CN101498732A - 一种改良的前白蛋白检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种改良的检测血清中前白蛋白含量的免疫透射比浊试剂盒。其包含试剂R1，试剂试剂R2，前白蛋白标准品。该试剂盒通过抗原抗体的特异性反应，形成小的免疫复合物(＜19s)，在促聚剂的作用下会形成大的可见的复合物(＞19s)，产生一定的浊度，从而适于透射比浊测量，所含试剂能有效地防止伪浊度的产生，且准确度高、重复性好、抗干扰能力强、操作简单，适用于各种类型的全自动生化分析仪。所含的标准液，采用全血清基质，避免了基质效应的影响。

Description

一种改良的前白蛋白检测试剂盒

技术领域

本发明属于医学免疫体外诊断领域，涉及一种免疫比浊检测试剂，特别是，本发明涉及一种免疫透射比浊检测血清中前白蛋白的试剂盒。

背景技术

前白蛋白是肝脏细胞合成的一种血清蛋白质，电泳时迁移在白蛋白之前，故称为前白蛋白，主要生理功能参与血清中甲状腺素和视黄醇的运输，并具有胸腺激素活性，可通过促进淋巴细胞的成熟来增加肌体免疫力。前白蛋白由4个相同的亚基组成，分子量54980，消光系数(E280nm)13.6，半衰期1.9天。

血清中前白蛋白的测定结果在临床上是反应肝功能和肌体营养状态的优良指标，常见于营养不良者。由于前白蛋白半衰期很短，可反应肝脏合成和分解代谢的轻微改变，其血清浓度降低的幅度与肝实质损害的程度密切相关，因此在临床上也常见于肝功能损伤、肝硬化、外伤及感染患者。皮质醇、帕金森氏病、饮酒和口服避孕药却可导致血清前白蛋白浓度升高。

现有技术中常用的检测方法是免疫透射比浊法、免疫扩散法、免疫电泳法、放射免疫分析法。免疫浊度测定的基本原理是：抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过量时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，与一系列的标准品对照，即可计算出待检测物的含量。

目前市场上的前白蛋白检测试剂不能很好的去除伪浊度的影响，抗干扰能力差，以致一些特殊的样本测值为零或者为负值。

为了克服现有技术的不足之处，本发明采用一种改良的免疫透射比浊试剂盒来检测血清中的前白蛋白的含量。通过优化促凝剂的含量以及试剂1(R1)和试剂2(R2)中促凝剂的配比，解决了浊度试验最大的弱点———伪浊度的产生，大大提高了抗干扰能力。同时，本试剂盒配备了人血清基质的标准液，去除了基质效应的影响，从而大大提高了检测结果的准确性，在血清的处理中加入了合适的表面活性剂，能够使抗原抗体的结合位点裸露，从而提高了反应的特异性。并且标准液是稳定的液体的，与市面上干粉的固态的相比较，使用更为方便，而且其制作方法简单易行，成本低廉，所以本发明在临床上具有较大应用价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种特异的免疫透射比浊检测试剂盒，该试剂盒能够降低浊度反应的最大弱点———伪浊度的产生，提高抗干扰能力；同时提供一种人血清基质标准品的制备方法及用该方法制备的标准品，解决了基质效应问题，提高检测的准确度。

因此，本发明提供一种改良的检测血清前白蛋白的试剂盒，包含试剂R1，试剂R2和人血清基质标准品，其特征在于所述的试剂R1包含按体积百分比计浓度为0.5—4％的促凝剂，按体积百分比计浓度为0.02-2.0％的表面活性剂，试剂R2包含按体积百分比计浓度为0.5—15％的促凝剂，按体积百分比计浓度为5—40％的抗血清和按体积百分比计浓度为0.02-2.0％的表面活性剂，人血清基质标准品为包含全人血清基质的液体。

