CN104095268B - 商用酿酒酵母和高浓度大枣环磷酸腺苷提取液及其制备方法 - Google Patents

商用酿酒酵母和高浓度大枣环磷酸腺苷提取液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种商用酿酒酵母的用途和高浓度大枣环磷酸腺苷提取液及其制备方法，是利用商用酿酒酵母在大枣环磷酸腺苷提取液中发酵，得到高浓度大枣环磷酸腺苷提取液。该制备方法包括获取大枣环磷酸腺苷提取液；在大枣环磷酸腺苷提取液中接种活化的商用酿酒酵母进行发酵；发酵液浓缩得到高浓度大枣环磷酸腺苷提取液等步骤，制备得到大枣环磷酸腺苷含量达1000-1300mg/L的高浓度提取液，可以直接作为保健饮品饮用，保留了枣中大部分活性物质，而且制备工艺简单，经济无污染。

Description

商用酿酒酵母和高浓度大枣环磷酸腺苷提取液及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种商用酿酒酵母的用途，同时本发明还涉及一种从大枣中提取环磷酸腺苷的方法，尤其涉及一种利用酿酒酵母发酵提高含量的高浓度大枣环磷酸腺苷提取液的制备方法，以及由该方法制得的高浓度大枣环磷酸腺苷提取液。
背景技术
环磷酸腺苷(cAMP）是细胞内参与调节物质代谢和生物学功能的重要物质，对许多疾病都有一定的预防作用，如冠心病，心肌缺氧，心绞痛，风湿病等。一般每天饮用量为250ml，具有保健作用。
枣果中含有多种活性物质，其中cAMP是活性物质之一，枣是所研究的180种自然界植物中含cAMP最多的植物种类。因此枣中cAMP的提取及浓缩为枣的加工又提供了一个方向。
中国专利申请CN103099264A公开了一种以大枣为原料制备以环磷酸腺苷为功效成份的口服液的方法。该方法主要包括两个步骤，一是采用水提取的传统方法获得大枣环磷酸腺苷提取液；二是为提高提取液质量和提取率，向获得的提取液或浓缩的提取液中加入果胶酶水解得到口服液。具体来讲，该方法对大枣进行粉碎或匀浆处理后，用水加热提取，经过离心、过滤、反复提取、合并滤液后得到大枣环磷酸腺苷水提取液；在水提取液或浓缩的提取液中加入果胶酶水解，水解后加入食品添加剂再离心过滤得到大枣口服液。通过此方法尽可能的保留了大枣的营养成份，制得的口服液中大枣环磷酸腺苷含量为0.002％～0.020％，即每100mL口服液含有2mg～20mg的环磷酸腺苷。
在上述方法中，由于大枣中含有大量的糖类物质，尤其在提取液蒸发浓缩提高大枣环磷酸腺苷含量的过程中，提取液浓缩至一定程度后再蒸发会出现糖分焦化等问题，影响提取液的品质与环磷酸腺苷的活性，限制了提取液中环磷酸腺苷的含量。
发明内容
为解决现有技术中存在的不足，本发明提供了一种既能保留枣中大部分活性物质又能极大提高环磷酸腺苷含量的大枣环磷酸腺苷浓缩液的制备方法。
为实现上述目的，本发明涉及一种商用酿酒酵母，其应用于发酵大枣环磷酸腺苷提取液，以制备高浓度大枣环磷酸腺苷提取液的方法中。
