CN101638629B

CN101638629B - 一种防治水稻细菌性病害的蛭弧菌及其应用

Info

Publication number: CN101638629B
Application number: CN200910042277XA
Authority: CN
Inventors: 蔡俊鹏; 韩晓宁
Original assignee: South China University of Technology SCUT
Current assignee: South China University of Technology SCUT
Priority date: 2009-08-28
Filing date: 2009-08-28
Publication date: 2011-04-06
Anticipated expiration: 2029-08-28
Also published as: CN101638629A

Abstract

本发明公开了一种防治农作物细菌性病害的蛭弧菌及其应用。本发明通过分离、紫外诱变得到蛭弧菌BDFM05。将蛭弧菌BDFM05与寡糖联用，得到防治农作物细菌性病害的菌剂。本发明首次将蛭弧菌BDFM05用于防治农作物细菌性病害。利用此蛭弧菌制备的菌剂对水稻的防治农作物细菌性病害的效果优于常用的噻森铜，而且无毒，无污染，对农作物病虫害天敌安全，不产生病原菌抗性，对人和动物无毒副作用，提高农产品品质和安全性，符合人民对食品健康绿色的需求和农业生产可持续发展的要求。

Description

一种防治水稻细菌性病害的蛭弧菌及其应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种防治水稻细菌性病害的蛭弧菌及其应用。

背景技术

农作物细菌性病害是世界性常发流行性病害，其中很多细菌性病害被列为植物检疫性病害，其危害程度比真菌性病害更加严重和难以防治。随着全球气候异常和局部变暖，台风、暴雨和热气流逐年发生，为细菌性病害的加重发生创造了外部的气候条件。随着耕地减少而导致复种指数在提高和复种面积在增加，大量的耕地无法得到休耕和轮作，土壤中累积的病原菌和病原菌基数逐步增加。

水稻细菌性病害是水稻生长过程中主要的一类病害，而其中以水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病危害最严重。目前水稻细菌性病害的防治仍以化学防治为主，能够有效防治水稻细菌病害的杀菌剂品种还比较缺乏，且防治药剂活性低。而且，由于长期使用导致很多病原菌已产生了非常严重的抗药性，导致药效非常差。有些制剂虽不产生抗药性，但是药效极其不稳定，经常出现防治效果不理想的状况。同时农用抗生素在环境中的残留和在食物链的传递中逐步累积，引起人体疾病的病原菌对抗生素药物产生抗药性。

生物农药一般是指用生物活体或其代谢产物防治病虫害的药剂，与化学农药相比生物农药具有以下优点：无残留、无公害、不污染环境、特性强即专一性作用于靶标有害生物，生物农药具有化学农药不可比拟的优点。

具有寄生特性的蛭弧菌是一种近年来研究的用于消除环境病原菌的有效工具，它以细菌为宿主，能够裂解消除病原菌，且裂解谱广泛，定植能力强，繁殖快，利用它作为环境中的天然生物改良剂和“活性抗生素”，在防治农作物细菌性病害中具有广阔的发展前景。到目前为止，已经开发出蛭弧菌应用于水产养殖中病原菌消除的产品，但尚未见蛭弧菌用于防治农作物细菌性病害的有效方法。

发明内容

为了克服现有技术中针对农作物细菌性病害特别是水稻细菌性病害没有较高防效的生防菌株制剂现状的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种防治水稻细菌性病害的蛭弧菌。

本发明的另一目的在于提供所述蛭弧菌的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种防治水稻细菌性病害的蛭弧菌，名称为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，于2009年8月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 209172；

对所述蛭弧菌BDFM05进行负染后于电子显微镜下形态观察(见图1)：BDFM05呈单细胞，椭圆形，大小为1.43×0.53μm，端生鞭毛，鞭毛长度至少2μm；所述蛭弧菌BDFM05以双层平板法于28℃培养三天可形成直径2～3mm的透明圆形噬菌斑；

