UA121376C2 - Інгібітори реплікації вірусів грипу - Google Patents

Інгібітори реплікації вірусів грипу Download PDF

Info

Publication number
UA121376C2
UA121376C2 UAA201606307A UAA201606307A UA121376C2 UA 121376 C2 UA121376 C2 UA 121376C2 UA A201606307 A UAA201606307 A UA A201606307A UA A201606307 A UAA201606307 A UA A201606307A UA 121376 C2 UA121376 C2 UA 121376C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
compound
dose
nsi
influenza
day
Prior art date
Application number
UAA201606307A
Other languages
English (en)
Inventor
Кваме В. Нті-Аддае
Квамэ В. Нти-Аддаэ
Майкл Волдо
Саймон Адам О'Ніл
Саймон Адам О'НИЛ
Альстен Джон Ґреґ ван
Альстен Джон Грег ван
Дайніус Масикенас
Дайниус Масикенас
Правін Мудунурі
Правин МУДУНУРИ
Ї Ши
Йи Ши
Марк Вілем Ледебур
Марк Вилем Ледебур
Валдас Юркаускас
Алес МЕДЕК
Стивен ДЖОУНЗ
Рендал Берн
Рэндал Берн
Могамед Асмал
Сара Марі Робертсон
Сара Мари РОБЕРТСОН
Ваньцзун Цаі
Ваньцзун ЦАИ
Original Assignee
Вертекс Фармасьютикалз Інкорпорейтед
Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорэйтед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Вертекс Фармасьютикалз Інкорпорейтед, Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорэйтед filed Critical Вертекс Фармасьютикалз Інкорпорейтед
Publication of UA121376C2 publication Critical patent/UA121376C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/29—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C07C309/30—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings of six-membered aromatic rings substituted by alkyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Abstract

Поліморфна форма Сполуки (1) або її фармацевтично прийнятна сіль, де Сполука (1) представлена наступною структурною формулою: , (1) Форми А солі НСl Сполуки (1) 1/2Н2О, Форми F солі НСl Сполуки (1) 3Н2О і Форми D солі НС1 Сполуки (1), Форми А Сполуки (1) і Форми А тозилату Сполуки (1). Такі поліморфні форми використовуються для лікування грипу, інгібування реплікації вірусів грипу або зменшення кількості вірусів грипу в біологічному зразку або у індивіда.

