CN110156908A - 一种黑木耳多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种黑木耳多糖的提取方法，以黑木耳干品为原料，粉碎后浸泡在水中，超声处理；然后使用由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶组成的复合酶进行酶解；对酶解所得混合物加热灭酶，再加入乙醇进行醇沉，离心所得沉淀即为黑木耳多糖。使用本发明的方法提取黑木耳多糖，提取率为8％～10％。采用纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶三种酶进行复合提取黑木耳多糖具有反应条件温和、效率高、杂质易除、工艺简便等许多优点，本方法提取的黑木耳多糖无化学残留，更加绿色健康。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种黑木耳多糖的提取方法。
背景技术
黑木耳(Auricularia auricula)，又名黑菜，桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸，因形似耳，加之其颜色黑褐色而得名，属黑木耳目、木耳科、木耳属、黑木耳种，黑木耳是一种营养丰富的食用菌。主要分布于我国黑龙江、吉林、福建、台湾、湖北、广东、广西、四川、贵州、云南等地。
黑木耳色泽黑褐，质地柔软，味道鲜美，营养丰富，可素可荤，不但为中国菜肴大添风采，而且能养血驻颜，令人肌肤红润，容光焕发，并可防治缺铁性贫血及其他药用功效。
黑木耳是难得的天然保健品，主要有多种医药保健价值：降血脂、降血压、补铁、抗癌防癌、提高机体免疫力、排毒、养颜、通便、乌发、美容，维生素E含量非常高，是肌肤美白佳品，抗电磁辐射，抗放射线，预防雀斑形成，黑木耳抗放射作用较好，能对抗由环磷酰胺引起的白细胞降低，是常坐电脑前的白领阶层美容第一选择。
黑木耳多糖是黑木耳主要的功效成分之一，具有多种保健功能。不仅可以降血糖、降血脂、抗血栓形成、提高机体免疫功能、对组织损伤具有保护、改善心肌缺氧、抗溃疡作用、抗放射作用，还具有抗衰老作用。
随着科学技术的飞速发展，人民生活水平的不断提高，人们对食品、保健品、化妆品的要求越来越高，黑木耳多糖的添加，必将使各类产品受到广大消费者青睐。
现有黑木耳多糖的提取方法，工艺繁琐，提取率低，有化学物质残留，不利于黑木耳多糖的大规模生产和应用。
发明内容
本发明的目的是提供一种黑木耳多糖的提取方法。
一种黑木耳多糖的提取方法，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径200～300目；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在水中，超声波处理，所述超声波处理条件为400～500W，75～85℃，2～3h，得混合物A；
S3、酶解：将步骤S2所述混合物A的pH调至5.2～5.8，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，35～45℃酶解1～2h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的1.5％～2％(m/v，g/ml)；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶40％～50％、果胶酶30％～40％、木瓜蛋白酶20％～30％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C加热灭酶，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其2～4倍体积的无水乙醇，0～5℃静置8～10h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E离心，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A离心，取沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
优选方式下，步骤S1所述黑木耳颗粒和水的重量比为：1:10。
优选方式下，步骤S4所述加热灭酶为：将步骤S3所述混合物C置于80～90℃加热1～2h。
优选方式下，步骤S6所述一次离心的参数为：5000～10000r/min，离心20～30min。
优选方式下，步骤S7所述二次离心的参数为：5000～10000r/min，离心20～30min。
优选方式下，所述黑木耳多糖的提取方法，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径300目；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在其10倍重量的水中，超声波处理，所述超声波处理条件为500W，80℃，3h，得混合物A；
S3、酶解：用稀盐酸将步骤S2所述混合物A的pH调至5.8，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，45℃酶解2h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的2％(m/v，g/ml)；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶50％、果胶酶30％、木瓜蛋白酶20％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C置于90℃加热2h，灭酶处理，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其3倍体积的无水乙醇，5℃静置10h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E 10000r/min，离心30min，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A10000r/min，离心30min，取沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
本发明的有益效果是：
使用本发明的方法提取黑木耳多糖，提取率为8％～10％。采用纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶三种酶进行复合提取黑木耳多糖具有反应条件温和、效率高、杂质易除、工艺简便等许多优点，本方法提取的黑木耳多糖无化学残留，更加绿色健康，有利于进一步的应用。
具体实施方式
下面通过具体实施实例对本发明做进一步说明。
1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径200～300目。
2、超声波处理：将粉碎后的黑木耳干品按照1:10的质量比浸泡在水中，超声波处理条件为400～500W，80±5℃，2～3h。
3、酶解：用1mol/l的稀盐酸调节溶液pH值，使pH达到5.5±0.3。加入2％复合酶(m：v)。复合酶包含(纤维素酶：果胶酶：木瓜蛋白酶＝4:3:2(m：m)，酶解条件为40±5℃，1～2h。
4、灭酶：对酶解液进行灭酶处理，处理条件为85±5℃，1～2h。
5、乙醇处理：用无水乙醇对灭酶后的溶液进行处理，无水乙醇体积为灭酶后溶液的三倍，0～5℃，8～10h。
6、离心：对乙醇处理后的原液进行离心处理。转速5000～10000r/min，时间20～30min，收集沉淀。
7、再离心：对取出沉淀后的上清液再次进行离心处理，转速5000～10000r/min，时间20～30min，收集沉淀。
多糖提取8～10％
如无特殊说明，下述实施例使用的酶购于：南宁庞博生物工程有限公司；使用的黑木耳为大连卓兴科技发展有限公司生产的含水量约为13％的干木耳
实施例1：
一种黑木耳多糖的提取方法，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径200目；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在其10倍重量的水中，超声波处理，所述超声波处理条件为400W，75℃，2h，得混合物A；
S3、酶解：用稀盐酸将步骤S2所述混合物A的pH调至5.2，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，35℃酶解1h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的1.5％(m/v，g/ml)；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶40％、果胶酶30％、木瓜蛋白酶30％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C置于80℃加热1h，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其3倍体积的无水乙醇，0℃静置8h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E 5000r/min，离心20min，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A5000r/min，离心20min，沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
