TWI773117B

TWI773117B - 活化素-actrii拮抗劑及治療貧血之用途

Info

Publication number: TWI773117B
Application number: TW110103864A
Authority: TW
Inventors: 肯尼斯 M 艾堤; 克里斯多夫羅瓦帝; 艾德拉曼拉丹
Original assignee: 美商西建公司; 美商艾瑟勒朗法瑪公司
Priority date: 2014-12-03
Filing date: 2015-12-03
Publication date: 2022-08-01
Also published as: EP4233889A2; US20170360887A1; AU2015358469B2; CA2969572A1; HK1245397A1; BR112017011722A2; CN114675039A; FI3227675T3; RS64214B1; EP4233889A3; PL3227675T3; HRP20230504T1; TW201636044A; JP7092853B2; ES2946160T3; MD4801C1; IL252631A0; IL252631B1; CN107533040B; JP2021038249A

Abstract

本文提供用於治療任何哺乳動物個體之貧血、需要RBC輸注之貧血、低或中等-1-風險型骨髓發育不良症候群(MDS)及/或非增生性慢性骨髓單核細胞性白血病(CMML)之方法，其中該等方法包含投與需要該治療之個體活化素-ActRII信號傳導抑制劑。

Description

活化素-ACTRII拮抗劑及治療貧血之用途

本文中提供用於長期治療個體中之以下疾病之方法：(i)貧血；(ii)需要RBC輸注之貧血；(iii)骨髓發育不良症候群(MDS)；及/或(iv)非增生性慢性骨髓單核細胞性白血病(CMML)，其中該等方法包含投與需要長期治療之個體活化素-ActRII信號傳導抑制劑。此類活化素-ActRII信號傳導抑制劑可為ActRIIA及/或ActRIIB信號傳導之信號傳導抑制劑。本文中提供長期治療個體中之以下疾病之方法：(i)貧血；(ii)需要紅血球(RBC)輸注之貧血；(iii)MDS；及/或(iv)非增生性CMML，其中個體具有環形含鐵胚血球。

貧血為紅血球數目降低或小於血液中血紅蛋白之正常數量。貧血亦可由血紅蛋白之氧結合能力降低引起。貧血為最常見的血液病症。貧血可由無效的紅血球生成引起。若進行活性紅血球生成，但未能以適當速率生成成熟的紅血球，則發生無效的紅血球生成。祖細胞在達到成熟紅血球之狀態之前經歷細胞凋亡。MDS包含由無效血細胞生成表徵之造血幹細胞病症。此外，MDS病症包括由環形含鐵胚血球表徵之病症。環形含鐵胚血球為異常紅血球母細胞。此外，某些與MDS相關之體細胞突變引起環型含鐵胚血球形成及無效的紅血球生成。編接因子3B1 (SF3B1)中之主要突變與環形含鐵胚血球之形成相關。環形含鐵胚血球為紅血球母細胞，其中存在覆蓋細胞核之至少三分之一周邊的最少五個含鐵(鐵質沉著性)顆粒。參見例如Mufti等人, 2008, Haematologica, 93(11):1712-7。環形含鐵胚血球含有載鐵粒線體。可藉由普魯士藍(Prussian blue)染色及觀測來偵測環形含鐵胚血球之存在。可在末梢血液及/或骨髓穿刺塗片中偵測到環形含鐵胚血球。兩種相關II型受體，ActRIIA及ActRIIB已鑑別為活化素之II型受體(Mathews及Vale, 1991, Cell 65:973-982; Attisano等人, 1992, Cell 68: 97-108)。除活化素以外，ActRIIA及ActRIIB可與若干其他TGF-β家族蛋白質，包括BMP7、Nodal、GDF8及GDF11以生物化學方式相互作用(Yamashita等人, 1995, J. Cell Biol. 130:217-226；Lee及McPherron, 2001, Proc. Natl. Acad. Sci. 98:9306-9311；Yeo及Whitman, 2001, Mol. Cell 7: 949-957；Oh等人, 2002, Genes Dev. 16:2749-54)。ALK4為活化素，尤其活化素A之主要I型受體，且ALK-7可充當活化素，以及尤其活化素B之受體。由活化素-受體類型IIA (ActRIIA)之細胞外域(ECD)及人類IgG1 Fc域組成之人類化融合蛋白質以高親和力結合於活化素-A，阻斷經由內源性ActRIIA受體進行之信號傳導。活化素-A為紅細胞分化因子，其影響RBC成熟之晚期狀態(Murata M, Onomichi K, Eto Y, Shibai H及Muramatsu M. Expression of erythroid differentiation factor in Chinese hamster ovary cells. Biochem Biophys Res Commun 1988; 151: 230-5)。已關於增加RBC含量來描述ActRII信號傳導抑制劑(例如專利申請公開案第20110038831號；第20100204092號；第20100068215號；第20100028332號；第20100028331號；及第20090163417號)。

本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其包含(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；及(b)若個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，血液相關病症為貧血、骨髓發育不良症候群(MDS)或非增生性慢性骨髓單核細胞性白血病(CMML)。在某些實施例中，在第一時間測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，該第一時間為投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑之1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月內。本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體II型活化素受體(ActRII)信號傳導處於以達成(i)與個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比相比，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低；及/或(ii)與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%。在某些實施例中，血液相關病症為貧血、MDS或非增生性CMML。本文中提供治療個體中之貧血之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑以達成(i)與個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比相比，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低；及/或(ii)與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。本文中提供治療個體中之MDS之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體ActRII信號傳導抑制劑以達成(i)與個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比相比，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低；及/或(ii)與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%。本文中提供治療個體中之非增生性CMML之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體ActRII信號傳導抑制劑以達成(i)與個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比相比，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低；及/或(ii)與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑投藥之該時間期為1、2、3、4、5或6個月。在某些實施例中，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比為投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低保持至少1、2、3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之時間期之後，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低比個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比低至少1.5、2.5、5.0、7.5或10.0倍持續至少6、12、18或24個月。在某些實施例中，個體中之初始血紅蛋白含量為投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，該個體中之初始血紅蛋白含量小於約11 g/dL。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體中血紅蛋白含量之長期增加保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之時間期之後，個體中血紅蛋白含量之長期增加為個體中之血紅蛋白含量在約11 g/dL與18 g/dL之間持續至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體在至少3、4、5、6、12、18或24個月內無需紅血球輸注。在某些實施例中，每三週一次投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，經由注射投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，皮下投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之另一百分比。在某些實施例中，藉由普魯士藍染色測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中之另一血紅蛋白含量。本文中亦提供治療個體中之血液相關病症之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比；及(b)(i)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則在短時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑，或(ii)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比小於10%，則在長時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，血液相關病症為貧血、需要輸注之貧血、MDS或非增生性CMML。本文中亦提供治療個體中之貧血之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比；及(b)(i)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則在短時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑，或(ii)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比小於10%，則在長時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，個體為需要輸血之個體。本文中亦提供用於治療個體中之MDS之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比；及(b)(i)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則在短時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑，或(ii)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比小於10%，則在長時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。本文中亦提供治療個體中之非增生性CMML之用於，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比；及(b)(i)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則在短時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑，或(ii)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比小於10%，則在長時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，在短時間期ActRII信號傳導抑制劑投藥之後至少6、12、18或24個月，在短時間期內投與ActRII信號傳導抑制劑之個體中成為個體中之環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比降低至小於10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小於1%。在某些實施例中，個體中之血紅蛋白含量小於約11 g/dL。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後至少3、4、5、6、12、18或24個月，在短時間期內投與ActRII信號傳導抑制劑之個體中之血紅蛋白含量在約11 g/dL與18 g/dL之間。在某些實施例中，該短時間期為1、2、3、4或5個月。在某些實施例中，該長時間期為至少6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體在至少3、4、5、6、12、18或24個月內無需紅血球輸注。在某些實施例中，每三週一次投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，經由注射投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，皮下投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比。在某些實施例中，藉由普魯士藍染色測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中之血紅蛋白含量。本文中亦提供治療個體中之血液相關病症之方法，其中該方法包含：(a)測定個體具有個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%；(b)投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在一段時間之後，測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比；及(d)視情況投與個體已調整劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，血液相關病症為貧血、需要輸注之貧血、MDS或非增生性CMML。本文中亦提供治療個體中之貧血之方法，其中該方法包含：(a)測定個體具有個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%；(b)投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在一段時間之後，測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比；及(d)視情況投與個體已調整劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，個體為需要輸血之個體。本文中亦提供治療個體中之MDS之方法，其中該方法包含：(a)測定個體具有個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%；(b)投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在一段時間之後，測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比；及(d)視情況投與個體已調整劑量之ActRII信號傳導抑制劑。本文中亦提供治療個體中之非增生性慢性骨髓單核細胞性白血病(CMML)之方法，其中該方法包含：(a)測定個體具有個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%；(b)投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在一段時間之後，測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比；及(d)視情況投與個體已調整劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，時間期1、2、3、4、5或6個月。在某些實施例中，經由注射投與初始劑量。在某些實施例中，皮下投與初始劑量。在某些實施例中，每三週一次投與初始劑量。在某些實施例中，初始劑量(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，在測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比之後立即或在其至多1天、2天、3天、4天、5天、6天或1週、2週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內投與個體初始劑量。在某些實施例中，在測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比之後立即或在其至多1天、2天、3天、4天、5天、6天或1週、2週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內投與個體已調整之劑量。在某些實施例中，若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量大於初始劑量。在某些實施例中，已調整之劑量比初始劑量大約0.05 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.15 mg/kg、約0.25 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.35 mg/kg、約0.4 mg/kg或約0.5 mg/kg、0.75 mg/kg、1.0 mg/kg、1.33 mg/kg、1.5 mg/kg或約1.75 mg/kg。在某些實施例中，已調整之劑量比初始劑量更頻繁地投與。在某些實施例中，已調整之劑量每5、10、15、20、25、28、30、35或40天投與。在某些實施例中，經由注射投與已調整之劑量。在某些實施例中，皮下投與已調整之劑量。在某些實施例中，若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比小於10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小於1%，則不投與個體已調整之劑量。在某些實施例中，投與已調整之劑量持續至多1、2、3、4、5或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體在至少3、4、5、6、12、18或24個月內無需紅血球輸注。在某些實施例中，每三週一次投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，藉由普魯士藍染色測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。本文中亦提供治療個體中之血液相關病症之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；(b)若個體中成為環形含鐵胚血球之個體中之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在投與個體ActRII信號傳導抑制劑之後，測定個體中之血紅蛋白含量；及(d)若個體中之血紅蛋白含量為至少11 g/dL，則中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，血液相關病症為貧血、需要輸注之貧血、MDS或非增生性CMML。本文中亦提供治療個體中之貧血之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；(b)若個體中成為環形含鐵胚血球之個體中之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在投與個體ActRII信號傳導抑制劑之後，測定個體中之血紅蛋白含量；及(d)若個體中之血紅蛋白含量為至少11 g/dL，則中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，個體需要RBC輸注。本文中亦提供治療個體中之MDS之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；(b)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在投與個體ActRII信號傳導抑制劑之後，測定個體中之血紅蛋白含量；及(d)若個體中之血紅蛋白含量為至少11 g/dL，則中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。本文中亦提供治療個體中之非增生性CMML之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；(b)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在投與個體ActRII信號傳導抑制劑之後，測定個體中之血紅蛋白含量；及(d)若個體中之血紅蛋白含量為至少11 g/dL，則中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，每三週一次投與個體ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，經由注射投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，皮下投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，在投與ActRII信號傳導抑制劑之後6、12、18及/或24個月內測定血紅蛋白含量。本文中亦提供促進患有血液相關病症之個體中之紅血球生成之方法，該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；(b)投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑持續第一時間期；(c)在第一時間期之後，若步驟(a)中個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比高於11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%，則降低投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量、降低個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥頻率或中斷ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，血液相關病症為貧血、需要輸注之貧血、MDS或非增生性CMML。