本发明中，所述的抗血清为羊抗人PA抗血清、马抗人抗血清、鼠抗人抗血清或兔抗人抗血清。所述的促凝剂包括PEG6000、PEG8000、PEG20000、溴化己二甲胺、聚凝胺；表面活性剂为Trion系列、Tween系列、月桂醚系列、聚氧乙烯辛基苯醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚。所述的表面活性剂优选是Trion X100、Tween20、月桂醚。

本发明所述的配制试剂R1、R2的缓冲液是pH范围为6.5—8.0的缓冲液，其选自三羟甲基氨基甲烷—盐酸缓冲液、三乙醇胺缓冲液、咪唑—盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、碳酸钠—碳酸氢钠缓冲液、硼酸—硼酸钠缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液、磷酸缓冲液或者磷酸盐缓冲液。

本发明所述的血清前白蛋白的试剂盒，还包括按照体积百分比计，浓度分别为0.01—1％的抗氧化剂、防腐剂。

所述的人血清基质标准品分别为0—850mg/L的五个不同浓度的标准品。该人血清基质标准品还包含抗氧化剂、防腐剂、表面活性剂、广谱杀菌剂、抗霉菌、稳定剂。人血清基质标准品由健康人混合血清，经检测排除乙肝、丙肝、爱滋、梅毒等传染病后，浓缩获得高浓度原液，再按梯度稀释成4—5个浓度梯度，经二级甚至一级参考品和参考测量方法量值溯源定值。

本发明所述的抗氧化剂为EDTA、丁基羟基茴香醚、苯多酚、二丁基羟基甲苯、硫代二丙酸二月桂酯、磷脂或甘草抗氧化物。

本发明所述防腐剂为NaN3、苯酚、对羟基苯甲酸乙酯或乙基汞硫代硫酸钠。

所述的杀菌剂为能杀灭革兰氏阴性、阳性菌的广谱和窄谱抗菌素中的一种或多种。所述的杀菌剂为：青霉素、链霉素、庆大霉素、四环素或土霉素。所述抗霉菌素为制霉菌素、季铵盐系列、丙酸钠、脱氧乙酸和两性霉素中的一种或多种。

本发明所述的稳定剂为EDTA、Mgcl2、BSA、丙三醇、乙二醇、单糖和多糖中的一种或者多种。

由此可见，本发明所述试剂盒包含试剂R1，试剂R2和标准液，所述试剂R1为含有少量促聚物、抗氧化剂、防腐剂和表面活性剂的缓冲液；所述的试剂R2为含抗人前白蛋白抗血清的溶液，还包含一定的抗氧化剂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂。

进一步的，在本发明所述的前白蛋白检测试剂盒的试剂R1中，所述的促聚物包括PEG6000、PEG8000、PEG20000；表面活性剂为Trion X100、Tween20和月桂醚等聚氧乙烯类多聚物等；抗氧化剂、防腐剂包括EDTA、NaN3。更进一步的，在试剂R1中，所述的促聚物浓度为0.25—3.5％，所述的表面活性剂的含量为0.1-3.0％，抗氧化剂、防腐剂的浓度为0.01—1％。试剂R2中，促聚物的浓度为0.25—20％，抗血清的浓度为5—60％。

本发明所述的试剂，优化了促聚剂的含量和配置，克服了临床上一些特殊样本测量中，容易出现伪浊度的缺点。由于调整了促聚剂的用量，也大大提高了抗干扰能力和灵敏度。

本发明所述的试剂，使用了合适的表面活性剂，可以改变分子的表面结构和电荷性质，有利于抗原抗体的充分特异性结合。

本发明所述的试剂盒还包括人血清基质标准液，从制作工艺上降低了标准液制备中的基质效应的影响。人血清基质标准液稀释为0—850mg/L的五个不同浓度，采用多点定标，使得试剂的临床测值更为准确。

