CN115436620A - 预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法 - Google Patents

Abstract

本申请涉及一种预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法。该预存试剂检测卡包括样品加注部、反应部、安装部和活动件，样品加注部具有加注腔；反应部具有反应腔，被检测样品能够从加注腔进入反应腔；安装部具有安装槽，安装槽的一侧设有第一通道，安装槽与反应腔通过第一通道连通；活动件至少部分位于安装槽内并与安装槽滑动连接，活动件具有用于放置第二非液态试剂的储存腔，活动件能够在外力驱动下从第一位置沿安装槽移动至释放位，当活动件位于释放位时，储存腔与第一通道连通，以使第二非液态试剂能够通过第一通道进入反应腔。本申请提供的方案，能够提高光激发均相发光试剂的运输和储存的稳定性、提高检测的精密度。

Description

预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用 方法

技术领域

本申请涉及发光免疫检测技术领域，尤其涉及一种预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法。

背景技术

相关技术中，常规的光激发均相发光试剂均以液相产品为主，但液态试剂的运输和储存的稳定性受到很大限制，且在检测操作过程中具有多个试剂加样步骤，需要将相关的试剂分步加入到反应器皿中，采取一步反应的形式会影响检测的灵敏度、精密度、信号值等性能。

因此，提高光激发均相发光试剂的运输、储存稳定性，同时保证检测的灵敏度、精密度、信号值等性能，将使光激发均相发光技术的应用具有更广阔的前景。

发明内容

为解决或部分解决相关技术中存在的问题，本申请提供一种预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法，能够提高光激发均相发光试剂的运输和储存的稳定性，并能够提高检测的精密度。

本申请第一方面提供一种预存试剂检测卡，包括样品加注部、反应部和活动件。其中，样品加注部具有承载加注的被检测样品的加注腔，反应部具有反应腔，所述反应腔内放置第一试剂，被检测样品能够在受控条件下从所述加注腔进入所述反应腔，活动件具有储存腔，所述储存腔用于放置第二非液态试剂，所述第二非液态试剂能够在受控条件下从所述储存腔进入所述反应腔。

进一步的，上述预存试剂检测卡还包括安装部，具有安装槽，所述安装槽的一侧设有第一通道，所述安装槽与所述反应腔通过所述第一通道连通；所述活动件至少部分位于所述安装槽内并与所述安装槽滑动连接，所述活动件与所述安装槽之间相对密封，所述活动件能够在外力驱动下从第一位置沿所述安装槽移动至释放位，当所述活动件位于所述释放位时，所述储存腔与所述第一通道连通，以使所述第二非液态试剂能够通过所述第一通道进入所述反应腔。

进一步的，所述加注腔内设有过滤装置，所述过滤装置能够承载非液态试剂。

进一步的，所述储存腔靠近所述第一通道的一侧设有开口，当所述活动件位于所述第一位置时，所述安装槽的侧壁使所述开口封闭；当所述活动件位于所述释放位时，所述开口与所述第一通道连通，以使所述第二非液态试剂能够从所述开口进入所述第一通道。

进一步的，所述储存腔和所述释放位的数量均为N个，N≥1，N个所述储存腔和N个所述释放位一一对应设置。

进一步的，所述活动件沿竖直方向与所述安装槽滑动连接，所述活动件的下端伸入所述安装槽内，上端位于所述安装槽外；优选地，还包括定位装置，所述定位装置能够使所述活动件分别定位于所述第一位置、第二位置和所述释放位；更优选地，所述活动件的下端与所述安装槽的底面之间设置有弹性部件。

进一步的，所述安装槽和所述反应腔的上端分别设有抽气口，所述安装槽的下端设有进气口；所述活动件完全位于所述安装槽内，通过使所述安装槽内位于所述活动件上部的空间与位于所述活动件下部的空间形成压差，能够使所述活动件从所述第一位置移动至所述释放位。

