CN101750487A - 干法光激化学发光免疫检测试剂盒及其制备与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及免疫检测试剂盒,公开了一种干法光激化学发光免疫检测试剂盒及其制备和应用。本发明的干法光激化学发光免疫检测试剂盒,包括固定有干燥的检测微粒和干燥的生物素标记的抗原或抗体的反应容器,其中,检测微粒为包被抗原或抗体的发光微粒。本发明的试剂盒可用于待测抗原或抗体的定量或定性检测。
Description
技术领域
本发明涉及免疫检测试剂盒,具体涉及干法光激化学发光免疫检测试剂盒、其制备及其使用方法。
背景技术
光激化学发光技术是一种以高分子微粒为基础的化学发光技术,它可以通过感光微粒和发光微粒在一定距离范围内结合,产生离子氧能量传递,发出光信号,从而对待测样品进行检测。感光微粒是填充有感光化合物的高分子微粒,发光微粒是填充有发光化合物和镧系元素的高分子微粒。光激化学发光技术的核心原理是能量的近距离转移,转移的介质是高能态的离子氧。当红色激光照射感光微粒后,释放单线态氧离子(4μs),其传播距离为200nm左右,只有当感光微粒和发光微粒的距离足够接近的情况下,感光微粒释放的单线态氧离子才能到达发光微粒,从而产生一系列化学反应,发射出520~620nm高能级的光,由于反应体系中,微粒的浓度很低,碰撞几率非常小,因此本底信号微弱,只有感光微粒和发光微粒通过免疫反应结合以后,才会发射出明显的光,因此系统灵敏度很高。相对于传统的酶联免疫分析方法,它具有均相(免冲洗)、灵敏度高和操作简便等特点,并且易于实现自动化,因此其应用前景十分广阔,具体见《光激化学发光免疫检测方法》(申请号:200810036596.5)。
现有的公开出版物中,关于上述技术的应用,微粒及相关试剂均在液态条件下保存及运输,在检测操作过程中,需要手动或者采用自动加样平台将相关试剂逐个加入反应器皿,操作过程较为繁琐,有多个加样步骤,需要专业人员进行相关操作。
而本发明将发光微粒和试剂直接干燥在反应容器中,易于保存运输,并能有效的延长其有效期,检验操作简便快捷。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型的干法光激化学发光免疫检测试剂盒及其使用方法。
本发明的原理:
基于光激化学发光技术原理,在发光微粒表面包被相应检测项目的抗原、抗体或者核酸等具有生物活性的物质,用生物素标记另一配对的抗原、抗体或者核酸等生物活性分子,利用这两种试剂与待测样品形成夹心或者竞争,然后与包被了抗生物素的感光微粒反应,通过光激化学发光机制,对产生光信号的强弱进行评价,从而实现对待测样品的定量检测。
一般的光激化学发光试剂均为液态,常规的反应模式为在反应杯中依次加入待测样品、包被抗体(抗原)的发光微粒,生物素标记的抗体(抗原)等(个别竞争反应要加入中和抗原或抗体),进行第一步温育反应,然后加入抗生物素包被的感光微粒,进行第二步温育,读取光子信号,根据标准曲线等计算待测样品浓度,直接得到样品的定量检测结果。
本发明将免疫发光微粒、生物素标记抗体等(个别竞争反应包括中和抗原或抗体)试剂干燥固定在反应杯的底部,然后封装,反应杯或与其连接支架上可以印上项目名称编号、条形码或点码等,便于识别和实现仪器的自动化。样品测试时去除封口,将待测样品加入反应杯,直接放入检测仪器,进行第一步温育反应,然后加入抗生物素包被的感光微粒,进行第二步温育,读取光子信号,根据标准曲线计算待测样品浓度,直接得到样品的定量检测结果。
本发明一方面提供了一种干法光激化学发光免疫检测试剂盒,包括固定有干燥的检测微粒和干燥的生物素标记的抗原或抗体的反应容器,其中,检测微粒为包被抗原或抗体的发光微粒。
上述抗原及抗体可以是各种已知的抗原或抗体。由本发明的原理可知,如被检测对象为抗原,则反应容器上应当相应固定有包被该抗原的抗体的发光微粒和生物素标记的该抗原的抗体。如被检测对象为抗体,则反应容器上应当固定有包被该抗体的抗原的发光微粒和生物素标记的该抗体的抗原。
较佳的,上述反应容器为反应杯。
较佳的,上述反应杯的底部设有1个以上隔断,较佳的隔断为1-5个。
较佳的,上述反应杯还设有支架。支架可起到操作人员握持方便、仪器准确定位、条码扫描记录样品编号及相关信息等作用。
较佳的,上述干法光激化学发光免疫检测试剂盒中的反应容器密封包装。
上述干法光激化学发光免疫检测试剂盒中,固定有干燥检测微粒的反应容器为在反应容器上点入包被抗原或抗体的发光微粒溶液和生物素标记的抗原或抗体溶液后干燥获得,包被抗原或抗体的发光微粒溶液或生物素标记的抗体溶液的溶剂为缓冲液,缓冲液可以选自HEPES、MES或Tris等,pH为6.0-9.0,且缓冲液中含有多糖,如海藻糖、蔗糖、果糖等,多糖占溶液重量百分比为3%-7%。研究发现,多糖在缓冲液中有十分重要的作用,在试剂干燥过程中起到了支撑定型作用,避免试剂分子间由于干燥脱水形成不可逆的结合而无法迅速复溶。进一步的缓冲液中还可包括表面活性剂(如Triton X-100、Triton X-405、Tween20等)、抗生素(如庆大霉素、链霉素等)、防腐剂及封闭剂等,还可包括其他促进免疫反应的物质。
上述发光微粒是指填充有发光化合物和镧系元素化合物的高分子微粒。发光化合物可以是Dioxene(二氧杂环己烯)或thioxene(二甲基噻吩)的衍生物等,镧系元素化合物可以是Eu(TTA)3/TOPO或Eu(TTA)3/Phen等,发光微粒表面通过共价连接有针对特定抗原或抗体的抗体或抗原等。
本发明的干法光激化学发光免疫检测试剂盒中,除了反应容器外,当然还可包括其他辅助检测的小型工具或独立包装的亲和素包被的感光微粒溶液等。
本发明第二方面,公开了一种制备上述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的方法,包括下列步骤:
1.配制包被有抗原或抗体的发光微粒溶液:用适当缓冲液将包被有抗原或抗体的发光微粒稀释到工作浓度。
上述适当的缓冲液可以选自HEPES、MES或Tris等,pH为6.0-9.0,且缓冲液中含有多糖,如海藻糖、蔗糖、果糖等,较佳的,多糖占溶液重量百分比为3%-7%。多糖在缓冲液中有十分重要的作用,在试剂干燥过程中起到了支撑定型作用,避免试剂分子间由于干燥脱水形成不可逆的结合而无法迅速复溶。进一步的缓冲液中还可包括表面活性剂(如Triton X-100、Triton X-405、Tween 20等)、抗生素(如庆大霉素、链霉素等)、防腐剂、多糖及封闭剂等,还可包括其他促进免疫反应的物质。
