其它药物可能的组合；并取决于所治疗情况的严重度。建议由本领域技术人员按照与已知胰岛素组合物类似的方式针对每个患者个体确定本发明胰岛素衍生物的每日剂量。
在方便时，可应用本发明胰岛素衍生物与其它类型的胰岛素例如具有更快速起效的胰岛素类似物的混合物。这样的胰岛素类似物的实例描述在例如公开号为EP214826(NovoNordiskA/S)、EP375437(NovoNordiskA/S)和EP383472(EliLilly&Co.)的欧洲专利申请中。
本发明通过以下实施例得到了进一步的举例说明，但这些实施例不能解释为对保护范围的限制。
本文引用的所有参考文献(包括出版物、专利申请和专利)均在此全文引入作为参考，其引入程度如同单独且明确地指示引入每个参考文献作为参考并且在本文中全文列出一样(法律所允许的最大程度)。
本发明中所用的所有标题和副标题仅是为了方便，不应认为是对发明任何方式的限制。
除非另有声明，否则本文提供的任何和所有实施例或示例性语言(例如，“诸如”)的应用仅仅旨在更好地说明本发明，而不是限制发明的范围。说明书中的语言不应当被解释为：表明任何未要求保护的元素是实施本发明必须的元素。
本文引入和并入专利文件仅是为了方便，并不反映任何这些专利文献的有效性、专利性和/或强制性的任何观点。
如适用法律所允许的，本发明包括所附权利要求中所述主题的所有修改和等同物。
实施例
实施例1
N εB29 -{3-[2-(16-羧基十六烷基氨基甲酰基)乙氨基]丙酰}desB30人胰岛素的合 成
步骤1：3-(2-苄氧羰基乙氨基)丙酸
向乙醇(50mL)中加入3-氨基丙酸(5g，56mmol)，并加入TEA(7.8ml，56mmol)和水(50mL)，将混合物在氮气下回流。加入丙烯酸苄基酯((9.1g，56mmol)和额外的乙醇(50mL)，并将混合物回流16小时。样品在真空下浓缩，加入甲苯，再蒸发两次，得到17.5克(产品加TEA)。
1H-NMR(DMSO，300MHz)δ7.12-7.40(m，5H)，4.49(s，2H)，2.98(t，4H)，2.42(t，4H)(加上TEA信号2.79和1.08)
步骤2：3-[(2-苄氧羰基乙基)叔丁氧羰基氨基]丙酸
将3-(2-苄氧羰基乙氨基)丙酸(2g，7.2mmol)溶于DCM(20mL)，加入二碳酸二叔丁酯(3.5g，15.8mmol)和TEA(2.59mL，18.6mmol)。8天后，加入DCM(50mL)，将溶液用水(75mL)和1NHCl(30ml)洗涤。水洗涤液用DCM(25mL)萃取。将有机相收集，经MgSO4干燥，在真空下浓缩。化合物经快速色谱法(AcOEt/庚烷)纯化，得到0.4g。
1H-NMR(DMSO，300MHz)δ12.24(br.1H)，7.25-7.45(m，5H)，5.09(s，2H)，3.42(t，2H)3.34(t-br，4H，理论上2H)，2.58(t，2H)，2.41(t，2H)
步骤3：17-氨基十七烷酸叔丁酯
向十八烷二酸单-叔丁酯(500mg，1.3mmol)中加入乙腈(10mL)，并加入TEA(0.226mL，1.6mmol)。在乙腈(1mL)溶液中加入叠氮磷酸二苯酯(Diphenylphosphonicazide)(0.37g，1.3mmol)。将混合物回流搅拌2小时，在室温搅拌16小时。将反应在真空下浓缩，混悬/溶于1∶2AcOEt∶庚烷(2mL)中，并用二氧化硅干燥床层(2×4cm直径)处理。用1∶2AcOEt∶庚烷(2mL)和1∶1AcOEt∶庚烷(60mL)洗脱。洗脱液浓缩至干。将剩余物部分混悬于THF(2mL)，加入1NNaOH(2mL)。将混浊的溶液/混悬液在室温搅拌1小时。加入水(15mL)，将其用AcOEt(2×25mL)萃取，加入一些盐水以帮助分离。有机相用饱和NaCl洗涤，干燥，过滤和浓缩至干。向剩余物中加入20％乙腈/水(15mL)、TFA(15-20ul)和DMSO(1mL)。混合物过滤失败，所以用DCM(2×60mL)萃取过滤器和溶液。浓缩有机提取物，得到粗制产品(0.14g)，
LCMS：m/z：342(M+1)
步骤4：17-{3-[(2-苄氧羰基乙基)叔丁氧羰基氨基]丙酰基氨基}十七烷酸叔丁酯
将3-[(2-苄氧羰基乙基)叔丁氧羰基氨基]丙酸(0.17g，0.48mmol)溶于DMF(2mL)，加入HOBt(0.065g，0.48mmol)和EDAC(0.093g，0.48mmol)。将混合物搅拌30分钟，加入DIEA(0.083mL，0.48mmol)，并加入溶于THF(3mL)+DMF(0.5mL)中的17-氨基十七烷酸叔丁酯(0.15g，0.44mmol)。将反应搅拌2天。浓缩反应，将剩余物溶于AcOEt(50mL)，用0.2NHCl(2×15mL)洗涤。有机相经MgSO4干燥，并在真空下浓缩。产品经快速色谱法(二氧化硅)纯化，用AcOEt/庚烷(1∶1，7∶3，8∶2)然后用DCM、DCM∶甲醇(8∶2)和5％AcOH/DCM洗脱。收集适当的部分，在真空下浓缩。将剩余物溶于DCM。加入二氧化硅，将产品在真空下浓缩在二氧化硅上。将二氧化硅用于另一快速色谱法，用AcOEt/庚烷(3∶7和1∶1)洗脱。收集适当的部分，在真空下浓缩，得到135mg。
LCMS：m/z：697(M+23)
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.31-7.41(m，5H)，5.12(s，2H)，3.48(m，2H)3.21(m，2H)，2.60(t，2H)，2.20(t，2H)，1.57(m，2H)，1.45(m，2OH，1.25(m-br，24H)。
步骤5：17-{3-[叔丁氧羰基(2-羧乙基)氨基]丙酰基氨基}十七烷酸叔丁酯
在烧瓶中将17-{3-[(2-苄氧羰基乙基)叔丁氧羰基氨基]丙酰基氨基}十七烷酸叔丁酯(0.135g，0.2mmol)溶于THF(10mL)。将烧瓶用氮气充满，在真空下净化数次。加入Pd/C，wet10％(0.03g)，将装有混合物(mixter)的烧瓶装上气球，并搅拌16小时。混合物通过硅藻土过滤，用THF洗脱。在真空下浓缩滤液。TLC指示反应不完全，所以这些过程重复进行两次以上。在真空下浓缩滤液，得到黄色油(0.12g)
LCMS：m/z：607(M+23)
步骤6：17-(3-(叔丁氧羰基[2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基氧羰基)乙基]氨基}丙酰 基氨基)十七烷酸叔丁酯
将17-{3-[叔丁氧羰基(2-羧乙基)氨基]丙酰基氨基}十七烷酸叔丁酯(0.122g，0.2mmol)溶于THF(5mL)。加入DIEA(39ul)，将混合物冷却至0℃。加入TSTU(66mg，0.22mmol)。将混合物在0℃搅拌30分钟，然后在室温搅拌16小时。混合物在真空下浓缩。加入AcOEt(15mL)，溶液用0.2NHCl(5ml)和饱和NaCl(5ml)洗涤，经MgSO4干燥，并在真空下干燥。剩余物经快速色谱法(二氧化硅)纯化，用AcOEt/庚烷(9∶1)和Ac0Et洗脱。收集适当的部分，在真空下浓缩，得到58mg。
LCMS：m/z：682(M+1)
步骤7：N εB29 -{3-[2-(16-羧基十六烷基氨基甲酰基)乙氨基]丙酰}desB30人胰岛 素
通过加入100mMNa2CO3(1.5ml)和乙腈(1.5ml)将DesB30胰岛素(126mg，0.022mmol)溶解在10ml圆底烧瓶。于乙腈(750ul)中加入17-(3-{叔丁氧羰基[2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基氧羰基)乙基]氨基}丙酰基氨基)十七烷酸叔丁酯(15mg，0.022mmol)，并加入Na2CO3(750ul)，所以最终溶液为50∶50100mMNa2CO3/乙腈。溶液在室温搅拌1小时。将溶液转移至15ml离心管中，用Milli-Q水(6ml)洗涤。将溶液在冰上冷却，通过加入1NHCl调节pH至5.1，这导致沉淀。在10℃将管在5000rpm离心10分钟。将溶剂轻轻倒离固体。向该固体中加入95∶5TFA/水(2.5ml)。将溶液倒入RB-烧瓶，用额外的95∶5TFA/水(2.5ml)洗涤。将溶液在室温搅拌30分钟，在真空下浓缩。加入DCM，除去两次，并将烧瓶在室温真空下干燥。产品用离子交换色谱法纯化。
柱：ResourceQ6ml
缓冲液A：15mMTRIS，3OmM醋酸铵，50％v/v乙醇，用AcOH调节pH7.5。
缓冲液B：15mMTRIS，30OmM醋酸铵，50％v/v乙醇，用AcOH调节pH7.5。
用4ml/min的2CV缓冲液A，然后用0-80％缓冲液B的陡度经12CV洗脱。
将适当的部分用水稀释，酸化至pH2，并在20％乙醇、0.1％TFA中上resourceRPC3ml柱，用50％乙醇、0.1％TFA洗脱。收集适当的部分，用水稀释，冷冻干燥，得到15mg。
LCMS：m/z：1529.7(M/4＝1529.3)
实施例2
N εB29 -{3-[2-(14-羧基十四烷基氨基甲酰基)乙氨基]丙酰}desB30人胰岛素的合 成
标题化合物以实施例1中所述方法的类似方式制得，但最终产品应用制备的HPLC(2cm直径.C18柱，乙腈/水/0.1％TFA)纯化
LCMS：1523.3(M/4＝1522.3)
实施例3
Nε B29 -(2-{[(14-羧基十四烷基氨基甲酰基)甲基]氨基}乙酰基)desB30人胰岛素 的合成
步骤1：
(叔丁氧羰基甲氧羰基甲氧羰基甲氨基)乙酸
将(叔丁氧羰基羧基甲氨基)乙酸(9.5g，41mmol)溶于DMF，加入ADAC(7.78g，41mmol)。溶液在室温氮气下搅拌1小时，加入MeOH(1.65ml，41mmol)。将混合物搅拌4小时，在真空下浓缩。加入AcOEt(150mL)，溶液用水(3×100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，在真空下浓缩，得到无色油(9.15g)。
LCMS：m/z：270.1(M+23)
步骤2：15-[2-(叔丁氧羰基甲氧羰基甲氨基)乙酰氨基]十五烷酸叔丁酯
15-氨基十五烷酸叔丁酯以17-氨基十七烷酸叔丁酯类似的方式制得，并按照实施例1步骤4中所述方法的类似方式将其与(叔丁氧羰基甲氧羰基甲氨基)乙酸偶合。
步骤3：15-[2-(叔丁氧羰基-羧基甲基-氨基)乙酰氨基]十五烷酸叔丁酯
将15-[2-(叔丁氧羰基甲氧羰基甲氨基)乙酰氨基]十五烷酸叔丁酯(0.22g，0.405mmol)溶于THF(5mL)，加入1NNaOH(0.405mL)。混合物在氮气下搅拌16小时。在真空下浓缩混合物。将剩余物混悬于AcOEt(约25mL)，加入水(15mL)和AcOH(3mL)。将有机相分离，用水(15mL)+AcOH(1mL)、水(15mL)洗涤，经硫酸镁干燥，在真空下浓缩。
其余步骤按照实施例1中所用方法的类似方式进行，最终化合物首先经制备的HPLC，然后经离子交换色谱法，应用ResourceQ1mL柱和从0.25％醋酸铵至2.5％醋酸铵(0.24％Tris，42.5％乙醇，pH7.5)洗脱，得到纯化。
LCMS：m/z：1516.55(M/4＝1515.3)
实施例4
Nε B29 -[(S)-2-氨基-6-(15-羧基十五烷酰氨基)己酰]desB30人胰岛素的合成
按照实施例1步骤6中所述方法的类似方式，可用TSTU活化十六烷二酸单-叔丁酯。产品可在室温与Boc-Lys-OH在DMF中反应16小时。在真空浓缩后，可向剩余物中加入AcOEt，混合物可用0.2NHCl洗涤。然后将有机相经MgSO4干燥，在真空下浓缩，得到粗制产品15-((S)-5-叔丁氧羰基氨基-5-羧基戊基氨基甲酰基)十五烷酸叔丁酯。这可以不用进一步纯化或经快速色谱法纯化。按照实施例1步骤6中所述方法的类似方式，可用TSTU活化该化合物，得到15-[(S)-5-叔丁氧羰基氨基-5-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基氧羰基)戊基氨基甲酰基]十五烷酸叔丁酯，该化合物可如同实施例1步骤7中所述与胰岛素偶合并脱保护，应用制备的HPLC分离该产品，得到标题化合物。
实施例5
Nε B29 -{(S)-2-氨基-3-[(S)-2-氨基-3-(15-羧基十五烷酰氨基)丙酰基氨基]丙 酰}desB30人胰岛素的合成
15-[(S)-2-叔丁氧羰基氨基-2-(2，5-二氧代-吡咯烷-1-基氧羰基)乙基氨基甲酰基]十五烷酸叔丁酯可应用(S)-3-氨基-2-叔丁氧羰基氨基丙酸按照15-[(S)-5-叔丁氧羰基氨基-5-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基氧羰基)戊基氨基甲酰基]十五烷酸叔丁酯所述的类似方式制得，可在室温将其用(S)-3-氨基-2-叔丁氧羰基氨基丙酸在DMF中反应16小时。在真空浓缩后，可向剩余物中加入AcOEt，混合物可用0.2NHCl洗涤。然后将有机相经MgSO4干燥，在真空下浓缩，得到粗制产品15-[(S)-2-叔丁氧羰基氨基-2-((S)-2-叔丁氧羰基氨基-2-羧基乙基氨基甲酰基)乙基氨基甲酰基]十五烷酸叔丁酯。这可以不用进一步纯化或经快速色谱法纯化。
按照实施例1步骤6中所述方法的类似方式，可用TSTU活化该化合物，得到15-{(S)-2-叔丁氧羰基氨基-2-[(S)-2-叔丁氧羰基氨基-2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基氧羰基)乙基氨基甲酰基]乙基氨基甲酰基}十五烷酸叔丁酯，该化合物可如同实施例1步骤7中所述与胰岛素偶合，应用制备的HPLC分离该产品得到标题化合物。
实施例6
Nε B29 -[(S)-6-氨基-2-(15-羧基十五烷酰氨基)己酰]desB30人胰岛素的合成
标题化合物可按照实施例4中所用方法的类似方式制得。
实施例7
Nε B29 -3-{[2-(15-羧基-十五烷酰氨基)-乙基]-甲基-氨基}-丙酰desB30人胰岛素 的合成
将1-Boc-氨基-2-甲氨基-乙烷(1g，4.75mmol)和丙烯酸叔丁酯(0.61g，4.75mmol)溶于乙醇(10mL)与三乙胺(1.32mL，9.5mmol)中，回流过夜。真空蒸发溶剂，通过加入乙酸乙酯(300ml)，用2×5％碳酸钠、水和盐水洗涤，随后经硫酸镁干燥和真空蒸发，留下油(630mg，44％)而分离出3-(Boc-氨基乙基-甲基-氨基)-丙酸叔丁酯。
LCMS：m/z：303.5(M+H)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ5.11(bs，1H)，3.20(t，2H)，2.65(t，2H)，2.46(t，2H)，2.37(t，2H)，2.21(s，3H)，1.46(s，9H)，1.44(s，9H)。
将3-(Boc-氨基乙基-甲基-氨基)-丙酸叔丁酯(630mg，2.1mmol)用三氟乙酸(6mL)处理2小时。通过从THF中重结晶，分离出3-(氨基乙基-甲基-氨基)-丙酸氟乙酸盐，得到白色粉末974mg(定量)。
将3-(氨基乙基-甲基-氨基)-丙酸(448mg，1.2mmol)和十六烷二酸叔丁基琥珀酰亚胺酯(474mg，1.1mmol)在DMF(6mL)中与三乙胺(0.53mL，2.0mmol)反应过夜。真空蒸发溶剂，通过加入乙酸乙酯，并用0.1M磷酸盐缓冲液pH4、水和盐水洗涤，随后经硫酸镁干燥和真空蒸发，分离出3-{[2-(15-叔丁基-羧基-十五烷酰氨基)-乙基]-甲基-氨基}-丙酸。
LCMS：m/z：471.4(M+H)
将3-{[2-(15-叔丁基-羧基-十五烷酰氨基)-乙基]-甲基-氨基}-丙酸(25mg，0.053mmmol)溶于四氢呋喃(0.3mL)，并用O-(N-琥珀酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(10mg，0.042mmol)和三乙胺(7.3μL，0.053mmol)处理过夜。将粗制的混合物直接用于胰岛素酰化作用。
在室温将DesB30人胰岛素(200mg，0.022mmol)溶于pH10.5的100mM碳酸钠(1mL)。向该胰岛素溶液中，加入上述粗制的3-{[2-(15-叔丁基-羧基-十五烷酰氨基)-乙基]-甲基-氨基}-丙酸O-琥珀酰亚胺酯。30分钟后，由HCl调节pH至5.5，通过离心收集等电的沉淀，真空干燥。将受保护的胰岛素中间体溶于95％TFA(3mL)，30分钟后，真空蒸发。