本发明所述的试剂盒中包括的人血清基质标准液的制备方法，采取混合血清浓缩的方法，操作简单，节约成本，使用的混合血清都是人健康血清，从而解决了基质效应的问题。并且本发明对混合血清浓缩前后采取了特殊处理，使得人血清基质标准液可长时间稳定。另外，也优化了标准液的定值方法，量值具有溯源性，可以溯源到二级或者一级参考物。

本发明所述的试剂盒的组成成分为：

试剂R1：

缓冲液(PH 6.5-8.0)                    10—100mM

抗氧化剂                         0.1-3g/L

防腐剂                           0.1-3g几

促凝剂                           0.5—4％

表面活性剂                       0.02—2％

试剂R2：

缓冲液                           10—100mM

抗氧化剂                         0.1-3g/L

防腐剂                           0.1-3g/L

表面活性剂                       0.02-2％

促凝剂                           0.5—15％

抗血清                    5—40％

人血清基质标准液：

混合人血清                排除乙肝、丙肝、梅毒、爱滋感染

防腐剂                    0.02—2％

杀菌剂                    2—20mM

抗氧化剂                  0.02—2％

表面活性剂                0.02—2％

抗霉菌素                  0.02—2％

稳定剂                    0.02—20％

本发明所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷—盐酸缓冲液、三乙醇胺缓冲液、咪唑—盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、碳酸钠—碳酸氢钠缓冲液、硼酸—硼酸钠缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液、磷酸缓冲液或者磷酸盐缓冲液中的一种。缓冲液的浓度为10-150mM，离子强度为120-250mM，pH范围为：6.5—8.0。

本发明所述抗氧化剂为EDTA、丁基羟基茴香醚、苯多酚、二丁基羟基甲苯、硫代二丙酸二月桂酯、磷脂和甘草抗氧化物等等，抗氧化剂的浓度为0.1—5％。

本发明所述防腐剂为NaN3、苯酚、对羟基苯甲酸乙酯、乙基汞硫代硫酸钠等等，防腐剂的浓度为0.1—5％。

本发明所述杀菌剂为能杀灭革兰氏阴性、阳性菌的广谱和窄谱抗菌素，如：青霉素、链霉素、庆大霉素、四环素、土霉素等等

本发明所述抗霉菌素为制霉菌素、季铵盐系列、丙酸钠、脱氧乙酸和两性霉素等，浓度为0.01—5％。

本发明所述稳定剂为下列物质的一种或者几种：EDTA、Mgcl2、BSA、丙三醇、乙二醇、单糖和多糖，浓度为0.1—5％。

本发明所述促凝剂为PEG6000、PEG8000、PEG20000、溴化己二甲胺、聚凝胺，浓度为0.2—20％。

本发明所述抗血清为：羊抗人PA抗血清、马抗人抗血清、鼠抗人抗血清、兔抗人抗血清，抗血清的浓度为5—65％。

本发明所述表面活性剂可以为非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂或两性离子表面活性剂，优选非离子表面活性剂。常用的为Trion系列、Tween系列、月桂醚系列、聚氧乙烯辛基苯醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚等，表面活性剂的浓度为0.01—5％。

本发明所述标准液为人血清基质，内含稳定剂、防腐剂等等。标准液的浓度值为：第1点：0—50mM；第2点：50—100mM；第3点：100—200mM；第4点：200—450mM；第5点：450—850mM。