Description

Е
Е по ї В:
М -
М й | М МН о
НМ пу 0)
Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форми Е солі НСІ Сполуки (1)хЗНгО і Форми О солі НС1
Сполуки (1), Форми А Сполуки (1) і Форми А тозилату Сполуки (1). Такі поліморфні форми використовуються для лікування грипу, інгібування реплікації вірусів грипу або зменшення кількості вірусів грипу в біологічному зразку або у індивіда.
ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНУ ЗАЯВКУ
ІЇО001| За даною заявкою РСТ вимагається пріоритет попередньої заявки США номер 61/903572, поданої 13 листопада 2013 року. Цей документ включений у даний опис за допомогою посилання в повному обсязі.
ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ, ДО ЯКОЇ НАЛЕЖИТЬ ВИНАХІД
Ї0002| Даний винахід стосується сполук і твердих форм сполук, які можуть використовуватися для інгібування реплікації вірусу грипу, лікування або зниження тяжкості інфекції, викликаної грипом, у пацієнтів і профілактичного запобігання або скорочення випадків інфекції, викликаної грипом, у пацієнтів.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
0003) Грип поширюється по усьому світу як сезонні епідемії, що приводить до загибелі сотень тисяч щорічно і мільйонів у роки пандемії. Наприклад, у ХХ сторіччі було три пандемії грипу і загинули десятки мільйонів людей, кожна з цих пандемій була викликана виникненням нового штаму вірусу у людини. Часто ці нові штами виникають у результаті поширення існуючого вірусу грипу від видів тварин до людини.
І0004| Грип в основному передається від людини до людини за допомогою великих крапель, що містять вірус, які утворюються при кашлі або чиханні інфікованої людини; ці великі краплі можуть потім осідати на поверхню слизової оболонки верхніх дихальних шляхів чутливих індивідуумів, які знаходяться поблизу (наприклад, у межах приблизно 6 футів) від інфікованих людей. Передача також може відбутися в результаті прямого або непрямого контакту з виділеннями з дихальних шляхів, наприклад, доторкаючись до поверхонь, заражених вірусом грипу, а потім торкаючись очей, носа або рота. Дорослі індивідууми можуть передавати грип іншим за 1 день до прояву симптомів і приблизно протягом 5 днів після початку симптомів.
Маленькі діти й індивіди з ослабленою імунною системою можуть бути заразними протягом 10 або більше днів після появи симптомів. 00051 Віруси грипу являють собою РНК-віруси сімейства Оппотухомігідає, який складається з п'яти родів: вірус грипу А, вірус грипу В, вірус грипу С, вірус ІЗА і вірус Тогото.
ІО00О6) Рід вірусу грипу А має один вид, вірус грипу А. Дикі водоплавні птахи є природними хазяїнами великої різноманітності грипу А. Іноді віруси передаються іншим видам, що потім
Зо може викликати катастрофічні спалахи серед домашньої птиці або приводити до пандемії грипу у людини. Віруси типу А є найбільш вірулентними патогенами для людини серед трьох типів грипу і викликають найбільш важке захворювання. Вірус грипу А можна підрозділити на різні серотипи на основі гуморальної (антитільної) відповіді на ці віруси. Серотипами, що були підтверджені у людини, які розташовані по кількості відомих смертей людини при пандемії, є:
НІМ! (який викликав Іспанський грип у 1918 році), Н2Ма2 (який викликав Азіатський грип у 1957 році), НЗ3М2 (який викликав Гонконгський грип у 1968 році), вірус НЬМ!І (загроза пандемії в сезон грипу 2007-08 рр.), Н7М?7 (який має надзвичайну зоонозну силу), НІМ2 (ендемічний грип у людей і свиней), НОМ2, Н7М2, Н7МЗ і НТОМ7.
І0007| Рід вірусу грипу В має один вид, вірус грипу В. Грип В інфікує практично тільки людей і менш поширений, ніж грип А. Як відомо, єдиною твариною, сприйнятливою до інфекції грипом типу В, є тюлень. Швидкість мутування цього грипу в 2-3 рази повільніше, ніж типу А, і, отже, він менш генетично різноманітний і має тільки один серотип грипу В. У результаті такої недостатньої антигенної різноманітності деякий рівень імунітету до грипу В звичайно набувається в ранньому віці. Проте, грип В мутує у достатньому ступені і стійкий імунітет до нього неможливий. Такий знижений рівень антигенної зміни, у сполученні з обмеженим діапазоном хазяїнів (інгібуючий міжвидовий антигенний зсув), гарантує відсутність пандемії грипу В. 0008) Вірус грипу роду С має один вид, вірус грипу С, що інфікує людей і свиней і може привести до важкого захворювання і локальних епідемій. При цьому, грип С зустрічається рідше, ніж інші типи, і, як правило, очевидно викликає легке захворювання у дітей. 0009) Віруси грипу А, В ії С дуже схожі за своєю структурою. Діаметр частинки вірусу складає 80-120 нм і, як правило, він має майже сферичну форму, хоча можуть виникати нитчасті форми. Геном являє собою не один фрагмент нуклеїнової кислоти, що незвичайно для вірусу; замість цього, він містить сім або вісім частин сегментованої негативної смислової РНК.
Геном грипу А кодує 11 білків: гемаглютинін (НА), нейрамінідазу (МА), нуклеопротеїни (МР), М1,
М2, М5О1, М52 (МЕР), РА, РВІ, РВ1-Р2 і РВ2. 0010) НА ї МА є великими глікопротеїнами зовні вірусних частинок. НА являє собою лектин, що опосередковує зв'язування вірусу з клітинами-мішенями і проникнення вірусного геному в клітину-мішень, а МА бере участь у вивільненні потомства вірусу з інфікованих клітин шляхом бо розщеплення цукрів, що зв'язують зрілі вірусні частинки. Таким чином ці білки були мішенями антивірусних препаратів. Крім того, вони є антигенами, відносно яких продукуються антитіла.
Віруси грипу А класифікують на підтипи, на основі гуморальних (антитільних) відповідей на НА і
МА, на цьому основана відмінність Н і М (дивіться вище), наприклад Н5МІ1.
ІЇО011| Грип приводить до безпосередніх витрат у результаті втрати працездатності і пов'язаного з ним медичного лікування, а також до непрямих витрат на профілактичні заходи. У
Сполучених Штатах на боротьбу з грипом витрачається загалом понад 910 мільярдів на рік, але по проведених розрахунках пандемія в майбутньому може привести до сотень мільярдів доларів на прямі і непрямі витрати. Профілактичні витрати також великі. Урядами по усьому світу були витрачені мільярди доларів США на підготовку і планування боротьби з можливою пандемією пташиного грипу НЬМІ, беручи до уваги витрати, пов'язані з придбанням ліків і вакцин, а також на розробку навчань по боротьбі з нещастям і стратегій для поліпшення прикордонного контролю.
І0012| Сучасні варіанти лікування грипу включають вакцинацію і хіміотерапію або хіміопрофілактику противірусними препаратами. Вакцинація проти грипу вакциною проти грипу часто рекомендується для груп з високим ризиком, таких як діти і люди похилого віку або люди, що страждають на астму, діабет або серцеві захворювання. Проте, можна зробити щеплення і при цьому занедужати грипом. Склад вакцини змінюється кожен сезон для декількох конкретних штамів вірусу грипу, але не може містити всі штами, що активно інфікують людей у світі протягом цього сезону. Для одержання складу і виробництва мільйонів доз, необхідних для боротьби з сезонними епідеміями, виробникам потрібно шість місяців; іноді протягом цього часу з'являється новий штам або активізується штам, випущений з уваги, і інфікує людей, хоча вони були вакциновані (як при грипі Фуцзяні НЗМ2 у сезоні 2003-2004 рр.). Крім того, можна заразитися безпосередньо перед вакцинацією і занедужати тим самим штамом, для захисту від якого передбачалася вакцина, оскільки до того, як вакцина стає ефективною, може знадобитися декілька тижнів. 0013) Крім того, ефективність вакцин проти грипу є змінною величиною. Через високу швидкість мутації вірусу конкретна вакцина проти грипу, як правило, забезпечує захист не більше ніж на декілька років. Склад вакцини на один рік може виявитися неефективним у наступному році, оскільки вірус грипу швидко змінюється з часом і інші штами стають домінуючими.
І0014) Крім того, через відсутність ферментів, що виправляють РНК, РНК-залежна РНК- полімераза вРНК грипу робить помилку, вставку одного нуклеотиду, приблизно кожні 10 тисяч нуклеотидів, що відповідає зразковій довжині вРНК грипу. Таким чином, майже кожен знову одержаний вірус грипу має мутант-антигенний дрейф. Розділення геному на вісім окремих сегментів ВРНК дозволяє змішувати або пересортовувати вРНК, якщо клітина інфікована більше ніж однією вірусною лінією. Швидка зміна у генетиці вірусів, що відбувається в результаті, забезпечує антигенні зсуви і дозволяє вірусу інфікувати нові види хазяїнів і швидко долати захисний імунітет. 0015) Противірусні препарати також можуть бути використані для лікування грипу, особливо ефективні інгібітори нейрамінідази, але віруси можуть виробляти стійкість до стандартних противірусних препаратів. Такі агенти можуть бути одержані таким чином, щоб мати різні хімічні форми, включаючи хімічні похідні або солі, або мати різні фізичні форми. Наприклад, вони можуть бути аморфними, можуть мати різні кристалічні поліморфи або можуть існувати в різних станах сольватації або гідратації. Змінюючи форми, можна змінювати їх фізичні властивості.
Такі різні форми можуть мати різні властивості, зокрема пероральні склади. Зокрема, може бути бажаним визначити поліпшені форми, що мають поліпшені властивості, наприклад підвищену розчинність у воді і стабільність, кращу технологічність або одержання фармацевтичних складів і збільшену пероральну біодоступність композицій. Такі поліпшені властивості, зазначені вище, можуть бути змінені таким чином, який буде мати перевагу для специфічного терапевтичного ефекту.
І0016| Зміна форми противірусного засобу може бути одним з багатьох способів зміни фізичних властивостей такого противірусного засобу, щоб зробити його більш ефективним для лікування грипу.
КОРОТКИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
ЇО017| Даний винахід загалом стосується поліморфних форм Сполуки (1) або фармацевтично прийнятної солі, фармацевтично прийнятних складів, способів одержання таких поліморфних форм Сполуки (1) і застосування таких поліморфних форм для інгібування реплікації вірусів грипу, для зменшення кількості вірусів грипу і для лікування грипу.
І0018| В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується поліморфної форми
Сполуки (1) або фармацевтично прийнятної солі, де Сполука (1) представлена наступною структурною формулою:
А Е
3-х - й і Мм'сМно нм а Т он 0) і де поліморфна форма вибрана з групи, що складається з: Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО і Форми О солі НСІ Сполуки (1), Форми А
Сполуки (1) і Форми А тозилату Сполуки (1).
Ї0019| У ще одному з варіантів здійснення даний винахід стосується фармацевтично прийнятного складу, який містить поліморфну форму Сполуки (1) або фармацевтично прийнятну сіль, як описано в даному документі, ї щонайменше один фармацевтично прийнятний носій або ексципієнт.
І0020| У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу інгібування реплікації вірусу грипу в біологічному зразку іп міго або у пацієнта. Спосіб включає введення в зразок ефективної кількості поліморфної форми Сполуки (1) або фармацевтично прийнятної солі, як розкрито в даному документі.
ІЇ0021| У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу зменшення кількості вірусу грипу в біологічному зразку іп міго або у пацієнта. Спосіб включає введення в зразок ефективної кількості поліморфної форми Сполуки (1) або фармацевтично прийнятної солі, як розкрито в даному документі. 00221) У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу лікування вірусу грипу у пацієнта. Спосіб включає введення в зразок ефективної кількості поліморфної форми
Сполуки (1) або фармацевтично прийнятної солі, як розкрито в даному документі. 0023) У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу одержання Форми
А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20О0. Спосіб включає змішування НСІ зі Сполукою (1) у системі розчинників, яка включає воду й один або декілька органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює 0,05-0,85. Сполука (1) може бути сольватованою або несольватованою і/або аморфною або кристалічною. (0024) У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу одержання Форми
Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О. Спосіб включає змішування НСІ і Сполуки (1) у системі розчинників, яка включає воду або яка включає воду й один або декілька органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює або більше 0,9, наприклад 0,9-1,0; або перемішування Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20О в системі розчинників, яка включає воду або яка включає воду й один або декілька органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює або більше 0,9, наприклад 0,9-1,0. Сполука (1) може бути сольватованою або несольватованою і/або аморфною або кристалічною. 0025) У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу одержання Форми р солі НСІ Сполуки (1). Спосіб включає дегідрування Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20. 0026) У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу одержання Форми
А Сполуки (1). Метод включає перемішуванні аморфної Сполуки (1) або сольвату Сполуки (1) у системі розчинників, яка включає воду і етанол.
І0027| У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу одержання Форми
А тозилату Сполуки (1). Метод включає перемішуванні суміші аморфної Сполуки (1) або сольвату Сполуки (1), п-толуолсульфонової кислоти і системи розчинників, яка включає ацетонітрил. (0028) 2-Метил-ТНЕ сольват Сполуки (1) також входить до складу винаходу.
І0029| У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу зниження кількості вірусу грипу в біологічному зразку іп міго або у індивідуума, який включає введення в зразок ефективної кількості поліморфної форми Сполуки (1), як описано в даному документі.
ІЇОО30| Ще один варіант здійснення даного винаходу стосується способу інгібування реплікації вірусів грипу в біологічному зразку іп міго або у індивідуума, який включає введення в зразок ефективної кількості поліморфної форми Сполуки (1), як описано в даному документі.
0031) У ще одному варіанті здійснення винахід стосується способу лікування вірусу грипу у індивідуума, який включає введення індивіду ефективної кількості поліморфної форми Сполуки (1), як описано в даному документі.
І0032| Винахід також стосується застосування поліморфних форм Сполуки (1), як описано тут, для інгібування реплікації вірусу грипу, для зменшення кількості вірусу грипу або для лікування грипу, у індивіда. Винахід також стосується застосування поліморфної форми
Сполуки (1), як описано в даному документі, для одержання лікарського засобу для інгібування реплікації вірусу грипу, для зменшення кількості вірусу грипу або для лікування грипу, у індивіда.
Ї0033| У ще одному аспекті, даний винахід стосується режиму доз Сполуки (1) або її фармацевтично прийнятної солі (наприклад, Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма О солі НСІ Сполуки (1), Форма А Сполуки (1) і Форма А тозилату Сполуки (1)) у діапазоні від 100 мг до 1600 мг.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
00341 Фіг. 1 ії 2 являють собою зображення порошкової рентгенівської дифракції (ХКРО) і спектр твердотільної спектроскопії ядерно-магнітного резонансу на С"З (213 55ММЕ) Форми А солі НСІ Сполуки (1)х 1/2Н2О, відповідно. 0035) Фіг. З і 4 являють собою зображення ХКЕРО і спектр С" 55ММЕ. Форми Е солі НС
Сполуки (1)хЗ3Н2О, відповідно.
І0ОЗ61| Фіг. 5 і 6 являють собою зображення ХКРО і спектр С"З 55ММЕ Форми О солі НСІ
Сполуки (1), відповідно. 00371 Фіг. 7 і 8 являють собою зображення ХРРО і спектр С"? 55ММЕ Форми А Сполуки (1), відповідно. 0038) Фіг. 9 являє собою зображення ХЕРО Форми А тозилату Сполуки (1). 00391 Фіг. 10 являє собою зображення ХЕРО 2-метилтетрагідрофурану (2-МеТНЕ) сольвату
Сполуки (1). 0040) Фіг. 11 являє собою зображення ХАРО аморфної форми Сполуки (1).
І0041| Фіг. 12 являє собою фазову діаграму температури проти активності води для переходу між різними поліморфами солі НСІ Сполуки (1).
Зо І0042| Фіг. 13 являє собою графік, що показує АОС виділення вірусу для групи, яка одержувала дозу 1200/600 мг Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, на моделі з зараженням людини живим атенуйованим вірусом.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
І0043| І. ТВЕРДІ ФОРМИ (0044) Сполука (1), представлена наступною структурною формулою:
Е уча ме Е ові
МАЙ дм отно (1) і її фармацевтично прийнятні солі можуть інгібувати реплікацію вірусу грипу і також описані в публікації ЛО 2010/148197. 0045) Сполука (1) може існувати або утворювати різні поліморфні форми. Як відомо в даній галузі, поліморфізм являє собою здатність сполуки кристалізуватися у вигляді більше одного окремого кристалічного або "поліморфного" виду. Поліморф являє собою тверду кристалічну фазу сполуки щонайменше з двома різними відносними розташуваннями або поліморфними формами молекули цієї сполуки у твердому стані. Поліморфні форми будь-якої конкретної сполуки визначаються тією ж хімічною формулою або композицією і відрізняються за хімічною структурою як кристалічні структури двох різних хімічних сполук. Як правило, різні поліморфні форми можуть бути охарактеризовані за допомогою аналітичних методів, таких як порошкова рентгенівська дифракція (ХКРО)) з одержанням профілю, термогравіметричний аналіз (ТА) і диференціальна скануюча калориметрія (0550), або по точці плавлення або іншими способами, відомими в даній галузі. Використовуваний у даному описі термін "поліморфна форма" включає в себе сольвати і чисту поліморфну форму, яка не має ніяких сольватів. (0046) Використовуваний у даному описі термін "Сполука (1)" означає форму вільної основи
Сполуки (1). Відповідно, "сіль НСІ Сполуки (1)" означає сіль НСІ вільної основи сполуки, і
"гозилат Сполуки (1)" означає тозилат вільної основи сполуки. Слід зазначити, що Сполука (1) і солі Сполуки (1) можуть бути сольватованими або несольватованими, якщо не зазначено іншого. Слід також зазначити, що Сполука (1) і солі Сполуки (1) можуть бути кристалічними або аморфними, якщо не зазначено іншого.
І0047| В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується поліморфної Форми А солі
НОСІ Сполуки (1)х1/2Н20. Ця форма є поліморфною формою солі НСІ Сполуки (1), яка містить воду як сольват з половинним еквівалентом на Сполуку (1). В одному з конкретних варіантів здійснення Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 10,5, 5,2, 7,4 і 18,9 (40,2 градуса) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення
Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 також характеризується одним або більше піками, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 25,2-0,2, 16,5-0,2, 18,1-0,2 ії 23,0-0,Ф2 на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення
Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О характеризується тим, що має профіль ХКРО з характеристичними піками, вираженими в 2-тета-0,2, у наступних положеннях, зазначених у
Таблиці 2. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 характеризується тим, що має профіль ХКРО, по суті такий же, як показано на Фіг. 1. Профілі
ХЕРО одержують при кімнатній температурі, використовуючи альфа-випромінювання СиК. У ще одному конкретному варіанті здійснення поліморфна Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 характеризується тим, що має один або більше характеристичних піків при 29,2, 107,0, 114,0, ії 150,7 (-0,3 м.ч.) у спектрі 5ЗММЕ на С"З. У ще одному конкретному варіанті здійснення поліморфна Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20О характеризується тим, що додатково має піки при 22,1, 24,6, 47,7 і 54,8 (40,3 м.ч.) у спектрі ЗОММК на С"3. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 характеризується тим, що має піки Б5ММЕ на
Сз, перераховані в Таблиці 3. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А солі НСІ
Сполуки (1)х1/2Н2О характеризується тим, що має 55ММЕ на С", по суті такий же, як показано на Фіг. 2. (0048) В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується поліморфної Форми Е солі
НСІ Сполуки (1)х3Н2О. Ця форма є поліморфною формою солі НСІ Сполуки (1), яка містить
Зо воду як сольват із трьома еквівалентами на Сполуку (1). В одному з конкретних варіантів здійснення Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2гО характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 7,1, 11,9, 19,2 і 12,4 (-0,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма ЕЕ солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О додатково характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 16,4, 21,8 і 23,9 (-0,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О характеризується тим, що має профіль ХКРО з характеристичними піками, вираженими в 2-тета-0,2, у наступних положеннях, зазначених у Таблиці 5. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О характеризується тим, що містить профіль ХКРО, по суті такий же, як показано на Фіг. 3. Профілі ХКРО одержують при кімнатній температурі, використовуючи альфа-випромінювання СиК. У ще одному конкретному варіанті здійснення поліморфна Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О характеризується піками при 20,7, 27,4, 104,8, 142,5, 178,6 (40,3 м.ч.) у спектрі ЗОММК на С"3. У ще одному конкретному варіанті здійснення поліморфна Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО характеризується тим, що додатково має піки при 154,3, 20,3, 132,3 ії 21,1 (40,3 м.ч.) у спектрі ЗЗММК на С"3. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О характеризується тим, що має піки 5ХЗ5ММЕ на С"З, перераховані в Таблиці 6. У ще одному конкретному варіанті здійснення
Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О характеризується тим, що має спектр З5ММЕ на С", по суті такий же, як показано на Фіїг. 4. 0049) В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується поліморфної Форми О солі
НСІ Сполуки (1). Ця форма є несольватованою формою солі НСІ Сполуки (1). В одному з конкретних варіантів здійснення Форма О солі НСІ Сполуки (1) характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 5,8, 17,1 їі 19,5 (ї-0,2) на порошковій рентгенограмі У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма О солі НСІ Сполуки (1) характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 5,3, 10,5 ї 15,9 (0,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма О солі НСІ
Сполуки (1) характеризується тим, що має профіль ХКРО з характеристичними піками,
вираженими в 2-тета-0,2, у положеннях, зазначених у Таблиці 7. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма О солі НСІ Сполуки (1) характеризується тим, що має профіль ХКРО, по суті такий же, як показано на Фіг. 5. Профілі ХКРО одержують при кімнатній температурі, використовуючи альфа-випромінювання СиК. У ще одному конкретному варіанті здійснення
Форма О солі НСІ Сполуки (1) характеризується тим, що має піки при 29,4, 53,4, 113,3, 135.4, 177,8 (40,3 м.ч.) у спектрі ЗЗММЕ на С"5. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма Ю солі НСІ Сполуки (1) характеризується тим, що додатково має піки при 22,9, 23,9, 26,0 і 31,6 (40,3 м.ч.) у спектрі ЗЗММЕ на С"3. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма О солі
НСЇІ Сполуки (1) характеризується тим, що має піки З5ММЕ на С", перераховані в Таблиці 8. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма О солі НСІ Сполуки (1) характеризується тим, що має спектр З55ММЕ на С У, по суті такий же, як показано на Фіг. 6.
І0О50)| В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується поліморфної Форми А
Сполуки (1). Ця форма є несольватованою формою солі НСІ Сполуки (1). В одному з конкретних варіантів здійснення Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 15,5, 18,9 і 22,0 (0,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма А Сполуки (7)х3Н2гО додатково характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 11,8, 16,9, 25,5 і 9,1 (-0,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має профіль ХКРО з характеристичними піками, вираженими в 2- тета-0,2, у положеннях, зазначених у Таблиці 10. У ще одному конкретному варіанті здійснення
Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має профіль ХКРО, по суті такий же, як показано на Фіг. 7. Профілі ХКРО одержують при кімнатній температурі, використовуючи альфа-випромінювання СиК. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має піки при 21,0, 28,5, 50,4, 120,8, 138,5 і 176,2 (0,3 м.ч.) у спектрі З5ММЕ на С'З. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має піки при 30,1, 25,9, 22,8 і 25,0 (0,3 м.ч.) у спектрі ЗОММК на С".
У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має піки 55ММЕ на С"З, перераховані в Таблиці 11. У ще одному конкретному варіанті
Зо здійснення Форма А Сполуки (1) характеризується тим, що має спектр З55ММЕ на С", по суті такий же, як показано на Фіг. 8. 0051) В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується поліморфної Форми А тозилату Сполуки (1). Ця форма є несольватованою формою тозилату Сполуки (1). В одному з конкретних варіантів здійснення Форма А тозилату Сполуки (1) характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 7,2, 9,3, 13,7, 14,3, 14,7, 16,9, 18,7, 26,3 і 26,9 (40,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма А тозилату Сполуки (1) додатково характеризується тим, що має один або більше піків, які відповідають значенням 2-тета, виміряним у градусах, що дорівнюють 6,0, 28,0 ії 27,5 (40,2) на порошковій рентгенограмі. В іншому конкретному варіанті здійснення Форма А тозилату Сполуки (1) характеризується тим, що має профіль ХКРО з характеристичними піками, вираженими в 2-тета-0,2, у наступних положеннях, зазначених у
Таблиці 14. У ще одному конкретному варіанті здійснення Форма А тозилату Сполуки (1) характеризується тим, що має профіль ХКРО, по суті такий же, як показано на Фіг. 9. Профілі
ХЕРО одержують при кімнатній температурі, використовуючи альфа-випромінювання Сик. 0052) У ще одному варіанті здійснення даний винахід стосується одержання Форми А солі
НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО і Форми О солі НСІ Сполуки (1),
Форми А Сполуки (1) і Форми А тозилату Сполуки (1).
ЇОО53| Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О0 може бути одержана з використанням змішування (наприклад, перемішування) хлористого водню (НС) зі Сполукою (1). Сполука (1) може бути сольватованою, несольватованою, аморфною або кристалічною. Розчин або суспензія Сполуки (1) можуть бути змішані з НСІ у системі розчинників, яка включає в себе воду й один або декілька органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює або більше 0,05 і дорівнює або менше 0,85, тобто 0,05-0,85. Термін "активність води" (ам), як використовується в даному описі, відомий у даній галузі техніки й означає міру енергетичного стану води в системі розчинників. Активність води визначається як тиск пари рідини, ділений на тиск чистої води при тій же температурі. Зокрема, активність води
Е визначається як що Р», де Р? являє собою тиск пари води в речовині, і Во являє собою тиск о с. . атм хх, і, с. пари чистої води при тій же температурі, або що ж, де Ж являє собою коефіцієнт активності води і Хо являє собою молярну частку води у водній фракції. Наприклад, чиста вода має значення активності води 1,0. Значення активності води, як правило, можуть бути одержані або по ємності гігрометра, або по точці роси гігрометра. Різні види інструментів для вимірювання активності води також є в продажу. Альтернативно, значення активності води сумішей двох або більше розчинників можуть бути розраховані на основі кількостей розчинників і відомих значень активності води розчинників. (0054) Приклад кристалічної Сполуки (1) включає Форму А Сполуки (1). Приклади сольватів
Сполуки (1) включають в себе сольвати 2-МетНЕ, М, М-диметилацетамід, М, М- диметилформамід, метанолу, ксилолу, ацетону, 2-бутанолу, метилацетату, 1-пропанолу, 2- пропанолу, тетрагідрофурану, метилтетрагідрофурану, диметилацетаміду, М, М- диметилформаміду, 1,4-діоксану, 1-пентанолу, 2-метил-1-пропанолу, метилетилкетону, 3- метил-1-бутанолу, гептану, етилформіату, 1-бутанолу, оцтової кислоти і етиленгліколю. У конкретному варіанті здійснення використовуються сольвати 2-МетНЕ (наприклад, Сполука (1)х1(2-МетнНЕ)). 0055) Системи розчинників, придатні для одержання Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, можуть містити велику різноманітність комбінацій води й органічних розчинників, де активність води системи розчинників дорівнює або більше 0,05 і дорівнює або менше 0,85 (0,05-0,85). У конкретному варіанті здійснення значення активності води дорівнює 0,4-0,6. Придатні органічні розчинники включають органічні розчинники Класу ІІ або Класу ІІ, перераховані в керівництві
Міжнародної конференції по гармонізації. Конкретні приклади придатних органічних розчинників
Класу ІІ включають хлорбензол, циклогексан, 1,2-дихлоретан, дихлорметан, 1,2-диметоксієтан,
М, М-диметилацетамід, диметилформамід, 1,4-діоксан, 2-етоксіетанол, формамід, гексан, 2- метоксіетанол, метилбутилкетон, метилциклогексан, М-метилпіролідон, нітрометан, піридин, сульфолан, тетрагідрофуран (ТНЕ), тетралін, толуол, 1,1,2-трихлоретилен і ксилол. Конкретні приклади придатних органічних розчинників Класу ІІЇ включають: оцтову кислоту, ацетон, анізол, 1-бутанол, 2-бутанол, бутилацетат, трет-бутилметиловий ефір, кумол, гептан, ізобутилацетат, ізопропілацетат, метилацетат, З-метил-1-бутанол, метилетилкетон, метилізобутилкетон, 2- метил-1-пропанол, етилацетат, етиловий ефір, етилформіат, пентан, 1-пентанол, 1-пропанол, 2- пропанол і пропілацетат. В одному з конкретних варіантів здійснення винаходу органічні
Зо розчинники системи розчинників вибрані з групи, що складається з хлорбензолу, циклогексану, 1,2-дихлоретану, дихлорметану, 1,2-диметоксіетану, гексану, 2-метоксіетанолу, метилбутилкетону, метилциклогексану, нітрометану, тетраліну, ксилолу, толуолу, 1,1,2- трихлоретану, ацетону, анізолу, 1-бутанолу, 2-бутанолу, бутилацетату, трет-бутилового ефіру, кумолу, етанолу, етилацетату, етилового ефіру, етилформіату, гептану, ізобутилацетату, ізопропілацетату, метилацетату, 3З-метил-1-бутанолу, метилетилкетону, 2-метил-1-пропанолу, пентану, 1-пропанолу, 1-пентанолу, 2-пропанолу, пропілацетату, тетрагідрофурану (4 метилтетрагідрофурану. В іншому конкретному варіанті здійснення органічні розчинники системи розчинників вибрані з групи, що складається з 2-етоксіетанолу, етиленгліколю, метанолу, 2-метоксіетанолу, 1-бутанолу, 2-бутанолу, З-метил-1-бутанолу, 2-метил-1-пропанолу, етанолу, 1-пентанолу, 1-пропанолу, 2-пропанолу, метилбутилкетону, ацетону, метилетилкетону, метилізобутилкетону, бутилацетату, ізобутилацетату, ізопропілацетату, метилацетату, етилацетату, пропілацетату, піридину, толуолу і ксилолу. У ще одному варіанті здійснення органічні розчинники вибрані з групи, що складається з ацетону, н-пропанолу, ізопропанолу, ізобутилацетату й оцтової кислоти. У ще одному варіанті здійснення органічні розчинники вибрані з групи, що складається з ацетону і ізопропанолу. У ще одному конкретному варіанті здійснення система розчинників включає воду й ацетон. У ще одному конкретному варіанті здійснення система розчинників включає воду і ізопропанол. 0056) Одержання Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20О може бути здійснене при будь-якій придатній температурі Як правило, одержання здійснюють при температурі 5-7576. У конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 15-75 70. В іншому конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 15-60 "С. У ще одному конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 15-35 "С. У ще одному конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 5-75"7С у системі розчинників, що має значення активності води 0,4-0,6. У ще одному конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 15-75 "С в системі розчинників, що має значення активності води 0,4-0,6. У ще одному конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 15-60 "С в системі розчинників, що має значення активності води 0,4-0,6. У ще одному конкретному варіанті здійснення одержання здійснюють при температурі 15-35 "С в системі розчинників, що має значення активності води 0,4-0,6.
І0057| Хлористий водень (НСІ) може бути введений у вигляді розчину або газу. Одним із прикладів придатного джерела хлористого водню є розчин хлористого водню, що містить 30-40 мас. 95 (наприклад, 34-38 мас. 95) НСІ по масі водного розчину. 0058) Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Нг2О може бути одержана шляхом змішування Не і
Сполуки (1) у системі розчинників, яка включає в себе воду або яка включає в себе воду й один або декілька органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює або більше 0,9 (20,9). Суміш може являти собою розчин або суспензію. Сполука (1) може бути сольватованою, несольватованою, аморфною або кристалічною. Альтернативно, вона може бути одержана шляхом перемішування Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О у системі розчинників, яка включає в себе воду або яка включає воду й один або більше органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює або більше 0,9. Як правило, чиста вода має значення активності води 1,0. Відповідно, система розчинників, яка має водну активність 0,9-1,0, може бути придатна для одержання Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О. У конкретному варіанті здійснення, змішування або перемішування здійснюють при температурі навколишнього середовища (18-257С). У ще одному конкретному варіанті здійснення, змішування або перемішування проводять при температурі 15-30 "С. В іншому конкретному варіанті здійснення, змішування або перемішування проводять при температурі 20- 28"7С (наприклад, при 25 "С). Придатними органічними розчинниками, включаючи конкретні приклади, для утворення Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, є розчинники, як описано вище для Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О0. У ще одному конкретному варіанті здійснення система розчинників включає воду й ацетон. У ще одному конкретному варіанті здійснення система розчинників включає воду і ізопропанол. 0059) Форма 0 солі НСІ Сполуки (1) може бути одержана шляхом дегідратації Форми А солі
НС Сполуки (1)х1/2Н2О. Дегідратація може бути здійснена за допомогою будь-яких придатних засобів, наприклад нагріванням або сухим продуванням азотом, або ними разом. 0060 Форма А Сполуки (1) може бути одержана (а) шляхом перемішування суміші аморфної Сполуки (1) або сольвату Сполуки (1) (наприклад, сольвату 2-МеТНЕ Сполуки (1)) у системі розчинників, яка включає в себе воду і етанол. Суміш може бути розчином або суспензією. У конкретному варіанті здійснення стадію перемішування проводять при
Зо температурі в діапазоні від 18 до 9070. В іншому конкретному варіанті здійснення стадію перемішування (а) здійснюють при температурі кипіння зі зворотним холодильником системи розчинників. У ще одному конкретному варіанті здійснення система розчинників включає від 5 мас. 96 до 15 мас. 95 води по масі системи розчинників. Прикладами сольватів Сполуки (1) є сольвати, як описано вище. У конкретному варіанті здійснення використовуються сольвати 2-
МетнНЕ (наприклад, Сполука (1)х1(2-МетТНЕ)). 0061) У ще одному варіанті здійснення спосіб одержання Форма А Сполуки (1) додатково включає: (Б) перемішування аморфної форми Сполуки (1) у нітрометані з утворенням кристалічної затравки Форми А Сполуки (1); і (с) додавання кристалічної затравки Форми А
Сполуки (1) до одержаної суміші на стадії змішування (а). У конкретному варіанті здійснення способи додатково включають: (5) перемішування аморфної форми Сполуки (1) у нітрометані з утворенням кристалічної затравки Форми А Сполуки (1); (с) охолодження одержаної суміші на стадії змішування (а) до температури в діапазоні від 18 до 60 "С (наприклад, 50-55 "С або при 55 С); і (4) додавання кристалічної затравки Форми А Сполуки (1) до одержаної суміші стадії (с). В іншому конкретному варіанті здійснення способи додатково включають додавання води, перед додаванням кристалічної затравки Форми А Сполуки (1), до одержаної суміші, що пройшла через стадію нагрівання зі зворотним холодильником, у такій кількості, щоб одержана система розчинників містила воду в кількості 15-25 мас. 95 після додавання води. У ще одному конкретному варіанті здійснення способи додатково включають додавання води до суміші, що містить кристалічну затравку Форми А Сполуки (1), у такій кількості, щоб система розчинників містила воду в кількості 35-45 мас. 90 після додавання води. У ще одному конкретному варіанті здійснення способи додатково включають охолодження суміші, що містить кристалічну затравку
Форми А Сполуки (1), після додавання води, до температури 0-10 "С. (0062) В одному з конкретних варіантів здійснення кристалічна Форма А Сполуки (1) може бути одержана за допомогою сольвату 2-МеТНЕ Сполуки (1) у нітрометані. В одному з варіантів здійснення система розчинників для стадії нагрівання зі зворотним холодильником включає 5-15 мас. 95 (наприклад, 8 мас. 95, 10 мас. 95 або 12 мас. 95) води по масі системи розчинників.
І0063| Форма А тозилату Сполуки (1) може бути одержана шляхом перемішування суміші аморфної Сполуки (1) або сольвату Сполуки (1) (наприклад, сольвату 2-МеТНЕ Сполуки (1)) п- толуолсульнофової кислоти і системи розчинників, яка включає ацетонітрил. У конкретному бо варіанті здійснення, стадію змішування або перемішування здійснюють при температурі навколишнього середовища. У ще одному конкретному варіанті здійснення, стадію змішування або перемішування здійснюють при температурі 15-30"С. В іншому конкретному варіанті здійснення, стадію змішування або перемішування здійснюють при температурі 20-30 С (наприклад, при 25 "С). Придатні приклади розчинників Сполуки (1) включають конкретні приклади, як описано вище для Форми А Сполуки (1). 0064) У ще одному варіанті здійснення винахід стосується 2-МетНЕ сольватів Сполуки (1).
В одному з конкретних варіантів здійснення сольвати включають 0,5-1,5 еквівалента 2-МетТнНЕ на Сполуку (1), наприклад 1 еквівалент 2-МеТНЕ на Сполуку (1) у нітрометані. В одному з конкретних варіантів здійснення сольвати включають 1 еквівалент 2-МетнНЕ і характеризуються тим, що мають профіль ХКРО з характеристичними піками, вираженими в 2-тета-0,2, у наступних положеннях при 8,4, 9,7, 16,7, 16,9, 17,4, 21,0, 22,3 і 25,7. В іншому конкретному варіанті здійснення сольвати включають 1 еквівалент 2-МетТНЕ і характеризуються наявністю визначених піків ХКРО, перерахованих у Таблиці 12, або наявністю зображень ХЕРО, як показано на Фіг. 10. 0065) У ще одному варіанті здійснення винахід включає аморфні форми Сполуки (1) і їх фармацевтично прийнятні солі, такі як аморфні солі НСІ Сполуки (1) і аморфні Сполуки (1). У ще одному варіанті здійснення даний винахід також включає Форму В Сполуки (1) гідрат. Форма В
Сполуки (1) гідрат є ізоморфною з Формою А Сполуки (1), показуючи піки ХКРО, такі ж, як піки
Форми А Сполуки (1), але утворюється в присутності води, наприклад у системі з активністю води вище 0,6, наприклад 0,6-1,0, при температурі навколишнього середовища. 0066) Даний винахід включає поліморфні форми Сполуки (1), як описано вище, у виділеній, чистій формі або в суміші у вигляді твердої композиції, якщо знаходиться в суміші з іншими речовинами, наприклад з іншими формами (тобто аморфна форма, Форма А Сполуки (1) тощо),
Сполуки (1) або будь-яких інших речовин.
І0067| В одному з аспекті даний винахід стосується одержання ізоморфних форм, таких як
Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма О солі НСІ
Сполуки (1), Форма А Сполуки (1), Форма В Сполуки (1) і Форма А тозилату Сполуки (1) у виділеній твердий формі. У ще одному аспекті даний винахід стосується аморфної форми
Сполуки (1) і її фармацевтично прийнятних солей, таких як аморфні солі НСІ Сполуки (1) і
Зо аморфні Сполуки (1) у виділеній твердій формі. 0068) У ще одному з аспекті даний винахід стосується одержання ізоморфних форм, таких як Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2гО, Форма О солі НСІ
Сполуки (1), Форма А Сполуки (1), Форма В Сполуки (1) і Форма А тозилату Сполуки (1) у чистій формі. Чиста форма означає, що конкретна поліморфна форма містить понад 95 95 (мас./мас.), наприклад більше 98 95 (мас./мас.), більше ніж на 99 95 (мас./мас.), 99,5 95 (мас./мас.) або більше 99,9 95 (мас./мас.). У ще одному аспекті надані аморфні форми Сполуки (1) або їх фармацевтично прийнятні солі в чистому вигляді. Чиста форма означає, що аморфна форма має понад 95 95 (мас./мас.), наприклад більше 98 95 (мас./мас.), більше ніж на 99 95 (мабс./мабс.), 99,5 95 (мас./мас.) або більше 99,9 95 (мас./мабс.).
І0069| Конкретно, даний винахід стосується кожної поліморфної форми у формі композиції або суміші поліморфної форми з одним або декількома іншими кристалічними, сольватними, аморфними або іншими поліморфними формами або їх комбінацій. Наприклад, в одному з варіантів здійснення композиція містить Форму А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О разом з однією або декількома іншими поліморфними формами Сполуки (1), такими як аморфна форма, сольвати, Форма О солі НСІ Сполуки (1), Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма А Сполуки (1) і/або інші форми або будь-які їх комбінації. Аналогічно, у ще одному варіанті здійснення композиція містить Форму Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО разом з однією або декількома іншими поліморфними формами Сполуки (1), наприклад аморфною формою, сольватами, Формою А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20О0, Формою О солі НСІ Сполуки (1), Формою А Сполуки (1) і/або іншими формами або їх комбінаціями. Аналогічно, у ще одному варіанті здійснення композиція містить Форму О солі НСІ Сполуки (1) разом з однією або декількома іншими поліморфними формами Сполуки (1), такими як аморфна форма, сольвати, Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма А Сполуки (1) і/або інші форми або будь-які їх комбінації. У ще одному варіанті здійснення композиція містить Форму А Сполуки (1) разом з однією або більше іншими поліморфними формами Сполуки (1), такими як аморфна форма, сольвати і/або інші форми або їх комбінації. У ще одному варіанті здійснення композиція містить Форму А тозилату Сполуки (1) разом з однією або більше іншими поліморфними формами Сполуки (1), такими як аморфна форма, сольвати і/або інші форми або їх комбінації.
Конкретно, композиція може містити від слідових кількостей до 100 95 конкретних поліморфних
Ге) форм або будь-яку кількість у зазначених межах, наприклад у діапазоні 0,1-0,5 о, 0,1-1 У, 0,1-
290, 0,1-590, 0,1-1095, 0,1-20 95, 0,1-30 95, 0,1-40 95 або 0,1-50 95 по масі, на основі загальної кількості Сполуки (1) у композиції. Альтернативно, композиція може містити щонайменше 50 95, бос, 7095, 8095, 9095, 9595, 9795, 9895, 9995, 99,5 95 або 99,995 по масі конкретної поліморфної форми на основі загальної кількості Сполуки (1) у композиції.
І0070)| Для цілей даного винаходу хімічні елементи ідентифіковані відповідно до Періодичної системи Елементів, версія СА5, Напароок ої Спетівігу апа РПузіс5, 75-е видання. Крім того, загальні принципи органічної хімії описані в "Огдапіс Спетівзігу", Тпотав5 зЗоїтеїЇ, Опімегейу зсієпсе Воок5, Заизоїйо: 1999, і в "Магсп"5 Адмапсей Огдапіс Спетівігу", 5-е видання, Еа.: 5тій
М.В. апа Магсй .4)., дУопп Уміеу 5 5оп5, Мем/ МогКк: 2001, повний зміст яких наведений в даному описі за допомогою посилання. 0071) Якщо не зазначено іншого, то структури, зображені в даному описі, також мають на увазі всі ізомерні (наприклад, енантіомерні, діастереомерні, цис-транс, конформаційні і ротаційні) форми структури. Наприклад, конфігурації К і 5 для кожного асиметричного центра, (2) ї (Е) ізомери подвійного зв'язку, а також (72) і (Е) конформаційні ізомери включені в даний винахід, якщо тільки один з ізомерів конкретно не зображений. Як зрозуміло фахівцю в даній галузі технікию, замісник може вільно обертатися навколо будь-якого зв'язку, здатного до и чл . й хх що обертання. Наприклад, замісники, зображені як ; також представляють .
І0072| Отже, окремі стереохімічні ізомери, а також енантіомерні, діастереомерні, цис/транс, конформаційні і ротаційні суміші сполук за даним винаходом знаходяться в рамках даного винаходу.