将NεB29-3-{[2-(15-羧基-十五烷酰氨基)-乙基]-甲基-氨基}-丙酰desB30人胰岛素经RP-HPLC在C4柱上纯化，缓冲液A：在0.1％的TFA-水中的10％的MeCN，缓冲液B：在0.1％的TFA-水中的80％的MeCN。
LCMS：1526.6(M/4＝1526.8)。
实施例8
Nε B29 -3-{[2-(14-羧基-十四烷酰氨基)-乙基]-甲基-氨基}-丙酰desB30人胰岛素 的合成
化合物如上所述由1-Boc-氨基-2-甲氨基-乙烷和丙烯酸叔丁酯以及十五烷酸叔丁基琥珀酰亚胺酯制得。
实施例9
N εB29 -3-{[2-(15-羧基-十四烷酰氨基)-丙基]-甲基-氨基}-丙酰desB30人胰岛素 的合成
化合物如上所述由1-Boc-氨基-3-甲氨基-丙烷和丙烯酸叔丁酯以及十五烷酸叔丁基琥珀酰亚胺酯制得。
实施例10
N εB29 -3-{[2-(15-羧基-十五烷酰氨基)-乙基]-乙基-氨基}-丙酰desB30人胰岛素 的合成
化合物如上所述由1-Boc-氨基-2-氨基-乙烷和丙烯酸叔丁酯制得。将中间的3-(Boc-氨基乙基-氨基)-丙酸叔丁酯在甲醇中应用乙醛和硼氢化钠进行还原烷基化，随后与受保护的十六烷二酸叔丁基琥珀酰亚胺酯进行反应，如同琥珀酰亚胺酯一样活化，并如上所述与胰岛素进行反应。
实施例11
N εB29 -(15-羧基-十五烷酰-γ-L-谷氨酰基-(2-二甲氨基乙基-酰胺)desB30人胰 岛素的合成
在室温让Boc-L-Glu(OtBu)-OSu与2-二甲氨基-乙胺在四氢呋喃和三乙胺中进行反应过夜，如上所述由醋酸乙酯进行后处理。将产品Boc-L-Glu(OtBu)-NHCH2CH2NMe2用三氟乙酸处理2小时，真空干燥。将产品L-谷氨酰基-2-二甲氨基乙基-酰胺与十六烷二酸叔丁基琥珀酰亚胺酯进行反应，如同琥珀酰亚胺酯一样活化，并如上所述与胰岛素进行偶合。
实施例12：
长效和短效胰岛素的疏水性、白蛋白亲和性、自身结合性和混溶性
本发明胰岛素衍生物的自身结合性质的分析
本发明胰岛素衍生物自身结合成大的但可溶的复合物的能力应用SEC(尺寸排阻色谱)进行分析：
柱：SuperoseTM6PC3.2/30，CV＝2.4ml
(AmerhamBiosciences)
温度：37℃
SEC缓冲液：140mMNaCl，10mMTrisHCl，0.01％NaN3，pH7.5
进样体积：20μl
流速：0.05ml/min
运行时间：60分钟，和另外100分钟平衡时间
为了进行该分析，本发明的胰岛素衍生物是在溶液中的，所述溶液组成为0.6mM衍生物、2.1Zn2+/六聚体、16mM苯酚、7mM磷酸盐pH7.8。然后将衍生物的保留时间与以下标准分子的保留时间相比较：蓝色葡聚糖(＞5MDa，KAV0.0)、甲状腺球蛋白(669kDa，KAV0.28)、铁蛋白(440kDa，KAV0.39)、卵清蛋白(44.5kDa，KAV0.56)、核糖核酸酶(13.7kDa，KAV0.69)以及第二对照白蛋白(66kDa，KAV0.53)、Co(III)胰岛素-六聚体(35kDa，KAV0.61)、和单体胰岛素X2(6kDa，KAV0.73)。
使用如下等式确定衍生物的Kav：
Kav＝(t-t0)/(Vt/(f+td-t0))
其中t是给定峰的保留时间，t0是蓝色葡聚糖的保留时间，Vt是总柱体积(这里为2.4ml)，f是流速(这里为0.04ml/min)，和td是系统中没有柱的蓝色葡聚糖的保留时间。
Kav值指示衍生物自身结合的程度，即与Co(III)胰岛素六聚体和X2胰岛素单体Kav类似的大的Kav表示衍生物形成大的自身结合复合物的倾向较低或者没有，而接近于零或甚至为负值的非常小的Kav表示衍生物自身结合成大的、可溶复合物的趋势很大。
根据本发明的胰岛素衍生物的疏水性数据
本发明胰岛素衍生物相对于人胰岛素的疏水性(疏水指数)k′相对，是在40℃时、LiChrosorbRP18(5μm，250×4mm)HPLC柱上应用A)和B)的混合物作为洗脱液经等度洗脱测得的：A)0.1M的磷酸钠缓冲液，pH7.3，含有10％乙腈，B)50％的乙腈水溶液。通过洗脱液在214nm下的UV吸收对洗脱进行监测。通过注射0.1mM的硝酸钠确定空白时间t0。通过改变A和B溶液之间的比例将人胰岛素的保留时间t人调节到至少2t0。k′相对＝(t衍生物-t0)/(t人-t0)。在表1中给出了多个根据本发明胰岛素衍生物实测的k′相对。
人血清白蛋白的亲和性实验
在Minileak粒子上固定并且在23℃下测量了125I-TyrA14-类似物对人血清白蛋白的相对结合常数(地特胰岛素(detemir)＝1，在盐缓冲液中)。
通过尺寸排阻色谱对胰岛素混合物分析时的长效和短效胰岛素的混溶性
SEC：门冬胰岛素(InsulinAspart)(3Zn/6胰岛素、甘油1.6％，16mM苯酚和16mM间甲酚、氯化钠10mM、磷酸盐7mM，pH7.4)和长效胰岛素(2.1或6Zn/6胰岛素)30∶70的混溶性，其是通过收集来自SEC的部分(如上所述)并通过HPLC分别在高分子量部分(部分2，MW＞HAS)和低分子量部分(部分3，MW＝HAS)对存在的长效和速效胰岛素定量而测量的。
在延迟后16分钟的尺寸时收集四个部分，其中部分2[16-32分钟](1号峰)含有大于白蛋白的结合形式(32分钟相当于KAV0.46)，并且部分3(2号峰)含有双六聚、六聚、二聚和单聚形式的胰岛素。
HPLC：反相色谱在ZorbaxEclipseXDB-C182.1*15mm(1.8μm)上运行，使用缓冲液A：0.2M硫酸钠、0.04M磷酸钠、10％乙腈，pH7.2和缓冲液B：70％乙腈在30℃进行梯度洗脱，洗脱梯度为4.5分钟内19-34％B的线性梯度，在5分钟时迅速恢复到起始条件，运行时间为7分钟，流速为0.5ml/min.，进样体积为14μL，UV检测在276nm处进行，两种类似物都使用609μM的门冬胰岛素参照物。
化合物 相对于人胰岛素的疏水性 相对于人胰岛素的胰岛素受体亲和性 相对于地特胰岛素的人血清白蛋白结合性 自身结合：Kav(峰面积的％)
实施例1 18 17％ 14 0.03(88)
实施例2 5.3 34％ 2.1 029(36)
实施例3 2.4 28％ 2.3 0.15(77)
实施例7 4.2 31％ - -
表格说明：
人血清白蛋白的Kav＝0.55，人胰岛素Co(III)六聚体的Kav＝0.63，单体胰岛素类似物X2的Kav＝0.72
n.a＝未分析。
实施例13
给猪皮下注射施用胰岛素制品后的正葡萄糖钳(Euglycaemicglucoseclamp)
雌性猪，60-90kg，禁食了18小时。在实验期间猪可以在它们的围栏中自由活动。皮下注射施用的胰岛素剂量取决于通常分为两个贮库的剂量大小。通过速度可变地静脉注射20％的葡萄糖溶液，使各个猪的个体禁食的葡萄糖水平一直在高至24小时内保持血糖正常(euglycaemic)。输注通过插入颈静脉的导管给予。根据在频繁血糖监测期间所观察到的血糖浓度的变化，对葡萄糖输注有经验地进行必要的调整。每15-30分钟，将血样收集在EDTA玻璃管中，为测量葡萄糖和胰岛素，分离了血浆。在采血样1.5分钟之内用YSI(YellowSpringsInstruments)葡萄糖分析仪(葡萄糖氧化酶法)测定葡萄糖。确定各个胰岛素制品的平均葡萄糖输注速率(GIR)曲线和平均血浆胰岛素曲线。(图2-4显示了平均值±SEM)。
实施例14
胰岛素衍生物-600-900-1200-1800-2400-3000nmol/mL的制剂
A.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
B.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌10μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
C.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
D.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
E.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌15μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
F.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
G.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
H.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌10μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
I.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
J.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
K.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌15μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
L.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
M.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
N.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌10μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
O.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
P.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
Q.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌15μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
R.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
S.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
T.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌10μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
U.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
V.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
X.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌15μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
Y.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AA.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素6μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌4μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AB.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素6μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌5μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AC.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素6μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AD.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素9μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AE.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素9μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌7.5μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AF.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素9μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌9μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AG.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素6μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌4μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AH.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素6μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌5μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AI.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素6μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AJ.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素9μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AK.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素9μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌7.5μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AL.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素9μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌9μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AM.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AN.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌20μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AO.