附图说明：

图1：试剂盒I与对照试剂相关性；

图2：试剂盒II与对照试剂相关性；

图3：试剂盒III与对照试剂相关性；

图4：试剂盒I线性；

图5：试剂盒II线性；

图6：试剂盒III线性；

图7：试剂盒I对靶值为170(119-221)mg/L质控液1的定标周期；

图8：试剂盒II对靶值为170(119-221)mg/L质控液1的定标周期；

图9：试剂盒III对靶值为170(119-221)mg/L质控液1的定标周期；

图10：对照试剂对靶值为170(119-221)mg/L质控液1的定标周期；

图11：试剂盒I对靶值317(254-380)mg/L质控液2的定标周期；

图12：试剂盒II对靶值317(254-380)mg/L质控液2的定标周期；

图13：试剂盒III对靶值317(254-380)mg/L质控液2的定标周期；

图14：对照试剂对靶值317(254-380)mg/L质控液2的定标周期；

图15：试剂盒I对靶值496(422-570)mg/L质控液3的定标周期；

图16：试剂盒II对靶值496(422-570)mg/L质控液3的定标周期；

图17：试剂盒III对靶值496(422-570)mg/L质控液3的定标周期；

图18：对照试剂对靶值496(422-570)mg/L质控液3的定标周期；

具体实施例：

实施例一：试剂盒I、II和III的主要成分和配制

本申请示例性的配制了3种试剂盒，其主要成分、配制步骤分别为：

1.试剂盒I、II和III的主要成分

A.试剂盒I的主要成分：

试剂R1：

缓冲液(10mM的Tris-HcL缓冲液中含有150mM的NaCl，0.1％的EDTA，0.1％的NaN₃，PH 6.5-8.0)

PEG6000                       0.5％

月桂醚                        0.02％

Tween20                       0.02％

试剂R2：

缓冲液(10mM的Tris-HcL缓冲液中含有150mM的NaCl，0.1％的EDTA，0.1％的NaN₃，PH 6.5-8.0)

抗血清                       10％

MgCL₂                        2％

PEG6000                      0.5％

人血清基质标准液：

混合人健康血清

青霉素                       20000U

制霉菌素                     2mM

月桂醚                       0.02％

B.试剂盒II的主要成分：

试剂R1：

缓冲液(50mM磷酸缓冲液中含有145mM KCL，0.2％EDTA，0.2％的NaN₃，PH 6.5-8.0)

PEG6000                                3％

月桂醚                                 0.03％

Triton X100                            0.1％

试剂R2：

缓冲液(50mM磷酸缓冲液中含有145mM KCL，0.2％EDTA，0.2％的NaN₃，PH 6.5-8.0)

抗血清                                     25％

甘露糖醇                                   2％

PEG6000                                    10％

人血清基质标准液

混合人健康血清

土霉素                                     200U

两性霉素                                   2mM

月桂醚                                     0.1％

C.试剂盒III的主要成分：

试剂R1：

缓冲液(100Mm Tris缓冲液含有145mM的NaCl，0.3％的EDTA，0.3％的NaN₃)

PEG6000                                    4％

Tween20                                    2％

试剂R2：

缓冲液(100Mm Tris缓冲液含有145mM的NaCl，0.3％的EDTA，0.3％的NaN₃，PH 6.5-8.0)

PEG6000                                     15％

抗血清                            40％

MgCL₂                             2％

人血清基质标准液

混合人健康血清

链霉素                            200000U

制霉菌素                          2mM

月桂醚                            2％

上述3种试剂盒中的试剂R1和试剂R2的体积比可以为1：1-5：1，优选3：1

2.试剂盒I、II、III的配制、检测参数和操作步骤

1)试剂的配制：

所需原料如表1所述：

表1：

 

名称	分子量	纯度	生产厂家
				Tris-base	121.1	99.9％	北京欣经科生物技术公司
NaCl	58.44	分析纯	北京益利精细化学品有限公司
				NaN3	65.01	99％	Merck
EDTA-2Na	372.24
				PEG-6000	6000	化学纯	北京益利精细化学品有限公司
Tween20			北京益利精细化学品有限公司
				Antiserum			Midland

2)配置方法：

室温下，将各种物质在少量的去离子水中溶解，然后混匀在缓冲液中，调pH为7.0～11.0、定容体积，4—8℃放置。

A.配制缓冲液(4L)

Tris(12g)+NaCl(36g)+EDTA(4g)+NaN₃(4g)于3.6升纯净水中，调pH7.5，定容4升

B.配制试剂R1(3L)

