WO2020147570A1 - 赤红球菌产品在治疗白色念珠菌感染引起的疾病中的用途 - Google Patents

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candida albicans
cell wall
albicans infection
diseases caused
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盖波
窦春艳
张轶
张国英
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辽宁格瑞仕特生物制药有限公司
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)

Definitions

  • the present disclosure relates to the medical field, the microbiological field, and the biopharmaceutical field. Specifically, it relates to Rhodococcus rubrum and its cell wall components, preparations, pharmaceutical compositions, preparation methods, and the use of Rhodococcus rubrum cell wall components in the preparation of drugs/medical devices.
  • Rhodococcus ruber also known as Rhodococcus ruber
  • Rhodococcus ruber a gram-positive bacteria.
  • the colony is orange or orange, round; the size of the colony is about 1mm to 2mm; the cell morphology is spherical or short rod; it can form primary branched mycelium; it has no flagella.
  • Rhodococcus is aerobic and chemically heterotrophic.
  • Rhodococcus rubrum researchers have performed complete gene sequencing of Rhodococcus rubrum. For example, Fan Xin et al. sequenced the entire genome of Rhodococcus rubrum SD3 strain and performed bioinformatics analysis. The whole genome length of the SD3 strain is about 5.37Mb, the GC content is about 70.63%, and the GenBank accession number is CP029146 (Fan Xin, Rhodococcus rubrum SD3 whole genome sequencing and its heat shock protein DnaK expression analysis, genomics and applied biology, January 2019).
  • Rhodococcus is a genus of Rhodococcus, which can adapt to a variety of living environments due to its strong tolerance to organic matter and a wide degradation spectrum. Therefore, Rhodococcus is widely used in pollution remediation, organic compound degradation, sewage treatment and other fields.
  • Rhodococcus rubrum lies in environmental management, see CN108862590A, CN107151635A, CN102250796A, CN1519312A, CN103627653A, CN101033454A, CN108130288A, CN104830738A, CN101619299A, CN103509833A, CN106434466A, CN101580808A, CN168A491, CN101580808A, CN102591A, CN102591106A, CN108862590A, CN106434466A, CN101580808A.
  • CN109576180A discloses a bacterium RDC-01 selected from the red soil in the suburbs near Panyu District, Guangzhou City. After 16S rRNA gene sequence analysis and cultivation characteristics identification, the strain was identified as Rhodococcus rubrum. After the bacterium was inactivated, it was added as an immune adjuvant to an inactivated vaccine for animals, and it was found to promote the production of antibodies in animals.
  • Rhodococcus rubrum in the field of human medicine has not yet been reported.
  • Candida albicans also known as Candida
  • Candida is a saprophytic fungus that exists widely in nature and belongs to the normal parasitic flora of the human body. It is a kind of conditional pathogenic bacteria. Under the influence of human immune function or some factors, the parasitic Candida albicans can produce pathogenicity and cause diseases.
  • Candida albicans is a biphasic fungus with a yeast phase and a hypha phase. It is a yeast phase when it is parasitic, and is generally not pathogenic; but under certain conditions, it can be transformed into a pathogenic hypha phase.
  • Candida albicans can be caused by infecting any tissue and organ of the body, such as: diseases caused by oral infections (such as thrush, glossitis, cheilitis, etc.); diseases caused by infection of the genitals (such as candidal vulvovaginitis, candida Foreskin balanitis, etc.); diseases caused by infection of the skin (such as candidal rash, candidal granuloma, chronic mucocutaneous candidiasis); diseases caused by infection of the bronchus and lungs (bronchitis, pneumonia, pleurisy, etc.) ); Infection of the digestive tract causes various diseases (digestive candidiasis).
  • oral infections such as thrush, glossitis, cheilitis, etc.
  • diseases caused by infection of the genitals such as candidal vulvovaginitis, candida Foreskin balanitis, etc.
  • diseases caused by infection of the skin such as candidal rash, candidal granuloma,
  • Candida albicans patients take a large number of antibiotics to cause low immunity and bacterial drug tolerance, and recurrent diseases caused by Candida infection, there is currently a lack of effective and ideal drugs and treatment methods in clinical practice.
  • an isolated Rhodococcus ruber is provided.
  • Rhodococcus rubrum which was deposited at the China General Microbiological Culture Collection Center of the China General Microbiological Culture Collection Center on March 22, 2019, Beichen, Chaoyang District, Beijing No. 3, No. 1 West Road, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences; Zip Code: 100101), and the deposit number is CGMCC No.17431.
  • the deposit meets the requirements of the Budapest Treaty on the International Recognition of Microorganisms for Patent Procedures (Budapest Treaty on the International Recognition of the Deposit of Microorganisms for the Purposes of Patent Procedure).
  • Rhodococcus rubrum and its derivative products are provided.
  • the derivative product is derived from Rhodococcus rubrum and contains the components of Rhodococcus rubrum (such as protein, nucleic acid, lipid, cell wall and its constituent components, carbohydrates, metabolites).
  • an isolated Rhodococcus rubrum cell wall is provided.
  • an isolated Rhodococcus rhodococcus cell wall is provided, and the Rhodococcus rhodococcus refers to a strain with the deposit number of CGMCC No. 17431.
  • an isolated Rhodococcus rubrum cell wall skeleton is provided.
  • an isolated Rhodococcus rhodococcus cell wall skeleton is provided, and the Rhodococcus rhodococcus refers to the strain with the deposit number of CGMCC No. 17431.
  • a pharmaceutical composition comprising the cell wall of Rhodococcus or the cell wall skeleton of Rhodococcus according to the present disclosure.
  • Rhodococcus Rhodococcus product which comprises a product obtained by pulverizing Rhodococcus Rhodococcus.
  • Rhodococcus Rhodococcus product which comprises a product obtained by crushing Rhodococcus Rhodococcus and undergoing purification (fat removal, nucleic acid removal, protein removal).
  • Rhodococcus rubra product which comprises the cell wall of Rhodococcus rubra.
  • Rhodococcus rubra product which comprises the cell wall skeleton of Rhodococcus rubra.
  • a pharmaceutical composition or medical device which comprises a product obtained by crushing Rhodococcus rubrum.
  • a pharmaceutical composition or medical device which comprises a product obtained by crushing and purifying Rhodococcus rubrum (removing fat, and/or nucleic acid, and/or protein).
  • a pharmaceutical composition or medical device which comprises the cell wall of Rhodococcus rubrum.
  • a pharmaceutical composition or medical device which comprises the cell wall skeleton of Rhodococcus rubrum.
  • a pharmaceutical composition or medical device which comprises the above-mentioned Rhodococcus product.
  • the pharmaceutical composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.
  • the rhodococcus product in the pharmaceutical composition is 1 part by weight
  • the pharmaceutically acceptable excipient is 100 to 1000 parts by weight (100, 200, 300, 400, 500, 600, 700 , 800, 900, 1000), preferably 200 to 500 parts by weight, more preferably 200 to 300 parts by weight (for example, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 and Any point value within any two numerical ranges).
  • the Rhodococcus rhodochrous cell wall in the pharmaceutical composition is 1 part by weight
  • the pharmaceutically acceptable excipient is 100 to 1000 parts by weight (100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000), preferably 200 to 500 parts by weight, more preferably 200 to 300 parts by weight (e.g., 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 And any point value within any two numerical ranges).
  • the Rhodococcus rubrum cell wall skeleton in the pharmaceutical composition is 1 part by weight
  • the pharmaceutically acceptable excipient is 100 to 1000 parts by weight (100, 200, 300, 400, 500, 600 , 700, 800, 900, 1000), preferably 200 to 500 parts by weight, more preferably 200 to 300 parts by weight (e.g., 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 and any point value within any two numerical ranges).
  • the pharmaceutical composition may be prepared as a liquid (liquid formulation).
  • the pharmaceutical composition can be prepared as a solid (dry powder formulation or lyophilized powder formulation).
  • the liquid preparation and the dry powder preparation can be converted into each other, and the difference lies only in the water content. Remove most or all of the water in the liquid formulation to obtain a dry powder formulation (or freeze-dried powder formulation). The dry powder preparation (or freeze-dried powder preparation) is dissolved (or reconstituted) to obtain a liquid preparation.
  • the drug or pharmaceutical composition is prepared into a dosage form selected from the group consisting of ointments, creams, emulsions, suspensions, pastes, gels, lotions, tinctures, oils, tablets, gas Fog, spray, liniment, powder, suppository, capsule; wherein, the ointment is selected from: ointment, plaster, and cream.
  • the dosage form is a form suitable for application to the lesion.
  • sprays, ointments, lotions, dressings, patches, suppositories for example, sprays, ointments, lotions, dressings, patches, suppositories.
  • the pharmaceutically acceptable excipient relates to, but is not limited to: fillers, stabilizers, flavors, disintegrants, binders, lubricants, propellants, humectants, solvents, Solubilizer, emulsifier, antioxidant, pH adjuster, preservative.
  • the pharmaceutically acceptable excipients such as but not limited to: dextran, lactose, microcrystalline cellulose, trehalose, glycine, xylitol, sodium carboxymethyl cellulose, erythrose Alcohol, gelatin, magnesium stearate.
  • non-limiting examples of the pharmaceutically acceptable excipients can also mention: white petrolatum, carbomer, hypromellose, methylcellulose, sodium hydroxymethylcellulose, Chitosan, sucralfate chitosan, polyvinylpyrrolidone, polyvinyl alcohol, sodium hyaluronate, dimethyl ether, tetrafluoroethane, hydrofluoroalkane, glycerin, propylene glycol, deionized water, water for injection, distilled water, ethanol , Cetyl alcohol, stearyl alcohol, p-aminobenzoic acid, acetamide, isopropanol, Tween, polyoxyethyl hydrogenated castor oil, stearic acid, glyceryl monostearate, triglycerol monostearic acid Esters, sucrose fatty acid esters, sucrose esters, sucrose acetate isobutyrate, sorbitan tristearate, iso
  • a method for preparing a Rhodococcus rubrum product which includes or consists of the following steps:
  • remove the water in the purified product preferably by freeze drying to remove the water in the purified product
  • steps 5.1), 5.2), and 5.3) can be interchanged in order or can be parallel; step 6) and step 7) can be interchanged in order.
  • step 5) may further include (for example, using a non-ionic surfactant) a step of removing the cell membrane.
  • Rhodococcus rubrum is not limited to specific culture media and culture parameters, and the skilled person can culture it in a well-known and appropriate manner, and can use petri dishes, culture bottles, and fermentation tanks according to the preparation scale.
  • Technicians have the ability to adjust the specific parameters and equipment of cultivation, crushing, separation, collection, impurity removal, and packaging according to the subsequent application (external application, etc.) of the active ingredients (cell wall and its components), so as to avoid the introduction of influence in the preparation step Factors for subsequent applications.
  • an organic solvent is used to remove lipids in the fragmented product.
  • DNA and RNA in the fragmented product are removed using, for example, nuclease.
  • a hydrolase is used to degrade the protein in the fragmented product.
  • a surfactant is used to remove the cell membrane in the disrupted product.