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AP.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AQ.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌20μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AR.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AS.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素30μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌20μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AT.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素30μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌25μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AU.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素30μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌30μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AV.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素30μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌20μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AX.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素30μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌25μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
AY.将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素30μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合。加入乙酸锌30μmol，调节pH至7.6，最后加水将体积调节至10mL。
实施例15
胰岛素衍生物-1200-1800-2400nmol/ml和门冬胰岛素-1200-1800-2400nmol/mL的制剂
A：将门冬胰岛素12μmol混悬于水中，并与包含6μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
B：将门冬胰岛素18μmol混悬于水中，并与包含9μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
C：将门冬胰岛素24μmol混悬于水中，并与包含12μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
D：将门冬胰岛素12μmol混悬于水中，并与包含6μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
E：将门冬胰岛素18μmol混悬于水中，并与包含9μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
F：将门冬胰岛素24μmol混悬于水中，并与包含12μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
G：将门冬胰岛素12μmol混悬于水中，并与包含6μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
H：将门冬胰岛素18μmol混悬于水中，并与包含9μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
I：将门冬胰岛素24μmol混悬于水中，并与包含12μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
J：将门冬胰岛素12μmol混悬于水中，并与包含6μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
K：将门冬胰岛素18μmol混悬于水中，并与包含9μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
L：将门冬胰岛素24μmol混悬于水中，并与包含12μmol乙酸锌和盐酸的溶液混合以获得溶液。然后加入包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的溶液。最后用氢氧化钠调节pH至7.4，并加水调节体积至8mL。
M：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
N：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
O：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
P：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
Q：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌9μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
R：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
S：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
T：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
U：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
V：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
X：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
Y：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌32μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
Z：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AA：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AB：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AC：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AD：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌9μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AE：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AF：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AG：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AH：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AI：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AJ：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AK：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌32μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AL：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AM：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AN：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AO：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AP：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌9μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AQ：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AR：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AS：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AT：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AU：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AV：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AX：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.16mmol、间甲酚0.16mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌32μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AY：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌6μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
AZ：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌8μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BA：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BB：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素12μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BC：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌9μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BD：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BE：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌18μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BF：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素18μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BG：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌12μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BH：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌16μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BI：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌24μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BJ：将LysB29Nε-十六烷二酰-γ-GludesB30人胰岛素24μmol溶于水中，并与包含苯酚0.19mmol、间甲酚0.19mmol、氯化钠0.10mmol、三羟甲基氨基甲烷70μmol和甘油约2mmol的水溶液混合(以获得等渗性)。加入乙酸锌32μmol，调节pH至7.4，最后加水将体积调节至8mL。
BK：通过将0.8mL的制剂A与7.2mL制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BL：通过将1.6mL的制剂A与6.4mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BM：通过将2.4mL的制剂A与5.6mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BN：通过将3.2mL的制剂A与4.8mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BO：通过将4.0mL的制剂A与4.0mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BP：通过将4.8mL的制剂A与3.2mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BQ：通过将5.6mL的制剂A与2.4mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BR：通过将6.4mL的制剂A与1.6mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BS：通过将7.2mL的制剂A与0.8mL的制剂M混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BT：通过将0.8mL的制剂A与7.2mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BU：通过将1.6mL的制剂A与6.4mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BV：通过将2.4mL的制剂A与5.6mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BX：通过将3.2mL的制剂A与4.8mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BY：通过将4.0mL的制剂A与4.0mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
