BRPI0808464A2 - Indazóis usados para tratar distúrbios mediados pelo receptor beta de estrogênio - Google Patents

Description

“INDAZÓIS USADOS PARA TRATAR DISTÚRBIOS MEDIADOS PELO RECEPTOR BETA DE ESTROGÊNIO”

A presente invenção refere-se a novos derivados de indazol tendo atividade farmacológica, processos para sua preparação, composições contendo os mesmos e usos destes compostos no tratamento de doenças mediadas pelo receptor beta de estrogênio.

Os estrogênios são reguladores endócrinos bem conhecidos nos processos celulares envolvidos no desenvolvimento e manutenção do sistema reprodutivo. Os estrogênios também mostraram ter efeitos importantes em muitos tecidos não reprodutivos, tais como ossos, fígado, o sistema cardiovascular, e o sistema nervoso central. Os 10 receptores de estrogênio são fatores de transcrição ativados por Iigantes e pertencem à subfamília do receptor para hormônio nuclear. Sob ligação ao ligante, estes receptores dimerizam e podem ativar a transcrição gênica tanto ligando-se diretamente às seqüências específicas sobre o DNA conhecido como elementos de resposta quanto interagindo-se com fatores de transcrição (tais como AP1) que por sua vez se ligam diretamente às seqüências 15 específicas de DNA. Adicionalmente, agora torna-se evidente que os estrogênios podem mediar seus efeitos por intermédio da cascata de sinalização mediada por cinase, embora grande parte deste trabalho ainda seja experimental. Kousteni et ai, Journal of Clinicai Investigation, (2003), 111, 1651-1664.

Historicamente, acredita-se que os estrogênios manifestam sua atividade biológica 20 através de um receptor de estrogênio único, presentemente denominado receptor alfa de estrogênio (ERa). Mais recentemente, entretanto, houve a descoberta do segundo subtipo de receptor de estrogênio, denominado receptor beta de estrogênio (ER/? ou ER beta). Veja, Kuiper et ai, WO 97/09348 e Kuiper et ai, Cloning of a Novel Estrogen Receptor Expressed in Rat Prostate and Ovary, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 1996, páginas 5925-5930. O ER/? é 25 expressado em seres humanos. Veja, Mosselman et al., ERf.3: Identification and Characterization of a Novel Human Estrogen Receptor, FEBR S Lett., 1996, páginas 49-53. A descoberta deste segundo subtipo de receptor de estrogênio aumentou significantemente a complexidade biológica da sinalização de estrogênio.

A distribuição de tecido de ER/? foi bem mapeada no roedor e não é coincidente 30 com o ERa. Tecidos, tais como o útero e ovário do camundongo expressam predominantemente ERor1 ao passo que órgãos não reprodutivos, por exemplo, o pulmão do camundongo, expressam predominantemente ER/?. Veja Couse, et al., Endocrinology 138: 4613-4621 (1997), Kuiper, et ai, Endocrinology 138: 863-870 (1997). Ainda dentro do mesmo órgão, a distribuição de ERa e ER^ pode ser compartimentalizada. Por exemplo, no 35 ovário do rato, ER£ é altamente expressado nas células granulosas e ERa é restrito às células tecais e estromais. Veja Sar e Welsch, Endocrinology 140: 963-971 (1999). Entretanto, existem exemplos onde os receptores são coexpressados e existe a evidência em estudos in vitro que ERo e ER/? podem formar heterodímeros. Veja Cowley, et ai, Journal of Biological Chemistry 272: 19858-19862 (1997).

O estrogênio endógeno mais potente é 17/?-estradiol. Um grande número de compostos foi descrito tanto imitando quanto bloqueando a atividade de 17/?-estradiol.

Compostos tendo aproximadamente os mesmos efeitos biológicos como 17/?-estradiol são referidos como “agonistas do receptor de estrogênio”. Aqueles que bloqueiam os efeitos de 17/ff-estradiol, quando fornecidos em combinação com este, são chamados “antagonistas do receptor de estrogênio”. Na realidade, existe uma série contínua entre a atividade do agonista do receptor de estrogênio e do antagonista do receptor de estrogênio e alguns 10 compostos comportam-se como agonistas do receptor de estrogênio em alguns tecidos, porém como antagonistas do receptor de estrogênio em outros. Compostos com atividade mista são chamados moduladores seletivos do receptor de estrogênio (SERMS) e podem ser agentes terapeuticamente úteis. A razão precisa para que o mesmo composto possa ter efeitos específicos de célula não foi esclarecida, porém as diferenças na conformação do 15 receptor e/ou no ambiente de proteínas corregulatórias foram sugeridas.

Os compostos da invenção se ligam ao receptor ER/? e, portanto, podem ser úteis no tratamento de doenças mediadas por Er/?, por exemplo, os compostos desta invenção podem ser úteis no tratamento da dor, distúrbios inflamatórios crônicos, doenças autoimunes, distúrbios do SNC, distúrbios metabólicos ou distúrbios do apetite. Os 20 compostos da invenção podem ser cardioprotetores. Os compostos desta invenção também podem ser úteis no tratamento ou inibição do crescimento de tecido anormal benigno ou maligno, e visto que os compostos nesta invenção são agonistas do receptor de estrogênio, eles também podem ser úteis no tratamento de distúrbios ou condições pelo menos parcialmente mediados pela deficiência de estrogênio.

A presente invenção fornece, em um primeiro aspecto, compostos da fórmula (I):

em que Ra, Rb e Rc são independentemente selecionados de halo, alcóxi Ci_4, alquila Ci_4, alquenila C2.4, alcanoila C1.5, CF3, CF3O e ciano, contanto que quando um dos substituintes é ligado ao C-5 do biciclo de indazol, este substituinte Ra não é um grupo metóxi.

OH

(!)

D

m é zero ou um número inteiro de 1 a 3; n é zero ou 1; p é zero ou um número inteiro de 1 a 4; entretanto m, n e p juntos são iguais a 5 ou menos; e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Em uma modalidade, R0 é halo, por exemplo, flúor.

Em uma modalidade m é zero.

Em uma modalidade m é 1 e Ra é halo, alcóxi C1^, alquila C1^, alquenila Cm ou ciano. Em uma modalidade Rc é orto para o grupo hidróxi no anel fenila.

Em uma modalidade n é zero.

Em uma outra modalidade, n é 1 e Rb é um grupo alquila C1-4.

Em uma modalidade p é zero, 1 ou 2.

Em uma modalidade Rc é F, Cl, ou CH3.

Compostos da invenção incluem os seguintes: 1-(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol;

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-6-(metilóxi)-1 /-/-indazol-4-ol 1-(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-4-hidróxi-1H-indazol-6-carbonitrila 6-Fluoro-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol 6-Bromo-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 6-Etenil-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol 6-Etil-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol

6-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-6-metil-1 /-/-indazol-4-ol 5-Fluoro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol

5-Bromo-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol

5-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol

7-Fluoro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 7-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 /-/-indazol-4-ol

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-3-metil-1 /-/-indazol-4-ol

1 -(4-Hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol

1 -(3-Cloro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol

1-(4-Hidróxi-3-metilfenil)-1/-/-indazol-4-ol

1-(3,5-Difluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol

1-(3,5-Difluoro-4-hidroxifenil)-4-hidróxi-1H-indazol-6-carbonitrila e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

O termo “alquila C1V', conforme usado neste relatório, como um grupo ou uma parte do grupo, refere-se a um grupo hidrocarboneto linear ou ramificado saturado contendo de 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos de tais grupos incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila e terc-butila e semelhantes. O termo “alquenila C2-V', conforme usado neste relatório, como um grupo ou uma parte do grupo, refere-se a um grupo hidrocarboneto linear ou ramificado insaturado contendo de 2 a 4 átomos de carbono e uma ligação dupla. Exemplos de tais grupos incluem etenila, 1-prop-2-enila, 2-prop-2-enila e semelhantes.

O termo “alcóxi C1V, conforme usado neste relatório, refere-se a um grupo -Oalquila C1^4 em que o alquila C1^ é conforme definido neste relatório. Exemplos de tais grupos incluem metóxi, etóxi, propóxi ou butóxi e semelhantes.

O termo “alcanoila C1V, conforme usado neste relatório, refere-se a um grupo C(=0)H ou -C(=0)alquila C1^ em que o alquila C1^ é conforme definido neste relatório.

O termo “halo”, conforme usado neste relatório, refere-se a um átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo.

Compostos da invenção incluem compostos da fórmula (I) e derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, os quais incluem os compostos dos Exemplos 1 a 20 e sais, solvatos, hidratos farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos ou hidratos de um sal dos mesmos, mais especificamente compostos dos Exemplos 1 a 20 e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Deve ser entendido que a presente invenção abrange todos os isômeros da fórmula (I) e seus sais, solvatos, hidratos farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos ou hidratos de um sal, incluindo todas as formas geométricas, tautoméricas e ópticas, e misturas das mesmas (por exemplo, misturas racêmicas). Onde centros quirais adicionais estão presentes em compostos da fórmula (I), a presente invenção inclui dentro de seu escopo todos os diastereoisômeros possíveis, incluindo misturas dos mesmos. As formas isoméricas diferentes podem ser separadas ou resolvidas entre si por métodos convencionais, ou qualquer isômero fornecido pode ser obtido por métodos sintéticos convencionais ou por síntese estereoespecífica ou assimétrica.

A presente invenção também inclui compostos isotopicamente marcados, que são idênticos aos compostos da fórmula (I), exceto que um ou mais átomos são substituídos por um átomo tendo uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa usualmente encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados em compostos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, flúor, iodo, e cloro, tais como 2H, 3H, 11C114C118F1123I e 125I.

Compostos da presente invenção que contêm os isótopos anteriormente mencionados e/ou outros isótopos de outros átomos estão dentro do escopo da presente invenção. Compostos isotopicamente marcados da presente invenção, por exemplo, aqueles em que os isótopos radioativos, tais como 3H e/ou 14C são incorporados, são úteis em ensaios de distribuição de tecido de fármaco e/ou substrato. 3H e 14C são considerados úteis devido a sua facilidade de preparação e detectabilidade. Os isótopos 11C e 18F são considerados úteis em PET (tomografia de emissão positrônica), e isótopos 125I são considerados úteis em SPECT (tomografia computadorizada de emissão de fótons isolados), todos úteis para imageamento in vivo. A substituição com isótopos mais pesados, tais como 2H1 pode fornecer certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade 5 metabólica, por exemplo, condições de meia vida in vivo aumentada ou dosagem reduzida e, consequentemente, são considerados úteis em algumas circunstâncias. Compostos isotopicamente marcados da fórmula (I) desta invenção geralmente podem ser preparados realizando-se os procedimentos divulgados nos esquemas e/ou nos Exemplos abaixo, substituindo-se um reagente isotopicamente marcado prontamente disponível por um 10 reagente não isotopicamente marcado.

As definições seguintes são usadas neste relatório, a menos que de outro modo indicado.

O termo “derivado farmaceuticamente aceitável” significa qualquer sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal de um composto da fórmula (I), ou qualquer outro composto que sob administração ao recipiente é capaz de fornecer (direta ou indiretamente) um composto da fórmula (I) (por exemplo, um pró-fármaco).

Conforme usado neste relatório, o termo “pró-fármaco” significa um composto que é convertido dentro do corpo, por exemplo, por hidrólise no sangue, em sua forma ativa que tem efeitos medicinais. Pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis são descritos em T. 20 Higuchi e V. Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 da A.C.S. Symposium Series, Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, e em D. Fleisher, S. Ramon e H. Barbra “Improved oral drug delivery: solubility Iimitations overcome by the use of prodrugs”, Advanced Drug Delivery Reviews (1996) 19(2) 115-130, cada um dos quais é incorporado ?5 neste relatório como referência.

Um aspecto adicional da invenção é Compostos da fórmula (I) como ácidos ou bases livres.

Sais farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles descritos por Berge, Bighley e Monkhouse, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19. O termo “sais farmaceuticamente aceitáveis”

0 refere-se a sais preparados a partir de ácidos farmaceuticamente aceitáveis, incluindo ácidos inorgânicos e orgânicos ou sais preparados a partir de bases farmaceuticamente aceitáveis incluindo bases inorgânicas e bases orgânicas. Tais ácidos incluem ácido acético, benzenossulfônico, benzóico, canforsulfônico, cítrico, etanossulfônico, etanodissulfônico, fumárico, glicônico, glutâmico, bromídrico, clorídrico, isetiônico, láctico, maléico, málico,

1 mandélico, metanossulfônico, múcico, pamóico, pantotênico, fosfórico, propiônico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluenossulfônico, e semelhantes. Sais derivados de bases inorgânicas incluem sais de alumínio, amônio, cálcio, cobre, férricos, ferrosos, lítio, magnésio, mangânicos, manganosos, potássio, sódio, zinco, e semelhantes. Sais derivados de bases orgânicas farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de aminas primárias, secundárias, e terciárias; aminas substituídas incluindo aminas substituídas que ocorrem naturalmente; e aminas cíclicas. Bases orgânicas farmaceuticamente aceitáveis particulares incluem arginina, betaína, cafeína, colina, Λ/,Λ/’-dibenziletilenodiamina, dietilamina, 2- dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilenodiamina, A/-etil-morfolina, Netilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, tris(hidroxímetil)aminometano (TRIS, trometamol) e semelhantes. Sais também podem ser formados a partir de resinas de troca iônica básicas, por exemplo, resinas de poliamina. Quando o composto da presente invenção é básico, sais podem ser preparados a partir de ácidos farmaceuticamente aceitáveis, incluindo ácidos inorgânicos e orgânicos. Tais ácidos incluem ácido acético, benzenossulfônico, benzóico, canforsulfônico, cítrico, etanossulfônico, etanodissulfônico, fumárico, glicônico, glutâmico, bromídrico, clorídrico, isetiônico, láctico, maléico, málico, mandélico, metanossulfônico, múcico, pamóico, pantotênico, fosfórico, propiônico, succínico, sulfúrico, tartárico, ptoluenossulfônico, e semelhantes. Em algumas circunstâncias, alguns sais podem ser não esteq uiométricos.