  • the crushed average particle size is 10 nm to 1000 nm; mention may be made of 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190nm ⁇ 10nm, and the range between any two of the above values.
  • There are many test methods for particle size (Hu Songqing et al., Modern Particle Size Measurement Technology, Modern Engineering, 22:1, 2002).
  • the average particle size of the pulverization is 10 nm to 800 nm.
  • the average particle size of the pulverization is 10 nm to 500 nm.
  • the dispensing refers to dispensing into a container or placing on a solid support.
  • the container is selected from: bottles, tubes, bags, bags, plates, ampoules, injection devices, aluminum film packaging, dressings, and capsules.
  • the dispensing refers to dispensing into bottles/ampoules. Add solvent to the bottle/ampule just before use.
  • Rhodococcus rubrum product which is prepared by the method according to the present disclosure.
  • a pharmaceutical composition or medical device which comprises a Rhodococcus product prepared according to the method of the present disclosure.
  • an isolated Rhodococcus rubrum cell wall is provided for use in the treatment of diseases caused by Candida albicans infection.
  • Rhodococcus rubrum product for treating diseases caused by Candida albicans infection.
  • a pharmaceutical composition or medical device which is used to treat diseases caused by Candida albicans infection.
  • the use of the Rhodococcus product according to the present disclosure in the treatment of diseases caused by Candida albicans infection is provided; and the use of the Rhodococcus product of the present disclosure in the treatment of diseases caused by Candida albicans infection is also provided. Use in medicines/medical devices.
  • the use of the pharmaceutical composition according to the present disclosure in the treatment of diseases caused by Candida albicans infection in the treatment of diseases caused by Candida albicans infection; it is also provided that the pharmaceutical composition of the present disclosure is prepared for the treatment of diseases caused by Candida albicans infection. Use in medicines/medical devices.
  • the disease caused by Candida albicans infection is selected from: genital disease caused by Candida albicans infection, oral mucosal disease caused by Candida albicans infection, skin disease caused by Candida albicans infection, and Candida albicans infection. Diseases of the digestive tract.
  • the oral mucosal disease caused by Candida albicans infection is selected from: thrush, candidal glossitis, and candidal cheilitis.
  • the genital disease caused by Candida albicans infection is selected from: candidal vulvitis, fungal vaginitis, and candidal balanitis.
  • the skin disease caused by Candida albicans infection is selected from the group consisting of: candidal rash, candidal granuloma, and chronic mucocutaneous candidiasis.
  • the gastrointestinal disease caused by Candida albicans infection is selected from the group consisting of fungal esophagitis, Candida enteritis, and anal Candida albicans infection.
  • the drug is used to treat diseases caused by Candida albicans infection.
  • the medical device (such as dressing, patch, bandage, film, patch, etc.) is used to treat diseases caused by Candida albicans infection.
  • a method for treating diseases caused by Candida albicans infection including contacting a subject (lesions) with a therapeutically effective amount of any one selected from the following:
  • different doses are used to administer the drug (or medical device) to the lesion for different severity.
  • the drug or medical device
  • different doses are used to administer the drug (or medical device) to the lesion for different severity. For example, but not limited to:
  • Liquid medicine, ointment, and dry powder can be used alternately on the lesion.
  • the period of contact is from 2 days to 2 months or longer.
  • the subject is administered the active ingredient for 3-4 weeks.
  • the administration is performed at the following frequency: 1 to 3 times a day, 1 to 6 times for two days, 1 to 9 times for three days, 1 to 14 times a week, and 1 to 60 times a month. In some embodiments, it is administered twice a day, or once a day, or once every two days.
  • the amount of each administration depends on the specific conditions of the subject, and different doses are used, usually 1 ⁇ g to 1000 ⁇ g/unit dose/each time; 5 ⁇ g to 800 ⁇ g/unit dose/each time, preferably 10 ⁇ g to 600 ⁇ g/unit dose/each Times. Specifically, such as 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120 , 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200 ⁇ g/unit dose/each time, and the range between any two of the foregoing values.
  • the Rhodococcus Rhodococcus product, pharmaceutical composition or medical device of the present disclosure is in contact with the lesion every time: a few minutes to a few hours, for example, 30 minutes to 24 hours.
  • the contact is achieved by the following means, such as but not limited to: oral, mucosal, transdermal, transdermal, abdominal cavity, puncture, nasal spray, eye drops, suppository, sublingual.
  • the aforementioned treatment method is applicable to any animal with skin or mucosal structure, specifically mammals, reptiles, amphibians, and birds.
  • Mammals are selected from: humans, non-human primates, pigs, cows, horses, sheep, dogs, cats, rats, rabbits, and camelids.
  • the subject is an animal other than a human, such as for farm animals, pets, working animals, ornamental animals, and production animals.
  • the subject is a human.
  • the subject is suspected of having, diagnosed with, already suffering from, or susceptible to the target disease or its symptoms.
  • the only therapeutic (or preventive) active ingredient in the drug or medical device is a product derived from Rhodococcus, especially containing Rhodococcus components (such as protein, nucleic acid, lipid, cell wall and Its constituents, carbohydrates, metabolites), specifically products containing Rhodococcus cell wall (more preferably Rhodococcus cell wall skeleton or its composition).
  • Rhodococcus components such as protein, nucleic acid, lipid, cell wall and Its constituents, carbohydrates, metabolites
  • specifically products containing Rhodococcus cell wall more preferably Rhodococcus cell wall skeleton or its composition.
  • Rhodococcus products can be administered in combination with other therapeutically active ingredients (antibiotics, hormones, cytokines).
  • other therapeutically active ingredients antibiotics, hormones, cytokines.
  • the product of Rhodococcus rubrum is applied alone or in combination with an antifungal agent.
  • Figure 1 Colony morphology of Rhodococcus rubrum.
  • Isolation refers to the separation of the Rhodococcus rubrum of the present disclosure from its original growth environment.
  • the cell wall structures of Gram-positive bacteria and Gram-negative bacteria are different. Specifically, the cell wall of gram-positive bacteria is thicker (usually 20nm to 80nm), containing about 90% peptidoglycan and about 10% teichoic acid (a polymer formed by alcohol and phosphoric acid molecules, usually sugar Exist in the form of ester or amino acid ester).
  • the peptidoglycan layer is dense, even up to 20 layers.
  • the cell wall of gram-negative bacteria is much thinner than that of gram-positive bacteria, and the structure is more complicated, divided into outer membrane and peptidoglycan layer (usually 2nm to 3nm).
  • the peptidoglycan layer is a unique component of the bacterial cell wall and is a derivative of heteropolysaccharide.
  • Each peptidoglycan monomer consists of 3 parts: sugar unit (for example, at least two sugar molecules are connected by glycosidic bonds to form the framework of the peptidoglycan), peptide tail (a short peptide chain connected by several amino acids) , Which is connected to the N-acetylmuramic acid molecule), and the peptide bridge (crosslinking adjacent "peptide tails" to form a high-strength network structure).
  • sugar unit for example, at least two sugar molecules are connected by glycosidic bonds to form the framework of the peptidoglycan
  • peptide tail a short peptide chain connected by several amino acids
  • the peptide bridge crosslinking adjacent "peptide tails" to form a high-strength network structure.
  • Different bacteria have different peptide bridges, peptide tails, and cross-linking methods.
  • isolated Rhodococcus rhodochrous cell wall can be understood as both a complete cell wall and an incomplete cell wall (for example, broken or partially degraded).
  • the ingredients exhibiting the desired activity are derived from the cell wall of Rhodococcus (for example, the cell wall itself or its composition). Therefore, in clinical applications, various forms such as intact cell walls, broken cell walls, incomplete degradation products of cell walls, components of cell walls, extracts of cell walls, and the like are all included within the scope of the present disclosure.
  • Rhodococcus used in the embodiments of the present disclosure refers to Rhodococcus ruber of the genus Rhodococcus, and is not limited to a specific cell strain.
  • Non-limiting examples include TOY7 strain (Nanjing Agricultural University Agricultural Environmental Microbial Culture Collection), CGMCC No. 4795, DSM43338, CCTCC No. 2012035, CGMCC No. 16640, CGMCC No. 17431.
  • technicians can perform taxonomic identification on a strain of bacteria.
  • the available identification techniques include morphology, physiological and biochemical characteristics, 16S rRNA, and so on.
  • Technicians understand that with the development of science and technology, identification techniques involve different methods. In the earlier period, morphological and biochemical identification methods were mainly used, but the reliability of this method is not high. After the advent of sequencing technology, technicians can identify strains in a more reliable way.
  • the medicine or pharmaceutical composition or active ingredient or product of the present disclosure can be embodied in but not limited to the following forms: ointment, cream, ointment, gel, tablet, lotion, tincture, liniment, oil, Pastes, powders, powders, sprays, aerosols, suppositories, patches, suspensions, mouthwashes, lozenges, skin care products (cleansers, lotions, essences, lotions, creams, masks), dressings, Patches, bandages, film, gauze.
  • the medicament or pharmaceutical composition or active ingredient or product of the present disclosure can be prepared in the form of a unit preparation (unit preparation).
  • the unit dose in the drug contains:
  • Rhodococcus rubrum cell wall skeleton -1 ⁇ g to 1000 ⁇ g of the Rhodococcus rubrum cell wall skeleton.
  • unit doses are 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 ⁇ g ⁇ 10%, and the range between any two of the above values.
  • administering when applied to animals, humans, cells, tissues, organs or biological samples, refer to drugs or medical devices and animals, humans, cells, tissues, organs or Biological sample contact.
  • Treatment means to give a subject an internal or external drug (therapeutic agent, active ingredient or composition) (for example, the Rhodococcus rhodochrous cell wall or a pharmaceutical composition thereof according to the present disclosure) or a medical device, in the treatment of the subject Alleviate (relieve, delay, ameliorate, cure) one or more symptoms of a disease in a person (or population) to a clinically measurable degree, wherein the subject has, is suspected of suffering, or is susceptible For one or more diseases or their symptoms.
  • an internal or external drug for example, the Rhodococcus rhodochrous cell wall or a pharmaceutical composition thereof according to the present disclosure
  • a medical device in the treatment of the subject Alleviate (relieve, delay, ameliorate, cure) one or more symptoms of a disease in a person (or population) to a clinically measurable degree, wherein the subject has, is suspected of suffering, or is susceptible For one or more diseases or their symptoms.
  • the amount of a drug (therapeutic agent, active ingredient or composition) that effectively relieves the symptoms of any disease is called a therapeutically effective amount. It can vary according to various factors, such as the disease state, age and weight of the subject. It should be understood that drugs (therapeutic agents, active ingredients, or compositions) may be ineffective in relieving the target disease or symptoms of a single subject, but according to any statistical test method known in the art (such as Student T test, card Fang test, U test according to Mann and Whitney) determines that the drug (therapeutic agent, active ingredient or composition) is statistically effective for the target disease or its symptoms.