ЇО073| Якщо не зазначене інше, то всі таутомерні форми сполук за даним винаходом входять у рамки даного винаходу. 00741 Крім того, якщо не зазначено іншого, то структури, зображені в даному описі, також передбачають сполуки, які відрізняються тільки наявністю одного або декількох ізотопно збагачених атомів. Наприклад, сполуки, які мають представлені структури, за винятком заміни водню дейтерієм або тритієм або заміни вуглецю на "30- або "7Сб-збагачений вуглець, входять у рамки даного винаходу. Такі сполуки можуть бути використані, наприклад, як аналітичні інструменти або зонди у біологічних аналізах. Такі сполуки, особливо аналоги дейтерію (0), також можуть бути терапевтично ефективними.
Зо 0075) Сполуки, описані в даному документі, визначені своїми хімічними структурами і/або хімічними найменуваннями. У випадку, якщо сполука посилається як на хімічну структуру, так і на хімічну назву, і хімічна структура і хімічна назва суперечать одна одній, то хімічна структура переважає при ідентифікації сполуки.
І0076| Як буде зрозуміло фахівцям у даній галузі сполуки за даним винаходом можуть містити хіральний центр. Сполуки формули можуть, таким чином, існувати у вигляді двох різних оптичних ізомерів (тобто (ж)- або (-)-енантіомерів). Усі такі енантіомери і їх суміші, включаючи рацемічні суміші, входять у рамки даного винаходу. Одиничний оптичний ізомер або енантіомер може бути одержаний способом, добре відомим у даній галузі, таким як хіральна ВЕРХ, ферментативне розділення і за допомогою хірального допоміжного агента. 0077) В одному з варіантів здійснення сполуки за даним винаходом представлені у формі одиничного енантіомера, який щонайменше на 95 95, щонайменше на 97 95 і щонайменше на 99 95 вільний від відповідного енантіомера.
Ї0078| У ще одному додатковому варіанті здійснення сполуки за даним винаходом знаходяться у формі (жї)-енантіомера, щонайменше на 9595 вільного від відповідного (-)- енантіомера.
Ї0079| У ще одному додатковому варіанті здійснення сполуки за даним винаходом знаходяться у формі (жї)-енантіомера, щонайменше на 97 95 вільного від відповідного (-)- енантіомера.
ІЇ0О80| У ще одному додатковому варіанті здійснення сполуки за даним винаходом знаходяться у формі (жї)-енантіомера, щонайменше на 9995 вільного від відповідного (-)- енантіомера.
ЇОО81| У ще одному додатковому варіанті здійснення сполуки за даним винаходом знаходяться у формі (-)-енантіомера, щонайменше на 9595 вільного від відповідного ()- енантіомера.
Ї0082| У ще одному додатковому варіанті здійснення сполуки за даним винаходом знаходяться у формі (-)-енантіомера, щонайменше на 97 90 вільного від відповідного ()- енантіомера.
Ї0083| У ще одному додатковому варіанті здійснення сполуки за даним винаходом знаходяться у формі (-)-енантіомера, щонайменше на 99905 вільного від відповідного ()- енантіомера. (0084) ІІ. ЗАСТОСУВАННЯ СПОЛУКИ (1) І ЇЇ ФАРМАЦЕВТИЧНО ПРИЙНЯТНОЇ СОЛІ
І0085| Один з аспектів даного винаходу, як правило, стосується застосування Сполуки (1) і її фармацевтично прийнятних солей, включаючи різні тверді форми (наприклад, Форма А солі НСІ
Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма О солі НСІ Сполуки (1), Форма
А солі НСІ Сполуки (1), Форма В Сполуки (1) гідрат і Форма А тозилату Сполуки (1)), як описано вище, для інгібування реплікації вірусу грипу в біологічному зразку або у пацієнта, для зменшення кількості вірусу грипу (зниження вірусного титру) у біологічному зразку або у пацієнта і для лікування грипу у пацієнта. У даному документі, якщо конкретно не зазначене інше, Сполука (1) і її фармацевтично прийнятні солі, включаючи різні тверді форми (наприклад,
Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма О солі НСІ
Сполуки (1), Форма А Сполуки (1), Форма В Сполуки (1) і Форма А тозилату Сполуки (1)), як описано вище, належать до загальних сполук.
І0086) В одному варіанті здійснення даний винахід загалом стосується застосування сполук, описаних у даному документі (наприклад, у фармацевтично прийнятних композиціях), для кожного з застосувань, зазначених вище. (0087) У ще одному варіанті здійснення сполуки, описані в даному документі, можуть бути використані для зниження титру вірусу в біологічному зразку (наприклад, інфікованій клітинній культурі) або в організмі людини (наприклад, вірусний титр у легенях у пацієнта). (0088) Терміни "стан, опосередкований вірусом грипу", "інфекція, викликана грипом", або "грип", як використовується в даному документі, є взаємозамінними і позначають захворювання, викликане інфекцією вірусом грипу. 0089) Грип є інфекційним захворюванням, що уражує птахів і ссавців, викликаним вірусами грипу. Віруси грипу являють собою РНК-віруси сімейства Огіпотухомігідає, що складається з п'яти родів: вірус грипу А, вірус грипу В, вірус грипу С, вірус ІА і вірус Тогото. Вірус грипу роду
А має один вид, вірус грипу А, що може бути підрозділений на різні серотипи на основі гуморальної (антитільної) відповіді на ці віруси: НІМІ, Н2М2, НЗМ2, НОМ, НМ, НІМ2, НМ,
Зо Н7Маг, Н7МЗ ії НІОМ7. Додаткові приклади вірусу грипу А включають НЗМ8 ії Н7МО. Рід вірусу грипу В має один вид, вірус грипу В. Грип В майже винятково заражає людей і зустрічається рідше, ніж грип А. Вірус грипу роду С має один вид, вірус грипу С, що інфікує людей і свиней і може привести до важкої хвороби і місцевих епідемій. При цьому, грип С зустрічається рідше, ніж інші типи, і, як правило, очевидно викликає легке захворювання у дітей.
І0090| У деяких варіантах здійснення даного винаходу, грип або віруси грипу пов'язані з вірусом грипу А. У деяких конкретних варіантах здійснення даного винаходу, вірус грипу А являє собою НІМІ, Н2М2, НЗМ2 або НЬОМІ. У деяких конкретних варіантах здійснення даного винаходу, вірус грипу А являє собою НІМІ, НЗМ2, НЗМ8, Н5ЬМІ1 ії Н7МОУ. У деяких конкретних варіантах здійснення даного винаходу, вірус грипу А являє собою НІМІ, НЗМ2, НЗМ8 і Н5М1.
І0091| У людей загальними симптомами грипу є озноб, пропасниця, фарингіт, болі в м'язах, сильний головний біль, кашель, слабкість і загальне нездужання. У більш серйозних випадках грип викликає пневмонію, що може привести до летального кінця, особливо у маленьких дітей і людей похилого віку. Незважаючи на те, що грип часто плутають зі звичайною застудою, він є набагато більш важким захворюванням і викликаний іншим типом вірусу. Грип може викликати нудоту і блювання, особливо у дітей, але ці симптоми більш характерні для гастроентериту, що не має відношення до грипу, який іноді називають "шлунковий грип" або "24-годинний грип".
Ї0092| Симптоми грипу можуть початися зовсім несподівано через день або два після зараження. Звичайно першими симптомами є озноб або відчуття холоду, але і пропасниця також характерна для ранньої стадії, при якій температура тіла знаходиться в межах від 38 до 39 С (приблизно 100-103 "Р). Багато людей настільки хворі, що прикуті до ліжка протягом декількох днів, почуваючи нездужання і болі у всьому тілі, які сильніше в спині і ногах. Симптоми грипу можуть включати в себе: ломоту в тілі, особливо в суглобах і горлі, неймовірний холод і пропасницю, утому, головний біль, подразнення очей і сльозотечу, почервоніння очей, шкіри (особливо обличчя), рота, горла і носа, болі в животі (у дітей з грипом В). Симптоми грипу є неспецифічними, подібними до багатьох збудниками ("грипоподібні захворювання"). Як правило, лабораторні дані необхідні для того, щоб підтвердити діагноз. (0093) Терміни "захворювання", "розлад" і "стан" можуть бути використані взаємозамінно в даному документі для позначення вірусу грипу, опосередкованого медичним або патологічним станом.
І0094| Використовувані в даному описі терміни "індивід" ії "пацієнт" використовуються взаємозамінно. Терміни "індивід" і "пацієнт" стосуються тварини (наприклад, птиця, така як курча, перепел або індичка, або ссавець), конкретно "ссавець" включає неприматів (наприклад, корова, свиня, кінь, вівця, кролик, морська свинка, щур, кішка, собака, миша) і приматів (наприклад, мавпа, шимпанзе і людина), більш конкретно людину. В одному з варіантів здійснення індивідом є тварина, така як сільськогосподарська тварина (наприклад, кінь, корова, свині або вівці) або домашня тварина (наприклад, собака, кішка, морська свинка або кролик). У переважному варіанті здійснення індивідом є "людина". 0095) Термін "біологічний зразок", як використовується в даному документі, включає в себе, але ними не обмежується, клітинні культури або їх екстракти; матеріал біопсії, одержаний з ссавця або його екстрактів; кров, слину, сечу, фекалії, сперму, сльози або інші рідини організму або їх екстракти.
І0096| Використовуваний у даному описі термін "множинність інфекції" або "МОЇ!" є відношенням інфекційних агентів (наприклад, фага або вірусу) до мішеней інфекції (наприклад, клітин). Наприклад, при посиланні на групу клітин, інокульованих інфекційними вірусними частинками, множинність інфекції або МОЇ являє собою відношення, визначене кількістю інфекційних вірусних частинок, внесених у ямку, ділене на число клітин-мішеней, присутніх у цій ямці.
І0097| Використовуваний у даному описі термін "інгібування реплікації вірусів грипу" включає як зменшення кількості вірусних реплікацій (наприклад, скорочення щонайменше на 10 9б), так і повне припинення вірусної реплікації (тобто 10095 зниження реплікації вірусу). У деяких варіантах здійснення реплікація вірусів грипу інгібується щонайменше на 50 95, щонайменше на 65 95, щонайменше на 75 95, щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95 або щонайменше на 95 Фр. 0098) Реплікація вірусу грипу може бути виміряна будь-яким придатним способом, відомим у даній галузі. Наприклад, титр вірусу грипу в біологічному зразку (наприклад, в інфікованій клітинній культурі) або в організмі людини (наприклад, вірусний титр у легенях пацієнта) може бути виміряний. Більш конкретно, для аналізів на основі клітин, у кожному випадку клітини культивують іп міго, вірус додають до культури в присутності або за відсутності тестованого
Зо агента і після відповідного періоду часу обчислюють вірусзалежну кінцеву точку. Для звичайних аналізів можуть бути використані клітини Мадін-Дарбі нирок собак (МОСК) і штам вірусу грипу,
А/Риепо Кісо/8/34, адаптований для стандартної тканинної культури. Перший тип клітинного аналізу, який може бути використаний за даним винаходом, оснований на загибелі інфікованих клітин-мішеней, процес, називаний цитопатичний ефект (СРЕ), коли вірусна інфекція викликає виснаження клітинних ресурсів і, в остаточному підсумку, лізис клітини. При першому типі клітинного аналізу низьку фракцію клітин у ямках планшета для мікротитрування інфікують (як правило, від 1/10 до 1/1000), дозволяючи вірусу робити декілька раундів реплікації протягом 48- 72 годин, потім кількість загиблих клітин вимірюють, використовуючи зменшення кількості клітинної АТФ у порівнянні з неінфікованими контролями. Другий тип клітинного аналізу, який може бути використаний за даним винаходом, оснований на збільшенні кількості вірусспецифічних молекул РНК в інфікованих клітинах, при цьому безпосередньо вимірюють рівні РНК, використовуючи метод гібридизації ДНК із розгалуженим ланцюгом (БДНК). В другому типі клітинного аналізу спочатку інфікують невелику кількість клітин у ямках планшета для мікротитрування, вірус залишають реплікуватися в інфікованих клітинах і поширюватися на додаткові раунди клітин, а потім клітини лізуються й у них вимірюють вміст РНК вірусу. Цей аналіз швидко зупиняють, як правило через 18-36 годин, при цьому всі клітини-мішені залишаються життєздатними. Вірусну РНК кількісно оцінюють по гібридизації з конкретними олігонуклеотидними зондами, фіксованими в ямках планшета для аналізу, а потім посилюють сигнал шляхом гібридизації з додатковими зондами, зв'язаними з репортерним ферментом.
І0099| Використовуваний у даному документі термін "титр вірусу (або титру" є мірою концентрації вірусу. При тестуванні титрів можна використовувати серійні розведення для одержання приблизної якісної інформації з аналітичної процедури, що по своїй суті дає тільки позитивну або негативну оцінку. Титр відповідає найбільш високому фактору розведення, що як і раніше дає позитивний результат; наприклад, позитивні показання в перших 8 послідовних дворазових розведеннях переводять у титр 1:256. Конкретним прикладом є вірусний титр. Для визначення титру було зроблено декілька розведень, наприклад 107, 102, 103, 102, 105, 106, 107, 108. Найнижча концентрація вірусу, при якій усе ще відбувається інфікування клітин, є вірусним титром.
ІЇО100| Використовувані в даному описі терміни "лікувати", "лікування" і "лікуючий" бо стосуються як терапевтичних, так і профілактичних заходів. Наприклад, терапевтичні заходи включають усунення або зниження прогресування, тяжкості і/або тривалості стану, викликаного вірусами грипу, або усунення одного або більше симптомів (зокрема, одного або більше помітних симптомів) стану, опосередкованого вірусами грипу, у результаті проведення однієї або декількох терапевтичних процедур (наприклад, введення одного або більше терапевтичних засіб, таких як сполуки або композиції за даним винаходом). У конкретних варіантах здійснення, терапевтичний захід включає в себе поліпшення принаймні одного вимірного фізичного параметра стану, опосередкованого вірусом грипу. В інших варіантах здійснення терапевтичний захід включає інгібування прогресування стану, опосередкованого вірусом грипу, або фізично, наприклад стабілізація помітного симптому, або фізіологічно, наприклад стабілізація фізичного параметра, або їх обох. В інших варіантах здійснення терапевтичний захід включає зниження або стабілізацію інфекцій, опосередкованих вірусом грипу. Противірусні препарати можуть бути використані в амбулаторних умовах для лікування людей, які вже хворі на грип, для зменшення тяжкості симптомів і зменшення кількості днів, протягом яких триває хвороба.
ІО1О1| Термін "хіміотерапія" стосується застосування лікарських засобів, наприклад низькомолекулярних препаратів (але не "вакцин"), для лікування розладу або захворювання. 0102) Терміни "профілактика" або "профілактичне застосування" і "профілактичний захід", як використовується в даному описі, стосуються будь-якої медичної процедури або процедури громадської охорони здоров'я, метою яких є запобігання, а не лікування або вилікування хвороби. Використовувані в даному описі терміни "профілактика", "запобігати" і "профілактичний" стосуються зменшення ризику набуття або розвитку даного стану або зменшення або інгібування рецидиву або зазначеного стану у індивіда, який не хворий, але який був або міг бути поруч із хворою людиною. Термін "хіміопрофілактика" стосується застосування лікарських засобів, наприклад низькомолекулярних препаратів (але не "вакцин"), для профілактики розладу або захворювання. 0103) Використовуване в даному описі профілактичне застосування включає застосування в ситуаціях, при яких був виявлений спалах інфекції, для запобігання зараження або поширення її в місцях, де велике число людей, що піддаються високому ризику серйозних ускладнень грипу, живуть у тісному контакті один з одним (наприклад, у лікарняній палаті, дитячому садку, в'язниці, будинку для людей похилого віку тощо). Профілактичне застосування також включає
Зо застосування серед груп населення, які мають потребу в захисті від грипу, але які або не одержують захист після вакцинації (наприклад, через слабку імунну систему), або якщо вакцина для них недоступна, або якщо вони не можуть бути вакциновані через побічні ефекти. Таке застосування також включає застосування протягом двох тижнів після вакцинації, оскільки протягом цього часу вакцина усе ще неефективна. Профілактичне застосування також може включати лікування індивіда, який не хворий на грип або який не належить до групи підвищеного ризику ускладнень, для зменшення імовірності зараження грипом і передачі грипу індивіду з високим ризиком при тісному контакті 3 ним (наприклад, медичні працівники, працівники будинку для людей похилого віку тощо). 0104 За даними СОС США "спалах" визначається як раптове збільшення гострого фібрилярного респіраторного захворювання (АЕКІ), що відбувається протягом періоду від 48 до 72 годин, у групі людей, які знаходяться в безпосередній близькості один від одного (наприклад, в одній і тій же області пансіону, у одному і тому ж будинку тощо), у порівнянні з нормальною фоновою швидкістю або якщо будь-який індивідуум у популяції, відносно якого був проведений тест, виявився позитивним на грип. Один випадок грипу, підтверджений будь-яким способом, вважається спалахом.
ІО105) "Кластер" визначається як група з трьох або більше випадків АЕКІ, що відбуваються протягом періоду від 48 до 72 годин, у групі людей, які знаходяться в безпосередній близькості один від одного (наприклад, у одному і тому ж пансіоні, у одному і тому ж будинку тощо).
І0106| Використовувані у даному описі терміни "джерело захворювання", "первинний випадок" або "пацієнт зеро" означають першого пацієнта в популяційному зразку епідеміологічного дослідження. При використанні загалом відносно таких пацієнтів в епідеміологічних дослідженнях, цей термін не виділяється заголовними буквами. Якщо цей термін використовується для позначення конкретного індивіда замість імені цього індивіда в доповіді про конкретне дослідження, то термін пишеться заголовними буквами як Пацієнт Зеро.
Часто вчені шукають носія захворювання для визначення того, як хвороба поширюється й у якому джерелі знаходиться захворювання між спалахами. Варто звернути увагу, що носій захворювання є першим пацієнтом, що вказує на наявність спалаху. Можуть бути виявлені більш ранні випадки і їх позначають як первинні, вторинні, третинні тощо.
ІО107| В одному варіанті здійснення способи за даним винаходом є профілактичною або 60 "попереджувальною" мірою для пацієнта, зокрема для людини, зі схильністю до ускладнень у результаті інфекції, викликаної вірусом грипу. Термін "попереджувальний" або "превентивно", використовуваний у даному описі, наприклад для попереджувального застосування, є профілактичним застосуванням у тих ситуаціях, при яких "джерело захворювання" або "спалах" було підтверджено, для запобігання поширення інфекції в іншій частині суспільства або групи популяції.
ЇО108| В іншому варіанті здійснення способи за винаходом застосовуються як "попереджувальна" міра до членів суспільства або групи популяції, зокрема до людей, для того, щоб запобігти поширенню інфекції.
І0109| Використовуваний у даному описі термін "ефективна кількість" стосується кількості, достатньої для того, щоб викликати бажану біологічну відповідь. У даному винаході бажаною біологічною відповіддю є інгібування реплікації вірусу грипу, зниження кількості вірусів грипу або зменшення або зниження тяжкості захворювання, тривалості, прогресії або початку інфекції вірусом грипу, запобігання поширенню інфекції вірусом грипу, запобігання повторенню, розвитку, початку або прогресуванню симптомів, пов'язаних з вірусом грипу, або підвищення або поліпшення профілактичного або терапевтичного ефекту(ів) іншого терапевтичного заходу проти грипозних інфекцій. Точна кількість сполуки, що вводиться індивіду, буде залежати від способу введення, типу і тяжкості інфекції і від особливостей індивіда, таких як загальний стан, вік, стать, маса тіла і толерантність до лікарських засобів. Фахівець зможе визначити відповідні дозування залежно від цих і інших факторів. При спільному введенні з іншими противірусними засобами, наприклад при спільному введенні з ліками проти грипу, "ефективна кількість" другого агента буде залежати від типу використовуваного препарату. Придатні дозування відомі для дозволених до застосування засобів і можуть бути скоректовані фахівцем відповідно до стану індивіда, типу стану(ів), відносно якого проводиться лікування, і кількості сполуки, описаної в даному документі. У тих випадках, коли кількість чітко не зазначена, ефективну кількість потрібно передбачати. Наприклад, сполуки, розкриті в даному описі, можуть бути введені індивіду в інтервалі доз приблизно від 0,01 до 100 мг/кг маси тіла/день для терапевтичного або профілактичного лікування. (0110) Як правило, режими дозування можуть бути вибрані відповідно до різних факторів, включаючи захворювання, відносно якого проводиться лікування, і тяжкість захворювання;
Зо активність конкретної використовуваної сполуки; специфічну використовувану композицію; вік, масу тіла, загальний стан здоров'я, стать і режим харчування пацієнта; час введення, шлях введення і швидкість екскреції специфічної використовуваної сполуки; функції нирок і печінки індивіда; і конкретну використовувану сполуку або її сіль, тривалість лікування; препарати, використовувані в комбінації або спільно зі специфічною використовуваною сполукою, і тому подібні фактори, добре відомі в галузі медицини. Досвідчений фахівець може легко визначити і призначити ефективну кількість описаних у даному документі сполук, необхідних для лікування, запобігання, інгібування (повністю або частково) або зупинення прогресування захворювання. 0111) Доза сполук, описаних у даному документі, може знаходитися в діапазоні від 0,01 до 100 мг/кг маси тіла/добу, від 0,01 до 50 мг/кг маси тіла/день, від 0,1 до 50 мг/кг маси тіла/день або від 1 до 25 мг/кг маси тіла/день. Зрозуміло, що загальну добову кількість можна вводити у вигляді однократної дози або можна вводити у вигляді багаторазових доз, наприклад два рази на день (наприклад, кожні 12 годин), три рази на день (наприклад, кожні 8 годин) або чотири рази на день (наприклад, кожні 6 годин). 0112) У деяких варіантах здійснення дози сполук, описаних у даному документі (наприклад,
Сполука (1) і її фармацевтично прийнятні солі, включаючи різні тверді форми (наприклад,
Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма О солі НСІ
Сполуки (1), Форма А Сполуки (1), Форма В Сполуки (1) гідрат і Форма А тозилату Сполуки (1))), знаходяться в діапазоні від 100 мг до 1600 мг, наприклад від 400 мг до 1600 мг або від 400 мг до 1200 мг. Кожна доза може прийматися один раз на день (00), два рази на день (наприклад, кожні 12 годин (ВІО)) або три рази на день (наприклад, д8П (ТІБ)). Слід зазначити, що можуть використовуватися будь-які комбінації ОО, ВІО і ТІЮ, за бажанням, наприклад ВІО на день 1, потім 00.
ІО113) У деяких варіантах здійснення дози сполук, описаних у даному документі (наприклад,
Сполука (1) і її фармацевтично прийнятні солі, включаючи різні тверді форми (наприклад,
Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, Форма О солі НСІ
Сполуки (1))), знаходяться в діапазоні від 100 мг до 1600 мг, наприклад від 400 мг до 1600 мг або від 400 мг до 1200 мг. Кожна доза може прийматися один раз на день (00), два рази на день (наприклад, кожні 12 годин (ВІЮБЮ)) або три рази на день (наприклад, д8п (ТІВ)). Слід зазначити, що можуть бути використані будь-які комбінації ОО, ВІЮ ї ТІО, якщо бажано,
наприклад ВІО на 1-й день, а потім ОО після цього, або, якщо ударна доза застосовується на 1- й день, ВІО на 2-й день, а потім 00.
ІЇО114| В одному з конкретних варіантів здійснення дози сполук, описаних у даному документі, складають від 400 мг до 1600 мг, від 400 мг до 1200 мг або від 600 мг до 1200 мг один раз на день. В іншому конкретному варіанті здійснення дози сполук, описаних у даному документі, складають від 400 мг до 1600 мг, від 400 мг до 1200 мг або від 300 мг до 900 мг два рази на день. У ще одному конкретному варіанті здійснення дози сполук, описаних у даному документі, складають від 400 мг до 1000 мг один раз на день. У ще одному конкретному варіанті здійснення, дози сполук, описаних у даному документі, складають від 600 мг до 1000 мг один раз на день. У ще одному конкретному варіанті здійснення дози сполук, описаних у даному документі, складають від 600 мг до 800 мг один раз на день. У ще одному конкретному варіанті здійснення дози сполук, описаних у даному документі, складають від 400 мг до 800 мг два рази на день (наприклад, від 400 мг до 800 мг кожні 12 годин). У ще одному конкретному варіанті здійснення дози сполук, описаних у даному документі, складають від 400 мг до 600 мг два рази на день. 0115) У деяких варіантах здійснення використовується схема ударних доз. В одному з конкретних варіантів здійснення ударна доза, що складає від 400 мг до 1600 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення ударна доза, що складає від 600 мг до 1600 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення ударна доза, що складає від 800 мг до 1600 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення, ударна доза, що складає від 900 мг до 1600 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення, ударна доза, що складає від 900 мг до 1200 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення, ударна доза, що складає 900 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення, ударна доза, що складає 1000 мг, використовується в день 1 лікування. У ще одному конкретному варіанті здійснення, ударна доза, що складає 1200 мгГг, використовується в день 1 лікування. 0116) В одному з конкретних варіантів здійснення в режимі доз сполук, описаних у даному документі, використовується ударна доза, що складає від 600 мг до 1600 мг, на день 1 і звичайна доза, що дорівнює від 300 мг до 1200 мг, протягом періоду лікування, що залишився.
Кожну звичайну дозу можна приймати один раз на день, два рази на день або три рази на день, або в будь-якій їх комбінації У додатковому специфічному варіанті здійснення використовується ударна доза, що складає від 900 мг до 1600 мг, наприклад 900 мг, 1200 мг або 1600 мг. У ще одному додатковому специфічному варіанті здійснення використовується ударна доза, що складає від 900 мг до 1200 мг, наприклад 900 мг або 1200 мг. У ще одному додатковому конкретному варіанті здійснення використовується звичайна доза, що складає від 400 мг до 1200 мг, наприклад 400 мг, 600 мг або 800 мг, протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному додатковому конкретному варіанті здійснення використовується звичайна доза, що дорівнює від 400 мг до 1000 мг, протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному додатковому конкретному варіанті здійснення використовується звичайна доза, що дорівнює від 400 мг до 800 мг, протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному додатковому конкретному варіанті здійснення використовується звичайна доза, що дорівнює від 300 мг до 900 мг, два рази на день. У ще одному додатковому конкретному варіанті здійснення використовується звичайна доза, що дорівнює від 600 мг до 1200 мг, один раз на день. У ще одному додатковому конкретному варіанті здійснення використовується звичайна доза, що дорівнює 600 мг, два рази на день у день 2, а потім 600 мг один раз на день протягом періоду лікування, що залишився.
І0О117| Для терапевтичного заходу сполуки, описані в даному документі, можуть вводитися пацієнту протягом, наприклад, 48 годин (або в межах 40 годин, або менше ніж протягом 2 днів, або менше ніж протягом 1,5 дня або протягом 24 годин) після появи симптомів (наприклад, закладеності носа, болю в горлі, кашлю, болю, утоми, головного болю, ознобу і/або випотів).
Альтернативно, для терапевтичного заходу сполуки, описані в даному документі, можуть бути введені пацієнту протягом, наприклад, 96 годин після появи симптомів. Терапевтичний захід може тривати протягом будь-якого придатного періоду, наприклад протягом З днів, 4 днів, 5 днів, 7 днів, 10 днів, 14 днів тощо. Для профілактичного заходу під час спалаху захворювання сполуки, описані в даному документі, можуть бути введені пацієнту протягом, наприклад, 2 днів до появи симптомів у джерелі захворювання, а також введення може бути продовжене протягом будь-якого придатного періоду, наприклад протягом 7 днів, 10 днів, 14 днів, 20 днів, 28 днів, 35 бо днів, 42 днів тощо, аж до всього сезону грипу. Сезон грипу є щорічно повторюваним періодом часу, що характеризується перевагою спалахів грипу. Активність грипу іноді може бути передбачена і навіть визначена географічно. Хоча початок основної активності грипу в кожному сезоні змінюється залежно від місця розташування, у будь-якому конкретному місці ці незначні епідемії звичайно тривають 3-4 тижні до піка, а ще через 3-4 тижні значно зменшуються. Як правило, Центр по контролю і профілактиці захворювань (СОС) збирає, накопичує й аналізує інформацію про цілорічну активність грипу в Сполучених Штатах і готує щотижневий звіт з жовтня до середини травня.
ІО118) В одному з варіантів здійснення, терапевтичний захід триває протягом від 1 дня до всього сезону грипу. В одному з конкретних варіантів здійснення терапевтичний захід триває протягом від З днів до 14 днів. У ще одному конкретному варіанті здійснення терапевтичний захід триває протягом від 5 днів до 14 днів. У ще одному конкретному варіанті здійснення терапевтичний захід триває протягом від З днів до 10 днів. У ще одному конкретному варіанті здійснення терапевтичний захід триває протягом від 4 днів до 10 днів. У ще одному конкретному варіанті здійснення, терапевтичний захід триває протягом від 5 днів до 10 днів. У ще одному конкретному варіанті здійснення, терапевтичний захід триває протягом від 4 днів до 7 днів (наприклад, 4 дні, 5 днів, б днів або 7 днів). У ще одному конкретному варіанті здійснення терапевтичний захід триває протягом від 5 днів до 7 днів (наприклад, 5 днів, Є днів або 7 днів). В одному з конкретних варіантів здійснення профілактичне лікування триває аж до всього сезону грипу.
І0119| В одному з конкретних варіантів здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів (наприклад, від 5 днів до 14 днів) з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1600 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 300 мг до 1200 мг, протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному конкретному варіанті здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів (наприклад, від 5 днів до 14 днів) з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1200 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 400 мг до 1000 мг, протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному конкретному варіанті здійснення, сполуки, описані в даному документі, водили пацієнту протягом від З днів до 14 днів (наприклад, від 5 днів до 14 днів) з ударною дозою, що складає 900 мг до 1200 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 400 мг до
Зо 800 мг, протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному конкретному варіанті здійснення, сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів (наприклад, від 5 днів до 14 днів) з ударною дозою, що складає 900 мг до 1200 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 400 мг до 800 мг, протягом періоду лікування, що залишився. Кожна доза може бути прийнята один раз на день, два рази на день або три рази на день, або у вигляді будь-якої їх композиції.
І0120)| В одному з конкретних варіантів здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1600 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 600 мг до 1000 мг, один раз на день протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному конкретному варіанті здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1200 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 600 мг до 800 мг (наприклад, 600 мг, 650 мг, 700 мг, 750 мг або 800 мг), один раз на день протягом періоду лікування, що залишився. У деяких варіантах здійснення тривалість лікування складає від 4 днів до 10 днів, від 5 днів до 10 днів або від 5 днів до 7 днів. 0121) В одному з конкретних варіантів здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1600 мг, на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 400 мг до 800 мг, два рази на день протягом періоду лікування, що залишився. У ще одному конкретному варіанті здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом від З днів до 14 днів з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1200 мг, на день 1 і зі звичайною дозою, що дорівнює від 400 мг до 600 мг (наприклад, 400 мг, 450 мг, 500 мг, 550 мг або 600 мг), два рази на день протягом періоду лікування, що залишився. У деяких варіантах здійснення тривалість складає від 4 днів до 10 днів, від 5 днів до 10 днів або від 5 днів до 7 днів. (0122) В одному з конкретних варіантів здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом 4 днів або 5 днів з ударною дозою, що складає від 900 мг до 1200 мг (наприклад, 900 мг або 1200 мг), на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 400 мг до 600 мг (наприклад, 400 мг або 600 мг), два рази на день протягом періоду лікування, що залишився (наприклад, від 2 до 4 днів або від 2 до 5 днів). У ще одному конкретному варіанті здійснення сполуки, описані в даному документі, вводили пацієнту протягом 4 днів або 5 днів з ударною 60 дозою, що складає від 900 мг до 1200 мг (наприклад, 900 мг або 1200 мг), на 1 день і зі звичайною дозою, що дорівнює від 600 мг до 800 мг (наприклад, 600 мг або 800 мг), один раз на день протягом періоду лікування, що залишився.
ІО123| У даному винаході можуть бути використані різні типи способів введення і вони докладно описані нижче в розділі під назвою "Способи введення".
І0124| У даному винаході можуть бути використані різні типи способів введення і вони докладно описані нижче в розділі під назвою "Способи введення". (0125) ІП. КОМБІНОВАНА ТЕРАПІЯ 0126) У способі або у фармацевтичній композиції за винаходом ефективна кількість може бути досягнута при використанні сполуки за даним винаходом (включаючи її фармацевтично прийнятну сіль або сольват (наприклад, гідрат)) окремо або в комбінації з додатковим придатним терапевтичним засобом, наприклад противірусним засобом або вакциною. Якщо використовується "комбінована терапія", то ефективна кількість може бути досягнута за допомогою першої кількості сполуки за винаходом і другої кількості додаткового придатного терапевтичного засобу (наприклад, противірусного агента або вакцини).
ІО127| У ще одному варіанті здійснення даного винаходу як сполуку за даним винаходом, так і додатковий терапевтичний засіб вводять в ефективній кількості (тобто кожне з них знаходиться в кількості, яка буде терапевтично ефективною при самостійному введенні). У ще одному варіанті здійснення як сполуку за даним винаходом, так і додатковий терапевтичний засіб вводять у кількості яка сама по собі не забезпечує терапевтичний ефект (субтерапевтична доза). У ще одному варіанті здійснення сполуку за даним винаходом можна вводити в ефективній кількості, а додатковий терапевтичний засіб вводять у субтерапевтичній дозі У ще одному варіанті здійснення сполуку за даним винаходом можна вводити в субтерапевтичній дозі, а додатковий терапевтичний засіб, наприклад придатний протираковий терапевтичний засіб, вводять в ефективній кількості. 0128) Використовувані у даному описі терміни "у комбінації" або "комбіноване введення" можуть бути використані взаємозамінно для позначення використання більше ніж одного медикаменту (наприклад, одного або більше профілактичних і/або терапевтичних засобів).
Використання термінів не обмежує порядок, у якому медикамент (наприклад, профілактичний і/або терапевтичний засіб) вводять індивіду.
Зо І0129| Спільне введення включає введення першої і другої кількості сполук для спільного введення, по суті, одночасно, наприклад в одній фармацевтичній композиції, наприклад у капсулі або таблетці, що має фіксоване співвідношення першої і другої кількості, або в декількох роздільних капсулах або таблетках для кожної з них. Крім того, таке спільне введення також включає використання кожної сполуки послідовно в будь-якому порядку.
ІО130| В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується способів комбінованої терапії для інгібування реплікації вірусу грипу в біологічних зразках або в організмі пацієнтів або для лікування або профілактики інфекцій, викликаних вірусом грипу, у пацієнтів, використовуючи сполуки, описані в даному документі. Відповідно, фармацевтичні композиції за даним винаходом також включають композиції, які містять інгібітор реплікації вірусу грипу за даним винаходом в комбінації з противірусною сполукою, що виявляє противірусну активність відносно вірусу грипу.
ІЇО131| Способи застосування сполук, описаних у даному документі, і композицій за винаходом також включають комбінацію хіміотерапевтичного засобу і сполуки або композиції за винаходом або комбінацію сполуки або композиції за даним винаходом з іншим противірусним засобом і вакцинацією проти вірусу грипу.
І0132| Якщо спільне введення включає роздільне введення першої кількості сполуки за винаходом і другої кількості додаткового терапевтичного засобу, то сполуки вводять достатньо близько у часі, щоб мати бажаний терапевтичний ефект. Наприклад, період часу між кожним введенням, що може привести до бажаного терапевтичного ефекту, може змінюватися від декількох хвилин до декількох годин і може бути визначений з урахуванням властивостей кожної сполуки, таких як сила, розчинність, біодоступність, період напіввиведення з плазми і кінетичний профіль. Наприклад, сполука за даним винаходом і другий лікарський засіб можуть бути введені в будь-якому порядку протягом 24 годин одне від одного, протягом 16 годин одне від одного, протягом 8 годин одне від одного, протягом 4 годин одне від одного, протягом 1 години одне від одного або протягом 30 хвилин одне від одного.
ІЇО133| Більш конкретно, першу терапію (наприклад, введення профілактичного або терапевтичного засобу, такого як сполука за винаходом) можна проводити до (наприклад, за 5 хвилин, 15 хвилин, 30 хвилин, 45 хвилин, 1 годину, 2 години, 4 години, 6 годин, 12 годин, 24 години, 48 годин, 72 годин, 96 годин, 1 тиждень, 2 тижні, З тижні, 4 тижні, 5 тижнів, б тижнів, 8 60 тижнів або 12 тижнів до), одночасно або після (наприклад, через 5 хвилин, 15 хвилин, 30 хвилин, 45 хвилин, 1 годину, 2 години, 4 години, 6 годин, 12 годин, 24 години, 48 годин, 72 годин, 96 годин, 1 тиждень, 2 тижні, З тижні, 4 тижні, 5 тижнів, б тижнів, 8 тижнів або через 12 тижнів після) проведення другої терапії (наприклад, введення профілактичного або терапевтичного засобу, такого як протираковий засіб) індивіду.
І0134| Зрозуміло, що спосіб спільного введення першої кількості сполуки за винаходом і другої кількості додаткового терапевтичного засобу може привести до посиленого або синергічного терапевтичного ефекту, причому об'єднаний ефект більше, ніж адитивний ефект, що міг би бути при роздільному введенні першої кількості сполуки за винаходом і другої кількості додаткового терапевтичного засобу. 01351) Використовуваний у даному описі термін "синергічний" стосується комбінації сполуки за винаходом й іншої терапії (наприклад, профілактичного або терапевтичного засобу), яка є більш ефективною, ніж адитивні ефекти терапії. Синергічний ефект комбінованої терапії (наприклад, комбінація профілактичних або терапевтичних засобів) може дозволити використовувати більш низькі дози одного або декількох медикаментів і/або рідше вводити зазначені медикаменти індивіду. Можливість використовувати більш низькі дози медикаменту (наприклад, профілактичного або терапевтичного засобу) і/або можливість рідше вводити зазначений медикамент може зменшити токсичність, пов'язану з введенням зазначеного медикаменту індивіду, без зниження ефективності зазначеного медикаменту для профілактики, контролю або лікування захворювання. Крім того, синергічний ефект може привести до підвищення ефективності агентів для профілактики, контролю або лікування захворювання.
Нарешті, завдяки синергічному ефекту комбінованої терапії (наприклад, комбінація профілактичних або терапевтичних засобів) можна уникнути або зменшити несприятливі або небажані побічні ефекти, пов'язані з застосуванням кожного з цих медикаментів самостійно.
ІЇО136| Коли комбінована терапія, що використовує сполуки за даним винаходом, знаходиться в комбінації з вакциною проти грипу, то обидва терапевтичних засоби можуть бути введені так, що проміжок часу між кожним введенням може бути більше (наприклад, декілька днів, тижнів або місяців).
І0137| Наявність синергічного ефекту можна визначити, використовуючи придатні способи оцінки лікарської взаємодії. Придатні способи включають в себе, наприклад, сигмоїдальне
Зо рівняння для обчислення максимальної ефективності (НоМога М.Н. апа 5сНеїіпег І.В., Сііп.
Рпаптасокіпеї. 6:429-453 (1981)), рівняння адитивності І оєуге (І оєуге 5. апа Миізсппек Н., Агсп.
Ехр. Раїної! Рнаптасої. 114:313-326 (1926)) і рівняння медіанного ефекту (Спои Т.С. апа Таіаіау
Р., Айм. Еплуте Неди. 22:27-55 (1984)) Кожне рівняння, зазначене вище, може використовуватися разом з експериментальними даними для одержання відповідного графіка для спрощення оцінки ефектів лікарської комбінації. Відповідні графіки, пов'язані з рівняннями, зазначеними вище, являють собою криву концентрація-ефект, криву ізоболограми і криву показника адитивності, відповідно.
ІО138) Конкретні приклади засобів, що можуть бути введені разом зі сполукою, описаною у даному документі, включають інгібітори нейрамінідази, такі як озельтамівір (ТатійцФ)) і занамівір (КІеплафФ), вірусний іонний канал (білок М2), блокатори, такі як амантадин (Зуттеїгек?) і ремантадин (РіІштадіпеФф)), і противірусні препарати, описані в МО 2003/015798, включаючи Т- 705 у стадії розробки від Тоуата Спетісаї, Японія (див. також Кигшїа еї аї., Апіїміга! Кезеагсі, 82: 95-102 (2009), "Т-705 (Памірігамії) апа геіаївй сотроипав5: Момеї! Бгоаа-5ресітит іппіріютв ої
КМА міга! іп'есіоп5"). У деяких варіантах здійснення сполуки, описані в даному документі, можуть бути введені разом зі звичайною вакциною проти грипу.
І0139| У деяких варіантах здійснення сполуки, описані в даному документі (наприклад
Сполука (1) і її фармацевтично прийнятні солі, такі як Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20,
Форма Е солі НСІ Сполуки (1)хЗ3НгО, Форма О солі НСІ Сполуки (1), Форма А Сполуки (1), Форма
В Сполуки (1) і Форма А тозилату Сполуки (1)), можуть бути введені разом із занамівіром. У деяких варіантах здійснення сполуки, описані в даному документі, можуть бути введені разом із флавіпіравіром (Т-705). У деяких варіантах здійснення сполуки, описані в даному документі, можуть бути введені разом з озельтамівіром. У деяких варіантах здійснення сполуки, описані в даному документі, можуть бути введені разом з амантадином або римантадином. Озельтамівір може бути введений за схемою прийому згідно з його інструкцією. У деяких конкретних варіантах його вводять по 75 мг два рази на день або 150 мг один раз на день. (0140) Фармацевтичні композиції
ЇО141| Сполуки, описані в даному документі, можуть бути включені до складу фармацевтичних композицій, які додатково містять фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, ад'ювант або носій. В одному з варіантів здійснення винахід стосується бо фармацевтичної композиції яка містить сполуку за винаходом, як описано вище, і фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, ад'ювант або носій. В одному з варіантів здійснення даний винахід стосується фармацевтичної композиції, яка містить ефективну кількість сполуки за даним винаходом або її фармацевтично прийнятної солі і фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, ад'ювант або носій. Фармацевтично прийнятні носії включають, наприклад, фармацевтичні розріджувачі, ексципієнти або носії, вибрані придатним чином відносно передбачуваної форми введення і відповідно до звичайної фармацевтичної практики. (0142) "Ефективна кількість" включає "терапевтично ефективну кількість" і "профілактично ефективну кількість". Термін "терапевтично ефективна кількість" стосується кількості, ефективної для лікування і/або зменшення інфекції, викликаної вірусом грипу, у пацієнтів, інфікованих грипом. Термін "профілактично ефективна кількість" стосується кількості, ефективної для профілактики і/або суттєвого зменшення імовірності або розміру спалаху інфекції, викликаної вірусом грипу. Конкретні приклади ефективних кількостей описані вище в розділі, озаглавленому "Застосування розкритих сполук". (0143) Фармацевтично прийнятний носій може містити інертні інгредієнти, які надмірно не перешкоджають біологічній активності сполук. Фармацевтично прийнятні носії повинні бути біологічно сумісними, наприклад бути нетоксичними, не викликати запалення, бути неімуногенними або не мати інші небажані реакції або побічні ефекти при введенні індивіду.
