CN101999324B - 一种稚鲍养殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种稚鲍养殖方法,养殖过程如下:(1)在养殖池内铺砖,然后注入海水;(2)稚鲍下池,同时开始曝气;(3)定期投喂饵料,并在养殖水体中和/或投喂的饵料中添加蛭弧菌游泳体菌液;且每5-30天换水一次,每次换水量为一个量程;(4)当稚鲍体长达到1.0-1.6cm时,即可采收稚鲍;所述蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05,由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M209172,保藏日期为2009年8月7日。本发明的优点有:(1)能节能减排,更环保;(2)蛭弧菌游泳体控制和消除稚鲍致病菌起效快、活力强;(3)能够明显改善稚鲍体质,增强免疫力。
Description
技术领域
本发明涉及海水贝类养殖技术领域,特别涉及一种提高稚鲍养殖成活率、节水节能、绿色环保的养殖方法。
背景技术
鲍的肉质细嫩,味道鲜美,含有丰富的蛋白质,历来是水产养殖的佳品,其贝壳“石决明”是名贵的中药材。我国的鲍养殖研究从20世纪70年代开始起步,经过近三十年的发展,取得了巨大的成绩和显著的经济效益。近年来,随着稚鲍人工养殖规模的扩大,技术上的缺陷也逐渐凸显出来,在养殖过程中,特别是在稚鲍剥离后,容易引发一些稚鲍疾病,2010年在辽宁、山东等地继2007年以来再次爆发大规模的流行病,许多养殖场在稚鲍剥离后出现大批量的死亡现象,有些养殖场死亡率甚至高达90%,给养殖户带来了巨大的经济损失。病原体感染是引起稚鲍死亡的主要原因,人工养殖环境下主要是细菌性疾病和病毒性疾病。常见的致病菌有副溶血弧菌、河流弧菌、副溶藻弧菌等。副溶血弧菌主要导致稚鲍肌肉萎缩病,死亡率可达50%左右,而河流弧菌和副溶藻弧菌引发的感染导致的死亡率高达60-70%。
目前常规的防治稚鲍掉板的方法主要是定期施用抗生素,抗生素虽然具有药物直接入水、浓度高、吸收快、疗效好的优点,但缺点是可能对稚鲍产生刺激性、引发新病症。如果长期大量使用抗生素不仅会使致病菌耐药菌株增加,也会使一些鲍病例变得难以治愈。此外鲍体内抗生素残留会影响稚鲍品质,不利于销售,进而造成养殖者的经济损失。中草药防治稚鲍掉板也是一种常见的办法,具有无药物残留、经济效益高的优点,但也有见效慢的缺点,因而寻求一种更高效、经济的办法显得极为迫切。
蛭弧菌游泳体是指蛭弧菌侵入宿主细菌前的生长形式。蛭弧菌游泳体侵入宿主细菌的过程非常快,一般几秒钟内即可完成。“绿色养殖”成为近年来许多养殖户的迫切需求,引起水产界的广泛关注。目前,用蛭弧菌游泳体来进行稚鲍养殖的方式在国内外尚未报道。
已有的研究表明,作为一种有益微生物制剂,无论是在食品工业还是在(海洋)水产养殖等领域,蛭弧菌的应用均是安全的。例如:在国外,Lenz and Hespell(1978)研究发现,蛭弧菌及对动物及人的细胞不具侵染性[Lenz R.W.,HespellR.B.Attempts to grow bedellovibrios micurgically-injected into animal cells.Archives of Microbiology,1978,119(3):245-248]。在国内,林茂等(2006)研究了蛭弧菌对鱼类细胞的作用,发现它对鱼类细菌没有侵染作用[林茂,杨先乐,薛晖,曹海鹏,邱军强。蛭弧菌BDH21 02对鱼类细胞及病原菌的作用。微生物学通报,2006,33(1):7-11]。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足,提供一种提高稚鲍免疫力、促进稚鲍生长、提高稚鲍成活率的养殖方法。
本发明的目的通过下述方案实现:
一种稚鲍养殖方法,其特征在于,养殖过程如下:
(1)在养殖池内铺砖,然后注入海水;
(2)稚鲍下池(选取体长在2.0-4.5mm),同时开始曝气;
(3)定期投喂饵料,并在养殖水体中和/或投喂的饵料中添加蛭弧菌游泳体菌液;且每5-30天换水一次,每次换水量为一个量程;
(4)当稚鲍体长达到1.0-1.6cm时,即可采收稚鲍;
