CN101812137B - 一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法 - Google Patents
一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101812137B CN101812137B CN200910216887.7A CN200910216887A CN101812137B CN 101812137 B CN101812137 B CN 101812137B CN 200910216887 A CN200910216887 A CN 200910216887A CN 101812137 B CN101812137 B CN 101812137B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- auricularia polysaccharide
- black fungus
- polysaccharide
- enriching
- absorption
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 80
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 80
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 80
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 49
- 239000011347 resin Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 229920005989 resin Polymers 0.000 title claims abstract description 38
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 title abstract description 14
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 10
- 241000221377 Auricularia Species 0.000 claims description 70
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 34
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 19
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 16
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 13
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 11
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 7
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 claims description 5
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 claims description 5
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 5
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 238000005325 percolation Methods 0.000 claims description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims 1
- 238000005554 pickling Methods 0.000 claims 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 abstract 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract 1
- 239000011265 semifinished product Substances 0.000 abstract 1
- 235000000023 Auricularia auricula Nutrition 0.000 description 4
- 241001149430 Auricularia auricula-judae Species 0.000 description 4
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 4
- DNVPQKQSNYMLRS-APGDWVJJSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-APGDWVJJSA-N 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002444 Exopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 2
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 2
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N 0.000 description 1
- CDVZCUKHEYPEQS-AZIZVCISSA-N (2r,3s,4s)-2,3,4,5-tetrahydroxypentanal Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O CDVZCUKHEYPEQS-AZIZVCISSA-N 0.000 description 1
- XDIYNQZUNSSENW-KZXKDKCNSA-N (2s,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-KZXKDKCNSA-N 0.000 description 1
