CN101745327A - 一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法。包括如下步骤：(1)将多巴类化合物和生物分子分别溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液和磷酸缓冲液中，配成溶液；(2)将聚合物微孔膜浸泡在多巴类化合物溶液中，并进行振荡，使多巴类化合物在膜表面自聚-复合，并紧密附着在膜表面和膜孔壁；(3)将多巴类化合物改性的聚合物微孔膜浸泡到生物分子溶液中，通过膜表面的儿茶酚基团与生物分子中氨基之间的加成反应，将生物分子固定到微孔膜表面。本发明所述的聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法工艺简单，所制备的聚合物微孔膜具有优异的亲水性和生物相容性，对改善聚合物微孔膜的通透性和生物相容性具有重要意义。

Description

一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法

技术领域

本发明涉及聚合物微孔膜表面改性技术领域，尤其涉及一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法。

背景技术

膜技术是一项新型高效的分离技术，具有节约能源、环境友好等优点，是解决人类所面临的水资源、环境、能源等领域重大问题的共性支撑技术之一，被广泛应用于水处理、化工分离、食品饮料纯化、生物医药、医疗等领域。膜材料是膜技术的核心，膜材料的性质直接影响着膜的物化稳定性和分离性能，近代高分子科学的发展开发出具有不同特性的高分子膜材料，为膜技术的研究和发展提供了原料基础。事实上，目前绝大多数膜技术依赖于有机高分子膜，常用的高分子膜材料主要有改性纤维素类，聚烯烃、聚砜类、聚酰胺、聚碳酸酯、聚丙烯腈类、丙烯酸共聚物和含氟聚合物等。

对于大多数合成高分子膜而言，膜材料本身具有较强的疏水性，可润湿性差，这使其在水相分离体系中存在以下突出问题：(1)膜的疏水性使水需要克服较高的阻力才能透过膜，膜传质驱动力大，能耗高；(2)在有机物/水分离体系中(尤其是含蛋白质或活性生物体的溶液)，强疏水性易引起有机物和胶体在膜表面和膜孔内吸附，形成严重的膜污染，劣化膜的性能，缩短膜的使用寿命。此外，合成高分子膜材料血液相容性和组织相容性不佳，在用于蛋白质过滤、血液净化或组织工程等场合时，可能引起蛋白质吸附、血小板粘附、凝血或细胞排斥反应、炎症等问题，这些问题阻碍了膜材料在生物医用领域的推广应用。因此，为了改善膜的表面物化性质，赋予膜更优的性能，拓展其应用范围，对高分子膜进行表面改性与修饰就显得尤为重要。

关于聚合物微孔膜表面改性的报道有很多，其主要方法可以分为两大类：物理改性和化学改性。物理改性方法主要包括表面涂覆和共混，表面涂覆通常是将表面活性剂(如F127)、亲水性聚合物或小分子有机质(如乙醇、甘油等)涂覆在膜表面和膜孔壁，如中国专利CN1704152公开了一种在聚四氟乙烯微孔膜表面涂覆聚乙烯醇、壳聚糖、海藻酸钠等亲水性聚合物，实现了膜表面亲水改性的方法。这种方法虽然可以在一定程度上改善膜的表面性能，但这些改性剂易溶于水，在膜使用过程中容易流失，得不到持久的改性效果。提高改性涂覆层的作用力往往需要增加复杂的操作步骤或者方法，如中国专利CN101462024提出在复合膜的聚酰胺致密层表面依次涂覆PVA溶液、含有交联剂及催化剂的溶液，然后再高温交联形成高交联度的PVA抗污染层，以此提高界面作用力，但涂覆层会对膜微孔结构造成一定的影响，改性膜渗透性能有所下降。共混是一种简单方便的膜改性方法，通常是在成膜配方中加入一些小分子或水溶性低分子量添加剂(如PEG、PVP等)，如美国专利US2005164025报道了一种采用羟烷基纤维素和聚偏氟乙烯(PVDF)共混制备亲水性超滤膜的方法，所得改性膜在干、湿状态下都具有一定的亲水性，该方法的缺点是所采用的添加剂易溶于水，在膜制备和应用过程中容易流失，因而更多是起到致孔剂的作用。化学改性有表面处理(如臭氧处理)、辐照、接枝、界面聚合和表面交联等，辐照等表面处理法要么效率较低，要么设备复杂，不易实现连续化生产，而且形成的极性基团小，这些基团随高分子链段的运动迁移到膜表面以下，改性效果随时间逐渐衰减；臭氧化或低温等离子体处理引发表面接枝可以实现膜的持久亲水性，如日本专利JP62262705A通过低温等离子体处理引发，在聚烯烃和PVDF膜表面接枝甲基丙烯酸酯类、丙烯酰胺类亲水单体，制备了亲水性血浆分离膜。然而，这些方法所采用的设备复杂，改性需多步进行，稳定性和安全性不佳；UV、高能粒子辐照处理可能切断聚合物分子链，破坏膜的本体结构，损害膜的分离性能和机械强度。因此，为克服现有方法的不足，需要开发更经济、更高效、操作更简单方便的方法来实现聚合物微孔膜的表面改性。