所述蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05,由中国典型培养物保藏中心保藏,其简称为CCTCC,保藏编号为CCTCC NO:M209172,保藏地址:湖北省武汉市珞珈山武汉大学内,保藏日期为2009年8月7日。BDFM05呈单细胞,椭圆形,大小为1.43×0.53μm,端生鞭毛,鞭毛长度至少2μm;所述蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05以双层平板法于28℃培养三天可形成直径2~3mm的透明圆形噬菌斑,采用游泳体高密度发酵方法发酵,得到一定浓度的蛭弧菌游泳体。
优选地,所述铺砖是先将砖洗刷干净并用高锰酸钾溶液消毒,消毒后再采取骑叠式摆砖。
优选地,所述海水在注入前经过砂滤和沉淀处理。
所投喂的饵料为人工合成饵料,优选地,所述投喂饵料时要先停止曝气,投饵0.5-1h后再开始曝气。
优选地,所述稚鲍下池后,曝气量控制在10-100L/h/m3,光照控制在 50-200lux,水温控制在15-28℃。
优选地,所述在投喂的饵料中添加蛭弧菌游泳体菌液是指用浓度为10-107pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡饵料20~40分钟。
优选地,所述在养殖水体中添加的蛭弧菌游泳体菌液,使蛭弧菌游泳体在水体中的浓度至少达到10pfu/mL。
优选地,所述每次换水后都立即添加蛭弧菌游泳体菌液,并使蛭弧菌游泳体在水体中的浓度至少达到10pfu/mL。
优选地,所述蛭弧菌游泳体在水体中的浓度为10-107pfu/mL。
优选地,所述蛭弧菌游泳体菌液的制备方法为:
在含副溶血弧菌的DNB液体培养基中接入1mL含103pfu/mL的蛭弧菌BDFM05(CCTCC M209172),恒温摇床150rpm~300rpm、20~35℃培养24~48h;培养物经过6000~8000rpm、4℃离心15~20min,取上清液,再将上清液16000~18000rpm、4℃条件下离心15~20min,弃上清液,向沉淀中加入DNB液体培养基重新悬浮蛭弧菌沉淀物,即制得蛭弧菌游泳体菌液。
本发明相对于现有技术,具有如下的优点及效果:
1、本发明所述的蛭弧菌游泳体菌液能显著提高稚鲍体质,增强免疫力。
本发明中所述的蛭弧菌游泳体菌液在控制稚鲍养殖环境、饵料、水体中细菌的效果显著,能够明显改善稚鲍体质,增强免疫力。
2、本发明所述的蛭弧菌游泳体菌液在控制和消除稚鲍致病菌应用中安全性好。
蛭弧菌游泳体菌液通过裂解致病菌的方法是生物方法,由于蛭弧菌游泳体控制和消除稚鲍致病菌时具有起效快、活力强的优点,这些优点使得蛭弧菌游泳体同样适合作为抑止或清除生物体及其环境中致病菌的生物净化因子,且其在裂解完宿主细菌后,会因饥饿而自动消亡,从而克服了抗生素滥用带来的副作用和常规消毒剂对稚鲍的不利影响,同时已有研究证明蛭弧菌对人等无毒。
3、所述的蛭弧菌游泳体菌液能净化水质并促进稚鲍生长。
蛭弧菌游泳体对水质有净化作用,能改善动物胃肠道环境,增强食欲,促进生长。
4、含有本发明所述的蛭弧菌游泳体菌液适合推广应用于鲍鱼养殖过程。
蛭弧菌游泳体对人和鲍鱼无毒副作用。适合于鲍鱼大规模工厂化养殖,可以为鲍鱼的绿色加工生产提供保障并且为控制和消除鲍鱼致病菌提供了一种 新方法。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步具体详细描述,但本发明的实施方式不限于此,对于未特别注明的工艺参数,可参照常规技术进行。本发明的实施地位于山东某养殖场,本发明的稚鲍为皱纹盘鲍,由该养殖场提供。
实施例1
蛭弧菌游泳体的制备