- RAFAVNTVTXJMAQ-UHFFFAOYSA-N (3-hydroxyfuran-2-yl)-phenylmethanone Chemical compound OC1=C(OC=C1)C(C1=CC=CC=C1)=O RAFAVNTVTXJMAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 241000221454 Auriculariaceae Species 0.000 description 1
- 241000221452 Auriculariales Species 0.000 description 1
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 229920000832 Cutin Polymers 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 240000003537 Ficus benghalensis Species 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N L-Fucose Natural products C[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219492 Quercus Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 244000046101 Sophora japonica Species 0.000 description 1
- 235000010586 Sophora japonica Nutrition 0.000 description 1
- 240000007313 Tilia cordata Species 0.000 description 1
- 229930003471 Vitamin B2 Natural products 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000000489 anti-atherogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002790 anti-mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004223 radioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229930184724 ustilaginoidin Natural products 0.000 description 1
- 239000011716 vitamin B2 Substances 0.000 description 1
- 235000019164 vitamin B2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 229960003487 xylose Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Abstract
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法。其特点是：应用大孔吸附技术分离纯化木耳多糖，对木耳多糖的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量35％以上的木耳多糖半成品和含量98％以上的木耳多糖终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。本发明选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的大孔吸附树脂，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附木耳多糖，吸附快、解析也快，吸附容量较大。
Description
技术领域：
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种木耳多糖的纯化方法，特别是涉及一种利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法。
背景技术：
黑木耳：别名光木耳。真菌学分类属担子菌纲，木耳目，木耳科。东北，湖北，浙江，云南都有分布，是中国木耳的生产区，生长于栎、杨、榕、槐等120多种阔叶树的腐木上，单生或群生。目前人工培植以椴木的和袋料的为主。木耳子实体胶质，成圆盘形，耳形不规则形，直径3-12厘米。新鲜时软，干后成角质。口感细嫩，风味特殊，是一种营养丰富的著名食用菌。含糖类、蛋白质10.6克、脂肪0.2克、热量306焦、氨基酸、维生素和矿物质。有益气、充饥、轻身强智、止血止痛、补血活血等功效。富含多糖胶体，有良好的清滑作用，是矿山工人、纺织工人的重要保健食品。还具有一定的抗癌和治疗心血管疾病功能。黑木耳含木耳多糖。从子实体分离的一个多糖，相对分子质量为155000，由L-岩藻糖(fucose)，L-阿拉伯糖(L-arabinose)，D-木糖(D-xylose)，D-甘露糖(D-mannose)，D-葡萄糖(D-glucose)，葡萄糖醛酸(glucuronic acid)等组成，其摩尔比为.14∶0.045∶0.17∶1.00∶∶61∶∶44。菌丝体含外多糖(exopolysaccharide)。还含麦角甾醇(ergosterol)，原维生素D2(provitamin D2)，黑刺菌素(ustilaginoidin)。生长在棉子壳上的木耳含总氨基酸11.50％，蛋白质(protein)13.85％，脂质(lipid)0.60％，糖66.22％，纤维素1.68％，胡萝卜素(carotene)0.22mg/kg，维生素(vitamin)A1.76u/g，维生素B10.88mg/kg，维生素B211.4mg/kg及各种无机元素：钾1.98％，钠0.055％，钙0.28％，镁0.23％，铁0.0017％，铜6.3×10\-6，锌12×10\-6，锰26×10\-6，磷392mg等。
木耳多糖是一种对人类健康有显著保健作用的天然活性物质，已引起国际社会的普遍关注。经科学研究及临床应用证明，木耳多糖甲具有抗凝血活性、抗血小板聚集作用、抗血栓形成、提升白细胞作用、增强对免疫功能的促进作用、对核酸和蛋白生物合成促进作用、降血脂及抗动脉粥样硬化的作用、延缓衰老作用、抗辐射及抗炎作用、抗溃疡作用、降血糖作用、抗癌、抗突变作用。近年来，人们发现天然植物黑木耳中含有大量的木耳多糖，从中提取木耳多糖并且取得了可喜进展，由于其原料黑木耳原料来源较广。名称为“黑木耳提取木耳多糖的方法”的专利申请中便公开了将黑木耳切片、粉碎，经强电磁场萃取，用超速离心机分离提取液，除去蛋白质及其脂类物质，再用真空刮板式薄膜浓缩，用真空冻干机进行冷干，既得黑木耳冻干粉末。其分离效果远远不如大孔吸附树脂处理后在进行硅胶柱层析分离的效果。
