TWI801393B - 針對cd73的抗體分子及其用途 - Google Patents

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Abstract

本發明揭示結合至CD73的抗體分子。該等抗CD73抗體分子可以用於治療、預防及/或診斷癌症。

Description

針對CD73的抗體分子及其用途
分化叢集73 (CD73)，亦稱為胞外-5'-核苷酸酶(胞外-5'NT)，為糖基磷脂醯肌醇(GPI)連接的細胞表面酶，其發現於大部分組織中，且尤其表現於內皮細胞及造血細胞亞群中(Resta等人, Immunol Rev161:95-109 (1998)及Colgan等人, Prinergic Signal 2:351-60 (2006))。CD73催化單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷。腺苷為經由若干受體(包括腺苷Al、A2A、A2B及A3受體)介導其生物作用的信號傳導分子。A2A受體因其廣泛表現於免疫細胞上而已備受關注。腺苷在腫瘤微環境中具有多效性效應，包括擴增調控T細胞(Treg)、抑制由干擾素(IFN)-γ介導之效應T細胞(Teff)反應，及擴增骨髓源抑制細胞(MDSC)。參見例如Allard B等人, Curr Opin Pharmacol 29:7-16 (2016)及Allard D等人, Immunotherapy 8:145-163 (2016)。
CD73亦表現於癌細胞上，包括結腸、肺、胰臟、卵巢、膀胱、白血病、神經膠質瘤、神經膠母細胞瘤、黑色素瘤、甲狀腺、食道、前列腺及乳房(Jin等人, Cancer Res 70:2245-55 (2010)及Stagg等人, PNAS 107: 1547-52 (2010)；Zhang等人, Cancer Res 70:6407-11 (2010))。已報導CD73高度表現與各種癌症適應症(諸如肺、黑色素瘤、三陰性乳房、鱗狀頭頸癌及結腸直腸癌)之不良結果相關。參見例如Allard B等人, Expert Opin Ther Targets 18:863-881 (2014)；Leclerc BG等人, Clin Cancer Res 22:158-166 (2016)；Ren ZH等人, Oncotarget 7:61690-61702 (2016)；Ren ZH等人, Oncol Lett 12:556-562 (2016)；及Turcotte M等人, Cancer Res 75:4494-4503 (2015)。
鑒於不斷地需要靶向諸如癌症之疾病的改良策略，因此非常需要用於調控CD73活性的新穎組合物及方法及相關治療劑。
本文揭示以高親和力及特異性結合至CD73 (分化叢集73)的抗體分子。亦提供編碼抗體分子的核酸分子、用於產生該等抗體分子的表現載體、宿主細胞及方法。亦提供包含該等抗體分子的免疫結合物、多特異性或雙特異性抗體分子及醫藥組合物。本文所揭示之抗CD73抗體分子可以(單獨或與其他藥劑或治療模式組合)用於治療、預防及/或診斷病症，包括免疫病症及癌症。因此，本文揭示使用抗CD73抗體分子治療及/或診斷各種病症(包括癌症及免疫病症)的組合物及方法。
因此，在某些態樣中，本發明提供一種抗體分子(例如經分離之分子或重組抗體分子)，其具有以下特性中之一或多者(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25或超過25種，例如全部)： (i)以高親和力(例如解離常數(KD )小於約100 nM，例如小於約10 nM、1 nM、0.1 nM或0.01 nM)結合至CD73，例如人類CD73，例如當使用Octet測試作為二價抗體分子的抗體分子時； (ii)結合至可溶性人類CD73或膜結合之人類CD73，或兩者； (iii)以小於約100 nM (例如小於約10 nM、1 nM、0.1 nM或0.01 nM)之解離常數(KD )實質上結合非人類靈長類動物CD73，例如食蟹獼猴CD73，例如當使用Octet測試作為二價抗體分子的抗體分子時； (iv)不結合至鼠類CD73，例如如使用Octet所測定，例如如實例1中所述； (v)抑制或減少CD73 (例如可溶性人類CD73或膜結合的人類CD73)之酶活性，例如抑制或減少人類CD73介導單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如在孔雀綠(MG)磷酸鹽分析或經修改的細胞效價Glo (CTG)分析中測試作為二價抗體的抗體分子時，例如如實例1中所述； (vi)在單磷酸腺苷(AMP)存在下增強抗CD3/抗CD28刺激之T細胞(例如CD4+ T細胞)增殖，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如在CellTrace Violet (CTV)細胞增殖分析中測試作為二價抗體的抗體分子時，例如如實例1中所述； (vii)當結合至細胞表面上所表現的人類CD73時，增強人類CD73於細胞中的內化，例如使人類CD73於細胞中的內化增強至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、15倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或100倍； (viii)結合至CD73上的抗原決定基，例如與本文所述之抗體分子(例如如本文所述的人類抗CD73抗體分子，例如表1中之抗體分子)所識別之抗原決定基相同或相似的抗原決定基； (ix)與針對CD73的第二抗體分子結合相同(或基本上相同)或重疊(或基本上重疊)的抗原決定基，其中第二抗體分子為本文所述之抗體分子，例如表1中所示的抗體分子； (x)抑制(例如競爭性地抑制)第二抗體分子結合至CD73，其中該第二抗體分子為本文所述之抗體分子，例如表1中所示的抗體分子； (xi)展示與表1中所述之抗體分子(例如包含表1中所示之重鏈可變區及/或輕鏈可變區的抗體分子)相同或相似的結合親和力或特異性，或兩者； (xii)結合至人類CD73之N末端域； (xiii)結合至人類CD73之A環及/或B環； (xiv)當結合包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時減少該蛋白質之一或多個區域處發生的氫-氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387，及殘基87-104，例如當使用氫氘交換質譜來測試作為二價抗體分子的抗體分子時； (xv)當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時，誘導SEQ ID NO: 105之殘基368-387發生構形變化； (xvi)接觸SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，例如直接地或間接地接觸； (xvii)接觸SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基，例如直接地或間接地接觸； (xviii)接觸SEQ ID NO: 105或106之殘基368-387內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基，例如直接地或間接地接觸； (xix)接觸SEQ ID NO: 105之殘基87-104內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基，例如直接地或間接地接觸； (xx)結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，該第一抗原結合域結合至第一CD73單體且該第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時； (xxi)優先結合至CD73之開放構形(例如催化非活性構形)，而非CD73之封閉構形(例如催化活性構形)，例如不結合至CD73之封閉構形(例如催化活性構形)，或結合至CD73之封閉構形(例如催化活性構形)的親和力低於抗體分子結合至CD73之開放構形(例如催化非活性構形)時的親和力，例如親和力低50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%； (xxii)將人類CD73鎖定在催化非活性開放構形； (xxiii)防止或減少人類CD73自催化非活性開放構形轉化成催化活性封閉構形，例如使該轉化減少至少1.5倍、2倍、5倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或100倍； (xxiv)具有本文所述之抗體分子(例如表1中所示的抗體分子)的一或多種生物特性； (xxv)具有本文所述之抗體分子(例如表1中所示的抗體分子)的一或多種藥物動力學特性；或 (xxvi)調節(例如抑制)CD73之一或多種活性，例如引起以下中之一或多者：抑制或減少CD73酶活性；抑制或減少單磷酸腺苷(AMP)轉化成腺苷；增強抗CD3/抗CD28刺激之T細胞(例如CD4+ T細胞) 在單磷酸腺苷(AMP)存在下的增殖；抑制調控T細胞增殖；增強效應T細胞反應；及/或抑制骨髓源抑制細胞的遷移、浸潤或擴增。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73二聚體的抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，該第一抗原結合域結合至第一CD73單體且該第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時。在一個實施例中，第一或第二CD73單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列。在一個實施例中，第一或第二CD73單體係由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成。
在一個態樣中，本文揭示一種組合物，其包含結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體係由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體係由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%或40%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成(例如當使用尺寸排阻層析法來量測時)，且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述。在一個實施例中，本文揭示一種組合物，其包含結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體係由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體係由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%或40%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析(SEC)分析來量測時，該尺寸排阻層析(SEC)分析包含以下步驟： (i)在4℃下培育含有等莫耳量之二價抗體分子及CD73單體的樣品隔夜； (ii)在室溫下，使樣品在含有90體積% 2x PBS及10體積%異丙醇的緩衝液中流過SEC管柱(例如Shodex Protein KW-803管柱(8 x 300mm ID))；及 (iii)分析SEC峰，藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得可區分抗體CD73物種的相對百分比值。
在一個態樣中，本文揭示一種組合物，其包含結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法來量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述。在一個實施例中，本文揭示一種組合物，其包含結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析(SEC)分析來量測時，該尺寸排阻層析(SEC)分析包含以下步驟： (i)在4℃下培育含有等莫耳量之二價抗體分子及CD73單體的樣品隔夜； (ii)在室溫下，使樣品在含有90體積% 2x PBS及10體積%異丙醇的緩衝液中流過SEC管柱(例如Shodex Protein KW-803管柱(8 x 300mm ID))；及 (iii)分析SEC峰，藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得可區分抗體CD73物種的相對百分比值。
在一個態樣中，本文揭示結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法來量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述。在一個實施例中，本文揭示結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析(SEC)分析來量測時，該尺寸排阻層析(SEC)分析包含以下步驟： (i)在4℃下培育含有等莫耳量之二價抗體分子及CD73單體的樣品隔夜； (ii)在室溫下，使樣品在含有90體積% 2x PBS及10體積%異丙醇的緩衝液中流過SEC管柱(例如Shodex Protein KW-803管柱(8 x 300mm ID))；及 (iii)分析SEC峰，藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得可區分抗體CD73物種的相對百分比值。
在一個態樣中，本文揭示結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%或30%結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法來量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述。在一個實施例中，本文揭示結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%或30%抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析(SEC)分析來量測時，該尺寸排阻層析(SEC)分析包含以下步驟： (i)在4℃下培育含有等莫耳量之二價抗體分子及CD73單體的樣品隔夜； (ii)在室溫下，使樣品在含有90體積% 2x PBS及10體積%異丙醇的緩衝液中流過SEC管柱(例如Shodex Protein KW-803管柱(8 x 300mm ID))；及 (iii)分析SEC峰，藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得可區分抗體CD73物種的相對百分比值。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，該抗體分子優先結合至CD73之開放構形(例如催化非活性構形)，而非CD73之封閉構形(例如催化活性構形)，例如不結合至CD73之封閉構形(例如催化活性構形)，或結合至CD73之封閉構形(例如催化活性構形)的親和力低於抗體分子結合至CD73之開放構形(例如催化非活性構形)的親和力，例如親和力低50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子防止或減少人類CD73自催化非活性開放構形轉化成催化活性封閉構形，例如使該轉化相較於缺乏抗體分子情況下之轉化減少至少1.5倍、2倍、5倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或100倍。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列之蛋白質(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時，該抗體分子減少該蛋白質之一或多個區域處發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387，及殘基87-104，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如氫氘交換質譜法在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行交換1分鐘。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時，使在選自核心區C (SEQ ID NO: 105之殘基368-387)的XC 殘基處發生的平均氫氘交換減少的程度大於選自核心區A (SEQ ID NO: 105之殘基158-172)之XA 殘基、選自核心區B (SEQ ID NO: 105之殘基206-215)之XB 殘基或選自核心區D (SEQ ID NO: 105之殘基297-309)之XD 殘基，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如氫氘交換質譜法在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換，其中： XC 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20， XA 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14， XB 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，及 XD 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13。
在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時，使在選自核心區C之20個殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於： (i)選自核心區A的14個殘基， (ii)選自核心區B的10個殘基，或 (iii)選自核心區D的13個殘基， 例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A及核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A、核心區B及核心區D。
在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時，使在選自核心區C之15個殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於： (i)選自核心區A的10個殘基， (ii)選自核心區B的8個殘基，或 (iii)選自核心區D的10個殘基， 例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A及核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A、核心區B及核心區D。
在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在選自核心區C之10個殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於： (i)選自核心區A的7個殘基， (ii)選自核心區B的5個殘基，或 (iii)選自核心區D的7個殘基， 例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A及核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區C發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區A、核心區B及核心區D。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如由SEQ ID NO: 171之胺基酸序列組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在選自核心區A (SEQ ID NO: 105之殘基158-172)的XA 殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於選自核心區B (SEQ ID NO: 105之殘基206-215)的XB 殘基、選自核心區C (SEQ ID NO: 105之殘基368-387)的XC 殘基，或選自核心區D (SEQ ID NO: 105之殘基297-309)的XD 殘基，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如氫氘交換質譜法在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換，其中： XA 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14， XB 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9或10， XC 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20，且 XD 等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13。
在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使14個在選自核心區A之殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於： (i)選自核心區B的10個殘基， (ii)選自核心區C的20個殘基，或 (iii)選自核心區D的13個殘基， 例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區C。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區C。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區C及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B、核心區C及核心區D。
在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在選自核心區A之10個殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於： (i)選自核心區B的8個殘基， (ii)選自核心區C的15個殘基，或 (iii)選自核心區D的10個殘基，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區C。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區C。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區C及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B、核心區C及核心區D。
在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在選自核心區A之7個殘基發生的平均氫氘交換減少程度大於： (i)選自核心區B的5個殘基， (ii)選自核心區C的10個殘基，或 (iii)選自核心區D的7個殘基， 例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區C。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區C。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區C及核心區D。在一個實施例中，抗體結合使在核心區A發生的平均氫氘交換減少程度大於核心區B、核心區C及核心區D。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使該蛋白質之一或多個區域處發生的氫氘交換減少，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387，及殘基87-104，其中該一或多個區域中之平均氫氘交換出現最大減少的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子接觸SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，例如直接地或間接地接觸。在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子接觸SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基，例如直接地或間接地接觸。在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子接觸SEQ ID NO: 105或106之殘基368-387內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基，例如直接地或間接地接觸。在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子接觸SEQ ID NO: 105之殘基87-104內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基，例如直接地或間接地接觸。
在一個實施例中，抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基。在一個實施例中，抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基。
或者，或在本文所述實施例之組合中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使在該蛋白質之殘基K136 (根據SEQ ID NO: 105編號)標記的串聯質量標籤(TMT)減少，例如當使用TMT同位素標記(例如使用實例9中所述的方法，例如使用執行30秒標記時間的TMT同位素標記)測試作為二價抗體分子的抗體分子時，視情況其中該抗體分子使在蛋白質之殘基K133、K162、K179、K206、K214、K285、K291及K341 (根據SEQ ID NO: 105編號)中之一或多者處(例如在蛋白質之殘基K162、K206、K214、K285、K291及K341 (根據SEQ ID NO: 105編號)中之一或多者處)發生的TMT標記進一步減少。在一個實施例中，抗體分子當結合至該蛋白質時，使在該蛋白質之殘基K262及K274 (根據SEQ ID NO: 105編號)中之一或兩者處發生的TMT標記增加，例如當使用TMT同位素標記測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如使用實例9中所述的方法，例如使用執行30秒標記時間的TMT同位素標記。在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使在該蛋白質之殘基K206及K214 (根據SEQ ID NO: 105編號)發生的串聯質量標籤(TMT)標記減少，其中在殘基K214處發生的減少不小於在殘基K206處發生之減少的90%、80%、70%、60%或50%，例如當使用TMT同位素標記(例如使用實例9中所述的方法)測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如其中在殘基K214處發生的減少不小於在殘基K206處發生之減少的90%、80%、70%、60%或50% (使用執行30秒標記時間的TMT同位素標記)，例如其中在殘基K214處發生的減少不小於在殘基K206處發生之減少的90%、80%、70%、60%、50%、40%或30% (使用執行300秒標記時間的TMT同位素標記)。在一個實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，當使用執行30秒標記時間的串聯質量標籤(TMT)同位素標記測試抗體分子時，使在該蛋白質之殘基K162 (根據SEQ ID NO: 105編號)處發生的TMT標記減少，其中： (i)當使用執行300秒標記時間的TMT同位素標記測試時，或抗體分子不減少在殘基K162發生的TMT標記，或 (ii)當使用執行300秒標記時間的TMT同位素標記測試時，抗體分子使在殘基K162處發生的TMT標記減少，其中在300秒標記時間下在殘基K162處發生的減少不大於在30秒標記時間下在殘基K162處發生之減少的20%、30%、40%或50%， 例如當測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如使用實例9中所述的方法。
或者，或在本文所述實施例之組合中，抗體分子結合至CD73之一或多個殘基，例如經由靜電相互作用及/或氫鍵，其中該一或多個殘基選自由以下組成之群：殘基Y110、K136、L132、L157、K162、S155及T209 (根據SEQ ID NO: 105編號)，例如如使用晶體結構分析(例如使用實例8中所述的方法)所量測。在一個實施例中，該抗體分子包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該抗體分子具有以下特性中之一或多者(例如1、2、3、4者或全部)： (i)抗體分子(例如重鏈可變區，例如重鏈可變區之R54，根據Kabat編號法所編號)結合至CD73之Y110 (例如Y110之主鏈羰基或K136 (例如K136之主鏈羰基)(根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由靜電相互作用，例如如晶體結構分析使用所量測，例如使用實例8中所述的方法， (ii)抗體分子(例如重鏈可變區，例如重鏈可變區之R31，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之L132 (例如L132之主鏈羰基)或L157 (例如L157之主鏈羰基)(根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由靜電相互作用，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法， (iii)抗體分子(例如重鏈可變區，例如重鏈可變區之S99 (例如S99之主鏈羰基)、R31 (例如R31之主鏈羰基)，或E95 (例如E95之側鏈)，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之K162 (例如K162之側鏈)(根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由靜電相互作用，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法， (iv)抗體分子(例如重鏈可變區，例如重鏈可變區之E98，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之S155 (例如S155之側鏈)(根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由氫鍵，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法，及 (v)抗體分子(例如輕鏈可變區，例如輕鏈可變區之W32 (例如W32之側鏈)，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之T209 (例如T209之側鏈)(根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由氫鍵，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法。
在一個實施例中，抗體分子結合至CD73之一或多個區域，例如經由形狀互補及/或凡得瓦爾相互作用(Van der Waal interaction)結合，其中該一或多個區域選自由根據SEQ ID NO: 105編號之殘基155-170、136-138及209-210組成之群，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法。在一個實施例中，抗體分子包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該抗體分子具有以下特性中之一或多者(例如1、2者或全部)： (i)抗體分子(例如重鏈可變區，例如重鏈可變區之殘基33、50、52、56、97、98、100或100a，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之殘基155-170 (根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由形狀互補及/或凡得瓦爾相互作用，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法， (ii)抗體分子(例如重鏈可變區，例如重鏈可變區之殘基30或31，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之殘基136-138 (根據SEQ ID NO: 105編號)，例如經由形狀互補及/或凡得瓦爾相互作用來結合，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法，及 (iii)抗體分子(例如輕鏈可變區，例如輕鏈可變區之殘基30或32，根據Kabat編號法編號)結合至CD73之殘基209-210 (根據SEQ ID NO: 105編號)，例如如使用晶體結構分析所量測，例如使用實例8中所述的方法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中該抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個互補決定區(CDR)(或總體而言所有的CDR)，該等互補決定區來自包含表1中所示胺基酸序列或由表1中所示核苷酸序列編碼之胺基酸序列的重鏈可變區及/或輕鏈可變區(例如來自表1中所揭示之抗體(例如抗體918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398)的重鏈及輕鏈可變區序列)。在一些實施例中，CDR係根據Kabat定義(例如如表1中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Chothia定義(例如如表1中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據基於Kabat定義與Chothia定義之組合定義(例如如表1中所述)。在一些實施例中，CDR係根據IMGT定義(例如如表1中所闡述)。在一個實施例中，CDR中之一或多者(或總體而言所有的CDR)相對於表1中所示的胺基酸序列或由表1中所示核苷酸序列編碼的胺基酸序列具有一、兩、三、四、五、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代(例如保守胺基酸取代)或缺失。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其包含： (i)重鏈可變區(VH)，其包含以下中之一者、兩者或三者：X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及/或 (ii)輕鏈可變區(VL)，其包含以下中之一者、兩者或三者：RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含： (i) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)； (ii) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)； (iii) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)； (iv) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)； (v) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；或 (vi) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含胺基酸序列SEQ ID NO: 44、77、84、142、151或159，或與SEQ ID NO: 44、77、84、142、151或159具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55，或與SEQ ID NO: 55具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 46、79、86、114、116或117，或與SEQ ID NO: 46、79、86、114、116或117具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57，或與SEQ ID NO: 57具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含： (i)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 44 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區； (ii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 77 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區； (iii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 84 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區； (iv)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 142 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區； (v)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 151 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區；或 (vi)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 159 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 55 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含： (i)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 46 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (ii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 114 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (iii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 79 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (iv)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 116 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (v)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 86 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈；或 (vi)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 117 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 57 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，該抗體分子包含含有VHCDR3胺基酸序列ESQESPYNNWFDP (SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其包含： (i)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及/或 (ii)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含： (i) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)； (ii) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)； (iii) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；或 (iv) VH，其包含以下中之一者、兩者或三者：VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)；及VL，其包含以下中之一者、兩者或三者：VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含胺基酸序列SEQ ID NO: 66、31、10或168，或與SEQ ID NO: 66、31、10或168具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含胺基酸序列SEQ ID NO: 21，或與SEQ ID NO: 21具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 68、33、12、115、113或112，或與SEQ ID NO: 68、33、12、115、113或112具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23，或與SEQ ID NO: 23具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含： (i)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 66 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 21 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區； (ii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 31 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 21 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區； (iii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 10 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 21 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區；或 (iv)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 168 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 21 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含： (i)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 68 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (ii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 115 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (iii)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 33 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (iv)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 113 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈； (v)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 12 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈；或 (vi)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 112 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 23 (或與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列)的輕鏈。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH3-23生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK3-15生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH3-23生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK3-15生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH4-59生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK1-12生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH4-59生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK1-12生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH3-23生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK1-05生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH3-23生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK1-05生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH1-02生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK1-12生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH1-02生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK1-12生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH3-07生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK4-01生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH3-07生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK4-01生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH1-69生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK3-15生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH1-69生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK3-15生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH4-34生殖系序列的重鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VK1-12生殖系序列的輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列來源於人類VH4-34生殖系序列的重鏈可變區，及胺基酸序列來源於人類VK1-12生殖系序列的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子為單株抗體或具有單一特異性的抗體。在某些實施例中，抗CD73抗體分子為雙特異性或多特異性抗體。抗CD73抗體分子之重鏈及輕鏈可為全長的(例如抗體可以包括至少一個或至少兩個完整重鏈，及至少一個或至少兩個完整輕鏈)或可以包括抗原結合片段(例如Fab、F(ab')2、Fv、單鏈Fv片段、單域抗體、雙功能抗體(dAb)、二價或雙特異性抗體或其片段、其單域變異體，或駱駝科抗體)。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子具有重鏈恆定區(Fc)，其選自例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgD及IgE之重鏈恆定區；尤其選自例如IgG1、IgG2、IgG3及IgG4之重鏈恆定區，更特定言之，IgG4之重鏈恆定區。在一些實施例中，重鏈恆定區為人類IgG4。在一些實施例中，抗CD73抗體分子具有輕鏈恆定區，其選自例如κ或λ之輕鏈恆定區。在一些實施例中，輕鏈恆定區為κ (例如人類κ)。在一些實施例中，恆定區經改變(例如突變)以修改抗CD73抗體分子之特性(例如增加或減少以下中之一或多者：Fc受體結合、抗體糖基化、半胱胺酸殘基數目、效應細胞功能，或補體功能)。在一些實施例中，IgG4 (例如人類IgG4)之重鏈恆定區在根據Eu編號的位置228處發生突變(例如S突變為P)，例如如表3所示。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含在根據Eu編號之位置228處發生突變的人類IgG4 (例如S突變為P)，例如如表3所示；及κ輕鏈恆定區，例如如表3所示。在一些實施例中，IgG4 (例如人類IgG4)之重鏈恆定區在根據Eu編號的位置228處(例如S突變為P)及位置235處(例如L突變為E)發生突變，例如如表3所示。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含在根據Eu編號的位置228處(例如S突變為P)及位置235處(例如L突變為E)發生突變的人類IgG4，例如如表3所示；及κ輕鏈恆定區，例如如表3所示。在再另一個實施例中，IgG1 (例如人類IgG1)之重鏈恆定區在以下位置中之一或多者處發生突變：位置297 (例如N突變為A)、位置265 (例如D突變為A)、位置329 (例如P突變為A)、位置234 (例如L突變為A)，或位置235 (例如L突變為A)，所有均根據Eu編號，例如如表3所示。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含在前述位置中之一或多者處發生突變的人類IgG1，例如如表3所示；及κ輕鏈恆定區，例如如表3所示。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含選自IgG1、IgG2、IgG3及IgG4的重鏈恆定區，及選自κ或λ輕鏈恆定區的輕鏈恆定區。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列選自由SEQ ID NO: 92-103、119及120組成之群的重鏈恆定區，及包含胺基酸序列SEQ ID NO: 104的輕鏈恆定區。
在一個態樣中，本發明特徵為一種與單株抗體(例如本文所述之抗體分子)競爭結合至人類CD73的抗體分子。本發明特徵亦為一種與針對人類CD73之單株抗體(例如本文所述之抗體分子)結合至相同(或基本上相同)或重疊(或基本上重疊)抗原決定基的抗體分子。
在一個實施例中，單株抗體包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在某些實施例中，單株抗體包含： (i)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及/或 (ii)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在某些實施例中，單株抗體包含： (i) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (ii) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (iii) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (iv) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (v) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (vi) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個實施例中，單株抗體包含重鏈可變區(VH)，該重鏈可變區包含ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)。
在某些實施例中，單株抗體包含： (i)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及/或 (ii)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在某些實施例中，單株抗體包含： (i) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (ii) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (iii) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (iv) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本發明特徵為 包含一個或兩個核苷酸序列的核酸分子，該等核苷酸序列編碼抗CD73抗體分子之重鏈及輕鏈可變區、CDR、高變環、構架區，如本文所述。在某些實施例中，編碼抗CD73抗體分子的核苷酸序列為密碼子最佳化。舉例而言，本發明特徵為分別編碼抗CD73抗體分子之重鏈及輕鏈可變區的第一及第二核酸，其選自如表1所概述之918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398中之任一者，或與其基本上一致之序列。舉例而言，核酸可以包含如表1中所述之核苷酸序列，或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列，或與表1中所示的序列差異不超過3、6、15、30或45個核苷酸)。
在一個態樣中，揭示包含核苷酸序列的核酸，該等核苷酸序列編碼如本文所述之抗CD73抗體分子的重鏈及輕鏈可變區及CDR。舉例而言，本發明根據表1提供分別編碼抗CD73抗體分子之重鏈及輕鏈可變區的第一及第二核酸，或與其基本上一致的序列。舉例而言，核酸可以包含根據表1之編碼抗CD73抗體分子的核苷酸序列，或與該核苷酸序列基本上一致的序列(例如與其至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列，或與前述核苷酸序列差異不超過3、6、15、30或45個核苷酸)。
在某些實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個或三個來自具有如表1中所闡述之胺基酸序列之重鏈可變區之CDR或高變環的核苷酸序列，或與其基本上同源的序列(例如，與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。
在某些實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個或三個來自具有如表1中所闡述之胺基酸序列之輕鏈可變區之CDR或高變環的核苷酸序列，或與其基本上同源的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。
在某些實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個來自具有如表1中所闡述之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區之CDR或高變環的核苷酸序列，或與其基本上同源的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。
在某些實施例中，核酸編碼重鏈可變區，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 45、78、85、143、152、160、67、32、11或169，或與SEQ ID NO: 45、78、85、143、152、160、67、32、11或169具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在某些實施例中，核酸編碼重鏈，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 47、80、87、69、34或13，或與SEQ ID NO: 47、80、87、69、34或13具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在某些實施例中，核酸編碼輕鏈可變區，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 56、144、22或170，或與SEQ ID NO: 56、144、22或170具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在某些實施例中，核酸編碼輕鏈，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 58或24，或與SEQ ID NO: 58或24具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在一個態樣中，本發明特徵為含有本文所述之核酸的宿主細胞及載體。核酸可存在於單一載體或各別載體中，該單一載體或各別載體存在於同一宿主細胞或各別宿主細胞中。本文亦提供一種產生抗C73抗體分子的方法，該方法包含在適於基因表現的條件下培養本文揭示之宿主細胞。
在一個態樣中，本發明提供一種提供本文所述之抗體分子的方法。該方法可以包括：提供CD73抗原(例如包含CD73抗原決定基之至少一部分(例如CD73抗原之N末端域)的抗原)；獲得結合至CD73抗原的抗體分子；及評估該抗體分子是否結合至CD73抗原，或評估抗體分子在調節(例如刺激或抑制)CD73活性方面的功效。該方法可以進一步包括將抗體分子投與個體，例如人類或非人類動物。
在一個態樣中，本發明提供組合物，例如醫藥組合物，其包括醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑及本文所述之抗CD73抗體分子中的至少一者。在一個實施例中，組合物(例如醫藥組合物)包括抗體分子與一或多種藥劑(例如治療劑或其他抗體分子)之組合，如本文所述。在一些實施例中，抗體分子與標記或治療劑結合。在一些實施例中，組合物(例如醫藥組合物)包含抗體分子與第二藥劑(例如治療劑，或前述抗體分子中之兩者或更多者)之組合，如本文進一步描述。
本文揭示之抗CD73抗體分子可以抑制、減少或中和CD73之一或多種活性，例如抑制或減少CD73酶活性；抑制或減少單磷酸腺苷(AMP)轉化成腺苷；增強抗CD3/抗CD28刺激之T細胞(例如CD4+ T細胞)在單磷酸腺苷(AMP)存在下的增殖；抑制調控T細胞增殖；增強效應T細胞反應；及/或抑制骨髓源抑制細胞的遷移、浸潤或擴增。因此，此類抗體分子可以用於治療或預防需要增強個體之免疫反應的病症。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成(例如各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列，例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定該複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合之抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且該百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子當結合至SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中： (i)當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如如實例2中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387，及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387，及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列d 蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387，及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基206-215發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在該蛋白質之一或多個區域處發生的氫氘交換減少，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、SEQ ID NO: 105之殘基206-215，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，或SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基368-387。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基368-387及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。在一個實施例中，抗體結合使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的平均氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、SEQ ID NO: 105之殘基368-387，及SEQ ID NO: 105之殘基297-309。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在該蛋白質的一或多個區域發生的氫氘交換減少，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例2中所述，例如在pH 7-8 (例如pH 7.5)及室溫下執行1分鐘交換的氫氘交換質譜法；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子結合至SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基，及/或SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述；及 (ii)抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 AMS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 88)，其中X1 為R、Y或S，且X2 為Y或N；X1 IX2 GX3 GX4 X5 TYYADSVKG之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 89)，其中X1 為A或S，X2 為S或T，X3 為S或T，X4 為M、G或S，且X5 為N、S、L或Y；及GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)；及 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQSVGSNLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 48)；GASTRAT之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 49)；及QQHNAFPYT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 50)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 36，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 72、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 71及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 136及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50； (e) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 146及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50；或 (f) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 137、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 154及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 50。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述；及 (ii)抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之重鏈互補決定區3 (VHCDR3)胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a)重鏈可變區(VH)，其包含X1 X2 YWS之重鏈互補決定區1 (VHCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 90)，其中X1 為R、G或S，且X2 為Y或R；YIYX1 X2 GSTX3 YNPSLKS之VHCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 91)，其中X1 為G或S，X2 為R、S或T，且X3 為N或K；及ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)；及/或 (b)輕鏈可變區(VL)，其包含RASQGISSWLA之輕鏈互補決定區1 (VLCDR1)胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)；AASSLQS之VLCDR2胺基酸序列(SEQ ID NO: 15)；及QQGNSFPRT之VLCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 16)。
在一個態樣中，本文揭示一種結合至人類CD73的抗體分子，其中： (i)抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述；及 (ii)抗體分子包含： (a) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 61、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 60，及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15，及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (b) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 26及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16； (c) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 4、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 2及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16；或 (d) VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 163、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 162及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 3；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO: 14、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO: 15及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO: 16。
抗 CD73 抗體分子之用途 本文揭示之抗體分子可以調節(例如增強、刺激、增加、抑制、降低或中和) CD73之一或多種活性。在一些實施例中，抗體分子引起以下中之一或多者：抑制或減少CD73之酶活性；抑制或減少單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷；及增強抗CD3/抗CD28刺激之T細胞(例如CD4+ T細胞)在單磷酸腺苷(AMP)存在下的增殖。
在一些實施例中，抗體分子抑制或減少CD73 (例如可溶性人類CD73或膜結合的人類CD73)的酶活性，例如人類CD73介導單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如孔雀綠(MG)磷酸鹽分析或經修改的細胞效價Glo (CTG)分析，例如如實例1中所述。
在一些實施例中，抗體分子抑制膜結合之人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如如實例1中所述。在一個實施例中，抗體分子抑制膜結合人類CD73之酶活性的至少約60%、70%、80%或90%，例如當使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析測試作為二價抗體分子的抗體分子時，該分析包含以下步驟： (i)將劑量滴定之抗體分子(例如1000 ng/ml)與20,000個細胞/毫升之表現人類CD73之人類癌細胞株(例如人類乳癌細胞株MDA-MB-231或人類卵巢癌細胞株SKOV3)一起在37℃下、在100 µM AMP存在下培育240分鐘； (ii)使用經修改的細胞效價Glo (CTG)分析量測AMP之消失，如實例1中所述；及 (iii)使用零時對照物作為100%抑制且使用無抗體對照物作為0%抑制來計算抗體分子所介導之抑制百分比。
在一些實施例中，抗體分子增強抗CD3/抗CD28刺激之T細胞(例如CD4+ T細胞)在單磷酸腺苷(AMP)存在下的增殖，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如CellTrace Violet (CTV)細胞增殖分析，例如實例1之分析。
在某些態樣中，提供一種調節(例如刺激或抑制)個體之免疫反應的方法。該方法包含將本文揭示之抗CD73抗體分子(例如治療有效量之抗CD73抗體分子)單獨或與一或多種藥劑或程序組合(例如與抗腫瘤療法組合，例如化學療法、輻射療法及/或其他免疫調節劑)投與個體，以便調節個體之免疫反應。在一些實施例中，抗體分子抑制、降低或中和個體之免疫反應。
個體可為哺乳動物，例如猴、靈長類動物，較佳為較高等靈長類動物，例如人類(例如患有或處於本文所述病症之風險中的患者)。在一些實施例中，個體需要增強免疫反應，且在一些實施例中，個體需要抑制免疫反應。在一個實施例中，個體患有或處於本文所述病症(例如如本文所述的癌症)之風險中。在某些實施例中，個體患有或處於免疫功能不全之風險中。舉例而言，個體正經歷或已經歷化學治療性治療及/或輻射療法。
在一個態樣中，提供一種刺激個體之免疫反應的方法。該方法包含將本文所述之抗CD73抗體分子(例如治療有效量之抗CD73抗體分子)單獨或與一或多種藥劑或程序組合投與個體。
在一個態樣中，提供一種治療(例如減輕、抑制或延遲進展中之一或多者)個體之癌症或腫瘤的方法。該方法包含將本文所述之抗CD73抗體分子(例如治療有效量之抗CD73抗體分子)單獨或與一或多種藥劑或程序組合投與個體。
在一些實施例中，抗體分子與第二治療劑或程序組合投與。在一些實施例中，第二治療劑或程序係選自以下中之一或多者：化學療法、靶向抗癌療法、溶瘤藥物、細胞毒性劑、基於免疫的療法、細胞介素、手術程序、輻射程序、共刺激分子活化劑、抑制分子之抑制劑(例如檢查點抑制劑之抑制劑)、疫苗，或細胞療法。在一些實施例中，第二治療劑係選自以下中之一或多者：1)蛋白激酶C (PKC)抑制劑；2)熱休克蛋白90 (HSP90)抑制劑；3)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)及/或雷帕黴素標靶(mTOR)之抑制劑；4)細胞色素P450抑制劑(例如CYP17抑制劑或17α-羥化酶/C17-20裂解酶抑制劑)；5)鐵螯合劑；6)芳香酶抑制劑；7) p53抑制劑，例如p53/Mdm2相互作用抑制劑；8)細胞凋亡誘導劑；9)血管生成抑制劑；10)醛固酮合成酶抑制劑；11)平順化(SMO)受體抑制劑；12)促乳素受體(PRLR)抑制劑；13) Wnt信號傳導抑制劑；14) CDK4/6抑制劑；15)纖維母細胞生長因子受體2 (FGFR2)/纖維母細胞生長因子受體4 (FGFR4)抑制劑；16)巨噬細胞群落刺激因子(M-CSF)之抑制劑；17) c-KIT、組織胺釋放、Flt3 (例如FLK2/STK1)或PKC中之一或多者的抑制劑；18) VEGFR-2 (例如FLK-1/KDR)、PDGFRβ、c-KIT或Raf激酶C中之一或多者的抑制劑；19)生長抑素促效劑及/或生長激素釋放抑制劑；20)退行性淋巴瘤激酶(ALK)抑制劑；21)類胰島素生長因子1受體(IGF-1R)抑制劑；22) P-醣蛋白1抑制劑；23)血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制劑；24) BCR-ABL激酶抑制劑；25) FGFR抑制劑；26) CYP11B2之抑制劑；27) HDM2抑制劑，例如HDM2-p53相互作用之抑制劑；28)酪胺酸激酶之抑制劑；29) c-MET之抑制劑；30) JAK之抑制劑；31) DAC之抑制劑；32) 11β-羥化酶之抑制劑；33) IAP之抑制劑；34) PIM激酶之抑制劑；35) 刺蝟(Porcupine)抑制劑；36) BRAF抑制劑，例如BRAF V600E或野生型BRAF；37) HER3之抑制劑；38) MEK之抑制劑；或39)脂質激酶之抑制劑。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與PD-1抑制劑組合投與。在一些實施例中，PD-1抑制劑選自由以下組成之群：PDR001、納武單抗(Nivolumab)、派立珠單抗(Pembrolizumab)、皮立珠單抗(Pidilizumab)、MEDI0680、REGN2810、TSR-042、PF-06801591及AMP-224。在一些實施例中，PD-1抑制劑為抗PD-1抗體分子。在一些實施例中，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約250 mg至350 mg、約350 mg至450 mg或約450 mg至550 mg之劑量投與，例如以約300 mg或約400 mg之劑量投與，例如每三週一次(Q3W)或每四週一次(Q4W)，例如以約300 mg Q3W之劑量，或以約400 mg Q4W之劑量。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子例如藉由輸注投與30分鐘之時段，或長達2小時之時段。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg、約100 mg至500 mg、約500 mg至1000 mg、約1000 mg至1500 mg、約1500 mg至2000 mg、約2000 mg至2500 mg、約2500 mg至3000 mg、約3000 mg至3500 mg或約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如以約6 mg、約20 mg、約60 mg、約200 mg、約600 mg、約1200 mg、約2400 mg、約3000 mg或約3600 mg之劑量投與，例如每週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)，例如Q2W。在一個實施例中，抗CD73抗體分子例如藉由輸注投與30分鐘之時段、1小時之時段或長達2小時之時段。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與PD-L1抑制劑組合投與。在一些實施例中，PD-L1抑制劑選自由以下組成之群：FAZ053、阿特唑單抗(Atezolizumab)、阿維魯單抗(Avelumab)、德瓦魯單抗(Durvalumab)及BMS-936559。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與CTLA-4抑制劑組合投與。在一些實施例中，CTLA-4抑制劑為伊匹單抗(Ipilimumab)或曲美單抗(Tremelimumab)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與TIM-3抑制劑組合投與。在一些實施例中，TIM-3抑制劑係選自MGB453、TSR-022或LY3321367。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與LAG-3抑制劑組合投與。在一些實施例中，LAG-3抑制劑選自由LAG525、BMS-986016、TSR-033、MK-4280及REGN3767組成之群。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與GITR促效劑組合投與。在一些實施例中，GITR促效劑選自由以下組成之群：GWN323 (Novartis)、BMS-986156 (BMS)、MK-4166或MK-1248 (Merck)、TRX518 (Leap Therapeutics)、INCAGN1876 (Incyte/Agenus)、AMG 228 (Amgen)及INBRX-110 (Inhibrx)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與抗CD3多特異性抗體分子組合投與。在一些實施例中，抗CD3多特異性抗體分子為抗CD3 x 抗CD123雙特異性抗體分子(例如XENP14045)，或抗CD3 x 抗CD20雙特異性抗體分子(例如XENP13676)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與細胞介素分子組合投與。在一些實施例中，細胞介素分子為與IL-15受體α (IL-15Ra)之可溶性形式複合的IL-15。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與STING促效劑組合投與。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與巨噬細胞群落刺激因子(M-CSF)抑制劑組合投與，視情況其中M-CSF抑制劑為MCS110。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與CSF-1R抑制劑組合投與，視情況其中CSF-1R抑制劑為BLZ945。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)及/或色胺酸2,3-雙加氧酶(TDO)組合投與。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與TGF-β抑制劑組合投與。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與腺苷A2AR拮抗劑組合投與。在一些實施例中，腺苷A2AR拮抗劑選自由以下組成之群：PBF509、CPI444、AZD4635、韋帕迪蘭(Vipadenant)、GBV-2034及AB928。在一些實施例中，腺苷A2AR拮抗劑選自由以下組成之群：5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺；(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；(R)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺，或其外消旋體；7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；及6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺。在一些實施例中，腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg、約60 mg至100 mg、約100 mg至140 mg、約140 mg至180 mg、約180 mg至220 mg、約220 mg至260 mg、約260 mg至300 mg、約300 mg至340 mg、約340 mg至380 mg、約380 mg至480 mg、約480 mg至580 mg或約580 mg至680 mg之劑量投與，例如以約40 mg、約80 mg、約160 mg、約320 mg、約480 mg或約620 mg之劑量投與，例如一天一次(QD)、一天兩次(BID)，或一天三次(TID)，例如BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg、約100 mg至500 mg、約500 mg至1000 mg、約1000 mg至1500 mg、約1500 mg至2000 mg、約2000 mg至2500 mg、約2500 mg至3000 mg、約3000 mg至3500 mg或約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如以約6 mg、約20 mg、約60 mg、約200 mg、約600 mg、約1200 mg、約2400 mg、約3000 mg或約3600 mg之劑量，例如每週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)，例如Q2W。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約480 mg至580 mg之劑量投與，例如480 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約580 mg至680 mg之劑量投與，例如620 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約480 mg至580 mg之劑量投與，例如480 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約580 mg至680 mg之劑量投與，例如620 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約480 mg至580 mg之劑量投與，例如480 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約580 mg至680 mg之劑量投與，例如620 mg、BID。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與PD-1抑制劑及腺苷A2AR拮抗劑組合投與。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg、約100 mg至500 mg、約500 mg至1000 mg、約1000 mg至1500 mg、約1500 mg至2000 mg、約2000 mg至2500 mg、約2500 mg至3000 mg、約3000 mg至3500 mg或約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如以約6 mg、約20 mg、約60 mg、約200 mg、約600 mg、約1200 mg、約2400 mg、約3000 mg或約3600 mg之劑量，例如每週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)，例如Q2W。在一些實施例中，PD-1抑制劑為抗PD-1抗體分子。在一些實施例中，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約250 mg至350 mg、約350 mg至450 mg或約450 mg至550 mg之劑量投與，例如以約300 mg或約400 mg之劑量，例如每三週一次(Q3W)或每四週一次(Q4W)，例如以約300 mg Q3W之劑量，或以約400 mg Q4W之劑量。在一些實施例中，腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg、約60 mg至100 mg、約100 mg至140 mg、約140 mg至180 mg、約180 mg至220 mg、約220 mg至260 mg、約260 mg至300 mg、約300 mg至340 mg、約340 mg至380 mg、約380 mg至480 mg、約480 mg至580 mg或約580 mg至680 mg之劑量投與，例如以約40 mg、約80 mg、約160 mg、約320 mg、約480 mg或約620 mg之劑量投與，例如一天一次(QD)、一天兩次(BID)或一天三次(TID)，例如BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如20 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg之劑量投與，例如60 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，且抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約100 mg至500 mg之劑量投與，例如200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約500 mg至1000 mg之劑量投與，例如600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約1000 mg至1500 mg之劑量投與，例如1200 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約20 mg至60 mg之劑量投與，例如40 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約60 mg至100 mg之劑量投與，例如80 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約140 mg至180 mg之劑量投與，例如160 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約480 mg至580 mg之劑量投與，例如480 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約2000 mg至2500 mg之劑量投與，例如2400 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約580 mg至680 mg之劑量投與，例如620 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約480 mg至580 mg之劑量投與，例如480 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3000 mg至3500 mg之劑量投與，例如3000 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約580 mg至680 mg之劑量投與，例如620 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約300 mg至340 mg之劑量投與，例如320 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約480 mg至580 mg之劑量投與，例如480 mg、BID。在一些實施例中，抗CD73抗體分子例如靜脈內以約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如3600 mg、Q2W，抗PD-1抗體分子例如靜脈內以約350 mg至450 mg之劑量投與，例如400 mg、Q4W，且腺苷A2AR拮抗劑例如經口以約580 mg至680 mg之劑量投與，例如620 mg、BID。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與PD-L1抑制劑及腺苷A2AR拮抗劑組合投與。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與嵌合抗原受體(CAR) T細胞療法組合投與。在一些實施例中，CAR T細胞療法為CTL019。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子與表18中所揭示之一或多種藥劑組合投與，例如以下中之一或多者：1)蛋白激酶C (PKC)抑制劑；2)熱休克蛋白90(HSP90)抑制劑；3)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)及/或雷帕黴素標靶(mTOR)之抑制劑；4)細胞色素P450抑制劑(例如CYP17抑制劑或17α-羥化酶/C17-20裂解酶抑制劑)；5)鐵螯合劑；6)芳香酶抑制劑；7) p53抑制劑，例如p53/Mdm2相互作用抑制劑；8)細胞凋亡誘導劑；9)血管生成抑制劑；10)醛固酮合成酶抑制劑；11)平順化(SMO)受體抑制劑；12)促乳素受體(PRLR)抑制劑；13) Wnt信號傳導抑制劑；14) CDK4/6抑制劑；15)纖維母細胞生長因子受體2 (FGFR2)/纖維母細胞生長因子受體4 (FGFR4)抑制劑；16)巨噬細胞群落刺激因子(M-CSF)抑制劑；17) c-KIT、組織胺釋放、Flt3 (例如FLK2/STK1)或PKC中之一或多者的抑制劑；18) VEGFR-2 (例如FLK-1/KDR)、PDGFRβ、c-KIT或Raf激酶C中之一或多者的抑制劑；19)生長抑素促效劑及/或生長激素釋放抑制劑；20)退行性淋巴瘤激酶(ALK)抑制劑；21)類胰島素生長因子1受體(IGF-1R)抑制劑；22) P-醣蛋白1抑制劑；23)血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制劑；24) BCR-ABL激酶抑制劑；25) FGFR抑制劑；26) CYP11B2抑制劑；27) HDM2抑制劑，例如HDM2-p53相互作用抑制劑；28)酪胺酸激酶抑制劑；29) c-MET抑制劑；30) JAK抑制劑；31) DAC抑制劑；32) 11β-羥化酶抑制劑；33) IAP抑制劑；34) PIM激酶抑制劑；35)刺蝟抑制劑；36) BRAF抑制劑，例如BRAF V600E或野生型BRAF；37) HER3抑制劑；38) MEK抑制劑；或39)脂質激酶抑制劑，例如如本文及表18所述。