进一步的，所述反应腔位于所述加注腔和所述安装槽之间，所述加注腔与所述反应腔通过所述第二通道连通；

或所述安装槽位于所述加注腔与所述反应腔之间，所述活动件设有第三通道，所述加注腔与所述反应腔能够经由所述第二通道、所述第三通道、所述第一通道连通。

进一步的，所述反应腔为圆柱形或长方体形；优选地，所述反应腔为圆柱形；更优选地，所述反应腔的底面为由四周向中心下凹的弧面形。

本申请第二方面提供一种均相发光免疫检测试剂盒，包括如上述任一项方案所述的预存试剂检测卡、位于所述反应腔内的所述第一试剂、位于所述储存腔内的所述第二非液态试剂、以及贴设于所述预存试剂检测卡上的医用易撕膜。

本申请第三方面提供一种如上述方案所述的均相发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括：

配制液体试剂，配制多步法孵育中需要的各液体试剂；

冻干，按照单位反应所需体积分装液体试剂预冻成冷冻小球，将所述冷冻小球转入冻干机中冷冻干燥后得到冻干小球；

分装，将第一步温育反应需要的冻干小球装入所述反应腔，将其他步温育反应需要的其他冻干小球装入所述储存腔配，分装完成后对所述预存试剂检测卡进行封口。

进一步的，上述制备方法还包括以下步骤：将处理样本的冻干小球装入所述加注腔内。

本申请第四方面提供一种如上述方案所述的均相发光免疫检测试剂盒的使用方法，包括：

测试时，去掉预存试剂检测卡上的医用易撕膜，加注被检测样品和稀释液至加注腔，通过压差或者重力作用使被检测样品流入反应腔，然后对试剂卡进行震动数秒，进行多步法孵育，孵育结束后，读取光子信号，根据标准曲线计算待测样品浓度，直接得到定量检测结果。

进一步的，所述进行多步法孵育中，在第一步温育反应时，所述反应腔内的所述第一试剂被复溶，在其他步温育反应时，通过移动所述活动件将所述储存腔内的所述第二非液态试剂释放至所述反应腔中复溶。

本申请提供的技术方案可以包括以下有益效果：通过采用将非液体试剂放置在预存试剂检测卡的储存腔内的方式，相对于液体试剂来说方便存储和运输，稳定性更好，并且减少了操作人员添加试剂的操作步骤，进而降低了操作过程中人为因素的影响，提高了检测的精密度；通过控制活动件来将储存腔内的冻干试剂投放至反应腔中，实现了多步法孵育中冻干试剂的分步投放，操作方便。

应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本申请。

附图说明

通过结合附图对本申请示例性实施方式进行更详细地描述，本申请的上述以及其它目的、特征和优势将变得更加明显，其中，在本申请示例性实施方式中，相同的参考标号通常代表相同部件。

图1是本申请实施例示出的一种预存试剂检测卡的结构示意图，其中，所述活动件位于第一位置；

图2是图1所示的预存试剂检测卡的另一结构示意图，其中，所述活动件位于第二位置；

图3是图1所示的预存试剂检测卡的另一结构示意图，其中，所述活动件位于释放位；

图4是本申请实施例示出的另一种预存试剂检测卡的结构示意图，其中，所述活动件位于第一位置；

图5是图4所示的预存试剂检测卡的另一结构示意图，其中，所述活动件位于释放位。

附图标记：

110-样品加注部，111-加注腔，120-反应部，121-反应腔，130-安装部，131-安装槽，140-第一通道，150-活动件，151-储存腔，152-第三通道，160-第二通道，170-定位块；

210-样品加注部，211-加注腔，220-反应部，221-反应腔，230-安装部，231-安装槽，232-抽气口，233-进气口，240-第一通道，250-活动件，251-储存腔，280-第二通道，290-过滤装置；

10-第一试剂，20-第二非液态试剂，30-吸嘴。

具体实施方式

下面将参照附图更详细地描述本申请的实施方式。虽然附图中显示了本申请的实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本申请而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了使本申请更加透彻和完整，并且能够将本申请的范围完整地传达给本领域的技术人员。

应当理解，尽管在本申请可能采用术语“第一”、“第二”、“第三”等来描述各种信息，但这些信息不应限于这些术语。这些术语仅用来将同一类型的信息彼此区分开。例如，在不脱离本申请范围的情况下，第一信息也可以被称为第二信息，类似地，第二信息也可以被称为第一信息。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本申请的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

