发明内容
本发明要解决的一个技术问题在于提供一种甜酸适口、风味独特、用表面静态发酵法制备红枣果醋的方法。
解决上述技术问题所采用的技术方案是它由下述步骤制成:
1、制备红枣原汁
将干红枣或新鲜红枣剔除霉烂果实,清洗干净,用粉碎机将红枣破碎,取破碎红枣,加红枣质量6倍的水,用浸提罐或夹层锅在95~100℃保温1小时,用离心机分离枣渣,得到红枣汁;向枣渣中加入红枣质量4倍的水,装入浸提罐或夹层锅,95~100℃保温30分钟,用离心机分离枣渣,得到红枣汁;合并两次提取的红枣汁,用200目的双联过滤器过滤,得到可溶性固形物为7%~8%的红枣原汁。
2、浓缩红枣汁
将红枣原汁在真空浓缩锅内真空度为0.06~0.08MPa浓缩至可溶性固形物为16%~20%的红枣汁。
3、制备红枣酒
(1)酵母菌扩大培养
将BM45干红专用葡萄酒酵母菌或ACCC21138啤酒酵母菌转接到麦芽汁斜面试管中活化,活化后在三角瓶中进行一级扩大培养,培养基是可溶性固形物为5%~6%的红枣汁,25~28℃培养24~28小时,将培养液转入到装有可溶性固形物为8%的红枣汁的卡氏罐中,进行二级扩大培养,25~28℃培养24~28小时,在装有可溶性固形物为10%的红枣汁种子罐中进行三级扩大培养,28~30℃培养24~28小时,制备成BM45干红专用葡萄酒酵母菌液或ACCC21138啤酒酵母菌液。
上述的ACCC21138啤酒酵母菌(Sacccharomyces cerevisiae)购于中国农业科学院,BM45干红专用葡萄酒酵母菌(Sacccharomyces cerevisiae)购于宁夏农业大学。
(2)红枣汁酒精发酵
将可溶性固形物为16%~20%的红枣汁转移至酒精发酵罐中,按红枣汁质量的3%接种扩大培养的BM45干红专用葡萄酒酵母菌液或ACCC21138啤酒酵母菌液,28~30℃酒精发酵6~8天,得酒精度为9%~13%的红枣酒,在贮存罐内0~10℃贮存备用。
4、制备大豆豆芽汁
将大豆发芽,取刚出芽的大豆,加入出芽的大豆质量10倍的水,用夹层锅煮汁20分钟,用100目的尼龙网过滤取汁,得大豆豆芽汁。
5、用表面静态醋酸发酵法发酵红枣果醋
(1)首批醋酸发酵
调配:首批醋酸发酵时,醋酸发酵液调配方法如下:
将酒精度为12%~13%的红枣酒转入调配罐中,加入用紫外线消毒的自来水,调配红枣酒的酒精度至7%~9%,用食用冰醋酸调整红枣酒中醋酸含量至2%~2.5%,得到发酵液,向发酵液中加入其质量4%的大豆豆芽汁,搅拌均匀。
醋酸发酵:将调配好的发酵液经进液阀、并用气液混合泵、安装在管道上的出液阀和液温调节器输入醋酸发酵罐中,加入量以淹没不锈钢筛网,发酵温度为30~33℃,发酵每间4~6小时开动气液混合泵3,醋酸发酵罐1中气体由通气管1-2排出,每次循环30分钟,循环10分钟后发酵液通气量达0.07M3/min,发酵时间16~20天,发酵液中醋酸含量为5%~7%,首批醋酸发酵结束。
(2)二批醋酸发酵
将首批醋酸发酵结束的发酵液从醋酸发酵罐中抽取出总质量的2/3,为红枣果醋,在醋酸发酵罐中剩余1/3发酵液中添加酒精度为12%~13%的红枣酒,补加至发酵液原质量,再加入发酵液质量4%的大豆豆芽汁,开始二批醋酸发酵,发酵条件与首批醋酸发酵相同。
待发酵液中醋酸含量达到5%~6%时,完全按二批醋酸发酵的操作步骤进行三批醋酸发酵,待发酵批数达8次后,将发酵好的红枣果醋全部从醋酸发酵罐中取出,清洗醋酸发酵罐。
6、红枣果醋的陈酿