在某些實施例中，經抗CD73抗體分子單獨或與第二治療劑或程序組合治療的癌症包括(但不限於)實體腫瘤、血液癌症(例如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，例如多發性骨髓瘤)，及轉移病灶。在一些實施例中，癌症係選自肺癌(例如非小細胞肺癌)、胰臟癌症(例如胰管腺癌)、乳癌(例如三陰性乳癌)、黑色素瘤、頭頸癌(例如鱗狀頭頸癌)、結腸直腸癌(例如微衛星穩定(MSS)結腸直腸癌)、卵巢癌，或腎癌(例如腎細胞癌)。在某些實施例中，單獨或與第二治療劑或程序組合使用的抗CD73抗體分子控制腫瘤生長，減少轉移，且/或改善存活。
在某些實施例中，抗體分子係以約100 mg至1600 mg、約100 mg至1400 mg、約100 mg至1200 mg、約100 mg至1000 mg、約100 mg至800 mg、約100 mg至600 mg、約100 mg至400 mg、約100 mg至200 mg，或約100 mg、約180 mg或約200 mg之劑量投與，例如每兩週一次。在一個實施例中，抗體分子係以至少約180 mg之劑量投與，每兩週一次。
在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約5 mg至100 mg、約100 mg至500 mg、約500 mg至1000 mg、約1000 mg至1500 mg、約1500 mg至2000 mg、約2000 mg至2500 mg、約2500 mg至3000 mg、約3000 mg至3500 mg或約3500 mg至4000 mg之劑量投與，例如每週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約6 mg、約20 mg、約60 mg、約200 mg、約600 mg、約1200 mg、約2400 mg、約3000 mg或約3600 mg之劑量投與，例如QW、Q2W或Q4W。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約60 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約200 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約600 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約1200 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約2400 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約3000 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約3600 mg Q2W之劑量投與。
又另外，本發明提供增強個體之針對抗原之免疫反應的方法，包含向該個體投與：(i)抗原；及(ii)本文揭示之抗CD73抗體分子，以便增強個體之針對抗原的免疫反應。抗原可為例如腫瘤抗原、病毒抗原、細菌抗原或來自病原體之抗原。
抗CD73抗體分子可以全身性(例如經口、非經腸、皮下、靜脈內、直腸、肌肉內、腹膜內、鼻內、經皮，或藉由吸入或腔內安設)或局部投與個體。在一個實施例中，抗CD73抗體分子靜脈內投與。
抗CD73抗體分子可以未結合形式單獨使用，或可以結合至物質，例如細胞毒性劑或部分(例如治療藥物；發射輻射的化合物；植物、真菌或細菌來源的分子；或生物蛋白質(例如蛋白質毒素)或顆粒(例如重組病毒顆粒，例如經由病毒外殼蛋白)。舉例而言，抗CD73抗體可與放射性同位素(諸如α-發射體、β-發射體或γ-發射體，或β-發射體與γ-發射體)偶聯。
抗CD73抗體分子之劑量及治療方案可由熟習此項技術者確定。
在另一態樣中，提供一種偵測生物樣品或個體中之CD73的方法。在一個實施例中，該方法包含(i)使樣品或個體(及視情況，參考樣品或個體)與如技術方案1至57中任一項之抗體分子在允許該抗體分子與CD73發生相互作用的條件下接觸；及(ii)偵測該抗體分子與樣品或個體(及視情況，參考樣品或個體)之間的複合物形成。
本文所述之抗體分子較佳供本文所述之方法使用，然可改用其他抗CD73抗體，或與本發明之抗CD73抗體分子組合。
相關申請案 本申請案主張2017年6月22日申請之美國第62/523,481號及2018年2月28日申請之美國第62/636,510號的優先權，其中之每一者的內容以全文引用之方式併入本文中。
序列表 本申請案含有序列表，該序列表已以ASCII格式、以電子方式提交且以全文引用的方式併入本文中。2018年6月15日建立的該ASCII複本命名為N2067-7123WO_SL.txt且具有497,959個位元組大小。
如本文所用，術語「CD73」係指「分化叢集73」，亦稱為5'-核苷酸酶(5'-NT)或胞外-5'-核苷酸酶。術語「CD73」包括全長野生型CD73之突變體、片段、變異體、同功異型物及同源物。在一個實施例中，蛋白質CD73係由NT5E基因編碼。例示性CD73序列可在Uniprot資料庫中以寄存編號Q6NZX3及P21589獲得。例示性不成熟CD73胺基酸序列係作為SEQ ID NO: 105-107提供。「CD73單體」係指包含CD73胞外域的多肽。在一個實施例中，CD73單體為全長CD73。「CD73二聚體」係指由兩種CD73單體(例如兩種相同的CD73單體)組成的兩種多肽(例如兩種非共價結合的多肽)，該兩種單體彼此相互作用而形成穩定的二聚體，例如CD73單體之C末端域之間經由蛋白質-蛋白質相互作用而形成的二聚體。在一個實施例中，CD73二聚體為天然存在的CD73二聚體。
不希望受理論所束縛，人類CD73具有兩個結構域。保守的N末端域(對應於SEQ ID NO: 105之約殘基29-310)及保守的C-末端域(對應於SEQ ID NO: 105之約殘基343-513)藉由單個α螺旋(對應於SEQ ID NO: 105之約殘基318-336)連接。活性位點主要在封閉構形中偵測到且在C末端域與N末端域之間形成。對於酶催化而言，N末端域相對於C-末端域約100°的域移動可以允許受質結合及釋放，此發生於開放(催化非活性)構形中。人類CD73經由C末端域之間的蛋白質-蛋白質相互作用形成二聚體。內埋表面積以及二聚體界面處的分子相互作用在酶之活性與非活性構形之間顯著不同。參見例如Knapp K等人, Structure 20:2161-73 (2012)，該文獻以全文引用之方式併入本文中。
因此，本發明至少部分地提供以高親和力及特異性結合至CD73的抗體分子。在一個實施例中，本文揭示結合至CD73的人類抗體。在一個實施例中，本文揭示能夠抑制或減少CD73 (例如人類CD73，例如可溶性人類CD73或膜結合之人類CD73)之酶活性的抗體分子。在一個實施例中，本文揭示能夠抑制或減少CD73介導單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷的抗體分子。本發明之其他態樣包括編碼抗體分子之核酸分子、用於產生抗體分子之表現載體、宿主細胞及方法。亦提供包含抗體分子的免疫結合物、多特異性或雙特異性分子及醫藥組合物。本文揭示之抗CD73抗體分子可以用於治療、預防及/或診斷癌變或惡性病症，例如實體及液體腫瘤，例如肺癌(例如非小細胞肺癌)、胰臟癌(例如胰管腺癌)、乳癌(例如三陰性乳癌)、黑色素瘤、頭頸癌(例如鱗狀頭頸癌)、結腸直腸癌(例如微衛星穩定(MSS)結腸直腸癌)、卵巢癌或腎癌(例如腎細胞癌)。本文揭示之抗CD73抗體分子可以用於治療、預防及/或診斷感染性疾病。因此，本文揭示用於偵測CD73之方法，以及使用抗CD73抗體分子治療各種病症(包括癌症及感染性疾病)之方法。
其他術語在下文及通篇申請案中定義。
如本文所用，冠詞「一(a及an)」係指該冠詞之一個或超過一個(亦即，至少一個)文法對象。如本文所用，「複數個」意謂兩個或超過兩個。
術語「或」在本文中用於意謂術語「及/或」且可與術語「及/或」互換使用，除非上下文另有明確說明。
「約」及「大約」一般應意謂鑒於量測值之性質或精確度，所量測之量之誤差程度可接受。例示性誤差程度在指定值或值範圍之百分之20(%)內，典型地在10%內，且更典型地在5%內。
本文揭示之組合物及方法涵蓋具有已指定之序列或與其基本上一致或相似之序列(例如與所指定之序列具有至少約85%、90%或95%序列一致性的序列)的多肽及核酸。在胺基酸序列之上下文中，術語「基本上一致」在本文中用於指第一胺基酸含有足夠或最少數目個胺基酸殘基i)與第二胺基酸序列中之所比對胺基酸殘基一致或ii)為第二胺基酸序列中之所比對胺基酸殘基之保守取代，使得第一胺基酸序列與第二胺基酸序列可具有共同結構域及/或共同功能活性。舉例而言，胺基酸序列含有的共同結構域與參考序列(例如本文所提供的序列)至少約85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致。
在核苷酸序列之上下文中，術語「基本上一致」在本文中用於指第一核酸序列含有足夠或最少數目個核苷酸與第二核酸序列中之所比對核苷酸一致，使得第一核苷酸序列及第二核苷酸序列編碼具有共同功能活性之多肽，或編碼共同的結構多肽域或共同的功能多肽活性。舉例而言，核苷酸序列與參考序列(例如本文所提供的序列)至少約85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致。
術語「功能變異體」係指具有與天然存在之序列基本上一致之胺基酸序列的多肽，或由基本上一致之核苷酸序列編碼，且能夠具有天然存在之序列的一或多種活性。
序列之間的同源性或序列一致性(該等術語在本文中可互換地使用)如下進行計算。
為了確定兩個胺基酸序列或兩個核酸序列之一致性百分比，將序列對準以達成最佳比較目的(例如可以將間隙引入第一及第二胺基酸或核酸序列中之一或兩者中用於最佳比對且為了比較目的可忽略非同源序列)。在一個較佳實施例中，為了比較目的而對準之參考序列的長度為參考序列長度之至少30%，例如至少40%、50%、60%，例如至少70%、80%、90%、100%。接著比較相應胺基酸位置或核苷酸位置的胺基酸殘基或核苷酸。若第一序列中之位置被與第二序列中之相應位置相同的胺基酸殘基或核苷酸佔據，則分子在該位置處一致。
考慮為了兩個序列之最佳對準而需要引入的間隙數目及各間隙長度，兩個序列之間的一致性百分比為該等序列所共有之一致位置數目的函數。
序列比較及兩個序列之間一致性百分比的確定可以使用數學算法完成。在一些實施例中，兩個胺基酸序列之間的一致性百分比係使用Needleman及Wunsch ((1970)J. Mol. Biol. 48:444-453)算法確定，該算法已併入GCG套裝軟體之GAP程式中(可獲得於http://www.gcg.com)，其使用Blossum 62矩陣或PAM250矩陣，及間隙權數16、14、12、10、8、6或4及長度權數1、2、3、4、5或6。在某些實施例中，兩個核苷酸序列之間的一致性百分比係使用GCG套裝軟體之GAP程式(可獲得於http://www.gcg.com)測定，其使用NWSgapdna.CMP矩陣及間隙權數40、50、60、70或80及長度權數1、2、3、4、5或6。一種適合的參數集(及應使用者，除非另外說明)為Blossum 62計分矩陣，其使用間隙罰分12、間隙擴展罰分4及讀框轉移間隙罰分5。
亦可使用E. Meyers及W. Miller ((1989) CABIOS, 4:11-17)之算法(其已併入ALIGN程式(2.0版)中)，使用PAM120權數殘基表、間隙長度罰分12分及間隙罰分4來測定兩個胺基酸或核苷酸序列之間的一致性百分比。
本文所述之核酸及蛋白質序列可作為「查詢序列」用於對照公用資料庫執行搜尋，例如以鑑別其他家族成員或相關序列。此等搜尋可使用Altschul等人(1990)J. Mol. Biol. 215:403-10之NBLAST及XBLAST程式(2.0版)進行。BLAST核苷酸搜尋可用NBLAST程序(分數=100，字長=12)進行，以獲得與如本文所述之核酸同源的核苷酸序列。BLAST蛋白質搜尋可用XBLAST程序(分數=50，字長=3)進行，以獲得與本文所述之蛋白質分子同源的胺基酸序列。為使間隙式比對達成比較目的，可如Altschul等人, (1997)Nucleic Acids Res. 25:3389-3402中所述使用間隙式BLAST。使用BLAST及間隙式BLAST程式時，可使用對應程式(例如XBLAST及NBLAST)之預設參數。參見http://www.ncbi.nlm.nih.gov。
如本文所用，術語「在低嚴格度、中嚴格度、高嚴格度或極高嚴格度條件下雜交」描述雜交及洗滌條件。用於執行雜交反應之導則可見於Current Protocols in Molecular Biology , John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6中，其以引用的方式併入。該參考文獻中描述水性及非水性方法且可以使用任一者。本文所提及的特定雜交條件如下：1)低嚴格度雜交條件為在約45℃使用6X氯化鈉/檸檬酸鈉(SSC)，隨後至少在50℃ (對於低嚴格度條件而言，洗滌溫度可升高至55℃)用0.2X SSC、0.1% SDS洗滌兩次；2)中嚴格度雜交條件為在約45℃使用6X SSC，隨後在60℃用0.2X SSC、0.1% SDS洗滌一或多次；3)高嚴格度雜交條件為在約45℃使用6X SSC，隨後在65℃用0.2X SSC、0.1% SDS洗滌一或多次；及較佳地，4)極高嚴格度雜交條件為在65℃使用0.5 M磷酸鈉、7% SDS，隨後在65℃、使用0.2X SSC、1% SDS洗滌一或多次。極高嚴格度條件(4)為適合條件及應使用的條件(除非另外說明)。
應瞭解，本發明之分子可具有對其功能無實質性影響的其他保守或非必需胺基酸取代。
術語「胺基酸」意欲涵蓋所有分子，無論天然或合成的，其包括胺基官能基與酸官能基且能夠包括於天然存在之胺基酸之聚合物中。例示性胺基酸包括天然存在的胺基酸；其類似物、衍生物及同類物；具有變異型側鏈之胺基酸類似物；及前述中之任一者之所有立體異構體。如本文所用，術語「胺基酸」包括D-光學異構體或L-光學異構體與肽模擬物。
「保守性胺基酸取代」為其中胺基酸殘基經具有類似側鏈之胺基酸殘基置換的取代。具有類似側鏈之胺基酸殘基家族在此項技術中已定義。此等家族包括具有鹼性側鏈(例如離胺酸、精胺酸、組胺酸)、酸性側鏈(例如天冬胺酸、麩胺酸)、不帶電極性側鏈(例如甘胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸、半胱胺酸)、非極性側鏈(例如丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、甲硫胺酸、色胺酸)、β分支鏈側鏈(例如蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸)及芳族側鏈(例如酪胺酸、苯丙胺酸、色胺酸、組胺酸)之胺基酸。
術語「多肽」、「肽」及「蛋白質」(若為單鏈)在本文中可互換使用以指任何長度之胺基酸聚合物。聚合物可為線性或分支的，其可以包含經修飾之胺基酸，且其可以間雜有非胺基酸。術語亦涵蓋已經修飾之胺基酸聚合物；舉例而言，二硫鍵形成、糖基化、脂質化、乙醯化、磷酸化或任何其他操縱，諸如與標記組分結合。多肽可以自天然來源中分離，可以藉由重組技術、自真核或原核宿主產生，或可以為合成程序之產物。
術語「核酸」、「核酸序列」、「核苷酸序列」或「聚核苷酸序列」及「聚核苷酸」可互換使用。其指任何長度之核苷酸(去氧核糖核苷酸或核糖核苷酸)之聚合物形式，或其類似物。聚核苷酸可為單股或雙股，且若為單股，則可為編碼股或非編碼(反義)股。聚核苷酸可以包含經修飾之核苷酸，諸如甲基化核苷酸及核苷酸類似物。核苷酸序列可間雜有非核苷酸組分。聚合後可進一步修飾聚核苷酸，諸如與標記組分結合。核酸可為重組聚核苷酸，或基因組、cDNA、半合成或合成來源之聚核苷酸，其不存在於自然界中或以非天然排列連接至另一聚核苷酸。
如本文所用，術語「分離」係指自原始或原生環境(例如，若其天然存在，則為天然環境)移除的材料。舉例而言，不分離出存在於活動物中之天然存在的聚核苷酸或多肽，而是分離出藉由人類干預而與天然系統中之一些或所有共存物質分離的相同聚核苷酸或多肽。此類聚核苷酸可為載體之一部分且/或此類聚核苷酸或多肽可為組合物之一部分，且仍經分離以使得此類載體或組合物不為其天然存在於其中之環境的一部分。
術語「嵌合抗原受體」或者「CAR」係指一組多肽，在最簡單實施例中典型地為兩種多肽，當在免疫效應細胞中時，其向細胞提供針對靶細胞(典型地為癌細胞)之特異性及胞內信號產生。在一些實施例中，CAR包含至少一個胞外抗原結合域、跨膜域及細胞質信號傳導域(在本文中亦稱為「胞內信號傳導域」)，其包含來源於如下文所定義之刺激分子及/或共刺激分子的功能信號傳導域。在一些態樣中，該組多肽彼此鄰接。在一些實施例中，該組多肽包括二聚化開關，其在二聚化分子存在時可以使多肽彼此偶聯，例如可以使抗原結合域與胞內信號傳導域偶聯。在一個態樣中，刺激分子為與T細胞受體複合物結合之ξ鏈。在一個態樣中，細胞質信號傳導域進一步包含一或多個來源於至少一個如下所定義之共刺激分子的功能信號傳導域。在一個態樣中，共刺激分子選自本文所述之共刺激分子，例如4-1BB (亦即CD137)、CD27及/或CD28。在一個態樣中，CAR包含嵌合融合蛋白，其包含胞外抗原結合域、跨膜域及胞內信號傳導域，該胞內信號傳導域包含來源於刺激分子之功能信號傳導域。在一態樣中，CAR包含嵌合融合蛋白，該蛋白質包含胞外抗原結合域、跨膜域及胞內信號傳導域，該胞內信號傳導域包含來源於共刺激分子之功能信號傳導域及來源於刺激分子之功能信號傳導域。在一個態樣中，CAR包含嵌合融合蛋白，該融合蛋白包含胞外抗原結合域、跨膜域及胞內信號傳導域，該胞內信號傳導域包含來源於一或多種共刺激分子的兩個功能信號傳導域及來源於刺激分子的功能信號傳導域。在一個態樣中，CAR包含嵌合融合蛋白，該融合蛋白包含胞外抗原結合域、跨膜域及胞內信號傳導域，該胞內信號傳導域包含來源於一或多種共刺激分子的至少兩個功能信號傳導域及來源於刺激分子的功能信號傳導域。在一個態樣中，CAR包含視情況存在於CAR融合蛋白之胺基末端(N末端)的前導序列。在一個態樣中，CAR進一步包含存在於胞外抗原結合域之N末端的前導序列，其中該前導序列視情況在細胞加工期間自抗原結合域(例如scFv)裂解且使CAR局域化至細胞膜。
術語「信號傳導域」係指蛋白質之功能部分，其作用為經由限定的信號傳導路徑在細胞內傳遞調控細胞活性的資訊，該信號傳導路徑為產生第二信使或藉由回應於此類信使而充當效應子。
如本文所用之術語「胞內信號傳導域」係指分子之胞內部分。胞內信號傳導域產生的信號促進含CAR細胞(例如CART細胞)的免疫效應功能。免疫效應功能之實例(例如在CART細胞中)包括溶胞活性及輔助活性，包括細胞介素分泌。
在一個實施例中，胞內信號傳導域可以包含初級胞內信號傳導域。例示性初級胞內信號傳導域包括來源於負責初始刺激或抗原依賴性模擬之分子的彼等域。在一個實施例中，胞內信號傳導域可以包含共刺激胞內域。例示性共刺激胞內信號傳導域包括來源於負責共刺激信號或抗原非依賴刺激之分子的彼等域。舉例而言，在CART之情況下，初級胞內信號傳導域可以包含T細胞受體之細胞質序列，且共刺激胞內信號傳導域可以包含來自共受體或共刺激分子之細胞質序列。
初級胞內信號傳導域可以包含信號傳導基元，已知其為基於免疫受體酪胺酸之活化基元或ITAM。含有ITAM之初級細胞質信號傳導序列之實例包括(但不限於)來源於CD3 ξ、共同FcR γ (FCER1G)、Fc γ RIIa、FcR β (Fc ε R1b)、CD3 γ、CD3 δ、CD3 ε、CD79a、CD79b、DAP10及DAP12的彼等序列。
術語「ξ」或替代地「ξ鏈」、「CD3-ξ」或「TCR-ξ」定義為以GenBank寄存編號BAG36664.1提供的蛋白質，或來自非人類物種(例如小鼠、嚙齒動物、猴、猿及其類似物)的等效殘基，且「ξ刺激域」或替代地「CD3-ξ刺激域」或「TCR-ξ刺激域」定義為來自ξ鏈之細胞質域的胺基酸殘基，或其功能衍生物，其足以在功能上傳遞T細胞活化所必需的初始信號。在一個態樣中，ξ之細胞質域包含Genbank寄存編號BAG36664.1之殘基52至164或作為其功能直系同源物之來自非人類物種(例如小鼠、嚙齒動物、猴、猿及其類似物)的等效殘基。
術語「共刺激分子」係指T細胞上之同源結合搭配物，其結合至共刺激配位體，藉此由T細胞介導共刺激反應，諸如(但不限於)增殖。共刺激分子為除抗原受體或其配位體之外之促成有效免疫反應的細胞表面分子。共刺激分子包括(但不限於) MHC I級分子、BTLA及Toll配位體受體以及OX40、CD27、CD28、CDS、ICAM-1、LFA-1 (CD11a/CD18)、ICOS (CD278)及4-1BB (CD137)。此類共刺激分子之其他實例包括CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、HVEM (LIGHTR)、SLAMF7、NKp80 (KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD160、CD19、CD4、CD8α、CD8β、IL2R β、IL2R γ、IL7R α、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA-1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、NKG2D、NKG2C、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1 (CD226)、SLAMF4 (CD244、2B4)、CD84、CD96 (Tactile)、CEACAM1、CRTAM、Ly9 (CD229)、CD160 (BY55)、PSGL1、CD100 (SEMA4D)、CD69、SLAMF6 (NTB-A、Ly108)、SLAM (SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME (SLAMF8)、SELPLG (CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp、CD19a，及結合至CD83之配位體。
共刺激胞內信號傳導域可為共刺激分子之胞內部分。共刺激分子可用以下蛋白質家族表示：TNF受體蛋白、免疫球蛋白樣蛋白質、細胞介素受體、整合素、信號傳導淋巴球性活化分子(SLAM蛋白)及活化NK細胞受體。此類分子之實例包括CD27、CD28、4-1BB (CD137)、OX40、GITR、CD30、CD40、ICOS、BAFFR、HVEM、ICAM-1、淋巴球功能相關抗原-1 (LFA-1)、CD2、CDS、CD7、CD287、LIGHT、NKG2C、NKG2D、SLAMF7、NKp80、NKp30、NKp44、NKp46、CD160、B7-H3，及結合至CD83之配位體，及其類似物。
胞內信號傳導域可以包含衍生其之分子的整個胞內部分或整個原生胞內信號傳導域，或其功能片段或衍生物。
術語「4-1BB」係指胺基酸序列如GenBank寄存編號AAA62478.2提供之TNFR超家族成員或來自非人類物種(例如小鼠、嚙齒動物、猴、猿及其類似物)之等效殘基；且「4-1BB共刺激域」定義為GenBank寄存編號AAA62478.2之胺基酸殘基214-255，或來自非人類物種(例如小鼠、嚙齒動物、猴、猿及其類似物)之等效殘基。
如本文中使用之術語「免疫效應細胞」係指涉及免疫反應(例如促進免疫效應反應)之細胞。免疫效應細胞之實例包括T細胞，例如α/β T細胞及γ/δ T細胞、B細胞、自然殺手(NK)細胞、自然殺手T (NKT)細胞、肥大細胞及骨髓源吞噬細胞。
如本文中使用的術語「免疫效應功能或免疫效應反應」係指例如免疫效應細胞之增強或促進免疫攻擊靶細胞的功能或反應。舉例而言，免疫效應功能或反應係指T或NK細胞的一種特性，其促進靶細胞被殺死或促進靶細胞生長或增殖受到抑制。在T細胞之情況下，初始刺激及共刺激為免疫效應功能或反應之實例。
術語「癌症相關抗原」或「腫瘤抗原」可互換地指完整地或以片段形式(例如MHC/肽)在癌細胞表面上表現之分子(典型地為蛋白質、碳水化合物或脂質)，且其適用於使藥理學藥劑優先靶向癌細胞。在一些實施例中，腫瘤抗原為正常細胞與癌細胞所表現之標記物，例如譜系標記物，例如B細胞上之CD19。在一些實施例中，腫瘤抗原為相較於正常細胞而在癌細胞中過度表現之細胞表面分子，例如相較於正常細胞1倍過度表現、2倍過度表現、3倍或超過3倍過度表現。在一些實施例中，腫瘤抗原為癌細胞中不適當合成之細胞表面分子，例如相較於正常細胞上表現之分子含有缺失、添加或突變之分子。在一些實施例中，腫瘤抗原將完整地或以片段形式(例如MHC/肽)專門表現於癌細胞之細胞表面上，且在正常細胞表面上不合成或不表現。在一些實施例中，本發明之CAR包括包含結合至MHC呈現肽之抗原結合域(例如抗體或抗體片段)的CAR。通常，來源於內源性蛋白質之肽填充主要組織相容複合物(MHC) I類分子之凹穴，且被CD8+ T淋巴細胞上之T細胞受體(TCR)識別。MHC I級複合物由所有成核細胞組成性表現。在癌症中，病毒特異性及/或腫瘤特異性肽/MHC複合物對於免疫療法而言代表一類獨特的細胞表面標靶。在人類白血球抗原(HLA)-A1或HLA-A2的情形中靶向病毒或腫瘤抗原衍生肽的TCR樣抗體已有描述(參見例如Sastry等人, J Virol. 2011 85(5):1935-1942；Sergeeva等人, Blood, 2011 117(16):4262-4272；Verma等人, J Immunol 2010 184(4):2156-2165；Willemsen等人, Gene Ther 2001 8(21) :1601-1608；Dao等人, Sci Transl Med 2013 5(176) :176ra33；Tassev等人, Cancer Gene Ther 2012 19(2):84-100)。舉例而言，TCR樣抗體可以藉由篩選文庫(諸如人類scFv噬菌體呈現文庫)來鑑別。
下文更詳細地描述本文中之組合物及方法之多個態樣。本說明書通篇闡述了其他定義。
抗體分子 在一個實施例中，抗體分子結合至哺乳動物(例如人類)CD73。舉例而言，抗體分子特異性結合至CD73上的抗原決定基，例如線性或構形抗原決定基，例如如本文所述之抗原決定基。
如本文所用，術語「抗體分子」係指一種蛋白質，例如包含至少一個免疫球蛋白可變域序列的免疫球蛋白鏈或其片段。術語「抗體分子」包括例如單株抗體(包括具有免疫球蛋白Fc區之全長抗體)。在一個實施例中，抗體分子包含全長抗體或全長免疫球蛋白鏈。在一個實施例中，抗體分子包含全長抗體或全長免疫球蛋白鏈之抗原結合或功能片段。
如本文所用，抗體分子「結合至」抗原，如此類結合為熟習此項技術者所瞭解。在一個實施例中，抗體結合至抗原的解離常數(KD )為約1×10-3 M或小於1×10-3 M、1×10-4 M或小於1×10-4 M，或1×10-5 M或小於1×10-5 M。
在一個實施例中，抗體分子為單特異性抗體分子且結合單個抗原決定基，例如具有複數個免疫球蛋白可變域序列之單特異性抗體分子，其中之每一者結合同一抗原決定基。
在一個實施例中，抗體分子為多特異性抗體分子，例如其包含複數個免疫球蛋白可變域序列，其中該複數個中之第一免疫球蛋白可變域序列對第一抗原決定基具有結合特異性且該複數個中之第二免疫球蛋白可變域序列對第二抗原決定基具有結合特異性。在一個實施例中，第一及第二抗原決定基位於同一抗原上，例如同一蛋白質(或多聚體蛋白質之亞單元)。在一個實施例中，第一抗原決定基與第二抗原決定基重疊或基本上重疊。在一個實施例中，第一抗原決定基與第二抗原決定基不重疊或基本上不重疊。在一個實施例中，第一及第二抗原決定基位於不同抗原上，例如不同蛋白質(或多聚體蛋白質之不同亞單元)。在一個實施例中，多特異性抗體分子包含第三、第四或第五免疫球蛋白可變域。在一個實施例中，多特異性抗體分子為雙特異性抗體分子、三特異性抗體分子或四特異性抗體分子。
在一個實施例中，多特異性抗體分子為雙特異性抗體分子。雙特異性抗體對不超過兩個抗原具有特異性。雙特異性抗體分子之特徵為第一免疫球蛋白可變域序列具有針對第一抗原決定基之結合特異性及第二免疫球蛋白可變域序列具有針對第二抗原決定基之結合特異性。在一個實施例中，第一及第二抗原決定基位於同一抗原上，例如同一蛋白質(或多聚體蛋白質之亞單元)。在一個實施例中，第一抗原決定基與第二抗原決定基重疊或基本上重疊。在一個實施例中，第一抗原決定基與第二抗原決定基不重疊或基本上不重疊。在一個實施例中，第一及第二抗原決定基位於不同抗原上，例如不同蛋白質(或多聚體蛋白質之不同亞單元)。在一個實施例中，雙特異性抗體分子包含具有針對第一抗原決定基之結合特異性的重鏈可變域序列及輕鏈可變域序列及具有針對第二抗原決定基之結合特異性的重鏈可變域序列及輕鏈可變域序列。在一個實施例中，雙特異性抗體分子包含具有針對第一抗原決定基之結合特異性的半抗體及具有針對第二抗原決定基之結合特異性的半抗體。在一個實施例中，雙特異性抗體分子包含具有針對第一抗原決定基之結合特異性的半抗體或其片段及具有針對第二抗原決定基之結合特異性的半抗體或其片段。在一個實施例中，雙特異性抗體分子包含具有針對第一抗原決定基之結合特異性的scFv或其片段及具有針對第二抗原決定基之結合特異性的scFv或其片段。
在一個實施例中，抗體分子包含雙功能抗體及單鏈分子，以及抗體之抗原結合片段(例如Fab、F(ab')2 及Fv)。舉例而言，抗體分子可以包括重(H)鏈可變域序列(本文中縮寫為VH)及輕(L)鏈可變域序列(本文中縮寫為VL)。在一個實施例中，抗體分子包含重鏈及輕鏈或由重鏈及輕鏈組成(在本文中稱為半抗體)。在另一實例中，抗體分子包括兩個重(H)鏈可變域序列及兩個輕(L)鏈可變域序列，藉此形成兩個抗原結合位點，諸如Fab、Fab'、F(ab')2 、Fc、Fd、Fd'、Fv、單鏈抗體(例如scFv)、單一可變域抗體、雙功能抗體(Dab)(二價及雙特異性)，及嵌合(例如人類化)抗體，其可以藉由修飾整個抗體來產生或可為使用重組DNA技術重新合成的彼等抗體。此等功能抗體片段保持與其對應抗原或受體選擇性結合之能力。抗體及抗體片段可以來自任何抗體類別，包括(但不限於) IgG、IgA、IgM、IgD及IgE，及來自抗體之任何子類(例如IgG1、IgG2、IgG3及IgG4)。抗體分子製劑可為單株或多株的。抗體分子亦可為人類、人類化、CDR移植或活體外產生之抗體。抗體可具有選自例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4之重鏈恆定區。抗體亦可具有選自例如κ或λ之輕鏈。在本文中，術語「免疫球蛋白」(Ig)可與術語「抗體」互換使用。
抗體分子之抗原結合片段之實例包括：(i) Fab片段，由VL、VH、CL及CH1域組成的單價片段；(ii) F(ab')2片段，包含兩個在鉸鏈區藉由二硫橋鍵連接之Fab片段的二價片段；(iii)由VH及CH1域組成的Fd片段；(iv)由抗體之單臂之VL及VH域組成的Fv片段；(v)由VH域組成的雙功能抗體(dAb)片段；(vi)駱駝科或駱駝化可變域；(vii)單鏈Fv (scFv)，參見例如Bird等人(1988)Science 242:423-426；及Huston等人(1988)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)；(viii)單域抗體。此等抗體片段可使用任何適合方法(包括熟悉此項技術者已知的習知技術)獲得，且可以與完整抗體相同之方式篩選出實用的片段。
術語「抗體」包括完整分子以及其功能片段。抗體恆定區可以改變(例如突變)，以修改抗體特性(例如增加或以下中之一或多者：Fc受體結合、抗體糖基化、半胱胺酸殘基數目、效應細胞功能，或補體功能)。
本文揭示之抗體亦可為單域抗體。單域抗體可包括互補決定區為單域多肽之一部分的抗體。實例包括(但不限於)重鏈抗體、天然缺乏輕鏈之抗體、來源於習知4鏈抗體之單域抗體、經工程改造之抗體及除來源於抗體之支架之外的單域支架。單域抗體可為此項技術中之任一者，或任何未來的單域抗體。單域抗體可來源於任何物種，包括(但不限於)小鼠、人類、駱駝、大羊駝、魚、鯊魚、山羊、兔及牛。根據本發明之另一態樣，單域抗體為天然存在的單域抗體，稱為缺乏輕鏈之重鏈抗體。此類單域抗體揭示於例如WO 9404678中。為清楚之故，來源於天然缺乏輕鏈之重鏈抗體的此可變域在本文中稱為VHH或奈米抗體，以與四鏈免疫球蛋白之習知VH區分。此類VHH分子可來源於駱駝科物種(例如駱駝、大羊駝、單峰駝、羊駝及栗色駱馬)中產生之抗體。除駱駝科之外的其他物種可以產生天然缺乏輕鏈之重鏈抗體；此類VHH屬於本發明之範疇內。
VH及VL區可以再分成高變區，稱為「互補決定區」(CDR)，其間散置有更保守的區域，稱為「構架區」(FR或FW)。
構架區及CDR範圍已藉由多種方法準確定義(參見Kabat, E.A.等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest第5版, 美國健康及人類服務部(U.S. Department of Health and Human Services), NIH公開案第91-3242號；Chothia, C.等人(1987)J. Mol. Biol . 196:901-917；及Oxford Molecular的AbM抗體模型化軟體所使用的AbM定義。大體參見例如Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. 於: Antibody Engineering Lab Manual (編: Duebel, S.及Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg)。
如本文所用，術語「互補決定區」及「CDR」係指抗體可變區內之賦予抗原特異性及結合親和力的胺基酸序列。在一些實施例中，各重鏈可變區中存在三個CDR (例如HCDR1、HCDR2及HCDR3)且各輕鏈可變區中存在三個CDR (LCDR1、LCDR2及LCDR3)。
所指定CDR之確切胺基酸序列邊界可容易使用熟知方案中的任一者確定，包括Kabat等人(1991),「Sequences of Proteins of Immunological Interest」第5版, 公共衛生服務署(Public Health Service), 國家衛生研究院(National Institutes of Health), Bethesda, MD (「Kabat」編號方案)；Al-Lazikani等人, (1997)JMB 273, 927-948 (「Chothia」編號方案)所述之方案。如本文所用，根據「Chothia」編號方案定義之CDR有時亦稱為「高變環」。
舉例而言，根據Kabat，重鏈可變域(VH)中之CDR胺基酸殘基編號為31至35 (HCDR1)、50至65 (HCDR2)及95至102 (HCDR3)；且輕鏈可變域(VL)中之CDR胺基酸殘基編號為24至34 (LCDR1)、50至56 (LCDR2)及89至97 (LCDR3)。根據Chothia，VH中之CDR胺基酸編號為26至32 (HCDR1)、52至56 (HCDR2)及95至102 (HCDR3)；且VL中之胺基酸殘基編號為26至32 (LCDR1)、50至52 (LCDR2)及91至96 (LCDR3)。根據Kabat與Chothia之CDR定義組合，CDR係由人類VH中之胺基酸殘基26至35 (HCDR1)、50至65 (HCDR2)及95至102 (HCDR3)及人類VL中之胺基酸殘基24至34 (LCDR1)、50至56 (LCDR2)及89至97 (LCDR3)組成。
根據所有定義，各VH及VL典型地包括三個CDR及四個FR，其自胺基端至羧基端按以下順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
一般而言，除非特別指出，否則抗CD73抗體分子可以包括一或多個Kabat CDR、Chothia CDR、Kabat與Chothia CDR組合、IMGT CDR及/或替代定義(例如表1中所述)的任何組合。
如本文所用，「免疫球蛋白可變域序列」係指可以形成免疫球蛋白可變域結構的胺基酸序列。舉例而言，序列可以包括天然存在之可變域之胺基酸序列的全部或一部分。舉例而言，序列可以或可以不包括一個、兩個或超過兩個N末端或C末端胺基酸，或可以包括與蛋白質結構形成相容的其他變化。
術語「抗原結合位點」係指抗體分子的一部分，其包含決定子，其形成結合至CD73多肽或其抗原決定基的界面。就蛋白質(或蛋白質模擬物)而言，抗原結合位點典型地包括一或多個環(至少例如四個胺基酸或胺基酸模擬物之環)，該等環形成結合至CD73多肽的界面。典型地，抗體分子之抗原結合位點包括至少一個或兩個CDR及/或高變環，或更典型地至少三個、四個、五個或六個CDR及/或高變環。
如本文所用，術語「Eu編號」係指關於抗體恆定區的Eu編號規約，如Edelman, G.M.等人, Proc. Natl. Acad. USA, 63, 78-85 (1969)及Kabat等人, 「Sequences of Proteins of Immunological Interest」，美國健康及人類服務部，第5版，1991中所述。
術語「競爭」或「交叉競爭」在本文中可互換使用且係指抗體分子干擾抗CD73抗體分子(例如本文所提供之抗CD73抗體分子)結合至標靶(例如人類CD73)的能力。干擾結合可為直接或間接的(例如經由抗體分子或標靶之異位調節)。抗體分子能夠干擾另一抗體分子結合至標靶的程度且因此是否可以稱其競爭可以使用競爭結合分析(例如流式細胞術分析、ELISA或BIACORE分析)測定。在一些實施例中，競爭結合分析為定量競爭分析。在一些實施例中，當第一抗CD73抗體分子對標靶的結合在競爭結合分析(例如本文所述之競爭分析)中減少10%或大於10% (例如20%或大於20%、30%或大於30%、40%或大於40%、50%或大於50%、55%或大於55%、60%或大於60%、65%或大於65%、70%或大於70%、75%或大於75%、80%或大於80%、85%或大於85%、90%或大於90%、95%或大於95%、98%或大於98%、99%或大於99%)時，稱第一抗CD73抗體分子與第二抗CD73抗體分子競爭結合至標靶。
如本文所用，術語「抗原決定基」係指與抗體分子發生特異性相互作用之抗原(例如人類CD73)之部分。此類部分(在本文中亦稱為抗原決定基決定子)典型地包含諸如胺基酸側鏈或糖側鏈之元件或為其一部分。抗原決定基決定子可以藉由此項技術中已知或本文揭示之方法(例如結晶學或藉由氫氘交換)定義。抗體分子上之與抗原決定基決定子發生特異性相互作用的至少一個或一些部分典型地位於CDR中。典型地，抗原決定基具有特定的三維結構特徵。典型地，抗原決定基具有特定的電荷特徵。一些抗原決定基為線性抗原決定基，而其他為構形抗原決定基。
在一個實施例中，抗原決定基決定子為位於抗原上之部分，例如胺基酸側鏈或糖側鏈，或其一部分，當抗原與抗體分子共結晶時，其位於抗體分子上之部分之預定距離(例如5埃(Angstroms))內，在本文中稱為「結晶學抗原決定基決定子」。抗原決定基之結晶學抗原決定基決定子統稱為「結晶學抗原決定基」。
若與第一抗體相互作用的抗原上之抗原決定基決定子與第二或參考抗體相同，例如當抗體與第二或參考抗體以相同方式量測相互作用時，則第一抗體分子結合的抗原決定基與第二抗體分子(例如參考抗體分子，例如本文揭示之抗體分子)相同。重疊的抗原決定基共用至少一個抗原決定基決定子。當兩種抗體分子與共同的抗原決定基決定子相互作用時，第一抗體分子結合的抗原決定基與第二抗體分子(例如參考抗體分子，例如本文揭示之抗體)結合的抗原決定基重疊。若發現第二或參考抗體之抗原決定基決定子的至少一半為第一抗體之抗原決定基中的抗原決定基決定子，則第一及第二抗體分子(例如參考抗體分子，例如本文揭示之抗體分子)結合的抗原決定基基本上重疊。若第一抗體分子結合的抗原決定基之核心抗原決定基決定子為第二或參考抗體之抗原決定基之核心抗原決定基決定子的至少一半(其中核心抗原決定基決定子係藉由例如結晶學或氫氘交換來定義)，則第一及第二抗體分子(例如參考抗體分子，例如本文揭示之抗體分子)結合的抗原決定基基本上相同。
如本文所用，當抗原片段在抗體分子存在下發生的氫氘交換低於抗原片段在抗體分子不存在下發生的氫氘交換時，抗體分子使抗原片段中發生的「氫氘交換減少」，如氫氘交換分析中所量測。
如本文所用，根據抗原片段在抗體不存在下發生的標準化氫氘交換程度(Da/殘基)減去抗原片段在抗體存在下發生的標準化氫氘交換程度(Da/殘基)來確定「平均氫氘交換」的減少。
如本文所用，術語「單株抗體」或「單株抗體組合物」係指單一分子組成之抗體分子製劑。單株抗體組合物對特定抗原決定基呈現單一結合特異性及親和力。單株抗體可藉由融合瘤技術或藉由不使用融合瘤技術的方法(例如重組方法)產生。
「有效的人類」蛋白質為不引起中和抗體反應(例如人類抗鼠類抗體(HAMA)反應)的蛋白質。HAMA在多種情形中可為有問題的，例如在重複投與抗體分子時，例如治療慢性或復發性疾病病狀時。由於抗體自血清清除增強(參見例如Saleh等人,Cancer Immunol. Immunother. , 32:180-190 (1990))且亦由於潛在過敏反應(參見例如LoBuglio等人,Hybridoma , 5:5117-5123 (1986))，因此HAMA反應可使得重複投與抗體變得潛在無效。
抗體分子可為多株或單株抗體。在其他實施例中，抗體可以重組方式產生，例如藉由酵母呈現、噬菌體呈現或組合方法產生。或者，此類抗體可以選自基於酵母之合成抗體呈現系統，諸如以下文獻中所述的彼等系統：例如Y. Xu等人, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool.PEDS 26.10, 663-70 (2013)；WO2009036379；WO2010105256及WO2012009568，該等文獻以全文引用的方式併入本文中。
在一個實施例中，抗體為完全人類抗體(例如藉由酵母呈現而產生的抗體、藉由噬菌體呈現而產生的抗體，或在已經基因工程改造以自人類免疫球蛋白序列產生抗體的小鼠中產生的抗體)，或非人類抗體，例如嚙齒動物(小鼠或大鼠)、山羊、靈長類動物(例如猴)，或駱駝抗體。產生嚙齒動物抗體之方法在此項技術中已知。
人類單株抗體可使用攜有人類免疫球蛋白基因而非小鼠系統之轉殖基因小鼠產生。利用來自經所關注之抗原免疫之此等轉殖基因小鼠的脾細胞產生融合瘤，此等融合瘤分泌對來自人類蛋白質之抗原決定基具有特異性親和力之人類mAb(參見例如 Wood等人的國際申請案WO 91/00906；Kucherlapati等人的PCT公開案WO 91/10741；Lonberg等人的國際申請案WO 92/03918；Kay等人的國際申請案92/03917；Lonberg, N. 等人, 1994Nature 368:856-859；Green, L.L. 等人, 1994Nature Genet. 7:13-21；Morrison, S.L. 等人, 1994Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855；Bruggeman等人, 1993Year Immunol 7:33-40；Tuaillon等人, 1993PNAS 90:3720-3724；Bruggeman等人, 1991Eur J Immunol 21:1323-1326)。
抗體可為其中可變區或其一部分(例如CDR)係在非人類生物體(例如大鼠或小鼠)中產生的抗體。嵌合抗體、CDR移植的抗體及人類化抗體均屬於本發明內。非人類生物體(例如大鼠或小鼠)中產生且接著經修飾(例如在可變構架或恆定區中經修飾)以降低在人體中之抗原性的抗體屬於本發明內。
抗體可以藉由此項技術中已知的任何適合重組DNA技術產生(參見Robinson等人，國際專利公開案PCT/US86/02269；Akira等人，歐洲專利申請案184,187；Taniguchi, M.，歐洲專利申請案171,496；Morrison等人，歐洲專利申請案173,494；Neuberger等人，國際申請案WO 86/01533；Cabilly等人，美國專利第4,816,567號；Cabilly等人，歐洲專利申請案125,023；Better等人(1988Science 240:1041-1043)；Liu等人(1987)PNAS 84:3439-3443；Liu等人, 1987,J. Immunol. 139:3521-3526；Sun等人(1987)PNAS 84:214-218；Nishimura等人, 1987,Canc. Res. 47:999-1005；Wood等人(1985)Nature 314:446-449；及Shaw等人, 1988,J. Natl Cancer Inst. 80:1553-1559)。
人類化或CDR移植抗體中至少一個或兩個、但通常全部三個接受者CDR(重鏈及/或輕鏈免疫球蛋白鏈之CDR)經供者CDR置換。抗體可經非人類CDR之至少一部分置換或僅一些CDR可經非人類CDR置換。僅需置換供人類化抗體結合至CD73所必需數目個CDR。在一些實施例中，供體為嚙齒動物抗體，例如大鼠或小鼠抗體，且受體為人類構架或人類共同構架。典型地，提供CDR之免疫球蛋白稱為「供體」且提供構架之免疫球蛋白稱為「受體」。在一個實施例中，供體免疫球蛋白為非人類(例如嚙齒動物)。受體構架為天然存在的(例如人類)構架或共同構架，或與其約85%或高於85% (例如90%、95%、99%或高於99%)一致的序列。
如本文所用，術語「共同序列」係指由相關序列家族中最頻繁存在之胺基酸(或核苷酸)形成的序列(參見例如Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987)。在蛋白質家族中，共同序列中之各位置被該家族中最頻繁存在於該位置之胺基酸佔據。若兩個胺基酸存在的頻率相等，則任一者可包括於共同序列中。「共同構架」係指共同免疫球蛋白序列中之構架區。
抗體可藉由此項技術中已知之方法人類化(參見例如Morrison, S. L., 1985,Science 229:1202-1207，Oi等人, 1986,BioTechniques 4:214及Queen等人，US 5,585,089、US 5,693,761及US 5,693,762，該等所有文獻之內容以引用的方式併入本文中)。
人類化或CDR移植抗體可藉由CDR移植或CDR取代來產生，其中免疫球蛋白鏈中之一個、兩個或全部CDR可經置換。參見例如美國專利5,225,539；Jones等人, 1986Nature 321:552-525；Verhoeyan等人, 1988Science 239:1534；Beidler等人, 1988J. Immunol. 141:4053-4060；Winter US 5,225,539，該等所有文獻的內容以引用的方式明確併入本文中。
其中特定胺基酸已經取代、缺失或添加之人類化抗體亦在本發明之範疇內。自供體選擇胺基酸之準則描述於US 5,585,089中，例如US 5,585,089之第12-16列，例如US 5,585,089之第12-16列，該文獻的內容以引用的方式併入本文中。用於使抗體發生人類化的其他技術描述於Padlan等人之EP 519596 A1 (1992年12月23日公開)中。
抗體分子可為單鏈抗體。單鏈抗體(scFV)可以加以工程改造(參見例如Colcher, D.等人, (1999)Ann N Y Acad Sci 880:263-80；及Reiter, Y. (1996)Clin Cancer Res 2:245-52)。單鏈抗體可以二聚合或多聚合以產生對相同靶蛋白之不同抗原決定基具有特異性的多價抗體。
在又其他實施例中，抗體分子具有重鏈恆定區，該重鏈恆定區選自例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgD及IgE之重鏈恆定區；特定而言，選自例如IgG1、IgG2、IgG3及IgG4之(例如人類)重鏈恆定區。在另一個實施例中，抗體分子具有輕鏈恆定區，其選自例如κ或λ之(例如人類)輕鏈恆定區。恆定區可以改變(例如突變)以修改抗體特性(例如增加或減少以下中之一或多者：Fc受體結合、抗體糖基化、半胱胺酸殘基數目、效應細胞功能及/或補體功能)。在一些實施例中，抗體具有效應功能且可固定補體。在其他實施例中，抗體不募集效應細胞或固定補體。在某些實施例中，抗體結合Fc受體的能力降低或無結合Fc受體的能力。舉例而言，其可為不支持結合至Fc受體的同型或亞型、片段或其他突變體，例如其具有誘變或缺失之Fc受體結合區。
用於抗體恆定區的方法在此項技術中已知。功能改變(例如對效應子配位體(諸如細胞上的FcR或補體之C1組分)的親和力改變)的抗體可以藉由不同殘基置換抗體之恆定部分中的至少一個胺基酸殘基來產生(參見例如EP 388,151 A1、美國專利第5,624,821號及美國專利第5,648,260號，該等所有文獻的內容均以引用的方式併入本文中)。亦涵蓋使抗體結構穩定的胺基酸突變，諸如人類IgG4中之S228P (Eu編號)。可描述若應用於鼠類或其他物種免疫球蛋白則會降低或消除此等功能的類似變化類型。
抗體分子可經衍生化或連接至另一功能分子(例如另一肽或蛋白質)。如本文所用，「衍生化」抗體分子為已經修飾之抗體分子。衍生化方法包括(但不限於)添加螢光部分、放射性核苷酸、毒素、酶或親和性配位體，諸如生物素。因此，本發明之抗體分子意欲包括本文所述之抗體之衍生化及以其他方式經修飾之形式，包括免疫黏附分子。舉例而言，抗體分子可在功能上連接(藉由化學偶合、基因融合、非共價結合或以其他方式)至一或多種其他分子實體，諸如另一種抗體(例如雙特異性抗體或雙功能抗體)、偵測劑、細胞毒性劑、醫藥劑，及/或可介導抗體或抗體部分與另一分子(諸如抗生蛋白鏈菌素核心區或聚組胺酸標籤)結合的蛋白質或肽。
一種類型的衍生化抗體分子係由兩種或超過兩種抗體(相同類型或不同類型之抗體，例如以產生雙特異性抗體)交聯而產生。適合交聯劑包括異雙官能交聯劑(具有兩個經適當間隔基(例如間順丁烯二醯亞胺基苯甲醯基-N-羥基丁二醯亞胺酯)分隔的不同反應基)或同雙官能交聯劑(例如辛二酸二丁二醯亞胺酯)。此類連接子可自Pierce Chemical Company, Rockford, Ill獲得。
可用於衍生化(或標記)本發明抗體分子的偵測劑包括螢光化合物、各種酶、輔基、發光物質、生物發光物質、發射螢光之金屬原子，例如銪(Eu)及其他鑭系元素，以及放射性物質(下文描述)。例示性螢光偵測劑包括螢光素(fluorescein)、螢光素異硫氰酸鹽、若丹明(rhodamine)、5-二甲胺-1-萘磺醯氯、藻紅素(phycoerythrin)及其類似物。抗體亦可用可偵測酶衍生化，諸如鹼性磷酸酶、辣根過氧化酶、β-半乳糖苷酶、乙醯膽鹼酯酶、葡萄糖氧化酶及其類似物。當抗體用可偵測酶衍生化時，其係藉由添加供酶用於產生可偵測反應產物之其他試劑來偵測。舉例而言，當偵測劑辣根過氧化酶存在時，添加過氧化氫及二胺基聯苯胺產生可偵測的著色反應產物。抗體分子亦可用輔基(例如抗生蛋白鏈菌素/生物素及抗生素蛋白/生物素)衍生化。舉例而言，抗體可用生物素衍生化，且經由間接量測抗生素蛋白或抗生蛋白鏈菌素結合來偵測。適合螢光物質之實例包括傘酮(umbelliferone)、螢光素、螢光素異硫氰酸鹽、若丹明、二氯三嗪基胺螢光素、丹磺醯氯或藻紅素；發光物質之實例包括魯米諾(luminol)；且生物發光物質之實例包括螢光素酶、螢光素及水母發光蛋白(aequorin)。
可使用經標記之抗體分子，例如在多種背景下以診斷方式及/或以實驗方式使用，包括(i)藉由標準技術(諸如親和層析或免疫沈澱)分離預定抗原；(ii)偵測預定抗原(例如在細胞溶胞物或細胞上清液中)以便評估蛋白質之豐度及表現模式；(iii)作為臨床測試程序之一部分，監測組織中之蛋白質含量，例如以確定所指定治療方案之功效。
抗體分子可與另一分子實體(典型地為標記或治療性(例如免疫調節性、免疫刺激性、細胞毒性或細胞抑制性)藥劑或部分)結合。診斷性或治療性應用中可使用放射性同位素。可以與抗CD73抗體偶聯的放射性同位素包括(但不限於) α-發射體、β-發射體或γ-發射體，或β-發射體與γ-發射體。此類放射性同位素包括(但不限於)碘(131 I或125 I)、釔(90 Y)、鎦(177 Lu)、錒(225 Ac)、鐠、砹(211 At)、錸(186 Re)、鉍(212 Bi或213 Bi)、銦(111 In)、鎝(99 mTc)、磷(32 P)、銠(188 Rh)、硫(35 S)、碳(14 C)、氚(3 H)、鉻(51 Cr)、氯(36 Cl)、鈷(57 Co或58 Co)、鐵(59 Fe)、硒(75 Se)或鎵(67 Ga)。適用作治療劑的放射性同位素包括釔(90 Y)、鎦(177 Lu)、錒(225 Ac)、鐠、砹(211 At)、錸(186 Re)、鉍(212 Bi或213 Bi)及銠(188 Rh)。適用作標記(例如供診斷之用)的放射性同位素包括碘(131 I或125 I)、銦(111 In)、鎝(99 mTc)、磷(32 P)、碳(14 C)及氚(3 H)，或一或多種上列治療性同位素。
本發明提供放射性標記之抗體分子及其標記方法。在一些實施例中，揭示標記抗體分子之方法。該方法包括使抗體分子與螯合劑接觸，從而產生所結合之抗體。結合之抗體經放射性同位素(例如111 銦、90 釔及177 鎦)放射性標記，從而產生標記之抗體分子。
如上文所述，抗體分子可與治療劑結合。治療活性放射性同位素已提及。其他治療劑之實例包括紫杉醇(taxol)、細胞鬆弛素B (cytochalasin B)、短桿菌素D (gramicidin D)、溴化乙錠(ethidium bromide)、吐根素(emetine)、絲裂黴素(mitomycin)、依託泊苷(etoposide)、特諾波賽(tenoposide)、長春新鹼(vincristine)、長春鹼(vinblastine)、秋水仙鹼(colchicine)、小紅莓(doxorubicin)、道諾黴素(daunorubicin)、二羥基炭疽菌素二酮(dihydroxy anthracin dione)、米托蒽醌(mitoxantrone)、光神黴素(mithramycin)、放線菌素D (actinomycin D)、1-去氫睪固酮、糖皮質激素、普魯卡因(procaine)、四卡因(tetracaine)、利多卡因(lidocaine)、普萘洛爾(propranolol)、嘌呤黴素(puromycin)、類美登素(maytansinoids) (例如美登醇(maytansinol) (參見美國專利第5,208,020號))、CC-1065(參見美國專利第5,475,092號、第5,585,499號、第5,846,545號)及其類似物或同源物。治療劑包括(但不限於)抗代謝物(例如甲胺喋呤(methotrexate)、6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、阿糖胞苷(cytarabine)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、達卡巴嗪(decarbazine))、烷基化劑(例如氮芥(mechlorethamine)、噻替派苯丁酸氮芥(thioepa chlorambucil)、CC-1065、美法侖(melphalan)、卡莫司汀(carmustine) (BSNU)及洛莫司汀(lomustine) (CCNU)、環硫磷醯胺(cyclothosphamide)、白消安(busulfan)、二溴甘露醇(dibromomannitol)、鏈佐黴素(streptozotocin)、絲裂黴素C (mitomycin C)，及順-二氯二胺鉑(II) (DDP)順鉑)、蒽環黴素(anthracyclinies) (例如道諾黴素(daunorubicin) (先前為柔紅黴素(daunomycin))及小紅莓)、抗生素(例如放線菌素D (先前為放射菌素)、博萊黴素(bleomycin)、光神黴素及安麯黴素(anthramycin) (AMC))，及抗有絲分裂劑(例如長春新鹼、長春鹼、紫杉醇及類美登素)。
在一個態樣中，本發明特徵為一種提供結合至CD73受體之標靶結合分子的方法。舉例而言，標靶結合分子為抗體分子。方法包括：提供包含非人類蛋白質之至少一部分的靶蛋白，該部分與人類靶蛋白之對應部分同源(至少70、75、80、85、87、90、92、94、95、96、97、98或99%一致)，但有至少一個胺基酸(例如至少一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個或九個胺基酸)不同；獲得結合至抗原之抗體分子；及評估結合劑在調節靶蛋白活性方面的功效。該方法可以進一步包括向人類個體投與結合劑(例如抗體分子)或衍生物(例如人類化抗體分子)。
在某些實施例中，抗體分子為多特異性(例如雙特異性或三特異性)抗體分子。用於產生雙特異性或異二聚抗體分子的方案在此項技術中已知；包括(但不限於)例如「臼包杵」方法，該方法描述於例如US 5731168中；靜電操縱Fc配對，如例如WO 09/089004、WO 06/106905及WO 2010/129304中所述；股交換工程化域(SEED)雜二聚體形成，如例如WO 07/110205中所述；Fab臂交換，如例如WO 08/119353、WO 2011/131746及WO 2013/060867中所述；雙重抗體結合物，例如使用具有胺反應基及硫氫基反應基的異雙官能試劑藉由抗體交聯來產生雙特異性結構，如例如US 4433059中所述；經由兩個重鏈之間之二硫鍵還原及氧化循環，藉由將來自不同抗體的半抗體重組(重鏈-輕鏈對或Fab)而產生的雙特異性抗體決定子，如例如US 4444878中所述；三官能抗體，例如經由硫氫基反應基交聯的三個Fab'片段，如例如US5273743中所述；生物合成結合蛋白，例如經由C末端尾、較佳經由二硫鍵或胺反應性化學交聯而交聯的scFvs對，如例如US5534254中所述；雙官能抗體，例如具有不同結合特異性、經由已置換恆定域之白胺酸拉鏈(例如c-fos及c-jun)而二聚合的Fab片段，如例如US5582996中所述；雙特異性及寡特異性單價及低價受體，例如兩種抗體(兩個Fab片段)之VH-CH1區域，其經由位於一種抗體之CH1區域與典型地具有相關輕鏈之另一種抗體之VH區域之間的多肽間隔子連接，如例如US5591828中所述；雙特異性DNA-抗體結合物，例如抗體或Fab片段經由DNA之雙股片段交聯，如例如US5635602中所述；雙特異性融合蛋白，例如含有兩個其間具有親水性螺旋形肽連接子之scFvs及完全恆定區的表現構築體，如例如US5637481中所述；多價及多特異性結合蛋白，例如第一結構域具有Ig重鏈可變區之結合區且第二結構域具有Ig輕鏈可變區之結合區的多肽二聚體，通常稱為雙功能抗體(亦揭示產生雙特異性、三特異性或四特異性分子的高階結構，如例如US5837242中所述；連接有VL及VH鏈的微型抗體構築體，該VL及VH鏈經由肽間隔子進一步連接至抗體鉸鏈區及CH3區域，該等構築體可以二聚合而形成雙特異性/多價分子，如例如US5837821中所述；經由短肽連接子(例如5或10個胺基酸)或根本不經由連接子連接的呈任何取向之VH及VL域，其可以形成二聚體，從而形成雙特異性雙功能抗體；三聚體及四聚體，如例如US5844094中所述；藉由與C末端之可交聯基團發生肽鍵聯而連接的一串VH域(或家族成員中之VL域)，其進一步與VL域結合而形成一系列FV (或scFv)，如例如US5864019中所述；及其中VH與VL域經由肽連接子連接的單鏈結合多肽經由非共價或化學交聯而組合成多價結構(使用scFV或雙功能抗體型形式)，從而形成例如同二價、異二價、三價及四價結構，如例如US5869620中所述。其他例示性多特異性及雙特異性分子及其製備方法見於例如US5910573、US5932448、US5959083、US5989830、US6005079、US6239259、US6294353、US6333396、US6476198、US6511663、US6670453、US6743896、US6809185、US6833441、US7129330、US7183076、US7521056、US7527787、US7534866、US7612181、US2002004587A1、US2002076406A1、US2002103345A1、US2003207346A1、US2003211078A1、US2004219643A1、US2004220388A1、US2004242847A1、US2005003403A1、US2005004352A1、US2005069552A1、US2005079170A1、US2005100543A1、US2005136049A1、US2005136051A1、US2005163782A1、US2005266425A1、US2006083747A1、US2006120960A1、US2006204493A1、US2006263367A1、US2007004909A1、US2007087381A1、US2007128150A1、US2007141049A1、US2007154901A1、US2007274985A1、US2008050370A1、US2008069820A1、US2008152645A1、US2008171855A1、US2008241884A1、US2008254512A1、US2008260738A1、US2009130106A1、US2009148905A1、US2009155275A1、US2009162359A1、US2009162360A1、US2009175851A1、US2009175867A1、US2009232811A1、US2009234105A1、US2009263392A1、US2009274649A1、EP346087A2、WO0006605A2、WO02072635A2、WO04081051A1、WO06020258A2、WO2007044887A2、WO2007095338A2、WO2007137760A2、WO2008119353A1、WO2009021754A2、WO2009068630A1、WO9103493A1、WO9323537A1、WO9409131A1、WO9412625A2、WO9509917A1、WO9637621A2、WO9964460A1中。上述申請案之內容以全文引用的方式併入本文中。
在其他實施例中，抗CD73抗體分子(例如單特異性、雙特異性或多特異性抗體分子)共價連接(例如融合)至另一搭配物(例如蛋白質，例如一個、兩個或超過兩個細胞介素)，例如呈融合分子(例如融合蛋白)形式。
「融合蛋白」及「融合多肽」係指具有至少兩個共價連接在一起之部分的多肽，其中各部分為具有不同特性之多肽。該特性可為生物特性，諸如活體外或活體內活性。該特性亦可為簡單的化學或物理特性，諸如結合至靶分子，催化反應等。兩個部分可以藉由單一肽鍵直接連接或經由肽連接子連接，但彼此處於閱讀框架中。
本發明提供編碼上述抗體分子之經分離核酸分子、其載體及宿主細胞。核酸分子包括(但不限於) RNA、基因組DNA及cDNA。
例示性抗CD73抗體分子 在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個抗原結合區，例如可變區或其抗原結合片段，其來自本文所述之抗體，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個、三個或四個來自本文所述之抗體的可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼的抗體。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個或兩個來自本文所述之抗體的重鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個或兩個來自本文所述之抗體的輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼的抗體。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包括IgG4 (例如人類IgG4)之重鏈恆定區。在另一個實施例中，人類IgG4包括在根據Eu編號之位置228處發生的取代(例如Ser經Pro取代)。在再另一個實施例中，抗CD73抗體分子包括IgG1 (例如人類IgG1)之重鏈恆定區。在一個實施例中，人類IgG1包括在根據Eu編號之位置297處發生的取代(例如Asn經Ala取代)。在一個實施例中，人類IgG1包括在根據Eu編號之位置265處發生的取代(例如Asp經Ala取代)、在根據Eu編號之位置329處發生的取代(例如Pro經Ala取代)，或兩者。在一個實施例中，人類IgG1包括在根據Eu編號之位置234處發生的取代(例如Leu經Ala取代)、在根據Eu編號之位置235處發生的取代(例如Leu經Ala取代)，或兩者。在一個實施例中，重鏈恆定區包含表3中所闡述之胺基酸序列，或與其基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列。
在又另一個實施例中，抗CD73抗體分子包括κ輕鏈恆定區，例如人類κ輕鏈恆定區。在一個實施例中，輕鏈恆定區包含表3中所闡述之胺基酸序列，或與其基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列。
在另一個實施例中，抗CD73抗體分子包括IgG4 (例如人類IgG4)之重鏈恆定區，及κ輕鏈恆定區，例如人類κ輕鏈恆定區，例如包含表3中所闡述之胺基酸序列或與其基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列的重鏈及輕鏈恆定區。在又另一個實施例中，抗CD73抗體分子包括IgG1 (例如人類IgG1)之重鏈恆定區，及κ輕鏈恆定區，例如人類κ輕鏈恆定區，例如包含表3中所闡述之胺基酸序列或與其基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列的重鏈及輕鏈恆定區。在一個實施例中，人類IgG1包括在根據Eu編號之位置297處發生的取代(例如Asn經Ala取代)。在一個實施例中，人類IgG1包括在根據Eu編號之位置265發生的取代、在根據Eu編號之位置329處發生的取代，或兩者(例如位置265處發生之Asp經Ala取代及/或位置329處發生之Pro經Ala取代)。在一個實施例中，人類IgG1包括在根據Eu編號之位置234處發生的取代、在根據Eu編號之位置235處發生的取代，或兩者(例如位置234處發生之Leu經Ala取代及/或位置235處發生之Leu經Ala取代)。
在另一個實施例中，抗CD73抗體分子包括重鏈可變區及恆定區、輕鏈可變區及恆定區，或兩者，其包含918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398之胺基酸序列；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個互補決定區(CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼的抗體。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個或三個互補決定區(CDR)，其來自包含表1中所示之胺基酸序列或由表1中之核苷酸序列編碼的重鏈可變區。在一個實施例中，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)相對於表1中所示或由表1中所示之核苷酸序列編碼的胺基酸序列，具有一個、兩個、三個、四個、五個或超過五個變化，例如胺基酸取代、插入或缺失。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括重鏈CDR中之取代，例如重鏈CDR1、CDR2及/或CDR3中的一或多個取代。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個互補決定區(CDR)，其來自本文所述之抗體的輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列編碼的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個CDR (或總體而言所有的CDR)，其來自包含表1中所示之胺基酸序列或由表1中所示之核苷酸序列編碼的輕鏈可變區。在一些實施例中，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)相對於表1中所示或由表1中所示之核苷酸序列編碼的CDR，具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代、插入或缺失。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個CDR (或總體而言所有的CDR)，其來自包含表1中所示之胺基酸序列或由表1中所示之核苷酸序列編碼的輕鏈可變區。在一些實施例中，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)相對於表1中所示或由表1中所示之核苷酸序列編碼的CDR，具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代、插入或缺失。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個CDR (或總體而言所有的CDR)，其來自包含表1中所示之胺基酸序列或由表1中所示之核苷酸序列編碼的重鏈及輕鏈可變區。在一些實施例中，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)相對於表1中所示或由表1中所示之核苷酸序列編碼的CDR，具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代、插入或缺失。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括所有六個CDR，其均來自本文所述之抗體，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列編碼的抗體；或緊密相關的CDR，例如一致或具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的CDR。在某些實施例中，抗CD73抗體分子可以包括本文所述之任何CDR。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括重鏈CDR中之取代，例如重鏈CDR1、CDR2及/或CDR3中的一或多個取代。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個根據Kabat等人之CDR (例如如表1中所闡述的至少一個、兩個或三個根據Kabat定義之CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列編碼；或相對於表1中所示之一個、兩個或三個根據Kabat等人之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個根據Kabat等人之CDR (例如如表1中所闡述的至少一個、兩個或三個根據Kabat定義之CDR)，其來自本文所述之抗體的輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據Kabat等人之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據Kabat等人之CDR (例如如表1中所闡述之根據Kabat定義之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈及輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據Kabat等人之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括所有六個根據Kabat等人之CDR (例如如表1中所闡述之所有六個根據Kabat定義的CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈及輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列編碼；或相對於表1中所示之所有六個根據Kabat等人的CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。在一個實施例中，抗CD73抗體分子可以包括本文所述之任何CDR。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個Chothia高變環(例如如表1中闡述之至少一個、兩個或三個根據Chothia定義的高變環)，其來自本文所述之抗體的重鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列編碼；或胺基酸至少來自接觸CD73之彼等高變環；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據Chothia等人之高變環，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括本文所述抗體之輕鏈可變區的至少一個、兩個或三個Chothia高變環(例如如表1中闡述的至少一個、兩個或三個根據Chothia定義之高變環)，該抗體例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列編碼；或胺基酸至少來自接觸CD73之彼等高變環；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據Chothia等人之高變環，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個高變環(例如如表1中闡述的至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據Chothia定義之高變環)，其來自本文所述之抗體的重鏈及輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列編碼；或胺基酸至少來自接觸CD73之彼等高變環；或相對於表1中所示的一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據Chothia等人之高變環，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括本文所述抗體之所有六個高變環(例如如表1中闡述之所有六個根據Chothia定義的高變環)，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或高變環緊密相關，例如高變環一致或具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)；或相對於表1中所示的所有六個根據Chothia等人之高變環，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。在一個實施例中，抗CD73抗體分子可以包括本文所述之任何高變環。
在再另一個實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個高變環，其具有與本文所述之抗體(例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398的抗體)之相應高變環相同的典型結構，例如與本文所述抗體之重鏈及/或輕鏈可變域的至少環1及/或環2相同的典型結構。關於高變環典型結構之描述，參見例如Chothia等人, (1992)J. Mol. Biol. 227:799-817；Tomlinson等人, (1992)J. Mol. Biol. 227:776-798。此等結構可藉由檢查此等參考文獻中所述之表來確定。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括根據Kabat等人及Chothia等人所定義之CDR或高變環之組合。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個CDR或高變環，其來自本文所述之抗體的重鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398、根據Kabat及Chothia定義(例如如表1中闡述之至少一個、兩個或三個根據Kabat及Chothia定義的CDR或高變環)；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據Kabat及/或Chothia之CDR或高變環，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在另一實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個CDR或高變環，其來自本文所述之抗體的輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398、根據Kabat及Chothia定義(例如如表1中闡述的至少一個、兩個或三個根據Kabat及Chothia定義之CDR或高變環)；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據Kabat及/或Chothia之CDR或高變環，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個根據IMGT定義之CDR (例如如表1中闡述的至少一個、兩個或三個根據IMGT定義之CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據IMGT定義之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個根據IMGT定義之CDR (例如如表1中闡述的至少一個、兩個或三個根據IMGT定義之CDR)，其來自本文所述之抗體的輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)之序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個或三個根據IMGT定義之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據IMGT定義之CDR (例如如表1中闡述的至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據IMGT定義之CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈及輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼；或相對於表1中所示的一個、兩個、三個、四個、五個或六個根據IMGT定義之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括所有六個根據IMGT定義的CDR (例如如表1中闡述的根據IMGT定義之所有六個CDR)，其來自本文所述之抗體的重鏈及輕鏈可變區，例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中的核苷酸序列或與任一前述序列基本上一致(例如具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性)的序列編碼；或相對於表1中所示的所有六個根據IMGT定義之CDR，具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代、缺失或插入，例如保守取代)的抗體。在一個實施例中，抗CD73抗體分子可以包括本文所述之任何CDR。
抗CD73抗體分子可以含有根據Kabat及Chothia定義之CDR或高變環之任何組合。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個Chothia高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73之彼等高變環)的重鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個Chothia高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73之彼等高變環)的輕鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個Kabat高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73之彼等高變環)的重鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個Kabat高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73的彼等高變環)的輕鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個IMGT高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73的彼等高變環)的重鏈可變區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個IMGT高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73的彼等高變環)的輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73的彼等高變環)的重鏈及輕鏈可變區。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括所有六個高變環，其來自本文所述之抗體(例如表1之抗體，或胺基酸至少來自接觸CD73的彼等高變環，或胺基酸至少來自接觸CD73的彼等高變環)的重鏈及輕鏈可變區；或緊密相關的高變環，例如一致或具有至少一個胺基酸變化、但不超過兩個、三個或四個變化(例如取代(例如保守取代)、缺失或插入)的高變環。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包括至少一個、兩個或三個高變環，其具有與本文所述之抗體(例如表1之抗體)之相應高變環相同的典型結構，例如與本文所述抗體之重鏈及/或輕鏈可變域之至少環1及/或環2相同的典型結構。關於高變環典型結構之描述，參見例如Chothia等人, (1992) J. Mol. Biol. 227:799-817；Tomlinson等人, (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798。此等結構可藉由檢查此等參考文獻中所述之表來確定。在一個實施例(例如包含可變區、CDR (例如Chothia、Kabat或IMGT CDR)或本文(例如表1)所提及之其他序列的實施例)中，抗體分子為單特異性抗體分子、雙特異性抗體分子，或為包含抗體之抗原結合片段(例如半抗體或半抗體之抗原結合片段)的抗體分子。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子之重鏈或輕鏈可變域或兩者包括與本文揭示之胺基酸基本上一致的胺基酸序列，例如與本文所述之抗體可變區具有至少約80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%序列一致性，該抗體例如選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398；或如表1中所述；或由表1中之核苷酸序列編碼；或與本文所述之抗體可變區差異至少1或5個殘基、但小於40、30、20或10個殘基的抗體。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子之重鏈或輕鏈可變區或兩者包括由本文所述之核酸序列或與本文所述之核酸序列(例如如表1所示的核酸序列)或其補體雜交(例如在低嚴格度、中等嚴格度或高度嚴格度或本文所述之其他雜交條件下雜交)之核酸編碼的胺基酸序列。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個、三個或四個抗原結合區，例如可變區，其具有如表1中所闡述之胺基酸序列，或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列，或與表1中所示的序列差異不超過1、2、5、10或15個胺基酸殘基。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包括由核酸編碼的VH及/或VL域，該核酸具有編碼表1之抗體的核苷酸序列，或與該等核苷酸序列中之任一者基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性，或與表1中所示的序列差異不超過3、6、15、30或45個核苷酸的序列)。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個或三個(例如所有)來自重鏈可變區的CDR，該重鏈可變區具有如表1中所闡述之胺基酸序列，或與其基本上同源的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個或三個(例如所有)來自輕鏈可變區的CDR，該輕鏈可變區具有如表1中所闡述之胺基酸序列，或與其基本上同源的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個(例如所有)來自重鏈及輕鏈可變區的CDR，該重鏈及輕鏈可變區具有如表1中所闡述之胺基酸序列，或與其基本上同源的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個或三個(例如所有)來自重鏈可變區的CDR及/或高變環，該重鏈可變區具有本文所述之抗體(例如如表1中所概述，選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398的抗體)的胺基酸序列，或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。在某些實施例中，抗CD73抗體分子包含至少一個、兩個或三個(例如所有)來自輕鏈可變區的CDR及/或高變環，該輕鏈可變區具有本文所述之抗體(例如如表1中所概述，選自918、350、356、358、930、373、374、376、377、379、363、366、407、893、939、430或398的抗體)的胺基酸序列，或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一個、兩個、三個或超過三個取代、插入或缺失(例如保守取代)的序列)。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含本文所述(例如表1中所述)之所有六個CDR及/或高變環。