使用的蛭弧菌菌株为蛭弧菌BDFM05。蛭弧菌BDFM05于2009年8月7日在武汉大学的中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M209172。BDFM05呈单细胞,椭圆形,大小为1.43×0.53μm,端生鞭毛,鞭毛长度至少2μm;所述蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05以双层平板法于28℃培养三天可形成直径2~3mm的透明圆形噬菌斑,所用的蛭弧菌游泳体通过高密度蛭弧菌游泳体的发酵方法进行发酵:在装有100mL营养肉汤(蛋白胨10g,牛肉膏粉3g,氯化钠5g,pH 7.4±0.2)的锥形瓶中接种0.5mL,浓度为107cfu/mL的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,购于美国典型微生物菌种保藏中心American Type Culture Collection,编号:ATCC 17802),200rpm、28℃摇床培养18小时,培养液分别于4℃、5000rpm离心15min,弃上清。用5mL生理盐水悬浮沉淀菌体,之后加入到一个装有100mL DNB(dilute nutrientbroth)液体培养基(营养肉汤0.8g,酪蛋白酸水解物0.5g,酵母精提物0.1g,海水晶28g,溶于1000mL蒸馏水,pH值为7.2~7.6)的锥形瓶中,再加入1mL含103pfu/mL的蛭弧菌BDFM05(CCTCC M209172)。恒温摇床250rpm、28℃培养36h。培养液于4℃6000rpm离心20min,取上清液,再将上清液于4℃16000rpm离心20min,保留沉淀,加入10mL DNB液体培养基(营养肉汤0.8g,酪蛋白酸水解物0.5g,酵母精提物0.1g,海水晶28g,溶于1000mL蒸馏水中,pH值为7.2~7.6)重新悬浮沉淀物,得到107-109pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液。
实施例2
蛭弧菌游泳体菌液在养殖中应用
实施地海域的具体水质条件为:水温15-28℃,盐度27-33‰,pH 6.8-7.2,无机氮0.2-0.4mg/mL,磷酸盐0.01-0.05mg/mL,无油类物质,海水经过砂滤、沉淀处理,并在进入养殖池前,在池进水管口包扎一个200目的网袋,防止细 砂入池。水源水质符合中华人民共和国国家标准渔业水质标准(GB11607-89)要求,符合农业部《无公害食品海水养殖用水水质》(NY5052-2001)要求。
本发明实施地的养殖池建在养殖大棚内,每个水池规格为2×2×0.75m,水深为0.45m,每池放置曝气管8条。水池上方盖上遮光度为60%的遮光布,光照强弱可以调节,光照强度一般控制在(50-200)lux。
铺砖前,将四角水泥方砖洗刷干净并用高锰酸钾溶液消毒,消毒后再放入池底,池底共放60块四脚水泥砖,两侧对称、骑叠式放置,每列6块,每侧5列。放砖后各池均用高锰酸钾溶液消毒,反复冲洗干净,然后注入经过砂滤和沉淀处理的海水。稚鲍下池,所选取的附苗波纹板附稚鲍量在30-2000粒/板,稚鲍体长在2.0-4.5mm,稚鲍健康、活力好,每池稚鲍剥离量为10000粒,投鲍后即开始曝气,曝气量为50L/h/m3。
本发明设置一个生产对照组-正常流水,日换水量为池水量的2倍,每天早上6:00用高压水冲洗池子,晚上18:00正常投饵,期间不加蛭弧菌游泳体菌液,完全的工厂养殖方式,将其编为A组。其他具体编排方案如下:
(1)在养殖水体中添加蛭弧菌游泳体菌液,但饵料中不加。
每次换水后立即在养殖水体中添加蛭弧菌游泳体菌液,所需48个水池分为B-1、B-2、B-3、B-4,C-1、C-2、C-3、C-4,D-1、D-2、D-3、D-4,E-1、E-2、E-3、E-4,F-1、F-2、F-3、F-4,G-1、G-2、G-3、G-4,每组2个重复。各组的换水周期及加菌液浓度如下:
B组(B-1、B-2、B-3、B-4):5天换(全池)水一次;
C组(C-1、C-2、C-3、C-4):10天换(全池)水一次;
D组(D-1、D-2、D-3、D-4):15天换(全池)水一次;
E组(E-1、E-2、E-3、E-4):20天换(全池)水一次;
F组(F-1、F-2、F-3、F-4):25天换(全池)水一次;
G组(G-1、G-2、G-3、G-4):30天换(全池)水一次;
B-1、C-1、D-1、E-1、F-1、G-1组每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到101pfu/ml;