在某些實施例中，該方法進一步包含(i)在第一時間期期間監測個體中之血液學參數；及(ii)若個體中之血液學參數恢復正常，則降低或中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，該方法進一步包含(i)在第一時間期期間監測個體中之血液學參數；及(ii)若個體中之血液學參數恢復正常，則降低投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量。在某些實施例中，該方法進一步包含(i)在第一時間期期間監測個體中之血液學參數；及(ii)若個體中之血液學參數恢復正常，則降低個體之ActRII信號傳導抑制劑之投藥頻率。在某些實施例中，該方法進一步包含(i)在第一時間期期間監測個體中之血液學參數；及(ii)若個體中之血液學參數恢復正常，則中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，個體中之恢復正常之血液學參數為參考群體中之血液學參數之位準。在某些實施例中，個體中恢復正常之血液學參數為個體中之血液學參數與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血液學參數相比改善至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，血液學參數為血紅蛋白含量、血容比、紅血球計數或個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，每三週一次投與個體ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，經由注射投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，皮下投與ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，若個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%紅血球母細胞成為環形含鐵胚血球，則個體之一或多個血液學參數恢復正常的可能性提高。在某些實施例中，血液學參數為血紅蛋白含量、血容比、紅血球計數或個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，恢復正常之血液學參數為參考群體中血液學參數之位準。在某些實施例中，恢復正常之血液學參數為與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血液學參數相比改善至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。本文中提供長期治療個體中之貧血之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體II型活化素受體(ActRII)抑制劑以達成(i)與個體中環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之初始比率相比，個體中環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之比率之長期降低；及(ii)與投與個體ActRII抑制劑之前個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量之長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中之初始環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞比率為至少1:10、至少1:7或至少1:5。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。本文中提供長期治療個體中之低或中等-1-風險型骨髓發育不良症候群(MDS)之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體II型活化素受體(ActRII)抑制劑以達成(i)與個體中環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之初始比率相比，個體中環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之比率之長期降低；及(ii)與投與個體ActRII抑制劑之前個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量之長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中之初始環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞比率為至少1:10、至少1:7或至少1:5。本文中提供長期治療個體中之非增生性慢性骨髓單核細胞性白血病(CMML)之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體II型活化素受體(ActRII)抑制劑以達成(i)與個體中環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之初始比率相比，個體中環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之比率之長期降低；及(ii)與投與個體ActRII抑制劑之前個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量之長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中之初始環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞比率為至少1:10、至少1:7或至少1:5。本文中亦提供增加個體中之嗜中性白血球含量之方法，其包含投與個體醫藥學有效劑量之II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑。本文中亦提供增加個體中之血小板含量之方法，其包含投與個體醫藥學有效劑量之II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為多肽，其包含選自由以下組成之群的胺基酸序列：(a)與SEQ ID NO:2具有90%一致性；(b)與SEQ ID NO:2具有95%一致性；(c)與SEQ ID NO:2具有98%一致性；(d)SEQ ID NO:2；(e)與SEQ ID NO:3具有90%一致性；(f)與SEQ ID NO:3具有95%一致性；(g)與SEQ ID NO:3具有98%一致性；(h)SEQ ID NO:3；(i)與SEQ ID NO:6具有90%一致性；(j)與SEQ ID NO:6具有95%一致性；(k)與SEQ ID NO:6具有98%一致性；(l)SEQ ID NO:6；(m)與SEQ ID NO:7具有90%一致性；(n)與SEQ ID NO:7具有95%一致性；(o)與SEQ ID NO:7具有98%一致性；(p)SEQ ID NO:7；(q)與SEQ ID NO:12具有90%一致性；(r)與SEQ ID NO:12具有95%一致性；(s)與SEQ ID NO:12具有98%一致性；(t)SEQ ID NO:12；(u)與SEQ ID NO:17具有90%一致性；(v)與SEQ ID NO:17具有95%一致性；(w)與SEQ ID NO:17具有98%一致性；(x)SEQ ID NO:17；(y)與SEQ ID NO:20具有90%一致性；(z)與SEQ ID NO:20具有95%一致性；(aa)與SEQ ID NO:20具有98%一致性；(bb)SEQ ID NO:20；(cc)與SEQ ID NO:21具有90%一致性；(dd)與SEQ ID NO:21具有95%一致性；(ee)與SEQ ID NO:21具有98%一致性；(ff)SEQ ID NO:21；(gg)與SEQ ID NO:25具有90%一致性；(hh)與SEQ ID NO:25具有95%一致性；(ii)與SEQ ID NO:25具有98%一致性；及(jj)SEQ ID NO:25。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRIIA信號傳導抑制劑為多肽，其包含選自由以下組成之群的胺基酸序列：(a)與SEQ ID NO:2具有90%一致性；(b)與SEQ ID NO:2具有95%一致性；(c)與SEQ ID NO:2具有98%一致性；(d)SEQ ID NO:2；(e)與SEQ ID NO:3具有90%一致性；(f)與SEQ ID NO:3具有95%一致性；(g)與SEQ ID NO:3具有98%一致性；(h)SEQ ID NO:3；(i)與SEQ ID NO:6具有90%一致性；(j)與SEQ ID NO:6具有95%一致性；(k)與SEQ ID NO:6具有98%一致性；(l)SEQ ID NO:6；(m)與SEQ ID NO:7具有90%一致性；(n)與SEQ ID NO:7具有95%一致性；(o)與SEQ ID NO:7具有98%一致性；(p)SEQ ID NO:7。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為包含SEQ ID NO:7之胺基酸序列的多肽。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為由ActRIIA之細胞外域及人類IgG1 Fc域組成之人類化融合蛋白質。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB之信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRIIB信號傳導抑制劑為多肽，其包含選自由以下組成之群的胺基酸序列：(a)與SEQ ID NO:17具有90%一致性；(b)與SEQ ID NO:17具有95%一致性；(c)與SEQ ID NO:17具有98%一致性；(d)SEQ ID NO:17；(e)與SEQ ID NO:20具有90%一致性；(f)與SEQ ID NO:20具有95%一致性；(g)與SEQ ID NO:20具有98%一致性；(h)SEQ ID NO:20；(i)與SEQ ID NO:21具有90%一致性；(j)與SEQ ID NO:21具有95%一致性；(k)與SEQ ID NO:21具有98%一致性；(l)SEQ ID NO:21；(m)與SEQ ID NO:25具有90%一致性；(n)與SEQ ID NO:25具有95%一致性；(o)與SEQ ID NO:25具有98%一致性；及(p)SEQ ID NO:25。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列的多肽。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為由ActRIIA之細胞外域及人類IgG1 Fc域組成之人類化融合蛋白質。在某些實施例中，個體為人類。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.1與2.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.1與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.7與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量為約0.1 mg/kg、0.125 mg/kg、0.3 mg/kg、0.5 mg/kg、0.7 mg/kg、1.0 mg/kg、1.25 mg/kg、1.33 mg/kg、1.5 mg/kg、1.75 mg/kg、2.0 mg/kg或2.25 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.1 mg/kg與0.5 mg/kg之間、在0.3 mg/kg與0.7 mg/kg之間、在0.5 mg/kg與1.0 mg/kg之間、在0.7 mg/kg與1.25 mg/kg之間、在1.0 mg/kg與2.0 mg/kg之間或在1.5與2.25 mg/kg之間。

對相關申請案之交叉參考本申請案主張2014年12月3日申請之美國臨時專利申請案第62/086,977號之優先權。本申請案亦主張2014年12月5日申請之美國臨時專利申請案第62/088,478號；2015年4月28日申請之美國臨時專利申請案第62/153,872號；2015年6月10日申請之美國臨時專利申請案第62/173,782號；及2015年9月15日申請之美國臨時專利申請案第62/218,728號之優先權，其中之每一者之全部內容以引用之方式併入本文中且用於所有目的。序列表 本申請案提供大小為93,638個位元組之以文件名「12827_978_228_Sequence_Listing.txt」提交之序列表之電腦可讀形式(CRF)拷貝，其在2015年11月19日建立，其與序列表之紙質拷貝相同且以全文引用之方式併入本文中且用於所有目的。 7.1概述意外發現患有血液相關病症之患者中環形含鐵胚血球之含量可用於鑑別患者對用活化素-ActRII信號傳導抑制劑進行之治療的反應。此類血液相關病症可為(i)貧血；(ii)需要RBC輸注之貧血；(iii)MDS；及/或(iv)非增生性CMML。參見章節7.8。不希望受理論約束，患有血液相關病症之患者中約15%或15%以上紅血球母細胞成為環形含鐵胚血球預示與患有相同血液相關病症但小於約15%紅血球母細胞成為環形含鐵胚血球之患者相比，患者中對活化素-ActRII信號傳導抑制劑之改善之臨床反應。此類改善之臨床反應可提高血液學參數(諸如血紅蛋白含量、紅血球含量及血容比)之反應。此類改善之臨床反應本身可以降低之輸注負擔顯示。此外，此類改善之臨床反應可在不持續投與活化素-ActRII信號傳導抑制劑情況下對患者產生長期益處。換言之，本文中所提供之方法可在停止投與活化素-ActRII信號傳導抑制劑之後的時間期內改善患者中一或多個血液學參數。因此，本文中提供治療患有血液相關病症之患者之方法，其中該方法包含(a)測定紅血球母細胞中之環形含鐵胚血球之百分比；及(b)若約15%或15%以上紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則投與患者活化素-ActRII信號傳導抑制劑。更特定言之，本文中提供治療患有血液相關病症之患者之方法，其中該方法包含(a)測定患者中紅血球母細胞中之環形含鐵胚血球之百分比；(b)投與患者活化素-ActRII信號傳導抑制劑；及(c)若至少約15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則(i)在一段時間之後降低活化素-ActRII信號傳導抑制劑之劑量或中斷活化素-ActRII信號傳導抑制劑之投藥及/或(ii)在一段時間之後降低活化素-ActRII信號傳導抑制劑之投藥頻率。此等方法之詳細描述可見於章節7.3及7.4中。 7.2 術語及縮寫如本文中所使用，「ActRII」係指II型活化素受體。如本文中所使用，「ActRIIA」係指IIA型活化素受體。參見例如Mathews及Vale, 1991, Cell 65:973-982。GenBank™寄存編號NM_001278579.1提供例示性人類ActRIIA核酸序列。GenBank™寄存編號NP_001265508.1提供例示性人類ActRIIA胺基酸序列。如本文中所使用，「ActRIIB」係指IIB型活化素受體。參見例如Attisano等人, 1992, Cell 68: 97-108。GenBank™寄存編號NM_001106.3提供例示性人類ActRIIB核酸序列。GenBank™寄存編號NP_001097.2提供例示性人類ActRIIB胺基酸序列。如本文中所使用，「ActRIIA-mFc」或「mActRIIA-Fc」係指IIA型小鼠活化素受體-IgG1融合蛋白質。參見例如美國專利第8,173,601號。如本文中所使用，「mActRIIB-Fc」或「ActRIIB-mFc」係指IIB型小鼠活化素受體-IgG1融合蛋白質。參見例如美國專利第8,173,601號。如本文中所使用，「hActRIIA-Fc」或「ActRIIA-hFc」係指IIA型人類活化素受體-IgG1融合蛋白質。參見例如美國專利第8,173,601號。在一個特定實施例中，hActRIIA-Fc為索塔西普(sotatercept)(SEQ ID NO:7)。如本文中所使用，「hActRIIB-Fc」或「ActRIIB-hFc」係指IIB型人類活化素受體-IgG1融合蛋白質。參見例如美國專利第8,173,601號。在一個特定實施例中，hActRIIB-Fc為盧帕西普(luspatercept)(SEQ ID NO:25)。如本文中所使用，「ALK」係指多形性淋巴瘤激酶。如本文中所使用，「BL」係指基線。如本文中所使用，「BMP7」係指骨形態生成蛋白質7。如本文中所使用，「CMML」係指慢性骨髓單核細胞性白血病。如本文中所使用，「DEXA」係指雙重能量X射線吸光測定法。如本文中所使用，「DNMT3A」係指DNA (胞嘧啶-5)-甲基轉移酶3A。GenBank™寄存編號NM_153759.3、NM_022552.4、NM_175629.2及NM_175630.1提供人類DNMT3A之例示性核酸序列。GenBank™寄存編號NP_715640.2、NP_783329.1、NP_783328.1及NP_072046.2提供人類DNMT3A之例示性胺基酸序列。如本文中所使用，「ECD」係指細胞外域。如本文中所使用，「EPO」係指紅血球生成素。如本文中所使用，「ESA」係指紅血球生成刺激劑。如本文中所使用，「G-CSF」係指顆粒球群落刺激因子。如本文中所使用，「GM-CSG」係指顆粒球巨噬細胞群落刺激因子。如本文中所使用，「Hb」係指血紅蛋白。如本文中所使用，「HBML」係指蜜蜂蜂毒肽。如本文中所使用，「HI-E」係指紅血球血液學改善。在某些實施例中，HI-E係如IWG所定義。在某些實施例中，HI-E係如經修飾之2006 IWG所定義。在某些實施例中，低輸注負擔患者之HI-E為患者中之血紅蛋白濃度增加至少1.5 g/dL持續至少8週。在某些實施例中，高輸注負擔患者之HI-E為在8週內RBC輸注之至少4個單位降低。如本文中所使用，「HTB」係指高輸注負擔。在某些實施例中，HTB個體在8週時程內接收大於或等於4個RBC單位。如本文中所使用，「IgG」係指免疫球蛋白G。如本文中所使用，「Int-1」係指中間物1之IPSS評分。參見章節7.8。如本文中所使用，「IPSS」係指國際預後評分系統(International Prognostic Scoring System)。參見章節7.8。如本文中所使用，「IWG」係指國際工作組(International Working Group)。參見例如Cheson等人 Blood. 2000 96:3671-3674。在某些實施例中，IWG係指經修飾之2006準則。參見例如Cheson等人, 2006, Blood, 108(2)。如本文中所使用，「LTB」係指低輸注負擔。在某些實施例中，LTB個體在8週時程內接收小於4個RBC單位。如本文中所使用，「MDS」係指骨髓發育不良症候群。如本文中所使用，「PD」係指藥效學。如本文中所使用，「PK」係指藥物動力學。如本文中所使用，「qCT」係指定量電腦斷層攝影。如本文中所使用，「RARS」係指具有環形含鐵胚血球之難治性貧血。如本文中所使用，「RBC」係指紅血球。如本文中所使用，「RBC-TI」係指紅血球輸注非依賴性。如本文中所使用，「RCMD-RS」係指具有多譜系發育不良及環形含鐵胚血球之難治性細胞減少症。如本文中所使用，「RS」係指環形含鐵胚血球。如本文中所使用，「SC」係指皮下。如本文中所使用，「SETBP1」係指SET結合蛋白質1。GenBank™寄存編號NM_015559.2及NM_001130110.1提供人類SETBP1之例示性核酸序列。GenBank™寄存編號NP_056374.2及NP_001123582.1提供人類SETBP1之例示性胺基酸序列。如本文中所使用，「SF3B1」係指編接因子3B1。GenBank™寄存編號NM_012433.3、NM_001005523.2及NM_001308824.1提供人類SF3B1之例示性核酸序列。GenBank™寄存編號NP_001295753.1、NP_001005526.1及NP_036565.2提供人類SF3B1之例示性胺基酸序列。如本文中所使用，「SPR」係指表面電漿子共振。如本文中所使用，「SRSF2」係指富含絲胺酸/精胺酸之編接因子2。GenBank™寄存編號NM_003016.4及NM_001195427.1提供人類SRSF2之例示性核酸序列。GenBank™寄存編號NP_001182356.1及NP_003007.2提供人類SRSF2之例示性胺基酸序列。如本文中所使用，「TET2」係指tet甲基胞嘧啶二加氧酶 2。GenBank™寄存編號NM_001127208.2及NM_017628.4提供人類TET2之例示性核酸序列。GenBank™寄存編號NP_001120680.1及NP_060098.3提供人類TET2之例示性胺基酸序列。如本文中所使用，「TGF」係指轉型生長因子。如本文中所使用，「TPA」係指組織纖維蛋白溶酶原活化因子。 7.3 治療方法在某些實施例中，本文中提供治療患有血液病症病症之個體之方法，其中該方法包含(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；及(b)若個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，若個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則投與個體ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，在第一時間測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，該第一時間為投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑之1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月內。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，若個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%紅血球母細胞成為環形含鐵胚血球，個體之一或多個血液學參數恢復正常的可能性提高。在某些實施例中，若個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則個體之一或多個血液學參數恢復正常的可能性提高。在某些實施例中，血液學參數為血紅蛋白含量。在某些實施例中，血液學參數為血容比。在某些實施例中，血液學參數為紅血球計數。在某些實施例中，血液學參數為個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，恢復正常之血液學參數為參考群體中血液學參數之位準。在某些實施例中，參考群體為如章節7.10中所描述之參考群體。在某些實施例中，一或多個血液學參數之恢復正常之為與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血液學參數相比改善至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析鑑別環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據普魯士藍染色鑑別環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析鑑別紅血球母細胞。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。在某些實施例中，本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其包含以醫藥學有效劑量及時間期投與個體II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑以達成(i)與個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比相比，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比長期降低；及(ii)與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，個體中之血紅蛋白含量長期增加；其中醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間，且其中個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。如本文中所使用，「環形含鐵胚血球」及「RS」可互換地使用。在某些實施例中，投與ActRII信號傳導抑制劑持續至多1、2、3、4、5或6個月。