BZ：通过将4.8mL的制剂A与3.2mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CA：通过将5.6mL的制剂A与2.4mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CB：通过将6.4mL的制剂A与1.6mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CC：通过将7.2mL的制剂A与0.8mL的制剂N混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CD：通过将0.8mL的制剂A与7.2mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CE：通过将1.6mL的制剂A与6.4mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CF：通过将2.4mL的制剂A与5.6mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CG：通过将3.2mL的制剂A与4.8mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CH：通过将4.0mL的制剂A与4.0mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CI：通过将4.8mL的制剂A与3.2mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CJ：通过将5.6mL的制剂A与2.4mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CK：通过将6.4mL的制剂A与1.6mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CL：通过将7.2mL的制剂A与0.8mL的制剂O混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CM：通过将0.8mL的制剂A与7.2mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CN：通过将1.6mL的制剂A与6.4mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CO：通过将2.4mL的制剂A与5.6mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CP：通过将3.2mL的制剂A与4.8mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CQ：通过将4.0mL的制剂A与4.0mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CR：通过将4.8mL的制剂A与3.2mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CS：通过将5.6mL的制剂A与2.4mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CT：通过将6.4mL的制剂A与1.6mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CU：通过将7.2mL的制剂A与0.8mL的制剂P混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CV：通过将0.8mL的制剂B与7.2mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CX：通过将1.6mL的制剂B与6.4mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CY：通过将2.4mL的制剂B与5.6mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
CZ：通过将3.2mL的制剂B与4.8mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DA：通过将4.0mL的制剂B与4.0mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DB：通过将4.8mL的制剂B与3.2mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DC：通过将5.6mL的制剂B与2.4mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DD：通过将6.4mL的制剂B与1.6mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DE：通过将7.2mL的制剂B与0.8mL的制剂Q混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DF：通过将0.8mL的制剂B与7.2mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DG：通过将1.6mL的制剂B与6.4mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DH：通过将2.4mL的制剂B与5.6mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DI：通过将3.2mL的制剂B与4.8mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DJ：通过将4.0mL的制剂B与4.0mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DK：通过将4.8mL的制剂B与3.2mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DL：通过将5.6mL的制剂B与2.4mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DM：通过将6.4mL的制剂B与1.6mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DN：通过将7.2mL的制剂B与0.8mL的制剂R混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DO：通过将0.8mL的制剂B与7.2mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DP：通过将1.6mL的制剂B与6.4mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DQ：通过将2.4mL的制剂B与5.6mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DR：通过将3.2mL的制剂B与4.8mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DS：通过将4.0mL的制剂B与4.0mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DT：通过将4.8mL的制剂B与3.2mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DU：通过将5.6mL的制剂B与2.4mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DV：通过将6.4mL的制剂B与1.6mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DX：通过将7.2mL的制剂B与0.8mL的制剂S混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DY：通过将0.8mL的制剂B与7.2mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
DZ：通过将1.6mL的制剂B与6.4mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EA：通过将2.4mL的制剂B与5.6mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EB：通过将3.2mL的制剂B与4.8mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EC：通过将4.0mL的制剂B与4.0mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ED：通过将4.8mL的制剂B与3.2mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EE：通过将5.6mL的制剂B与2.4mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EF：通过将6.4mL的制剂B与1.6mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EG：通过将7.2mL的制剂B与0.8mL的制剂T混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EH：通过将0.8mL的制剂C与7.2mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EI：通过将1.6mL的制剂C与6.4mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EJ：通过将2.4mL的制剂C与5.6mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EK：通过将3.2mL的制剂C与4.8mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EL：通过将4.0mL的制剂C与4.0mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EM：通过将4.8mL的制剂C与3.2mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EN：通过将5.6mL的制剂C与2.4mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EO：通过将6.4mL的制剂C与1.6mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EP：通过将7.2mL的制剂C与0.8mL的制剂U混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EQ：通过将0.8mL的制剂C与7.2mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ER：通过将1.6mL的制剂C与6.4mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ES：通过将2.4mL的制剂C与5.6mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ET：通过将3.2mL的制剂C与4.8mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EU：通过将4.0mL的制剂C与4.0mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EV：通过将4.8mL的制剂C与3.2mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EX：通过将5.6mL的制剂C与2.4mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EY：通过将6.4mL的制剂C与1.6mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
EZ：通过将7.2mL的制剂C与0.8mL的制剂V混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FA：通过将0.8mL的制剂C与7.2mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FB：通过将1.6mL的制剂C与6.4mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FC：通过将2.4mL的制剂C与5.6mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FD：通过将3.2mL的制剂C与4.8mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FE：通过将4.0mL的制剂C与4.0mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FF：通过将4.8mL的制剂C与3.2mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FG：通过将5.6mL的制剂C与2.4mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FH：通过将6.4mL的制剂C与1.6mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FI：通过将7.2mL的制剂C与0.8mL的制剂X混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FJ：通过将0.8mL的制剂C与7.2mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FK：通过将1.6mL的制剂C与6.4mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FL：通过将2.4mL的制剂C与5.6mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FM：通过将3.2mL的制剂C与4.8mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FN：通过将4.0mL的制剂C与4.0mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FO：通过将4.8mL的制剂C与3.2mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FP：通过将5.6mL的制剂C与2.4mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FQ：通过将6.4mL的制剂C与1.6mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FR：通过将7.2mL的制剂C与0.8mL的制剂Y混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FS：通过将0.8mL的制剂D与7.2mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FT：通过将1.6mL的制剂D与6.4mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FU：通过将2.4mL的制剂D与5.6mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FV：通过将3.2mL的制剂D与4.8mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FX：通过将4.0mL的制剂D与4.0mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FY：通过将4.8mL的制剂D与3.2mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