称取Tween20 3mL，PEG6000 105g，然后溶解混匀于3升缓冲液中。

C.配制试剂R2(1L)

分别称取PEG6000 40g，量取缓冲液750mL倒入烧杯中混匀，然后缓慢加入抗血清250mL，搅匀2hr。4摄氏度保存静止过夜。

D.试剂R1试剂R2抽滤

3)试剂盒使用参数

温度                           37℃

波长                           340nm(主)&700nm(副)

比色杯光径                     1.0cm

测试方法                       终点法

反应方向                       正反应

4)本发明试剂盒具体操作步骤为：

首先根据表2的成分含量，用本申请的试剂盒配制检测样品及标准：

表2

 

加入物质	空白管	校准管	样本管
				试剂R1(ul)	225	225	225
生理盐水(ul)	6
				标准液(ul)		6
待测样本(ul)			6

然后混匀，37度孵育3分钟，读取吸光度A1，再分别加入75ul试剂R2混匀，37度孵育5分钟，在波长340nm处，读取吸光度A2，得ΔA＝A2—A1。

结果计算：

在生化自动分析仪上，用标准品进行5点定标，以标准品浓度对相应的ΔA，采用非线性拟和模式，如logit_log(4P)四参数拟和模式做标准曲线，样本中的前白蛋白浓度通过样本得ΔA从标准曲线上读出。

5)参考值：

血清中前白蛋白的正常参考值：200—400mg/L

实施例2：试剂盒I、II、III的主要性能指标

同时对实施例1配置的3种试剂盒，即试剂盒I、II、III的性能进行如下检测：

1.检测试剂盒I、II、III的抗干扰能力

1)试剂盒的抗干扰实验

分别按照本领域的常规技术配置含有甘油三酯、胆红素、Hb不同浓度的待测样品，采用试剂盒I、II、III在检测仪器中检测样品中前白蛋白的含量，从而检测三种试剂盒对各种干扰物的抗干扰能力(每个样品一式三份，取其平均值)。检测结果(平均值)如表3所示：

表3

表3的结果表明，当甘油三酯≤500mg/dL、胆红素≤2mMol/L或者Hb≤200mg/dL时，其不影响试剂盒I、II、III样品中前白蛋白的含量的检测，即所述的干扰物并不对试剂盒的检测产生干扰。

2)检测试剂盒I、II、III的准确性和精密度

分别采用本领域常规的检测方法，对制备的试剂盒I、II、III的准确性和精密度进行检测。

A.准确性

采用试剂盒I、II、III分别对靶值分别为170mg/L(119-221)的质控液1，089LPC、靶值328mg/L(279-377)的质控液2，099LPC、靶值496mg/L(422-570)，100LPC的质控液3进行检测：在相同条件下，采用试剂盒I、II、III对同一质控液的前白蛋白含量连续检测5次，将检测结果的平均值与各质控液靶值范围进行比较，以检测所述的试剂盒的准确性。对试剂盒I、II、III的准确性的检测结果如表4、5、6所示：

表4：

表5：

表6：

表4、5、6的结果表明：试剂盒I、II、III的5次检测结果的平均值在靶值范围内，不准确度相对偏差(CV(％))不超过±5％。说明本申请公开的三种试剂盒的准确度符合诊断试剂盒的技术指标。

B精密度

在相同条件下，采用试剂盒I、II、III分别对质控液1、2、3的前白蛋白的含量连续检测20次，比较每个试剂盒的变异系数，以检测所述的试剂盒的精密度。对试剂盒I、II、III的精密度的检测结果如表7、8、9所示：

质控液1(靶值170mg/L(119-221)，089LPC)见表7：

表7：

质控液2(靶值328mg/L(279-377)，099LPC)检测的结果见表8：

表8：

质控液3(靶值496mg/L(422-570)，100LPC)的检测结果见表9：

表9：

表7、8、9的结果表明：试剂盒I、II、III检测的同一样品的MAO活性的变异系数不超过±10％，说明本申请公开的三种试剂盒的精密度符合诊断试剂盒的技术指标。

C.检测试剂盒I、II、III与某进口对照试剂的相关性

采用本领域技术人员已知的方法，在同样的条件下，用试剂盒I、II、III和某进口国外对照试剂对44例正常和异常病人的血清样本连续测定其前白蛋白的含量，结果见表10和图1、2、3。