在某些實施例中，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比為投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在投與最後一次劑量之ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之時間期之後，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低比個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比低至少1.5、2.5、5.0、7.5或10.0倍持續至少6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體中血紅蛋白含量之長期增加保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之時間期之後，個體中血紅蛋白含量之長期增加為個體中之血紅蛋白含量在約11 g/dL與18 g/dL之間持續至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，個體在至少3、4、5、6、12、18或24個月內無需RBC輸注。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，該方法消除個體之RBC輸注需求保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比之長期降低為在投與最後一次劑量之ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，比個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之初始百分比低至少1.5、2.5、5.0、7.5或10.0倍保持至少6、12、18或24個月。在某些實施例中，在投與最後一次劑量之ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中血紅蛋白含量之長期增加保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，個體中之血紅蛋白含量之長期增加為在投與最後一次劑量之ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中之血紅蛋白含量在約11 g/dL與18 g/dL之間保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在投與最後一次劑量ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，個體在至少3、4、5、6、12、18或24個月內無需RBC輸注。在某些實施例中，在投與最後一次劑量之ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，該方法消除個體之RBC輸注需求保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之另一百分比。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中之另一血紅蛋白含量。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析鑑別環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據普魯士藍染色鑑別環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析鑑別紅血球母細胞。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為初始劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。在某些實施例中，本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；及(b)(i)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則在短時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑，或(ii)若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比小於10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或1%，則在長時間期內投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥之短時間期為1、2、3、4或5個月。在某些實施例中，個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥之長時間期為至少6、12、18或24個月。在一個特定實施例中，在短時間期投藥之後，在ActRII信號傳導抑制劑之最後一次投藥之後至少0、3、4、5、6、12、28、24或48個月測試環形含鐵胚血球之含量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之另一百分比。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中之另一血紅蛋白含量。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之另一百分比。在某些實施例中，該方法進一步包含在ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後6、12、18及/或24個月測定個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，該方法消除個體之紅血球輸注需求保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，在投與最後一次劑量之ActRII信號傳導抑制劑且不進一步投與ActRII信號傳導抑制劑之後，該方法消除個體之紅血球輸注需求保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析鑑別環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據普魯士藍染色鑑別環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析鑑別紅血球母細胞。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為初始劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。在某些實施例中，本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其包含投與個體醫藥學有效劑量之II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑，且其中該個體表現包含一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，該一或多種突變在非編碼區中。在某些實施例中，該一或多種突變在編碼區中。在某些實施例中，SF3B1為SF3B1蛋白質。在某些實施例中，SF3B1為編碼SF3B1之基因。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，SF3B1中之一或多種突變如章節7.8中所描述。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有血小板減少。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為初始劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。需要增加嗜中性白血球含量之個體可為患有環形含鐵胚血球、貧血、需要RBC輸注之貧血、非增生性CMML及/或MDS之個體。 7.3.1 遺傳標記在某些實施例中，本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其包含投與個體醫藥學有效劑量之II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑，且其中該個體表現包含一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，該一或多種突變在非編碼區中。在某些實施例中，該一或多種突變在編碼區中。在某些實施例中，SF3B1為SF3B1蛋白質。在某些實施例中，SF3B1為編碼SF3B1之基因。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，SF3B1中之一或多種突變如章節7.8中所描述。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有血小板減少。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為初始劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。需要增加嗜中性白血球含量之個體可為患有環形含鐵胚血球、貧血、需要RBC輸注之貧血、非增生性CMML及/或MDS之個體。 7.4 經調節之給藥方法在某些實施例中，本文中提供治療個體中之血液相關病症之方法，其中該方法包含：(a)測定個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球；(b)投與個體0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間的初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑；(c)在一段時間之後，測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比；及(d)視情況投與個體已調整劑量之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，初始劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，在測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第一百分比之後立即或在其至多1天、2天、3天、4天、5天、6天或1週、2週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內投與個體初始劑量。在某些實施例中，投與個體初始劑量與測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比之間的時間期為1天、2天、3天、4天、5天、6天或1週、2週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月。在某些實施例中，在測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比之後立即或在其至多1天、2天、3天、4天、5天、6天或1週、2週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內投與個體已調整之劑量。在某些實施例中，若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%，則ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量小於初始劑量。在某些實施例中，個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比為至少15%。在某些實施例中，若個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之第二百分比小於10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或1%，則不投與個體已調整之劑量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，該方法消除個體之紅血球輸注需求保持至少3、4、5、6、12、18或24個月。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之初始劑量。在某些實施例中，劑量為如章節7.7中所描述之已調整之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。在某些實施例中，本文中提供促進患有血液相關病症之個體中之紅血球生成之方法，該方法包含：(a)測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比；(b)投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑持續第一時間期；及(c)在第一時間期之後，若步驟(a)中個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比高於11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%，則降低投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量、降低個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥頻率或中斷ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，該方法進一步包含(i)在第一時間期期間監測個體中之血液學參數；及(ii)若個體中之血液學參數恢復正常，例如若個體中之血液學參數至少為參考群體中之血液學參數之位準，則降低(例如降低劑量或降低頻率)或中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥。在某些實施例中，參考群體為如章節7.10中所描述之參考群體。在某些實施例中，該方法進一步包含(i)在第一時間期期間監測個體中之血液學參數；及(ii)若個體中之血液學參數恢復正常，例如若個體中之血液學參數與第二時間期之個體中之血液學參數相比改善至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%，則降低(例如降低劑量或降低頻率)或中斷個體之ActRII信號傳導抑制劑投藥，其中該第二時間期為在投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期。在某些實施例中，該第一時間期為至少1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或1年。在某些實施例中，該第二時間期為1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，血液學參數為血紅蛋白含量。在某些實施例中，血液學參數為血容比。在某些實施例中，血液學參數為紅血球計數。在某些實施例中，血液學參數為個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之降低之劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，降低之投與ActRII信號傳導抑制劑之頻率為如章節7.7中所描述之頻率。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之初始劑量。在某些實施例中，劑量為如章節7.7中所描述之已調整之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。 7.5 增加嗜中性白血球含量之方法在某些實施例中，本文中提供用於增加需要增加嗜中性白血球含量之個體中之嗜中性白血球含量的方法，其包含投與個體醫藥學有效劑量之II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑。在某些實施例中，嗜中性白血球含量為絕對嗜中性白血球計數。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之嗜中性白血球含量相比，個體中之嗜中性白血球含量增加至少0.1×10⁹ 個/公升、0.5×10⁹ 個/公升、1.0×10⁹ 個/公升、5×10⁹ 個/公升、1.0×10¹⁰ 個/公升、5×10¹⁰ 個/公升或1.0×10¹¹ 個。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之嗜中性白血球含量相比，個體中之嗜中性白血球含量增加至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之嗜中性白血球含量相比，個體中之嗜中性白血球含量增加至多1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。在某些實施例中，在投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中之嗜中性白血球含量在至少1、2、3、4、5或6個月內增加。在某些實施例中，在終止投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中之嗜中性白血球含量在至少1、2、3、4、5或6個月內增加。亦參見章節7.4。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，如章節7.10中所描述量測嗜中性白血球含量。在某些實施例中，如章節7.10中所描述量測絕對嗜中性白血球計數。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有血小板減少。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為初始劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。需要增加嗜中性白血球含量之個體可為患有環形含鐵胚血球、貧血、需要RBC輸注之貧血、非增生性CMML及/或MDS之個體。 7.6 增加血小板含量之方法在某些實施例中，本文中提供用於增加需要增加血小板含量之個體中之血小板含量的方法，其包含投與個體醫藥學有效劑量之II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前時間期個體中之血小板含量相比，個體中之血小板含量增加至少1×10¹⁰ 個/公升、3×10¹⁰ 個/公升、5×10¹⁰ 個/公升、1×10¹¹ 個/公升、5×10¹¹ 個/公升或至少1×10¹² 個/公升。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血小板含量相比，個體中之血小板含量增加至少1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血小板含量相比，個體中之血小板含量增加至多1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中之血小板含量在至少1、2、3、4、5或6個月內增加。在某些實施例中，在終止投與個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑之後，個體中之嗜中性白血球含量至少在1、2、3、4、5或6個月內增加。亦參見章節7.4。在某些實施例中，如章節7.10中所描述量測血小板含量。在某些實施例中，個體為如章節7.8中所描述之個體。在某些實施例中，個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體之血紅蛋白含量小於11 g/dL。在某些實施例中，個體與參考群體相比具有降低之血紅蛋白含量。在某些實施例中，參考群體如章節7.10中所描述。在某些實施例中，個體患有貧血。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，個體患有MDS。在某些實施例中，個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有嗜中性白細胞減少症。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述之劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量以如章節7.7中所描述之頻率投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為如章節7.7中所描述投與。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為初始劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與初始劑量。在某些實施例中，醫藥學有效劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，根據如章節7.4中所描述之方法投與已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑以如章節7.11中所描述之組合物形式投與。在某些實施例中，以如章節7.7中所描述之頻率投與組合物。在某些實施例中，如章節7.7中所描述投與組合物。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIA信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA-Fc，諸如ActRIIA-hFc (例如SEQ ID NO:7)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每21天一次皮下投與ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRII-Fc，諸如ActRIIB-hFc (例如SEQ ID NO:25)。需要增加嗜中性白血球含量之個體可為患有環形含鐵胚血球、貧血、需要RBC輸注之貧血、非增生性CMML及/或MDS之個體。 7.7 劑量本文中提供用於治療個體中之血液相關病症(例如貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或非增生性CMML)之方法，其中該方法包含投與需要治療之個體醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑(參見章節7.9)。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為如章節7.9.1中所闡述之ActRIIA信號傳導抑制劑。在其他實施例中，ActRII抑制劑為如章節7.9.2中所闡述之ActRIIB信號傳導抑制劑。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為ActRIIA信號傳導抑制劑與ActRIIB信號傳導抑制劑之組合。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為SEQ ID NO:7。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為SEQ ID NO:25。本文中提供之劑量可用於治療血液相關疾病，諸如貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或非增生性CMML。在某些實施例中，劑量為醫藥學有效劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為足以改善貧血之一或多種症狀之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為足以預防貧血之至少一種症狀惡化之劑量。貧血之非限制性實例包括疲乏、活力喪失、心跳快速、呼吸短促、頭痛、注意力難以集中、眩暈、皮膚蒼白、腿部抽筋及失眠。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為足以改善非增生性CMML之一或多種症狀之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為足以預防非增生性CMML之一或多種症狀惡化之劑量。CMML之症狀之非限制性實例包括脾腫大、肝腫大、貧血、疲乏、呼吸短促、白細胞減少症、頻繁感染、血小板減少、易於挫傷或出血、發燒、體重減輕、皮膚蒼白及食慾不振。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為足以改善MDS之一或多種症狀之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為足以改善MDS之一或多種症狀惡化之劑量。