酵母菌的生长必须以碳水化合物为碳源和能源物质，糖是碳水化合物中酵母菌生长的最佳碳源之一，通过在大枣环磷酸腺苷提取液中接种酿酒酵母，使酵母菌发酵，在酵母菌的生长繁殖过程提取液中的大量糖分被消耗掉，极大降低了糖含量，消除了糖对浓缩的制约；此外酿酒酵母在发酵过程中不会影响大枣中的其它活性物质，最大程度地保留了大枣的营养成分；而且酿酒酵母传统上用于酿制葡萄酒、果酒和啤酒，对人体无害，大枣环磷酸腺苷的提取液在发酵后产生的少量酒精可以在再次蒸发浓缩过程中挥发掉，不残留在浓缩液中，由此制得的高浓度大枣环磷酸腺苷浓缩液可以直接作为保健品饮用。
作为对上述方式的限定，所述商用酿酒酵母为葡萄酒酵母或啤酒酵母中的一种。
葡萄酒酵母或啤酒酵母是常用的酿酒酵母，如市售的安琪酵母系列等，既易于获得，经济实用，又对产品的安全性有保证。
本发明同时涉及一种制备高浓度大枣环磷酸腺苷提取液的方法，该方法包括以下步骤：
a、获取大枣环磷酸腺苷提取液；
b、在大枣环磷酸腺苷提取液中接种活化的商用酿酒酵母进行发酵；
c、将步骤b所得的发酵液蒸发浓缩，得到高浓度大枣环磷酸腺苷提取液。
对大枣进行处理、提取，获得大枣环磷酸腺苷提取液，将活化的酿酒酵母接种在提取液中进行发酵，随着酵母菌的生长繁殖提取液中的大量糖分被消耗，解除了糖分对浓缩的限制，极大提高了提取液的浓缩倍数，从而获得高浓度大枣环磷酸腺苷提取液。
作为对上述方式的限定，所述在步骤a和步骤b之间，设有向步骤a获取的大枣环磷酸腺苷提取液中加入果胶酶进行酶解、以及对酶解液进行蒸发浓缩的步骤。
通过果胶酶对提取液酶解，使提取液中的果胶类、多糖类等大分子物质能够水解成小分子物质，既能使环磷酸腺苷尽量多的被释放，提高提取率，还能减少大分子物质的影响，使提取液易于澄清，利于后续浓缩、发酵等步骤。
通过对酶解液的蒸发浓缩，提高糖含量，为后续酵母菌的发酵提供充足的碳源，同时浓缩后发酵还可使发酵脱糖的用途发挥到最佳，最大量的消除糖分，以获得高浓度环磷酸腺苷提取液。
作为对上述方式的限定，所述酶解液进行蒸发浓缩步骤中，酶解液蒸发浓缩至原体积的1/3，蒸发温度为55-65℃，压力为0.06-0.09MPa。
将酶解液蒸发浓缩至原体积的1/3，是考虑到酶解液中糖分对浓缩的影响，既保证不会出现糖分受热焦化的问题，又使浓缩率最大。控制蒸发浓缩的温度与压力，一方面要尽量多蒸出水份，提高浓缩倍数；另一方面要防止提取液出现糖分焦化问题，影响浓缩提取液的质量。
作为对上述方式的限定，所述步骤a包括以下步骤：
a1、大枣预处理，将清洗干净的大枣烘干、去核、切片；
a2、制备提取液，用大枣重量4-5倍的软化水对大枣进行加热提取，反复提取三次，过滤得到大枣环磷酸腺苷提取液。
通过对大枣进行烘干、去核、切片的预处理，再通过水提法获得大枣环磷酸腺苷提取液，最大程度得保留了环磷酸腺苷及大枣中其它营养物质的活性，使提取液可直接作为保健品引用。
作为对上述方式的限定，所述步骤b包括以下步骤：
b1、将商用酿酒酵母接种在4%蔗糖溶液中活化，活化温度为38-40℃，时间为25-30min；
b2、将活化的酿酒酵母菌液接种到提取液中进行发酵，在温度28-30℃下发酵120-150小时，至酒精浓度达到5-6度，残糖0.3-0.5g/100mL。
在38-40℃的4%蔗糖溶液中快速活化酿酒酵母，使菌种能够尽快适应提取液中的糖含量环境，开始发酵；在28-30℃下缓慢发酵，使酿酒酵母菌较长时间处于生长期，能够大量地消耗糖分；控制发酵时间在120-150小时，酿酒酵母的产酒量还较少，减少对后续处理的影响；控制发酵酒精度和残糖，一方面要在后续浓缩中使酒精能够完全挥发，不影响提取液的品质，另一方面要最大程度的提高浓缩率。