Можна використовувати стандартні методики одержання фармацевтичних сполук.
І0144| Фармацевтично прийнятний носій, ад'ювант або носій, як використовується в даному документі, включає в себе будь-який і кожен розчинник, розріджувач або інший рідкий носій, що сприяє диспергуванню або суспендуванню, поверхнево-активні речовини, ізотонічні речовини, агенти ущільнення або емульгуючі агенти, консерванти, тверді зв'язувальні агенти, мастильні речовини тощо, як придатно для конкретної бажаної лікарської форми. У Ветіпдіоп'5
Ріпаптасецшііса! бсіепсевз, Біхіеепій Еайіоп, Е. МУ. Мапйіп (Маск Рибіїзпіпу Со., Еазіюп, Ра., 1980), описані різні носії, використовувані для одержання складів фармацевтичних композицій, і відомі методики їх одержання. За винятком тих випадків, коли звичайне середовище носія є несумісним зі сполуками, розкритими в даному описі, наприклад шляхом створення якого- небудь небажаного біологічного ефекту або іншим способом роблячи шкідливий вплив на будь- який інший компоненті) фармацевтично прийнятної композиції, його застосування
Зо розглядається в межах обсягу даного винаходу. Як використовується в даному документі фраза "побічні ефекти" включає в себе небажані і несприятливі ефекти терапії (наприклад, профілактичного або терапевтичного засобу). Побічні ефекти завжди є небажаними, але небажані ефекти не обов'язково роблять негативну дію. Побічний ефект терапії (наприклад, профілактичного або терапевтичного засобу) може бути або шкідливим, або дискомфортним, або викликати ризик. Побічні ефекти включають, але ними не обмежуються, пропасницю, озноб, летаргію, інтоксикацію шлунково-кишкового тракту (включаючи шлункові і кишкові виразки й ерозії), нудоту, блювання, нейротоксичність, гепатотоксичність, ниркову токсичність (включаючи такі стани як хронічний інтерстиціальний нефрит, папілярний некроз), гепатотоксичність (включаючи підвищення печінкових ферментів у сироватці), мієлотоксичність (у тому числі лейкопенію і мієлосупресію, тромбоцитопенію, анемію), сухість у роті, металевий смак, збільшення гестаційного періоду, слабкість, сонливість, біль (у тому числі болі в м'язах, кістах і головні болі), випадання волосся, астенію, запаморочення, екстрапірамідальні симптоми, акатизію, серцево-судинні розлади і сексуальну дисфункцію. (0145) Деякі приклади речовин, які можуть служити фармацевтично прийнятними носіями, включають, але ними не обмежуються, іонообмінні речовини, оксид алюмінію, стеарат алюмінію, лецитин, білки сироватки (наприклад, сироватковий альбумін людини), буферні речовин (наприклад, Тм'ееп 80, фосфати, сорбінова кислота або сорбат калію), суміші часткових гліцеридів насичених жирних кислот рослинного походження, воду, солі або електроліти (наприклад, протаміну сульфат, динатрію гідрофосфат, калію гідрофосфат, хлорид натрію або цинкові солі), колоїдний кремнезем, магнію трисилікат, полівінілпіролідон, поліакрилати, воски, блок-полімери поліетилену-поліоксипропілену, метилцелюлозу, гідроксипропілметилцелюлозу, жир шерсті, цукри, такі як лактоза, глюкоза і сахароза; крохмаль, такий як кукурудзяний крохмаль і картопляний крохмаль; целюлозу і її похідні, такі як натрію карбоксиметилцелюлоза, етилцелюлоза і целюлози ацетат; порошкоподібний трагант; солод; желатин; тальк; наповнювачі, такі як масло какао і воски для супозиторіїв; олії, такі як арахісова олія, бавовняна олія; сафлорова олія; кунжутна олія; оливкова олія; кукурудзяна олія і соєва олія; гліколі, такі як пропіленгліколь або поліетиленгліколь; ефіри, такі як етилолеагт і етиллаурат; агар; буферні агенти, такі як гідроксид магнію й алюмінію гідроксид; альгінову кислоту; апірогенну воду; ізотонічний сольовий розчин; розчин Рінгера; етиловий спирт і бо фосфатні буферні розчини, а також інші нетоксичні сумісні мастильні речовини, такі як натрію лаурилсульфат і магнію стеарат, а також барвники, агенти вивільнення, агенти покриття, підсолоджувачі, ароматизотори й віддушки, консерванти й антиоксиданти також можуть бути представлені в композиції, відповідно до рішення укладача. (0146) ІМ. СПОСОБИ ВВЕДЕННЯ
І0147| Сполуки і їх фармацевтично прийнятні композиції, описані вище, можуть бути введені людині й іншим тваринам перорально, ректально, парентерально, інтрацистернально, інтравагінально, внутрішньоочеревинно, місцево (у вигляді порошків, мазей або крапель), трансбукально, у вигляді перорального або назального спрею тощо, залежно від тяжкості інфекції, що підлягає лікуванню.
ІО148| Рідкі лікарські форми для перорального введення включають фармацевтично прийнятні емульсії, мікроемульсії, розчини, суспензії, сиропи й еліксири. Крім активних сполук рідкі лікарські форми можуть містити інертні розріджувачі, звичайно використовувані в рівні техніки, наприклад, такі як вода або інші розчинники, солюбілізуючі агенти і емульгатори, такі як етиловий спирт, ізопропіловий спирт, етилкарбонат, етилацетат, бензиловий спирт, бензилбензоат, пропіленгліколь, 1,3-бутиленгліколь, диметилформамід, олії (зокрема, бавовняна, арахісова, кукурудзяна, олія зародків пшениці, оливкова, касторова і кунжутна олія), гліцерин, тетрагідрофуриловий спирт, поліетиленгліколі і складні ефіри жирних кислот і сорбітану, а також їх суміші. Крім інертних розріджувачів, композиції для перорального застосування можуть додатково включати допоміжні речовини, такі як зволожувачі, емульгатори і суспендуючі агенти, підсолоджувачі, смакові добавки й ароматизуючі агенти.
І0149| Препарати для ін'єкцій, наприклад стерильні ін'єктовані водні або маслянисті суспензії, можуть бути одержані відповідно до інформації рівня техніки, використовуючи придатні диспергуючі або змочувальні агенти і суспендуючі агенти. Стерильний препарат для ін'єкцій може також бути стерильним ін'єктованим розчином, суспензією або емульсією в нетоксичному розріджувачі або розчиннику, прийнятному для парентерального введення, наприклад у вигляді розчину в 1,3-бутандіолі. Серед прийнятних носіїв і розчинників, які можуть бути використані, можна указати воду, розчин Рінгера, Ш.5.Р і ізотонічний розчин хлориду натрію. Крім того, як розчинник або суспендуюче середовище звичайно використовують стерильні нелеткі масла. Для цієї мети може бути використана будь-яке нелетке масло,
Зо включаючи синтетичні моно- або дигліцериди. Крім того, для одержання препаратів для ін'єкцій використовуються жирні кислоти, такі як олеїнова кислота.
ІЇО150| Склади для ін'єкцій можуть бути стерилізовані, наприклад, фільтрацією через затримуючий бактерії фільтр або введенням стерилізуючих агентів у формі стерильних твердих композицій, які можуть бути розчинені або дисперговані в стерильній воді або в деяких інших стерильних середовищах для ін'єкцій перед застосуванням.
ІО151| Для пролонгації ефекту сполуки, описаної в даному документі, часто бажано уповільнити абсорбцію сполуки після підшкірної або внутрішньом'язової ін'єкції. Це може бути досягнуто за рахунок використання рідкої суспензії кристалічної або аморфної речовини з поганою розчинністю у воді. Швидкість абсорбції сполуки тоді залежить від швидкості її розчинення, що, у свою чергу, може залежати від розміру кристалів і кристалічної форми.
Альтернативно, уповільнення абсорбції парентерально введеної сполуки досягається за допомогою розчинення або суспендування сполуки в масляному носії. Ін'єкційні депо-форми одержують шляхом формування мікроінкапсулюючих матриць сполуки в біодеградовних полімерах, таких як полілактид-полігліколід. Залежно від співвідношення сполуки і полімеру, а також природи конкретного використовуваного полімеру, швидкість вивільнення сполуки можна контролювати. Приклади інших полімерів, що піддаються біологічному розкладанню, включають полі(ортоефіри) і полі(ангідриди). Депо-форми складів для ін'єкцій також одержують шляхом включення сполуки в ліпосоми або мікроемульсії, що сумісні з тканинами організму. 0152) Композиції для ректального або вагінального введення являють собою специфічні супозиторії, які можуть бути одержані шляхом змішування описаних у даному документі сполук із придатними неподразнюючими ексципієнтами або носіями, такими як масло какао, поліетиленгліколь або віск для супозиторіїв, що є твердими при температурі навколишнього середовища, але рідкими при температурі тіла, і тому розплавляються в прямій кишці або вагінальній порожнини і вивільняють активну сполуку.
І01531| Тверді лікарські форми для перорального введення включають капсули, таблетки, пігулки, порошки і гранули. У таких твердих лікарських формах активну сполуку змішують щонайменше з одним інертним, фармацевтично прийнятним ексципієнтом або носієм, таким як цитрат натрію або дикальцію фосфат і/або а) наповнювачі або сухі розріджувачі, такі як крохмалі, лактоза, сахароза, глюкоза, маніт і кремнієва кислота, Б) зв'язувальні речовини, такі 60 як, наприклад, карбоксиметилцелюлоза, альгінати, желатин, полівінілпіролідон, сахароза і гуміарабік, с) зволожувачі, такі як гліцерин, а) дезінтегруючі агенти, такі як агар-агар, карбонат кальцію, картопляний крохмаль або крохмаль з тапіоки, альгінова кислота, деякі силікати і карбонат натрію, е) агенти, що уповільнюють розчинення, такі як парафін, ї) прискорювачі абсорбції, такі як четвертинні амонієві сполуки, 9) змочувальні агенти, такі як, наприклад, цетиловий спирт і гліцерину моностеарат, І) абсорбенти, такі як каолін і бентонітова глина, і і) мастильні речовини, такі як тальк, стеарат кальцію, стеарат магнію, тверді поліетиленгліколі, лаурилсульфат натрію і їх суміші. У випадку капсул, таблеток і пігулок, дозована форма може додатково містити буферні агенти. 01541 Крім того, тверді композиції подібного типу можуть використовуватися як наповнювачі у м'яких і твердих желатинових капсулах, використовуючи ексципієнти, такі як лактоза або молочний цукор, а також високомолекулярні поліетиленгліколі тощо. Тверді дозовані форми таблеток, драже, капсул, пігулок і гранул можуть бути одержані з покриттями й оболонками, такими як ентеросолюбільні покриття й інші покриття, добре відомі в галузі фармацевтичних препаратів. Вони можуть необов'язково містити замутнювачі і можуть являти собою композиції, що вивільняють активнийіі) інгредієнт(и) тільки або переважно у визначеній частині шлунково- кишкового тракту, необов'язково, в уповільненій формі. Приклади інкапсульованих композицій, які можуть використовуватися, включають полімерні речовини і воски. Крім того, тверді композиції подібного типу можуть використовуватися як наповнювачі у м'яких і твердих желатинових капсулах, використовуючи такі ексципієнти як лактоза або молочний цукор, а також високомолекулярні поліетиленгліколі тощо. (0155) Крім того, активний інгредієнт може знаходитися в мікроінкапсульованій формі з одним або декількома вищевказаними ексципієнтами. Тверді лікарські форми, такі як таблетки, драже, капсули, пігулки і гранули, можуть бути одержані з покриттям і оболонками, такими як кишковорозчинні покриття й інші види покриття, контролюючі вивільнення, добре відомі в галузі фармацевтичних препаратів. У таких твердих лікарських формах активна сполука може бути змішана принаймні з одним інертним розріджувачем, таким як сахароза, лактоза або крохмаль.
Такі лікарські форми можуть також включати, як і в звичайній практиці, додаткові речовини, відмінні від інертних розріджувачів, наприклад мастильні речовини для таблетування й інші допоміжні агенти для таблетування, такі як стеарат магнію і мікрокристалічна целюлоза. У
Зо випадку капсул, таблеток і пігулок, лікарські форми можуть додатково містити буферні агенти.
Вони можуть необов'язково містити замутнювачі і можуть являти собою композиції, що вивільняють активний) інгредієнт(и) тільки або переважно у визначеній частині шлунково- кишкового тракту, необов'язково, в уповільненій формі. Приклади інкапсульованих композицій, що можуть використовуватися, включають полімерні речовини і воски. 0156) Лікарські форми для місцевого або трансдермального введення сполуки, описаної в даному документі, включають мазі, пасти, креми, лосьйони, гелі, порошки, розчини, спреї, інгалятори або пластири. Активний компонент може бути змішаний у стерильних умовах з фармацевтично прийнятним носієм і будь-якими консервантами або агентами, що будуть необхідні. Офтальмологічні склади, вушні краплі й очні краплі також входять у рамки даного винаходу. Крім того, даний винахід передбачає застосування трансдермальних пластирів, що мають додаткову перевагу, забезпечуючи контрольовану доставку сполуки в організм. Такі лікарські форми можуть бути одержані шляхом розчинення або диспергування сполуки у відповідному середовищі. Додатково можуть застосовуватися прискорювачі абсорбції, щоб збільшити надходження сполуки через шкіру. Швидкість можна контролювати або за допомогою контролюючої швидкість мембрани, або диспергуючи сполуку в полімерній матриці або гелі.
ІО157| Композиції, розкриті в даному описі, можуть бути введені перорально, парентерально, шляхом інгаляції, місцево, ректально, назально, трансбукально, вагінально або через імплантований резервуар. Термін "парентеральний", використовуваний у даному документі, включає, але не обмежуючись ними, підшкірну, внутрішньовенну, внутрішньом'язову, внутрішньосуглобову, внутрішньосиновіальну, внутрішньогруднинну, інтратекальну, внутрішньопечінкову, внутрішньоосередкову і внутрішньочерепну ін'єкцію або інфузію. Зокрема, композиції вводять перорально, внутрішньоочеревинно або внутрішньовенно.
І0158| Стерильними ін'єкційними формами композицій, описаних у даному документі, можуть бути водна або масляна суспензія. Ці суспензії можуть бути приготовлені відповідно до методик, відомими в даній галузі, використовуючи придатні диспергуючі або змочувальні агенти і суспендуючі агенти. Стерильний ін'єкційний склад також може бути стерильним ін'єкційним розчином або суспензією в нетоксичному парентерально прийнятному розріджувачі або розчиннику, наприклад у вигляді розчину в 1,3-бутандіолі Серед прийнятних носіїв і розчинників, що можуть бути використані, можна указати воду, розчин Рінгера і ізотонічний бо розчин хлориду натрію. Крім того, як розчинник або суспендуюче середовище звичайно використовують стерильні нелеткі масла. З цією метою може бути використане будь-яке нелетке масло, включаючи синтетичні моно- або дигліцериди. Жирні кислоти, такі як олеїнова кислота і її гліцеридні похідні, можуть використовуватися для одержання препаратів для ін'єкцій, такі як природні фармацевтично прийнятні олії, такі як оливкова олія або касторова олія, особливо їх поліоксіетиловані варіанти. Ці масляні розчини або суспензії можуть також містити спиртовий розріджувач з довгим ланцюгом або диспергуючий агент, такий як карбоксиметилцелюлоза або подібні диспергуючі агенти, що звичайно використовуються при одержанні фармацевтично прийнятних лікарських форм, включаючи емульсії і суспензії. Інші звичайно використовувані поверхнево-активні речовини, такі як Ту'ееп, Зрап і інші емульгуючі агенти або підсилювачі біодоступності, звичайно використовувані для одержання фармацевтично прийнятних твердих, рідких або інших лікарських форм, також можуть бути використані для цілей одержання. 0159) Фармацевтичні композиції, розкриті в даному описі, можуть бути введені перорально в будь-якій перорально прийнятній лікарській формі, включаючи, але ними не обмежуючись, капсули, таблетки, водні суспензії або розчини. У випадку таблеток для перорального застосування звичайно використовувані носії включають, але ними не обмежуються, лактозу і кукурудзяний крохмаль. Також звичайно додають мастильні речовини, такі як стеарат магнію.
Для перорального введення у формі капсул придатні розріджувачі включають лактозу і висушений кукурудзяний крохмаль. Якщо для перорального застосування вимагаються водні суспензії, то активний інгредієнт об'єднують з емульгуючими і суспендуючими агентами. При бажанні також можуть бути додані визначені підсолоджувачі, ароматизатори або барвники. (0160) Альтернативно, фармацевтичні композиції, описані в даному документі, можуть бути введені у формі супозиторіїв для ректального введення. Вони можуть бути одержані шляхом змішування агента з придатним неподразнюючим ексципієнтом, що є твердим при кімнатній температурі, але рідким при ректальній температурі, і, отже, буде плавитися в прямій кишці з вивільненням лікарського засобу. Такі речовини включають, але ними не обмежуються, масло какао, бджолиний віск і поліетиленгліколі.
ІЇО161| Фармацевтичні композиції описані в даному документі, також можуть застосовуватися місцево, особливо, якщо метою лікування є ділянки або органи, легкодоступні для місцевого нанесення, включаючи хвороби очей, шкіри або нижньої частини кишечнику.
Придатні склади для місцевого застосування можуть бути легко одержані для кожної з цих ділянок або органів. (0162) Місцеве застосування для нижнього відділу кишечнику може бути здійснене у вигляді ректальних супозиторіїв (дивіться вище) або у вигляді придатного складу для клізми. Також можуть бути використані місцеві трансдермальні пластири.
ІО163| Для місцевого застосування фармацевтичні композиції можуть бути одержані у вигляді придатної мазі, яка містить активну речовину, суспендовану або розчинену в одному або декількох носіях. Носії для місцевого застосування сполук за даним винаходом включають, але ними не обмежуються, мінеральне масло, рідкий вазелін, білий вазелін, пропіленгліколь, поліоксіетилен, поліоксипропілен, емульгуючий віск і воду. Альтернативно, фармацевтичні композиції можуть бути одержані у вигляді придатного лосьйону або крему, що містить активні компоненти, суспендовані або розчинені в одному або більше фармацевтично прийнятними носіях. Придатні носії включають, але ними не обмежуються, мінеральне масло, сорбітанмоностеарат, полісорбат 60, цетилові ефіри воску, цетеариловий спирт, 2- октилдодеканол, бензиловий спирт і воду. 0164 Для офтальмологічного застосування фармацевтичні композиції можуть бути одержані у вигляді мікронізованих суспензій у ізотонічному стерильному фізіологічному розчині з встановленим рН або, зокрема, у вигляді розчинів у ізотонічному стерильному фізіологічному розчині з встановленим рН разом або без консерванту, такого як хлорид бензалконію.
Альтернативно, для офтальмологічного застосування фармацевтичні композиції можуть бути одержані у вигляді мазі, такої як вазелін.
ІО165| Фармацевтичні композиції можуть бути також введені за допомогою назального аерозолю або інгаляції. Такі композиції одержують відповідно до методик, добре відомих в галузі фармацевтичних складів, і можуть бути одержані у вигляді розчинів у фізіологічному розчині, використовуючи бензиловий спирт або інші придатні консерванти, прискорювачі абсорбції для підвищення біодоступності, фторвуглеці і/або інші звичайні солюбілізуючі або диспергуючі агенти. 0166) Сполуки для застосування в способах за винаходом можуть бути одержані у вигляді стандартної лікарської форми. Термін "одинична дозована форма" стосується фізично 60 дискретних одиниць, придатних як одиничні дози для індивідів, що проходять лікування,
причому кожна одиниця містить попередньо визначену кількість активної речовини, розраховану на одержання бажаного терапевтичного ефекту, необов'язково, у сполученні з придатним фармацевтичним носієм. Стандартна лікарська форма може бути однією добовою дозою або однією з множини добових доз (наприклад, від 1 до 4 або більше разів на день). Якщо використовуються множина добових доз, то стандартна лікарська форма може бути однаковою або різною для кожної дози.
І0167| М. ПРИКЛАДИ 01681) Приклад 1. Загальні способи ХЕРО, вимірювання С": твердотільної ЯМР, О5С 0169) Термогравіметричний аналіз (ТГА) (0170) Термогравіметричний аналіз (ТГА) проводили на ТА приладі для ТОА, модель 2500
Аз5еї Тад М014840. Твердий зразок вміщували у ванночку для платинового зразка і нагрівали при 10 "С/хв. до 300 "С від кімнатної температури. 0171) Вимірювання О5С
І0172| Диференціальну скануючу калориметрію (0552) проводили на приладі Тад МО15553
ТА рБС 0200 Авзеї. Приблизно 1-2 мг твердого зразка вміщували в алюмінієву герметично закриту ванночку для Ю5С з рифленою кришкою з отвором. Клітинний зразок, як правило, нагрівають при продуванні азоту. (0173) Експериментальна 55ММК
ІО174| Спектри твердотільної ядерно-магнітної спектроскопії (З5ММЕК) одержували на
ВгикКе!-Віозріп 400 МГц Адмапсе Ш їз широким спектрометром, оснащеним зондом Вгикег-
Віобріп 4 мм НЕХ. Зразки були упаковані в ротори 4 мм 7702 (приблизно 70 мг або менше, залежно від наявності зразка). Була використана швидкість обертання під магічним кутом (МА5), що звичайно дорівнює 12,5 кГц. Температура головки зонда була встановлена на 275К, щоб звести до мінімуму вплив фрикційного нагрівання під час обертання. Час протонної релаксації вимірювали за допомогою експерименту по відновленню насичення по релаксації "Н-
МАБ5 Ті для того, щоб установити правильну рециркуляційну затримку в експерименті з 730 крос-поляризацією (СР) МА5Б. Відновлення насичення в експерименті "б СРМАБ5 установлювали принаймні в 1,2 разу довше, ніж виміряний час релаксації "Н Ті, для максимального збільшення співвідношення сигнал вуглецю-шум у спектрі. Час контактування
Зо СР в експерименті С СРМАБ був встановлений на 2 мс. Використовували СР протонний імпульс з лінійною характеристикою (від 50 до 100 95). Умову Хартмана-Хана оптимізували на зовнішньому еталонному зразку (гліцин). Спектри фтору були одержані, використовуючи установку МА5 з незв'язаними протонами і повтореною затримкою, установленою приблизно в 5 разів від виміряного часу релаксації "РЕ Ту. Час релаксації фтору вимірювали за допомогою експерименту по відновленню насичення по релаксації незв'язаного протона ""Е-МА5 Ті.
Обидва спектри вуглецю і фтору були одержані за допомогою 5РІМАЇ64. Розділення використовували з напруженістю поля близько 100 кГц. Хімічний зсув був протиставлений зовнішньому стандарту адамантану з резонансом, спрямованим в область сильного поля, що дорівнює 29,5 проміле.
Ї0175| Докладний опис експерименту ВгиКег 08 бізсомег ХКРО
І0176)| Параметри рентгенівської порошкової дифрації (ХКРО) одержували при кімнатній температурі в режимі відбиття, використовуючи дифрактометр ВгиКег Ю8 різсомег (Авзеї Тад
У012842), оснащений герметизованою пробіркою з джерелом і з виявлювачем Ні-єїаг (ВгиКег
АХ5, Мадізоп, УМ). Генератор рентгенівського випромінювання працював при напрузі 40 кВ і струмі 35 мА. Зразок порошку вміщували в алюмінієвий тримач. Два кадри були зареєстровані з часом експозиції 120 с кожний. Дані потім були інтегровані в діапазоні від 4,57-397 28 з розміром кроку 0,027 і об'єднані в один неперервний параметр.
І0177| Приклад 2. Одержання Сполуки (1) і сольвату 2-МеТНЕ Сполуки (1) 0178) Сполука (1) може бути одержана, як описано в УМО 2010/148197. Наприклад, аморфну вільну основу Сполуки (1) одержували відповідно до УМО 2010/148197, а потім за допомогою звичайного хірального розділення й очищення: ЗСЕ хіральна хроматографія з модифікатором, що включає ЕСБМН (який утворював сіль ЕСМН Сполуки (1)), а потім обробка іонообмінною смолою. Дані ХКРО показані в Таблиці 11. Альтернативно, Сполука (1) може бути одержана за допомогою наступних методик як сольват 2-МеТНЕ.
І0179| Одержання Сполуки га (2-аміно-3-бром-5-фторпіридин) сс Ве, НВг Су ВЕ мм, М осМмн,
Та 2а
ІО180)| До суспензії 2-аміно-5-фторпіридину (6 кг, 53,6 моль) у воді (24 л) при 14 "С додавали протягом 10 хвилин 48595 бромистоводневу кислоту (18,5 кг, 110 моль). Реакція була екзотермічною і температура піднімалася до 24 "С. Суміш повторно охолоджували до 12 "с, потім додавали дев'ять порцій брому (9 кг, 56,3 моль) протягом 50 хвилин (екзотермічна реакція, підтримують при 20 7"С). Суміш перемішували при 22 "С протягом ночі і контролювали за допомогою ЯМР аліквоти з погашеною реакцією (гасять 5 краплями в суміш 1 мл 20 95 К»2СОз, 0,3 мл 1095 Маг52Оз і 0,7 мл ОСМ). Органічний шар упарювали й аналізували. Суміш охолоджували до 10 "С, потім гасили додаванням бісульфіту натрію (560 г, 5,4 моль) у воді (2 л) і потім охолоджували до 0 "С. Цю суміш додавали в холодну суміш (-4 "С) ОСМ (18 л) і 5,4М гідроксиду натрію (35 л, 189 моль). Порцію на дні 435 л фільтрували через подушку з Целіту, і потім утворювався фазовий розрив. Водний шар повторно екстрагували ОСМ (10 л). Органічні шари фільтрували через подушку з З кг магнезолу, промивали ОСМ (8 л). Фільтрат упарювали, розтирали в порошок з гексаном і фільтрували.
ІО0181| Незважаючи на те, що аналіз у ході процесу вказав на 97 95 завершення, цей початковий продукт усіх чотирьох пробігів, як правило, містив 10 95 5М. Його об'єднували і розтирали в гексані (2 л на кг речовини) при 50 "С, а потім охолоджували до 15 "С і фільтрували з одержанням Сполуки 2а (30,0 кг, 9595 чистота, 149 моль, 67 965). Маточні розчини початкового розтирання і повторного очищення хроматографували (20 кг силікагелю, елюент 25-50 96 ЕОАс у гексані) з одержанням додаткової Сполуки 2а (4,7 кг, 799 95 чистота, 24,4 моль, 11 Об).
І0182)| Одержання Сполуки За , «ТМ5 дек ит шк ТМ Е ДЕ.
Я пттттттттттттсттссссод в: ц ще Си, Ра кат. на
М Мне М см 2а За
І0183) В інертний 400-л реактор вміщували Сполуку 2а (27,5 кг, чистота 96 95, 138 моль),
РАІ(РРз)4 (1044 г, 0,90 моль) і Си! (165 г, 0,87 моль), а потім толуол (90 кг). Суміш знекиснювали трьома циклами вакуум-азот, а потім додавали триетиламін (19,0 кг, 188 моль). Суміш знекиснювали ще одним циклом вакуум-азот, потім додавали ТМ5-ацетилен (16,5 кг, 168 моль).
Суміш нагрівали до 48 "С протягом 23 годин (початкова екзотермічна реакції підвищувала температуру максимально до 53 "С), потім охолоджували до 18 "С. Суспензію фільтрували через подушку із Целіту і промивали толуолом (8 кг). Фільтрат промивали 12 95 МагНРО» (75 л),
Зо потім фільтрували через подушку із силікагелю (25 кг), промивали 1:1 гексан:МТВЕ (120 л). Цей фільтрат упарювали до коричневого масла, а потім розчиняли в ММР для наступної стадії. Маса розчину Сполуки За була 58 кг, 50 мас. 95, 138 моль, 100 95. "Н-ЯМР (СОСІіз, 300 МГц): б 7,90 (с, 1Н), 7,33-7,27 (м, 1Н), 4,92 (с, МН»), 0,28 (с, 9Н) м.ч.
І0184)| Одержання Сполуки 4
І дет ОКО вол л а 23 тес МО зв За 4а 01851 В інертний 400-л реактор вміщували трет-бутоксид калію (17,5 кг, 156 моль) і ММР (45 кг). Суміш нагрівали до 54 "С, потім додавали розчин Сполуки За (29 кг, 138 моль) у ММР (38 кг) протягом 2,75 години і промивали ММР (6 кг) (екзотермічна реакція, підтримували при 70-77 7С).
Реакційну суміш перемішували при 74 "С протягом 2 годин, потім охолоджували до З30сС і додавали розчин тозилхлориду (28,5 кг, 150 моль) у ММР (30 кг) протягом 1,5 години і промивали з ММР (4 кг). Реакція була екзотермічною і її підтримували на рівні 30-43 "С.
Реакційну суміш перемішували протягом 1 години при охолодженні до 20 "С, потім додавали воду (220 л) протягом 35 хвилин (екзотермічна реакція, підтримували при 18-23 7С). Суміш перемішували при 20 "С протягом 30 хв., потім фільтрували і промивали водою (100 л). Тверді продукти відфільтровували за допомогою ОСІМ (250 кг), відділяли від залишкової води, і органічні речовини фільтрували через подушку з магнезолу (15 кг, зверху) і силікагелю (15 кг, знизу), промиваючи додатковою кількістю ОСІМ (280 кг). Фільтрат концентрували до густої суспензії (7 об'єм 50 л), потім додавали МТВЕ (30 кг), продовжуючи дистиляцію при постійному об'ємі (кінцева температура дистиляту дорівнює 51 "С). Додавали додаткову кількість МТВЕ (10 кг) Її суспензію охолоджували до 15 "С, фільтрували і промивали МТВЕ (40 л), одержуючи
Сполуку 4а (19,13 кг, чистота 95 95, 62,6 моль, 45 95). Часткова концентрація фільтрату давала другу порцію (2,55 кг, чистота 91 95, 8,0 моль, 6 95). "Н-'ЯМР (СОСіз, 300 МГц): б 8,28-8,27 (м, 1Н), 8,06-8,02 (м, 2Н), 7,77 (д, 9-4,0 Гу, 1Н), 7,54-7,50 (м, 1Н), 7,28-7,26 (м, 2Н), 6,56 (д, 9-40 Гц, 1Н), 2,37 (с, ЗН) м.ч. 0186) Одержання Сполуки 5а р ма5 й ши ху Ен
ТД -н--оофтУ
ЗМ х Ко --м 5 М тТ5 да За
ІО187| У суспензію М-бромсукциніміду (14,16 кг, 79,6 моль) у ОСМ (30 кг) при температурі 15"7С вміщували розчин Сполуки 4а (19,13 кг, чистота 95 9б, і 2,86 кг, чистота 91 95, 71,6 моль) у
ОСМ (115 кг), промиваючи в ОСМ (20 кг). Суміш перемішували при 25 "С протягом 18 годин, а потім охолоджували до 9 "С і гасили, додаючи розчин тіосульфату натрію (400 г) і 50 95 розчин гідроксиду натрію (9,1 кг) у воді (130 л). Суміш нагрівали до 20 "С і шари розділяли, і органічні шари промивали 12595 сольовим розчином (40 л). Водні шари послідовно повторно екстрагували ОСМ (4х50 кг). Органічні речовини об'єднували і 40 л дистилювали до азеотропної води, потім розчин фільтрували через подушку із силікагелю (15 кг, знизу) і магнезолу (15 кг, зверху), промиваючи ОСМ (180 кг). Фільтрат концентрували до густої суспензії (х об'єм 32 л), потім додавали гексан (15 кг). Додавали додаткову кількість гексану (15 кг), продовжуючи дистиляцію при постійному об'ємі (кінцева температура дистиляту 5270). Суспензію охолоджували до 16 "С, фільтрували і промивали гексаном (25 кг) з одержанням Сполуки 5а (25,6 кг, 69,3 моль 97 95). "Н-ЯМР (СОСІіз, 300 МГц): б 8,34-8,33 (м, 1Н), 8,07 (д, 9-8,2Гц, 2Н), 7,85 (с, 1Н), 7,52-7,49 (м, 1Н), 7,32-7,28 (м, 2Н), 2,40 (с, ЗН) м.ч.
І0188) Одержання Сполуки ба: реакція ВЕЕТАЇ
Ве ря
ЕХ ня Вріп)», КОАс о, ї Вій У (Вріп)» в'о
МТМ 00 РО(РРНХ ра ден ва м, ба
ІЇО189| В інертний 400-л реактор вміщували Сполуку 5Ба (25,6 кг, 69,3 моль), біс(пінаколато)диборон (19 кг, 74,8 моль), ацетат калію (19 кг, 194 моль), ацетат паладію (156 г, 0,69 моль) і трифенілфосфін (564 г, 2,15 моль), а потім діоксан (172 кг), який був окремо знекиснений з використанням циклів вакуум-азот (х3). Суміш перемішували й знекиснювали, використовуючи цикли вакуум-азот (х2), а потім нагрівали до 100 "С протягом 15 годин. Суміш
Зо охолоджували до 35 "С, потім фільтрували, промивали 30"С ТНЕ (до 75 кг). Фільтрат упарювали і залишок розчиняли в ОСМ (90 л). Розчин перемішували разом з 1 кг вуглецю і 2 кг магнезолу протягом 45 хв., потім фільтрували через подушку із силікагелю (22 кг, знизу) і магнезолу (10 кг, зверху), промиваючи ОСМ (160 кг). Фільтрат концентрували до густої суспензії (7 об'єм 40 л), потім розтирали в порошок при температурі 35 "С і додавали гексан (26 кг).
Суспензію охолоджували до 20 "С, фільтрували і промивали сумішшю ОСМ (5,3 кг) і гексану (15 кг), а потім гексаном (15 кг) і сушили в атмосфері азоту на фільтрі з одержанням Сполуки ба (23,31 кг, 56,0 моль, 81 95) у вигляді білої твердої речовини. "Н-ЯМР відповідає цільовому продукту, ВЕРХ 99,5 95, аналіз з паладієм 2 проміле. "Н-ЯМР (СОСІз, 300 МГц): б 8,25 (с, 1Н), 8,18 (с, 1Н), 8,09-8,02 (м, 2Н), 7,91-7,83 (м, 1Н), 7,30-7,23 (м, 2Н), 2,39 (с, ЗН), 1,38 (с, 12Н) м.ч.
І0190| Одержання Сполук ва і да
Я ни | «0 Всбньовий розра: ВЕ НОЇ Зо їв ее ЗМ щ тапуак ее
НЯ. ее с до ке ва п нОоде Нева з 0191) Сполука 8а. Ангідрид 7а (24,6 кг, Арех) і хінін (49,2 кг, ВиспіІег) додавали до реактора з наступним додаванням безводного РиМе (795,1 кг). Реактор потім охолоджували до -16 С і додавали ЕН (безводний, 41,4 кг) при такій швидкості, щоб підтримувати внутрішню температуру реактора при менше -12 "С. Максимальна температура реакції, зареєстрована в цьому експерименті, склала -16 "С. Реакційну суміш потім нагрівали при -16 "С протягом 16 годин. Зразок видаляли і фільтрували. Твердий продукт сушили і оцінювали за допомогою "Н-
ЯМР, який показав, що ангідриду не залишилося. Вміст реактора відфільтровували. Реактор і наступний вологий осад на фільтрі промивали РиМе (безводний, 20 кг). Одержану тверду речовину вміщували у віддентрову сушарку при менше 45"С, промиваючи Мо протягом принаймні 48 годин. У цьому експерименті, фактична температура складала 44 "С, і вакуум був -30 у На. Речовину відбирали через 2,5 дні після висушування і ЯМР показав З 956 РиМе. Ще через 8 годин кількість зразка РіМе аналізували, і він показав присутність тих же З 956 РАМе і сушіння припиняли. Маса твердої речовини білого кольору була 57,7 кг, вихід 76 95. "Н-ЯМР показав відповідність зі структурою й аналіз СпігаІ! 5ЕС показав 299 95 ее речовини. (0192) Сполука 9а. У реактор вміщували сіль хініну ва (57,7 кг) і РпиМе (250,5 кг, Аіагісп класу
АС5, »99,5 95) і починали перемішувати. Вміст охолоджували до менше 15 "С і обробляли бн
НС (18 кг НгО обробляли 21,4 кг конц. НС) при підтриманні температури менше 25 "С. Суміш перемішували протягом 40 хв. і візуально оцінювали для того, щоб переконатися, що ніяких твердих частинок не присутньо. Перемішування припиняли, фазам давали відстоятися і фази розділяли. Водні фази знову екстрагували за допомогою РиИМе (160 кг); кількість, яку використовували, була, як правило, набагато менше обчисл. 43 кг. Проте, для ефективного перемішування у вигляді мінімального об'єму додавали додаткову кількість РиМе. Органічні фази об'єднували. Брали зразки органічної фази і проганяли в аналізі ВЕРХ, щоб підтвердити присутність продукту; тільки для інформації.
І0193| Органічні фази охолоджували до менше 5 "С (0-57) і додавали сульфат натрію (безводний, 53,1 кг) при перемішуванні протягом 8 годин (у даному випадку 12 годин). Вміст реактора, що містить органічну фазу, пропускали через фільтр, який містить сульфат натрію (31 кг, безводний), і вміщували в очищений і висушений реактор. Реактор промивали РиМе (57,4 кг),
Зо пропускали через фільтр у реактор ємністю 20 л. Починали перемішування і додавали додаткову кількість РиМе (44 кг) і реакційну суміш охолоджували до -20 "С. При цій температурі додавали розчин РиМе калію трет-пентоксиду протягом 2 годин, підтримуючи температуру від - 15 до -22 "С. Реакційну суміш підтримували при приблизно -20 "С протягом ще 30 хв., після чого брали зразки. Узяття зразка відбувалося шляхом видалення аліквот і негайного їх гасіння у бн
НОЇ. Цільове співвідношення в даному випадку дорівнює 96:4 (транс:цис). (0194) Досягши цільового відношення, в реактор вміщували оцтову кислоту (2,8 кг) протягом б хвилин. Температура залишалася на рівні -20 "С. Температуру потім доводили до -5 С і додавали водний 2н НСІ (65,7 кг води, обробленої 15,4 кг конц. НС). Вміст нагрівали до 5 "С/- 5"С, перемішували протягом 45 хв., а потім нагрівали до 20 7С/-57С при перемішуванні протягом 15 хвилин. Перемішування припиняли, і фазам давали відстоятися. Водний шар видаляли (тимчасове утримання). Органічну фазу промивали водою (48 кг, питна), перемішували протягом 15 хв. і фазам давали відстоятися (принаймні 15 хв.), ії водний шар видаляли і додавали до водного шару. В органічну фазу додавали 1/3 буферного розчину (приблизно 50 л), який був одержаний (7,9 кг МаНеРО», 1,3 кг МагНРО» і 143,6 кг води), і перемішували протягом щонайменше 15 хвилин. Перемішування припиняли і фази залишали розділятися принаймні на 15 хвилин. Нижній шар видаляли. Іншу частину буферного розчину (близько 50 л) використовували для промивання органічного шару, як описано вище.
Промивання проводили втретє, як описано вище.
І0195| Вакуумну дистиляцію фази РиИМе (150 л) починали при 42 "С/-13,9 фунтів на квадратний дюйм і дистилювали до масла об'ємом приблизно 20 л. Після значного зменшення об'єму суміш переносили в меншу посудину для завершення дистиляції. Додавали гептан (13,7 кг), Її суміш нагрівали до 40-57С протягом 30 хвилин, а потім вміст охолоджували до температури 0-5"С протягом 1,5 години. Тверді речовини відфільтровували і реактор промивали приблизно 14 кг охолодженого (0-5 "С) гептану. Тверді речовини сушили у вакуумі перед тим як вміщували в піч при температурі менше 40 "С під домашнім вакуумом (-28 фунтів на квадратний дюйм) доти, поки ГОЮ не дорівнював «1 905. 15,3 кг, 64 95, чистота згідно з ВЕРХ 96 95. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІв): б 11,45 (ушир.с, 1Н), 6,41 (т, 9-7,2 Гц, 1Н), 6,25 (т, У-7,2 Гц, 1Н), 4,18 (м, 2Н), 3,27 (м, 1Н), 3,03 (м, 1Н), 2,95 (м, 1Н), 2,77 (м, 1Н), 1,68 (м, 1Н), 1,49 (м, 1Н), 1,25 (т, 9У7,2 Гц), 1,12 (м, 1Н). (0196) Одержання Сполуки 1ба
АВ ях одн жорен ! ноУА не, Ї ТТЕАОВЕА, ТОЛУуСИ Ва Ї й
У 0024 ВВОН ТОК У
За іа
ІЇО197| У тригорлу круглодонну колбу, оснащену механічною мішалкою, датчиком температури, зворотним холодильником, краплинною лійкою і входом для азоту, вміщували
Сполуку За (145,0 г, 1 екв.) і безводний толуол (Аїдгіс!, кат. Ж 244511) (1408 г, 1655 мл) в атмосфері азоту. Потім порціями додавали триетиламін (Аїагісп, кат. Ж 471283) (140 г, 193 мл, 2,14 екв.) протягом 5 хвилин до перемішуваного розчину, при цьому спостерігалося виділення тепла при максимальній температурі 27 "С. Починали збирання даних за допомогою КеасіІК.
Реакційну суміш потім нагрівали до 95"С протягом 70 хв. Потім порціями додавали дифенілфосфорилазид (Аїйгісп, кат. Ж 178756) (176,2 г, 138,0 мл, 0,99 екв.) за допомогою краплинної лійки протягом загального часу 2,25 години. (0198) Після завершення додавання дифенілфосфорилазиду (краплинну лійку промивали невеликою кількістю толуолу), одержану суміш нагрівали при 96 "С протягом ще 50 хвилин.
Зразок реакційної суміші, розведений у толуолі, аналізували за допомогою ОС/МС, що вказувало на витрату дифенілфосфорилазиду. Потім додавали бензиловий спирт (Аїагіси, кат. як 108006) (69,9 г, 67,0 мл, 1,0 екв.) за допомогою краплинної лійки протягом 5-10 хвилин.
Одержану суміш потім нагрівали при 97 "С протягом ночі (протягом приблизно 19 годин). Зразок реакційної суміші, розведений у толуолі, за допомогою ЗС/МС показав утворення продукту (т/е-330). Реакційну суміш потім охолоджували до 21 "С, після чого порціями додавали воду (870 г, 870 мл) (спостерігали невелике виділення тепла до максимальної температури 22 "С).
Реакційну суміш спочатку гасили, додаючи 500 г води, і перемішували механічним способом протягом 10 хвилин. Потім суміш переносили в ділильну лійку, яка містить 370 г води, що залишилися, а потім вручну перемішували. Після перемішування і розділення фаз, органічний і
Зо водний шари розділяли (відділяли водну фазу при рН-10). Органічний шар потім промивали додатковою порцією води (870 г; 1х870 мл). Органічний і водний шари розділяли (відділяли водний шар при рН-10). Зібрану органічну фазу потім концентрували досуха при зниженому тиску (водяна баня при температурі 45-50 72), одержуючи 215 г неочищеної Сполуки 1ба (приблизний об'єм 190 мл). "Н-ЯМР і СС/М5 відповідають Сполуці 10а (із залишковим толуолом і бензиловим спиртом).
І0199| Одержання Сполуки 11а (о, т о т
Н о) | о ша м НЬМ,
Щ до Но, РИС до "неї і. ЕЮН/НСІ 1ба 11а 0200 Одержання НСІ у етанолі. У тригорлу круглодонну колбу, оснащену датчиком температури, входом для азоту і магнітною мішалкою, вміщували етанол (1000 мл, 773 г) в атмосфері азоту. Розчин перемішували і охолоджували на бані сухий лід/ацетон доти, поки внутрішня температура не досягала 12 "С. Потім безводний НОСІ (80 г, 2,19 моль) повільно барботували в охолоджений розчин (спостерігали температуру від -24 до -6"С під час додавання) протягом 2 годин. Після додавання розчин переносили в скляну колбу і залишали нагріватися до температури навколишнього середовища. Зразок розчину, узятий для титрування, давав концентрацію 2,6М. Розчин потім зберігали в холодному приміщенні (приблизно 5 "С) протягом ночі.
І0201| Гідрування/утворення солі НОСІ. У скляну вставку в 2-галонному автоклаві Парра вміщували паладій на вугіллі (Ра/С (Аїйгісп, кат. Ж 330108), 10 956 у розрахунку на суху вагу (вологість 50 905), 13,11 г, 0,01 екв. на основі Сполуки 1О0а) в атмосфері азоту, а потім зволожували етанолом (93 г; 120 мл). Потім додавали розчин неочищеної Сполуки 10а (212 г, 1 екв.) у етанолі (1246 г, 1600 мл) у скляну вставку (промивали невеликим об'ємом етанолу для сприяння перенесенню). Скляну вставку вміщували в автоклав, а потім додавали НСІ у етанолі (одержаний, як описано вище, 2,6М, 1,04 екв. у розрахунку на Сполуку 10а, 223 г, 259 мл).
Автоклав герметизували, а потім продували воднем (Зх при 20 фунтах на квадратний дюйм).
Потім починали гідрування при прикладеному тиску газоподібного водню (15 фунтів на квадратний дюйм) протягом З годин, після чого тиск був постійним. Аналіз аліквот реакційної суміші за допомогою "Н-ЯМР і СС/МС показав витрату вихідного матеріалу/утворення продукту.
Одержану суміш потім фільтрували через подушку з Целіту (192 г), після чого подушку з Целіту промивали додатковою кількістю етанолу (Зх, усього під час промивання використовували 1176 г етанолу). Фільтрат (зеленого кольору) потім концентрували при зниженому тиску (на водяній бані при 45 "С) до «382 г (4435 мл, 2,9 об'єму на основі теоретичного виходу Сполуки 114).
Потім до залишку додавали ізопропілацетат (1539 г, 1813 мл, 12 об'ємів на основі теоретичного виходу Сполуки 11а2). Одержаний розчин дистилювали у вакуумі при поступовому підвищенні температури. (02021) Дистиляцію зупиняли, після чого розчин, що залишився (370 г, «365 мл загального об'єму, коричнюватий колір), залишали стояти при температурі навколишнього середовища протягом вихідних. Суміш фільтрували (для полегшення фільтрації використовували ізопропілацетат) і зібрані тверді продукти промивали додатковою кількістю ізопропілового ацетату (2х116 мл, кожне промивання приблизно 100 г). Потім тверду речовину сушили у вакуумі при 40"С (максимальна спостережувана температура 42") протягом ночі з одержанням 118 г (78,1 95 протягом двох стадій) Сполуки 11а. "Н-ЯМР речовини відповідав структурі Сполуки 11а і СС/МС показала чистоту 99 95. (0203) Одержання Сполуки 1За необ пов з - т Ж я я ме в їі3а
Ол 154 (0204) Методика А. Суміш 5-фтор-2,4-дихлорпіримідину (Сполука 12а, 39,3 г, 235 ммоль, 1,1 екв.) і солі аміну НСІ (Сполука 11а, 50 г, 214 ммоль) обробляли СНеСі» (169 мл), і суміш нагрівали до 30 "С. Суміш потім повільно обробляли ОІЕА (60,8 г, 82 мл, 471 ммоль, 2,2 екв.) через шприц з насосом протягом З годин. Пік температури був до 32 "С. Реакційну суміш
Зо перемішували протягом 20 годин, реакційну суміш перевіряли на завершення реакції за допомогою ВЕРХ і охолоджували до кімнатної температури. Одержану реакційну суміш промивали послідовно водою (211 мл, рН-8-9), 5 96 розчином Манзох (211 мл, рнН-1-2), а потім 5 95 водним розчином Масі (211 мл, рН.-5-6).
ІО2О5І| Органічну фазу потім дистилювали при зниженому тиску до 190 мл. Вміщували РИМе (422 мл) і температуру встановлювали при 70-80 "С і при внутрішній температурі 60-65 "С доти, поки об'єм не повертався до 190 мл. Суміш залишали охолоджуватися до 37 "С при перемішуванні, через приблизно 10 хвилин починалася кристалізація і відзначалося підвищення температури до 41 "С. Після зрівноважування до 37 "С, у суспензію додавали н-гептан (421 мл) протягом 3,5 години, а потім охолоджували до 22 "С протягом 1 години. Суміш перемішували протягом ночі при цій температурі перед фільтрацією. Одержану тверду речовину на фільтрі промивали 10 95 РАМе у розчині н-гептану (2х210 мл). Потім тверду речовину сушили в печі під вакуумом при продуванні Ма при 50 "С протягом ночі. Одержаний твердий продукт важив 62 г (вихід 88 Об).
І0206| Методика В. У тригорлу круглодонну колбу, оснащену механічною мішалкою, датчиком температури, зворотним холодильником, входом для азоту і додатковою краплинною лійкою, вміщували Сполуку 11а (51,2 г) і Сполуку 12а (40,2 г) в атмосфері азоту. Додавали дихлорметан (173 мл, 230 г), ії одержану суміш перемішували при нагріванні до внутрішньої температури, що дорівнює 30 "С. Потім повільно додавали М, М-дізопропілетиламін (85 мл, 63,09 г) за допомогою краплинної лійки протягом 2,5-3 годин, протягом цього часу відзначалося виділення тепла до максимальної температури, що дорівнює 33,5 "С. Після завершення додавання, одержаний розчин перемішували при 30-31 "С протягом ночі в атмосфері азоту (протягом приблизно 19 годин).