Os compostos da fórmula (I) podem ser preparados na forma cristalina ou não cristalina, e podem ser opcionalmente hidratados ou solvatados. Esta invenção inclui em seu escopo, hidratos estequiométricos, assim como compostos contendo quantidades variáveis de água.

Os compostos da fórmula (I) podem existir em mais do que uma forma polimórfica. A invenção estende-se a todas as tais formas se, em uma forma polimórfica pura ou quando misturadas com qualquer outro material, tal como uma outra forma polimórfica.

Solvatos adequados incluem solvatos farmaceuticamente aceitáveis, tais como

hidratos.

Solvatos incluem solvatos estequiométricos e solvatos não estequiométricos.

Compostos da fórmula (I) podem ser preparados conforme apresentado nos Esquemas e nos Exemplos seguintes. Os processos seguintes formam um outro aspecto da presente invenção.

Processos para a preparação de um composto da fórmula (I) compreendem:

(a) reação de um composto da fórmula (II),

em que Ra, Rb, m e n são conforme definidos para os compostos da fórmula (I) e

(II) PG1 representa um grupo de proteção, tal como metila ou um grupo benzila opcionalmente substituído, com um composto da fórmula (III) ou um derivado protegido do mesmo

(III)

em que Rc e p são conforme definidos para os compostos da fórmula (I), PG2 representa um hidrogênio ou um grupo de proteção opcional, tal como metila ou um grupo benzila opcionalmente substituído e X representa um grupo de partida, tal como halo (por exemplo, bromo ou iodo) ou um resíduo, tal como -B(OH)2 ou um éster de boronato equivalente,

e, em seguida, remoção de quaisquer grupos de proteção PG1 e PG2;

(b) por reação de um composto da fórmula (IV),

H

(IV)

em que Ra, Rb, m e n são conforme definidos para os compostos da fórmula (I) e L1

representa um grupo de partida, tal como um halogênio (por exemplo, bromo), com um composto da fórmula (III), conforme definido acima, depois reação subsequente com um nucleófilo, tal como hidróxido ou o derivado aniônico de um composto da fórmula PG1-OH (onde PG1 é conforme definido acima) na presença de um sistema catalisador de metal de transição adequado (por exemplo, uma mistura de bis(1,1-dimetiletíl)[2’,4’,6’-tris(1-metiletil)

2-bifenilil]fosfano e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (O)) em um sistema de solvente apropriado, tal como 1,4-dioxano aquoso, seguido por remoção de grupos de proteção;

(c) interconversão de um composto da fórmula (I) ou derivado protegido do mesmo;

(d) desproteção de um composto da fórmula (I) que é protegido; e/ou

(e) conforme apropriado, separação de misturas diastereoméricas ou

enantioméricas de compostos da fórmula (I) e/ou formação de um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal.

Reações de compostos da fórmula (II) com compostos da fórmula (III)1 de acordo com o processo (a), são tipicamente realizadas na presença de um sal de metal de !5 transição, tal como um haleto de cobre, uma base apropriada, tal como fosfato de potássio, carbonato de potássio ou trietilamina e, opcionalmente, um Iigante de coordenação adequado, tal como uma 1,2-diamina (por exemplo, 1,2-(dimetilamino)cicloexano) ou um aminoácido. Onde X representa um grupo de partida, tal como halo, o uso de uma fonte de cobre (I) é vantajoso, tal como iodeto de cobre (I), na presença de uma base, tal como fosfato de potássio ou carbonato de potássio, opcionalmente na presença de um ligante, tal como uma 1,2-diamina (por exemplo, 1,2-(dimetilamino)cicloexano) ou um aminoácido (por exemplo, prolina). Solventes adequados para esta reação incluem tolueno, dimetilsulfóxido, Λ/,/V-dimetilformamida e 1,4-dioxano. Onde X representa um resíduo, tal como -B(OH)2 ou um éster de boronato equivalente, uma fonte de cobre (II) pode ser utilizada, tal como acetato de cobre (II) na presença de uma base, tal como trietilamina ou piridina, vantajosamente sob uma atmosfera contendo oxigênio, tal como ar, usando um solvente adequadamente inerte, tal como diclorometano. Reações, de acordo com o processo (a), podem ser realizadas na temperatura ambiente ou temperatura elevada, por exemplo, sob refluxo ou usando radiação por microondas.

Nos processos (a) e (d), exemplos de grupos de proteção e os meios para sua remoção podem ser encontrados em T. W. Greene “Protective Groups in Organic Synthesis” (J. Wiley e Sons, 1991). Por exemplo, um grupo benzila opcionalmente substituído pode ser removido por hidrogenólise, por exemplo, na presença de Pd 10 % em carvão vegetal.

Separações, de acordo com o processo (e), podem ser realizadas usando metodologia estabelecida, por exemplo, por cromatografia, resolução como sais diastereoméricos ou cristalização.

Compostos da fórmula (II), (III), (IV) são conhecidos na literatura ou podem ser adquiridos de fornecedores convencionais ou podem ser preparados por métodos convencionais, por exemplo, a adição de grupos de proteção aos compostos conhecidos, ou por métodos análogos àqueles descritos nos Experimentos.

Será avaliado que os compostos das fórmulas (II), (III) e (IV) podem ser obtidos como misturas de diastereômeros e/ou enantiômeros. Tais misturas podem opcionalmente ser separadas usando metodologia estabelecida, por exemplo, por cromatografia.

O termo “derivado protegido do mesmo” é usado neste relatório para se referir ao composto que inclui um grupo de proteção, por exemplo, aquele referido acima.

Os compostos da invenção se ligam ao receptor ERyff e, portanto, podem ser úteis no tratamento de doenças mediadas por ER/?.

Em uma modalidade, os compostos da invenção são seletivos para ER/? sobre ERa, por exemplo, em uma modalidade, compostos da invenção podem ter mais do que 5 vezes de afinidade mais alta em ER/? comparada à ERa.

Tendo em vista sua capacidade de se ligar ao receptor ER/?, os compostos desta invenção podem ser úteis no tratamento dos distúrbios que seguem.

Os compostos da fórmula podem ser úteis no tratamento da dor.

Quando usado neste relatório, o termo dor inclui dor aguda, dor crônica, dor articular crônica, dor musculoesquelética, dor inflamatória, dor visceral, dor associada ao câncer, dor associada à enxaqueca, cefaleia do tipo tensional e cefaleia em salvas, dor associada aos distúrbios funcionais do intestino, dor lombar e de pescoço, dor associada às tensões e distensões, dor simpaticamente mantida; miosite, dor associada à gripe ou outras infecções virais, tais como as comuns de resfriado, dor associada à febre reumática, dor associada à isquemia miocárdica, dor do pós-operatório, dor de cabeça, dor de dentes e dismenorreia.

Em uma modalidade, os compostos podem ser úteis no tratamento da dor crônica, dor do pós-operatório, dor lombar e de pescoço crônica, dor do câncer, dor associada às tensões e distensões.

Condições de dor articular crônica incluem artrite reumatóide, osteoartrite, espondilite reumatóide, artrite gotosa e artrite juvenil.

Dor associada aos distúrbios funcionais do intestino inclui dispepsia não ulcerosa, dor torácica não cardíaca e síndrome do intestino irritável.

Os compostos da invenção também podem ser úteis no tratamento de distúrbios inflamatórios crônicos ou doenças autoimunes incluindo artrite, (reumatóide, osteoartrite e espondiloartropatias), doença inflamatória intestinal (doença de Crohn, colite ulcerativa, colite indeterminada), esclerose múltipla, diabetes, lesão de isquemia/reperfusão, psoríase, sepsia, lúpus eritematoso sistêmico e endometriose.

Os compostos da invenção podem ser cardioprotetores e úteis para o tratamento de hipercolesteremia, aterosclerose, doença cardiovascular, hiperlipidemia e dano vascular mediado por células imunes.

Os compostos da invenção também podem ser úteis no tratamento de crescimento de tecido anormal benigno ou maligno incluindo hipertrofia prostática, câncer de mama, câncer de cólon e câncer de próstata.

Compostos que exibem atividade de ligação ao receptor ER/? foram descritos tendo atividade no cérebro e, portanto, podem ser úteis para inibir ou tratar distúrbios do SNC incluindo depressão, ansiedade, insônia, esquizofrenia, doença de Alzheimer1 declínio cognitivo, demência senil e distúrbios neurodegenerativos.

Como os compostos da invenção são agonistas do receptor de estrogênio, eles podem ser úteis no tratamento de distúrbios ou condições pelo menos parcialmente 30 mediados pela deficiência de estrogênio. Em particular, estes compostos podem ser úteis para o tratamento de distúrbios da menopausa e pós-menopausa (sintomas vasomotores, atrofia vaginal urogenital ou vulvar, vaginite atrófica, disfunção sexual feminina, desmineralização óssea e o tratamento de osteoporose.

Indicações adicionais incluem distúrbios metabólicos, tais como diabetes tipo Il e S5 distúrbios do apetite (obesidade).

Quando usado neste relatório, o termo “tratamento” se estende à profilaxia dos distúrbios acima, assim como o tratamento de condições estabelecidas, por exemplo, inibição de tecido anormal benigno ou maligno, profilaxia de distúrbios da menopausa e pós-menopausa, osteoporose e osteoartrite ou proteção contra um evento cardíaco (proteção cardíaca).

Assim, a invenção também fornece um composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo, para o uso como uma terapia cardioprotetora ou como uma substância terapêutica no tratamento dos distúrbios acima, em particular dor, distúrbios inflamatórios crônicos, doenças autoimunes, crescimento de tecido anormal benigno ou maligno, distúrbios do SNC, distúrbios metabólicos, distúrbios do apetite, distúrbios ou condições pelo menos parcialmente mediados pela deficiência de estrogênio.

A invenção fornece ainda um método de tratamento dos distúrbios acima, em mamíferos incluindo seres humanos, o qual compreende administrar ao paciente, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo.

Em um outro aspecto, a invenção fornece o uso de um composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo na fabricação de um medicamento para o uso no tratamento dos distúrbios acima.

Quando usados em terapia, os compostos da fórmula (I) são usualmente formulados em uma composição farmacêutica padrão. Tais composições podem ser preparadas usando procedimentos padrão.

Assim, a presente invenção fornece ainda uma composição farmacêutica para o uso no tratamento dos distúrbios acima, a qual compreende o composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo e um portador farmaceuticamente aceitável.

A presente invenção fornece ainda uma composição farmacêutica que compreende

o composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo e um portador farmaceuticamente aceitável.

Uma composição farmacêutica da invenção, que pode ser preparada por mistura, adequadamente na temperatura ambiente e pressão atmosférica, é usualmente adaptada para administração oral, parenteral ou retal e, como tal, pode estar na forma de tabletes, cápsulas, preparações líquidas orais, pós, grânulos, pastilhas expectorantes, pós reconstituíveis, soluções ou suspensões injetáveis ou infusíveis ou supositórios. No geral, composições oralmente administráveis são preferidas.

Tabletes e cápsulas para administração oral podem estar na forma de dosagem unitária, e podem conter excipientes convencionais, tais como agentes de ligação, enchedores, lubrificantes de tabletagem, desintegrantes e agentes umectantes aceitáveis. Os tabletes podem ser revestidos de acordo com métodos bem conhecidos na prática farmacêutica normal. Preparações líquidas orais podem estar na forma, por exemplo, de suspensão, soluções aquosas ou oleosas, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem estar na forma de um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Tais preparações líquidas podem conter aditivos convencionais, tais como agentes de suspensão, agentes emulsificadores, veículos não aquosos (que podem incluir óleos comestíveis), preservantes, e, se desejado, flavorizantes ou corantes convencionais.

Para administração parenteral, formas de dosagem unitária fluida podem ser preparadas utilizando um composto da invenção ou sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo e um veículo estéril. O composto, dependendo do veículo e concentração usados, pode ser colocado em suspensão ou dissolvido no veículo. Na preparação das soluções, o composto pode ser dissolvido para injeção e o filtro esterilizado antes do enchimento em um frasco ou ampola adequado e vedação. Vantajosamente, adjuvantes, tais como um anestésico local, preservantes e agentes tamponantes são dissolvidos no veículo. Para realçar a estabilidade, a composição pode ser congelada depois do enchimento no frasco e a água removida sob vácuo. Suspensões parenterais são preparadas substancialmente da mesma maneira, exceto que o composto é colocado em suspensão no veículo ao invés de ser dissolvido, e a esterilização não pode ser realizada por filtração. O composto pode ser esterilizado por exposição ao óxido de etileno antes da suspensão em um veículo estéril. Vantajosamente, um tensoativo ou agente umectante é incluído na composição para facilitar a distribuição uniforme do composto.

