CN113862188A

CN113862188A - 一株格氏乳杆菌ls03及其应用

Info

Publication number: CN113862188A
Application number: CN202111205336.8A
Authority: CN
Inventors: 张召; 郑康帝; 陈涛
Original assignee: Foshan Langxin Biotechnology Co ltd; Guangdong Yiyuan Lanxin Biotechnology Co ltd
Current assignee: Foshan Langxin Biotechnology Co ltd; Guangdong Yiyuan Lanxin Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-10-15
Filing date: 2021-10-15
Publication date: 2021-12-31
Anticipated expiration: 2041-10-15
Also published as: CN113862188B

Abstract

本发明公开了一株格氏乳杆菌LS03及其应用，属于微生物技术领域。本发明公开的一株格氏乳杆菌LS03，保藏编号为CGMCC No.22009；格氏乳杆菌LS03能够产乳酸降低pH；同时在体外能显著抑制病原菌的生长，和显著抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7的粘附，用于制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物。本发明公开的格氏乳杆菌LS03在缓解和/或预防女性生殖道疾病方面有巨大的潜在应用前景。

Description

一株格氏乳杆菌LS03及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，更具体的说是涉及一株格氏乳杆菌LS03及其应用。

背景技术

在世界范围内，女性生殖道疾病是全球性的重大社会及公共卫生问题，女性生殖道疾病也是影响女性生殖健康和妇科常见疾病之一。近年来，女性生殖道疾病在世界范围内的发病率呈逐年上升趋势，严重影响人们的生活质量。女性生殖道是开放性腔道，在女性生殖道，特别是由阴道和子宫颈组成的下生殖道中分布着大量微生物，形成独特的微生态环境。不同于威胁女性生命的生殖道恶性肿瘤，感染性疾病患者就诊时通常主诉为“阴道分泌物增加、异味、瘙痒、腹痛”等，由于临床医生对生殖道感染发病机制的远期危害认知不充分而不诊不治；因临床表现不特异、检测方法不恰当而依据经验导致的乱诊乱治，或者由于诊断不确切，盲目应用抗“炎”治疗，从而导致目前生殖道感染性疾病的正确诊断率低、抗菌药物合理使用率低、治愈率低和复发率高，即"三高一低"的诊疗现状。因此，对于女性生殖道感染性疾病的规范化诊断亟待解决。传统的抗生素治疗虽然对需氧菌性阴道炎(Aerobicvaginitis，AV)、细菌性阴道病(Bacterial vaginosis，BV)、外阴阴道假丝酵母菌病(Vulvovaginal Candidiasis，VVC)等有一定疗效，但容易破坏阴道的菌群平衡，引发二次感染。由于滥用抗生素导致耐药菌的出现也影响感染性阴道病的治疗。因此微生态制剂对于感染性阴道病的辅助治疗越来越得到关注。

益生菌被定义为能改善生殖道菌群平衡的活微生物，可有益于宿主生理反应的多个方面，包括免疫功能。此外，益生菌对女性生殖道疾病如BV、VVC、HPV等的预防和治疗作用也得到了大量的研究。研究表明，维护阴道微生态平衡，可有效降低高危型HPV的感染。有临床研究探索了乳酸菌阴道胶囊辅助人干扰素α-2b用于宫颈高危型HPV感染治疗的作用，结果表明乳酸菌辅助治疗可显著提高重组人干扰素α-2b治疗效果，同时有促进阴道与宫颈的微生态稳定的作用乳酸杆菌作为阴道微生态的优势菌，可通过黏附与竞争排斥，产乳酸，产过氧化氢，产细菌素等机制抑制HPV感染。当前国际益生菌专利申请集中于美、日、俄传统研发强国，而我国缺乏拥有自主知识产权的功能性菌株。国内生产企业所用益生菌菌种长期依赖进口，而且国外菌株未必适合我国女性生殖道生理状况。另外，益生菌的功能缺乏有力的科学研究证据，严重影响了益生菌及其制品的推广。基于此，针对菌种资源的功能深入挖掘，筛选出拥有自主知识产权、具有特定功能性质、适合中国人群生理特性的新型益生菌菌株，对提高我国益生菌生产企业的核心竞争力，促进我国益生菌制品发展尤为重要。

因此，提供一株格氏乳杆菌LS03及其在制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物中的应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一株格氏乳杆菌LS03及其在制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一株格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)LS03，其保藏编号为CGMCC No.22009，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年03月15日，分类命名为格氏乳杆菌Lactobacillus gasseri。

