CN102017905B

CN102017905B - 一种斑节对虾的育苗方法

Info

Publication number: CN102017905B
Application number: CN2010102709870A
Authority: CN
Inventors: 蔡俊鹏; 孙丽滢
Original assignee: South China University of Technology SCUT
Current assignee: South China University of Technology SCUT
Priority date: 2010-08-31
Filing date: 2010-08-31
Publication date: 2012-05-30
Anticipated expiration: 2030-08-31
Also published as: CN102017905A

Abstract

本发明公开了一种斑节对虾的育苗方法，具体步骤如下：(1)制备蛭弧菌游泳体菌液；(2)在育苗池中投放蛭弧菌游泳体菌液，使海水中蛭弧菌游泳体含量达到10¹pfu/mL以上，曝气5-12h；(3)将斑节对虾无节幼体以6～12万尾/m³的密度投入上述育苗池中；(4)育苗过程中，定期投喂饵料，幼体投放后至少每隔5天投放一次蛭弧菌游泳体菌液，浓度在10pfu/mL以上；待仔虾发育到15天时或仔虾体长全部达到1厘米以上时，即得到斑节对虾虾苗。本发明通过在水质处理及饵料中投放蛭弧菌游泳体菌液，再配合科学的育苗质量管理可有效减少育苗过程中的换水次数，甚至不换水，来提高虾苗的出产率，并提高虾苗成活率和免疫力。

Description

一种斑节对虾的育苗方法

技术领域

本发明属于对虾养殖育苗技术领域，涉及一种使用蛭弧菌游泳体菌液进行斑节对虾育苗的方法。

背景技术

斑节对虾(Penaeus monodon)因幼虾多附着河口海藻或海草上，体色呈绿色，又称之为草虾。由于其适应性强、生长快、个体大已成为世界重要的养殖对象。与其他几种养殖对虾(如长毛对虾、东方对虾、日本对虾等)相比，斑节对虾前期幼体生命力较弱，幼体成活率较低，因而人工育苗难度较大。

在斑节对虾育苗过程中，幼体患病时有发生，近年来，由于海区受到环境污染，近岸水质不稳定，斑节对虾育苗常因暴发虾病流行造成大面积减产。引起斑节虾苗发病的原因很多，有生物因素的，如病毒、细菌、真菌、原生动物、附着性藻类；有非生物因素的，如水质、水温、光照、营养等。人们多采用广谱抗生素来控制病害的发生，过度使用的抗生素药物不仅使病菌的耐药性增强，而且还干扰了养殖环境中有益生物群的生长繁殖，引起微生态平衡失调，产生二次污染和内源性感染。

微生态制剂是从自然环境中筛选出来的微生物菌体，经培养繁殖后制成的含有大量有益菌的活菌制剂。它具有成本低、无毒副作用、不污染环境的特点。

蛭弧菌是寄生于其他细菌，并能导致宿主细菌裂解的一类细菌。比一般细菌小，能通过细菌滤器，有类似噬菌体的作用。它对水体中的弧菌有高的裂解率，故是一种很有前景的可用来净化水质，提高水产养殖成活率的微生物制剂。

目前微生态制剂在水产渔业中的应用多集中在由幼苗到成体的阶段中的某个较短时期来控制水质，且多为几种微生物制剂联用，少见在育苗的全过程使用单一微生态制剂控制水质提高育苗成活率的实例，特别是仍没有在斑节对虾育苗的全过程使用蛭弧菌制剂的案例报道。已有的研究表明，作为一种有益微生物制剂，无论是在食品工业还是在(海洋)水产养殖等领域，蛭弧菌的应用均是安全的。例如：在国外，Lenz and Hespell(1978)研究发现，蛭弧菌及对动物及人的细胞不具侵染性[Lenz R.W.，Hespell R.B.Attempts to growbedellovibrios micurgically-injected into animal cells.Archives of Microbiology，1978，119(3)：245-248]。在国内，林茂等(2006)研究了蛭弧菌对鱼类细胞的作用，发现它对鱼类细菌没有侵染作用[林茂，杨先乐，薛晖，曹海鹏，邱军强。蛭弧菌BDH21 02对鱼类细胞及病原菌的作用。微生物学通报，2006，33(1)：7-11]。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，通过开发适合于斑节对虾育苗过程中净化水质，防治斑节对虾种苗病害，提高免疫力的育苗方法，提供一种能培育出健康、优质、存活率高且符合节能减排要求的斑节对虾的育苗方法。