MDS之症狀之非限制性實例包括貧血、呼吸短促、疲乏、皮膚蒼白、白細胞減少症、頻繁感染、嗜中性白細胞減少症、血小板減少、易於挫傷或出血、體重減輕、發燒、食慾不振、虛弱及骨痛。在某些實施例中，以足以達到0.2微克/公斤或0.2微克/公斤以上之血清濃度，例如1微克/公斤或2微克/公斤或2微克/公斤以上之血清含量的間隔及投藥量投與ActRII信號傳導抑制劑。給藥方案可經設計以達成0.2與15微克/公斤之間，且視情況1與5微克/公斤之間的血清濃度。在人類中，可用0.1 mg/kg或0.1 mg/kg以上之單一劑量達到0.2微克/公斤之血清含量且可用0.3 mg/kg或0.3 mg/kg以上之單一劑量達到1微克/公斤之血清含量。所觀測之分子之血清半衰期為約20與30天之間，實質上比大多數Fc融合蛋白質長，且因此可例如依每週或每兩週給藥之基礎投與0.2-0.4 mg/kg，或可拉長投藥間隔時間投與更高劑量，以達到持續有效血清含量。舉例而言，1至3 mg/kg之劑量可在每月或每兩月基礎上使用，且對骨骼之影響可充分持久使得僅每3、4、5、6、9、12或更多個月一次需要給藥。ActRII信號傳導抑制劑之血清含量可藉由熟習此項技術者已知之任何方式量測。舉例而言，針對ActRII信號傳導抑制劑之抗體可用於使用例如ELISA測定ActRII信號傳導抑制劑之血清含量。在一個特定實施例中，本文中提供之方法亦實現對骨密度及強度之顯著作用。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量為約0.1 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.5 mg/kg、0.75 mg/kg、約1.0 mg/kg、約1.25 mg/kg、約1.5 mg/kg、約1.75 mg/kg、約2.0 mg/kg或約2.25 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.1與2.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.1 mg/kg與1 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.3 mg/kg與1.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.5 mg/kg與1.5 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量在0.75 mg/kg與1.0 mg/kg之間、在1.0 mg/kg與1.25 mg/kg之間、在1.25 mg/kg與1.5 mg/kg之間、在1.5 mg/kg與1.75 mg/kg之間或在1.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量為醫藥學有效劑量。當結合本文提供之劑量(例如ActRII信號傳導抑制劑之劑量或第二活性劑之劑量)使用時，字「約」係指在參考數字之1%、5%或10%內之任何數字。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量為醫藥學有效劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量為約0.1 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.5 mg/kg、0.75 mg/kg、約1.0 mg/kg、約1.25 mg/kg、約1.5 mg/kg、約1.75 mg/kg、約2.0 mg/kg或約2.25 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與1 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.3 mg/kg與1.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.5 mg/kg與1.5 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之醫藥學有效劑量在0.75 mg/kg與1.0 mg/kg之間、在1.0 mg/kg與1.25 mg/kg之間、在1.25 mg/kg與1.5 mg/kg之間、在1.5 mg/kg與1.75 mg/kg之間或在1.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量為初始劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量為約0.1 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.5 mg/kg、0.75 mg/kg、約1.0 mg/kg、約1.25 mg/kg、約1.5 mg/kg、約1.75 mg/kg、約2.0 mg/kg或約2.25 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量在0.1 mg/kg與2.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量在0.1 mg/kg與1 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量在0.3 mg/kg與1.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量在0.5 mg/kg與1.5 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量在0.75 mg/kg與1.0 mg/kg之間、在1.0 mg/kg與1.25 mg/kg之間、在1.25 mg/kg與1.5 mg/kg之間、在1.5 mg/kg與1.75 mg/kg之間或在1.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量每三週投與一次。在某些實施例中，劑量為已調整之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量為約0.1 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.5 mg/kg、0.75 mg/kg、約1.0 mg/kg、約1.25 mg/kg、約1.5 mg/kg、約1.75 mg/kg、約2.0 mg/kg或約2.25 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量在0.1 mg/kg與2.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量在0.1 mg/kg與1 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量在0.3 mg/kg與1.25 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量在0.5 mg/kg與1.5 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量在0.75 mg/kg與1.0 mg/kg之間、在1.0 mg/kg與1.25 mg/kg之間、在1.25 mg/kg與1.5 mg/kg之間、在1.5 mg/kg與1.75 mg/kg之間或在1.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量(i)每28天投與一次；或(ii)每42天投與一次。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量每三週投與一次。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量大於初始劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量比ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量大約2.5 mg、約5 mg、約10 mg、約 15mg、約20 mg或約35 mg，或比ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量大約0.05 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.15 mg/kg、約0.25 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.35 mg/kg、約0.4 mg/kg或約0.5 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量比ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量更頻繁地投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量每5、10、15、20、25、28、30、35或40天投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量每1或2週投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量小於初始劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量比ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量小約2.5 mg、約5 mg、約10 mg、約 15mg、約20 mg或約35 mg，或比ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量小約0.05 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.15 mg/kg、約0.25 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.35 mg/kg、約0.4 mg/kg或約0.5 mg/kg。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量比ActRII信號傳導抑制劑之初始劑量較不頻繁地投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量每30、35、40、42、50、60、70、80或90天投與。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之已調整之劑量每4、5、6、7或8週投與。在某些實施例中，經由注射投與ActRII信號傳導抑制劑之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量每28天投與一次或每42天投與一次。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量每21天投與一次。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為SEQ ID NO:7。在某些實施例中，經由注射投與ActRII信號傳導抑制劑之劑量。在某些實施例中，皮下投與ActRII信號傳導抑制劑之劑量。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑之劑量每3週投與一次。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為SEQ ID NO:25。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比降低至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比降低至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至多100%。在某些實施例中，投與個體ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內降低個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性降低個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之環形含鐵胚血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之環形含鐵胚血球含量降低至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之環形含鐵胚血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之環形含鐵胚血球含量降低至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至多100%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內降低個體中之環形含鐵胚血球含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性降低個體中之環形含鐵胚血球含量。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，根據如章節7.10中所描述之分析測定個體中之環形含鐵胚血球含量。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血紅蛋白含量增加至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%、150%、200%、300%、400%或至少500%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血紅蛋白含量增加至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%、150%、200%、300%、400%或至多500%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血紅蛋白含量增加至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%或至少60%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血紅蛋白含量增加至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%或至多60%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使血紅蛋白含量增加至少0.5 g/dL、1.0 g/dL、1.1 g/dL、1.3 g/dL、1.5 g/dL、1.8 g/dL、2.0 g/dL、2.2 g/dL、2.4 g/dL、2.6 g/dL、2.8 g/dL、3.0 g/dL、3.2 g/dL、3.4 g/dL、3.6 g/dL、3.8 g/dL、4.0 g/dL、4.2 g/dL、4.4 g/dL或至少4.6 g/dL。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血紅蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使血紅蛋白含量增加至多0.5 g/dL、1.0 g/dL、1.1 g/dL、1.3 g/dL、1.5 g/dL、1.8 g/dL、2.0 g/dL、2.2 g/dL、2.4 g/dL、2.6 g/dL、2.8 g/dL、3.0 g/dL、3.2 g/dL、3.4 g/dL、3.6 g/dL、3.8 g/dL、4.0 g/dL、4.2 g/dL、4.4 g/dL或至多4.6 g/dL。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內增加個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性增加個體中之血紅蛋白含量。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之網狀紅血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之網狀紅血球含量增加至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之網狀紅血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之網狀紅血球含量增加至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至多100%、150%、200%、300%、400%或至多500%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內增加個體中之網狀紅血球含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性增加個體中之網狀紅血球含量。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期之紅血球輸注依賴性相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以降低個體中之紅血球輸注依賴性。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之紅血球輸注頻率相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以降低個體中之紅血球輸注頻率。在某些實施例中，投與根據本文所提供之方法治療之個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使紅血球輸注降低至少30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或至少100%。在某些實施例中，投與根據本文所提供之方法治療之個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使紅血球輸注降低至多30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或至多100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中輸注之紅血球單位相比，投與根據本文所提供之方法治療之個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中輸注之紅血球單位降低至少4、5、6、7、8、9、11、12或13個單位。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，投與根據本文所提供之方法治療之個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使紅血球輸注頻率降低至少30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或至少100%。在某些實施例中，投與根據本文所提供之方法治療之個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使紅血球輸注頻率降低至多30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內消除個體之紅血球輸注需求。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性消除個體中之紅血球輸注需求。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，一個RBC單位係指約150 mL、200 mL、250 mL、300 mL、350 mL、100-200 mL、150-250 mL、200-300 mL或250至350 mL RBC。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之輸注負擔相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之輸注負擔降低至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之輸注負擔相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之輸注負擔降低至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至多100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之輸注負擔相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之輸注負擔降低至少33%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之輸注負擔相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之輸注負擔降低至少50%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內降低個體中之輸注負擔。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性降低個體中之輸注負擔。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之鐵螯合療法(例如劑量或頻率)相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之鐵螯合療法(例如劑量或頻率)降低至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少100%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之鐵螯合療法(例如劑量或頻率)相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之鐵螯合療法(例如劑量或頻率)降低至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至多100%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內降低個體中之鐵螯合療法(例如劑量或頻率)。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性降低個體中之鐵螯合療法(例如劑量或頻率)。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血清鐵蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血清鐵蛋白含量降低至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或至少50%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血清鐵蛋白含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血清鐵蛋白含量降低至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內降低個體中之血清鐵蛋白含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性降低個體中之血清鐵蛋白含量。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之紅血球血液學改善相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以引起個體中之紅血球血液學改善達至少1.5 g/dL、1.8 g/dL、2.0 g/dL、2.2 g/dL、2.4 g/dL、2.6 g/dL、2.8 g/dL、3.0 g/dL、3.2 g/dL、3.4 g/dL、3.6 g/dL、3.8 g/dL或至少4.0 g/dL。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內引起個體中之紅血球血液學改善。