2.配制生物素标记抗原或抗体溶液:用适当缓冲液将生物素标记抗原或抗体稀释到工作浓度。
上述适当的缓冲液可以选自HEPES、MES或Tris等,pH为6.0-9.0,,且缓冲液中含有占溶液重量百分比3%-7%的多糖,如海藻糖、蔗糖、果糖。进一步的缓冲液中还可包括表面活性剂(如Triton X-100、Triton X-405、Tween 20等)、抗生素(如庆大霉素、链霉素等)、防腐剂、多糖及封闭剂等,还可包括其他促进免疫反应的物质。
3.反应容器上试剂点样;根据试验需要在样品杯中采用自动点样仪器或手工点入一定量(点样量根据仪器的精度以及操作方便性确定,以便于生产为准)的生物素标记抗原或抗体以及包被有抗原或抗体的发光微粒溶液。
4.干燥:采用冻干或烘干的方式将上述点有试剂的样品杯进行干燥。为了更好的保持试剂的生物活性及更易于复溶,优选采用冻干方式进行干燥。
本发明第三方面提供了上述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的使用方法,包括将样品加在反应容器上。进行第一步37摄氏度温育反应,然后加入亲和素包被的感光微粒,进行第二步37摄氏度温育,激发光照射后检测光子信号。
上述感光微粒是填充有感光化合物的高分子微粒。在670~690nm光激发下,可以产生单线态氧离子,当其与发光微粒距离足够近的情况下,单线氧离子传递到发光微粒,与发光微粒中的发光化合物反应,产生紫外光,紫外光再进一步激发镧系元素化合物,产生520~620nm波长光子。感光化合物可以是酞菁染料等。感光微粒表面通过共价连接有亲和素或者链霉亲和素,可以与标记有生物素的抗体结合。
激发光的光源波长范围为600-700nm。
本发明的方法将待测样品中的抗原抗体信息转化成了另一种更为直观的中间信息即光子信号信息,利用该方法,经过一系列的研究工作,可获得光子信号与待测抗原或抗体浓度之间的对应关系,进而作出标准曲线,再通过对光子信号与标准曲线的比对或者与阴阳性参考光子信号的比较检测,最终获得待测抗原或抗体的定量或定性检测结果。
本发明将针对不同项目的特异性试剂以干燥固体形式存放于反应杯中,仪器只进行缓冲液和通用试剂(抗生物素包被的感光微粒)的加入,一方面干式试剂可以有效的延长试剂盒的有效期,另一方面有效的减少了操作人员的操作步骤,如果需要同时检测多个项目,采用液态的模式,就需要针对不同的检测项目加入不同的试剂,操作人员在操作过程中需要同时处理多种试剂,手工操作将比较繁琐,也容易出错,如果采用仪器加样,则需要配备自动加样工作站,而且需要较为复杂的加样参数设置;而采用本发明,操作人员只需要将样品加入相应项目的试剂杯中即可,仪器可以通过扫描条码等信息自动设定试验参数,得到试验结果,因此说,本发明的试剂盒不仅便于保藏和运输,且灵敏度高,适合待测抗原或抗体的定量或定性检测,也便于多个项目的同时检测。
附图说明
图1:双抗体夹心法检测模式
A:包被有亲和素的感光微粒
B:生物素标记抗体
C:待测抗原
D:包被有抗体的发光微粒
F:发光免疫复合体
图2:干式试剂样品杯
A:样品杯容器部分剖面图,在样品杯的底部有一个小的隔断,这样就可以将不同试剂分别固定在样品杯底部而不会产生反应和非特异性吸附等,如果部分检测项目有三个或三个以上试剂需要提前固定在试剂杯底部,那么样品杯底部的隔断也可以相应增加,起到分隔试剂的效果。
B:样品杯全图(包括外部支架),样品杯与支架可以分别为两个独立的组件,也可以是一个整体,B图中为整体设计,支架起到操作人员握持方便、仪器准确定位、条码扫描记录样品编号及相关信息等作用。
具体实施方式
以下通过具体实施例对本发明进行进一步的阐述,但实施例并非限定本发明的保护范围。
实施例1:质控微粒的信号检测
(1)质控微粒的制备:
a.生物素标记的γ-球蛋白(BGG)的制备
用0.1M NaHCO3将BGG(购自Pel-Freez Biological)配制成1mg/ml溶液,采用DMSO(二甲基甲酰胺)配置Biotin-X-X-NHS(N-羟基琥珀酰亚胺修饰生物素,生产商:SIGMA,产品号:B3295)溶液至16.172mg/ml,取5.4ul Biotin-X-X-NHS至1mg BGG溶液中,混合均匀并在4℃下放置过夜。采用100mM磷酸缓冲液(pH 7.0)透析纯化蛋白。
b.采用上述标记蛋白包被醛基修饰的发光微粒
在1mg醛基修饰的发光微粒(美国PentaTek公司)中加入12.5μl 1%Tween-20,0.05mg上述步骤1获得的透析纯化的蛋白以及10μl的NaCNBH3(25mg/ml),加0.1M pH6.0 MES至总体积为200μl,37℃避光孵育48h。加入10μl的0.3M CMO溶液,37℃避光孵育1h。加190μl pH8.0的Tris溶液。4℃ 13000g离心30分钟。弃上清,用1ml pH8.0的Tris溶液再洗一次。用200μl pH8.0的Tris溶液悬浮(其终浓度为5mg/ml)。
c.质控微粒工作液配制
采用pH8.0的Tris溶液将b中悬液稀释到5mg/ml。
(2)质控微粒溶液的配置:采用pH8.0的Tris溶液(含5%的海藻糖)将上述终浓度为5mg/ml的悬液稀释到20ng/ml,200ng/ml,2ug/ml,20ug/ml,40ug/ml五个浓度。
(3)点样:用10ul移液器,将稀释后的20ng/ml,200ng/ml,2ug/ml,20ug/ml,40ug/ml五个浓度的质控微粒10ul分别加入到样品杯中,每个浓度点10孔。
(4)干燥:将点有试剂的反应杯放入冻干机中进行预冻,待试剂完全冻结后进行冷冻真空干燥。真空干燥结束后取出反应杯,并用袋中装有干燥剂的密封袋密封。
(5)感光微粒的配制:感光微粒:采用粒径为220±40nm的感光微粒(美国PentaTek公司)
制备方法:
a、感光微粒混悬液处理:吸取一定量的感光微粒于高速冷冻离心机中离心,弃去上清,加入一定量MES缓冲液,超声细胞破碎仪上超声至微粒重新悬浮,加入MES缓冲液调节感光微粒浓度至100mg/ml。
b、亲和素溶液配制:称量一定量Avidin,加MES缓冲液溶解至8mg/ml。
c、混合:将处理好的感光微粒混悬液、8mg/ml的Avidin以及MES缓冲液,以2∶5∶1的体积比进行混合,迅速混匀,得到反应液。
d、反应:MES缓冲液配制25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液1∶25的体积比加入,迅速混匀。37℃旋转反应48小时。