为了解决上述问题，本发明通过以下技术方案实现：

一种斑节对虾的育苗方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)制备蛭弧菌游泳体菌液，其中，蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，由中国典型培养物保藏中心保藏，其简称为CCTCC，保藏编号为：CCTCC NO：M 209172，保藏单位地址为：湖北省武汉市珞珈山武汉大学内，保藏日期为2009年8月7日；

(2)在育苗池中投放蛭弧菌游泳体菌液，使海水中蛭弧菌游泳体含量达到10¹pfu/mL以上，曝气5-12h；

(3)将斑节对虾无节幼体以6～12万尾/m³的密度投入上述育苗池中；

(4)育苗过程中，定期投喂饵料，幼体投放后至少每隔5天投放一次蛭弧菌游泳体菌液，使海水中蛭弧菌游泳体浓度在10pfu/mL以上；待仔虾发育到15天时或仔虾体长全部达到1厘米以上时，即得到斑节对虾虾苗。

优选地，步骤(2)和(4)所述蛭弧菌游泳体的浓度为10¹～10⁷pfu/mL。

优选地，步骤(3)中所述斑节对虾无节幼体的培育方法为：

挑选出活力良好，虾体无损伤，性腺成熟度好的亲虾放入产卵槽，每一产卵槽放入亲虾1～2尾，产卵槽水深保持70～90cm，并微量充气；及时清除水槽周围的浅橙红色且带有腥味的产卵粘稠物；将产卵后的亲虾移出，让卵继续在产卵槽中孵化，孵化时增大充气量，水温保持28～30℃，盐度28～33，卵孵化后要彻底清洁一次，吸出池底污物及未孵化出的卵子，计算出斑节对虾无节幼体数量，并根据无节幼体数量的多少选取优质健康的无节幼体移入育苗池。所述产卵槽中投放蛭弧菌游泳体菌液，使产卵槽的海水中蛭弧菌游泳体含量达到10¹pfu/mL以上。

优选地，所述海水经砂滤和沉淀处理，且育苗过程中海水全程不换。

优选地，步骤(4)所述蛭弧菌游泳体菌液的投放间隔为5～15天，使水中的蛭弧菌游泳体浓度在10¹～10⁷pfu/mL。

优选地，步骤(4)所投喂的饵料先用浓度10¹～10⁷pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡15～45min。

优选地，步骤(4)所述定期投喂饵料是从溞状幼体开始投喂配合饵料，每天投喂8次；在溞状幼体中加投单胞藻和轮虫；在糠虾期幼体中投单胞藻，后期投卤虫无节幼体；仔虾生长期投卤虫无节幼体。

优选地，步骤(4)所述育苗过程中的条件控制：盐度幼体前期为28～33‰，后期逐渐降低到14～25‰；水温在26～31℃，pH值7.8～8.7；连续充气并随幼体发育充气量逐渐增加；溞状幼体期间忌直射、强光，以免使幼体弯曲，应保持光照强度在203.8～305.7lx；在糠虾幼体之后逐渐加强光照强度，到仔虾期后可让太阳光直接照射，以锻炼其对外界环境的适应力。

优选地，步骤(4)所述充气量控制为：无节幼体期间充气使水面呈微波状，溞状幼体期微沸腾状，糠虾幼体期沸腾状；仔虾期后，气量加到最大至强沸腾状；所述光线控制为：在溞状幼体期间弱光照射；在糠虾幼体之后逐渐加强光照强度，到仔虾期后，采用太阳光直接照射。

所述蛭弧菌游泳体菌液优选通过申请号“200710031166.X”，公开的高密度蛭弧菌游泳体的发酵方法进行制备，具体步骤如下：

(1)制备副溶血弧菌：副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)用普通营养肉汤培养基摇床培养，160rpm～250rpm、25～32℃培养12～36h，培养物经过5000rpm、4℃离心15～20min，弃上清液，沉淀即为副溶血弧菌；