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性引起個體中之紅血球血液學改善。在某些實施例中，低輸注負擔患者之紅血球血液學改善為患者中之血紅蛋白濃度增加至少1.5 g/dL保持至少8週。在某些實施例中，高輸注負擔患者之紅血球血液學改善為RBC輸注降低至少4個單位保持8週。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之嗜中性白血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之嗜中性白血球含量增加至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%、150%、200%、300%、400%或至少500%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之嗜中性白血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之嗜中性白血球含量增加至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%、150%、200%、300%、400%或至多500%。在某些實施例中，與投與ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之嗜中性白血球含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使嗜中性白血球含量增加至少0.1×10⁹ 個/公升、0.5×10⁹ 個/公升、1.0×10⁹ 個/公升、5×10⁹ 個/公升、1.0×10¹⁰ 個/公升、5×10¹⁰ 個/公升或1.0×10¹¹ 個/公升。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內增加個體中之嗜中性白血球含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性增加個體中之嗜中性白血球含量。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血小板含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血小板含量增加至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%、150%、200%、300%、400%或至多500%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血小板含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使個體中之血小板含量增加至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%、150%、200%、300%、400%或至多500%。在某些實施例中，與投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期個體中之血小板含量相比，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以使血小板含量增加至少1×10¹⁰ 個/公升、3×10¹⁰ 個/公升、5×10¹⁰ 個/公升、1×10¹¹ 個/公升、5×10¹¹ 個/公升或至少1×10¹² 個/公升。在某些實施例中，投與個體初始劑量之ActRII信號傳導抑制劑之前的時間期為至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以在至少3、4、5、6、12、18、24或48個月內增加個體中之血小板含量。在某些實施例中，在ActRII信號傳導抑制劑投藥之後，根據本文所提供之方法投與個體之ActRII信號傳導抑制劑之劑量足以永久性增加個體中之血小板含量。在某些實施例中，劑量在0.1 mg/kg與2.0 mg/kg之間。在某些實施例中，劑量在0.75 mg/kg與2.0 mg/kg之間。當結合本文提供之劑量(例如ActRII信號傳導抑制劑之劑量或第二活性劑之劑量)使用時，字「約」係指在參考數字之1%、5%或10%內之任何數字。在某些實施例中，皮下或靜脈內投與如本文中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每三週一次皮下投與如本文中所描述之ActRII信號傳導抑制劑。在某些實施例中，每三週一次皮下投與根據本文所提供之方法治療之個體ActRIIA-hFC (SEQ ID NO:7；亦稱為索塔西普)。在某些實施例中，每三週一次皮下投與根據本文所提供之方法治療之個體ActRIIB-hFC (SEQ ID NO:25；亦稱為盧帕西普)。 7.8 患者群體根據本文所描述之方法治療之個體可為任何哺乳動物，諸如嚙齒動物及靈長類動物，且在一個較佳實施例中為人類。在某些實施例中，個體為人類。在某些實施例中，本文所描述之方法可用於治療任何哺乳動物，諸如嚙齒動物及靈長類動物且在一個較佳實施例中，人類個體中之貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或非增生性CMML。在某些實施例中，本文所描述之方法可用於增加任何哺乳動物，諸如嚙齒動物及靈長類動物且在一個較佳實施例中，人類個體中之嗜中性白血球含量。在某些實施例中，本文所描述之方法可用於增加任何哺乳動物，諸如嚙齒動物及靈長類動物且在一個較佳實施例中，人類個體中之血小板含量。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為至少15%。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比為約15%。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比在約10%與約20%之間。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體中成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比在約12%與17%之間。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體中之環形含鐵胚血球與正常紅血球母細胞之比率為至少1:10、至少1:7或至少1:5。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有血液相關病症。在某些實施例中，血液相關病症為貧血。在某些實施例中，血液相關病症為需要輸注之貧血。在某些實施例中，血液相關病症為MDS。在某些實施例中，血液相關病症為非增生性CMML。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有貧血。在一些態樣中，貧血個體之Hb含量小於或等於9.0 g/dL。在一些態樣中，在根據本文所提供之方法治療之前，貧血個體在84天內需要2個或2個以上RBC輸注單位。在某些實施例中，個體具有高輸注負擔(HTB)。HTB個體每56天需要至少4個RBC輸注單位。在某些實施例中，個體具有低輸注負擔(LTB)。LTB個體每56天需要小於4個RBC輸注單位。在某些實施例中，個體為需要RBC輸注之個體。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有鐵粒幼細胞性貧血，諸如X連鎖性鐵粒幼細胞貧血、常染色體隱性吡哆醇難治性鐵粒幼細胞性貧血、X連鎖性鐵粒幼細胞貧血及脊髓小腦失調、肌病、乳酸酸中毒及鐵粒幼細胞性貧血、肌病、乳酸酸中毒及鐵粒幼細胞性貧血、硫胺反應性巨紅血球貧血、皮爾森骨髓-胰腺症候群(pearson marrow-pancreas syndrome)、具有環形含鐵胚血球之難治性貧血、具有環形含鐵胚血球及經標記之血小板增多之難治性貧血以及酒精誘導及藥物誘導之鐵粒幼細胞性貧血。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有貧血且個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有IPSS定義之MDS。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有IPSS定義之MDS且個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。 IPSS係指國際預後評分系統，其用於評估骨髓發育不良症候群中之預後。參見例如Greenberg等人, Blood, 1997; 89(6):2079-2088，及Erratum, Blood, 1998; 91:1100。IPSS利用準則點系統將骨髓發育不良症候群患者結果表徵為低風險(0點；中值存活期為5.7年)、中等1 (0.5 -1點；中值存活期為3.5年)；中等2風險(1.5-2.0點；中值存活期為1.2年)；或高風險(2.5-3.5點；中值存活期為0.4年)。點系統評估(i)個體中之骨髓母細胞之百分比；(ii)個體之核型；及(iii)及個體中之血球減少症(定義為血紅蛋白濃度小於10 g/dL、絕對嗜中性白血球計數小於1,800個/微升及血小板計數小於100,000個/微升)。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有IPSS-R定義之MDS。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有IPSS-R定義之MDS且個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為含鐵胚血球含鐵胚血球。在某些實施例中，個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。 IPSS-R係指經修改之國際預後評分系統，其用於評估骨髓發育不良症候群中之預後。參見例如Greenberg等人, Blood, 2012; 120(12):2454-2465，及Erratum, Blood, 1998; 91:1100。IPSS-R利用準則點系統將骨髓發育不良症候群患者結果表徵為極低風險(小於或等於1.5點；中值存活期為8.8年)、低風險(大於1.5點，小於或等於3點；中值存活期為5.3年)；中等風險(大於3點，小於或等於4.5點；中值存活期為3年)；高風險(大於4.5點，小於或等於6點；中值存活期為1.6年)；或極高(大於6點；中值存活期為0.8年)。點系統尤其評估(i)個體中之骨髓母細胞之百分比；(ii)個體之核型；及(iii)及個體中之血球減少症(定義為血紅蛋白濃度小於10 g/dL、絕對嗜中性白血球計數小於1,800個/微升及血小板計數小於100,000個/微升)。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，已診斷根據本文所提供之方法治療之個體患有非增生性CMML且個體中至少10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或至少20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS定義之低風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS定義之中等-1風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS定義之中等-2風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS定義之高風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS-R定義之極低風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS-R定義之低風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS-R定義之中等風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS-R定義之高風險MDS。在某些實施例中，MDS為IPSS-R定義之極高風險MDS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS及(ii)患有RARS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS及(ii)患有RCMD-RS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS及(iii)患有RCMD-RS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS及(ii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS及(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RCMD-RS及(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS及(iii)患有RCMD-RS及(iv)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS及(iii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RCMD-RS及(iii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS，(iii)患有RCMD-RS及(iv)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(iii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS，(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(iv)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RCMD-RS，(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(iv)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有MDS，(ii)患有RARS，(iii)患有RCMD-RS，(iv)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(v)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有非增生性CMML。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML及(ii)患有RARS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML及(ii)患有RCMD-RS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS及(iii)患有RCMD-RS。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML及(ii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS及(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RCMD-RS及(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS及(iii)患有RCMD-RS及(iv)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML及(ii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS及(iii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RCMD-RS及(iii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS，(iii)患有RCMD-RS及(iv)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(iii)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS，(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(iv)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RCMD-RS，(iii)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(iv)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體(i)患有非增生性CMML，(ii)患有RARS，(iii)患有RCMD-RS，(iv)個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球及(v)表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有與無效紅血球生成相關之突變的基因。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現包含一或多種突變之一或多種編接因子基因。在一個特定實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有一或多種突變之SF3B1。在某些實施例中，該一或多種突變在非編碼區中。在某些實施例中，SF3B1為編碼SB3B1之基因。在某些實施例中，該一或多種突變在編碼區中。在某些實施例中，SF3B1為SF3B1蛋白質。在某些實施例中，SF3B1蛋白質中之一或多種突變係選自由以下組成之群：E622D、R625C、H662Q、H662D、K66N、K666T、K666Q、K666E、A672D、K700E、I704N。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變E622D之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變R625C之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變H662Q之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變H662D之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變K66N之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變K666T之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變K666Q之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變K666E之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變A672D之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變K700E之SF3B1蛋白質。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有突變I704N之SF3B1蛋白質。在一個特定實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有一或多種突變之SRSF2。在一個特定實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有一或多種突變之DNMT3A。在一個特定實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有一或多種突變之TET2。在一個特定實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體表現具有一或多種突變之SETBP1。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有血小板減少。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有小於1×10¹¹ 個血小板/公升。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有嗜中性白細胞減少症。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體之絕對嗜中性白血球計數小於1×10⁹ 個/公升。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有小於13,000個白血球/微升、小於12,000個白血球/微升、小於11,000個白血球/微升、小於10,000個白血球/微升、小於7,500個白血球/微升或小於500個白血球/微升。在某些實施例中，根據本文中提供之方法治療之個體中之血紅蛋白含量小於10 g/dL、9 g/dL、8 g/dL或7 g/dL。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體中之血紅蛋白含量在7 g/dL與7.5 g/dL之間、在7.5 g/dL與8 g/dL之間、在8 g/dL與8.5 g/dL之間、在8.5 g/dL與9.0 g/dL之間、在9.0 g/dL與9.5 g/dL之間或在9.5 g/dL與10.0 g/dL之間。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有低輸注負擔。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之具有低輸注負擔之個體每8週需要至多0、1、2或3個紅血球單位。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有高輸注負擔。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之具有高輸注負擔之個體每8週需要至少4、5、6、7、8、9、10、11、12或13個紅血球單位。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體對一或多種ESA不具有反應、具有反應缺失或低反應機率。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體先前經歷用一或多種ESA治療或當前正在進行用一或多種ESA治療。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體先前經歷用低甲基化劑治療。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體先前經歷用來拉度胺(lenalidomine)治療。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體未經歷用阿紮胞苷(azacitidine)、地西他濱(decitabine)、ESA、G-CSF、GM-CSG或來那度胺治療。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體對用一或多種ESA治療不起反應。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體對用一或多種ESA治療具有難治性。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體變成對用一或多種ESA治療具有難治性。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體對先前ESA治療具有難治性。在某些實施例中，對先前ESA治療具有難治性之個體經記錄對先前含有ESA之療程(呈單一藥劑或組合(例如與G-CSF)形式)不起反應或不再保持反應；ESA療程必須為(a)大於40,000 IU/週保持至少8個劑量或等效物之重組型人類紅血球生成素，或(b)每三週一次大於500 μg保持至少4個劑量或等效物之達貝泊汀α (darbepoetin alpha)。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體對先前ESA治療不耐受。