在一些實施例中，抗體分子的可變區與本文所述之可變區(例如本文揭示之FR區)序列一致或差異為1、2、3或4個胺基酸。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含含有GGLYGSGSYLSDFDL之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 37)的重鏈可變區(VH)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含含有ESQESPYNNWFDP之VHCDR3胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)的重鏈可變區(VH)。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 88之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 89之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 90之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 91之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 122之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 123之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 124之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 125之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 17之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 19之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 126之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 89之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 127之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 91之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 128之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 129之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 130之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 131之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 20之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 189之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 89之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 196之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 91之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表2中。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 38之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 36之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 72之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 71之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 38之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 71之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 137之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 136之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 137之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 146之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 137之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 154之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 61之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 60之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 4之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 26之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 4之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 2之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 163之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 162之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 39之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 40之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 73之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 74之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 82之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 74之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 138之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 139之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 147之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 148之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 155之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 156之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 51之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 53之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 62之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 63之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 17之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 19之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 27之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 28之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 17之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 19之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 5之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 6之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 17之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 19之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 164之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 165之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 17之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 19之VLCDR3胺基酸序列。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 35之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 36之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 70之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 71之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 81之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 71之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 135之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 136之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 145之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 146之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 153之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 154之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 37之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 59之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 60之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 25之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 26之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 1之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 2之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 161之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 162之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 3之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 41之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 42之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 75之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 76之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 83之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 76之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 140之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 141之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 149之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 150之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 157之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 158之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 54之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 52之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 64之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 65之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 20之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 29之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 30之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 20之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 7之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 8之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 20之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 166之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 167之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 20之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 18之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。
在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 190之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 36之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 191之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 71之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 192之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 71之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 193之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 136之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 194之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 146之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 195之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 154之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 43之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 48之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 49之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 50之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 197之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 60之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 198之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 26之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 199之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 2之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD73抗體分子包含：VH，其包含SEQ ID NO: 200之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 162之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 9之VHCDR3胺基酸序列；及VL，其包含SEQ ID NO: 14之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 15之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 16之VLCDR3胺基酸序列。
在其他實施例中，前述抗體包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 44、77、84、142、151或159中之任一者具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區。在其他實施例中，前述抗體包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 66、31、10或168中之任一者具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區。
在其他實施例中，前述抗體包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 55或21中之任一者具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。
在其他實施例中，前述抗體包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 46、79、86、114、116或117中之任一者具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈。在其他實施例中，前述抗體包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 68、33、12、115、113或112中之任一者具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈。
在其他實施例中，前述抗體包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 57或23中之任一者具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。
在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 44具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 55具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 77具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 55具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 84具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 55具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 142具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 55具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 151具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 55具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 159具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 55具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 66具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 21具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 31具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 21具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 10具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 21具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 168具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈可變區；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 21具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈可變區。
在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 46具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 57具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 79具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 57具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 86具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 57具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 114具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 57具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 116具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 57具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 117具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 57具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 68具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 23具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 33具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 23具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 12具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 23具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 115具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 23具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 113具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 23具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。在其他實施例中，抗體分子包含胺基酸序列與SEQ ID NO: 112具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的重鏈；及胺基酸序列與SEQ ID NO: 23具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的輕鏈。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 81、201、37、205、206及207。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 38、201、37、205、206及207。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 82、202、37、208、209及228。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 83、203、43、229、209及207。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 192、201、43、205、206及207。在其他實施例中，抗體分子包含分別含有胺基酸序列SEQ ID NO: 204及230 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)的VH及VL。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 81、231、37、205、206及207。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 38、231、37、205、206及207。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 82、232、37、208、209及228。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 83、233、43、229、209及207。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 192、231、43、205、206及207。在其他實施例中，抗體分子包含VH及VL，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 234及230 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 235、236、237、246、15及247。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 238、236、237、246、15及247。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 239、240、237、248、18及249。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 241、242、243、250、18及247。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 244、236、243、246、15及247。在其他實施例中，抗體分子包含VH及VL，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 245及251 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 252、253、254、262、263及264。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 255、253、254、262、263及264。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 155、256、254、265、266及267。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 257、258、259、268、266及264。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 260、253、259、262、263及264。在其他實施例中，抗體分子包含VH及VL，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 261及269 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 287、288、289、298、49及299。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 290、288、289、298、49及299。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 291、292、289、300、52及301。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 293、294、295、302、52及299。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 296、288、295、298、49及299。在其他實施例中，抗體分子包含VH及VL，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 297及303 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 304、305、306、14、15及314。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 61、305、306、14、15及314。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 307、308、306、17、18及315。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 309、310、311、20、18及314。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 312、305、311、14、15及314。在其他實施例中，抗體分子包含VH及VL，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 313及316 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)。
在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 317、318、319、14、15及328。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 320、318、319、14、15及328。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 321、322、319、17、18及329。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 323、324、325、20、18及328。在其他實施例中，抗體分子包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 326、318、325、14、15及328。在其他實施例中，抗體分子包含VH及VL，其分別包含胺基酸序列SEQ ID NO: 327及330 (或與其具有至少約85% (例如至少90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性的胺基酸序列)。
在其他實施例中，前述抗體分子選自完整抗體、雙特異性抗體、Fab、F(ab')2、Fv，或單鏈Fv片段(scFv)。
在其他實施例中，前述抗體分子包含選自IgG1、IgG2、IgG3及IgG4之重鏈恆定區。
在其他實施例中，前述抗體分子包含選自κ或λ之輕鏈恆定區的輕鏈恆定區。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含表1中所揭示之重鏈可變區、輕鏈可變區、重鏈恆定區及/或輕鏈恆定區。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含表3中所揭示之重鏈恆定區及/或輕鏈恆定區。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含胺基酸序列選自由SEQ ID NO: 92-103、119及120組成之群的重鏈恆定區。在一些實施例中，抗CD73抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 104的輕鏈恆定區。
抗CD73抗體之例示性序列描述於下文表1及2中。表 1 .例示性抗CD73抗體之胺基酸及核苷酸序列
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 表 2. 例示性抗CD73抗體之共同CDR序列
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 表 26. 抗CD73抗體之相應生殖系序列
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 表 3 . 人類IgG重鏈及人類κ輕鏈之恆定區胺基酸序列
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 表 4. CD73之例示性序列
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在其他實施例中，前述抗體分子能夠以小於約1×10-4 M、1×10-5 M、1×10-6 M、1×10-7 M、1×10-8 M、1×10-9 M之解離常數(KD )結合至人類CD73，例如如藉由Biacore、Octet、流式細胞術或ELISA所量測。
在一些實施例中，抗體分子結合至哺乳動物(例如人類或食蟹獼猴) CD73。舉例而言，抗體分子結合至CD73上的抗原決定基，例如線性或構形抗原決定基(例如如本文所述之抗原決定基)。在某些態樣中，鑑別出以高親和力結合至所關注蛋白質之人類及食蟹獼猴同源物的抗體是有利的。此所需交叉反應性允許在動物模型中測試相同抗體(或具有相同CDR或可變區之兩種抗體)，接著作為治療劑投與人類患者。
在一些實施例中，本文揭示一種經分離之抗體分子，其與前述抗CD73抗體分子競爭結合至人類CD73。
在一些實施例中，本文揭示一種經分離之抗體分子，其結合至與前述抗CD73抗體分子之抗原決定基相同的抗原決定基、基本上相同的抗原決定基、重疊的抗原決定基或基本上重疊的抗原決定基。
在一些實施例中，抗體分子結合至人類CD73之N末端域。在一些實施例中，抗體分子結合至人類CD73之A環及/或B環。在一些實施例中，抗體分子當結合至人類CD73時，誘導人類CD73之C環發生構形變化。
在一些實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。在一些實施例中，氫氘交換減少至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%。
在一些實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 106之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 106之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，例如當使用氫氘交換質譜法測試作為二價抗體分子的抗體分子時。
在一些實施例中，抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基297-309，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。在一些實施例中，SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的氫氘交換減少程度為SEQ ID NO: 105之殘基297-309所發生之氫氘交換減少程度的至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍或4倍。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 106之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使在SEQ ID NO: 106之殘基368-387處發生的氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 106之殘基297-309，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至人類CD73時，使人類CD73之C環處發生的氫氘交換減少程度大於人類CD73之A環、B環或D環，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。在一些實施例中，人類CD73之C環處發生的氫氘交換減少程度為人類CD73之A環、B環或D環處所發生之氫氘交換減少程度的至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍或4倍。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。在一些實施例中，SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的氫氘交換減少程度為SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309處發生之氫氘交換減少程度的至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍或4倍。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 106之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使在SEQ ID NO: 106之殘基368-387處發生的氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 106之殘基158-172、殘基206-215或殘基297-309，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至人類CD73時，使在人類CD73之A環發生的氫氘交換減少程度大於人類CD73之B環、C環或D環，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。在一些實施例中，人類CD73之A環處發生的氫氘交換減少程度為人類CD73之B環、C環或D環處所發生之氫氘交換減少程度的至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍或4倍。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 105之殘基206-215、殘基368-387或殘基297-309，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。在一些實施例中，SEQ ID NO: 105之殘基158-172處發生的氫氘交換減少程度為SEQ ID NO: 105之殘基206-215、殘基368-387或殘基297-309處所發生之氫氘交換減少程度的至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍或4倍。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 106之殘基158-172處發生的氫氘交換減少程度大於SEQ ID NO: 106之殘基206-215、殘基368-387或殘基297-309，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，能夠減少在人類CD73之一或多個區域處發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中減少最大的區域不為SEQ ID NO: 105之殘基206-215，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 106之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，能夠減少在人類CD73之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 106之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中減少最大的區域不為SEQ ID NO: 106之殘基206-215，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使在SEQ ID NO: 105之殘基368-387處發生的氫氘交換減少大於例如每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06 Da，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子當結合至包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質(例如由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成的蛋白質)時，使得在SEQ ID NO: 105之殘基206-215處發生的氫氘交換減少小於例如每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02 Da，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如氫氘交換質譜法在pH 7.5及室溫下執行1分鐘交換，例如圖14及15所用的方法。代表性資料展示於圖14及15中。
在一些實施例中，抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，其中當抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，第一抗原結合域結合至第一CD73單體且第二抗原結合域結合至第二CD73單體，例如當使用尺寸排阻層析法測試時，例如當使用本文所述之方法測試時，例如圖17A及17B所用的方法。
在一些實施例中，本文揭示一種包含結合至人類CD73二聚體之複數個抗體分子的組合物，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如當使用本文所述之方法測試時，例如圖17A、17B、18A及18B所用的方法。代表性資料展示於圖17A、17B、18A及18B中。
在一些實施例中，本文揭示結合至人類CD73二聚體的複數個抗體分子，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO: 105之殘基27-547的胺基酸序列(例如各單體由胺基酸序列SEQ ID NO: 171組成)，其中當複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，該組合物中至多20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%的抗體分子結合至CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體，例如當使用尺寸排阻層析法量測時；且百分比值係藉由相對於結合至CD73之抗體分子的總量(不包括未結合的抗體分子)測定複合物中之抗體分子的量來獲得，例如當使用本文所述之方法測試時，例如圖17A、17B、18A及18B所用的方法。代表性資料展示於圖17A、17B、18A及18B中。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子在結合至人類CD73後，不引起人類CD73寡聚。
在一些實施例中，抗體分子優先結合至CD73之開放構形(例如催化非活性構形)，而非CD73之封閉構形(例如催化活性構形)，例如不結合至CD73之封閉構形(例如催化活性構形)，或結合至CD73之封閉構形(例如催化活性構形)的親和力低於抗體分子結合至CD73之開放構形(例如催化非活性構形)時的親和力，例如親和力低50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子防止或減少人類CD73自催化非活性開放構形轉化成催化活性封閉構形。在一些實施例中，相較於在抗體分子不存在下的轉化，人類CD73自催化非活性開放構形向催化活性封閉構形的轉化減少至少1.5倍、2倍、5倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或100倍。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子接觸(例如直接地或間接地接觸)SEQ ID NO: 105之殘基158-172內的至少一個殘基。在一些實施例中，抗CD73抗體分子接觸(例如直接地或間接地接觸)SEQ ID NO: 105之殘基206-215內的至少一個殘基。在一些實施例中，抗CD73抗體分子接觸(例如直接地或間接地接觸)SEQ ID NO: 105之殘基368-387內的至少一個殘基。在一些實施例中，抗CD73抗體分子接觸(例如直接地或間接地接觸)SEQ ID NO: 105之殘基87-104內的至少一個殘基。在一些實施例中，抗CD73抗體分子接觸(例如直接地或間接地接觸)SEQ ID NO: 106之殘基368-387內的至少一個殘基。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子抑制或減少CD73 (例如可溶性人類CD73或膜結合的人類CD73)的酶活性，例如人類CD73介導單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如孔雀綠(MG)磷酸鹽分析或經修改之細胞效價Glo (CTG)分析，例如圖2B、3A、3B、3C、4、5、6、7A、7B、7C、8A、8B、9A、9B、10、11A、11B或13中所用的方法。代表性資料展示於圖2B、3A、3B、3C、4、5、6、7A、7B、7C、8A、8B、9A、9B、10、11A、11B及13中。在一些實施例中，CD73 (例如可溶性人類CD73或膜結合的人類CD73)的酶活性減少至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或99%。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子使抗CD3/抗CD28刺激的T細胞(例如CD4+ T細胞)在單磷酸腺苷(AMP)存在下的增殖增強，例如如藉由本文所述之方法所量測，例如CellTrace Violet (CTV)細胞增殖分析，例如圖12A或12B中所用的方法。代表性資料展示於圖12A及12B中。在一些實施例中，抗CD3/抗CD28刺激的T細胞(例如CD4+ T細胞)增殖增加至少2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。
在另一態樣中，本發明提供一種編碼前述抗體分子、其載體及宿主細胞中之任一者的經分離之核酸分子。核酸分子包括(但不限於) RNA、基因組DNA及cDNA。
在一些實施例中，經分離之核酸編碼任一種前述抗體分子的抗體重鏈可變區、輕鏈可變區、重鏈及/或輕鏈。
在一些實施例中，經分離之核酸編碼重鏈可變區，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 45、78、85、143、152、160、67、32、11或169，或與SEQ ID NO: 45、78、85、143、152、160、67、32、11或169具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在一些實施例中，經分離之核酸編碼重鏈，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 47、80、87、69、34或13，或與SEQ ID NO: 47、80、87、69、34或13具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在一些實施例中，經分離之核酸編碼輕鏈可變區，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 56、144、22或170，或與SEQ ID NO: 56、144、22或170具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
在一些實施例中，經分離之核酸編碼輕鏈，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO: 58或24，或與SEQ ID NO: 58或24具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
醫藥組合物及套組 在一些態樣中，本發明提供組合物，例如醫藥學上可接受的組合物，其包括連同醫藥學上可接受之載劑一起調配的本文所述抗CD73抗體分子。如本文所用，「醫藥學上可接受之載劑」包括生理上相容的任何及所有溶劑、分散介質、等張劑及吸收延遲劑及其類似物。載劑可適於靜脈內、肌肉內、皮下、非經腸、直腸、脊柱或表皮投藥(例如藉由注射或輸注)。
本文所述之組合物可呈多種形式。此等形式包括例如液體、半固體及固體劑型，諸如液體溶液(例如可注射及可輸注溶液)、分散液或懸浮液、脂質體及栓劑。適合形式視預定投藥模式及治療應用而定。典型的適合組合物呈可注射或可輸注溶液形式。一種適合的投藥模式為非經腸(例如靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內)。在一些實施例中，抗體分子藉由靜脈內輸注或注射投與。在某些實施例中，抗體係藉由肌肉內或皮下注射投與。
如本文所用，片語「非經腸投藥(parenteral administration)」及「非經腸投與(administered parenterally)」意謂除經腸及局部投藥之外的投藥模式，通常為注射，且包括(不限於)靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛膜下、脊柱內、硬膜外及胸骨內注射及輸注。
治療組合物在製造及儲存條件下典型地應無菌且穩定。組合物可調配為溶液、微乳液、分散液、脂質體或適合於抗體高濃度之其他有序結構。無菌可注射溶液可以藉由將活性化合物(亦即抗體或抗體部分)以必需的量(必要時與上文所列成分之組合一起)併入適當溶劑中、隨後過濾滅菌來製備。一般而言，分散液係藉由將活性化合物併入含有鹼性分散介質及選自上文所列成分之所需其他成分的無菌媒劑中來製備。在用於製備無菌可注射溶液之無菌粉末的情況下，較佳製備方法為真空乾燥及冷凍乾燥，其利用先前無菌過濾溶液產生活性成分加上任何其他所需成分的粉末。溶液之適當流動性可例如藉由使用諸如卵磷脂之包衣、在分散液之情況下藉由維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持。可注射組合物之延長吸收可藉由在組合物中包括延遲吸收劑(例如單硬脂酸鹽及明膠)來達成。
抗體分子可藉由多種方法投與。若干方法在此項技術中已知，且在許多治療性應用中，適當投藥途徑/模式為靜脈內注射或輸注。在一個實施例中，抗體分子可以藉由速率大於20 mg/min (例如20-40 mg/min)的靜脈內輸注來投與。在一個實施例中，抗體分子可以藉由速率大於或等於40 mg/min的靜脈內輸注來投與，以達到約35至440 mg/m2 、約70至310 mg/m2 或約110至130 mg/m2 之劑量。在一個實施例中，抗體分子可以藉由速率小於10 mg/min (例如小於或等於5 mg/min)的靜脈內輸注來投與，以達到約1至100 mg/m2 、約5至50 mg/m2 、約7至25 mg/m2 、或約10 mg/m2 之劑量。如熟習此項技術者所瞭解，投藥途徑及/或模式將視所要結果而變化。在某些實施例中，活性化合物可用保護化合物以免快速釋放之載劑製備，諸如控制釋放調配物，包括植入物、經皮貼片及微囊封遞送系統。可使用生物可降解、生物相容性聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯及聚乳酸。用於製備此類調配物之許多方法已獲得專利或為熟習此項技術者大體所知。參見例如Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems , J. R. Robinson編, Marcel Dekker, Inc., New York, 1978。
在某些實施例中，抗體分子可經口投與，例如隨惰性稀釋劑或可吸收可食用載劑一起經口投與。抗體分子(及必要時之其他成分)亦可封閉於硬殼或軟殼明膠膠囊中，壓製成錠劑，或直接併入個體之膳食中。經口治療性投與時，可將抗體分子與賦形劑合併且以可吸收性錠劑、頰內錠劑、糖衣錠、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑及其類似形式使用。為藉由除非經腸投藥以外之形式投與抗體分子，可能需要用防止化合物不活化之物質包覆化合物或將化合物與防止其不活化之物質共投與。亦可用此項技術中已知之醫療裝置投與治療組合物。
調整劑量方案以得到所需反應(例如治療反應)。舉例而言，可投與單一藥團，可隨時間投與若干分次劑量，或可依治療情況之緊急性所指示按比例減少或增加劑量。就容易投藥及劑量之均一性而言，將非經腸組合物調配成單位劑型尤其有利。如本文所用之單位劑型係指適合作為單一劑量用於待治療之個體的實體上不連續單元；各單元含有與所需醫藥載劑結合，經計算以產生所需治療效果之預定量活性化合物。單位劑型之規格係由以下決定且直接取決於：(a)活性化合物之獨特特徵及欲達成之特定治療作用，及(b)用於治療個體過敏性之此類活性化合物之混配技術中的固有限制。
在一些實施例中，本文揭示的抗CD73抗體分子係藉由注射(例如皮下或靜脈內)、以約60 mg至2400 mg的劑量(例如均一劑量)投與，例如約100 mg至2400 mg、約100 mg至2200 mg、約100 mg至2000 mg、約100 mg至1800 mg、約100 mg至1600 mg、約100 mg至1400 mg、約100 mg至1200 mg、約100 mg至1000 mg、約100 mg至800 mg、約100 mg至600 mg、約100 mg至400 mg、約100 mg至200 mg，或約100 mg、約180 mg或約200 mg。給藥時程(例如均一給藥時程)可有所不同，例如一週一次至每2、3或4週一次。在一個實施例中，本文揭示的抗CD73抗體分子係以約100 mg至200 mg的劑量投與，每週一次、每兩週一次或每三週一次。在一個實施例中，本文揭示的抗CD73抗體分子係以至少約180 mg之劑量投與，每兩週一次。
在一些實施例中，本文揭示之抗CD73抗體分子係藉由注射(例如皮下或靜脈內)、以約5 mg至100 mg、約100 mg至500 mg、約500 mg至1000 mg、約1000 mg至1500 mg、約1500 mg至2000 mg、約2000 mg至2500 mg、約2500 mg至3000 mg、約3000 mg至3500 mg或約3500 mg至4000 mg之劑量(例如均一劑量)投與，例如每週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約6 mg、約20 mg、約60 mg、約200 mg、約600 mg、約1200 mg、約2400 mg、約3000 mg或約3600 mg之劑量投與，例如QW、Q2W或Q4W。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約60 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約200 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約600 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約1200 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約2400 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約3000 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約3600 mg Q2W之劑量投與。
在一個實施例中，本文揭示之抗CD73抗體分子例如藉由輸注投與30分鐘之時段、1小時之時段或長達2小時之時段。
抗體分子之治療或預防有效量之例示性、非限制性範圍為0.1至30 mg/kg，更佳為1至25 mg/kg。抗CD73抗體分子之劑量及治療方案可由熟習此項技術者確定。在某些實施例中，抗CD73抗體分子係藉由注射(例如皮下或靜脈內)、以約1至40 mg/kg之劑量投與，例如1至30 mg/kg，例如約5至25 mg/kg、約10至20 mg/kg、約1至5 mg/kg、1至10 mg/kg、5至15 mg/kg、10至20 mg/kg、15至25 mg/kg，或約3 mg/kg。給藥時程可不同，例如一週一次至每2、3或4週一次。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係以約10至20 mg/kg之劑量每隔一週投與。抗體分子可以藉由靜脈內輸注、以大於20 mg/min之速率投與，例如20-40 mg/min，例如大於或等於40 mg/min，以達到約35至440 mg/m2 、約70至310 mg/m2 或約110至130 mg/m2 之劑量。在實施例中，約110至130 mg/m2 之輸注速率達成約3 mg/kg之水準。在其他實施例中，抗體分子可以藉由靜脈內輸注、以小於10 mg/min (例如小於或等於5 mg/min)之速率投與，以達到約1至100 mg/m2 之劑量，例如約5至50 mg/m2 、約7至25 mg/m2 ，或約10 mg/m2 。在一些實施例中，抗體輸注約30分鐘之時段。應注意，劑量值可隨待緩解之病狀的類型及嚴重程度而變化。應進一步瞭解，對於任何特定個體而言，特定劑量方案應根據個體需要及投與組合物或監督組合物投與之人員的專業判斷而隨時間調整，且本文所闡述之劑量範圍僅具例示性且不意欲限制所主張之組合物的範疇或實務。
本發明之醫藥組合物可以包括「治療有效量」或「預防有效量」的本發明抗體分子。「治療有效量「係指以必需的劑量及時間段有效達成所需治療結果之量。經修飾抗體或抗體片段之治療有效量可根據以下因素改變，諸如疾病狀態、個體之年齡、性別及體重，及抗體或抗體部分在個體中引發所要反應的能力。治療有效量亦為抗體分子之治療有益效應超過其任何毒性或有害效應的量。相對於未治療之個體，「治療有效劑量」較佳將可量測參數抑制至少約20%、更佳至少約40%、甚至更佳至少約60%，且仍更佳至少約80%。可量測參數可為例如腫瘤生長速率或病原體生長速率。抗體分子抑制可量測參數的能力可用預測針對相應人類疾病之功效的動物模型系統評估。或者，組合物之此特性可藉由利用熟習此項技術者已知之分析檢查化合物之抑制能力(諸如活體外抑制)來評估。
「預防有效量」係指以必要的劑量及時間段有效達成所要預防結果之量。典型地，由於預防劑量係在疾病之前或在疾病早期階段時用於個體，因此預防有效量小於治療有效量。
包含本文所述抗體分子之套組亦在本發明範疇內。套組可以包括一或多個其他元件，包括：使用說明書；其他試劑，例如標籤、治療劑，或適用於使抗體與標記或治療劑螯合或以其他方式偶合之藥劑，或防輻射組合物；用於製備供投與之抗體分子的裝置或其他物質；醫藥學上可接受之載劑；及用於投與個體的裝置或其他物質。
抗 CD73 抗體分子的用途 本文揭示之抗CD73抗體分子具有活體外及活體內診斷以及治療及預防效用。舉例而言，此等分子可以活體外或離體投與培養中之細胞，或投與個體，例如人類個體，以治療、預防及/或診斷多種病症，諸如癌症及感染性病症。
因此，在一個態樣中，本發明提供一種調節個體之免疫反應之方法，其包含向個體投與本文所述之抗體分子，從而調節個體之免疫反應。在一些實施例中，免疫反應經增強、刺激或上調。在一個實施例中，抗體分子藉由阻斷CD73來增強個體之免疫反應。
如本文所用，術語「個體」意欲包括人類及非人類動物。在一個實施例中，個體為人類個體，例如患有特徵為CD73功能異常之病症或病狀的人類患者。術語「非人類動物」包括哺乳動物及非哺乳動物，諸如非人類靈長類動物。在一個實施例中，個體為人類。在一個實施例中，個體為需要增強免疫反應之人類患者。在一個實施例中，個體為免疫功能不全，例如個體正經歷或已經歷化學療法或輻射療法。或者，或組合地，個體患有或處於因感染所致之免疫功能不全風險中。本文所述之方法及組合物適合於治療患有可藉由加強T細胞介導之免疫反應治療之病症的人類患者。舉例而言，本文所述之方法及組合物可增強多種免疫活性。在一個實施例中，個體的腫瘤浸潤T淋巴球(TIL)的數目或活性增加。
治療用途 癌症 在一個態樣中，本發明係關於使用抗CD73抗體分子活體內治療個體，以便抑制或減少癌變腫瘤生長。抗CD73抗體可以單獨使用以抑制癌變腫瘤生長。或者，抗CD73抗體可以與以下中之一或多者組合使用：標準照護療法(例如針對癌症)、另一種抗體分子、免疫調節劑(例如共刺激分子活化劑或共抑制分子抑制劑)；疫苗，例如治療癌症疫苗；或細胞療法之其他形式，如下文所述。
因此，在一個實施例中，本發明提供一種抑制個體之腫瘤細胞生長的方法，其包含向該個體投與治療有效量之本文所述抗CD73抗體分子。
在一個實施例中，該等方法適用於活體內治療癌症。為了使免疫達成抗原特異性增強，抗CD73抗體分子可以連同所關注之抗原一起投與。當針對CD73之抗體與一或多種藥劑組合投與時，該組合可依次或同時投與。
癌症類型 在另一態樣中，提供一種治療個體之方法，例如減少或改善個體之過度增生性病狀或病症(例如癌症)，例如實體腫瘤、血液癌症、軟組織腫瘤或轉移性病灶。方法包括將一或多種本文所述抗CD73抗體分子單獨或與其他藥劑或治療模式組合投與個體。
如本文所用，術語「癌症」意欲包括所有類型的癌變生長或致癌過程、轉移性組織或惡性轉型細胞、組織或器官，無論組織病理學類型或侵襲階段。癌變病症之實例包括(但不限於)實體腫瘤、血液癌症、軟組織腫瘤及轉移性病灶。實體腫瘤之實例包括各種器官系統之惡性疾病，例如肉瘤及癌瘤(包括腺癌及鱗狀細胞癌)，諸如影響肝臟、肺、乳房、淋巴、胃腸(例如結腸)、泌尿生殖道(例如腎、尿道上皮細胞)、前列腺及咽之彼等腫瘤。腺癌包括諸如大部分結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝癌、非小細胞肺癌、小腸癌及食道癌之惡性疾病。鱗狀細胞癌包括例如肺、食道、皮膚、頭頸區域、口腔、肛門及子宮頸之惡性疾病。在一個實施例中，癌症為黑色素瘤，例如晚期黑色素瘤。亦可使用本發明之方法及組合物治療或預防前述癌症之轉移性病灶。
可使用本文揭示之抗體分子抑制生長的例示性癌症包括典型地對免疫療法有反應之癌症。待治療之較佳癌症之非限制性實例包括黑色素瘤(例如轉移性惡性黑色素瘤)、腎癌(例如透明細胞癌瘤)、前列腺癌(例如激素難治性前列腺腺癌)、乳癌、結腸癌及肺癌(例如非小細胞肺癌)。另外，可以使用本文所述之抗體分子治療難治性或復發性惡性疾病。
可治療之其他癌症之實例包括骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭頸癌、皮膚或眼內惡性黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門癌、胃食道癌、胃癌、睪丸癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、梅克爾細胞癌(Merkel cell cancer)、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陽莖癌、慢性或急性白血病(包括急性骨髓白血病、慢性骨髓白血病、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病)、兒童實體腫瘤、淋巴球性淋巴瘤、膀胱癌、多發性骨髓瘤、骨髓增生異常症候群、腎癌或輸尿管癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)贅瘤、原發性CNS淋巴瘤、腫瘤血管生成、脊椎腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤、卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、表皮樣癌、鱗狀細胞癌、T細胞淋巴瘤、環境誘發之癌症，包括石棉誘發之癌症(例如間皮瘤)，及該等癌症之組合。
在一些實施例中，本文療法可以用於治療患有(或經鑑別患有)與感染(例如病毒或細菌感染)相關之癌症的患者。例示性癌症包括宮頸癌、肛門癌、HPV相關的頭頸部鱗狀細胞癌、HPV相關的食道乳頭狀瘤、HHV6相關的淋巴瘤、EBV相關的淋巴瘤(包括伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma))、胃MALT淋巴瘤、其他感染相關的MALT淋巴瘤、HCC及卡波西氏肉瘤。
在其他實施例中，癌症為血液惡性疾病或癌症，包括(但不限於)白血病或淋巴瘤。舉例而言，抗CD73抗體分子可以用於治療癌症及惡性疾病，包括(但不限於)例如急性白血病，包括(但不限於)例如B細胞急性淋巴白血病(「BALL」)、T細胞急性淋巴白血病(「TALL」)、急性淋巴白血病(ALL)；一或多種慢性白血病，包括(但不限於)例如慢性骨髓性白血病(CML)、慢性淋巴球性白血病(CLL)；其他血液癌症或血液病狀，包括(但不限於)例如B細胞前淋巴球性白血病、母細胞性漿細胞樣樹突狀細胞贅瘤、伯基特氏淋巴瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、毛細胞白血病、小細胞或大細胞濾泡性淋巴瘤、惡性淋巴組織增生性病狀、MALT淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、邊緣區淋巴瘤、多發性骨髓瘤、骨髓發育不良及骨髓發育不良症候群、非霍奇金淋巴瘤、漿母細胞淋巴瘤、漿細胞樣樹突狀細胞贅瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia)，及「白血病前驅症」，其為一組不同的血液學病狀聯合骨髓血細胞之低效產生(或發育不良)，及其類似者。
在一個實施例中，癌症係選自肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC)(例如具有鱗狀及/或非鱗狀組織學之NSCLC，或NSCLC腺癌))、黑色素瘤(例如晚期黑色素瘤)、腎癌(例如腎細胞癌，例如透明細胞腎細胞癌)、肝癌、骨髓瘤(例如多發性骨髓瘤)、前列腺癌、乳癌(例如不表現雌激素受體、孕酮受體或Her2/neu中之一者、兩者或全部之乳癌，例如三陰性乳癌)、結腸直腸癌(例如微衛星穩定(MSS)結腸直腸癌)、卵巢癌、胰臟癌、頭頸癌(例如頭頸部鱗狀細胞癌(HNSCC)、肛門癌、胃食道癌症、甲狀腺癌、宮頸癌、淋巴組織增生疾病(例如移植後淋巴組織增生疾病)或血液癌症、T細胞淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤，或白血病(例如骨髓白血病)。
在一個實施例中，癌症係選自肺癌(例如非小細胞肺癌)、胰臟癌(例如胰管腺癌)、乳癌(例如三陰性乳癌)、黑色素瘤、頭頸癌(例如鱗狀頭頸癌)、結腸直腸癌(例如微衛星穩定(MSS)結腸直腸癌)、卵巢癌，或腎癌(例如腎細胞癌)。
在一個實施例中，癌症係選自膀胱癌、白血病、淋巴瘤、神經膠質瘤、神經膠母細胞瘤、卵巢癌、甲狀腺癌、食道癌、前列腺癌、子宮/子宮頸癌、睪丸癌、食道癌、胃腸癌、結腸癌、腎癌、胃癌、生殖細胞癌、骨癌、肝癌、皮膚癌、中樞神經系統贅瘤、骨髓瘤、肉瘤，及病毒相關癌症。
抗 CD73 抗體分子之組合 抗CD73抗體分子可以與其他療法組合使用。舉例而言，組合療法可包括與一或多種其他治療劑(例如一或多種抗癌劑、細胞毒性劑或細胞生長抑制劑、激素療法、疫苗及/或其他免疫療法)共調配及/或共投與的本發明組合物。在其他實施例中，抗體分子與其他治療性治療模式(包括手術、輻射、冷凍手術及/或熱療法)組合投與。此類組合療法可以有利地利用較低之治療劑投與劑量，從而避免與各種單一療法相關之可能毒性或併發症。
「組合」並非意指療法或治療劑必須同時投與及/或調配成一起遞送，然此等遞送方法屬於本文所述之範疇內。抗CD73抗體分子可以與一或多種其他額外療法或治療劑同時投與、在其之前投與或在其之後投與。抗CD73抗體分子及其他藥劑或治療方案可依任何次序投與。一般而言，各藥劑將依針對該藥劑所確定的劑量及/或時程來投與。另外應瞭解，此組合中所用之其他治療劑可在單一組合物中一起投與或在不同組合物中分開投與。一般而言，預期組合中所用之其他治療劑的用量不超過其個別使用時的量。在一些實施例中，組合用量將低於個別使用量。
例示性腺苷A2A受體拮抗劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73分子係與腺苷A2A受體(A2AR)拮抗劑組合投與。例示性A2AR拮抗劑包括例如PBF509 (Palobiofarma/Novartis)、CPI444/V81444 (Corvus/Genentech)、AZD4635/HTL-1071 (AstraZeneca/Heptares)、韋帕迪蘭(Vipadenant)(Redox/Juno)、GBV-2034 (Globavir)、AB928 (Arcus Biosciences)、茶鹼(Theophylline)、伊曲茶鹼(Istradefylline)(Kyowa Hakko Kogyo)、托紮耐特(Tozadenant)/SYN-115 (Acorda)、KW-6356 (Kyowa Hakko Kogyo)、ST-4206 (Leadiant Biosciences)，及普雷迪南(Preladenant)/SCH 420814 (Merck/Schering)。
在某些實施例中，A2AR拮抗劑為PBF509。PBF509及其他A2AR拮抗劑揭示於US 8,796,284及WO 2017/025918中，該等文獻以全文引用之方式併入本文中。PBF509係指具有以下結構的5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺：
Figure 02_image001
。
在某些實施例中，A2AR拮抗劑為CPI444/V81444。CPI-444及其他A2AR拮抗劑揭示於WO 2009/156737中，該文獻以全文引用之方式併入本文中。在某些實施例中，A2AR拮抗劑為(S )-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。在某些實施例中，A2AR拮抗劑為(R )-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺，或其外消旋物。在某些實施例中，A2AR拮抗劑為7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。在某些實施例中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 02_image003
。
在某些實施例中，A2AR拮抗劑為AZD4635/HTL-1071。A2AR拮抗劑揭示於WO 2011/095625中，該文獻以全文引用之方式併入本文中。在某些實施例中，A2AR拮抗劑為6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺。在某些實施例中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 02_image005
。
在某些實施例中，A2AR拮抗劑為ST-4206 (Leadiant Biosciences)。在某些實施例中，A2AR拮抗劑為US 9,133,197中所述的A2AR拮抗劑，該文獻以全文引用之方式併入本文中。在某些實施例中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 02_image007
。
在某些實施例中，A2AR拮抗劑為US8114845、US9029393、US20170015758或US20160129108中所述的A2AR拮抗劑，該等文獻以全文引用之方式併入本文中。
在一些實施例中，A2AR拮抗劑為伊曲茶鹼(CAS登記號：155270-99-8)。伊曲茶鹼亦稱為KW-6002或8-[(E)-2-(3,4-二甲氧基苯基)乙烯基]-1,3-二乙基-7-甲基-3,7-二氫-1H-嘌呤-2,6-二酮。伊曲茶鹼揭示於例如LeWitt等人(2008)Annals of Neurology 63 (3): 295-302)中。
在某些實施例中，A2aR拮抗劑為托紮耐特(tozadenant)(Biotie)。托紮耐特亦稱為SYN115或4-羥基-N-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-甲基哌啶-1-甲醯胺。托紮耐特阻斷內源腺苷在A2a受體處之作用，從而增強多巴胺在D2受體處之作用且抑制麩胺酸鹽在mGluR5受體處之作用。在一些實施例中，A2aR拮抗劑為普雷迪南(preladenant)(CAS登記號：377727-87-2)。普雷迪南亦稱為SCH 420814或2-(2-呋喃基)-7-[2-[4-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-1-哌嗪基]乙基]7H-吡唑并[4,3-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-5-胺。作為藥物開發的普雷迪南充當腺苷A2A受體之有效及選擇性拮抗劑。
在某些實施例中，A2aR拮抗劑為維帕德南(vipadenan)。維帕德南亦稱為BIIB014、V2006或3-[(4-胺基-3-甲基苯基)甲基]-7-(呋喃-2-基)三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。
其他例示性A2aR拮抗劑包括例如ATL-444、MSX-3、SCH-58261、SCH-412,348、SCH-442,416、VER-6623、VER-6947、VER-7835、CGS-15943，或ZM-241,385。
在一些實施例中，A2aR拮抗劑為A2aR路徑拮抗劑(例如CD-73抑制劑，例如抗CD73抗體)，其為MEDI9447。MEDI9447為對CD73具有特異性之單株抗體。藉由CD73靶向腺苷之細胞外產生可降低腺苷之免疫抑制作用。據報導，MEDI9447具有多種活性，例如抑制CD73外核苷酸酶活性、緩解AMP介導之淋巴球抑制，及抑制同基因型腫瘤生長。MEDI9447可驅動腫瘤微環境內之骨髓與淋巴浸潤性白血球群體之變化。此等變化包括例如CD8效應細胞及活化巨噬細胞增加，以及骨髓源抑制細胞(MDSC)及調控性T淋巴球之比例降低。
例示性PD-1抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與PD-1抑制劑組合投與。PD-1抑制劑可為抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或寡肽。在一些實施例中，PD-1抑制劑係選自PDR001 (Novartis)、納武單抗(Nivolumab)(Bristol-Myers Squibb)、派立珠單抗(Pembrolizumab)(Merck & Co)、皮立珠單抗(Pidilizumab)(CureTech)、MEDI0680 (Medimmune)、REGN2810 (Regeneron)、TSR-042 (Tesaro)、PF-06801591 (Pfizer)、BGB-A317 (Beigene)、BGB-108 (Beigene)、INCSHR1210 (Incyte)或AMP-224 (Amplimmune)。
例示性抗 PD-1 抗體分子 在一個實施例中，PD-1抑制劑為抗PD-1抗體分子。在一個實施例中，PD-1抑制劑為如2015年7月30日公開之名稱為「Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof」之US 2015/0210769中所述的抗PD-1抗體分子，該案以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個互補決定區(CDR)(或總體而言所有的CDR)，其來自包含表5中所示之胺基酸序列(例如來自表5中所揭示之BAP049-純系-E或BAP049-純系-B的重鏈及輕鏈可變區序列)或由表5中所示之核苷酸序列編碼之胺基酸序列的重鏈及輕鏈可變區。在一些實施例中，CDR係根據Kabat定義(例如如表5中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Chothia定義(例如如表5中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Kabat與Chothia之CDR定義組合(例如如表5中所闡述)。在一個實施例中，VH CDR1之Kabat與Chothia CDR組合包含胺基酸序列GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 541)。在一個實施例中，相對於表5中所示或由表5中所示核苷酸序列編碼的胺基酸序列，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代(例如保守胺基酸取代)或缺失。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 501之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 502之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 503之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 510之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 511之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 512之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表5中。
在一個實施例中，抗體分子包含VH，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 524編碼的VHCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 525編碼的VHCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 526編碼的VHCDR3；及VL，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 529編碼的VLCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 530編碼的VLCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 531編碼的VLCDR3，其各自揭示於表5中。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含VH，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 506或與SEQ ID NO: 506具有至少約85%、90%、95%或99或更高%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含VL，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 520或與SEQ ID NO: 520具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含VL，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 516或與SEQ ID NO: 516具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 506之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 520之VL。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 506之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 516之VL。
在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 507或與SEQ ID NO: 507具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 521或517或與SEQ ID NO: 521或517具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 507編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 521或SEQ ID NO: 517編碼的VL。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 508或與SEQ ID NO: 508具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 522或與SEQ ID NO: 522具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 518或與SEQ ID NO: 518具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 508之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 522之輕鏈。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 508之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 518之輕鏈。
在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 509或與SEQ ID NO: 509具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 523或519或與SEQ ID NO: 523或519具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 509編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 523或519編碼的輕鏈。
本文所述之抗體分子可藉由US 2015/0210769中所述之載體、宿主細胞及方法製得，該案以全文引用之方式併入本文中。表 5 . 例示性抗PD-1抗體分子之胺基酸及核苷酸序列表5
Figure AA5
Figure AA5-1
Figure AA5-2
Figure AA5-3
Figure AA5-4
其他例示性 PD-1 抑制劑 在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為納武單抗(Bristol-Myers Squibb)，亦稱為MDX-1106、MDX-1106-04、ONO-4538、BMS-936558或OPDIVO®。納武單抗(純系5C4)及其他抗PD-1抗體揭示於US 8,008,449及WO 2006/121168中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含納武單抗之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表6所揭示。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為派立珠單抗(Merck & Co)，亦稱為拉立珠單抗(Lambrolizumab)、MK-3475、MK03475、SCH-900475或KEYTRUDA®。派立珠單抗及其他抗PD-1抗體揭示於Hamid, O.等人(2013)New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44、US 8,354,509及WO 2009/114335中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含派立珠單抗之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表6所揭示。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為皮立珠單抗(Pidilizumab)(CureTech)，亦稱為CT-011。皮立珠單抗及其他抗PD-1抗體揭示於Rosenblatt, J.等人(2011)J Immunotherapy 34(5): 409-18、US 7,695,715、US 7,332,582及US 8,686,119中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含皮立珠單抗之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表6所揭示。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為MEDI0680 (Medimmune)，亦稱為AMP-514。MEDI0680及其他抗PD-1抗體揭示於US 9,205,148及WO 2012/145493中，其以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含MEDI0680之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為REGN2810 (Regeneron)。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含REGN2810之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為PF-06801591 (Pfizer)。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含PF-06801591之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為BGB-A317或BGB-108 (Beigene)。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含BGB-A317或BGB-108之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為INCSHR1210 (Incyte)，亦稱為INCSHR01210或SHR-1210。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含INCSHR1210之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗PD-1抗體分子為TSR-042 (Tesaro)，亦稱為ANB011。在一個實施例中，抗PD-1抗體分子包含TSR-042之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知抗PD-1抗體包括例如以下文獻中所述之彼等抗體：WO 2015/112800、WO 2016/092419、WO 2015/085847、WO 2014/179664、WO 2014/194302、WO 2014/209804、WO 2015/200119、US 8,735,553、US 7,488,802、US 8,927,697、US 8,993,731及US 9,102,727，該等文獻以全文引用之方式併入。
在一個實施例中，抗PD-1抗體為與本文所述之抗PD-1抗體之一競爭結合PD-1且/或與本文所述之抗PD-1抗體之一結合至PD-1上之相同抗原決定基的抗體。
在一個實施例中，PD-1抑制劑為一種抑制PD-1信號傳導路徑的肽，例如如US 8,907,053中所述，該文獻以全文引用的方式併入本文中。在一個實施例中，PD-1抑制劑為與恆定區(例如免疫球蛋白序列之Fc區)融合之免疫黏附素(例如包含PD-L1或PD-L2之細胞外或PD-1結合部分的免疫黏附素)。在一個實施例中，PD-1抑制劑為AMP-224 (B7-DCIg (Amplimmune)，例如如WO 2010/027827及WO 2011/066342中揭示，其以全文引用之方式併入)。表 6 . 其他例示性抗PD-1抗體分子之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0005
Figure 107121595-A0304-0005-1
例示性PD-L1抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與PD-1抑制劑組合投與。PD-L1抑制劑可為抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或寡肽。在一些實施例中，PD-L1抑制劑係選自FAZ053 (Novartis)、阿特珠單抗(Atezolizumab)(Atezolizumab) (Genentech/Roche)、阿維魯單抗(Avelumab)(Merck Serono及Pfizer)、德瓦魯單抗(Durvalumab) (MedImmune/AstraZeneca)或BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb)。