所述蛭弧菌BDFM05最适pH值为7.0、最适盐度为0.2％、最适温度为28℃；

所述蛭弧菌BDFM05是由野生型蛭弧菌BDS02经紫外诱变得到；

所述蛭弧菌BDS02自泥样中分离得到，于2009年8月7日保藏于中国武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M209170；对其进行负染后于电子显微镜下形态观察可见BDS02呈单细胞，弧形，大小为0.65×0.2μm，端生鞭毛，鞭毛长度至少1.8μm；将其以双层平板法于28℃培养四天可形成直径1-2mm的透明圆形噬菌斑；

所述紫外诱变依据申请号“2008100220488.3”，名称为“紫外诱导突变在增强蛭弧菌裂解性能中的应用”的国家发明专利申请中的方法进行；

蛭弧菌BDFM05的16S-ITS rDNA序列如下(如序列表SEQ ID：No.1所示)：CAGGCCTAACACATGCAAGTCGAACGGGGTAGCAATACCTAGTGGCGCACGGGTGAGTAACGCGTGGATAATCTGCCTTGGAGTGGGGGATAACTAGTCGAAAGATTAGCTAATACCGCATAAGACCACAGGAGCTGCGGCTCTAGGGGTCAAAGGTTTTTCGTTCCAAGATGAGTCCGCGTAAGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGATCTTTAACTGGTCTGAGAGGATGATCAGTCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATATTGCACAATGGAGGAAACTCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCTTCGGGTCGTAAAGCTCTGTCGCAGGGGAATAACACAATGAATGTACCCTGTAAGAAAGGATCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAAGACGAGGGATCCTAGCGTTGTTCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGGATGTAGGTGGCTTTGTAAGTCAGATGTGAAAGCCCAGGGCTCAACCCTGGAAGTGCATTTGATACTGCGAAGCTTGAGTGTCGGAGAGGTTACTAGAATTGTTGGTGTAGTGGTGAAATACGTAGATATCAACAGGAATACCGGAGGCGAAGGCGGGTAACTGGCCGAACACTGACACTGAGATCCGAAAGCGTGGGGATCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGGATACTTGTTGTTAGAGGTATTGACCCCTTCAGTGACGAAGCTAACGCGTTAAGTATCCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTAGGCTTGACATGTACTGGAAGATTGGCAGAAATGTCGTCGCCCGCAAGGGTCGGTACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCCTGCATTTAGTTGCCAGCATTCAGTTCGGCACTCTAGATGGACTGCCGGTGTTAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTATGCCTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGTAGTCACAGAGCGAAGCTAAGCCGCGAGGTAGAGCAAATCGCTTAAAAGCTATCTAAGTTCAGATTGATCTCTGCAACTCGAGATCATGAAGTTGGAATCGCTAGTAATCGCGGAACAGAATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAAAGTCGGCTGTACCAGAAGTCGCTGCGCTAACCGTAAGGAGGCAGGCGCCCAAGGTATGGTCGATGATTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGGAGCCGTAGGGGAACCTGCGGCTGGATCACCTCCTTTCTAAGGTTTATCCGGTCAATCTTCATCAAGACTTGTTCTTGATAAGTTAAAATGACCCAATCTTAGGTCAACTTACTCTTCCCGAGTAAGTGAGTCCCAAAAATCTATCTAGCTGTTTAGTTTTGAGAGAGTGAAGCCTAACGGGCCTGTAGCTCAGTTGGTTACAGCACACGCTTGATAAGCGTGGGGTCGGAAGTTCGAGTCTTCCCAGGCCCACCAAGTTCTACTGTACTGGAATGCGGTGTAAGTTAGAGTTTTGCTGAACGGTTTTCGTTCTTTGACATTTGAATAGATTGATTTAGTTGATTTTTAGCGAGGTTAGTTCCATTCTTTTAAGCTACAAAGGGCTTACGGTGGATGCCCTGGCAGTCA