研究发现，在适当的溶液条件下，含有儿茶酚基团和氨基的3，4-二羟基苯丙氨酸(又称为多巴)和4-(2-乙胺基)苯-1，2-二醇(又称为多巴胺)可以在材料表面交联，并通过与材料表面的强相互作用附着在材料表面。Haeshin Lee等做了大量研究工作，在有机、无机等一系列固体材料表面成功复合了聚多巴胺薄层，并通过聚多巴胺复合层上的活性基团，对材料表面进行了各种功能化修饰，包括PEG、硫醇和透明质酸粘多糖在材料表面的固定(Science.318，426(2007))。中国专利CN101269303公开了一种超薄活性层的中空纤维复合膜的制备方法，将聚多巴胺活性层与聚砜中空纤维膜进行复合，所制备复合膜应用于气体脱湿，特别适用于丙烯气体的脱水。然而，利用多巴类化合物的自聚和强附着特性对聚合物微孔膜进行表面改性和并进一步固定生物分子的方法还未见报道。

在本发明中，通过多巴或多巴胺的自聚-复合方法对聚合物微孔膜进行亲水改性，并进一步通过复合层表面的活性基团在膜表面固定生物分子，所制备的改性膜具有良好的亲水性和生物相容性，可广泛应用于有机物/水处理体系和生物医用分离领域。采用多巴或多巴胺对聚合物微孔膜进行改性后，大量极性基团的引入，使得改性后的聚合物微孔膜表面具有高亲水性。多巴或多巴胺中的儿茶酚部分有氧化还原作用，可以产生自由基使得分子链交联，并与聚合物表面牢固结合，因此亲水改性效果稳定持久。改性膜表面的多巴或多巴胺复合层能与含氨基、亚氨基或巯基的分子发生加成反应，为膜表面进一步功能化提供了一种新途径。本发明所涉及的改性方法工艺设备简单，是一种经济、高效、无毒、无污染的表面改性技术，具有良好的工业化前景。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种简单高效、适用范围广的在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法。

在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法包括如下步骤：

(1)将含有儿茶酚基团和氨基的多巴类化合物溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液中，得到多巴类化合物溶液，溶液pH值为7.5～10，溶液浓度为0.2～2.5克/升；

(2)将生物分子溶解在0.01摩尔/升的磷酸缓冲液中，配成生物分子溶液，溶液pH值为7.4，生物分子溶液浓度为0.25～2.0克/升；

(3)将在乙醇中浸泡1小时的聚合物微孔膜浸泡在上述多巴类化合物溶液中进行反应，在膜表面形成自聚的多巴类化合物复合层，反应温度为10～60℃，反应时间为0.5～100小时，得到多巴类化合物改性的聚合物微孔膜；

(4)将多巴类化合物改性的聚合物微孔膜浸泡在上述生物分子溶液中，通过膜表面的儿茶酚基团与生物分子中氨基之间的加成反应进行耦合，将生物分子固定在聚合物微孔膜表面，反应温度为4～30℃，反应时间为6～42小时；