A composição pode conter de 0,01 % a 99 % em peso, preferivelmente de 1 a 60 % em peso, do material ativo, dependendo do método de administração. A dosagem do composto usado no tratamento dos distúrbios anteriormente mencionados variará na maneira usual com a gravidade dos distúrbios, o peso do paciente, e outros fatores similares. Entretanto, como um guia geral, dosagens unitárias adequadas podem ser de 0,05 a 1000 mg, mais adequadamente 1,0 a 200 mg, e tais dosagens unitárias podem ser administradas mais do que uma vez ao dia, por exemplo duas ou três vezes ao dia. Tal terapia pode se estender por várias semanas ou meses.

Um aspecto adicional da invenção é uma composição farmacêutica compreendendo de 0,05 a 1000 mg de um composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo, e de 0 a 3 g, mais adequadamente de 0 a 2 g de pelo menos um portador farmaceuticamente aceitável, por exemplo, um agente de ligação, um enchedor, um lubrificante de tabletagem, um desintegrante e ou um agente umectante.

A quantidade precisa dos compostos da fórmula (I) administrada a um hospedeiro, particularmente um paciente humano, será de responsabilidade do médico atendente. Entretanto, a dosagem utilizada dependerá de vários fatores incluindo a idade e sexo do paciente, a condição precisa sendo tratada e sua severidade, e a via de administração.

Compostos da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal dos mesmos podem ser usados em combinação com outros agentes terapêuticos.

Os compostos da invenção podem ser usados em combinação com outros agentes

terapêuticos, por exemplo, inibidores de COX-2 (ciclooxigenase-2), tais como celecoxib, deracoxib, rofecoxib, valdecoxib, parecoxib, COX-189 ou 2-(4-etóxi-fenil)-3-(4- metanossulfonil-fenil)-pirazolo[1,5-b]piridazina (WO 99/012930); inibidores de 5- lipoxigenase; NSAIDs (fármacos anti-inflamatórios não esteróides), tais como diclofenaco, 10 indometacina, nabumetona ou ibuprofeno; bisfosfatos, antagonistas do receptor de leucotrieno; DMARDs (fármacos antirreumáticos que modificam a doença), tais como metotrexato; agonistas do receptor de adenosina A1; bloqueadores do canal de sódio, tais como lamotrigina; moduladores do receptor NMDA (N-metil-D-aspartato), tais como antagonistas do receptor de glicina; Iigantes para a a2<J-subunidade de canais de cálcio 15 ativados pela voltagem, tais como gabapentina e pregabalina; antidepressivos tricíclicos, tais como amitriptilina; fármacos antiepilépticos estabilizantes de neurônio; inibidores de absorção monoaminérgicos, tais como venlafaxina; analgésicos opióides; anestésicos locais; agonistas de 5HTi, tais como triptanos, por exemplo sumatriptano, naratriptano, zolmitriptano, eletriptano, frovatriptano, almotriptano ou rizatriptano; moduladores do 20 receptor de acetil colina nicotínico (nACh); moduladores do receptor de glutamato, por exemplo, moduladores do subtipo NR2B; Iigantes do receptor EP4; Iigantes do receptor EP2; Iigantes do receptor EP3; agonistas de EP4 e agonistas de EP2; antagonistas de EP4; antagonistas de EP2 e antagonistas de EP3; Iigantes do receptor canabinóide; Iigantes do receptor de bradicinina; Iigante do receptor vanilóide; e Iigantes do receptor purinérgico, 25 incluindo antagonistas em P2X3, P2X2/3, P2X4, P2X7 ou P2X4/7 . Quando os compostos são usados em combinação com outros agentes terapêuticos, os compostos podem ser administrados seqüencial ou simultaneamente por qualquer via conveniente.

Inibidores de COX-2 adicionais são divulgados na Patente US N— 5.474.995 US 5.633.272; US 5.466.823, US 6.310.099 e US 6.291.523; e na WO 96/25405, WO 97/38986, WO 98/03484, WO 97/14691, WO 99/12930, WO 00/26216, WO 00/52008, WO 00/38311, WO 01/58881 e WO 02/18374.

Outros agentes terapêuticos reivindicados que são úteis como modificadores da doença ou como tratamentos sintomáticos da doença de Alzheimer podem ser usados em combinação com os compostos da presente invenção. Exemplos adequados de tais outros agentes terapêuticos podem ser agentes conhecidos para modificar a transmissão colinérgica, tais como os antagonistas de 5-HT1A, (por exemplo, lecozotan), antagonistas de

5-HT6, agonistas muscarínicos M1, antagonista muscarínico M2, inibidores de acetilcolinesterase (por exemplo, donepezil ou rivastigmina), ou moduladores alostéricos, agonistas do receptor nicotínico ou moduladores alostéricos, agentes sintomáticos, tais como antagonistas do receptor 5-HT6, por exemplo, SB742457, antagonistas do receptor H3, por exemplo, GSKI89254 e GSK239512, agonista do receptor 5HT4, também 5 antagonistas ou moduladores do receptor NMDA, e moduladores de PPARy, e agentes modificadores da doença, tais como inibidores e/ou moduladores de β ou γ-secretase (por exemplo, R-flurbiprofeno). Outros exemplos adequados de tais outros agentes terapêuticos podem ser medicamentos reivindicados que são úteis no tratamento da dor de origem neuropática incluindo neuralgias, neurite e dorsalgia, e dor inflamatória incluindo osteoartrite, 10 artrite reumatóide, dor inflamatória aguda, dorsalgia e enxaqueca.

Quando os compostos são usados em combinação com outros agentes terapêuticos, eles podem ser administrados seqüencial ou simultaneamente através de qualquer via conveniente.

Assim, a invenção fornece, em um aspecto adicional, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo junto com um agente ou agentes terapêuticos adicionais.

As combinações referidas acima podem ser convenientemente apresentadas para o uso na forma de uma formulação farmacêutica e, assim, formulações farmacêuticas 20 compreendendo uma combinação, conforme definida acima, junto com um portador ou excipiente farmaceuticamente aceitável, compreendem um aspecto adicional da invenção. Os componentes individuais de tais combinações podem ser administrados seqüencial ou simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas.

Quando um composto da fórmula (I) ou um sal, solvato, hidrato farmaceuticamente aceitável ou solvato ou hidrato de um sal do mesmo é usado em combinação com um segundo agente terapêutico ativo contra o mesmo estado da doença, a dosagem de cada composto pode diferir daquela quando o composto é usado sozinho. Dosagens apropriadas serão prontamente avaliadas por aqueles habilitados na técnica.

Todas as publicações, incluindo mas não limitadas às patentes e pedidos de patente, citadas neste relatório descritivo são incorporadas como referência como se cada publicação individual fosse específica e individualmente indicada para ser incorporada integralmente como referência neste relatório.

Os Exemplos não Iimitantes seguintes ilustram a preparação de compostos farmacologicamente ativos da invenção.

EXEMPLOS

Nos procedimentos que seguem, depois de cada material de partida, referência a uma descrição é tipicamente fornecida. Isto é meramente fornecido para assistência ao químico habilitado. O material de partida pode não necessariamente ser preparado, conforme descrito na descrição referida.

LC/Espectros de massas foram obtidos usando Método de 5 minutos

Sistema HPLC série 1100 Agilent ligado com um Espectrômetro de Massas Waters

ZQ. A análise por LC foi realizada em uma coluna Waters Atlantis (50 x 4,6 mm, 3 μπ\) (fase móvel: [água + HCO2H 0,05 %] 97 % / [CH3CN + HCO2H 0,05 %\ 3 % durante 0,1 min, depois um gradiente de [água + HCO2H 0,05 %] 3 % / [CH3CN + HCO2H 0,05 %] 97 % durante 3,9 min, e depois mantida sob estas condições durante 0,8 min); temperatura = 30 10 °C; taxa de fluxo = 3 mL/min; Espectros de massas foram coletados usando eletrospray e/ou APCI. Nos espectros de massas apenas um pico no aglomerado iônico molecular é relatado. A faixa de detecção de UV é de 220 a 330 nm.

Ou um método de 2 minutos

Hardware: Gerenciador de solvente Binário Acquity Waters, Gerenciador de Amostra Acquity Waters, Forno de Coluna Acquity Waters, Arranjo de Fotodiodos Acquity Waters, Espectrômetro de Massas Waters ZQ, Polymer Labs ELSD PL1000, Sistema Operacional XP SP2

Software: Waters MassLynx v4.1

Coluna: Acquity UPLC BEH C18 1,7 pm, 2,1 mm x 50 mm, forno de coluna ajustado a 40 graus centígrados

Solventes: A- Solvente Aquoso = Água Ácido fórmico 0,1 % + Acetato de Amônio 10 mM, B- Solvente Orgânico = MeCN:Água 95:5 + Ácido fórmico 0,05 %

Ajustes do Instrumento: Volume de Injeção: 0,5 μ\, detecção de UV: 220 a 330 nm, faixa de varredura MS: 100 a 1000 uma, taxa de varredura MS: 0,2 segundo por varredura com um atraso entre varredura de 0,1 segundo, função de varredura MS: Eletrospray com comutação pós neg.

Gradiente:

Tempo Fluxo mL/mim % de A % de B 0 1 97 3 0,1 1 97 3 1,4 1 0 100 1,9 1 0 100 2 1 97 3 Os espectros de ressonância magnética de prótons (RMN) foram registrados em um instrumento Bruker em 250 ou 400 MHz. Os deslocamentos químicos são relatados em

0 ppm (6) usando tetrametilsilano como padrão interno. Padrões de separação são designados como s, singleto; d, dubleto; t, tripleto; q, quarteto; m, multipleto; br, amplo. Os espectros de RMN foram registrados em uma temperatura variando de 25 a 90 °C. Quando mais do que um conformêro for detectado, os deslocamentos químicos para a maioria abundante são relatados.

A cromatografia foi realizada em cartuchos de sílica gel em um Flashmaster Il

(Argonaut) ou um sistema de cromatografia automatizado Biotage SP4 e um sistema de solvente e eluição apropriado.

Instrumentos de HPLC Preparativa Automatizada Direcionada a Massas (MDAP) consistem no seguinte: Módulo de Gradiente Binário Waters 2525, Bomba de Composição 10 Waters 515, Módulo de Controle de Bomba Waters, Coletor de Injeção Waters 2767, Gerenciador de Fluidos de Coluna Waters, Detector de Arranjo de Fotodiodos Waters 2996, Espectrômetro de Massas Waters ZQ1 coletor de fração Gilson 202, coletor de resíduos Gilson Aspec. Coluna: Waters Atlantis, as dimensões são 19 mm x 100 mm (escala <100 mg) e 30 mm x 100 mm (escala >100 mg), o tamanho de partícula é de 5 μηι. Solventes, A: 15 Solvente Aquoso = Água + Ácido fórmico 0,1 % B: Solvente Orgânico = Acetonitrila + Ácido fórmico 0,1 %. Faixa de Gradientes de 5 a 30 % de B em A para 80 a 99 % de B em A, dependendo do tempo de retenção da HPLC, tempo conduzido = 13,5 minutos. Taxa de fluxo = 20 mL/min (escala <100 mg), 40 mL/min (escala >100 mg)

O Η-Cube™ é um instrumento de hidrogenação de fluxo contínuo fabricado pela THALES Inc (Budapeste)

As abreviações usadas neste relatório são:

DMF - A/,A/-Dimetilformamida DCM - Diclorometila THF- Tetraidrofurano DME - Éter etilenoglicol dimetílico

Pd2dba3 - Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0)

Descrição 1

4-r(Fenilmetinóxi1-1 /-/-indazol (D1)

A uma solução agitada de 4-hidroxiindazol (702 mg, 5,24 mmols) em DMF (10 mL) 50 na temperatura ambiente sob argônio foi adicionado hidreto de sódio (231 mg de uma dispersão em óleo mineral 60 %, 5,76 mmols). A mistura foi agitada durante 10 minutos e depois brometo de benzila (0,622 mL, 5,24 mmols) foi adicionado por intermédio de seringa. Depois de agitar durante 2 horas na temperatura ambiente, a mistura foi extinta com solução de cloreto de amônio, os solventes foram evaporados e acetato de etila e água foram adicionados. O produto foi extraído em acetato de etila e a solução orgânica foi seca (Na2SO4) e evaporada. Cromatografia (sílica gel, eluição com acetato de etila O a 100 % em hexano) forneceu o composto do título (D1) (0,532 g).

LC-MS: MH+ = 225 (Ci4H12N2O = 224)

Descrição 2

1 -(3-Fluoro-4-r(fenilmetihóxilfenil>-4-r(fenilmetil)óxi1-1 H-indazol (D2)

F

Uma mistura de 4-[(fenilmetil)óxi]-1 H-indazol (D1) (530 mg, 2,37 mmols), ácido {3- fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}borônico (873 mg, 3,55 mmols), acetato de cobre (861 mg, 4,74 mmols), trietilamina (0,660 mL, 4,74 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (2,5 g) em 10 diclorometano (10 ml) foi vigorosamente agitada sob uma atmosfera de ar na temperatura ambiente. Além disso, quantidades de ácido borônico, trietilamina e acetato de cobre foram adicionadas depois de 18 horas (0,5 equivalente de cada) e 22 horas (1 equivalente de cada). Depois de agitar durante um adicional de 24 h, a mistura foi filtrada através de um tampão de sílica gel e concentrada. Cromatografia (sílica gel, eluição com acetato de etila 0 15 a 20 % em hexano) forneceu o composto do título (D2) como um sólido branco (309 mg).