进一步，所述的格氏乳杆菌LS03在制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物中的应用。

进一步，所述的格氏乳杆菌LS03在产乳酸降低pH值中的应用。

进一步，所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制女性生殖道病原微生物药物中的应用。

进一步，所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母药物中的应用。

进一步，所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7粘附药物中的应用。

进一步，所述格氏乳杆菌LS03为菌悬液或发酵上清液。

本发明所述格氏乳杆菌LS03，在体外具有抑制致病菌，和抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7粘附的作用，表现出良好的预防或缓解生殖道感染的益生功效。本发明所述在体外具有抑制致病菌的作用的菌株，为菌悬液或发酵上清液。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一株格氏乳杆菌LS03及其在制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物中的应用，格氏乳杆菌LS03是从健康育龄女性的生殖道分泌物中分离筛选得到的，在体外能够显著抑制致病菌，和显著抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7粘附的作用，具备应用于体内缓解或预防女性生殖道感染的潜能，此为利用格氏乳杆菌LS03开发预防和/或缓解女性生殖道感染的益生菌制剂提供理论参考和指导依据。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1附图为本发明格氏乳杆菌LS03形成的菌落形态图；

图2附图为本发明格氏乳杆菌LS03革兰氏染色后的显微形态观察；

图3附图为本发明格氏乳杆菌LS03产乳酸能力；

图4附图为本发明格氏乳杆菌LS03降低pH能力；

图5附图为本发明格氏乳杆菌LS03的发酵上清液、菌悬液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母粘附人阴道上皮细胞VK2/E6E7的影响。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1格氏乳杆菌LS03分离、鉴定及保藏

(1)分离：将健康育龄女性的生殖道分泌物经梯度稀释后，分别接种于厌氧血琼脂培养基、MRS固体培养基中，37℃厌氧培养48h，挑取平板上的单菌落划线分离得到纯菌落。将平板上的纯菌落接种于MRS液体培养基中，37℃厌氧培养12～16h，加入20％甘油，置于-80℃冰箱中保存。

(2)菌株形态学鉴定：对筛选出的菌株革兰氏染色后于显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

(3)菌株的分子生物学鉴定：对所获得的菌株提取基因组DNA，通过PCR技术利用16S rDNA通用引物27F和1492R扩增16S rDNA全长片段，之后进行测序，鉴定菌株的种属。

其中，通用引物27F和1492R的引物序列如下：

27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’；SEQ ID NO.1；

1492R：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’；SEQ ID NO.2。

实验结果：从广东省广州市健康育龄女性的生殖道分泌物中筛选出的菌株，经形态观察、16S rDNA鉴定，其中菌株LS03被鉴定为格氏乳杆菌，其16S rDNA序列如SEQ IDNO.3所示。

GACGGCTGACTCCTATAAAGGTTATCCCACCGGCTTTGGGTGTTACAGACTCTCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCGTGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAGTCCGAACTGAGAACGGCTTTCAGAGATCCGCTTGCCTTCGCAGGTTCGCTTCTCGTTGTACCGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCATTAGAGTGCCCAACTTAATGATGGCAACTAATGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCACCACCTGTCTCAGCGTCCCCGAAGGGAACACCTAATCTCTTAGGTTTGCACTGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTGAGAGGCGGAAACCTCCCAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTACCCATGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTGCAGACCAGAGAGCCGCCTTCGCCACTGGTGTTCTTCCATATATGTACGCATTCCACCGCTACACATGGAGTTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCAACAGTTTCTGATGCAATTCTCCGGTTGAGCCGAAGGCTTTCACATCAGACTTATTGAACCGCCTGCACTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGACTTTCTAAGTAATTACCGTCAAATAAAGGCCAGTTACTACCTCTATCTTTCTTCACTACCAACAGAGCTTTACGAGCCGAAACCCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCCATCAGACTTGCGTCCATTGTGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTTTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAATGTGGCCGATCAGTCTCTCAACTCGGCTATGCATCATTGCCTTGGTAAGCCGTTACCTTACCAACTAGCTAATGCACCGCAGGTCCATCCAAGAGTGATAGCAGAACCATCTTTTAAACTCTAGACATGCGTCTAGTGTTGTTATCCGGTATTAGCATCTGTTTCCAGGTGTTATCCCAGTCTCTTGGGCAGGTTACCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTCGCTTGTATCTAGTTTCATCTGGTGCAAGCACCAAATTCATCTAGGCAAGCTCGCTCGACTTGCATGTATTAG；SEQ ID NO.3。

菌株LS03单菌落接种到MRS固体培养基上，37℃厌氧生长良好、呈圆形、凸起、边缘整齐的微白色菌落(图1)，革兰氏染色呈阳性(图2)。菌株LS03已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年03月15日，分类命名为格氏乳杆菌Lactobacillusgasseri，保藏编号为CGMCC No.22009。

实施例2格氏乳杆菌LS03产酸能力测定

将格氏乳杆菌LS03接种于MRS液体培养基，置于厌氧工作站内37℃培养14h，调整菌株浓度为1×10⁶CFU/mL，按体积分数5％接种于新鲜MRS液体培养基中，置于37℃、150r/min的全温振荡器内培养0、5、10、15、20、24、28、32、36、48h后，运用日立全自动生化分析仪检测菌株发酵上清液中的乳酸浓度。同时运用pH计(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)测定发酵液的pH值。