e、封闭:MES缓冲液配制75mg/ml的Gly溶液以及25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液2∶1∶10的体积比加入上述溶液中,混匀,37℃旋转反应2小时。再加入200mg/ml的BSA溶液(MES缓冲液),其与反应液体积比为5∶8,迅速混匀,37℃旋转反应16小时。
清洗:向反应好的溶液中加入MES缓冲液,高速冷冻离心机离心,弃上清,加入新鲜MES缓冲液超声法重新悬浮,再次离心,如此清洗3次,最后用少量的感光试剂缓冲液进行悬浮,测定固含量,用感光试剂缓冲液调节浓度至10mg/ml。
(5)将干燥后的质控微粒进行试验,在反应杯中加入60ul的感光微粒,温浴10分钟后,采用光激化学发光检测仪读数,结果如下表:
结果显示干燥后的质控微粒的性能灵敏,浓度值与信号值之间有明显的相关性,可用于定量检测。
实施例2:HBsAg(乙型肝炎表面抗原)的检测
(1)生物素标记表面抗体溶液的制备与配制
制备:a、将HBsAb透析于0.1M NaHCO3溶液,测定抗体浓度并调节至1mg/ml。b、用DMSO配制16.17mg/ml的Biotin溶液。c、标记:取处理好的1mg/ml HBsAb标记抗体与配制好的Biotin溶液,二者按照72∶10000的体积比进行混合,迅速混匀。4℃静置反应12~16小时。d、透析:将反应好的生物素标记抗体透析于生物素标记透析缓冲液(pH8.00)。e、将透析好的生物素化抗体吸出转移至干净离心管中,取样测定抗体浓度。将质检合格的生物素标记抗体浓度调节至0.5mg/ml。
配制:将生物素标记表面抗体采用生物素缓冲液(0.02M MES,1%BSA,1%dextran,0.01%庆大霉素、0.1% tween 20、0.05% procline、5%的海藻糖)稀释到3.75ug/ml。
(2)表面抗体包被的发光微粒溶液的制备与配制
制备:a、发光微粒混悬液处理:吸取一定量的发光微粒于高速冷冻离心机中离心,弃去上清,加入一定量MES缓冲液,超声破碎至微粒重新悬浮,加入MES缓冲液调节发光微粒浓度至100mg/ml。b、抗体处理:HBsAb于0.05M pH6.0的MES缓冲液(以下简称MES缓冲液)透析,透析完成后测定浓度,并调节浓度至8mg/ml。c、MES缓冲液、100mg/ml的发光微粒混悬液(MES缓冲液)和8mg/ml的抗-HBe(MES缓冲液)以及,以1∶2∶5的体积比进行混合,迅速混匀,得到反应液。d、用MES缓冲液配制25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液1∶25的体积比加入,迅速混匀,37℃旋转反应48小时。e、MES缓冲液配制75mg/ml的Gly溶液以及25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液2∶1∶10的体积比加入上述溶液中,混匀,37℃旋转反应2小时。再加入200mg/ml的BSA溶液(MES缓冲液),其与反应液体积比为5∶8,迅速混匀,37℃旋转反应16小时。f、用MES缓冲液离心清洗四次,最后用发光试剂缓冲液进行悬浮,测定粒径和固含量,调节浓度至10mg/ml。
配制:将表面抗体包被的发光微粒采用发光缓冲液(0.05M HEPES,1%BSA,1%dextran,0.01%庆大霉素、0.1% tween 20、0.05% procline、5%的海藻糖)稀释到375ug/ml。
(3)样品杯中试剂点样
用10ul移液器在反应杯中分别点入10ul生物素标记表面抗体和表面抗体包被的发光微粒。
(4)干燥
将点有试剂的反应杯放入冻干机中进行预冻,待试剂完全冻结后进行冷冻真空干燥。真空干燥结束后取出样品杯封口,并用袋中装有干燥剂的密封袋密封。
(5)检测结果
将已知浓度的乙肝表面抗原定标品6个分别取10ul加入反应杯中,每个样品10孔。随后将反应杯在37度条件下温浴5分钟,然后加入60ul的感光微粒,温浴10分钟后,采用光激化学发光检测仪读数。
结果显示干式试剂的信号值与浓度具有明显的相关性,随着浓度值的升高,信号值逐步升高,同时精密度CV逐渐降低,批内精密度小于10%,可应用于乙肝表面抗原的检测。
实施例3:cTnI(心肌钙蛋白I)干式诊断试剂的制备
(1)生物素标记抗心肌钙蛋白I抗体溶液制备与配制
制备:a、将抗心肌蛋白I抗体透析于0.1M NaHCO3溶液,测定抗体浓度并调节至1mg/ml。b、用DMSO配制16.17mg/ml的Biotin溶液。c、标记:取处理好的1mg/ml HBsAb标记抗体与配制好的Biotin溶液,二者按照72∶10000的体积比进行混合,迅速混匀。4℃静置反应12~16小时。d、透析:将反应好的生物素标记抗体透析于生物素标记透析缓冲液(pH8.00)。e、将透析好的生物素化抗体吸出转移至干净离心管中,取样测定抗体浓度。将质检合格的生物素标记抗体浓度调节至0.5mg/ml。
配制:将生物素标记抗心肌钙蛋白I抗体采用实施例2中的生物素缓冲液稀释到2.5ug/ml。
(2)抗心肌钙蛋白I抗体包被的发光微粒溶液配制
制备:a、发光微粒混悬液处理:吸取一定量的发光微粒于高速冷冻离心机中离心,弃去上清,加入一定量MES缓冲液,超声破碎至微粒重新悬浮,加入MES缓冲液调节发光微粒浓度至100mg/ml。b、抗体处理:抗心肌蛋白I抗体于0.05M pH6.0的MES缓冲液(以下简称MES缓冲液)透析,透析完成后测定浓度,并调节浓度至8mg/ml。c、MES缓冲液、100mg/ml的发光微粒混悬液(MES缓冲液)和8mg/ml的抗心肌蛋白I抗体(MES缓冲液)以及,以1∶2∶5的体积比进行混合,迅速混匀,得到反应液。d、用MES缓冲液配制25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液1∶25的体积比加入,迅速混匀,37℃旋转反应48小时。e、MES缓冲液配制75mg/ml的Gly溶液以及25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液2∶1∶10的体积比加入上述溶液中,混匀,37℃旋转反应2小时。再加入200mg/ml的BSA溶液(MES缓冲液),其与反应液体积比为5∶8,迅速混匀,37℃旋转反应16小时。f、用MES缓冲液离心清洗四次,最后用发光试剂缓冲液进行悬浮,测定粒径和固含量,调节浓度至10mg/ml。配制:将抗心肌钙蛋白I抗体包被的发光微粒采用实施例2中的发光缓冲液稀释到150ug/ml。