(5)将生物分子固定后的聚合物微孔膜在去离子水中振荡清洗，再真空干燥，清洗振荡频率60～80次/分钟，清洗时间24～96小时，清洗温度4～30℃，干燥温度4～30℃。

所述的多巴类化合物为3，4-二羟基苯丙氨酸或4-(2-乙胺基)苯-1，2-二醇。所述的聚合物微孔膜为聚乙烯、聚丙烯、聚偏氟乙烯或聚四氟乙烯微孔膜。所述的聚合物微孔膜的形状为平板膜或中空纤维膜。所述的聚合物微孔膜平均孔径为0.1～1.5微米。所述的生物分子为牛血清白蛋白或肝素。

本发明通过多巴类化合物在固体材料表面的自聚/强附着特性对聚合物微孔膜进行表面改性，并以多巴类化合物复合层为间隔臂，在膜表面进一步固定生物分子。该改性方法设备简单，成本低，易于大规模工业生产。

又，本发明中自聚的多巴类化合物依靠共价键和范德华力紧密附着在膜表面，改性效果持久稳定，改性膜经长时间清洗后，仍能维持优异的亲水性和生物相容性。

又，本发明采用多巴类化合物对聚合物微孔膜进行亲水改性，改性不仅发生在膜表面，也深入到了膜孔内部。接触角测量实验表明，采用多巴改性后的平板聚乙烯微孔膜可很快将膜表面的水滴完全吸收，表明膜孔内部的亲水性也得到了明显提高。

又，本发明中多巴类化合物复合层中的活性基团可与含氨基、亚氨基的生物分子发生加成反应，在膜表面进一步固定生物分子，故本发明提供了一种改善聚合物微孔膜生物相容性的方法。

又，本发明的适用对象广，可用于聚乙烯、聚丙烯、聚偏氟乙烯和聚四氟乙烯平板膜和中空纤维膜的表面改性。

附图说明

图1是聚合物微孔膜表面固定生物分子实验方法过程示意图；

图2(a)是PE平板微孔膜原膜血小板粘附后膜表面扫描电镜(SEM)图；

图2(b)是多巴复合改性的PE平板微孔膜表面血小板粘附后SEM图；

图2(c)是肝素固定改性的PE平板微孔膜表面血小板粘附后SEM图；

图3(a)是PVDF中空纤维微孔膜原膜内壁肝细胞培养后SEM图；

图3(b)是多巴复合改性的PVDF中空纤维微孔膜内壁肝细胞培养后SEM图；

图3(c)是BSA固定改性的PVDF中空纤维微孔膜内壁肝细胞培养后SEM图。

具体实施方式

本发明通过多巴类化合物在固体材料表面的自聚/强附着特性对聚合物微孔膜进行表面复合改性，并以多巴类化合物复合层为间隔臂，在膜表面进一步固定生物分子。经过表面改性的聚合物微孔膜可以克服原膜的水透过阻力大、分离过程能耗高、易被污染等问题，而且改性膜表面固定生物分子后，可提高膜的生物相容性，使其在生物医用领域得以推广应用。本改性方法广泛适用于聚乙烯(PE)、聚丙烯(PP)、聚偏氟乙烯(PVDF)和聚四氟乙烯(PTFE)等聚合物平板膜和中空纤维膜。本发明所述聚合物微孔膜表面改性方法主要由反应溶液的配制、多巴类化合物表面自聚-复合、表面生物分子固定和膜清洗干燥四个步骤实现，其过程如附图1所示。

(1)反应溶液的配制

①多巴类化合物溶液的配制

将多巴或多巴胺溶解于三羟甲基氨基甲烷-盐酸(又称为Tris-HCl)缓冲溶液中，得到一定浓度的多巴类化合物溶液，溶液PH值为7.5～10，溶液浓度为0.2～2.5克/升，多巴类化合物为3，4-二羟基苯丙氨酸或4-(2-乙胺基)苯-1，2-二醇。3，4-二羟基苯丙氨酸又称为多巴，具有如下表示的化学结构：

4-(2-乙胺基)苯-1，2-二醇又称为多巴胺，具有如下表示的化学结构：

②生物分子溶液的配制

将BSA或肝素溶解于pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液(0.01摩尔/升)中，得到生物分子溶液，生物分子溶液浓度为0.25～2.0克/升。