在本申请的描述中，需要理解的是，术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本申请和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本申请的限制。

除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本申请中的具体含义。

相关技术中，常规的光激发均相发光试剂均以液相产品为主，但液态试剂的运输和储存的稳定性受到很大限制，且在检测操作过程中具有多个试剂加样步骤，需要将相关的试剂分步加入到反应器皿中，采取一步反应的形式会影响检测的灵敏度、精密度、信号值等性能。针对上述问题，本申请实施例提供一种预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法，能够提高光激发均相发光试剂的运输和储存的稳定性，并能够提高检测的灵敏度、精密度、信号值等性能。

以下结合附图详细描述本申请实施例的技术方案。

如图1所示，本申请实施例提供一种预存试剂检测卡，包括样品加注部110、反应部120、安装部130和活动件150，其中，样品加注部110具有用于加注被检测样品的加注腔111；反应部120具有反应腔121，反应腔121用于放置第一试剂10，实际使用时，第一试剂10可以是液态或者非液态试剂，本申请实施例以非液态的第一试剂10为例；被检测样品能够从加注腔111进入反应腔121，被检测样品流入反应腔121后能够复溶第一试剂10，在一些实施方式中，被检测样品和样品稀释液混合后加入加注腔111，进而可进行第一步温育反应；安装部130具有安装槽131，安装槽131的一侧设有第一通道140，安装槽131与反应腔121通过第一通道140连通。

活动件150至少部分位于安装槽131内并与安装槽131滑动连接，活动件150与安装槽131之间相对密封，活动件150具有用于放置第二非液态试剂20的储存腔151，其中，第二非液态试剂20可以是以冻干、烘干、风干等形式制备的干燥试剂，也可以是凝胶状的试剂；活动件150相对安装槽131移动时，能够处于如图1所示的第一位置和如图3所示的释放位，活动件150能够在外力驱动下从第一位置沿安装槽131移动至释放位，当活动件150位于释放位时，储存腔151与第一通道140连通，以使第二非液态试剂20能够通过第一通道140进入反应腔121。

基于上述方案，通过采用将非液态的试剂放置在预存试剂检测卡的反应腔121和储存腔151内的方式，相对于液体试剂来说方便存储和运输，稳定性更好，并且减少了操作人员添加试剂的操作步骤，进而降低了操作过程中人为因素的影响，提高了检测的精密度；通过移动活动件150使储存腔151与第一通道140连通来将储存腔151内的试剂投放至反应腔121中，实现了多步法孵育中冻干试剂的自动分步投放，操作方便的同时保证了反应的灵敏度和信号强度。其中，第一试剂10用于第一步温育反应，第二非液态试剂20用于第二步或更多步的温育反应，例如，被检测样品进入反应腔121复溶第一试剂10后进行第一步温育反应，然后将活动件150移动至释放位，使第二非液态试剂20进入反应腔121后被复溶，然后进行第二步温育反应。

如图1所示，在一些实施例中，第二非液态试剂20能够在重力的作用下从第一通道140落入反应腔121中，并具体采用如下方案实现：第一通道140自安装槽131向下倾斜延伸至反应腔121，储存腔151倾斜设置并与第一通道140的倾斜方向相同，当活动件150位于释放位时，第二非液态试剂20能够在重力作用下进入第一通道140并沿第一通道140落入反应腔121，不需要再借助外力作用移动第二非液态试剂20，方便操作。

可以理解的是，第一通道140和储存腔151倾斜设置可只指用于承托第二非液态试剂20的下表面倾斜设置，在重力作用下第二非液态试剂20能够沿斜面自动进入反应腔121内即可，而第一通道140和储存腔151其他部位是否倾斜不做限制。

具体的，如图1所示，储存腔151靠近第一通道140的一侧设有开口，当活动件150位于第一位置时，安装槽131的侧壁使开口封闭，使得第二非液态试剂20被限制在储存腔151内；当活动件150位于释放位时，开口与第一通道140连通，以使第二非液态试剂20能够从开口进入第一通道140，通过这样简单的结构，即可实现对第二非液态试剂20的限位与释放。