(3)样品杯中试剂点样
用10ul移液器在反应杯中分别点入10ul生物素标记抗心肌钙蛋白I抗体和抗心肌钙蛋白I抗体包被的发光微粒。
(4)干燥
将点有试剂的反应杯放入冻干机中进行预冻,待试剂完全冻结后进行冷冻真空干燥。真空干燥结束后取出反应杯封口,并用袋中装有干燥剂的密封袋密封。
(5)检测结果
将已知浓度的心肌蛋白I定标品6个分别取10ul加入反应杯中,每个样品10孔。随后将反应杯在37度条件下温浴5分钟,然后加入60ul的感光微粒,温浴10分钟后,采用光激化学发光检测仪读数。
结果显示干式试剂复溶良好,信号值与浓度具有明显的相关性,随着浓度值的升高,信号值逐步升高,同时精密度CV逐渐降低,批内精密度小于10%,可应用于心肌蛋白I的检测。
实施例4:hs-CRP(人超敏C反应蛋白)干式诊断试剂的制备
(1)生物素标记抗CRP抗体溶液制备及配制
制备:a、将CRP抗体透析于0.1M NaHCO3溶液,测定抗体浓度并调节至1mg/ml。b、用DMSO配制16.17mg/ml的Biotin溶液。c、标记:取处理好的1mg/mlCRP标记抗体与配制好的Biotin溶液,二者按照72∶10000的体积比进行混合,迅速混匀。4℃静置反应12~16小时。d、透析:将反应好的生物素标记抗体透析于生物素标记透析缓冲液(pH8.00)。e、将透析好的生物素化抗体吸出转移至干净离心管中,取样测定抗体浓度。将质检合格的生物素标记抗体浓度调节至0.5mg/ml。
配制:将生物素标记抗CRP抗体采用实施例2中的生物素缓冲液稀释到100ug/ml。
(2)抗CRP抗体包被的发光微粒溶液配制
制备:a、发光微粒混悬液处理:吸取一定量的发光微粒于高速冷冻离心机中离心,弃去上清,加入一定量MES缓冲液,超声破碎至微粒重新悬浮,加入MES缓冲液调节发光微粒浓度至100mg/ml。b、抗体处理:CRP抗体于0.05M pH6.0的MES缓冲液(以下简称MES缓冲液)透析,透析完成后测定浓度,并调节浓度至8mg/ml。c、MES缓冲液、100mg/ml的发光微粒混悬液(MES缓冲液)和8mg/ml的抗-HBe(MES缓冲液)以及,以1∶2∶5的体积比进行混合,迅速混匀,得到反应液。d、用MES缓冲液配制25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液1∶25的体积比加入,迅速混匀,37℃旋转反应48小时。e、MES缓冲液配制75mg/ml的Gly溶液以及25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液2∶1∶10的体积比加入上述溶液中,混匀,37℃旋转反应2小时。再加入200mg/ml的BSA溶液(MES缓冲液),其与反应液体积比为5∶8,迅速混匀,37℃旋转反应16小时。f、用MES缓冲液离心清洗四次,最后用发光试剂缓冲液进行悬浮,测定粒径和固含量,调节浓度至10mg/ml。
配制:将抗CRP抗体包被的发光微粒采用实施例2中的发光缓冲液稀释到600ug/ml。
(3)反应膜上试剂点样
用10ul移液器在反应杯中分别点入10ul生物素标记抗CRP抗体和抗CRP抗体包被的发光微粒。
(4)干燥
将点有试剂的反应杯放入冻干机中进行预冻,待试剂完全冻结后进行冷冻真空干燥。真空干燥结束后取出反应杯,用袋中装有干燥剂的密封袋密封。
(5)检测结果
将已知浓度的hsCRP定标品6个分别取10ul加入反应杯中,每个样品10孔。随后将反应杯在37度条件下温浴5分钟,然后加入60ul的感光微粒,温浴10分钟后,采用光激化学发光检测仪读数。
结果显示干式试剂复溶良好,信号值与浓度具有明显的相关性,随着浓度值的升高,信号值逐步升高,同时精密度CV逐渐降低,批内精密度小于10%,可应用于hsCRP的检测。
实施例4:HBcAb(乙肝病毒核心抗体)检测
(1)生物素标记重组乙肝病毒核心抗原溶液配制
制备:a、将重组乙肝病毒核心抗原透析于0.1M NaHCO3溶液,测定抗原浓度并调节至1mg/ml。b、用DMSO配制16.17mg/ml的Biotin溶液。c、标记:取处理好的1mg/ml标记抗原与配制好的Biotin溶液,二者按照72∶10000的体积比进行混合,迅速混匀。4℃静置反应12~16小时。d、透析:将反应好的生物素标记重组乙肝病毒核心抗原透析于生物素标记透析缓冲液(pH8.00)。e、将透析好的生物素化核心抗原吸出转移至干净离心管中,取样测定核心抗原浓度。将质检合格的生物素标记核心抗原浓度调节至0.5mg/ml。配制:采用实施例2中的稀释液将乙肝病毒核心抗原液稀释到10ug/ml。
(2)乙肝病毒核心抗体包被的发光微粒溶液配制
制备:a、发光微粒混悬液处理:吸取一定量的发光微粒于高速冷冻离心机中离心,弃去上清,加入一定量MES缓冲液,超声破碎至微粒重新悬浮,加入MES缓冲液调节发光微粒浓度至100mg/ml。b、抗体处理:乙肝病毒核心抗体于0.05M pH6.0的MES缓冲液(以下简称MES缓冲液)透析,透析完成后测定浓度,并调节浓度至8mg/ml。c、MES缓冲液、100mg/ml的发光微粒混悬液(MES缓冲液)和8mg/ml的抗-HBe(MES缓冲液)以及,以1∶2∶5的体积比进行混合,迅速混匀,得到反应液。d、用MES缓冲液配制25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液1∶25的体积比加入,迅速混匀,37℃旋转反应48小时。e、MES缓冲液配制75mg/ml的Gly溶液以及25mg/ml的NaBH3CN溶液,按照与反应液2∶1∶10的体积比加入上述溶液中,混匀,37℃旋转反应2小时。再加入200mg/ml的BSA溶液(MES缓冲液),其与反应液体积比为5∶8,迅速混匀,37℃旋转反应16小时。f、用MES缓冲液离心清洗四次,最后用发光试剂缓冲液进行悬浮,测定粒径和固含量,调节浓度至10mg/ml。
将乙肝病毒核心抗体包被的发光微粒采用发光缓冲液稀释到300ug/ml。
(3)样品杯中试剂点样
用10ul移液器在样品杯底部不同液槽中分别点入10ul生物素标记乙肝核心抗原和乙肝核心抗体包被的发光微粒。
(4)干燥
将点有试剂的样品杯放入冻干机中进行预冻,待试剂完全冻结后进行冷冻真空干燥。真空干燥结束后取出样品杯封口,并用袋中装有干燥剂的密封袋密封。
(5)检测结果
将干式试剂与液态试剂同时试验对比检测,显示干式试剂与液态试剂各项性能指标均与液态试剂无明显差异,检测范围5~800ng/ml,且标准曲线线性良好,r值大于0.99,批内及批间精密度均小于10%。