将步骤5中8批发酵获得的红枣果醋盛放并装满于密闭式、不锈钢贮存罐中,室温静置贮存12~24月。
7、过滤
将步骤6陈酿后的红枣果醋,取出上清液,添加陈酿后的红枣果醋质量2.5%的硅藻土,混匀,用板框过滤机过滤。
8、包装、杀菌、冷却
将过滤后的红枣果醋包装于玻璃瓶中,置于60~65℃的热水槽中,保温25~ 30分钟,自然冷却。
在本发明的浓缩红枣汁步骤2中,将红枣原汁在真空浓缩锅内真空度为0.06~0.08MPa浓缩至可溶性固形物最佳为20%的红枣汁。
在本发明的制备红枣酒步骤3的酵母菌扩大培养(1)中,最佳将BM45干红专用葡萄酒酵母菌转接到麦芽汁斜面试管中活化,活化后在三角瓶中进行一级扩大培养,培养基是可溶性固形物为5%~6%的红枣汁,25~28℃培养24~28小时,将培养液转入到装有可溶性固形物为8%的红枣汁的卡氏罐中,进行二级扩大培养,25~28℃培养24~28小时,在装有可溶性固形物为10%的红枣汁种子罐中进行三级扩大培养,28~30℃培养24~28小时,制备成BM45干红专用葡萄酒酵母菌液。在红枣汁酒精发酵(2)中,将可溶性固形物为20%的红枣汁转移至酒精发酵罐中,按发酵液体积的3%最佳接种扩大培养的BM45干红专用葡萄酒酵母菌液,28~30℃酒精发酵7天,得酒精度为12%~13%的红枣酒,在贮存罐内0~10℃贮存备用。
在本发明的用表面静态醋酸发酵法发酵红枣果醋步骤5的首批醋酸发酵中,将酒精度为9%~10%的红枣酒转入调配罐中,加入用紫外线消毒的自来水,调配红枣酒的酒精度最佳至9%,用食用冰醋酸调整红枣酒中醋酸含量至2.5%,得到发酵液,向发酵液中加入其质量4%的大豆豆芽汁,搅拌均匀;调配好的发酵液经进液阀、并用气液混合泵、经安装在管道上的出液阀和液温调节器输入醋酸发酵罐中,加入量以淹没不锈钢筛网,最佳发酵温度为30℃、发酵每间6小时,开动气液混合泵,醋酸发酵罐中气体由通气管排出,每次循环30分钟,循环10分钟后发酵液通气量达0.07M3/min,发酵时间16~20天,发酵液中醋酸含量为6%~7%,首批醋酸发酵结束。
本发明与用液态深层醋酸发酵方法相比,具有一次性生产投资少、易于操作和掌握等优点,采用本发明所制备的红枣果醋,风味和质量明显优于液态深层醋酸发酵,经测试,达到了GB18187-2000酿造食醋和GB2719-2003食醋卫生标准,可作为调味品。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明,但本发明不限于这些实施例。
实施例1
以所用可溶性固形物为20%的红枣汁100kg为例所用的其它原料及其制备方法如下:
1、制备红枣原汁
将干红枣或新鲜红枣剔除霉烂果实,清洗干净,用粉碎机将红枣破碎,取破碎红枣40kg,加红枣质量6倍的水,用浸提罐或夹层锅在95~100℃保温1小时,用离心机分离枣渣,得到红枣汁;向枣渣中加入红枣质量4倍的水,装入浸提罐或夹层锅,95~100℃保温30分钟,用离心机分离枣渣,得到红枣汁;合并两次提取的红枣汁,用200目的双联过滤器过滤,得到可溶性固形物为7%~8%的红枣原汁。
2、浓缩红枣汁
将红枣原汁在真空浓缩锅内真空度为0.06~0.08MPa浓缩至可溶性固形物为20%的红枣汁。
3、制备红枣酒
(1)酵母菌扩大培养
将BM45干红专用葡萄酒酵母菌转接到麦芽汁斜面试管中活化,活化后在三角瓶中进行一级扩大培养,培养基是可溶性固形物为5%~6%的红枣汁,25~28℃培养24~28小时,将培养液转入到装有可溶性固形物为8%的红枣汁的卡氏罐中,进行二级扩大培养,25~28℃培养24~28小时,在装有可溶性固形物为10%的红枣汁种子罐中进行三级扩大培养,28~30℃培养24~28小时,制备成BM45干红专用葡萄酒酵母菌液。