  • any statistical test method known in the art such as Student T test, card Fang test, U test according to Mann and Whitney
  • the inventor preserved the main generation strains preserved in the laboratory on March 22, 2019 at No. 3, No. 1, Beichen West Road, Chaoyang District, Beijing (Institute of Microbiology Chinese Academy of Sciences, No. 1 West Beichen Road, Chaoyang District, Beijing) China), the General Microbiology Center of the China Microbial Culture Collection Management Committee, the deposit number is CGMCC No.17431. The test showed that the deposited strains survived.
  • the size of the colony is about 1mm to 2mm (it will vary slightly depending on the culture conditions).
  • the bacteria When cultured for 4 to 5 days, the bacteria will become short rod-shaped or spherical (different depending on the culture conditions).
  • Gram stain is positive.
  • Negative Inositol, inulin, lactose, sucrose, starch, maltose, glycogen, xylitol, gluconate, trehalose, erythritol, melezitose, melibiose, raffinose, cellobiose , Amygdalin, gentiobiose, adonol, arbutin, D-arabinose, L-arabinose, ⁇ -methyl-D-glucoside, ⁇ -methyl-D-mannoside, D -Ribose, D-xylose, L-xylose, N-acetyl-glucosamine, D-turbiose, D-lyxose, ⁇ -methyl-D-xyloside, D-galactose, D -Tagatose, D-fucose, L-fucose, D-mannose, L-sorbose, L-arabinitol
  • alkaline phosphatase alkaline phosphatase, lipid esterase (C8), lipase (C14), leucine araminase, valine araminase, cystine araminase, trypsin, chymotrypsin Protease, acid phosphatase, naphthol-AS-B1-phosphohydrolase, ⁇ -glucosidase;
  • Negative N-acetyl-glucosaminidase, esterase (C4), ⁇ -galactosidase, ⁇ -glucuronidase, ⁇ -glucosidase, ⁇ -galactosidase, ⁇ -mannosidase , ⁇ -Fucosidase.
  • Nitrate reduction reaction is positive, contact enzyme is positive, tyrosinase is positive, amylase is negative, oxidase is negative, gelatin liquefaction is negative.
  • the 15 strains isolated from the working seed tube and the 10 different strains isolated from the original seed tube were subjected to genome extraction, 16Sr RNA amplification, and sequencing.
  • the 16Sr RNA gene identity of 25 strains in total is 100%. This means that 25 strains are of the same species ( Figure 2).
  • the neighbor-joining strain evolution tree constructed based on the Kimura2-parameter algorithm shows that the strain belongs to Rhodococcus ruber.
  • Rhodococcus rubrum can be cultivated by conventional microbial production methods.
  • the culture method can be solid culture or liquid culture (such as shake flask, fermentor).
  • the culture medium contains carbon sources, nitrogen sources and other nutrient sources commonly used for culturing Gram-positive bacteria.
  • the carbon source is any carbon source available to Rhodococcus rubrum. For example, fructose, glucose, etc.
  • -Nitrogen source meat extract, peptone, ammonium salt, nitrate and other organic or inorganic nitrogen-containing compounds.
  • inorganic salts can be added appropriately.
  • composition of the culture medium includes:
  • Peptone beef extract, sodium chloride, phosphate, glycerin (and, optionally, agar, when in solid culture).
  • the working strain After the working strain is recovered, it is transferred to solid culture medium for 3-5 days, and then transferred to liquid culture (30-37°C, maintained for 3-5 days).
  • the fed-batch semi-continuous mode can also be used. Batch mode. Monitor pH, bacterial density, dissolved oxygen, and carbon source consumption during cultivation.
  • the bacteria obtained in Preparation Example 1 were collected, and the cells were pulverized (for example, but not limited to ultrasonic disruption). It is also allowed to use any suitable well-known method in the art to break up the bacterial cells, such as CN101250490A or CN101323865A.
  • a common protease such as trypsin
  • Organic reagents such as but not limited to one or a combination of acetone, ether, and ethanol are added to the precipitate, and lipids are removed according to conventional operations in the art.
  • TritonX-100 was added to the precipitate, and the precipitate was collected by centrifugation according to conventional operations in the art, and rinsed with PBS.
  • the technician can adjust the order to make the steps compatible.
  • the precipitate is reconstituted in water for injection and is ready for use.
  • it can be sterilized at 115°C for 20-30 minutes as the original solution of the cell wall skeleton (including the cell wall skeleton and its components).
  • the skilled person can also use methods known in the art or in the future to remove non-cell wall components, such as the method for extracting cell wall components disclosed in CN105779326A.
  • the pharmaceutical composition can be formulated in various forms
  • the pharmaceutical composition of item 1 is lyophilized to prepare lyophilized powders (numbered as lyophilized powder compositions 1 to 7 respectively).
  • the pharmaceutical composition of item 1 is coated on a dressing (for example, sterile gauze) to prepare an external medical device.
  • a dressing for example, sterile gauze
  • composition 3 and the esterification agent are stirred and dissolved in a solvent, hydroxyalkyl cellulose is added to swell it, and the stirring is continued to form a gel; Then add the crosslinking agent and continue to stir until completely uniform.
  • compositions 1 to 7 The preparation methods of topical ointment (respectively, for compositions 1 to 7) are also found in but not limited to the methods disclosed in Chinese Application Nos. 201610856428.5, 01133296.4, 1133297.2, "Drug Formulation and Preparation Design” (Chemical Industry Press 2009).
  • compositions 1 to 7 respectively are made into vaginal or anal suppositories.
  • mice After intravenous injection of 1000 times the equivalent of human clinical dose, the coordinated movement and learning and memory function of mice did not have obvious effects.
  • compositions of the present disclosure have no significant effect on animal spirits, nervous system, cardiovascular system, and respiratory system.
  • mice 1. Acute toxicity test in mice:
  • the test group was administered by subcutaneous injection and intraperitoneal injection, and the dosage was 5 times that of humans.
  • the control group was treated with sterile normal saline 0.5ml per tube for continuous observation for 7-8 days.
  • the mice are in good condition and have no abnormal body weight; all organs of the mice are normal.
  • composition 1 to composition 7 30 times the clinical dose was used, once a day, for three months of continuous vaginal administration, no toxic effects in dogs were found; the electrocardiogram and blood biochemical indicators were within the normal range. Two weeks after stopping the drug, no delayed toxicity was seen (composition 1 to composition 7).
  • composition 1 to composition 7 Placed at room temperature (18-25°C) for 0, 1, 2, 3, 8, 14, and 21 months, the alanine content, muramic acid content, and phagocytosis of the pharmaceutical composition (composition 1 to composition 7) Compared with the beginning of the experiment, there is no statistically significant difference in the rate and phagocytosis index (three batches tested).
  • the pharmaceutical composition of the freeze-dried powder formulation can be stored stably for 24 months.
  • phagocytes are activated after being stimulated by an antigen, which can significantly enhance the phagocytic function.
  • an antigen which can significantly enhance the phagocytic function.
  • the mice were injected with chicken red blood cells. 30 minutes later, the mice were killed and the peritoneal fluid was taken out, stained, and the percentage of phagocytic red blood cells was counted under a microscope to determine the killing ability of phagocytes, indirectly Measure the body's non-specific immunity level.
  • the phagocytosis rate was 75%, and the phagocytosis index was 1.05.
  • the phagocytic rate and phagocytic index of the negative control (excipient) and blank control (normal saline) were both lower. It shows that the cell wall skeleton or its components of the present application have a strong ability to promote immune phagocytosis.
  • Candida albicans 1. Candida albicans:
  • mice Each group of 5 mice, re-dissolve the lyophilized powder composition 3 of the present disclosure with sterile water for injection, and intraperitoneally inject with a syringe (20 ⁇ g/0.2ml/mouse/time), 5 days apart, the second injection;
  • mice On the fourth day after injection, the mice were killed by cervical dislocation;
  • the average phagocytic percentage of the test group is much higher than that of the control group, and the average phagocytic index is also significantly higher than that of the control group.
  • the phagocytic ability of peritoneal macrophages in mice stimulated by the composition of the present disclosure is significantly improved. In the microscope field, the number of macrophages in the test group was significantly more than that in the control group.
  • Experimental animal Japanese big-eared rabbit, ordinary grade, female, 2-2.5kg.
  • ATCC 14053 purchased from Institute of Dermatology, Chinese Academy of Sciences.
  • compositions 1-3 of the present disclosure compositions 1-3 of the present disclosure
  • Rabbit No. 1 Positive control: 20 mg/head of Dakenine;
  • Test group 3 freeze-dried powder composition of the present disclosure (the drug is immersed in a sterile dressing);
  • Test group 2 freeze-dried powder composition of the present disclosure
  • Test group 1 lyophilized powder composition of the present disclosure
  • the drug was administered for 7 consecutive days, and smears were checked every two days.
  • Treatment Dissolve composition 2 with physiological saline, soak in sterile cotton balls, and attach it to the ulcer surface for 40 to 60 minutes each time, morning and evening, 10 ⁇ g/2 ml each time.
  • composition 1 Dissolve composition 1 with physiological saline, soak in sterile cotton balls, and attach to the ulcer surface for 40 to 60 minutes each time, morning and evening, 1 ⁇ g/2ml each time.
  • composition 7 made of ointment.