结果显示干式试剂复溶良好,信号值与浓度具有明显的相关性,随着浓度值的升高,信号值逐步升高,同时精密度CV逐渐降低,批内精密度小于10%,可应用于乙肝核心抗体的检测。
综上实验数据所述,干式光激化学发光检测方法可用于多种物质的检测及多种形式的检测,并且反应简单、迅速、结果可靠。
以上按照特定模式对本发明进行了说明,但本领域技术人员自明的变形和改良也都包括在本发明的范围内。
Claims (18)
1.一种干法光激化学发光免疫检测试剂盒,包括固定有干燥的检测微粒和干燥的生物素标记的抗原或抗体的反应容器,其中,检测微粒为包被抗原或抗体的发光微粒。
2.如权利要求1所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述反应容器为反应杯。
3.如权利要求2所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述反应杯的底部设有隔断。
4.如权利要求2所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述反应杯设有支架。
5.如权利要求1所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述固定有干燥检测微粒的反应容器为在反应容器上点入包被抗原或抗体的发光微粒溶液和生物素标记的抗原或抗体溶液后干燥获得。
6.如权利要求5所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述包被抗原或抗体的发光微粒溶液或生物素标记的抗体溶液的溶剂为缓冲液,缓冲液选自HEPES、MES或Tris,且缓冲液中含有多糖。
7.如权利要求6所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述多糖占溶液重量百分比为3%-7%。
8.如权利要求6所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述多糖选自海藻糖、蔗糖或果糖。
9.如权利要求6所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述缓冲液中还包括表面活性剂、抗生素、防腐剂或封闭剂。
10.如权利要求1-9中任一权利要求所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述发光微粒是指填充有发光化合物和镧系元素化合物的高分子微粒。
11.如权利要求1-10中任一权利要求所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,包括下列步骤:
a.配制包被有抗原或抗体的发光微粒溶液:用缓冲液将包被有抗原或抗体的发光微粒稀释到工作浓度;
b.配制生物素标记抗原或抗体溶液:用缓冲液将生物素标记抗原或抗体稀释到工作浓度;
c.反应容器上试剂点样:采用自动点样仪器或手工点入生物素标记抗原或抗体溶液以及包被有抗原或抗体的发光微粒溶液;
d.干燥:采用冻干或烘干的方式将上述点有试剂的反应容器进行干燥。
12.如权利要求11所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,其特征在于,步骤a和b中的缓冲液选自HEPES、MES或Tris,且缓冲液中含有多糖。
13.如权利要求12所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述多糖占溶液重量百分比为3%-7%。
14.如权利要求12所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述多糖选自海藻糖、蔗糖或果糖。
15.如权利要求11所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述缓冲液中还包括表面活性剂、抗生素、防腐剂或封闭剂。
16.如权利要求1-10中任一权利要求所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的使用方法,包括将样品加至反应容器上,进行第一步37摄氏度温育反应,然后加入亲和素包被的感光微粒,进行第二步37摄氏度温育,激发光照射后检测光子信号。
17.如权利要求16所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述感光微粒为填充有感光化合物的高分子微粒。
18.如权利要求16所述干法光激化学发光免疫检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述激发光的光源波长范围为600-700nm。
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---|---|
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Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101750487B (zh) |
Cited By (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102608313A (zh) * | 2012-02-27 | 2012-07-25 | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 | 抗甲型肝炎病毒IgM AlphaLISA检测试剂盒 |
CN102621334A (zh) * | 2012-04-06 | 2012-08-01 | 上海蓝怡科技有限公司 | 促卵泡成熟激素荧光磁微粒酶免检测试剂及其制备方法 |
CN102662052A (zh) * | 2012-04-19 | 2012-09-12 | 上海蓝怡科技有限公司 | 磁微粒封闭液 |
CN102735833A (zh) * | 2012-07-09 | 2012-10-17 | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 甲状腺过氧化物酶抗体均相发光免疫分析试剂盒及其检测方法 |