一种防治水稻细菌性病害的微生物菌剂，含有所述的蛭弧菌BDFM05；

所述微生物菌剂还含有寡糖；

所述微生物菌剂优选每升溶液中含10⁶～10¹²pfu(plaque-forming units，噬菌斑形成单位)的蛭弧菌和10～30g寡糖；

所述寡糖优选为壳寡糖或琼胶寡糖中的一种或两种；

所述防治水稻细菌性病害的菌剂的制备方法，包括以下步骤：将蛭弧菌菌液的浓度调整为10⁶～10¹²pfu/L后加入寡糖，寡糖的加入量为10～30g/L，混匀，得到防治农作物细菌性病害的菌剂；

所述蛭弧菌菌液为蛭弧菌蛭质体菌液或蛭弧菌游泳体菌液中的至少一种；

所述蛭弧菌菌液优选为蛭弧菌蛭质体菌液和蛭弧菌游泳体菌液按细菌数1∶1混合；

所述的蛭弧菌蛭质体为蛭弧菌存在于宿主菌内的状态；

所述的蛭弧菌游泳体为蛭弧菌游离在宿主菌外部的状态；

所述的蛭弧菌蛭质体菌液优选通过以下方法制备：接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物所菌种保藏中心，编号GIM1.172)于LB(Luria-Bertani)液体培养基中，26～30℃培养20h，培养液经5000～8000rpm离心10～20min后，沉淀加入至DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，28℃培养36～48h，培养液经6000～8000rpm离心15～20min后，去除含蛭弧菌游泳体的上清，沉淀用DNB液体培养基、水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2～7.6的磷酸盐缓冲液悬浮，得到蛭弧菌蛭质体菌液；

所述蛭弧菌游泳体菌液的制备方法为将蛭弧菌蛭质体制备方法中的含蛭弧菌游泳体的上清经16000～18000rpm离心15～20min后，沉淀用DNB液体培养基、水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2～7.6的磷酸盐缓冲液悬浮，得到蛭弧菌游泳体菌液；

所述寡糖优选为壳寡糖或琼胶寡糖中的一种或两种；

所述防治农作物细菌性病害的菌剂的应用，是将所述菌剂喷洒植株的茎、叶或穗。

本发明的原理：本发明利用蛭弧菌以细菌为宿主，能够裂解消除病原菌，且裂解谱广泛，定植能力强，繁殖快、寡糖能够与农作物植株信号转导分子结合，是植物获得性抗病诱导剂，使植株获得系统、长久、广谱的抗性的特点，在使用蛭弧菌消除病原菌的同时，添加能够提高农作物获得性抗性的寡糖，使防效更加稳定持久，解决了过去采用抗菌素防治细菌性病害带来的药残及抗性等问题。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

1.本发明首次将蛭弧菌BDFM05应用于水稻细菌性病害的防治，填补国内外蛭弧菌研究开发的空白，增加了生物农药的新种类。蛭弧菌具有裂解谱广，生长迅速的特点，对多种细菌病原菌具有优异的消灭能力。寡糖与之联用后，增强水稻抗性，药效大幅提高，从而高效防治水稻细菌性病害。试验表明，用于防治水稻白叶枯病，施药21天后防效达到73.9％，优于20％噻森铜防效(图4)。

2.本发明所制备的制剂无毒，无污染，对农作物病虫害天敌安全，而且病原菌基本不对其产生抗性，对人和动物无毒副作用，提高农产品品质和安全性，符合人民对食品健康绿色的需求和农业生产可持续发展的要求。

附图说明

图1是蛭弧菌BDFM05进行负染后于电子显微镜下观察到的形态图。

图2是实施例1制备的防治水稻细菌性病害的微生物菌剂防治水稻细菌性基腐病效果图。

图3是实施例2制备的防治水稻细菌性病害的微生物菌剂防治水稻细菌性褐斑病效果图。

图4是实施例3制备的防治水稻细菌性病害的微生物菌剂防治水稻细菌性白叶枯病效果图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

(1)通过紫外诱变方法得到蛭弧菌BDFM05

出发菌株为蛭弧菌BDS02，BDS02是本实验室自泥样中分离得到的，并于2009年8月7日保藏于中国武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 209170；对其进行负染后于电子显微镜下形态观察可见BDS02呈单细胞，弧形，大小为0.65×0.2μm，端生鞭毛，鞭毛长度至少1.8μm；；将其以双层平板法于28℃培养四天可形成直径1-2mm的透明圆形噬菌斑；