结果见图3和图4。由图3可知，格氏乳杆菌LS03接种于培养基后即开始发酵产生乳酸，24h后几乎达到饱和浓度，最终乳酸产量达到1.97mg/mL。另外，由图4可知，格氏乳杆菌LS03发酵液的pH值于5h后明显下降，32h后pH值变化不明显，最终pH值为3.86。上述结果表明，格氏乳杆菌LS03能够产乳酸降低pH，具有预防和/或缓解女性生殖道疾病的潜能。

实施例3格氏乳杆菌LS03发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)的制备

将格氏乳杆菌LS03活化培养后接种于MRS液体培养基中，37℃培养15h后，调整发酵菌浓度为1×10⁷CFU/mL，4℃，6000r/min离心10min，得到培养上清液和菌体沉淀，上清液经0.22μm滤膜过滤后得发酵上清液(胞外分泌物)；菌体沉淀经PBS两次洗涤后，将菌体用PBS重新悬浮，调整细胞浓度为1×10⁷CFU/mL得到菌悬液(菌体)。

实施例4格氏乳杆菌LS03抑菌能力测定

将100μL浓度均为1×10⁸CFU/mL的大肠埃希菌(ATCC 35132)、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、白假丝酵母(ATCC 10231)分别均匀涂于脑心浸液(BHI)琼脂平板上(平板直径90mm)，不含抗生素。然后放入3个牛津杯，并向牛津杯中加入100μL格氏乳杆菌LS03菌悬液或发酵上清液，将平板在厌氧条件下于37℃孵育72h，然后测量抑菌圈的直径。PBS作为菌悬液空白对照组，MRS作为发酵上清液空白对照组。实验重复3次。

采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用

数据表示，采用T检验进行分析，与空白对照组(PBS)相比：***P<0.005，与空白对照组(MRS)相比：***P<0.005。

格氏乳杆菌LS03对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母的抑制作用，结果见表1。

表1格氏乳杆菌LS03对致病菌的抑制作用

由表1可知，与空白对照组(PBS)相比，格氏乳杆菌LS03的菌悬液均显著抑大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母的生长(P<0.005)，抑菌圈直经分别为10.85±0.44mm、9.22±0.17mm和11.97±0.47mm。另外，格氏乳杆菌LS03的发酵上清液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母的生长均具有抑制作用，抑菌圈直经分别为15.67±0.35mm、14.14±0.27mm和16.84±0.50mm，与空白对照组(MRS)相比较均差异性显著(P<0.005)。上述结果表明，格氏乳杆菌LS03的菌悬液和发酵上清液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母均有良好的抑制作用。

实施例5格氏乳杆菌LS03对人阴道上皮细胞VK2/E6E7粘附的影响

将对数生长期的人阴道上皮细胞VK2/E6E7，经胰酶消化、吹打制备成细胞数为5×10⁵个/mL的细胞悬液，接种于24孔细胞培养板中，每孔0.5mL，置37℃、5％CO₂培养箱中孵育24h，吸弃上清液，然后每孔加入0.5mL DMEM培养液，进行分组试验。菌悬液空白对照组(PBS)和菌悬液模型组均加入50μL无菌PBS，菌悬液组加入50μL格氏乳杆菌LS03的菌悬液；发酵上清液空白对照组(MRS)和发酵上清液模型组均加入50μL无菌MRS，发酵上清液组加入50μL格氏乳杆菌LS03的发酵上清液，孵育2h后，菌悬液空白对照组(PBS)加入50μL无菌PBS，发酵上清液组空白对照组(MRS)加入50μL无菌MRS，菌悬液模型组和发酵上清液模型组以及菌悬液组和发酵上清液组均加入50μL 1.5×10⁷CFU/mL大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌或白假丝酵母，再孵育2h后，用无菌PBS将每孔洗涤3次以去除未粘附的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌或白假丝酵母，每孔加入500μL无菌蒸馏水，裂解细胞10min。最后，每孔取100μL裂解物涂布于脑心浸液(BHI)琼脂平板上，将平板在厌氧条件下于37℃孵育72h，然后统计菌落数CFU。实验重复3次。大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌或白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7的粘附率计算如下：