  • Treatment Wipe the affected area with normal saline; dissolve composition 2 with normal saline, soak in sterile gauze, wrap it on the ulcer surface for 30 minutes and then take it off, morning and evening;

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Abstract

本公开涉及赤红球菌产品在治疗白色念珠菌感染引起的疾病中的用途。具体而言，本公开提供了一种包含赤红球菌细胞壁或其成分的赤红球菌产品。向受试者施用该赤红球菌产品，有效减轻白色念珠菌感染引起的疾病和症状，白色念珠菌感染引起的疾病包括白色念珠菌感染引起的生殖器疾病、白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病、白色念珠菌感染引起的皮肤疾病、白色念珠菌感染引起的消化道疾病。

Description

赤红球菌产品在治疗白色念珠菌感染引起的疾病中的用途
本公开要求2019年01月15日提交的中国专利申请《赤红球菌细胞壁骨架及其用途》(申请号201910036001.4)以及2019年10月25日提交的中国专利申请《一种分离的赤红球菌》(申请号201911022193.X)的优先权，它们的全部内容通过引用并入此处。
技术领域
本公开涉及医学领域、微生物领域、生物制药领域。具体而言，涉及赤红球菌及其细胞壁成分、制剂、药物组合物、制备方法、以及赤红球菌的细胞壁成分在制备药物/医疗装置中的用途。
背景技术
赤红球菌(Rhodococcus ruber)(也称为红色红球菌)，革兰氏阳性菌。通常而言，菌落呈桔黄色或呈桔红色，圆形；菌落大小约1mm至2mm；细胞形态为球状或短杆状；可形成初级分枝菌丝体；无鞭毛。赤红球菌好氧，化能异养。
目前，已有研究人员对赤红球菌进行了全基因测序。例如，樊欣等人对赤红球菌SD3株的全基因组进行测序，并进行生物信息学分析。SD3株的全基因组长度大约为5.37Mb，GC含量约为70.63％，GenBank登录号为CP029146(樊欣，赤红球菌SD3全基因组测序及其热休克蛋白DnaK的表达分析，基因组学与应用生物学，2019年1月)。
红球菌属Rhodococcus，因其自身具有非常强的有机物耐受性，以及较宽的降解谱，能够适应多种生存环境。因此，红球菌属被广泛应用于污染修复、有机化合物降解、污水处理等领域。目前，赤红球菌的主要应用领域在于环境治理，参见CN108862590A、CN107151635A、CN102250796A、CN1519312A、CN103627653A、CN101033454A、CN108130288A、CN104830738A、CN101619299A、CN103509833A、CN106434466A、CN101580808A、CN102604875A、CN103160491A、CN106591168A、CN106591172A、CN105820982A。
CN109576180A中公开了一种从广州市番禺区附近郊野红土中筛 选到的菌RDC-01，经16S rRNA基因序列分析和培养特性鉴定，该菌株鉴定为赤红球菌。将该菌灭活后，作为免疫佐剂添加入动物用的灭活疫苗中，发现可以促进动物生产抗体。
然而，赤红球菌在人类医学领域中的应用，尚未有报道。
白色念珠菌(又称假丝酵母菌)是一种广泛存在于自然界的腐生菌，属于人体的正常寄生菌群。它是一种条件致病菌，在人体免疫功能下降或受某些因素的影响下，寄生的白色念珠菌可产生致病性而引起疾病。
白色念珠菌是一种双相真菌，有酵母相和菌丝相。在寄生时为酵母相，一般无致病性；但在一定条件时可转变为有致病性的菌丝相。白色念珠菌可以感染机体任何组织和器官而引起，例如：口腔感染引起的疾病(如鹅口疮、舌炎、唇炎等)；感染生殖器引起的疾病(例如念珠菌性外阴阴道炎、念珠菌性包皮龟头炎等)；感染皮肤引起的疾病(例如念珠菌性间擦疹、念珠菌性肉芽肿、慢性皮肤黏膜念珠菌病)；感染支气管、肺部引起的疾病(支气管炎、肺炎、胸膜炎等)；感染消化道引起各种的疾病(消化道念珠菌病)。
由于白色念珠菌患者大量服用各种抗生素引起免疫能力低下和菌药物耐受，使念珠菌感染引起的疾病反复发作，目前临床上缺少有效理想的药物和治疗方法。
发明内容
根据本公开的一些实施方案，提供了一种分离的赤红球菌(Rhodococcus ruber)。
根据本公开的一些具体的实施方案，提供了一种赤红球菌，其于2019年03月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(China General Microbiological Culture Collection Center，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；邮政编码：100101)，保藏编号为CGMCC No.17431。该保藏满足《国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约(Budapest Treaty on the International Recognition of the Deposit of Microorganisms for the Purposes of Patent Procedure)》的规定。
根据本公开的一些实施方案，提供了赤红球菌及其衍生产品。所述衍生产品源自赤红球菌，包含赤红球菌的组成成分(如蛋白、核酸、脂质、细胞壁及其组成成分、碳水化合物、代谢物)。
在具体的实施方案中，提供了一种分离的赤红球菌细胞壁。
在具体的实施方案中，提供了一种分离的赤红球菌细胞壁，所述赤红球菌是指保藏号为CGMCC No.17431的株。
在具体的实施方案中，提供了一种分离的赤红球菌细胞壁骨架。
在具体的实施方案中，提供了一种分离的赤红球菌细胞壁骨架，所述赤红球菌是指保藏号为CGMCC No.17431的株。
根据本公开的一些实施方案，提供了药物组合物，其包含根据本公开的赤红球菌的细胞壁或赤红球菌的细胞壁骨架。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种赤红球菌产品，其包含赤红球菌经粉碎后所得的产物。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种赤红球菌产品，其包含赤红球菌经粉碎并经过纯化(除脂、除核酸、除蛋白)所得的产物。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种赤红球菌产品，其包含赤红球菌的细胞壁。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种赤红球菌产品，其包含赤红球菌的细胞壁骨架。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其包含赤红球菌经粉碎后所得的产物。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其包含赤红球菌经粉碎和经过纯化(除脂、和/或除核酸、和/或除蛋白质)后所得的产物。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其包含赤红球菌的细胞壁。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其包含赤红球菌的细胞壁骨架。
根据本公开的另一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其包含上述赤红球菌产品。
在具体的实施方案中，药物组合物还包含药学上可接受的赋形剂。
在一些实施方案中，药物组合物中所述赤红球菌产品为1个重量份，药学上可接受的赋形剂为100至1000个重量份(100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000)，优选200个至500个重量份，更优选200至300个重量份(例如，200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300以及任意两个数值范围内的任意点值)。
在另一些实施方案中，药物组合物中赤红球菌细胞壁为1个重量份，所述药学上可接受的赋形剂为100至1000个重量份(100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000)，优选200个至500个重量份，更优选200至300个重量份(例如，200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300以及任意两个数值范围内的任意点值)。
在又一些实施方案中，药物组合物中赤红球菌细胞壁骨架为1个重量份，所述药学上可接受的赋形剂为100至1000个重量份(100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000)，优选200个至500个重量份，更优选200至300个重量份(例如，200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300以及任意两个数值范围内的任意点值)。
在一些实施方案中，药物组合物可以制备成液态的(液体制剂)。
在另一些实施方案中，药物组合物可以制备成固体的(干粉制剂或冻干粉制剂)。
技术人员理解，对于本公开的药物组合物而言，液体制剂和干粉制剂(或冻干粉制剂)，二者可以相互转化，差别仅在于含水量。除去液体制剂中的绝大部分或全部水，得到干粉制剂(或冻干粉制剂)。干粉制剂(或冻干粉制剂)溶解(或复溶)后得到液体制剂。
在一些实施方案中，药物或药物组合物被制备成选自以下的剂型：膏剂、霜剂、乳液、混悬剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、酊剂、油剂、片剂、气雾剂、喷雾剂、搽剂、粉剂、栓剂、胶囊；其中，所述膏剂选自：软膏剂、硬膏剂、乳膏剂。
在一些实施方案中，剂型是适合应用至病灶上的形式。例如，喷雾、软膏、洗剂、敷料、贴片、栓剂。
在一些实施方案中，所述药学上可接受的赋形剂涉及但不限于： 填充剂、稳定剂、矫味剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、抛射剂、保湿剂、溶剂、增溶剂、乳化剂、抗氧化剂、pH调节剂、防腐剂。
在一些实施方案中，所述药学上可接受的赋形剂，例如但不限于：右旋糖酐、乳糖、微晶纤维素、海藻糖、甘氨酸、木糖醇、羧甲基纤维素钠、赤藓糖醇、明胶、硬脂酸镁。
在一些实施方案中，所述药学上可接受的赋形剂的非限制示例还可以提及：白凡士林、卡波姆、羟丙甲纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素钠、壳聚糖、硫糖铝壳聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、玻璃酸钠、二甲醚、四氟乙烷、氢氟烷烃、甘油、丙二醇、去离子水、注射用水、蒸馏水、乙醇、十六醇、十八醇、对氨基苯甲酸、乙酰胺、异丙醇、吐温、聚氧乙基氢化蓖麻油、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、三聚甘油单硬脂酸酯、脂肪酸蔗糖酯、蔗糖酯、乙酸异丁酸蔗糖糖酯、山梨醇酐三硬脂酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、胆固醇、角鲨烯、角鲨烷、正丁醇、乙二醇、乙醇、丙二醇、聚甘油酯、亚硫酸盐、半胱氨酸、二叔丁基羟基甲苯、山梨酸钾、磷酸缓冲溶液、三乙醇胺、氢氧化钠、乙二胺、月桂胺、碳酸氢钠、盐酸、尼泊金类、硫柳汞、氯甲酚、三氯叔丁醇、苯甲酸及其钠盐。
根据本公开的一些实施方案，提供一种赤红球菌产品的制备方法，其包括以下步骤或由以下步骤组成：
1)提供赤红球菌；
2)任选，培养所述赤红球菌；
3)任选，收集经培养的赤红球菌；
4)粉碎所述经培养的赤红球菌，得到粉碎产物；
5.1)任选，对所述的粉碎产物进行去除脂质的操作；
5.2)任选，对所述的粉碎产物进行去除核酸的操作；
5.3)任选，对所述的粉碎产物进行去除蛋白质的操作；
5.4)得到纯化产物；
6)任选地，除去所述纯化产物中的水，优选通过冷冻干燥除去所述纯化产物中的水；
7)任选地，进行分装；
8)收获所述的赤红球菌产品；
其中，步骤5.1)、5.2)、5.3)可互换顺序或可并行；步骤6)和步骤7)可互换顺序。
任选地，根据需要，步骤5)中还可以包含(例如用非离子型表面活性剂)去除细胞膜的步骤。
赤红球菌的培养不限于具体的培养介质和培养参数，技术人员可以采用公知的适当方式进行培养，可以根据制备规模采用培养皿、培养瓶、发酵罐。