例示性抗 PD-L1 抗體分子 在一個實施例中，PD-L1抑制劑為抗PD-L1抗體分子。在一個實施例中，PD-L1抑制劑為如2016年4月21日公開之名稱為「Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof」之US 2016/0108123中所揭示的抗PD-L1抗體分子，該案以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個互補決定區(CDR)(或總體而言所有的CDR)，其來自包含表7中所示之胺基酸序列(例如來自表7中所揭示之BAP058-純系O或BAP058-純系N之重鏈及輕鏈可變區序列)或由表7中所示之核苷酸序列編碼之胺基酸序列的重鏈及輕鏈可變區。在一些實施例中，CDR係根據Kabat定義(例如如表7中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Chothia定義(例如如表7中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Kabat與Chothia之CDR定義組合(例如如表7中所闡述)。在一個實施例中，VH CDR1之Kabat與Chothia CDR組合包含胺基酸序列GYTFTSYWMY (SEQ ID NO: 647)。在一個實施例中，相對於表7中所示或由表7中所示核苷酸序列編碼的胺基酸序列，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代(例如保守胺基酸取代)或缺失。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 601之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 602之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 603之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 609之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 610之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 611之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表7中。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含VH，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 628編碼的VHCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 629編碼的VHCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 630編碼的VHCDR3；及VL，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 633編碼的VLCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 634編碼的VLCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 635編碼的VLCDR3，其各自揭示於表7中。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 606或與SEQ ID NO: 606具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 616或與SEQ ID NO: 616具有至少約85%、90%、95%或99%或更高序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 620或與SEQ ID NO: 620具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 624或與SEQ ID NO: 624具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 606之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 616之VL。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 620之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 624之VL。
在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 607或與SEQ ID NO: 607具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 617或與SEQ ID NO: 617具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 621或與SEQ ID NO: 621具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 625或與SEQ ID NO: 625具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 607編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 617編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 621編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 625編碼的VL。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 608或與SEQ ID NO: 608具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 618或與SEQ ID NO: 618具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 622或與SEQ ID NO: 622具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 626或與SEQ ID NO: 626具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 608之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 618之輕鏈。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 622之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 626之輕鏈。
在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 615或與SEQ ID NO: 615具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 619或與SEQ ID NO: 619具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 623或與SEQ ID NO: 623具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 627或與SEQ ID NO: 627具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 615編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 619編碼的輕鏈。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 623編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 627編碼的輕鏈。
本文所述之抗體分子可藉由US 2016/0108123中所述之載體、宿主細胞及方法製得，該案以全文引用之方式併入本文中。表 7 . 例示性抗PD-L1抗體分子之胺基酸及核苷酸序列表7
Figure AA7
Figure AA7-1
Figure AA7-2
Figure AA7-3
Figure AA7-4
Figure AA7-5
其他例示性 PD-L1 抑制劑 在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子為阿特珠單抗(Genentech/Roche)，亦稱為MPDL3280A、RG7446、RO5541267、YW243.55.S70或TECENTRIQ™。阿特珠單抗及其他抗PD-L1抗體揭示於US 8,217,149中，該案以全文引用之方式併入本文中。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含阿特珠單抗之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表8所揭示。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子為阿維魯單抗(Merck Serono及Pfizer)，亦稱為MSB0010718C。阿維魯單抗及其他抗PD-L1抗體揭示於WO 2013/079174中，該案以全文引用之方式併入本文中。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含阿維魯單抗之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表8所揭示。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子為德瓦魯單抗(MedImmune/AstraZeneca)，亦稱為MEDI4736。德瓦魯單抗及其他抗PD-L1抗體揭示於US 8,779,108中，該案以全文引用之方式併入本文中。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含德瓦魯單抗之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表8所揭示。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子為BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb)，亦稱為MDX-1105或12A4。BMS-936559及其他抗PD-L1抗體揭示於US 7,943,743及WO 2015/081158中，其以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗PD-L1抗體分子包含BMS-936559之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表8所揭示。
其他已知抗PD-L1抗體包括以下文獻中所述的彼等抗體：例如WO 2015/181342、WO 2014/100079、WO 2016/000619、WO 2014/022758、WO 2014/055897、WO 2015/061668、WO 2013/079174、WO 2012/145493、WO 2015/112805、WO 2015/109124、WO 2015/195163、US 8,168,179、US 8,552,154、US 8,460,927及US 9,175,082，該等文獻以全文引用之方式併入。
在一個實施例中，抗PD-L1抗體為與本文所述之抗PD-L1抗體之一競爭結合PD-L1且/或與本文所述之抗PD-L1抗體之一結合至PD-L1上之相同抗原決定基的抗體。表 8 . 其他例示性抗PD-L1抗體分子之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0006
Figure 107121595-A0304-0006-1
例示性LAG-3抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73分子與此項技術中已知的LAG-3抑制劑組合投與。LAG-3抑制劑可為抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或寡肽。在一些實施例中，LAG-3抑制劑係選自LAG525 (Novartis)、BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb)、TSR-033 (Tesaro)、MK-4280 (Merck & Co)，或REGN3767 (Regeneron)。
例示性抗 LAG-3 抗體分子 在一個實施例中，LAG-3抑制劑為抗LAG-3抗體分子。在一個實施例中，LAG-3抑制劑為如2015年9月17日公開之名稱為「Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof」之US 2015/0259420中所揭示之抗LAG-3抗體分子，該案以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個互補決定區(CDR)(或總體而言所有的CDR)，其來自包含表9中所示之胺基酸序列(例如來自表9中所揭示之BAP050-純系I或BAP050-純系J之重鏈及輕鏈可變區序列)或由表9中所示核苷酸序列編碼之胺基酸序列的重鏈及輕鏈可變區。在一些實施例中，CDR係根據Kabat定義(例如如表9中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Chothia定義(例如如表5中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Kabat與Chothia之CDR定義組合(例如如表9中所闡述)。在一個實施例中，VH CDR1之Kabat與Chothia CDR組合包含胺基酸序列GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 766)。在一個實施例中，相對於表9中所示或由表9中所示核苷酸序列編碼的胺基酸序列，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代(例如保守胺基酸取代)或缺失。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 701之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 702之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 703之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 710之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 711之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 712之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表9中。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含VH，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 736或737編碼的VHCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 738或739編碼的VHCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 740或741編碼的VHCDR3；及VL，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 746或747編碼的VLCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 748或749編碼的VLCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 750或751編碼的VLCDR3，其各自揭示於表9中。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含VH，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 758或737編碼的VHCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 759或739編碼的VHCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 760或741編碼的VHCDR3；及VL，其包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 746或747編碼的VLCDR1、由核苷酸序列SEQ ID NO: 748或749編碼的VLCDR2及由核苷酸序列SEQ ID NO: 750或751編碼的VLCDR3，其各自揭示於表9中。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 706或與SEQ ID NO: 706具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 718或與SEQ ID NO: 718具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 724或與SEQ ID NO: 724至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 730或與SEQ ID NO: 730具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 706之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 718之VL。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 724之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 730之VL。
在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 707或708或與SEQ ID NO: 707或708具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 719或720或與SEQ ID NO: 719或720具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 725或726或與SEQ ID NO: 725或726具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 731或732或與SEQ ID NO: 731或732具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 707或708編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 719或720編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 725或726編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 731或732編碼的VL。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 709或與SEQ ID NO: 709具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 721或與SEQ ID NO: 721具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 727或與SEQ ID NO: 727具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 733或與SEQ ID NO: 733具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 709之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 721之輕鏈。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 727之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 733之輕鏈。
在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 716或717或與SEQ ID NO: 716或717具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 722或723或與SEQ ID NO: 722或723具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 728或729或與SEQ ID NO: 728或729具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 734或735或與SEQ ID NO: 734或735具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 716或717編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 722或723編碼的輕鏈。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 728或729編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 734或735編碼的輕鏈。
本文所述之抗體分子可藉由US 2015/0259420中所述之載體、宿主細胞及方法製得，該案以全文引用之方式併入本文中。表 9 . 例示性抗LAG-3抗體分子之胺基酸及核苷酸序列表9
Figure AA9
Figure AA9-1
Figure AA9-2
Figure AA9-3
Figure AA9-4
Figure AA9-5
Figure AA9-6
Figure AA9-7
Figure AA9-8
其他例示性 LAG-3 抑制劑 在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子為BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb)，亦稱為BMS986016。BMS-986016及其他抗LAG-3抗體揭示於WO 2015/116539及US 9,505,839中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含BMS-986016之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表10所揭示。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子為TSR-033 (Tesaro)。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含TSR-033之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子為MK-4280 (Merck & Co)。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含MK-4280之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子為REGN3767 (Regeneron)。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含REGN3767之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子為IMP731或GSK2831781 (GSK及Prima BioMed)。IMP731及其他抗LAG-3抗體揭示於WO 2008/132601及US 9,244,059中，其以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含IMP731之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表10中所揭示。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含GSK2831781之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子為IMP761 (Prima BioMed)。在一個實施例中，抗LAG-3抗體分子包含IMP761之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知抗LAG-3抗體包括以下文獻中所述的彼等抗體：例如WO 2008/132601、WO 2010/019570、WO 2014/140180、WO 2015/116539、WO 2015/200119、WO 2016/028672、US 9,244,059、US 9,505,839，該等文獻以全文引用之方式併入。
在一個實施例中，抗LAG-3抗體為與本文所述之抗LAG-3抗體之一競爭結合LAG-3且/或與本文所述之抗LAG-3抗體之一結合至LAG-3上之相同抗原決定基的抗體。
在一個實施例中，抗LAG-3抑制劑為可溶性LAG-3蛋白質，例如IMP321 (Prima BioMed)，例如如WO 2009/044273中所揭示，該案以全文引用之方式併入本文中。表 10 . 其他例示性抗LAG-3抗體分子之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0007
例示性TIM-3抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與TIM-3抑制劑組合投與。TIM-3抑制劑可為抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或寡肽。在一些實施例中，TIM-3抑制劑係選自MGB453 (Novartis)、TSR-022 (Tesaro)或LY3321367 (Eli Lilly)。
例示性抗 TIM-3 抗體分子 在一個實施例中，TIM-3抑制劑為抗TIM-3抗體分子。在一個實施例中，TIM-3抑制劑為如2015年8月6日公開之名稱為「Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof」之US 2015/0218274中所揭示的抗TIM-3抗體分子，該案以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個互補決定區(CDR)(或總體而言所有的CDR)，其來自包含表11中所示之胺基酸序列(例如來自表11中所揭示之ABTIM3-hum11或ABTIM3-hum03之重鏈及輕鏈可變區序列)或由表11中所示核苷酸序列編碼之胺基酸序列的重鏈及輕鏈可變區。在一些實施例中，CDR係根據Kabat定義(例如如表11所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Chothia定義(例如如表11中所闡述)。在一個實施例中，相對於表11中所示的胺基酸序列或由表11中所示核苷酸序列編碼的胺基酸序列，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代(例如保守胺基酸取代)或缺失。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 801之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 802之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 803之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 810之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 811之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 812之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表11中。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 801之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 820之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 803之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 810之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 811之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 812之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表11中。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 806或與SEQ ID NO: 806具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 816或與SEQ ID NO: 816具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 822或與SEQ ID NO: 822具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 826或與SEQ ID NO: 826具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 806之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 816之VL。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 822之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 826之VL。
在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 807或與SEQ ID NO: 807具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 817或與SEQ ID NO: 817具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 823或與SEQ ID NO: 823具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VH。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 827或與SEQ ID NO: 827具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性之核苷酸序列編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 807編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 817編碼的VL。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 823編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 827編碼的VL。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 808或與SEQ ID NO: 808具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 818或與SEQ ID NO: 818具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 824或與SEQ ID NO: 824具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 828或與SEQ ID NO: 828具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 808之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 818之輕鏈。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 824之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 828之輕鏈。
在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 809或與SEQ ID NO: 809具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 819或與SEQ ID NO: 819具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 825或與SEQ ID NO: 825具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 829或與SEQ ID NO: 829具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 809編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 819編碼的輕鏈。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 825編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 829編碼的輕鏈。
本文所述之抗體分子可藉由US 2015/0218274中所述之載體、宿主細胞及方法製得，該案以全文引用之方式併入本文中。表 11 . 例示性抗TIM-3抗體分子之胺基酸及核苷酸序列表11
Figure AA11
Figure AA11-1
Figure AA11-2
Figure AA11-3
Figure AA11-4
其他例示性 TIM-3 抑制劑 在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子為TSR-022 (AnaptysBio/Tesaro)。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含TSR-022之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含APE5137或APE5121之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表12中所揭示。APE5137、APE5121及其他抗TIM-3抗體揭示於WO 2016/161270中，該案以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子為LY3321367 (Eli Lilly)。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含LY3321367之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子為抗體純系F38-2E2。在一個實施例中，抗TIM-3抗體分子包含F38-2E2之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知抗TIM-3抗體包括以下文獻中所述的彼等抗體：例如WO 2016/111947、WO 2016/071448、WO 2016/144803、US 8,552,156、US 8,841,418及US 9,163,087，該等文獻以全文引用之方式併入。
在一個實施例中，抗TIM-3抗體為與本文所述之抗TIM-3抗體之一競爭結合TIM-3且/或與本文所述之抗TIM-3抗體之一結合至TIM-3上之相同抗原決定基的抗體。表 12 . 其他例示性抗TIM-3抗體分子之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0008
例示性CTLA-4抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與CTLA-4抑制劑組合投與。CTLA-4抑制劑可為抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或寡肽。在一些實施例中，CTLA-4抑制劑為伊匹單抗(Ipilimumab)(Yervoy® , Bristol-Myers Squibb)或曲美單抗(Tremelimumab)(Pfizer)。抗體伊匹單抗及其他抗CTLA-4抗體揭示於US 6,984,720中，該文獻以引用的方式併入本文中。抗體曲美單抗及其他抗CTLA-4抗體揭示於US 7,411,057中，該文獻以引用的方式併入本文中。
例示性GITR促效劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與GITR促效劑組合投與。GITR促效劑可為抗體、其抗原結合片段、免疫黏附素、融合蛋白或寡肽。在一些實施例中，GITR促效劑為GWN323 (Novartis)、BMS-986156 (BMS)、MK-4166或MK-1248 (Merck)、TRX518 (Leap Therapeutics)、INCAGN1876 (Incyte/Agenus)、AMG 228 (Amgen)或INBRX-110 (Inhibrx)。
例示性抗 GITR 抗體分子 在一個實施例中，GITR促效劑為抗GITR抗體分子。在一個實施例中，GITR促效劑為如2016年4月14日公開之名稱為「Compositions and Methods of Use for Augmented Immune Response and Cancer Therapy」之WO 2016/057846中所述的抗GITR抗體分子，該案以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個互補決定區(CDR)(或總體而言所有的CDR)，其來自包含表13中所示之胺基酸序列(例如來自表13中所揭示之MAB7的重鏈及輕鏈可變區序列)或由表13中所示核苷酸序列編碼之胺基酸序列的重鏈及輕鏈可變區。在一些實施例中，CDR係根據Kabat定義(例如如表13中所闡述)。在一些實施例中，CDR係根據Chothia定義(例如如表13中所闡述)。在一個實施例中，相對於表13中所示的胺基酸序列或由表13中所示核苷酸序列編碼的胺基酸序列，一或多個CDR (或總體而言所有的CDR)具有一個、兩個、三個、四個、五個、六個或超過六個變化，例如胺基酸取代(例如保守胺基酸取代)或缺失。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含：重鏈可變區(VH)，其包含SEQ ID NO: 909之VHCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 911之VHCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 913之VHCDR3胺基酸序列；及輕鏈可變區(VL)，其包含SEQ ID NO: 914之VLCDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 916之VLCDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 918之VLCDR3胺基酸序列，其各自揭示於表13中。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含VH，該VH包含胺基酸序列SEQ ID NO: 901或與SEQ ID NO: 901至少85%、90%、95%或99%一致的胺基酸序列。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含VL，該VL包含胺基酸序列SEQ ID NO: 902或與SEQ ID NO: 902至少85%、90%、95%或99%一致或高於99%一致的胺基酸序列。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 901之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 902之VL。
在一個實施例中，抗體分子包含VH，該VH由核苷酸序列SEQ ID NO: 905或與SEQ ID NO: 905至少85%、90%、95%或99%一致或高於99%一致的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含VL，該VL由核苷酸序列SEQ ID NO: 906或與SEQ ID NO: 906至少85%、90%、95%或99%一致或高於99%一致的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 905編碼的VH及由核苷酸序列SEQ ID NO: 906編碼的VL。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含重鏈，該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 903或與SEQ ID NO: 903至少85%、90%、95%或99%一致或高於99%一致的胺基酸序列。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含輕鏈，該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 904或與SEQ ID NO: 904至少85%、90%、95%或99%一致或高於99%一致的胺基酸序列。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 903之重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 904之輕鏈。
在一個實施例中，抗體分子包含重鏈，該重鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 907或與SEQ ID NO: 907至少85%、90%、95%或99%一致或高於99%一致的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含輕鏈，該輕鏈由核苷酸序列SEQ ID NO: 908或與SEQ ID NO: 908至少85%、90%、95%或99%或高於99%一致的核苷酸序列編碼。在一個實施例中，抗體分子包含由核苷酸序列SEQ ID NO: 907編碼的重鏈及由核苷酸序列SEQ ID NO: 908編碼的輕鏈。
本文所述之抗體分子可藉由WO 2016/057846中所述之載體、宿主細胞及方法製得，該案以全文引用之方式併入本文中。表 13. 例示性抗GITR抗體分子之胺基酸及核苷酸序列表13
Figure AA13
Figure AA13-1
Figure AA13-2
其他例示性 GITR 促效劑 在一個實施例中，抗GITR抗體分子為BMS-986156 (Bristol-Myers Squibb)，其亦稱為BMS 986156或BMS986156。BMS-986156及其他抗GITR抗體揭示於例如US 9,228,016及WO 2016/196792中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含BMS-986156之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，例如如表14所揭示。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子為MK-4166或MK-1248 (Merck)。MK-4166、MK-1248及其他抗GITR抗體揭示於例如US 8,709,424、WO 2011/028683、WO 2015/026684及Mahne等人,Cancer Res. 2017; 77(5):1108-1118中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含MK-4166或MK-1248之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子為TRX518 (Leap Therapeutics)。TRX518及其他抗GITR抗體揭示於例如US 7,812,135、US 8,388,967、US 9,028,823、WO 2006/105021及Ponte J等人(2010)Clinical Immunology ; 135:S96中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含TRX518之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子為INCAGN1876 (Incyte/Agenus)。INCAGN1876及其他抗GITR抗體揭示於例如US 2015/0368349及WO 2015/184099中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含INCAGN1876之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子為AMG 228 (Amgen)。AMG 228及其他抗GITR抗體揭示於例如US 9,464,139及WO 2015/031667中，其以全文引用之方式併入。在一個實施例中，抗GITR抗體分子包含AMG 228之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，抗GITR抗體分子為INBRX-110 (Inhibrx)。INBRX-110及其他抗GITR抗體揭示於例如US 2017/0022284及WO 2017/015623中，其以全文引用之方式併入。在一個實施例中，GITR促效劑包含INBRX-110之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施例中，GITR促效劑(例如融合蛋白)為MEDI 1873 (MedImmune)，亦稱為MEDI1873。MEDI 1873及其他GITR促效劑揭示於例如US 2017/0073386、WO 2017/025610及Ross等人,Cancer Res 2016; 76(14增刊): Abstract nr 561中，其以全文引用之方式併入。在一個實施例中，GITR促效劑包含MEDI 1873之糖皮質激素誘導TNF受體配位體(GITRL)之IgG Fc域、多聚化功能域及受體結合域中之一或多者。
其他已知GITR促效劑(例如抗GITR抗體)包括例如WO 2016/054638中所述之促效劑，其以全文引用之方式併入。
在一個實施例中，抗GITR抗體為與本文所述之抗GITR抗體之一競爭結合GITR且/或結合至GITR上之相同抗原決定基的抗體。
在一個實施例中，GITR促效劑為活化GITR信號傳導路徑之肽。在一個實施例中，GITR促效劑為與恆定區(例如免疫球蛋白序列之Fc區)融合之免疫黏附素結合片段(例如包含GITRL之細胞外或GITR結合部分的免疫黏附素結合片段)。表 14 . 其他例示性抗GITR抗體分子之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0009
例示性抗CD3多特異性抗體分子 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與抗CD3多特異性抗體分子(例如抗CD3雙特異性抗體分子)組合投與。在一個實施例中，抗CD3多特異性抗體分子結合至CD3及標靶腫瘤抗原(TTA)。在一個實施例中，TTA係選自CD19、CD20、CD38或CD123。在一個實施例中，抗CD3多特異性抗體分子所呈形式揭示於WO 2016/182751之圖1A、1B、1C及125中，該文獻以全文引用之方式併入本文中。
在一個實施例中，抗CD3多特異性抗體分子為抗CD3 x 抗CD123雙特異性抗體分子，例如XENP14045 (例如如表15中所闡述)，或WO 2016/086189或WO 2016/182751中所揭示的抗CD3 x 抗CD123雙特異性抗體分子，該等文獻以全文引用之方式併入本文中。在一個實施例中，抗CD3 x 抗CD123雙特異性抗體分子包含XENP14045之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，或與其基本上一致的胺基酸序列(例如與其具有至少約85%、90%或95%序列一致性的序列)。
在一個實施例中，抗CD3多特異性抗體為抗CD3 x 抗CD20雙特異性抗體分子，例如XENP13676 (例如如表15中所闡述)，或WO 2016/086189或WO 2016/182751中所揭示的抗CD3 x 抗CD20雙特異性抗體分子，該等文獻以全文引用之方式併入本文中。在一個實施例中，抗CD3 x 抗CD20雙特異性抗體分子包含XENP13676之一或多個CDR序列(或總體而言所有的CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列，或與其基本上一致的胺基酸序列(例如與其具有至少約85%、90%或95%序列一致性的序列)。表 15. 例示性抗CD3雙特異性抗體分子之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0010
Figure 107121595-A0304-0010-1
例示性IL15/IL-15Ra複合物 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與IL-15/IL-15Ra複合物組合投與。在一些實施例中，IL-15/IL-15Ra複合物係選自NIZ985 (Novartis)、ATL-803 (Altor)或CYP0150 (Cytune)。
例示性 IL-15/IL-15Ra 複合物 在一個實施例中，IL-15/IL-15Ra複合物包含與可溶形式之人類IL-15Ra複合的人類IL-15。複合物可以包含與可溶形式之IL-15Ra共價或非共價結合的IL-15。在一個特定實施例中，人類IL-15非共價結合至可溶形式之IL-15Ra。在一個特定實施例中，如WO 2014/066527中所述，組合物中之人類IL-15包含表16中之胺基酸序列SEQ ID NO: 183且可溶形式之人類IL-15Ra包含表16中之胺基酸序列SEQ ID NO: 184，該文獻以全文引用的方式併入本文中。本文所述之分子可藉由WO 2007/084342中所述之載體、宿主細胞及方法製得，該案以全文引用之方式併入本文中。表 16 . 例示性IL-15/IL-15Ra複合物之胺基酸及核苷酸序列
Figure 107121595-A0304-0011
其他例示性 IL-15/IL-15Ra 複合物 在一個實施例中，IL-15/IL-15Ra複合物為ALT-803，一種IL-15/IL-15Ra Fc融合蛋白(IL-15N72D:IL-15RaSu/Fc可溶性複合物)。ALT-803揭示於WO 2008/143794中，該文獻以全文引用的方式併入本文中。在一個實施例中，IL-15/IL-15Ra Fc融合蛋白包含如表17中所揭示之序列。
在一個實施例中，IL-15/IL-15Ra複合物包含與IL-15Ra之壽司域(sushi domain)融合的IL-15 (CYP0150, Cytune)。IL-15Ra之壽司域係指始於IL-15Ra信號肽之後之第一半胱胺酸殘基且終止於該信號肽之後之第四半胱胺酸殘基的結構域。IL-15與IL-15Ra之壽司域融合的複合物描述於WO 2007/04606及WO 2012/175222中，該等文獻以全文引用之方式併入。在一個實施例中，IL-15/IL-15Ra壽司域融合包含如表17中所揭示之序列。表 17 . 其他例示性IL-15/IL-15Ra複合物之胺基酸序列
Figure 107121595-A0304-0012
Figure 107121595-A0304-0012-1
例示性STING促效劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與STING促效劑組合投與。在一些實施例中，該組合用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如乳癌、鱗狀細胞癌、黑色素瘤、卵巢癌、輸卵管癌、腹膜癌、軟組織肉瘤、食道癌、頭頸癌、子宮內膜癌、子宮頸癌或基底細胞癌)，例如血液惡性疾病(例如白血病(例如慢性淋巴球性白血病(CLL)，或淋巴瘤(例如邊緣區B細胞淋巴瘤、小淋巴球性淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤))。在一些實施例中，癌症係選自頭頸癌(例如頭頸部鱗狀細胞癌(HNSCC)、皮膚癌(例如黑色素瘤)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC))，或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在一些實施例中，STING促效劑為環狀二核苷酸，例如包含嘌呤或嘧啶核鹼基(例如腺苷、鳥嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶或胞嘧啶核鹼基)之環狀二核苷酸。在一些實施例中，環狀二核苷酸之核鹼基包含相同核鹼基或不同核鹼基。
在一些實施例中，STING促效劑包含腺苷或鳥苷核鹼基。在一些實施例中，STING促效劑包含一個腺苷核鹼基及一個鳥苷核鹼基。在一些實施例中，STING促效劑包含兩個腺苷核鹼基或兩個鳥苷核鹼基。
在一些實施例中，STING促效劑包含經修飾之環狀二核苷酸，例如包含經修飾之核鹼基、經修飾之核糖或經修飾之磷酸酯鍵聯。在一些實施例中，經修飾之環狀二核苷酸包含經修飾之磷酸酯鍵聯，例如硫代磷酸酯。
在一些實施例中，STING促效劑包含具有2',5'或3',5'磷酸酯鍵聯之環狀二核苷酸(例如經修飾之環狀二核苷酸)。在一些實施例中，STING促效劑包含圍繞磷酸酯鍵聯呈Rp或Sp立體化學構型的環狀二核苷酸(例如經修飾之環狀二核苷酸)。
在一些實施例中，STING促效劑為Rp,Rp二硫基2',3'c-二-AMP (例如Rp,Rp-二硫基c-[A(2',5')pA(3',5')p])，或其環狀二核苷酸類似物。在一些實施例中，STING促效劑為美國專利公開案第US2015/0056224號中所描繪之化合物(例如圖2C中之化合物，例如化合物21或化合物22)。在一些實施例中，STING促效劑為c-[G(2',5')pG(3',5')p]、二硫基核糖O-經取代之其衍生物，或PCT公開案第WO 2014/189805及WO 2014/189806號之圖4中描繪之化合物。在一些實施例中，STING促效劑為c-[A(2',5')pA(3',5')p]或二硫基核糖O-經取代之其衍生物，或為PCT公開案第WO 2014/189805號及第WO 2014/189806號之圖5中描繪之化合物。在一些實施例中，STING促效劑為c-[G(2',5')pA(3',5')p]或二硫基核糖O-經取代之其衍生物，或為PCT公開案第WO 2014/189805號及第WO 2014/189806號之圖5中描繪之化合物。在一些實施例中，STING促效劑為2'-O-炔丙基-環狀[A(2',5')pA(3',5')p](2'-O-炔丙基-ML-CDA)，或PCT公開案第WO 2014/189806號之圖7中描繪之化合物。
其他例示性STING促效劑揭示於例如PCT公開案第WO 2014/189805號及第WO 2014/189806號以及美國公開案第2015/0056225號中。
例示性CSF-1/1R結合劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與CSF-1/1R結合劑組合投與。在一些實施例中，該組合用於治療癌症，例如本文中所述之癌症，例如實體腫瘤(例如前列腺癌、乳癌或色素沉著絨毛結節性滑膜炎(PVNS))。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑為巨噬細胞群落刺激因子(M-CSF)之抑制劑。M-CSF有時亦稱為CSF-1。
在另一實施例中，CSF-1/1R結合劑為CSF-1R酪胺酸激酶抑制劑4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)，或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物。在一些實施例中，癌症係選自腦癌(例如多形性神經膠母細胞瘤(GBM))、胰臟癌，或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑(例如CSF-1R酪胺酸激酶抑制劑) 4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物係與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與。
在某些實施例中，CSF-1/1R結合劑(例如CSF-1R酪胺酸激酶抑制劑) 4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物係與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與以治療癌症，例如實體腫瘤(例如晚期實體腫瘤)，例如腦癌(例如多形性神經膠母細胞瘤(GBM)，例如復發性神經膠母細胞瘤)、乳癌(例如三陰性乳癌(例如NTBC))，或胰臟癌(例如晚期胰臟癌)。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑為M-CSF抑制劑化合物A33，或PCT公開案第WO 2004/045532號或PCT公開案第WO 2005/068503號中所揭示之針對CSF-1之結合劑，包括RX1或5H4 (例如針對M-CSF之抗體分子或Fab片段)。在一些實施例中，癌症係選自子宮內膜癌、皮膚癌(例如黑色素瘤)、胰臟癌或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑為CSF1R抑制劑或4-(2-((1R,2R)-2-羥基環己基胺基)苯并噻唑-6-基氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺。4-(2-((1R,2R)-2-羥基環己基胺基)苯并噻唑-6-基氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺揭示於PCT公開案第WO 2007/121484號之第117頁之實例157中。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑為派西尼布(pexidartinib)(CAS登記號1029044-16-3)。派西尼布亦稱為PLX3397或5-((5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)甲基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)吡啶-2-胺。派西尼布為KIT、CSF1R及FLT3之小分子受體酪胺酸激酶(RTK)抑制劑。在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑(例如派西尼布)與CD73抑制劑(例如本文所述之抗CD73抗體分子)組合使用。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑為艾瑪圖單抗(emactuzumab)。艾瑪圖單抗亦稱為RG7155或RO5509554。艾瑪圖單抗為靶向CSF1R之人類化IgG1 mAb。在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑(例如派西尼布)與CD73抑制劑(例如本文所述之抗CD73抗體分子)組合使用。
在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑為FPA008。FPA008為抑制CSF1R之人類化mAb。在一些實施例中，CSF-1/1R結合劑(例如FPA008)與CD73抑制劑(例如本文所述之抗CD73抗體分子)組合使用。
例示性IDO/TDO抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)及/或色胺酸2,3-雙加氧酶(TDO)之抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如黑色素瘤、非小細胞肺癌、結腸癌、頭頸部鱗狀細胞癌、卵巢癌、腹膜癌、輸卵管癌、乳癌(例如轉移性或HER2陰性乳癌))，例如血液惡性疾病(例如淋巴瘤，例如非霍奇金氏淋巴瘤或霍奇金氏淋巴瘤(例如彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)))。
在一些實施例中，IDO/TDO抑制劑係選自(4E)-4-[(3-氯-4-氟苯胺基)-亞硝基亞甲基]-1,2,5-噁二唑-3-胺(亦稱為INCB24360)、因多莫得(indoximod)(1-甲基-D-色胺酸)，或α-環己基-5H-咪唑并[5,1-a]異吲哚-5-乙醇(亦稱為NLG919)。
在一些實施例中，IDO/TDO抑制劑為艾帕斯塔(epacadostat)(CAS登記號：1204669-58-8)。艾帕斯塔亦稱為INCB24360或INCB024360 (Incyte)。艾帕斯塔為強效及選擇性吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO1)抑制劑，其IC50為10 nM，與其他相關酶(諸如IDO2或色胺酸2,3-雙加氧酶(TDO))相比具有高選擇性。
在一些實施例中，IDO/TDO抑制劑為因多莫得(New Link Genetics)。因多莫得(1-甲基-色胺酸之D異構體)為經口投與之小分子吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)路徑抑制劑，其干擾腫瘤藉以逃避免疫介導之摧毀的機制。
在一些實施例中，IDO/TDO抑制劑為NLG919 (New Link Genetics)。NLG919為強效IDO (吲哚胺-(2,3)-二加氧酶)路徑抑制劑，其在無細胞分析中具有7 nM/75 nM之Ki/EC50。
在一些實施例中，IDO/TDO抑制劑為F001287 (Flexus/BMS)。F001287為吲哚胺2,3-二加氧酶1 (IDO1)之小分子抑制劑。
例示性TGF-β抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與轉型生長因子β (TGF-β)抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如腦癌(例如神經膠質瘤)、黑色素瘤、腎癌(例如腎細胞癌)、胸膜惡性間皮瘤(例如復發的胸膜惡性間皮瘤)，或乳癌(例如轉移性乳癌))。在某些實施例中，癌症係選自結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS CRC)、肝癌(例如肝細胞癌)、肺癌(例如非小細胞肺癌(HSCLC))、乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))、表現TGF-β的癌症、胰臟癌、前列腺癌或腎癌(例如腎細胞癌)。
TGF-β屬於結構相關細胞介素之大家族，包括例如骨骼形態發生蛋白質(BMP)、生長及分化因子、活化素及抑制素。在一些實施例中，本文所述之TGF-β抑制劑可以結合及/或抑制TGF-β之一或多種同功異型物(例如TGF-β1、TGF-β2或TGF-β3中之一者、兩者或全部)。
在一些實施例中，TGF-β抑制劑為福萊索單抗(fresolimumab)(CAS登記號：948564-73-6)。福萊索單抗亦稱為GC1008。福萊索單抗為結合至且抑制TGF-β同功異型物1、2及3的人類單株抗體。
福萊索單抗之重鏈具有以下胺基酸序列：QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSNVISWVRQAPGQGLEWMGGVIPIVDIANYAQRFKGRVTITADESTSTTYMELSSLRSEDTAVYYCASTLGLVLDAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 172)。
福萊索單抗之輕鏈具有以下胺基酸序列：ETVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSLGSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRAPGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYADSPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 173)。
福萊索單抗揭示於例如WO 2006/086469、US 8,383,780及US 8,591,901中。
在一些實施例中，TGF-β抑制劑為XOMA 089。XOMA 089亦稱為XPA.42.089。XOMA 089為一種結合且中和TGF-β1及2配位體的完全人類單株抗體。
XOMA 089之重鏈可變區具有以下胺基酸序列：QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 174) (WO 2012/167143中揭示為SEQ ID NO: 6)。
XOMA 089之輕鏈可變區具有以下胺基酸序列：SYELTQPPSVSVAPGQTARITCGANDIGSKSVHWYQQKAGQAPVLVVSEDIIRPSGIPERISGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDRDSDQYVFGTGTKVTVLG (SEQ ID NO: 175) ( WO 2012/167143揭示為SEQ ID NO: 8)。
在某些實施例中，該組合包括CD73抑制劑(例如本文所述之抗CD73抗體分子)及TGF-β抑制劑(例如本文所述之TGF-β抑制劑)。
在一個實施例中，該組合包括TGF-β抑制劑、XOMA 089，或PCT公開案第WO 2012/167143號中所揭示之化合物，及CD73抑制劑(例如本文所述之抗CD73抗體)。
在一個實施例中，TGF-β抑制劑XOMA 089或PCT公開案第WO 2012/167143號中所揭示之化合物係與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與以治療胰臟癌、結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS-CRC))、肺癌(例如非小細胞肺癌)、乳癌(例如三陰性乳癌)、肝癌(例如肝細胞癌)、前列腺癌或腎癌(例如透明細胞腎細胞癌)。
例示性VEGFR抑制劑在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子係與血管內皮生長因子(VEGF)受體抑制劑(例如一或多種VEGFR (例如VEGFR-1、VEGFR-2或VEGFR-3)或VEGF之抑制劑)組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如黑色素瘤、乳癌、結腸癌、食道癌、胃腸基質腫瘤(GIST)、腎癌(例如腎細胞癌)，肝癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌或胃癌)，例如血液惡性疾病(例如淋巴瘤)。
在一些實施例中，VEGFR抑制劑為丁二酸凡塔藍尼(vatalanib succinate)(化合物A47)或EP 296122中所揭示之化合物。
在一些實施例中，VEGFR抑制劑為VEGFR-2、PDGFRβ、KIT或Raf激酶C中之一或多者之抑制劑1-甲基-5-((2-(5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)吡啶-4-基)氧基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(化合物A37)或PCT公開案第WO 2007/030377號中所揭示之化合物。
可以用於本文所揭示之組合中的其他例示性VEGFR路徑抑制劑包括例如貝伐單抗(AVASTIN®)、阿西替尼(axitinib)(INLYTA®)；丙胺酸布立尼布(brivanib alaninate)(BMS-582664，(S)-((R)-1-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基)丙-2-基)2-胺基丙酸酯)；索拉非尼(sorafenib)(NEXAVAR®)；帕唑帕尼(pazopanib)(VOTRIENT®)；蘋果酸舒尼替尼(sunitinib malate)(SUTENT®)；西地尼布(cediranib)(AZD2171，CAS 288383-20-1)；瓦格特氟(vargatef)(BIBF1120，CAS 928326-83-4)；弗雷替尼(GSK1363089)；特拉替尼(telatinib)(BAY57-9352，CAS 332012-40-5)；阿帕替尼(apatinib)(YN968D1，CAS 811803-05-1)；伊馬替尼(imatinib)(GLEEVEC®)；普納替尼(ponatinib)(AP24534，CAS 943319-70-8)；替沃紮尼(AV951，CAS 475108-18-0)；瑞戈非尼(regorafenib)(BAY73-4506，CAS 755037-03-7)；凡塔藍尼二鹽酸鹽(vatalanib dihydrochloride)(PTK787，CAS 212141-51-0)；布立尼布(brivanib)(BMS-540215，CAS 649735-46-6)；凡德他尼(vandetanib)(CAPRELSA®或AZD6474)；二磷酸莫替沙尼(motesanib diphosphate)(AMG706，CAS 857876-30-3，N-(2,3-二氫-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶基甲基)胺基]-3-吡啶甲醯胺，PCT公開案第WO 02/066470號中所述)；立尼法尼(linfanib)(ABT869，CAS 796967-16-3)；卡博替尼(cabozantinib)(XL184，CAS 849217-68-1)；來他替尼(lestaurtinib)(CAS 111358-88-4)；N-[5-[[[5-(1,1-二甲基乙基)-2-噁唑基]甲基]硫基]-2-噻唑基]-4-哌啶甲醯胺(BMS38703，CAS 345627-80-7)；(3R,4R)-4-胺基-1-((4-((3-甲氧基苯基)胺基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-醇(BMS690514)；N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-[[(3aα,5β,6aα)-八氫-2-甲基環戊并[c]吡咯-5-基]甲氧基]-4-喹唑啉胺(XL647，CAS 781613-23-8)；4-甲基-3-[[1-甲基-6-(3-吡啶基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基]胺基]-N-[3-(三氟甲基)苯基]-苯甲醯胺(BHG712，CAS 940310-85-0)；阿柏西普(aflibercept)(EYLEA®)，及內皮抑制素(ENDOSTAR®)。
可以用於本文所揭示之組合中的例示性抗VEGF抗體包括例如與融合瘤ATCC HB 10709所產生之單株抗VEGF抗體A4.6.1結合至相同抗原決定基的單株抗體；根據Presta等人(1997)Cancer Res. 57:4593-4599所產生的重組人類化抗VEGF單株抗體。在一個實施例中，抗VEGF抗體為貝伐單抗(BV)，亦稱為rhuMAb VEGF或AVASTIN®。其包含突變的人類IgG1構架區及來自鼠類抗hVEGF單株抗體A.4.6.1之抗原結合互補決定區，該鼠類抗hVEGF單株抗體阻斷人類VEGF結合至其受體。貝伐單抗及其他人類化抗VEGF抗體進一步描述於2005年2月26日頒佈之美國專利第6,884,879號中。其他抗體包括如PCT公開案第WO2005/012359號、PCT公開案第WO2005/044853號中所述的G6或B20系列抗體(例如G6-31、B20-4.1)，此等專利申請案之內容以引用的方式明確併入本文中。關於其他抗體，參見美國專利第7,060,269號、第6,582,959號、第6,703,020號、第6,054,297號；WO98/45332、WO 96/30046、WO94/10202、EP 0666868B1；美國專利申請公開案第2006/009360號、第2005/0186208號、第2003/0206899號、第2003/0190317號、第2003/0203409號及第2005/0112126號；及Popkov等人, Journal of Immunological Methods 288: 149-164 (2004)。其他抗體包括結合至人類VEGF上之功能抗原決定基的彼等抗體，該功能抗原決定基包含殘基F17、Ml 8、D19、Y21、Y25、Q89、191、Kl 01、El 03及C104，或替代地包含殘基F17、Y21、Q22、Y25、D63、183及Q89。
例示性c-MET抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與c-MET抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如非小細胞肺癌、胰臟癌、肝癌、甲狀腺癌(例如退行性甲狀腺癌瘤)、腦瘤(例如神經膠母細胞瘤)、腎癌(例如腎細胞癌)，或頭頸癌(例如頭頸部鱗狀細胞癌)。在某些實施例中，癌症為肝癌，例如肝細胞癌(HCC)(例如表現c-MET的HCC)。
在一些實施例中，c-MET抑制劑為化合物A17或美國專利第7,767,675號及第8,420,645號中所述的化合物。
在一些實施例中，c-MET抑制劑為JNJ-38877605。JNJ-38877605為口服可利用的c-Met小分子抑制劑。JNJ-38877605選擇性地結合至c-MET，藉此抑制c-MET磷酸化且中斷c-Met信號轉導路徑。
在一些實施例中，c-Met抑制劑為AMG 208。AMG 208為c-MET之選擇性小分子抑制劑。AMG 208抑制c-MET之配位體依賴性及配位體非依賴性活化，抑制其酪胺酸激酶活性，從而可以使得過度表現c-Met之腫瘤的細胞生長受到抑制。
在一些實施例中，c-Met抑制劑為AMG 337。AMG 337為口服生物可利用的c-Met抑制劑。AMG 337選擇性結合至c-MET，藉此中斷c-MET信號轉導路徑。
在一些實施例中，c-Met抑制劑為LY2801653。LY2801653為口服可利用的c-Met小分子抑制劑。LY2801653選擇性地結合至c-MET，藉此抑制c-MET磷酸化且中斷c-Met信號轉導路徑。
在一些實施例中，c-Met抑制劑為MSC2156119J。MSC2156119J為口服可利用的c-Met抑制劑。MSC2156119J選擇性結合至c-MET，其抑制c-MET磷酸化且中斷c-Met介導之信號轉導路徑。
在一些實施例中，c-MET抑制劑為卡普尼布(capmatinib)。卡普尼布亦稱為INCB028060。卡普尼布為口服可利用的c-MET抑制劑。卡普尼布選擇性地結合至c-Met，藉此抑制c-Met磷酸化且中斷c-Met信號轉導路徑。
在一些實施例中，c-MET抑制劑為克卓替尼(crizotinib)。克卓替尼亦稱為PF-02341066。克卓替尼為受體酪胺酸激酶退行性淋巴瘤激酶(ALK)及c-Met/肝細胞生長因子受體(HGFR)之基於胺基吡啶的口服可利用抑制劑。克卓替尼以ATP競爭性方式結合至且抑制ALK激酶及ALK融合蛋白。此外，克卓替尼抑制c-Met激酶且中斷c-Met信號傳導路徑。總之，此藥劑抑制腫瘤細胞生長。
在一些實施例中，c-MET抑制劑為格瓦替尼(golvatinib)。格瓦替尼為c-MET與VEGFR-2之口服生物可利用雙重激酶抑制劑，其具有潛在抗贅瘤活性。格瓦替尼結合至c-MET與VEGFR-2且抑制其活性，從而可以抑制過度表現此等受體酪胺酸激酶之腫瘤細胞生長及腫瘤細胞存活。
在一些實施例中，c-MET抑制劑為提瓦替尼(tivantinib)。提瓦替尼亦稱為ARQ 197。提瓦替尼為口服可利用的c-MET小分子抑制劑。提瓦替尼結合至c-MET蛋白質且中斷c-Met信號轉導路徑，從而可以誘導過度表現c-MET蛋白質或表現組成型活化c-Met蛋白質之腫瘤細胞發生細胞死亡。
例示性IAP抑制劑在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與細胞凋亡蛋白質抑制劑(IAP)之抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如結腸直腸癌(CRC)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC))、乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))、卵巢癌或胰臟癌)，例如血液惡性疾病(例如多發性骨髓瘤)。
在一些實施例中，IAP抑制劑為(S)-N-((S)-1-環己基-2-((S)-2-(4-(4-氟苯甲醯基)噻唑-2-基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-2-(甲基胺基)丙醯胺(化合物A21)或美國專利第8,552,003號中所揭示之化合物。
在一些實施例中，本文所述之組合包括IAP抑制劑(S)-N-((S)-1-環己基-2-((S)-2-(4-(4-氟苯甲醯基)噻唑-2-基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-2-(甲基胺基)丙醯胺(化合物A21)，或美國專利第8,552,003號中所揭示之化合物，及免疫檢查點分子抑制劑，例如CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)。
例示性EGFR抑制劑在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與表皮成長因子受體(EGFR)抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如肺癌(例如非小細胞肺癌)、胰臟癌、乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))或結腸癌)。在某些實施例中，癌症係選自結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS CRC))、肺癌(例如非小細胞肺癌)或乳癌(例如三陰性肺癌(TNBC))。
在一些實施例中，EGFR抑制劑為(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物。
在一些實施例中，本文所述之組合包括EGFR抑制劑(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)，或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物，及免疫檢查點分子抑制劑，例如CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)。
在一些實施例中，EGFR抑制劑(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與以治療結腸直腸癌(CRC)(例如MSS-CRC)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC))或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在一些實施例中，EGFR抑制劑係選自埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、西妥昔單抗(cetuximab)、帕尼單抗(panitumumab)、萊西單抗(necitumumab)、PF-00299804、尼妥珠單抗(nimotuzumab)或RO5083945中之一或多者。
例示性mTOR抑制劑在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子與雷帕黴素標靶抑制劑(mTOR)組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如前列腺癌、乳癌、腦癌、膀胱癌、胰臟癌、腎癌或肝癌、肺癌(例如小細胞肺癌或非小細胞肺癌)、呼吸道/胸腺癌、肉瘤、骨癌、非小細胞肺癌、內分泌癌症、星形細胞瘤、子宮頸癌、神經癌症、胃癌或黑色素瘤)，例如血液惡性疾病(例如白血病(例如淋巴細胞性白血病)，例如淋巴瘤，或例如多發性骨髓瘤)。在某些實施例中，癌症係選自結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS CRC))、肺癌(例如非小細胞肺癌)或乳癌(例如三陰性肺癌(TNBC))。
在一些實施例中，mTOR抑制劑為8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氫-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(化合物A41)。
在一些實施例中，mTOR抑制劑為依維莫司(everolimus)(亦稱為AFINITOR®；化合物A36)或PCT公開案第WO 2014/085318號中所揭示之化合物。
在一些實施例中，本文所述之組合包括mTOR抑制劑依維莫司(化合物A36)，或PCT公開案第WO 2014/085318號中所揭示之化合物，及免疫檢查點分子抑制劑，例如CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)。
在一些實施例中，mTOR抑制劑依維莫司(化合物A36)或PCT公開案第WO 2014/085318號中所揭示之化合物係與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與，以治療結腸直腸癌、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC))或乳癌(例如三陰性乳癌(NTBC))。
在一些實施例中，mTOR抑制劑係選自以下中之一或多者：雷帕黴素、坦羅莫司(TORISEL®)、AZD8055、BGT226、XL765、PF-4691502、GDC0980、SF1126、OSI-027、GSK1059615、KU-0063794、WYE-354、Palomid 529 (P529)、PF-04691502或PKI-587；地磷莫司(ridaforolimus)(正式稱為迪福莫司(deferolimus)，(1R,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-二羥基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-五側氧基-11,36-二氧雜-4-氮雜三環[30.3.1.04,9]三十六碳-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基環己基二甲基次膦酸酯，亦稱為AP23573及MK8669，其描述於PCT公開案第WO 03/064383號中)；依維莫司(AFINITOR®或RAD001)；雷帕黴素(AY22989, SIROLIMUS®)；斯馬匹莫(simapimod)(CAS登記號：164301-51-3)；(5-{2,4-雙[(3S)-3-甲基嗎啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基苯基)甲醇(AZD8055)；2-胺基-8-[反-4-(2-羥基乙氧基)環己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF04691502，CAS登記號：1013101-36-4)；N2-[1,4-二側氧基-4-[[4-(4-側氧基-8-苯基-4H-1-苯并哌喃-2-基)嗎啉鎓-4-基]甲氧基]丁基]-L-精胺醯甘胺醯基-L-α-天冬胺醯基L-絲胺酸(SEQ ID NO: 176)內鹽(SF1126，CAS登記號：936487-67-1)，或XL765 (SAR245409)。
其他例示性mTOR抑制劑包括(但不限於)坦羅莫司(temsirolimus)；地磷莫司(1R ,2R ,4S )-4-[(2R )-2[(1R ,9S ,12S ,15R ,16E , 18R ,19R ,21R ,23S ,24E ,26E ,28Z ,30S ,32S ,35R )-1,18-二羥基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-五側氧基-11,36-二氧雜-4-氮雜三環[30.3.1.04,9 ]三十六碳-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基環己基二甲基次膦酸酯，亦稱為AP23573及MK8669；依維莫司(RAD001)；雷帕黴素(AY22989)；斯馬匹莫；(5-{2,4-雙[(3S)-3-甲基嗎啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基苯基)甲醇(AZD8055)；2-胺基-8-[反-4-(2-羥基乙氧基)環己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H )-酮(PF04691502)；及N2 -[1,4-二側氧基-4-[[4-(4-側氧基-8-苯基-4H -1-苯并哌喃-2-基)嗎啉鎓-4-基]甲氧基]丁基]-L-精胺醯甘胺醯基-L-α-天冬胺醯基L-絲胺酸-(SEQ ID NO: 176)內鹽(SF1126)；及XL765。
例示性PI3K-γ、PI3K-δ抑制劑 在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子係與磷脂醯肌醇-4,5-雙磷酸酯3-激酶(PI3K)(例如磷脂醯肌醇-4,5-雙磷酸酯3-激酶γ及/或δ (PI3K-γ,δ))之抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如前列腺癌、乳癌、腦癌、膀胱癌、胰臟癌、腎癌、實體腫瘤、肝癌、非小細胞肺癌、內分泌癌症、卵巢癌、黑色素瘤、雌性生殖系統癌症、消化/胃腸癌、多形性神經膠母細胞瘤、頭頸癌或結腸癌)，例如血液惡性疾病(例如白血病(例如淋巴細胞性白血病，例如慢性淋巴球性白血病(CLL)(例如復發CLL))，例如淋巴瘤(例如非霍奇金氏淋巴瘤(例如復發濾泡性B細胞非霍奇金淋巴瘤(FL)或復發小淋巴球性淋巴瘤(SLL))，例如多發性骨髓瘤)。
在一些實施例中，PI3K抑制劑為PI3K之δ及γ同功異型物之抑制劑。可以組合使用的例示性PI3K抑制劑(例如WO 2010/036380、WO 2010/006086、WO 09/114870、WO 05/113556中所述)為GSK 2126458、GDC-0980、GDC-0941、Sanofi XL147、XL756、XL147、PF-46915032、BKM 120、CAL-101、CAL 263、SF1126、PX-886及雙重PI3K抑制劑。
在一些實施例中，PI3K-γ,δ抑制劑為艾德昔布(idelalisib)(CAS登記號：870281-82-6)。艾德昔布亦稱為ZYDELIG®、GS-1101、CAL-101或5-氟-3-苯基-2-[(1S)-1-(7H-嘌呤-6-基胺基)丙基]-4(3H)-喹唑啉酮。艾德昔布阻斷PI3K之δ同功異型物P110δ。艾德昔布揭示於例如Wu等人,Journal of Hematology & Oncology (2013) 6: 36。
在一些實施例中，PI3K-γ,δ抑制劑為8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氫-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(化合物A41)。
在一些實施例中，PI3K-γ,δ抑制劑為布帕昔布(buparlisib)(化合物A6)或PCT公開案第WO 2007/084786號中所揭示之化合物。
可以組合使用之其他例示性PI3K-γ,δ抑制劑包括例如皮克立西(pictilisib)(GDC-0941)、LY294002、皮拉昔布(pilaralisib)(XL147)、PI-3065、PI-103、VS-5584 (SB2343)、CZC24832、杜維昔布(duvelisib)(IPI-145、INK1197)、TG100-115、CAY10505、GSK1059615、PF-04691502、AS-605240、沃塔昔布(voxtalisib)(SAR245409、XL765)、IC-87114、奧米昔布(omipalisib)(GSK2126458、GSK458)、TG100713、吉達昔布(gedatolisib)(PF-05212384、PKI-587)、PKI-402、XL147類似物、PIK-90、PIK-293、PIK-294、3-甲基腺嘌呤(3-MA)、AS-252424、AS-604850或阿托昔布(apitolisib)(GDC-0980、RG7422)。
在一些實施例中，PI3K抑制劑為化合物A8或PCT公開案第WO2010/029082號中所述之化合物。
在一些實施例中，PI3K抑制劑為泛PI3K抑制劑(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-4-(羥甲基)-5-甲基噁唑啶-2-酮(化合物A13)或PCT公開案第WO2013/124826號中所揭示之化合物。
例示性PI3K-γ、PI3K-δ抑制劑包括(但不限於)杜維昔布及艾德昔布。艾德昔布(亦稱為GS-1101或CAL-101；Gilead)為阻斷PI3K之δ同功異型物的小分子。艾德昔布(5-氟-3-苯基-2-[(1S )-1-(7H -嘌呤-6-基胺基)丙基]-4(3H )-喹唑啉酮)之結構展示於下文中。
Figure 02_image009
杜維昔布(亦稱為IPI-145；Infinity Pharmaceuticals and Abbvie)為阻斷PI3K-δ,γ之小分子。杜維昔布(8-氯-2-苯基-3-[(1S)-1-(9H-嘌呤-6-基胺基)乙基]-1(2H)-異喹啉酮)之結構展示於下文中。
Figure 02_image011
在一個實施例中，該抑制劑為磷脂醯肌醇3-激酶(PI3K)及mTOR雙重抑制劑，其選自2-胺基-8-[反-4-(2-羥基乙氧基)環己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d ]嘧啶-7(8H )-酮(PF-04691502)；N -[4-[[4-(二甲胺基)-1-哌啶基]羰基]苯基]-N '-[4-(4,6-二-4-嗎啉基-1,3,5-三嗪-2-基)苯基]脲(PF-05212384、PKI-587)；阿托昔布(apitolisib)(GDC-0980、RG7422)；2,4-二氟-N-{2-(甲氧基)-5-[4-(4-噠嗪基)-6-喹啉基]-3-吡啶基}苯磺醯胺(GSK2126458)；8-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-(哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-2(3H)-酮順丁烯二酸(NVP-BGT226)；3-[4-(4-嗎啉基吡啶并[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基]苯酚(PI-103)；5-(9-異丙基-8-甲基-2-嗎啉基-9H-嘌呤-6-基)嘧啶-2-胺(VS-5584、SB2343)；或N-[2-[(3,5-二甲氧基苯基)胺基]喹喏啉-3-基]-4-[(4-甲基-3-甲氧基苯基)羰基]胺基苯磺醯胺(XL765)。