此外，本发明同时提供了一种高浓度大枣环磷酸腺苷提取液，其是由如上所述的制备高浓度大枣环磷酸腺苷提取液的方法制得。
作为对上述方式的限定，所述的高浓度大枣环磷酸腺苷提取液中大枣环磷酸腺苷含量为1000-1300mg/L。
本发明通过采用发酵的方法将大枣环磷酸腺苷含量提高到1000-1300mg/L，获得的高浓度大枣环磷酸腺苷提取液可以直接作为保健品饮用，既安全又含有大量大枣的营养活性成份，有益于身体。
综上所述，本发明成功地将酿酒酵母的发酵用在提取液的去糖以提高浓缩率方面，扩展了酵母菌发酵的新用途；其在最大程度保留大枣营养成分的前提下将环磷酸腺苷含量提高至1000-1300mg/L，制得的高浓度环磷酸腺苷提取液可以直接作为保健品饮用，而且制备方法工艺简单、安全。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作更进一步详细说明。
实施例一
实施例1.1
本实施例涉及一种制备高浓度大枣环磷酸腺苷提取液的方法，该方法具体操作步骤如下：
1.大枣预处理：用清水将大枣清洗干净，放入烘箱中烘干，烘箱温度控制在55℃，烘干时间为3小时。烘干后对大枣进行去核，切片，切片厚度为2-3毫米；
2.提取：称取大枣100g，添加软化水500ml，升温至65℃进行提取，提取时间为3小时，放出提取液，过滤；再加入软化水450ml，在65℃下提取2小时，过滤；第三次加软化水400ml浸提，提取时间为1小时，过滤。将前面三次提取液混合，得到提取液1200ml；
3.酶解：在混合提取液中加入果胶酶进行水解，果胶酶添加量为1‰，水解温度50℃，水解时间3小时，过滤后备用；
4.蒸发浓缩：将水解后的提取液蒸发浓缩，浓缩温度55℃，压力0.06MPa，得到提取浓缩液约400ml停止浓缩；
5.接种发酵：利用商用酿酒酵母进行发酵。首先将酵母菌进行活化，称取0.24g菌种，加入到8ml的4%蔗糖溶液中进行活化，活化温度40℃，活化时间30min。将活化后的酵母菌发酵液接种于400ml提取浓缩液中，并置于28℃条件下进行发酵，发酵时间为150小时。发酵液酒精度达到5度，残糖0.38g/100ml，停止发酵；
6.二次浓缩：将发酵液进一步浓缩，浓缩体积至20ml，发酵浓缩液中大枣环磷酸腺苷含量达到1275mg/L，得到高浓度大枣环磷酸腺苷提取液。
实施例1.2
本实施例同样涉及一种制备高浓度大枣环磷酸腺苷提取液的方法，该方法具体操作步骤如下：
1.大枣预处理：用清水将大枣清洗干净，放入烘箱中烘干，烘箱温度控制在45℃，烘干时间为5小时。烘干后对大枣进行去核，切片，切片厚度为2-3毫米；
2.提取：称取大枣100g，添加软化水500ml，升温至55℃进行提取，提取时间为3小时，放出提取液，过滤；再加入软化水400ml，在55℃下提取3小时，过滤；第三次加软化水450ml浸提，提取时间为3小时，过滤。将前面三次提取液混合，得到提取液1200ml；
3.酶解：在混合提取液中加入果胶酶进行水解，果胶酶添加量为1‰，水解温度50℃，水解时间3小时，过滤后备用；
4.蒸发浓缩：将水解后的提取液蒸发浓缩，浓缩温度50℃，压力0.09MPa，得到提取浓缩液约400ml停止浓缩；