CN102798725A (zh) * | 2012-08-13 | 2012-11-28 | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 血清总IgE测定诊断试剂盒及制备和使用方法 |
CN103837675A (zh) * | 2014-03-07 | 2014-06-04 | 常艳敏 | 多组分同时定量分析的均相发光免疫分析方法及其所使用的试剂盒 |
CN104597254A (zh) * | 2015-02-04 | 2015-05-06 | 上海丰汇医学科技股份有限公司 | C反应蛋白快速检测方法及检测试剂盒 |
CN104614533A (zh) * | 2015-02-04 | 2015-05-13 | 上海丰汇医学科技股份有限公司 | 心肌钙蛋白i快速检测方法及相应的检测试剂盒 |
CN105044047A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-11-11 | 天津市南开医院 | 检测重组蛋白表达情况的试剂盒及其使用方法 |
CN105785030A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-07-20 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种血清特异性IgE光激化学发光免疫分析试剂盒 |
CN106124768A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-16 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种一步均相saa检测试剂盒及其制备和使用方法 |
CN106124771A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-16 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种一步均相cTnT检测试剂盒及其应用 |
CN106124769A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-16 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种一步均相il‑6检测试剂盒及其制备和使用方法 |
CN107966555A (zh) * | 2017-11-23 | 2018-04-27 | 中山市创艺生化工程有限公司 | 一种用于稳定保存nad或其衍生物的存储液 |
CN108445223A (zh) * | 2018-02-11 | 2018-08-24 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN108982879A (zh) * | 2018-04-25 | 2018-12-11 | 上海铭源数康生物芯片有限公司 | 抗缪勒氏管激素光激发化学发光检测试剂盒制备方法及其试剂盒和使用方法 |
CN109307663A (zh) * | 2018-09-13 | 2019-02-05 | 广州俊通生物科技有限公司 | 一种微孔反应板制备方法、试剂盒以及试剂盒的检测方法 |
CN109342719A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-02-15 | 广州俊通生物科技有限公司 | 一种甲状腺功能多联检测试剂盒的制备方法 |
CN109470874A (zh) * | 2016-11-22 | 2019-03-15 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN109470864A (zh) * | 2016-11-22 | 2019-03-15 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN110161248A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161232A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗ccp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161230A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 快速检测降钙素原的均相免疫试剂盒、制备方法、检测方法和装置 |
CN110161249A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161247A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗环瓜氨酸肽抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110736734A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种cTnI均相化学发光检测试剂盒、检测方法与装置 |
CN110736739A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种均相化学发光检测试剂盒及其应用 |
CN110736735A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种均相化学发光检测试剂盒及其应用 |
CN112240928A (zh) * | 2019-07-19 | 2021-01-19 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种均相化学发光分析的方法及其应用 |
CN112566924A (zh) * | 2018-06-15 | 2021-03-26 | 科沃施种子欧洲股份两合公司 | 改善植物中基因组工程化和再生的方法 |
CN112585269A (zh) * | 2018-06-15 | 2021-03-30 | 科沃施种子欧洲股份两合公司 | 改善植物中基因组工程化和再生的方法ii |