LC-MS: MH+ = 425 (C27H21FN2O2 = 347)

Descrição 3

4-Bromo-1-f3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenil)-6-(metilóxi)-1 H-indazol (D3)

A uma solução de 4-bromo-6-(metilóxi)-1 H-indazol (200 mg, 0,88 mmol) em 20 diclorometano (10 mL) foram adicionados ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (433 mg, 1,76 mmol), piridina (0,14 mL, 1,73 mmol), acetato de cobre (239 mg, 1,32 mmol) e peneiras moleculares 4 A em pó (500 mg). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente na presença de ar durante 3 dias. Celite foi adicionado à mistura, depois a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e depois o filtrado foi concentrado a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com diclorometano 5 a 80 % em hexano para produzir o composto do título (D3) (176 mg).

LC-MS: MH+ = 427, 429 (C2IH16BrFN2O2 = 426, 428)

Descrição 4

1-f3-Fluoro-4-r(fenilmetinóxi1fenil-6-(metilóxi)-1H-indazol-4-ol (D4)

A uma solução de 4-bromo-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-6-(metilóxi)-1 H-indazol (D3) (176 mg, 0,41 mmol) em dioxano (5 mL) e água (5 ml) foi adicionado hidróxido de potássio (92 mg, 1,64 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com argônio e depois tratada com bis(1,1-dimetiletil)[2’,4’,6’-tris(1-metiletil)-2-bifenilil]fosfano (10 mg, 0,02 mmol) e 10 tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (8 mg, 0,009 mmol). Depois de aquecer a 90 0C durante 1 hora, a mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e depois diluída com acetato de etila e água. O pH foi ajustado a 7 pela adição de ácido clorídrico 1 M. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e 15 concentradas a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 70 % em hexano para produzir o composto do título (D4) (118 mg).

LC-MS: MH+ = 365 (C21H17FN2O3 = 364)

Descrição 5

4-Bromo-1 -(3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenil)-1 H-indazol-6-carbonitrila (D5)

A uma solução de 4-bromo-1H-indazol-6-carbonitrila (1,0 g, 4,50 mmols) em

diclorometano (80 mL) foram adicionados ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (2,2 g, 8,94 mmols), piridina (0,71 mL, 8,78 mmols), acetato de cobre (1,2 g, 6,63 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (2,0 g). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente na presença de ar durante 6 dias. Celite foi adicionado à mistura, depois a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e depois o filtrado foi concentrado a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com diclorometano 5 a 100 % em hexano para produzir o composto do título (D5) (774 mg).

LC-MS: MH+ = 422, 424 (C2iHi3BrFN3O = 421, 423)

Descricão 6

1 -(3-Fluoro-4-f(fenilmetil)óxilfenill-4-hidróxi-1 /-/-indazol-6-carbonitrila (D6)

A uma solução de 4-bromo-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1/-/-indazol-6- carbonitrila (D5) (535 mg, 1,27 mmol) em dioxano (10 ml) e água (10 mL) foi adicionado hidróxido de potássio (284 mg, 5,07 mmols). A mistura de reação foi desgaseificada com argônio e depois tratada com bis(1,1-dimetiletil)[2’,4’,6’-tris(1-metiletil)-2-bifenilil]fosfano (32 mg, 0,075 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (23 mg, 0,025 mmol). Depois de aquecer a 90 0C durante

1 hora, a mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e depois diluída com acetato de etila e água. O pH foi ajustado a 7 pela adição de ácido clorídrico 1 M. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas 15 combinadas foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 100 % em hexano para produzir o composto do título (D6) (308 mg).

LC-MS: MH+ = 360 (C2iH14FN3O2 = 359)

Descricão 7

4-Bromo-6-fluoro-1-(3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenil}-1 H-indazol (D7)

A uma solução de 4-bromo-6-fluoro-1 H-indazol (1,0 g, 4,65 mmols) em diclorometano (50 ml) foram adicionados ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (2,29 g, 9,31 mmols), piridina (0,75 mL, 9,28 mmols), acetato de cobre (1,26 g, 6,96 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (2 g). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente na presença de ar durante 4 dias. Celite foi adicionado à mistura e agitado durante 5 min, depois a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e depois o filtrado foi lavado com água, seco em sulfato de magnésio, filtrado e concentrado. O produto foi 5 purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com diclorometano 5 a 100 % em hexano para produzir o composto do título (D7) (779 mg).

(D7) (670 mg, 1,61 mmol) em dioxano (20 ml) e água (20 ml) foi adicionado hidróxido de potássio (362 mg, 6,46 mmols). A mistura de reação foi desgaseificada com argônio e depois tratada com bis(1,1-dimetiletil)[2’,4’,6’-tris(1-metiletil)-2-bifenilil]fosfano (41 mg, 0,097 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (30 mg, 0,033 mmol). Depois de aquecer a 15 90 0C durante 1 hora, a mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e depois diluída com acetato de etila e água. O pH foi ajustado a 7 pela adição de ácido clorídrico 1 M. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com 20 acetato de etila 5 a 80 % em hexano para produzir o composto do título (D8) (473 mg).

LC-MS: MH+ = 415, 417 (C20H13BrF2N2O = 414, 416)

Descricão 8

6-Fluoro-1 -(3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenil)-1 H-indazol-4-ol (D8)

10

A uma solução de 4-bromo-6-fluoro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1 H-indazol

LC-MS: MH+ = 353 (C20H14F2N2O2 = 352)

Descricão 9

6-Bromo-1-(3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenilM-(metilóxi)-1 H-indazol (D9)

A uma solução de 6-bromo-4-(metilóxi)-1 H-indazol (1,0 g, 4,40 mmols) em diclorometano (50 ml) foram adicionados ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (2,16 g, 8,80 mmols), piridina (0,71 mL, 8,79 mmols), acetato de cobre (1,2 g, 6,62 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (2 g). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente na presença de ar durante 5 dias. Celite foi adicionado à mistura e agitado durante 5 10 min, depois a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e depois o filtrado foi lavado com diclorometano, depois lavado com água, seco em sulfato de magnésio, filtrado e concentrado. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 30 % em hexano para produzir o composto do título (D9) (1,23 g).

LC-MS: MH+ = 427, 429 (C21H16BrFN2O2 = 426, 428)

0 Descricão 10

4-Bromo-6-cloro-1-f3-fluoro-4-f(fenilmetil)óxi1fenil)-1 H-indazol (DIO)

4-Bromo-6-cloro-1 H-indazol (413 mg, 1,78 mmol), ácido {3-fluoro-4- [(fenilmetil)óxi]fenil}borônico (876 mg, 3,56 mmols), acetato de cobre (II) (483 mg, 2,67 mmols) e piridina (0,29 mL, 3,56 mmols) em DCM (30 ml) foram agitados na presença de 5 peneiras moleculares (4 A, 790 mg) em ar. Depois de 40 horas, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e concentrada para fornecer 1,24 g de material bruto. Isto foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 40 + M) com um gradiente de Et2O (0 a 30 %) em hexano para fornecer 410 mg do composto desejado (D10) contendo uma quantidade pequena do regioisômero N2-arila.

!0 LC-MS: MH+ = 432 (C20H13BrCIFN2O = 431)

Descricão 11

6-Cloro-1-(3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenilV-1H-indazol-4-ol (D11)

OH

Uma solução de 4-bromo-6-cloro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1 H-indazol (D10) (410 mg, 0,95 mmol) e KOH (212 mg, 3,8 mmols) em dioxano (10 ml) e água (10 ml) foi sonicada sob um fluxo de argônio durante 5 minutos depois que o bis(1,1- dimetiletil)[2’,4’,6’tris(1-metiletil)-2-bifenilil]fosfano (24 mg, 0,057 mmol) e Pd2dba3 (17 mg, 0,019 mmol) foram adicionados e esta foi aquecida em refluxo durante 2 horas. A mistura depois foi esfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc e água e o pH foi ajustado a cerca de 7. As 5 fases foram separadas, o aquoso extraído novamente com EtOAc e os orgânicos combinados foram finalmente secos em MgSO4. O material bruto (450 mg) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 25 + M) com um gradiente de EtOAc 0 a 50 % em hexano para fornecer 60 mg do composto desejado (D11).

O 4-bromo-6-metil-1 H-indazol (950 mg, 4,5 mmols), o ácido {3-fluoro-4- [(fenilmetil)óxi]fenil}borônico (2,2 g, 9 mmols), acetato de cobre (II) (1,22 g, 6,75 mmols) e piridina (0,73 mL, 9 mmols) em DCM (80 ml) foram agitados na presença de peneiras 15 moleculares (4 A, 2 g) em ar. Depois de 40 horas, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e concentrada para fornecer 3,3 g de material bruto. Isto foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 40 + M) com um gradiente de EtOAc 0 a 30 % em hexano para fornecer 1,98 g do composto desejado (D12) levemente impuro, porém considerado.

10

LC-MS: MH+ = 369 (C20H14CIFN2O2 = 368)

Descricão 12

4-Bromo-1 -f3-fluoro-4-f(fenilmetiDóxi1fenil)-6-metil-1 H-indazol (D12)

Br

O

20

LC-MS: MH+ = 412 (C21H16BrFN2O = 411)

Descricão 13

1 -(3-Fluoro-4-F(fenilmetinóxi1fenil)-6-metil-1 H-indazol-4-ol (D13)

OH

O

Uma solução de 4-bromo-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-6-metil-1 H-indazol (D12) (1,97 g, 4,5 mmols) e KOH (1 g, 18 mmol) em dioxano (50 ml) e água (50 ml) foi sonicada sob um fluxo de argônio durante 5 minutos depois que o bis(1,1-dimetiletil)[2’,4’,6’-tris(1- metiletil)-2-bifenilil]fosfano (115 mg, 0,27 mmol) e Pd2dba3 (82 mg, 0,09 mmol) foram adicionados e esta foi aquecida em refluxo durante 2 horas. A mistura depois foi esfriada até 5 a temperatura ambiente, diluída com EtOAc e água e o pH foi ajustado a cerca de 7 com HCI 1 M. As fases foram separadas, o aquoso extraído novamente com EtOAc e os orgânicos combinados foram finalmente secos em MgSO4. O material bruto (2,1 g) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 40 + M) com um gradiente de EtOAc 0 a 50 % em hexano para fornecer 730 mg do composto desejado 10 (D13).

LC-MS: MH+ = 349 (C2IH17FN2O2 = 348)

Descricão 14

2-Bromo-3.6-difluorobenzaldeído (D14)

À solução de diisopropilamina (13,29 mL, 93 mmols) em THF (300 mL) a -78 °C, foi 15 adicionado n-butillítio (34,2 mL de 2,5 M em hexanos, 85 mmols), às gotas durante 10 min. A mistura foi agitada a -78 0C durante 15 min e depois 2-bromo-1,4-difluorobenzeno (15 g, 78 mmols) em THF (100 mL) foi adicionado às gotas durante 15 min mantendo a temperatura abaixo de -65 °C. Depois de agitar durante 1 h a -78 °C, /V,/V-dimetilformamida (6,62 mL, 85 mmols) foi adicionada por intermédio de seringa. A mistura foi agitada a -78 0C 20 durante 30 min e depois extinta com solução de NH4CI sat. e a mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente. O produto foi extraído em éter e os extratos foram secos (Na2SO4) e evaporados. Cromatografia (sílica, diclorometano 0 a 100 % em hexano) forneceu o composto do título (D14) como um sólido amarelo (12,73 g).

RMN (ÍH), (CDCI3): 7,16 (1H, m), 7,35 (1H, m), 10,32 (1H, s).

Descricão 15

4-Bromo-5-fluoro-1 /-/-indazol (D15)

Br

A uma solução de 2-bromo-3,6-difluorobenzaldeído (D14) (6 g, 27,1 mmols) em 1,2- dimetoxietano (25 ml) foi adicionada hidrazina monoidratada (30 mL, 956 mmols) durante 5 min. A mistura depois foi submetida ao refluxo sob argônio durante 6 dias. A solução foi 30 evaporada a -10 ml e a mistura foi vertida em água (500 mL). O sólido precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3 x) e seco para fornecer 1,4 g de produto bruto. O aquoso foi extraído com acetato de etila (2 x) e os extratos foram secos em Na2SO4 e evaporados para fornecer 0,4 g adicional de sólido que foi combinado com o lote anterior e submetido à cromatografia (sílica gel, acetato de etila em hexano) para fornecer o composto do título (D15) como um sólido branco (1,01 g).

LC-MS: MH+ = 215/217 (C7H4BrFN2 = 214/216)

Descricão 16

4-Bromo-5-fluoro-1-l3-fluoro-4-f(fenilmetil)óxi1fenil)-1 H-indazol (D16)

Uma mistura de 4-bromo-5-fluoro-1 H-indazol (D15) (1,008 g, 4,69 mmols), ácido {3- fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}borônico 1,730 g, 7,03 mmols), acetato de cobre (II) (1,277 g, 7,03 mmols) e piridina (0,758 mL, 0,742 g, 9,38 mmols) foi vigorosamente agitada sob uma atmosfera de ar com peneiras moleculares 4 A em pó (5 g) na temperatura ambiente. Depois de 6 dias, 580 mg adicionais de ácido borônico foram adicionados e a agitação continuada durante um adicional de 24 h. A mistura foi filtrada através de celite, o celite foi lavado com diclorometano e o filtrado combinado foi lavado com água, seco em Na2SO4 e evaporado. Cromatografia (sílica gel, diclorometano 0 a 100 % em isoexano), seguido por trituração do produto com éter dietílico forneceu o composto do título (D16) (0,968 g) como um sólido branco.