将蛭弧菌BDS02依据申请号“2008100220488.3”，名称为“紫外诱导突变在增强蛭弧菌裂解性能中的应用”的国家发明专利申请中的方法，在紫外灯功率15W，辅助红外光源的功率为20W，照射距离为15cm，诱变时间4min的条件下，六次累加诱变后，筛选得到诱变株BDFM05。

对蛭弧菌BDFM05进行负染后于电子显微镜下形态观察(见图1)：BDFM05呈单细胞，椭圆形，大小为1.43×0.53μm，端生鞭毛，鞭毛长度至少2μm；所述蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05以双层平板法于28℃培养三天可形成直径2～3mm的透明圆形噬菌斑；

蛭弧菌BDFM05于2009年8月7日在位于中国武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 209172。

相对于野生株BDS02，诱变株BDFM05可以裂解更多的革兰氏阴性和阳性菌，其中包括：嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，GIM 1.172)、大肠杆菌(E.coli，GIM 1.137)、欧文氏菌(Erwinia sp.，CGMCC 1.1215)、沙门氏菌(Salmonella sp.，GIM 1.244)、李斯特菌(Listeria monocytogenes，GIM 1.298)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，GIM 1.143)、停乳链球菌(Streptococcusdysgalactiae，ATCC35666)、密执安棍状杆菌(Clavibacter michiganensis，CGMCC 1.1909)、谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum，GIM 1.297)、珊瑚色诺卡氏菌(Nocardia coralline，GIM 4.78)和生孢梭菌(Clostridiumsporogenes，ATCC11437)等。

(2)防治农作物细菌性病害的菌剂的制备

接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物所菌种保藏中心，编号GIM1.172)于LB液体培养基中，28℃培养20h，培养液经6000rpm，15min离心浓缩后，将沉淀加入至DNB液体培养基(营养肉汤0.8g，酪蛋白酸水解物0.5g，酵母精提物0.1g，NaCl 30g，溶于1000mL蒸馏水中，pH值为7.2～7.6)中，接入蛭弧菌BDFM05，28℃培养36h，培养液经6000rpm，15min离心后，去除含蛭弧菌游泳体的上清，沉淀用适量DNB液体培养基悬浮，制成浓度为10⁶pfu/L的蛭弧菌蛭质体菌液。

在所得的蛭弧菌蛭质体菌液中加入壳寡糖使之浓度为15g/L，混匀，得到防治水稻细菌性病害的菌剂。

(3)将菌剂用于防治水稻细菌性基腐病

试验田位于广州市天河区岑村水稻田，肥力中等，试验所用水稻品种为晚稻协优85。水稻处于拔节期，试验田块为常发病田块。试验期间日平均气温22.1～29.5℃，相对湿度90～95％。随机选择小区，每个小区2m²，每小区种植水稻20穴。清水设三个小区，作为空白对照，对照药剂为20％噻森铜稀释500倍液。

在基腐病发病初期，即水稻近土表茎基部或叶鞘上产生水浸状椭圆形零星斑时按小区施用实施例1中制备的防治水稻细菌性病害的制剂，用量为200mL/m²，使用手压喷雾器喷雾茎叶，重复2个小区。以后每隔10d喷洒1次，连续3次。第3次施药后第21d查防治效果。

防效检查时均采用五点取样，每个取样点选取2株水稻，每株选取旗叶及旗叶以下两片叶，参照农药田间药效试验准则进行试验调查和计算防效。

试验显示，使用蛭弧菌防治水稻细菌性病害效果显著，施用蛭弧菌-寡糖菌剂后仅在第一天出现少量病斑，2d后，病情不再扩大，病情得到控制，以后病害几乎不再发展。蛭弧菌BDFM05与寡糖联用所制得的制剂防效均优于20％噻森铜稀释500倍液的防效，防治效果如图2所示。用菌剂处理后的水稻不见药害产生，植株挺拔健壮，叶子舒展，长势良好，生长状况优于喷洒20％噻森铜500倍液。