(2)混合培养：将蛭弧菌BDFM05(CCTCC M209172)与上述制备得到的副溶血弧菌加入到DNB培养基中，恒温摇床160rpm～250rpm、25～32℃培养12～36h；

(3)制备菌液：混合培养物经过6000rpm、4℃离心20min，取上清液，再将上清液16000rpm、4℃条件下离心20min，弃上清液，向沉淀中加入DNB液体培养基重新悬浮蛭弧菌沉淀物，制得蛭弧菌游泳体菌液。

用无菌水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2～7.6的磷酸盐缓冲液稀释，可得不同浓度的蛭弧菌游泳体菌液。

与现有方法相比本技术方案具有以下优点：

1、本发明所述的蛭弧菌游泳体菌液在斑节对虾育苗中效果显著

蛭弧菌游泳体侵入宿主细菌的过程非常快，一般几秒钟内即可完成。相对于蛭弧菌蛭质体而言，蛭弧菌游泳体具有起效快、活力强的优点。

本方案于实际使用，蛭弧菌游泳体菌液的效果明显好于目前常规的工厂化育苗方式，起效时间快，育苗效果好。

2、本发明所述的蛭弧菌游泳体菌液在斑节对虾育苗中使用安全性好

蛭弧菌游泳体可侵染、裂解宿主细菌的特性使之适合作为抑止或清除生物体及其环境中致病菌的生物净化因子，且其在裂解完宿主细菌后，会因饥饿而自动消亡，从而克服了抗生素滥用带来的副作用和常规消毒剂的不利影响。同时，已有研究已证明，蛭弧菌对人等无毒无害。

3、本发明的育苗方法能净化并促进水质

用蛭弧菌游泳体对对虾育苗的水体进行处理，可有效裂解消除水体中可能产生斑节对虾种苗病害的细菌，同时防止常规使用的NaClO、漂白粉等造成的氯残留，以及使用土霉素等抗生素造成的药物残留。

4、本发明的育苗方法能有效提高育苗成活率

本发明可有效解决斑节对虾养殖育苗成活率低的问题，使育苗存活率从一般工厂化育苗成功率35.2％最高提高到63.9％。

5、本发明的育苗方法可有效提高种苗免疫力

蛭弧菌游泳体菌液可调节虾苗自身的菌系，维护肠道系统环境，促进免疫系统的发育，增强苗种的体质，方案于实际实施中各项免疫指标的测定均高于使用传统的方法。

6、本发明方案全程不用换水和添水，有效避免了由于换水带来的病害，且减少了污水的排放，降低对环境的影响，是一种绿色、环保、低碳的育苗方法。

附图说明

图1为实施例育苗试验后免疫因素酚氧化酶(Phenoloxidase，PO)检测结果；

图2为实施例育苗试验后免疫因素超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)检测结果；

图3为实施例免疫保护率检测结果。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步具体详细描述，但本发明的实施方式不限于此，对于未特别注明的工艺参数，可参照常规技术进行。

实施例1

一、实验分组

实验分A、B、C、D四大组，每组均设2个平行对照。其中：

A组(对照组)：

A1：按现有的工业育苗方法实施。

A2：按本发明方案实施但全程不用蛭弧菌游泳体菌液浸泡饵料和/或泼洒于水体

B组(蛭弧菌游泳体菌液浸泡饲料组)

B1：全程用10¹pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡所有饵料；

B2：全程用10³pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡所有饵料；

B3：全程用10⁵pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡所有饵料；

B4：全程用10⁷pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡所有饵料。

C组(蛭弧菌游泳体泼洒水体组)

C1.1～C1.3：用蛭弧菌游泳体菌液均匀泼洒于水体中，使水体中蛭弧菌浓度达到10¹pfu/mL。幼苗培育期分别间隔5天、10天、15天泼洒菌液一次；

C2.1～C2.3：用蛭弧菌游泳体菌液均匀泼洒于水体中，使水体中蛭弧菌浓度达到10³pfu/mL。幼苗培育期分别间隔5天、10天、15天泼洒菌液一次；

C3.1～C3.3：用蛭弧菌游泳体菌液均匀泼洒于水体中，使水体中蛭弧菌浓度达到10⁵pfu/mL。幼苗培育期分别间隔5天、10天、15天泼洒菌液一次；

C4.1～C4.3：用蛭弧菌游泳体菌液均匀泼洒于水体中，使水体中蛭弧菌浓度达到10⁷pfu/mL。幼苗培育期分别间隔5天、10天、15天泼洒菌液一次；

D组(蛭弧菌游泳体菌液泼洒于水体和浸泡饵料)