对于赤红球菌的粉碎，其目的在于去除细胞内的物质，因此可以采用超声破碎、溶菌酶等技术。技术人员理解，任何适用于破碎革兰氏阳性菌的已知或未来方法，均适用于本公开技术方案。
技术人员有能力根据活性成分(细胞壁及其组成成分)的后续应用(例如外敷等)，来调整培养、破碎、分离、收集、除杂质、分装的具体参数和设备，以免制备步骤中引入影响后续应用的因素。
在一些实施方案中，利用例如有机溶剂去除破碎产物中的脂质。在一些实施方案中，利用例如核酸酶去除破碎产物中的DNA和RNA。在一些实施方案中，利用例如水解酶降解破碎产物中的蛋白质。在一些实施方案中，利用例如表面活性剂去除破碎产物中的细胞膜。
在一些实施方案中，粉碎的平均粒度为10nm至1000nm；可以提及10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190nm±10nm，以及上述任意两个数值之间的范围。粒度的测试方法有很多(胡松青等人，现代颗粒粒度测量技术，现代化工，2002年22：1)。
在一些具体的实施方案中，粉碎的平均粒度为10nm至800nm。
在另一些具体的实施方案中，粉碎的平均粒度为10nm至500nm。
在一些实施方案中，所述分装是指分装至容器或置于固体支持物上。所述容器选自：瓶、管、包、袋、板、安瓿、注射装置、铝膜包装、敷料、胶囊。
例如，在具体的实施方案中，所述分装是指分装至瓶/安瓿中。临用前，向瓶/安瓿中添加溶剂。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种赤红球菌产品，其是通过根据本公开的方法制备所得。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其包含根据本公开的方法制备所得的赤红球菌产品。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种分离的赤红球菌细胞壁，其用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种赤红球菌产品，其用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病。
根据本公开的一些实施方案，提供了一种药物组合物或医疗装置，其用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病。
根据本公开的一些实施方案，提供根据本公开的赤红球菌细胞壁在治疗白色念珠菌感染引起的疾病中的用途；还提供了本公开的赤红球菌细胞壁在制备用于治疗受试者皮肤损伤或溃疡的药物/医疗装置中的用途。
根据本公开的一些实施方案，提供根据本公开的赤红球菌产品在治疗白色念珠菌感染引起的疾病中的用途；还提供了本公开的赤红球菌产品在制备用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病的药物/医疗装置中的用途。
根据本公开的一些实施方案，提供根据本公开的药物组合物在治疗白色念珠菌感染引起的疾病中的用途；还提供了本公开的药物组合物在制备用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病的药物/医疗装置中的用途。
在一些实施方案中，白色念珠菌感染引起的疾病选自：白色念珠菌感染引起的生殖器疾病、白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病、白色念珠菌感染引起的皮肤疾病、白色念珠菌感染引起的消化道疾病。
在一些实施方案中，白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病选自：鹅口疮、念珠菌性舌炎、念珠菌性唇炎。
在一些实施方案中，白色念珠菌感染引起的生殖器疾病选自：念珠菌性外阴炎、霉菌性阴道炎、念珠菌性包皮龟头炎。
在一些实施方案中，白色念珠菌感染引起的皮肤疾病选自：念珠菌性间擦疹、念珠菌性肉芽肿、慢性皮肤黏膜念珠菌病。
在一些实施方案中，白色念珠菌感染引起的消化道疾病选自：霉菌性食道炎、念珠菌性肠炎、肛门白色念珠菌感染。
根据本公开的一些实施方案，提供选自以下的任一项在制备药物(或医疗装置)中的用途：
-根据本公开的赤红球菌、
-根据本公开的分离的赤红球菌细胞壁、
-根据本公开的赤红球菌产品、
-根据本公开的药物组合物。
在一些具体的实施方案中，所述药物用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病。
在一些具体的实施方案中，所述医疗装置(如敷料、贴片、绷带、膜、贴片等)用于治疗白色念珠菌感染引起的疾病。
根据本公开的一些实施方案，还提供了一种治疗白色念珠菌感染引起的疾病的方法，包括使受试者(病灶)接触治疗有效量的选自以下的任一项：
-根据本公开的分离的赤红球菌细胞壁、
-根据本公开的赤红球菌产品、
-根据本公开的药物组合物、
-根据本公开的医疗装置。
在一些具体的实施方案中，针对严重程度的不同，采用不同的剂量，将药物(或医疗装置)施用至病灶。例如，但不限于：
-用包含赤红球菌细胞壁骨架的药物涂抹；或者
-用浸有赤红球菌细胞壁骨架的贴片(或膜、纱布)覆盖在病灶处；
-包含赤红球菌细胞壁骨架的冻干粉在病灶直接施用；或
-在病灶上施用包含赤红球菌细胞壁骨架的膏体/霜。
可以在病灶上交替使用药液、膏剂、干粉剂。
在一些具体的实施方案中，接触的周期为：持续2天至2个月或更长。具体而言，例如2、4、6、8、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60天；再比如，可以提及1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、13周、14周、15周、16周、17周、18周或更长。在具体的实施方案中，向受试者施用3-4周活性成分。
在一些实施方案中，按照以下频率进行施用：一天施用1至3次、 两天施用1至6次、三天施用1至9次、一周施用1至14次、一月施用1至60次。在一些实施方案中，一天施用两次，或一天施用一次，或二天施用一次。
每次施用量视受试者具体情况的不同，采用不同的剂量，通常为1μg至1000μg/单位剂量/每次；5μg至800μg/单位剂量/每次，优选为10μg至600μg/单位剂量/每次。具体而言，例如1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200μg/单位剂量/每次、以及前述任意两个数值之间的范围。
在一些具体的实施方案中，本公开的赤红球菌产品、药物组合物或医疗装置每次与病灶接触：数分钟至数小时，例如30分钟至24小时。
在一些具体的实施方案中，接触是通过以下方式实现的，例如但不限于：口服、黏膜、经皮、透皮、腹腔、穿刺、喷鼻、滴眼、栓剂、舌下。
在一些实施方案中，前述治疗方法适用于任何具有皮肤或黏膜结构的动物，具体而言是哺乳动物、爬行动物、两栖动物、鸟。哺乳动物选自：人、非人灵长动物、猪、牛、马、羊、犬、猫、鼠、兔、骆驼科。
在一些具体的实施方案中，受试者是人以外的动物，例如用于农场动物、宠物、工作动物、观赏动物、生产动物。
在具体的实施方案中，受试者是人。
在一些具体的实施方案中，受试者疑似患有、确诊患有、已经患有、或易感于目标疾病或其症状。
在一些具体的实施方案中，药物或医疗装置中的唯一治疗性(或预防性)活性成分是源自赤红球菌的产品，尤其是包含赤红球菌组成成分(如蛋白、核酸、脂质、细胞壁及其组成成分、碳水化合物、代谢物)的产品，具体而言包含赤红球菌细胞壁(更优选赤红球菌细胞壁骨架或其组成)的产品。
在另一些具体的实施方案中，赤红球菌的产品(赤红球菌细胞壁或其组成，更优选赤红球菌细胞壁骨架或其组成)可以和其它治疗活 性成分(抗生素、激素、细胞因子)联合施用。例如，赤红球菌的产品单独施用，或与抗真菌剂联合施用。
附图说明
图1：赤红球菌的菌落形态。
图2：16S rRNA鉴定结果。
具体实施方式
“分离”是指本公开的赤红球菌脱离其原始生长环境。
技术人员知晓，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构不同。具体而言，革兰氏阳性菌的细胞壁较厚(通常20nm至80nm)，含有约90％的肽聚糖和约10％的磷壁酸(一种由醇和磷酸分子形成的聚合物，通常以糖酯或氨基酸酯的形式存在)。肽聚糖层致密，甚至多达20层。然而，革兰氏阴性菌的细胞壁比革兰氏阳性菌的细胞壁要薄很多，结构较复杂，分为外膜(outer membrane)和肽聚糖层(通常2nm至3nm)。
肽聚糖层是细菌细胞壁中特有成分，是一种杂多糖的衍生物。每一个肽聚糖的单体包括3部分：糖单元(例如，至少两种糖分子通过糖苷键连接起来，构成肽聚糖的框架性结构)、肽尾(由若干氨基酸连接成的短肽链，其连接在N-乙酰胞壁酸分子上)、和肽桥(将相邻“肽尾”交联形成高强度的网状结构)。不同细菌的肽桥、肽尾、交联方式是不同的。
分离的赤红球菌细胞壁
在本公开中，“分离的赤红球菌细胞壁”既可以理解为完整的细胞壁，也可以理解为不完整的细胞壁(例如，破碎的、或部分降解的)。在本公开的教导下，技术人员将理解，显示出所需活性的成分来自赤红球菌的细胞壁(例如，是细胞壁本身或其组成)。因此，在临床应用中允许采用完整的细胞壁、经破碎的细胞壁、细胞壁的不完全降解产物、细胞壁的组成成分、细胞壁的提取物等各种形式，这些都包含在本公开范畴之内。
细胞壁骨架
构成细胞壁主体结构的组成成分；但不能理解为仅仅表示细胞壁当中的交联网状实体，技术人员理解不排除交联网状实体上所吸附、结合、携带的其他细胞壁成分。
赤红球菌
本公开实施方案中所用的赤红球菌是指红球菌属(Rhodococcus)的赤红球菌种(Rhodococcus ruber)，不限于特定的细胞株。
非限制性示例包括TOY7株(南京农业大学农业环境微生物菌种保藏中心)、CGMCCNo.4795、DSM43338、CCTCC No.2012035、CGMCC No.16640、CGMCC No.17431。
赤红球菌的鉴定
根据已知的或未来的微生物鉴定技术，技术人员可以对一株细菌进行分类学鉴定，例如可用的鉴定技术包括形态学、生理生化特征、16S rRNA等。技术人员理解，随着科技的发展，鉴定技术涉及不同的手段，在较早的时期主要采用形态学和生化鉴定方式，但是这种方法的可靠程度不高。测序技术出现后，技术人员可以利用更为可信的方式鉴定菌株。例如，当16S rRNA的DNA序列被鉴定为具有97％(含)以上相似性时，判定两个菌属于相同的种(华苟根等人，红球菌属的分类及应用研究进展，微生物学通报，2003：30(4))。就赤红球菌而言，将保藏在国际(或国家级)菌种保藏单位中的已知菌株作为模式菌株，并与其进行比对。
剂型
本公开的药物或药物组合物或活性成分或产品，可以体现为但不限于以下形式：软膏剂、乳膏剂、硬膏剂、凝胶剂、片剂、洗剂、酊剂、搽剂、油剂、糊剂、散剂、粉剂、喷雾剂、气雾剂、栓剂、贴片、悬液、漱口液、口含片、护肤品(洁面乳、化妆水、精华、乳液、面霜、面膜)、敷料、贴片、绷带、贴膜、纱布。
制剂单元
本公开的药物或药物组合物或活性成分或产品，可以制备成单位制剂(单元制剂)的形式。
在一些实施方案中，所述药物(或制剂、或治疗剂、或医疗装置)中的单位剂量含有：
-1μg至1000μg所述的赤红球菌产品；或
-1μg至1000μg所述的赤红球菌细胞壁；或
-1μg至1000μg所述的赤红球菌细胞壁骨架。
单位剂量的具体示例是1、2、5、10、15、20、25、30、40、50、55、56、57、58、59、60、61、62、63、65、66、67、68、69、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500μg±10％、以及上述任意两个数值之间的范围。
“施用”、“给予”、“提供给”、“处理”当应用于动物、人、细胞、组织、器官或生物样品时，是指药物或医疗装置与动物、人、细胞、组织、器官或生物样品接触。
“治疗”意指给予受试者内用或外用药物(治疗剂、活性成分或组合物)(如，根据本公开的赤红球菌细胞壁或其药物组合物)或医疗装置，在被治疗的受试者(或群体)中缓解(减轻、延迟、改善、治愈)一种或多种疾病症状，以至于达到临床可测量的程度，其中所述的受试者已经患有、疑似患有或易感于一种或多种疾病或其症状。
有效缓解任何疾病症状的药物(治疗剂、活性成分或组合物)的量称为治疗有效量。可根据多种因素变化，例如受试者的疾病状态、年龄和体重。应当理解，在缓解单个受试者的目标疾病或其症状时，药物(治疗剂、活性成分或组合物)可能无效，但是根据本领域已知的任何统计学检验方法(如Student T检验、卡方检验、依据Mann和Whitney的U检验)确定，药物(治疗剂、活性成分或组合物)在统计学意义上对目标疾病或其症状是有效的。
“任选”意味着其随后所描述的事项可以发生，但不必须发生；需要视情况而定。例如，“任选地，进行分装”意味着允许对产品进行分装，但是不是必须进行分装；分装与否不影响技术效果的实现。