FZ：通过将5.6mL的制剂D与2.4mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GA：通过将6.4mL的制剂D与1.6mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GB：通过将7.2mL的制剂D与0.8mL的制剂Z混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GC：通过将0.8mL的制剂D与7.2mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GD：通过将1.6mL的制剂D与6.4mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GE：通过将2.4mL的制剂D与5.6mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GF：通过将3.2mL的制剂D与4.8mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GG：通过将4.0mL的制剂D与4.0mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GH：通过将4.8mL的制剂D与3.2mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GI：通过将5.6mL的制剂D与2.4mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GJ：通过将6.4mL的制剂D与1.6mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GK：通过将7.2mL的制剂D与0.8mL的制剂AA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GL：通过将0.8mL的制剂D与7.2mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GM：通过将1.6mL的制剂D与6.4mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GN：通过将2.4mL的制剂D与5.6mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GO：通过将3.2mL的制剂D与4.8mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GP：通过将4.0mL的制剂D与4.0mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GQ：通过将4.8mL的制剂D与3.2mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GR：通过将5.6mL的制剂D与2.4mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GS：通过将6.4mL的制剂D与1.6mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GT：通过将7.2mL的制剂D与0.8mL的制剂AB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GU：通过将0.8mL的制剂D与7.2mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GV：通过将1.6mL的制剂D与6.4mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GX：通过将2.4mL的制剂D与5.6mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GY：通过将3.2mL的制剂D与4.8mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
GZ：通过将4.0mL的制剂D与4.0mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HA：通过将4.8mL的制剂D与3.2mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HB：通过将5.6mL的制剂D与2.4mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HC：通过将6.4mL的制剂D与1.6mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HD：通过将7.2mL的制剂D与0.8mL的制剂AC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HE：通过将0.8mL的制剂E与7.2mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HF：通过将1.6mL的制剂E与6.4mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HG：通过将2.4mL的制剂E与5.6mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HH：通过将3.2mL的制剂E与4.8mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HI：通过将4.0mL的制剂E与4.0mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HJ：通过将4.8mL的制剂E与3.2mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HK：通过将5.6mL的制剂E与2.4mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HL：通过将6.4mL的制剂E与1.6mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HM：通过将7.2mL的制剂E与0.8mL的制剂AD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HN：通过将0.8mL的制剂E与7.2mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HO：通过将1.6mL的制剂E与6.4mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HP：通过将2.4mL的制剂E与5.6mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HQ：通过将3.2mL的制剂E与4.8mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HR：通过将4.0mL的制剂E与4.0mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HS：通过将4.8mL的制剂E与3.2mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HT：通过将5.6mL的制剂E与2.4mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HU：通过将6.4mL的制剂E与1.6mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HV：通过将7.2mL的制剂E与0.8mL的制剂AE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HX：通过将0.8mL的制剂E与7.2mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HY：通过将1.6mL的制剂E与6.4mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
HZ：通过将2.4mL的制剂E与5.6mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IA：通过将3.2mL的制剂E与4.8mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IB：通过将4.0mL的制剂E与4.0mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IC：通过将4.8mL的制剂E与3.2mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ID：通过将5.6mL的制剂E与2.4mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IE：通过将6.4mL的制剂E与1.6mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IF：通过将7.2mL的制剂E与0.8mL的制剂AF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IG：通过将0.8mL的制剂E与7.2mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IH：通过将1.6mL的制剂E与6.4mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
II：通过将2.4mL的制剂E与5.6mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IJ：通过将3.2mL的制剂E与4.8mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IK：通过将4.0mL的制剂E与4.0mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IL：通过将4.8mL的制剂E与3.2mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IM：通过将5.6mL的制剂E与2.4mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IN：通过将6.4mL的制剂E与1.6mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IO：通过将7.2mL的制剂E与0.8mL的制剂AG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IP：通过将0.8mL的制剂F与7.2mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IQ：通过将1.6mL的制剂F与6.4mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IR：通过将2.4mL的制剂F与5.6mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IS：通过将3.2mL的制剂F与4.8mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IT：通过将4.0mL的制剂F与4.0mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IU：通过将4.8mL的制剂F与3.2mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IV：通过将5.6mL的制剂F与2.4mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IX：通过将6.4mL的制剂F与1.6mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IY：通过将7.2mL的制剂F与0.8mL的制剂AH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
IZ：通过将0.8mL的制剂F与7.2mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JA：通过将1.6mL的制剂F与6.4mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JB：通过将2.4mL的制剂F与5.6mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JC：通过将3.2mL的制剂F与4.8mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JD：通过将4.0mL的制剂F与4.0mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JE：通过将4.8mL的制剂F与3.2mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JF：通过将5.6mL的制剂F与2.4mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JG：通过将6.4mL的制剂F与1.6mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JH：通过将7.2mL的制剂F与0.8mL的制剂AI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JI：通过将0.8mL的制剂F与7.2mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JJ：通过将1.6mL的制剂F与6.4mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JK：通过将2.4mL的制剂F与5.6mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JL：通过将3.2mL的制剂F与4.8mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JM：通过将4.0mL的制剂F与4.0mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JN：通过将4.8mL的制剂F与3.2mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JO：通过将5.6mL的制剂F与2.4mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JP：通过将6.4mL的制剂F与1.6mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JQ：通过将7.2mL的制剂F与0.8mL的制剂AJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JR：通过将0.8mL的制剂F与7.2mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JS：通过将1.6mL的制剂F与6.4mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JT：通过将2.4mL的制剂F与5.6mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JU：通过将3.2mL的制剂F与4.8mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JV：通过将4.0mL的制剂F与4.0mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JX：通过将4.8mL的制剂F与3.2mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JY：通过将5.6mL的制剂F与2.4mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