例示性JAK抑制劑在某些實施例中，本文所述之抗CD73抗體分子係與傑納斯激酶(Janus kinase，JAK)抑制劑組合投與。在一些實施例中，該組合係用於治療癌症，例如本文所述之癌症，例如實體腫瘤(例如結腸癌、前列腺癌、肺癌、乳癌或胰臟癌)，例如血液惡性疾病(例如白血病(例如骨髓性白血病或淋巴球性白血病)，例如淋巴瘤(例如非霍奇金氏淋巴瘤)，或多發性骨髓瘤。
在一些實施例中，JAK抑制劑為2-氟-N-甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(化合物A17)或其二鹽酸鹽，或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物。
在一些實施例中，JAK抑制劑為磷酸蘆可替尼(ruxolitinib phosphate)(亦稱為JAKAFI；化合物A18)或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物。
例示性細胞療法 抗CD73抗體分子亦可與細胞療法組合，例如嵌合抗原受體(CAR)療法、T細胞療法、自然殺手(NK)細胞療法或樹突狀細胞療法。
與 CAR 療法組合 本文所述之抗CD73抗體分子可與第二療法(例如包含嵌合抗原受體(CAR)的細胞)組合投與。CAR可以包含i)細胞外抗原結合域、ii)跨膜域，及iii)細胞內信號傳導域(其可以包含初級信號傳導域及共刺激域中之一或兩者)。CAR可以進一步包含前導序列及/或鉸鏈序列。在特定實施例中，CAR構築體包含scFv域，其中該scFv可以位於視情況存在之前導序列之後且位於視情況存在之鉸鏈序列、跨膜區及細胞內信號傳導域之前，例如其中該等結構域鄰接且處於同一閱讀框架中以形成單一融合蛋白。
在一些實施例中，CAR分子包含本文所述之CD19 CAR分子，例如US 2015/0283178中所述的CD19 CAR分子，例如CTL019。在實施例中，CD19 CAR包含胺基酸，或具有US 2015/0283178中所示的核苷酸序列，該文獻以全文引用之方式併入本文中；或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%或95%序列一致性的序列)。
在一個實施例中，結合至CD19的CAR T細胞具有USAN名稱TISAGENLECLEUCEL-T。CTL019係經由在EF-1 α啟動子之控制下用含有CTL019轉殖基因之自不活化、缺乏複製之慢病毒(LV)載體轉導、藉由對穩定插入所介導之T細胞進行基因修飾來製得。CTL019可為轉殖基因陽性T細胞與陰性T細胞之混合物，其基於轉殖基因陽性T細胞百分比來遞送至個體。
在一個實施例中，CD19 CAR包含PCT公開案WO2012/079000中作為SEQ ID NO: 12提供的胺基酸序列。在實施例中，胺基酸序列為： MALPVTALLLPLALLLHAARPdiqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvsstttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr (SEQ ID NO: 132)，或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%或95%序列一致性的序列)，其具有或不具有大寫字母所指示之信號肽序列。
在一個實施例中，胺基酸序列為： diqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvsstttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr (SEQ ID NO: 133)，或與其基本上同源的序列(例如與其具有至少約85%、90%或95%序列一致性的序列)。
嵌合抗原受體 (CAR) 之抗原結合域 抗原結合域可為結合至抗原之任何結構域，包括(但不限於)單株抗體、多株抗體、重組抗體、人類抗體、人類化抗體及其功能片段，包括(但不限於)單域抗體，諸如來源於駱駝科之奈米抗體的重鏈可變域(VH)、輕鏈可變域(VL)及可變域(VHH)，以及此項技術中已知充當抗原結合域的替代支架，諸如重組纖維結合蛋白域、T細胞受體(TCR)或其片段，例如單鏈TCR，及其類似物。在一些情況下，抗原結合域來源於將最終使用CAR之相同物種為有益的。舉例而言，當用於人類時，對於抗體或抗體片段之抗原結合域而言，CAR之抗原結合域包含人類或人類化殘基可為有益的。
在一些實施例中，CAR之抗原結合域為scFv抗體片段，相較於衍生其之scFv之鼠類序列，該scFv抗體片段發生人類化。
在一些實施例中，抗原結合域結合本文所述之腫瘤抗原。在實施例中，腫瘤抗原係選自：CD19；CD123；CD22；CD30；CD171；CS-1 (亦稱為CD2亞群1、CRACC、SLAMF7、CD319及19A24)；C型凝集素樣分子-1 (CLL-1或CLECL1)；CD33；表皮成長因子受體變異體III (EGFRvIII)；神經節苷脂G2 (GD2)；神經節苷脂GD3 (aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer)；TNF受體家族成員，B細胞成熟(BCMA)；Tn抗原((Tn Ag)或(GalNAcα-Ser/Thr))；前列腺特異性膜抗原(PSMA)；受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)；Fms樣酪胺酸激酶3 (FLT3)；腫瘤相關醣蛋白72 (TAG72)；CD38；CD44v6；癌胚抗原(CEA)；上皮細胞黏附分子(EPCAM)；B7H3 (CD276)；KIT (CD117)；介白素-13受體亞單元α-2 (IL-13Ra2或CD213A2)；間皮素；介白素11受體α (IL-11Ra)；前列腺幹細胞抗原(PSCA)；蛋白酶絲胺酸21 (睾蛋白或PRSS21)；血管內皮生長因子受體2 (VEGFR2)；路易斯(Y)抗原；CD24；血小板源生長因子受體β (PDGFR-β)；階段特異性胚抗原-4 (SSEA-4)；CD20；葉酸受體α；受體酪胺酸蛋白激酶ERBB2 (Her2/neu)；細胞表面相關黏蛋白1 (MUC1)；表皮成長因子受體(EGFR)；神經細胞黏附分子(NCAM)；前列腺酶；前列腺酸性磷酸酶(PAP)；突變的延長因子2 (ELF2M)；蝶素B2；纖維母細胞活化蛋白質α (FAP)；類胰島素生長因子1受體(IGF-I受體)、碳酸酐酶IX (CAIX)；蛋白酶體(前體、巨蛋白因子)亞單元β型9 (LMP2)；醣蛋白100 (gp100)；由斷點叢集區(BCR)及阿貝爾森(Abelson)鼠類白血病病毒致癌基因同源物1 (Abl)組成的致癌基因融合蛋白(bcr-abl)；酪胺酸酶；蝶素A型受體2 (EphA2)；海藻糖基GM1；唾液酸基路易斯黏附分子(sLe)；神經節苷脂GM3(aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer)；轉麩胺醯胺酶5 (TGS5)；高分子量黑色素瘤相關抗原(HMWMAA)；o-乙醯基-GD2神經節苷脂(OAcGD2)；葉酸受體β；腫瘤內皮細胞標記物1 (TEM1/CD248)；相關腫瘤內皮細胞標記物7 (TEM7R)；緊密連接蛋白6 (CLDN6)；促甲狀腺激素受體(TSHR)；G蛋白偶聯受體C類第5組成員D (GPRC5D)；X染色體開放閱讀框架61 (CXORF61)；CD97；CD179a；退行性淋巴瘤激酶(ALK)；聚唾液酸；胎盤特異性1 (PLAC1)；globoH腦苷脂(GloboH)之六醣部分；乳腺腺體分化抗原(NY-BR-1)；尿溶蛋白2 (UPK2)；A型肝炎病毒細胞受體1 (HAVCR1)；腎上腺素受體β3 (ADRB3)；泛連接蛋白3 (PANX3)；G蛋白偶聯受體20 (GPR20)；淋巴球抗原6複合物，基因座K 9 (LY6K)；嗅覺受體51E2 (OR51E2)；TCR γ替代閱讀框架蛋白質(TARP)；威爾姆斯腫瘤蛋白(Wilms tumor protein，WT1)；癌症/睪丸抗原1 (NY-ESO-1)；癌症/睪丸抗原2 (LAGE-1a)；黑色素瘤相關抗原1 (MAGE-A1)；ETS移位變異體基因6，其位於染色體12p (ETV6-AML)上；精子蛋白質17 (SPA17)；X抗原家族成員1A (XAGE1)；血管生成素結合細胞表面受體2 (Tie 2)；黑色素瘤癌症睪丸抗原-1 (MAD-CT-1)；黑色素瘤癌症睪丸抗原-2 (MAD-CT-2)；Fos相關抗原1；腫瘤蛋白質p53 (p53)；p53突變體；前列腺蛋白；存活素；端粒酶；前列腺癌腫瘤抗原-1 (PCTA-1或半乳糖凝集素8)、T細胞1所識別的黑色素瘤抗原(MelanA或MART1)；大鼠肉瘤(Ras)突變體；人類端粒酶逆轉錄酶(hTERT)；肉瘤移位斷點；黑色素瘤細胞凋亡抑制劑(ML-IAP)；ERG (跨膜蛋白酶、絲胺酸2 (TMPRSS2) ETS融合基因)；N-乙醯基葡糖胺基轉移酶V (NA17)；成對匣蛋白Pax-3 (PAX3)；雄激素受體；週期素B1；v-myc禽類髓細胞組織增生病毒致癌基因神經母細胞瘤源同源物(MYCN)；Ras同源物家族成員C (RhoC)；酪胺酸酶相關蛋白質2 (TRP 細胞色素P450 1B1 (CYP1B1)；CCCTC結合因子(鋅指蛋白質)樣(BORIS或壓印位點調控因子同族)，T細胞所識別的鱗狀細胞癌抗原3 (SART3)；成對匣蛋白Pax-5 (PAX5)；前頂體素結合蛋白sp32 (OY-TES1)；淋巴球特異性蛋白質酪胺酸激酶(LCK)；激酶錨蛋白4 (AKAP-4)；滑膜肉瘤，X斷裂點2 (SSX2)；晚期糖基化終產物受體(RAGE-1)；腎泛素1 (RU1)；腎泛素2 (RU2)；豆莢蛋白；人類乳頭狀瘤病毒E6 (HPV E6)；人類乳頭狀瘤病毒E7 (HPV E7)；腸羧基酯酶；突變的熱休克蛋白70-2 (mut hsp70-2)；CD79a；CD79b；CD72；白血球相關免疫球蛋白樣受體1 (LAIR1)；IgA受體Fc片段(FCAR或CD89)；白血球免疫球蛋白樣受體亞家族A成員2 (LILRA2)；CD300分子樣家族成員f (CD300LF)；C型凝集素結構域家族12成員A (CLEC12A)；骨髓基質細胞抗原2 (BST2)；含有EGF樣模組的黏蛋白樣激素受體樣2 (EMR2)；淋巴球抗原75 (LY75)；磷脂肌醇蛋白聚醣-3 (GPC3)；Fc受體樣5 (FCRL5)；及免疫球蛋白λ樣多肽1 (IGLL1)。
在一個實施例中，CAR分子包含BCMA CAR分子，例如US 2016/0046724或WO 2016/014565中所述的BCMA CAR，該等文獻以引用之方式併入本文中。在實施例中，BCMA CAR包含胺基酸，或具有CAR分子之核苷酸序列，或根據US 2016/0046724之抗原結合域，或WO 2016/014565之表1或16的SEQ ID NO: 271或SEQ ID NO: 273，該等文獻以引用之方式併入本文中；或與任一前述序列基本上一致(例如與任一前述BCMA CAR序列具有至少約85%、90%或95%序列一致性)的序列。編碼BCMA CAR分子及抗原結合域(例如包括根據Kabat或Chothia的一個、兩個、三個VH CDR；及一個、兩個、三個VL CDR)的胺基酸及核苷酸序列說明於WO 2016/014565中。
嵌合抗原受體 (CAR) 之跨膜域 就跨膜域而言，在各種實施例中，CAR可經設計以包含連接至CAR胞外域之跨膜域。
跨膜域可來源於天然來源或重組來源。在來源為天然的情況下，結構域可來源於任何膜結合蛋白或跨膜蛋白。在一個態樣中，每當CAR已結合至標靶時，跨膜域能夠向胞內域傳導信號。跨膜域可以至少包括T細胞受體、CD28、CD27、CD3ε、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154之例如α、β或ξ鏈的跨膜區。在一些實施例中，跨膜域可以至少包括例如以下之跨膜區：KIRDS2、OX40、CD2、CD27、LFA-1 (CD11a、CD18)、ICOS (CD278)、4-1BB (CD137)、GITR、CD40、BAFFR、HVEM (LIGHTR)、SLAMF7、NKp80 (KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD160、CD19、IL2R β、IL2R γ、IL7R α、ITGA1、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA-1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、TNFR2、DNAM1 (CD226)、SLAMF4 (CD244、2B4)、CD84、CD96 (Tactile)、CEACAM1、CRTAM、Ly9 (CD229)、CD160 (BY55)、PSGL1、CD100 (SEMA4D)、SLAMF6 (NTB-A、Ly108)、SLAM (SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME (SLAMF8)、SELPLG (CD162)、LTBR、PAG/Cbp、NKG2D及NKG2C。
在一些情況下，跨膜域可以經由鉸鏈(例如來自人類蛋白質的鉸鏈)連接至CAR胞外區，例如CAR抗原結合域。舉例而言，在一個實施例中，鉸鏈可為人類Ig (免疫球蛋白)鉸鏈(例如IgG4鉸鏈、IgD鉸鏈)、GS連接子(例如本文所述之GS連接子)、KIR2DS2鉸鏈或CD8a鉸鏈。
嵌合抗原受體 (CAR) 之細胞內信號傳導域 CAR之細胞質域或區域包括細胞內信號傳導域。細胞內信號傳導域一般負責CAR已引入其中之免疫細胞之至少一種正常效應功能的活化。
用於CAR的細胞內信號傳導域實例包括T細胞受體(TCR)及輔助受體之細胞質序列，其協同作用以在抗原受體接合後起始信號轉導；以及具有相同功能能力之此等序列的任何衍生物或變異體以及任何重組序列。
初始信號傳導域以刺激方式或抑制方式調控TCR複合物之初始活化。以刺激方式起作用之初始細胞內信號傳導域可以含有信號傳導基元，稱為基於免疫受體酪胺酸之活化基元或ITAM。
含ITAM初始細胞內信號傳導域之實例包括CD3 ξ、共同FcRγ (FCER1G)、Fc γ RIIa、FcR β (Fc ε R1b)、CD3 γ、CD3 δ、CD3 ε、CD79a、CD79b、DAP10及DAP12之彼等域。在一個實施例中，CAR包含細胞內信號傳導域，例如CD3-ξ之初始信號傳導域。
CAR之細胞內信號傳導域可以包含CD3-ξ信號傳導域本身或其可以與適用於本發明之CAR情形中之任何其他所需細胞內信號傳導域組合。舉例而言，CAR之細胞內信號傳導域可以包含CD3 ξ鏈部分及共刺激信號傳導域。共刺激信號傳導域係指CAR之一部分，其包含共刺激分子之胞內域。共刺激分子為淋巴球對抗原有效反應所必需之除抗原受體或其配位體之外的細胞表面分子。此類分子之實例包括CD27、CD28、4-1BB (CD137)、OX40、CD30、CD40、PD-1、ICOS、淋巴球功能相關抗原-1 (LFA-1)、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、B7-H3，及結合至CD83的配位體，及其類似物。舉例而言，CD27共刺激已證明可增強活體外人類CART細胞擴增、效應功能及存活且增強活體內人類T細胞存留及抗腫瘤活性(Song等人, Blood. 2012; 119(3):696-706)。此類共刺激分子之其他實例包括CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、HVEM (LIGHTR)、SLAMF7、NKp80 (KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD160、CD19、CD4、CD8α、CD8β、IL2R β、IL2R γ、IL7R α、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA-1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1 (CD226)、SLAMF4 (CD244、2B4)、CD84、CD96 (Tactile)、NKG2D、CEACAM1、CRTAM、Ly9 (CD229)、CD160 (BY55)、PSGL1、CD100 (SEMA4D)、CD69、SLAMF6 (NTB-A、Ly108)、SLAM (SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME (SLAMF8)、SELPLG (CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp及CD19a。
免疫效應細胞(例如T細胞)之活化及擴增 諸如T細胞之免疫效應細胞通常可以使用如以下文獻中所述之方法活化及擴增：例如美國專利6,352,694、6,534,055、6,905,680、6,692,964、5,858,358、6,887,466、6,905,681、7,144,575、7,067,318、7,172,869、7,232,566、7,175,843、5,883,223、6,905,874、6,797,514、6,867,041；及美國專利申請公開案第2006/0121005號，該等文獻以引用之方式併入本文中。
免疫效應細胞之實例包括T細胞，例如α/β T細胞及γ/δ T細胞、B細胞、自然殺手(NK)細胞、自然殺手T (NKT)細胞、肥大細胞及骨髓源吞噬細胞。
CAR表現細胞製備方法描述於例如US 2016/0185861中，該文獻以引用之方式併入本文中。
例示性癌症疫苗 抗CD73抗體分子可以與免疫原性劑(諸如癌細胞、純化腫瘤抗原(包括重組蛋白質、肽及碳水化合物分子)、細胞及經編碼免疫刺激細胞介素之基因轉染的細胞組合(He等人(2004)J. Immunol. 173:4919-28)。可以使用之腫瘤疫苗之非限制性實例包括黑色素瘤抗原之肽，諸如gp100、MAGE抗原、Trp-2、MART1及/或酪胺酸酶之肽，或經轉染以表現細胞介素GM-CSF之腫瘤細胞、基於DNA之疫苗、基於RNA之疫苗及基於病毒轉導之疫苗。癌症疫苗可具預防性或治療性。
CD73阻斷可與腫瘤中所表現之一組重組蛋白及/或肽聯合使用以便產生針對此等蛋白質之免疫反應。
其他腫瘤疫苗可以包括來自牽涉到人類癌症之病毒(諸如人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、肝炎病毒(HBV及HCV)、卡波西氏疱疹肉瘤病毒(Kaposi's Herpes Sarcoma Virus，KHSV)及埃-巴二氏病毒(Epstein-Barr virus，EBV))之蛋白質。可以聯合CD73阻斷使用之腫瘤特異性抗原的另一種形式為自腫瘤組織自身分離之純化熱休克蛋白(HSP)。此等熱休克蛋白含有來自腫瘤細胞之蛋白質之片段且此等HSP高效地遞送至抗原呈遞細胞以引起腫瘤免疫性(Suot, R & Srivastava, P (1995)Science 269:1585-1588; Tamura, Y.等人(1997)Science 278:117-120)。
樹突狀細胞(DC)為可用於引發抗原特異性反應之強抗原呈遞細胞。DC可以離體產生且負載有各種蛋白質及肽抗原以及腫瘤細胞萃取物(Nestle, F.等人(1998)Nature Medicine 4: 328-332)。DCs亦可藉由基因方式轉導，以亦表現此等腫瘤抗原。DC亦已與腫瘤細胞直接融合以用於免疫接種之目的(Kugler, A.等人 (2000)Nature Medicine 6:332-336)。作為疫苗接種方法，DC免疫接種可以與CD73阻斷有效組合以活化更強的抗腫瘤反應。
例示性溶瘤病毒 抗CD73抗體分子可以與溶瘤病毒組合投與。在實施例中，溶瘤病毒能夠在癌細胞中選擇性地複製，且觸發癌細胞死亡或減緩癌細胞生長。在一些情況下，溶瘤病毒對非癌細胞無作用或作用最小。在一些實施例中，組合用於治療癌症，例如本文中所述之癌症。在某些實施例中，癌症為腦癌，例如神經膠母細胞瘤(GBM)。溶瘤病毒包括(但不限於)溶瘤腺病毒、溶瘤單純疱疹病毒、溶瘤逆轉錄病毒、溶瘤小病毒、溶瘤痘瘡病毒、溶瘤新必斯病毒(oncolytic Sinbis virus)、溶瘤流感病毒或溶瘤RNA病毒(例如溶瘤呼腸孤病毒、溶瘤新城疫病毒(Newcastle Disease Virus，NDV)、溶瘤麻疹病毒或溶瘤水泡性口炎病毒(VSV))。
例示性溶瘤病毒包括(但不限於)以下： B組溶瘤腺病毒(ColoAd1)(PsiOxus Therapeutics Ltd.)(參見例如臨床試驗標識符：NCT02053220)； ONCOS-102 (先前稱為CGTG-102)，其為包含顆粒球巨噬細胞群落刺激因子(GM-CSF)之腺病毒(Oncos Therapeutics)(參見例如臨床試驗標識符：NCT01598129)； VCN-01，其為編碼人類PH20玻尿酸酶之基因修飾溶瘤人類腺病毒(VCN Biosciences, S.L.) (參見例如臨床試驗標識符：NCT02045602及NCT02045589)； 條件性複製型腺病毒ICOVIR-5，其為來源於野生型人類腺病毒血清型5 (Had5)之已經修飾以在視網膜母細胞瘤/E2F路徑調節異常之癌細胞中選擇性複製的病毒(Institut Català d'Oncologia)(參見例如臨床試驗標識符：NCT01864759)； Celyvir，其包含經溶瘤腺病毒ICOVIR5 (Hospital Infantil Universitario Niño Jesús, Madrid, Spain/Ramon Alemany)感染的骨髓源自體間葉細胞幹細胞(MSC)(參見例如臨床試驗標識符：NCT01844661)； CG0070，其為條件複製型溶瘤血清型5腺病毒(Ad5)，其中人類E2F-1啟動子驅動基本E1a病毒基因表現，藉此將病毒複製及細胞毒性限制於缺乏Rb路徑之腫瘤細胞(Cold Genesys, Inc.)(參見例如臨床試驗標識符：NCT02143804)；或 DNX-2401 (先前稱為δ-24-RGD)，其為已經工程改造的腺病毒以在缺乏視網膜母細胞瘤(Rb)路徑之細胞中選擇性複製且更有效地感染表現某些RGD結合整合素之細胞(Clinica Universidad de Navarra, Universidad de Navarra/DNAtrix, Inc.)(參見例如臨床試驗標識符：NCT01956734)。
在一些實施例中，本文所述之溶瘤病毒藉由注射(例如皮下、動脈內、靜脈內、肌肉內、鞘內或腹膜內注射)投與。在實施例中，本文所述之溶瘤病毒以瘤內、經皮、經黏膜、經口、鼻內方式或經由肺部投藥來投與。
其他例示性癌症療法 抗CD73抗體分子(單獨或與其他刺激劑組合)與癌症標準照護療法之例示性組合至少包括以下各者。在某些實施例中，抗CD73抗體分子(例如本文所述之抗CD73抗體分子)係與標準癌症照護化學治療劑組合使用，該化學治療劑包括(但不限於)阿那曲唑(anastrozole)(Arimidex® )、比卡魯胺(bicalutamide)(Casodex® )、硫酸博萊黴素(bleomycin sulfate)(Blenoxane® )、白消安(busulfan)(Myleran® )、白消安注射劑(busulfan injection)(Busulfex® )、卡培他濱(capecitabine)(Xeloda® )、N4-戊氧基羰基-5-去氧-5-氟胞苷、卡鉑(carboplatin)(Paraplatin® )、卡莫司汀(carmustine)(BiCNU® )、苯丁酸氮芥(chlorambucil)(Leukeran® )、順鉑(cisplatin)(Platinol® )、克拉屈濱(cladribine)(Leustatin® )、環磷醯胺(cyclophosphamide)(Cytoxan® 或Neosar® )、阿糖胞苷(cytarabine)、胞嘧啶阿拉伯糖苷(cytosine arabinoside)(Cytosar-U® )、阿糖胞苷脂質體注射劑(DepoCyt® )、達卡巴嗪(dacarbazine)(DTIC-Dome® )、放線菌素d (dactinomycin)(放線菌素D、Cosmegan)、鹽酸道諾黴素(daunorubicin hydrochloride)(Cerubidine® )、檸檬酸道諾黴素脂質體注射劑(DaunoXome® )、地塞米松(dexamethasone)、多烯紫杉醇(docetaxel)(Taxotere® )、鹽酸小紅莓(doxorubicin hydrochloride)(Adriamycin® 、Rubex® )、依託泊苷(etoposide)(Vepesid® )、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)(Fludara® )、5-氟尿嘧啶(Adrucil® 、Efudex® )、氟他胺(flutamide)(Eulexin® )、替紮他濱(tezacitibine)、吉西他濱(Gemcitabine)(二氟去氧胞苷)、羥脲(Hydrea® )、艾達黴素(Idarubicin)(Idamycin® )、異環磷醯胺(ifosfamide)(IFEX® )、伊立替康(irinotecan)(Camptosar® )、L-天冬醯胺酶(ELSPAR® )、亞葉酸鈣(leucovorin calcium)、美法侖(melphalan)(Alkeran® )、6-巰基嘌呤(Purinethol® )、甲胺喋呤(methotrexate)(Folex® )、米托蒽醌(mitoxantrone)(Novantrone® )、麥羅塔(mylotarg)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)(Taxol® )、菲尼克斯(phoenix)(釔90/MX-DTPA)、噴司他汀(pentostatin)、聚苯丙生20 (polifeprosan 20)結合卡莫司汀(carmustine)植入物(Gliadel® )、檸檬酸他莫昔芬(tamoxifen citrate)(Nolvadex® )、替尼泊苷(teniposide)(Vumon® )、6-硫鳥嘌呤、噻替派(thiotepa)、替拉紮明(tirapazamine)(Tirazone® )、注射用的鹽酸拓朴替康(topotecan hydrochloride)(Hycamptin® )、長春鹼(vinblastine)(Velban® )、長春新鹼(vincristine)(Oncovin® )、長春瑞賓(vinorelbine)(Navelbine® )、依魯替尼(Ibrutinib)、艾德昔布(idelalisib)及貝倫妥單抗維多汀(brentuximab vedotin)。
例示性烷基化劑包括(但不限於)氮芥、伸乙基亞胺衍生物、磺酸烷基酯、亞硝基脲及三氮烯)：尿嘧啶氮芥(Aminouracil Mustard®、Chlorethaminacil®、Demethyldopan®、Desmethyldopan®、Haemanthamine®、Nordopan®、Uracil nitrogen mustard®、Uracillost®、Uracilmostaza®、Uramustin®、Uramustine®)、氮芥(Mustargen®)、環磷醯胺(Cytoxan®、Neosar®、Clafen®、Endoxan®、Procytox®、RevimmuneTM )、異環磷醯胺(Mitoxana®)、美法侖(Alkeran®)、苯丁酸氮芥(Leukeran®)、哌泊溴烷(pipobroman)(Amedel®、Vercyte®)、三伸乙基蜜胺(triethylenemelamine)(Hemel®、Hexalen®、Hexastat®)、三伸乙基硫代磷胺、替莫唑胺(Temozolomide)(Temodar®)、噻替派(Thioplex®)、白消安(Busilvex®、Myleran®)、卡莫司汀(carmustine)(BiCNU®)、洛莫司汀(lomustine)(CeeNU®)、鏈脲菌素(Zanosar®)及達卡巴嗪(DTIC-Dome®)。其他例示性烷基化劑包括(但不限於)奧沙利鉑(Oxaliplatin)(Eloxatin®)；替莫唑胺(Temodar®及Temodal®)；放線菌素d (亦稱為放線菌素-D、Cosmegen®)；美法侖(亦稱為L-PAM、L-溶肉瘤素及苯丙胺酸氮芥、Alkeran®)；六甲蜜胺(亦稱為六甲三聚氰胺(HMM)、Hexalen®)；卡莫司汀(BiCNU®)；苯達莫司汀(Bendamustine)(Treanda®)；白消安(Busulfex®及Myleran®)；卡鉑(Paraplatin®)；洛莫司汀(亦稱為CCNU、CeeNU®)；順鉑(亦稱為CDDP、Platinol®及Platinol®-AQ)；苯丁酸氮芥(Leukeran®)；環磷醯胺(Cytoxan®及Neosar®)；達卡巴嗪(亦稱為DTIC、DIC及咪唑甲醯胺、DTIC-Dome®)；六甲蜜胺(亦稱為六甲三聚氰胺(HMM)、Hexalen®)；異環磷醯胺(Ifex®)；普莫司汀；丙卡巴肼(Matulane®)；二氯甲二乙胺(亦稱為氮芥(nitrogen mustard)、氮芥(mustine)及二氯甲基二乙胺鹽酸鹽、Mustargen®)；鏈脲菌素(Zanosar®)；噻替派(亦稱為硫代磷醯胺、TESPA及TSPA、Thioplex®)；環磷醯胺(Endoxan®、Cytoxan®、Neosar®、Procytox®、Revimmune®)；及苯達莫司汀HCl (Treanda®)。
例示性蒽環黴素包括例如小紅莓(Adriamycin®及Rubex®)；博萊黴素(lenoxane®)；道諾黴素(鹽酸道諾黴素、柔紅黴素及鹽酸紅比黴素、Cerubidine®)；道諾黴素脂質體(檸檬酸道諾黴素脂質體、DaunoXome®)；米托蒽醌(DHAD、Novantrone®)；表柔比星(epirubicin)(Ellence™)；艾達黴素(Idamycin®、Idamycin PFS®)；絲裂黴素C (Mutamycin®)；格爾德黴素(geldanamycin)；除莠黴素(herbimycin)；拉維黴素(ravidomycin)；及去乙醯基拉維黴素(desacetylravidomycin)。可以與抗CD73抗體分子組合使用的例示性長春花生物鹼包括(但不限於)酒石酸長春瑞賓(vinorelbine tartrate)(Navelbine®)、長春新鹼(Oncovin®)及長春地辛(Vindesine)(Eldisine®))；長春鹼(亦稱為硫酸長春鹼、長春花鹼及VLB、Alkaban-AQ®及Velban®)；及長春瑞賓(vinorelbine)(Navelbine®)。
可以與抗CD73抗體分子組合使用的例示性蛋白酶體抑制劑包括(但不限於)硼替佐米(bortezomib)(Velcade®)；卡非佐米(carfilzomib)(PX-171-007、(S)-4-甲基-N -((S )-1-(((S )-4-甲基-1-((R )-2-甲基環氧乙烷-2-基)-1-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-2-((S )-2-(2-嗎啉基乙醯胺基)-4-苯基丁醯胺基)-戊醯胺)；馬瑞佐米(marizomib)(NPI-0052)；檸檬酸依薩佐米(ixazomib citrate)(MLN-9708)；迪蘭佐米(delanzomib)(CEP-18770)；及O- 甲基-N -[(2-甲基-5-噻唑基)羰基]-L-絲胺醯基-O-甲基-N -[(1S )-2-[(2R)-2-甲基-2-環氧乙烷基]-2-側氧基-1-(苯基甲基)乙基]-L-絲胺醯胺(ONX-0912)。
在一些實施例中，抗CD73抗體分子(例如本文所述之抗CD73抗體分子)與酪胺酸激酶抑制劑(例如受體酪胺酸激酶(RTK)抑制劑)組合使用。例示性酪胺酸激酶抑制劑包括(但不限於)表皮生長因子(EGF)路徑抑制劑(例如表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑)、血管內皮生長因子(VEGF)路徑抑制劑(例如血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制劑(例如VEGFR-1抑制劑、VEGFR-2抑制劑、VEGFR-3抑制劑))、血小板源生長因子(PDGF)路徑抑制劑(例如血小板源生長因子受體(PDGFR)抑制劑(例如PDGFR-β抑制劑))、RAF-1抑制劑、KIT抑制劑及RET抑制劑。在一些實施例中，與刺蝟抑制劑組合使用的抗癌劑選自由以下組成之群：阿西替尼(axitinib)(AG013736)、伯舒替尼(bosutinib)(SKI-606)、西地尼布(cediranib)(RECENTINTM 、AZD2171)、達沙替尼(dasatinib)(SPRYCEL®、BMS-354825)、埃羅替尼(erlotinib)(TARCEVA®)、吉非替尼(gefitinib)(IRESSA®)、伊馬替尼(imatinib)(Gleevec®、CGP57148B、STI-571)、拉帕替尼(lapatinib)(TYKERB®、TYVERB®)、來他替尼(lestaurtinib)(CEP-701)、來那替尼(neratinib)(HKI-272)、尼羅替尼(nilotinib)(TASIGNA®)、司馬沙尼(semaxanib)(司馬西尼(semaxinib)、SU5416)、舒尼替尼(sunitinib)(SUTENT®、SU11248)、妥賽蘭尼(toceranib)(PALLADIA®)、凡德他尼(vandetanib)(ZACTIMA®、ZD6474)、凡塔藍尼(vatalanib)(PTK787、PTK/ZK)、曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)、貝伐單抗(AVASTIN®)、利妥昔單抗(RITUXAN®)、西妥昔單抗(ERBITUX®)、帕尼單抗(panitumumab)(VECTIBIX®)、蘭尼單抗(ranibizumab)(Lucentis®)、尼羅替尼(nilotinib)(TASIGNA®)、索拉非尼(sorafenib)(NEXAVAR®)、阿侖單抗(alemtuzumab)(CAMPATH®)、吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin)(MYLOTARG®)、ENMD-2076、PCI-32765、AC220、BIBW 2992 (TOVOKTM )、SGX523、PF-04217903、PF-02341066、PF-299804、BMS-777607、ABT-869、MP470、BIBF 1120 (VARGATEF®)、AP24534、JNJ-26483327、MGCD265、DCC-2036、BMS-690154、CEP-11981、替沃紮尼(tivozanib)(AV-951)、OSI-930、MM-121、XL-184、XL-647、XL228、AEE788、AG-490、AST-6、BMS-599626、CUDC-101、PD153035、培利替尼(pelitinib)(EKB-569)、凡德他尼(vandetanib)(紮克替馬(zactima))、WZ3146、WZ4002、WZ8040、ABT-869 (立尼法尼(linifanib))、AEE788、AP24534 (普納替尼(ponatinib))、AV-951 (替沃紮尼(tivozanib))、阿西替尼(axitinib)、BAY 73-4506 (瑞戈非尼(regorafenib))、丙胺酸布立尼布(brivanib alaninate)(BMS-582664)、布立尼布(brivanib)(BMS-540215)、西地尼布(cediranib)(AZD2171)、CP 673451、CYC116、E7080、Ki8751、馬賽替尼(masitinib)(AB1010)、MGCD-265、二磷酸莫替沙尼(motesanib diphosphate)(AMG-706)、MP-470、OSI-930、鹽酸帕唑帕尼(Pazopanib Hydrochloride)、PD173074、甲苯磺酸索拉非尼(Sorafenib Tosylate)(Bay 43-9006)、SU 5402、TSU-68 (SU6668)、凡塔藍尼、XL880 (GSK1363089、EXEL-2880)。所選酪胺酸激酶抑制劑係選自舒尼替尼、埃羅替尼、吉非替尼或索拉非尼。
輻射療法可經由若干方法之一或方法組合來投與，包括(但不限於)外射束療法、內輻射療法、植入物輻射、立體定向放射外科手術、全身輻射療法、放射線療法及持久性或臨時性間質性近接療法。術語「近接療法」係指藉由在或靠近腫瘤或其他增生組織疾病位點插入體內之空間圍束放射性材料所遞送的輻射療法。該術語意欲包括(不限於)暴露於放射性同位素(例如At-211、I-131、I-125、Y-90、Re-186、Re-188、Sm-153、Bi-212、P-32，及Lu之放射性同位素)。適用作本發明之細胞調節劑之輻射源包括固體與液體。作為非限制性實例，輻射源可為放射性核素，諸如作為固體源之I-125、I-131、Yb-169、Ir-192、作為固體源之I-125，或發射光子、β粒子、γ輻射或其他治療射線之其他放射性核素。放射性材料亦可為由放射性核素之任何溶液(例如I-125或I-131之溶液)製備的流體，或放射性流體可以使用含有較小固體放射性核素(諸如Au-198、Y-90)粒子之適合流體的漿液製備。
CD73阻斷亦可與化學治療方案有效組合。在此等情形下，可減少所投與之化學治療試劑的劑量。
可以與抗CD73抗體分子組合投與的例示性細胞毒性劑包括抗微管劑、拓樸異構酶抑制劑、抗代謝物、有絲分裂抑制劑、烷基化劑、蒽環黴素(anthracyclines)、長春花生物鹼、插入劑、能夠中斷信號轉導路徑的藥劑、促進細胞凋亡的藥劑、蛋白酶體抑制劑及輻射(例如局部或全身照射)。
在某些實施例中，本文揭示之任何組合替代地或組合地進一步包括表18中所述之一或多種藥劑。表 18 . 可以與抗CD73抗體分子組合(例如作為單一藥劑或與本文所述之其他免疫調節劑組合)的所選治療劑。此表中所列之各公開案以全文引用的方式併入本文中，包括其中的所有結構式。
Figure 107121595-A0304-0013
在一些實施例中，另一種治療劑係選自以下一或多者：1)蛋白激酶C (PKC)抑制劑；2)熱休克蛋白90 (HSP90)抑制劑；3)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)及/或雷帕黴素標靶(mTOR)之抑制劑；4)細胞色素P450之抑制劑(例如CYP17抑制劑或17α-羥化酶/C17-20裂解酶抑制劑)；5)鐵螯合劑；6)芳香酶抑制劑；7) p53抑制劑，例如p53/Mdm2相互作用之抑制劑；8)細胞凋亡誘導劑；9)血管生成抑制劑；10)醛固酮合成酶抑制劑；11)平順化(SMO)受體抑制劑；12)促乳素受體(PRLR)抑制劑；13) Wnt信號傳導抑制劑；14) CDK4/6抑制劑；15)纖維母細胞生長因子受體2 (FGFR2)/纖維母細胞生長因子受體4 (FGFR4)抑制劑；16)巨噬細胞群落刺激因子(M-CSF)之抑制劑；17) c-KIT、組織胺釋放、Flt3 (例如FLK2/STK1)或PKC中之一或多者之抑制劑；18) VEGFR-2 (例如FLK-1/KDR)、PDGFRβ、c-KIT或Raf激酶C中之一或多者之抑制劑；19)生長抑素促效劑及/或生長激素釋放抑制劑；20)退行性淋巴瘤激酶(ALK)抑制劑；21)胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)抑制劑；22) P-醣蛋白1抑制劑；23)血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制劑；24) BCR-ABL激酶抑制劑；25) FGFR抑制劑；26) CYP11B2抑制劑；27) HDM2抑制劑，例如HDM2-p53相互作用之抑制劑；28)酪胺酸激酶抑制劑；29) c-MET抑制劑；30) JAK抑制劑；31) DAC抑制劑；32) 11β-羥化酶抑制劑；33) IAP抑制劑；34) PIM激酶抑制劑；35)箭豬(Porcupine)抑制劑；36) BRAF (例如BRAF V600E或野生型BRAF)之抑制劑；37) HER3抑制劑；38) MEK抑制劑；或39)脂質激酶抑制劑，例如如本文及表18中所述。
例示性酪胺酸激酶抑制劑包括(但不限於)表皮生長因子(EGF)路徑抑制劑(例如表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑)、血管內皮生長因子(VEGF)路徑抑制劑(例如血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制劑(例如VEGFR-1抑制劑、VEGFR-2抑制劑、VEGFR-3抑制劑))、血小板源生長因子(PDGF)路徑抑制劑(例如血小板源生長因子受體(PDGFR)抑制劑(例如PDGFR-β抑制劑))、RAF-1抑制劑、KIT抑制劑及RET抑制劑。
在一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與PKC抑制劑、索塔妥林(Sotrastaurin)(化合物A1)或PCT公開案第WO 2005/039549號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，PKC抑制劑為索塔妥林(化合物A1)或PCT公開案第WO 2005/039549號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與索塔妥林(化合物A1)或如PCT公開案第WO 2005/039549號中所述之化合物組合使用，以治療病症，諸如癌症、黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、發炎性腸病、移植排斥、眼科病症或牛皮癬。
在一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與BCR-ABL抑制劑TASIGNA (化合物A2)或PCT公開案第WO 2004/005281號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，BCR-ABL抑制劑為TASIGNA，或PCT公開案第WO 2004/005281號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與TASIGNA (化合物A2)或如PCT公開案第WO 2004/005281號中所述的化合物組合使用以治療病症，諸如淋巴球性白血病、巴金森氏病(Parkinson's Disease)、神經癌症、黑色素瘤、消化/胃腸癌、結腸直腸癌、骨髓性白血病、頭頸癌或肺高血壓。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與HSP90抑制劑組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症，例如癌症、多發性骨髓瘤、非小細胞肺癌、淋巴瘤、胃癌、乳癌、消化/胃腸癌、胰臟癌、結腸直腸癌、實體腫瘤或造血病症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)係與PI3K及/或mTOR抑制劑8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氫-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(化合物A41)組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，PI3K及/或mTOR抑制劑為8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氫-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(化合物A41)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氫-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(化合物A41)組合使用，以治療諸如癌症、前列腺癌、白血病(例如淋巴球性白血病)、乳癌、腦癌、膀胱癌、胰臟癌、腎癌、實體腫瘤或肝癌之病症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與FGFR抑制劑3-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基脲(化合物A5)或美國專利8,552,002中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，FGFR抑制劑為3-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基苯基)-1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基脲(化合物A5)或美國專利第8,552,002號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與化合物A5或如US 8,552,002中所述的化合物組合使用以治療病症，諸如消化道/胃腸癌、血液癌症或實體腫瘤。化合物A5具有以下結構：
Figure 02_image083
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與PI3K抑制劑布帕昔布(化合物A6)或PCT公開案第WO 2007/084786號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一些實施例中，PI3K抑制劑為布帕昔布(化合物A6)或PCT公開案第WO 2007/084786號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與布帕昔布(化合物A6)或PCT公開案第WO 2007/084786號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，諸如前列腺癌、非小細胞肺癌、內分泌癌症、白血病、卵巢癌、黑色素瘤、膀胱癌、乳癌、雌性生殖系統癌症、消化/胃腸癌、結腸直腸癌、多形性神經膠母細胞瘤、實體腫瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、造血病症或頭頸癌。化合物A6具有以下結構：
Figure 02_image085
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與FGFR抑制劑8-(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(4-((二甲基胺基)甲基)-1H-咪唑-2-基)喹喏啉-5-甲醯胺(化合物A7)或PCT公開案第WO 2009/141386號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，FGFR抑制劑為8-(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(4-((二甲基胺基)甲基)-1H-咪唑-2-基)喹喏啉-5-甲醯胺(化合物A7)或PCT公開案第WO 2009/141386號中所揭示之化合物。在一個實施例中，FGFR抑制劑為8-(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(4-((二甲基胺基)甲基)-1H-咪唑-2-基)喹喏啉-5-甲醯胺(化合物A7)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與8-(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苯基)-N-(4-((二甲胺基)甲基)-1H-咪唑-2-基)喹喏啉-5-甲醯胺(化合物A7)或PCT公開案第WO 2009/141386號中揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如特徵為血管生成之癌症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與PI3K抑制劑(S)-N1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)吡咯啶-1,2-二甲醯胺(化合物A8)或PCT公開案第WO 2010/029082號所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，PI3K抑制劑為(S)-N1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)吡咯啶-1,2-二甲醯胺(化合物A8)或PCT公開案第WO 2010/029082號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與(S)-N1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)吡咯啶-1,2-二甲醯胺(化合物A8)或PCT公開案第WO 2010/029082號所揭示之化合物組合使用，以治療病症，諸如胃癌、乳癌、胰臟癌、消化/胃腸癌、實體腫瘤及頭頸癌。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與細胞色素P450抑制劑(例如CYP17抑制劑)或PCT公開案第WO 2010/149755號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，細胞色素P450抑制劑(例如CYP17抑制劑)為CFG920或PCT公開案第WO 2010/149755；US 8,263,635 B2；或EP 2445903 B1號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與PCT公開案第WO 2010/149755號中所揭示之化合物組合使用以治療前列腺癌。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與HDM2抑制劑(S)-1-(4-氯苯基)-7-異丙氧基-6-甲氧基-2-(4-(甲基(((1r,4S)-4-(4-甲基-3-側氧基哌嗪-1-基)環己基)甲基)胺基)苯基)-1,2-二氫異喹啉-3(4H)-酮(化合物A10)或PCT公開案第WO 2011/076786號中所揭示之化合物組合使用，以治療病症，例如本文所述之病症)。在一個實施例中，HDM2抑制劑為(S)-1-(4-氯苯基)-7-異丙氧基-6-甲氧基-2-(4-(甲基(((1r,4S)-4-(4-甲基-3-側氧基哌嗪-1-基)環己基)甲基)胺基)苯基)-1,2-二氫異喹啉-3(4H)-酮(化合物A10)或PCT公開案第WO 2011/076786號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與(S)-1-(4-氯苯基)-7-異丙氧基-6-甲氧基-2-(4-(甲基(((1r,4S)-4-(4-甲基-3-側氧基哌嗪-1-基)環己基)甲基)胺基)苯基)-1,2-二氫異喹啉-3(4H)-酮(化合物A10)或PCT公開案第WO 2011/076786號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如實體腫瘤。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與鐵螯合劑地拉羅司(亦稱為EXJADE；化合物A11)或PCT公開案第WO 1997/049395號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，鐵螯合劑為地拉羅司(Deferasirox)或PCT公開案第WO 1997/049395號中所揭示之化合物。在一個實施例中，鐵螯合劑為地拉羅司(Deferasirox)(化合物A11)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與地拉羅司(化合物A11)或PCT公開案第WO 1997/049395號中揭示之化合物組合使用以治療鐵過載、血色素沈著症或骨髓發育不良。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與芳香酶抑制劑來曲唑(亦稱為FEMARA；化合物A12)或US 4,978,672中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，芳香酶抑制劑為來曲唑(化合物A12)或美國專利4,978,672中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與來曲唑(化合物A12)或美國專利4,978,672中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、平滑肌肉瘤、子宮內膜癌、乳癌、雌性生殖系統癌症或激素缺乏。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與PI3K抑制劑(例如泛PI3K抑制劑(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-4-(羥甲基)-5-甲基噁唑啶-2-酮(化合物A13)或PCT公開案第WO2013/124826號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，PI3K抑制劑為(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-4-(羥甲基)-5-甲基噁唑啶-2-酮(化合物A13)或PCT公開案第WO2013/124826號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-4-(羥甲基)-5-甲基噁唑啶-2-酮(化合物A13)或PCT公開案第WO2013/124826號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症或晚期實體腫瘤。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與p53及/或p53/Mdm2相互作用之抑制劑(S)-5-(5-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)-6-(4-氯苯基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-異丙基-5,6-二氫吡咯并[3,4-d]咪唑-4(1H)-酮(化合物A14)或PCT公開案第WO2013/111105號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，p53及/或p53/Mdm2相互作用抑制劑為(S)-5-(5-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)-6-(4-氯苯基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-異丙基-5,6-二氫吡咯并[3,4-d]咪唑-4(1H)-酮(化合物A14)或PCT公開案第WO2013/111105號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與(S)-5-(5-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)-6-(4-氯苯基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-異丙基-5,6-二氫吡咯并[3,4-d]咪唑-4(1H)-酮(化合物A14)或PCT公開案第WO2013/111105號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症或軟組織肉瘤。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與CSF-1R酪胺酸激酶抑制劑4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，CSF-1R酪胺酸激酶抑制劑為4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症。
在某些實施例中，CSF-1R酪胺酸激酶抑制劑4-((2-(((1R,2R)-2-羥基環己基)胺基)苯并[d]噻唑-6-基)氧基)-N-甲基吡啶甲醯胺(化合物A15)或PCT公開案第WO 2005/073224號中所揭示之化合物係與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與以治療癌症，例如實體腫瘤(例如晚期實體腫瘤)。可以藉由該組合治療之例示性癌症包括(但不限於)腦癌(例如多形性神經膠母細胞瘤(GBM)，例如復發性神經膠母細胞瘤)、乳癌(例如三陰性乳癌(例如NTBC))或胰臟癌(例如晚期胰臟癌)。此等癌症之共同特點包括例如以可能導致免疫逃避及免疫抑制之腫瘤微環境中之TAM含量高為特徵的腫瘤生物學。在一些實施例中，阻斷CSF-1R聯合抗CD73療法可以例如促進TAM再程式化且/或移除腫瘤浸潤性淋巴球(TIL)之免疫抑制。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與細胞凋亡誘導劑及/或血管生成抑制劑(諸如甲磺酸伊馬替尼(亦稱為GLEEVEC®；化合物A16)或PCT公開案第WO1999/003854號中所揭示之化合物)組合使用以治療病症，例如所述病症。在一個實施例中，細胞凋亡誘導劑及/或血管生成抑制劑為甲磺酸伊馬替尼(化合物A16)或PCT公開案第WO1999/003854號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與甲磺酸伊馬替尼(化合物A16)或PCT公開案第WO1999/003854號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、多發性骨髓瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、淋巴瘤、胃癌、黑色素瘤、乳癌、胰臟癌、消化/胃腸癌、結腸直腸癌、多形性神經膠母細胞瘤、肝癌、頭頸癌、哮喘、多發性硬化症、過敏、阿茲海默氏癡呆症(Alzheimer's dementia)、肌肉萎縮性側索硬化或類風濕性關節炎。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與JAK抑制劑2-氟-N-甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(化合物A17)或其二鹽酸鹽或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，JAK抑制劑為2-氟-N-甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(化合物A17)或其二鹽酸鹽，或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與2-氟-N-甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2-基)苯甲醯胺(化合物A17)或其二鹽酸鹽或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如結腸直腸癌、骨髓性白血病、血液癌症、自體免疫疾病、非霍奇金氏淋巴瘤或血小板增多症。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與JAK抑制劑蘆可替尼磷酸鹽(亦稱為JAKAFI；化合物A18)或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，JAK抑制劑為盧佐替尼磷酸鹽(化合物A18)或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與蘆可替尼磷酸鹽(化合物A18)或PCT公開案第WO 2007/070514號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如前列腺癌、淋巴球性白血病、多發性骨髓瘤、淋巴瘤、肺癌、白血病、惡病質、乳癌、胰臟癌、類風濕性關節炎、牛皮癬、結腸直腸癌、骨髓性白血病、血液癌症、自體免疫疾病、非霍奇金氏淋巴瘤或血小板增多症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與去乙醯酶(DAC)抑制劑帕比諾他(Panobinostat)(化合物A19)或PCT公開案第WO 2014/072493號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，DAC抑制劑為帕比諾他(Panobinostat)(化合物A19)或PCT公開案第WO 2014/072493號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與帕比諾他(化合物A19)、PCT公開案第WO 2014/072493號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如結腸直腸癌、小細胞肺癌、呼吸道/胸腺癌、前列腺癌、多發性骨髓瘤、骨髓發育不良症候群、骨癌、非小細胞肺癌、內分泌癌症、淋巴瘤、神經癌症、白血病、HIV/AIDS、免疫病症、移植排斥反應、胃癌、黑色素瘤、乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))、胰臟癌、結腸直腸癌、多形性神經膠母細胞瘤、骨髓性白血病、血液癌症、腎癌、非霍奇金氏淋巴瘤、頭頸癌、造血病症或肝癌。在一些實施例中，癌症係選自結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS CRC))、肺癌(例如非小細胞肺癌)或乳癌(例如三陰性肺癌(TNBC))。
在一些實施例中，本文所述之組合包括去乙醯酶(DAC)抑制劑帕比諾他(化合物A19)，或PCT公開案第WO 2014/072493號中所揭示之化合物，及免疫檢查點分子抑制劑，例如CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)。
在一個實施例中，DAC抑制劑帕比諾他(化合物A19)或PCT公開案第WO 2014/072493號中所揭示之化合物係與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與以治療結腸直腸癌(例如MSS CRC)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC)或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與細胞色素P450 (例如11B2)、醛固酮或血管生成劑中之一或多者之抑制劑奧卓司他(化合物A20)或PCT公開案第WO2007/024945號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，細胞色素P450 (例如11B2)、醛固酮或血管生成中之一或多者之抑制劑為奧卓司他(化合物A20)或PCT公開案第WO2007/024945號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與奧卓司他(化合物A20)或PCT公開案第WO2007/024945號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如庫欣氏症候群(Cushing's syndrome)、高血壓或心臟衰竭療法。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與IAP抑制劑(S)-N-((S)-1-環己基-2-((S)-2-(4-(4-氟苯甲醯基)噻唑-2-基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-2-(甲基胺基)丙醯胺(化合物A21)或中US 8,552,003所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，IAP抑制劑為(S)-N-((S)-1-環己基-2-((S)-2-(4-(4-氟苯甲醯基)噻唑-2-基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-2-(甲基胺基)丙醯胺(化合物A21)或美國專利8,552,003中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與(S)-N-((S)-1-環己基-2-((S)-2-(4-(4-氟苯甲醯基)噻唑-2-基)吡咯啶-1-基)-2-側氧基乙基)-2-(甲基胺基)丙醯胺(化合物A21)或美國專利8,552,003中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如多發性骨髓瘤、結腸直腸癌(CLC)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC)、乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))、卵巢癌、胰臟癌或造血病症。在一些實施例中，癌症係選自結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS CRC))、肺癌(例如非小細胞肺癌)或乳癌(例如三陰性肺癌(TNBC))。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與平順化(SMO)抑制劑(R)-2-(5-(4-(6-苯甲基-4,5-二甲基噠嗪-3-基)-2-甲基哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)丙-2-醇(化合物A25)或PCT公開案第WO 2010/007120號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，SMO抑制劑為(R)-2-(5-(4-(6-苯甲基-4,5-二甲基噠嗪-3-基)-2-甲基哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)丙-2-醇(化合物A25)，或PCT公開案第WO 2010/007120號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與(R)-2-(5-(4-(6-苯甲基-4,5-二甲基噠嗪-3-基)-2-甲基哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)丙-2-醇(化合物A25)或PCT公開案第WO 2010/007120號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、神經管胚細胞瘤、小細胞肺癌、前列腺癌、基底細胞癌、胰臟癌或炎症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與Alk抑制劑色瑞替尼(ceritinib)(亦稱為ZYKADIA；化合物A23)組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，Alk抑制劑為色瑞替尼(化合物A23)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與色瑞替尼(化合物A23)組合使用以治療諸如非小細胞肺癌或實體腫瘤之病症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與JAK及/或CDK4/6抑制劑7-環戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(化合物A24)或美國專利8,415,355或美國專利8,685,980中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，JAK及/或CDK4/6抑制劑為7-環戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(化合物A24)或美國專利8,415,355或美國專利8,685,980中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與7-環戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(化合物A24)或US 8,415,355或US 8,685,980中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如淋巴瘤、神經癌症、黑色素瘤、乳癌或實體腫瘤。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與促乳素受體(PRLR)抑制劑、如美國專利7,867,493所揭示的人類單株抗體分子(化合物A26)組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，PRLR抑制劑為US 7,867,493中揭示之人類單株抗體(化合物A26)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與美國專利7,867,493中所述之人類單株抗體分子(化合物A26)組合使用以治療病症，諸如癌症、前列腺癌或乳癌。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與PIM激酶抑制劑N-(4-((1R,3S,5S)-3-胺基-5-甲基環己基)吡啶-3-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶甲醯胺(化合物A27)或PCT公開案第WO 2010/026124號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，PIM激酶抑制劑為N-(4-((1R,3S,5S)-3-胺基-5-甲基環己基)吡啶-3-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶甲醯胺(化合物A27)或PCT公開案第WO 2010/026124號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與N-(4-((1R,3S,5S)-3-胺基-5-甲基環己基)吡啶-3-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶甲醯胺(化合物A27)或PCT公開案第WO 2010/026124號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如多發性骨髓瘤、骨髓發育不良症候群、骨髓白血病或非霍奇金氏淋巴瘤。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與Wnt信號傳導抑制劑2-(2',3-二甲基-[2,4'-聯吡啶]-5-基)-N-(5-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙醯胺(化合物A28)或PCT公開案第WO 2010/101849號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，Wnt信號傳導抑制劑為2-(2',3-二甲基-[2,4'-聯吡啶]-5-基)-N-(5-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙醯胺(化合物A28)或PCT公開案第WO 2010/101849號中所揭示之化合物。在一個實施例中，Wnt信號傳導抑制劑為2-(2',3-二甲基-[2,4'-聯吡啶]-5-基)-N-(5-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙醯胺(化合物A28)。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與2-(2',3-二甲基-[2,4'-聯吡啶]-5-基)-N-(5-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙醯胺(化合物A28)或PCT公開案第WO 2010/101849號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如實體腫瘤(例如頭頸癌、鱗狀細胞癌、乳癌、胰臟癌或結腸癌)。在某些實施例中，癌症係選自皮膚癌(例如黑色素瘤)、微衛星高度不穩定性(高MSI)實體腫瘤、胰臟癌或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與BRAF抑制劑組合使用以治療病症，例如本文所述之病症，例如非小細胞肺癌、黑色素瘤或結腸直腸癌。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與CDK4/6抑制劑7-環戊基-N,N-二甲基-2-((5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(化合物A30)或PCT公開案第WO 2011/101409號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，CDK4/6抑制劑為7-環戊基-N,N-二甲基-2-((5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(化合物A30)或PCT公開案第WO 2011/101409號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與7-環戊基-N,N-二甲基-2-((5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基)胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(化合物A30)或PCT公開案第WO 2011/101409號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、套細胞淋巴瘤、脂肪肉瘤、非小細胞肺癌、黑色素瘤、鱗狀細胞食道癌或乳癌。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與HER3抑制劑化合物A31或PCT公開案第WO 2012/022814號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，HER3抑制劑為化合物A31或PCT公開案WO 2012/022814中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與化合物A31或PCT公開案WO 2012/022814中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如胃癌、食道癌、頭頸癌、鱗狀細胞癌、胃癌、乳癌(例如轉移性乳癌)或消化/胃腸癌。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與FGFR2及/或FGFR4抑制劑化合物A32或公開案PCT公開案第WO 2014/160160號中所揭示之化合物(例如針對FGFR2及/或FGFR4的抗體分子藥物結合物，例如mAb 12425)組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，FGFR2及/或FGFR4抑制劑為化合物A32或公開案PCT公開案第WO 2014/160160號中揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與化合物A32或如表18中所述之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、胃癌、乳癌、橫紋肌肉瘤、肝癌、腎上腺癌、肺癌、食道癌、結腸癌或子宮內膜癌。
在一些實施例中，化合物A32為針對FGFR2及/或FGFR4之抗體分子藥物結合物，例如mAb 12425。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與M-CSF抑制劑化合物A33或PCT公開案第WO 2004/045532號中所揭示之化合物(例如針對M-CSF之抗體分子或Fab片段)組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，M-CSF抑制劑為化合物A33或PCT公開案第WO 2004/045532號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與化合物A33或如PCT公開案第WO 2004/045532號中所述之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、前列腺癌、乳癌或色素沈著絨毛結節性關節膜炎(PVNS)。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與MEK抑制劑組合使用以治療病症，諸如非小細胞肺癌、多系統遺傳病症、黑色素瘤、卵巢癌、消化/胃腸癌、類風濕性關節炎或結腸直腸癌。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與c-KIT、組織胺釋放、Flt3 (例如FLK2/STK1)或PKC、米哚妥林(化合物A35)或PCT公開案第WO 2003/037347號中所揭示之化合物中之一或多者組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，抑制劑為米哚妥林(化合物A35)或PCT公開案第WO 2003/037347號中所揭示之化合物。在一個實施例中，c-KIT、組織胺釋放、Flt3 (例如FLK2/STK1)或PKC中之一或多者之抑制劑為米哚妥林。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係與米哚妥林(化合物A35)或PCT公開案第WO 2003/037347號中揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、結腸直腸癌、骨髓性白血病、骨髓發育不良症候群、年齡相關黃斑變性、糖尿病併發症或皮膚病。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與TOR抑制劑(例如mTOR抑制劑)、依維莫司(亦稱為AFINITOR；化合物A36)或PCT公開案第WO 2014/085318號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症)。在一個實施例中，TOR抑制劑為依維莫司(化合物A36)或PCT公開案第WO 2014/085318號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與依維莫司(化合物A36)組合使用以治療病症，諸如結腸直腸癌、間質性肺病、小細胞肺癌、呼吸道/胸腺癌、前列腺癌、多發性骨髓瘤、肉瘤、年齡相關黃斑變性、骨癌、結節性硬化症、非小細胞肺癌、內分泌癌症、淋巴瘤、神經病症、星形細胞瘤、子宮頸癌、神經癌症、白血病、免疫病症、移植排斥反應、胃癌、黑色素瘤、癲癇症、乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC)，或膀胱癌。在一些實施例中，癌症係選自結腸直腸癌(例如微衛星穩定結腸直腸癌(MSS CRC))、肺癌(例如非小細胞肺癌)或乳癌(例如三陰性肺癌(TNBC))。
在一些實施例中，本文所述之組合包括mTOR抑制劑依維莫司(化合物A36)，或PCT公開案第WO 2014/085318號中所揭示之化合物，及免疫檢查點分子抑制劑，例如CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與VEGFR-2、PDGFRβ、KIT或Raf激酶C、1-甲基-5-((2-(5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)吡啶-4-基)氧基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(化合物A37)或PCT公開案第WO 2007/030377號中所揭示之化合物中之一或多者組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，VEGFR-2、PDGFRβ、KIT或Raf激酶C中之一或多者之抑制劑為1-甲基-5-((2-(5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)吡啶-4-基)氧基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(化合物A37)或PCT公開案第WO 2007/030377號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與1-甲基-5-((2-(5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)吡啶-4-基)氧基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(化合物A37)或PCT公開案第WO 2007/030377號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、黑色素瘤或實體腫瘤。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與生長抑素促效劑及/或生長激素釋放抑制劑二天冬胺酸帕瑞肽(Pasireotide diaspartate)(亦稱為SIGNIFOR；化合物A38)或PCT公開案第WO2002/010192號或美國專利第7,473,761號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，生長抑素促效劑及/或生長激素釋放抑制劑為二天冬胺酸帕瑞肽(化合物A38)或PCT公開案第WO2002/010192號或美國專利第7,473,761號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與二天冬胺酸帕瑞肽(化合物A38)或PCT公開案第WO2002/010192號或美國專利第7,473,761號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如前列腺癌、內分泌癌症、神經癌症、神經內分泌腫瘤(NET)(例如非典型肺類癌瘤)、皮膚癌(例如黑色素瘤或梅克爾細胞癌)、胰臟癌、肝癌、庫欣氏症候群(Cushing's syndrome)、胃腸病症、肢端肥大症、肝臟及膽道病症，或肝硬化。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與例如信號轉導調節劑及/或血管生成抑制劑組合使用以治療病症，諸如癌症、呼吸道/胸腺癌、多發性骨髓瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、內分泌癌症或神經遺傳病症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與EGFR抑制劑(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，EGFR抑制劑為(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症，例如實體腫瘤。
在一些實施例中，將EGFR抑制劑(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲胺基)丁-2-烯醯基)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸鹼醯胺(化合物A40)或PCT公開案第WO 2013/184757號中所揭示之化合物與CD73抑制劑(例如抗CD73抗體分子)組合投與，以治療結腸直腸癌(CRC)、肺癌(例如非小細胞肺癌(NSCLC))或乳癌(例如三陰性乳癌(TNBC))。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與ALK抑制劑N6 -(2-異丙氧基-5-甲基-4-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)-N4 -(2-(異丙基磺醯基)苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺(化合物A42)或PCT公開案第WO 2008/073687號中所揭示之組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，ALK抑制劑為N6 -(2-異丙氧基-5-甲基-4-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)-N4 -(2-(異丙基磺醯基)苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺(化合物A42)或PCT公開案第WO 2008/073687號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與N6 -(2-異丙氧基-5-甲基-4-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)-N4 -(2-(異丙基磺醯基)苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺(化合物A42)或PCT公開案第WO 2008/073687號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症、多形性大細胞淋巴瘤(ALCL)、非小細胞肺癌(NSCLC)或神經母細胞瘤。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與IGF-1R抑制劑3-(4-(4-((5-氯-4-((5-甲基-1H-吡唑-3-基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-5-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基)硫雜環丁烷1,1-二氧化物(化合物A43)、5-氯-N2 -(2-氟-5-甲基-4-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)哌啶-4-基)苯基)-N4 -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(化合物A44)或5-氯-N2-(4-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟-5-甲基苯基)-N4 -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(化合物A45)或PCT公開案第WO 2010/002655號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如所述病症。在一個實施例中，IGF-1R抑制劑為3-(4-(4-((5-氯-4-((5甲基-1H-吡唑-3-基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-5-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基)硫雜環丁烷1,1-二氧化物(化合物A43)、5-氯-N2 -(2-氟-5-甲基-4-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)哌啶-4-基)苯基)-N4 -(5甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(化合物A44)、5-氯-N2-(4-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟-5-甲基苯基)-N4 -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(化合物A45)或PCT公開案第WO 2010/002655號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與3-(4-(4-((5-氯-4-((5-甲基-1H-吡唑-3-基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-5-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基)硫雜環丁烷1,1-二氧化物(化合物A43)、5-氯-N2 -(2-氟-5-甲基-4-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)哌啶-4-基)苯基)-N4 -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(化合物A44)、5-氯-N2-(4-(1-乙基哌啶-4-基)-2-氟-5-甲基苯基)-N4 -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(化合物A45)或PCT公開案第WO 2010/002655號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症或肉瘤。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與P-醣蛋白1抑制劑伐司撲達(Valspodar)(亦稱為AMDRAY；化合物A46)或EP 296122中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，P-醣蛋白1抑制劑為伐司撲達(Valspodar)(化合物A46)或EP 296122中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與伐司撲達(化合物A46)或EP 296122中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症或抗藥性腫瘤。
在另一實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與VEGFR抑制劑、丁二酸凡塔藍尼(化合物A47)或EP 296122中所揭示之化合物中之一或多者組合使用以治療病症，例如本文中所述之病症。在一個實施例中，VEGFR抑制劑為丁二酸凡塔藍尼(化合物A47)或EP 296122中揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與丁二酸凡塔藍尼(化合物A47)或EP 296122中揭示之化合物組合使用以治療癌症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與IDH抑制劑或WO2014/141104中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，IDH抑制劑為PCT公開案第WO2014/141104號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與WO2014/141104中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與BCL-ABL抑制劑或PCT公開案第WO2013/171639、WO2013/171640、WO2013/171641或WO2013/171642號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，BCL-ABL抑制劑為PCT公開案第WO2013/171639號、第WO2013/171640號、第WO2013/171641號或第WO2013/171642號中所揭示之化合物。在一個實施例中，抗CD73抗體分子與PCT公開案第WO2013/171639號、第WO2013/171640號、第WO2013/171641號或第WO2013/171642號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，諸如癌症。