(2)红枣汁酒精发酵
将可溶性固形物为20%的红枣汁100kg转移至酒精发酵罐中,按发酵液体积的3%接种扩大培养的BM45干红专用葡萄酒酵母菌液,28~30℃酒精发酵7天,得酒精度为12%~13%的红枣酒,在贮存罐内0~10℃贮存备用。
4、制备大豆豆芽汁
将大豆发芽,取刚出芽的大豆0.8kg,加入出芽的大豆质量10倍的水,用夹层锅煮汁20分钟,用100目的尼龙网过滤取汁,得大豆豆芽汁。
5、用表面静态醋酸发酵法发酵红枣果醋
(1)首批醋酸发酵
调配:首批醋酸发酵时,醋酸发酵液调配方法如下:
将酒精度为12%~13%的红枣酒100kg转入调配罐5中,加入用紫外线消毒的自来水,调配红枣酒的酒精度至9%,用食用冰醋酸调整红枣酒中醋酸含量至2.5%,得到发酵液,向发酵液中加入其质量4%的大豆豆芽汁,搅拌均匀。
醋酸发酵:将调配好的发酵液经进液阀6、并用气液混合泵3、经安装在管道上的出液阀4和液温调节器2输入醋酸发酵罐1中,加入量以淹没不锈钢筛网1-1,发酵温度为30℃、发酵每间6小时开动气液混合泵3,醋酸发酵罐1中气体由通气管1-2排出,每次循环30分钟,循环10分钟后发酵液通气量达0.07M3/min,发酵时间16~20天,发酵液中醋酸含量为6%~7%,首批醋酸发酵结束。
(2)二批醋酸发酵
将首批醋酸发酵结束的发酵液从醋酸发酵罐1中抽取出总质量的2/3,为红枣果醋,在醋酸发酵罐1中剩余1/3发酵液中添加酒精度为12%的红枣酒,补加至发酵液原质量,再加入发酵液质量4%的大豆豆芽汁,开始二批醋酸发酵,发酵条件与首批醋酸发酵相同。
待发酵液中醋酸含量达到5%~6%时,完全按二批醋酸发酵的操作步骤进行三批醋酸发酵,待发酵批数达8次后,将发酵好的红枣果醋全部从醋酸发酵罐1中取出,清洗醋酸发酵罐1。
6、红枣果醋的陈酿
将步骤5中8批发酵获得的红枣果醋盛放并装满于密闭式、不锈钢贮存罐中,室温静置贮存12~24月。
7、过滤
将步骤6陈酿后的红枣果醋,取出上清液,添加陈酿后的红枣果醋质量2.5%的硅藻土,混匀,用板框过滤机过滤。
8、包装、杀菌、冷却
将过滤后的红枣果醋包装于玻璃瓶中,置于60~65℃的热水槽中,保温25~30分钟,自然冷却。
实施例2
以所用可溶性固形物为16%的红枣汁100kg为例所用的其它原料及其制备方法 如下:
在浓缩红枣汁步骤2中,将红枣原汁在真空浓缩锅内真空度为0.06~0.08MPa浓缩至可溶性固形物为16%的红枣汁。
在制备红枣酒步骤3的红枣汁酒精发酵(2)中,将可溶性固形物为16%的红枣汁100kg转移至酒精发酵罐中,按发酵液体积的3%接种扩大培养的BM45干红专用葡萄酒酵母菌液,28~30℃酒精发酵7天,得酒精度为9%~10%的红枣酒,在贮存罐内0~10℃贮存备用。
在用表面静态醋酸发酵法发酵红枣果醋步骤5的首批醋酸发酵中,将酒精度为9%~10%的红枣酒100kg转入调配罐中,加入用紫外线消毒的自来水,调配红枣酒的酒精度至9%,用食用冰醋酸调整红枣酒中醋酸含量至2.5%,得到发酵液,向发酵液中加入其质量4%的大豆豆芽汁,搅拌均匀;调配好的发酵液经进液阀6、并用气液混合泵3、安装在管道上的出液阀4和液温调节器2输入醋酸发酵罐1中,加入量以淹没不锈钢筛网1-1,发酵温度为33℃,发酵每间4小时开动气液混合泵3,醋酸发酵罐1中气体由通气管1-2排出,每次循环30分钟,循环10分钟后发酵液通气量达0.07M3/min,发酵时间16~20天,发酵液中醋酸含量为5%~6%,首批醋酸发酵结束。该步骤的其他步骤与实施例1相同。