CN113376146A (zh) * | 2020-02-25 | 2021-09-10 | 上海交通大学 | 适于生物分子多重检测的检测颗粒及其制备方法与应用 |
CN115436620A (zh) * | 2022-11-10 | 2022-12-06 | 科美诊断技术股份有限公司 | 预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1234614A1 (de) * | 2001-02-27 | 2002-08-28 | Pentapharm Gmbh | Mit Stegen unterteiltes Messgefäss zur Aufnahme von Reagenzien, dessen Herstellung und Verwendung |
AT5044U1 (de) * | 2001-05-10 | 2002-02-25 | Medsystems Diagnostics Gmbh | Quantitativer einschritt immuntest in lyophilisierter form |
CN101251540B (zh) * | 2008-03-26 | 2012-12-05 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 乙型肝炎病毒e抗原检测微粒、其制备及应用 |
-
2008
- 2008-12-02 CN CN 200810203886 patent/CN101750487B/zh active Active
Cited By (49)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102608313A (zh) * | 2012-02-27 | 2012-07-25 | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 | 抗甲型肝炎病毒IgM AlphaLISA检测试剂盒 |
CN102621334B (zh) * | 2012-04-06 | 2014-11-12 | 上海蓝怡科技有限公司 | 促卵泡成熟激素荧光磁微粒酶免检测试剂及其制备方法 |
CN102621334A (zh) * | 2012-04-06 | 2012-08-01 | 上海蓝怡科技有限公司 | 促卵泡成熟激素荧光磁微粒酶免检测试剂及其制备方法 |
CN102662052A (zh) * | 2012-04-19 | 2012-09-12 | 上海蓝怡科技有限公司 | 磁微粒封闭液 |
CN102735833A (zh) * | 2012-07-09 | 2012-10-17 | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 甲状腺过氧化物酶抗体均相发光免疫分析试剂盒及其检测方法 |
CN102735833B (zh) * | 2012-07-09 | 2015-01-21 | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 甲状腺过氧化物酶抗体均相发光免疫分析试剂盒及其检测方法 |
CN102798725B (zh) * | 2012-08-13 | 2015-03-18 | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 血清总IgE测定诊断试剂盒及制备和使用方法 |
CN102798725A (zh) * | 2012-08-13 | 2012-11-28 | 沃克(天津)生物科技有限公司 | 血清总IgE测定诊断试剂盒及制备和使用方法 |
CN103837675A (zh) * | 2014-03-07 | 2014-06-04 | 常艳敏 | 多组分同时定量分析的均相发光免疫分析方法及其所使用的试剂盒 |
CN103837675B (zh) * | 2014-03-07 | 2016-01-13 | 天津市南开医院 | 多组分同时定量分析的均相发光免疫分析方法及其所使用的试剂盒 |
CN104597254A (zh) * | 2015-02-04 | 2015-05-06 | 上海丰汇医学科技股份有限公司 | C反应蛋白快速检测方法及检测试剂盒 |
CN104614533A (zh) * | 2015-02-04 | 2015-05-13 | 上海丰汇医学科技股份有限公司 | 心肌钙蛋白i快速检测方法及相应的检测试剂盒 |
CN105044047A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-11-11 | 天津市南开医院 | 检测重组蛋白表达情况的试剂盒及其使用方法 |
CN105785030A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-07-20 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种血清特异性IgE光激化学发光免疫分析试剂盒 |
CN106124768A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-16 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种一步均相saa检测试剂盒及其制备和使用方法 |
CN106124771A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-16 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种一步均相cTnT检测试剂盒及其应用 |
CN106124769A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-16 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种一步均相il‑6检测试剂盒及其制备和使用方法 |