LC-MS: MH+ = 415/417 (C20H13BrFN2O = 414/416)

Descricão 17

5-Fluoro-1-f3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxnfenil}-1H-indazol-4-ol (D17)

Uma suspensão de 4-bromo-5-fluoro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1 H-indazol (D16) (0,968 g, 2,331 mmols) em 1,4-dioxano (20 mL)/água (20 ml) foi agitada e tratada com hidróxido de potássio (0,523 g, 9,32 mmols), Pd2dba3 (42,7 mg, 0,047 mmol) e 2-di-terc

Br

OH butilfosfino-2’,4’,6’-triisopropilbifenila (59,4 mg, 0,140 mmol) e a mistura foi submetida ao refluxo sob argônio. Depois do refluxo durante 6 h, as mesmas quantidades de Pd2dba3 e 2- di-tercbutilfosfino-2’,4’,6’-triisopropilbifenila foram adicionadas e o refluxo continuado durante um adicional de 3 h. A mistura foi diluída com água/acetato de etila e o pH foi ajustado a 6 com HCI 2 M. O produto foi extraído em acetato de etila e os extratos foram secos (Na2SO4) e concentrados. Cromatografia (sílica, diclorometano/hexano) forneceu o composto do título (D17) como um sólido bege (0,612 g).

LC-MS: MH+ = 353 (C20H14F2N2O2 = 352)

Descricão 18

3-Bromo-6-fluoro-2-(metilóxi)benzaldeído (D18)

A uma solução de diisopropilamina (6,89 g, 9,6 mL, 68,3 mmols) em THF (100 ml) a -78 0C foi adicionado n-butillítio (33,5 ml de solução 1,6 M em hexano, 53,6 mmols) durante 3 min. Depois de agitar a -78 0C durante 10 min, 2-bromo-5-fluoroanisol (10 g, 48,8 mmols) em THF (20 ml) foi adicionado às gotas durante 15 min. Depois que a adição foi concluída, a mistura foi agitada a -78 0C durante 1 h e depois DMF (3,91 g, 4,12 mL, 53,6 mmols) foi adicionado às gotas durante 3 min e a agitação foi continuada a -78 0C durante 45 min. Solução de NH4CI saturada foi adicionada e a mistura deixado até a temperatura ambiente. Éter dietílico e HCI 2 M foram adicionados, o produto foi extraído em éter dietílico e os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos e evaporados. Cromatografia em sílica gel seguido por trituração do produto com éter dietílico forneceu o composto do título (D18) como um sólido amarelo (6,84 g).

RMN (<5h), (CDCI3): 3,97 (3H, s), 6,90 (1H, m), 7,76 (1H, dd, J = 5,9, 11,0 Hz), 10,34

(1H,s).

Descricão 19

5-Bromo-4-fmetilóxi)-1 H-indazol (D19)

Uma mistura de 3-bromo-6-fluoro-2-(metilóxi)benzaldeído (D18) (4 g, 17,16 mmols), cloridreto de metoxilamina (1,43 g, 17,16 mmols) e carbonato de potássio (2,60 g, 18,97 mmols) em DME (20 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h sob argônio. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado, depois redissolvido em DME (20 ml) e hidrazina hidratada (20 ml) foi adicionada e a mistura foi aquecida a 100 0C durante 16 h. Depois de esfriar, acetato de etila foi adicionado e a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca (MgSO4) e concentrada. A trituração com éter dietílico forneceu o composto do título (D19) como um sólido laranja.

LC-MS: MH+ = 227/229 (C8H7BrN2O = 226/228)

Descricão 20

Uma mistura de 5-bromo-4-(metilóxi)-1 H-indazol (D19) (0,670 g, 2,95 mmols), ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (1,45 g, 5,90 mmols), acetato de cobre (II) (0,804 g, 4,43 mmols), piridina (0,447 mL, 5,90 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (3 g) em diclorometano (30 ml) foi agitada em uma atmosfera de ar na temperatura ambiente. Depois 10 de 4 dias, a mistura foi diluída com acetato de etila e filtrada através de celite. O filtrado foi lavado com água, seco (Na2SO4) e concentrado. Cromatografia em sílica gel (acetato de etila 0 a 30 % em hexano e éter dietílico em hexano) forneceu o composto do título (D20)

A uma solução de diisopropilamina (5 mL, 35,4 mmols) em THF (30 mL) a 0 0C sob argônio foi adicionado n-butillítio (16,5 ml de solução 1,6 M em hexano, 26,4 mmols) lentamente durante 20 minutos. A mistura foi esfriada a -75 0C e 2-bromo-1-cloro-4- 20 fluorobenzeno (5 g, 23,9 mmols) em THF (20 ml) foi adicionado às gotas durante 15 min embora mantendo a temperatura < -70 °C. A solução depois foi agitada a -75 0C durante 45 min e depois DMF (2,2 mL, 28,6 mmols) foi adicionado durante 5 min. A mistura foi agitada a -78 0C durante 2 h e depois deixada atingir a temperatura ambiente. Água foi adicionada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados Í5 com salmoura e o solvente evaporado. Cromatografia (sílica gel, acetato de etila/hexano) forneceu o composto do título (D21) como um sólido amarelo (3,344 g).

5

5-Bromo-1-f3-fluoro-4-r(fenilmetil)óxi1fenilM-(metilóxi)-1 H-indazol (D20)

o

(0,65 g).

15

LC-MS: MH+ = 427/429 (C21H16BrFN2O2 = 426/428) Descricão 21

2-Bromo-3-cloro-6-fluorobenzaldeído (D21)

Br o RMN (<JH), (CDCI3): 7,14 (1H, m), 7,66 (1H, dd, J= 5,0, 11,0 Hz), 10,32 (1H, s) Descricão 22

4-Bromo-5-cloro-1/-/-indazol (D22)

Br

Cl

N

Uma mistura de 2-bromo-3-cloro-6-fluorobenzaldeído (D21) (1 g, 4,2 mmols),

cloridreto de metoxilamina (0,35 g, 4,2 mmols) e carbonato de potássio (0,64 g, 4,6 mmols) foi aquecida em DME anidro (5 ml) a 40 0C durante 5 h. A mistura foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado de 1 a 2 mL. Hidrazina monoidratada (20 ml) foi adicionada e a mistura foi aquecida a 100 0C durante 21 h. Depois de esfriar, acetato de etila e água foram adicionados e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila. Os extratos 10 combinados foram lavados com salmoura, secos e evaporados. Cromatografia (sílica, acetato de etila/hexano) forneceu o composto do título (D22) como um sólido branco amarelado (0,361 g).

Uma mistura de 4-bromo-5-cloro-1 H-indazol (D22) (0,361 g, 1,56 mmol), ácido {3- fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}borônico (0,57 g, 2,32 mmols), acetato de cobre (II) (0,42 g, 2,31 mmols) e piridina (0,25 mL, 3,10 mmols) em diclorometano (50 ml) foi vigorosamente agitada sob uma atmosfera de ar com peneiras moleculares 4 A em pó (1,5 g). Depois de 5 20 dias, a mistura foi filtrada através de celite e o solvente evaporado. O concentrado foi submetido à cromatografia (sílica, diclorometano/hexano) para fornecer o composto do título (D23) como um sólido branco amarelado (0,32 g).

15

LC-MS: MH+ = 231/233/235 (C7H4BrCIN2 = 230/232/234)

Descricão 23

4-Bromo-5-cloro-1-(3-fluoro-4-f(fenilmetil)óxi1fenill-1 H-indazol (D23)

Br

O

25

LC-MS: MH+ = 431/433 (C20H13BrCIFN2O = 430/432)

Descricão 24

5-Cloro-1 ~f3-fluoro-4-r(fenilmetinóxnfenil}-1 H-indazol-4-ol (D24) OH

Uma suspensão de 4-bromo-5-cloro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1 H-indazol (D23) (0,32 g, 0,74 mmol) em 1,4-dioxano (5 ml_)/água (5 ml) foi agitada e tratada com hidróxido de potássio (0,17 g, 3,03 mmols), Pd2dba3 (0,014 g, 0,015 mmol) e 2-ditercbutilfosfino-2’,4’,6’-triisopropilbifenila (0,019 g, 0,045 mmol) e a mistura foi aquecida a 90 5 0C sob argônio. Depois de 3 h, a mistura foi esfriada e água/acetato de etila foram adicionados seguido por HCI 2 N (1,3 ml) e o produto foi extraído em acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos, concentrados e submetidos à cromatografia (sílica, acetato de etila/hexano) para fornecer o composto do título (D24) (0,195 g).

LC-MS: MH+ = 369/371 (C20H14CIFN2O2 = 368/370)

Descricão 25

2.3-Difluoro-6-(metilóxi)benzaldeído (D25)

F

A uma solução de diisopropilamina (14,6 mL, 103,5 mmols) em THF seco (50 mL) esfriada a -78 0C foi adicionada uma solução de BuLi (1,6 M em hexano, 47 mL, 75,9 mmols) às gotas sob argônio, mantendo a temperatura abaixo de -60 °C. A mesma foi 15 agitada nesta temperatura durante 15 minutos, depois que uma solução de 1,2-difluoro-4- (metilóxi)benzeno (10 g, 69 mmols) em THF seco (50 mL) foi adicionada lentamente. A mistura foi deixada agitar a -78 0C durante 45 minutos seguido por adição lenta de DMF (6,37 mL, 82,8 mmols) mantendo a temperatura abaixo de -60 °C. A mistura resultante foi agitada a -78 0C durante cerca de 3,5 horas, depois que água (100 mL) foi adicionada e o 20 esfriamento removido para possibilitar o aquecimento da mistura até a temperatura ambiente. Esta foi diluída com EtOAc e o orgânico separado. O aquoso foi extraído novamente com EtOAc (3 x) e os orgânicos combinados lavados com salmoura e secos em MgSO4. O material bruto (10,26 g) foi purificado por cromatografia instantânea para fornecer o composto do título (D25) (9 g).

LC-MS: MH+ = 173 (C8H6F2O2 = 172)

Descricão 26 7-Fluoro-4-(metilóxiV1/-/-indazol (D26)

N

F

O 2,3-difluoro-6-(metilóxi)benzaldeído (D25) (5 g, 29,05 mmols) foi dissolvido em DME (30 mL) e desgaseificado por sonicação sob argônio durante 5 minutos. A este foi adicionado cloridreto de O-metilidroxilamina (2,43 g, 29,05 mmols) e K2CO3 (4,42 g, 31,95 5 mmols) e a solução agitada durante 3 horas. A mistura foi filtrada através de celite e o volume reduzido a aproximadamente 20 mL sob vácuo. A esta foi adicionada hidrazina monoidratada (20 mL) e a mesma foi submetida ao refluxo sob argônio durante 2,5 dias. A reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc (150 mL) e água (150 mL) e as fases separadas. A camada aquosa foi extraída novamente com EtOAc (3 x) 10 e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos em MgSO4. O material bruto (4,8 g) foi purificado por cromatografia instantânea (ISCO Companion XL1 coluna de sílica 120 g) com um gradiente de EtOAc (0 a 50 %) em hexano para fornecer 3,33 g do composto do título (D26).

7-Fluoro-4-(metilóxi)-1/-/-indazol (D26) (500 mg, 3,01 mmols), o ácido {3-fluoro-4- [(fenilmetil)óxi]fenil}borônico (1,48 g, 6,02 mmols), acetato de cobre (II) (820 mg, 4,51 mmols) peneiras moleculares em pó (550 mg) e piridina (0,49 mL, 6,02 mmols) em DCM (15 20 ml) foram agitados na temperatura ambiente na presença de ar. Depois de 4 horas, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com água. O aquoso foi extraído novamente com DCM (3 x) e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos em MgSO4. O bruto (1,71 g) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4) com um gradiente de EtOAc (0 a 20 %) em hexano para fornecer 286 mg do 25 composto do título (D27).

15

LC-MS: MH+ = 167 (C8H7FN2O = 166)

Descricão 27

7-Fluoro-1-f3-fluoro-4-r(fenilmetihóxi1fenil)-4-(metilóxi)-1 H-indazol (D27)

o

LC-MS: MH+ = 367 (C21H16F2N2O2 = 366) Descricão 28

7-Cloro-4-fmetilóxi)-1 H-indazol (D28)

Cl

A uma solução de 3-cloro-2-fluoro-6-(metilóxi)benzaldeído (10 g, 53,0 mmols) em 1,2-dimetoxietano (105 ml) foram adicionados carbonato de potássio (8,06 g, 58,3 mmols) e 5 cloridreto de O-metilidroxilamina (4,43 g, 53,0 mmols) e a mistura foi agitada e aquecida a 45 0C durante 4 h. Depois de esfriar, a mistura foi filtrada e concentrada a -40 mL e hidrazina monoidratada (58,3 mL, 1856 mmols) foi adicionada e a reação foi submetida ao refluxo sob argônio durante o fim de semana. A mistura foi concentrada de 10 a 15 mL no evaporador rotatório e depois vertida em água e agitada durante 10 min. O sólido 10 precipitado foi coletado por filtração e lavado com água (3 x), seco por sucção e depois seco no forno a vácuo a 60 0C durante 1 h para fornecer o composto do título (D28) como um sólido branco amarelado (8,83 g).