发明内容：
本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其步骤如下：
(1)将干黑木耳粉碎后以料液比为1∶20～50的比例加热回流提取两次，每次1h；
(2)将经(1)处理的黑木耳提取液高速离心分离，分别收集上清液和滤渣，合并滤液，得初提物；
(3)将所收获初提物加适量的水，使混合液的重量达到原料干重的50倍，调节其PH值3.0～7.5，然后将上述滤渣加入混合液中，加热至40～60℃，加入果胶酶(100万u/ml)1.0～2.0％，混匀后保持酶解0.5～3h。冷却至室温，静置、过滤、弃去滤渣，减压浓缩滤液得木耳多糖粗提物；
(4)将所得木耳多糖粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；
(5)用不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(6)将木耳多糖各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得木耳多糖半成品，其含量为40％以上；
(7)将所得木耳多糖半成品上硅胶层析柱，并以正丁醇、氯仿以不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(8)将所收集的木耳多糖洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得木耳多糖，其含量在98％以上。
所述的步骤(1)中，黑木耳粉碎后过10～80目筛在进行加热回流提取。
在所述的步骤(1)中，用水加热提取时间为4～48小时。
所述的步骤(1)中，加热回流提取的方法为浸泡法、回流提取法、渗漉法、煎煮法、连续提取法中的一种或一种以上。
所述的步骤(1)中，加入纯化水的体积为黑木耳粉碎体积的20～50倍。
在所述的(3)中，加入纯化水的量按体积计算为提取物水溶液的50倍，调节PH值所用的酸为盐酸。
步骤(4)中所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X-5、NKA-9、S-8、D3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-II型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态吸附。
步骤(5)中所述的洗脱为用70～90％的乙醇进行洗脱。
在步骤(5)和(7)中，所采取的检测方法均为薄层色谱法跟踪检测。
步骤(7)中所采取的氯仿与正丁醇的体积为3～7∶1。
本发明应用大孔吸附技术分离纯化木耳多糖，对五木耳多糖的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量40％以上的木耳多糖半成品和含量98％以上的木耳多糖终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。
本发明选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的大孔吸附树脂，不容于酸、碱及有机媒，对有机物选择性较好，不受无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附木耳多糖，吸附快、解析也快，吸附容量较大。
具体实施方式：
实施例1：一种利用大孔吸附树脂富集纯化五味子中五味子醇甲的方法，其步骤如下：
(1)将干黑木耳粉碎后过60目筛，以料液比为1∶20的比例加热回流提取两次，每次1h；
(2)将经(1)处理的黑木耳提取液高速离心分离，分别收集上清液和滤渣，合并滤液，得初提物；
(3)将所收获初提物加适量的水，使混合液的重量达到原料干重的50倍，调节其PH值3.0，然后将上述滤渣加入混合液中，加热至40℃，加入果胶酶(100万u/ml)1.0％，混匀后保持酶解3h。冷却至室温，静置、过滤、弃去滤渣，减压浓缩滤液得木耳多糖粗提物；
(4)将所得木耳多糖粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南开大学所生产的NKA-II型树脂；
(5)用70％、80％、90％的乙醇在大孔吸附树脂层柱中依次进行梯度洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(6)将木耳多糖各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得到含量为40％以上木耳多糖半成品；
(7)将所得木耳多糖半成品上硅胶层析柱，并用氯仿、正丁醇依次以3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(8)将所收集的木耳多糖洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量98％以上木耳多糖。
实施案例2：一种利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其步骤如下：
(1)将干黑木耳粉碎后过10目筛，以料液比为1∶30的比例加热回流提取两次，每次1h；
(2)将经(1)处理的黑木耳提取液高速离心分离，分别收集上清液和滤渣，合并滤液，得初提物；
(3)将所收获初提物加适量的水，使混合液的重量达到原料干重的50倍，调节其PH值5.0，然后将上述滤渣加入混合液中，加热至50℃，加入果胶酶(100万u/ml)1.5％，混匀后保持酶解3h。冷却至室温，静置、过滤、弃去滤渣，减压浓缩滤液得木耳多糖粗提物；
(4)将所得木耳多糖粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南开大学所生产的D4006型树脂；
(5)用70％、80％、90％的乙醇在大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(6)将木耳多糖各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得到含量50％以上木耳多糖半成品；
(7)将所得木耳多糖半成品上硅胶层析柱，并用氯仿、正丁醇依次以3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(8)将所收集的木耳多糖洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量98％以上木耳多糖。
实施案例3：一种利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其步骤如下：