在另一個實施例中，該組合(例如包含如本文所述之抗CD73抗體分子的組合)包括或與c-RAF抑制劑或PCT公開案第WO2014/151616號中所揭示之化合物組合使用以治療病症，例如本文所述之病症。在一個實施例中，c-RAF抑制劑為化合物A50或PCT公開案第WO2014/151616號中所揭示之化合物。在一些實施例中，c-RAF抑制劑或化合物A50為式(I)化合物：
Figure 02_image087
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： Z1 為O、S、S(=O)或SO2 ； Z2 為N、S或CRa ，其中Ra 為H、鹵基、C1-4 烷基或C1-4 鹵烷基； R1 為CN、鹵基、OH、C1-4 烷氧基，或C1-4 烷基，其視情況經一至三個選自鹵基、C1-4 烷氧基、CN及羥基之基團取代； 環B係選自苯基、吡啶、嘧啶、吡嗪、噠嗪、吡啶酮、嘧啶酮、吡嗪酮、噠嗪酮及噻唑，其中之每一者視情況經至多兩個選自以下之基團取代：鹵基、OH、CN、C1-4 烷基、C2-4 烯基、-O-(C1-4 烷基)、NH2 、NH-(C1-4 烷基)、-N(C1-4 烷基)2 、-SO2 R2 、NHSO2 R2 、NHC(O)R2 、NHCO2 R2 、C3-6 環烷基、5-6員雜芳基、-O-C3-6 環烷基、-O-(5-6員雜芳基)、C4-8 雜環烷基，及-O-(4-8員雜環烷基)，其中各雜環烷基及雜芳基含有至多三個選自N、O及S之雜原子作為環成員， 其中各C1-4 烷基、C2-4 烯基、C3-6 環烷基、5-6員雜芳基及4-8員雜環烷基各視情況經至多三個選自以下的基團取代：側氧基、羥基、鹵基、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基、C1-4 烷氧基及-(CH2 )1-2 Q，其中Q為OH、C1-4 烷氧基、-CN、NH2 、-NHR3 、-N(R3 )2 、-SO2 R3 、NHSO2 R3 、NHC(O)OR3 或NHC(O)R3 ；各R2 及R3 獨立地C1-4 烷基；及 環B視情況與含有至多兩個選自N、O及S之雜原子的5-6員芳族或非芳族環稠合，其中該5-6員環可以經鹵基、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基或C1-4 烷氧基取代，且若稠合環為非芳族，則取代基選項可以進一步包括側氧基； 各Y獨立地選自C1-4 烷基、C1-4 烷氧基、CN、鹵基、側氧基、-(CH2 )P OR4 、-(CH2 )pN(R4 )2 、-(CH2 )pNHC(O)R4 、-(CH2 )p NHCOO(C1-4 烷基)，及咪唑， 或環A上之兩個Y基團視情況結合在一起形成稠合環或橋接環A，其中該稠合或橋接環視情況含有選自N、O及S之雜原子作為環成員，且視情況經至多兩個選自以下的基團取代：C1-4 烷基、C1-4 烷氧基、CN、鹵基、側氧基、-(CH2 )p OR4 、-(CH2 )P N(R4 )2 、-(CH2 )p NHC(O)R4 ，及-(CH2 )p NHCOO(C1-4 烷基)； 各R4 獨立地為H或C1-4 烷基； 各p獨立地為0、1或2； q為0、1或2； Z3 、Z4 及Z5 獨立地選自CH及N及視情況NO； L為-C(=O)-NR4 -[CY]或-NR4 -C(=O)-[CY]，其中[CY]表示L之哪個原子連接至CY；及 CY為選自苯基、吡啶、嘧啶、吡嗪、噠嗪、吡啶酮、噻唑、異噻唑、噁唑、吡唑及異噁唑之芳族環，其中該環視情況與噻吩、咪唑、噁唑酮或吡咯環稠合； 且CY經至多兩個選自鹵基、CN、R5 、OR5 、SO2 R5 、-S(=NH)(=O)R5 、OH、NH2 、NHR5 及-N(R5 )2 的基團取代， 其中各R5 獨立地為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-6 雜環基、含有至多三個選自N、O及S之雜原子作為環成員的5員雜芳基，或C3-8 環烷基，且R5 視情況經至多四個選自以下的基團取代：側氧基、鹵基、CN、R6 、OH、OR6 、SO2 R6 、NH2 、NHR6 、N(R6 )2 、NHSO2 R6 、NHCOOR6 、NHC(=O)R6 、-CH2 OR7 、-CH2 N(R7 )2 ，其中各R6 獨立地為C1-4 烷基，且各R7 獨立地為H或C1-4 烷基； 且同一氮原子上的兩個R4 、R5 、R6 或R7 可以結合在一起形成5-6員雜環，該雜環視情況含有額外的N、O或S作為環成員且視情況經至多兩個選自C1-4 烷基、側氧基、鹵基、OH及C1-4 烷氧基的基團取代。
投與抗體分子之方法在此項技術中已知且描述於下文中。所用分子之適合劑量取決於個體年齡及體重及所用特定藥物。抗CD73抗體分子之劑量及治療方案可由熟習此項技術者確定。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子藉由注射(例如靜脈內)、以約60 mg至2400 mg之劑量(例如均一劑量)投與，例如約100 mg至2400 mg、約100 mg至2200 mg、約100 mg至2000 mg、約100 mg至1800 mg、約100 mg至1600 mg、約100 mg至1400 mg、約100 mg至1200 mg、約100 mg至1000 mg、約100 mg至800 mg、約100 mg至600 mg、約100 mg至400 mg、約100 mg至200 mg，或約100 mg、約180 mg，或約200 mg。給藥時程可不同，例如一週一次至每2、3或4週一次。在一些實施例中，抗CD73抗體分子係藉由靜脈內輸注、以約100 mg之劑量投與，每兩週一次。在一些實施例中，抗CD73抗體分子係藉由靜脈內輸注、以至少約180 mg之劑量投與，每兩週一次。在一些實施例中，抗CD73抗體分子係藉由靜脈內輸注、以約200 mg之劑量投與，每兩週一次。
在一些實施例中，本文揭示之抗CD73抗體分子係藉由注射(例如皮下或靜脈內)、以約5 mg至100 mg、約100 mg至500 mg、約500 mg至1000 mg、約1000 mg至1500 mg、約1500 mg至2000 mg、約2000 mg至2500 mg、約2500 mg至3000 mg、約3000 mg至3500 mg或約3500 mg至4000 mg之劑量(例如均一劑量)投與，例如每週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約6 mg、約20 mg、約60 mg、約200 mg、約600 mg、約1200 mg、約2400 mg、約3000 mg或約3600 mg之劑量投與，例如QW、Q2W或Q4W。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約60 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約200 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約600 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約1200 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約2400 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約3000 mg Q2W之劑量投與。在某些實施例中，抗體分子例如靜脈內以約3600 mg Q2W之劑量投與。
在某些實施例中，抗CD73抗體分子係藉由注射(例如靜脈內)以約1至30 mg/kg之劑量投與，例如約5至25 mg/kg、約10至20 mg/kg、約1至5 mg/kg，或約3 mg/kg。在一些實施例中，抗CD73抗體分子係以約1 mg/kg、約3 mg/kg或10 mg/kg、約20 mg/kg、約30 mg/kg或約40 mg/kg之劑量投與。在一些實施例中，抗CD73抗體分子係以約1-3 mg/kg或約3-10 mg/kg之劑量投與。在一些實施例中，抗CD73抗體分子係以約0.5-2、2-4、2-5、5-15或5-20 mg/kg之劑量投與。給藥時程可不同，例如一週一次至每2、3或4週一次。在一個實施例中，抗CD73抗體分子係以約10至20 mg/kg之劑量每隔一週投與。
抗體分子可以未結合形式使用或與第二藥劑(例如細胞毒性藥物、放射性同位素，或蛋白質，例如蛋白質毒素或病毒蛋白質)結合。此方法包括：將單獨或與細胞毒性藥物結合的抗體分子投與需要此類療法的個體。抗體分子可以用於遞送多種治療劑，例如細胞毒性部分，例如治療藥物、放射性同位素、植物、真菌或細菌來源之分子，或生物蛋白質(例如蛋白質毒素)或顆粒(例如重組病毒顆粒，例如經由病毒外殼蛋白)，或其混合物。
診斷用途 在一個態樣中，本發明提供用於活體外(例如在生物樣品中，諸如組織切片，例如來自癌變組織的切片)或活體內(例如個體之活體內成像)偵測CD73蛋白之存在的診斷方法。該方法包括：(i)使樣品與本文所述之抗體分子接觸，或向個體投與抗體分子；(視情況)(ii)與參考樣品(例如對照樣品(例如對照生物樣品，諸如血漿、組織、活體組織切片)或對照個體))接觸；及(iii)偵測抗體分子與樣品或個體或對照樣品或對照個體之間的複合物形成，其中樣品或個體中之複合物形成相對於對照樣品或對照個體的變化(例如統計顯著變化)表示樣品中存在CD73。抗體分子可以直接地或間接地用可偵測物質標記以促進偵測所結合或非結合之抗體的偵測。適合之可偵測物質包括各種酶、輔基、螢光物質、發光物質及放射性物質，如上文所述且下文更詳細地描述。
術語「樣品」，當其指偵測多肽所用的樣品時，包括(但不限於)細胞、細胞溶胞物、細胞之蛋白質或膜萃取物、體液，或組織樣品。
抗體分子與CD73之間的複合物形成可以藉由量測或目測結合至CD73抗原之結合分子或非結合之結合分子來偵測。可以使用習知偵測分析，例如酶聯免疫吸附分析(ELISA)、放射免疫分析(RIA)或組織免疫組織化學。作為標記抗體分子的替代方案，可以藉由競爭免疫分析、使用經可偵測物質標記之標準物及未標記的抗體分子來分析樣品中的CD73存在。在此分析中，合併生物樣品、經標記之標準物及抗體分子且測定結合至未標記結合分子的所標記標準物之量。樣品中CD73之量與結合至抗體分子的所標記標準物之量成反比。
核酸 本發明特徵亦為包含編碼如本文所述之抗CD73抗體分子之重鏈及輕鏈可變區及CDR或高變環之核苷酸序列的核酸。舉例而言，本發明特徵為分別編碼選自本文揭示之一或多種抗體分子之抗CD73抗體分子之重鏈及輕鏈可變區的第一及第二核酸。核酸可以包含如表1中所述之核苷酸序列，或與其基本上一致的序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性的序列，或與表1中所示的序列差異不超過3、6、15、30或45個核苷酸的序列)。
在某些實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個或三個CDR或高變環的核苷酸序列，該等CDR或高變環來自具有如表1中所闡述之胺基酸序列或與其基本上同源之序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一或多個取代(例如保守取代)的序列)的重鏈可變區。在其他實施例中，該核酸可以包含編碼至少一個、兩個或三個CDR或高變環的核苷酸序列，該等CDR或高變環來自具有如表1中所闡述之胺基酸序列或與其基本上同源之序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一或多個取代(例如保守取代)的序列)的輕鏈可變區。在又另一個實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個CDR或高變環的核苷酸序列，該等CDR或高變環來自具有如表1中所闡述之胺基酸序列或與其基本上同源之序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或具有一或多個取代(例如保守取代)的序列)的重鏈及輕鏈可變區。
在某些實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個或三個CDR或高變環的核苷酸序列，該等CDR或高變環來自具有如表1中所述之核苷酸序列、與其基本上同源之序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或能夠在本文所述之嚴格度條件下雜交的序列)的重鏈可變區。在另一個實施例中，核酸可以包含編碼至少一個、兩個或三個CDR或高變環之核苷酸序列，該等CDR或高變環來自具有如表1中所述之核苷酸序列或與其基本上同源之序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或能夠在本文所述之嚴格度條件下雜交的序列)的輕鏈可變區。在又另一個實施例中核酸可以包含編碼至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個CDR或高變環的核苷酸序列，該等CDR或高變環來自具有如表1中所述之核苷酸序列或與其基本上同源之序列(例如與其具有至少約85%、90%、95%或99%序列一致性且/或能夠在本文所述之嚴格度條件下雜交的序列)的重鏈及輕鏈可變區。
在另一態樣中，本申請案特徵為含有本文所述之核酸的宿主細胞及載體。核酸可以存在於單一載體或各別載體中，該單一載體或各別存在於同一宿主細胞或各別宿主細胞中，如下文中更詳細所述。
載體 本文進一步提供包含編碼本文所述抗體分子之核苷酸序列的載體。在一個實施例中，載體包含編碼本文所述之抗體分子的核苷酸。在一個實施例中，載體包含本文所述之核苷酸序列。載體包括(但不限於)病毒、質體、黏質體、λ噬菌體或酵母人工染色體(YAC)。
可以使用多種載體系統。舉例而言，一類載體係利用來源於動物病毒(諸如牛乳頭狀瘤病毒、多瘤病毒、腺病毒、痘瘡病毒、桿狀病毒、逆轉錄病毒(勞斯肉瘤病毒(Rous Sarcoma Virus)、MMTV或MOMLV)或SV40病毒)之DNA元件。另一類載體係利用來源於RNA病毒(諸如勝利基森林病毒(Semliki Forest virus)、東部馬腦炎病毒及黃病毒)之RNA元件。
另外，可以藉由引入一或多個標記物、從而可以選擇經轉染之宿主細胞來選擇其染色體中已穩定整合有DNA的細胞。標記可以提供例如營養缺陷型宿主之原始營養型、殺生物劑抗性(例如抗生素)或針對重金屬(諸如銅)之抗性，或其類似者。可選標記物基因可以直接連接至待表現之DNA序列，或藉由共轉型來引入相同細胞中。mRNA之最佳合成亦可能需要其他元件。此等元件可以包括剪接信號以及轉錄啟動子、增強子及終止信號。
含有構築體之表現載體或DNA序列一經製備用於表現，即可將表現載體轉染或引入適當宿主細胞中。為此，可採用各種技術，諸如原生質體融合、磷酸鈣沈澱、電穿孔、逆轉錄病毒轉導、病毒轉染、基因槍、基於脂質之轉染或其他習知技術。在原生質體融合的情況下，細胞生長於培養基中且根據適當活性進行篩選。培養所得經轉染細胞及回收所產生之抗體分子的方法及條件已為熟習此項技術者所知，且可基於本發明描述，根據所用之特定表現載體及哺乳動物宿主細胞來改變或最佳化。
細胞 本發明亦提供包含編碼如本文所述之抗體分子之核酸的宿主細胞。
在一個實施例中，宿主細胞經基因工程改造以包含編碼抗體分子之核酸。
在一個實施例中，宿主細胞係藉由使用表現卡匣進行基因工程改造。片語「表現卡匣」係指核苷酸序列，其能夠影響與此類序列相容之宿主中之基因表現。此類卡匣可以包括啟動子、具有或不具有內含子之開放閱讀框架，及終止信號。亦可使用需要或有助於達成表現的其他因子，諸如誘導型啟動子。
本發明亦提供包含本文所述之載體的宿主細胞。
細胞可為(但不限於)真核細胞、細菌細胞、昆蟲細胞或人類細胞。適合的真核細胞包括(但不限於) Vero細胞、HeLa細胞、COS細胞、CHO細胞(例如CHO-C8TD細胞)、HEK293細胞、BHK細胞及MDCKII細胞。適合之昆蟲細胞包括(但不限於) Sf9細胞。
實例 闡述以下實例以幫助理解本發明，但不意欲且不應理解為以任何方式限制其範疇。
實例1：抗CD73抗體的產生及表徵 自合成酵母抗體文庫中選擇及最佳化抗 CD73 抗體 使用下述方法自八個初始人類合成酵母文庫中選擇代表五個不同抗原決定基組的抗CD73單株抗體。
材料及方法 使用得自Pierce的EZ-Link Sulfo-NHS生物素化套組對抗原進行生物素化。山羊F(ab')2 抗人類κ-FITC (LC-FITC)、ExtrAvidin-PE (EA-PE)及抗生蛋白鏈菌素-AF633 (SA-633)分別獲自Southern Biotech、Sigma及Molecular Probes。抗生蛋白鏈菌素微珠及MACS LC分離管柱購自Miltenyi Biotec。山羊抗人類IgG-PE (人類-PE)獲自Southern Biotech。
主要發現 八個各具約109 種多樣性的初始人類合成酵母文庫如先前所述增殖(參見例如Y. Xu等人, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool.PEDS 26.10, 663-70 (2013)；WO2009036379；WO2010105256；及WO2012009568，該等文獻以全文引用的方式併入本文中)。對於頭兩輪選擇而言，利用Miltenyi MACS系統執行磁珠分選技術，如先前所述(參見例如Siegel等人, High efficiency recovery and epitope-specific sorting of an scFv yeast display library.J Immunol Methods 286(1-2), 141-153 (2004)，該文獻以全文引用之方式併入本文中)。簡言之，將酵母細胞(約1010 個細胞/文庫)與3 ml 100 nM生物素化抗原在洗滌緩衝液(磷酸鹽緩衝生理鹽水(PBS)/0.1%牛血清白蛋白(BSA))中、在30℃下培育30分鐘。用40 ml冰冷的洗滌緩衝液洗滌一次之後，使細胞離心塊再懸浮於20 mL洗滌緩衝液中，且向酵母中添加抗生蛋白鏈菌素微珠(500 μl)且在4℃下培育15分鐘。接著，使酵母細胞離心成塊，再懸浮於20 mL洗滌緩衝液中，且裝載於Miltenyi LS管柱上。裝載20 mL之後，用3 ml洗滌緩衝液洗滌管柱3倍。接著自磁場移除管柱，且酵母細胞用5 mL生長培養基溶離且接著生長隔夜。利用流式細胞術執行隨後多輪選擇。使約2×107 個酵母細胞離心成塊，用洗滌緩衝液洗滌三次，且在30℃下、在平衡條件下與濃度遞減的生物素化抗原(100至1 nM)、不同物種的30 nM生物素化抗原(以便獲得物種交叉反應)或與多特異性耗乏試劑(PSR)(以自選擇中移除非特異性抗體)一起培育。對於PSR耗乏而言，將文庫與生物素化PSR試劑之1:10稀釋液一起培育，如先前所述(參見例如Y. Xu等人, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool.PEDS 26.10, 663-70 (2013)，該文獻以全文引用之方式併入本文中)。酵母細胞接著用洗滌緩衝液洗滌兩次且用LC-FITC (1:100稀釋)及SA-633 (1:500稀釋)或EAPE (1:50稀釋)二級試劑在4℃下染色15分鐘。用洗滌緩衝液洗滌兩次之後，將細胞離心塊再懸浮於0.3 mL洗滌緩衝液中且轉移至有篩濾蓋的分選管中。使用FACS ARIA分選儀(BD Biosciences)執行分選且分選閘經確定可選擇具有所需特徵的抗體。重複進行多輪選擇直至獲得具有全部所需特徵的群體。最後一輪分選之後，接種酵母細胞且挑選個別群落用於表徵。
在主要發現階段期間使用輕鏈多樣化方案以便進一步發現且改良抗體。
輕鏈分批多樣化方案：經由強行提取(smash and grab)，自酵母中萃取出來自初始選擇輸出物的重鏈質體，在大腸桿菌中增殖且隨後自大腸桿菌純化，且轉型成具有5×106 種多樣性的輕鏈文庫。使用一輪MACS及四輪FACS、利用與初始發現相同的條件執行選擇。
抗體最佳化 抗體最佳化係藉由將多樣性引入重鏈及輕鏈可變區來執行，如下文所述。
CDRH1及CDRH2選擇：將單一抗體之CDRH3與多樣性為1×108 種的CDRH1及CDRH2變異體重組成預備文庫且利用一輪MACS及四輪FACS執行選擇，如初始發現中所述。在不同輪的FACS中，藉由滴定或親本Fab預複合來檢查文庫中之PSR結合、物種交叉反應及親和壓力，且執行分選以便獲得具有所需特徵的群體。
抗體產生及純化 使酵母純系生長至飽和且接著在30℃下、在振盪下誘導48小時。誘導之後，使酵母細胞離心成塊且收集上清液用於純化。使用蛋白質A管柱且用乙酸pH 2.0溶離來純化IgG。藉由木瓜蛋白酶消化來產生Fab片段且在KappaSelect (GE Healthcare LifeSciences)上純化。
ForteBio KD 量測 在Octet RED384上執行ForteBio親和力量測，大體如先前所述(參見例如Estep等人, High throughput solution-based measurement of antibody-antigen affinity and epitope binning.Mabs 5(2), 270-278 (2013)，該文獻以全文引用之方式併入本文中)。簡言之，藉由將IgG線上裝載於AHQ感測器上來執行ForteBio親和力量測。使感測器離線在分析緩衝液中平衡30分鐘且接著線上監測60秒以確立基線。使裝載有IgG的感測器暴露於100 nM抗原3分鐘，且隨後轉移至分析緩衝液中維持3分鐘以量測解離速率。使用1:1結合模型分析所有動力學。所用抗原為： · 人類CD73-His：重組人類5'-核苷酸酶/CD73蛋白，CF，得自R&D Systems，目錄號：5795-EN · 小鼠CD73-His：重組小鼠5'-核苷酸酶/CD73蛋白，CF，得自R&D Systems，目錄號：4488-EN · 食蟹獼猴CD73-His：食蟹獼猴CD73/NT5E蛋白質(His標籤)，得自Sino Biological，目錄號：90192-C08H-50
ForteBio 抗原決定基分組 / 配位體阻斷 利用標準夾心型式交叉阻斷分析來執行抗原決定基分組/配位體阻斷。將對照抗標靶IgG裝載於AHQ感測器上且感測器上未佔據的Fc結合位點用無關的人類IgG1抗體阻斷。接著使感測器暴露於100 nM靶抗原，隨後暴露於二級抗標靶抗體或配位體。抗原結合之後的二級抗體或配位體之額外結合表示抗原決定基未佔據(非競爭者)，而不結合表示抗原決定基阻斷(競爭者或配位體阻斷)。
MSD-SET 動力學分析 如先前所述執行平衡親和力量測(Estep等人, 2013)。在PBS + 0.1%無IgG之BSA (PBSF)中執行溶液平衡滴定(SET)，其中抗原在10-100 pM下保持恆定；且與初始5-100 nM之抗體之3至5倍連續稀釋液一起培育(實驗條件與樣品有關)。使抗體(20 nM於PBS中)在標準MSD-ECL結合盤上、在4℃下塗佈隔夜或在室溫下塗佈30分鐘。接著在700 rpm振盪下，將盤阻斷30分鐘，隨後用洗滌緩衝液(PBSF + 0.05% Tween 20)洗滌三次。施加SET樣品且在700 rpm振盪下、在盤上培育150秒，隨後洗滌一次。藉由在盤上培育3分鐘、在PBSF中、用250 ng/mL經磺酸基標籤標記的抗生蛋白鏈菌素來偵測盤上所捕捉的抗原。盤用洗滌緩衝液洗滌三次且接著在MSD Sector成像儀2400儀器上使用具有界面活性劑的1x讀取緩衝液T讀取。利用Prism對游離抗原百分比相對於所滴定的抗體作圖且與二次方程式擬合以求取KD 。為了改良處理量，在整個MSD-SET實驗中(包括SET樣品製備)，均使用液體處置機器人。
細胞結合分析 過度表現抗原的約100,000個細胞用洗滌緩衝液洗滌且在室溫下與100 µl 100 nM IgG一起培育5分鐘。細胞接著用洗滌緩衝液洗滌兩次且與100 µl之1:100人類-PE一起在冰上培育15分鐘。細胞接著用洗滌緩衝液洗滌兩次且在FACS Canto II分析儀(BD Biosciences)上分析。
結果 根據對人類CD73的結合來篩選出表面上表現人類抗體文庫的酵母細胞。來自抗原決定基組4、918及930的兩種抗體良好地結合至CD73且抑制CD73酶活性(資料未展示)。對這兩種抗體進行親和力成熟，從而產生相關抗體的兩種譜系，分別稱為譜系1及譜系3 (表19)。此等抗CD73抗體係以三種不同形式表現：IgG1抗體(稱為.C構築體，例如350.C)、Fc區中包含S228P突變的IgG4抗體(IgG4 S228P，稱為.A構築體，例如350.A)，或Fc區中包含S228P及L235E突變的IgG4抗體(IgG4 S228P/L235E，稱為.B構築體，例如350.B)，根據Eu編號法編號。此等抗體之序列揭示於表1中。對於抗體350.A而言，產生兩批抗體，在下文稱作350.A1及350.A2。表 19. 抗CD73抗體之兩種譜系
Figure 107121595-A0304-0014
所測試的全部抗CD73抗體結合至人類及食蟹獼猴CD73。譜系1抗體亦結合至鼠類CD73。表20提供此等抗體之Kd 值，其如上文所述使用Octet量測。表 20. 抗CD73抗體之親和力
Figure 107121595-A0304-0015
 *數值接近Kd 量測值之上限
接著，使用抗原決定基分組/配位體阻斷研究表明，親本抗體918與後代抗體350、356及358競爭結合至CD73。類似地，親本抗體930與後代抗體373、374、376、377及379競爭結合至CD73。918與930展示與內部參考抗CD73抗體競爭，表明此等抗體共有相同的抗原決定基組。
使用表面電漿子共振量測 Fab 及抗體親和力 mAb 350及373之Fab係藉由對350及373之重鏈之核心鉸鏈區上方的兩個脯胺酸殘基之間的終止子進行工程改造來產生。兩者均在Expi293F (ThermoFisher)細胞中表現且使用CaptureSelect IgG CH1親和樹脂(ThermoFisher)純化。
使用Biacore量測mAb 350及373之Fab物質的跨物種親和力。所用蛋白質如下：重組人類CD73 (R&D Systems 5795-EN)；重組食蟹獼猴CD73 (Sino Biological 90912-C08H)；重組小鼠CD73 (R&D Systems 4488-EN)；及重組大鼠CD73 (Sino Biological 80375-R08H)。抗人類Fab (GE Healthcare Life Sciences)固著於CM5晶片(GE)的所有4個流動池(Fc)上。Fab 350及373以約20 RU捕捉於Fc2及Fc4上。0.01 nM至90 nM CD73 (3倍稀釋系列)在所有4個Fc上流動。所有樣品均在操作緩衝液HBS-EP+ (pH 7.4，0.01 M HEPES、150 mM NaCl、3 mM EDTA及0.05% (v/v) P20)中稀釋。 表21中展示350及373 Fab之跨物種結合的Kd (M)親和力結果。表 21. 抗CD73 Fab之親和力
Figure 107121595-A0304-0016
在一項單獨研究中，使用抗組胺酸(His)抗體捕捉Biacore方法、利用表面電漿子共振(SPR)測定全長抗體373.A或373.A之Fab片段對人類、食蟹獼猴、小鼠及大鼠CD73的親和力。抗His Ab藉由胺偶合而直接固著於CM5晶片表面上。使His標記的人類CD73/His、食蟹獼猴CD73/His、小鼠CD73/His或大鼠CD73/His流動且以所需的共振單位(RU)捕捉，Rmax為20。使存在於IgG或Fab連續稀釋液中的抗體分析物濃縮物以60 µL/min流動。使用製造商軟體分析1:1結合模型的感測圖譜。373.A及373.A Fab對小鼠CD73/His蛋白質及大鼠CD73/His蛋白質的結合無法偵測，證明373.A無嚙齒動物交叉反應。
使用373.A與373.A Fab確定針對人類及食蟹獼猴CD73的親和力。氫氘質譜法及尺寸排阻層析研究支持373.A使CD73二聚體鎖定成開放-開放(非活性-非活性)構形的構形模型，從而支持1 Ab:1 CD73二聚體之1:1雙齒結合(參見實例2)。因此，鑒於1:1雙齒結合有利於親合力，因此使用完整Ab親和力，而非Fab量測值。全長抗體373.A係以0.991 ± 0.267 nM之Kd 結合重組人類CD73且以0.068 ± 0.009 nM之Kd 與重組食蟹獼猴CD73發生交叉反應，如Biacore動力學結合研究所測定。
抗 CD73 抗體對全血標靶的接合 使用得自健康人類供者的全血，藉由流式細胞術評估全血標靶接合。簡言之，將生物素化抗體與全血一起培育30分鐘，隨後進行紅血球溶解及固定。經固定的細胞針對CD3及CD8染色以鑑別CD8+ T細胞，且針對抗生蛋白鏈菌素-APC染色以偵測生物素。染色之後，洗滌細胞且進行流式細胞術分析。
觀測所測試之抗CD73抗體的劑量依賴性結合，如藉由APC信號之中值螢光強度(MFI)所量測(圖1)。生物素化同型對照抗體的確不展示對CD8+ T細胞的結合(圖1)。
人類全血樣品上的 CD73 標靶佔據 藉由未標記之373.A離體處理供者血液來概念性證明CD73在人類全血樣品上的標靶佔據(TO)。對10 μg/mL至0.17 ng/mL的373.A或DNP-IgG4sm同型對照物進行滴定。如圖24A中所示，來自經更高劑量(10 μg/mL至約0.1 μg/mL)之未標記373.A處理之兩位供者的樣品防止生物素化373.A結合至細胞，從而使幾何平均螢光強度(gMFI)值降低至處於螢光背景水準下的平穩階段(兩位供者均為約550 gMFI)。此表示完全的CD73標靶佔據。相比之下，經較低量之未標記373.A (0.17 ng/mL及0.51 ng/mL)預處理之細胞的gMFI值類似於經DNP-IgG4sm同型對照物預處理的樣品(供者1為約1600 gMFI且供者2為約2200 gMFI)。經同型對照物處理的樣品模擬具有零標靶佔據的血液。所得% TO值繪示於圖24B中。
可溶性重組 CD73 之酶活性的抑制 5'外核苷酸酶CD73為AMP向腺苷轉化的限速步驟。抗CD73抗體抑制CD73酶活性的能力係使用孔雀綠磷酸鹽分析來量測。簡言之，將25 ng/ml重組人類CD73與使用單獨緩衝液之受質單磷酸腺苷(AMP)劑量滴定液(0-500 µM)一起培育，或在1 µg/ml同型對照抗體或1、0.3或0.1 µg/ml抗CD73抗體350.C存在下培育。使用孔雀綠磷酸鹽分析套組(Enzo Life Sciences, 目錄號BML-AK111)來量測無機磷酸鹽釋放(Pi)。
如圖2A中所示，測試濃度下的對照抗體不影響重組人類CD73的米氏常數(Michaelis constant)(Km )。相比之下，抗CD73抗體350.C引起Km 曲線上的Vmax 出現劑量依賴性降低(圖2B)，表明抗體350.C為人類CD73的非競爭抑制劑。
接著，利用如上文所述的類似孔雀綠磷酸鹽分析測試以.A或.B形式表現之抗CD73抗體350、356、373及374抑制重組人類及食蟹獼猴CD73之酶活性的能力。簡言之，將抗CD73抗體與25 ng/ml重組人類或食蟹獼猴CD73一起在25 µM AMP存在下培育10分鐘。使用孔雀綠磷酸鹽分析套組(Enzo Life Sciences, 目錄號BML-AK111)來量測無機磷酸鹽釋放(Pi)。使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH，測定標準化抑制百分比(% INH)。
如圖3A-3C中所示，所測試的全部抗CD73抗體抑制可溶性重組人類及食蟹獼猴CD73之酶活性。
可溶性內源 CD73 之酶活性的抑制 另外，測試抗CD73抗體針對可溶性內源CD73 (例如自細胞表面排出的CD73)之酶抑制活性。
在第一個研究中，將以.A或.B形式表現的抗CD73抗體350及373或同型對照抗體與MDA-MB-231 (人類乳癌細胞株)調節的無血清培養基一起在100 µM AMP存在下培育240分鐘。藉由經修改之細胞效價Glo (CTG)分析(Promega，目錄號G9242/3)量測AMP的消失。在CTG套組中，AMP抑制螢光素酶信號。隨著所添加的AMP被CD73以酶方式消耗，螢光素酶信號增強。使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH，測定標準化抑制百分比(% INH)。
如圖4中所示，抗CD73抗體以劑量依賴性方式抑制自乳癌細胞株MDA-MB-231排出之CD73的酶活性。
在第二個研究中，將抗CD73抗體350、356、358、373、374、377及379 (皆以.B形式表現)與得自胰臟癌患者之經稀釋(12.5% v:v，於PBS中)血清一起在100 µM AMP存在下培育60分鐘。類似於第一個研究，藉由經修改之細胞效價Glo (CTG)分析來量測AMP的消失且使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH來測定標準化抑制百分比(% INH)。
抗CD73抗體在胰臟癌患者血清中亦以劑量依賴性方式抑制CD73酶活性(圖5)。
細胞表面上所表現之 CD73 之酶活性的抑制 首先，利用孔雀綠磷酸鹽分析來檢查抗CD73抗體350、356、358、373、374、377及379 (皆呈.B形式)抑制乳癌細胞株MDA-MB-231上所表現之CD73的能力。簡言之，將抗體與細胞一起在100 µM AMP存在下培育180分鐘。使用孔雀綠磷酸鹽分析套組(Enzo Life Sciences，目錄號BML-AK111)來量測由AMP釋放的無機磷酸鹽。使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH，測定標準化抑制百分比(% INH)。
如圖6中所示，所測試的所有抗CD73抗體抑制乳癌細胞株MDA-MB-231表面上所表現的CD73酶活性。
接著，由於譜系1抗體與小鼠CD73交叉反應，而譜系3抗體則不，因此針對人類或鼠類乳癌細胞株表面上所表現的CD73測試來自兩種譜系的抗體。抗CD73抗體與人類乳癌細胞株MDA-MB-231或鼠類乳癌細胞株4T1一起在100 µM AMP存在下培育240分鐘。藉由上述經修改之細胞效價Glo (CTG)分析來量測AMP的消失且使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH來測定標準化抑制百分比(% INH)。
與其結合曲線一致，譜系1抗體918、350、356及358抑制人類與鼠類CD73 (圖7A及7B)，而譜系3抗體930、373、374、376、377及379抑制人類CD73，而不抑制鼠類CD73 (圖7C及7D)。
另外，執行兩次經修改之細胞效價Glo (CTG)分析，以測試抗CD73抗體針對人類乳癌細胞株MDA-MB-231或人類卵巢癌細胞株SKOV3上所表現之CD73的酶抑制活性。在兩次研究中，將1000 ng/ml抗CD73抗體與每毫升20,000個細胞一起在100 µM AMP存在下、在37℃下培育240分鐘。藉由上述經修改之細胞效價Glo (CTG)分析來量測AMP的消失且使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH來測定標準化抑制百分比(% INH)。
在兩次研究中，所測試的全部抗CD73抗體能夠抑制人類乳癌細胞株MDA-MB-231或人類卵巢癌細胞株SKOV3上所表現的表面CD73 (圖8A、8B、9A及9B)。
接著，執行類似的細胞效價Glo (CTG)分析，以檢查抗CD73抗體抑制HEK 293細胞株上所表現之人類CD73的能力。簡言之，對HEK 293細胞株進行工程改造以穩定地過度表現人類CD73且與抗CD73抗體一起在100 µM AMP存在下培育150分鐘。藉由上述經修改之細胞效價Glo (CTG)分析來量測AMP的消失且使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH來測定標準化抑制百分比(% INH)。
如圖10中所示，呈.A或.B形式的抗CD73抗體350、356、373及374係以劑量依賴型方式抑制膜結合的人類CD73。
另外，亦使用人類PBMC檢查抗CD73抗體的酶抑制活性。簡言之，自兩位各別供者分離出初始人類PBMC且與抗CD73抗體一起在25 µM AMP存在下培育480分鐘。藉由上述經修改之細胞效價Glo (CTG)分析來量測AMP的消失且使用零時對照作為100% INH及無抗體對照作為0% INH來測定標準化抑制百分比(% INH)。
如圖11A及11B中所示，所測試的抗CD73抗體抑制來自兩位供者之初始人類PBMC上所表現之CD73的酶活性。
在 AMP 存在下 ， CD4 + 及 CD8 +T 細胞 增殖恢復 接著，測試抗CD73抗體緩解AMP介導之CD4+ T細胞抑制的能力。簡言之，自健康人類供者的周邊血液單核細胞(PBMC)池中分離出CD4+ T細胞。在800 µM AMP存在下用抗CD3/28珠粒刺激之前，CD4+ T細胞用CellTrace Violet (CTV)(Thermo Fisher Scientific，目錄號C34557)染色以追蹤細胞分裂。第4天，使用流式細胞術，藉由CTV稀釋來測定增殖。經CTV染色的細胞失去其螢光信號的大約一半，如每次分裂時在流式細胞儀上所量測。增殖指數作為每種條件下的T細胞分裂水準之度量來計算，其中100表示最大增殖且0表示不增殖。
如圖12A及12B中所示，所測試的全部抗CD73抗體能夠恢復CD4+ T細胞在AMP存在下的增殖。
在單獨研究中，測試CD4+與CD8+ T細胞。簡言之，CD4+及CD8+ T細胞自分離自健康人類供者之周邊血液單核細胞(PBMC)純化且用羧基螢光素丁二醯亞胺基酯(CFSE)標記。經CFSE標記之CD4+或CD8+ T細胞在800 μM AMP及同型對照物hIgG4或373.A之連續稀釋液存在下用抗CD3/CD28 T細胞活化劑珠粒(1個珠粒/16個細胞)活化4天。展示三位供者各自之CD4+ T細胞(圖25A)及CD8+ T細胞(圖25B)的代表性資料。資料以CD4+ (圖25A)或CD8+ (圖25B) T細胞增殖百分比表示，其中同型對照物證明在AMP存在下，最大增殖受到遏制，且373.A的存在以劑量依賴性方式恢復增殖。雖然反應程度因供者而異，但在(圖25A)所代表的所有三位CD4+ T細胞供者及針對CD8+ T細胞所示的2/3供者(圖25B)中，373.A展現恢復T細胞增殖的活體外活性。
活體內 CD73 酶活性的抑制 另外，檢查抗CD73抗體在活體內的酶抑制活性。以每隻小鼠10x106 個細胞/200 μl將高度表現CD73之MDA-MB231乳癌細胞株(ATCC HTB-26)植入雌性無胸腺裸小鼠(6-8週齡)中。當腫瘤為200 mm3 時，依每組五隻小鼠隨機分組且腹膜內以每隻小鼠20或200 μg對照多株人類IgG或一組抗CD73 mAb處理。所測試的抗體為以.A或.B形式表現的抗CD73抗體350、356、373及374。
給藥後第三天，依一份血漿/五份甲醇之體積比收集血漿。甲醇淬滅的樣品在使用之前在-80℃下儲存，使用時將樣品離心。丟棄沈澱物且將上清液轉移至新的埃彭道夫管(Eppendorf tubes)中。添加內標物儲備溶液(IS，經C-13標記的腺苷及N-15標記的肌苷，Cambridge Isotope Laboratories, MA)直至50 nM的最終濃度。接著使用API-6500 QTrap (AB Sciex, US)與Shimadzu LC泵浦(LC-20AD)及CTC自動取樣器及DLW洗液耦聯的LC/MS系統分析所製備的樣品。各樣品注射5 µL且使用維持在40℃的SeQuant ZIC-pHILIC管柱(5 µm，150×2.1 mm，Millipore, MA)分離。使用二元梯度進行溶離，其中移動相B為不含添加劑的100%乙腈且移動相A為存在於水與乙腈之1:1 (v/v)混合物中的12 mM甲酸銨及12 mM甲酸。溶離如下程式化：(0，85，0.6)、(0.5，85，0.4)、(2，10，0.4)、(4.5，10，0.4)、(5，85，0.4)，(5.5，85，0.6)，其中括弧中的值依序為時間(分鐘)、移動相B百分比及流量(mL/min)。在ESI正模式下，監測腺苷及C13-腺苷0.5至4.5分鐘，且質量轉變分別為268-＞136及273-＞136。在ESI負模式下，監測肌苷及N15-肌苷0.5至4.5分鐘，且質量轉變分別為267-＞135及271-＞139。結果以nM腺苷或肌苷報導。
所測試的全部抗CD73抗體有效減少腺苷及肌苷在免疫功能不全小鼠血清中的積聚，該等小鼠中植入高度表現CD73的MDA-MB231乳癌細胞株(圖13)。
實例2：抗CD73抗體之抗原決定基及結合模式的確定 在此實例中，藉由片段化醯胺氫/氘交換(HDx)及尺寸排阻層析(SEC)來確定抗CD73抗體350.A2、350.B、373.A及373.B之抗原決定基及結合模式。
方法 片段化氫氘交換質譜法 (HDx-MS) HDx-MS實驗如先前所述執行(Park IH等人, J. Chem. Inf. Model.; 55(9): 1914-1925 (2015)；Chalmers MJ等人, Anal. Chem.; 78(4): 1005-14 (2006))。製備抗體抗原複合物且以1:1莫耳比使用，在4℃下培育隔夜。重要的是注意到，此意謂複合物混合物中存在2倍過量的Fab結合位點。
室溫交換實驗係藉由人工添加50 µL交換緩衝液(50 mM磷酸鹽、150 mM NaCl，pH 7.1，於D2 O中)至10 µL 0.5 mg/ml rhCD73蛋白質(R&D systems，目錄號5795，AAH65937之Trp27-Lys547與C末端6-His標籤(SEQ ID NO: 922)融合)或莫耳濃度等效量的CD73-mAb複合物(50 mM磷酸鹽、150 mM NaCl，pH 7.1)中來執行。在室溫下藉由添加250 µL淬滅緩衝液(4 M鈲鹽酸鹽、0.5 M參(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP-HCl)、0.2 M磷酸鹽，pH 2.5，0℃)交換60秒之後，且在進一步用300 µL冰冷儲存緩衝液(20%甘油、0.25%甲酸於水中)稀釋30秒之後，樣品被淬滅，隨後用液氮急驟冷凍且在-80℃下儲存直至使用或轉移至附接至位於0℃罩殼內部之液體處置器軌道的-70℃抽屜(PAL HTS, LEAP Technologies, Carrboro, NC)。藉由使N2 氣體流經樣品小瓶而使冷凍樣品解凍120秒(藉由液體處置器配合解凍夾具來促進)且裝載至注射閥之樣品迴路(Valco, Houston, TX)中。樣品(負載緩衝液0.05%三氟乙酸(TFA)，500 µL/min)裝載至層析系統之前管柱上及線上胃蛋白酶消化(Poros AL20 (2.1x150 mm，維持在15℃)上固著的胃蛋白酶)係使用雙重泵浦系統(2x, Accela 1250, Thermo Scientific, Waltham MA)執行，該系統允許在消化後，經由混合三通來摻合第二流量550 µL/min (0.05% TFA、500 µL/min)的負載緩衝液。將合併之液流引入維持在0℃的層析系統中以便在15 µL/min的流量下進行脫鹽及梯度LC分離(Dionex UltiMate 3000, Thermo Scientific, Waltham, MA)且對層析流出物進行並行的質譜分析(QExactive, Thermo Scientific, Waltham, MA)。層析系統係由以下組成：閥門(15kPSI Valco, Houston, TX)、4 µL EXP Halo C18逆相捕集筒(Optimize Technologies Inc., Oregon City, OR)及分析管柱(2.1x10 mm ID, Prozap 1.5 µm C18, Grace)。梯度分離為0%至40% B，歷時20分鐘，隨後為40%至75% B，歷時5分鐘，使用緩衝液組成A：99.75:0.25% v/v (H2O:甲酸)及B：99.75:0.25% v/v (乙腈:甲酸)。
對於MS而言，在350-2000之m/z範圍內，以70,000的解析度擷取MS掃描，且對於MS/MS而言，以35,000的解析度擷取MS掃描。所有實驗使用的儀器參數，包括2.5 kV的噴霧電壓、120 ms的最大注射時間、500,000個離子之MS的AGC目標，在所有操作中維持相同。三重複分析樣品。
藉由使用Proteome Discoverer 1.4將原始資料換算成.mgf格式、使用MASCOT 2.4 (Matrix Science, London, UK)針對構築體序列搜尋且使用Scaffold 1.4過濾來進行肽鑑別。將過濾的結果連同原始資料檔案一起輸入HDExaminer (v1.3, Sierra Analytics, Modesto, CA)以便定量氘化。輸出的氘化值輸入Microsoft Excel中以便計算氘化差異，且根據肽中之可觀測醯胺的數目(殘基數目減去2，再減去序列中的脯胺酸數目，不包括N末端及次末端的殘基)對氘併入進行標準化。為了壓縮序列上的肽差異資料，在其中相應醯胺可觀測的肽觀測範圍內，將初始序列每個殘基的標準化氘化差值平均化。
水、氧化氘、胍鹽酸鹽、氯化鈉、甘油、甲酸、三氟乙酸(TFA)、三氟乙醇(TFE)、乙腈(ACN)得自Sigma Chemical Company (St. Louis, MO)。參-(2-羧基乙基)膦)TCEP得自Gold Biotechnology Inc (St. Louis, MO)。
尺寸排阻層析 (SEC) 將等莫耳量的rhCD73 (3.2 µL，1.6 mg/mL)與mAb (2.6 µL，5 mg/mL)混合且允許在4℃下複合隔夜。使用連接至Agilent 1200系列泵浦及Agilent UV偵測器的Agilent自動取樣器來操作樣品。該系統由Agilent Chemstation軟體控制。所用管柱為Shodex Protein KW-803管柱(8 x 300 mm ID)。移動相：90% 2x PBS，10體積%異丙醇。流量：500 µL/min。注射量：8 µL。偵測波長：220 nm。操作時間：30分鐘。
製備抗體抗原複合物且使用所提供的濃度值、以1:1比率使用，在4℃下培育隔夜。重要的是注意到，此意謂複合物混合物中存在2倍過量的Fab結合位點。
結構資料 自蛋白質資料庫(www.rcsb.org)檢索用於解釋的結構資料且由條目4H2F、4H2I及4H1S組成。各種模型及可視化的比對係利用PyMOL (PyMOL Molecular Graphics System, 1.8版, Schrödinger, LLC)執行。
結果 氫交換資料
在CD73的整個序列上，如圖14中所示之373.A與373.B的HDx MS保護曲線重疊。此展現抗體就其抗原決定基而言是等效的。
在CD73的完整序列上，如圖15中所示之350.A2與350.B的HDx MS保護曲線彼此良好一致。此展現抗體就其抗原決定基而言是等效的。
觀測到最強保護的序列在圖中註釋且大部分對應於CD73之環區域。其相對空間排列描繪於圖16A及16B中所示的結構模型中。雖然針對A環、B環及D環之序列所觀測到的保護作用可歸因於抗體-CD73相互作用，但針對標註為C環之序列所觀測到的保護作用可能起因於構形鎖定。C環依CD73之開放/非活性構形摺疊且依封閉/活性構形展開(圖16A)。可溶性CD73以及膜結合的CD73經由C末端域形成二聚體(圖16B)。當N末端域旋轉約90度而自開放形式轉化成封閉形式時，開放構形與封閉構形之間存在平衡。C環報導支持該平衡。若抗體結合至CD73後，平衡更多地轉向開放構形，則C環的較大部分摺疊，從而處於保護狀態。另一方面，若抗體結合至CD73時，平衡更多地轉向封閉構形，則預期存在去保護作用。觀測到373.A及373.B在C環處之異常強的保護作用(圖14)表明，此等抗體最有效地使CD73維持非活性構形且/或藉由不同機制來維持。
根據曲線推斷出，在所有圖式中，受到最大程度保護的序列為殘基範圍158-172：YLPYKVLPVGDEVVG (SEQ ID NO: 108)，指定為A環；殘基範圍206-215：KLKTLNVNKI (SEQ ID NO: 109)，指定為B環；及殘基範圍368-387：MINNNLRHADETFWNHVSMC (SEQ ID NO: 110)，指定為C環(根據SEQ ID NO: 105編號)。
對於抗體373.A及373.B而言，A環及B環區域中的殘基對於抗原決定基似乎同等重要，如根據圖14中所觀測到的類似的保護量所指示。在抗體350.A2及350.B的情況下，A環殘基對於抗原決定基顯得最重要，即便如此，亦觀測到一些B環保護作用，但不清楚此是否應解釋為抗體與該範圍內的殘基直接接合，或僅為因鄰近A環而引起的間接作用。
尺寸排阻資料 尺寸排阻資料與上文所論述的HDx資料良好相關。發現抗體373.A及373.B在其尺寸排阻層析(SEC)曲線的相似性方面是等效的，此反映了寡聚狀態分佈(圖17A及17B)。相同評估適用於抗體350.A2及350.B (圖18A及18B)。
約17分鐘的特徵對應於CD73二聚體及游離抗體，此符合基於校準物的分子量量表，其為了參考而展示。約14.8分鐘或約300 kDa的特徵符合CD73二聚體/mAb複合物。在12.4分鐘周圍，觀測到約600 kDa的特徵，此符合兩種CD73二聚體 + 2種mAb (2xCD73二聚體/2xmAb)的組合物。管柱之排阻侷限影響了高於600 kDa的其他特徵。然而，可以向其指配更高的寡聚狀態，此意謂複合物由3種或多於3種CD73二聚體及另外3種或多於3種mAb組成(3+ xCD73二聚體/3+ xmAb)。
圖17A及17B中所示之CD73-373.A及CD73-373.B曲線中的主導物種為CD73二聚體/mAb複合物。僅觀測到少量的2xCD73二聚體/2xmAb物種。此符合一種抗體與CD73二聚體的較佳雙齒結合模式。
圖18A及18B中所示之CD73-350.A2及CD73-350.B的SEC曲線展示CD73二聚體/mAb物種與2xCD73二聚體/2xmAb物種存在類似的豐度。位於較短溶離時間處的肩峰表示存在一些較高寡聚物。此表明350.A2及350.B能夠以雙齒方式結合CD73樣373.A及373.B，但此模式不一定為熱力學上有利的模式，至少在如實驗中所用的高濃度下。
利用SEC曲線的積分來估算形成1xCD73二聚體/1xmAb複合物、2xCD73二聚體/2xmAb複合物或較高寡聚物之抗CD73抗體相對於可區分物種的百分比(圖19)。所有積分均使用零基線，所有樣品一致地使用10.5分鐘至11.65分鐘的積分區間(對於較高寡聚物)及11.65分鐘至13.5分鐘的積分區間(對於2xCD73二聚體/2xmAb複合物)。1xCD73二聚體/1xmAb複合物物種的積分區間略有變化且對於CD73-373.A選為13.5分鐘至16.2分鐘、對於CD73-373.B選為13.5分鐘至16分鐘、對於CD73-350.A2選為13.5分鐘至15.75分鐘，及對於CD73-350.B選為13.5分鐘至15.75分鐘，以與未積分的游離抗體信號達成最佳分離，如同其與分析不相關(由於複合物混合物中存在的Fab結合位點數目為CD73結合位點的約兩倍，因此抗體以偽過量使用)。
結論及論述 上述HDx及SEC資料有說服力地證明373.A及373.B以及350.A2及350.B就其與CD73相互作用的模式而言是等效的。考慮到該等對之間僅有的序列差異為恆定區中的單一突變(L235E，以去除殘餘FcR相互作用)，此為所預期的。
HDx與SEC實驗資料一致且完全支持圖20中所呈現的模型。根據模型，所有抗體的抗原決定基位於N末端域。抗體373.A及373.B與CD73二聚體相互作用而幾乎完全形成圖20左側所說明的同質物種。在該物種中，CD73二聚體的兩個活性位點均鎖定成非活性構形。另外，在此構形中，在膜結合之CD73的情況下，CD73二聚體的兩個N末端域經導引而遠離細胞表面，從而允許373.A及373.B以相等的效率抑制標靶的可溶型式及膜結合型式。
在圖20之左側，抗體350.A2及350.B可以形成雙齒同質複合物，但對於圖20之中部所示的2xCD73二聚體/2xmAb物種則未展示形成偏好。亦觀測到圖20之右側所說明的較高寡聚物種。在膜結合之CD73情況下或在抗體及抗原之低濃度下，物種分佈可能向同質雙齒複合物偏移，此為活體內之可能情形。預期抗體350.A2及350.B能夠藉由非活性位點鎖定機制有效地抑制CD73之所有形式。應瞭解，即使在活性構形中，標靶由於抗體結合、由於其他異位抑制機制而仍可能為催化非活性的。
基於模型，預期優先形成圖20之中部及右側所說明之寡聚物種的抗CD73抗體在抑制可溶性CD73及膜結合之CD73方面不太有效，尤其在低濃度下。此原因為CD73之大部分始終處於活性構形且即使抗體在彼等情形下可能藉由間接機制抑制催化，但抗體的任何脫離將立即產生催化活性CD73。另外，當抗原及抗體的總濃度趨向於零時，需要兩種抗體分子抑制單一CD73二聚體，而對於373及350抗體而言，單一分子仍可滿足。
概述 抗體373.A、373.B、350.A2及350.B對rhCD73之推定結合位點以及其與rhCD73二聚體的相互作用模式已確定。抗原決定基的特徵為可能不連續的且由人類CD73之序列範圍158-172 YLPYKVLPVGDEVVG (SEQ ID NO: 108)及206-215 KLKTLNVNKI (SEQ ID NO: 109)中所發現的殘基組成，根據SEQ ID NO: 105編號。若考慮需要CD73鎖定成非活性構形以便抑制的模型，則根據HDx MS及SEC的實驗觀測結果，預測373.A、373.B、350.A2及350.B能夠抑制CD73的可溶形式及膜結合形式。
實例3：活體內TGFβ阻斷後，基質細胞中之CD73上調 已報導癌症中之CD73表現不僅存在於癌細胞中，而且存在於構成腫瘤微環境的基質元件中。另外，已提出若干基質因子(包括TGFβ)為組織微環境中的腺苷產生提供潛在的擴增機制。在此實例中，執行研究以確定活體內TGFβ阻斷是否可以促使腫瘤基質細胞中的CD73表現發生變化。
為此目的，使用以高親和力結合至人類及鼠類TGFβ1及TGFβ2且以較低親和力結合至TGFβ3的人類化IgG2單株抗體。此抗體已證明具有針對TGFβ同功異型物的活體外及活體內中和活性。將4T1鼠類三陰性乳癌細胞株以10x104 個細胞/小鼠/100 μl植入雌性BALB/c免疫勝任小鼠(6-8週齡)的右側腹中。每組十隻小鼠以腹膜內方式隔日用最終濃度為每公斤體重10 mg的泛TGFβ阻斷抗體或同型對照物(hIgG2)處理。讓腫瘤生長14天，隨後將動物安樂死且收集腫瘤且進行流式細胞術分析。簡言之，自小鼠切除腫瘤且使用物理解離與酶解離(去氧核糖核酸酶I、膠原酶P、分散酶)之組合來消化。單一細胞懸浮液進行Fc阻斷30分鐘以防止非特異性抗體結合，且用結合至特定細胞表面標記物(包括CD45 (排除造血細胞)、CD31 (內皮細胞)、CD90 (泛間葉細胞標記物)、CD26及腎小球足突細胞膜黏蛋白(podoplanin))的一組抗體染色，以便鑑別出基質細胞群體。相較於同型對照物染色的樣品(eFluor 450結合的大鼠IgG1，eBioscience #48-4301-82)，使用eFluor450結合的抗CD73抗體(eBioscience #48-0731-82)來評估CD73表現。在4℃下染色40分鐘之後，樣品用FACS緩衝液(PBS、5 mM EDTA、2%胎牛血清)洗滌，依據製造商說明書用固定/滲透溶液(eBioscience #00-5523)固定，且在BDLSRFortessa ™流式細胞儀上分析。CD73高度表現於經同型對照物處理之小鼠的內皮細胞中，而間質基質細胞(CD26+及CD26-CAF，及周細胞)中偵測到的表現最小(圖21A及21B)。驚人地，小鼠經TGFβ中和抗體處理促使癌症相關纖維母細胞(CAF)中的CD73獨立於CD26表現而顯著上調(圖21A及21B)。內皮細胞中的CD73亦明顯上調(儘管程度更小)，而在周細胞中則未觀測到上調(圖21A及21B)。總而言之，此等資料表明，將腫瘤微環境中的TGFβ中和引發基質細胞中的CD73表現，說明腫瘤纖維母細胞所致的CD73上調及腺苷產生可以提供腫瘤為了在TGFβ阻斷後維持免疫靜息而指定的替代機制。
實例4：抗CD73抗體對B細胞的影響 為了評估阻斷CD73依賴性腺苷產生是否可以特異性地抑制類別轉換重組(CSR)而不影響B細胞反應效率，測試抗CD73抗體350.B。根據CD73表現，自兩位健康供者之周邊血液純化初始B (CD19+CD27-IgM+IgD+)細胞，且在抗體350.B存在下，用TLR9促效劑、抗CD40抗體及細胞介素(IL-2及IL-21)刺激。測試抗體以及IgG4同型對照物的三種不同濃度：1 ng/ml、10 ng/ml及100 ng/ml。第7天量測培養物上清液中的IgM分泌，且觀測到與同型對照物無差異(圖22A)。值得注意的是，350.B處理對CD73酶活性的抑制引起IgG分泌細胞減少分化，如藉由偵測IgG分泌漿細胞之ELISPOT分析(Millipore MSIPS4510盤，塗有10 µg/ml山羊抗人類IgG，Southern Biotechnologies)所量測，其在100 ng/ml濃度下具有較強作用(圖22C)。亦評估活細胞數目，且未觀測到差異(圖22B)，從而將350.B處理之後之初始CD73+ B細胞中所觀測到之低存活率與不良CSR效率之間的關聯排除。作為對照，對初始CD73-細胞進行同等刺激，且未觀測到差異(圖22A-C)。最後，評估同型對照條件下的CSR證實初始CD73+隔室中的IgG ISC數目增加(圖22C)。總之，此等結果證明，阻斷CD73酶活性影響類別轉換重組而不改變IgM反應。
實例5：抗CD73與抗PD-1在同基因型小鼠腫瘤模型中的共阻斷作用 為了確定對帶有腫瘤之小鼠中之CD73與PD-1路徑的共阻斷作用，將抗PD-1及抗CD73 (350.B)抗體投與接種同基因型結腸癌細胞株CT-26的免疫勝任型小鼠。6-10週齡的BALB/c小鼠各自在側腹接種1×105 個CT-26腫瘤細胞。接種之後第2天，小鼠(n=10/組)以腹膜內方式用1次劑量600 μg同型對照抗體350.B處理，隨後用400 μg，分4次劑量；300 μg抗PD-1，分5次劑量(低劑量)；600 μg抗PD-1，分5次劑量(高劑量)；高劑量抗PD-1 + 350.B之組合；或低劑量抗PD-1 + 350.B之組合。腫瘤尺寸及體重一週記錄三次，量測間隔2至3天，且當腫瘤尺寸達到＞2000 mm3 時，小鼠瀕死時，或腫瘤潰瘍時，將各動物安樂死。計算至第25天的腫瘤生長抑制百分比(因為對照組在第26天安樂死)。
單獨350.B或低劑量抗PD-1 (300 μg)處理在第25天展示部分腫瘤生長抑制(分別為30.96%及52.04%)。相比之下，低劑量抗PD-1 + 350.B組合引起88.41%腫瘤生長抑制(圖23)。高劑量的單獨抗PD-1足以用於腫瘤對照物，因此未觀測到350.B存在額外的益處。任一組中均未觀測到顯著的體重損失，且研究動物不存在顯著的臨床觀測結果。此等資料證明，次佳劑量之抗CD73與抗PD-1抗體的組合療法在CT-26同基因型腫瘤模型中可以增強腫瘤生長抑制。
實例6：抗CD73抗體373.A在食蟹獼猴中的藥物動力學及毒理學研究 作為單一藥劑，抗CD73抗體373.A當靜脈內以高達100 mg/kg之劑量在四週期間、每週一次投與食蟹獼猴時具有良好耐受性。如藉由心電圖所評估，對心臟功能無影響，對臨床病理學、免疫表型或組織病理學結果亦無毒理學上有意義的任何影響。因此，373.A在食蟹獼猴中之觀測不到的不良影響水準(NOAEL)為100 mg/kg，而最高的非嚴重毒性劑量(HNSTD)為＞100 mg/kg。
在非GLP單次劑量毒理學研究中，向食蟹獼猴投與單次IV劑量的對照物：3、30或100 mg/kg抗體373.A。IV注射之後，由於標靶介導之藥物處置，因此3 mg/kg群組中的373.A快速下降。在30 mg/kg及100 mg/kg群組中，下降通常以多指數方式進行。未觀測到373.A Cmax與AUC0-168hr 值存在性別差異。藉由373.A平均Cmax及AUC0-168hr 值評估的暴露量隨著劑量水準自3 mg/kg增加至100 mg/kg而增加。373.A平均Cmax及AUC0-168hr 值的增加通常與劑量成比例，但AUC0-168hr 在劑量水準3 mg/kg與30 mg/kg之間。在100 mg/kg劑量組中，平均Cmax及AUC0-168hr 分別為2540 µg/mL及173,000 µg.hr/mL。此研究中的抗藥物抗體(ADA)發生率的確不影響PK。
在GLP毒理學研究中，向猴投與每週四次IV劑量的對照物10、30或100 mg/kg的373.A。373.A Cmax與AUC0-168hr 的性別差異最小(在0.7至1.2倍之間)。如藉由平均Cmax及AUC0-168hr 評估的暴露量依比例自10 mg/kg增加至100 mg/kg。IV快速注射之後，373.A PK以雙指數方式下降，100 mg/kg群組在第22天、在恢復期之後的平均消除期t1/2 值為266小時。在100 mg/kg劑量組中，第22天給藥之後的平均Cmax及AUC0-168hr 分別為5030 µg/mL及365,000 µg.hr/mL。ADA發生使30 mg/kg群組中的一個動物暴露量降低。
在單獨研究中，在50、100、500及1000 μg/mL的373.A刺激人類全血24小時之後，在活體外可溶性分析形式中評估細胞介素釋放。自十位健康人類供者收集血液樣品。對於各樣品而言，包括陰性(全血及使用培養基的全血)及陽性(抗人類CD3)對照物。使用針對IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IFNγ及TNFα的Luminex多工方法來量測細胞介素含量。使用緩衝液對照物所得的結果類似於使用陰性對照物(僅血液)所得的結果且在稀釋劑(0.5%右旋糖)存在下注意到細胞介素釋放無減少或增加傾向。對於所有供者而言，所有細胞介素的抗CD3陽性對照物均存在細胞介素釋放誘導，表明刺激為適當且可以誘導所有樣品中的細胞介素釋放。373.A刺激之後所得的細胞介素含量類似於在陰性對照物中所量測的含量。總之，373.A在高達1000 μg/mL的濃度下對人類全血的活體外刺激不誘導細胞介素釋放。
實例7：抗CD73抗體373.A作為單一藥劑及與BAP049-純系-E及/或PBF509的組合在患有晚期惡性疾病之患者中的I/Ib期研究 在最近十年期間，靶向不同免疫檢查點(例如PD-1、PD-L1及CTLA-4)的免疫療法在多種癌症適應症中已展示功效。然而，雖然一些患者對檢查點阻斷達成持久的目標反應，但大部分患者展示適度或無臨床益處，表明腫瘤係利用替代的免疫抑制機制達成免疫逃避(Allard等人, Clin Cancer Res. 2013; 19(20):5626-35；Vesely等人, Annu Rev Immunol 2011; 29:235-271)。因此，可能需要多重免疫抑制路徑的同時阻斷來誘導較大數目個患者中發生臨床上有意義的反應。
在過去多年期間，腺苷產生及信號傳導已作為癌症治療的潛在治療標靶出現。腺苷係藉由減少細胞毒性抗腫瘤免疫反應、增強免疫抑制細胞增殖及極化以及藉由增強新血管生成來產生免疫抑制腫瘤微環境(Young等人, Cancer Discovery 2014; 4(8):879-88)。臨床前資料證明，在免疫勝任同基因型小鼠模型中，CD73阻斷可以顯著地延遲原發腫瘤生長且抑制肺轉移發展(Stagg等人，2010)。在研究中觀測到類似結果，其中宿主中之A2aR基因缺失在缺乏A2aR的小鼠中引起已建立免疫原性腫瘤的排斥反應，而在對照野生型小鼠中則未發現排斥反應(Ohta等人, PNAS 2006; 103(35):13132-37)。
已設計I/Ib期開放標記多中心研究來評估抗CD73抗體373.A作為單一藥劑及與A2aA R拮抗劑PBF509及/或抗PD-1抗體BAP049-純系-E之組合在患有晚期惡性疾病之患者中的安全、耐受性、初始抗腫瘤活性、藥物動力學(PK)及藥效學(PD)。主要目標為表徵安全及耐受性，及確定373.A作為單一藥劑及與PBF509及/或BAP049-純系-E組合時之建議劑量(RD)。第二目標為評估373.A作為單一藥劑及與PBF509及/或BAP049-純系-E組合時之初始抗腫瘤活性及PK，評估373.A及BAP049-純系-E之免疫原性，及表徵腫瘤在治療後的免疫浸潤變化，例如腫瘤浸潤性淋巴球(TIL)、腫瘤相關巨噬細胞(TAM)、CD8+ T細胞及PDL-1表現相對於基線的變化。
BAP049-純系-E為阻斷PD-L1及PD-L2結合至PD-1的高親和力、阻斷配位體、人類化抗程式化死亡-1 (PD-1) IgG4抗體。BAP049-純系-E正在晚期惡性疾病之I/II期研究中加以測試。PBF509，一種新穎的基於非黃嘌呤之化合物，為強效口服腺苷A2aA R拮抗劑。BAP049-純系-E之序列揭示於表5中。
兩項進行中的I/Ib期及II期研究對PBF509作為單一藥劑及/或與BAP049-純系-E的組合在分別患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)及實體腫瘤及非霍奇金氏淋巴瘤的患者中進行評估。
此I/Ib研究首先募集患有晚期惡性疾病的成年患者，該等惡性疾病已進展或對適應症之標準療法不耐受，其中CD73中度至高度表現已與較差結果相關，表明腺苷介導免疫逃避(Wu等人, Journal of Surgical Oncology 2012, 106(2): 130-137；Gaudreau等人, Oncoimmunology; 2016, 5(5): e1127496；Inoue等人, Oncotarget.; 2017, 8(5):8738-8751)。此等適應症包括非小細胞肺癌(NSCLC)、三陰性乳癌(TNBC)、胰臟癌(PDAC)、腎細胞癌(RCC)、卵巢癌及微衛星穩定(MSS)結腸直腸癌，然而可以根據新出現的臨床資料(例如功效資料或已證實的路徑活化)募集其他適應症。
該研究由兩個部分組成：(1)劑量遞增部分，用於單一藥劑373.A、雙重組合373.A/PBF509及373.A/BAP049-純系-E，或三重組合373.A/PBF509/BAP049-純系-E，其說明各療法之建議劑量(RD)；及(2)劑量擴增部分，其中患者將以單一藥劑、雙重組合及三重組合的RD治療。遞增部分將募集患有晚期NSCLC、TNBC、PDAC、RCC、卵巢癌及結腸直腸癌(MSS)的患者；且對先前治療的次數無限制。擴增部分將募集患有晚期惡性疾病、已接受至多3線先前治療的患者。
在擴增部分中，各種適應症的患者均等地隨機分成組合治療組。隨機分組將根據適應症執行，且根據先前PD-1/PD-L1治療(初始或抗性)、在某些適應症內進一步分級。
劑量及療法選擇373.A 單一療法
基於食蟹獼猴中所觀測的臨床前安全、耐受性及PK資料以及CD73缺乏患者之已公開個案歷史，選擇60 mg均一劑量373.A的起始劑量，靜脈內每2週投與(Q2W)。
60 mg劑量被視為最低的藥理學活性劑量(mPAD)，因為預測其提供(1)約20小時＞90%的CD8+ T細胞CD73佔據；(2)約22小時＞90%的腺苷抑制；(3)約17小時＞90%的總體CD73佔據估算。
根據食蟹獼猴毒理學研究的TK資料模型化、離體CD8+ T細胞CD73佔據資料及活體外腺苷形成抑制資料，預測劑量≥1200 mg Q2W可在整個給藥間隔時間期間在CD8+ T細胞上達成＞90%的標靶佔據且預測劑量≥600 mg Q2W可達成＞90%的腺苷產生抑制。
373.A劑量在各組中依序遞增，如根據貝葉斯邏輯回歸模型(Bayesian Logistic Regression model，BLRM)聯合過劑量控制(EWOC)標準所指導，直至鑑別出用於擴增的最大耐受劑量(MTD)或建議劑量(RD)。臨床前資料及模型化表明，可能存在高度的抗原沉默且可能需要高劑量(例如≥1200 mg Q2W)以在整個給藥間隔時間期間達成連續的標靶佔據。劑量遞增主要利用Q2W療法執行。然而，若此療法展示快速的373.A消除且在給藥間隔時間內缺乏標靶飽和，則可以測試更頻繁的QW療法。若另一方面預測Q4W療法在給藥間隔時間內未發生快速消除，則可以改為研究Q4W療法。
373.A / PBF509 組合 373.A/PBF509雙重組合之最大初始劑量將為200 mg Q2W 373.A及80 mg BID PBF509。
200 mg Q2W 373.A為低劑量的373.A，其經預測可對CD8+ T細胞達成約2.3天的＞90%標靶佔據。200 mg Q2W 373.A劑量為1200 mg Q2W劑量的16%，預期其可在整個給藥間隔時間期間達成＞90%的CD8+ T細胞標靶佔據。
PBF509已作為單一藥劑(至多640 mg BID)在晚期/轉移性NSCLC中加以測試而無安全問題(在640 mg BID劑量下，5位可評估患者中僅出現1個DLT)。在相同研究中，PBF509已展示80 mg BID至480 mg BID範圍內的單一藥劑活性，總共18位服藥患者中有2位出現部分反應(PR)且6位疾病穩定(SD)。
為了確定各種藥物在組合中的適當劑量，執行373.A及PBF509之劑量遞增方法，如藉由貝葉斯邏輯回歸模型(BLRM)聯合過劑量控制(EWOC)原理準則所指導。
373.A/ BAP049- 純系 -E 組合 373.A/BAP049-純系-E雙重組合之最大起始劑量將為200 mg Q2W 373.A及400 mg Q4W BAP049-純系-E。
200 mg Q2W 373.A之基本原理已描述如上。200 mg Q2W 373.A將與BAP049-純系-E之RD (為400 mg Q4W)組合，其已展示為安全且有效的。
373.A劑量水準相對於BAP049-純系-E之固定劑量依序遞增，如藉由貝葉斯邏輯回歸模型(BLRM)聯合過劑量控制(EWOC)原理準則所指導。
373.A / BAP049- 純系 -E/ PBF509 組合 373.A/BAP049-純系-E/PBF509三重組合的最大起始劑量將為200 mg Q2W 373.A、400 mg Q4W BAP049-純系-E及80 mg BID PBF509。
PBF509已以至多160 mg BID安全地與400 mg Q4W BAP049-純系-E組合投與(6位可評估患者中僅出現1位DLT)，其具有有效的組合活性：總共10位患者中出現2個PR及6個SD。Ph2研究中當前正使用160 mg BID PBF509及400 mg Q4W BAP049-純系-E劑量。
為了確定373.A及PBF509在三重組合中的適當劑量，執行373.A/BAP049-純系-E/PBF509相對於BAP049-純系-E之固定劑量的劑量遞增方法，如藉由貝葉斯邏輯回歸模型(BLRM)聯合過劑量控制(EWOC)準則所指導。
抗體373.A (100 mg粉末，用於輸注溶液)將以1小時輸注(最長2小時，若臨床上指定)形式靜脈內投與。BAP049-純系-E (100 mg粉末，用於輸注溶液)將以30分鐘輸注(最長2小時，若臨床上指定)形式靜脈內投與。當組合提供時，373.A及BAP049-純系-E係在同一天使用各自輸注用的各別輸注材料(袋、管線、過濾器)投與。兩次輸注均可以使用相同的接取位點。首先輸注373.A，隨後間隔30分鐘之後輸注BAP049-純系-E。PBF509 (40 mg及/或80 mg及/或160 mg膠囊，用於口服利用)連續地口服，每日兩次(BID)。就診時(其中投與373.A及/或BAP049-純系-E)，首先給與PBF509，隨後輸注373.A。投與PBF509與輸注373.A之間無需間隔。373.A輸注應該儘可能快地且在給與PBF509之後不超過60分鐘開始。
表22-25描述可以在此試驗期間評估的起始劑量及劑量水準。經373.A單一藥劑或373.A與BAP049-純系-E及/或PBF509組合治療的患者在第1循環第1天上開始研究治療。各循環將由28天組成。在循環之第1天及第15天投與373.A Q2W。在循環之第1天、第8天、第15天及第22天投與373.A QW。在循環之第1天投與373.A Q4W。在循環之第1天投與BAP049-純系-E Q4W。在循環之每一天服用PBF509 BID。表 22. 373.A的臨時劑量水準
Figure 107121595-A0304-0017
 表 23. 373.A與PBF509組合的臨時劑量水準
Figure 107121595-A0304-0018
 表 24 . 373.A與BAP049-純系-E組合的臨時劑量水準
Figure 107121595-A0304-0019
 表 25 . PBF509與373.A及BAP049-純系-E組合的臨時劑量水準
Figure 107121595-A0304-0020
實例8. 晶體結構分析選殖 藉由對350.A2抗體之重鏈之核心鉸鏈區上方之兩個脯胺酸殘基之間的終止密碼子進行工程改造來產生350.A2之Fab片段。350.A2 Fab包含含有胺基酸序列SEQ ID NO: 331的重鏈及含有胺基酸序列SEQ ID NO: 23的輕鏈。將具有his標籤(SEQ ID NO: 171)的CD73 ECD選殖入pRS5a載體中。
表現及純化 Expi293F細胞以1:1 350.A2與CD73 ECD比率轉染且轉染後第五天，使細胞以2000 rpm離心成塊。在此時間期間，Fab:CD73複合物分泌至上清液中。上清液經由0.2 µm SteriFlip過濾器過濾。丟棄所集結的細胞碎片。Fab-ECD複合物係使用蛋白質L管柱純化，隨後藉由Mono Q管柱純化。自MonoQ管柱溶離之後，使用蛋白質L管柱將複合物(捕捉於流過物中)再純化。經純化之樣品相對於10 mM tris (pH 7.5)、100 mM NaCl透析且藉由SEC-MALS分析其純度。隨後將其濃縮至9 mg/ml。
結晶、低溫保存及資料收集 使用懸滴法使350.A2 Fab-CD73複合物結晶。設置結晶盤之前，經純化之複合物以14,000 rpm旋轉10分鐘以移除聚集的蛋白質及碎片。此後，將1.0 µl複合物(9 mg/ml)與由0.2 M Li2 SO4 、1.2 M NaH2 PO4 、0.8 M K2 HPO4 、0.1 M甘胺酸(pH 10.5)組成的1.0 µl蛋白質沈澱劑混合，且接著懸浮於300 µl蛋白質沈澱劑之孔中。使晶體生長約3-4天。收集晶體且接著使用蛋白質沈澱劑與25% (v:v)甘油組合的溶液低溫保存。在Advanced Light Source (射束線5.0.1)收集X射線繞射資料。可使用約2.85埃的繞射資料。
結構解析及改進 使用AL-57 (RCSB寄存碼3HI5)之Fab片段作為模板，使用MOE模型化程式組將350.A2結構模型化。利用程式PHASER及糖基化人類CD73 (RCSB 4H1S)之二聚合結構及Fab同源模型作為搜尋模型，求解共結構。簡言之，使用人類CD73之二聚合結構作為第一搜尋模型，確定人類CD73之兩種二聚體在不對稱單元中的位置。利用Phenix-Refine改進此初始結構。隨後，使用重鏈及輕鏈之同源模型作為各別搜尋模型，藉此確定兩種Fab相對於人類CD73之兩種二聚體的位置。改進所完成的結構以彙聚多輪改進及真實空間重建。最終R因數及自由R因數分別為22.78%及27.12%。電子密度圖譜展現各種CD73單體在天冬醯胺-311上發生糖基化。然而，此糖基化為異質的且因此不可能確定糖基化事件之確切化學結構。因此，結構模型中不包括糖基化。
350.A2 Fab-CD73共晶體結構揭露抗體與CD73的相互作用。此等相互作用可以分成直接焓相互作用，諸如氫鍵或靜電相互作用，及凡得瓦爾(Van der Waal)及疏水相互作用，其由抗體與CD73之間的形狀互補性驅動。
依據共晶體結構鑑別的關鍵焓及VDW/疏水相互作用如下。Fab重鏈與CD73之間出現以下相互作用。Fab重鏈殘基係根據Kabat編號法編號且突出顯示於圖26C及26D中(粗體、斜體，及加單下劃線)。CD73殘基係根據SEQ ID NO: 105編號且突出顯示於圖26A及26B中(粗體、斜體，及加單下劃線)。
• Fab重鏈之R54定位成與CD73中之Y110及K136之主鏈碳基發生靜電相互作用。
• Fab重鏈之R31定位成與CD73之L132及L157之主鏈碳基發生靜電相互作用。
• Fab重鏈之S99主鏈羰基、R31主鏈羰基及E95側鏈定位成與CD73之K162側鏈發生靜電相互作用。
• Fab重鏈之E98側鏈定位成與CD73中之S155側鏈以氫鍵鍵結。
• Fab重鏈之胺基酸33、50、52、56、97、98、100及100a與CD73之胺基酸155-170之間的形狀互補性及凡得瓦爾相互作用。
• Fab重鏈之胺基酸30-31與CD73之胺基酸136-138之間的形狀互補性及凡得瓦爾相互作用。
Fab輕鏈與CD73之間出現以下相互作用。Fab輕鏈殘基係根據Kabat編號法編號且突出顯示於圖26G及26H中(粗體、斜體，及加單下劃線)。CD73殘基係根據SEQ ID NO: 105編號且突出顯示於圖26E及26F中(粗體、斜體，及加單下劃線)。
• Fab輕鏈之W32側鏈定位成與CD73之T209側鏈以氫鍵鍵結。
• Fab輕鏈之胺基酸30及32與CD73之胺基酸209-210之間的形狀互補性及凡得瓦爾相互作用。
實例9. 利用串聯質量標籤(TMT)同位素標記的抗原決定基定位 利用TMT同位素編碼試劑進行的抗體比較主要如John D.等人, Analytical Chemistry 2015 87 (15), 7540-7544中所述執行，該文獻以全文引用之方式併入本文中。
方法 TMT標記 DPBS中之抗體具有以下濃度且不進一步處理即使用：374 (1.37 mg/mL)、377.B (2.25 mg/mL)、379.B (2.82 mg/mL)、373 (1 mg/mL)及350 (1 mg/mL)。CD73 (R&D Systems，目錄號5795-EN)在100 mM三乙銨碳酸氫鹽緩衝液(TEAB)(pH 8)中進行緩衝交換且使用10 kDa分子量截斷微型濃縮器(Millipore Amicon Ultra)濃縮至5 mg/ml以移除所接受材料及條件樣品中用於TMT標記的游離胺。藉由將10 µg CD73與12.8 µg mAb (等當量或2:1莫耳比的CD73:mAb或1:1結合位點等效物)(就CD73而言，為約2 µM濃度)合併於100 mM TEAB、pH 8緩衝液中且在室溫下平衡30分鐘來製備抗原/抗體複合物(CD73/抗CD73 mAb複合物)。藉由添加5 µl之35 mM TMT試劑來執行標記。以類似方式製備單獨CD73對照物用於標記。標記時間分別為30秒及300秒，隨後藉由添加50 µL之5%羥胺溶液來淬滅標記反應。所有反應物雙重複製備。
消化 合併樣品15分鐘後，在旋轉濃縮器中淬滅羥胺且總體積減小至約30 µL。此後為使用PNGase F進行去糖基化且藉由標準方法進行還原/變性SDS PAGE分離。
自凝膠切除含有CD73的色帶用於凝膠內消化。凝膠處理係依循去染、還原、烷基化及脫水的標準程序。對於在彈性蛋白酶消化之前進行調理而言，將脫水的凝膠片用50 mM Tris緩衝液pH8復水，而對於胃蛋白酶消化而言，在真空完全脫水之前的最後復水步驟中使用1%甲酸。
彈性蛋白酶消化樣品係在冰上藉由添加25 µL含有12.5 ng/µL彈性蛋白酶的50 mM Tris pH8來復水1小時。胃蛋白酶消化樣品係在冰上藉由添加25 µl含有10 ng/µL胃蛋白酶的1%甲酸來復水1小時。
經由酶復水之後，丟棄過量的酶溶液且添加50 µl相應消化緩衝液，隨後在37℃下消化4小時。消化之後，再次依循標準凝膠內消化方法進行肽回收。
LCMSMS 使用Orbitrap Lumos質譜儀(Thermo Scientific, Waltham, MA)聯合Easy-nLC 1200層析系統(Thermo Scientific, Waltham, MA)執行LCMSMS。分離管柱為裝填有15 cm ReproSil-Pur 120 C18 AQ 3 µm之75 µm拉尖毛細管(目錄號r13.aq)。使用溶離緩衝液A = 0.1%甲酸/水及B = 0.1%甲酸/80% MCN，以500 nL/min之流量，利用如下分段式梯度溶離蛋白水解片段：0-35% B，歷時120分鐘；35-63% B，歷時30分鐘；63-100% B，歷時5分鐘，100% B保持5分鐘；100-0% B，歷時2分鐘；0% B保持2分鐘。
對於TMT實驗及MSMS偵測而言，資料擷取方法係利用製造商預設的方法參數。
資料簡化及分析 使用MASCOT 2.5.1 (MatrixScience, UK)，使用MASCOT Daemon (MatrixScienc, UK)及ExtractMSn (Thermo Scientific, Waltham, MA)，針對CD73蛋白序列搜尋原始資料，以便將彈性蛋白酶及胃蛋白酶原始檔案轉換且合併至.mgf峰值清單中。使用內嵌於MASCOT中的預設TMT10plex方法進行定量。搜尋結果(包括TMT報導子離子強度)以.csv形式輸出且進一步改進/組織以移除離群值，隨後使用Microsoft Excel計算初始序列之既定離胺酸殘基之肽譜匹配(peptide spectral matches，PSM)範圍內的強度加權報告體離子強度平均值。分析中僅使用含有單一離胺酸殘基之肽的PSM以避免標記位點時的不明確性。
結果 對涵蓋初始序列之可觀測離胺酸殘基的強度加權CD73標準化報導子離子強度比率相對於CD73/抗CD73 mAb複合物與CD73之間的差異(1，根據標準化之定義)作圖。以此方式將比率作圖可以直接了當地評估作為複合物形成之結果而發生的標記比率變化。負差值表示抗體/抗原複合物中的標記減少且類似於HDX資料解釋為保護作用。預期最強保護作用反映來自試劑之抗原的蛋白質表面被抗體遮蔽。除蛋白質-蛋白質界面處直接遮蔽之外，當蛋白質整體摺疊時，在別處發生變化不令人意外，且複合物形成可以干擾所有構形集合。儘管複雜，但此促進分子事件依絕對值量表解釋。有可能的是，複合物形成後展示類似總體效應(標記曲線)的抗體具有類似的抗原決定基且藉由類似分子機制發揮其效應功能。此實例中所示的全部殘基係根據SEQ ID NO: 105編號。
圖27A及27B展示CD73初始序列之35個離胺酸中有29個存在比率差，如在30秒標記時所觀測。離胺酸K162、K206及K214處之保護作用(圖27A)與373之抗原決定基之先前HDX解釋(實例2)良好相關。特定言之，HDX研究指定涵蓋K162的殘基158-172 (YLPYKVLPVGDEVVG，SEQ ID NO: 108，A環)；及涵蓋K206及K214的殘基206-215 (KLKTLNVNKI，SEQ ID NO: 109，B環)作為373抗原決定基的一部分。離胺酸K285及K291處之保護作用(圖27B)符合殘基300周圍區域之先前HDX資料中所觀測到的較小保護作用(圖14及實例2)。相對於抗原決定基(K162、K206及K214)，K262及K274位於N末端域之對置側且該兩種殘基處之標記增加(圖27A)可能反映出該區域由於mAb接合而發生的「去穩定」。K136在空間上接近於K162，但更多地向二聚體中心定位。抗體374、377、379及373在K136處之保護作用(圖27A)符合實例2中關於373所述的雙齒結合模式。此資料表明抗體374、377、379及373可以形成高同質群組。K341位於N/C末端域界面且接近於二聚體界面。
圖28A及28B展示CD73初始序列之35個離胺酸中有29個存在比率差，如在300秒標記時所觀測到。mAb 374、377、379及373對K162處之保護作用不再可觀測到，而350之保護作用仍較強。相比之下，K206及K214處之保護作用不變。由此進一步證明抗體374、377、379及373具有高度同源性質，如根據其空間-時間標記圖案所評估。
值得注意的是，對於所有此等抗體而言，K206處之保護作用類似於K214處之保護作用(圖27A及28A)。
以引用的方式併入 本文中提及之所有公開案、專利及寄存編號均以全文引用的方式併入本文中，其併入程度如同各個別公開案或專利經特定且個別地指示以引用的方式併入一般。
等效物 雖然本發明之特定實施例已加以論述，但以上說明書具說明性而非限制性。熟習此項技術者在審查本說明書及下述申請專利範圍後，將顯而易知本發明之諸多變更。本發明之完整範疇以及其等效物之完整範疇，及說明書，以及此類變更，應參照申請專利範圍確定。
圖 1 為展示藉由流式細胞術所量測之抗CD73抗體或同型對照抗體對CD8+ T細胞之結合的圖。對MFI值相對於抗體濃度作圖。所測試的抗體為抗CD73抗體350、356、358、373、374、377及379，以及同型對照抗體，所有皆以.B形式表現。圖 2A 及圖 2B 為展示孔雀綠無機磷酸鹽分析之結果的圖，該分析測試抗CD73抗體抑制人類CD73促進單磷酸腺苷(AMP)轉化成腺苷的能力。對無機磷酸鹽(Pi)釋放速率相對於所測試的AMP濃度作圖。在圖2A中，重組人類CD73與單獨的具有緩衝液之受質AMP (「hCD73 Km」)一起培育或在IgG1同型對照抗體(ISO.C)存在下培育。在圖2B中，重組CD73與單獨的具有緩衝液之AMP (「hCD73 Km」)一起培育或在指定濃度(「1 µg/ml 350.C」、「0.3 µg/ml 350.C」或「0.1 µg/ml 350.C」)之抗CD73抗體350.C存在下培育。圖 3A 、3B 及 3C 為展示孔雀綠(MG)磷酸鹽分析結果的圖，該分析測試抗CD73抗體抑制人類或食蟹獼猴重組可溶性CD73酶活性的能力。在使用重組人類CD73 (圖3A及圖3B)或食蟹獼猴CD73 (圖3C)的研究中，對INH磷酸鹽形成%相對於抗CD73抗體濃度作圖。所測試的抗體為以.A或.B形式表現的抗CD73抗體350、356、373及374。圖 4 為展示經修改之細胞效價Glo (CTG)分析之結果的圖，該分析檢查抗CD73抗體針對自乳癌細胞株MDA-MB-231排出之CD73的酶抑制活性。對% INH相對於抗CD73抗體濃度的範圍作圖。所測試的抗體為以.A或.B形式表現的抗CD73抗體350及373、IgG4 S228P同型對照抗體(「ISO.A」)，及IgG4 S228P/L235E同型對照抗體(「ISO.B」)。圖 5 為展示經修改之細胞效價Glo (CTG)分析之結果的圖，該分析檢查抗CD73抗體抑制胰臟癌患者血清中之CD73酶活性的能力。對INH AMP轉化%相對於抗CD73抗體濃度作圖。所測試的抗CD73抗體為350、356、358、373、374、377及379，所有皆以.B形式表現。圖 6 為展示乳癌細胞株MDA-MB-231表面上所表現之CD73受到抑制的圖，如使用孔雀綠磷酸鹽分析所量測。對抗CD73抗體濃度範圍內之INH AMP轉化率%作圖。所測試的抗CD73抗體為350、356、358、373、374、377及379，所有皆呈.B形式。圖 7A 、7B 、7C 及7D 為展示經修改之細胞效價Glo (CTG)分析之結果的條形圖，該分析測試抗CD73抗體抑制人類乳癌細胞株MDA-MB-231 (圖7A及7C)或鼠類乳癌細胞株4T1 (圖7B及7D)表面上所表現之CD73的酶活性。y軸展示抑制相對於無抗體(完全轉化)對照物及零時(未轉化)對照物的百分比。對於各種抗體而言，自左至右的條形圖表示10、3、1及0.3 µg/ml劑量。所測試的抗體為譜系1抗體918、350、356及358 (圖7A及7B)且譜系3抗體930、373、374、376、377及379 (圖7C及7D)。圖 8A 及 8B 為展示抗CD73抗體針對人類乳癌細胞株MDA-MB-231或人類卵巢癌細胞株SKOV3表面上所表現之CD73之酶抑制活性的圖，如藉由經修改之細胞效價Glo (CTG)分析所量測。對% INH相對於抗CD73抗體濃度作圖。所測試的抗CD73抗體為350及373，其以.A或.B形式表現。圖 9A 及圖 9B 為類似於圖8A及8B的圖。所測試的抗體為呈.A或.B形式的抗CD73抗體350、356、373及374。圖 10 為展示抗CD73抗體抑制HEK 293細胞上過度表現之人類CD73的圖，如藉由經修改的細胞效價Glo (CTG)分析所量測。對INH AMP轉化率%相對於抗CD73抗體濃度範圍作圖。所測試的抗體為呈.A或.B形式的抗CD73抗體350、356、373及374。圖 11A 及 11B 為展示抗CD73抗體抑制自兩個各別供者分離之初代人類PBMC上所表現之CD73的圖，如藉由經修改的細胞效價Glo (CTG)分析所量測。對% INH相對於抗CD73抗體濃度範圍作圖。所測試的抗CD73抗體為350、356及358，其皆呈.B形式。圖 12A 及 12B 為展示經抗CD3/28刺激之CD4+ T細胞在AMP及抗CD73抗體存在下之增殖的圖。對增殖指數(T細胞分裂之量度)相對於抗體濃度範圍作圖。圖12A展示研究結果，該研究測試皆呈.B形式的抗CD73抗體350、356、358、374、377及379。圖12B展示研究結果，該研究使用以.A或.B形式表現之抗體350及372。圖 13 為展示異種移植物研究之結果的條形圖，該研究測試抗CD73抗體活體內抑制CD73酶活性的能力。y軸展示植入有高度表現CD73之乳癌細胞株(MDA-MB-231)之免疫功能不全小鼠之血清中的腺苷及肌苷含量，如藉由質譜法所量測。以.A或.B形式表現的抗CD73抗體350、356、373及374腹膜內以每隻小鼠20或200 μg投與。對照物人類多株IgG抗體係以每隻小鼠200 μg投與。圖 14 為展示373.A與373.B之保護概況之比較的圖，如藉由片段化氫氘交換質譜法(HDx-MS)所量測。圖14展示在pH 7.5及室溫下的1分鐘交換結果。圖 15 為展示350.A2與350.B之保護概況之比較的圖，如藉由片段化氫氘交換質譜法(HDx-MS)所量測。圖15展示在pH 7.5及室溫下的1分鐘交換結果。圖 16A 為展示CD73在封閉/活性構形(蛋白質資料庫(PDB) 4H2I)與開放/非活性構形(PDB 4H2F)之間之構形變化的圖。圖 16B 為展示由PDB 4H2F之兩個單元構築之CD73二聚體在c末端域與PDB 4H1S對準之後之開放/開放構形的圖。圖 17A 及 17B 分別為展示CD73-373.A及CD73-373.B複合物之SEC概況的圖。圖 18A 及 18B 分別為展示CD73-350.A2及CD73-350 .B複合物之SEC概況的圖。圖 19 為展示使用積分方法所計算之CD73/mAb物種之相對百分比的圖。圖 20 為展示使HDx與SEC解釋統一之寡聚模型的示意圖。圖 21A 及 21B 為展示藉由流式細胞術所分析之經泛抗TGFβ抗體或hIgG2同型對照物處理之小鼠4T1腫瘤中之基質細胞亞群中之CD73表現的圖。在圖21A中，CD73表現以相較於經匹配同型對照物染色之樣品的螢光強度顯示。圖示為一個代表性樣品。在圖21B中，描繪CD73表現之定量，如作為平均螢光強度所量測。各符號表示樣品。在顯著的情況下指示P值。CAF = 癌症相關纖維母細胞。圖 22A 、 22B 及 22C 為展示分析結果的圖，該分析評估抗CD73抗體對B細胞中之類別轉換重組的影響。自健康供者之周邊血液中分離出未處理(CD19+ CD27- IgM+ IgD+ ) CD73+ 及CD73- B細胞，用CFSE標記且活體外用CpG 2006、抗CD40、IL-2、IL-21及轉鐵蛋白刺激。細胞在三種不同濃度(1、10及100 ng/mL)的抗CD73抗體350.B或同型對照抗體(IgG4)存在下培養。在圖22A中，使用ELISA分析來量測7天培養上清液中之IgM分泌。在圖22B中，第7天量測B細胞增殖且在電子閘選CFSE稀釋群體之後所計數之分裂細胞的數目相對於所測試的三種不同濃度作圖。在圖22C中，在相同時間點藉由ELISPOT分析對分泌IgG的細胞(IgG SC)計數。自兩個獨立實驗收集資料。圖 23 為展示指定群組之個別腫瘤體積的一組圖。同型對照小鼠在第25天安樂死。在抗PD-1處理組中，小鼠在所有給藥時接受每隻小鼠300 μg。在350.B處理組中，小鼠第一次給藥時接受600 µg，隨後其餘四次劑量為每隻小鼠400 μg。組合群組投與相同的給藥方案。所有小鼠在第2、5、9、12及17天處理。圖 24A 為展示偵測來自兩個供者之未標記373.A預處理血液樣品中之生物素化373.A的一對圖。圖 24B 為展示抗體373.A在CD8+ T細胞上之標靶佔據百分比的圖。圖 25A 及 25B 為一組圖，其展示CD4+及CD8+ T細胞增殖在TCR介導的活化期間被AMP遏制，且此抑制可以被抗體373.A恢復。圖 26A 及 26B 展示與350.A2Fab重鏈經由直接的焓相互作用(Y110、L132、K136、S155、L157及K162，根據SEQ ID NO: 105編號)(圖26A)或凡得瓦爾及疏水相互作用(殘基136-138及155-170，根據SEQ ID NO: 105編號)(圖26B)而發生相互作用的CD73殘基(粗體、斜體及單個加下劃線)，如實例8中所量測。圖26C及26D展示與CD73經由直接的焓相互作用(R31、R54、E95、E98及S99，根據Kabat編號編號；或R31、R54、E98、E101及S102，根據其在SEQ ID NO: 331中的線性位置編號)(圖26C)或凡得瓦爾及疏水相互作用(殘基30、31、33、50、52、56、97、98、100及100a，根據Kabat編號法編號；或殘基30、31、33、50、52、56、100、101、103及104，根據其在SEQ ID NO: 331中的線性位置編號)(圖26D)而發生相互作用的350.A2 Fab重鏈殘基(粗體、斜體，且單個加下劃線)，如實例8所量測。圖26E及26F展示與350.A2 Fab輕鏈經由直接的焓相互作用(T209，根據SEQ ID NO: 105編號)(圖26E)或凡得瓦爾及疏水相互作用(殘基209及210，根據SEQ ID NO: 105編號)(圖26F)發生相互作用的CD73殘基(粗體、斜體，及單個加下劃線)，如實例8中所量測。圖26G及26H展示與CD73經由直接的焓相互作用(W32，根據Kabat編號法或其在SEQ ID NO: 23中的線性位置編號)(圖26G)或凡得瓦爾及疏水相互作用(殘基30及32，根據Kabat編號法或其在SEQ ID NO: 23中的線性位置編號)(圖26H)發生相互作用的350.A2 Fab輕鏈殘基(粗體、斜體，及單個加下劃線)，如實例8中所量測。信號肽在圖26A、26B、26E及26F中加雙下劃線。圖 27A 及 27B 為在30秒標記脈衝之後針對CD73/mAb複合物與單獨CD73所觀測到之標記比率之間差異的圖。圖 28A 及 28B 為展示標記300秒之後針對CD73/mAb複合物及單獨CD73所觀測到之標記比率之間差異的圖。