在某些實施例中，對先前ESA治療不耐受之個體經記錄在在引入之後的任何時間由於不耐受性或不良事件而停止先前含有ESA之療程(呈單一藥劑或組合(例如與G-CSF)形式)。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體為ESA不合格。在某些實施例中，基於先前未用ESA治療之個體中大於200 U/L之內源性血清紅血球生成素含量，ESA不合格之個體對ESA具有低反應機率。在某些實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體可為任何年齡。在某些實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體小於18歲。在一特定實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體小於13歲。在另一特定實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體小於12、小於11、小於10、小於9、小於8、小於7、小於6或小於5歲。在另一特定實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體為1至3歲、3至5歲、5至7歲、7至9歲、9至11歲、11至13歲、13至15歲、15至20歲、20至25歲、25至30歲或大於30歲。在另一特定實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體為30至35歲、35至40歲、40至45歲、45至50歲、50至55歲、55至60歲或大於60歲。在另一特定實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體為60至65歲、65至70歲、70至75歲、75至80歲或大於80歲。在某些實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體患有MDS。在某些實施例中，治療本文所描述之方法根據之個體患有MDS及完整染色體5q。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有MDS、完整染色體5q且不具有所記錄之來那度胺治療失敗。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有MDS、完整染色體5q且記錄有來那度胺治療失敗。在某些實施例中，根據本文所描述之方法治療之個體患有具有染色體5q缺失之MDS。具有染色體5q缺失之MDS包含長臂染色體5之缺失且其特徵尤其在於具有卵形大紅血球之大紅血球性貧血、正常至稍微降低之白血球計數、正常至升高之血小板計數及骨髓以及血液中小於5%母細胞。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有具有染色體5q缺失之MDS且不具有所記錄之來那度胺治療失敗。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體患有具有染色體5q缺失之MDS且記錄有來那度胺治療失敗。在某些實施例中，來那度胺治療失敗包含對來那度胺不起反應、在用來那度胺治療4個月之後對來那度胺不起反應、對用來那度胺治療不耐受或妨礙用來那度胺治療之細胞減少症。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體在骨髓及血液具有小於5%母細胞。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有大於500 mIU/mL之EPO血清濃度。在某些實施例中，根據本文所提供之方法治療之個體具有大於200 mIU/mL之EPO血清濃度。 7.9 ACTRII受體之信號傳導抑制劑本文中涵蓋之ActRII受體之抑制劑包括ActRIIA信號傳導抑制劑及ActRIIB信號傳導抑制劑(參見下文)。在某些實施例中，ActRII受體信號傳導抑制劑對ActRIIA具有特異性。在其他實施例中，ActRII受體信號傳導抑制劑對ActRIIB具有特異性。在某些實施例中，ActRII受體信號傳導抑制劑優先抑制ActRIIA。在其他實施例中，ActRII受體信號傳導抑制劑優先抑制ActRIIB。在某些實施例中，ActRII受體信號傳導抑制劑抑制ActRIIA及ActRIIB。在某些實施例中，ActRII受體之信號傳導抑制劑可為包含ActRII之活化素結合域之多肽。不受理論束縛，此類包含活化素結合域之多肽螯合活化素且藉此防止活化素信號傳導。此等包含活化素結合域之多肽可包含ActRII受體之細胞外域中之所有或一部分(亦即ActRIIA之細胞外域中之所有或一部分或ActRIIB之細胞外域中之所有或一部分)。在特定實施例中，ActRII受體之細胞外域可溶。在某些實施例中，包含活化素結合域之多肽連接至抗體之Fc部分(亦即產生包含ActRII受體之包含活化素結合域的多肽及抗體之Fc部分之結合物)。不希望受理論約束，抗體部分賦予結合物增加之穩定性。在某些實施例中，活化素結合域經由連接子，例如肽連接子連接至抗體之Fc部分。用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII受體之信號傳導抑制劑包含直接或間接，細胞外或細胞內抑制ActRIIA信號傳導及/或ActRIIB信號傳導之分子。在一些實施例中，本文中所描述之組合物及方法中使用之ActRIIA及/或ActRIIB之信號傳導抑制劑經由與受體本身相互作用來抑制ActRIIA及/或ActRIIB。在其他實施例中，本文中所描述之組合物及方法中使用之ActRIIA及/或ActRIIB之信號傳導抑制劑經由與ActRIIA及/或ActRIIB配位體(例如活化素)相互作用來抑制ActRIIA及/或ActRIIB。 7.9.1 ACTRIIA之信號傳導抑制劑如本文所用，術語「ActRIIA」係指來自任何物種及變異體之IIa型活化素受體(ActRIIA)蛋白質之家族，其藉由突變誘發或其他修飾衍生自此類ActRIIA蛋白質。本文中提及ActRIIA理解為提及目前鑑定形式中之任一者。ActRIIA家族之成員通常為跨膜蛋白質，其由以下構成：具有富含半胱胺酸之區域之配位體結合細胞外域、跨膜域及具有預測絲胺酸/蘇胺酸激酶活性之細胞質域。欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包括(但不限於)活化素結合之可溶ActRIIA多肽、結合至活化素(尤其活化素A或B子單位，亦稱為βA或βB)且破壞ActRIIA結合之抗體、結合至ActRIIA且破壞活化素結合之抗體、針對活化素或ActRIIA結合選擇之非抗體蛋白(關於此類蛋白之實例及其設計及選擇方法，參見例如WO/2002/088171、WO/2006/055689、WO/2002/032925、WO/2005/037989、US 2003/0133939及US 2005/0238646，其中之每一者以全文引用之方式併入本文中)及針對活化素或ActRIIA結合選擇之可結合於Fc域之隨機化肽。在某些實施例中，具有活化素或ActRIIA結合活性之兩種或兩種以上不同蛋白質(或其他部分)，尤其分別阻斷I型(例如可溶I型活化素受體)及II型(例如可溶II型活化素受體)結合位點之活化素結合子可一起連接以產生抑制ActRIIA且因此可用於本文所描述之組合物及方法中之雙官能或多官能結合分子。在某些實施例中，抑制ActRIIA之活化素-ActRIIA信號傳導軸拮抗劑包括核酸適體，包括用於本文所描述之組合物及方法中之小分子及其他試劑。 (a) 包含ActRIIA多肽之ActRIIA信號傳導抑制劑術語「ActRIIA多肽」包括包含ActRIIA家族成員之任何天然存在之多肽以及保留適用活性之其任何變異體(包括突變體、片段、融合物及肽模擬物形式)的多肽。舉例而言，ActRIIA多肽包括來源於具有與ActRIIA多肽序列至少約80%一致，且視情況至少85%、90%、95%、97%、98%、99%或99%以上一致性之序列的任何已知ActRIIA序列的多肽。舉例而言，ActRIIA多肽可結合於ActRIIA蛋白質及/或活化素且抑制ActRIIA蛋白質及/或活化素之功能。ActRIIB多肽可針對其促進骨骼生長及骨骼礦化之能力選擇。ActRIIA多肽之實例包括人類ActRIIA前驅體多肽(SEQ ID NO:1)及可溶性人類ActRIIA多肽(例如SEQ ID NO:2、3、7及12)。相對於胺基酸序列在SEQ ID NO:1處描述之ActRIIA前驅體多肽，人類ActRIIA前驅體多肽之信號肽位於胺基酸位置1至20處；細胞外域位於胺基酸位置21至135處且人類ActRIIA前驅體多肽(SEQ ID NO: 1)之N連接糖基化位點位於SEQ ID NO: 1之胺基酸位置43及56處。編碼SEQ ID NO:1之人類ActRIIB前驅體多肽之核酸序列揭示為SEQ ID NO: 4 (基因庫條目NM_001616之核苷酸164-1705)。編碼SEQ ID NO:2之可溶人類ActRIIA多肽之核酸序列揭示為SEQ ID NO:5。關於序列之描述，參見表21。在特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA多肽為可溶性ActRIIA多肽。ActRIIA蛋白之細胞外域可結合至活化素且通常可溶，且因此可稱為可溶性結合活化素之ActRIIA多肽。因此，如本文所用，術語「可溶性ActRIIA多肽」通常係指包含ActRIIA蛋白之細胞外域，包括ActRIIA蛋白之任何天然存在之細胞外域以及其任何變異體(包括突變體、片段及肽模擬物形式)之多肽。可溶性ActRIIA多肽可結合至活化素；然而，野生型ActRIIA蛋白在結合於活化素相對於GDF8/11方面不展示顯著選擇性。天然或變化之ActRIIA蛋白質可藉由與第二活化素選擇性結合劑偶合來給與附加對活化素之特異性。可溶性結合活化素之ActRIIA多肽之實例包括SEQ ID NO:2、3、7、12及13中所示之可溶性多肽。可溶性結合活化素之ActRIIA多肽之其他實例除ActRIIA蛋白之細胞外域以外包含信號序列，例如蜜蜂蜂毒肽(mellitin)前導序列(SEQ ID NO:8)、組織纖維蛋白溶酶原活化因子(TPA)前導(SEQ ID NO:9)或天然ActRIIA前導(SEQ ID NO:10)。SEQ ID NO:13中所示之ActRIIA-hFc多肽使用TPA前導。在某些實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包含結合物/融合蛋白質，其包含ActRIIA之活化素結合域連接至抗體之Fc部分。在某些實施例中，活化素結合域經由連接子，例如肽連接子，連接至抗體之Fc部分。視情況，Fc域在殘基具有一或多種突變，諸如Asp-265、離胺酸322及Asn-434。在某些情況下，具有此等突變中之一或多者(例如Asp-265突變)之突變型Fc域與野生型Fc域相比具有降低之結合於Fcγ受體之能力。在其他情況下，具有此等突變中之一或多者(例如Asn-434突變)之突變型Fc域與野生型Fc域相比具有增加之結合於I類MHC相關之Fc受體(FcRN)之能力。包含ActRIIA之可溶細胞外域與Fc域融合之例示性融合蛋白質述於SEQ ID NO:6、7、12及13中。在一個特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包含ActRIIA之細胞外域或其部分連接至抗體之Fc部分，其中該ActRIIA信號傳導抑制劑包含與選自SEQ ID NO:6、7、12及13之胺基酸序列具有至少75%一致性之胺基酸序列。在另一特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包含ActRIIA之細胞外域或其部分連接至抗體之Fc部分，其中該ActRIIA信號傳導抑制劑包含與選自SEQ ID NO:6、7、12及13之胺基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之胺基酸序列。在某些實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包含ActRIIA之細胞外域之截短形式。截短可在ActRIIA多肽之羧基端及/或胺基端處。在某些實施例中，截短可比成熟ActRIIA多肽細胞外域長1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個胺基酸。在某些實施例中，截短可為成熟ActRIIA多肽細胞外域之1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個N端胺基酸。在某些實施例中，截短可為成熟ActRIIA多肽細胞外域之1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個C端胺基酸。舉例而言，ActRIIA之截短形式包括具有胺基酸20-119、20-128、20-129、20-130、20-131、20-132、20-133、20-134、20-131、21-131、22-131、23-131、24-131及25-131之多肽，其中胺基酸位置指在SEQ ID NO:1中之胺基酸位置。在某些實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包含具有一或多個胺基酸取代之ActRIIA之細胞外域。在某些實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑包含亦攜帶胺基酸取代之ActRIIA細胞外域之截短形式。在一個特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑為人類ActRIIA受體之細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白質。在另一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑為人類ActRIIA受體之截短細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白質。在另一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIA信號傳導抑制劑為人類ActRIIA受體之截短細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白，其中人類ActRIIA受體之截短細胞外域具有一或多個胺基酸取代。 ActRIIA多肽之功能活性片段可例如藉由篩選以重組方式由編碼ActRIIA多肽之核酸之對應片段產生之多肽獲得。此外，片段可使用此項技術中已知之技術，諸如習知梅里菲爾德(Merrifield)固相f-Moc或t-Boc化學方法來化學合成。片段可經產生(以重組方式或藉由化學合成)且測試以鑑定可充當藉由活化素介導之ActRIIA蛋白或信號傳導之拮抗劑(抑制劑)的彼等肽基片段。此外，ActRIIA多肽之功能活性變異體可例如藉由篩選以重組方式由編碼ActRIIA多肽之相應誘變核酸產生之經修飾之多肽之文庫獲得。變異體可經產生且測試以鑑定可充當ActRIIA蛋白質或藉由活化素介導之信號傳導之拮抗劑(抑制劑)之彼等。在某些實施例中，ActRIIA多肽之功能性變異體包含與選自SEQ ID NO:2或3之胺基酸序列具有至少75%一致性之胺基酸序列。在某些情況下，功能性變異體具有與選自SEQ ID NO:2或3之胺基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%一致性之胺基酸序列。功能性變異體可例如藉由出於諸如增強治療功效或穩定性(例如離體存放期及活體內對蛋白水解降解之耐受性)的目的改變ActRIIA多肽之結構產生。當經選擇以保留活化素結合時將此類經修飾之ActRIIA多肽認為天然存在之ActRIIA多肽之功能等效物。經修飾之ActRIIA多肽亦可例如藉由胺基酸取代、缺失或添加產生。舉例而言，期望用異白胺酸或纈胺酸獨立置換白胺酸，用麩胺酸鹽置換天冬胺酸鹽、用絲胺酸置換蘇胺酸或用結構上相關胺基酸類似置換胺基酸(例如保守性突變)將不對所得分子之生物活性具有主要影響為合理的。保守性置換為在其側鏈中相關之胺基酸家族內進行的彼等置換。ActRIIA多肽之胺基酸序列變化是否產生功能同源物可容易地藉由評估變異ActRIIA多肽以類似於野生型ActRIIA多肽之方式在細胞中產生反應之能力確定。在某些實施例中，本文中提供ActRIIA多肽之特異性突變，其可改變多肽之糖基化。可選擇此類突變以引入或消除一或多個糖基化位點，諸如O-連接或N-連接之糖基化位點。天冬醯胺連接之糖基化識別位點一般包含藉由合適細胞糖基化酶特異性識別之三肽序列，天冬醯胺-X-蘇胺酸(或天冬醯胺-X-絲胺酸) (其中「X」為任何胺基酸)。改變亦可藉由添加一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基或藉由一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基取代至野生型ActRIIA多肽之序列(對於O-連接之糖基化位點)進行。在糖基化識別位點之第一或第三胺基酸位置中之一者或兩者處的多種胺基酸取代或缺失(及/或在第二位置處之胺基酸缺失)引起在經修飾之三肽序列處之非糖基化。增加ActRIIA多肽上碳水化合物部分之數目的另一方式為藉由醣苷與ActRIIA多肽之化學或酶促偶合。取決於所使用之偶合模式，糖可連接至(a)精胺酸及組胺酸；(b)游離羧基；(c)游離硫氫基，諸如半胱胺酸之游離硫氫基；(d)游離羥基，諸如絲胺酸、蘇胺酸或羥脯胺酸之游離羥基；(e)芳族殘基，諸如苯丙胺酸、酪胺酸或色胺酸之芳族殘基；或(f)麩醯胺酸之醯胺基。此等方法描述於1987年9月11日公開之WO 87/05330及Aplin及Wriston(1981) CRC Crit. Rev. Biochem., 第259-306頁中，其以引用的方式併入本文中。存在於ActRIIA多肽上之一或多個碳水化合物部分之移除可以化學方式及/或以酶促方式實現。化學去糖基化可涉及例如使ActRIIA多肽暴露於化合物三氟甲磺酸或等效化合物。此處理使得除連接糖(N-乙醯基葡萄胺糖或N-乙醯基半乳胺糖)外之大多數或所有糖裂解，而保持胺基酸序列完整。化學去糖基化由Hakimuddin等人, (1987) Arch. Biochem. Biophys. 259:52及由Edge等人, (1981) Anal. Biochem. 118:131進一步描述。ActRIIA多肽上碳水化合物部分之酶促裂解可藉由使用如由Thotakura等人(1987) Meth. Enzymol. 138:350所描述之各種內醣苷酶及外醣苷酶來達成。ActRIIA多肽之序列可按需要視使用之表現系統類型而調整，因為哺乳動物、酵母、昆蟲及植物細胞可均引入可受肽之胺基酸序列影響之不同糖基化模式。通常，用於人類之ActRIIA蛋白質將在提供適當糖基化之哺乳動物細胞株，諸如HEK293或CHO細胞株中表現，儘管其他表現系統，諸如其他哺乳動物表現細胞株、具有工程改造糖基化酶之酵母細胞株及昆蟲細胞預期同樣適用。本文進一步提供產生突變體，尤其ActRIIA多肽之組合突變體集合以及截短突變體之方法；組合突變體之池尤其適用於鑑定功能性變異體序列。篩選此類組合庫之目的可為產生例如可充當促效劑或拮抗劑，或替代地一起具有新穎活性之ActRIIA多肽變異體。以下提供多種篩選分析，且此類分析可用於評估變異體。舉例而言，可針對結合於ActRIIA配位體、防止ActRIIA配位體與ActRIIA多肽之結合或干擾由ActRIIA配位體所引起之信號傳導之能力篩選ActRIIA多肽變異體。可產生相對於天然存在之ActRIIA多肽，具有選擇性或一般增加之效能的組合衍生變異體。同樣地，突變誘發可產生具有與對應野生型ActRIIA多肽顯著不同之細胞內半衰期之變異體。舉例而言，可使改變之蛋白質對蛋白水解降解或導致天然ActRIIA多肽之破壞或者失活之其他細胞過程較穩定或較不穩定。此類變異體及編碼其之基因可用於藉由調節ActRIIA多肽之半衰期改變ActRIIA多肽含量。舉例而言，短半衰期可產生更短暫生物影響且可允許較緊密控制個體內之重組型ActRIIA多肽含量。在Fc融合蛋白質中，突變可在連接子(若存在)及/或Fc部分中進行以改變蛋白質之半衰期。組合庫可藉助於編碼各包括至少一部分潛在ActRIIA多肽序列之多肽庫之基因之簡併庫產生。舉例而言，可將合成寡核苷酸之混合物以酶促方式接合至基因序列中以使得簡併組之潛在ActRIIA多肽核苷酸序列可作為個別多肽，或替代地作為一組較大融合蛋白質(例如用於噬菌體呈現)表現。存在許多可由簡併寡核苷酸序列產生潛在同源物庫之方式。簡併基因序列之化學合成可在自動DNA合成器中進行，且合成基因隨後接合至合適載體中以便表現。簡併寡核苷酸之合成在此項技術中眾所周知(參見例如Narang, S A (1983) Tetrahedron 39:3；Itakura等人, (1981) Recombinant DNA, Proc. 3rd Cleveland Sympos. Macromolecules, AG Walton編, Amsterdam: Elsevier 第273-289頁；Itakura等人, (1984) Annu. Rev. Biochem. 53:323；Itakura等人, (1984) Science 198:1056：Ike等人, (1983) Nucleic Acid Res. 11:477)。此類技術已用於其他蛋白質之定向進化(參見例如Scott等人, (1990) Science 249:386-390；Roberts等人, (1992) PNAS USA 89:2429-2433；Devlin等人, (1990) Science 249: 404-406；Cwirla等人, (1990) PNAS USA 87: 6378-6382；以及美國專利第5,223,409號、第5,198,346號及第5,096,815號)。或者，可利用其他形式之突變誘發產生組合庫。舉例而言，ActRIIA多肽變異體可藉由使用例如丙胺酸掃描突變誘發及其類似技術篩選(Ruf等人, (1994) Biochemistry 33:1565-1572；Wang等人, (1994) J. Biol. Chem. 269:3095-3099；Balint等人, (1993) Gene 137:109-118；Grodberg等人, (1993) Eur. J. Biochem. 218:597-601；Nagashima等人, (1993) J. Biol. Chem. 268:2888-2892；Lowman等人, (1991) Biochemistry 30:10832-10838；及Cunningham等人, (1989) Science 244:1081-1085)、藉由連接子掃描突變誘發(Gustin等人, (1993) Virology 193:653-660；Brown等人, (1992) Mol. Cell Biol. 12:2644-2652；McKnight等人, (1982) Science 232:316)、藉由飽和突變誘發(Meyers等人, (1986) Science 232:613)、藉由PCR突變誘發(Leung等人, (1989) Method Cell Mol Biol 1:11-19)或藉由隨機突變誘發，包括化學突變誘發等(Miller等人, (1992) A Short Course in Bacterial Genetics, CSHL Press, Cold Spring Harbor, N.Y.；及Greener等人, (1994) Strategies in Mol Biol 7:32-34)產生及自庫分離。連接子掃描突變誘發(尤其在組合設置中)為鑑定截短(生物活性)形式之ActRIIA多肽之有吸引力的方法。此項技術中已知各種用於篩選藉由點突變及截短製造之組合庫之基因產物，且就此而言用於針對具有某一特性之基因產物篩選cDNA庫的技術。此類技術將一般適合於快速篩選藉由ActRIIA多肽之組合突變誘發產生之基因庫。篩選大型基因庫之最廣泛使用之技術通常包含將基因庫選殖至可複製表現載體中，用所得載體庫轉型合適細胞，且在所需活性之偵測促進編碼產物經偵測之基因之載體之相對容易分離的條件下表現組合基因。較佳分析包括活化素結合分析及活化素介導之細胞信號傳導分析。在某些實施例中，ActRIIA多肽可進一步包含除任何天然存在於ActRIIA多肽中之修飾以外的轉譯後修飾。此類修飾包括(但不限於)乙醯化、羧化、糖基化、磷酸化、脂質化及醯化。因此，經修飾之ActRIIA多肽可含有非胺基酸要素，諸如聚乙二醇、脂質、多醣或單醣及磷酸鹽。此類非胺基酸要素對ActRIIA多肽之功能性之影響可藉由熟習此項技術者已知之任何方法測試。當ActRIIA多肽在細胞中藉由裂解新生形式之ActRIIA多肽產生時，轉譯後處理亦可對於蛋白質之適當摺疊及/或功能重要。不同細胞(諸如CHO、HeLa、MDCK、293、W138、NIH-3T3或HEK293)對於此類轉譯後活性具有特定細胞機制及特徵機制且可經選擇以確保ActRIIA多肽之正確修飾及處理。在某些態樣中，ActRIIA多肽之功能性變異體或經修飾之形式包括具有ActRIIA多肽之至少一部分及一或多個融合域之融合蛋白質。此等融合域之熟知實例包括(但不限於)聚組胺酸、Glu-Glu、麩胱甘肽S轉移酶(GST)、硫氧還原蛋白、蛋白質A、蛋白質G、免疫球蛋白重鏈恆定區(Fc)、麥芽糖結合蛋白(MBP)或人類血清白蛋白。