B-2、C-2、D-2、E-2、F-2、G-2组每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到103pfu/ml;
B-3、C-3、D-3、E-3、F-3、G-3组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到105pfu/ml;
B-4、C-4、D-4,E-4、F-4、G-4组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到107pfu/ml。
(2)在饵料中加蛭弧菌游泳体菌液,但在养殖水体中不加。
每天投饵前用蛭弧菌游泳体菌液浸泡饵料半小时,而每次换水后养殖水体都不加蛭弧菌游泳体菌液。所需48个水池分为b-1、b-2、b-3、b-4;c-1、c-2、c-3、c-4;d-1、d-2、d-3、d-4;e-1、e-2、e-3、e-4;f-1、f-2、f-3、f-4;g-1、g-2、g-3、g-4每组2个重复。各组的换水周期及加菌液浓度如下:
b组(b-1、b-2、b-3、b-4):5天换(全池)水一次;
c组(c-1、c-2、c-3、c-4):10天换(全池)水一次;
d组(d-1、d-2、d-3、d-4):15天换(全池)水一次;
e组(e-1、e-2、e-3、e-4):20天换(全池)水一次;
f组(f-1、f-2、f-3、f-4):25天换(全池)水一次;
g组(g-1、g-2、g-3、g-4):30天换(全池)水一次;
b-1、c-1、d-1、e-1、f-1、g-1组投的饵料经过浓度为101pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡过的饵料;每次换水不在水体加蛭弧菌游泳体菌液。
b-2、c-2、d-2、e-2、f-2、g-2组投的饵料经过浓度为103pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡过的饵料;每次换水不在水体加蛭弧菌游泳体菌液。
b-3、c-3、d-3、e-3、f-3、g-3组投的饵料经过浓度为105pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡过的饵料;每次换水不在水体加蛭弧菌游泳体菌液。
b-4、c-4、d-4、e-4、f-4、g-4组投的饵料经过浓度为107pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡过的饵料;每次换水不在水体加蛭弧菌游泳体菌液。
(3)在养殖水体和饵料中均添加蛭弧菌游泳体菌液
每次投饵前用蛭弧菌游泳体菌液浸泡饵料半小时,每次换水后养殖水体也添加蛭弧菌游泳体菌液。共需48个水池,分为Bb-1、Bb-2、Bb-3、Bb-4;Cc-1、Cc-2、Cc-3、Cc-4;Dd-1、Dd-2、Dd-3、Dd-4;Ee-1、Ee-2、Ee-3、Ee-4;Ff-1、Ff-2、Ff-3、Ff-4;Gg-1、Gg-2、Gg-3、Gg-4每组2个重复。Bb组(Bb-1、Bb-2、Bb-3、Bb-4):5天换(全池)水一次;
Cc组(Cc-1、Cc-2、Cc-3、Cc-4):10天换(全池)水一次;
Dd组(Dd-1、Dd-2、Dd-3、Dd-4):15天换(全池)水一次;
Ee组(Ee-1、Ee-2、Ee-3、Ee-4):20天换(全池)水一次;
Ff组(Ff-1、Ff-2、Ff-3、Ff-4):25天换(全池)水一次;
Gg组(Gg-1、Gg-2、Gg-3、Gg-4):30天换(全池)水一次;
Bb-1、Cc-1、Dd-1、Ee-1、Ff-1、Gg-1组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到101pfu/ml;每次投饵的饵料用浓度为101pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡半小时;
Bb-2、Cc-2、Dd-2、Ee-2、Ff-2、Gg-2组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到103pfu/ml;每次投饵的饵料用浓度为103pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡半小时;