02071 Зразок, 100 мкл реакційної суміші розбавляли дихлорметаном до повного об'єму 10 мл і розчин добре перемішували. Зразок розведеної аліквоти аналізували за допомогою ЗС/МС, що вказувало на повне завершення реакції по зС/МС; при цьому спостерігалося утворення продукту (т/е-328). Реакційну суміш охолоджували до 26 "С і переносили в ділильну лійку (за допомогою дихлорметану). Потім суміш послідовно промивали водою (211 мл, 211 г, водний шар відділявся при рН-8, невеликий шар із суспензією переносився разом з відділенням водного шару), 5 96 водним розчином Манзох (одержували, використовуючи 50 г моногідрату бісульфату натрію (АїЇагісп кат. Ж 233714) і 950 г води) 211 мл, 216 г; рН при відділенні водного шару був --2), а потім 5 95 водним розчином масі (одержували, використовуючи 50 г хлориду натрію (Аїагіспй кат. Ж 59888) і 950 г води) 211 мл, 215 г; рН водного шару був -«4-5). Зібрану органічну фазу потім концентрували при зниженому тиску (на водяній бані при 35 "С) до «190 мл (2,7 об'єму на основі теоретичного виходу Сполуки 13а), після чого додавали толуол (Аїагіси, кат. Ж 179418, 422 мл, 361 г). Одержану суміш концентрували при зниженому тиску (на водяній бані при температурі 55-65 С) до «190 мл (2,7 об'єму на основі теоретичного виходу Сполуки 13а). Аналіз зразка розчину на цій стадії за допомогою "Н-ЯМР показав відсутність дихлорметану. Суміш, що залишилася, залишали охолоджуватися до 37 "С (використовуючи водяну баню при температурі 37 "С на роторному випарнику при перемішуванні). Протягом цього часу спостерігалася виражена кристалізація. Потім суміш механічно перемішували і нагрівали до температури приблизно 37 "С (зовнішнє джерело тепла, установлене на 38 С), після чого повільно додавали н-гептан (430 мл, 288 г, Аїйгісй кат. Ж Н2198) за допомогою краплинної лійки протягом З годин. Після додавання нагрівання зупиняли й одержану суспензію перемішували механічним способом при охолодженні до температури навколишнього середовища протягом ночі. Одержану суміш потім фільтрували і зібрані тверді речовини промивали 1095 толуолом у н-гептані (2х210 мл, кожне промивання одержували шляхом змішування 21 мл (16 г) толуолу і 189 мл (132 г) н-гептану). Вакуум використовували доти, поки спостерігали дуже мало фільтрату. Тверді речовини потім додатково сушили у вакуумі при 50 "С при продуванні азотом до постійної маси (3,5 години) з одержанням 64,7 г (90 90) Сполуки 1За. Аналіз зразка твердого продукту за допомогою "Н-ЯМР показав, що речовина відповідає структурі, і аналіз І С показав 99,8 95 чистоти, використовуючи наданий спосіб І С.
Зо (0208) Одержання Сполуки 14а оо а
АН, Її" цен а КІ я
М ЯКО тт М Ян чем -у тр ему У сі м) ТНЕ с се їза вода її 0209) Етиловий ефір 13За (85 г, 259 ммоль) розчиняли в ТНЕ (340 мл) і обробляли розчином
ПОН (2М, 389 мл, 778 ммоль) протягом 10 хв. (температура від 21 до 24 "С). Суміш нагрівали до 45"С при перемішуванні протягом 17 годин, після чого перевіряли завершення реакції за допомогою ВЕРХ (5М не спостерігали). Реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і додавали СНоСі» (425 мл). Потім повільно додавали розчин лимонної кислоти (2М, 400 мл) протягом 45 хв. (при температурі до 26 "С). Було відзначено, що під час додавання утворилися деякі білі тверді речовини, але вони швидко розчинялися при перемішуванні.
Реакційну суміш перемішували протягом ще 15 хв., після чого фази розділяли. Після того, як були розділені фази, вимірювали рН водної фази, рН-4,0. Органічну фазу промивали (перемішування 15 хв.) водою (255 мл), фази залишали розділятися. Нижній шар (органічний), що містить необхідний продукт, потім зберігали в холодильнику протягом ночі. 0210) Органічну фазу концентрували при зниженому тиску (котел установлювали на 65 "С) до приблизно 150 мл (обчисл. 1,76 об'єму мії ЗМ). ІРА (510 мл) завантажували і дистилювали при зниженому тиску (85 "С температурна установка холодильної машини) до 255 мл (З об'єми).
Рівень розчинника доводили приблизно до 553 мл (6,5 об'єму) шляхом додавання ІРА (298 мл).
Потім додавали воду (16 мл) і реакційну суміш нагрівали зі зворотним холодильником (77 "С) при енергійному перемішуванні, при якому розчинялися тверді речовини, осаджені на стінках посудини. Реакційну суміш потім повільно охолоджували до 65 "С (протягом 60 хв.) і зберігали всю речовину в розчині (брали зразок для аналізу залишку в розчині). Реакційну суміш додатково охолоджували до 60 "С, і реакційна суміш здавалася злегка опалесціюючою. Після перемішування протягом 15 хвилин додатково охолоджували до 55 "С. Продукт продовжував випадати в осад, а суміш як і раніше була негустою і легко перемішувалася. Дуже повільно (2,5-
З години) додавали воду (808 мл) підтримуючи температуру близько 55 "С. Суміш потім охолоджували до 22 "С протягом 2 годин і залишали перемішуватися протягом ночі. Речовину потім фільтрували і промивали сумішшю води: ІРА (75:25, 2х255 мл). Кислоту сушили у вакуумній сушильній шафі при 55 "С протягом ночі. Одержували 69 г кислоти 14а, вихід 88 95 твердого білого продукту. Аналіз речовини за допомогою ВЕРХ - »99 95 чистоти.
І0211)| Одержання Сполуки 15а: реакція приєднання Сузукі дк. ово і за НЕ ії бе. же, та М с -і - й РАС (0.5 моль б) Ше - й чав Х-РНоз ГО моль 95) й ері зва
К2СОЗ, ТНЕ М
І0212| До Сполуки 14а (91,4 г, 305 ммоль), Сполуки ба (158,6 г, 381 ммоль, 1,25 екв.),
РаЯ(ОАсС)» (0,34 г, 1,5 ммоль, 0,5 моль 95), Х-Рпоз5 (1,45 г, 3,0 ммоль, 1,0 моль 9б5), і КеСО» (168,6 г, 1220 ммоль, 4 екв.) додавали ТНЕ (731 мл, 8 об'ємів) і воду (29 мл, 0,32 об'єму). Реакційну суміш продували Ма протягом 30 хв., потім нагрівали до 65-70 "С і перемішували протягом 5 годин. ВЕРХ-аналіз реакційної суміші показав 99,395 перетворення. Реакційну суміш охолоджували до 22-25 "С і додавали воду. Суміш перемішували, фазам давали розділитися і водну фазу видаляли. Розчин 18 мас. 95 Масі у воді (напівнасичений водний розчин Масі) додавали до органічної фази, і рН суміші доводили до 6,0-6,5 за допомогою 2н НС. Фазам давали розділитися і водну фазу видаляли. Органічну фазу концентрували до мінімального об'єму і додавали ацетонітрил. Процес повторювали ще один раз, і додавали ацетонітрил до одержання кінцевого об'єму 910 мл (10 об'ємів). Суспензію нагрівали до 80-85 С протягом 6 годин, потім охолоджували до 20-25"С. Суспензію перемішували протягом 2 годин, потім фільтрували. Тверді речовини промивали ацетонітрилом з одержанням Сполуки 15а (161 г, вихід 89 Об). 0213) Одержання Сполуки (1): стадія детозилування хор дод ше В ьом
Ко тттюкн, жо ї. ЕТНО ваза І ші - в ж я З. Розчинник мінала ва ВЕ ве
Й Розчинник С ЩеТНЕ (0214) До Сполуки 15а (25 г, 45,2 ммоль) додавали ТНЕ (125 мл, 5 об'ємів), потім полімер
МР-ТМТ (6,25 г, 25 мас. 95). Суміш перемішували при 20-25 "С протягом 16 годин і фільтрували, промиваючи 1 об'ємом ТНЕ. Процес обробки полімеру і фільтрацію повторювали. Розчин ТНЕ концентрували до 5 об'ємів. До суміші при 22-25 "С додавали водний розчин 2М ПОН (90,3 мл, 4 екв.). Реакційну суміш нагрівали до 40-45 "С і перемішували протягом 5 годин. ВЕРХ-аналіз показав 99,7 96 перетворення. Реакційну суміш охолоджували до температури 22-257С і додавали МТВЕ (50 мл, 2 об'єми). Відбувалося розділення фаз. Нижню водну фазу збирали.
Водну фазу екстрагували МТВЕ. Нижню водну фазу збирали. До водної фази додавали 2-
МетнНЕ ї одержану суміш перемішували. Значення рН суміші доводили до 6,0-6,5, а нижню водну фазу видаляли. Органічну фазу промивали буфером з рН 6,5. Органічну фазу концентрували до 85 мл, розбавляли 2-МетТнНЕ (150 мл) і концентрували до кінцевого об'єму 180 мл. Одержану суспензію нагрівали до 70-75 "С і перемішували до повного розчинення, потім охолоджували до 45-50 "С з одержанням суспензії. Суспензію перемішували протягом 1 години, а потім додавали гептан (180 мл). Суспензію охолоджували до температури 20-25 "С протягом 1 години і перемішували протягом 16 годин. Партію фільтрували, промивали гептаном тверді продукти. Тверді продукти сушили з одержанням сирого сольвату Сполуки (1):2-МетТнНЕ, вихід 79 о. (0215) Приклад 3. Утворення поліморфів солі НСІ Сполуки (1) (0216) ЗА: одержання Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20
Зо
І0217| Форму А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 одержували шляхом змішування сольвату 2- метилтетрагідрофурану (2-МетНЕ) (1 еквівалент) Сполуки (1) (Сполука (1)х1(2-МетНЕ)) із хлористим воднем у суміші води й органічного розчинника(ів), причому суміш з води й органічного розчинника(ів) мала активність води 0,05-0,85. Конкретні використовувані умови реакції наведені в Таблиці 1 нижче. (02181
Таблиця 1
Умови реакції, використані для одержання Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20
Спол., (1) - Екв. (НОСІ:
МетнЕ (мл) (мл) (мл) 4 (мас. Ов)
ІРОНІ/ оцтова о кислота-» 100/1,0 А 3,10 45 1,3561 7,25 95 ацетон" 118 Ацетон. | 180 | 6 | 360 | 30 | 05774 | 53395 118 Ацетон. | 180 | 8 | 640 | 35 | 10266 | 77395 16 Ацетон. | 66 | 11 | 282 | 30 | 13561 | 185795 зе 15 || г» | 5 | ме | тк кислота "Дві стадії: ІРГОН/АСОН і потім знову одержували суспензію в ацетоні/воді.
І0219| Альтернативно, Форму А сіль НСІ Сполуки (1)х1/2Н:О0 також одержували за допомогою наступних методик. Методика А. Сполуку (1)х2-МетнНЕ (953 г, 2,39 моль) вміщували в реактор з оболонкою, 30 л, і обробляли ІРА (15 л) і водою (0,57 л). Починали перемішування і реакційну суміш нагрівали до 73"С для одержання розчину всіх компонентів, потім охолоджували до 50 "0-55 С. При 50 "0-55 С реакційну суміш обробляли свіжоприготованим
НОСІ у ІРА (0,83М, 4,34 л) за допомогою повільного додавання протягом 4 годин. Слід зазначити, що приблизно в 72 від початку суміш ставала густіше. Відбирали зразки реакційної суміші для перевірки правильної форми за допомогою ХКРО. Після додавання холодильну машину програмували на зниження до 0 "С протягом 480 хв. при перемішуванні. Після підтвердження форми аналізом ХКРО, суспензію фільтрували на двох фільтрах. Реактор промивали З л ІРА і кожен осад на фільтрі промивали «1,5 л ІРА промивки ІРА з реактора. Коржики залишали сохнути на повітрі протягом ночі за допомогою усмоктування. Коржики потім вміщували у віддентрову сушарку без нагрівання у вакуумі з продуванням М» (22 у Не) протягом 24 годин.
Залишковий розчинник і аналіз води показав 505 чнм ІРА, 8 чнм 2-Ме-ТНЕ і приблизно 2,15 95
НгО. Речовину виймали з печі і перемелювали до розподілу з одержанням 805 г солі НСІ
Сполуки (1)х1/2Н2О0. Методика В. Альтернативно, замість ІРА використовували ацетон, але таким же чином, як описано вище в методиці А, з одержанням солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20. 022091 Дані ХКРО і С"З 55ММЕ Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О показані на Фіг. 1 і2, відповідно. Деякі спостережувані піки ХЕРО і піки С 55ММЕ підсумовані в Таблицях 2 і 3, відповідно. (02211
Коо)
Таблиця 2
Одержання Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 061111711111111111111111716511111111111171Ї11111111395.СсС1С ниниижиининншлнннининнш нн нини нииннихиннининнш хни (02221
Таблиця З
Піки С"З 5БММК Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 нини а ЕТ Я ПО ся ОО 28111111 17111111 3001111 811Г1111111111290111Ї11111111111111112о1
І0223| Було виявлено, що одержана Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О була стабільна в наступних системах розчинників (але ними не обмежуючись): хлорбензол, циклогексан, 1,2- дихлоретан, дихлорметан, 1,2-диметоксіетан, гексан, 2-метоксіетанол, метилбутилкетон, метилциклогексан, нітрометан, тетралін, ксилол, толуол, 1,1,2-трихлоретан, ацетон, анізол, 1- бутанол, 2-бутанол, бутилацетат, трет-бутиловий ефір, кумол, етанол, етилацетат, етиловий ефір, етилформіат, гептан, ізобутилацетат, ізопропілацетат, метилацетат, З-метил-1-бутанол, метилетилкетон, 2-метил-1І-пропанол, пентан, 1-пропанол, 1-пентанол, 2-пропанол, пропілацетат, тетрагідрофуран, метилтетрагідрофуран. (02241 Зокрема, для тестів розчинності і стабільності Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О, зразки сполуки вміщували в 2-мл посудини для ВЕРХ з 500нл розчинника. Суміш перемішували при температурі навколишнього середовища протягом 2 тижнів, а потім фільтрували за допомогою центрифуги. Одержані тверді продукти аналізували за допомогою ХКРО, розчини аналізували на розчинність за допомогою кількісного ЯМР проти стандарту гідрохінону.
Результати наведені в Таблиці 4. (0225)
Таблиця 4
Стисле представлення даних форми і розчинності для Форми А солі НСІ Сполуки (1) оМетилацетат//////77777777771111111111 11111066 ТАС
Продовження таблиці 4
Пропілацетат 77777771 Ї1111111710081С ТАС (Вода ////777777777777111111111111111111Ї11111100661С 81111111
І0226| Дані термограми (дані не показані) були одержані шляхом поміщення зразка в платинову ємність для зразків і при нагріванні при 10 "С/хв. у діапазоні від 300 "С до кімнатної температури. Дані термограми показали втрату маси, що дорівнює 2,1 95, при від ЗО до 170 С, що узгоджується з теоретичним напівгідратом (2,0 Об). (0227) Дані О5С-термограми були одержані (дані не показані) шляхом нагрівання зразка при
С/хв. у діапазоні від 300 "С до кімнатної температури. О5С-термограма показала температуру дегідратації, що дорівнює 50-100 "С, а потім температуру плавлення/розкладання, що дорівнює 200-260 "С. 10 (0228) ЗВ: одержання Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3Нг2О
І0229| Форма Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О може бути одержана шляхом одержання суспензії
Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О у ізопропанолі і воді або ацетоні і воді, або у воді (зі значенням активності води, що дорівнює або більше 0,9). (0230| Наприклад, суспензію 100 мг Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20, у 5 мл ізопропанолу/води або ацетону/води при активності води, що дорівнює 0,9, перемішували при температурі навколишнього середовища протягом ночі. Супернатант видаляли і сушили під несильним струменем повітря одержану тверду речовину з одержанням Форми Е солі НСІ
Сполуки (1)хЗ3НгО. (02311 Дані ХЕРО ї С"З 55ММЕК Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО показані на Фіг. З і 4, відповідно. Деякі спостережувані піки ХКРО і піки С"З 55ММК представлені в Таблицях 5 і 6, відповідно. (02321
Таблиця 5
Піки ХКРО Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО 2 а11111111171961111111111117111111111111111118301 61171111 830111 шишниининннннинннинншнни нини шишнинининнпшхнннинннш нн (233
Таблиця 6
Піки С"З ББММК Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О нини нини нини 2811Г11111111111279811111111111111111111154 ни ши ЕЕ: Я ПО Я (0234 МО5С-термограму одержували (дані не показані) шляхом нагрівання зразка при 2" Сб/хв. до 350 С від -20"С і зміни на --С кожні 60 сек. МО5С-термограма показала дегідратацію при нижче 150 "С, плавлення і перекристалізацію при від 150 до 2007 і деградацію при температурі вище 250 "С.
ІЇ0235| Також був проведений термогравіметричний аналіз (ТА) форми. Термограма показала втрату маси, що дорівнює 12 95, при до 125 "С, що близько до теоретичного тригідрату (11 95). Друга стадія втрати маси нижче 200 "С була показана за допомогою ТОА-МС, що являє собою втрату НСІ. Температура плавлення/розкладання складає близько 270-290 "С. (0236) ЗС: одержання Форми О солі НСІ Сполуки (1)
І0237| Безводна Форма О солі НСІ Сполуки (1) може бути одержана загалом шляхом дегідратації Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20О. Дегідратація може бути здійснена шляхом нагрівання або сухого продування азотом або їх комбінації. Наприклад, 2 мг Форми А солі НСІ
Сполуки (1)х1/2Н20О нагрівали на гарячій плитці, одержуючи бажану безводну Форму Ю при близько 85 "С.
ІО2381 Дані ХКРО і С"З 55ММК безводної Форми 0 солі НСІ Сполуки (1) показані на Фіг. 5 і 6, відповідно. Деякі спостережувані піки ХЕРО і піки С 55ММЕ підсумовані в Таблицях 7 і 8, відповідно.
Таблиця 7
Піки ХКРО для Форми О безводної солі НСІ Сполуки (1) 6111111111711111111111112651111 11111111 61111174 2 811111111111111112190111117111111111111117174 (240)
Таблиця 8
Піки С"З ББММЕК Форми О безводної солі НСІ Сполуки (1) 267 1111111111111111498111111111111111111111111111СсС1С 2811 Г1111111111111489111111111171111111111111111185сСсСсИсИЙ2Й2 нининшинншЕсснинннниншишишшея: пили
Зб
Продовження таблиці 8 (02411 30: тести на активність води (0242) Конкурентне дослідження суспензії Форми А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О із затравкою
Форми Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2О, у воді з активністю від 0,0 до 0,8 з ізопропіловим спиртом/водою, показали, що Форма А є найбільш стабільною формою серед Форми 0 безводної солі НСІ Сполуки (1), Форми Е солі НСІ Сполуки (1)хЗ3НгО і Форми А солі НСІ Сполуки (1)хХ1/2Н20, через приблизно 2 тижні перемішування при умовах навколишнього середовища.
При ІРА/воді з активністю 0,9, Форма А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 перетворювалася у Форму
Е солі НСІ Сполуки (1)х3Н2гО. Результати цих досліджень наведені в Таблиці 9 нижче. 0243
Таблиця 9
Тести на активність води солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О в сумішах ІРА/вода форми Активність (ам/ І
А | бж»вос | 77777771 1О 77111111 |Безводна./77/7/7/:
АЖ ОЇ 77771717707771117177777171717171717171717171717117 ТА 77777777 Напівгідрат//-
АЖ Ї77777171706 77117100 А Напівгідрат//З
АЖ Ї77777717108 | 1185 А Напівгідрат//З
АЖ 77771709... 280 | 7777777 Тригідрат//З (0244) Фазова діаграма температури проти активності води для переходу між Формою 0 безводної солі НСІ (1) ("Форма 0"), Формою Е солі НСІ Сполуки (1)х3НгО ("Форма Е") і Формою
А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н2О ("Форма А") показана на Фіг. 12. (0245) ЗЕ: аморфні солі НСІ Сполуки (1) (0246| Аморфна сіль НСІ Сполуки (1) може бути одержана шляхом обробки солі Мег2гМЕЇ
Сполуки (1) (1,985 г) у воді і 2-МеТНЕ з 1,05 екв. МаоН, з наступною обробкою НСІ для видалення аміну і виходу з водного шару (рН 2-3). Одержану суспензію концентрували для видалення яких-небудь органічних сполук, а потім фільтрували. Одержану тверду речовину промивали невеликими порціями води і сушили. Сіль Мег2МЕЇ Сполуки (1) одержували відповідно до УМО 2010/148197, а потім використовували звичайне хіральне розділення і очищення: хіральна хроматографія СЕ з модифікуючим агентом, що включав МегМЕЇ (який утворює сіль Ме2МЕЇ Сполуки (1)). (0247| Приклад 4. Утворення поліморфів вільної основи Сполуки (1) (0248) 4А: одержання Форми А вільної основи Сполуки (1)
І0249| Форму А вільної основи Сполуки (1) одержували за наступною методикою. Сиру аморфну вільну основу Сполуки (1) (приблизно 135 г) переносили в реактор об'ємом 4 л з оболонкою, і в реактор вміщували етанол (2,67 л) і воду (0,325 л) (10 95 водний розчин). Суміш нагрівали зі зворотним холодильником. Додавали воду (300 мл) до одержаної суміші на стадії 2) для одержання 2095 водного розчину. Одержану суміш потім охолоджували до 55" (швидкість--1 "С/хв.), а потім витримували протягом 30 хвилин. Кристалічну затравку вільної основи Форми А Сполуки (1) (1,5 г, 3,756 ммоль) потім додавали в охолоджену суміш, і одержану суміш витримували протягом 30 хвилин поки продукт осаджувався. Затравка кристалічної вільної основи Форми А Сполуки (1) була одержана суспендуванням аморфної вільної основи Сполуки (1) (20 мг) у нітрометані (0,5 мл). Додаткові затравки кристалічної вільної основи Форми А Сполуки (1) одержували шляхом одержання суспензії аморфної вільної основи Сполуки (1) (900 мг) в ацетонітрилі (10 мл) разом із затравками, одержаними з використанням нітрометану. У суміш, що містить затравку кристалічної вільної основи Форми А
Сполуки (1), повільно додавали воду (795,0 мл) для одержання 4095 водного розчину.
Одержану суміш повільно охолоджували до 0 "С (--10"С/годину), а потім витримували протягом 2 годин. Тверді речовини потім фільтрували і сушили на повітрі, а потім додатково сушили в сушильній шафі при 60 "С протягом 18 годин.
І0250| Альтернативно, використовували сольват 2-метил-ТНЕ вільної основи Сполуки (1) замість аморфної вільної основи Сполуки (1) і аналогічними чином, як описано вище, також одержували Форму А вільної основи Сполуки (1).
ІЇО251| Було виявлено, що одержана Форма А Сполуки (1) є стабільною в наступних системах розчинників (але ними не обмежуючись): ацетонітрил, хлорбензол, хлороформ, циклогексан, 1,2-дихлоретан, дихлорметан, 1,2-диметоксієтан, етиленгліколь, формамід, гексан, метилбутилкетон, метилциклогексан, М-метилпіролідинон, нітрометан, тетралін, толуол, 1,1,2- трихлоретан, оцтова кислота, анізол, 1-бутанол, бутилацетат, кумол, етилацетат, етиловий ефір, етилформіат, гептан, ізобутилацетат, ізопропілацетат, З-метил-1-бутанол, 2-метил-1- пропанол, пентан, пропілацетат, вода, вода-ізопропанол (1:3 об./06.) і вода-ацетонітрил (1:1 об./об.; 1:3 об./об.). (02521) Дані ХКРО і СЗ 55ММЕК Форми А Сполуки (1) представлені в Таблицях 10 і 11, відповідно. Деякі спостережувані піки ХЕРО і піки С" 55ММЕ підсумовані в Таблицях 10 і 11, відповідно. (253)
Таблиця 10
ХАРО-піки Форми А Сполуки (1) 611111111111111111111111125561111111111Ї111111111997111 нини хи шипшини лиш (02541
Таблиця 11
Піки С"З ББММЕ Форми А Сполуки (1) нини: шини :хнишиши 2811 Г111111111111560111111111Ї1111111111111111843с1 811Г11111111111111155411111 11111149 22411197 Ї11111111111111111190811с71 (0255) Термогравіметричний аналіз продукту, Форма А Сполуки (1), був проведений (дані не показані) на ТА Іпзігитепі5 ТОА модель 0500 шляхом поміщення зразка в платинову ємність для зразків і наступного нагрівання ємності при 10 "С/хв. у діапазоні від 300 "С до кімнатної температури. Термограма показала, що розкладання починається приблизно при 293 "С.
(0256| ДСсК-термограма для Форми А Сполуки (1) також була одержана за допомогою ТА
Іпвігитепіє ОС 00200. Зразок форми нагрівали при 10 "С/хв. до 35070. ДСК-термограма показала температуру плавлення, що дорівнює приблизно 278 "С. (0257| 48: одержання Форми В вільної основи Сполуки (1) (0258) Гідратована форма вільної основи Сполуки (1) була ізоморфна як Форми А вільної основи Сполуки (1). Форма А вільної основи Сполуки (1) може вільно перетворюватися в гідратну форму, якщо вона піддається впливу високої вологості, і повертатися назад, якщо вологість зменшується. Відповідно до зміни фази, визначеної за допомогою експериментів О5С (дані не показані), температура переходу була близька до температури навколишнього середовища і змінювалася залежно від активності води. Наприклад, при температурі навколишнього середовища відзначалася гідратна форма, де активність води була більше 0,6, наприклад 0,6-1,0. (02591 4С: одержання аморфної вільної основи Сполуки (1) й Псполука ва орех я ке ооо чо пеня кою 0 МОСК аррігваних ши ще
ЯК» фільтранію бою ши тю їв и ше я я а Еко (0260) Реакцію приєднання Сузукі проводили поміщенням хлоропіримідину, Сполука 13а, боронового ефіру Сполуки ба, каталізатора РІ(ОАсС)» і ліганду (Х-Рпо5) у 10 об'ємів 2-МеТНЕ.
Суміш нагрівали до 65 "С і додавали 2 об'єми 50 95 водного розчину КзРОх зі швидкістю, при якій температура реакційної суміші підтримувалася при 65 "С. Обидві реакційні суміші повністю перетворювалися після охолодження до 20 "С їі фільтрації через целіт. Водні шари видаляли, органічні шари промивали 595 водним розчином Масі, а потім концентрували досуха з одержанням приблизно 3,5 кг кожного у вигляді темно-зеленої пасти. Сире масло розділяли на 4 рівні частини, суспендували з 400 г 5іО» і 500 г флорисилу і елюювали через 2,3 кг 5іОг на колонці з гептаном/ЕОАс (фракції від 5:11 до 3:1,2 л), об'єднуючи усі фракції, що містять продукт. Ці фракції концентрували досуха з одержанням приблизно 2,9 кг Сполуки 21а.
І0261| Сполуку 21а розчиняли в 10 об'ємах (25 л) СНІСМ і обробляли 4 екв. НСІ (4,31 л 4н
НС у 1,4-діоксані) при температурі 70 "С протягом 15 годин. Оцінка ВЕРХ показала 100 95 завершення реакції і дрібну суспензію охолоджували до 20 "С протягом 1 години. Додавали
Зо ТВМЕ (28 л, 11 об.) при 0,5 л/хв., суспензія при цьому ставала густою (желеподібною) наприкінці додавання. Через 4-5 годин перемішування суспензія ставала значно менш густою. Одержані тверді речовини збирали фільтрацією відсмоктуванням і промивали З3х5 л ТВМЕ, з одержанням коржика з низькою щільністю, і сушили в потоці Ма протягом З днів з одержанням 1,71 кг (вихід 86 96, ЛОС чистота 98,9 95) Сполуки 22а НОЇ. ве 4 ноб он и ЯМ, г Кй У у мл М га я че М У
К. пий СУ 1» Ммаон ве Бай так ШИН 2) на ай
Н Ге 22а 1 (02621 Розчин Маон (55,60 мл 2М, 111,2 ммоль) додавали до суспензії Сполуки 22а2-НСЇІ (10 г, 22,23 ммоль) у 2-МеТНЕ (100,00 мл) при температурі 20 "С. Реакційну суміш перемішували при 60 С протягом 5 годин, а потім додатково при 67 "С. Після перемішування протягом приблизно 22 годин до одержаної суміші додавали 100 мл (10 об.) 2-МеТНЕ. Партію потім охолоджували до 0 "С. До одержаної суміші додавали НСІ для того, щоб довести рН до 6,6, з одержанням сирої вільної основи Сполуки (1). Сиру речовину в 60 мл (6 об'ємів) 2-МеТНЕ нагрівали до 50 "С. В одержану суміш додавали 50 мл (5 об.) н-гептану протягом 1 години.
Партію потім охолоджували до 20 "С. Твердий продукт фільтрували, і твердий продукт потім очищали колонковою хроматографією (ЕОАс/гептан, від 2:11 до 41). Дані ХКРО показали аморфну вільну основу Сполуки (1).
(0263) Альтернативно, спостерігали аморфну вільну основу Сполуки (1) із суміші Форми А вільної основи Сполуки (1) і розчинника, вибраного з 2-етоксіетанолу, 2-метоксіетанолу, трет- бутилметилового ефіру, мурашиної кислоти або метилетилкетону (наприклад, див. Таблицю 13 нижче), які перемішували при температурі навколишнього середовища. (0264) 40: одержання сольвату 2-МетТнНЕ вільної основи Сполуки (1)
І0265| Сполуку (1)х1(2-МетНЕ) одержували, як описано в Прикладі 2 вище. Дані ХКРО показані на фіг. 12. Деякі спостережувані піки ХКРО підсумовані в Таблиці 12. (266)
Таблиця 12
Піки ХКРО Сполуки (1)х 1(2-МетнНЕ) 2261 1777711111111111111169777771111111111171Ї1111111111111114655..Й.:/С:ОС 281111111111111111194111111111111711111111111111171в54С1 281177111111111111200771111111111171Ї111111111111111714621 (02671) 4Е: розчинність і дані стабільності Форми А вільної основи Сполуки (1) і аморфної
Сполуки (1) у різних системах розчинників (0268) Розчинність і стабільність Форми А вільної основи Сполуки (1) ("Форма А") і аморфної
Сполуки (1) (Аморфна") у різних системах розчинників протестували при температурі навколишнього середовища таким чином, як описано вище для Форми А солі НСІ Сполуки (1).
Одержані дані наведені в Таблиці 13. (О269)
Таблиця 13
Дані розчинності і стабільності Форми А вільної основи
Сполуки (1) ("Форма А") і аморфної Сполуки (1) (Аморфна") шо 3330 дв іш
Дихлорметан.//////777777771Ї7777717171009 ФА |Аморфниї/ЗО
Продовження таблиці 13
ВодаїРАТИ 77777717 111111 |Сольват /:;/С/|.Ї //:/ -
ВодаїРАТЗ ЇЇ ТА 7 Її
ВодаАйСМіІ! 7 Ї7777717117-1СТА 7 Її
ВодаАСМіЗ СГ 77777117 ТА 7 Її
ВодаМеоніїй 77777771 111111 |Сольватр /:;/|/./НСС|.Ї //:/ -
ВодамМеоніЗ 77777771 - 111111 |Сольватр /:;/./)С |: - (0270) Приклад 5. Одержання Форми А тозилату Сполуки (1)
І0271| Форму А тозилату Сполуки (1) одержували шляхом одержання суспензії аморфної вільної основи Сполуки (1) (500 мг) і п-толуолсульнової кислоти в ацетонітрилі (20 мл). Зразки перемішували протягом ночі. Дані ХКРО показані на Фіг. 9. Деякі спостережувані піки ХКРО підсумовані в Таблиці 14.
І0272| Альтернативно, використовували сольват 2-метил-ТНЕ вільної основи Сполуки (1) замість аморфної вільної основи Сполуки (1) і аналогічним чином, як описано вище, також одержували Форму А вільної основи Сполуки (1). (0273
Таблиця 14
ХАРО-піки Форми А тозилату Сполуки (1) т во11111111111111111111111111збсИ72 261 177711111111111111111481111111111111711111111111111115025..Й.Й.ЙКЦМщКЙКСЬ нишининнишниннннинишишн х пиши шини: сх, нини (0274) Приклад 6. Склади Сполуки (1) 02751 А. Таблетки Сполуки (1) (0276) Композиції
І0277| Для одержання таблеток використовували Форму А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 (надалі просто Сполука (1) у Прикладі 6). Усі ексципієнти відповідали існуючим в монографіях
Європейської Фармакопеї і ЮО5Р/МЕ і були придбані у затверджених постачальників. 0278) Склад складу і розмір партії для попередньої грануляції і зв'язувальний розчин для грануляції наведені в Таблиці 15А. Розмір партії зв'язувального розчину включав 100 95 надлишок для калібрування насоса і заповнень ліній розчину. Теоретичний склад суміші стиснення також наведений у Таблиці 15А. Були розраховані фактичні величини для партії на основі виходу висушених гранул. Склад і приблизний розмір партії суспензії для плівкового покриття наведений у Таблиці 158 і включає 100 95 надлишок для калібрування насоса і заповнень ліній суспензії. Цільова кількість плівкового покриття склала 3,0 мас. 9б/мас. 95 від маси таблетки. (0279І
Таблиця 15А
Композиції таблеток Сполуки (1) о в Фо в сухих | 95 в ядрі МГ. передграну- | гранулах | таблетки| "аблетці ляційної суміші рану (300 мг) гемігідрат, сіль НСІ (Форма А тб 74,99 50,00 333,00
Внутрішньо- | Амісе! РН-102, МЕ, РпЄиг, ОР 10,03 43,89 гранулярний | Лактози моногідрат, Ж 316, МЕ,
РИЄМГ, ОР 10,03 9,88 6,59 43,89
Ас-0і-Бої, МЕ, РАБ, УР 16,65
ШИ загальна передгрануляційна 100,00 98,50 | 65,8 | 437,43 суміш: " " " "
В зв'язува- | Ромідопе КЗО, ОБР 11111117115о | то | 666 льному 11111111 |всьоюгрануї// | 77777777 | 10000 | 6668 | 444,09
Ргозоїм 50, МЕ 11711111 28,82 | 191,94
Екотраграну: Гдо-рі-Бої, МЕ, РАЄит, УР 01777711 250 1 1665 й ЗБЕ, МЕ 11111111» | 15,32 1111111 |Загальнеядротаблетки.//./-:-| | | 7777777 | 7100 | 666.00
Суспензія (32 мл нанесення покриттям (280
Таблиця 158
Композиція для покривної плівки і приблизний розмір партії
Розмір партії (г)
Ораадгу І! МУніїє, ЗЗА 15,00 210,00
Вода, ОБР. 85,00 1190,00 100,00 1400,00
І0281| Одержання зв'язувальний розчину (0282) Зв'язувальний розчин складався з повідону і води. Розчин одержували на основі 40 Фо водного вмісту в кінцевій суміші для грануляції. Таким чином, загальна кількість твердих речовин у розчині (повідон) склала 3,6 95 (мас./мас.). Надлишкову кількість 100 95 одержували для заповнення ліній тощо. На основі візуального огляду запуску прогону грануляції одержували додаткові вихідні розчини --2 95 (38-42 9о) води в кінцевій суміші для грануляції. Як правило, зважували 87,00 г повідону КЗО ї 2320,00 г очищеної води (01) і при постійному перемішуванні додавали повідон КЗО у контейнер, що містить ОО! води. Після додавання контейнер герметизували для мінімізації випаровування, і розчин перемішували доти, поки всі присутні тверді речовини повністю не розчинялися. 0283) Схема процесу вологого гранулювання
І0284| Вологе гранулювання здійснювали за допомогою методик, описаних нижче.
Зважували надлишкову (1095) кількість Сполуки (1), Амісе! РН-101, лактози Разшто і кроскармелози натрію (див. Таблицю 15А). Їх сортували за допомогою ручного сита 20 меш або конічного млина, оснащеного решітчастим ситом з розміром комірок 813 мкм, при 1000 обертах на хвилину (для 05 Оцайго Со-тії). Відсортовані речовини вміщували в окремі пакети або контейнери. Речовини потім переносили в блендер і перемішували протягом 15 хвилин як правило при 15 обертах на хвилину. Змішані речовини розмелювали, використовуючи конусний млин 05 Оцайдго, оснащений ситом із квадратними отворами 4 мм, при 1000 обертах на хвилину. Подрібнені речовини знову змішували, повторюючи стадію змішування. Повторно змішані речовини потім подавали в двошнековий гранулятор. Об'ємну вологу суміш для гранулювання подавали в гранулятор, використовуючи ваговий живильник безперервної дії (К-
Тгоп або аналогічний). Одержані речовини потім гранулювали. Зв'язувальну рідину (див.
Таблицю 15А) вводили в двошнековий гранулятор, використовуючи перистальтичний насос.
Відношення швидкості подачі розчину до швидкості подачі порошку складало 0,4095.
Наприклад, якщо швидкість подачі порошку була 15,00 г/хв., то швидкість подачі розчину була 0,4095х15,00-6,14 г/хв., при вмісті води 40 95 (у перерахуванні на суху масу). Субпартії гранул збирали в сушильні лотки з попередньо визначеною вагою. Зібрані речовини рівномірно розприскували на лоток і сушили речовину в печі з утворенням висушених гранул. Висушені гранули вміщували в К-Тгоп для безупинного виснаження подачі речовини в конусному млині, а потім перемелювали. (0285) Екстрагранулярне змішування і процес стиснення (0286) Екстрагранулярне змішування і процес стиснення проводили відповідно до методик, описаних нижче. Зважували кількість екстрагранулярних наповнювачів на основі складу суміші для стиснення. Зважені наповнювачі сортували, використовуючи 5 Сотії із ситом 32С і круглий стрижень лопатевої мішалки при 1000 обертах на хвилину. Подрібнені гранули Сполуки (1) спочатку додавали в блендер, що містить відсортовані Амісе! РН-102 і Ас-0і-5ої. Їх змішували протягом 8 хвилин при 16 обертах на хвилину. Стеарил натрію (5511) сортували через ручне сито з отворами 50 меш у придатний контейнер. Частину екстрагранульованої суміші, по масі приблизно в 10 разів більше кількості 55Е, вміщували в контейнер з 55Е і змішували протягом 30 секунд перед додаванням суміші в бункерний змішувач. Усі речовини потім змішували протягом 2 хвилин при 16 обертах на хвилину. Кінцеву суміш потім пресували відповідно до заданих параметрів процесу стиснення таблеток.
І0287| Процес нанесення покриття (0288) Плівкове покриття наносили на серцевини таблеток у ємності для нанесення покриття
Месіог МРС 1355 у вигляді 15 95 мас./мас. Орадгу І М/пйе й 330 водної суспензії. Цільове покриття складало 3,0 95 мас./мас. від маси серцевини таблетки в прийнятному діапазоні від 2,596 до 3,595. Для досягнення цієї мети, кількість суспензії для покриття, еквівалентну збільшенню маси на 3,295, розпиляли, що давало 3,095 покриття, якщо передбачити, що ефективність покриття складає 95 9. (0289) В. Внутрішньовенні склади (вв) Сполуки (1)
І0290| Форму А солі НСІ Сполуки (1)х1/2Н20 (у Прикладі б надалі просто Сполука (1)) одержували у вигляді 2 мг/мл розчину для внутрішньовенного (вв) введення. Склад розчину разом з еталонною якістю і функцією кожного компонента представлені в Таблицях 16А і 168. (02911
Таблиця 16А
Склад розчину носія? оожженю 000 онцтютоюте (ЛОТ дк бо лнс
Компонент : Функція компонента) (мг/50 г вв якості (95 мас./мас.) розчину) гептагідрат " тонічності
Ве 00002001 151 500ю | о арН розчину доводили за допомогою Маон або НСІ.
(02921
Таблиця 168
Порівняння внутрішньовенного розчину? Сполуки (1) п ІВ Зч
Компонент (мг/50 г вв компонента (95 мас./мас.) розчину)
Речовина
Сполука (1) лікарського 111 0,222 препарату
Всю 01111111 вою | лож арН розчину доводили за допомогою Маон або НСІ.
Густина розчину дорівнює 1000 г/см3.
Лікарська речовина являла собою напівгідрат солі НОЇ. Кількість лікарської речовини розраховували на основі еквівалента активної безводної вільної основи, де коефіцієнт перетворення з вільної основи в напівгідрат солі НСІ складає 1,11. 0293) Приклад 7. Іп мімо аналіз комбінації Сполуки (1) разом або без озелтамівіру (02941 Інфікованих мишей обробляли носієм або підвищуваними рівнями доз Форми А солі
НС Сполуки (1)х1/2Н2О у комбінації з клінічно значимою дозою озельтамівіру, починаючи через 48 годин після зараження грипом А або за 2 години до зараження грипом В. 0295) Способи. У цих дослідженнях Форма А солі НСІ Сполуки (1), напівгідрат (у Прикладі 7 надалі просто Сполука (1)), була включена до складу разом з носієм, що містить 0,5 95 (мас./мас.) МС (Зідта-Аїйагісп, еї І оці5, МО), з одержанням гомогенної суспензії, ії доза сполуки була основана на солі НСІ Сполуки (1), напівгідрат. Озельтамівір був включений до складу з дистильованою деіонізованою водою з одержанням гомогенної суспензії. Комбінація Сполуки (1) з озельтамівіром була включена до складу з носієм, що містить 0,5 95 (мас./мас.) МС. Ці комбіновані склади одержували на початку кожного дослідження і зберігали при 4 "С протягом до 10 днів при перемішуванні в темряві. Усі склади і носії вводили мишам за допомогою перорального зонда в об'ємі дози 10 мл/кг.
І0296| Самців мишей ВА! В/с (5-7 тижнів, 17-19 г) анестезували і заражали летальною дозою вірусу грипу А/РК/8/34 або В/Ма55/3/66, адаптованого для мишей, шляхом інтраназальної інстиляції. Вісім мишей були включені в досліджувану групу. Лікування починали через 48 годин після зараження вірусом грипу А або за 2 години до зараження вірусом грипу В. Носій (10 мл/кг) і Сполуку (1) у дозах 0,1-10 мг/кг вводили самостійно або в комбінації з 10 мг/кг озельтамівіру, перорально (РО), два рази на день (ВІОЮ) протягом 10 днів у дослідженні грипу А. Носій (10 мл/кг) і Сполуку (1) при дозах 1-10 мг/кг вводили самостійно або в комбінації з 10 мг/кг озельтамівіру, перорально (РО), два рази на день (ВІО) протягом 10 днів у дослідженні грипу В.
Мишей зважували і щодня оглядали на наявність ознак захворювання протягом 21 дня після зараження. Крім того, функції легень контролювали за допомогою природного М/ВР. (Вихсо,
Зо Теоу, МУ).
І0297| Грип А/РК/8/34 (У-1469) і грип В/Маз55/3/66 (МА-523) одержували з АТСС (Мапаззав,
МА). Вихідні розчини одержували стандартними способами, відомими в даній галузі. Коротко, вірус пасивували при низькій множинності інфекції в клітини Мадін-Дарбі нирок собак (клітини
МОСК, ССІ-34, АТСС), супернатант збирали через приблизно 48 годин і центрифугували при ббБОхуд протягом 10 хвилин. Вихідні розчини вірусу заморожували при -80"С перед використанням. Титр вірусу (ТСІОЮво/мл) розраховували по методу Спірмена-Каргер після серійних розведень зразка вірусу, інфікуючи культури МОСК у повторі, і вимірювали цитопатичний ефект (СРЕ) на основі вмісту АТФ в 96 годин (СейПТетг-Сіо, Рготеда, Мадізоп МІ).
І0298| Мишей зважували щодня протягом 21 дня після зараження. Дані про масу тіла аналізували за допомогою двофакторного АМОМА і пост-тесту Бонферроні для порівняння груп.
Р-значення, що дорівнюють менше 0,05, вважалися значимими.
І0299| Мишей щодня спостерігали протягом 21 дня після зараження грипом. Будь-яку мишу, яка оцінювалася позитивною протягом чотирьох з наступних шести спостережень (235 95 втрата
ВУМ, скуйовджене хутро, згорблена поза, респіраторний дистрес-синдром, зниження рухливості або гіпотермія), вважали умираючою, після чого її піддавали евтаназії і вважали це як смерть відповідно до правил, установлених Мегіех Іпзійшіопа! Апітаі! Саге апа Озе СоттіНее. Дані виживаності аналізовані з використанням методу Каплана-Мейєра.
ІО300| Мишей піддавали природному М/ВР (Вихсо, Тгоу, МУ). Функцію легень виражали як тривалість паузи (індекс Репі)), безрозмірне розраховане значення, що відображує легеневий опір. Це значення одержували на основі змін у підтримуючому тиск контейнері, що коливається в результаті змін дихання тварини. Бронхостеноз дихальних шляхів тварини впливає на потік повітря і, отже, на тиск у підтримуючому тиск контейнері. Зміни тиску відслідковували під час видиху (РЕР) і вдиху (РІР). Значення Репп обчислювали за формулою Репп-паузахРЕР/РІР, де "пауза" відображує час видиху. Миші акліматизувалися в камері плетизмографії протягом 15 хвилин, а потім збирали дані з інтервалом в одну хвилину, у середньому протягом 10 хв., і виражали у вигляді абсолютних значень Реп. Дані аналізували за допомогою двофакторного
АМОМА і пост-тесту Бонферроні для порівняння груп. Р-значення, що дорівнюють менше 0,05, вважалися значимими.
ЇОЗО1| Результати. Сполуку (1) оцінювали в комбінації з озельтамівіром на здатність запобігати смертності і захворюваності, зменшувати втрати ВУМ і запобігати зміні або відновлювати функцію легень на моделі легеневої інфекції грипу у мишей у порівнянні з ефектами Сполуки (1) або озельтамівіру, що вводяться самостійно. Комбінація не показала негативного впливу на ефективність кожного з препаратів у порівнянні з кожним препаратом, що вводиться самостійно. Крім того, комбінація лікування показала синергію лікування грипу А при недостатній дозі введення кожної сполуки (0,3 і 10 мг/кг Сполуки (1) і озельтамівіру, відповідно) самостійно, тоді як комбінація збільшувала виживаність з 0 до 100 95. Сполука (1) має незначну активність проти грипу В іп мімо (як очікувалося від наявних іп міго даних) і не впливає на ефективність озельтамівіру.
І0302| Модель грипу А у миші. Усі контролі з носієм занедужували при дослідженні на 9 або 10 день. Лікування тільки 1, З і 10 мг/кг Сполуки (1) ВІО забезпечувало повний захист від смерті, зменшувало втрату ВУМ і відновлювало функцію легень, якщо дозу починали вводити через 48 годин після інфікування в порівнянні з контрольною групою з носієм (Таблиця 17). Обробка 0,1 і 0,3 мг/кг Сполуки (1) і 10 мг/кг озельтамівіру, що вводяться самостійно, не захищала від смерті,
Зо не зменшувала втрату ВМУ або не відновлювала функцію легень, якщо лікування починали через 48 годин після інфікування вірусом грипу А. Цікаво, що 0,3 мг/кг Сполуки (1) і озельтамівіру, що вводяться разом через 48 години після інфікування вірусом грипу А, давали повний захист від смерті, знижували втрату ВУМ і відновлювали функцію легень.
ІОЗОЗІ
Таблиця 17
Дані ефективності іп мімо Сполуки (1) з або без введення озельтамівіру через 48 годин після зараження грипом А б 10 мг/кг
Сполука Виживання ререта ваги Репп Виживання ререта ваги Репп (1умг/ю | (21 день) (90). "и день) (День 3). | (21 день) (90) |. "и день) (День 3) 7770. 0 1 9339 | 228 | 0 | 320 | 236 01711110 1 342 | 215 | 0 | 316 | 209 7703 | юЮщЩщо20о0 1рю юьз324 | 190 | 100 | 293 | 80 (0304) Модель грипу В у миші. Усі контролі з носієм занедужували при дослідженні на 7 або 8 день. Введення 1, З або 10 мг/кг Сполуки (1) самостійно за 2 години до інфікування грипом В і потім ВІЮО протягом 10 днів не давало суттєвого захисту від захворюваності, втрати ВУМ або порушення функції легень у порівнянні з контрольними групами. Озельтамівір вводили в дозі 10 мг/кг окремо або в сполученні з 1, З або 10 мг/кг Сполуки (1) за 2 години до інфікування грипом
В, що забезпечувало повний захист від смерті, знижувало втрати ВУМ і відновлювало функцію легень (Таблиця 18). (ОЗО5І
Таблиця 18
Дані ефективності іп мімо Сполуки (1) з або без введення озельтамівіру через 48 годин після зараження грипом В
Комбінація Сполуки (1)/озельтамівіру при грипі В
Озельтамівір 10 мг/кг
Сполука Виживання йде Реп Виживання Втрата ваги (день (1) мг/кг (21 день) (95) о, д (день 6/7) |(21 день) (90) | (8-й день) (95) Б 175 Ж 1251060 даних 21117170 1 336 | 790 | 100 | 77 | 726 778.0 1 339 | 206 | 100 | 175 10177110 | з3 | 204 | 100 | 97 | 17
ІО306)| Приклад 8. Аналіз іп мімо комбінації Сполуки (1) разом з озельтамівіром
ЇО307| Заражених мишей обробляли носієм або підвищуваною дозою Форми А солі НСІ
Сполуки (1)х1/2Н2О (у Прикладі 8 надалі просто Сполука (1)) у комбінації з занамівіром, починаючи за 24 години до зараження вірусом грипу 5х103 ТСІЮво А/РК/8/34. Суспензії для зараження грипом А і Сполуки (1) одержували способом, аналогічним описаному вище в
Прикладі 7. Заражених мишей обробляли один раз ІМ (інтраназально) занамівіром дозою 0,3 мг/кг, 1 мг/кг або З мг/кг за 24 години до ІМ зараження 5х103 ТСІОво А/РВ/8/34, і Сполукою (1) у дозі 0,1 мг/кг, 0,3 мг/кг або 1 мг/кг протягом 10 днів, починаючи за 2 години до зараження 5х103
ТСІОво А/РА/8/34. 0308) Результати підсумовані в Таблицях 19А і 198 нижче. Як показано в Таблиці 19А нижче, комбінована терапія Сполукою (1) і занамівіром давала особливі переваги у виживанні.
Коефіцієнт ефективності, складений показник виживання, втрати маси тіла і функції легень (90 виживаності/(9о втрати маси тіла на 8 день)х(Репйп на 6 день)) підсумовані в Таблиці 198. (ОЗО9
Таблиця 19А
Виживаність: комбінована терапія Сполукою (1) і занамівіром
Сполука (1) (мг/кг, ВІЮ) 1-а доза за 2 години до інфікування ом 03 111 сві 70. 125 | 444 | лою
Занамівір (мг/кг, 0 125 яд 100 мн адозазаги 3031378 111101011001.100 гдинидоінфування. 1 3172323250.1751.0071...00
М у
ІОЗ10І
Таблиця 198
Коефіцієнт ефективності: комбінована терапія Сполукою (1) і занамівіром
Сполука (1) (мг/кг, ВІЮ) 1-а доза за 2 години до інфікування 01111103 1 1
Занамівір 01777117 -117711117-11659 1232 (мг/кг, ІМХ1) 03 044 | щ-КЗ- 5БЮЖюЮКЮКХУМК|ф 55 | 297 1-а доза за 24 години до інфікування (0311) Приклад 9. Профілактична ефективність й ефективність після інфікування Сполуки (1) на моделі інфекції грипу А у миші
ІО312) Матеріали і методи
ЇО313| Тварини. Самки вагою 18-20 г мишей ВАЇ В/с були одержані з даскзоп І арогайогіе5 (Ваг Нагрог, МЕ) для противірусного експерименту. Тварин утримували на стандартному кормі для гризунів і водопровідній воді «ай ІПрішт». їх вміщували в карантин за 48 годин перед використанням.