融合域可經選擇以便賦予所需特性。舉例而言，一些融合域特別適用於藉由親和性層析法分離融合蛋白質。出於親和純化之目的，使用用於親和性層析法之相關基質，諸如麩胱甘肽、澱粉酵素及鎳或鈷結合樹脂。許多此類基質可以「套組」形式獲得，諸如對(HIS6)融合搭配物適用之Pharmacia GST純化系統及QIAexpress.TM.系統(Qiagen)。作為另一實例，融合域可經選擇以便促進ActRIIA多肽之偵測。此等偵測域之實例包括各種螢光蛋白質(例如GFP)以及「抗原決定基標籤」，其通常為特異性抗體可用之短肽序列。特異性單株抗體容易可用之熟知抗原決定基標籤包括FLAG、流感病毒血球凝集素(HA)及c-myc標籤。在一些情況下，融合域具有蛋白酶裂解位點(諸如用於因子Xa或凝血酶)，其允許相關蛋白酶部分消化融合蛋白且藉此自其釋放重組型蛋白質。釋放之蛋白質可隨後藉由隨後層析分離自融合域分離。在某些較佳實施例中，ActRIIA多肽與活體內穩定ActRIIA多肽之域(「穩定劑」域)融合。「穩定」意謂增加血清半衰期，不論此是否由於破壞減少、腎臟清除率降低或其他藥物動力學影響之任何者。與免疫球蛋白之Fc部分融合已知賦予各種蛋白質所需藥物動力學特性。同樣地，與人類血清白蛋白融合可賦予所需特性。可選擇之其他類型之融合域包括多聚化(例如二聚、四聚)域及功能域(賦予額外生物功能，諸如視需要進一步刺激骨骼生長或肌肉生長)。應瞭解融合蛋白質之不同要素可以符合所需功能性之任何方式配置。舉例而言，ActRIIA多肽可針對異源域經置放C端，或替代地異源域可針對ActRIIA多肽經置放C端。ActRIIA多肽域及異源域在融合蛋白中無需相鄰，且額外域或胺基酸序列可經包括C端或N端至任一域或域之間。在某些實施例中，本文中所描述之ActRIIA多肽含有能夠使ActRIIA多肽穩定之一或多個修飾。舉例而言，此類修飾增強ActRIIA多肽之活體外半衰期，增強ActRIIA多肽之循環半衰期或減少ActRIIA多肽之蛋白水解降解。此類穩定修飾包括(但不限於)融合蛋白質(包括例如包含ActRIIA多肽及穩定劑域之融合蛋白質)、修飾糖基化位點(包括例如添加糖基化位點至ActRIIA多肽)及修飾碳水化合物部分(包括例如自ActRIIA多肽移除碳水化合物部分)。在融合蛋白之情況下，ActRIIA多肽融合至穩定劑域，諸如IgG分子(例如Fc域)。如本文中所使用，術語「穩定劑域」不僅指融合域(例如Fc)，如在融合蛋白質之情況下，且亦包括非蛋白性修飾，諸如碳水化合物部分，或非蛋白性聚合物，諸如聚乙二醇。在某些實施例中，自其他蛋白質分離或者實質上不含其他蛋白質之分離及/或純化形式之ActRIIA多肽可與本文所描述之方法及組合物一起使用。ActRIIA多肽將一般藉由自重組型核酸表現產生。在某些態樣中，本文中提供編碼ActRIIA多肽(例如可溶性ActRIIA多肽)中之任一者之經分離及/或重組型核酸，其包括本文中所揭示之片段、功能性變異體及融合蛋白質。舉例而言，SEQ ID NO:4編碼天然存在之人類ActRIIA前驅體多肽，而SEQ ID NO:5編碼ActRIIA之經處理細胞外域。個體核酸可為單股或雙股。此類核酸可為DNA或RNA分子。此等核酸可用於例如製造ActRIIA多肽之方法中或用作直接治療劑(例如在基因療法方法中)。在某些態樣中，應進一步理解，編碼ActRIIA多肽之個體核酸包括作為SEQ ID NO:4或5之變異體的核酸。變異核苷酸序列包括相差一或多個核苷酸取代、添加或缺失之序列，諸如對偶基因變異體。在某些實施例中，本文中提供經分離或重組型核酸序列，其與SEQ ID NO:4或5具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%一致性。一般熟習此項技術者應瞭解，本文中亦涵蓋與SEQ ID NO:4或5互補之核酸序列及SEQ ID NO:4或5之變異體。在其他實施例中，本文中提供之核酸序列可為分離型、重組型及/或與異源核苷酸序列融合，或在DNA文庫中。在其他實施例中，本文中提供之核酸亦包括在高嚴格度條件下與SEQ ID NO:4或5中指定之核苷酸序列、SEQ ID NO:4或5之補體序列或其片段雜交之核苷酸序列。如上文所論述，一般熟習此項技術者將易於理解，促進DNA雜交之適合的嚴格度條件可變化。一般熟習此項技術者應理解可改變促進DNA雜交之合適嚴格條件。舉例而言，吾人可在約攝氏45度下在6.0 ×氯化鈉/檸檬酸鈉(SSC)下進行雜交，接著在攝氏50度下進行2.0 × SSC之洗滌。舉例而言，洗滌步驟中之鹽濃度可選自在攝氏50度下約2.0 × SSC之低嚴格度至在攝氏50度下約0.2 × SSC 之高嚴格度。此外，洗滌步驟中之溫度可自在室溫(約攝氏22度)下之低嚴格度條件增加至在約攝氏65度下之高嚴格度條件。可改變溫度及鹽兩者，或溫度或鹽濃度可保持恆定，而改變另一變數。在一個實施例中，在室溫下在6 × SSC之低嚴格度條件下雜交，接著在室溫下在2 × SSC下洗滌之核酸可與本文所描述之方法及組合物一起使用。本文中亦涵蓋由於基因密碼中之簡併而與SEQ ID NO:4或5中所闡述之核酸不同之經分離之核酸。舉例而言，藉由一種以上三重態指定多種胺基酸。指定相同胺基酸之密碼子或同義語(例如CAU及CAC為組胺酸之同義語)可引起不影響蛋白質之胺基酸序列之「靜默」突變。然而，吾人預期引起本發明蛋白質之胺基酸序列改變之DNA序列多形現象將存在於哺乳動物細胞中。熟習此項技術者將瞭解編碼特定蛋白質之核酸之一或多種核苷酸(多達約3-5%之核苷酸)之此等變異可由於天然對偶基因變異存在於給定物種之個體中。本文中涵蓋任何及所有此類核苷酸變化及所得胺基酸多形性。在某些實施例中，重組型核酸可可操作地連接於表現構築體中之一或多個調節核苷酸序列。調節核苷酸序列將一般適合於用於表現之宿主細胞。對於多種宿主細胞，此項技術中已知許多類型之合適表現載體及適合調節序列。通常該一或多個調節核苷酸序列可包括(但不限於)啟動子序列、前導或信號序列、核糖體結合位點、轉錄起始及終止序列、轉譯起始及終止序列及強化子或活化因子序列。本文中涵蓋如此項技術中已知之組成性或誘導性啟動子。啟動子可為天然存在之啟動子，或組合一種以上啟動子之元件之混合啟動子。表現構築體可存在於細胞中游離基因體(諸如質體)上，或表現構築體可插入染色體中。在一個較佳實施例中，表現載體含有可選擇標記基因以允許選擇經轉型宿主細胞。可選擇標記基因為此項技術中熟知且將隨使用之宿主細胞變化。在某些態樣中，在包含編碼ActRIIA多肽且可操作地連接於至少一個調節序列之核苷酸序列之表現載體中提供本發明之核酸。調節序列為此項技術中公認的且針對ActRIIA多肽之直接表現選擇。因此，術語調節序列包括啟動子、強化子及其他表現控制元件。例示性調節序列描述於Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology, Academic Press, San Diego, Calif. (1990)中。舉例而言，當可操作地連接於DNA序列時控制其表現之廣泛多種表現控制序列中之任一者可在此等載體中使用以表現編碼ActRIIA多肽之DNA序列。此等適用之表現控制序列包括例如SV40之早期及晚期啟動子、tet啟動子、腺病毒或細胞巨大病毒立即早期啟動子、RSV啟動子、lac系統、trp系統、TAC或TRC系統、表現藉由T7核糖核酸聚合酶引導之T7啟動子、噬菌體λ之主要操縱子及啟動子區域、fd鞘蛋白之控制區域、3-磷酸甘油酸激酶或其他糖分解酶之啟動子、酸性磷酸酶之啟動子(例如Pho5)、酵母α-交配因子之啟動子、桿狀病毒系統及已知控制原核或真核細胞或其病毒基因之表現之其他序列的多面體啟動子及其各種組合。應理解表現載體之設計可視諸如欲轉型之宿主細胞之選擇及/或需要表現之蛋白質之類型的因素而定。此外，亦應考慮載體之複本數、控制該複本數之能力及藉由載體(諸如抗生素標記)編碼之任何其他蛋白質之表現。本文中提供之重組型核酸可藉由將選殖基因或其部分接合至適用於在原核細胞、真核細胞(酵母、禽類、昆蟲或哺乳動物)或兩者中表現之載體中來產生。用於產生重組型ActRIIA多肽之表現載體包括質體及其他載體。舉例而言，適合的載體包括以下類型之質體：pBR322衍生之質體、pEMBL衍生之質體、pEX衍生之質體、pBTac衍生之質體及pUC衍生之質體，其用於在原核細胞，諸如大腸桿菌中表現。一些哺乳動物表現載體含有促進載體在細菌中繁殖之原核序列及在真核細胞中表現之一或多個真核轉錄單位兩者。pcDNAI/amp、pcDNAI/neo、pRc/CMV、pSV2gpt、pSV2neo、pSV2-dhfr、pTk2、pRSVneo、pMSG、pSVT7、pko-neo及pHyg衍生之載體為適用於轉染真核細胞之哺乳動物表現載體之實例。此等載體中之一些用來自細菌質體，諸如pBR322之序列修飾以促進在原核細胞及真核細胞中複製及抗藥性選擇。替代地，諸如牛乳頭狀瘤病毒(BPV-1)或埃-巴二氏病毒(pHEBo、pREP衍生及p205)之病毒衍生物可用於蛋白質在真核細胞中之短暫表現。其他病毒(包括反轉錄病毒)表現系統之實例可見於以下基因療法遞送系統之描述中。質體之製備及宿主生物體之轉型中使用之各種方法在此項技術中熟知。關於原核及真核細胞之其他適合的表現系統以及一般重組程序，參見Sambrook、Fritsch及Maniatis編之Molecular Cloning A Laboratory Manual, 第3版(Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001)。在一些情況下，可能需要藉由使用桿狀病毒表現系統表現重組型多肽。此等桿狀病毒表現系統之實例包括pVL衍生之載體(諸如pVL1392、pVL1393及pVL941)、pAcUW衍生之載體(諸如pAcUW1)及pBlueBac衍生之載體(諸如含有β-gal之pBlueBac III)。在一個較佳實施例中，載體將經設計以在CHO細胞中產生本發明之ActRIIA多肽，諸如Pcmv-Script載體(Stratagene, La Jolla, Calif.)、pcDNA4載體(Invitrogen, Carlsbad, Calif.)及pCI-neo載體(Promega, Madison, Wis.)。如將顯而易見，個體基因構築體可用於引起個體ActRIIA多肽在於培養物中繁殖之細胞中表現例如以產生蛋白質，包括融合蛋白質或變異蛋白質，以便純化。本發明亦係關於經包括個體ActRIIA多肽中之一或多者之編碼序列(例如SEQ ID NO:4或5)之重組型基因轉染的宿主細胞。宿主細胞可為任何原核或真核細胞。舉例而言，本文中提供之ActRIIA多肽可在細菌細胞(諸如大腸桿菌)、昆蟲細胞(例如使用桿狀病毒表現系統)、酵母或哺乳動物細胞中表現。其他適合之宿主細胞為熟習此項技術者已知。因此，本文提供產生ActRIIA多肽之方法。舉例而言，用編碼ActRIIA多肽之表現載體轉染之宿主細胞可在合適條件下培養以允許ActRIIA多肽之表現發生。ActRIIA多肽可自細胞與含有ActRIIA多肽之培養基之混合物分泌及分離。替代地，ActRIIA多肽可以細胞質方式或在膜部分中保留且收集細胞，溶解且分離蛋白質。細胞培養物包括宿主細胞、培養基及其他副產物。用於細胞培養之適合培養基在此項技術中熟知。個體ActRIIA多肽可使用此項技術中已知之用於純化蛋白質之技術自細胞培養基、宿主細胞或兩者分離，該等技術包括離子交換層析、凝膠過濾層析、超過濾、電泳、用對ActRIIA多肽之特定抗原決定基具有特異性之抗體免疫親和純化及用結合至與ActRIIA多肽融合之域之試劑親和純化(例如蛋白A管柱可用於純化ActRIIA-Fc融合物)。在一個較佳實施例中，ActRIIA多肽為含有促進其純化之域的融合蛋白質。在一個較佳實施例中，純化藉由一系列管柱層析步驟實現，該等步驟以任何順序包括例如以下中之三者或三者以上：蛋白質A層析、Q瓊脂糖層析、苯基瓊脂糖層析、尺寸排外層析及陽離子交換層析。純化可用病毒過濾及緩衝液更換完成。如本文中所展現，將ActRIIA-hFc蛋白質純化至如藉由尺寸排外層析所測定之＞98%及如藉由SDS PAGE所測定之＞95%之純度。此純度水準足以達成對小鼠中之骨骼之所需影響及在小鼠、大鼠及非人類靈長類動物中之可接受安全概況。在另一實施例中，針對純化前導序列，諸如在重組型ActRIIA多肽之所需部分之N端處的聚-(His)/腸激酶裂解位點序列編碼之融合基因可允許藉由使用Ni²⁺ 金屬樹脂之親和性層析純化表現之融合蛋白質。純化前導序列可隨後藉由用腸激酶處理來隨後移除以提供純化ActRIIA多肽(例如參見Hochuli等人, (1987) J. Chromatography 411:177；及Janknecht等人, PNAS USA 88:8972)。製造融合基因之技術已為吾人所熟知。實質上，針對不同多肽序列編碼之各種DNA片段之接合根據習知技術進行，其使用用於連接之鈍端或交錯端末端、提供合適末端之限制酶消化、按需要黏端之填充、避免非所需接合之鹼性磷酸酶處理及酶促連接。在另一實施例中，融合基因可藉由包括自動DNA合成器之習知技術合成。替代地，基因片段之PCR擴增可使用錨定引子進行，該等錨定引子在可隨後黏接以產生嵌合基因序列之兩個連續基因片段之間產生互補突出物(參見例如Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel等人編, John Wiley & Sons: 1992)。 ActRIIA-Fc融合蛋白質可在來自pAID4載體(SV40 ori/強化子，CMV啟動子)之穩定轉染CHO-DUKX Bl 1細胞中使用SEQ ID NO:9之組織纖維蛋白溶酶原前導序列表現。Fc部分為人類IgGl Fc序列，如SEQ ID NO:7中所示。在某些實施例中，在表現後，含有之蛋白質平均具有每分子ActRIIA-Fc融合蛋白，在約1.5與2.5莫耳之間的唾液酸。在某些實施例中，ActRIIA-Fc融合物之長血清半衰期可為在人類個體中25-32天。另外，CHO細胞表現物質可具有比針對在人類293細胞中表現之ActRIIA-hFc融合蛋白報導之親和力高的對活化素B配位體之親和力(del Re等人, J Biol Chem. 2004 Dec 17;279(51):53126-35)。另外，不希望受理論約束，使用TPA前導序列提供比其他前導序列大之產量，且不同於用天然前導表現之ActRIIA-Fc，可提供高純度之N端序列。使用天然前導序列可產生ActRIIA-Fc之各具有不同N端序列之兩個主要物種。 7.9.2 ACTRIIB之信號傳導抑制劑如本文所用，術語「ActRIIB」係指來自任何物種之活化素受體IIB型(ActRIIB)蛋白質之家族及藉由突變誘發或其他修飾衍生自此等ActRIIB蛋白質之變異體。本文中提及ActRIIB理解為提及受體之目前鑑定形式中之任一者。ActRIIB家族之成員通常為跨膜蛋白，其由以下構成：具有富含半胱胺酸之區域之配位體結合細胞外域、跨膜域及具有預測絲胺酸/蘇胺酸激酶活性之細胞質域。欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑包括(但不限於)活化素結合之可溶ActRIIB多肽、結合至活化素(尤其活化素A或B子單位，亦稱為βA或βB)且破壞ActRIIB結合之抗體、結合至ActRIIB且破壞活化素結合之抗體、針對活化素或ActRIIB結合選擇之非抗體蛋白及針對活化素或ActRIIB結合選擇之可結合至Fc域之隨機化肽。在某些實施例中，具有活化素或ActRIIB結合活性之兩種或兩種以上不同蛋白質(或其他部分)，尤其分別阻斷I型(例如可溶I型活化素受體)及II型(例如可溶II型活化素受體)結合位點之活化素結合子可一起連接以產生抑制ActRIIB且因此可用於本文所描述之組合物及方法中之雙官能或多官能結合分子。在某些實施例中，抑制ActRIIB之活化素-ActRIIB信號傳導軸拮抗劑包括核酸適體，包括用於本文所描述之組合物及方法中之小分子及其他試劑。 (a) 包含ActRIIB多肽之ActRIIB信號傳導抑制劑如本文所用，術語「ActRIIB多肽」係指包含ActRIIB家族成員之任何天然存在之多肽的多肽以及保留適用活性之其任何變異體(包括突變體、片段、融合物及肽模擬物形式)。舉例而言，ActRIIB多肽包括衍生自具有與ActRIIB多肽序列具有至少約80%一致性，且視情況至少85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或99%以上一致性之序列的任何已知ActRIIB受體序列的多肽。舉例而言，ActRIIB多肽可結合於ActRIIB蛋白質及/或活化素且抑制ActRIIB蛋白質及/或活化素之功能。ActRIIB多肽之實例包括人類ActRIIB前驅體多肽(SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28)。相對於胺基酸序列描繪為SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之ActRIIB前驅體多肽(亦即人類ActRIIB前驅體多肽)，ActRIIB前驅體多肽之信號肽位於胺基酸1至18處；細胞外域位於胺基酸19至134處且潛在N-連接之糖基化位點位於胺基酸位置42及65處。編碼SEQ ID NO:16之人類ActRIIB前驅體多肽之核酸序列揭示為SEQ ID NO:19 (SEQ ID NO:19在對應於胺基酸位置64之密碼子處提供丙胺酸，但替代地可容易地由熟習此項技術者使用此項技術中已知之方法修飾以在對應於胺基酸位置64之密碼子處提供精胺酸)。關於序列之描述，參見表21。除非另外特定指明，否則本文所描述之所有ActRIIB相關多肽之胺基酸之編號係基於SEQ ID NO:16及SEQ ID NO:28 (其僅僅在於位置64表現之胺基酸方面不同)之胺基酸編號。舉例而言，若ActRIIB多肽描述為在胺基酸位置79具有取代/突變，則應理解位置79係指衍生ActRIIB多肽之SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28中之第79個胺基酸。同樣地，若ActRIIB多肽描述為在胺基酸位置64具有丙胺酸或精胺酸，則應理解位置64係指衍生ActRIIB多肽之SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28中之第64個胺基酸。在某些實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑包含具有ActRIIB之活化素結合域之多肽。在一些實施例中，ActRIIB之活化素結合域包含ActRIIB之細胞外域或其部分。在特定實施例中，ActRIIB之細胞外域或其部分可溶。ActRIIB多肽之說明性經修飾形式揭示於美國專利申請公開案第20090005308號及第20100068215號中，其揭示內容以全文引用之方式併入本文中。在特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB多肽為可溶ActRIIB多肽。術語「可溶性ActRIIB多肽」通常係指包含ActRIIB蛋白之細胞外域，包括ActRIIB蛋白之任何天然存在之細胞外域之多肽以及其任何變異體(包括突變體、片段及肽模擬物形式)。可溶性ActRIIB多肽可結合至活化素；然而，相對於GDF8/11，野生型ActRIIB蛋白不展示在結合至活化素方面之顯著選擇性。在某些實施例中，具有不同結合特性之變化形式之ActRIIB可用於本文所提供之方法中。此等變化形式揭示於例如國際專利申請公開案第WO 2006/012627號及第WO 2010/019261號中，其揭示內容以全文引用之方式併入本文中。可藉由使原生或變化ActRIIB蛋白質與第二活化素選擇性結合劑偶合來給與其對活化素之附加特異性。例示性可溶性ActRIIB多肽包括人類ActRIIB多肽(例如SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43)之細胞外域。已證明由Hilden等人(Blood, 1994, 83(8):2163-70)揭示之具有ActRIIB細胞外序列之Fc融合蛋白質(其在對應於ActRIIB前驅體胺基酸序列，亦即SEQ ID NO:16(本文中稱為「A64」)之胺基酸64之位置處具有丙胺酸)對活化素及GDF-11具有相對低親和力。相比之下，在ActRIIB前驅體胺基酸序列(本文中稱為「R64」)之位置64處具有精胺酸之Fc融合蛋白質對活化素及GDF-11具有低奈莫耳至高皮莫耳範圍內之親和力(參見例如美國專利申請公開案第20100068215號，其揭示內容以全文引用之方式併入本文中)。在位置64具有精胺酸之ActRIIB前驅體胺基酸序列呈現在SEQ ID NO:28中。同樣，在某些實施例中，根據本文中所描述之組合物及方法使用之ActRIIB多肽可包含(i)對應於ActRIIB前驅體胺基酸序列之胺基酸64之位置處的丙胺酸，亦即SEQ ID NO:16；或(ii)ActRIIB前驅體胺基酸序列，亦即SEQ ID NO:28之位置64處的精胺酸。在其他實施例中，根據本文所描述之組合物及方法使用之ActRIIB多肽可包含不為在對應於ActRIIB前驅體胺基酸序列，亦即SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸64之位置處之丙胺酸或精胺酸的胺基酸。已顯示在ActRIIB之細胞外域之C端缺失脯胺酸節降低受體對活化素之親和力(參見例如Attisano等人, Cell, 1992, 68(1):97-108)。含有SEQ ID NO:28之胺基酸20-119 之ActRIIB-Fc融合蛋白(亦即SEQ ID NO:32)「ActRIIB(20-119)-Fc」相對於包括脯胺酸節區域及完整近膜域之含有SEQ ID NO:28之胺基酸20-134之ActRIIB-Fc融合蛋白(亦即SEQ ID NO:31) 「ActRIIB(20-134)-Fc」，具有降低之與GDF-11及活化素之結合。然而，含有SEQ ID NO:28之胺基酸20-129之ActRIIB-Fc融合蛋白質「ActRIIB(20-129)-Fc」相對於ActRIIB之未截短細胞外域保留類似但略微降低之活性，儘管脯胺酸節區域經破壞。因此，包含在SEQ ID NO:28 (或SEQ ID NO:16)之胺基酸134、133、132、131、130及129處終止之細胞外域之ActRIIB多肽均預期為活性，但在胺基酸134或133處終止之構築體可為活性最強。類似地，在殘基129-134中之任一者處之突變不預期藉由較大邊緣改變配位體結合親和力，如藉由SEQ ID NO:28之P129及P130之突變不實質上減少配位體結合之事實所指示。因此，根據本文所描述之方法及組合物使用之ActRIIB多肽可早在SEQ ID NO:28 (或SEQ ID NO:16)之胺基酸109 (亦即最終半胱胺酸)終止，然而，在SEQ ID NO:28 (或SEQ ID NO:16)之胺基酸位置109及119處或之間終止之形式預期具有降低之配位體結合能力。 SEQ ID NO:16及SEQ ID NO:28之胺基酸29代表ActRIIB前驅體序列中之初始半胱胺酸。吾人預期在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之N端之胺基酸29處或在此等胺基酸位置之前開始之ActRIIB多肽將保留配位體結合活性。在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之位置24處之丙胺酸至天冬醯胺突變在不實質上影響配位體結合之情況下引入N連接糖基化序列。此證實對應於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-29之在信號裂解肽與半胱胺酸交聯區域之間的區域中之突變充分耐受。特定言之，在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置20、21、22、23及24處開始之ActRIIB多肽將保留活性，且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置25、26、27、28及29處開始之ActRIIB多肽亦預期保留活性。在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置22、23、24或25處開始之ActRIIB多肽將具有最大活性。綜合而言，欲根據本文所描述之方法及組合物使用之ActRIIB前驅蛋白(亦即SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28)之活性部分(亦即ActRIIB多肽)將一般包含SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸29-109，且此等ActRIIB多肽可例如在對應於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸19-29中之任一者之殘基處開始且在對應於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸109-134中之任一者之位置處終止。本文涵蓋之ActRIIB多肽之特定實例包括在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之19-29、20-29或21-29之胺基酸位置處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之119-134、119-133或129-134、129 133之胺基酸位置處終止之彼等多肽。