表10：

表10和图1-3的结果表明：试剂盒I、II、III和某国外进口试剂的相关系数大于0.99，说明本申请公开的三种试剂盒与对照试剂的相关性符合诊断试剂盒的技术指标

4)线性试验：(倍比稀释Randox定标液浓度：600mg/l，批号091LPC)

采用本领域技术人员已知的方法，将某一高值血清等比稀释10个梯度，采用上述所配制的试剂盒I、II、III在相同的条件下分别连续测定三次，取其均值与理论计算值相比较，计算其线性偏差。其测量结果如表11-13和图4-6：

表11(试剂盒I)：

表12(试剂盒II)：

表13(试剂盒III)：

表11-13和图4-6的结果表明：试剂盒I、II、III可检测的线性范围可以达到600(595)mg/L，说明本申请公开的三种试剂盒的线性范围符合诊断试剂盒的技术指标。

5)灵敏度

采用本领域技术人员已知的方法，将空白液和同一份用生理盐水进行等比稀释10个梯度的样品，在检测仪器上采用试剂盒I、II、III连续对各个样本的前白蛋白的含量连续测定13次，读取每次测定原始吸光度值，然后计算出扣除空白吸光度后的各样品的吸光度的值，计算其均值，标准偏差。这里采用99.7％的可能性来计算检测低限。将每个样本的均值减去3倍的各自的标准偏差，然后与空白液的3倍的标准偏差比较，如果前者高于后者，我们就认定有99.7％的可能性出现的最小吸光度一定大于空白的吸光度，能定量的报告结果。试剂盒I的结果如表14-15所示，试剂盒II的结果如表16-17所示，试剂盒III的结果如表18-19所示：

表14 试剂盒I的测值的原始吸光度的数据：

表15 试剂盒I的测值扣除空白后的吸光度：

表14-15的结果表明，试剂盒I的生物检测限是：25mg/L

表16 试剂盒II的测值的原始吸光度的数据：

表17 试剂盒II的测值扣除空白后的吸光度：

表16-17的结果表明，试剂盒II的生物检测限是：25mg/L

表18 试剂盒III的测值的原始吸光度的数据：

表19 试剂盒III的测值扣除空白后的吸光度：

表18-19的结果表明，试剂盒III的生物检测限是：25mg/L

6)定标周期

采用本领域技术人员已知的方法，采用试剂盒I、II、III和某国外知名品牌对照试剂分别在相同的实验条件下，对3个靶值分别为170(119-221)mg/L、317(254-380)mg/L、496(422-570)的低、中、高定值质控液1、2和3测定其前白蛋白的含量。每隔两天测定一次，每次连续测定3遍，取其平均值，如此连续测定1个月。观察试剂盒I、II、III和对照试剂的测值与靶值相比较，从而确定测值的稳定性。对089LPC，靶值为170(119-221)mg/L质控液1的检测结果如表20和图7-9所示，对照如表20和图10所示：

表20 质控液1，089LPC，靶值170(119-221)mg/L：

对108LPC，靶值317(254-380)mg/L质控液2的检测结果如表21和图11-13所示，对照如图14所示。

表21 质控液2，108LPC，靶值317(254-380)mg/L：

对100LPC，靶值496(422-570)mg/L的质控液3的检测结果如表22和图15-17所示，对照如图18所示。

表22 质控液3，100LPC，靶值496(422-570)mg/L：

表20-22和图7-18的结果表明：试剂盒I、II、III的定标周期测量结果与国外对照试剂相比校还是比较稳定的，说明本申请公开的三种试剂盒的开盖稳定性符合诊断试剂盒的技术指标。

