CN114250186A - 一株缓解细菌性阴道炎的格氏乳杆菌及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株缓解细菌性阴道炎的格氏乳杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明所提供的格氏乳杆菌在体外能够显著抑制加德纳菌生物膜的形成，并且其能够很好地定植于阴道内，可以显著减轻阴道上皮细胞脱落情况，提升阴道恢复能力，并且降低阴道免疫反应。将所述格氏乳杆菌制成菌剂、药物或是女性卫生产品，将有助于缓解细菌性阴道炎、保持女性阴道的健康，具备广阔的应用前景。

Description

一株缓解细菌性阴道炎的格氏乳杆菌及其应用

技术领域

本发明涉及一株缓解细菌性阴道炎的格氏乳杆菌及其应用，属于微生物技术领域。

背景技术

健康女性下生殖道微生物区系主要由乳杆菌属组成，其中以卷曲乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌和詹氏乳杆菌为最常见菌种。这些存在于阴道中的乳杆菌代谢阴道上皮分泌的糖原，产生有机酸，维持阴道正常的酸性环境(pH<4.5)。健康阴道的酸性环境阻碍许多潜在病原体生长。此外，乳杆菌通过分泌一些抗菌剂或通过竞争排斥来抵御病原体。

细菌性阴道炎(BV)是育龄妇女最常见的下生殖道疾病。其特征是乳杆菌被厌氧菌取代，如阴道加德纳氏菌、普雷沃特氏菌等，导致阴道正常优势菌群明显减少，阴道致病性菌群明显增加。其中，阴道加德纳菌被认为是核心病原体，它存在于98％-100％的病例中。阴道加德纳菌生物膜的建立是细菌性阴道炎启动和发展的必要环节。生物膜的形成代表了一种受保护的生长模式，使阴道加德纳菌能够在阴道环境中存活。同时，以生物膜形式固着的阴道加德纳菌通常比浮游形式对抗生素的耐受性要更强。

此外，侵入阴道环境中的阴道加德纳菌通过黏附于生殖道上皮细胞，激发宿主局部免疫应答。由于阴道上皮细胞最先接触到该病原微生物，除了为病原微生物提供物理屏障外，它们受到病原菌刺激表达Toll样受体(TLR)，通过核因子-κB(NF-kB)信号转导途径响应微生物病原体分子，分泌促炎细胞因子如TNF-α、IL-1β，引起阴道粘膜对阴道加德纳菌免疫反应，并伴有组织炎症发生。

目前，针对细菌性阴道炎主要采用抗生素类药物进行治疗，常用的抗生素主要有甲硝唑、克林霉素、替硝唑。虽然抗生素治疗用时短见效快，但是从长远来看，治愈率并不高。据统计，超过50％的妇女在使用抗生素治疗后的1年内会出现细菌性阴道炎的重复发作。这主要是由于抗生素在杀灭病原菌的同时，也抑制了阴道内益生菌群的生长，使阴道环境仍处于易受致病菌侵染的状态，从根本上未改善阴道微生态环境。其次，虽然抗生素对生物膜有一定损害，但由于作用细菌之前其就与组成生物膜物质结合，失去了一定效用，再加上生物膜的存在使致病菌对抗生素高度耐受，最终使抗生素无法彻底根除细菌。此外，抗生素治疗副反应较大，不适合孕妇和哺乳期妇女使用，种种原因为抗生素疗法带来隐患。