ІО314| Вірус. Вірус грипу А/Каліфорнія/04/2009 (рпантМ1!), адаптований для мишей, одержували від доктора Олени Говоркової (51. Уиде Спіідгеп'є Кезеагоп Нозрйа!І, Метрпів, ТМ).
Кількість вихідного вірусу збільшували в клітинах МОСК, а потім титрували на летальність у мишах ВАГ В/с. Вірус грипу А//ісіогіа/3/75 (НЗМ2) одержували з Американської колекції типових культур (АТСС) (Мапаззаз5, МА). Вірус пасивували сім разів з мишей адаптованим мишам, а потім один раз перещеплювали в клітини МОСК. Вірус додатково титрували на летальність у мишах ВАГВ/сС з одержанням придатної смертельної дози для зараження. Вірус грипу
А/Леїпат/1203/2004 (Н5МІ1) одержували від доктора дасКіє Каї» з Сепіег5 Тог Оізеазе Сопігої (АМапіа, СА). Мишам вводили смертельну дозу вірусу (5 МІГО50, 5 РЕШ/мишу), що раніше приводила до смерті в проміжку між 6 і 13 днем, 90-100 95 смертності на день 10 при такій дозі.
ЇО315| Сполуки. Озельтамівір (ТаміфлюФ) одержували з місцевої аптеки. Кожна капсула
Таміфлю містить 75 мг активного компонента, озельтамівіру карбоксилату, після метаболізму в організмі. Доза озельтамівіру була основана на цьому вимірюванні. Форму А солі НСІ Сполуки (1), напівгідрат "у Прикладі 9 надалі просто Сполука (1)), використовували для дослідження і доза сполуки була основана на солі НСІ Сполуки (1), напівгідрат. Обидві Сполуки (1) і озельтамівір готували в 0,5 95 розчині метилцелюлози (5ідта, 951. І оці5, МО) для перорального прийому через зонд (п.о.) для введення мишам.
ЇО316| Хід експерименту. Мишей анестезували внутрішньоочеревинною ін'єкцією кетаміну/ксилазину (50/5 мг/кг), і тварин інтраназально інфікували 90 мкл суспензії вірусу грипу.
Зараження вірусом проводили приблизно чотирма 50 95 летальними інфекційними дозами для мишей. Обробку проводили два рази на день (з інтервалом 12 годин) протягом 10 днів, починаючи за 2 години до зараження вірусом або через 48 годин після зараження, як зазначено.
Параметрами для оцінки інфекції були: виживаність, день смерті в середньому, зміни маси тіла і параметрів легеневої інфекції (крововилив у балах, маса і титр вірусу). Тварин зважували окремо щодня протягом 21 дня інфекції. Мишей, що померли протягом перших шести днів
Зо періоду лікування, визнавали померлими з іншої причини, а не від інфекції вірусом грипу, і їх виключали з загального підрахунку.
І0О317| Для оцінки параметрів легеневої інфекції одержували легені від умертвлених тварин (спочатку 5 тварин на групу були відділені для цієї мети). Бали крововиливу в легені оцінювали шляхом візуального огляду на зміну кольору від рожевого до синюшного. Вони виникали в областях легень, а не як поступова зміна кольору усієї легені до більш темного. Бали крововиливу знаходилися в діапазоні від 0 (нормальний) до 4 (уся легеня мала синюшний колір) і, таким чином, є непараметричним вимірюванням. Легені зважували і потім заморожували при - 80 "С. Потім розморожені легені гомогенізували в 1 мл клітинного культурального середовища, рідини супернатанту центрифугували для видалення твердих частинок, і рідкі зразки знову заморожували при -80 "С. Після одержання 96б-ямкових планшетів клітин МОСК, зразки розморожували, серійно розводили з 10-кратним збільшенням розведення і титрували методом кінцевих точок у планшетах (1), використовуючи 4 мікроямки на розведення. Титри вірусу розраховували як І0д910 50 95 дози інфікованої культури клітин на грам легеневої тканини (10910
ССІЮ5БОлЛ).
ЇО318| Статистичний аналіз. Криву Каплана-Мейєра для множинних груп порівнянь аналізували за допомогою логрангового критерію Мантеля-Кокса для визначення статистичної значимості. Потім парні порівняння проводили за допомогою тесту Гехана-Бреслоу-Вілкоксона.
Відносне експериментальне значення доводили до граничної величини порога значимості з поправкою Бонферроні на основі числа зроблених порівнянь обробок. Порівняння середнього значення дня смерті і середнього бала крововиливу в легені аналізували за допомогою тесту
Крускала-Уолліса, а потім тестом Данна множинних порівнянь. Середню масу тіла, вагу легень і 0910 титри вірусу легень оцінювали за допомогою АМОМА, передбачаючи рівну величину відхилення і нормальний розподіл. Після АМОМА індивідуальні значення обробки порівнювали тестом множинних порівнянь Тьюкі-Крамера. Аналізи проводили за допомогою програмного забезпечення РгізтФ (сгарпРайд Зоїмаге, Зап Оіедо, СА). 0319) Результати й обговорення (0320) Профілактичну дозу-відповідь Сполуки (1) досліджували на моделі грипу А у миші.
Введення дози або носія Сполуки (1) починали за 2 години до інфікування і продовжували два рази на день протягом 10 днів. Результати представлені в Таблицях 20 і 21. Усі миші, що 60 одержували тільки носій, занедужували на день 9 дослідження і втрачали, у середньому, 7-32 95 маси тіла (ВУМ). Сполука (1), що вводиться в дозах 1, З або 10 мг/кг ВІО, забезпечувала повну виживаність і дозозалежне зниження втрати ВМУ. Сполука (1), що вводиться в дозі 0,3 мг/кг ВІО, забезпечувала деяке поліпшення виживаності (2/8 мишей), хоча у мишей була значна втрата
ВМУ. У тому ж самому експерименті мишам вводили озельтамівір у дозі 10 мг/кг ВІО, що клінічно еквівалентно дозі для людини (на основі АС). Усі миші, що одержували озельтамівір, виживали і мали подібний профіль втрати ваги як і миші, яким вводили 1 мг/кг ВІО Сполуки (1).
ІО321| Сполука (1) також мала ефективність на цій моделі зараження вірусом грипу
А/Леїпат/1203/2004 (Н5МІ), якщо її вводили через 48 годин після інфікування і продовжували вводити дозу ВІО протягом 10 днів (Таблиця 22). Введення Сполуки (1) у дозі 10 мг/кг давало повний захист, як показано в Таблиці 20. (оЗ22І
Таблиця 20
Профілактичні ефекти Сполуки (1) і озельтамівіру на інфекцію, викликану грипом А/Саїїогпіа/04/2009 (рпан1 М) у мишей ВАГ В/с (профілактика) які мое .
Сполука (мг/кг)? вижили/Всь ср Бали Маса (мг) Титр вірусує ого
Сполука (1) (10 мг/кг) 1010 ши 02-04 13232077
Сполука(і)(Змои | еея 0100-0001 0050077) лозкаїт | Зижоди
Сполука (1) (1 мг/кг) 10 ши 0,6--0,92 246-217 552
Озельтамівір (10 яжж якх 2/2 99413. 3405 282526 790 аДоза на курс лікування, два рази на день протягом 10 днів, починаючи за 2 години до зараження грипом. ьУсереднений день смерті мишей, які померли на 21 день або до цього дня. « од10 ССІОБО/г.
ЗНижня межа детекції (2,6 10910). еНе значиме по дуже строгому тесту множинного порівняння Данна, але значиме від плацебо (Ре0,01) по попарному двосторонньому О-критерію Манна-Уїтні, "Р«0,05, якр«0,01, иир«0,001, у порівнянні з плацебо. оз2ЗІ 5О0
Таблиця 21
Ефекти Сполуки (1) і озельтамівіру на інфекцію, викликану грипом А/ЛМісіогіа/3/75 (НЗМ2) у мишей ВАГ В/с (профілактика)
Які Ь Титр
Сполука ОП) по жк а ж жк мг/кг) 10/10 01-02 164--11 6б,1-0,5
Сполука (1) (3 яжж мг/кг) 10/10 3,3--0,62 260-25 7,202
Сполука (1) (1 410 98-19 0 320,36 | 274449 7,3303 мг/кг)
Озельтамівір жкж як (10 мг/кг) 9ло 1,711 218-24 7,0--0,3
З/20 9,8--21 2,2--0,6 264-54 7,8--0,4 аДоза на курс лікування, два рази на день протягом 10 днів, починаючи за 2 години до зараження грипом. ьУсереднений день смерті мишей, які померли на 21 день або до цього дня. «| од10 ССІОБО/г.
Не значиме по дуже строгому тесту множинного порівняння Данна, але значиме від плацебо (Р«е0,01) по попарному двосторонньому О-критерію Манна-Уіїтні. еТе саме, що зноска "а", але значиме від плацебо при рівні Р«0,05, Р«к0,01, ихР«О,001, у порівнянні з плацебо. (ОЗ241
Таблиця 22
Ефекти лікування (через 48 годин) Сполуки (1) і озельтамівіру на інфекцію, викликану грипом Іпїшеп7а А/Меїпат/1203/2004 (Н5МІ1) у мишей ВАГ В/с (профілактика)
Середні параметри легень (6-й день)
Які вижили/ Море :
Сполука (1) (10 мг/кг) 10/10 0,15--0,02 3,75--0,94
Озельтамівір (10 мг/кг) ло 95-12 0,17--0,02 5,22-0,38 0/2 9,9-0,8 0,16-0,02 4,6541,23 аДоза на курс лікування, два рази на день протягом 10 днів, починаючи за 2 години до зараження грипом. ьУсереднений день смерті мишей, які померли на 21 день або до цього дня. «| од10 ССІОБО/г. (0325) Приклад 10. Ефективність іп міго Сполуки (1) відносно штаму іспанського грипу
0326) Клітини і віруси. Клітини Мадіпе Юагру нирок собак (МОСК) спочатку одержували з американської колекції культур Туре (АТСС, Мапазза5, МА) і пасивували, використовуючи стандартні лабораторні методики, перед використанням в аналізах з інфекцією. Клітини підтримували при 37 "С у середовищі Ігла, модифікованому за методикою Дульбекко (ОМЕМ;
Іпмігодеп, Сагієрайд, СА), з додаванням 10 95 фетальної бичачої сироватки (бідта-Айагіси, 95.
Гоці5, МО), 2 мМ Г-глютаміну, 10 НЕРЕ5, 100 Од/мл пеніциліну і 100 мкг/мл стрептоміцину (Іпмігодеп). Вірус грипу одержували з АТСС, Ше Міги5 Зигмейіапсе апа Оіадпо5і5 Вгапсп ої Те
ІпЯнепла Оімівіоп ої Ше Сепієег5 ог Оізеазе Сопігої апа Ргемепіп (СОС; АйШапіа, СА) або Ше
Іпїнепла Неадепі Везошйгсе, Іп'їцеплга Оімізіосп, М/НО СоПарогаїп9у Сепієї їог Зигуеїйапсе,
Еріаетіоіюду апа Сопіго!ї ої Іпїйнепга, СОС. Для одержання основних розчинів вірусу клітини
МОСК інфікували при низькій множинності зараження інфекції (МОЇ) у середовищі ОМЕМ з додаванням 2 мМ Г-глютаміну, 10 мМ НЕРЕФЗ5, 100 Од/мл пеніциліну, 100 мкг/мл стрептоміцину і 1 мкг на мл трипсину, обробленого толілсульфонілфенілаланілхлорметилкетоном (ТРСК) (5В
Согр.; Запіа Сіага, СА). Клітини інкубували при 37 "С з 595 СО» протягом 48 годин, після чого супернатант збирали центрифугуванням при 900х4д протягом 10 хв. на центрифузі Весктап 5- 6К. Брали аліквоти з основного розчину вірусу і заморожували при -80 "С.
І0327| Сполуки. Вільну основу або сіль НСІ Сполуки (1) (наприклад, аморфна сіль НСІ
Сполуки (1), Форма А солі НСІ Сполуки (1), гемігідрат, аморфна вільна основа Сполуки (1)) («у
Прикладі 10 надалі Сполука (1)) розчиняли в 100 95 диметилсульфоксиді (МО) з одержанням розчину з концентрацією 10 мм. (0328) Противірусна активність. Противірусну активність Сполуки (1) оцінювали в клітинах
МОСК по вимірюванню рівня АТФ, за допомогою СейПТйет-сїіо (Рготеда; Маадізоп, УМІ). Клітини
МОСК вміщували в чорні планшети з прозорим дном і 384 ямками з густиною 2х10"7 клітин на ямку в 50 мкл МОМ. Клітини інкубували при 37 "С, 595 СО», при насиченій вологості для забезпечення адгезії клітин і формування моношару. Через 5 годин 40 мкл середовища видаляли і додавали 15 мкл вірусу при МОЇ 0,005. Сполуку додавали як 25 мкл 10-точкового триразового розведення в ОМЕМ з добавками (кінцева концентрація ОМ5О дорівнює 0,5 95).
Внутрішні контролі складалися з ямок, що містять тільки клітини і необроблені клітини, інфіковані вірусом. Через 72 год. інкубації в кожну ямку додавали 20 мкл СейТйетг-сіо і
Зо інкубували при кімнатній температурі протягом 10 хв. Люмінесценцію вимірювали за допомогою зчитувача Епмізіоп Микабеї! (РегкіпЕІтег; М/актат, МА). Значення ЕСзхо (концентрація сполуки, що забезпечує життєздатність 5095 клітин у неінфікованому контролі) розраховували за допомогою кривої доза сполуки проти даних відповіді, використовуючи метод побудови кривої на 4-х параметрах, використовуючи алгоритм ІГемепригд Магоацагаї (програмне забезпечення
Сопдозео; Сепедайа, Вазеї, Швейцарія). Тестування іп міго праїНоМ1 здійснювали в ЗошНегп
Кезеагсі Іпзійше при попередженні В5І -3. 0329) Як показано в Таблиці 23 нижче, Сполука (1) показала потужну активність проти всіх досліджених штамів грипу А, включаючи НІМІ ії НЗМ2 посилальні штами 1934-2009 років, а також штами пандемії НІМ1 А/Саїпогпіа/07/2009, А/Гехас/48/2009 2009 року і високопатогенного штаму Н5МІ1 АЛ/М/1203/2004 птахів. Сполука (1) була також ефективна проти всіх штамів, включаючи штами, що стійкі до амантадину й інгібіторів нейрамінідази. Сполука показала обмежену активністю відносно вірусу грипу В.
ІОЗЗО
Таблиця 23
Ефективність Сполуки (1) проти груп штамів грипу
Штам грипу штам Підтип ЕСво-ЗО вірус Спол. (1) (НМ)
Продовження таблиці 23
А/Мем детвеу/в/лв 77777711 ІВ фін | 7 бгонобє
В/лее/дО 11111111 111111монд11 (В/Лизва/б9ї 77777711 Ї1711111монДд1 асСійкість до амантадину: мутація М2 31. ьЬСійкість до озельтамівіру карбоксилату: мутація МА 275У. сСійкість до озельтамівіру карбоксилату: мутація МА 119. "Зовнішньо підтверджена фенотипічна стійкість, послідовність даних недоступна.
ІО331| Приклад 11. Іп мійго комбіновані експерименти зі Сполукою (1) і озельтамівіром, занамівіром або фавіпіравіром
ЇОЗ332| Розчин Сполуки (1) (вільна основа або сіль НСІ Сполуки (1) як і в Прикладі 10) у 100 965 диметилсульфоксиді (0ОМ5О) тестували у триденному аналізі з клітинами МОСК на основі СРЕ, що були інфіковані А/Риегпо Кісо/8/34 при МОЇ, що дорівнює 0,01, у комбінованих експериментах або з інгібіторами нейрамінідази озельтамівіром і занамівіром, або з інгібітором полімерази Т-705. Озельтамівіру карбоксилат і Т-705 розводили в 100 95 диметилсульфоксиді (0М50); занамівір розводили в середовищі Ігла, модифікованому по методу Дульбекко (ОМЕМ), з концентрацією 10 мМ і зберігали при -20 "С. У цьому дослідженні використовували або Бліс- незалежний спосіб (Масзупегду) (наприклад, Ргіспага М.М. апа 5піртап С., Уг., Апіїміга! Вев, 1990. 14(4-5): р. 181-205), або метод адитивності І оеу"е/медіанного ефекту (наприклад, Споц
Т.б. апа Таїіаіау Р., Адм Еплуте Недиї, 1984. 22: р. 27-55). Бліс-незалежний спосіб включає тестування комбінації різних концентрацій інгібіторів у шаховому порядку, у той час як спосіб адитивності І оеу"е включає тестування фіксованого відношення комбінацій інгібіторів у різних розведеннях фіксованого співвідношення. Експерименти також проводили, використовуючи комбінації Сполуки (1) із самою собою як контролем, підтверджуючи адитивність.
Життєздатність клітин визначали за допомогою СеїЇТйег-с1о.
0333) Результатом Бліс-незалежного способу були синергічні значення, що дорівнюють 312 і 268, для озельтамівіру карбоксилату і занамівіру, відповідно; і синергічне значення, що дорівнює 317, було одержане для фавіпіравіру. Синергічні значення більше 100 звичайно вважаються сильною синергією, а значення між 50 і 100 вважаються помірною синергією.
Спосіб адитивності І оеме показав значення СІ (показник адитивності), що дорівнюють 0,58, 0,64 і 0,89, при 50 У5--ому ефективному рівні для озельтамівіру, занамівіру і Т-705, відповідно.
Значення СІ менше ніж 0,8 вважаються сильною синергією, а значення між 0,8 і 1,0 вважаються такими, що знаходяться в діапазоні від адитивних до помірно синергічних. Разом ці дані, як показано в Таблиці 24, передбачають, що Сполука (1) є синергічною з тестованими інгібіторами нейрамінідази й інгібітором полімерази. оЗЗ41
Таблиця 24
Висновок експериментів іп міїго синергії і антагонізму я. й Від адитивності до нн'фнИІІХХКНТНТНШИИШННННШШВООВОВОВОТВТТВОВВ ОВ ОО
ЕОзо, ЕЮ»з, Ебео: концентрація сполуки, при якій 50 9», 75 95 або 90 95, відповідно, клітин захищені; показники адитивності розраховували при рівнях ефекту ЕЮвхо, ЕО»5 і ЕЮво.
ІО335)| Приклад 12. Ефективність на моделі інфекції грипу А у мишей (0336| Профілактичну дозу-відповідь Сполуки (1) (в аморфній формі солі НСІ Сполуки (1) гемігідрат або, у цьому прикладі, просто Сполука (1)) досліджували на моделі грипу А у миші.
Введення дози носія або Сполуки (1) починали за 2 години до інфікування і продовжували два рази на день протягом 10 днів. Усі миші, що одержували тільки носій, занедужували на день 9 дослідження і втрачали, у середньому, «32 9о маси тіла (ВУМ). Сполука (1), що вводиться в дозах 1, З або 10 мг/кг ВІЮ, забезпечувала повну виживаність і дозозалежне зниження втрати
ВУУ. Сполука (1), що вводиться в дозі 0,3 мг/кг ВІЮО, забезпечувала деяке поліпшення виживаності (2/8 мишей), хоча у мишей була значна втрата ВМУ. У тому ж самому експерименті мишам вводили озельтамівір у дозі 10 мг/кг ВІО, що клінічно еквівалентно дозі для людини (на основі АОС). Усі миші, що одержували озельтамівір, виживали і мали подібний профіль втрати ваги як і миші, яким вводили 1 мг/кг ВІО Сполуки (1).
І0337| Термін, на який можна відстрочити введення Сполуки (1) і при цьому забезпечувати ефективність у цій моделі, досліджували за допомогою зараження мишей вірусом грипу А і шляхом введення доз носія, озельтамівіру або Сполуки (1), починаючи через 24, 48, 72, 96 або 120 годин після інфікування, продовжуючи вводити дозу ВІО протягом 10 днів (Таблиця 25). Усі
Зо контролі з носієм занедужували при дослідженні на 8 або 9 день. Сполука (1), що вводиться в дозі 1, З або 10 мг/кг ВІОЮ, забезпечувала повний захист від смерті і зменшувала зниження ВМУ, якщо введення доз починали через 72 години після інфікування в порівнянні з контролем з носієм. Тільки введення озельтамівіру в дозі 10 мг/кг забезпечувало повний захист, якщо введення дози починали через 24 години або раніше після інфікування. Якщо початок введення сполуки при цьому затримували, то Сполука (1) у дозі З або 10 мг/кг ВІО забезпечувала повне виживання через 96 годин після інфікування і давала частковий захист, якщо початок введення дози відкладали на 120 годин після інфікування. (0338) Досліджували ефективність Сполуки (1) відносно зменшення титрів вірусу в легенях.
Мишей інфікували вірусом грипу А і через 24 години після цього вводили носій, озельтамівір (10 мг/кг ВІ) або Сполуку (1) (3, 10, 30 мг/кг ВІЮ) до витягання легень і визначення вірусного навантаження на 6 день (Таблиця 26). Усі групи, яким вводили Сполуку (1), показали надійне статистично значиме зниження титрів вірусу в легенях у порівнянні з тваринами, яким вводили озельтамівір і носій.
І0О339| Для одержання моделі РК/РО моделі мишей інфікували вірусом грипу протягом 24 годин, а потім вводили Сполуку (1) ще 24 години. Дози розділяли на фракції у вигляді одиночної дози, у вигляді двох або чотирьох доз, що вводяться кожні 12 годин або 6 годин, відповідно.
Легені витягали, а плазму збирали для визначення вірусного навантаження легень і концентрації Сполуки (1). Окремі дані титрів легень при цих схемах дозування (дбп, д12пП і д24п) переносили на криву проти окремих значень Стах Стіп і АОС (дані не показані). Хоча існує чіткий взаємозв'язок між зниженням титрів у легенях і Стіп, кореляція з Стах була слабкою, а кореляції з АОС ще слабкіше. Сильна кореляція з Стіп була тоді, коли виміряні концентрації Сполуки (1) у плазмі переносили на криву проти виміряних титрів у легенях. Половина від максимального зниження титрів у легенях (2-3 І0д) була поблизу зсувів у сироватці ЕСоо (100 нг/мл). Аналогічна кореляція була виявлена між титром у легенях і виміряними концентраціями
Сполуки (1) у легенях (дані не показані). 0340)
Таблиця 25
Підсумовування процента виживання і процента втрати маси тіла на моделі грипу А миші лікування відносно , маси тіла на 8-ий 1 (мг/кг, ВІЮ) (мг/кг; ВІО) виживання й інфікування (год. день дослідження пд си п ГЕ ПО ПОН То п ПО Я: по нннннннннпІШШН ШИНИ ШИ ПИ ТЕТ ПО: Я ДО нини а а Я ПО ТТ Я ПО СС ЗО нини ши Я ПО я ПОЛО То нин с я я Ох ПО ПОН ЛА: ПОН нн я ПЕ ТЯ ПО ТТ ПО СС Тк НОЯ нин:ншШТІВІ НІ НИ Я а о ПЕ У п пи У си п ГЕ я ПОН То НЯ НО с З 181 111111111111111111711лоо 1111-42
С т111111111во 1111134 голою 11111289 1 о1171111111111111111171110111711711113380 п ит: и о ТЯ ПО КОН Те ХНН НО: ПОН нини ши Пи ПО ТЕТ Я ОО ТК: ПОН т11111111во 1111125 гово 111 1 о111111111111111117110111111344 пи Р о Ге ПО ПОН То НЯ НО и КД 18171111111111111111111711лво 1111132
С т111111111во 11111294 нини ши ли По По ПО Х ПЕ ЗО нини ши ши пиши: лилия ПИЛИ ж ПОМ пит: Си п Го ПО КОН То ХНН КОН ТЯ УДО 181 1111111111111111117110о 111123 1ло161нде 7 (нд 1 о1711111111111111171110117111111346 ав Ї77711771о 1 17777777717171717171717111711111375. | 3440 181 111111111111111111711125 11113260 1ло161нде 7 (нд 1 о0111111111111171110171111113460 аДані незалежних експериментів.
ЬДані того же експерименту. «НД - немає даних.
ІОЗА1І
Таблиця 26
Підсумовування титру вірусу в легенях і Г0д:о зменшення на моделі грипу А мишей титр вірусу в Зниження І од1о Титр вірусу в Зниження І од1о легенях . Я легенях . Я
І оаіоТСІЮ5о)? відносно носія І оаіоТСІЮ5о)? відносно носія
Омг/ковіб носія | (62077 ЇЇ77777777сї1ї1111с16281сС1 10 мг/кг ВІО соельтамвру 00060516
Носііаасі: ННЯ ННЯ КОН: НО ННЯ івіньісьй ННЯ ПНЯ ПН ЗИ НЕ УНЯ аВведення тварині починали через 24 години після інфікування і продовжували протягом 5 днів. ьТитри вірусу в легенях визначали на 6 день дослідження. «НД - немає даних.
Двофакторний АМОМА і пост-тест Бонферроні, "Р«0,001. (0342) Приклад 13. Експеримент по перевірці зараження грипом
І0343| Раніше використовували модель інфікування живим атенуйованим грипом для прогнозування ефективності препаратів проти грипу при природній інфекції в організмі людини (Саїее О.Р., Репд АМ/., Нивзеу Е.К., Горо М. 4 Наудеп Б.С. Заїеїу апа ейісасу ої опсе даїйїу іпігапаза! 2апатімік іп ргемепіїпда ехрегітепіа! питап іпПшепга А іпіесійоп. Апіїмі" ТНег. 4, 143-149 (1999); Наудеп Е.С. еї а). Ове ої ІШїйе ога!| пешгатіпідазе іппіріюог озейатіміг іп ехрегітепіа! питап іпепга. "АМА, 282, 1240-1246 (1999). Проводили рандомізоване -подвійне-сліпе дослідження під контролем плацебо в єдиному центрі Форми А солі НСІ Сполуки (1) гемігідрат (далі в цьому прикладі просто Сполука (1)) у здорових добровольців, яких інокулювали для зараження живим вірусом штаму грипу АЛЛ/5соп5іп/67/2005 (НЗМ2). Індивіди одержували п'ять щоденних доз або плацебо (М-33), або Сполуки (1) один раз на день (00) (у вигляді капсули, що складається з чистої Сполуки (1)): 100 мг (М-16), 400 мг (М-19) або 900 мг на 1 день, а потім 600 мг 2-5 день (М-20) або 1200 мг на 1 день, а потім 600 мг на 2-5 день (М-18). Індивіди одержували три рази на день тампони в ніс і три рази на день проводили запис у картках клінічних симптомів у 1-7 дні і їх виписували з клініки на 8 день, після чого їх безпеку оцінювали приблизно на 28 день.
Тампони в ніс досліджували на наявність вірусу грипу в культурі клітин (первинний аналіз) і за допомогою ЗКТ-ПЛР (вторинний аналіз). 0344) Аналізи ефективності здійснювали на наборі повного аналізу (БА), визначений як усі рандомізовані індивіди, що одержали принаймні одну дозу досліджуваного препарату (Сполука (1) або плацебо) і концентрації вірусу у яких були вище або дорівнювали нижній межі кількісного визначення аналізу ТСІЮвзо клітинної культури в будь-який момент часу протягом 48 годин після щеплення, або титр інгібування гемаглютинації яких підвищувався в 4 рази або більше у порівнянні з базовим (день 1) у період після щеплення (М-74). Набір безпеки включав всіх індивідів, які були щеплені вірусом грипу на день 0 і які одержували принаймні одну дозу або плацебо, або Сполуки (1) (М-104). 0345) Оцінка ефективності
Ї0346| Головним показником у цьому дослідженні була демонстрація тенденції доза- відповідь у АОС виділення вірусу між днем 1 дослідження (перший день введення дози
Зо лікарського засобу) і днем 7 по вимірюванню ТСІЮ5зо в аналізі клітинної культури в наборі РА.
Статистично значима тенденція доза-відповідь спостерігалася в медіані АОС виділення вірусу в тампонах у ніс (Р-0,036, тест на тенденцію Джонкхієра-Терпстра). Крім того, були проведені парні порівняння пулів плацебо і групи кожної дози Сполуки (1) для медіани АОС виділення вірусу, середнього продовження виділення і середньої величини піка виділення вірусу (Таблиця 27). Для групи з дозою 1200/600 мг було відзначено статистично значиме зниження АОС виділення вірусу (Р-0,010, тест на рангові суми Уїлкоксона), і значні скорочення піка виділення спостерігали для групи з дозою 1200/600 мг (Фіг. 13), групи з дозою 400 мг і об'єднаних груп з дозою Сполуки (1). Були здійснені додаткові аналізи груп ЕА (дані не показані).
І0347| Виділення грипу через ніс також кількісно оцінювалися ДКТ-ПЛР і результати були аналогічні результатам аналізу клітинної культури. Немає ніякої різниці у швидкості сероконверсії між групами з дозою Сполуки (1) і плацебо, як визначено по 4-кратному або більшому збільшенню титру проти грипу відносно базової лінії до щеплення, що передбачає, що доза Сполуки (1), уведена через 24 години після щеплення грипу, не впливає на швидкість передачі інфекції грипу і не припиняє наступну гуморальну імунну відповідь на інфекцію (Таблиця 28). (0348) Індивіди записували клінічні симптоми три рази на день у щоденниках. Розраховували
АЦШС клінічних і грипоподібних симптомів, оцінених по балах з дня 1 по день 7. У порівнянні з плацебо, група з дозою 1200/5600 мг Сполуки (1) показала статистично значиме зниження середньої тривалості композитних клінічних симптомів (Р-0,001), медіани АОС. грипоподібних симптомів (Р-0,040) і середньої тривалості грипоподібних симптомів (Р«0,001) (Таблиця 28).
О349)
Таблиця 27
Середня АОС виділення вірусу, середня тривалість виділення і середня величина піка виділення вірусу
Узага-
Кінцева точка льнені
Іодиниції плацебо Сполука (1)
М-22 100 мг | 400 мг | 900/600 мг |1200/600 мг/| Об'єднані
М-12 М-12 М-14 М-14 М-52 й АЦШС, медіана вірусу в (020 (00, (0,0 культурі ПооттсіОвомлдень| б ОО (0,0,16,1) |(0,0, 8,4) (0,0, 18,0) панни 0269 | 0206 | 0,723 0,010 0,057 1. |Тривалість, середня! 238 | 096 | 160 | 271 | 000 07 (95 95СІ) (0,03, (0,00, 1(0,00, (0.00, 4,68) | (0,00, 1,33). (0,00,
НІ ІДень) 4,63) |3,39) |НД) 000,68) 0000, 75) 2 43 111 |Р-значенняяї/// |НД | 0331 | 0,831 0,893 0,169 0,487 7 Пік, середнє (50) 0 Шодіо ТСІЮОво/млі 1,878 2,209) |1(1,976) | (2,201 1,365 2,002 111 |Р-значенняя.д// |НД | 039 | 0,049 77 0,505 0,002 0,015
АЦШС, медіана вірусу по | Подію копій/ (0,0, (0,0, (0,0, авВТ-РОВе | мл"день) 42 41,9) 36,9) 000,57) )(00,0,257) )(0,0, 21,5) 0218 | 0,306 | 0,821 0,014 0,075 7. |Тривалість, середня! 2,91 | 096 | 1,936 | 239 / 000 07 (95 95СІ) (0,03, (0,00, 1(0,00, (000,51) | (000,06). (0,00,
НІ ІДень) 535) 3,99) НД) (05) 00006) /2 394 1111 |Р-значенняя,їд/// |НД | 0318 | 0,753 0,602 0,084 0,238 7 Пік, середнє (50) 0 Шодіо ТСІЮОво/млі 3,108 3,379) |(3,514). |(3,097 2,861 3,276 7. |Р-значенняяд / |НД | 0380 | б2б2 | 0,794 0,007 0,081 21/32 | 11/16 | 9/9 13/19 12/18 45/72 (мм (в) ////// ((6б9є) (6996) (4795) (6895) (6795) (6395) 111111 |Р-значення.їд/// (НДО | 50999) 0247 | »50,999 »0,999 | 0,828
АЦС: площа під кривою значення відносно часу; СІ: довірчий інтервал; МА: не доступно; ЗКТ-ПЛР: кількісна полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскриптазою; 50: стандартне відхилення;
ТСІО5О: 50 95 інфекційна доза культури тканини.
Примітка: статистично значущі значення Р (Р«е0,05) виділені жирним шрифтом. ар-0,036 для тенденції доза відповідь АОС з тесту тенденції Джонкхієра-Терпстра.
ЬБр-значення розраховували з тесту на рангові суми Уїлкоксона. сзначення Р обчислювали з АМОМА. азначення Р обчислювали з Іод-ранг-тесту. ер-0,036 для тенденції доза відповідь АОС з тесту тенденції Джонкхієра-Терпстра. і'сероконверсію визначали як 24-кратне збільшення титру антитіл проти грипу при візиті для перевірки безпеки у порівнянні з базовим рівнем. Значення Р обчислювали за допомогою точного тесту Фішера.
ІОЗ5ОЇ
Таблиця 28
Медіана АС, середня тривалість і середня величина піка, композитних клінічних симптомів і грипоподібних симптомів
Узагальнені
Кінцева точка (одиниціїЇ плацебо Сполука (1)
М-е22
М-12 М-12 М-14 М-14 М-52 дис,
Композитний | медіана 4,85 1,85 4,70 1,75 1,95 2,15 клінічний (діапазон) симптом 0,0, 23,5 0,0, 25,3) 1(0,0, 16,0) | (0,0, 32,3 0,0, 5,5 0,0, 32,3 0,422 0,694 0,595 0,211
Тривалість, пи сх ааНЕСІННЕН ШЕ: ЗМ НЕ НЕ НН ШЕУ о, 00001 оом, алу (003, 543) (1,28, 4,63))(0,00,4,61) (0,00,224). | (1,87, 3,06) 11111111 |Р-значенняї НД. | 0,946 0,994 0,686 0,001 0,355
Ранг) о 1(3,637 3,881 2,167 4,232 1,286 3,158 77171711 Ф|Р-значенняїНД.7 | 0,532 0,366 0,863 0,036 0,187 дис,
Гоипоподібний медіана 4,05 1,85 3,80 1,75 1,75 2.05 0,0, 17,7 0,0, 21,3) | (0,0, 14,0). | (0,0, 28,6 0,0, 4,4 0,0, 28,6 0,363 0,617 0,595 0,040 0,149
Тривалість, одязі) ве | вве о,
НИ ден (2,04, 4,73) | (0,00, 5,40)) (1,28, 4,63)| (0,00, 4,61) (0,00, 2,24). | (1,87, 3,00) 71111111 |Р-значенняїНд.д//-/--/ | 0,957 0,994 0,653 -0,001 0,342 77771111 ПРаніф (3,003 3,361 1,832 3,534 1,216 2,689 11111111 |РізначенняїНд.Г///// | б 0,323 0,838 0,034 0,168
АЦС: площа під кривою значення відносно часу; СІ: довірчий інтервал; МА: немає даних.
Примітка: статистично значущі значення Р (Р«е0,05) виділені жирним шрифтом.
ЬБр-значення розраховували з тесту на рангові суми Уїлкоксона. сзначення Р обчислювали з АМОМА. 9значення Р обчислювали з Іод-ранг-тесту. 0351 Оцінка безпеки 0352) Сполука (1) добре переноситься, і там були не непланового внаслідок сполуки (1)- негативних подій, пов'язаних з (АЕ) не було яких-небудь серйозних побічних ефектів. Список несприятливих подій, що відбуваються у 21095 випробуваних у будь-якій групі лікування, представлений в Таблиці 29. Грипоподібне захворювання найбільш часто приводило до несприятливих подій і, як повідомлялося, пропорція була приблизно однакова в плацебо й у групах, що одержували Сполуку (1). Несприятливі події, які відбулися з 210 95 різницею в групах,
що одержували Сполуку (1) і плацебо, були: зниження рівня фосфору в крові (18,1 95, для
Сполуки (1); 0 95 для плацебо), ринорея (Сполука (1), 4,2 95; плацебо, 18,8 95) і закладеність носа (1,495, Сполука (1); 15,695, плацебо). Крім того, спостерігалося підвищення аланінамінотрансферази (АГТ) як у плацебо, так і у реципієнтів Сполуки (1). Ні порушень функції печінки, ні зменшення фосфату в сироватці не спостерігалися в дослідженні зі збільшенням дози вперше у людини Сполуки (1) з однією дозою до 1600 мг і з декількома дозами до 800 мг щодня протягом 10 днів; раніше повідомлялося як про підвищення АЇ Т, так і про зменшення фосфату сироватки при вірусній інфекції верхніх дихальних шляхів.
ІОЗ53
Таблиця 29
Список несприятливих подій, що відбуваються у х10 95 випробуваних в будь-якій групі лікування
Переважний термі Узагальнені 500/БО | 1200/506
ИН
Грипоподібне
Збільшена зпанінамінотраноферага | 5056 3П6Ю 15) 00685 опа
Знижений фосфор вкрові | 0 /|3(18,9|Ї 0 |6(31,6)| 4(222) | 13(181) (Ненормальнаспірометрія / 26,3) |2(12,5)14(211)| 0 | 4(222) | 10(13,9)
Риноряя 1 6088) | 0 |2005),Ї 0 | 1056) | з(42)
Головнийбіль. 17 26,3) |1(653|4(21)|Ї 0 | 21) | 7097) (Контактнийдерматит / 3(94) )/|3188)Ї 0 | 0 | 0 | з(42) (Закладеністьносаї | 5156) | 0 | 0 | 0 | 1656) | 10149
Збільшена зспартатамінотраноферава | 09) 1690155) 020) яве
Ротоглотюювийбіль | 1(3) 202,53! 0 | 1(0553| 0 | з(а42) (Головний більнапруження | 1(3) | 0 |200,53)| 105535 | 0 | з(42)
Нездужанняд 171 103) (202531 0 | 0 | 0 | 2028) (нудота: 17717110 | 0 |2005)| 10553 | 0 | заг)
Примітки. Індивіда з декількома подіями рахували один раз АЕ. Індивіди можуть бути в декількох категоріях. аОдна доза в 900 мг в день 1 і 600 мг да в проміжку між 2 днем і 5 днем.
ЬОдна доза в 1200 мг в день 1 і 600 мг да в проміжку між 2 днем і 5 днем. сГрипоподібне захворювання, як визначено в аналізі ефективності, оцінювали на основі параметрів, перерахованих в тексті.
АЕ грипоподібного захворювання визначав лікар. (0354) Обговорення
ЇО355| У дослідженні з зараженням грипом здорових добровольців Сполуки (1) була показана залежність доза-відповідь АОС вірусного титру в тампонах у ніс як у клітинних культурах ТСІЮво, так і в ЗОЗКТ-ПЛР, і найвища оцінена доза Сполуки (1) викликала значне зниження вірусного титру АОС, а також АОС і тривалості симптомів грипу. Хоча аналогічна величина поліпшення вище плацебо не спостерігалася в групі з другою високою дозою 900/600 мг (Таблиця 27), ця доза не показала результати, подібні з дозою 600 мг відносно медіанної
АЦС для композитних клінічних симптомів і грипоподібних симптомів у кінцевих точках (Таблиця 28); причини цієї відмінності повністю не зрозумілі. Хоча точна безпека не була оцінена в ході
РОС, зменшення фосфату і збільшення АТ передбачає, що відповідний моніторинг обох параметрів потрібно буде використовувати в майбутніх дослідженнях. 0356) У цілому, обмеження моделі зараження грипом полягають у тому, що вірус грипу, використовуваний у цьому дослідженні, являє собою штам, що був спеціально вибраний так, щоб не дати найбільш серйозні клінічні симптоми інфекції вірусом грипу. Крім того, кількість вірусу, що вводиться для зараження, ймовірно більше, ніж кількість грипу при природному зараженні. Час введення дози Сполуки (1) через 24 год. після впливу може бути неможливим терміном початку терапії в суспільстві, де пацієнти рідко проходять діагностику або лікування, доти, поки в них не з'являються суттєві симптоми, імовірно більше ніж через 24 години після впливу. Однак з огляду на той факт, що при природному зараженні індивіда спочатку заражаються набагато меншим вірусним титром, часові шкали не є прямо порівнянними.
ІЇО357| У підсумку, Сполука (1) є потужним інгібітором грипу А РВ2, що представляє особливий і новий клас противірусного засобу. Властивості цього інгібітору, як описано в доклінічних і клінічних даних, указують, що Сполука (1) є прекрасним кандидатом для подальшої оцінки і має декілька потенційних переваг перед існуючими противірусними препаратами, використовуваними для лікування інфекції, викликуваної грипом. 0358) Усі посилання, наведені в даному документі, включені як посилання в повному обсязі.
Як використовується в даному документі всі абревіатури, символи і конвенції узгоджуються з використовуваними в сучасній науковій літературі. Див., е.9., Чапеї 5. ода, єд., Те АС БУЄ
Спціде: А Мапиаї! тог Аційоге5 апа Еайогв5, 2па Еа., Мавнпіпаїюп, О.С: Атепсап Спетіса! босівїу, 1997. 0359) Приклад 14. Сполука, збагачена дейтерієм (1)
ІО360)| Сполука (1), збагачена дейтерієм, може бути синтезована згідно зі Схемою 1, нижче: 0361 Схема 1 5 ств ав Еш й сан ВЕ. Ем ес ік ; се у фун БК ї СИРИ й 3Х З о її х ї в йо їЗ у З Бе БУ й Б
Зїщеї З ЕК
Св, ї гео їх я ї |со ТЕ сів ЩЕ МК кон ше Й Кн В арис он
БЕ В ЖЕ В
Бе й В ся і-ї б вв
ЖК 5 ВЕК В об ї В о и В я и, ку є йо: о
Ей, сталія Ве ек В п 45 Песни Ко ой о еадія ЕК, хакі Б МЕ че ри х МААХАМУМАУАХХ УМА ВВ.
Те бак
СЕБЕ М
В їх Ко Я щ КІ їх ви В Е І ще її й ие ОО т К З Не се Ба її ще і: сужнія ж Конт що 7
КОС, мая ВОСЕЬ, -х Бе ї М ше ч
З В ее БЕХ СНО 0362) Реагенти й умови: малеїновий ангідрид (стадія 14а), СНІ»; (стадія 1465) бета-хінін, етанол, толуол; (стадія 14с) ОРРА, ЕЇїзМ, 90 С, ВпОн; (стадія 144) Не», Ра/С, метанол; амін (стадія 14є) 14-5, ІРІ2МЕЇ, ТНЕ, 70 "С; (стадія 141) НСІ, діоксан, МеСМ, 80 "С; (стадія 149) Маон,
ТНЕ, меОнН. 03631 14А: Сполука (14-1) бо ї о -- Ковви Ох я
Ск ОТ кт р»о о ть
ЕВ
14-41
ЇО364| Трет-бутоксид калію (9,663 г, 86,11 ммоль) розчиняли в ЮМ5О-йвє (30,00 мл) і вміщували в азот. Додавали розчин циклогекса-1,4-дієну (6 г, 74,88 ммоль) у пентані (60,00 мл), і суміш перемішували в азоті протягом 2,5 години. Шар ОМ50О-4й6 видаляли і додавали свіжі 30 мл ОМ5О-й6є разом із трет-бутоксидом калію (9,663 г, 86,11 ммоль). Перемішування продовжували протягом ночі. Шари розділяли і пентановий шар промивали 02О (50 мл) і сушили на Ма»5О.4 з одержанням 1,2,3,4,5,5,6,6-октадейтеріоциклогекса-1,3-дієну (14-1), який переносили в наступну стадію у вигляді розчину. Ця реакція дає суміш ізомерів 1,3- і 1,4-дієну.
Тільки 1,3-дієн бере участь у реакції в наступній стадії. 03651) 146: За, 4,7,7а-тетрагідро-4,7-етанізобензофуран-1,З-діон-4,5,6,7,8,8,9,9-дв (14-2)
Зо в ; Б. іш Е: щ х З В явну Ян КЗ ї ве бар а й я В о 5 я й
З зенверозура о її веж (0366) Пентановий розчин 1,2,3,4,5,5,6,6-октадейтеріоциклогекса-1,3-дієну (14-1) (6,5 г, 74,0 ммоль) розбавляли хлороформом (50 мл) і обробляли малеїновим ангідридом (8,0 г, 81,4 ммоль). Реакційну суміш залишали перемішуватися при кімнатній температурі протягом ночі.
Розчинник упарювали при зниженому тиску й одержаний напівтвердий осад обробляли Меон.
Після перемішування протягом 10 хвилин суспензію МеоН охолоджували приблизно до 20 "с.
Одержаний осад збирали шляхом фільтрації і промивали трьома невеликими порціями (5 мл) холодного метанолу з одержанням продукту (14-2) у вигляді білого твердого продукту. "Н-ЯМР- аналіз (СОСІв) 3,15 (с, 2Н) показав чистий продукт і 95 9о включення дейтерію. (03671) 14с: (-/-)-трано-3-(етоксикарбоніл)біцикло(|2.2.2окт-5-ен-2-карбонова-1,4,5,6,7,7,8,8-йв кислота (14-3) и и ще на. г ЗЕ в
Кн х ей Ся дю Пд вк. Бе Ку Ж. М сш ша тече МОХ бу В ге Не Ми Ка на іа
ІО368| До З-горлої круглодонної колби в азоті приєднували краплинну лійку і внутрішній температурний зонд. Колбу наповнювали За, 4,7,7а-тетрагідро-4,7-етанізобензофуран-1,3-діон- 4,5,6,7,8,8,9,9-дв (14-2) (2,68 г, 14,39 ммоль), бета-хініном (5,24 г, 15,83 ммоль) і безводним толуолом (40 мл). Реакційне середовище перемішували магнітною мішалкою і охолоджували до -257С (охолодження "холодним пальцем"). Додавали розчин безводного абсолютного етанолу (8,40 мл, 143,90 ммоль) у безводному толуолі (13,4 мл) протягом 25 хвилин, підтримуючи
Зо внутрішню температуру нижче -25 "С. Реакційну суміш потім перемішували при приблизно - 20 С протягом ночі. Осаджений гелеподібний продукт збирали фільтрацією, промивали толуолом (3х30 мл) і потім вміщували в їн НСІ/ЕЮАс (300 мл суміші 1:1). Двофазну суміш перемішували до повного розчинення усього осаду. Шари розділяли, і органічний шар промивали водою (2х100 мл), насиченим сольовим розчином (100 мл), сушили над Ма»5Ох, фільтрували, концентрували на роторному випарнику при низькій температурі з одержанням 800 мг бажаного продукту (14-3), який використовували без додаткового очищення.
ІОЗ69| 14а: (з/-)-транс-етил-3-((бензилокси)карбоніл)аміно)біцикло|2.2.21-окт-5-ен-2- карбоксилат-1,4,5,6,7,7,8,8-дв (14-4) 0. -0 ВРРА БОХ БЮ. о но в ро шо Щ лу й Ср; І о ре, бу Бони З ВМ А шк В оо-«Яхко но-Жх о ту В яти В їі їі ро ро (/-) 14-35 (н-)14-4
ЇО370О| До розчину /(/ (ж/-)-трансо-3-«(етоксикарбоніл)біцикло(2.2.2|окт-5-ен-2-карбонової- 1,4,5,6,7,7,8,8-дв кислоти (14-3) (0,60 г, 2,58 ммоль) у толуолі (4,5 мл) додавали дифенілфосфорилазид (0,81 г, 0,63 мл, 2,84 ммоль), а потім триетиламін (0,40 мл, 2,84 ммоль).
Реакційну суміш потім нагрівали до 90 "С протягом 2 годин. До суміші додавали бензиловий спирт (0,35 мл, 3.34 ммоль), який нагрівали при 90 "С протягом ночі. Реакційну суміш залишали охолоджуватися до кімнатної температури і розділяли в ЕН і водному насиченому розчині
МансСоОз. Шари розділяли й органічну фазу промивали водним насиченим розчином МНАаСІ, насиченим сольовим розчином, сушили над Маг5О»4, фільтрували й упарювали досуха. Сирий осад очищали хромотографією на силікагелі (0-35-100 95 Е(Ас/гексан - пляма з САМА). "Н-
ЯМР показав бажаний продукт (14-4) разом із присутністю домішки бензилового спирту.
Речовину використовували далі без додаткового очищення. 03711 14е: (-47-)-транс-етил-3-амінобіцикло(2.2.2|октан-2-карбоксилат-1,4,5,5,6,6,7,8-дв (14-5)
ЕО. шо мода
НН Н со, о дир "5 ке нУРЕС на дет "в дн
Гі г ро бо сн 14-4 (ну 14-5 0372) Паладій (0,052 г, 0,049 ммоль) вміщували в посудину для гідрування (в атмосфері азоту) і зволожували приблизно 5 мл метанолу. До суспензії додавали розчин (/-)-транс- етил(25, 35)-3-«((бензилокси)карбоніл)аміно)біцикло|2.2.2)окт-5-ен-2-карбоксилат-1,4,5,6,7,7,8,8-
Ов (14-4) (0,521 г, 1,547 ммоль) у метанолі (20 мл). Реакційну суміш гідрували (44 псі) протягом ночі. Тиску давали вихід і каталізатор відфільтровували. Усі леткі речовини видаляли у вакуумі.
Сирий продукт (14-5) використовували без додаткового очищення.
ІОЗ7ЗІ 14г: (ч/-)-транс-етил-3-((5-фтор-2-(5-фтор-1-тозил-1Н-піроло|2,3-б|піридин-3- іл)упіримідин-4-іл)аміно)біцикло(|2.2.2|октан-2-карбоксилат-1,4,5,5,6,6,7,8-дв (14-7) о р
Е а во о, яр ше ЕЕ. -О воООАЛІ
МВ, | ще ПІРЕА - юс ве пен фан; тес й У-МНолі А
Ек ра й й ит М. се М й в)
М й--3 Б. ивнй й тн во щи;
Тв мМ т5 ов (р 14-6 (н.)14-5 (на 147
ІО374| До суспензії (ж/-)-транс-етил(25, 35)-3-амінобіцикло/2.2.2|октан-2-карбоксилат- 1,4,5,5,6,6,7,8-дв (14-5) (0,317 г, 1,547 ммоль) і 5-фтор-3-(5-фтор-4-метилсульфінілпіримідин-2- іл)-1-(п-толілсульфоніл)піроло(2,3-б|Іпіридину (14-6) (0,694 г, 1,547 ммоль) у ТГФ (10 мл) додавали М, М-дііззопропілетиламін (0,808 мл, 4,641 ммоль), і реакційну суміш нагрівали до
Зо 707С протягом ночі. Реакційну суміш розбавляли ЕІАс і водою. Шари розділяли й органічну фазу промивали насиченим сольовим розчином, сушили (Ма5О»54), фільтрували і концентрували у вакуумі. Сирий продукт (14-7) очищали хроматографією на силікагелі (0-100 96 ЕоАс/гексан) з одержанням бажаного продукту.
ІО375| 149: (-/-)-трансо-етил-3-((5-фтор-2-(5-фтор-1Н-піроло(|2,3-б|Іпіридин-3-іл)піримідин-4- іллуаміно)біцикло|2.2.2)октан-2-карбоксилат-1,4,5,5,6,6,7,8-дв (14-8) о в) о о
ТЯ НК их /й А шле їв во Ко. Ко и но АЛИ окис й чо
Кі, уАМНої АХ | й МНна А че М ї р М с-м о з.
Ко ий о / ншщ срУсь
ЗИМ зим т5 н (нН/-)14-7 СН-)14-8
ІО376| До розчину (ч/-)-транс-етил(25, 35)-3-((5-фтор-2-(5-фтор-1-тозил-1 Н-піроло|2,3-
БІпіридин-3-іл)піримідин-4-іл)аміно)біцикло(|2.2.2|октан-2-карбоксилат-1,4,5,5,6,6,7 ,8-йв (14-7) (373 мг, 0,6325 ммоль) в ацетонітрилі (6 мл) додавали НС (800 мкл 4М розчину в діоксані, 3,200 ммоль). Реакційну суміш залишали перемішуватися при кімнатній температурі протягом 2 годин. Реакційну суміш потім нагрівали до 80"С протягом б годин і потім залишали охолоджуватися до кімнатної температури і перемішували протягом ночі. Аналіз І С/М5 показав повне завершення реакції. У суміш додавали ще б мл СНзСМ і 800 мкл 4н розчину НСі/діоксан.
Реакційну суміш потім нагрівали до 80 "С протягом 4 годин. Усі леткі речовини видаляли при зниженому тиску і залишок розбавляли ЕІАс і насиченим водним розчином МансСоОз. Шари розділяли й органічну фазу промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма5оОх4, фільтрували і концентрували у вакуумі. Сирий осад очищали хромотографією на силікагелі (0- 100 95 ЕІАс/гексан) з одержанням бажаного продукту (14-8). "Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-ав): б 12,28 (с, 1Н), 8,50 (дд, У-9,8, 2,8 Гц, 1Н), 8,23 (ддд, уУ-12,6, 6,2, 2,7 Гц, 2Н), 7,60 (д, 9У-6,9 Гц, 1Н), 4,73 (т, 9-6,5 Гц, 1Н), 4,30-3,85 (м, 2Н), 2,89 (д, 9У-6,8 Гц, 1Н), 1,59-0,96 (м, 4Н). 0377
ІО378| 14й: (ч/-)-трансо-етил-3-((5-фтор-2-(5-фтор-1Н-піроло|2,3-б|Іпіридин-3-іл)піримідин-4- іллуаміно)біцикло|2.2.2|октан-2-карбонова-1,4,5,5,6,6,7,8-08 кислота (1) ю о о о 7 Пи й др. шель то нон од де / з) щі о» і о» ем В ор ве Ь р й шен Е. рі
КЕ як 1 5
М Н М М
(ні-)14-8 (1
ІОЗ79І До розчину (1/-)-транс-етил-3-((5-фтор-2-(5-фтор-1Н-піроло|2,3-В|Іпіридин-3- іл)упіримідин-4-іл)ламіно)біцикло(|2.2.2|октан-2-карбоксилат-1,4,5,5,6,6,7,8-йв (14-8) (0,165 г, 0,379 ммоль), розчиненому в ТГФ (3,0 мл) і метанолі (1 мл), додавали Маон (1 мл розчину 2М, 2,000 ммоль), і реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом З годин. Аналіз
І С/М5 показав повне завершення реакції. Реакційну суміш нагрівали до 45 "С і потім до 557 протягом 30 хвилин. Реакційну суміш розводили в насиченому розчині МНАСІ. Додавали декілька крапель їн НСІ для доведення рН приблизно до 6,5. Продукт екстрагували ЕТОАСс.
Органічні фази сушили над Мо95О»., фільтрували і концентрували у вакуумі, з одержанням
Зо бажаного продукту (1) (чистота 97,5 95, ЯМР, ГС/МС і ВЕРХ). "Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-ав): б 12,30 (д, 9У-14,2 Гц, 2 Н), 8,79-7,94 (м, 4Н), 7,58 (с, 1Н), 4,68 (с, 1Н), 2,84 (с, 1Н), 1,85 (д, 9У-85,0
Гу, 1Н), 1,58-1,05 (м, 2Н).
ІО380| Приклад 15. Сполука, збагачена дейтерієм (1)
ІО381| Альтернативно, Сполука (1), збагачена дейтерієм, може бути синтезована згідно зі
Схемою 2, нижче.
І03821| Схема 2 ох о .
Ї. чи ОСМ. ОБА - бю мон.
Нам. В 8О-ВКо с нище шия ЗЕ,
М ЗО о тя реа В І а «НЕНЬ ! і е : я вира; і й Но ; : рн ве й ие сі АК 5 бі; и ! Е- ро
І») М. М ргГоо
То (лед) п сі 14-5 15-2
Е о. ре, р кі н ОН но-Х о? ее
У зм біо І РКО Ас), Х-Рров Е що Ли 7 пт я ка г. г. Н й - сі ПішнЯ КоСОз, ТНЕ, ЩО ш-щ Ко - т чи ! чу у-МНо . ра р і ро в т зем В р й в-о ши дає | Ж. Є
Кш м ЗМ Те
ВЕЕтА? 15-3 15-4 о В пре В о : В Ж у Я я
ПММ пожнев що пенні ВО
ЗОН Не ОКА ВН А ще не КН же х В как
ЖАВИ МЖКУ й й ках
Яка їй р р нот их зо а оОКоуо
Р па
ІЙ АМНО І и
М ек Ме
І
ВЕ. з ше НС ; щи
І | 5 овно я М" ЗМ
Н
. (1)-ь
ІНШІ ВАРІАНТИ ЗДІЙСНЕННЯ
5 ІО383| Варто розуміти, що хоча винахід описаний у сполученні з докладним описом, вищенаведений опис призначений для ілюстрації, а не для обмеження сфери застосування винаходу, що визначається формулою винаходу. Інші аспекти, переваги і зміни знаходяться в рамках наступної формули винаходу.