其中，储存腔151和释放位的数量均为N个，N≥1，N个储存腔151和N个释放位一一对应设置。例如，在一些实施例中，如图1所示，当检测需要进行两步法温育反应时，储存腔151和释放位的数量分别为一个，储存腔151内放置的是第二步温育反应需要的第二非液态试剂20。在其他一些实施例中，当检测需要大于两步的更多步温育反应时，储存腔151和释放位的数量也分别大于一个，多个储存腔151可沿活动件150的移动方向阵列排布，各储存腔151内分别放置的是从第二步到最后一步温育反应所需的第二非液态试剂20，并通过依次移动活动件150位于各释放位，使各储存腔151依次与第一通道140连通，实现各步温育反应所需的第二非液态试剂20的分步投放。

如图1和图2所示，在本实施例中，安装槽131位于加注腔111与反应腔121之间，加注腔111的下端设有第二通道160，加注腔111与安装槽131通过第二通道160连通，活动件150设有第三通道152；活动件150能够在外力驱动下从图1中的第一位置移动至图2中的第二位置，并能够从第二位置移动至图3中的释放位；当活动件150位于第一位置时，活动件150使第一通道140与第二通道160相阻隔，加注腔111的液体无法流入反应腔121中，当活动件150位于第二位置时，第二通道160通过第三通道152与第一通道140连通，此时加注腔111的液体能够流入反应腔121中。

具体的，在进行第一步温育反应时，活动件150位于第二位置，被检测样品从加注腔111流入反应腔121中，在进行第二步温育反应时，活动件150位于释放位。在不需要进行检测反应时，活动件150处于第一位置并使加注腔111与反应腔121相隔开，此时加注腔111内还可以储存液体，例如纯化水、稀释液、样本处理剂等，可以根据不同检测项目需求进行选择。

在一些实施方式中，加注腔111内设有过滤装置，所述过滤装置能够承载非液态试剂，如干燥或凝胶状的样本处理试剂。加注样本时活动件150处于第一位置，样本将复溶样本处理试剂后在加注腔内被预处理。然后活动件150移动至第二位置，预处理后的样品从加注腔111流入反应腔121中进行后续反应。在一些实施例中，为了便于活动件150在第一位置、第二位置及释放位处的定位，预存试剂检测卡还包括定位装置，定位装置能够使活动件150分别定位于第一位置、第二位置和释放位。

具体的，如图1至图3所示，定位装置包括设于安装槽131的侧壁上的若干层定位块170，当活动件150向下移动时，活动件150的下端依次经过若干层定位块170并与若干层定位块170之间产生摩擦阻力，每层定位块170对应于活动件150的其中一个需要定位的位置。

可以理解的是，在活动件150的下端与定位块170摩擦时，定位块170会顶触活动件150使得活动件150产生轻微的变形，活动件150也可使安装槽131在定位块170的部位产生轻微的变形，活动件150依然可继续沿安装槽131移动，活动件150和安装部130可采用具有一定形变能力的塑料件制成。

在其他一些实施例中，定位装置包括设于安装槽131的侧壁和活动件150的侧壁其中一者上的若干层定位块170、以及设于另一者上的定位槽，当活动件150向下移动时，定位槽依次经过若干层定位块170，这种方式同样能够在活动件150移动时产生摩擦阻力的突变，方便对活动件150定位。

可选的，定位块170的截面为三角形或弧形，这种形状方便产生阻力突变的同时，不至于阻力过大很难继续移动活动件150。

如图3所示，在一些实施例中，定位装置还包括安装槽131的底面，当活动件150的下端面与安装槽131的底面贴合时，活动件150被定位于释放位。具体的，活动件150向下移动至最低处时，活动件150的下端面与安装槽131的底面贴合，此时活动件150将释放最后一步温育反应需要的第二非液态试剂20。

在一些实施例中，为了防止活动件150意外下滑，预存试剂检测卡还包括设于活动件150的下端与安装槽131的底面之间的弹簧，在活动件150发生意外下滑时会压缩弹簧，弹簧具有对活动件150向上的弹力以防止活动件150继续向下滑动，以免错误的将试剂释放到反应腔121中。