从微生态学角度出发，利用益生菌缓解细菌性阴道炎具有优势。乳杆菌作为健康生殖道优势菌，利用自身代谢产生的抑菌物质自然抵抗致病菌生长，安全可靠，且有助于失衡的阴道菌群的恢复。目前，已在市面上销售用于治疗细菌性阴道炎的本土益生菌产品十分有限。早在20世纪初，国内康白等人筛选出一株阴道来源乳杆菌—德氏乳杆菌DM8909并已研制成一款益生菌产品(定君生)(《对德氏乳杆菌DM8909菌株的微生物学研究》，公开于2001年)。通过体外实验(刘佳明等《乳杆菌DM8909菌株抑制小鼠阴道感染的研究》，公开于2003年；吕虎等《乳杆菌DM8909对阴道上皮细胞粘附现象的初步研究》，公开于1993年)和临床数据(王友芳等《德氏乳杆菌DM8909菌株对细菌性阴道病治疗的Ⅱ期临床试验研究》，公开于2001年)表明德氏乳杆菌DM8909具有良好的益生特性，如产酸高、对阴道上皮细胞具有一定黏附优势等，同时抑制有害致病菌生长繁殖，调节阴道菌群平衡，可以有效治疗细菌性阴道炎。然而，这株乳杆菌针对细菌性阴道炎核心致病菌-阴道加德纳菌的作用却未作具体报道，同时，该菌株对细菌性阴道炎治疗作用的探讨存在局限性(康白等《对DM8909菌株治疗菌群失调性阴道病作用机制的研究》，公开于2001年)，仅仅从竞争排斥及单一的抑菌物质发挥阻碍病原菌是不全面的。此外，德氏乳杆菌并非中国健康女性下生殖道主要优势菌，其缓解效果是否会优于优势菌治疗效果仍未可知。已有部分专利申请涉及到优势菌格氏乳杆菌(CN111088178A)，其所保护的菌株在体内具有抑制阴道加德纳生长与定植的能力，然而是否调节细菌性阴道炎所产生的免疫反应并不明晰，而后者直接关系到格氏乳杆菌能否通过调节宿主免疫，进而持续作用，达到缓解细菌性阴道炎。因此，还未有阐明机制、明确能够用于缓解细菌性阴道炎的格氏乳杆菌。

发明内容

针对目前所存在的问题，本发明提供了一株格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)，已于2021年12月17日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62136。

本发明提供了一种产品，所述产品含有所述格氏乳杆菌或所述乳杆菌的发酵产物。

在一种实施方式中，所述产品为药品或卫生用品。

在一种实施方式中，所述药品的成分包含所述格氏乳杆菌及药学上可接受的载体和/或药用辅料；或者，所述药品的成分包含所述格氏乳杆菌的代谢产物以及药学上可接受的载体和/或药用辅料；或者，所述药品的成分包含所述格氏乳杆菌、所述格氏乳杆菌的代谢产物以及药学上接受的载体。

在一种实施方式中，所述药学上可接受的载体包括微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。

在一种实施方式中，所述药用辅料包含赋形剂和/或附加剂。

在一种实施方式中，所述赋形剂包含粘合剂、填充剂、崩解剂和/或润滑剂。

在一种实施方式中，所述附加剂包含增溶剂、助溶剂、潜溶剂和/或防腐剂。

在一种实施方式中，所述药品的剂型为粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、栓剂、丸剂和/或口服剂。

在一种实施方式中，所述卫生用品包括卫生湿纸巾、卫生巾、卫生护垫、卫生栓、卫生棉、阴道洗液、女士抗菌/抑菌洗剂。

本发明提供了一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中含有所述格氏乳杆菌。

在一种实施方式中，所述微生物菌剂中格氏乳杆菌的含量不低于10⁹CFU/mL或10⁹CFU/g。

本发明提供了所述格氏乳杆菌在制备缓解和/或治疗细菌性阴道炎的产品中的应用。

在一种实施方式中，所述产品为药品或卫生用品，所述药品或卫生用品中含有所述格氏乳杆菌。

在一种实施方式中，所述缓解和/或治疗细菌性阴道炎包括降低阴道炎症因子的水平、减轻阴道上皮细胞的脱落；所述炎症因子包括TNF-α、IL-1β和/或髓过氧化物酶。

在一种实施方式中，所述产品中所述格氏乳杆菌的浓度不低于10⁹CFU/mL或10⁹CFU/g。

在一种实施方式中，所述药品的成分中含有所述的格氏乳杆菌以及药学上可接受的载体和/或药用辅料；或者，所述药品的成分包含所述的格氏乳杆菌的代谢产物以及药学上可接受的载体和/或药用辅料；或者，所述药品中含有所述的格氏乳杆菌、所述的格氏乳杆菌的代谢产物以及药学上可接受的载体和/或药用辅料。