LC-MS: MH+ = 183/185 (C8H7CIN2O = 182/184)

Descricão 29

7-Cloro-1-{3-fluoro-4-í(fenilmetinóxi1fenil)-4-(metilóxi)-1 H-indazol (D29)

Uma mistura de 7-cloro-4-(metilóxi)-1 H-indazol (D28) (5 g, 27,4 mmols), ácido {3- fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}borônico (10,11 g, 41,1 mmols), acetato de cobre (II) (7,46 g, 41,1 mmols) e piridina (4,43 mL, 4,33 g, 54,8 mmols) em diclorometano (100 ml) foi vigorosamente agitada sob uma atmosfera de ar com peneiras moleculares 4 A em pó (-25 g). Depois de 4 20 dias, a mistura foi filtrada através de celite e o filtro lavado com diclorometano. O filtrado foi lavado com água e salmoura e depois seco (Na2SO4) e evaporado. Cromatografia (sílica, diclorometano 5 a 100 % em isoexano) forneceu 2 produtos, o componente mais polar foi o produto N-1 arilado (sólido branco amarelado 2,41 g) (D29).

LC-MS: MH+ = 383/385 (C21H16CIFN2O2 = 382/384)

Descricão 30

3-Metil-4-IYfenilmetihóxi1-1 H-indazol (D30) N

H

A uma suspensão de hidreto de sódio (0,452 g de uma dispersão em óleo mineral 60 %, 11,3 mmols) em DMF (30 ml) foi adicionado 4-hidróxi-3-metilindazol (1,52 g, 10,3 mmols) (preparado em uma maneira similar àquela descrita em J. Med. Chem., 2000, 2672) em DMF (20 ml) por intermédio de uma cânula. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 5 10 minutos e depois brometo de benzila (1,223 mL, 10,3 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada na temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi extinta com solução de cloreto de amônio e a DMF foi evaporada. Acetato de etila e água foram adicionados e o produto foi extraído em acetato de etila e os extratos foram secos (Na2SO4) e evaporados. Cromatografia (acetato de etila 0 a 100 % em hexano) forneceu o composto do título (D30) 10 como um sólido laranja (1,774 g, contendo -10 % de material dibenzilado).

ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (1,97 g, 8,0 mmols), acetato de cobre (II) (1,09 g, 6,0 mmols), piridina (0,647 mL, 8,0 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (4 g) em diclorometano (25 ml) foi agitada em uma atmosfera de ar na temperatura ambiente. Depois de 48 h, a mistura foi filtrada através de Celite, concentrada, redissolvida em acetato de etila, filtrada novamente e concentrada e depois submetida à cromatografia (acetato de etila 20 0 a 50 % em hexano e éter dietílico 0 a 40 % em hexano). Um sólido branco cristalizou a partir de algumas frações e isto foi coletado por filtração para fornecer o composto do título (D31) (0,45 g).

LC-MS: MH+ = 239 (Ci5H14N2O = 238)

Descricão 31

1-(3-Fluoro-4-f(fenilmetinóxi1fenill-3-metil-4-í(fenilmetil)óxi1-1 H-indazol (D31)

o

Uma mistura de 3-metil-4-[(fenilmetil)óxi]-1 H-indazol (D30) (0,952 g, 4 mmols), LC-MS: MH+ = 439 (C28H23FN2O2 = 438)

Descricão 32

1 -r4-(MetilóxiWenil1-4-f(fenilmetil)óxi1-1 H-indazol (D32)

o

/

O 4-[(fenilmetil)óxi]-1 H-indazol (D1) (543 mg, 1,65 mmol), o ácido [4-

(metilóxi)fenil]borônico (500 mg, 3,29 mmols), acetato de cobre (II) (448 mg, 2,47 mmols) peneiras moleculares em pó (400 mg) e piridina (0,27 mL, 3,29 mmols) em DCM (75 ml) foram agitados na temperatura ambiente na presença de ar. Depois de 4 horas, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com água. O aquoso foi extraído novamente com DCM e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos em 10 MgSO4. O bruto (880 mg) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4) com um gradiente de Et2O (0 a 30 %) em hexano para fornecer 115 mg do composto do título (D32).

(metilóxi)fenil]borônico (831 mg, 4,46 mmols), acetato de cobre (II) (608 mg, 3,345 mmols) peneiras moleculares em pó (400 mg) e piridina (0,36 mL, 4,46 mmols) em DCM (75 ml) foram agitados na temperatura ambiente na presença de ar. Depois de 5 dias, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com água. O aquoso foi extraído 20 novamente com DCM e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos em MgSO4. O bruto (1,06 g) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 40 + M) com um gradiente de EtOAc (0 a 20 %) em hexano para fornecer 470 mg

LC-MS: MH+ = 331 (C2iH1eN202 = 330)

Descricão 33

1-f3-Cloro-4-(metilóxitfenin-4-r(fenilmetinóxi1-1 H-indazol (D33)

o

/

15

O 4-[(fenilmetil)óxi]-1 H-indazol (D1) (500 mg, 2,23 mmols), o ácido [3-cloro-4- do composto do título (D33) contendo uma impureza.

LC-MS: MH+ = 365 (C21H17CIN2O2 = 364)

Descrição 34

1-r3-Metil-4-(metilóxi)fenil1-4-r(fenilmetinóxi1-1/-/-indazol (D34)

O 4-[(fenilmetil)óxi]-1H-indazol (D1) (500 mg, 2,23 mmols), o ácido [3-metil-4-

(metilóxi)fenil]borônico (740 mg, 4,46 mmols), acetato de cobre (II) (608 mg, 3,345 mmols), piridina (0,36 ml_, 4,46 mmols) e peneiras moleculares em pó (400 mg) em DCM (75 mL) foram agitados na temperatura ambiente na presença de ar. Depois de 41 horas, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com água. O aquoso foi extraído 10 novamente com DCM e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos em MgSO4. O bruto (1,17 g) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4) com um gradiente de EtOAc 0 a 30 % em hexano para fornecer 562 mg do composto do título (D34) contendo uma impureza.

LC-MS: MH+ = 345 (C22H20N2O2 = 344)

Descrição 35

1 -f3.5-Difluoro-4-r(fenilmetinóxi1fenM)-4-r(fenilmetihóxi1-1 H-indazol (035)

A uma solução de 4-[(fenilmetil)óxi]-1 H-indazol (D1) (280 mg, 1,25 mmol) em diclorometano (20 ml) foram adicionado ácido {3,5-difluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}borônico {pedido de patente DE 4236105} (660 mg, 2,50 mmols), piridina (0,202 mL, 2,50 mmols), acetato de cobre (340 mg, 1,88 mmol) e peneiras moleculares 4 A em pó (500 mg). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente na presença de ar durante 6 dias. Celite foi adicionado à mistura, depois a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e depois o filtrado foi lavado com água. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas 5 foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 100 % em hexano para produzir

o composto do título (D35 (257 mg).

LC-MS: MH+ = 443 (C27H20F2N2O2 = 442)

Descrição 36

4-Bromo-1 -(3.5-difluoro-4-r(fenilmetiBóxilfenilV-1 /-/-indazol-6-carbonitrila ÍD36)

A uma solução de 4-bromo-1/-/-indazol-6-carbonitrila (1,0 g, 4,50 mmols) em diclorometano (50 ml) foram adicionados ácido {3,5-difluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}borônico {DE 4236105} (1,8 g, 6,82 mmols), piridina (0,73 mL, 9,04 mmols), acetato de cobre (1,22 g, 6,74 mmols) e peneiras moleculares 4 A em pó (5 g). A mistura de reação foi agitada na 15 temperatura ambiente na presença de ar durante 6 dias. Celite foi adicionado à mistura e agitado durante 5 min, depois a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e depois o filtrado foi lavado com água, seco em sulfato de magnésio, filtrado e concentrado.

O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 10 a 100 % em hexano para produzir o composto do título (D36) (944 mg).

LC-MS: MH+ = 440, 442 (C2lH12BrF2N3O = 439, 441)

Descrição 37

1 -{3.5-Difluoro-4-f(fenilmetil)óxi1fenil)-4-hidróxi-1 /-/-indazol-6-carbonitrila (D37) A uma solução de 4-bromo-1-{3,5-difluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1H-indazol-6- carbonitrila (D36) (940 mg, 2,135 mmols) em dioxano (20 mL) e água (20 mL) foi adicionado hidróxido de potássio (479 mg, 8,54 mmols). A mistura foi desgaseificada com argônio e depois tratada com 2-di-terc-butilfosfino-2’,4’,6’-triisopropilbifenila (54,4 mg, 0,128 mmol) e 5 tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (39,1 mg, 0,043 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 90 0C durante 1 hora. A reação foi diluída com acetato de etila e água. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com 10 acetato de etila 10 a 100 % em hexano para fornecer o composto do título (D37) (617 mg).

LC-MS: MH+ = 378 (C2IH13F2N3O2 = 377)

Descrição 38

4-Bromo-1 -(3-fluoro-4-í(fenilmetil)óxi1fenil>-1 H-indazol (D38)

A uma solução de 4-bromo-1 H-indazol (4,32 g, 21,9 mmols) em diclorometano (100 ml) foram adicionados ácido 4-benzilóxi-3-fluorobenzenoborônico (10,8 g, 43,9 mmols), piridina (3,5 mL, 43,3 mmols), acetato de cobre (5,9 g, 32,6 mmols) e peneiras moleculares

4 A em pó (5 g). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente na presença de ar durante 5 dias. Celite foi adicionado à mistura de reação e a mistura agitada durante 5 minutos. A mistura depois foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com 20 diclorometano e depois o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi diluído em diclorometano e água. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída com diclorometano (4 x). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com diclorometano 10 a 80 % em hexano para produzir o composto do 25 título (D38) (5,25 g).

LC-MS: MH+ = 397, 399 (C20Hi4BrFN2O = 396, 398)

RMN de 1H ÓH (DMSO-Cf6) 8,34 (1H, d, J = 0,9 Hz), 7,80 (1H, m), 7,69 (1H, dd, J = 12,0, 2,5 Hz), 7,56 - 7,35 (9H, m), 5,29 (2H, s).

Descrição 39

1-f3-Fluoro-4-IYfenilmetil)óxi1fenil)-1H-indazol-4-ol (D39) A uma solução de 4-bromo-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1 H-indazol (D38) (5,25 g, 13,2 mmols) em dioxano (50 ml) e água (50 ml) foi adicionado hidróxido de potássio (2,95 g, 52,7 mmols). A mistura de reação foi desgaseificada com argônio e depois tratada com bis(1,1-dimetiletil)[2’,4’,6’-tris(1-metiletil)-2-bífenilil]fosfano (336 mg, 0,79 mmol) e 5 tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (242 mg, 0,26 mmol). Depois de aquecer a 90 0C durante 1 hora sob argônio, a mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e depois diluída com acetato de etila e água. O pH foi ajustado a ~7 pela adição de ácido clorídrico 1 M. Depois da separação das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de 10 magnésio, filtradas e concentradas a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 70 % em hexano para produzir o composto do título (D39) (3,80 g).

LC-MS: MH+ = 335 (C20H15FN2O2 = 334)

RMN de 1H δΗ (DMSO-cfe) 10,41 (1H, s), 8,31 (1H, d, J = 0,9 Hz), 7,61 (1H, dd, J = 12,2, 2,5 Hz), 7,52 - 7,17 (9H, m), 6,55 (1H, d J = 7,5 Hz), 5,26 (2H, s).

Exemplo 1

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol (E1)

Uma mistura de 1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-[(fenilmetil)óxi]-1 H-indazol (D2) (307 mg) em etanol/acetato de etila (-50 mL, 1:1) foi hidrogenada na presença de Pd 10 % 20 em carvão vegetal (150 mg) na pressão atmosférica e temperatura ambiente durante 3 h. A mistura foi filtrada e concentrada e depois submetida à cromatografia em sílica gel (eluição com acetato de etila 0 a 50 % em hexano) para fornecer um sólido branco amarelado. Isto foi dissolvido em acetato de etila e agitado com carvão vegetal (Norit SX+, 10 mg) durante 30 minutos. A mistura foi filtrada e concentrada para fornecer o composto do título (E1) (144 mg).

LC-MS: MH+ = 245 (C13H9FN2O2 = 243)

RMN (íH), (DMS0-d6): 6,54 (1H, d,J = 7,5 Hz), 7,13 (1H, t,J = 7,9 Hz), 7,14 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,25 (1H, dd, J = 7,8, 8,4 Hz), 7,36 (1H, ddd, J = 1,3, 2,6, 8,7 Hz), 7,49 (1H, dd, J = 2,7, 12,0 Hz), 8,27 (1H, d, J= 0,6 Hz), 10,17 (1H, amplo s), 10,29 (1H, amplo s) ppm

Exemplo 1a

1-(3-Fluoro-4-hidroxifenin-1H-indazol-4-ol (E1). procedimento alternativo

Uma solução de 1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1/-/-indazol-4-ol (D39) (3,79 g, 11,3 mmols) em acetato de etila (150 mL) foi hidrogenada durante a noite na temperatura e pressão 10 ambiente sobre paládio 10 % em carvão vegetal (700 mg). A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite, lavada com acetato de etila e o filtrado resultante foi concentrado a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 80 % em hexano. O produto depois foi triturado com hexano e o produto coletado por filtração e seco em um fomo a vácuo para produzir o composto do título (Ela) (2,35 g).

Dados de LC-MS e RMN foram compatíveis com aqueles descritos pelo Exemplo 1.

Exemplo 2

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifeniO-6-ímetilóxi)-1 H-indazol-4-ol (EZ\

Uma solução de 1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-6-(metilóxi)-1/-/-indazol-4-ol (D4) (116 mg, 0,32 mmol) em etanol (5 mL) e acetato de etila (5 mL) foi hidrogenada em um Hcube sobre um catalisador de paládio 10 % em carvão vegetal. A solução resultante foi concentrada e o produto purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 80 % em hexano para produzir o composto do título (E2) (65 mg).