(2)多巴类化合物表面自聚-复合

将待改性的聚合物微孔膜在乙醇(浓度为95％)中浸泡1小时，取出置于多巴类化合物溶液中进行反应，在膜表面形成自聚的多巴类化合物复合层，反应温度为10～60℃，反应时间为0.5～100小时；

(3)表面生物分子固定

将多巴类化合物表面自聚-复合的聚合物微孔膜浸泡在生物分子溶液中，通过膜表面的儿茶酚基团与生物分子中氨基之间的加成反应进行耦合，将生物分子固定到微孔膜表面，反应温度为4～30℃，反应时间为6～42小时，生物分子为肝素或牛血清白蛋白(BSA)；

(4)膜清洗干燥

将改性膜在去离子水中振荡清洗，再真空干燥，清洗振荡频率60～80次/分钟，清洗时间24～96小时，清洗温度4～30℃，干燥温度4～30℃。

通过膜孔结构观察、水接触角测量、水通量测定、血小板粘附实验和肝细胞培养实验对改性聚合物微孔膜的结构和性能进行表征。

本发明中聚合物微孔膜结构与性能的表征方法分别为：

膜孔结构表征：采用扫描电子显微镜(XL-30-ESEM)观察，观察之前先将样品真空镀金。

水通量：平板膜的水通量测量在超滤杯中进行，中空纤维膜的水通量测定采用外压法测量，测量压力均为0.1兆帕斯卡，未改性膜在测定之前用乙醇浸泡1小时。

水接触角：聚合物微孔膜的表面水接触角采用接触角测量仪(DataphysicsOCA20，德国)，通过座滴法测定。

蛋白质吸附：改性前、后聚合物微孔膜的抗蛋白质吸附性能采用BSA在膜表面的吸附量来表征。首先，配制不同浓度BSA(浓度分别为0.1，0.3，0.5，0.8，1.2，1.8，2.5克/升)的磷酸缓冲溶液(PBS，PH＝7.4)，利用紫外分光光度计(UV-1601，日本岛津制作所生产)测定BSA溶液在280纳米处的吸光度，绘制吸光度-BSA浓度标准曲线。然后剪取一定面积的膜样品，浸入装有10毫升浓度为0.5克/升BSA磷酸缓冲液的试管中，在30℃的恒温水浴中振荡24小时。吸附完成后用定量的去离子水充分冲洗膜，冲洗液与吸附液合并，用紫外分光光度计分别测定280纳米处BSA吸附前后溶液吸光度的变化，根据标准曲线和溶液总量计算BSA在单位面积膜上的吸附量。

血小板粘附实验：在室温下，用微量进样器将富含血小板的成人血浆滴加在膜片上粘附30分钟，然后用磷酸缓冲溶液(PBS，pH 7.2)清洗膜片，除去吸附不牢固的血小板。将膜片浸入戊二醛溶液中固定30min，然后用三蒸水清洗膜片，并用乙醇/水梯度溶液脱水。冷冻干燥后喷金，使用环境扫描电子显微镜(XL-30-ESEM)观察。

肝细胞培养实验：将大鼠肝细胞接种于平板膜上或中空纤维膜内，每24小时更换一次培养基，样品用含2.5％戊二醛的磷酸缓冲溶液固定后，肝细胞的形态使用环境扫描电镜(XL-30-ESEM)观察。

下面将结合实施例和附图对本发明做更详细的描述，但所述实施例不构成对本发明的限制。从本发明公开的内容联想到或导出的所有变形，均认为是本发明的保护范围。

实施例1：

将多巴溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中，配成pH值为7.5，浓度为0.2克/升的多巴溶液；将肝素溶解在0.01摩尔/升的磷酸缓冲液中，配成肝素溶液，溶液pH值为7.4，溶液浓度为0.25～2.0克/升；剪取洗净烘干的PE平板微孔膜(拉伸法制备，平均孔径0.5微米)5×5cm²，在95％乙醇中浸泡1小时，取出置于上述多巴溶液中振荡反应100小时，振荡频率为60次/分钟，反应温度为10℃，得到多巴复合改性的PE平板微孔膜；将多巴复合改性的PE平板微孔膜浸泡在上述肝素溶液中反应至设定时间，将膜取出置于去离子水中振荡清洗，再真空干燥，清洗振荡频率60次/分钟，清洗时间24小时，清洗温度4℃，干燥温度4℃。