总之，本专利发明了一种改良的免疫透射比浊试剂盒来检测血清中的前白蛋白的含量。通过优化促凝剂的含量以及试剂R1和试剂R2中促凝剂的配比，解决了浊度试验最大的弱点———伪浊度的产生，大大提高了抗干扰能力。同时，本试剂盒配备了人血清基质的标准液，去除了基质效应的影响，从而大大提高了检测结果的准确性，在血清的处理中加入了特异的表面活性剂，能够使抗原抗体的结合位点裸露，从而提高了反应的特异性。并且本试剂盒的标准液是稳定的液体试剂，与市场上干粉的相比较，使用更为方便，而且其制作方法简单易行，成本低廉，所以本发明在临床上具有较大应用价值。

Claims (15)

1、一种改良的检测血清前白蛋白的试剂盒，包含试剂R1，试剂R2和人血清基质标准品，其特征在于所述的试剂R1包含按体积百分比计浓度为0.5—4％的促凝剂，按体积百分比计浓度为0.02-2.0％的表面活性剂，试剂R2包含按体积百分比计浓度为0.5—15％的促凝剂，按体积百分比计浓度为5—40％的抗血清和按体积百分比计浓度为0.02-2.0％的表面活性剂，人血清基质标准品为包含全人血清基质的液体。

2、根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的抗血清为羊抗人PA抗血清、马抗人抗血清、鼠抗人抗血清或兔抗人抗血清。

3、根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于，所述的促凝剂包括PEG6000、PEG8000、PEG20000、溴化己二甲胺、聚凝胺；表面活性剂为Trion系列、Tween系列、月桂醚系列、聚氧乙烯辛基苯醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚。

4、根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于，所述的表面活性剂是Trion X100、Tween20、月桂醚。

5、根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于，配制试剂R1、R2的缓冲液是pH范围为6.5—8.0的缓冲液，其选自三羟甲基氨基甲烷一盐酸缓冲液、三乙醇胺缓冲液、咪唑—盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、碳酸钠—碳酸氢钠缓冲液、硼酸—硼酸钠缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液、磷酸缓冲液或者磷酸盐缓冲液。

6、根据权利要求1所述所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于，还包括按照体积百分比计，浓度分别为0.01—1％的抗氧化剂、防腐剂。

7、根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于，所述的人血清基质标准品分别为0—850mg/L的五个不同浓度的标准品。

8 根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的人血清基质标准品还包含抗氧化剂、防腐剂、表面活性剂、广谱杀菌剂、抗霉菌、稳定剂。

9、根据权利要求1所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的人血清基质标准品由健康人混合血清，经检测排除乙肝、丙肝、爱滋、梅毒等传染病后，浓缩获得高浓度原液，再按梯度稀释成4—5个浓度梯度，经二级甚至一级参考品和参考测量方法量值溯源定值。

10、根据权利要求8所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的抗氧化剂为EDTA、丁基羟基茴香醚、苯多酚、二丁基羟基甲苯、硫代二丙酸二月桂酯、磷脂或甘草抗氧化物。

11、根据权利要求8所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述防腐剂为NaN3、苯酚、对羟基苯甲酸乙酯或乙基汞硫代硫酸钠。

12、根据权利要求8所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的杀菌剂为能杀灭革兰氏阴性、阳性菌的广谱和窄谱抗菌素中的一种或多种。

13、根据权利要求12所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的杀菌剂为：青霉素、链霉素、庆大霉素、四环素或土霉素。

14、根据权利要求8所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述抗霉菌素为制霉菌素、季铵盐系列、丙酸钠、脱氧乙酸和两性霉素中的一种或多种。

15、根据权利要求8所述的血清前白蛋白的试剂盒，其特征在于所述的稳定剂为EDTA、Mgcl2、BSA、丙三醇、乙二醇、单糖和多糖中的一种或者多种。

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