在一种实施方式中，所述药学上可接受的载体包括微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。

在一种实施方式中，所述药用辅料包含赋形剂和/或附加剂。

在一种实施方式中，所述赋形剂包含粘合剂、填充剂、崩解剂和/或润滑剂。

在一种实施方式中，所述附加剂包含增溶剂、助溶剂、潜溶剂和/或防腐剂。

在一种实施方式中，所述药品的剂型为粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂和/或口服剂。

在一种实施方式中，所述卫生用品包括卫生湿纸巾、卫生巾、卫生护垫、卫生栓、卫生棉、阴道洗液、女士抗菌或抑菌洗剂。

本发明的有益效果：

本发明从健康女性的阴道中筛选到一株格氏乳杆菌CCFM1201，本发明所提供的格氏乳杆菌CCFM1201在体外能够抑制加德纳菌生物膜的形成，可从源头上阻断细菌性阴道炎的形成，并且其能够很好地定植于阴道内；与德氏乳杆菌DM8909以及同期筛选到的其他格式乳杆菌相比，格氏乳杆菌CCFM1201可以显著减轻阴道上皮细胞脱落情况，提升阴道恢复能力，并降低阴道免疫反应。将所述格氏乳杆菌CCFM1201制成菌剂、药物或是女性卫生产品，将有助于缓解细菌性阴道炎、保持女性阴道的健康。

生物材料保藏

本发明所提供的格氏乳杆菌CCFM1201，分类学命名为Lactobacillus gasseri，于2021年12月17日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62136，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

附图说明

图1为格氏乳杆菌对阴道加德纳菌生物膜形成的影响图；与阳性对照德氏乳杆菌DM8909相比，*：p<0.05，****：p<0.0001。

图2为乳杆菌黏附能力评价图；与阳性对照德氏乳杆菌DM8909相比，***：p<0.001，****：p<0.0001。

图3为动物实验设计方案流程图。

图4为阴道加德纳菌和格氏乳杆菌在阴道中的定植图；(A)第5天和第17天BV小鼠阴道中阴道加德纳菌载量；(B)第17天BV小鼠阴道中格氏乳杆菌载量；a、b、c代表第17天不同组之间的显著差异(p<0.05)。

图5为格氏乳杆菌对阴道免疫反应的影响图；(A)髓过氧化物酶(MPO)活性水平；(B)促炎因子TNF-α的表达；(C)促炎因子IL-1β的表达；与模型组比较，*：p<0.05，**：p<0.01。

图6为小鼠阴道组织病理学评价图；(a)：空白对照组；(b)：细菌性阴道炎模型组；(c)：德氏乳杆菌DM8909组；(d)：格氏乳杆菌CCFM1201组；(e)：格氏乳杆菌QJSWX195M1组；SEP：复层鳞状上皮。

具体实施方式

MRS培养基：酵母粉5.0g/L、牛肉膏10.0g/L、蛋白胨10.0g/L、葡萄糖20.0g/L、无水乙酸钠2.0g/L、柠檬酸氢二胺2.0g/L、磷酸氢二钾2.6g/L、一水合硫酸锰0.25g/L、七水合硫酸镁0.5g/L、吐温-80 1mL这几种成分，pH6.2～6.4。