JZ：通过将6.4mL的制剂F与1.6mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KA：通过将7.2mL的制剂F与0.8mL的制剂AK混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KB：通过将0.8mL的制剂G与7.2mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KC：通过将1.6mL的制剂G与6.4mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KD：通过将2.4mL的制剂G与5.6mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KE：通过将3.2mL的制剂G与4.8mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KF：通过将4.0mL的制剂G与4.0mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KG：通过将4.8mL的制剂G与3.2mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KH：通过将5.6mL的制剂G与2.4mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KI：通过将6.4mL的制剂G与1.6mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KJ：通过将7.2mL的制剂G与0.8mL的制剂AL混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KK：通过将0.8mL的制剂G与7.2mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KL：通过将1.6mL的制剂G与6.4mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KM：通过将2.4mL的制剂G与5.6mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KN：通过将3.2mL的制剂G与4.8mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KO：通过将4.0mL的制剂G与4.0mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KP：通过将4.8mL的制剂G与3.2mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KQ：通过将5.6mL的制剂G与2.4mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KR：通过将6.4mL的制剂G与1.6mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KS：通过将7.2mL的制剂G与0.8mL的制剂AM混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KT：通过将0.8mL的制剂G与7.2mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KU：通过将1.6mL的制剂G与6.4mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KV：通过将2.4mL的制剂G与5.6mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KX：通过将3.2mL的制剂G与4.8mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KY：通过将4.0mL的制剂G与4.0mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
KZ：通过将4.8mL的制剂G与3.2mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LA：通过将5.6mL的制剂G与2.4mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LB：通过将6.4mL的制剂G与1.6mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LC：通过将7.2mL的制剂G与0.8mL的制剂AN混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LD：通过将0.8mL的制剂G与7.2mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LE：通过将1.6mL的制剂G与6.4mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LF：通过将2.4mL的制剂G与5.6mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LG：通过将3.2mL的制剂G与4.8mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LH：通过将4.0mL的制剂G与4.0mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LI：通过将4.8mL的制剂G与3.2mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LJ：通过将5.6mL的制剂G与2.4mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LK：通过将6.4mL的制剂G与1.6mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LL：通过将7.2mL的制剂G与0.8mL的制剂AO混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LM：通过将0.8mL的制剂H与7.2mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LN：通过将1.6mL的制剂H与6.4mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LO：通过将2.4mL的制剂H与5.6mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LP：通过将3.2mL的制剂H与4.8mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LQ：通过将4.0mL的制剂H与4.0mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LR：通过将4.8mL的制剂H与3.2mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LS：通过将5.6mL的制剂H与2.4mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LT：通过将6.4mL的制剂H与1.6mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LU：通过将7.2mL的制剂H与0.8mL的制剂AP混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LV：通过将0.8mL的制剂H与7.2mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LX：通过将1.6mL的制剂H与6.4mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LY：通过将2.4mL的制剂H与5.6mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
LZ：通过将3.2mL的制剂H与4.8mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MA：通过将4.0mL的制剂H与4.0mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MB：通过将4.8mL的制剂H与3.2mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MC：通过将5.6mL的制剂H与2.4mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MD：通过将6.4mL的制剂H与1.6mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ME：通过将7.2mL的制剂H与0.8mL的制剂AQ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MF：通过将0.8mL的制剂H与7.2mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MG：通过将1.6mL的制剂H与6.4mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MH：通过将2.4mL的制剂H与5.6mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MI：通过将3.2mL的制剂H与4.8mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MJ：通过将4.0mL的制剂H与4.0mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MK：通过将4.8mL的制剂H与3.2mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ML：通过将5.6mL的制剂H与2.4mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MM：通过将6.4mL的制剂H与1.6mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MN：通过将7.2mL的制剂H与0.8mL的制剂AR混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MO：通过将0.8mL的制剂H与7.2mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MP：通过将1.6mL的制剂H与6.4mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MQ：通过将2.4mL的制剂H与5.6mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MR：通过将3.2mL的制剂H与4.8mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MS：通过将4.0mL的制剂H与4.0mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MT：通过将4.8mL的制剂H与3.2mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MU：通过将5.6mL的制剂H与2.4mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MV：通过将6.4mL的制剂H与1.6mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MX：通过将7.2mL的制剂H与0.8mL的制剂AS混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MY：通过将0.8mL的制剂I与7.2mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