Claims (38)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Кристалічна сіль НСІ Сполуки (1)х1/2 Н2О, де Сполука (1) представлена наступною структурною формулою:
Е З х ще М- ! Мм'МмноОо ня пу» (9 і де кристалічна сіль НСІ Сполуки (1)х1/2 Н2О охарактеризована піками, які відповідають значенням 2-тета, виміряним в градусах, що дорівнюють 10,5--0,2, 5,250,2, 7,4--0,2 і 18,9--0,2 на порошковій рентгенограмі.
2. Кристалічна сіль НСІ Сполуки (1)х1/2 Н2О за п. 1, що додатково характеризується одним або більше піками, які відповідають 29,2--0,3 м. ч., 107,0--0,3 м. ч., 114,0--0,3 м. ч. і 150,7-0,3 м. ч. у спектрі ХЗЗММЕ на 736.
3. Кристалічна сіль НСІ Сполуки (1)х1/2 НО за п. 2, що додатково характеризується одним або більше піками, які відповідають 22,1-0,3 м. ч., 24,6-0,3 м. ч., 47,4-0,3 м. ч. і 54,8-0,3 м. ч. у спектрі ХЗЗММЕ на 736.
4. Фармацевтична композиція, яка містить кристалічну сіль НСІ Сполуки (1)х1/2 Н.О зап. 1 ї принаймні один фармацевтично прийнятний носій або ексципієнт.
5. Спосіб зниження кількості вірусу грипу в біологічному зразку /л уйго або у індивідуума, який включає стадію, на якій вводять в зразок ефективну кількість кристалічної солі НСІ Сполуки (1)х1/2 НО за будь-яким з пп. 1-3.
6. Спосіб інгібування реплікації вірусу грипу в біологічному зразку /л міго або у індивідуума, який включає стадію, на якій вводять в зразок ефективну кількість кристалічної солі НСІ Сполуки (1)х1/2 НО за будь-яким з пп. 1-3.
7. Спосіб за п. 5 або 6, який додатково включає спільне введення одного або більше додаткових терапевтичних засобів індивідууму.
8. Спосіб за п. 7, де додаткові терапевтичні агенти включають антивірусний препарат.
9. Спосіб за п. 8, де противірусний засіб є інгібітором нейрамінідази.
10. Спосіб за п. 9, де інгібітор нейрамінідази є озельтамівіром або занамівіром.
11. Спосіб за п. 8, де противірусний засіб є інгібітором полімерази.
12. Спосіб за п. 11, де інгібітор полімерази є флавіпіравіром.
13. Спосіб за будь-яким з пп. 6-12, де вірусами грипу є віруси грипу А.
14. Спосіб одержання кристалічної солі НСІ Сполуки (1)х1/2 Н2О, де Сполука (1) представлена наступною структурною формулою: Е 0 ми ; І і чин о І он (0) який включає стадію, на якій: змішують НСІ зі Сполукою (1) у системі розчинників, яка включає воду й один або декілька органічних розчинників, де система розчинників має активність води, що дорівнює 0,05-0,85.
15. Спосіб за п. 14, де система розчинника містить один або більше органічних розчинників, вибраних із хлорбензолу, циклогексану, 1,2-дихлоретану, дихлорметану, 1,2-диметоксіетану, М,М-диметилацетаміду, М,М-диметилформаміду, 1,4-діоксану, 2-етоксіетанолу, формаміду, гексану, 2-метоксіетанолу, метилбутилкетону, метилциклогексану, М-метилпіролідону, нітрометану, піридину, сульфолану, тетрагідрофурану (ТНЕ), метилтетрагідрофурану, тетраліну, толуолу, 1,1,2-трихлоретану, ксилолу, оцтової кислоти, ацетону, анізолу, 1-бутанолу, 2-бутанолу, бутилацетату, трет-бутилметилового ефіру, кумолу, гептану, ізобутилацетату, ізопропілацетату, метанолу, метилацетату, З-метил-1-бутанолу, метилетилкетону, метилізобутилкетону, 2-метил-1-пропанолу, етилацетату, етанолу, н-пропанолу, ізопропанолу, ізобутилацетату, етилового ефіру, етилформіату, етиленгліколю, пентану, 1-пентанолу, 1- пропанолу, 2-пропанолу, пропілацетату або будь-якої їх комбінації.
16. Спосіб за п. 15, де система розчинників містить один або декілька органічних розчинників, вибраних із хлорбензолу, циклогексану, 1,2-дихлоретану, дихлорметану, 1,2-диметоксіетану, формаміду, гексану, 2-метоксіетанолу, метилбутилкетону, метилциклогексану, нітрометану,
тетраліну, ксилолу, толуолу, 1,1,2-трихлоретану, ацетону, анізолу, 1-бутанолу, 2-бутанолу, бутилацетату, трет-бутилового ефіру, кумолу, етанолу, етилацетату, етилового ефіру, етилформіату, гептану, ізобутилацетату, ізопропілацетату, метилацетату, З-метил-1-бутанолу, метилетилкетону, 2-метил-1-пропанолу, пентану, 1-пропанолу, 1-пентанолу, 2-пропанолу, пропілацетату, тетрагідрофурану, метилтетрагідрофурану і будь-якої їх комбінації.
17. Спосіб за п. 15, де система розчинників містить один або декілька органічних розчинників, вибраних з 2-етоксіетанолу, етиленгліколю, метанолу, 2-метоксіетанолу, 1-бутанолу, 2- бутанолу, З3-метил-1-бутанолу, 2-метил-1-пропанолу, етанолу, 1-пентанолу, 1-пропанолу, 2- пропанолу, метилбутилкетону, ацетону, метилетилкетону, метилізобутилкетону, бутилацетату, ізобутилацетату, ізопропілацетату, метилацетату, етилацетату, пропілацетату, піридину, толуолу, ксилолу і будь-якої їх комбінації.
18. Спосіб за п. 15, де система розчинників складається з одного або більше органічних розчинників, вибраних з ацетону, н-пропанолу, ізопропанолу, ізобутилацетату, оцтової кислоти або будь-якої їх комбінації.
19. Спосіб за п. 15, де система розчинників містить один або декілька органічних розчинників, вибраних з ацетону або ізопропанолу.
20. Спосіб за будь-яким з пп. 14-19, де система розчинників має значення активності води від 0,4 до 0,6.
21. Спосіб за будь-яким з пп. 14-20, де змішування здійснюють при температурі від 5 до 75 С.
22. Спосіб за будь-яким з пп. 14-21, де НСІ вводять як водний розчин, що має від 30 до 40 мас. Фо НСІ по масі водного розчину.
23. Режим дозування, який включає введення індивіду кристалічної солі НСІ Сполуки (1)х1/2 НгО за будь-яким з пп. 1-3 у кількості дози від 100 мг до 1600 мг, де кількість дози вводять один раз на день, два рази на день і три рази на день.
24. Режим дозування за п. 23, де кількість дози складає від 300 мг або 1600 мг.
25. Режим дозування за п. 24, де кількість дози складає від 600 мг або 1200 мг.
26. Режим дозування за п. 25, де дозу вводять один раз на день.
27. Режим дозування за п. 26, де кількість дози складає від 600 мг або 800 мг.
28. Режим дозування за п. 24, де кількість дози складає від 300 мг або 900 мг.
29. Режим дозування за п. 28, де дозу вводять два рази на день.
30. Режим дозування за п. 24, де кількість дози складає від 400 мг або 600 мг.
31. Режим дозування за будь-яким з пп. 23-30, де кристалічну сіль НСІ Сполуки (1)х1/2 Н2О вводять протягом лікування від 1 дня до всього сезону грипу.
32. Режим дозування за п. 31, де тривалість лікування складає від З днів до 14 днів.
33. Режим дозування за п. 32, де тривалість лікування складає З дні, 4 дні або 5 днів.
34. Режим дозування за п. 23, де дозу в кількості 600 мг або 1600 мг вводять індивіду на день 1 і дозу в кількості від 400 мг до 1200 мг вводять індивіду протягом часу лікування, що залишився.
35. Режим дозування за п. 34, де дозу в кількості 900 мг або 600 мг вводять індивіду на день 1 і дозу в кількості від 400 мг до 1200 мг вводять індивіду протягом часу лікування, що залишився.
36. Режим дозування за п. 35, де дозу в кількості 900 мг або 1200 мг вводять індивіду на день 1 і дозу в кількості від 600 мг до 800 мг вводять індивіду протягом часу лікування, що залишився.
37. Режим дозування за п. 36, де дозу в кількості 900 мг вводять індивіду на день 1 і дозу в кількості 600 мг вводять один раз на день індивіду протягом часу лікування, що залишився.
38. Режим дозування за п. 36, де дозу в кількості 1200 мг вводять індивіду на день 1 і дозу в кількості 600 мг вводять один раз на день індивіду протягом часу лікування, що залишився.
вк ЩЕ ; х З | ї
: . Ь ї У зе зо х и Мо ЗОЇ -В ЕЕ ОО в ве х І . й КЕ В Ї Жоосрт я ї ! - ЖЕ т т і ХЕ ! хх х. Е: ж | 5. Ї: 3 В Е ЖЕ 3 ВОК Кк т ЕН їх Е М Я ! І хх. ШІ і В: ; ГО ВЕ І ши ш шен и ше З : ; « БЖ ВВ п ОБО. ЕМ АК й з Кай і ЖЕО Я З | ТБ. Ми у і За й с ЕЕ у пай і ТУ Ту я К й ї ; х 5 ; ей Я Я УА В що жк я тата нкала аг. і ; ї с
; . ЛАК Е 5 : ; В Її й ї С . и 5 ОО ОВ В ЗСШ І ТЕКУ ЯКУ ВІЧНУ ї сш иши ши ші ої КЕ я ЩЕ в Ж її їх їх М НЬИ о осо Й пере кі Хо ее в мой куда туту ут нон Кит тн ХА Упр У Кп ЖК КУКА КУМ о МУКУМ КК рун и терем Кк у тет тив ин в и С а В С п п Є п в По А С тт Ї ЯН НЕ і З ШЕ я. т Бех Зле Е З ! мах Е: щу БА Ко М дак я З я ВЕ ж а Ї СИ, ! в Я зе х х х. сіння і ВАОВХ ї КІ І х К кон Я їх ЗІ | й ; я шщ і . ЖИ і Е Й ; скоб вання Яні оо. Аж і я й сш сан ев ши ВВ а У і й ВДВ тут три жену ут еф рух ум рт у нкрн реф ннкумя ух уклннрння укккнрккиюннк ук ут та Кк я Тата шкала чі. З и І : Н І: : З її ; З Ж З х 3 Х х ї 3 ХЕ х Н ї : же Хо ї і п х Же ОК М ї її х : ШОЕ МЕ: і й їх Б У ЕХ БЕКОН ї чн : ї КК ІЗ Кк. Х Між ї Мт НУ Кк, Бе х НКУ ЗЕ ся КУ ТУ Я ЩІ хх ТЕХ ЯН ок ком дали я Яр М В вий жів шк : у НИ НЯ х "УК МКК РіхасхкА тую Ко Можна о о о конк Ве не В НВ В НН а Но лм АйдО Ю сх сих (Я дохо аж хх хе т. ЇВ а с К то З БЖ ОВЖКО З ОС Ж ЖЕО ОО ЗО ЩО ВЕ ОО ще си З СВ ЗСУ КНУ як Ве З х х ж ОФНКВ син МЕ Ж. ш А З пмиц З В х - ї Я ЗОШ се Ж ї Можу х. МАК 5 Ку ВЕ Е її ; хх ва К Е БК і ЩІ ККЗ
У 2.3 х по Ж У ву ї мм ОК ї ЕН ї х і их Я (х ОБ З г ї рія й З | ї т їх Н ЗА - З Б х і Зі Е ї 8 х з Же ій З ї В в ОА і й КЗ нин п В В По я а з - х Ю щі КІ аТета шкала
Чнк. 8 з 3 г хх х хх ї х МН й ге тв ; ; Енн ВУ Я поз в г ї ГУ В М во жу о ІЗ х Ві ій Х ї ЕВ ї : х : МЕ ЖЖ Що ЩЕ Я ЕД ОО МОВ І ТЕ хх КОВО М я г; І Ї МОСК НЕ МО в ПІ ОО. В З Мт В З СВК Бо ВЕ Ше диких ПоохкнимА Х Ха жк М Ва В о ЗИ екю панна но он ма нки нн в нн ана нн з аня «а кл чо Я ай ОО ай зе я ж як м «А дих КУ - зх ооо ше СМ ав с п В п с В ХВ ВО В З В В С с п о В ПТ В ВЕ БЕВЕНАН ї во З ля КОД З З ї Н й МКК ї | і З Я З Я Я х ї ГЕ ї чеки. Я з їх Її о МНК що Е КУ у ІЗ КУ с З Х 5 5 х : : ще щ- о п ще КУ З ї Е КК ї КЗ : у їх і ЖК З Не Я я ще ї ше с ! І ЧТ ї Й яна ЕУ з І ї ке : їз ; З В | і у З їх СК В з у. У і. В З ТОК: Сх ООН КЕ З З Вк ж, ; я ЇВ Те З кої й я г ПЕК ЕЕ НБН пай ї й пу В ІАЕ КІ МАЕ Е; : і ЗК ЗОВ ОНА Тл КУН, Н 4 ши ши ее ва я і я Бош ії етан На. 1 їй ві у Я ТІК ЕН Е МЕЖ, НИ Я 3 Ек ча І м а ою Се. і, и ША Х Найт я і ; ше а ІМЕН й (5 ;Я ШК ук, пев азни а п ші БТВ ЩШКВЛа сг ЕЗЗК в м В і її Я з ї 3. і : З 33
В о. ; й КЕ ї ; - ! ї ге ЕЕ СЕ; І : І : М КЕ Ї Еш щд Ж З НЕБІ З Ох Е ту КЕ КО ОС ЖИМ її ЕЕ ТНК ЩЕ! КЗ ЕЕ паші Я, ПІ : МОМ ЕКомк у Кт Ко Я ее ШУ її г ж Б БК КА КЕ МАХ У Кс ї. и ежукхв ух ЄОпжхуюуту й виь» льні Хеттки яки кн ю КА ХМ Кт ПАК кум АННИ КИ едикт, ек жижнх. нина мо нн нн пп о ПИ М а а а п о Бе: З Да; ЗМ З ВІВ ЕОМ З ЗІЕНЄ СО З В С З КН З І С ВЕ СС В З ЗЕ З ЗИ СЗЗ с М ЗНЗ ЗТ врн: я ях цк диннннннлнннктнкннннннянн жук кни КОТУ тн нт ння плн нят кнкккнннкюккюккткк ск сс сккккжк ск юєккєся 3 ІЗ 3 ; х 5 ще Е Е - З ЕЗ Е: З З З ГУ х х З : : сх ЕЗ Х Е а Я х в х Н ж ишш ще : -Е і х КУ Щ їх ж - х І : ЧУ Щ 3. Е х ще ж ще ше ши и шк мя о ! - Кок Я КУ Щі ІНК КЕШ Мих Її демо Ї ЕК Я МВ і 3 В ЖЕНЯ Н КК ЕЕ ЕКЗ ЗУ ТОК Ж КУ ЕМЕНКЕ Я Н аКЖТР о я 33 Х М к БВ БЕН В щи ; їж: ЗЕ ОА ОК Вт : ї ко КЕ ЗЕ т хЕХЕ ІЗ оо ЕЛЕ ї ІЗ іх Е я я ї кій: : ККУ ї ОВ В й її я Я | що ГЕ К ТП г ї ВОЮ КК НЕ ШК НН еВ : ї ко 7 ІЗ (та В ВК З о пкт Ж 5. : ї х КСВ З КО ЕЕ НУ ща УНЕ БУ ; І ях З ИН ЗаНЯ ДОН в Не ВН З М НИЖНЯ 35 ще ІЗ ви 5 БЦ 5 Мая щі 55 Кк з т а ТТ ЛК З ке чук нон вн и в одне рен риттрт р титя таджика сени НАМ
МК. Х
ЩО !
і Е. ї і ! ї ї Е. : ! ї ї ! і ї й : ї Е Х дялян 5 ! - ЗК ; ХЕ В 3 її і ВОК ше: ; СКУ Я та гУ і ях Н с З 515 Е З 1 : ов сх ЕК пан їх її г 3 я . 1 В ІЗ я МАСІ ко ах ся ше ВК я Не Пекин рені кр ран я За ее ж о окуні, я ЗА МЖК Дндкк корсрі пн З Ткекувення ПОТ ек ам Фа, т х
1. ЗЕ ЗА пах й г; в. ЗК й Е Ку. Ех й Зк ке хе ї Ен ї із н ш І й з й сх ад ї
Мк. НК хи НИЄ В С шо Шо й в НЯ Е Шо ї ща З нн нен нин на нн і нн зо пи ан е нв знивн пинипненин нннн Мо нини пн зон нс юн мн нн пара соки є: че рез Ж « й ЗТети вікапа ян Її ШЕ ? 2 форма Є Тоні довкЕ 53- З ІБ ве х Вивихи і і Рорма й скинув оОоозБя винен шшиш чк форма бевзамнея я : Ей І Н кі Кох Аж І Форма А еВ і ши ШЕ ще ле ко ой що 3 аа вище же М : гя то ! ФОБМЯЕ не м Н , й Ше : ітнтізнні м авиавиви ви ваг оон Е їх ї реечетуктртренниетюутт рвані у тре ще щодо бе я ЩО Актнжністьволия 1853 ск й
UAA201606307A 2013-11-13 2014-11-12 Інгібітори реплікації вірусів грипу UA121376C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361903572P 2013-11-13 2013-11-13
PCT/US2014/065114 WO2015073476A1 (en) 2013-11-13 2014-11-12 Inhibitors of influenza viruses replication