其他步骤与实施例1相同,制备成红枣果醋。
实施例3
在以上的实施例1、2的制备红枣酒步骤3中,用ACCC21138啤酒酵母菌替换BM45干红专用葡萄酒酵母菌,制备成ACCC21138啤酒酵母菌液,用等质量的ACCC21138啤酒酵母菌液替换BM45干红专用葡萄酒酵母菌液,该步骤的其它步骤与实施例1相同。其它步骤与实施例1相同,制备成红枣果醋。
为了确定本发明的最佳工艺条件,发明人进行了大量的实验室研究实验,各种实验情况如下:
实验仪器:水浴锅,离心机,打浆机,手持糖量计,10L自制开放式酒精发酵罐,10L自制密闭式酒精发酵罐,真空旋转薄膜蒸发仪,循环式表面静态醋酸发酵装置,板框过滤机,分光光度计。
实验材料:干净无霉烂变质的干红枣,市售;大豆,市售;96%食用酒精。
发酵菌 种:(1)ACCC21138啤酒酵母菌(Sacccharomyces cerevisiae),购于中国农业科学院,BM45干红专用葡萄酒酵母菌(Sacccharomyces cerevisiae)和小椭圆啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae var ellipsoideus),购于宁夏农业大学;安琪酿酒干酵母菌(Sacccharomyces cerevisiae)为市场上销售的商品。以上菌种于陕西师范大学食品发酵实验室保存;(2)巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus),从红枣果醋的醋膜中分离,保存于陕西师范大学食品发酵实验室。
测定方法:可溶性固形物测定,采用手持折光仪法;还原糖测定,采用斐林试剂法;总酸测定,采用酸碱滴定法;酒度测定,采用酒精比重计法。
1、加水量对红枣汁提取的影响
取干红枣9份每份250g,加水提取红枣汁两次,两次提取温度均为100℃,每次提取加水量见表1,加水量均按干红枣质量计算,每次提取结束后用离心机分离红枣汁,合并红枣汁,并将9份红枣汁都补水至干红枣质量的11倍,测定每份红枣汁中还原糖、总糖、可溶性固形物的含量,确定加水量。实验结果见表1。
表1加水量对红枣汁提取的影响
由表1可见,第一次提取加入干红枣质量5倍水时,从红枣中提取的汁液相对较少,汁渣分离困难;若两次提取加水量过多,虽然获得的红枣汁较多,但枣汁中的可溶性固形物、还原糖和总糖含量相对偏低,不利于浓缩红枣汁。综合考虑,本发明提取红枣汁第一次加水量为干红枣质量的6倍,第二次提取加水量为4倍。
2、红枣汁与红枣浆酒精发酵的比较
取干红枣1kg,加干红枣质量5倍的水煮沸打浆,除去枣核,即为红枣浆。将红枣浆在100℃煮至可溶性固形物为16%为止。用可溶性固形物为16%的浓缩红枣汁 和红枣浆为原料,按发酵液质量的3%接种量,菌悬液浓度为108个/mL,接种BM45干红专用葡萄酒酵母菌,分别置于密闭和开放两种发酵装置中避光,28℃进行酒精发酵。发酵结束后测定发酵液中可溶性固形物含量和酒度,并观察发酵期间发酵液状态变化,结果见表2。
表2红枣汁与红枣浆酒精发酵的比较
发酵状态 |
发酵时间(天) |
可溶性固形物(%) |
酒精度%(v/v) |
糖转化率(%) |
开放发酵红枣汁 |
7 |
6 |
6.5 |
69.1 |
开放发酵红枣浆 |