Bb-3、Cc-3、Dd-3、Ee-3、Ff-3、Gg-3组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到105pfu/ml;每次投饵的饵料用浓度为105pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡半小时。
Bb-4、Cc-4、Dd-4、Ee-4、Ff-4、Gg-4组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌游泳体菌液,使水体中蛭弧菌游泳体菌体浓度达到107pfu/ml;每次投饵的饵料用浓度为107pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液浸泡半小时。
本发明的各组池中,所投喂的饵料为人工合成饵料,饵料量随稚鲍大小而变化,当要投喂饵料时,要先停止曝气,投饵0.5h后再开始曝气。为了减少残饵对水质的破坏,需要每天对除A组外各组池底和四角方砖上的残饵进行虹吸,也可间隔5天对残饵进行虹吸。除此之外,每晚需要观察稚鲍活动情况,吃食状况等。
从下板到统计,时间为60天,为了了解蛭弧菌游泳体对稚鲍的成活率的影响与促生长能力,需要对活稚鲍进行计数,并按一定指标统计稚鲍。
(4)养殖指标与测量
①稚鲍初始量,每池1万稚鲍。
②收稚鲍平均壳长,随机抽取50粒稚鲍,测量壳长,取平均值。
③稚鲍平均重量,随机抽取50粒稚鲍,称其总重后取平均。
④收稚鲍总量,称取10g稚鲍,计算其粒数,将稚鲍称总重估算粒数。
⑤成活率,某阶段结束时稚鲍量占该阶段所投稚鲍量的百分率。
(5)稚鲍免疫指标测定
试验结束每组取样15个去壳,3个/管放于5个分别盛有lmL Hank’s缓冲液(pH值7.8)的2mL-Eppendorf管中,贮于-80℃以备抗免疫指标的测定。测定时取出样品,使其在冰上融化。进行匀浆,然后6000r/min,-4℃离心5min.取上清用于免疫指标的测定。
①酚氧化物酶的测定
酚氧化物酶的活性测定是通过测定和L-DOPA(左旋多巴)反应生成的多巴胺的吸光值来计算的。把每个样品100μL到1.5mL的Eppendorf管中,每个样品重复三次。再加入用PBS液配制的0.5mg/L海藻酸钠在26-27℃下反应30min。加入50μL的用PBS液配制的3mg/L的L-DOPA(左旋多巴),10min后,在490nm处读取吸光值。对照液用相应的PBS液代替海藻酸钠。
②溶菌酶活力测定
以溶壁微球菌冻干粉为底物。用0.1mol/L,pH=6.4的磷酸盐缓冲液配成底物悬液(OD570nm≈0.3),取3.0mL该悬液于试管内置冰浴中,再加入50μL待测血清,混合,测A0值。然后将试液移入37℃温浴中置30min,取出
后再置于冰浴中10min,以终止反应,测其A值。溶菌活力UL按(A0-A)/A式计算。
此种方法对稚鲍养殖的各项指标影响具体见下表:
表1 5天换水对稚鲍生长情况影响
表2 10天换水对稚鲍生长情况影响
表3 15天换水对稚鲍生长情况影响
表4 20天换水对稚鲍生长情况影响
表5 25天换水对稚鲍生长情况影响
表6 30天换水对稚鲍生长情况影响
从表1-6可以看出,在相同的换水周期下,随着蛭弧菌游泳体的浓度升高,稚鲍的成活率都有一定升高,且都明显高于A组,说明采用新型的添加蛭弧菌游泳体的方法,明显节约养殖成本,以2×2×0.75m的水池为例,按每天两个交换量的流水方式,水深0.45m来计算,每天需要3.6吨海水,以海水的成本0.264元/吨(养殖场提供的数据),这样一口水池每天的耗水费用达到0.95元,而应用蛭弧菌游泳体的日耗水费用只有0.047元,两者相差0.9元。因此这种新方法不仅大大节约了用水量,还节省了大量的人力,物力资源,节约了养殖成本,同时提高了成活率。
从不同换水周期来看,相同浓度下的各组稚鲍成活率,体长等都没有太大的变化,说明采用新型养殖方法,5-30天不换水蛭弧菌游泳体都能催进稚鲍的生长。综合来看,在10pfu/mL浓度下,30天不换水是比较经济的方式,采用这样的方法,效果较佳。