本实施例中所使用的黑木耳干品中多糖含量为64.9g/100g(GBT15672-2009)，步骤S1使用黑木耳干品10g，步骤S7所述沉淀中黑木耳多糖根据苯酚硫酸法测得，其中共含有多糖0.54g，因此本实施例多糖的提取率为0.54×10/64.9＝8.3％
实施例2：
一种黑木耳多糖的提取方法，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径300目；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在其10倍重量的水中，超声波处理，所述超声波处理条件为500W，80℃，3h，得混合物A；
S3、酶解：用稀盐酸将步骤S2所述混合物A的pH调至5.8，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，45℃酶解2h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的2％(m/v，g/ml)；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶50％、果胶酶30％、木瓜蛋白酶20％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C置于90℃加热2h，灭酶处理，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其3倍体积的无水乙醇，5℃静置10h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E 10000r/min，离心30min，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A10000r/min，离心30min，取沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
本实施例中所使用的黑木耳干品中多糖含量为64.9g/100g(GBT15672-2009)，步骤S1使用黑木耳干品10g，步骤S7所述沉淀中黑木耳多糖根据苯酚硫酸法测得，其中共含有多糖0.62g，因此本实施例多糖的提取率为0.62×10/64.9＝9.6％
实施例3：
一种黑木耳多糖的提取方法，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径250目；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在水中，超声波处理，所述超声波处理条件为450W，85℃，2.5h，得混合物A；
S3、酶解：用稀盐酸将步骤S2所述混合物A的pH调至5.5，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，40℃酶解1.5h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的2％(m/v，g/ml)；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶45％、果胶酶30％、木瓜蛋白酶25％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C置于85℃加热1.5h，灭酶处理，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其3倍体积的无水乙醇，4℃静置9h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E 8000r/min，离心25min，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A8000r/min，离心25min，取沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
本实施例中所使用的黑木耳干品中多糖含量为64.9g/100g(GBT15672-2009)，步骤S1使用黑木耳干品10g，步骤S7所述沉淀中黑木耳多糖根据苯酚硫酸法测得，其中共含有多糖0.59g，因此本实施例多糖的提取率为0.59×10/64.9＝9.1％
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到黑木耳颗粒，粒径200～300目；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在水中，超声波处理，所述超声波处理条件为400～500W，75～85℃，2～3h，得混合物A；
S3、酶解：将步骤S2所述混合物A的pH调至5.2～5.8，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，35～45℃酶解1～2h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的1.5％～2％g/ml；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶40％～50％、果胶酶30％～40％、木瓜蛋白酶20％～30％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C加热灭酶，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其2～4倍体积的无水乙醇，0～5℃静置8～10h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E离心，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A离心，取沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
2.根据权利要求1所述黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，步骤S1所述黑木耳颗粒和水的重量比为1:10。
3.根据权利要求1所述黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，步骤S4所述加热灭酶为：将步骤S3所述混合物C置于80～90℃加热1～2h。
4.根据权利要求1所述黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，步骤S6所述一次离心的参数为：5000～10000r/min，离心20～30min。
5.根据权利要求1所述黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，步骤S7所述二次离心的参数为：5000～10000r/min，离心20～30min。
6.根据权利要求1所述黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，包括步骤：
S1、粉碎：对黑木耳干品进行粉碎，得到粒径300目的黑木耳颗粒；
S2、超声波处理：将步骤S1所述黑木耳颗粒浸泡在其10倍重量的水中，超声波处理，所述超声波处理条件为500W，80℃，3h，得混合物A；
S3、酶解：用稀盐酸将步骤S2所述混合物A的pH调至5.8，得混合物B；向所述混合物B中加入复合酶，45℃酶解2h，得混合物C；其中，所述复合酶的添加重量为所述混合物B体积的2％g/ml；所述复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按下述重量百分含量混合而成，纤维素酶50％、果胶酶30％、木瓜蛋白酶20％；所述纤维素酶2万U/g、果胶酶5万U/g、木瓜蛋白酶10万U/g；
S4、灭酶：将步骤S3所述混合物C置于90℃加热2h，得混合物D；
S5、乙醇处理：向步骤S4所述混合物D中加入其3倍体积的无水乙醇，5℃静置10h，得混合物E；
S6、一次离心：将步骤S5所述混合物E 10000r/min，离心30min，得沉淀A和上清液A；
S7、二次离心：将步骤S6所述上清液A 10000r/min，离心30min，取沉淀B；所述沉淀A和沉淀B即为黑木耳多糖。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190823 |
|
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