8 |
7 |
6.0 |
63.8 |
密闭发酵红枣汁 |
8 |
5.5 |
7.2 |
76.5 |
密闭发酵红枣浆 |
9 |
6.5 |
6.5 |
69.1 |
注:糖转化率(%)=酒精度(%)÷发酵初发酵液可溶性固形物(%)×1.7×100。
由表2可见,用红枣汁发酵的红枣酒,无论是在密闭还是开放的发酵条件下,酒度和糖转化率均高于红枣浆,发酵时间却短于红枣浆,发酵结束后红枣浆残留的可溶性固形物较高。密闭式酒精发酵与开放式酒精发酵相比,虽然后者的发酵时间相对较长,但发酵效果优于前者。因此,本发明的酒精发酵步骤中,采用先从红枣中提取红枣汁,用浓缩红枣汁在密闭式酒精发酵罐进行酒精发酵。
3、不同酵母菌对红枣汁酒精发酵的影响
取可溶性固形物为16%的红枣汁4份每份5kg,按发酵液质量3%的接种量,菌悬液浓度为108个/mL,分别接入已经活化好的安琪酿酒干酵母菌(I)、BM45干红专用葡萄酒酵母菌(II)、ACCC21138啤酒酵母菌(III)、小椭圆啤酒酵母菌(IV),混合均匀,28℃密闭酒精发酵,发酵结束后,倒罐分离酵母菌,转入室温后陈酿,30天后测定红枣酒的酒度和总糖,实验结果见表3。
表3不同酵母菌对红枣汁酒精发酵的影响
指标 |
I |
II |
III |
IV |
发酵时间(天) |
5.0 |
6.5 |
8 |
7.5 |
发酵后酒度(%,v/v) |
5.5 |
7.2 |
7.5 |
6.1 |
陈酿后酒度(%,v/v) |
7.0 |
9.2 |
9.1 |
8.0 |
发酵后残糖(g/L) |
6.82 |
6.69 |
5.68 |
6.41 |
陈酿后残糖(g/L) |
5.01 |
3.24 |
3.47 |
4.11 |
从表3可知,用安琪酿酒干酵母菌发酵的酒发酵期最短,发酵后产生的酒度低、发酵液剩余的糖多,陈酿也相同。比较4株酵母菌对红枣汁发酵的影响,认为BM45干红专用葡萄酒酵母菌或ACCC21138啤酒酵母菌最适合于用作红枣汁的酒精发酵。
4、红枣汁可溶性固形物含量对酒精发酵的影响
采用提取的红枣原汁,浓缩为不同可溶性固形物含量的发酵液,每份试样5kg,接种BM45干红专用葡萄酒酵母菌,接种量为发酵液质量的3%,28℃发酵,每天测定发酵液的酒度。
结果见表4。
表4红枣汁可溶性固形物含量对酒精发酵的影响
从表4可知,随着发酵液可溶性固形物含量的增大,其发酵时间逐渐延长,酒度逐渐增大,可溶性固形物含量为8%的发酵液,发酵5天主发酵基本结束,可溶性固形物含量为20%的发酵液,发酵8天主发酵才基本结束,酒度达11.5%。但发酵液可溶性固形物含量增加至25%时,酵母菌发酵产生的酒度很低,说明此时的糖浓度已抑制了酵母菌,使枣汁不能酒精发酵。因此从实验结果可得出,用以制造红枣果醋的红枣汁,酒精发酵时要求其可溶性固形物含量不高于25%,否则酵母菌不能进行酒精发酵。本发明选择可溶性固形物为16%~20%的浓缩红枣汁。
5、酒精度对红枣果醋醋酸发酵的影响
采用实验室自制的30L表面静态醋酸发酵设备。先在发酵罐中保留10L已发酵好的红枣果醋,其醋酸含量为5%、酒精度低于1%、液面有醋酸菌膜漂浮,加入20L酒精度为7%的红枣酒,混合后测定其酒精度,按表5设计的发酵液酒精度,用食用酒精补足至要求的发酵液酒精度,发酵温度控制在30~32℃,控制气液混合泵的流速,使打开泵循环发酵液10分钟后发酵液通气量达0.07M3/min,每次循环30分钟,每间隔3天测定发酵液醋酸含量,并观测发酵情况。
测试结果见表5。