MZ：通过将1.6mL的制剂I与6.4mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NA：通过将2.4mL的制剂I与5.6mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NB：通过将3.2mL的制剂I与4.8mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NC：通过将4.0mL的制剂I与4.0mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ND：通过将4.8mL的制剂I与3.2mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NE：通过将5.6mL的制剂I与2.4mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NF：通过将6.4mL的制剂I与1.6mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NG：通过将7.2mL的制剂I与0.8mL的制剂AT混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NH：通过将0.8mL的制剂I与7.2mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NI：通过将1.6mL的制剂I与6.4mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NJ：通过将2.4mL的制剂I与5.6mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NK：通过将3.2mL的制剂I与4.8mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NL：通过将4.0mL的制剂I与4.0mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NM：通过将4.8mL的制剂I与3.2mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NN：通过将5.6mL的制剂I与2.4mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NO：通过将6.4mL的制剂I与1.6mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NP：通过将7.2mL的制剂I与0.8mL的制剂AU混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NQ：通过将0.8mL的制剂I与7.2mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NR：通过将1.6mL的制剂I与6.4mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NS：通过将2.4mL的制剂I与5.6mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NT：通过将3.2mL的制剂I与4.8mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NU：通过将4.0mL的制剂I与4.0mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NV：通过将4.8mL的制剂I与3.2mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NX：通过将5.6mL的制剂I与2.4mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NY：通过将6.4mL的制剂I与1.6mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
NZ：通过将7.2mL的制剂I与0.8mL的制剂AV混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OA：通过将0.8mL的制剂I与7.2mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OB：通过将1.6mL的制剂I与6.4mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OC：通过将2.4mL的制剂I与5.6mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OD：通过将3.2mL的制剂I与4.8mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OE：通过将4.0mL的制剂I与4.0mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OF：通过将4.8mL的制剂I与3.2mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OG：通过将5.6mL的制剂I与2.4mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OH：通过将6.4mL的制剂I与1.6mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OI：通过将7.2mL的制剂I与0.8mL的制剂AX混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OJ：通过将0.8mL的制剂J与7.2mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OK：通过将1.6mL的制剂J与6.4mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OL：通过将2.4mL的制剂J与5.6mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OM：通过将3.2mL的制剂J与4.8mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
ON：通过将4.0mL的制剂J与4.0mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OO：通过将4.8mL的制剂J与3.2mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OP：通过将5.6mL的制剂J与2.4mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OQ：通过将6.4mL的制剂J与1.6mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OR：通过将7.2mL的制剂J与0.8mL的制剂AY混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OS：通过将0.8mL的制剂J与7.2mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OT：通过将1.6mL的制剂J与6.4mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OU：通过将2.4mL的制剂J与5.6mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OV：通过将3.2mL的制剂J与4.8mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OX：通过将4.0mL的制剂J与4.0mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OY：通过将4.8mL的制剂J与3.2mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
OZ：通过将5.6mL的制剂J与2.4mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PA：通过将6.4mL的制剂J与1.6mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PB：通过将7.2mL的制剂J与0.8mL的制剂AZ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PC：通过将0.8mL的制剂J与7.2mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PD：通过将1.6mL的制剂J与6.4mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PE：通过将2.4mL的制剂J与5.6mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PF：通过将3.2mL的制剂J与4.8mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PG：通过将4.0mL的制剂J与4.0mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PH：通过将4.8mL的制剂J与3.2mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PI：通过将5.6mL的制剂J与2.4mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PJ：通过将6.4mL的制剂J与1.6mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PK：通过将7.2mL的制剂J与0.8mL的制剂BA混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PL：通过将0.8mL的制剂J与7.2mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PM：通过将1.6mL的制剂J与6.4mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PN：通过将2.4mL的制剂J与5.6mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PO：通过将3.2mL的制剂J与4.8mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PP：通过将4.0mL的制剂J与4.0mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PQ：通过将4.8mL的制剂J与3.2mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PR：通过将5.6mL的制剂J与2.4mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PS：通过将6.4mL的制剂J与1.6mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PT：通过将7.2mL的制剂J与0.8mL的制剂BB混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PU：通过将0.8mL的制剂K与7.2mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PV：通过将1.6mL的制剂K与6.4mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PX：通过将2.4mL的制剂K与5.6mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PY：通过将3.2mL的制剂K与4.8mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
PZ：通过将4.0mL的制剂K与4.0mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QA：通过将4.8mL的制剂K与3.2mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QB：通过将5.6mL的制剂K与2.4mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QC：通过将6.4mL的制剂K与1.6mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QD：通过将7.2mL的制剂K与0.8mL的制剂BC混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QE：通过将0.8mL的制剂K与7.2mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QF：通过将1.6mL的制剂K与6.4mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QG：通过将2.4mL的制剂K与5.6mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QH：通过将3.2mL的制剂K与4.8mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QI：通过将4.0mL的制剂K与4.0mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QJ：通过将4.8mL的制剂K与3.2mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QK：通过将5.6mL的制剂K与2.4mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QL：通过将6.4mL的制剂K与1.6mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QM：通过将7.2mL的制剂K与0.8mL的制剂BD混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QN：通过将0.8mL的制剂K与7.2mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QO：通过将1.6mL的制剂K与6.4mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QP：通过将2.4mL的制剂K与5.6mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QQ：通过将3.2mL的制剂K与4.8mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QR：通过将4.0mL的制剂K与4.0mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QS：通过将4.8mL的制剂K与3.2mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QT：通过将5.6mL的制剂K与2.4mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QU：通过将6.4mL的制剂K与1.6mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QV：通过将7.2mL的制剂K与0.8mL的制剂BE混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QX：通过将0.8mL的制剂K与7.2mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QY：通过将1.6mL的制剂K与6.4mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