BHIs培养基：胰蛋白胨10.0g/L、牛心浸粉17.5g/L、氯化钠5.0g/L、葡萄糖3.0g/L、十二水合磷酸氢二钠2.5g/L、酵母粉10.0g/L、麦芽糖1.0g/L，pH7.2～7.4；待温度凉至55℃左右，添加10％无菌胎牛血清。

格氏乳杆菌CCFM1201菌液：将格氏乳杆菌CCFM1201在MRS液体培养基中以2％(v/v)接种量接种，于37℃培养箱培养24h后调节菌悬液浓度为1×10⁹CFU/mL。

阴道加德纳菌悬液：将阴道加德纳菌株ATCC 14018在BHI培养基中在37℃，培养24h时间，调节菌悬液浓度为1×10⁸CFU/mL。

粘附指数：一个细胞所黏附的细菌数目。

实施例1：格氏乳杆菌体外抑制阴道加德纳菌生物膜形成能力

在4℃下以10000×g离心10min，收集相应培养物浓度为10⁸CFU/mL的格氏乳杆菌上清液(所用的格氏乳杆菌见图1，所用的格氏乳杆菌均为同批次筛选到的，德氏乳杆菌DM8909为商业购买获得)。将BHIs中阴道加德纳菌24h培养物调至10⁸CFU/mL，向96孔板每孔转移100μL阴道加德纳菌悬液，加入100μL乳杆菌上清液。MRS用作空白对照。将板在37℃下孵育24h。24h生物膜形成后，用PBS洗涤3次小心去除浮游细胞，每孔加入100μL甲醇(国药集团化学试剂有限公司)固定30分钟。弃去甲醇后，生物膜用0.1％结晶紫染色5分钟。弃去结晶紫，用PBS洗涤3次，每孔加入200μL 33％冰醋酸(国药集团化学试剂有限公司)。通过酶标仪测量每个孔在570nm处的吸光度。

图1结果表明，八株格氏乳杆菌均表现出不同程度抑制生物膜形成的能力。德氏乳杆菌DM8909作为商品菌株，能有效地抑制阴道加德纳菌生物膜形成，OD_590nm由3.80降至2.34(p<0.05)。格氏乳杆菌CCFM1201对阴道加德纳菌生物膜形成的抑制效果最好，抑制率为78.85％，其余格氏乳杆菌对生物膜抑制率介于19.71％到51.70％之间。在所有菌株中，格氏乳杆菌QJSWX195M1的抑制作用最弱，为19.71％。因此，对格氏乳杆菌CCFM1201在体内的作用进行进一步的研究，同时，以格氏乳杆菌QJSWX195M1为阴性对照，德氏乳杆菌DM8909为阳性对照菌株。

实施例2：格氏乳杆菌黏附能力

将生长融合至80％的HeLa细胞消化，将无菌盖玻片放置在6孔培养板中，加入2mL/孔的细胞完全培养悬液(1×10⁵个/mL)，37℃条件下放入5％CO₂培养箱中培养，待细胞贴壁后，弃去培养基，加入2mL/孔的乳杆菌悬液(1×10⁸CFU/mL)，随后孵育2h。结束后，用磷酸盐缓冲液清洗以除去未黏附的乳杆菌，甲醇固定20min后进行革兰氏染色，显微镜观察。随机选取20个视野进行评价，计录100个细胞所黏附的细菌数目，并以每个Hela细胞黏附细菌数表示，即为黏附指数。

有相关研究表明，乳杆菌的粘附能力有助于在阴道环境中定植，抑制病原菌入侵，调节宿主局部免疫防御反应，因此，粘附能力也是衡量乳杆菌抗菌性能、免疫性能的一个重要指标。这3个菌株对HeLa细胞的粘附能力不同(图2)。格氏乳杆菌CCFM1201的黏附能力较强，为26.2个/细胞，显著高于德氏乳杆菌DM8909，为17.1个/细胞(***：p<0.01)，而QJSWX195M1的粘附能力最低，为3.8个/细胞。由于格氏乳杆菌CCFM1201在体外表现出高黏附能力，推测可能其在体内具有较好的定植能力。