LC-MS: MH+ = 275 (C14H11FN2O3 = 274)

Exemplo 3

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenin-4-hidróxi-1 /-/-indazol-6-carbonitrila (E3)

Uma solução de 1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-hidróxi-1/-/-indazol-6-carbonitrila (D6) (308 mg, 0,86 mmol) em etanol (10 ml) e acetato de etila (10 ml) foi hidrogenada em um H-cube sobre um catalisador de paládio 10 % em carvão vegetal. A solução resultante foi concentrada, dissolvida em etanol, depois o produto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 10 a 100 % em hexano para produzir o composto do título (E3) (98 mg).

LC-MS: MH+ = 270 (C14H8FN3O2 = 269)

RMN de 1H δΗ (DMSO-Cf6) 11,23 (1H, s), 10,32 (1H, s), 8,44 (1H, d, J = 0,9 Hz), 7,71 (1H, m), 7,57 (1H, dd, J = 11,8, 2,6 Hz), 7,39 (1H, m), 7,14 (1H, dd, J = 9,4, 8,8 Hz), 6,77 (1H, d, J= 1,1 Hz).

Exemplo 4

6-Fluoro-1-(3-fluoro-4-hidroxifenilV1H-indazol-4-ol (E4)

Uma solução de 6-fluoro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1/-/-indazol-4-ol (D8) (470 mg, 1,34 mmol) em etanol (20 mL) e acetato de etila (20 mL) foi hidrogenada em um H-cube sobre um catalisador de paládio 10 % em carvão vegetal. A solução resultante foi concentrada para produzir o composto do título (E4) (320 mg).

LC-MS: MH+ = 263 (C13H8F2N2O2 = 262)

RMN de 1H ÓH (DMSO-Cf6) 10,96 (1H, s), 10,19 (1H, s), 8,27 (1H,

(1H, dd, J = 11,8, 2,6 Hz), 7,34 (1H, m), 7,12 (1H, dd, J = 9,5, 8,7 Hz),

(1H, dd, J= 11,2, 2,0 Hz).

Exemplo 5

6-Bromo-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol (E5)

Ácido bromídrico 48 % (10 ml) foi adicionado ao 6-bromo-1-{3-fluoro-4- [(fenilmetil)óxi]fenil}-4-(metilóxi)-1H-indazol (D9) (1,16 g, 2,71 mmols) e a mistura aquecida a 130 0C durante 3 horas. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com acetato de etila e água. O pH foi ajustado a 7 pela adição de solução de hidróxido de sódio aquosa 2 M. Depois da separação da camada orgânica, a fase aquosa foi extraída

d, J = 0,9 Hz), 7,49 6,92 (1H, m), 6,38 novamente com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 100 % em hexano. O produto foi purificado ainda por MDAP para produzir o composto do título (E5) (170 mg).

LC-MS: MH+ = 323/325 (C13H8BrFN2O2 = 322/324)

Exemplo 6

6-Etenil-1-(3-fluoro-4-hidroxifenilV1H-indazol-4-ol (E6)

A uma solução de 6-bromo-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol (360 mg, 1,11 mmol) (E5) em dimetoxietano (10 ml) foram adicionados diclorobis(tris-o-tolilfosfino)paládio (44 10 mg, 0,056 mmol) e tributilvinilestanho (0,65 mL, 2,22 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 90 0C sob argônio durante a noite. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite. O filtrado foi concentrado e o produto bruto purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 100 % em hexano. O produto foi purificado ainda por MDAP para produzir o composto do título (E6) (101 mg).

LC-MS: MH+ = 271 (C15H11FN2O2 = 270)

Exemplo 7

6-Etil-1-(3-fluoro-4-hidroxifenin-1/-/-indazol-4-ol (E7)

Uma solução de 6-etenil-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol (E6) (190 mg, 0,70 mmol) em etanol (6 mL) e acetato de etila (6 mL) foi hidrogenada durante o fim de semana na temperatura ambiente e uma pressão de 50 psi sobre um catalisador de paládio 10 % em carvão vegetal (20 mg). Depois de filtração para remover o catalisador, o filtrado foi concentrado e o produto bruto purificado usando MDAP para produzir o composto do título (E7) (36 mg). LC-MS: MH+ = 273 (C15H13FN2O2 = 272)

Exemplo 8

6-Cloro-1-(3-fluoro-4-hidroxifenih-1/-/-indazol-4-ol (E8) OH

A uma suspensão de 6-cloro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1/-/-indazol-4-ol (D11) (60 mg, 0,163 mmol) em DCM seco (2 m L) esfriada a -78 0C foi adicionado BBr3 (1 M em DCM, 0,326 mL, 0,326 mmol) às gotas. A mistura resultante foi agitada nesta temperatura durante 1 hora, depois foi aquecida até a temperatura ambiente, tratada com 5 água e o pH ajustado a 7 por adição de NaHCO3 saturado. A solução foi extraída com EtOAc (2 x) e os orgânicos combinados foram secos em MgSO4. O material bruto (49 mg) depois foi purificado por cromatografia instantânea com um gradiente de EtOAc 5 a 100 % em hexano para fornecer o composto do título (E8) como um sólido incolor (35 mg).

LC-MS: MH+ = 279 (Ci3H8CIFN2O2 = 278)

RMN (<JH), (DMSO-Cf6): 6,54 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,16 (2H, m), 7,34 (1H, ddd, J= 1,2,

2,8, 8,8 Hz), 7,50 (1H, dd, J = 2,8, 12 Hz), 8,29(1 H1 s), 10,25 (1H, bs), 10,95 (1H, bs).

Exemplo 9

1-(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-6-metil-1 /-/-indazol-4-ol (E9)

OH

O composto do título foi preparado por intermédio de um procedimento similar àquele descrito no Exemplo 8 partindo de 1 -{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-6-metil-1 Hindazol-4-ol (D13) (720 mg, 2,01 mmols). A purificação final produziu 142 mg do composto do título como um sólido amarelo.

LC-MS: MH+ = 259 (C14H11FN2O2 = 258)

RMN (*H), (DMSO-Cf6): 2,35 (3H, s), 6,37 (1H, s), 6,94 (1H, s), 7,12 (1H, t, J = 8,8 Hz), 7,33 (1H, ddd, J = 1,2, 2,4, 8,8 Hz), 7,46 (1H, dd, J = 2,8, 12 Hz), 8,18 (1H, s), 10,2 (2H, bs). Exemplo 10

5-Fluoro-1-(3-fluoro-4-hidroxifenih-1/-/-indazol-4-ol (E10) Uma solução de 5-fluoro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1H-indazol-4-ol (D17) (610 mg, 1,731 mmol) em etanol (20 mL) foi hidrogenada com paládio 10 % em carbono (0,25 g, 2,349 mmols) na temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi filtrada, concentrada e submetida à cromatografia (EtOAc 0 a 100 % em hexano) para fornecer o composto do título (E10) como um sólido branco amarelado (290 mg).

LC-MS: MH+ = 263 (Ci3H8F2N2O2 = 262)

RMN (rfH), (DMSO-Cf6) 7,12 (2H, m), 7,33 |(2H, m), 7,50 (1H, dd, J = 2,4, 12,0 Hz), 8,57 (1H, s), 10,23 (1H, amplo s), 10,66 (1H, amplo s).

Exemplo 11

5-Bromo-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol (E11)

OH

Uma solução de 5-bromo-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-(metilóxi)-1/-/-indazol (D20) (71 mg) em diclorometano seco (2 mL) foi esfriada a -78 0C sob argônio a tratada às gotas com solução de tribrometo de boro (0,75 mL de solução 1 M em diclorometano, 0,75 mmol). A mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente e foi agitada durante a noite. 15 Água e acetato de etila foram adicionados e o pH da camada aquosa foi ajustado a 7 e o produto foi extraído em acetato de etila. Os extratos foram secos (Na2SO4), concentrados e submetidos à cromatografia (sílica gel, acetato de etila 0 a 100 % em hexano) para fornecer

o composto do título (E11) como um sólido bege (40 mg).

LC-MS: MH+ = 323/325 (C13H8N2O2BrF = 322/324)

RMN (<yH), (DMSO-Cf6): 7,13 (2H, m), 7,33 (1H, m), 7,49 (2H, m), 8,45 (1H, s), 10,22

(1H, s), 11,00 (1H,s).

Exemplo 12

5-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenih-1 /-/-indazol-4-ol ÍE12)

OH

Uma solução de 5-cloro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-1 W-indazol-4-ol (D24) (0,072 g, 0,2 mmol) em diclorometano (4mL) foi esfriada a -78 0C e tribrometo de boro (0,4 mL de solução 1 M em diclorometano, 0,4 mmol) foi adicionado às gotas durante 5 min. Depois de agitar a -78 0C durante 3 h sob argônio, metanol (1 mL) foi adicionado e a mistura foi diluída com diclorometano (30 mL) e água (30 mL). O pH foi ajustado a 7 com solução de NaHCO3 e a camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (35 mL x 2). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (25 mL) e evaporados. O produto foi purificado por MDAP para fornecer o composto do título (E12) como um sólido branco (0,022 g).

LC-MS: MH+ = 279/281 (Ci3H8CIFN2O2 = 278/280)

RMN (íH), (DMSO-Cf6): 7,15 (2H, m), 7,36 (2H, m), 7,50 (1H, dd, J = 2,4, 12,1 Hz), 8,43 (1H1 s), 10,24 (1H, s), 11,01 (1H,s).

Exemplo 13

7-Fluoro-1-(3-fluoro-4-hidroxifenilV1H-indazol-4-ol (E13)

OH

7-Fluoro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-(metilóxi)-1/-/-indazol (D27) (280 mg,

0,764 mmol) foi dissolvido em HBr (aq. 48 %, 15 mL) e submetido ao refluxo a 120 0C sob argônio. Depois de 2 horas, a mistura foi particionada entre DCM (50 mL)/água (50 mL), o pH ajustado a 7 por adição de uma solução 2 M de NaOH e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 50 mL) e os orgânicos combinados foram lavados com 15 salmoura (50 mL), separados e secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O material bruto (198 mg) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4) com um gradiente de Et2O 0 a 100 % em hexano. O material isolado (75 mg) foi purificado ainda por MDAP para fornecer 46 mg do composto do título (E13).

LC-MS: MH+ = 263 (Ci3H8F2N2O2 = 262)

RMN (ÍH), (DMSO-Cf6): 6,40 (1H, dd, J = 2,8, 8,4 Hz), 7,07 (2H, m), 7,24 (1H, d,J =

8,8 Hz), 7,42 (1H, dd, J = 2,8, 9,2 Hz), 8,3 (1H, s), 10,3 (2H, bs).

Exemplo 14

7-Cloro-1-(3-fluoro-4-hidroxifeniO-1H-indazol-4-ol (E14)

OH

Uma mistura de 7-cloro-1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-(metilóxi)-1 H-indazol (D29) (2,41 g, 6,30 mmols) em ácido bromídrico 48 % (120 ml) foi aquecida em refluxo e a seguir reação por LC-MS. Depois de 2 h, a mistura foi concentrada a -30 ml no evaporador rotatório e depois NaHCO3 sólido foi adicionado ao pH 6. O produto foi extraído em acetato de etila e os extratos foram secos (Na2SO4) e concentrados. Este produto foi dissolvido em diclorometano (60 ml) e esfriado a -78 0C sob argônio e tribrometo de boro (2,381 mL, 25,2 mmols) foi adicionado às gotas por intermédio de seringa. Depois de 10 min a -78 °C, a mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente e a agitação foi continuada durante 24 h.

A mistura foi diluída com acetato de etila e NaHC03/água e o pH ajustado a 6 e o produto foi extraído em acetato de etila. Os extratos foram secos (Na2SO4), concentrados e submetidos à cromatografia (sílica, metanol 10 % em diclorometano ao produto bruto que foi novamente provido de coluna por acetato de etila 0 a 100 % em hexano) para fornecer o composto do título como um pó branco amarelado (405 mg) (E14).

LC-MS: MH+ = 279/281 (C13H8CIFN2O2 = 278/280)

RMN (<JH), (DMSO-Of6): 6,51 (1H, d,J = 8,4 Hz), 7,04 (1H, m), 7,14 (1H, m), 7,24 (1H, d, J= 8,4 Hz), 7,36 (1H, dd, J = 2,4, 11,6 Hz), 8,30 (1H, s), 10,33 (1H, amplo s), 10,59 (1H, amplo s).

Exemplo 15

1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-3-metil-1 H-indazol-4-ol (E15)

Uma mistura de 1-{3-fluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-3-metil-4-[(fenilmetil)óxi]-1Hindazol (D31) (0,45 g) e paládio 10 % em carvão vegetal (150 mg) em acetato de etila (30 mL) foi hidrogenada na pressão atmosférica durante cerca de 18 h. A mistura foi filtrada, concentrada e submetida à cromatografia (sílica gel, acetato de etila 0 a 100 % em hexano) para fornecer o composto do título como um sólido branco (0,15 g) (E15).

LC-MS: MH+ = 259 (C14H11N2O2F = 258)

RMN (<JH), (DMSO-Ci6): 2,62 (3H, s), 6,48 (1H, d, J = 7,2 Hz), 7,07 (2H, m), 7,18 (1H, m), 7,31 (1H, m), 7,43 (1H, dd, J = 2,8, 8,0 Hz), 10,15 (2H, amplo s).