CN109470864A (zh) * | 2016-11-22 | 2019-03-15 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN109470866A (zh) * | 2016-11-22 | 2019-03-15 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN109470865B (zh) * | 2016-11-22 | 2022-04-15 | 科美博阳诊断技术(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN109470865A (zh) * | 2016-11-22 | 2019-03-15 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN109470874A (zh) * | 2016-11-22 | 2019-03-15 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 免疫测定方法、用于鉴定免疫测定的系统和试剂盒 |
CN107966555A (zh) * | 2017-11-23 | 2018-04-27 | 中山市创艺生化工程有限公司 | 一种用于稳定保存nad或其衍生物的存储液 |
CN114217077A (zh) * | 2018-02-11 | 2022-03-22 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂套装及其应用 |
CN110161247A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗环瓜氨酸肽抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN114217076B (zh) * | 2018-02-11 | 2024-05-10 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161248A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161232A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗ccp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161230A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 快速检测降钙素原的均相免疫试剂盒、制备方法、检测方法和装置 |
CN110161249A (zh) * | 2018-02-11 | 2019-08-23 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN114217075A (zh) * | 2018-02-11 | 2022-03-22 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂套装及其应用 |
CN114217077B (zh) * | 2018-02-11 | 2024-05-10 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂套装及其应用 |
CN114217075B (zh) * | 2018-02-11 | 2024-05-10 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂套装及其应用 |
CN110161248B (zh) * | 2018-02-11 | 2023-06-20 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测抗Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110161232B (zh) * | 2018-02-11 | 2023-02-28 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测抗ccp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN108445223A (zh) * | 2018-02-11 | 2018-08-24 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN114217076A (zh) * | 2018-02-11 | 2022-03-22 | 科美诊断技术股份有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN108982879A (zh) * | 2018-04-25 | 2018-12-11 | 上海铭源数康生物芯片有限公司 | 抗缪勒氏管激素光激发化学发光检测试剂盒制备方法及其试剂盒和使用方法 |
CN112585269A (zh) * | 2018-06-15 | 2021-03-30 | 科沃施种子欧洲股份两合公司 | 改善植物中基因组工程化和再生的方法ii |
CN112566924A (zh) * | 2018-06-15 | 2021-03-26 | 科沃施种子欧洲股份两合公司 | 改善植物中基因组工程化和再生的方法 |
CN110736735A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种均相化学发光检测试剂盒及其应用 |
CN110736739A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种均相化学发光检测试剂盒及其应用 |
CN110736734A (zh) * | 2018-07-18 | 2020-01-31 | 博阳生物科技(上海)有限公司 | 一种cTnI均相化学发光检测试剂盒、检测方法与装置 |
CN109307663A (zh) * | 2018-09-13 | 2019-02-05 | 广州俊通生物科技有限公司 | 一种微孔反应板制备方法、试剂盒以及试剂盒的检测方法 |
CN109342719A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-02-15 | 广州俊通生物科技有限公司 | 一种甲状腺功能多联检测试剂盒的制备方法 |
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