AR100605A1 - Métodos para la producción de lipasas - Google Patents

Abstract

Reivindicación 1: Un método para la generación de una preparación de lipasa con mayor actividad lipolítica, que comprende la etapa de la alteración de uno o más nucleótidos en un polinucleótido que comprende un primer polinucleótido que codifica un propéptido funcionalmente ligado a un segundo polinucleótido que codifica una lipasa, donde la alteración de uno o más nucleótidos se hace en el primer polinucleótido, y la alteración produce independientemente una sustitución, una inserción o una deleción en la secuencia de aminoácidos de propéptido codificada. Reivindicación 3: El método de la reivindicación 2, donde la zona de contacto de lipasa es cualquiera de las zonas de contacto de lipasa principales seleccionadas de los aminoácidos correspondientes a los residuos -57 a -50, -40 a -28, y -22 a -15 de SEC. ID. Nº 2, siempre que la alteración no sea una sustitución que corresponde a S-24F de SEC. ID. Nº 2. Reivindicación 7: Un polinucleótido que codifica una lipasa que comprende un primer polinucleótido que codifica el propéptido de la lipasa funcionalmente ligado a un segundo polinucleótido que codifica la proteína madura de la lipasa, donde el propéptido codificado comprende una alteración en una o más posiciones, donde la alteración es independientemente una sustitución, una inserción o una deleción. Reivindicación 23: Una construcción de ácido nucleico que comprende el polinucleótido de cualquiera de las reivindicaciones 7 - 21. Reivindicación 26: Un método para la producción de una lipasa a partir del polinucleótido de cualquiera de las reivindicaciones 7 - 21, que comprende: (a) el cultivo de la célula huésped de la reivindicación 24 en condiciones adecuadas para la expresión de la lipasa; y (b) la recuperación de la lipasa.