(1)将干黑木耳粉碎后过80目筛，以料液比为1∶20～50的比例加热回流提取两次，每次1h；
(2)将经(1)处理的黑木耳提取液高速离心分离，分别收集上清液和滤渣，合并滤液，得初提物；
(3)将所收获初提物加适量的水，使混合液的重量达到原料干重的50倍，调节其PH值7.5，然后将上述滤渣加入混合液中，加热至60℃，加入果胶酶(100万u/ml)2.0％，混匀后保持酶解3h。冷却至室温，静置、过滤、弃去滤渣，减压浓缩滤液得木耳多糖粗提物；
(4)将所得木耳多糖粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南开大学所生产的NKA-9型树脂；
(5)用70％、80％、90％的乙醇在大孔吸附树脂层析柱子中依次进行梯度洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(6)将木耳多糖各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得到含量40％以上木耳多糖半成品；
(7)将所得木耳多糖半成品上硅胶层析柱，并用氯仿、正丁醇依次以3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
(8)将所收集的木耳多糖洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量98％以上木耳多糖。
Claims (8)
1.一种利用大孔吸附树脂分离富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征在于，其步骤如下：
（1）将干黑木耳粉碎后以料液比为1：20～50的比例经浸渍法、回流提取法、渗漉法、煎煮法中的一种或一种以上的方法提取两次，每次1h；
（2）将经（1）处理的黑木耳提取液高速离心分离，分别收集上清液和滤渣，合并滤液，得初提物；
（3）将所收获初提物加适量的水，使混合液的重量达到原料干重的50倍，调节其PH值3.0～7.5，然后将上述滤渣加入混合液中，加热至40～60℃，加入果胶酶（100万u/ml）1.0～2.0%，混匀后保持酶解0.5～3h；冷却至室温，静置、过滤、弃去滤渣，减压浓缩滤液得木耳多糖粗提物；
（4）将所得木耳多糖粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；
（5）用不同浓度乙醇水溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，收集木耳多糖洗脱液；
（6）将木耳多糖洗脱液浓缩回收洗脱剂，得木耳多糖半成品；
（7）将所得木耳多糖半成品上硅胶层析柱，并以正丁醇、氯仿以不同体积比进行洗脱，收集木耳多糖各阶段洗脱液；
（8）将所收集到的木耳多糖洗脱液进行精制得木耳多糖。
2.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：所述的步骤（1）中，黑木耳粉碎后过10～80目筛再进行加热回流提取。
3.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：所述的步骤（1）中，加入水的体积为黑木耳粉体积的20～50倍。
4.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：所述的步骤（3）中，加适量的水，使混合液的重量达到原料干重的50倍，调节PH值所用的酸为盐酸。
5.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：所述步骤（4）中吸附为静态吸附或动态吸附；所述步骤（5）中的洗脱为用70～90%的乙醇水溶液进行洗脱。
6.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：在步骤（5）和（7）中洗脱过程中采用薄层色谱法跟踪检测。
7.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：步骤（7）中所采用氯仿与正丁醇的体积比为3～7：1。
8.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法，其特征是：在步骤（8）中采用活性炭脱色、重结晶方法进行精制。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910216887.7A CN101812137B (zh) | 2009-12-28 | 2009-12-28 | 一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910216887.7A CN101812137B (zh) | 2009-12-28 | 2009-12-28 | 一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101812137A CN101812137A (zh) | 2010-08-25 |
| CN101812137B true CN101812137B (zh) | 2014-02-19 |
Family
ID=42619513
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200910216887.7A Expired - Fee Related CN101812137B (zh) | 2009-12-28 | 2009-12-28 | 一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101812137B (zh) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101967202A (zh) * | 2010-09-15 | 2011-02-09 | 哈尔滨工业大学（威海） | 药用真菌高抗肿瘤活性多糖的生产方法 |
| CN102090619B (zh) * | 2010-12-03 | 2013-08-28 | 吴惠玲 | 一种预煮双孢蘑菇水浓缩液的生产方法 |
| CN103030708B (zh) * | 2012-12-13 | 2016-04-13 | 大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司 | 一种枸杞多糖的纯化新方法 |
| CN103030709B (zh) * | 2012-12-13 | 2016-02-17 | 大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司 | 一种从柳蒿芽中制备多糖的方法 |