实施例2

(1)防治农作物细菌性病害的菌剂的制备

接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物所菌种保藏中心，编号GIM1.172)于LB液体培养基中，26℃培养20h，培养液经7000rpm，10min离心浓缩后，将沉淀加入至DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，28℃培养40h，培养液经8000rpm，18min离心后，取上清液再经16000rpm，20min离心后，沉淀用适量生理盐水悬浮，制成浓度为10⁸pfu/L的蛭弧菌游泳体菌液。

在所得的蛭弧菌游泳体菌液中加入琼胶寡糖使之浓度为20g/L，混匀，得到防治水稻细菌性病害的制剂。

(2)将菌剂用于防治水稻细菌性褐斑病

在褐斑病发病初期，即稻田出现褐色水浸状零星小斑时按小区施用实施例2中制备的防治水稻细菌性病害的制剂，用量为180mL/m²，使用手压喷雾器喷雾茎叶，叶面和叶背都均匀喷到，重复2个小区。以后每隔10d喷洒1次，连续3次。第3次施药后第21d查防治效果。

防效检查时均采用五点取样，每个取样点选取2株水稻，每株选取旗叶及旗叶以下两片叶，参照农业部农药检定所，参照农药田间药效试验准则进行试验调查和计算防效。

试验显示，使用蛭弧菌防治水稻细菌性病害效果显著，施用蛭弧菌-寡糖菌剂后仅在第一天出现少量病斑，2d后，病情不再扩大，病情得到控制，以后病害几乎不再发展。蛭弧菌BDFM05与寡糖联用所制得的制剂防效均优于20％噻森铜稀释500倍液的防效，防治效果如图3所示。用菌剂处理后的水稻不见药害产生，植株挺拔健壮，叶子舒展，长势良好，生长状况优于喷洒20％噻森铜500倍液。

实施例3

(1)防治农作物细菌性病害的菌剂的制备

接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物所菌种保藏中心，编号GIM1.172)于LB液体培养基中，30℃培养20h，培养液经5000rpm，20min离心浓缩后，加入至磷酸盐缓冲液(0.2mol/L，pH7.2～7.6)中，接入蛭弧菌BDFM05，28℃培养42h，培养液即为蛭质体、游泳体混合菌液，经检测其中蛭质体与游泳体浓度比为1∶1，菌液浓度为10¹⁰pfu/L。

在所得菌液中加入壳寡糖、琼胶寡糖使之浓度分别为15g/L，混匀，得到防治水稻细菌性病害的制剂。

(2)将菌剂用于防治水稻细菌性白叶枯病

在白叶枯病发病初期，即稻田出现暗绿色水浸状线状零星斑时按小区施用实施例3中制备的防治水稻细菌性病害的制剂，用量为250mL/m²，使用手压喷雾器喷雾茎叶，叶面和叶背都均匀喷到，重复2个小区。以后每隔10d喷洒1次，连续3次。第3次施药后第21d查防治效果。

试验显示，使用蛭弧菌防治水稻细菌性病害效果显著，施用蛭弧菌-寡糖菌剂后仅在第一天出现少量病斑，2d后，病情不再扩大，病情得到控制，以后病害几乎不再发展。蛭弧菌BDFM05与寡糖联用所制得的制剂防效均优于20％噻森铜稀释500倍液的防效，防治效果如图4所示。用菌剂处理后的水稻不见药害产生，植株挺拔健壮，叶子舒展，长势良好，生长状况优于喷洒20％噻森铜500倍液。

实施例4

防治农作物细菌性病害的菌剂的制备，具体过程如下：

接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物所菌种保藏中心，编号GIM1.172)于LB液体培养基中，28℃培养20h，培养液经5000rpm，20min离心浓缩后，加入至无菌的DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，28℃培养48h，培养液即为蛭质体、游泳体混合菌液，经检测其中蛭质体与游泳体浓度比为3∶2，菌液浓度为10¹¹pfu/L。