采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用

数据表示，采用T检验进行分析，与菌悬液模型组相比：^##P<0.01，^###P<0.005，与发酵上清液模型组相比：***P<0.005。

结果见图5；由图5可知，与菌悬液模型组(大肠埃希菌：100.00±3.78％、金黄色葡萄球菌：100.00±5.86％、白假丝酵母：100.00±6.25％)相比，格氏乳杆菌LS03的菌悬液均显著抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7的粘附(P<0.01)，粘附率分别为52.87±10.49％、66.03±8.62％、43.89±6.09％。另外，格氏乳杆菌LS03的发酵上清液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母粘附人阴道上皮细胞VK2/E6E7均具有抑制作用，粘附率分别为48.89±7.39％、59.38±7.78％、38.69±10.95％，与发酵上清液模型组(大肠埃希菌：100.00±2.65％、金黄色葡萄球菌：100.00±4.46％、白假丝酵母：100.00±6.94％)相比较均差异性显著(P<0.005)。上述结果表明，格氏乳杆菌LS03的菌悬液和发酵上清液均显著抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母对人阴道上皮细胞VK2/E6E7的粘附，表现出良好的预防和/或缓解女性生殖道疾病的功效。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

序列表

<110> 广东一元兰欣生物科技有限公司佛山市朗芯生物科技有限公司

<120> 一株格氏乳杆菌LS03及其应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 20

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 1

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 2

<211> 19

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 2

ggttaccttg ttacgactt 19

<210> 3

<211> 1450

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 3

gacggctgac tcctataaag gttatcccac cggctttggg tgttacagac tctcatggtg 60

tgacgggcgg tgtgtacaag gcccgggaac gtattcaccg cggcgtgctg atccgcgatt 120

actagcgatt ccagcttcgt gtaggcgagt tgcagcctac agtccgaact gagaacggct 180

ttcagagatc cgcttgcctt cgcaggttcg cttctcgttg taccgtccat tgtagcacgt 240

gtgtagccca ggtcataagg ggcatgatga cttgacgtca tccccacctt cctccggttt 300

gtcaccggca gtctcattag agtgcccaac ttaatgatgg caactaatga caagggttgc 360

gctcgttgcg ggacttaacc caacatctca cgacacgagc tgacgacagc catgcaccac 420

ctgtctcagc gtccccgaag ggaacaccta atctcttagg tttgcactgg atgtcaagac 480

ctggtaaggt tcttcgcgtt gcttcgaatt aaaccacatg ctccaccgct tgtgcgggcc 540

cccgtcaatt cctttgagtt tcaaccttgc ggtcgtactc cccaggcgga gtgcttaatg 600

cgttagctgc agcactgaga ggcggaaacc tcccaacact tagcactcat cgtttacggc 660

atggactacc agggtatcta atcctgttcg ctacccatgc tttcgagcct cagcgtcagt 720

tgcagaccag agagccgcct tcgccactgg tgttcttcca tatatgtacg cattccaccg 780

ctacacatgg agttccactc tcctcttctg cactcaagtt caacagtttc tgatgcaatt 840

ctccggttga gccgaaggct ttcacatcag acttattgaa ccgcctgcac tcgctttacg 900

cccaataaat ccggacaacg cttgccacct acgtattacc gcggctgctg gcacgtagtt 960

agccgtgact ttctaagtaa ttaccgtcaa ataaaggcca gttactacct ctatctttct 1020

tcactaccaa cagagcttta cgagccgaaa cccttcttca ctcacgcggc gttgctccat 1080

cagacttgcg tccattgtgg aagattccct actgctgcct cccgtaggag tttgggccgt 1140

gtctcagtcc caatgtggcc gatcagtctc tcaactcggc tatgcatcat tgccttggta 1200

agccgttacc ttaccaacta gctaatgcac cgcaggtcca tccaagagtg atagcagaac 1260

catcttttaa actctagaca tgcgtctagt gttgttatcc ggtattagca tctgtttcca 1320

ggtgttatcc cagtctcttg ggcaggttac ccacgtgtta ctcacccgtc cgccgctcgc 1380

ttgtatctag tttcatctgg tgcaagcacc aaattcatct aggcaagctc gctcgacttg 1440

catgtattag 1450

Claims

1.一株格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)LS03，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNo.22009。

2.权利要求1所述的格氏乳杆菌LS03在制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的格氏乳杆菌LS03在制备治疗和/或预防女性生殖道疾病药物中的应用，其特征在于，所述格氏乳杆菌LS03为菌悬液或发酵上清液。

4.权利要求1所述的格氏乳杆菌LS03在产乳酸降低pH值中的应用。

5.权利要求1所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制女性生殖道病原微生物药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制女性生殖道病原微生物药物中的应用，其特征在于，所述格氏乳杆菌LS03为菌悬液或发酵上清液。

7.权利要求1所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母药物中的应用，其特征在于，所述格氏乳杆菌LS03为菌悬液或发酵上清液。

9.权利要求1所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母粘附人阴道上皮细胞VK2/E6E7药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的格氏乳杆菌LS03在制备抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母粘附人阴道上皮细胞VK2/E6E7药物中的应用，其特征在于，所述格氏乳杆菌LS03为菌悬液或发酵上清液。