PE原膜与改性膜的性能表征数据见表1，PE原膜、多巴改性膜以及1-1号膜表面血小板粘附后的SEM图分别见附图2中(a)、(b)和(c)。

表1：PE平板微孔膜固定肝素前、后性能数据

编号	肝素溶液浓度(g/L)	反应温度(℃)	反应时间(h)	水接触角/°	水通量(L/m2·h)	BSA吸附里(μg/cm2)
							PE原膜	-	-	-	122.1	245.5	153.5
多巴改性膜	-	-	-	72.0	286.4	35.6
							1-1	0.25	4	42	63.6	186.7	25.1
1-2	0.50	20	12	53.3	156.4	18.7
							1-3	2.00	30	6	52.5	198.9	19.8

实施例2：

将多巴胺溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中，配成pH值为7.5，浓度为0.2克/升的多巴胺溶液；将肝素溶解在0.01摩尔/升的磷酸缓冲液中，配成肝素溶液，溶液pH值为7.4，溶液浓度为0.25～2.0克/升；剪取20根长为10cm的PP中空纤维微孔膜(拉伸法制备，平均孔径0.15微米)，洗净烘干，在95％乙醇中浸泡1小时后置于上述多巴胺溶液中，振荡反应0.5小时，振荡频率为80次/分钟，反应温度为60℃，得到多巴胺复合改性的PP中空纤维膜；将多巴胺复合改性的PP中空纤维膜浸泡在前述肝素溶液中反应至设定时间，将膜取出置于去离子水中振荡清洗，清洗振荡频率80次/分钟，清洗时间96小时，清洗温度30℃，再真空干燥，干燥温度30℃。

PP中空纤维原膜与多巴胺改性以及肝素固定改性后的中空纤维膜性能表征数据见表2。

表2：PP中空纤维微孔膜在多巴胺和肝素固定改性前、后性能比较

编号	肝素溶液浓度(g/L)	反应温度(℃)	反应时间(h)	水接触角/°	水通量(L/m2·h)	BSA吸附量(μg/cm2)
							PP原膜	-	-	-	125.5	65.2	123.5
多巴胺改性膜	-	-	-	52.1	197.8	25.8
							2-1	0.25	4	6	57.1	156.7	20.4
2-2	1.00	10	24	51.8	141.9	19.1

编号	肝素溶液浓度(g/L)	反应温度(℃)	反应时间(h)	水接触角/°	水通量(L/m2·h)	BSA吸附量(μg/cm2)
							2-3	2.00	30	42	42.9	135.7	16.8

实施例3：

将多巴溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中，配成pH值为10.0，浓度为2.0克/升的多巴溶液；将BSA溶解在0.01摩尔/升的磷酸缓冲液中，配成BSA溶液，溶液pH值为7.4，溶液浓度为0.25～2.0克/升；剪取10根长为10cm的PVDF中空纤维微孔膜(干-湿纺丝法制备，平均孔径0.1微米)，用去离子水充分洗净并烘干，在工业乙醇中浸泡1小时后置于前述多巴溶液中，振荡反应24小时，振荡频率为70次/分钟，反应温度为60℃，得到多巴复合改性的PVDF中空纤维膜；将多巴复合改性的PVDF中空纤维膜浸泡在上述BSA溶液中反应至设定时间，将膜取出置于去离子水中振荡清洗，清洗振荡频率70次/分钟，清洗时间48小时，清洗温度25℃，再真空干燥，干燥温度25℃。

PVDF中空纤维原膜与多巴改性以及BSA固定改性后的中空纤维膜性能表征数据见表3，PVDF原膜、多巴改性膜以及3-1号膜表面肝细胞培养后的SEM图分别见附图3中(a)、(b)和(c)。