表之簡單說明 表 1 提供例示性抗CD73抗體的胺基酸及核苷酸序列。表 2 提供例示性抗CD73抗體的共同CDR序列。表 3 提供人類IgG重鏈及人類κ輕鏈之胺基酸序列。表 4 提供CD73之例示性序列。表 5 及 6 提供例示性抗PD-1抗體分子之胺基酸及/或核苷酸序列。表 7 及 8 提供例示性抗PD-L1抗體分子之胺基酸及/或核苷酸序列。表 9 及 10 提供例示性抗LAG-3抗體分子之胺基酸及/或核苷酸序列。表 11 及 12 提供例示性抗TIM-3抗體分子之胺基酸及/或核苷酸序列。表 13 及 14 提供例示性抗GITR抗體分子之胺基酸及/或核苷酸序列。表 15 提供例示性抗CD3雙特異性抗體分子之胺基酸序列。表 16 及 17 提供例示性IL15/IL-15Ra複合物之胺基酸序列。表 18 為可與本文所述之抗CD73抗體分子組合投與之所選治療劑的概述。表18自左向右提供以下：第二治療劑之化合物命名、化合物結構，及揭示該化合物的專利公開案。表 19 提供抗CD73抗體之兩個譜系的命名法。表 20 提供抗CD73抗體之親和力。表 21 提供抗CD73 Fab之親和力。表 22 提供373.A之臨時劑量水準。表 23 提供與PBF509組合之373.A的臨時劑量水準。表 24 提供與BAP049-純系-E組合之373.A的臨時劑量水準。表 25 提供與373.A及BAP049-純系-E組合之PBF509的臨時劑量水準。表 26 提供抗CD73抗體之相應生殖系序列。
<110> 瑞士商諾華公司(NOVARTIS AG) 美商表面腫瘤學公司(SURFACE ONCOLOGY,INC.)
<120> 針對CD73的抗體分子及其用途
<130> N2067-7123WO
<140> 107121595
<141> 2018-06-22
<150> 62/636,510
<151> 2018-02-28
<150> 62/523,481
<151> 2017-06-22
<160> 922
<170> PatentIn version 3.5
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<213> 人工序列
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<221> MISC_FEATURE
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Figure 107121595-A0305-02-0472-12
Figure 107121595-A0305-02-0473-13
Figure 107121595-A0305-02-0474-14
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<211> 1344
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<221> Variation
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Figure 107121595-A0305-02-0474-15
Figure 107121595-A0305-02-0475-16
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<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0475-17
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0475-18
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<212> PRT
<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0476-22
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<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<212> PRT
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Figure 107121595-A0305-02-0479-29
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<211> 16
<212> PRT
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Figure 107121595-A0305-02-0483-39
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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Figure 107121595-A0305-02-0488-53
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Figure 107121595-A0305-02-0489-56
Figure 107121595-A0305-02-0490-57
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Figure 107121595-A0305-02-0491-59
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<220>
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<212> PRT
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<220>
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<210> 54
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<212> PRT
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<220>
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0493-72
Figure 107121595-A0305-02-0494-73
<210> 58
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<212> DNA
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<220>
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
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<212> PRT
<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0496-80
<210> 63
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0496-81
<210> 64
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0496-82
<210> 65
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0496-83
<210> 66
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0497-84
<210> 67
<211> 363
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 67
Figure 107121595-A0305-02-0497-85
<210> 68
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0498-86
Figure 107121595-A0305-02-0499-87
<210> 69
<211> 1344
<212> DNA
<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0500-89
<210> 70
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 70
Figure 107121595-A0305-02-0501-90
<210> 71
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 71
Figure 107121595-A0305-02-0501-91
<210> 72
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 72
Figure 107121595-A0305-02-0501-92
<210> 73
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 73
Figure 107121595-A0305-02-0501-93
<210> 74
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 74
Figure 107121595-A0305-02-0502-94
<210> 75
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 75
Figure 107121595-A0305-02-0502-95
<210> 76
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 76
Figure 107121595-A0305-02-0502-96
<210> 77
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 77
Figure 107121595-A0305-02-0502-98
Figure 107121595-A0305-02-0503-99
<210> 78
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 78
Figure 107121595-A0305-02-0503-100
<210> 79
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (451)..(451)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
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<400> 79
Figure 107121595-A0305-02-0503-101
Figure 107121595-A0305-02-0504-102
Figure 107121595-A0305-02-0505-103
<210> 80
<211> 1353
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> Variation
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<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1353)
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<400> 80
Figure 107121595-A0305-02-0506-106
<210> 81
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 81
Figure 107121595-A0305-02-0506-105
<210> 82
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 82
Figure 107121595-A0305-02-0507-107
<210> 83
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 83
Figure 107121595-A0305-02-0507-108
<210> 84
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 84
Figure 107121595-A0305-02-0507-109
Figure 107121595-A0305-02-0508-110
<210> 85
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成聚核苷酸」
<400> 85
Figure 107121595-A0305-02-0508-112
<210> 86
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<221> VARIANT
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(451)
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<400> 86
Figure 107121595-A0305-02-0508-113
Figure 107121595-A0305-02-0509-114
Figure 107121595-A0305-02-0510-115
<210> 87
<211> 1353
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> Variation
<222> (1351)..(1353)
<223> /置換=「 」
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1353)
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<400> 87
Figure 107121595-A0305-02-0510-116
Figure 107121595-A0305-02-0511-117
<210> 88
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<221> VARIANT
<222> (1)..(1)
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<220>
<221> VARIANT
<222> (2)..(2)
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<220>
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<222> (1)..(5)
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<400> 88
Figure 107121595-A0305-02-0512-118
<210> 89
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<221> VARIANT
<222> (1)..(1)
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<220>
<221> VARIANT
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<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
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<220>
<221> VARIANT
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<220>
<221> VARIANT
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<220>
<221> MISC_FEATURE
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<400> 89
Figure 107121595-A0305-02-0512-119
<210> 90
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (1)..(1)
<223> /置換=「Gly」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (2)..(2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(5)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 90
Figure 107121595-A0305-02-0513-120
<210> 91
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (4)..(4)
<223> /置換=「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Ser」或「Thr」
<220>
<221> VARIANT
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<223> /置換=「Lys」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(16)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 91
Figure 107121595-A0305-02-0513-121
<210> 92
<211> 327
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 92
Figure 107121595-A0305-02-0514-122
Figure 107121595-A0305-02-0515-123
<210> 93
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 93
Figure 107121595-A0305-02-0515-124
Figure 107121595-A0305-02-0516-125
<210> 94
<211> 327
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 94
Figure 107121595-A0305-02-0516-126
Figure 107121595-A0305-02-0517-128
Figure 107121595-A0305-02-0518-129
<210> 95
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 95
Figure 107121595-A0305-02-0518-130
Figure 107121595-A0305-02-0519-131
<210> 96
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 96
Figure 107121595-A0305-02-0519-132
Figure 107121595-A0305-02-0520-133
<210> 97
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 97
Figure 107121595-A0305-02-0521-134
Figure 107121595-A0305-02-0522-135
<210> 98
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 98
Figure 107121595-A0305-02-0522-136
Figure 107121595-A0305-02-0523-137
<210> 99
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 99
Figure 107121595-A0305-02-0524-138
Figure 107121595-A0305-02-0525-139
<210> 100
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 100
Figure 107121595-A0305-02-0525-140
Figure 107121595-A0305-02-0526-141
<210> 101
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 101
Figure 107121595-A0305-02-0526-142
Figure 107121595-A0305-02-0527-143
Figure 107121595-A0305-02-0528-144
<210> 102
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 102
Figure 107121595-A0305-02-0528-145
Figure 107121595-A0305-02-0529-146
<210> 103
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 103
Figure 107121595-A0305-02-0529-147
Figure 107121595-A0305-02-0530-148
<210> 104
<211> 107
<212> PRT
<213> 智人
<400> 104
Figure 107121595-A0305-02-0531-149
<210> 105
<211> 574
<212> PRT
<213> 智人
<400> 105
Figure 107121595-A0305-02-0531-150
Figure 107121595-A0305-02-0532-151
Figure 107121595-A0305-02-0533-152
<210> 106
<211> 574
<212> PRT
<213> 智人
<400> 106
Figure 107121595-A0305-02-0533-153
Figure 107121595-A0305-02-0534-154
Figure 107121595-A0305-02-0535-155
<210> 107
<211> 524
<212> PRT
<213> 智人
<400> 107
Figure 107121595-A0305-02-0536-156
Figure 107121595-A0305-02-0537-157
<210> 108
<211> 15
<212> PRT
<213> 智人
<400> 108
Figure 107121595-A0305-02-0538-158
<210> 109
<211> 10
<212> PRT
<213> 智人
<400> 109
Figure 107121595-A0305-02-0538-159
<210> 110
<211> 20
<212> PRT
<213> 智人
<400> 110
Figure 107121595-A0305-02-0538-160
<210> 111
<211> 18
<212> PRT
<213> 智人
<400> 111
Figure 107121595-A0305-02-0538-161
<210> 112
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (448)..(448)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(448)
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<400> 112
Figure 107121595-A0305-02-0539-162
Figure 107121595-A0305-02-0540-163
<210> 113
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (448)..(448)
<223> /置換=「 」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(448)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 113
Figure 107121595-A0305-02-0541-164
Figure 107121595-A0305-02-0542-165
<210> 114
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (451)..(451)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(451)
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<400> 114
Figure 107121595-A0305-02-0543-166
Figure 107121595-A0305-02-0544-167
<210> 115
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (448)..(448)
<223> /置換=「 」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(448)
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<400> 115
Figure 107121595-A0305-02-0545-168
Figure 107121595-A0305-02-0546-169
<210> 116
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (451)..(451)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(451)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 116
Figure 107121595-A0305-02-0547-170
Figure 107121595-A0305-02-0548-171
<210> 117
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<220>
<221> VARIANT
<222> (451)..(451)
<223> /置換=「 」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(451)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 117
Figure 107121595-A0305-02-0549-172
Figure 107121595-A0305-02-0550-173
Figure 107121595-A0305-02-0551-174
<210> 118
<211> 13
<212> PRT
<213> 智人
<400> 118
Figure 107121595-A0305-02-0551-175
<210> 119
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 119
Figure 107121595-A0305-02-0551-176
Figure 107121595-A0305-02-0552-177
<210> 120
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 120
Figure 107121595-A0305-02-0552-178
Figure 107121595-A0305-02-0553-179
Figure 107121595-A0305-02-0554-180
<210> 121
<211> 20
<212> PRT
<213> 智人
<400> 121
Figure 107121595-A0305-02-0554-181
<210> 122
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Ser」或「Arg」或「Lys」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Tyr」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Asn」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(7)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 122
Figure 107121595-A0305-02-0554-182
<210> 123
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (1)..(1)
<223> /置換=「Thr」
<220>
<221> VARIANT
<222> (3)..(3)
<223> /置換=「Thr」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Gly」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Ser」或「Leu」或「Tyr」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(6)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 123
Figure 107121595-A0305-02-0555-183
<210> 124
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Gly」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Arg」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(7)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 124
Figure 107121595-A0305-02-0555-184
Figure 107121595-A0305-02-0556-185
<210> 125
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (2)..(2)
<223> /置換=「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (3)..(3)
<223> /置換=「Ser」或「Thr」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(5)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 125
Figure 107121595-A0305-02-0556-186
<210> 126
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Ser」或「Arg」或「Lys」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Tyr」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Asn」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(10)
<223> /註解=序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 126
Figure 107121595-A0305-02-0557-187
<210> 127
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
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<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
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<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Arg」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(10)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 127
Figure 107121595-A0305-02-0557-188
<210> 128
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Ser」或「Arg」或「Lys」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Tyr」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Asn」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(8)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 128
Figure 107121595-A0305-02-0558-189
<210> 129
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (2)..(2)
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<220>
<221> VARIANT
<222> (4)..(4)
<223> /置換=「Thr」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
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<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Ser」或「Leu」或「Tyr」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(8)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 129
Figure 107121595-A0305-02-0558-190
<210> 130
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Gly」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (7)..(7)
<223> /置換=「Arg」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(8)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 130
Figure 107121595-A0305-02-0559-191
<210> 131
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (3)..(3)
<223> /置換=「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (4)..(4)
<223> /置換=「Ser」或「Thr」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(7)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 131
Figure 107121595-A0305-02-0559-192
<210> 132
<211> 486
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 132
Figure 107121595-A0305-02-0560-193
Figure 107121595-A0305-02-0561-194
<210> 133
<211> 465
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 133
Figure 107121595-A0305-02-0562-196
Figure 107121595-A0305-02-0563-197
<210> 134
<211> 521
<212> PRT
<213> 智人
<400> 134
Figure 107121595-A0305-02-0564-198
Figure 107121595-A0305-02-0565-199
<210> 135
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 135
Figure 107121595-A0305-02-0566-200
<210> 136
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 136
Figure 107121595-A0305-02-0566-201
<210> 137
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 137
Figure 107121595-A0305-02-0566-202
<210> 138
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 138
Figure 107121595-A0305-02-0566-204
<210> 139
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 139
Figure 107121595-A0305-02-0567-208
<210> 140
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 140
Figure 107121595-A0305-02-0567-207
<210> 141
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 141
Figure 107121595-A0305-02-0567-206
<210> 142
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 142
Figure 107121595-A0305-02-0567-205
Figure 107121595-A0305-02-0568-209
<210> 143
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 143
Figure 107121595-A0305-02-0568-210
<210> 144
<211> 321
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 144
Figure 107121595-A0305-02-0568-213
<210> 145
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 145
Figure 107121595-A0305-02-0569-217
<210> 146
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 146
Figure 107121595-A0305-02-0569-216
<210> 147
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 147
Figure 107121595-A0305-02-0569-215
<210> 148
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 148
Figure 107121595-A0305-02-0569-214
<210> 149
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 149
Figure 107121595-A0305-02-0570-219
<210> 150
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 150
Figure 107121595-A0305-02-0570-220
<210> 151
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 151
Figure 107121595-A0305-02-0570-222
<210> 152
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 152
Figure 107121595-A0305-02-0571-225
<210> 153
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 153
Figure 107121595-A0305-02-0571-224
<210> 154
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 154
Figure 107121595-A0305-02-0571-223
<210> 155
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 155
Figure 107121595-A0305-02-0572-226
<210> 156
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 156
Figure 107121595-A0305-02-0572-227
<210> 157
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 157
Figure 107121595-A0305-02-0572-228
<210> 158
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 158
Figure 107121595-A0305-02-0572-229
<210> 159
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 159
Figure 107121595-A0305-02-0572-230
Figure 107121595-A0305-02-0573-231
<210> 160
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成聚核苷酸」
<400> 160
Figure 107121595-A0305-02-0573-232
<210> 161
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 161
Figure 107121595-A0305-02-0574-233
<210> 162
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 162
Figure 107121595-A0305-02-0574-234
<210> 163
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 163
Figure 107121595-A0305-02-0574-235
<210> 164
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 164
Figure 107121595-A0305-02-0574-236
<210> 165
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 165
Figure 107121595-A0305-02-0574-237
<210> 166
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 166
Figure 107121595-A0305-02-0575-238
<210> 167
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 167
Figure 107121595-A0305-02-0575-239
<210> 168
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 168
Figure 107121595-A0305-02-0575-240
Figure 107121595-A0305-02-0576-241
<210> 169
<211> 363
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成聚核苷酸」
<400> 169
Figure 107121595-A0305-02-0576-246
<210> 170
<211> 321
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成聚核苷酸」
<400> 170
Figure 107121595-A0305-02-0576-244
<210> 171
<211> 527
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 171
Figure 107121595-A0305-02-0576-245
Figure 107121595-A0305-02-0577-247
Figure 107121595-A0305-02-0578-248
<210> 172
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 172
Figure 107121595-A0305-02-0579-249
Figure 107121595-A0305-02-0580-250
<210> 173
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 173
Figure 107121595-A0305-02-0580-251
Figure 107121595-A0305-02-0581-252
<210> 174
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 174
Figure 107121595-A0305-02-0581-253
Figure 107121595-A0305-02-0582-254
<210> 175
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 175
Figure 107121595-A0305-02-0582-255
<210> 176
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 176
Figure 107121595-A0305-02-0583-256
<210> 177
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 177
Figure 107121595-A0305-02-0583-257
Figure 107121595-A0305-02-0584-258
Figure 107121595-A0305-02-0585-259
<210> 178
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 178
Figure 107121595-A0305-02-0585-260
Figure 107121595-A0305-02-0586-261
Figure 107121595-A0305-02-0587-262
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<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 179
Figure 107121595-A0305-02-0587-263
Figure 107121595-A0305-02-0588-264
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 180
Figure 107121595-A0305-02-0588-265
Figure 107121595-A0305-02-0589-266
<210> 181
<211> 485
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 181
Figure 107121595-A0305-02-0590-267
Figure 107121595-A0305-02-0591-268
Figure 107121595-A0305-02-0592-269
<210> 182
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 182
Figure 107121595-A0305-02-0592-270
Figure 107121595-A0305-02-0593-271
<210> 183
<211> 114
<212> PRT
<213> 智人
<400> 183
Figure 107121595-A0305-02-0593-272
<210> 184
<211> 170
<212> PRT
<213> 智人
<400> 184
Figure 107121595-A0305-02-0593-273
Figure 107121595-A0305-02-0594-274
<210> 185
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 185
Figure 107121595-A0305-02-0594-276
<210> 186
<211> 297
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 186
Figure 107121595-A0305-02-0595-277
Figure 107121595-A0305-02-0596-278
<210> 187
<211> 114
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<221> VARIANT
<222> (93)..(93)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(114)
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<400> 187
Figure 107121595-A0305-02-0596-279
Figure 107121595-A0305-02-0597-280
<210> 188
<211> 77
<212> PRT
<213> 智人
<400> 188
Figure 107121595-A0305-02-0597-281
<210> 189
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (4)..(4)
<223> /置換=「Ser」或「Arg」或「Lys」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Tyr」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Asn」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(9)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 189
Figure 107121595-A0305-02-0597-282
<210> 190
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 190
Figure 107121595-A0305-02-0598-283
<210> 191
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 191
Figure 107121595-A0305-02-0598-284
<210> 192
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 192
Figure 107121595-A0305-02-0598-285
<210> 193
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 193
Figure 107121595-A0305-02-0598-286
<210> 194
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 194
Figure 107121595-A0305-02-0599-287
<210> 195
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 195
Figure 107121595-A0305-02-0599-288
<210> 196
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<220>
<221> VARIANT
<222> (4)..(4)
<223> /置換=「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (5)..(5)
<223> /置換=「Gly」或「Ser」
<220>
<221> VARIANT
<222> (6)..(6)
<223> /置換=「Arg」
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(9)
<223> /註解=「序列中所指定之變異型殘基就註釋中關於變異位置之彼等而言無偏好」
<400> 196
Figure 107121595-A0305-02-0599-289
<210> 197
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 197
Figure 107121595-A0305-02-0600-294
<210> 198
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 198
Figure 107121595-A0305-02-0600-293
<210> 199
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 199
Figure 107121595-A0305-02-0600-292
<210> 200
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 200
Figure 107121595-A0305-02-0600-291
<210> 201
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 201
Figure 107121595-A0305-02-0600-290
Figure 107121595-A0305-02-0601-295
<210> 202
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 202
Figure 107121595-A0305-02-0601-296
<210> 203
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 203
Figure 107121595-A0305-02-0601-297
<210> 204
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 204
Figure 107121595-A0305-02-0601-298
Figure 107121595-A0305-02-0602-299
<210> 205
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 205
Figure 107121595-A0305-02-0602-301
<210> 206
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 206
Figure 107121595-A0305-02-0602-302
<210> 207
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 207
Figure 107121595-A0305-02-0602-303
<210> 208
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 208
Figure 107121595-A0305-02-0603-304
<210> 209
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 209
Figure 107121595-A0305-02-0603-305
<210> 210
<400> 210 000
<210> 211
<400> 211 000
<210> 212
<400> 212 000
<210> 213
<400> 213 000
<210> 214
<400> 214 000
<210> 215
<400> 215 000
<210> 216
<400> 216 000
<210> 217
<400> 217 000
<210> 218
<400> 218 000
<210> 219
<400> 219 000
<210> 220
<400> 220 000
<210> 221
<400> 221 000
<210> 222
<400> 222 000
<210> 223
<400> 223 000
<210> 224
<400> 224 000
<210> 225
<400> 225 000
<210> 226
<400> 226 000
<210> 227
<400> 227 000
<210> 228
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 228
Figure 107121595-A0305-02-0605-306
<210> 229
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 229
Figure 107121595-A0305-02-0605-309
<210> 230
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 230
Figure 107121595-A0305-02-0605-308
<210> 231
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 231
Figure 107121595-A0305-02-0606-315
<210> 232
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 232
Figure 107121595-A0305-02-0606-313
<210> 233
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0606-312
<210> 234
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 234
Figure 107121595-A0305-02-0606-311
Figure 107121595-A0305-02-0607-316
<210> 235
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 235
Figure 107121595-A0305-02-0607-317
<210> 236
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 236
Figure 107121595-A0305-02-0607-318
<210> 237
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 237
Figure 107121595-A0305-02-0608-319
<210> 238
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 238
Figure 107121595-A0305-02-0608-320
<210> 239
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 239
Figure 107121595-A0305-02-0608-322
<210> 240
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 240
Figure 107121595-A0305-02-0608-321
<210> 241
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 241
Figure 107121595-A0305-02-0608-323
<210> 242
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 242
Figure 107121595-A0305-02-0609-327
<210> 243
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 243
Figure 107121595-A0305-02-0609-328
<210> 244
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成肽」
<400> 244
Figure 107121595-A0305-02-0609-324
<210> 245
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註解=「人工序列之描述：合成多肽」
<400> 245
Figure 107121595-A0305-02-0609-326
Figure 107121595-A0305-02-0610-329
<210> 246
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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<400> 246
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Figure 107121595-A0305-02-0627-391
<210> 317
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<212> PRT
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<220>
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<210> 318
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<212> PRT
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<220>
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<210> 319
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<220>
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<210> 320
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<220>
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<210> 321
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<212> PRT
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<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0628-396
<210> 322
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Figure 107121595-A0305-02-0628-397
<210> 323
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<210> 324
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<212> PRT
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<210> 325
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<211> 9
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<210> 327
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<212> PRT
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Figure 107121595-A0305-02-0630-403
<210> 328
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<213> 人工序列
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Figure 107121595-A0305-02-0660-444
<210> 523
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
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Figure 107121595-A0305-02-0660-449
<210> 524
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
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Figure 107121595-A0305-02-0660-448
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<212> DNA
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Figure 107121595-A0305-02-0767-705
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<212> PRT
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<212> PRT
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Figure 107121595-A0305-02-0768-708
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<212> PRT
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<212> PRT
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Figure 107121595-A0305-02-0775-732
Figure 107121595-A0305-02-0776-733
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<212> PRT
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<220>
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<223> /註解=「人工序列之描述：合成6xHis標籤」
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Figure 107121595-A0305-02-0776-735

Claims (42)

  1. 一種結合至人類CD73的抗體分子，該抗體分子包含：(i)重鏈可變區(VH)，其包含重鏈互補決定區1(VHCDR1)胺基酸序列SEQ ID NO：38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：36及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：37；及輕鏈可變區(VL)，其包含輕鏈互補決定區1(VLCDR1)胺基酸序列SEQ ID NO：48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50；(ii)VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：35、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：36及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50；(iii)VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：39、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：40及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：51、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：52及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：53；(iv)VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：41、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：42及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：43；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：54、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：52及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50；或(v)VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：190、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：36及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：43；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：48、VLCDR2胺基酸序列 SEQ ID NO：49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50。
  2. 如請求項1之抗體分子，其包含：VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：38、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：36及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50。
  3. 如請求項1之抗體分子，其包含：VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：39、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：40及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：51、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：52及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：53。
  4. 如請求項1之抗體分子，其包含：VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：41、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：42及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：43；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：54、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：52及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50。
  5. 如請求項1之抗體分子，其包含：VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：190、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：36及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：43；及VL， 其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50。
  6. 如請求項1之抗體分子，其包含：VH，其包含VHCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：35、VHCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：36及VHCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：37；及VL，其包含VLCDR1胺基酸序列SEQ ID NO：48、VLCDR2胺基酸序列SEQ ID NO：49及VLCDR3胺基酸序列SEQ ID NO：50。
  7. 如請求項1之抗體分子，其包含：重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：44，或與SEQ ID NO：44具有至少90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  8. 如請求項1之抗體分子，其包含：輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：55，或與SEQ ID NO：55具有至少90%、95%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  9. 如請求項1之抗體分子，其包含：重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：44，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列；及輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：55，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列。
  10. 如請求項1之抗體分子，其包含： 包含胺基酸序列SEQ ID NO：44的重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO：55的輕鏈可變區。
  11. 如請求項1之抗體分子，其包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：46或114的重鏈，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列。
  12. 如請求項1之抗體分子，其包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：57的輕鏈，或與SEQ ID NO：57具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列。
  13. 如請求項1之抗體分子，其包含：(i)重鏈，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：46，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列；及輕鏈，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：57，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列；或(ii)重鏈，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：114，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列；及輕鏈，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：57，或與其具有至少90%、95%或99%序列一致性的序列。
  14. 如請求項1之抗體分子，其包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：46的重鏈，其中SEQ ID NO：46的殘基451為離胺酸(K)；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：57的輕鏈。
  15. 如請求項1之抗體分子，其包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：114的重鏈，其中SEQ ID NO：114的殘基451為離胺酸(K)；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：57的輕鏈。
  16. 如請求項1之抗體分子，其中：(i)該抗體分子為人類抗體、全長抗體、雙特異性抗體、Fab、F(ab')2、Fv，或單鏈Fv片段(scFv)；(ii)該抗體分子包含選自IgG1、IgG2、IgG3及IgG4的重鏈恆定區以及選自κ或λ輕鏈恆定區的輕鏈恆定區；或(iii)該抗體分子包含含有選自由SEQ ID NO：92-103、119及120組成之群之胺基酸序列的重鏈恆定區，及/或含有胺基酸序列SEQ ID NO：104的輕鏈恆定區。
  17. 如請求項1之抗體分子，其中該抗體分子包含IgG4之重鏈恆定區及κ之輕鏈恆定區。
  18. 如請求項1之抗體分子，其包含：人類IgG4重鏈恆定區，其在根據EU編號之第228位具有突變。
  19. 如請求項18之抗體分子，其包含：人類IgG4重鏈恆定區，其在根據EU編號之第228位具有絲胺酸至脯 胺酸之突變。
  20. 如請求項1之抗體分子，其包含：重鏈恆定區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：92或93。
  21. 如請求項1之抗體分子，其具有以下特性中之1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17者或全部：(i)以小於1×10-8M之解離常數(KD)結合至人類CD73；(ii)結合至可溶性人類CD73及/或膜結合的人類CD73；(iii)不結合至鼠類CD73；(iv)抑制或減少CD73之酶活性，或抑制或減少人類CD73介導單磷酸腺苷(AMP)轉化為腺苷；(v)抑制膜結合之人類CD73之酶活性的至少60%、70%、80%或90%；(vi)增強抗CD3/抗CD28刺激之T細胞在單磷酸腺苷(AMP)存在下的增殖；(vii)結合至人類CD73之N末端域；(viii)當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質，或由胺基酸序列SEQ ID NO：171組成的蛋白質時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO：105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104；(ix)當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的 蛋白質，或由胺基酸序列SEQ ID NO：171組成的蛋白質時，誘導SEQ ID NO：105之殘基368-387發生構形變化；(x)直接地或間接地接觸SEQ ID NO：105之殘基158-172內的至少一個、兩個、三個或四個殘基；(xi)直接地或間接地接觸SEQ ID NO：105之殘基206-215內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；(xii)直接地或間接地接觸SEQ ID NO：105或106之殘基368-387內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；(xiii)直接地或間接地接觸SEQ ID NO：105之殘基87-104內的至少一個、兩個、三個、四個或五個殘基；(xiv)結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，其中當該抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，該第一抗原結合域結合至該第一CD73單體且該第二抗原結合域結合至該第二CD73單體；(xv)以比該抗體分子結合至人類CD73之催化非活性開放構形時更低的親和力結合至人類CD73的催化活性封閉構形；(xvi)將人類CD73鎖定在催化非活性開放構形；(xvii)相較於該抗體分子不存在下的該轉化，防止或減少人類CD73自催化非活性開放構形轉化成催化活性封閉構形；或(xviii)結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，其中當該抗體分子包含第一抗原結合域及第二抗原結合域時，該第一抗原結合域結合至該第一CD73單體且該第二抗原結合域結合至該第二CD73單體。
  22. 如請求項21之抗體分子，其中：在(iv)中，該CD73為可溶性人類CD73或膜結合的人類CD73；或在(vi)中，該T細胞為CD4+ T細胞。
  23. 一種組合物，其包含複數個如請求項1至8中任一項之抗體分子，其中該等抗體分子結合至人類CD73二聚體，該二聚體由第一CD73單體及第二CD73單體組成，各單體包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列，其中當該複數個抗體分子各自包含相同的第一抗原結合域及相同的第二抗原結合域時，(i)該組合物中至少30%、35%或40%的該等抗體分子結合至該CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者由一個抗體分子及一個CD73二聚體組成；或(ii)該組合物中至多60%、65%或70%的該等抗體分子結合至該CD73二聚體而形成複合物，其中該複合物中之每一者包含兩個或超過兩個抗體分子及兩個或超過兩個CD73二聚體。
  24. 如請求項1之抗體分子，其中：(a)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO：105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104；(b)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺 基酸序列的蛋白質時，使在選自核心區C或SEQ ID NO：105之殘基368-387之XC殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於選自核心區A或SEQ ID NO：105之殘基158-172之XA殘基、選自核心區B或SEQ ID NO：105之殘基206-215之XB殘基或選自核心區D或SEQ ID NO：105之殘基297-309之XD殘基，其中：XC等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20，XA等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14，XB等於1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，及XD等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13；(c)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使在選自核心區A或SEQ ID NO：105之殘基158-172之XA殘基處發生的平均氫氘交換減少程度大於選自核心區B或SEQ ID NO：105之殘基206-215之XB殘基、選自核心區C或SEQ ID NO：105之殘基368-387之XC殘基或選自核心區D或SEQ ID NO：105之殘基297-309之XD殘基，其中：XA等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14，XB等於1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，XC等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20，且XD等於1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13；(d)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，減少在該蛋白質之一或多個區域發生的氫氘交換，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：SEQ ID NO：105之殘基158-172、殘基206-215、殘基368-387及殘基87-104，其中該一或多個區域中 平均氫氘交換減少最大的區域不為SEQ ID NO：105之殘基206-215；或(e)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使得：(i)在SEQ ID NO：105之殘基368-387處發生的平均氫氘交換減少大於每個殘基0.02、0.03、0.04、0.05或0.06Da，或(ii)在SEQ ID NO：105之殘基206-215處發生的平均氫氘交換減少小於每個殘基0.05、0.04、0.03或0.02Da。
  25. 如請求項1之抗體分子，其中：(a)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，使在該蛋白質根據SEQ ID NO：105編號之殘基K136標記的串聯質量標籤(TMT)減少；(b)該抗體分子當結合至該蛋白質時，使在該蛋白質根據SEQ ID NO：105編號之殘基K262及K274之一或兩者處發生的TMT標記增加；(c)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，減少在該蛋白質根據SEQ ID NO：105編號之殘基K206及K214處發生的TMT標記，其中殘基K214處出現之該減少不小於殘基K206處所出現之該減少的90、80、70、60或50%；或(d)該抗體分子當結合至包含SEQ ID NO：105之殘基27-547的胺基酸序列的蛋白質時，當使用執行30秒標記時間的串聯質量標籤(TMT)同位素標記測試該抗體分子時，使在該蛋白質根據SEQ ID NO：105編號之殘基K162發生的TMT標記減少，其中：(i)當使用執行300秒標記時間的TMT同位素標記測試時，該抗體分子 不減少在殘基K162發生的TMT標記，或(ii)當使用執行300秒標記時間的TMT同位素標記測試時，該抗體分子減少在殘基K162處發生的TMT標記，其中在300秒標記時間下在殘基K162處發生的該減少不大於在30秒標記時間下在殘基K162處發生之該減少的20、30、40或50%。