表5酒精度对红枣果醋醋酸发酵的影响
由表5可见,用酒精度为5%的发酵液进行醋酸发酵,发酵9天时醋酸含量为3.23%,此后随发酵时间的延长醋酸含量逐渐减少,实验中还发现,发酵液在第9天时,液面长满膜醭酵母菌,并有少量的霉菌出现;发酵前酒精度为7%的发酵液发酵6天后,液面出现连片的菌膜,发酵12天后醋酸含量为7.22%,15天达到7.30%,此后下降;发酵前酒精度为9%的发酵液发酵6天,液面出现连片的菌膜,发酵12天后醋酸含量达6.28%,发酵18天达到7.80%,说明酒精度为9%的发酵液醋酸发酵已出现迟缓现象,醋酸发酵的时间延长;当发酵液发酵前酒精度为11%时,发酵18天,发酵液酸度变化不大,液面无菌膜生长,说明11%的酒精度已完全抑制了醋酸菌对发酵液的发酵。综上结果,红枣果醋发酵时,发酵液的酒精度不易过低,也不易过高,过低发酵液易被杂菌污染,产生的醋酸少;过高,会抑制醋酸菌的发酵。本发明选择酒精度在7%~9%的红枣酒进行醋酸发酵。
6、大豆豆芽汁添加量的确定
取刚发芽的大豆,加入其质量10倍的水,用夹层锅煮大豆豆芽20分钟,用100目的尼龙网过滤取汁,得大豆豆芽汁。向发酵罐中加入20L酒精度为12%的红枣酒和10L醋酸含量为5%的红枣果醋组成发酵液,按发酵液质量的0%、2%、4%、6%添加大豆豆芽汁,其它发酵条件同实验5,发酵12天后观测发酵液液面的长膜情况,并测定醋酸含量。实验结果见表6。
表6豆芽汁加入量对醋酸发酵的影响
加入量(%) |
0 |
2 |
4 |
6 |
醋酸含量(%) |
6.72 |
6.91 |
7.13 |
7.12 |
液面长膜情况 |
有膜、零散 |
有膜、成片、薄 |
有膜、成片、厚 |
有膜、成片、厚 |
由表6可见,大豆豆芽汁的添加量为发酵液质量的4%~6%时,醋酸含量高, 液面的菌膜成片且膜较厚,适合于醋酸发酵,但实验发现若发酵液中大豆豆芽汁的量达到6%时,发酵的红枣果醋风味不如添加少时好,有微弱的臭味,故大豆豆芽汁的添加量不易过大。本发明选择大豆豆芽汁的添加量为发酵液质量的4%~6%,最佳为4%。
7、醋酸菌对红枣果醋醋酸发酵的影响
选用来源不同的醋酸菌株,发酵红枣果醋。发酵方式及醋酸菌的来源为:(1)30L酒度为8%的红枣酒自然发酵;(2)30L酒度为8%的红枣酒,接入1.5L培养好的巴氏醋杆菌菌悬液发酵;(3)20L酒度为12%的红枣酒与10L醋酸含量为5%红枣果醋混合发酵;(4)20L酒度为12%的红枣酒与10L醋酸含量为5%红枣果醋混合,接入1.5L培养好的巴氏醋杆菌菌悬液发酵。巴氏醋杆菌为发明人从红枣果醋醋膜中分离得到,其它发酵条件同实验5,发酵12天,观测发酵液表面的长膜情况,测定发酵液的醋酸含量,比较不同来源的醋酸菌对红枣果醋发酵的影响。实验结果见表7。
表7不同来源的醋酸菌对红枣果醋醋酸发酵的影响
发酵方式 |
(1) |
(2) |
(3) |
(4) |
发酵前醋酸含量(%) |
0.13 |
0.18 |
1.73 |
1.91 |
发酵后醋酸含量(%) |
4.76 |
5.22 |
7.21 |
7.24 |
醋酸增加量(%) |
4.63 |
5.04 |
5.48 |
5.33 |
液面长膜情况 |
有膜、零散 |
有膜、成片 |
有膜、成片 |
有膜、成片 |