在一些实施例中，安装槽131和活动件150均为长方体形，安装槽131和活动件150的形状相吻合，活动件150具体可为板形结构，便于限位和进行插拔活动。

如图1至图3所示，在一些实施例中，加注腔111的液体可通过重力作用流入反应腔121中，具体的，第一通道140、第二通道160和第三通道152均沿由加注腔111向反应腔121的方向斜向下延伸，当活动件150位于第二位置时，加注腔111中的液体在重力作用下依次经过第二通道160、第三通道152和第一通道140后进入反应腔121中复溶第一试剂10。可以理解的是，在进行反应时，反应腔121中液体的液面高度应低于第一通道140连通反应腔121的一端。

可选的，反应腔121为圆柱形或长方体形，优选为圆柱形；当反应腔121为圆柱形时，反应腔121的底面为由四周向中心下凹的弧面形，例如可以为半球形，有利于试剂的混合和反应以及光信号的采集。

在一些实施例中，样品加注部110、反应部120和安装部130为一体成型结构，例如可以采用塑料一体注塑成型，便于加工。

如图1至图3所示，预存试剂检测卡的检测步骤如下：

使用时撕掉加注腔111和反应腔121的封口膜，加入样本至加注腔111，将中间的活动件150从第一位置下压至第二位置，液体从加注腔111释放至反应腔121，然后进行震荡使第一试剂10溶解、混匀反应腔121内反应液，在一定的温度下反应一定的时间。

第一步反应完成后，将中间的活动件150从第二位置下压至释放位，储存腔151中存放的第二步反应需要加入的第二非液态试剂20释放至反应腔121。震荡溶解混匀反应腔121反应液，在一定的温度下反应一定的时间。

若需要进行两步以上的温育反应，则依次将各步的第二非液态试剂20释放至反应腔121，最后检测反应腔121中反应液的信号值。

如图4和图5所示，本申请实施例提供另一种预存试剂检测卡，包括样品加注部210、反应部220、安装部230和活动件250，其中，样品加注部210具有用于加注被检测样品的加注腔211；反应部220具有反应腔221，反应腔221用于放置第一试剂10，被检测样品能够从加注腔211流入反应腔221，被检测样品流入反应腔221后能够复溶第一试剂10，进而可进行第一步温育反应；安装部230具有安装槽231，安装槽231的一侧设有第一通道240，安装槽231与反应腔221通过第一通道240连通。

活动件250至少部分位于安装槽231内并与安装槽231滑动连接，活动件250具有用于放置第二非液态试剂20的储存腔251，活动件250相对安装槽231移动时，能够处于如图4所示的第一位置和如图5所示的释放位，活动件250能够在外力驱动下从第一位置沿安装槽231移动至释放位，当活动件250位于释放位时，储存腔251与第一通道240连通，以使第二非液态试剂20能够通过第一通道240进入反应腔221。

基于上述方案，通过采用将冻干试剂放置在预存试剂检测卡的反应腔221和储存腔251内的方式，相对于液体试剂来说方便存储和运输，稳定性更好，并且减少了操作人员添加试剂的操作步骤，进而降低了操作过程中人为因素的影响，提高了检测的精密度；通过移动活动件250使储存腔251与第一通道240连通来将储存腔251内的冻干试剂投放至反应腔221中，实现了多步法孵育中冻干试剂的自动分步投放，操作方便的同时保证了反应的灵敏度和信号强度。其中，第一试剂10用于第一步温育反应，第二非液态试剂20用于第二步或更多步的温育反应，例如，被检测样品进入反应腔221复溶第一试剂10后进行第一步温育反应，然后将活动件250移动至释放位，使第二非液态试剂20进入反应腔221后被复溶，然后进行第二步温育反应。

如图4所示，在一些实施例中，第二非液态试剂20能够在重力的作用下从第一通道240落入反应腔221中，并具体采用如下方案实现：第一通道240自安装槽231向下倾斜延伸至反应腔221，储存腔251倾斜设置并与第一通道240的倾斜方向相同，当活动件250位于释放位时，第二非液态试剂20能够在重力作用下进入第一通道240并沿第一通道240落入反应腔221，不需要再借助外力作用移动第二非液态试剂20，方便操作。