5.接种发酵：利用商用酿酒酵母进行发酵。首先将酵母菌进行活化，称取0.24g菌种，加入到10ml的4%蔗糖溶液中进行活化，活化温度38℃，活化时间30min。将活化后的酵母菌发酵液接种于400ml提取浓缩液中，并置于28℃条件下进行发酵，发酵时间为120小时。发酵液酒精度达到5度，残糖0.36g/100ml，停止发酵；
6.二次浓缩：将发酵液进行进一步浓缩，浓缩体积至20ml，发酵浓缩液中大枣环磷酸腺苷含量达到1190mg/L，得到高浓度大枣环磷酸腺苷提取液。
实施例二
本实施例是基于如上实施例，通过采用不同酿酒酵母制备得到的高浓度大枣环磷酸腺苷提取液，与采用现有技术不经过发酵脱糖得到大枣环磷酸腺苷提取液进行对比，其比对结果如下：
通过对比结果显示，本发明制得的高浓度大枣环磷酸腺苷提取液与现有技术相比，极大提高了大枣环磷酸腺苷的含量。
实施例三：
本实施例是基于实施例一，对提取液果胶酶酶解和酶解液蒸发浓缩两步骤制得的高浓度环磷酸腺苷提取液，与不经过提取液果胶酶酶解和酶解液蒸发浓缩两步骤制得的高浓度环磷酸腺苷提取液进行对比，其比对结果如下：
由如上对比可知，在制备方法中设有提取液酶解和酶解液蒸发浓缩步骤会大大提高了提取液中环磷酸腺苷的含量。

Claims (8)

1.一种商用酿酒酵母的用途，其特征在于：其应用于发酵大枣环磷酸腺苷提取液，以制备大枣环磷酸腺苷浓缩液的方法中。
2.根据权利要求1所述的商用酿酒酵母的用途，其特征在于：所述商用酿酒酵母为葡萄酒酵母或啤酒酵母中的一种。
3.一种制备大枣环磷酸腺苷浓缩液的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
a、获取大枣环磷酸腺苷提取液；
b、在大枣环磷酸腺苷提取液中接种活化的商用酿酒酵母进行发酵，包括以下步骤：
b1、将商用酿酒酵母接种在4%蔗糖溶液中活化，活化温度为38-40℃，时间为25-30min；
b2、将活化的酿酒酵母菌液接种到提取液中进行发酵，在温度28-30℃下发酵120-150小时，至酒精浓度达到5-6度，残糖为0.3-0.5g/100mL；
c、将步骤b所得的发酵液蒸发浓缩，得到大枣环磷酸腺苷浓缩液。
4.根据权利要求3所述的制备大枣环磷酸腺苷浓缩液的方法，其特征在于：在步骤a和步骤b之间，设有向步骤a获取的大枣环磷酸腺苷提取液中加入果胶酶进行酶解、以及对酶解液进行蒸发浓缩的步骤。
5.根据权利要求4所述的制备大枣环磷酸腺苷浓缩液的方法，其特征在于：酶解液进行蒸发浓缩步骤中，酶解液蒸发浓缩至原体积的1/3，蒸发温度为55-65℃，压力为0.06-0.09MPa。
6.根据权利要求3所述的制备大枣环磷酸腺苷浓缩液的方法，其特征在于步骤a包括以下步骤：
a1、大枣预处理，将清洗干净的大枣烘干、去核、切片；
a2、制备提取液，用大枣重量4-5倍的软化水对大枣进行加热提取，反复提取三次，过滤，得到大枣环磷酸腺苷提取液。
7.一种大枣环磷酸腺苷浓缩液，其特征在于：其由权利要求3所述的制备大枣环磷酸腺苷浓缩液的方法制得。
8.根据权利要求7所述的大枣环磷酸腺苷浓缩液，其特征在于：所述的大枣环磷酸腺苷浓缩液中大枣环磷酸腺苷含量为1000-1300mg/L。
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