“一个”、“一”、“单个”、“该”，如果没有明确说明，也包括复数形式。
以下结合实施例、制备例和测试例，进一步描述本公开。但这些实施例、制备例和测试例并非限制着本公开的范围。当未注明具体条件时，按照常规条件、按照原料供应商所建议的条件操作。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
技术人员尤其理解，虽然以下具体示例采用了特定的细胞株，但是技术效果的实现不限于该特定的细胞株，任何属于红球菌属赤红球菌种的(Rhodococcus ruber)物种均适用。
实施例
实施例1.菌株保藏
发明人将实验室保存的主代菌株于2019年03月22日保藏在北京市朝阳区北辰西路1号院3号(Institute of Microbiology Chinese Academy of Sciences，No.1West Beichen Road，Chaoyang District，Beijing China)，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17431。经检测表明，所寄存的菌株存活。
实施例2.菌株鉴定
1.菌落形态特征的裸眼观测
在甘油琼脂培养介质上，30-37℃(具体为32-35℃)培养12至72(具体为36至60，例如40-50)小时，可见(图1)：
-菌落隆起；
-呈桔红色(受光线、培养介质颜色等影响，则略有差别)；
-表面干燥皱起、稍显光泽(随培养条件差别，则略有差别)；
-轻触易碎；
-菌落大小约1mm至2mm(随培养条件差别，则略有差别)。
2.显微镜观察
-菌体呈分枝状，有横隔膜，形成菌丝体(随培养条件差别，则略有差别)；
-菌丝分裂形成规则的短粗细胞(随培养条件差别，则略有差别)；
-培养4至5天时，菌体成短杆状或球形(随培养条件差别，则略有差别)。
3.染色性
革兰氏染色阳性。
4.生化反应
取甘油琼脂斜面培养介质上，30-37℃(具体为32-35℃)培养12 至72(具体为36至60，例如40-50)小时培养。然后，对培养物进行以下各项测试。
4.1碳水化合物产酸：
呈阳性：甘油、甘露醇、山梨醇、D-阿拉伯糖醇、D-果糖、D-葡萄糖；
呈阴性：肌醇、菊糖、乳糖、蔗糖、淀粉、麦芽糖、糖原、木糖醇、葡萄糖酸盐、海藻糖、赤藓醇、松三糖、蜜二糖、棉子糖、纤维二糖、苦杏仁甙、龙胆二糖、阿东醇、熊果甙、D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、α-甲基-D-葡萄糖甙、α-甲基-D-甘露糖甙、D-核糖、D-木糖、L-木糖、N-乙酰-葡糖胺、D-松二糖、D-来苏糖、β-甲基-D-木糖甙、D-半乳糖、D-塔格糖、D-岩藻糖、L-岩藻糖、D-甘露糖、L-山梨糖、L-阿拉伯糖醇、L-鼠李糖、2-酮基-葡萄糖酸盐。
4.2酶活性测定(API ZYM)：
呈阳性：碱性磷酸酶、类脂酯酶(C8)、类脂酶(C14)、白氨酸芳胺酶、缬氨酸芳胺酶、胱氨酸芳胺酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、酸性磷酸酶、萘酚-AS-B1-磷酸水解酶、α-葡萄糖苷酶；
呈阴性：N-乙酰-葡萄糖胺酶、酯酶(C4)、β-半乳糖苷酶、β-糖醛酸苷酶、β-葡萄糖苷酶、α-半乳糖苷酶、α-甘露糖苷酶、β-岩藻糖苷酶。
4.3硝酸盐还原反应阳性、接触酶阳性、酪氨基酸酶阳性、淀粉酶阴性、氧化酶阴性、明胶液化阴性。
4.4唯一碳源：
Figure PCTCN2019129891-appb-000001
4.5.16S rRNA鉴定：
对工作种子管中分离的15株菌和原始种子管中分离的10株不同菌株，进行基因组提取、16Sr RNA扩增、并测序。总计25个菌株的16Sr RNA基因同一性为100％。这表示25个菌株为相同种属(图2)。
同时，基于Kimura2-参数算法构建的neighbor-joining菌株进化树，结果显示菌株归属为Rhodococcus ruber。
制备例
制备例1.培养方法
1.可以通过常规的微生物生产方法，培养赤红球菌。
2.培养方式既可为固体培养，也可为液体培养(比如摇瓶、发酵罐)。
3.对培养介质中的营养源并无特殊的限制，培养介质中含有培养革兰氏阳性菌常用的碳源、氮源及其它营养源。
-碳源是赤红球菌可以利用的任何碳源。例如，果糖、葡萄糖等。
-氮源：肉膏、蛋白胨、铵盐、硝酸盐以及其它有机或无机含氮化合物。
-其它营养源：可适当添加无机盐。例如NaCl、磷酸盐等。
4.对培养条件(温度、时间等)并无严格的限制，技术人员可以根据初步的小规模的中试数据，自行选择使其产量最高的条件。
5.作为一个示例，采用以下培养条件发酵赤红球菌：
(1)培养介质组成包含：
蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、磷酸盐、甘油(以及，任选琼脂，当固体培养时)。
(2)培养的方法参数：
工作菌种复苏后，转移至固体培养介质上维持3-5天，再转移至液体培养(30-37℃，维持3-5天)，可以采用补料分批的半连续模式，也可以采用分批模式。培养期间监控pH、细菌密度、溶解氧、碳源消耗。
制备例2.菌体破碎
收集制备例1所得到的菌，对细胞进行粉碎(例如但不限于通过 超声波破碎)。也允许采用本领域任何适当的公知方法对菌体进行破碎，例如CN101250490A或CN101323865A。
显微镜下检查粉碎的情况，每个视野有形菌不得超过5个，检查若干(10至30个)视野均达到此标准为合格。
制备例3.去除非细胞壁成分
1.除核酸：
将破碎产物进行离心，获得的沉淀物中加入DNA酶和RNA酶，按照酶的供应商建议的操作去除核酸。
2.除蛋白质：
沉淀物加入常见的蛋白酶(例如胰蛋白酶)，按照酶的供应商建议的操作去除蛋白质。
3.除脂质：
沉淀物中加入有机试剂(如但不限于丙酮、乙醚、乙醇中的一种或组合)，按照本领域常规操作去除脂质。
4.除细胞膜：
沉淀物中加入TritonX-100，按照本领域常规操作，离心收集沉淀物，用PBS漂洗。
应当理解，上述除去杂质的步骤之间，技术人员可以调整先后顺序，使得步骤之间兼容。去除非细胞壁成分后，将沉淀物复溶于注射用水，待用。任选地，可以在115℃下灭菌20-30分钟，作为细胞壁骨架的原液(包含细胞壁骨架及其组成成分)。
除了上述方法，技术人员还可以使用本领域已知的或未来的方法以去除非细胞壁成分，例如CN105779326A中公开的萃取细胞壁成分的方法。
5.产量：
从159个克氏瓶中共收集菌液653ml(破碎后)；湿重产量为138g；细胞壁骨架产量为约0.87g/克氏瓶。
制备例4.药物组合物(医疗装置)的制备方法
1.液体组合物
向制备例3所得产物中加入赋形剂(如右旋糖酐40、甘露醇或海藻糖)。分装后，即为药物组合物。
表1.药物组合物可以配制成多种形式
Figure PCTCN2019129891-appb-000002
2.冻干粉组合物
将第1项的药物组合物冻干，制得冻干粉(分别编号为冻干粉组合物1至7)。
3.制剂/医疗装置的制备方法
(1)敷料
将第1项的药物组合物涂覆在敷料(例如无菌纱布)上，制备成外用医疗装置。
(2)贴片/膜
采用本领域公知的方法，例如参考中国申请号201610605617.5、201510614414.8、200610200450.0等公开的方法，将成膜材料聚乙烯醇、卡波姆、羟丙基纤维素加如水中，溶胀，形成均质粘稠液；向其中加入第1项的药物组合物(分别地，组合物1至7)，并混匀；静置消泡；将形成的无气泡的混合黏稠液；浇铸在涂抹少量石蜡的模具上，干燥5-20min，取出起膜，切割成所需面积。
(3)凝胶剂
也可以制成凝胶的形式，例如中国申请号200510028076.6公开的方法，将组合物3和酯化剂搅拌溶解在溶媒中，加入羟烷基纤维素， 使之溶胀，继续搅拌形成凝胶状；然后加入交联剂继续搅拌至完全均匀。
(4)膏剂
外用软膏的制备方法(分别地，针对组合物1至7)，还见于但不限于中国申请号201610856428.5、01133296.4、1133297.2、《药物剂型与制剂设计》(化学工业出版社2009)公开的方法。
(5)栓剂
参考《药物剂型与制剂设计》(化学工业出版社2009)等文献中公开的方法，将第1项的药物组合物(分别地，组合物1至7)制成阴道或肛门栓剂。
4.质量检验(以冻干粉组合物3为例)
表2.质量检验项目
Figure PCTCN2019129891-appb-000003
测试例
测试例1.药理实验
1.用相当于人类临床剂量的20、40、80倍静脉注射后，对麻醉猫的血压、呼吸、心率和心电进行监测，未产生明显影响；
2.用相当于人类临床剂量的1000倍静脉注射后，小鼠的协调运动和学习记忆功能未产生明显的影响。
可见本公开的药物组合物(组合物1至组合物7)对动物精神、神 经系统、心血管系统、呼吸系统均无明显影响。
测试例2.安全实验
1.无菌实验：
结果阴性，证明无菌。
2.小鼠急性毒性实验：
测试组分别以皮下注射及腹腔注射方式给药，其剂量是人用量的5倍，对照组以无菌生理盐水0.5ml/支，连续观察7-8天。小鼠状态良好，体重无异常；小鼠各脏器无异常。
3.长期毒性实验：
应用临床剂量的30倍，每日一次，连续阴道给药三个月，未发现狗有毒性作用；心电图、血液生化指标在正常范围内。停药两周后，未见到延迟毒性(组合物1至组合物7)。
测试例3.稳定性实验
在常温(18-25℃)放置0、1、2、3、8、14、21个月，该药物组合物(组合物1至组合物7)的丙氨酸含量、胞壁酸含量、吞噬率、吞噬指数与实验起始时相比，无统计学显著差异(测试三个批次)。
综上，冻干粉制剂的药物组合物可以稳定保存24个月。
测试例4.吞噬实验
现有技术中，吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠取出腹腔液，染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，以判断吞噬细胞的杀伤能力，间接地测定机体的非特异性免疫水平。
利用本申请的组合物3进行测试，其吞噬率为75％，吞噬指数1.05。而阴性对照(赋形剂)和空白对照(生理盐水)的吞噬率和吞噬指数都较低。说明本申请的细胞壁骨架或其组成成分的促免疫吞噬能力强。
效果例
效果例1.对白色念珠球菌的吞噬作用
一、实验材料
1.白色念珠球菌：
保藏号ATCC 14053，购自中科院皮肤病研究所。
2.实验动物：
BALB/C小鼠，SPF级，18-20g，中国药品生物制品检定所，生产许可证：SCXK(京)2000-0010。
二、实验方法
1.方案：
参照《吞噬细胞的吞噬和杀菌功能测定方法的改进》中华微生物学和免疫学杂志，制定本实验方法。
2.步骤：
2.1测试组：
每组小鼠5只，用无菌注射用水复溶本公开的冻干粉组合物3，用注射器腹腔注射(20μg/0.2ml/只/次)，间隔5天，第二次注射；
注射后第四天，颈椎脱位处死小鼠；
腹腔注射1/10小鼠体重的Hank氏液，轻揉腹部2-3分钟后，吸取腹腔液1.0至1.5ml于试管中；
加4.0至5.0ml Hank氏液，混匀，1500rpm离心10min，倾出上清液，加1640营养液1.0ml，充分混匀，调节至2×10 6细胞/ml的细胞悬液。
2.2对照组：
用等当量的右旋糖酐代替本公开的组合物外，其它步骤同上。
2.3取白色念珠菌的24小时培养物，用1640营养液配成悬液。革兰氏染色后，用血球计数板计数。
2.4细胞悬液与白色念珠菌悬液各1.0ml混合，37℃静置培养60min，1000rpm离心5min，弃上清，余约0.3ml液体，充分吸打混匀。
2.5取培养物和冷0.02％美兰液各1滴于载玻片上混合，加盖盖玻片，置5min后，油镜检查，按下列公式计算：
Figure PCTCN2019129891-appb-000004
Figure PCTCN2019129891-appb-000005
3.实验结果：
表3.测试结果
Figure PCTCN2019129891-appb-000006
从以上结果可知：测试组的平均吞噬百分率远高于对照组，平均吞噬指数也明显高于对照组。经本公开的组合物刺激过的小鼠，其腹腔巨噬细胞的吞噬能力明显提高。在显微镜视野中，测试组中巨噬细胞数目明显多于对照组。
效果例2.霉菌性阴道炎动物模型
一、实验材料：
实验动物：日本大耳兔，普通级，雌性，2-2.5kg。
菌种：保藏号ATCC 14053，购自中科院皮肤病研究所。
-测试组：本公开的组合物1-3；
-阳性对照：达克宁栓剂，200mg/粒，西安杨森制药有限公司；
-阴性对照：右旋糖酐赋形剂。
二、方法
1.参照《氟康唑凝胶对动物霉菌性阴道炎模型的治疗作用》山东医药工业，2000年第19卷第4期、以及《实验动物和动物实验技术》中国中医药出版社，制定本实验方法。
2.步骤：
用乙醚通过吸入法麻醉兔，固定于兔子固定板上；扩张阴道；于阴道2-4cm处用接种环接种白色念珠球菌，连续两天；第二次接种后的第三天，做阴道涂片检查，呈阳性，证明造模成功。
按如下方法给药：