表3：PVDF中空纤维微孔膜在多巴和BSA固定改性前、后的性能比较

编号	BSA溶液浓度(g/L)	反应温度(℃)	反应时间(h)	水接触角/°	水通量(L/m2·h)	BSA吸附里(μg/cm2)
							PVDF原膜	-	-	-	95.2	190.5	197.5
多巴改性膜	-	-	-	68.7	257.1	39.1
							3-1	0.25	4	42	59.6	296.5	20.1
3-2	1.50	25	24	65.3	234.1	10.9
							3-3	2.00	30	6	61.2	210.2	12.1

实施例4：

将多巴胺溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中，配成pH值为10.0，浓度为2.0克/升的多巴胺溶液；将BSA溶解在0.01摩尔/升的磷酸缓冲液中，配成BSA溶液，溶液pH值为7.4，溶液浓度为0.25～2.0克/升；剪取5张充分洗净并烘干的PTFE平板微孔膜(拉伸法制备，平均孔径1.5微米)，每张大小为5×5cm²，在95％乙醇中浸泡1小时，取出置于前述多巴胺溶液中振荡反应48小时，振荡频率为60次/分钟，反应温度为10℃，得到多巴胺复合改性的PTFE微孔膜；将多巴胺复合改性的PTFE微孔膜浸泡在前述BSA溶液中反应至设定时间，将膜取出置于去离子水中振荡清洗，再真空干燥，清洗振荡频率60次/分钟，清洗时间48小时，清洗温度4℃，干燥温度4℃。

PTFE原膜与改性膜的性能表征数据见表4。

表4：PTFE平板微孔膜在多巴胺和BSA固定改性前、后的性能比较

编号	BSA溶液浓度(g/L)	反应温度(℃)	反应时间(h)	水接触角/°	水通量(L/m2·h)	BSA吸附里(μg/cm2)
							PTFE原膜	-	-	-	133.2	205.1	251.7
多巴胺改性膜	-	-	-	61.3	480.4	56.1
							4-1	0.25	4	24	58.6	520.9	27.2
4-2	1.00	20	42	63.2	442.4	16.2
							4-3	2.00	30	6	61.5	380.1	15.1

Claims (6)

1.一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将含有儿茶酚基团和氨基的多巴类化合物溶解在三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液中，得到多巴类化合物溶液，溶液pH值为7.5～10，溶液浓度为0.2～2.5克/升；

(2)将生物分子溶解在0.01摩尔/升的磷酸缓冲液中，配成生物分子溶液，溶液pH值为7.4，生物分子溶液浓度为0.25～2.0克/升；

(3)将在乙醇中浸泡1小时的聚合物微孔膜浸泡在上述多巴类化合物溶液中进行反应，在膜表面形成自聚的多巴类化合物复合层，反应温度为10～60℃，反应时间为0.5～100小时，得到多巴类化合物改性的聚合物微孔膜；

(4)将多巴类化合物改性的聚合物微孔膜浸泡在上述生物分子溶液中，通过膜表面的儿茶酚基团与生物分子中氨基之间的加成反应进行耦合，将生物分子固定在聚合物微孔膜表面，反应温度为4～30℃，反应时间为6～42小时；

(5)将生物分子固定后的聚合物微孔膜在去离子水中振荡清洗，再真空干燥，清洗振荡频率60～80次/分钟，清洗时间24～96小时，清洗温度4～30℃，干燥温度4～30℃。

2.根据权利要求1所述的一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法，其特征在于，所述的多巴类化合物为3，4-二羟基苯丙氨酸或4-(2-乙胺基)苯-1，2-二醇。

3.根据权利要求1所述的一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法，其特征在于，所述的聚合物微孔膜为聚乙烯、聚丙烯、聚偏氟乙烯或聚四氟乙烯微孔膜。

4.根据权利要求1所述的一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法，其特征在于，所述的聚合物微孔膜的形状为平板膜或中空纤维膜。

5.根据权利要求1所述的一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法，其特征在于，所述的聚合物微孔膜平均孔径为0.1～1.5微米。

6.根据权利要求1所述的一种在聚合物微孔膜表面固定生物分子的方法，其特征在于，所述的生物分子为牛血清白蛋白或肝素。

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