在所得菌液中加入壳寡糖、琼胶寡糖使之浓度分别为10g/L，20g/L，混匀，得到防治水稻细菌性病害的制剂。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

SEQUENCE LISTING

<110>华南理工大学

<120>一种防治水稻细菌性病害的蛭弧菌及其应用

<130>6

<160>1

<170>PatentIn version 3.2

<210>1

<211>1835

<212>DNA

<213>蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)

<400>1

caggcctaac acatgcaagt cgaacggggt agcaatacct agtggcgcac gggtgagtaa 60

cgcgtggata atctgccttg gagtggggga taactagtcg aaagattagc taataccgca 120

taagaccaca ggagctgcgg ctctaggggt caaaggtttt tcgttccaag atgagtccgc 180

gtaagattag ctagttggtg aggtaatggc tcaccaaggc gacgatcttt aactggtctg 240

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ccttcgggtc gtaaagctct gtcgcagggg aataacacaa tgaatgtacc ctgtaagaaa 420

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atcgcttaaa agctatctaa gttcagattg atctctgcaa ctcgagatca tgaagttgga 1260

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cgcccgtcac accatgaaag tcggctgtac cagaagtcgc tgcgctaacc gtaaggaggc 1380

aggcgcccaa ggtatggtcg atgattgggg tgaagtcgta acaagggagc cgtaggggaa 1440

cctgcggctg gatcacctcc tttctaaggt ttatccggtc aatcttcatc aagacttgtt 1500

cttgataagt taaaatgacc caatcttagg tcaacttact cttcccgagt aagtgagtcc 1560

caaaaatcta tctagctgtt tagttttgag agagtgaagc ctaacgggcc tgtagctcag 1620

ttggttacag cacacgcttg ataagcgtgg ggtcggaagt tcgagtcttc ccaggcccac 1680

caagttctac tgtactggaa tgcggtgtaa gttagagttt tgctgaacgg ttttcgttct 1740

ttgacatttg aatagattga tttagttgat ttttagcgag gttagttcca ttcttttaag 1800

ctacaaaggg cttacggtgg atgccctggc agtca 1835

Claims

1.一种防治农作物细菌性病害的蛭弧菌，其特征在于：所述蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，于2009年8月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 209172。

2.一种防治农作物细菌性病害的菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述的防治农作物细菌性病害的蛭弧菌BDFM05。

3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于：所述菌剂含有寡糖。

4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于：每升所述菌剂中含10⁶～10¹²pfu的蛭弧菌和10～30g寡糖。

5.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于：所述寡糖为壳寡糖或琼胶寡糖中的一种或两种。

6.权利要求4或5所述防治农作物细菌性病害的菌剂的制备方法，其特征在于：将蛭弧菌调整为浓度10⁶～10¹²pfu/L的蛭弧菌菌液后加入寡糖，寡糖的加入量为10～30g/L，混匀，得到防治农作物细菌性病害的菌剂。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述蛭弧菌菌液为蛭弧菌蛭质体菌液或蛭弧菌游泳体菌液中的一种或两种。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述蛭弧菌菌液为蛭弧菌蛭质体菌液和蛭弧菌游泳体菌液按细菌数1∶1混合。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述的蛭弧菌蛭质体菌液通过以下方法制备：接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)于LB液体培养基中，26～30℃培养20h，培养液经5000～8000rpm离心10～20min后，沉淀加入至DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，28℃培养36～48h，培养液经6000～8000rpm离心15～20min后，去除含蛭弧菌游泳体的上清，沉淀用溶液悬浮，得到蛭弧菌蛭质体菌液；

所述蛭弧菌游泳体菌液的制备是将含蛭弧菌游泳体的上清于经16000～18000rpm离心15～20min后，沉淀用溶液悬浮，得到蛭弧菌游泳体菌液；

所述溶液为DNB液体培养基、水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2～7.6的磷酸盐缓冲液。

10.权利要求2～5任一项所述菌剂的应用，其特征在于：将所述菌剂喷洒植株的茎、叶或穗，用于防治水稻细菌性基腐病、水稻细菌性褐斑病和水稻细菌性白叶枯病。