用蛭弧菌游泳体处理水体和所有饵料，浓度和换水间隔设置同C组。

二、实验步骤

1.一种用于斑节对虾育苗的蛭弧菌游泳体菌液的制备

所用蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，由中国典型培养物保藏中心保藏，其简称为CCTCC，保藏编号为：CCTCC NO：M 209172，保藏日期为2009年8月7日。

蛭弧菌游泳体通过以下方法制备：在1个装有100mL营养肉汤液体培养基(蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH 7.4)的锥形瓶中接种0.5mL 10⁷cfu/mL副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus，购于美国典型物种保藏中心American Type Culture Collection，编号：ATCC 17802)，200rpm、28℃摇床培养18小时，培养液分别于4℃、5000rpm离心15min，弃上清。沉淀用1mL DNB(dilute nutrient broth)液体培养基(营养肉汤0.8g，酪蛋白酸水解物0.5g，酵母精提物0.1g，溶于1000mL蒸馏水中，pH值为7.2～7.6)悬浮，然后将悬浮液加入到1个装有100mL DNB的锥形瓶中，再加入1mL含10³pfu/mL的蛭弧菌BDFM05(CCTCC M209172)。恒温摇床250rpm、28℃培养36h。培养液分别于4℃6000rpm离心20min，取上清液，再将上清液分别于4℃16000rpm离心20min，保留沉淀，加入1mL DNB液体培养基(营养肉汤0.8g，酪蛋白酸水解物0.5g，酵母精提物0.1g，溶于1000mL蒸馏水中，pH值为7.2～7.6)重新悬浮蛭弧菌沉淀物，得浓度为10⁸pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液。用0.2mol/L pH值为7.2～7.6的磷酸盐缓冲液稀释上述蛭弧菌游泳体菌液，得到不同浓度的蛭弧菌游泳体菌液。

2.水质处理

A2及B/C/D组产卵槽和育苗池的海水均为经过砂滤、沉淀的新鲜海水。然后向B/C/D水体中加入蛭弧菌游泳体菌液，使水体中蛭弧菌含量达到10¹～10⁷pfu/mL，曝气6h，A1组用水和目前工业育苗用水处理方法保持一致。

3.亲虾的选择和产卵及受精卵孵化

挑选出活力良好，虾体无损伤，性腺成熟度好的亲虾放入0.5吨产卵槽，每池放入亲虾2尾，产卵槽水深保持90cm，并微量充气。及时清除水槽周围的浅橙红色且带有腥味的产卵粘稠物。

产卵后将亲虾移出，让卵继续在产卵槽中孵化，孵化时增大充气量为使卵能充分滚动，水温保持28℃，盐度30‰，卵孵化后彻底清洁水池，吸出池底污物及未孵化出的卵，计算出无节幼体数量，并根据无节幼体数量选取优质健康的无节幼体移入相应的育苗池。

4.幼体培育

育苗池中无节幼体的饲育密度范围控制在6～12万尾/m³。幼体前期盐度为33‰，后期逐渐降低到15‰；水温在28℃，pH值8.0，溶氧在7.6mg/L。无节幼体期间充气使水面呈微波状，溞状幼体期微沸腾状，糠虾幼体期沸腾状；仔虾期后加大充气量至强沸腾状。在溞状幼体期间忌直射、强光，以免使幼体弯曲，应保持光照强度在260lx；在糠虾幼体之后逐渐加强光照强度，到仔虾期后可让太阳光直接照射，以锻炼其对外界环境的适应力。

从溞状幼体开始投喂0号(Z1～M3)或1号(P1～P15)规格的配合饵料，每天投喂8次。另外，在溞状幼体中加投单胞藻和轮虫；糠虾期幼体中投单胞藻，后期投卤虫无节幼体；仔虾期投卤虫无节幼体。所有投喂的饵料需事先使用10¹～10⁷pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡30min。