实施例3：格氏乳杆菌CCFM1201在缓解小鼠细菌性阴道炎中的应用

实验动物及菌株：

SPF级BALB/c小鼠，雌性，7周龄、体重18-20g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司(生产许可证号SCXK(京)2012-0001)。

阴道加德纳菌采用阴道加德纳菌ATCC 14018，购买于广东省微生物研究所菌种保藏中心GDMCC。

实验流程图3参考如下

实验方案和分组：

表1小鼠实验分组情况

分组	诱导发情	阴道加德纳菌侵染时间	益生菌益益时间
				空白对照	-	-	-
细菌性阴道炎模型	第-3-0天	第0-4天	第5-17天
				DM8909益益	第-3-0天	第0-4天	第5-17天
格氏乳杆菌CCFM1201益益	第-3-0天	第0-4天	第5-17天
				格氏乳杆菌QJSWX195M1益益	第-3-0天	第0-4天	第5-17天

根据体重随机将小鼠分成5组，参照表1，所有组小鼠整个实验过程中正常饲养。

细菌性阴道炎模型组和益益组都需经历连续5天(0-4天)的阴道加德纳菌的侵染(侵染的具体操作手法为用枪头吸取阴道加德纳菌的菌悬液20μL(数量级为10⁸CFU/mL)，缓缓注入小鼠阴道内，将小鼠倒立，停留1-2分钟，放入笼中)。益生菌益益组分别再用德氏乳杆菌DM8909、格氏乳杆菌CCFM1201、QJSWX195M1连续益益12天(第5-17天)。所有益益的具体操作手法为，用枪头吸收相应乳杆菌菌悬液20μL，浓度为10⁹CFU/mL，缓缓注入小鼠阴道内，将小鼠倒立，停留1-2分钟，放入笼中。实验周期为20天(第-3-17天)。在侵染结束(第5天)和益益结束(第17天)分别用枪头每次吸取50μL磷酸缓冲溶液对小鼠阴道吹吸进行取样，最终采集300μL阴道灌洗液对阴道加德纳菌和乳杆菌载量进行测定。同时，在第17天，对所有实验小鼠进行处死并剥离阴道组织用于后续实验组织病理学分析，测定髓过氧化物酶活性、炎症因子(TNF-α、IL-1β)分泌，此外，吸取10μL阴道灌洗液用于评判阴道上皮细胞脱落情况。

实验结果：

(1)小鼠阴道中阴道加德纳菌和乳杆菌定植载量

采样方式为用枪头吸取一定量磷酸缓冲溶液来回吹吸小鼠阴道获取300μL阴道灌洗液样本，用qPCR方式对阴道加德纳菌与乳杆菌计数。整个实验周期为20天，期间进行两次采样，第一次取样在第5天(侵染结束第一天)作为阴道加德纳菌的定植检验，第二次取样定植检验是在益益结束后(第17天)，对阴道加德纳菌和乳杆菌载量进行定量。首先，根据使用说明，使用土壤快速DNA旋转试剂盒(MP Biomedical，美国)和QIAQuick Gel提取试剂盒(Qiagen，德国)提取阴道灌洗液中的DNA。随后，使用qPCR对阴道加德纳菌和格氏乳杆菌进行了定量检测。根据细菌16S rRNA序列选择引物。反应混合物(10μL)包括5μL的2×iTaq^TMUniversal

GreenSuperMix(Bio-Rad，美国)，1μL的模板DNA(10ng/μL)，0.5μL的正反向引物(各10μM)和3μL的双蒸水。

热循环条件为：初始变性95℃，30s；随后95℃，5s和60℃，30s，此条件循环40次。另一个步骤，95℃，10s，从65℃增加到95℃，每5s增加0.5℃，以建立熔解曲线。确定阈值周期值(CT)，并根据标准曲线(Log copies/μL与CT值)计算拷贝数。每个样本都进行了一式三份的检查。实验所涉及格氏乳杆菌、阴道加德纳菌引物参见如下(表2)。