  26. 如請求項1之抗體分子，其中：(i)該抗體分子結合至CD73之一或多個殘基，其中該一或多個殘基選自由以下組成之群：殘基Y110、K136、L132、L157、K162、S155及T209，其根據SEQ ID NO：105編號；(ii)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之Y110或K136；(iii)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之L132或L157；(iv)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之K162；(v)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之S155；(vi)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之T209；(vii)該抗體分子結合至CD73之一或多個區域，其中該一或多個區域選自由以下組成之群：殘基155-170、136-138及209-210，其根據SEQ ID NO：105編號；(viii)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之殘基155-170；(ix)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之殘基136- 138；或(x)該抗體分子結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之殘基209-210。
  27. 如請求項26之抗體分子，其中：(i)該抗體分子經由靜電交互作用結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之殘基Y110、L132及/或K162；(ii)該抗體分子經由氫鍵結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之殘基S155及/或T209；及/或(iii)該抗體分子經由形狀互補性及/或凡得瓦爾相互作用結合至CD73根據SEQ ID NO：105編號之殘基155-170、136-138及/或209-210。
  28. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1-22及24-27中任一項之抗體分子或如請求項23之組合物及醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑。
  29. 一種核酸，其編碼如請求項1-22及24-27中任一項之抗體分子的抗體重鏈或輕鏈可變區。
  30. 如請求項29之核酸，其中：(i)該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO：45，或與SEQ ID NO：45具有至少90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列；(ii)該核酸編碼重鏈，其中該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO：47，或與SEQ ID NO：47具有至少90%、95%或99%序列一致性的核苷酸 序列；(iii)該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO：56，或與SEQ ID NO：56具有至少90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列；或(iv)該核酸包含核苷酸序列SEQ ID NO：58，或與SEQ ID NO：58具有至少90%、95%或99%序列一致性的核苷酸序列。
  31. 一種表現載體，其包含如請求項29或30之核酸。
  32. 一種宿主細胞，其包含如請求項29或30之核酸，或如請求項31之表現載體。
  33. 一種產生抗體分子的方法，該方法包含在適於基因表現的條件下培養如請求項32之宿主細胞。
  34. 一種如請求項1-22及24-27中任一項之抗體分子、如請求項23之組合物或如請求項28之醫藥組合物的用途，其係用於製備刺激個體之免疫反應的藥物。
  35. 一種如請求項1-22及24-27中任一項之抗體分子、如請求項23之組合物或如請求項28之醫藥組合物的用途，其係用於製備治療個體之癌症的藥物。
  36. 如請求項35之用途，其中該癌症係選自肺癌、胰臟癌、乳癌、黑色 素瘤、頭頸癌、結腸直腸癌、卵巢癌或腎癌。
  37. 如請求項36之用途，其中該肺癌為非小細胞肺癌，該胰臟癌為胰管腺癌，該乳癌為三陰性乳癌，該頭頸癌為鱗狀頭頸癌，該結腸直腸癌為微衛星穩定(MSS)結腸直腸癌，且該腎癌為腎細胞癌。
  38. 如請求項34至37中任一項之用途，其中：(i)該抗體分子係以100mg至1600mg、100mg至1400mg、100mg至1200mg、100mg至1000mg、100mg至800mg、100mg至600mg、100mg至400mg、100mg至200mg、或100mg、180mg或200mg之劑量投與，每兩週一次(Q2W)；(ii)該抗體分子以5mg至100mg、100mg至500mg、500mg至1000mg、1000mg至1500mg、1500mg至2000mg、2000mg至2500mg、2500mg至3000mg、3000mg至3500mg、或3500mg至4000mg之劑量投與；(iii)該抗體分子係與PD-1抑制劑組合投與；(iv)該抗體分子係與腺苷A2AR拮抗劑組合投與；或(v)該抗體分子係與PD-1抑制劑及腺苷A2AR拮抗劑組合投與。
  39. 如請求項38之用途，其中：(i)該抗體分子係每兩週一次(Q2W)以180mg之劑量投與；(ii)該抗體分子係以靜脈內投與；(iii)該抗體分子係以6mg、20mg、60mg、200mg、600mg、 1200mg、2400mg、3000mg或3600mg之劑量投與；(iv)該抗體分子係每一週一次(QW)、每兩週一次(Q2W)或每四週一次(Q4W)投與；(v)該PD-1抑制劑選自由以下組成之群：PDR001、納武單抗(Nivolumab)、派立珠單抗(Pembrolizumab)、皮立珠單抗(Pidilizumab)、MEDI0680、REGN2810、TSR-042、PF-06801591及AMP-224；(vi)該PD-1抑制劑為抗PD-1抗體分子，其中該抗PD-1抗體分子靜脈內以250mg至350mg、350mg至450mg或450mg至550mg、300mg或400mg之劑量投與；(vii)該PD-1抑制劑為抗PD-1抗體分子，其中該抗PD-1抗體分子每三週一次(Q3W)或每四週一次(Q4W)以300mg Q3W之劑量或以400mg Q4W之劑量投與；(viii)該抗CD73抗體分子以5mg至100mg或20mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(ix)該抗CD73抗體分子以5mg至100mg或60mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(x)該抗CD73抗體分子以100mg至500mg或200mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(xi)該抗CD73抗體分子以500mg至1000或600mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投 與；(xii)該抗CD73抗體分子以1000mg至1500mg或1200mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(xiii)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(xiv)該抗CD73抗體分子以3000mg至3500mg或3000mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(xv)該抗CD73抗體分子以3500mg至4000mg或3600mg Q2W之劑量投與，且該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與；(xvi)該抗CD73抗體分子與該抗PD-1抗體分子係以靜脈內投與；(xvii)該腺苷A2AR拮抗劑選自由以下組成之群：PBF509、CPI444、AZD4635、韋帕迪蘭(Vipadenant)、GBV-2034及AB928；(xviii)該腺苷A2AR拮抗劑選自由以下組成之群：5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺；(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；(R)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺，或其外消旋物；7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；及6-(2-
    Figure 107121595-A0305-02-0792-736
    -6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪- 3-胺；(xix)該腺苷A2AR拮抗劑以20mg至60mg、60mg至100mg、100mg至140mg、140mg至180mg、180mg至220mg、220mg至260mg、260mg至300mg、300mg至340mg、340mg至380mg、380mg至480mg、480mg至580mg或580mg至680mg或以40mg、80mg、160mg、320mg、480mg或620mg之劑量投與；(xx)該腺苷A2AR拮抗劑係以一天一次(QD)、一天兩次(BID)或一天三次(TID)投與；(xxi)該抗CD73抗體分子以5mg至100mg或20mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以20mg至60mg或40mg BID之劑量投與；(xxii)該抗CD73抗體分子以5mg至100mg或60mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以20mg至60mg或40mg BID之劑量投與；(xxiii)該抗CD73抗體分子以100mg至500mg或200mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以60mg至100mg或80mg BID之劑量投與；(xxiv)該抗CD73抗體分子以100mg至500mg或200mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以140mg至180mg或160mg BID之劑量投與；(xxv)該抗CD73抗體分子以500mg至1000mg或600mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以140mg至180mg或160mg BID之劑量投與； (xxvi)該抗CD73抗體分子以1000mg至1500mg或1200mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以140mg至180mg或160mg BID之劑量投與；(xxvii)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以140mg至180mg或160mg BID之劑量投與；(xxviii)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以300mg至340mg或320mg BID之劑量投與；(xxix)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以480mg至580mg或480mg BID之劑量投與；(xxx)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以580mg至680mg或620mg BID之劑量投與；(xxxi)該抗CD73抗體分子以3000mg至3500mg或3000mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以300mg至340mg或320mg BID之劑量投與；(xxxii)該抗CD73抗體分子以3000mg至3500mg或3000mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以480mg至580mg或480mg BID之劑量投與； (xxxiii)該抗CD73抗體分子以3000mg至3500mg或3000mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以580mg至680mg或620mg BID之劑量投與；(xxxiv)該抗CD73抗體分子以3500mg至4000mg或3600mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以300mg至340mg或320mg BID之劑量投與；(xxxv)該抗CD73抗體分子以3500mg至4000mg或3600mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以480mg至580mg或480mg BID之劑量投與；(xxxvi)該抗CD73抗體分子以3500mg至4000mg或3600mg Q2W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以580mg至680mg或620mg BID之劑量投與；(xxxvii)該抗CD73抗體分子係以靜脈內投與，且該腺苷A2AR拮抗劑係經口投與；(xxxviii)該抗CD73抗體分子以5mg至100mg或20mg或60mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以20mg至60mg或40mg BID之劑量投與；(xxxix)該抗CD73抗體分子以100mg至500mg或200mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以60mg至100mg、140mg至180mg、80mg BID或160mg BID之劑量投與； (xl)該抗CD73抗體分子以500mg至1000mg、1000mg至1500mg、600mg Q2W或1200mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以140mg至180mg或160mg BID之劑量投與；(xli)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以140mg至180mg、300mg至340mg、160mg BID或320mg BID之劑量投與；(xlii)該抗CD73抗體分子以2000mg至2500mg或2400mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以480mg至580mg、580mg至680mg、480mg BID或620mg BID之劑量投與；(xliii)該抗CD73抗體分子以3000mg至3500mg或3000mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以300mg至340mg、480mg至580mg、580mg至680mg、320mg BID、480mg BID或620mg BID之劑量投與；(xliv)該抗CD73抗體分子以3500mg至4000m或3600mg Q2W之劑量投與，該抗PD-1抗體分子以350mg至450mg或400mg Q4W之劑量投與，且該腺苷A2AR拮抗劑以300mg至340mg、480mg至580mg、580mg至680mg、320mg BID、480mg BID或620mg BID之劑量投與；或(xlv)該抗CD73抗體分子係以靜脈內投與，該抗PD-1抗體分子係以靜脈內投與，且該腺苷A2AR拮抗劑係經口投與。
  40. 如請求項34至37中任一項之用途，其中該抗體分子係與第二治療劑或程序組合投與，該第二治療劑或程序係選自以下中之一或多者：化學療法、靶向抗癌療法、溶瘤藥物、細胞毒性劑、基於免疫的療法、細胞介素、手術程序、輻射程序、共刺激分子活化劑、抑制分子之抑制劑、疫苗，或細胞療法。
  41. 如請求項40之用途，其中該第二治療劑或程序為：(i)PD-L1抑制劑，(ii)腺苷A2AR拮抗劑，(iii)PD-L1抑制劑及腺苷A2AR拮抗劑兩者，(iv)CTLA-4抑制劑，(v)TIM-3抑制劑，(vi)LAG-3抑制劑，(vii)GITR促效劑，(viii)抗CD3多特異性抗體分子，(ix)與可溶形式之IL-15受體α(IL-15Ra)複合的IL-15，(x)STING促效劑，(xi)巨噬細胞群落刺激因子(M-CSF)抑制劑，(xii)CSF-1R抑制劑，(xiii)吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)及/或色胺酸2,3-雙加氧酶(TDO)之抑制劑，(xiv)TGF-β抑制劑，(xv)溶瘤疫苗， (xvi)嵌合抗原受體(CAR)T細胞療法，或(xvii)表18中所揭示的化合物。
  42. 一種偵測生物樣品或個體中之CD73的方法，包含(i)使該樣品或該個體與如請求項1-22及24-27中任一項之抗體分子在允許該抗體分子與CD73發生相互作用的條件下接觸；及(ii)偵測該抗體分子與該樣品或該個體之間的複合物形成。
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KR (1) KR20200021087A (zh)
CN (2) CN110785187B (zh)
AU (1) AU2018290237A1 (zh)
BR (1) BR112019027104A2 (zh)
CA (1) CA3066774A1 (zh)
CL (2) CL2019003796A1 (zh)
CO (1) CO2019014414A2 (zh)
CR (2) CR20190593A (zh)
CU (1) CU24606B1 (zh)
EA (1) EA202090104A1 (zh)
EC (1) ECSP19090538A (zh)
IL (1) IL271539A (zh)
JO (1) JOP20190291A1 (zh)
MA (1) MA49457A (zh)
MX (1) MX2019015885A (zh)
PE (1) PE20200717A1 (zh)
PH (1) PH12019502875A1 (zh)
SG (1) SG11201912473PA (zh)
TW (1) TWI801393B (zh)
UY (1) UY37779A (zh)
WO (1) WO2018237157A1 (zh)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
CU24481B1 (es) * 2014-03-14 2020-03-04 Immutep Sas Moléculas de anticuerpo que se unen a lag-3
PT3383916T (pt) 2017-01-24 2022-03-30 I Mab Biopharma Us Ltd Anticorpos anti-cd73 e seus usos
US11578136B2 (en) 2017-03-16 2023-02-14 Innate Pharma Compositions and methods for treating cancer
IL303087B1 (en) 2018-02-27 2024-08-01 Incyte Corp Midazopyrimidines and triazolopyrimidines as A2A /A2B inhibitors
US11168089B2 (en) 2018-05-18 2021-11-09 Incyte Corporation Fused pyrimidine derivatives as A2A / A2B inhibitors
EA202092518A1 (ru) 2018-06-18 2021-08-23 Иннейт Фарма Композиции и способы лечения рака
CN113166153A (zh) 2018-07-05 2021-07-23 因赛特公司 作为a2a/a2b抑制剂的稠合吡嗪衍生物
CN111499747B (zh) * 2019-01-11 2022-03-18 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种抗cd73单克隆抗体及其应用
CA3126735A1 (en) 2019-01-11 2020-07-16 Omeros Corporation Methods and compositions for treating cancer
TWI829857B (zh) 2019-01-29 2024-01-21 美商英塞特公司 作為a2a / a2b抑制劑之吡唑并吡啶及三唑并吡啶
WO2020185859A1 (en) * 2019-03-12 2020-09-17 Arcus Biosciences, Inc. Treatment of oncogene-driven cancers
EP3947447A4 (en) * 2019-04-02 2023-01-11 Medimmune, LLC ANTI-CD73, ANTI-PD-L1 ANTIBODIES AND TUMOR TREATMENT CHEMOTHERAPY
WO2020244606A1 (zh) * 2019-06-06 2020-12-10 北京加科思新药研发有限公司 对cd73具有特异性的结合分子及其用途
CN112300279A (zh) * 2019-07-26 2021-02-02 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 针对抗cd73抗体和变体的方法和组合物
EP3999545A4 (en) * 2019-08-21 2023-09-13 Harbour Biomed (Shanghai) Co., Ltd ANTI-CD73 ANTIBODIES AND USE THEREOF
CN112442132A (zh) * 2019-09-05 2021-03-05 复旦大学 靶向肿瘤的重组双功能融合蛋白及其应用
JP2022547081A (ja) 2019-09-06 2022-11-10 シンフォジェン・アクシェセルスケープ 抗ｃｄ７３抗体
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
WO2021062244A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Surface Oncology, Inc. Anti-il-27 antibodies and uses thereof
EP4058150A2 (en) * 2019-11-15 2022-09-21 Genzyme Corporation Biparatopic cd73 antibodies
IL293268A (en) * 2019-12-02 2022-07-01 Astrazeneca Ab Solid pharmaceutical formulations of 6-(2-chloro-6-methylpyridin-4-yl)-5-(-4-fluorophenyl)-1,2,4-triazine-3-amine
BR112022013236A2 (pt) 2020-01-03 2022-09-06 Incyte Corp Anticorpos anti-cd73 e usos dos mesmos
WO2021138498A1 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Incyte Corporation Cd73 inhibitor and a2a/a2b adenosine receptor inhibitor combination therapy
US20230174665A1 (en) * 2020-04-09 2023-06-08 Aprilbio Co., Ltd. Monoclonal Antibodies and Antigen Binding Fragments Thereof for Suppressing CD73 Immune Checkpoint and Uses Thereof
IL297426A (en) * 2020-04-22 2022-12-01 Akeso Biopharma Inc Anti-cd73 antibody and its use
WO2021247188A1 (en) * 2020-06-05 2021-12-09 Bristol-Myers Squibb Company Cd73 antagonist potency assay and methods of use thereof
EP4169948A4 (en) 2020-06-22 2024-07-10 Innovent Biologics Suzhou Co Ltd ANTI-CD73 ANTIBODIES AND USE THEREOF
JP2023537115A (ja) 2020-08-13 2023-08-30 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニム 抗ｃｄ７３抗体を使用する癌処置方法
BR112023004594A2 (pt) * 2020-09-23 2023-04-11 Medimmune Llc Métodos de tratamento usando anticorpos anti-cd73 e anti-pd-l1 e quimioterapia
CN114456268B (zh) * 2020-11-09 2023-08-18 江苏中新医药有限公司 抗胞外-5’-核苷酸酶的抗体序列
JP2024502005A (ja) 2020-12-29 2024-01-17 インサイト・コーポレイション Ａ２ａ／ａ２ｂ阻害剤、ｐｄ－１／ｐｄ－ｌ１阻害剤、及び抗ｃｄ７３抗体を含む併用療法
EP4284510A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Novartis AG Dosage regimes for anti-cd73 and anti-entpd2 antibodies and uses thereof
US20240174763A1 (en) * 2021-02-24 2024-05-30 Novoprotein Scientific Inc. Anti-human cd73 antibody and use thereof
CA3215856A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Alison O'neill Anti-il-27 antibodies and uses thereof
WO2022242757A1 (zh) * 2021-05-21 2022-11-24 百奥泰生物制药股份有限公司 抗pd-1抗体的应用
WO2022247826A1 (zh) * 2021-05-28 2022-12-01 和铂医药(上海)有限责任公司 靶向pd-l1和cd73的特异性结合蛋白
CN113440610B (zh) * 2021-08-30 2021-12-28 山东大学 共载cd73抗体和阿霉素的脂质体及其制备方法和应用
WO2023049917A1 (en) * 2021-09-27 2023-03-30 Zoetis Services Llc ANTI- TGFβ1,2,3 ANTIBODIES AND THERAPEUTIC USES THEREOF
AU2023252914A1 (en) 2022-04-13 2024-10-17 Arcus Biosciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
WO2024040194A1 (en) 2022-08-17 2024-02-22 Capstan Therapeutics, Inc. Conditioning for in vivo immune cell engineering
WO2024116140A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Medimmune Limited Combination therapy for treatment of cancer comprising anti-pd-l1 and anti-cd73 antibodies

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201632555A (zh) * 2014-11-10 2016-09-16 梅迪繆思有限公司 對ｃｄ７３具專一性之結合分子及其用途
CN106852149A (zh) * 2014-10-10 2017-06-13 依奈特制药公司 Cd73阻断

Family Cites Families (279)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4433059A (en) 1981-09-08 1984-02-21 Ortho Diagnostic Systems Inc. Double antibody conjugate
US4444878A (en) 1981-12-21 1984-04-24 Boston Biomedical Research Institute, Inc. Bispecific antibody determinants
GB2136016B (en) 1983-03-07 1987-01-07 Sheena Margaret Johnson Monoclonal factor having 5'-nucleotidase inhibitory activity
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
JPS61134325A (ja) 1984-12-04 1986-06-21 Teijin Ltd ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US5869620A (en) 1986-09-02 1999-02-09 Enzon, Inc. Multivalent antigen-binding proteins
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
DE3884470T2 (de) 1987-06-17 1994-03-10 Sandoz Ag Cyclosporine und deren Benutzung als Arzneimittel.
JPH021556A (ja) 1988-06-09 1990-01-05 Snow Brand Milk Prod Co Ltd ハイブリッド抗体及びその作製方法
US6352694B1 (en) 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US6534055B1 (en) 1988-11-23 2003-03-18 Genetics Institute, Inc. Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
US5858358A (en) 1992-04-07 1999-01-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
GB8905669D0 (en) 1989-03-13 1989-04-26 Celltech Ltd Modified antibodies
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
WO1991000906A1 (en) 1989-07-12 1991-01-24 Genetics Institute, Inc. Chimeric and transgenic animals capable of producing human antibodies
AU6290090A (en) 1989-08-29 1991-04-08 University Of Southampton Bi-or trispecific (fab)3 or (fab)4 conjugates
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
JP3068180B2 (ja) 1990-01-12 2000-07-24 アブジェニックス インコーポレイテッド 異種抗体の生成
US5273743A (en) 1990-03-09 1993-12-28 Hybritech Incorporated Trifunctional antibody-like compounds as a combined diagnostic and therapeutic agent
GB9012995D0 (en) 1990-06-11 1990-08-01 Celltech Ltd Multivalent antigen-binding proteins
ATE158021T1 (de) 1990-08-29 1997-09-15 Genpharm Int Produktion und nützung nicht-menschliche transgentiere zur produktion heterologe antikörper
ATE352612T1 (de) 1990-08-29 2007-02-15 Pharming Intellectual Pty Bv Homologe rekombination in säugetier-zellen
US5582996A (en) 1990-12-04 1996-12-10 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Bifunctional antibodies and method of preparing same
US6582959B2 (en) 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
US20030206899A1 (en) 1991-03-29 2003-11-06 Genentech, Inc. Vascular endothelial cell growth factor antagonists
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
DE4118120A1 (de) 1991-06-03 1992-12-10 Behringwerke Ag Tetravalente bispezifische rezeptoren, ihre herstellung und verwendung
US6511663B1 (en) 1991-06-11 2003-01-28 Celltech R&D Limited Tri- and tetra-valent monospecific antigen-binding proteins
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
US5910573A (en) 1992-01-23 1999-06-08 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Monomeric and dimeric antibody-fragment fusion proteins
CA2372813A1 (en) 1992-02-06 1993-08-19 L.L. Houston Biosynthetic binding protein for cancer marker
EP0563475B1 (en) 1992-03-25 2000-05-31 Immunogen Inc Cell binding agent conjugates of derivatives of CC-1065
EP0640130B1 (en) 1992-05-08 1998-04-15 Creative Biomolecules, Inc. Chimeric multivalent protein analogues and methods of use thereof
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
WO1994004678A1 (en) 1992-08-21 1994-03-03 Casterman Cecile Immunoglobulins devoid of light chains
EP1550729B1 (en) 1992-09-25 2009-05-27 Avipep Pty Limited Target binding polypeptide comprising an IG-like VL domain linked to an IG-like VH domain
GB9221657D0 (en) 1992-10-15 1992-11-25 Scotgen Ltd Recombinant bispecific antibodies
DE69233803D1 (de) 1992-10-28 2011-03-31 Genentech Inc Verwendung von vaskulären Endothelwachstumsfaktor-Antagonisten
EP0627932B1 (en) 1992-11-04 2002-05-08 City Of Hope Antibody construct
GB9323648D0 (en) 1992-11-23 1994-01-05 Zeneca Ltd Proteins
WO1994013804A1 (en) 1992-12-04 1994-06-23 Medical Research Council Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
US6476198B1 (en) 1993-07-13 2002-11-05 The Scripps Research Institute Multispecific and multivalent antigen-binding polypeptide molecules
US5635602A (en) 1993-08-13 1997-06-03 The Regents Of The University Of California Design and synthesis of bispecific DNA-antibody conjugates
WO1995009917A1 (en) 1993-10-07 1995-04-13 The Regents Of The University Of California Genetically engineered bispecific tetravalent antibodies
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
JP3659261B2 (ja) 1994-10-20 2005-06-15 モルフォシス・アクチェンゲゼルシャフト 組換体タンパク質の多機能性複合体への標的化ヘテロ結合
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
IL117645A (en) 1995-03-30 2005-08-31 Genentech Inc Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration
US7067318B2 (en) 1995-06-07 2006-06-27 The Regents Of The University Of Michigan Methods for transfecting T cells
US6692964B1 (en) 1995-05-04 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for transfecting T cells
JPH11508126A (ja) 1995-05-23 1999-07-21 モルフォシス ゲゼルシャフト ファー プロテインオプティマイルング エムベーハー 多量体タンパク質
US5989830A (en) 1995-10-16 1999-11-23 Unilever Patent Holdings Bv Bifunctional or bivalent antibody fragment analogue
ES2225961T3 (es) 1996-04-04 2005-03-16 Unilever N.V. Proteina de union a antigeno multivalente y multiespecifica.
DK0973804T3 (da) 1997-04-07 2007-05-07 Genentech Inc Anti-VEGF-antistoffer
US20020032315A1 (en) 1997-08-06 2002-03-14 Manuel Baca Anti-vegf antibodies
DK1695985T3 (da) 1997-04-07 2011-06-14 Genentech Inc Fremgangsmåde til dannelse af humaniserede antistoffer ved tilfældig mutagenese
US6884879B1 (en) 1997-04-07 2005-04-26 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
EP0979102A4 (en) 1997-04-30 2005-11-23 Enzon Inc DETAILED POLYPEPTIDE MODIFIED BY POLYALKYLENE OXIDE
US20030207346A1 (en) 1997-05-02 2003-11-06 William R. Arathoon Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
CA2304254C (en) 1997-06-11 2012-05-22 Hans Christian Thogersen Trimerising module
AU2152299A (en) 1997-10-27 1999-05-24 Unilever Plc Multivalent antigen-binding proteins
DE69922159T2 (de) 1998-01-23 2005-12-01 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Mehrzweck-antikörperderivate
CZ121599A3 (cs) 1998-04-09 1999-10-13 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Jednořetězcová molekula vázající několik antigenů, způsob její přípravy a léčivo obsahující tuto molekulu
DE19819846B4 (de) 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
GB9812545D0 (en) 1998-06-10 1998-08-05 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
JP2002521053A (ja) 1998-07-28 2002-07-16 マイクロメット アーゲー ヘテロミニ体
US6333396B1 (en) 1998-10-20 2001-12-25 Enzon, Inc. Method for targeted delivery of nucleic acids
US7109003B2 (en) 1998-12-23 2006-09-19 Abgenix, Inc. Methods for expressing and recovering human monoclonal antibodies to CTLA-4
IL129299A0 (en) 1999-03-31 2000-02-17 Mor Research Applic Ltd Monoclonal antibodies antigens and diagnosis of malignant diseases
US6703020B1 (en) 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
US7527787B2 (en) 2005-10-19 2009-05-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies
US7534866B2 (en) 2005-10-19 2009-05-19 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for generating bioactive assemblies of increased complexity and uses
EP3214175A1 (en) 1999-08-24 2017-09-06 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human ctla-4 antibodies and their uses
DK1234031T3 (en) 1999-11-30 2017-07-03 Mayo Foundation B7-H1, AN UNKNOWN IMMUNE REGULATORY MOLECULE
US6797514B2 (en) 2000-02-24 2004-09-28 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US6867041B2 (en) 2000-02-24 2005-03-15 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
IL151287A0 (en) 2000-02-24 2003-04-10 Xcyte Therapies Inc A method for stimulation and concentrating cells
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
EP1272647B1 (en) 2000-04-11 2014-11-12 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
US20020103345A1 (en) 2000-05-24 2002-08-01 Zhenping Zhu Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production
WO2002002781A1 (en) 2000-06-30 2002-01-10 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw Heterodimeric fusion proteins
AU2001283496A1 (en) 2000-07-25 2002-02-05 Immunomedics, Inc. Multivalent target binding protein
US20040242847A1 (en) 2000-10-20 2004-12-02 Naoshi Fukushima Degraded agonist antibody
US6995162B2 (en) 2001-01-12 2006-02-07 Amgen Inc. Substituted alkylamine derivatives and methods of use
US7829084B2 (en) 2001-01-17 2010-11-09 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding constructs and methods for use thereof
AU2002247826A1 (en) 2001-03-13 2002-09-24 University College London Specific binding members
DE60237282D1 (de) 2001-06-28 2010-09-23 Domantis Ltd Doppelspezifischer ligand und dessen verwendung
US6833441B2 (en) 2001-08-01 2004-12-21 Abmaxis, Inc. Compositions and methods for generating chimeric heteromultimers
ATE346866T1 (de) 2001-09-14 2006-12-15 Affimed Therapeutics Ag Multimerische, einzelkettige, tandem-fv- antikörper
US20030211078A1 (en) 2001-12-07 2003-11-13 Heavner George A. Pseudo-antibody constructs
PL216224B1 (pl) 2002-02-01 2014-03-31 Ariad Pharmaceuticals Pochodne rapamycyny zawierające fosfor, kompozycja je zawierająca oraz ich zastosowanie
AU2003209446B2 (en) 2002-03-01 2008-09-25 Immunomedics, Inc. Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance
AU2003227504A1 (en) 2002-04-15 2003-10-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha METHOD OF CONSTRUCTING scDb LIBRARY
IL149820A0 (en) 2002-05-23 2002-11-10 Curetech Ltd Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency
DE10161767T1 (de) 2002-07-03 2018-06-07 Honjo Tasuku Immunopotenzierende Zusammensetzungen, die einen Anti-PD-L1 Antikörper enthalten
DK1572106T3 (da) 2002-11-15 2010-08-23 Novartis Vaccines & Diagnostic Fremgangsmåde til forebyggelse og behandling af cancermetastase og knogletab forbundet med cancermetastase
ATE514713T1 (de) 2002-12-23 2011-07-15 Wyeth Llc Antikörper gegen pd-1 und ihre verwendung
GB0230203D0 (en) 2002-12-27 2003-02-05 Domantis Ltd Fc fusion
GB0305702D0 (en) 2003-03-12 2003-04-16 Univ Birmingham Bispecific antibodies
US20050003403A1 (en) 2003-04-22 2005-01-06 Rossi Edmund A. Polyvalent protein complex
MXPA05012723A (es) 2003-05-30 2006-02-08 Genentech Inc Tratamiento con anticuerpos anti-vgf.
WO2005000898A2 (en) 2003-06-27 2005-01-06 Biogen Idec Ma Inc. Use of hydrophobic-interaction-chromatography or hinge-region modifications for the production of homogeneous antibody-solutions
AU2004255216B2 (en) 2003-07-01 2010-08-19 Immunomedics, Inc. Multivalent carriers of bi-specific antibodies
US7696322B2 (en) 2003-07-28 2010-04-13 Catalent Pharma Solutions, Inc. Fusion antibodies
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US20050106667A1 (en) 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
EP1688439A4 (en) 2003-10-08 2007-12-19 Kyowa Hakko Kogyo Kk HYBRID PROTEIN COMPOSITION
US20050136051A1 (en) 2003-12-22 2005-06-23 Bernard Scallon Methods for generating multimeric molecules
GB0329825D0 (en) 2003-12-23 2004-01-28 Celltech R&D Ltd Biological products
US20050266425A1 (en) 2003-12-31 2005-12-01 Vaccinex, Inc. Methods for producing and identifying multispecific antibodies
PT1704166E (pt) 2004-01-07 2015-09-04 Novartis Vaccines & Diagnostic Anticorpo monoclonal específico de m-csf e respetivos usos
JP2007518823A (ja) 2004-01-23 2007-07-12 アムゲン インコーポレイテッド キノリン、キナゾリン、ピリジン、及びピリミジン化合物と炎症、血管新生、及び癌に対する治療におけるそれら化合物の用途
US8383575B2 (en) 2004-01-30 2013-02-26 Paul Scherrer Institut (DI)barnase-barstar complexes
HUE030950T2 (en) 2004-05-13 2017-06-28 Icos Corp Quinazolinones as 3-kinase delta inhibitors of human phosphatidylinositol
US20060009360A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
JP2008512352A (ja) 2004-07-17 2008-04-24 イムクローン システムズ インコーポレイティド 新規な四価の二重特異性抗体
MX2007002856A (es) 2004-09-02 2007-09-25 Genentech Inc Metodos para el uso de ligandos receptores de muerte y anticuerpos c20.
LT1850873T (lt) 2005-02-08 2019-04-10 Genzyme Corporation Antikūnas prieš tgf beta
DK1866339T3 (da) 2005-03-25 2013-09-02 Gitr Inc GTR-bindende molekyler og anvendelser heraf
EP3050963B1 (en) 2005-03-31 2019-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for production of polypeptide by regulation of assembly
JP5011277B2 (ja) 2005-04-06 2012-08-29 アイビーシー・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド ホモダイマー、ホモテトラマーまたはダイマーのダイマーのからなる安定に連結された複合体を発生させるための方法および使用
ES2707152T3 (es) 2005-04-15 2019-04-02 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y usos de los mismos
NZ563193A (en) 2005-05-09 2010-05-28 Ono Pharmaceutical Co Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
US20060263367A1 (en) 2005-05-23 2006-11-23 Fey Georg H Bispecific antibody devoid of Fc region and method of treatment using same
DK1907424T3 (en) 2005-07-01 2015-11-09 Squibb & Sons Llc HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES TO PROGRAMMED death ligand 1 (PD-L1)
WO2007004606A1 (ja) 2005-07-04 2007-01-11 Nikon Vision Co., Ltd. 測距装置
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
ATE452913T1 (de) 2005-08-26 2010-01-15 Pls Design Gmbh Bivalente igy antikörperkonstrukte für diagnostische und therapeutische anwendungen
PE20070427A1 (es) 2005-08-30 2007-04-21 Novartis Ag Compuestos derivados de benzimidazoles sustituidos como inhibidores de tirosina quinasas
WO2007044887A2 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Transtarget, Inc. Method for producing a population of homogenous tetravalent bispecific antibodies
EP1962961B1 (en) 2005-11-29 2013-01-09 The University Of Sydney Demibodies: dimerisation-activated therapeutic agents
UA98449C2 (en) 2005-12-13 2012-05-25 Инсайт Корпорейшин Heteroaryl substituted pyrrolo[2,3-b]pyridines and pyrrolo[2,3-b]pyrimidines as janus kinase inhibitors
US9303080B2 (en) 2006-01-13 2016-04-05 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, National Institutes Of Health Codon optimized IL-15 and IL-15R-alpha genes for expression in mammalian cells
JO2660B1 (en) 2006-01-20 2012-06-17 نوفارتيس ايه جي Pi-3 inhibitors and methods of use
MX2008010561A (es) 2006-02-15 2009-03-02 Imclone Systems Inc Anticuerpos funcionales.
JP5374359B2 (ja) 2006-03-17 2013-12-25 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド 安定化されたポリペプチド化合物
WO2007112362A2 (en) 2006-03-24 2007-10-04 The Regents Of The University Of California Construction of a multivalent scfv through alkyne-azide 1,3-dipolar cycloaddition
JP5474531B2 (ja) 2006-03-24 2014-04-16 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 操作されたヘテロ二量体タンパク質ドメイン
ES2654040T3 (es) 2006-03-31 2018-02-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Método de modificación de anticuerpos para la purificación de anticuerpos biespecíficos
TW200813039A (en) 2006-04-19 2008-03-16 Novartis Ag 6-O-substituted benzoxazole and benzothiazole compounds and methods of inhibiting CSF-1R signaling
JP5189082B2 (ja) 2006-05-25 2013-04-24 バイエル・ファルマ・アクチェンゲゼルシャフト 二量体分子複合体
US20070274985A1 (en) 2006-05-26 2007-11-29 Stefan Dubel Antibody
CA2654317A1 (en) 2006-06-12 2007-12-21 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Single-chain multivalent binding proteins with effector function
PE20110217A1 (es) 2006-08-02 2011-04-01 Novartis Ag DERIVADOS DE 2-OXO-ETIL-AMINO-PROPIONAMIDA-PIRROLIDIN-2-IL-SUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DEL ENLACE DE LA PROTEINA Smac AL INHIBIDOR DE LA PROTEINA DE APOPTOSIS
US8759297B2 (en) 2006-08-18 2014-06-24 Armagen Technologies, Inc. Genetically encoded multifunctional compositions bidirectionally transported between peripheral blood and the cns
WO2008027236A2 (en) 2006-08-30 2008-03-06 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
WO2008140477A2 (en) 2006-11-02 2008-11-20 Capon Daniel J Hybrid immunoglobulins with moving parts
AU2007323725B2 (en) 2006-11-22 2014-02-20 Incyte Holdings Corporation Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors
EP2626372B1 (en) 2007-03-29 2018-03-21 Genmab A/S Bispecific antibodies and methods for production thereof
EP2144930A1 (en) 2007-04-18 2010-01-20 ZymoGenetics, Inc. Single chain fc, methods of making and methods of treatment
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
US9244059B2 (en) 2007-04-30 2016-01-26 Immutep Parc Club Orsay Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
ES2470772T3 (es) 2007-05-11 2014-06-24 Altor Bioscience Corporation Moléculas de fusión y variantes de IL-15
EP2170959B1 (en) 2007-06-18 2013-10-02 Merck Sharp & Dohme B.V. Antibodies to human programmed death receptor pd-1
WO2009018386A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Medimmune, Llc Multispecific epitope binding proteins and uses thereof
JP5485152B2 (ja) 2007-08-15 2014-05-07 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 単一特異性および多特異性抗体ならびに使用方法
BRPI0816785A2 (pt) 2007-09-14 2017-05-02 Adimab Inc bibliotecas de anticorpos sintéticos racionalmente desenhadas, e, usos para as mesmas
US8877688B2 (en) 2007-09-14 2014-11-04 Adimab, Llc Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
JP2011504740A (ja) 2007-11-27 2011-02-17 アブリンクス エン．ヴェー． ヘテロ二量体サイトカイン及び／又はこれらの受容体に指向性を有するアミノ酸配列、並びにこれを含むポリペプチド
TW200944231A (en) 2007-11-30 2009-11-01 Glaxo Group Ltd Antigen-binding constructs
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8227577B2 (en) 2007-12-21 2012-07-24 Hoffman-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
HUE028536T2 (en) 2008-01-07 2016-12-28 Amgen Inc Method for producing antibody to FC heterodimer molecules using electrostatic control effects
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
JP5547099B2 (ja) 2008-03-14 2014-07-09 インテリカイン， エルエルシー キナーゼ阻害剤および使用方法
NZ602791A (en) 2008-05-21 2014-04-30 Incyte Corp Salts of 2-fluoro-n-methyl-4-[7-(quinolin-6-yl-methyl)- imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-yl]benzamide and processes related to preparing the same
GB0906579D0 (en) 2009-04-16 2009-05-20 Vernalis R&D Ltd Pharmaceuticals, compositions and methods of making and using the same
AU2009268611B2 (en) 2008-07-08 2015-04-09 Intellikine, Llc Kinase inhibitors and methods of use
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
CN102203125A (zh) 2008-08-25 2011-09-28 安普利穆尼股份有限公司 Pd-1拮抗剂及其使用方法
SI2350129T1 (sl) 2008-08-25 2015-11-30 Amplimmune, Inc. Sestavki PD-1 antagonistov in postopek njihove uporabe
UA104147C2 (uk) 2008-09-10 2014-01-10 Новартис Аг Похідна піролідиндикарбонової кислоти та її застосування у лікуванні проліферативних захворювань
EP2342229A1 (en) 2008-09-12 2011-07-13 ISIS Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
JP5731978B2 (ja) 2008-09-26 2015-06-10 インテリカイン， エルエルシー 複素環キナーゼ阻害剤
CA2998281C (en) 2008-09-26 2022-08-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Human anti-pd-1 antobodies and uses therefor
CN108997498A (zh) 2008-12-09 2018-12-14 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗-pd-l1抗体及它们用于增强t细胞功能的用途
EP2210891A1 (en) 2009-01-26 2010-07-28 Domain Therapeutics New adenosine receptor ligands and uses thereof
HUE025704T2 (en) 2009-03-20 2016-04-28 Sigma Tau Ind Farmaceuti Oxidized triazolyl purine derivatives used as adenosine A2A receptor ligands and their use as medicaments
EP2424567B1 (en) 2009-04-27 2018-11-21 OncoMed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
US8709424B2 (en) 2009-09-03 2014-04-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-GITR antibodies
IT1395574B1 (it) 2009-09-14 2012-10-16 Guala Dispensing Spa Dispositivo di erogazione
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
DK3279215T3 (da) 2009-11-24 2020-04-27 Medimmune Ltd Målrettede bindemidler mod b7-h1
DK2531492T3 (en) 2010-02-05 2016-07-04 Heptares Therapeutics Ltd 1,2,4-triazin-4-amine derivatives
EP2545078A1 (en) 2010-03-11 2013-01-16 UCB Pharma, S.A. Pd-1 antibody
WO2011123518A1 (en) 2010-03-31 2011-10-06 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Adenosine receptor agonists for the treatment and prevention of vascular or joint capsule calcification disorders
ES2365960B1 (es) 2010-03-31 2012-06-04 Palobiofarma, S.L Nuevos antagonistas de los receptores de adenosina.
PT2560993T (pt) 2010-04-20 2024-09-16 Genmab As Proteínas contendo anticorpo heterodimérico fc e métodos para a produção das mesmas
ES2682078T3 (es) 2010-06-11 2018-09-18 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Anticuerpo anti-TIM-3
CA2802344C (en) 2010-06-18 2023-06-13 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
US8907053B2 (en) 2010-06-25 2014-12-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
KR102024922B1 (ko) 2010-07-16 2019-09-25 아디맵 엘엘씨 항체 라이브러리
WO2012031320A1 (en) 2010-09-06 2012-03-15 Peter Maccallum Cancer Institute Cancer diagnostic
SG190997A1 (en) 2010-12-09 2013-07-31 Univ Pennsylvania Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
CN103608040B (zh) 2011-04-20 2017-03-01 米迪缪尼有限公司 结合b7‑h1和pd‑1的抗体和其他分子
KR102148982B1 (ko) 2011-06-03 2020-08-27 조마 테크놀로지 리미티드 Tgf-베타에 특이적인 항체
EP2537933A1 (en) 2011-06-24 2012-12-26 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) An IL-15 and IL-15Ralpha sushi domain based immunocytokines
US8841418B2 (en) 2011-07-01 2014-09-23 Cellerant Therapeutics, Inc. Antibodies that specifically bind to TIM3
CA2840018C (en) 2011-07-24 2019-07-16 Curetech Ltd. Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies
EP3674320A3 (en) 2011-10-27 2020-08-12 Genmab A/S Production of heterodimeric proteins
SI2785375T1 (sl) 2011-11-28 2020-11-30 Merck Patent Gmbh Protitelesa proti PD-L1 in uporabe le-teh
UY34632A (es) 2012-02-24 2013-05-31 Novartis Ag Compuestos de oxazolidin- 2- ona y usos de los mismos
PL2838548T3 (pl) 2012-04-17 2024-02-05 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Komórki z niedoborem hla klasy ii, komórki z niedoborem hla klasy i, zdolne do ekspresji białek hla klasy ii i ich zastosowania
CN115093480A (zh) 2012-05-31 2022-09-23 索伦托药业有限公司 与pd-l1结合的抗原结合蛋白
JO3300B1 (ar) 2012-06-06 2018-09-16 Novartis Ag مركبات وتركيبات لتعديل نشاط egfr
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
JP6403166B2 (ja) 2012-08-03 2018-10-10 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド 単一抗原抗ｐｄ−ｌ１およびｐｄ−ｌ２二重結合抗体およびその使用方法
CN104994873B (zh) 2012-10-04 2017-12-22 达纳－法伯癌症研究所公司 人单克隆抗‑pd‑l1抗体和使用方法
EP2911684B1 (en) 2012-10-24 2019-06-19 Novartis Ag Il-15r alpha forms, cells expressing il-15r alpha forms, and therapeutic uses of il-15r alpha and il-15/il-15r alpha complexes
EP2925365A1 (en) 2012-11-28 2015-10-07 Novartis AG Combination therapy
AR093984A1 (es) 2012-12-21 2015-07-01 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano
KR101763352B1 (ko) 2013-03-15 2017-07-31 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 디벨로프먼트 리미티드 항­ｌａｇ­3 결합 단백질
SG11201508528TA (en) 2013-05-02 2015-11-27 Anaptysbio Inc Antibodies directed against programmed death-1 (pd-1)
RS59500B1 (sr) 2013-05-18 2019-12-31 Aduro Biotech Inc Sastavi i metode za aktiviranje signaliziranja koje je zavisno od „stimulatora gena za interferon“
JP6400082B2 (ja) 2013-05-18 2018-10-03 アデュロ バイオテック，インコーポレイテッド 「インターフェロン遺伝子の刺激因子」依存性シグナル伝達を抑制するための組成物および方法
CA3175360C (en) 2013-05-31 2024-05-28 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind pd-1
US20160145355A1 (en) 2013-06-24 2016-05-26 Biomed Valley Discoveries, Inc. Bispecific antibodies
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白
CN112457403B (zh) 2013-09-13 2022-11-29 广州百济神州生物制药有限公司 抗pd1抗体及其作为治疗剂与诊断剂的用途
US10202454B2 (en) 2013-10-25 2019-02-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Anti-PD-L1 monoclonal antibodies and fragments thereof
WO2015081158A1 (en) 2013-11-26 2015-06-04 Bristol-Myers Squibb Company Method of treating hiv by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
HUE046249T2 (hu) 2013-12-12 2020-02-28 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd PD-1 antitest, antigén-kötõ fragmense, és gyógyászati alkalmazása
PL3094351T3 (pl) 2014-01-15 2022-06-27 Kadmon Corporation, Llc Środki immunomodulujące
CA2936244A1 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Medimmune, Llc Compositions and methods for modulating and redirecting immune responses
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
BR112016017174A2 (pt) 2014-01-28 2017-10-03 Bristol Myers Squibb Co Anticorpos anti-lag-3 para tratar malignidades hematológicas
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CU24481B1 (es) 2014-03-14 2020-03-04 Immutep Sas Moléculas de anticuerpo que se unen a lag-3
SG10202109752XA (en) 2014-04-07 2021-10-28 Novartis Ag Treatment of cancer using anti-cd19 chimeric antigen receptor
SG11201609721WA (en) 2014-05-28 2016-12-29 Agenus Inc Anti-gitr antibodies and methods of use thereof
AU2015265870B2 (en) 2014-05-29 2020-07-09 Ventana Medical Systems, Inc. PD-L1 antibodies and uses thereof
EA037006B1 (ru) 2014-06-06 2021-01-26 Бристол-Майерс Сквибб Компани Антитела к индуцируемому глюкокортикоидами рецептору фактора некроза опухолей (gitr) и их применения
WO2015195163A1 (en) 2014-06-20 2015-12-23 R-Pharm Overseas, Inc. Pd-l1 antagonist fully human antibody
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
KR102130600B1 (ko) 2014-07-03 2020-07-08 베이진 엘티디 Pd-l1 항체와 이를 이용한 치료 및 진단
MY181834A (en) 2014-07-21 2021-01-08 Novartis Ag Treatment of cancer using humanized anti-bcma chimeric antigen receptor
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
US10463732B2 (en) 2014-10-03 2019-11-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) antibodies and methods of use thereof
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
US20180030144A1 (en) 2014-10-10 2018-02-01 Innate Pharma Cd73 blockade
CR20170143A (es) 2014-10-14 2017-06-19 Dana Farber Cancer Inst Inc Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas
SI3215532T1 (sl) 2014-11-06 2020-02-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa proti TIM3 in postopki uporabe
GB2538120A (en) 2014-11-11 2016-11-09 Medimmune Ltd Therapeutic combinations comprising anti-CD73 antibodies and uses thereof
ME03806B (me) 2014-11-21 2021-04-20 Bristol Myers Squibb Co Antitela protiv cd73 i njihova upotreba
CN110894240B (zh) 2014-11-26 2022-04-15 森科股份有限公司 结合cd3和肿瘤抗原的异二聚体抗体
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
IL253149B2 (en) 2014-12-29 2023-11-01 Novartis Ag Methods for preparing cells expressing a chimeric receptor antigen
US20160200815A1 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
EP3259288A1 (en) * 2015-02-20 2017-12-27 Innate Pharma Cd73 blockade
CN107922484A (zh) 2015-03-06 2018-04-17 索伦托治疗有限公司 结合tim3的抗体治疗剂
MA41867A (fr) 2015-04-01 2018-02-06 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de cellule t et protéine 3 de mucine (tim-3)
SG11201708620QA (en) 2015-05-08 2017-11-29 Xencor Inc Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens
JP2018520650A (ja) * 2015-05-21 2018-08-02 アリゲーター・バイオサイエンス・アーベー 新規のポリペプチド
CA2988115A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Anti-gitr antibodies for cancer diagnostics
SG10201913807QA (en) 2015-07-23 2020-03-30 Inhibrx Inc Multivalent and multispecific gitr-binding fusion proteins
BR112018002585A2 (pt) 2015-08-11 2018-10-16 Novartis Ag 5-bromo-2,6-di-(1h-pirazol-1-il)pirimidin-4-amina para uso no tratamento de câncer
RU2018108236A (ru) 2015-08-12 2019-09-12 Медиммьюн Лимитед Слитые белки на основе gitrl и пути их применения
EP3362475B1 (en) 2015-10-12 2023-08-30 Innate Pharma Cd73 blocking agents
IL295230A (en) 2016-03-04 2022-10-01 Bristol Myers Squibb Co Combination therapy with anti-cd73 antibodies
US10793636B2 (en) 2016-07-11 2020-10-06 Corvus Pharmaceuticals, Inc. Anti-CD73 antibodies
EP3569618A1 (en) 2018-05-19 2019-11-20 Boehringer Ingelheim International GmbH Antagonizing cd73 antibody
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3999545A4 (en) 2019-08-21 2023-09-13 Harbour Biomed (Shanghai) Co., Ltd ANTI-CD73 ANTIBODIES AND USE THEREOF
EP4058150A2 (en) 2019-11-15 2022-09-21 Genzyme Corporation Biparatopic cd73 antibodies

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106852149A (zh) * 2014-10-10 2017-06-13 依奈特制药公司 Cd73阻断
TW201632555A (zh) * 2014-11-10 2016-09-16 梅迪繆思有限公司 對ｃｄ７３具專一性之結合分子及其用途

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Publication number Publication date
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