可以理解的是，第一通道240和储存腔251倾斜设置可只指用于承托第二非液态试剂20的下表面倾斜设置，在重力作用下第二非液态试剂20能够沿斜面自动进入反应腔221内即可，而第一通道240和储存腔251其他部位是否倾斜可不做限制。

具体的，如图4所示，储存腔251靠近第一通道240的一侧设有开口，当活动件250位于第一位置时，安装槽231的侧壁使开口封闭，使得第二非液态试剂20被限制在储存腔251内；当活动件250位于释放位时，开口与第一通道240连通，以使第二非液态试剂20能够从开口进入第一通道240，通过这样简单的结构，即可实现对第二非液态试剂20的限位与释放。

其中，储存腔251和释放位的数量均为N个，N≥1，N个储存腔251和N个释放位一一对应设置。例如，在一些实施例中，如图4所示，当检测需要进行两步法温育反应时，储存腔251和释放位的数量分别为一个，储存腔251内放置的是第二步温育反应需要的第二非液态试剂20。在其他一些实施例中，当检测需要大于两步的更多步温育反应时，储存腔251和释放位的数量也分别大于一个，多个储存腔251可沿活动件250的移动方向阵列排布，各储存腔251内分别放置的是从第二步到最后一步温育反应所需的第二非液态试剂20，并通过依次移动活动件250至位于各释放位，使各储存腔251依次与第一通道240连通，实现各步温育反应所需的第二非液态试剂20的分步投放。

如图4和图5所示，在本实施例中，反应腔221位于加注腔211和安装槽231之间，加注腔211的下端设有第二通道280，加注腔211与反应腔221通过第二通道280连通，具体的，第二通道280可由加注腔211的底部向下倾斜延伸至反应腔221，便于样本试剂从加注腔211流入反应腔221中。

在一些实施例中，如图4所示，加注腔211内设有过滤装置290，过滤装置290可以是虑血膜或者虑血膜与滤芯的组合，滤芯可以通过聚乙烯烧结而成，过滤装置290可以过滤样本中体积较大的蛋白分子，保证测量的准确性。在具体实施时，可通过与气泵连接的吸嘴30对反应腔221上端的抽气口进行抽真空，在反应腔221形成负压，在压力差作用下将加注腔211中的样本及稀释液从第二通道280吸入反应腔221中。

在一些实施例中，如图4和图5所示，活动件250完全位于安装槽231内，活动件250沿竖直方向与安装槽231滑动连接，活动件250使得安装槽231内位于活动件250上部的空间与位于活动件250下部的空间相对密封，通过使安装槽231内位于活动件250上部的空间与位于活动件250下部的空间形成压差，能够使活动件250从图4所示的第一位置移动至图5所示的释放位。具体的，活动件250类似于活塞，能够在安装槽231内上下滑动。

在一些实施例中，安装槽231的上端设有抽气口232，安装槽231的下端设有进气口233。因为活动件250将安装槽231的上部与下部之间相对密封，在检测时，通过与气泵连接的吸嘴30对抽气口232进行抽真空，使得活动件250上方的空间形成负压，在压差作用下使得活动件250向上移动至释放位，并将第二非液态试剂20释放至反应腔221中。

本申请实施例还提供一种均相发光免疫检测试剂盒，包括上述任一实施例的预存试剂检测卡、位于反应腔内的第一试剂10、位于储存腔内的第二非液态试剂20、以及贴设于预存试剂检测卡上的医用易撕膜，其中，医用易撕膜用于对各腔体进行封口，使试剂盒处于密封状态，在进行检测时再将医用易撕膜撕掉，第一试剂10和第二非液态试剂20均为冻干试剂。

上述方案的均相发光免疫检测试剂盒，相对于液体试剂来说方便存储和运输，稳定性更好，并且减少了操作人员添加试剂的操作步骤，进而降低了操作过程中人为因素的影响，提高了检测的精密度；通过移动活动件使储存腔与第一通道连通来将储存腔内的冻干试剂投放至反应腔中，实现了多步法孵育中冻干试剂的自动分步投放，操作方便的同时保证了反应的灵敏度和信号强度。