1号兔：阳性对照：20mg/只达克宁；
2号兔：阴性对照：用含有右旋糖酐的生理盐水灌洗；
3号兔：空白对照：不治疗；
4号兔：测试组：本公开的冻干粉组合物3/只(药物浸在无菌敷料上)；
5号兔：测试组：本公开的冻干粉组合物2/只；
6号兔：测试组：本公开的冻干粉组合物1/只；
连续给药7天，每两天做一次涂片检查。
三、疗效判定标准：
参考《新药临床及临床前研究指导原则汇编》第5页，3.3.2.7节：
-痊愈：症状、体征、病原学检查，全部四项指标均恢复正常；
-显效：病情明显好转，四项指标中有一项为完全恢复正常：
-进步：施用后，病情有所好转，但不够明显：
-无效：施用72小时后，病情无明显进步或有加重。
四、实验结果：
表4.实验结果
Figure PCTCN2019129891-appb-000007
可见，达克宁组和三个测试组在施用4天后病情有好转，第6天 已经基本恢复正常。到第8天也未见有复发迹象，阴性对照和空白对照无变化。
效果例3.口腔黏膜的白色念珠菌感染(舌)
1.患者：48岁，舌下有小块白色溃疡面、有烧灼感。临床诊断为口腔黏膜白色念珠菌感染。
2.治疗：用生理盐水溶解组合物2，并浸透无菌棉球，附在溃疡面，每次40至60分钟，早晚各一次，每次10μg/2毫升。
3.结果：施用4次痊愈。
效果例4.口腔黏膜的白色念珠菌感染(颊部)
1.患者：
59岁(男)，接受过放疗，口腔颊部有白色溃疡、烧灼感、口干。临床诊断为口腔黏膜白色念珠菌感染。
65岁(女)，接受过放疗，口腔颊部有白色溃疡、烧灼感、口干。临床诊断为口腔黏膜白色念珠菌感染。
2.治疗：用生理盐水溶解组合物1，并浸透无菌棉球，附在溃疡面，每次40至60分钟，早晚各一次，每次1μg/2毫升。
3.结果：
59岁(男)：施用3次后，疼痛消除；施用6次后痊愈。
65岁(女)：施用3次后，疼痛减轻；施用5次后痊愈。
效果例5.皮肤的白色念珠菌感染
1.患者：
长期卧床，背部皮肤溃疡。临床诊断为皮肤白色念珠菌感染。
2.治疗：
用生理盐水擦净患处；用生理盐水溶解组合物7，并浸透无菌纱布，附在溃疡面12至24小时，第一天一次，800μg；隔一天，再用同样方法，涂覆本公开的组合物7制成的膏剂。
3.结果：
三次施用后，病情明显好转；继用3次药后，恢复正常。
效果例6.泌尿道的白色念珠菌感染
1.患者：尿道外口，红肿且溃疡。临床诊断为白色念珠菌感染。
2.治疗：用生理盐水擦净患处；用生理盐水溶解组合物2，并浸透无菌纱布，包裹在溃疡面30分钟后取下，早晚各一次；
3.结果：治疗6次后痊愈。
效果例7.霉菌性阴道炎
表5.临床汇总
Figure PCTCN2019129891-appb-000008

Claims (10)

  1. 赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架在制备药物中的用途，其中：
    所述药物用于在受试者中治疗白色念珠菌感染引起的疾病；
    所述受试者选自：哺乳动物、爬行动物、两栖动物、鸟；
    所述哺乳动物选自：人、非人灵长动物、猪、牛、马、羊、犬、猫、鼠、兔、骆驼科；优选，所述受试者是人；
    所述白色念珠菌感染引起的疾病选自：白色念珠菌感染引起的生殖器疾病、白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病、白色念珠菌感染引起的皮肤疾病、白色念珠菌感染引起的消化道疾病。
  2. 赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架在制备医疗装置中的用途，其中：
    所述医疗装置用于在受试者中治疗白色念珠菌感染引起的疾病；
    所述受试者选自：哺乳动物、爬行动物、两栖动物、鸟；
    所述哺乳动物选自：人、非人灵长动物、猪、牛、马、羊、犬、猫、鼠、兔、骆驼科；优选，所述受试者是人；
    所述白色念珠菌感染引起的疾病选自：白色念珠菌感染引起的生殖器疾病、白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病、白色念珠菌感染引起的皮肤疾病、白色念珠菌感染引起的消化道疾病；
    所述医疗装置是敷料、绷带、膜、或贴片。
  3. 根据权利要求1或2所述的用途，其中：
    所述白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病选自：鹅口疮、念珠菌性舌炎、念珠菌性唇炎；
    所述白色念珠菌感染引起的生殖器疾病选自：念珠菌性外阴炎、霉菌性阴道炎、念珠菌性包皮龟头炎；
    所述白色念珠菌感染引起的皮肤疾病选自：念珠菌性间擦疹、念珠菌性肉芽肿、慢性皮肤黏膜念珠菌病；
    所述白色念珠菌感染引起的消化道疾病选自：霉菌性食道炎、念 珠菌性肠炎、肛门白色念珠菌感染。
  4. 根据权利要求1所述的用途，其中所述药物制备成选自以下的剂型：
    膏剂、霜剂、乳液、混悬剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、酊剂、油剂、片剂、气雾剂、喷雾剂、搽剂、粉剂、栓剂、胶囊；
    其中，所述膏剂选自：软膏剂、硬膏剂、乳膏剂。
  5. 根据权利要求1或2所述的用途，其中：
    所述药物或医疗装置包含1μg至1000μg单位剂量的赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架；
    优选地，5μg至800μg单位剂量的赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架；
    更优选地，10μg、20μg、30μg、40μg、50μg、60μg、70μg、80μg、90μg、100μg、150μg、200μg、250μg、300μg、350μg、400μg、500μg、600μg、700μg、800μg每单位剂量。
  6. 根据权利要求1或2所述的用途，其中所述赤红球菌是2019年03月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的赤红球菌Rhodococcus ruber，保藏编号为CGMCC No.17431。
  7. 根据权利要求1所述的用途，其中：
    所述药物还包含药学上可接受的赋形剂；
    所述赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架为1个重量份，所述药学上可接受的赋形剂为100至1000个重量份，优选200个至500个重量份，更优选200个至300个重量份；
    优选，所述赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架为1个重量份，所述药学上可接受的赋形剂为250个重量份；
    所述药物组合物是液态制剂、干粉制剂、或冻干粉制剂。
  8. 根据权利要求1至7任一项所述的用途，所述赤红球菌细胞壁 或赤红球菌细胞壁骨架能够通过以下方法获得，所述方法包括以下步骤或由以下步骤组成：
    1)提供赤红球菌；
    2)粉碎所述赤红球菌，得到粉碎产物；
    3.1)任选地，对所述的粉碎产物进行去除脂质的操作；
    3.2)任选地，对所述的粉碎产物进行去除核酸的操作；
    3.3)任选地，对所述的粉碎产物进行去除蛋白质的操作；
    3.4)得到源自赤红球菌细胞壁的产物；
    4)任选地，除去所述源自赤红球菌细胞壁的产物中的水，优选对所述源自赤红球菌细胞壁的产物进行冷冻干燥；
    5)任选地，分装；
    其中，步骤3.1)、3.2)、3.3)能够互换顺序或并行；步骤4)和步骤5)能够互换顺序；
    优选地，所述分装是指分装至容器中或固体支撑物上；
    所述容器选自：瓶、管、包、袋、板、安瓿、注射装置、铝膜包装、敷料、胶囊。
  9. 一种治疗受试者中白色念珠菌感染引起的疾病的方法，包括步骤：使受试者接触治疗有效量的赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架；
    所述受试者选自：哺乳动物、爬行动物、两栖动物、鸟；
    所述哺乳动物选自：人、非人灵长动物、猪、牛、马、羊、犬、猫、鼠、兔、骆驼科；优选，所述受试者是人；
    所述白色念珠菌感染引起的疾病选自：白色念珠菌感染引起的生殖器疾病、白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病、白色念珠菌感染引起的皮肤疾病、白色念珠菌感染引起的消化道疾病；
    所述白色念珠菌感染引起的生殖器疾病选自：念珠菌性外阴炎、霉菌性阴道炎、念珠菌性包皮龟头炎；
    所述白色念珠菌感染引起的口腔黏膜疾病选自：鹅口疮、念珠菌性舌炎、念珠菌性唇炎；
    所述白色念珠菌感染引起的皮肤疾病选自：念珠菌性间擦疹、念 珠菌性肉芽肿、慢性皮肤黏膜念珠菌病；
    所述白色念珠菌感染引起的消化道疾病选自：霉菌性食道炎、念珠菌性肠炎、肛门白色念珠菌感染；
    所述赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架制备成选自以下的形式：膏剂、霜剂、乳液、混悬剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、酊剂、油剂、片剂、气雾剂、喷雾剂、搽剂、粉剂、栓剂、胶囊、敷料、绷带、膜、贴片；
    所述膏剂选自：软膏剂、硬膏剂、乳膏剂；
    所述接触为一天两次、或一天一次、或二天一次、或二天三次、或三天一次、或一周一次；
    所述接触为每次30分钟至每次24小时；
    所述接触持续2天、3天、4天、5天、6天、1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、13周、14周、15周、16周、17周、18周或更长。
  10. 根据权利要求9所述的方法，所述赤红球菌细胞壁或赤红球菌细胞壁骨架能够通过以下方法获得，所述方法包括以下步骤或由以下步骤组成：
    1)提供赤红球菌；
    2)粉碎所述赤红球菌，得到粉碎产物；
    3.1)任选地，对所述的粉碎产物进行去除脂质的操作；
    3.2)任选地，对所述的粉碎产物进行去除核酸的操作；
    3.3)任选地，对所述的粉碎产物进行去除蛋白质的操作；
    3.4)得到源自赤红球菌细胞壁的产物；
    4)任选地，除去所述源自赤红球菌细胞壁的产物中的水，优选对所述源自赤红球菌细胞壁的产物进行冷冻干燥；
    5)任选地，分装；
    其中，步骤3.1)、3.2)、3.3)能够互换顺序或并行；步骤4)和步骤5)能够互换顺序；
    任选地，所述粉碎的平均粒度为10nm至1000nm，优选10nm至800nm，更优选10nm至500nm；
    优选地，所述分装是指分装至容器中或固体支撑物上；
    所述容器选自：瓶、管、包、袋、板、安瓿、注射装置、铝膜包装、敷料、胶囊。
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109576180B (zh) * 2018-12-17 2021-11-26 北京利昂盛生物技术有限公司 一株赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用
US20220241348A1 (en) * 2019-01-15 2022-08-04 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co. Ltd. Product derived from rhodococcus ruber, and pharmaceutical use thereof
WO2020182180A1 (zh) * 2019-03-14 2020-09-17 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 赤红球菌产品在治疗外阴白色病变中的用途
JP2022531109A (ja) * 2019-04-24 2022-07-06 ▲遼▼▲寧▼格瑞仕特生物制▲藥▼有限公司 熱損傷の治療におけるロドコッカスルーバー製品の使用
CN110101721A (zh) * 2019-05-21 2019-08-09 福建省微生物研究所 一种赤红球菌提取物的用途
EP4043555A4 (en) * 2020-01-21 2023-01-18 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co., Ltd. USE OF RHODOCOCCUS RUBER CELL WALL SKELETON IN REGENERATIVE MEDICINE
CN115484967A (zh) * 2021-03-24 2022-12-16 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 赤红球菌产品在治疗放射病中的用途