表2阴道细菌实时定量PCR检测种特异性引物

从图4A结果显示除空白对照组外的所有组在第5天均可在小鼠体内检测到约7lg拷贝数/μL阴道加德纳菌，这表明阴道加德纳菌成功定殖。对于空白对照组，在整个实验期间未检测到阴道加德纳菌。益生菌益益数天后，CCFM1201组阴道加德纳菌定植量显着降低至5.73lg拷贝数/μL。与模型组相比，德氏乳杆菌DM8909没有显著减少阴道加德纳菌定植(p>0.05)。格氏乳杆菌QJSWX195M1抑制阴道加德纳菌的能力比格氏乳杆菌CCFM1201弱，从7.11lg拷贝数/μL降低到6.21lg拷贝数/μL(p<0.05)。

同时，本发明还评估了在益益阶段益生菌定植(图4B)：格氏乳杆菌CCFM1201与格氏乳杆菌QJSWX195M1在第17天的定植量分别为6.38lg拷贝数/μL、5.85lg拷贝数/μL。并且阴道加德纳菌载量与格氏乳杆菌载量之间呈负相关(r＝-0.800；p<0.01)，表明格氏乳杆菌定植可以在一定程度上抑制体内阴道加德纳菌的生长，其中格氏乳杆菌CCFM1201抑制最为显著。

(2)阴道加德纳菌诱导上皮细胞脱落情况

从第17天小鼠阴道灌洗液中取出10μL样品溶液，移至玻片上，用吸管尖端外壁轻轻涂抹。涂片标本用固定剂保存，用Diff-Quik染色法(一种对瑞氏染色法进行改进的快速染色法)染色。在显微镜下，从每个样本(1只小鼠)中捕获5个视野，并从每张图像中计数上皮细胞以确定平均值。在400倍光学显微镜下评价上皮细胞的脱落情况。

如表3，模型组上皮细胞脱落严重(36.9±3.7个/视野)，而空白对照组每个视野下约7.8个细胞。与模型组相比，德氏乳杆菌DM8909可显着缓解上皮脱落情况(p<0.05)。CCFM1201组的上皮脱落情况为14.7个/视野，减少上皮细胞脱落的效果明显优于DM8909组(p<0.05)，而相比于模型组，195M1组的阴道上皮细胞脱落没有显著减少。

表3.阴道加德纳菌诱导上皮细胞脱落

注：a,b,c表示组间差异(p<0.05)

(3)小鼠阴道组织中免疫调节因子TNF-α、IL-1β分泌情况和髓过氧化物酶活性

取部分小鼠阴道组织来测定细胞因子。用益冷的RIPA裂解缓冲液(碧云天生物技术有限公司)和蛋白酶抑制剂混合物(碧云天生物技术有限公司)对阴道组织进行匀浆处理。在4℃下，以11300r/min对样品离心15min，取阴道组织上清液按试剂盒说明书进行TNF-α、IL-1β浓度和髓过氧化物酶活性测定。

结果如图5A所示，与对照组相比，模型组髓过氧化物酶活性水平显著升高，从64.83U/L上升至83.04U/L(p<0.01)，说明阴道加德纳菌导致大量中性粒细胞聚集在阴道组织中。德氏乳杆菌DM8909没有显着降低该酶的活性。格氏乳杆菌CCFM1201阴道给药可显著抑制髓过氧化物酶活性，为66.88U/L(p<0.01)，接近对照组的该酶活性水平。图5B和图5C分别显示了阴道组织中促炎因子TNF-α和IL-1β的浓度。结果表明，与对照组相比，模型组小鼠阴道组织分泌大量TNF-α和IL-1β，浓度分别为131.14pg mg^-1、78.69pg mg^-1。益生菌益益后，德氏乳杆菌DM8909和格氏乳杆菌QJSWX195M1与模型组相比没有显著调节促炎因子。格氏乳杆菌CCFM1201显著降低了阴道组织中促炎细胞因子TNF-α和IL-1β(分别为100.26pgmg^-1和54.33pg mg^-1；p<0.05)的表达，抑制率分别31％和30.4％。