Exemplo 16

1 -(4-Hidroxifenin-1 H-indazol-4-ol (E16)

OH

1-[4-(Metilóxi)fenil]-4-[(fenilmetil)óxi]-1/-/-indazol (D32) (40 mg, 0,121 mmol) foi dissolvido em DCM seco (1,5 mL) sob argônio e esfriado a -78 0C em um banho de gelo seco-acetona. Depois de 5 minutos, BBr3 (1 M em DCM, 0,242 mL, 0,242 mmol) foi adicionado às gotas e quando a adição foi concluída, o banho foi removido e este foi deixado atingir a temperatura ambiente. A seguir, a reação por LC-MS ocorreu. Depois de 4 horas, mais BBr3 (1 M em DCM, 0,242 mL, 0,242 mmol) foi adicionado à mistura e depois de 5 21 horas esta foi concentrada a vácuo. O resíduo foi particionado entre EtOAc (25 mL)/água (25 mL), o pH ajustado a 7 por adição de uma solução de NaHCO3 e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 25 mL) e os orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O material bruto (28 mg) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4) com um gradiente de EtOAc 30 a 60 10 % em hexano. O material isolado (28 mg) foi purificado ainda por MDAP para fornecer 16 mg do composto do título (E16).

LC-MS: MH+ = 227 (C13H10N2O2 = 226)

RMN (<SH), (DMSO-Of6): 6,51 (1H, d,J = 7,4 Hz), 6,93 (2H, d,J = 8,8 Hz), 7,06 (1H, J = 8,5 Hz), 7,21 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,47 (2H, d,J = 8,8 Hz), 8,24 (1H, s), 9,8 (1H, bs), 10,38 (1H, bs).

Exemplo 17

1-(3-Cloro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol (E17)

OH

1-[3-Cloro-4-(metilóxi)fenil]-4-[(fenilmetil)óxi]-1/-/-indazol (D33) (460 mg, 1,26 mmol) foi dissolvido em DCM seco (15 mL) e desgaseificado por sonicação sob um fluxo de 20 argônio. A solução foi esfriada a -78 0C e depois de 10 min tratada com BBr3 (1 M em DCM, 2,52 mL, 2,52 mmols) às gotas e quando a adição foi concluída, o banho foi removido e esta foi deixada atingir a temperatura ambiente ainda com agitação sob argônio. Depois de 17 horas, a mistura foi particionada entre DCM (50 mL)/água (50 mL), o pH ajustado a 7 por adição de uma solução de NaHCO3 e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída 25 com DCM duas vezes (2 x 50 mL) e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), separados e secos em MgSO4. O material bruto foi purificado por MDAP para fornecer 34 mg do composto do título (E17).

RMN (<yH), (DMSO-Qf6): 6,53 (1H, d, 7,6 Hz), 7,11 (2H, m), 7,25 (1H, t, J = 8 Hz), 7,49 (1H, dd, J = 2,4, 8,4 Hz), 7,63 (1H, d,J= 2,4 Hz), 8,27 (1H, s), 10,45 (2H, bs).

Exemolo 18

1 -(4-Hidróxi-3-metilfenih-1 /-/-indazol-4-ol (E18) OH

1-[3-Metil-4-(metilóxi)fenil]-4-[(fenilmetíl)óxi]-1A/-indazol (D34) (550 mg, 1,64 mmol) foi dissolvido em DCM seco (20 mL) e desgaseificado por sonicação sob um fluxo de argônio. A solução foi esfriada a -78 0C e depois de 10 min tratada com BBr3 (1 M em DCM, 3,29 mL, 3,29 mmols) às gotas e quando a adição foi concluída, o banho foi removido e esta 5 foi deixada atingir a temperatura ambiente. A seguir, reação por LC-MS ocorreu. Depois de 45 minutos, mais BBr3 (1 M em DCM, 3,29 mL, 3,29 mmols) foi adicionado à mistura e depois de 17 horas esta foi particionada entre DCM (75 mL)/água (75 mL), o pH ajustado a 7 por adição de uma solução de NaHCO3 e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM duas vezes (2 x 50 mL) e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura 10 (50 mL) e secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O material bruto (456 mg) foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4) com um gradiente de EtOAc 0 a 40 % em hexano. O material isolado foi purificado ainda por MDAP para fornecer 36 mg do composto do título (E18).

LC-MS: MH+ = 241 (C14H12N2O2 = 240)

RMN (ÍH), (DMSO-Cf6): 2,21 (3H, s), 6,49 (1H, d,J = 7,2 Hz), 6,94 (1H, d,J = 8,4

Hz), 7,06 (1H, d, J= 8,8 Hz), 7,21 (1H, t, J = 7,6 Hz), 7,29 (1H, dd, J = 2,8, 8,4 Hz), 7,37 (1H, d, J= 2 Hz), 8,22 (1H, s), 9,63 (1H, bs), 10,3 (1H, bs).

Exemplo 19

1-('3,5-Diftuoro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol (Έ19)

Uma solução de 1-{3,5-difluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-[(fenilmetil)óxi]-1/-/-indazol

(D35) (257 mg, 0,58 mmol) em etanol (10 mL) e acetato de etila (10 mL) foi hidrogenada em um H-cube sobre um catalisador de paládio 10 % em carvão vegetal. A solução resultante foi concentrada e depois o produto bruto purificado por cromatografia de sílica gel eluindo com acetato de etila 5 a 100 % em hexano para produzir o composto do título (E19) (126 mg).

LC-MS: MH+ = 263 (C13H8F2N2O2 = 262) Exemplo 20 1-(3.5-Difluoro-4-hidroxifenin-4-hidróxi-1H-indazol-6-carbonitrila (E20)

Uma solução de 1-{3,5-difluoro-4-[(fenilmetil)óxi]fenil}-4-hidróxi-1/-/-indazol-6- carbonitrila (D37) (610 mg, 1,617 mmol) em acetato de etila (50 ml) foi passada através do H-cube sobre um catalisador de paládio 10 % em carvão vegetal na temperatura e pressão ambiente. O filtrado foi concentrado e depois triturado com diclorometano e coletado por filtração para produzir o produto desejado (E20) (235 mg).

LC-MS: MH+ = 288 (C14H7F2N3O2 = 287)

Deve ser entendido que a presente invenção abrange todas as combinações de subgrupos particulares e preferidos descritos neste relatório acima.

ENSAIOS PARA DETERMINAR A ATIVIDADE BIOLÓGICA

Tampão de Ensaio (AB) (MOPES 50 mM pH 7,5, NaF 50 mM, CHAPs 2,5 mM), em água desionizada, 1,4 ditiotreitol 5 mM (DTT) adicionado no dia do experimento. A quantidade apropriada de AB foi colocada em um tubo plástico, adicionando DTT sólido antes de o ensaio ser conduzido. AB com DTT foi distribuído nos tubos plásticos. Descobrimos que o uso do plástico é mais eficiente que o uso do vidro. Uma concentração final da proteína de ER beta 6 nM foi adicionada ao tubo seguido por suave inversão. Uma concentração final de Iigante ER FP 1,5 nM (Fluormone™ EL Red 200 nM em Tris 20 mM, Metanol 90 % adquirido da Invitrogen, catálogo na P3030) foi adicionada ao mesmo tubo seguido por suave inversão. Isto foi deixado em repouso durante 5 a 10 minutos antes de adicioná-lo à placa de ensaio 384. Protocolo similar foi usado para ER alfa com uma concentração final de ER alfa 4 nM e Iigante ER FP 1,5 nM.

384 placas contendo compostos de teste dissolvidos em DMSO 100 % em 1 mM foram sucessivamente diluídas (1:3) por um Beckman FX. Os compostos de teste diluídos em série foram adicionados, 0,1 nL, às placas de ensaio com uma concentração máxima final de 10 μΜ. Uma vez que as placas de ensaio estavam preparadas, 10 pL dos reagentes acima foram adicionados ao conjunto apropriado de placas com o Thermo combi. Estas placas depois foram vedadas e colocadas na temperatura ambiente durante 3 horas.

As placas depois foram colocadas no Molecular Devices Analyst e contadas (excitação 535 nm, emissão 590 nm com um espelho dicróico 561). Os dados foram normalizados para controle e depois ajustados a um algoritmo dos mínimos quadrados não linear (veja abaixo). Cálculo de plC50

y = a + ((b - a) / (1 + (10 Λχ /10 Ac) Ad)

Resultados

O composto do Exemplo 1,3a11,13a14e17 obtiveram uma plC50 >7 no ensaio de ligação ER beta FP. O composto do Exemplo 1 também obteve seletividade >10 vezes versus ER alfa.

Todos os compostos dos Exemplos obtiveram uma plC50 >6 no ensaio de ligação ER beta FP.

A seqüência de aminoácidos de ER beta humano usada neste ensaio é MKKHHHHHHG ELLLDALSPE QLVLTLLEAE PPHVLISRPS APFTEASMMM

SLTKLADKELVHMISWAKKI PGFVELSLFDQVRLLESCWM EVLMMGLMWR SIDHPGKLIF APDLVLDRDE GKCVEGILEI FDMLLATTSR FRELKLQHKE YLCVKAMILL NSSMYPLVTATQDADSSRKL AHLLNAVTDA LVWVIAKSGI SSQQQSMRLA NLLMLLSHVR HASNKGMEHL LNMKCKNWP VYDLLLEMLN AHVLRGCKSS ITGSECSPAE DSKSKEGSQN PQSQ

A seqüência de aminoácidos de ER alfa humano usada neste ensaio é MKKGHHHHHH GLVPRGSMIK RSKKNSLALS LTADQMVSAL LDAEPPILYS EYDPTRPFSE ASMMGLLTNL ADRELVHMIN WAKRVPGFVD LTLHDQVHLL ECAWLEILMI GLVWRSMEHP GKLLFAPNLL LDRNQGKCVE GMVEIFDMLL ATSSRFRMMN LQGEEFVCLK SIILLNSGVY TFLSSTLKSL EEKDHIHRVL DKITDTLIHL MAKAGLTLQQ QHQRLAQLLL ILSHIRHMSN KGMEHLYSMK CKNWPLYDL LLEMLDAHRL HAPTS

O pedido do qual esta descrição e reivindicações formam parte pode ser usado como uma base para prioridade com respeito a qualquer pedido subsequente. As reivindicações de tal pedido subsequente podem ser dirigidas a qualquer característica ou 25 combinação de características descrita neste relatório. Elas podem tomar a forma de reivindicações de produto, composição, processo, ou uso e podem incluir, por via de exemplo e sem limitação, as reivindicações seguintes:

Claims (8)

1. Composto, CARACTERIZADO pelo fato de que é da fórmula (I): <formula>formula see original document page 48</formula> em que Ra1 Rb e Rc são independentemente selecionados de halo, alcóxi Ci_4, alquila C^4, alquenila C2.4, alcanoila C1^, CF3, CF3O e ciano, contanto que quando um dos substituintes é ligado ao C-5 do biciclo de indazol, este substituinte Ra não é um grupo metóxi. m é zero ou um número inteiro de 1 a 3; n é zero ou 1; p é zero ou um número inteiro de 1 a 4; entretanto m, n e p juntos são iguais a 5 ou menos; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado de: 1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-1 /-/-indazol-4-ol; 1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-6-(metilóxi)-1 /-/-indazol-4-ol 1-(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-4-hidróxi-1/-/-indazol-6-carbonitrila 6-Fluoro-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol 6-Bromo-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1H-indazol-4-ol 6-Etenil-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 6-Etil-1-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1/-/-indazol-4-ol 6-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 /-/-indazol-4-ol 1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-6-metil-1 /-/-indazol-4-ol 5-Fluoro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 5-Bromo-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 /-/-indazol-4-ol 5-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 7-Fluoro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 7-Cloro-1 -(3-fluoro-4-hidroxifenil)-1 /-/-indazol-4-ol 1 -(3-Fluoro-4-hidroxifenil)-3-metil-1 /-/-indazol-4-ol 1 -(4-Hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 1 -(3-Cloro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 1 -(4-Hidróxi-3-metilfenil)-1 H-indazol-4-ol . 1 -(3,5-Difluoro-4-hidroxifenil)-1 H-indazol-4-ol 1-(3,5-Difluoro4-hidroxifenil)-4-hidróxi-1/-/-indazol-6-carbonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo junto com um portador e/ou excipiente farmacêutico.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que é para o uso como uma substância terapêutica ativa.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que é para o uso como uma terapia cardioprotetora, uso no tratamento da dor, distúrbios inflamatórios crônicos, doenças autoimunes, crescimento de tecido anormal benigno ou maligno, distúrbios do SNC, distúrbios metabólicos, distúrbios do apetite, distúrbios ou condições pelo menos parcialmente mediados pela deficiência de estrogênio.

6. Método de tratar um paciente humano ou animal em necessidade de terapia cardioprotetora, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar ao dito paciente uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Método de tratar um paciente humano ou animal sofrendo de dor, distúrbios inflamatórios crônicos, doenças autoimunes, crescimento de tecido anormal benigno ou maligno, distúrbios do SNC, distúrbios metabólicos, distúrbios do apetite, distúrbios ou condições pelo menos parcialmente mediados pela deficiência de estrogênio, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar ao dito paciente uma quantidade eficaz de um composto de acordo com reivindicação 1 ou reivindicação 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Uso de um composto, de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento da dor, distúrbios inflamatórios crônicos, doenças autoimunes, crescimento de tecido anormal benigno ou maligno, distúrbios do SNC, distúrbios metabólicos, distúrbios do apetite, distúrbios ou condições pelo menos parcialmente mediados pela deficiência de estrogênio, ou como um cardioprotetor.