| CN106749724A (zh) * | 2016-12-09 | 2017-05-31 | 昭平县科学技术指导站 | 一种提取木耳多糖的方法 |
| CN108727508A (zh) * | 2018-04-27 | 2018-11-02 | 镇远县苗岭山珍有限公司 | 一种提取木耳多糖的方法 |
| CN110467684A (zh) * | 2018-05-11 | 2019-11-19 | 东北林业大学 | 一种阳离子大孔树脂精制黑木耳多糖的方法 |
| CN110156908A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-08-23 | 大连卓兴科技发展有限公司 | 一种黑木耳多糖的提取方法 |
| CN114031694B (zh) * | 2021-12-23 | 2023-02-03 | 云南三七科技有限公司 | 一种三七多糖的提取方法 |
| CN115093921A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-09-23 | 江西樟树市庆仁保健品有限公司 | 一种用于保健酒的中药提取物的制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1580079A (zh) * | 2004-05-21 | 2005-02-16 | 大连轻工业学院 | 一种木耳多糖的提取方法 |
| CN101514234A (zh) * | 2009-03-09 | 2009-08-26 | 王振宇 | 一种黑木耳多糖提取方法 |
-
2009
- 2009-12-28 CN CN200910216887.7A patent/CN101812137B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1580079A (zh) * | 2004-05-21 | 2005-02-16 | 大连轻工业学院 | 一种木耳多糖的提取方法 |
| CN101514234A (zh) * | 2009-03-09 | 2009-08-26 | 王振宇 | 一种黑木耳多糖提取方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 丁黎.木耳多糖的分离及其组成单糖的分析.《特产研究》.1994,(第1期), |
| 木耳多糖的分离及其组成单糖的分析;丁黎;《特产研究》;19941231(第1期);44-45 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101812137A (zh) | 2010-08-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101812137B (zh) | 一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法 | |
| CN101255200B (zh) | 以大蒜为原料生产大蒜多糖和蒜氨酸酶的生产工艺 | |
| CN101508690B (zh) | 一种从茶叶中同时提取茶多酚、茶多糖、咖啡因的新方法 | |
| CN102078339B (zh) | 一种富集纯化桑黄中桑黄总黄酮的方法 | |
| CN106349398A (zh) | 一种菊苣菊粉的提取方法 | |
| CN103497258A (zh) | 小麦麸皮活性多糖的提取纯化方法 | |
| CN103044441B (zh) | 一种从银杏叶中提取银杏内酯的方法 | |
| CN102093328B (zh) | 一种富集纯化松树皮中原花青素的方法 | |
| CN102086235B (zh) | 3种葵花籽多糖及葵花籽水溶性多糖的提取、分离纯化方法 | |
| CN102060693A (zh) | 一种富集纯化升麻中阿魏酸的方法 | |
| JP3806693B2 (ja) | 大豆加工副産物からピニトールを高収率で回収する方法 | |
| CN106544374A (zh) | 一种从桦树桑黄提取桑黄素的新方法 | |
| CN102070685A (zh) | 一种富集纯化牛蒡中牛蒡苷的方法 | |
| CN109942428A (zh) | 一种复合酶催化活化桑叶提制高纯度绿原酸的方法 | |
| CN102532219A (zh) | 一种富集纯化蓝靛果忍冬中花色苷的方法 | |
| CN101117641B (zh) | 开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的制备方法 | |
| CN101463052B (zh) | 一种龙眼果皮低聚糖的制备方法 | |
| CN102690359A (zh) | 一种从罗汉果块根中提取淀粉和葫芦素的方法 | |
| CN102649823B (zh) | 一种径向流耦合超滤分离制备铜藻多糖的方法 | |
| CN101732391B (zh) | 一种富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法 | |
| CN102093437B (zh) | 一种富集纯化菊苣中低聚果糖的方法 | |
| CN102719485B (zh) | 一种利用罗汉果块根中淀粉转化乙醇的方法 | |
| CN101642466B (zh) | 一种含鹿茸多糖具有降血脂功能的组合物制备方法 | |
| CN107927800A (zh) | 一种菠萝蜜果皮膳食纤维的提取方法及饼干 | |
| CN111549083B (zh) | 侧耳木霉菌株zj-03在工业大麻精深加工中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20170327 Address after: 161000 Longhua Road, Qigihar city of Heilongjiang Province, Tiefeng District No. 92 Patentee after: Heilongjiang Dinghengsheng Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 165012 Heilongjiang area of Greater Khingan Range province green Songling District Road No. 1 Patentee before: DAXINGANLING KORALLE BIO-TECH Co.,Ltd. |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140219 |