幼体培育期间，每5～15天向育苗池均匀泼洒一次蛭弧菌游泳体菌液，使池水中泼洒的蛭弧菌游泳体浓度在10¹～10⁷pfu/mL。

待仔虾发育到15天时(P15)或仔虾体长全部达到1厘米以上时，即可出苗销售。

5.免疫因素测定

(1)酚氧化酶及超氧化物歧化酶测定

育苗试验结束后饥饿24小时，每组取样100个，20只/管放于6个分别盛有3mL Hank’s液(pH值7～8)的离心管中，贮于-80℃以备抗免疫指标的测定。测定时取出样品，使其在冰上融化，进行匀浆，然后6000r/min，-4℃离心5min，取上清用于免疫指标的测定。

酚氧化酶(Phenoloxidase，PO)：以左旋多巴(L-dopa)为底物，采用改进的Ashida方法，以OD490对反应时间作图，以实验条件下每分钟OD值增加0.001定义为1个酶活力单位。

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)：采用YI Sun等(A SimpleMethod for Clinical Assay of Superoxide Dismutase[J].Clin.Chem.1988：497-500)的方法。一个酶活力单位定义为：在试验条件下，硝基四氮唑溶液(NBT)被SOD抑制50％所需的酶蛋白量。

(2)免疫保护率的测定：

免疫保护率的测定：

于预先消毒的盛有5L砂滤海水(盐度15‰)的水池中进行。以A1组为对照组，其他(B-D组)为免疫实验组，每个组随机取100尾仔虾，平均分成两组。向每组的水体中加入副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus，购于美国典型物种保藏中心American Type Culture Collection，编号：ATCC 17802)使总浓度达到10⁷cfu/mL；两组均正常投饵，攻毒5d后实验结束。考虑到仔虾有一定自然死亡率，因此采用相对存活率(Relative Percentage Survival，RPS)计算式：

RPS(％)＝(1-免疫组死亡率/对照组死亡率)×100％

6.水质检测

水质检测项目包括：色臭味，酸碱度pH，氨态氮，亚硝态氮，硫化物。其中，pH用数字式pH计测定(分辨率0.01pH)；氨态氮用次溴酸纳氧化法法测定(GB12763.4-91)；亚硝态氮用重氮-偶氮光度法测定(GB12763.4-91)；硫化物用对氨基二甲基苯胺光度法(亚甲蓝法)(GB16489-96)。

实验结果如下：

表1斑节对虾育苗成活率情况

成活率结果如表1所示，PO、SOD、RPS结果见图1，图2，图3。从结果可知实验组B/C/D结果无论是育苗成功率还是各项免疫指标的均要好于对照组A1和A2。可见本方案用蛭弧菌游泳体进行海参育苗的新型育苗方式要优于现有的生产技术，可大大提高虾苗的成活率和免疫力。

比较实验组B/C/D，可知：B组成活率最高可达50％，但要略低于C组，而D组成活率最高可达63.9％，远高于B/C两组，可见用蛭弧菌同时处理饵料和水体可有效提高虾苗的成活率。

从各组组内的对比可知，各项指标的数据随着蛭弧菌游泳体浓度的升高而升高，但加菌间隔周期对其的影响不显著。因此，在实际生产中，加菌周期可适当延长。如此，既可降低能耗和劳动力，又可节约育苗成本。

免疫指标PO，SOD和RPS的对比结果规律与成活率一致。特别是RPS结果中对照组A1死亡率高达96％而加入了蛭弧菌蛭质体菌液的免疫实验组死亡率都要低于60％，故而RPS都要高于35％，RPS最高组D4.1可达到80％。可见蛭弧菌蛭质体菌液可有效提高虾苗的免疫力。

水质检测结果除A2组水体已有异味，水色浑浊外，其他组水质监测结果均符合《渔业水质标准》(GB 11607-1989)和《海水虾类育苗水质标准》(GB/T21673-2008)标准，但A1组的氨态氮，亚硝态氮，硫化物测定值均高于试验组B、C、D的。其中，A组氨态氮的检测结果为0.312mg/L，B/C/D组均≤0.231mg/L；亚硝态氮A组检测结果为：0.018mg/L，B/C/D组均≤0.015mg/L；硫化物A组检测结果为：0.114mg/L，B/C/D组均≤0.103mg/L。