CN115025128A (zh) * 2022-06-24 2022-09-09 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架在治疗宫颈病变中的应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000009659A1 (de) * 1998-08-13 2000-02-24 Lonza Ag Verfahren zur herstellung von indanderivaten
CN101580808A (zh) * 2008-05-15 2009-11-18 汕头大学 一株赤红球菌及其在降解烃类化合物中的应用
CN101892283A (zh) * 2010-06-03 2010-11-24 华东理工大学 红球菌Rhodococcus ruber 4.1187催化制备光学纯(S)-(+)-2-苯基丙酸
CN102250796A (zh) * 2011-06-21 2011-11-23 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种赤红球菌和微生物菌剂及它们的应用
CN105820982A (zh) * 2016-04-29 2016-08-03 河北省科学院生物研究所 一种赤红球菌xs-2、其生物菌剂及制备方法和应用
CN106434466A (zh) * 2016-10-14 2017-02-22 天津科技大学 一种产生天然红色素的赤红球菌及其制备方法与应用

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63126493A (ja) * 1986-11-17 1988-05-30 Nippon Oil & Fats Co Ltd 抗ウイルス剤
DK1270722T3 (da) * 2001-06-22 2007-05-14 Inst Francais Du Petrole Cytochrom P-450-klynge fra Rhodococcus ruber og anvendelse deraf til etherbrændstofspaltning
DE10149715B4 (de) * 2001-10-09 2013-04-18 Evonik Degussa Gmbh Esterase EstA aus Rhodococcus ruber
CN1291725C (zh) * 2002-03-08 2006-12-27 沈阳胜宝康生物制药有限公司 用于治疗宫颈糜烂的红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂及其制法
CN1214798C (zh) * 2002-06-21 2005-08-17 沈阳胜宝康生物制药有限公司 用于治疗单纯疱疹和带状疱疹的诺卡软膏
JP4726485B2 (ja) * 2002-08-02 2011-07-20 大日本住友製薬株式会社 細菌細胞壁骨格成分製剤
GB0220809D0 (en) * 2002-09-06 2002-10-16 Univ College Of London Immune modulator
AR041171A1 (es) * 2002-09-06 2005-05-04 Univ London Modulador inmune
CN1223673C (zh) 2003-01-23 2005-10-19 中国科学院微生物研究所 一种产生生物乳化剂和降解多环芳烃的赤红球菌Em及用途
WO2005049056A2 (en) * 2003-11-14 2005-06-02 Ucl Biomedica Plc Immune modulator comprising whole cell rhodococcus, gordonia, nocardia, dietzia, tsukamurella or nocardioides bacteria
CA2564180A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Pharmaceutical preparation containing bacterial cell wall skeleton component
CN1879661B (zh) * 2005-06-16 2012-06-20 辽宁纳可佳生物制药有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备抗真菌感染的药物中的用途
GB0526032D0 (en) * 2005-12-21 2006-02-01 Bioeos Ltd Use
CN100519737C (zh) 2006-04-29 2009-07-29 浙江工业大学 赤红球菌zjb-064及其应用
CN101073583A (zh) * 2006-05-19 2007-11-21 沈阳胜宝康生物制药有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备药物中的用途
CN101209267B (zh) * 2006-12-29 2012-10-03 辽宁纳可佳生物制药有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备治疗皮肤损伤和疮疡的药物中的用途
JP5019519B2 (ja) * 2007-03-20 2012-09-05 独立行政法人産業技術総合研究所 ロドコッカス属細菌由来の抗菌活性物質及びそれを用いた微生物防除法
GB0716778D0 (en) * 2007-08-29 2007-10-10 Bioeos Ltd Use
CN101250490A (zh) 2008-03-28 2008-08-27 天津科技大学 活酵母细胞衍生物的生产方法
CN101323865B (zh) 2008-08-07 2012-07-18 山东省科学院能源研究所 微生物油脂分离提取方法
CN101619299B (zh) 2009-07-08 2012-07-04 天津科技大学 一种赤红球菌以及利用该菌制备5-氰基戊酰胺的方法
CN102604875B (zh) 2012-03-26 2014-12-10 江西师范大学 赤红球菌及其在降解苯酚污染物中的应用
WO2014034669A1 (ja) * 2012-08-28 2014-03-06 国立大学法人北海道大学 非極性溶媒に分散性を有する細菌菌体成分を内封する脂質膜構造体およびその製造方法
CN102895264B (zh) * 2012-11-15 2014-05-14 福建广生堂药业股份有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架口含片及其制备方法
CN103160491B (zh) 2013-04-15 2014-12-10 江西师范大学 赤红球菌sd3的诱变菌m1的固定化细胞及其在降解苯酚污染物中的应用
CN103509833B (zh) 2013-08-15 2016-04-06 天津科技大学 一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法
CN103627653B (zh) 2013-10-17 2016-01-20 浙江省环境保护科学设计研究院 一种赤红球菌菌株及其在含有机污染物的废水处理中的应用
CN104830738B (zh) 2015-05-22 2017-09-15 厦门大学 一种赤红球菌及其在制备十溴联苯醚降解剂中的应用
CN106591168B (zh) 2016-02-02 2019-08-16 江苏南资环保科技有限公司 一种烟嘧磺隆降解赤红球菌ymhl-1及其应用
WO2017143386A1 (en) * 2016-02-25 2017-08-31 Borody Thomas J Compositions and methods of treatment of chronic infectious diseases
CN106591172B (zh) * 2016-04-01 2019-11-29 江苏南资环保科技有限公司 一种赤红球菌pta-2及其固定化和应用
CN107151635B (zh) 2017-04-28 2020-02-18 中国农业科学院研究生院 一种能够降解邻苯二甲酸酯的赤红球菌及其应用
CN108815197A (zh) * 2017-05-03 2018-11-16 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架作为cd4+t细胞增殖促进剂的用途
CN108938674A (zh) * 2017-05-27 2018-12-07 福建省山河药业有限公司 红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备治疗皮肤病变药物中的用途
CN108130288B (zh) 2017-12-15 2020-10-09 浙江工业大学 赤红球菌及其降解有机污染物的应用
CN108862590B (zh) 2018-08-03 2021-01-12 中国石油大学(北京) 一种降解丙烯腈废水cod的方法
CN109576180B (zh) 2018-12-17 2021-11-26 北京利昂盛生物技术有限公司 一株赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用
CN109666609B (zh) * 2019-01-14 2020-04-17 付家栋 一种赤红球菌发酵方法及其作为佐剂在动物疫苗中的应用
US20220241348A1 (en) * 2019-01-15 2022-08-04 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co. Ltd. Product derived from rhodococcus ruber, and pharmaceutical use thereof
WO2020182180A1 (zh) * 2019-03-14 2020-09-17 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 赤红球菌产品在治疗外阴白色病变中的用途
JP2022531109A (ja) * 2019-04-24 2022-07-06 ▲遼▼▲寧▼格瑞仕特生物制▲藥▼有限公司 熱損傷の治療におけるロドコッカスルーバー製品の使用
CN110184215B (zh) * 2019-05-21 2021-08-13 福建省微生物研究所 一种赤红球菌菌株、菌制剂及其菌体细胞与提取物的应用
EP4043555A4 (en) * 2020-01-21 2023-01-18 Liaoning Greatest Bio-Pharmaceutical Co., Ltd. USE OF RHODOCOCCUS RUBER CELL WALL SKELETON IN REGENERATIVE MEDICINE
CN115484967A (zh) * 2021-03-24 2022-12-16 辽宁格瑞仕特生物制药有限公司 赤红球菌产品在治疗放射病中的用途

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000009659A1 (de) * 1998-08-13 2000-02-24 Lonza Ag Verfahren zur herstellung von indanderivaten
CN101580808A (zh) * 2008-05-15 2009-11-18 汕头大学 一株赤红球菌及其在降解烃类化合物中的应用
CN101892283A (zh) * 2010-06-03 2010-11-24 华东理工大学 红球菌Rhodococcus ruber 4.1187催化制备光学纯(S)-(+)-2-苯基丙酸
CN102250796A (zh) * 2011-06-21 2011-11-23 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种赤红球菌和微生物菌剂及它们的应用
CN105820982A (zh) * 2016-04-29 2016-08-03 河北省科学院生物研究所 一种赤红球菌xs-2、其生物菌剂及制备方法和应用
CN106434466A (zh) * 2016-10-14 2017-02-22 天津科技大学 一种产生天然红色素的赤红球菌及其制备方法与应用

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