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA121376C2 true UA121376C2 (uk) 2020-05-25

Family

ID=51952043

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201606307A UA121376C2 (uk) 2013-11-13 2014-11-12 Інгібітори реплікації вірусів грипу

Country Status (26)

Country Link
US (1) US9771361B2 (uk)
EP (2) EP3578554A1 (uk)
JP (3) JP6615755B2 (uk)
KR (1) KR102353413B1 (uk)
CN (2) CN110156779A (uk)
AU (1) AU2014348840B2 (uk)
CA (1) CA2930103A1 (uk)
CL (1) CL2016001110A1 (uk)
CY (1) CY1121919T1 (uk)
DK (1) DK3068776T3 (uk)
ES (1) ES2741444T3 (uk)
HR (1) HRP20191525T1 (uk)
HU (1) HUE044667T2 (uk)
IL (1) IL245585B (uk)
LT (1) LT3068776T (uk)
ME (1) ME03460B (uk)
MX (1) MX2016006199A (uk)
NZ (1) NZ719729A (uk)
PL (1) PL3068776T3 (uk)
PT (1) PT3068776T (uk)
RS (1) RS59144B1 (uk)
RU (1) RU2700415C1 (uk)
SG (1) SG10201804026WA (uk)
SI (1) SI3068776T1 (uk)
UA (1) UA121376C2 (uk)
WO (1) WO2015073476A1 (uk)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS55341B1 (sr) 2009-06-17 2017-03-31 Vertex Pharma Inhibitori replikacije virusa gripa
UA118010C2 (uk) 2011-08-01 2018-11-12 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Інгібітори реплікації вірусів грипу
DK3421468T3 (da) 2013-11-13 2021-01-11 Vertex Pharma Fremgangsmåder til fremstilling af inhibitorer af re-plikation af influenzavira
NZ719729A (en) * 2013-11-13 2022-04-29 Vertex Pharma Inhibitors of influenza viruses replication
AU2015298876B2 (en) 2014-08-08 2020-02-13 Janssen Sciences Ireland Uc Indoles for use in influenza virus infection
WO2016183116A1 (en) 2015-05-13 2016-11-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of preparing inhibitors of influenza viruses replication
EP3294735B8 (en) 2015-05-13 2022-01-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of influenza viruses replication
KR20180088466A (ko) * 2015-12-09 2018-08-03 선샤인 레이크 파르마 컴퍼니 리미티드 인플루엔자 바이러스 복제 저해제, 활용 방법 및 그 용도
CN110177779A (zh) * 2017-01-24 2019-08-27 苏州科睿思制药有限公司 一种病毒蛋白抑制剂药物vx-787的晶型及其制备方法和用途
CA3059362A1 (en) * 2017-04-12 2018-10-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Combination therapies for treating influenza virus infection
CN111936497A (zh) * 2018-04-06 2020-11-13 杨森制药公司 制备匹莫迪韦盐酸盐半水合物的结晶形式的等温反应性结晶方法
KR20210091753A (ko) * 2018-11-13 2021-07-22 코크리스탈 파마, 아이엔씨. 인플루엔자 치료제 제형
WO2020212399A1 (en) 2019-04-15 2020-10-22 Janssen Pharmaceutica Nv Method for preparing an alkyl trans-3-aminobicyclo[2.2.2]octane-2-carboxylic acid ester compound
CN112079785B (zh) * 2019-06-13 2023-08-04 中国科学院上海药物研究所 一种新型抗流感病毒奥司他韦衍生物、其制备方法及用途
WO2021038480A1 (en) * 2019-08-27 2021-03-04 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combinations for treating influenza virus
US11462418B2 (en) * 2020-01-17 2022-10-04 Taiwan Semiconductor Manufacturing Co., Ltd. Integrated circuit package and method
CN112578034B (zh) * 2020-11-04 2022-02-11 广东众生睿创生物科技有限公司 一种手性胺小分子及其盐的质量控制方法

Family Cites Families (156)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4349552A (en) 1978-10-30 1982-09-14 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. 5-Fluorouracil derivatives, and their pharmaceutical compositions
IL83821A0 (en) 1986-09-10 1988-02-29 Sandoz Ag Azaindole and indolizine derivatives,their production and pharmaceutical compositions containing them
MX19185A (es) 1989-01-20 1993-12-01 Pfizer Procedimiento para preparar 3-(1,2,5,6-tretrahidropiridil)-pirrolopiridinas.
US5304121A (en) 1990-12-28 1994-04-19 Boston Scientific Corporation Drug delivery system making use of a hydrogel polymer coating
FR2687402B1 (fr) 1992-02-14 1995-06-30 Lipha Nouveaux azaindoles, procedes de preparation et medicaments les contenant.
DE4304455A1 (de) 1993-02-15 1994-08-18 Bayer Ag Heterocyclisch substituierte Phenyl-cyclohexan-carbonsäurederivate
US5994341A (en) 1993-07-19 1999-11-30 Angiogenesis Technologies, Inc. Anti-angiogenic Compositions and methods for the treatment of arthritis
IL129871A (en) 1994-05-06 2003-11-23 Pharmacia & Upjohn Inc Process for preparing 4-phenyl-substituted octanoyl-oxazolidin-2-one intermediates that are useful for preparing pyran-2-ones useful for treating retroviral infections
EP0763035A4 (en) 1994-06-09 1997-10-01 Smithkline Beecham Corp ENDOTHELIN RECEPTOR ANTAGONISTS
US6099562A (en) 1996-06-13 2000-08-08 Schneider (Usa) Inc. Drug coating with topcoat
GB9721437D0 (en) 1997-10-10 1997-12-10 Glaxo Group Ltd Heteroaromatic compounds and their use in medicine
DK1147083T3 (da) 1999-01-07 2004-08-16 Wyeth Corp Arylpiperazinyl-cyclohexylindolderivater til behandling af depression
US6313126B1 (en) 1999-01-07 2001-11-06 American Home Products Corp Arylpiperazinyl-cyclohexyl indole derivatives for the treatment of depression
WO2000040581A1 (en) 1999-01-07 2000-07-13 American Home Products Corporation 3,4-dihydro-2h-benzo[1,4]oxazine derivatives
US6265403B1 (en) 1999-01-20 2001-07-24 Merck & Co., Inc. Angiogenesis inhibitors
AR028475A1 (es) 1999-04-22 2003-05-14 Wyeth Corp Derivados de azaindol y uso de los mismos para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la depresion.
US20030153560A1 (en) 1999-04-23 2003-08-14 Salituro Francesco G. Inhibitors of c-Jun N-terminal kinases (JNK)
ATE323482T1 (de) 1999-07-02 2006-05-15 Stuart A Lipton Verwendung von p38 mapk inhibitoren in der behandlung von augenkrankheiten
GB9919843D0 (en) 1999-08-20 1999-10-27 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
DE19948417A1 (de) 1999-10-07 2001-04-19 Morphochem Ag Imidazol-Derivate und ihre Verwendung als Arzneimittel
US20020065270A1 (en) 1999-12-28 2002-05-30 Moriarty Kevin Joseph N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression
AU2001237041B9 (en) 2000-02-17 2005-07-28 Amgen Inc. Kinase inhibitors
US7041277B2 (en) 2000-03-10 2006-05-09 Cadbury Adams Usa Llc Chewing gum and confectionery compositions with encapsulated stain removing agent compositions, and methods of making and using the same
CA2308994A1 (en) 2000-05-19 2001-11-19 Aegera Therapeutics Inc. Neuroprotective compounds
JP4911864B2 (ja) 2000-08-14 2012-04-04 オーソ−マクニール・フアーマシユーチカル・インコーポレーテツド 置換ピラゾール
ATE402699T1 (de) 2000-09-06 2008-08-15 Ortho Mcneil Pharm Inc Verwendung von substituierten pyrazolen zur behandlung von allergien
RU2003106192A (ru) 2000-09-06 2004-07-27 Орто-Макнейл Фармасьютикал, Инк. (Us) Способ лечения аллергий
CN1281605C (zh) 2000-12-22 2006-10-25 惠氏公司 作为5－羟色胺－6配基的杂环基－吲唑或氮杂吲唑化合物
ES2360205T3 (es) 2001-03-02 2011-06-01 Agennix Ag Sistema de ensayo de tres híbridos.
EP1392697B1 (en) 2001-03-14 2004-11-03 Wyeth Antidepressant azaheterocyclymethyl derivatives of 2,3-dihydro-1,4-dioxino 2,3-f]quinoline
US7081454B2 (en) 2001-03-28 2006-07-25 Bristol-Myers Squibb Co. Tyrosine kinase inhibitors
WO2002085896A1 (en) 2001-04-24 2002-10-31 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 2,3-dihydro-1,4-benzodioxan
US6656950B2 (en) 2001-04-25 2003-12-02 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 1,4-dioxino[2,3-b]pyridine
CN1503798A (zh) 2001-04-26 2004-06-09 抗抑郁的氧杂环稠合的－[1,4]苯并二噁烷的氮杂环基甲基衍生物
US6573283B2 (en) 2001-04-26 2003-06-03 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 7,8-dihydro-3H-6,9-dioxa-1,3-diazacyclopenta[a]naphthalene
US6593350B2 (en) 2001-04-26 2003-07-15 Wyeth Antidepressant indoletetrahydropyridine derivatives of 2,3-dihydro-7H-[1,4]dioxino[2,3-e]indole
EP1381612A1 (en) 2001-04-26 2004-01-21 Wyeth Antidepressant aza-heterocyclylmethyl derivatives of 2,3-dihydro-1,4-dioxino[2,3-f]quinazoline
JP2004527563A (ja) 2001-04-26 2004-09-09 ワイス 抗うつ作用を有する、２，３−ジヒドロ−１，４−ジオキシノ［２，３−ｆ］キノキサリンのアザへテロシクリルメチル誘導体
TR200402753T4 (tr) 2001-04-30 2004-11-22 Wyeth 7,8-Dihidro-1,6,9-trioksa-3-aza-siklopenta[a]naftalen'in antidepresan azaheterosiklmetil türevleri.
US6555560B2 (en) 2001-04-30 2003-04-29 Wyeth Antidepressant azaheterocyclylmethyl derivatives of 1,4,5-trioxa-phenanthrene
GB0111186D0 (en) 2001-05-08 2001-06-27 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
CA2447150A1 (en) 2001-05-17 2002-11-21 Wyeth Processes for the synthesis of derivatives of 2,3-dihydro-1,4-dioxino-[2,3-f] quinoline
JP4541695B2 (ja) 2001-06-15 2010-09-08 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼインヒビターとしての５−（２−アミノピリミジン−４−イル）ベンズイソキサゾール
GB0115109D0 (en) 2001-06-21 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
AR035083A1 (es) 2001-07-25 2004-04-14 Wyeth Corp Derivados azaheterociclilmetilicos de 7,8-dihidro-6h-5-oxa-1-aza-fenantreno, composiciones farmaceuticas, el uso de dichos derivados para la preparacion de un medicamento antidepresivo e intermediarios
US20040235761A1 (en) 2001-08-14 2004-11-25 Yousuke Furuta Novel virus proliferaton inhibition/virucidal method and novel pyradine nucleotide/pyradine nucleoside analogue
US20040236110A1 (en) 2001-09-26 2004-11-25 Ladouceur Gaetan H Substituted 3-pyridyl indoles and indazoles as c17,20 lyase inhibitors
US6667322B2 (en) 2001-10-05 2003-12-23 Wyeth Antidepressant chroman and chromene derivatives of 3-(1,2,3,6-tetrahydro-4-pyridinyl)-1H-indole
US7361671B2 (en) 2001-11-15 2008-04-22 The Institute For Pharmaceutical Discovery, Inc. Substituted heteroarylalkanoic acids
TW200306819A (en) 2002-01-25 2003-12-01 Vertex Pharma Indazole compounds useful as protein kinase inhibitors
EP1506189A1 (en) 2002-04-26 2005-02-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrole derivatives as inhibitors of erk2 and uses thereof
DE60302150D1 (en) 2002-04-26 2005-12-08 Pfizer Prod Inc N-substituiete heteroaryloxy-aryl-spiro-pyrimidine-2,4,6-trion metalloproteinase inhibitoren
IL164209A0 (en) 2002-05-31 2005-12-18 Eisai Co Ltd Pyrazole derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
UA78999C2 (en) 2002-06-04 2007-05-10 Wyeth Corp 1-(aminoalkyl)-3-sulfonylazaindoles as ligands of 5-hydroxytryptamine-6
MXPA05001367A (es) 2002-08-02 2005-04-28 Vertex Pharma Composiciones de pirazol utiles como inhibidores de gsk-3.
WO2004014912A1 (en) 2002-08-08 2004-02-19 Ribapharm Inc. Improved synthesis for hydroxyalkylated heterocyclic bases
SE0202463D0 (sv) 2002-08-14 2002-08-14 Astrazeneca Ab Novel compounds
WO2004037814A1 (en) 2002-10-25 2004-05-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indazolinone compositions useful as kinase inhibitors
EP1599478B1 (de) 2003-02-26 2007-05-09 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG Dihydropteridinone, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung als arzneimittel
EP1599475A2 (en) 2003-03-06 2005-11-30 Eisai Co., Ltd. Jnk inhibitors
US7169801B2 (en) 2003-03-17 2007-01-30 Takeda San Diego, Inc. Histone deacetylase inhibitors
GB0308466D0 (en) 2003-04-11 2003-05-21 Novartis Ag Organic compounds
WO2004106298A1 (en) 2003-05-30 2004-12-09 Janssen Pharmaceutica N.V. Indole derivatives with an improved antipsychotic activity
WO2005000813A1 (en) 2003-05-30 2005-01-06 Imclone Systems Incorporated Heteroarylamino-phenylketone derivatives and their use as kinase inhibitors
ATE413404T1 (de) 2003-07-16 2008-11-15 Janssen Pharmaceutica Nv Triazolopyrimidin derivate als inhibitoren von glycogen synthase kinase-3
TWI339206B (en) 2003-09-04 2011-03-21 Vertex Pharma Compositions useful as inhibitors of protein kinases
WO2005044181A2 (en) 2003-09-09 2005-05-19 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Protection of tissues and cells from cytotoxic effects of ionizing radiation by abl inhibitors
EP1675830A4 (en) 2003-09-30 2008-08-20 Scios Inc HETEROCYCLIC AMIDES AND SULFONAMIDES
CN1897950A (zh) 2003-10-14 2007-01-17 惠氏公司 稠合芳基和杂芳基衍生物及其使用方法
US20070066641A1 (en) 2003-12-19 2007-03-22 Prabha Ibrahim Compounds and methods for development of RET modulators
JP5138938B2 (ja) 2003-12-19 2013-02-06 プレキシコン インコーポレーテッド Ｒｅｔ調節剤の開発のための化合物および方法
GB0405055D0 (en) 2004-03-05 2004-04-07 Eisai London Res Lab Ltd JNK inhibitors
CN101676285A (zh) * 2004-03-30 2010-03-24 沃泰克斯药物股份有限公司 用作jak和其它蛋白激酶抑制剂的氮杂吲哚
TW200604168A (en) 2004-04-02 2006-02-01 Vertex Pharma Azaindoles useful as inhibitors of rock and other protein kinases
ITMI20040874A1 (it) 2004-04-30 2004-07-30 Ist Naz Stud Cura Dei Tumori Derivati indolici ed azaindolici con azione antitumorale
KR100476851B1 (ko) 2004-05-18 2005-03-17 (주)성신엔지니어링 중력식 섬유여과기
CA2570817A1 (en) 2004-06-17 2006-01-26 Plexxikon, Inc. Azaindoles modulating c-kit activity and uses therefor
DE102004029784A1 (de) 2004-06-21 2006-01-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue 2-Benzylaminodihydropteridinone, Verfahren zur deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
US20050288290A1 (en) 2004-06-28 2005-12-29 Borzilleri Robert M Fused heterocyclic kinase inhibitors
US20060122213A1 (en) 2004-06-30 2006-06-08 Francoise Pierard Azaindoles useful as inhibitors of protein kinases
NZ553267A (en) 2004-07-27 2010-09-30 Sgx Pharmaceuticals Inc Pyrrolo-pyridine kinase modulators
GB0420719D0 (en) 2004-09-17 2004-10-20 Addex Pharmaceuticals Sa Novel allosteric modulators
WO2006041773A2 (en) 2004-10-04 2006-04-20 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Lactam compounds useful as protein kinase inhibitors
WO2006038001A1 (en) 2004-10-06 2006-04-13 Celltech R & D Limited Aminopyrimidine derivatives as jnk inhibitors
US7855205B2 (en) 2004-10-29 2010-12-21 Janssen Pharmaceutica Nv Pyrimidinyl substituted fused-pyrrolyl compounds useful in treating kinase disorders
AU2005304784B2 (en) 2004-11-04 2011-03-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolo[1,5-a]pyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
NZ555566A (en) 2004-11-22 2009-12-24 Vertex Pharma Pyrrolopyrazines and pyrazolopyrazines useful as inhibitors of protein kinases
WO2006063167A1 (en) 2004-12-08 2006-06-15 Smithkline Beecham Corporation 1h-pyrrolo[2,3-b]pyridines
EP1831168B1 (en) 2004-12-16 2014-07-02 Vertex Pharmaceuticals Inc. Pyrid-2-ones useful as inhibitors of tec family protein kinases for the treatment of inflammatory, proliferative and immunologically-mediated diseases.
US20060161001A1 (en) 2004-12-20 2006-07-20 Amgen Inc. Substituted heterocyclic compounds and methods of use
MX2007009429A (es) 2005-02-03 2008-03-18 Vertex Pharma Pirrolopirimidinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas.
KR20080016643A (ko) 2005-05-16 2008-02-21 아이알엠 엘엘씨 단백질 키나제 억제제로서의 피롤로피리딘 유도체
US8921376B2 (en) 2005-05-20 2014-12-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrolopyridines useful as inhibitors of protein kinase
RS52010B (en) 2005-06-22 2012-04-30 Plexxikon Inc. DERIVATI PIROLO [2, 3-B] PIRIDINA KAO INHIBITORI PROTEIN KINAZE
EP1749523A1 (en) 2005-07-29 2007-02-07 Neuropharma, S.A. GSK-3 inhibitors
GB0516156D0 (en) 2005-08-05 2005-09-14 Eisai London Res Lab Ltd JNK inhibitors
SG151327A1 (en) 2005-09-30 2009-04-30 Vertex Pharmaceuticals Incopor Deazapurines useful as inhibitors of janus kinases
CN101365700A (zh) 2005-11-15 2009-02-11 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作激酶抑制剂的氮杂吲唑
US20130096302A1 (en) 2005-11-22 2013-04-18 Hayley Binch Pyrrolopyrazines and pyrazolopyrazines useful as inhibitors of protein kinases
EP2537849A3 (en) 2006-01-17 2013-04-03 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Azaindoles useful as inhibitors of janus kinases
CA2641254A1 (en) 2006-02-14 2007-08-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrolo(3,2-c) pyridines useful as inhibitors of protein kinases
RU2475488C2 (ru) 2006-02-14 2013-02-20 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Дигидродиазепины, которые можно использовать в качестве ингибиторов протеинкиназ
DE102006012617A1 (de) 2006-03-20 2007-09-27 Merck Patent Gmbh 4-(Pyrrolopyridinyl)-pyrimidinyl-2-amin-derivate
US8741912B2 (en) 2006-04-05 2014-06-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deazapurines useful as inhibitors of Janus kinases
RU2008141356A (ru) 2006-04-26 2010-06-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) Производные пиримидина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы (pi3k)
WO2007129195A2 (en) 2006-05-04 2007-11-15 Pfizer Products Inc. 4-pyrimidine-5-amino-pyrazole compounds
US20090017444A1 (en) 2006-06-09 2009-01-15 Wisconsin Alumni Research Foundation Screening method for modulators of viral transcription or replication
EP2038272B8 (en) 2006-06-30 2013-10-23 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Pyridinonyl pdk1 inhibitors
TW200808325A (en) 2006-07-06 2008-02-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
KR101435231B1 (ko) 2006-08-24 2014-10-02 아스트라제네카 아베 증식성 질환의 치료에 유용한 모르폴리노 피리미딘 유도체
US20130310418A1 (en) 2006-11-15 2013-11-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindazoles useful as inhibitors of kinases
MX2009006345A (es) 2006-12-14 2009-06-23 Vertex Pharma Compuestos utiles como inhibidores de proteina cinasa.
WO2008079346A1 (en) 2006-12-21 2008-07-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 5-cyan0-4- (pyrrolo [2, 3b] pyridine-3-yl) -pyrimidine derivatives useful as protein kinase inhibitors
TW200840581A (en) 2007-02-28 2008-10-16 Astrazeneca Ab Novel pyrimidine derivatives
MX2009009591A (es) 2007-03-09 2009-11-10 Vertex Pharma Aminopirimidinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas.
JP2010520887A (ja) 2007-03-09 2010-06-17 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 蛋白キナーゼの阻害剤として有用なアミノピリジン
MX2009009590A (es) 2007-03-09 2009-11-10 Vertex Pharma Aminopirimidinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas.
AU2008228303B2 (en) 2007-03-22 2012-04-19 Takeda Pharmaceutical Company Limited Substituted pyrimidodiazepines useful as PLK1 inhibitors
RU2334747C1 (ru) 2007-04-05 2008-09-27 Андрей Александрович Иващенко ЗАМЕЩЕННЫЕ 2,3,4,5-ТЕТРАГИДРО-1Н-ПИРИДО[4,3-b]ИНДОЛЫ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ
RU2339637C1 (ru) 2007-04-05 2008-11-27 Андрей Александрович Иващенко Блокаторы гистаминного рецептора для фармацевтических композиций, обладающих противоаллергическим и аутоиммунным действием
WO2009018415A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process for preparing 5-fluoro-1h-pyrazolo [3, 4-b] pyridin-3-amine and derivatives thereof
US8461149B2 (en) 2007-08-15 2013-06-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful as protein kinase inhibitors
PL2205603T3 (pl) 2007-09-28 2014-07-31 Cyclacel Ltd Pochodne pirymidyny jako inhibitory kinaz białkowych
EP2574619A3 (en) 2007-10-09 2013-07-31 European Molecular Biology Laboratory Soluble fragments of influenza virus PB2 protein capable of binding RNA-cap
KR20100093552A (ko) 2007-11-02 2010-08-25 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 단백질 키나제 ｃ-세타로서의 [1ｈ-피라졸로[3,4-ｂ]피리딘-4-일]-페닐 또는 -피리딘-2-일 유도체
WO2009145814A2 (en) 2008-03-10 2009-12-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrimidines and pyridines useful as inhibitors of protein kinases
EP2297200A1 (en) 2008-04-09 2011-03-23 Technion Research & Development Foundation Ltd. Anti influenza antibodies and uses thereof
WO2010008459A1 (en) 2008-06-23 2010-01-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Protein kinase inhibitors
EP2356122B1 (en) 2008-06-23 2019-03-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Protein kinase inhibitors
AU2009274023A1 (en) 2008-07-23 2010-01-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Tri-cyclic pyrazolopyridine kinase inhibitors
US8569337B2 (en) 2008-07-23 2013-10-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Tri-cyclic pyrazolopyridine kinase inhibitors
CN102131807B (zh) 2008-07-23 2013-11-20 沃泰克斯药物股份有限公司 吡唑并吡啶激酶抑制剂
AU2009274017A1 (en) 2008-07-23 2010-01-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolopyridine kinase inhibitors
CN102459259A (zh) 2009-05-06 2012-05-16 沃泰克斯药物股份有限公司 吡唑并吡啶类
RS55341B1 (sr) 2009-06-17 2017-03-31 Vertex Pharma Inhibitori replikacije virusa gripa
WO2011000566A2 (en) 2009-06-30 2011-01-06 Savira Pharmaceuticals Gmbh Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of negative-sense ssrna virus infections
CN102471339A (zh) 2009-07-15 2012-05-23 雅培制药有限公司 激酶的吡咯并吡啶抑制剂
PL3290428T3 (pl) 2010-03-31 2022-02-07 Gilead Pharmasset Llc Tabletka zawierająca krystaliczny (S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-diokso-3,4-dihydropirymidyn-1(2H)-ylo)-4-fluoro-3-hydroksy-4-metylotetrahydrofuran-2-ylo)metoksy)(fenoksy)fosforylo)amino)propanian izopropylu
TWI549950B (zh) * 2010-04-07 2016-09-21 維泰克斯製藥公司 ３－（６－（１－（２，２－二氟苯并［ｄ］［１，３］二氧雜環戊烯－５－基）環丙烷甲醯胺基）－３－甲基吡啶－２－基）苯甲酸之固體形式
AU2011240808B2 (en) 2010-04-14 2015-01-22 Array Biopharma Inc. 5, 7-substituted-imidazo [1, 2-c] pyrimidines as inhibitors of JAK kinases
WO2011137022A1 (en) 2010-04-27 2011-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Azaindoles as janus kinase inhibitors
CN103562205A (zh) * 2010-12-16 2014-02-05 沃泰克斯药物股份有限公司 流感病毒复制的抑制剂
CN103492382A (zh) 2010-12-16 2014-01-01 沃泰克斯药物股份有限公司 流感病毒复制的抑制剂
CN103492381A (zh) 2010-12-16 2014-01-01 沃泰克斯药物股份有限公司 流感病毒复制的抑制剂
RU2014103806A (ru) 2011-07-05 2015-08-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Способы и промежуточные соединения для получения азаиндолов
UA118010C2 (uk) 2011-08-01 2018-11-12 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Інгібітори реплікації вірусів грипу
JP2014532765A (ja) 2011-11-07 2014-12-08 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ 炎症性疾患を処置する方法およびそのために有用な薬学的組み合わせ物
WO2013184985A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of influenza viruses replication
WO2014201332A1 (en) 2013-06-14 2014-12-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical combinations useful for treating rheumatoid arthritis
KR20160045070A (ko) 2013-08-22 2016-04-26 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 동위원소 풍부 아자인돌
US9296727B2 (en) 2013-10-07 2016-03-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of regioselective synthesis of 2,4-disubstituted pyrimidines
DK3421468T3 (da) 2013-11-13 2021-01-11 Vertex Pharma Fremgangsmåder til fremstilling af inhibitorer af re-plikation af influenzavira
NZ719729A (en) * 2013-11-13 2022-04-29 Vertex Pharma Inhibitors of influenza viruses replication
SG10201804024VA (en) 2013-11-13 2018-07-30 Vertex Pharma Formulations of azaindole compounds
MA40772A (fr) 2014-10-02 2017-08-08 Vertex Pharma Variants du virus de la grippe a
MA40773A (fr) 2014-10-02 2017-08-08 Vertex Pharma Variants du virus influenza a

Also Published As

Publication number Publication date
JP6615755B2 (ja) 2019-12-04
RS59144B1 (sr) 2019-09-30
CL2016001110A1 (es) 2017-10-20
US9771361B2 (en) 2017-09-26
AU2014348840B2 (en) 2019-06-06
KR20160084464A (ko) 2016-07-13
EP3068776B1 (en) 2019-05-29
NZ719729A (en) 2022-04-29
CA2930103A1 (en) 2015-05-21
PL3068776T3 (pl) 2019-10-31
IL245585B (en) 2021-07-29
HRP20191525T1 (hr) 2019-11-29
SG10201804026WA (en) 2018-06-28
CY1121919T1 (el) 2020-10-14
AU2014348840A1 (en) 2016-05-26
EP3068776A1 (en) 2016-09-21
SI3068776T1 (sl) 2019-09-30
LT3068776T (lt) 2019-08-12
CN105849100B (zh) 2019-07-16
US20160251353A1 (en) 2016-09-01
CN105849100A (zh) 2016-08-10
KR102353413B1 (ko) 2022-01-21
WO2015073476A1 (en) 2015-05-21
JP2016537346A (ja) 2016-12-01
PT3068776T (pt) 2019-08-26
CN110156779A (zh) 2019-08-23
ES2741444T3 (es) 2020-02-11
IL245585A0 (en) 2016-06-30
JP2020128441A (ja) 2020-08-27
MX2016006199A (es) 2016-08-08
EP3578554A1 (en) 2019-12-11
HUE044667T2 (hu) 2019-11-28
JP2019048898A (ja) 2019-03-28
RU2700415C1 (ru) 2019-09-17
DK3068776T3 (da) 2019-07-29
ME03460B (me) 2020-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA121376C2 (uk) Інгібітори реплікації вірусів грипу
RU2680800C1 (ru) Способы получения ингибиторов репликации вирусов гриппа
RU2685730C1 (ru) Составы соединений азаиндола
US10273233B2 (en) Inhibitors of influenza viruses replication
WO2019089734A1 (en) Methods and compositions for the treatment of influenza