本申请实施例还提供一种制备上述实施例的均相发光免疫检测试剂盒的方法，该方法包括：

S1、配制液体试剂，配置多步法孵育中需要的各液体试剂；

具体的，液体试剂例如可以是分别被缓冲液稀释的包被有抗原或抗体的发光微粒溶液、生物素标记抗原或抗体溶液或亲和素包被的感光微粒溶液。

S2、冻干，通过滴珠机将上述各液体试剂呈液滴滴入液氮中，经液氮冷却后形成冷冻小球，将冷冻小球转入冻干机中冷冻干燥后得到冻干小球。

具体的，经液氮冷冻后的冻干小球可具有三种不同种类，分别对应上述三种液体试剂。

S3、分装，将第一步温育反应需要的冻干小球装入反应腔配制成第一试剂10，将其他步温育反应需要的冻干小球装入储存腔配制成第二非液态试剂20，分装完成后对预存试剂检测卡进行封口。

具体的，在需要进行两步温育反应的检测中，可将上述包被有抗原或抗体的发光微粒冻干球和生物素标记抗原或抗体冻干球装入反应腔中配置成第一试剂10，将亲和素包被的感光微粒冻干球装入储存腔作为第二非液态试剂20。

在其他实施例中，若需要进行的温育反应大于两步，则储存腔的数量也大于两个，每个储存腔中存放的第二非液态试剂20对应于相应步骤的温育反应。

例如，在一些实施例中，储存腔的数量为多个，在上述步骤S3中，将其他步温育反应需要的冻干小球装入储存腔配制成第二非液态试剂20的具体步骤包括：

向多个储存腔内分别装入第二步温育反应至最后一步温育反应所需的冻干小球配制成第二非液态试剂20。

在一些实施方式中，还包括样本处理剂，也进行干燥处理。在分装步骤中，将干燥的样本处理剂放入加注腔111中，在一些实施方式中，放置在加注腔111中的过滤装置上。

本申请实施例还提供一种使用上述实施例的均相发光免疫检测试剂盒的方法，该方法包括：

测试时，去掉预存试剂检测卡上的医用易撕膜，加注被检测样品和稀释液至加注腔，通过压差或者重力作用使被检测样品流入反应腔，然后对试剂卡进行震动数秒，进行多步法孵育，孵育结束后，读取光子信号，根据标准曲线计算待测样品浓度，直接得到定量检测结果。

具体的，上述进行多步法孵育中，在第一步温育反应时，反应腔内的第一试剂10被复溶，在其他步温育反应时，通过移动活动件将储存腔内的第二非液态试剂20释放至反应腔中复溶。

综上，本申请实施例提供一种预存试剂检测卡、均相发光免疫检测试剂盒及其制备和使用方法，可将液态试剂进行冻干制作成冻干小球并提前封装在试剂盒中，提高了光激发均相发光试剂的运输、储存稳定性，减小了在操作过程中人为因素的影响，提高了检测的精密度；本申请实施例通过对活动件进行简单的机械控制实现了试剂的分步投放，进而控制反应进程，实现了最优的反应流程。

上文中已经参考附图详细描述了本申请的方案。在上述实施例中，对各个实施例的描述都各有侧重，某个实施例中没有详细描述的部分，可以参见其他实施例的相关描述。本领域技术人员也应该知悉，说明书中所涉及的动作和模块并不一定是本申请所必需的。另外，可以理解，本申请实施例方法中的步骤可以根据实际需要进行顺序调整、合并和删减，本申请实施例装置中的模块可以根据实际需要进行合并、划分和删减。

以上已经描述了本申请的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。本文中所用术语的选择，旨在最好地解释各实施例的原理、实际应用或对市场中的技术的改进，或者使本技术领域的其他普通技术人员能理解本文披露的各实施例。

Claims (17)