(4)小鼠阴道组织病理学分析

实验结束时，处死小鼠并切除阴道。一部分阴道组织用于组织病理学检查。阴道组织用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片成5mm厚切片，苏木精伊红染色(H&E)。阴道组织样本在病理切片扫描仪(Panoramic MIDI，3DHistech Ltd，Budapest，Hungary)下放大20倍进行观察。

通过对小鼠阴道组织进行HE染色，可以有效评估各组别小鼠阴道织的炎症情况。如图6所示，空白对照组阴道上皮光滑连续，组织结构完整，未见炎性细胞浸润。模型组阴道黏膜上皮连续性差，表层细胞糜烂，形成孔洞，黏膜下间质充血，大量炎性细胞浸润到上皮和间质中。在适当的益生菌阴道给药一段时间后，德氏乳杆菌DM8909组的炎症细胞浸润比模型组少，但上皮层存在轻度表面糜烂。其余两个益生菌益益组中，格氏乳杆菌QJSWX195M1对小鼠阴道组织恢复程度较模型组并无明显改善，与对照组相比，阴道上皮层不同部位仍有浅表糜烂、阴道上皮不连续、炎症细胞浸润等现象。而格氏乳杆菌CCFM1201表现出与格氏乳杆菌QJSWX195M1相反的效果，例如恢复上皮连续性、间质充血明显改善和少量炎症细胞浸润。格氏乳杆菌CCFM1201益益后小鼠阴道组织的恢复优于德氏乳杆菌DM8909组。

虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

SEQUENCE LISTING

<110> 江南大学

<120> 一株缓解细菌性阴道炎的格氏乳杆菌及其应用

<130> BAA211572A

<160> 4

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 1

ttactggtgt atcactgtaa gg 22

<210> 2

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 2

ccgtcacagg ctgaacagt 19

<210> 3

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 3

cgagcttgcc tagatgaatt tg 22

<210> 4

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 4

ctctagacat gcgtctagtg 20

Claims (10)

1.一株格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)，已于2021年12月17日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62136。

2.一种产品，其特征在于，含有权利要求1所述格氏乳杆菌或权利要求1所述乳杆菌的发酵产物。

3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于，所述产品为药品或卫生用品。

4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述药品的成分包含权利要求1所述格氏乳杆菌及药学上可接受的载体和/或药用辅料；或者，所述药品的成分包含权利要求1所述格氏乳杆菌的代谢产物以及药学上可接受的载体和/或药用辅料；或者，所述药品的成分包含权利要求1所述格氏乳杆菌、权利要求1所述格氏乳杆菌的代谢产物以及药学上接受的载体。

5.根据权利要求3或4所述的产品，其特征在于，所述卫生用品包括卫生湿纸巾、卫生巾、卫生护垫、卫生栓、卫生棉、阴道洗液、女士抗菌/抑菌洗剂。

6.一种微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述格氏乳杆菌。

7.根据权利要求6所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中格氏乳杆菌的含量不低于10⁹CFU/mL或10⁹CFU/g。

8.权利要求1所述格氏乳杆菌在制备缓解和/或治疗细菌性阴道炎的产品中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述产品为药品或卫生用品，所述药品或卫生用品中含有权利要求1所述格氏乳杆菌。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述缓解和/或治疗细菌性阴道炎包括减轻阴道免疫反应、减轻阴道上皮细胞的脱落；所述减轻阴道免疫反应包括降低TNF-α、IL-1β和/或髓过氧化物酶的水平。

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