免疫力方面,添加蛭弧菌游泳体的各组免疫指标明显高于A组,说明所加蛭弧菌游泳体能明显增强稚鲍体质,提高免疫力;水质方面,氨态氮用次溴酸纳氧化法测定(GB 12763.4-91);亚硝酸盐氮用重氮-偶氮光度法测定(GB 12763.4-91)。应用试验结束时,对各组的水质进行了测定。结果表明,A组水池中的各项水质测定值均高于试验组B、C、D...G组。其中,A组氨态氮的检测结果为0.0356mg/L,B-1与Gg-4之间最低为0.0264mg/L、最高为0.0351mg/L;A组检测亚硝酸盐氮结果为0.051mg/L,B-1与Gg-4之间最低为0.041mg/L、最高为0.050mg/L。
由以上结果分析可知,应用浓度为101-107pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液可有效改善养殖水体环境,调节水中氨态氮、亚硝酸盐氮的含量,从而提供有利于稚鲍生存的水体环境。弧菌数方面,采用涂布TCBS平板法检测,对照组A水体弧菌数在3.30×102cfu/mL左右,然而添加蛭弧菌游泳体菌液的各组弧菌总数一般在2.18-3.72×101cfu/mL,说明蛭弧菌游泳体能有效控制水体的弧菌数,并达到改善水质的目的细菌数方面。
综合来看,不论在水体、饵料,或者是两者均使用蛭弧菌游泳体,三种方法都能大大提高稚鲍的成活率、促进稚鲍的生长。且在养殖水体和饵料中均添加蛭 弧菌游泳体的方法效果最佳。
上述各组实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种稚鲍养殖方法,其特征在于,养殖过程如下:
(1)在养殖池内铺砖,然后注入海水;
(2)稚鲍下池,同时开始曝气;
(3)定期投喂饵料,并在养殖水体中和/或投喂的饵料中添加蛭弧菌游泳体菌液;且每5-30天换水一次,每次为全池换水;
(4)当稚鲍体长到1.0-1.6cm时,即可收稚鲍;
所述蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05,由中国典型培养物保藏中心保藏,其简称为CCTCC,保藏编号为CCTCC NO:M209172,保藏日期为2009年8月7日。
2.根据权利要求1所述的养殖方法,其特征在于,所述铺砖是先将砖洗刷干净并用高锰酸钾溶液消毒,消毒后再采取骑叠式摆砖。
3.根据权利要求1所述的养殖方法,其特征在于,所述海水在注入前经过砂滤和沉淀处理。
4.根据权利要求1所述的养殖方法,其特征在于,所述投喂饵料时要先停止曝气,投饵0.5-1h后再开始曝气。
5.根据权利要求1所述的养殖方法,其特征在于,所述稚鲍下池后,曝气量控制在10-100L/h/m3,光照控制在50-200lux,水温控制在15-28℃。
6.根据权利要求1所述的养殖方法,其特征在于,所述在投喂的饵料中添加蛭弧菌游泳体菌液是指用浓度为10-107pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液浸泡饵料20~40分钟。
7.根据权利要求1所述的养殖方法,其特征在于,所述在养殖水体中添加的蛭弧菌游泳体菌液,使蛭弧菌游泳体在水体中的浓度至少达到10pfu/mL。
8.根据权利要求7所述的养殖方法,其特征在于,所述每次换水后都立即添加蛭弧菌游泳体菌液,并使蛭弧菌游泳体在水体中的浓度至少达到10pfu/mL。
9.根据权利要求7或8所述的养殖方法,其特征在于,所述蛭弧菌游泳体在水体中的浓度为10-107pfu/mL。
10.根据权利要求1~8任意一项所述的养殖方法,其特征在于,所述蛭弧菌游泳体菌液的制备方法为:
在含副溶血弧菌的DNB液体培养基中接入蛭弧菌BDFM05,恒温摇床150rpm~300rpm、20~35℃培养24~48h;培养物经过6000~8000rpm、4℃离心15~20min,取上清液,再将上清液16000~18000rpm、4℃条件下离心15~20min,弃上清液,向沉淀中加入DNB液体培养基重新悬浮蛭弧菌沉淀物,即制得蛭弧菌游泳体菌液。
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