1.一种预存试剂检测卡，其特征在于，包括：

样品加注部，具有承载加注的被检测样品的加注腔；

反应部，具有反应腔，所述反应腔内放置第一试剂，被检测样品能够在受控条件下从所述加注腔进入所述反应腔；以及

活动件，具有储存腔，所述储存腔用于放置第二非液态试剂，所述第二非液态试剂能够在受控条件下从所述储存腔进入所述反应腔。

2.根据权利要求1所述的预存试剂检测卡，其特征在于：还包括安装部，具有安装槽，所述安装槽的一侧设有第一通道，所述安装槽与所述反应腔通过所述第一通道连通；

所述活动件至少部分位于所述安装槽内并与所述安装槽滑动连接，所述活动件与所述安装槽之间相对密封，所述活动件能够在外力驱动下从第一位置沿所述安装槽移动至释放位，当所述活动件位于所述释放位时，所述储存腔与所述第一通道连通，以使所述第二非液态试剂能够通过所述第一通道进入所述反应腔。

3.根据权利要求1所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述加注腔内设有过滤装置，所述过滤装置能够承载非液态试剂。

4.根据权利要求2所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述储存腔靠近所述第一通道的一侧设有开口，当所述活动件位于所述第一位置时，所述安装槽的侧壁使所述开口封闭；当所述活动件位于所述释放位时，所述开口与所述第一通道连通，以使所述第二非液态试剂能够从所述开口进入所述第一通道。

5.根据权利要求2所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述储存腔和所述释放位的数量均为N个，N≥1，N个所述储存腔和N个所述释放位一一对应设置。

6.根据权利要求2所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述活动件沿竖直方向与所述安装槽滑动连接，所述活动件的下端伸入所述安装槽内，上端位于所述安装槽外。

7.根据权利要求6所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

还包括定位装置，所述定位装置能够使所述活动件分别定位于所述第一位置、第二位置和所述释放位。

8.根据权利要求6所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述活动件的下端与所述安装槽的底面之间设置有弹性部件。

9.根据权利要求2所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述安装槽和所述反应腔的上端分别设有抽气口，所述安装槽的下端设有进气口；所述活动件完全位于所述安装槽内，通过使所述安装槽内位于所述活动件上部的空间与位于所述活动件下部的空间形成压差，能够使所述活动件从所述第一位置移动至所述释放位。

10.根据权利要求2所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述反应腔位于所述加注腔和所述安装槽之间，所述加注腔与所述反应腔通过第二通道连通；

或所述安装槽位于所述加注腔与所述反应腔之间，所述活动件设有第三通道，所述加注腔与所述反应腔能够经由所述第二通道、所述第三通道、所述第一通道连通。

11.根据权利要求1-10任一项所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述反应腔为圆柱形或长方体形。

12.根据权利要求11所述的预存试剂检测卡，其特征在于：

所述反应腔的底面为由四周向中心下凹的弧面形。

13.一种均相发光免疫检测试剂盒，其特征在于：

包括如权利要求1-12任一项所述的预存试剂检测卡、位于所述反应腔内的所述第一试剂、位于所述储存腔内的所述第二非液态试剂、以及贴设于所述预存试剂检测卡上的医用易撕膜。

14.一种如权利要求13所述的均相发光免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：

配制液体试剂，配制多步法孵育中需要的各液体试剂；

冻干，按照单位反应所需体积分装液体试剂预冻成冷冻小球，将所述冷冻小球转入冻干机中冷冻干燥后得到冻干小球；

分装，将第一步温育反应需要的冻干小球装入所述反应腔，将其他步温育反应需要的其他冻干小球装入所述储存腔配，分装完成后对所述预存试剂检测卡进行封口。

15.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于，还包括：

将处理样本的冻干小球装入所述加注腔内。

16.一种如权利要求13所述的均相发光免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括：

测试时，去掉预存试剂检测卡上的医用易撕膜，加注被检测样品至加注腔，通过压差或者重力作用使被检测样品流入反应腔，然后对试剂卡进行震动数秒，进行多步法孵育，孵育结束后，读取光子信号，根据标准曲线计算待测样品浓度，直接得到定量检测结果。

17.根据权利要求16所述的使用方法，其特征在于：

所述进行多步法孵育中，在第一步温育反应时，所述反应腔内的所述第一试剂被复溶，在其他步温育反应时，通过移动所述活动件将所述储存腔内的所述第二非液态试剂释放至所述反应腔中复溶。

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