由表7可见,实验处理(1)的醋酸发酵不加任何发酵菌种,利用自然界的野生醋酸菌发酵,同其它发酵方式相比,虽然发酵液也能进行醋酸发酵,液面表面也能长膜,将红枣酒变成红枣果醋,但发酵时间较长。实验发现,若将红枣酒的酒精完全转变成醋酸,发酵时间需20~28天,且若发酵环境卫生条件差,发酵液表面已污染杂菌而败坏。实验(2)是将分离出的、适宜于表面静态发酵的巴氏醋杆菌经过扩大培养,接种于发酵液中进行醋酸发酵,发酵12天,发酵前后醋酸的增加量为5.04%,但品尝最终发酵好的醋液,其风味较其它处理差。实验(3)是将已经发酵好、内含大量活醋酸菌的醋液与红枣酒混合发酵,发酵12天后醋液含酸量达7.21%,发酵前后醋酸的增加量为5.48%。实验(4)是在(3)实验的基础上,又添加了巴氏醋杆菌纯种扩大培养液,从醋酸增加量和液面长膜情况结果发现,实验(4) 与实验(3)差异不大。实验(3)与实验(2)相比,操作简便,不需要菌种的活化和扩大培养,简化了工艺等优势。
8、循环发酵通气间隔时间对醋酸发酵的影响
根据上述研究结果,将气液混合泵的流量调节到开泵循环10min,发酵液通气量为0.07M3/min,每次开泵循环总时间30min,调节开泵循环发酵液的间隔时间,确定每批发酵的循环次数。实验结果见表8。
表8每批醋酸发酵液循环次数的确定
从表8可知,发酵液循环通气间隔时间为2小时,发酵12天后,醋液中的醋酸含量只有3.82%,液面无菌膜生长,说明通气量过大,一方面使发酵形成的醋酸被空气带走引起发酵液醋酸含量减低,另一方面,大量起泡上升使发酵液搅拌,无法在发酵液表面形成菌膜。当发酵液循环通气间隔时间超过8小时,发酵液发酵12天后,虽然发酵液液面有成片的醋膜生成,但醋酸含量明显低于通气间隔时间6小时发酵液发酵12天的醋酸含量,说明间隔8小时通气,发酵罐的通气量不足,醋酸生成速度变慢,醋酸发酵期延长。因此,本发明适宜的循环通气间隔时间确定为4~6小时。
9、红枣果醋澄清方法的确定
将陈酿12月的红枣果醋采用离心澄清法、冷冻澄清法、硅藻土过滤澄清法进行澄清实验。
离心澄清法:在室温,用3500转/分钟分别离心红枣果醋0、2、4、6、8、10、12分钟,澄清后用分光光度计在波长420nm处测定透光率。
冷冻澄清法:将红枣果醋在-6℃左右,分别冷冻0、2、4、6、8、10、12天,解冻后取清夜,用分光光度计在波长420nm处测定透光率。
硅藻土过滤澄清法:在红枣果醋中添加红枣果醋质量0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的硅藻土,室温,摇匀静置30分钟,过滤,澄清后用分光光度计在波长420nm处测定透光率。
测试结果见表9。
表9红枣果醋澄清方法的确定
结果表明,用离心机在室温离心,时间≥8分钟时,醋液透光率增加幅度不大,说明用3500转/分钟的离心机澄清红枣果醋的离心时间8~10分钟为宜。冷冻澄清法,随冷冻时间的延长醋液透光率增大,根据透光率的变化幅度大小,实验确定冷冻时间不低于10天。硅藻土过滤澄清法,其添加量为醋液质量的2.5%,透光率为77.3%,与添加量3%相比,透光率增幅不大,故用硅藻土澄清,添加量为醋液重量的2.5%为宜。比较三澄清方法,本发明选择硅藻土过滤澄清法,添加量为红枣果醋质量的2.5%。
为了证明本发明的有益效果,本发明的发明人将采用本发明实施例1红枣果醋制备方法制备的红枣果醋,按照GB18187-2000酿造食醋和GB2719-2003食醋卫生标准要求进行检测。检测结果见表11。
表11红枣果醋的质量检验结果
由表11可见,经检验,用表面静态发酵法制备的红枣果醋达到了GB18187-2000酿造食醋和GB2719-2003食醋卫生标准要求。