由此可见，无论在水中还是在饲料中添加浓度为10～10⁷pfu/ml的蛭弧菌游泳体菌液，5～15天加菌一次，都能够达到提高虾苗的免疫力和成活率，促进生长的效果。在水中和饲料中同时添加蛭弧菌游泳体菌液，效果更佳。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种斑节对虾的育苗方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)制备蛭弧菌游泳体菌液，其中，蛭弧菌菌株为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，由中国典型培养物保藏中心保藏，其简称为CCTCC，保藏编号为：CCTCC NO：M 209172，保藏日期为2009年8月7日；

(4)育苗过程中，定期投喂饵料，幼体投放后至少每隔5天投放一次蛭弧菌游泳体菌液，使海水中蛭弧菌游泳体浓度在10pfu/mL以上；待仔虾发育到15天时或仔虾体长全部达到1厘米以上时，即得到斑节对虾虾苗；

所述蛭弧菌游泳体菌液的制备方法如下：

(a)制备副溶血弧菌：副溶血弧菌用普通营养肉汤培养基摇床培养，160rpm～250rpm、25～32℃培养12～36h，培养物经过5000rpm、4℃离心15～20min，弃上清液，沉淀即为副溶血弧菌；

(b)混合培养：将蛭弧菌BDFM05与上述制备得到的副溶血弧菌加入到DNB培养基中，恒温摇床160rpm～250rpm、25～32℃培养12～36h；

(c)制备菌液：混合培养物经过6000rpm、4℃离心20min，取上清液，再将上清液16000rpm、4℃条件下离心20min，弃上清液，向沉淀中加入DNB液体培养基重新悬浮蛭弧菌沉淀物，制得蛭弧菌游泳体菌液。

2.根据权利要求1所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(2)和(4)所述蛭弧菌游泳体的浓度为10¹～10⁷pfu/mL。

3.根据权利要求1或2所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(3)中所述斑节对虾无节幼体的培育方法为：

挑选出活力良好，虾体无损伤，性腺成熟度好的亲虾放入产卵槽，每一产卵槽放入亲虾1～2尾，产卵槽水深保持70～90cm，并微量充气；及时清除水槽周围的浅橙红色且带有腥味的产卵粘稠物；将产卵后的亲虾移出，让卵继续在产卵槽中孵化，孵化时增大充气量，水温保持28～30℃，盐度28～33，卵孵化后，即得到斑节对虾无节幼体；所述产卵槽中投放蛭弧菌游泳体菌液，使产卵槽的海水中蛭弧菌游泳体含量达到10¹pfu/mL以上。

4.根据权利要求3所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，所述海水经砂滤和沉淀处理，且育苗过程中海水全程不换。

5.根据权利要求1所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(4)所述蛭弧菌游泳体菌液的投放间隔为5～15天，使水中的蛭弧菌游泳体浓度在10¹～10⁷pfu/mL。

6.根据权利要求1所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(4)所投喂的饵料先用浓度10¹～10⁷pfu/mL蛭弧菌游泳体菌液浸泡15～45min。

7.根据权利要求1或6所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(4)所述定期投喂饵料是从溞状幼体开始投喂配合饵料，每天投喂8次；在溞状幼体中加投单胞藻和轮虫；在糠虾期幼体中投单胞藻，后期投卤虫无节幼体；仔虾生长期投卤虫无节幼体。

8.根据权利要求1或6所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(4)所述育苗过程中的条件控制：盐度幼体前期为28～33‰，后期逐渐降低到14～25‰；水温在26～31℃，pH值7.8～8.7；连续充气并随幼体发育充气量逐渐增加；幼体前期用弱光线照射。

9.根据权利要求8所述的斑节对虾的育苗方法，其特征在于，步骤(4)所述充气量控制为：无节幼体期间充气使水面呈微波状，溞状幼体期微沸腾状，糠虾幼体期沸腾状；仔虾期后，气量加到最大至强沸腾状；所述光线控制为：在溞状幼体期间弱光照射；在糠虾幼体之后逐渐加强光照强度，到仔虾期后，采用太阳光直接照射。