QZ：通过将2.4mL的制剂K与5.6mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RA：通过将3.2mL的制剂K与4.8mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RB：通过将4.0mL的制剂K与4.0mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RC：通过将4.8mL的制剂K与3.2mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RD：通过将5.6mL的制剂K与2.4mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RE：通过将6.4mL的制剂K与1.6mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RF：通过将7.2mL的制剂K与0.8mL的制剂BF混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RG：通过将0.8mL的制剂L与7.2mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RH：通过将1.6mL的制剂L与6.4mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RI：通过将2.4mL的制剂L与5.6mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RJ：通过将3.2mL的制剂L与4.8mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RK：通过将4.0mL的制剂L与4.0mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RL：通过将4.8mL的制剂L与3.2mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RM：通过将5.6mL的制剂L与2.4mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RN：通过将6.4mL的制剂L与1.6mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RO：通过将7.2mL的制剂L与0.8mL的制剂BG混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RP：通过将0.8mL的制剂L与7.2mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RQ：通过将1.6mL的制剂L与6.4mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RR：通过将2.4mL的制剂L与5.6mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RS：通过将3.2mL的制剂L与4.8mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RT：通过将4.0mL的制剂L与4.0mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RU：通过将4.8mL的制剂L与3.2mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RV：通过将5.6mL的制剂L与2.4mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RX：通过将6.4mL的制剂L与1.6mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RY：通过将7.2mL的制剂L与0.8mL的制剂BH混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
RZ：通过将0.8mL的制剂L与7.2mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SA：通过将1.6mL的制剂L与6.4mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SB：通过将2.4mL的制剂L与5.6mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SC：通过将3.2mL的制剂L与4.8mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SD：通过将4.0mL的制剂L与4.0mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SE：通过将4.8mL的制剂L与3.2mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SF：通过将5.6mL的制剂L与2.4mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SG：通过将6.4mL的制剂L与1.6mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SH：通过将7.2mL的制剂L与0.8mL的制剂BI混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SI：通过将0.8mL的制剂L与7.2mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SJ：通过将1.6mL的制剂L与6.4mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SK：通过将2.4mL的制剂L与5.6mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SL：通过将3.2mL的制剂L与4.8mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SM：通过将4.0mL的制剂L与4.0mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SN：通过将4.8mL的制剂L与3.2mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SO：通过将5.6mL的制剂L与2.4mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SP：通过将6.4mL的制剂L与1.6mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
SQ：通过将7.2mL的制剂L与0.8mL的制剂BJ混合，得到包含门冬胰岛素和胰岛素衍生物的制剂，并最后通过加水将其体积调节至10mL。
药理学方法
实验(I)
本发明胰岛素衍生物的胰岛素受体结合
通过SPA实验(闪烁迫近分析)微滴定板抗体俘获实验测定了本发明胰岛素类似物对人胰岛素受体的亲合性。将SPA-PVT抗体结合珠、抗-小鼠试剂(AmershamBiosciences，CatNo.PRNQ0017)与25ml结合缓冲液(100mMHEPESpH7.8；100mM氯化钠，10mMMgS04，0.025％吐温-20)混合。用于单一PackardOptiplate(PackardNo.6005190)的试剂混合物包括2.4μl的1∶5000稀释的纯化重组体人胰岛素受体-外显子11，相当于5000cpm/每100μl试剂混合物量的A14Tyr[125I]-人胰岛素储备溶液，12μl的1∶1000的F12抗体稀释液，3ml的SPA-珠和至总量12ml的结合缓冲液。然后加入总数100μl，并由合适样品制备一系列稀释液。接着向该稀释液系列中加入100μl试剂混合物，并将样品孵育了16小时，同时轻轻地振摇。然后通过离心1分钟分离了相层，并在Topcounter中对这些板进行了计数。应用GraphPadPrism2.01(GraphPadSoftware，SanDiego，CA)中的非线性回归算法拟合了结合数据。
实验(II)
本发明胰岛素衍生物相对于人胰岛素的效能
将实验当天称重为238-383g的SpragueDawley雄性大鼠用于钳实验(clampexperiment)。让大鼠在受控的环境条件下自由摄食并在钳实验前禁食过夜(从下午3点开始)。
实验方案
在手术操作前让大鼠适应动物设施至少1周。在钳实验前约1周，在氟烷麻醉下将聚乙烯(Tygon)导管插入颈静脉(用于输注)和颈动脉(用于采集血样)中，将导管露出并固定在颈背上。手术后对大鼠给予兽用链霉素(Streptocilinvet.)(BoehringerIngelheim；0.15ml/大鼠，肌内)，并在恢复期间将其放入动物监护单元内(25℃)。为了达到止痛作用，在麻醉过程中给予内啡肽(Anorphin)(0.06mg/大鼠，皮下)，和在从麻醉状态完全恢复后(2-3小时)给予卡布洛芬(1.5mg/kg，皮下)，并再每天一次给予2天。
所用钳技术适应于(1)。将在实验当天上午7时，对禁食过夜(从前一天的下午3时开始)的大鼠称重，并与取样注射器和输注系统(Harvard22基础泵，Harvard，和Perfoctum皮下玻璃注射器，Aldrich)连接，然后将其放入各自的钳笼，它们在笼中休息约45分钟，然后开始实验。在整个实验过程中大鼠能够在其常用的衬垫上自由运动，和自由饮水。30分钟的基础期后，在所述基础期过程中每隔10分钟测定了其血糖水平，以恒定速率输注了(静脉内)待测的胰岛素衍生物和人胰岛素(1个剂量水平/大鼠，n＝6-7/剂量水平)300分钟。自始至终每隔10分钟测定了其血糖水平，并相应地调节20％葡萄糖水溶液的输注以维持血糖正常(euglyceamia)。将每只大鼠的重悬浮红细胞样品进行了合并，并通过颈动脉导管以约1/2ml的体积返回。
在每一实验天时，在钳实验前和该实验结束时采取各个待测胰岛素衍生物溶液和人胰岛素溶液的样品，并通过HPLC确定了肽的浓度。在该研究前和结束时测定相关时间点处的大鼠胰岛素和C-肽的血浆浓度以及待测胰岛素衍生物和人胰岛素的血浆浓度。在实验结束时使用超剂量的戊巴比妥处死大鼠。
测试的化合物和剂量：由储备溶液稀释待测试的胰岛素，所述储备溶液含有在5mM磷酸盐pH7.7中的97μM胰岛素衍生物。备用溶液中的终浓度为0.45μM胰岛素衍生物、5mM磷酸盐、100mM氯化钠、0.007％聚山梨醇酯20。pH为7.7，静脉输注速率为15和20pmol·min-1·kg-1。
用作参比化合物的人胰岛素的储备溶液是在类似介质中配制的，并以6、15或30pmol·min-1·kg-1的速度进行了静脉输注。
两种储备溶液均储存在-20℃，并在使用前于4℃下融化过夜。在将这些溶液转移至输注注射器内前15分钟，轻轻地将其上下翻转几次。
实验(III)
本发明胰岛素衍生物在猪体内的T50％的测定
T50％是当使用外部γ-计数器测定时，50％注射量的A14Tyr[125I]标记的待测胰岛素衍生物从注射部位消失时的时间。
遵循实验室动物监护的原则，应用无特定病原的LYYD，非糖尿病型雌性猪，即DanishLandrace、Yorkshire和Duroc的杂交猪(Holmenlund，Haarloev，Denmark)进行药动学和药效学研究。这些猪是有意识的，具有4-5个月的月龄且体重为70-95kg。在实验前使动物禁食过夜18小时。
如先前所述，将用125I在TyrA14上标记的胰岛素衍生物的配制制剂经皮下注入猪中(Ribel，U.，K，Brange，J，和Henriksen，U.Thepigasamodelforsubcutaneousinsulinabsorptioninman.Serrano-Rios，M和Lefèbvre，P.J.891-896.1985.Amsterdam；NewYork；Oxford，ElsevierSciencePublishers.1985(ConferenceProceeding))。
在实验开始时，将60nmol剂量的根据本发明胰岛素衍生物(测试化合物)和60nmol剂量的地特胰岛素(均在TyrA14上用125I标记过)注射到各只猪颈部的两个不同部位上。
使用常规外部γ-计数法的改进方法(Ribel，U.Subcutaneousabsorptionofinsulinanalogues.Berger，M.和Gries，F.A.70-77(1993)。Stuttgart；NewYork，GeorgThimeVerlag(ConferenceProceeding))监测放射标记从皮下注射部位上的消失。采用这种改进的方法，能够使用无线便携式装置(ScancysLaboratorieteknik，DK-3500，Denmark)连续数天地测定放射性从皮下储存处的消失。每隔1分钟进行测量，并将计数值用背景活性进行校准。

Claims (14)

1.具有下式的胰岛素衍生物
Ins-Q1-Q2-X1-Q3-COOH
其中Ins是母体胰岛素部分和Q1-Q2-X1-Q3-COOH是取代基，且其中Ins经由母体胰岛素B链中的B29位Lys残基上的ε-氨基和该取代基的Q1或Q2中的CO基连接到该取代基上；
Q1为：
·氨基酸残基，该残基用其羧酸基团与Ins的B链中存在的Lys残基上的ε-氨基一起形成酰胺基团，或者
·键
Q2为：-CO-(CH2)2-NH-(CH2)2-，-CO-CH2-NH-CH2-或
·其中n＝1-6，和其中R1和R2各自独立地为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3
Q3为
·-(CH2)m-，其中m是12、13、14、15或16；
X1为
·O；
·-C＝O；
·键；
·NCOR1，其中R1为H、-CH3或-(CH2)1-6-CH3；或
·
其中R是氢或C1-3-烷基；
及其任意Zn2+复合物。
2.根据权利要求1的胰岛素衍生物，其中Q1为键。
3.根据权利要求1或2的胰岛素衍生物，其中X1是其中R为氢的
4.根据权利要求1或2的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为胰岛素类似物。
5.根据权利要求1或2的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素B30位的氨基酸残基为Lys或缺失。
6.根据权利要求1或2的胰岛素衍生物，其中取代基连接在desB30人胰岛素中B29位Lys残基上的ε-氨基上。
7.根据权利要求4的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为AspB28人胰岛素、GlyA21人胰岛素或GlyA21desB30人胰岛素、GlyA21ArgB31ArgB32人胰岛素。
8.根据权利要求5的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为AspB28人胰岛素、GlyA21人胰岛素或GlyA21desB30人胰岛素、GlyA21ArgB31ArgB32人胰岛素。
9.根据权利要求6的胰岛素衍生物，其中母体胰岛素为AspB28人胰岛素、GlyA21人胰岛素或GlyA21desB30人胰岛素、GlyA21ArgB31ArgB32人胰岛素。
10.根据1-9中任一项的胰岛素衍生物的锌复合物，其中胰岛素衍生物每六个分子结合两个锌离子、三个锌离子、四个锌离子、五个锌离子、六个锌离子、七个锌离子、八个锌离子、九个锌离子或十个锌离子。
11.一种用于在需要这种治疗的患者中治疗糖尿病作为药物应用的药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1-9中任一项的胰岛素衍生物。
12.根据权利要求11的药物组合物，其中组合物包含药学上可接受的赋形剂。
13.根据权利要求11或12的药物组合物，其中组合物包含快速起效的胰岛素类似物。
14.根据权利要求13的药物组合物，其中速效胰岛素类似物为AspB28人胰岛素。
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