本文涵蓋之ActRIIB多肽之其他特定實例包括在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之20-24 (或21-24或22-25)之胺基酸位置處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之109-134 (或109-133)、119-134 (或119-133)或129-134 (或129-133)之胺基酸位置處終止彼等多肽。亦涵蓋屬於此等範圍內之變異型ActRIIB多肽，尤其與SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之對應部分具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性或序列同源性之彼等多肽。在某些實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑包含ActRIIB之細胞外域之截短形式。截短可在ActRIIB多肽之羧基端及/或胺基端處。在某些實施例中，相對於成熟ActRIIB多肽細胞外域，截短可為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個胺基酸長。在某些實施例中，截短可為成熟ActRIIB多肽細胞外域之1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個N端胺基酸。在某些實施例中，截短可為成熟ActRIIB多肽細胞外域之1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個C端胺基酸。舉例而言，ActRIIB之截短形式包括具有胺基酸20-119、20-128、20-129、20-130、20-131、20-132、20-133、20-134、20-131、21-131、22-131、23-131、24-131及25-131之多肽，其中胺基酸位置指在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28中之胺基酸位置。 ActRIIB之額外例示性截短形式包括(i)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸21-29中之任一者處開始(視情況在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之22-25處開始)且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸109-134中之任一者處結束之多肽；(ii)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-29中之任一者處開始(視情況在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之22-25處開始)且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸109-133中之任一者處結束之多肽；(iii)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-24中之任一者處開始(視情況在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之22-25處開始)且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸109-133中之任一者處結束之多肽；(iv)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸21-24中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸109-134中之任一者處結束之多肽；(v)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-24中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸118-133中之任一者處結束之多肽；(vi)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸21-24中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸118-134中之任一者處結束之多肽；(vii)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-24中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸128-133中之任一者處結束之多肽；(viii)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-24中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸128-133中之任一者處結束之多肽；(ix)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸21-29中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸118-134中之任一者處結束之多肽；(x)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-29中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸118-133中之任一者處結束之多肽；(xi)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸21-29中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸128-134中之任一者處結束之多肽；及(xii)在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-29中之任一者處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸128-133中之任一者處結束之多肽。在一個特定實施例中，ActRIIB多肽包含在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置25處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置131處結束之胺基酸序列、基本上由該胺基酸序列組成或由該胺基酸序列組成。在另一特定實施例中，ActRIIB多肽由SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42或43之胺基酸序列組成或基本上由該胺基酸序列組成。本文中所揭示之ActRIIB多肽中之任一者可以均二聚體形式產生。本文中所揭示之ActRIIB多肽中之任一者可以具有異源部分之融合蛋白質形式調配，該異源部分包含來自IgG重鏈之恆定區，諸如Fc域。本文中所揭示之ActRIIB多肽中之任一者可包含對應於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之位置79之位置處的酸性胺基酸，視情況與相對於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之一或多個其他胺基酸取代、缺失或插入組合。在特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑包含具有一或多個胺基酸取代/突變之ActRIIB之細胞外域。此類胺基酸取代/突變可為例如自SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置79處之白胺酸交換為酸性胺基酸，諸如天冬胺酸或麩胺酸。舉例而言，SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之位置L79可在ActRIIB細胞外域多肽中改變以賦予改變之活化素-肌肉抑制素(GDF-11)結合特性。與活化素結合相比L79A及L79P突變在更大程度上減少GDF-11結合。L79E及L79D突變保留GDF-11結合，同時展現極大減少之活化素結合。在某些實施例中，本文中所描述之組合物及方法中使用之ActRIIB信號傳導抑制劑包含ActRIIB細胞外域之截短形式，其亦具有胺基酸取代，例如SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置79處之白胺酸換成酸性胺基酸，諸如天冬胺酸或麩胺酸。在一個特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之亦攜帶胺基酸取代之ActRIIB多肽之細胞外域的截短形式為SEQ ID NO:23。截短及/或具有一或多個胺基酸取代之ActRIIB之形式可連接至如上文所論述之抗體之Fc域。 ActRIIB多肽之功能活性片段可例如藉由篩選以重組方式由編碼ActRIIB多肽之核酸之對應片段產生之多肽獲得。此外，片段可使用此項技術中已知之技術，諸如習知梅里菲爾德固相f-Moc或t-Boc化學方法來化學合成。片段可經產生(以重組方式或藉由化學合成)且測試以鑑定可充當ActRIIB蛋白或藉由活化素介導之信號傳導之拮抗劑(抑制劑)的彼等肽基片段。此外，ActRIIB多肽之功能活性變異體可例如藉由篩選以重組方式由編碼ActRIIB多肽之對應誘變核酸產生之經修飾之多肽之文庫獲得。變異體可經產生且測試以鑑定可充當ActRIIB蛋白或藉由活化素介導之信號傳導之拮抗劑(抑制劑)之彼等者。在某些實施例中，ActRIIB多肽之功能性變異體包含與選自SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之胺基酸序列具有至少75%一致性之胺基酸序列。在某些實施例中，功能性變異體具有與選自SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之胺基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之胺基酸序列。功能性變異體可例如藉由出於諸如增強治療功效或穩定性(例如離體存放期及活體內對蛋白水解降解之耐受性)的目的修飾ActRIIB多肽之結構產生。當經選擇以保留活化素結合時將此類經修飾之ActRIIB多肽認為天然存在之ActRIIB多肽之功能等效物。經修飾之ActRIIB多肽亦可例如藉由胺基酸取代、缺失或添加產生。舉例而言，期望用異白胺酸或纈胺酸獨立置換白胺酸，用麩胺酸鹽置換天冬胺酸鹽、用絲胺酸置換蘇胺酸或用結構上相關胺基酸類似置換胺基酸(例如保守性突變)將不對所得分子之生物活性具有主要影響為合理的。保守性置換為在其側鏈中相關之胺基酸家族內進行的彼等置換。ActRIIB多肽之胺基酸序列變化是否產生功能同源物可容易地藉由評估變異ActRIIB多肽以類似於野生型ActRIIB多肽之方式在細胞中產生反應之能力確定。本文中提供產生突變體，尤其ActRIIB多肽之組合突變體集合以及截短突變體之方法；組合突變體之池尤其適用於鑑定功能變異體序列。篩選此等組合庫之目的可為產生例如可充當促效劑或拮抗劑，或替代地一起具有新穎活性之ActRIIB多肽變異體。已展現ActRIIB之配位體結合袋藉由SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之殘基Y31、N33、N35、L38至T41、E47、E50、Q53至K55、L57、H58、Y60、S62、K74、W78至N83、Y85、R87、A92及E94至F101限定。在此等位置處，吾人預期保守性突變將耐受，儘管K74A突變充分耐受，如同在位置L79處之R40A、K55A、F82A及突變。R40為爪蟾屬(Xenopus)中之K，指示此位置處之鹼性胺基酸將耐受。Q53為牛ActRIIB中之R及非洲爪蟾屬ActRIIB中之K，且因此包括R、K、Q、N及H之胺基酸將在此位置處耐受。因此，用於本文所描述之方法及組合物中之ActRIIB多肽之通式為包含SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸29-109，但視情況在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之20-24或22-25範圍內之胺基酸位置處開始且在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之129-134範圍內之胺基酸位置處結束，且在配位體結合袋中包含不超過1、2、5或15個保守性胺基酸變化及在配位體結合袋中在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸位置40、53、55、74、79及/或82處包含零、一或多個非保守性變化之通式。此類ActRIIB多肽可保留與SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸29-109之序列的大於80%、90%、95%或99%序列一致性或序列同源性。變異性可尤其充分耐受之在結合袋外之位點包括ActRIIB之細胞外域之胺基及羧基端及位置42-46及65-73。在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之位置65處之天冬醯胺至丙胺酸改變(N65A)實際上改善在A64背景中之配位體結合，且因此預期對R64背景中之配位體結合不具有有害影響。此變化可能消除在A64背景中在N65處之糖基化，因此展現可能耐受此區域中之顯著變化。雖然R64A變化經不佳地耐受，R64K經充分耐受，且因此另一鹼性殘基，諸如H可能在位置64處耐受。作為在配位體結合域中具有突變之ActRIIB多肽之一特定實例，ActRIIB之配位體結合域之帶正電荷胺基酸殘基Asp (D80)可突變成不同胺基酸殘基以使得變異ActRIIB多肽優先結合於GDF8而非活化素。在一特定實施例中，使D80殘基變為選自由以下組成之群的胺基酸殘基：不帶電胺基酸殘基、負性胺基酸殘基及疏水性胺基酸殘基。作為另一特定實例，疏水性殘基L79可變為酸性胺基酸天冬胺酸或麩胺酸以極大地減少活化素結合同時保留GDF11結合。如熟習此項技術者將認識到，大多數所描述之突變、變異或修飾可在核酸層級下或在一些情況下，藉由轉譯後修飾或化學合成進行。此類技術為此項技術中熟知。在特定實施例中，本文中所描述之組合物及方法中使用之ActRIIB信號傳導抑制劑包含結合物/融合蛋白質，其包含連接至抗體之Fc部分之ActRIIB受體之細胞外域(例如活化素結合域)。此類結合物/融合蛋白質可包含本文中所揭示之ActRIIB多肽中之任一者(例如SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42或43中之任一者)、此項技術中已知之任何ActRIIB多肽或使用此項技術中已知及/或本文中提供之方法產生之任何ActRIIB多肽。在某些實施例中，細胞外域經由連接子，例如肽連接子連接至抗體之Fc部分。例示性連接子包括短多肽序列，諸如2-10、2-5、2-4、2-3個胺基酸殘基(例如甘胺酸殘基)，諸如Gly-Gly-Gly連接子。在一特定實施例中，連接子包含胺基酸序列Gly-Gly-Gly (GGG)。在另一特定實施例中，連接子包含胺基酸序列Thr-Gly-Gly-Gly (TGGG)。視情況，Fc域在殘基處具有一或多種突變，諸如Asp-265、離胺酸322及Asn-434。在某些情況下，具有此等突變(例如天冬胺酸-265突變)中之一或多者之突變型Fc域與野生型Fc域相比具有降低之結合於Fcγ受體之能力。在其他情況下，具有此等突變(例如Asn-434突變)中之一或多者之突變型Fc域與野生型Fc域相比具有增加之結合於I類MHC相關之Fc受體(FcRN)之能力。包含與Fc域融合之ActRIIB之可溶細胞外域的例示性融合蛋白闡述於SEQ ID NO:20、21、24、25、34、35、38、39、40、41、44、46及47中。在一特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑包含連接至抗體之Fc部分的ActRIIB之細胞外域或其部分，其中該ActRIIB信號傳導抑制劑包含與選自SEQ ID NO:20、21、24、25、34、35、38、39、40、41、44、46及47之胺基酸序列具有至少75%一致性的胺基酸序列。在另一特定實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑包含連接至抗體之Fc部分的ActRIIB之細胞外域或其部分，其中該ActRIIB信號傳導抑制劑包含與選自SEQ ID NO:20、21、24、25、34、35、38、39、40、41、44、46及47之胺基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的胺基酸序列。在一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑為人類ActRIIB受體之細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白質。在另一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑為人類ActRIIB受體之截短細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白質。在另一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑為人類ActRIIB受體之截短細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白質，其中人類ActRIIB受體之截短細胞外域擁有在對應於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸79之胺基酸位置處的胺基酸取代。在一個實施例中，在對應於SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸79之胺基酸位置處的胺基酸取代為用白胺酸取代天冬胺酸(亦即L79D突變)。在一個特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑為SEQ ID NO:24或25，其表示人類ActRIIB受體之細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白質，其中該ActRIIB細胞外域包含具有L79D突變之SEQ ID NO:28之胺基酸25-131。編碼SEQ ID NO:24之ActRIIB-Fc融合蛋白之核酸序列呈現在SEQ ID NO:45中。在另一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRIIB信號傳導抑制劑為SEQ ID NO:34或35，其表示人類ActRIIB受體之細胞外域與IgG1之Fc部分之間的融合蛋白，其中該ActRIIB細胞外域包含具有L79D突變之SEQ ID NO:16之胺基酸25-131。天冬醯胺連接之糖基化識別位點一般包含藉由合適細胞糖基化酶特異性識別之三肽序列，天冬醯胺-X-蘇胺酸(或天冬醯胺-X-絲胺酸) (其中「X」為任何胺基酸)。改變亦可藉由添加一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基或藉由一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基取代至野生型ActRIIB多肽之序列(對於O連接之糖基化位點)進行。在糖基化識別位點之第一或第三胺基酸位置中之一者或兩者處的多種胺基酸取代或缺失(及/或在第二位置處之胺基酸缺失)引起在經修飾之三肽序列處之非糖基化。增加ActRIIB多肽上碳水化合物部分之數目的另一方式為藉由醣苷與ActRIIB多肽之化學或酶促偶合。取決於所使用之偶合模式，糖可連接至(a)精胺酸及組胺酸；(b)游離羧基；(c)游離硫氫基，諸如半胱胺酸之游離硫氫基；(d)游離羥基，諸如絲胺酸、蘇胺酸或羥脯胺酸之游離羥基；(e)芳族殘基，諸如苯丙胺酸、酪胺酸或色胺酸之芳族殘基；或(f)麩醯胺酸之醯胺基。此等方法描述於1987年9月11日公開之國際專利申請案第WO 87/05330號及Aplin及Wriston (1981) CRC Crit. Rev. Biochem., 第259-306頁中，其以引用之方式併入本文中。存在於ActRIIB多肽上之一或多個碳水化合物部分之移除可以化學方式及/或以酶促方式實現。化學去糖基化可涉及例如使ActRIIB多肽暴露於化合物三氟甲磺酸或等效化合物。此處理使得除連接糖(N-乙醯基葡萄胺糖或N-乙醯基半乳胺糖)外之大多數或所有糖裂解，而保持胺基酸序列完整。化學去糖基化由Hakimuddin等人, (1987) Arch. Biochem. Biophys. 259:52及由Edge等人, (1981) Anal. Biochem. 118:131進一步描述。ActRIIB多肽上碳水化合物部分之酶促裂解可藉由使用如由Thotakura等人(1987) Meth. Enzymol. 138:350所描述之各種內醣苷酶及外醣苷酶來達成。ActRIIB多肽之序列可按需要視使用之表現系統類型而調整，因為哺乳動物、酵母、昆蟲及植物細胞可均引入可受肽之胺基酸序列影響之不同糖基化模式。通常，用於人類之ActRIIB蛋白將在提供適當糖基化之哺乳動物細胞株，諸如HEK293或CHO細胞株中表現，儘管其他表現系統，諸如其他哺乳動物表現細胞株、具有工程改造糖基化酶之酵母細胞株及昆蟲細胞預期同樣適用。在特定實施例中，本文中涵蓋突變型ActRIIB多肽，其包含與ActRIIB (R64)-Fc形式相比添加另一個增加ActRIIB-Fc融合蛋白質之血清半衰期的N-連接之糖基化位點(N-X-S/T)。在一特定實施例中，在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之位置24處引入天冬醯胺(A24N)使得產生賦予較長半衰期之NXT序列。其他NX(T/S)序列可在42-44 (NQS)及65-67 (NSS)處發現，儘管後者可能用位置64處之R (亦即在R64多肽中)不有效地糖基化。N-X-S/T序列可一般在以上詳述之ActRIIB之配位體結合袋外的位置處引入。用於引入非內源N-X-S/T序列之尤其適合之位點包括SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28之胺基酸20-29、20-24、22-25、109-134、120-134或129-134。N-X-S/T序列亦可引入ActRIIB序列與Fc或其他融合物組分之間的連接子中。此類位點可以最少努力藉由在相對於預先存在之S或T之正確位置中引入N或藉由在對應於預先存在之N之位置處引入S或T引入。因此，將產生N連接之糖基化位點之所需變化為A24N、R64N、S67N (可能與N65A變化組合)、E106N、R112N、G120N、E123N、P129N、A132N、R112S及R112T (其中所有胺基酸位置對應於可在SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:28中發現其之位置)。由於糖基化提供之保護，預期經糖基化之任何S可在不產生免疫原性位點之情況下改變成T。同樣地，預期待糖基化之任何T可改變成S。因此，本文中涵蓋變化S67T及S44T。同樣地，在A24N變異體中，可使用S26T變化。因此，ActRIIB多肽可包括一或多個額外、非內源N-連接之糖基化共同序列。本文中提供多種篩選分析，且此類分析可用於評估ActRIIB多肽變異體。舉例而言，可針對結合至ActRIIB配位體、防止ActRIIB配位體與ActRIIB多肽之結合或干擾由ActRIIB配位體所引起之信號傳導之能力篩選ActRIIB多肽變異體。ActRIIB多肽或其變異體之活性亦可在基於細胞之分析或活體內分析中測試。可產生相對於天然存在之ActRIIB多肽，具有選擇性或一般增加之效能的組合衍生變異體。同樣地，突變誘發可產生具有與對應野生型ActRIIB多肽顯著不同之細胞內半衰期之變異體。舉例而言，可使改變之蛋白質對蛋白水解降解或導致天然ActRIIB多肽之破壞或者失活之其他細胞過程較穩定或較不穩定。此等變異體及編碼其之基因可用於藉由調節ActRIIB多肽之半衰期改變ActRIIB多肽含量。舉例而言，短半衰期可產生更短暫生物影響且可允許較緊密控制個體內之重組ActRIIB多肽含量。在Fc融合蛋白質中，突變可在連接子(若存在)及/或Fc部分中進行以改變蛋白質之半衰期。組合庫可藉助於編碼各包括至少一部分潛在ActRIIB多肽序列之多肽庫之基因之簡併庫產生。舉例而言，可將合成寡核苷酸之混合物以酶促方式接合至基因序列中以使得簡併組之潛在ActRIIB多肽核苷酸序列可作為個別多肽，或替代地作為一組較大融合蛋白質(例如用於噬菌體呈現)表現。存在許多可由簡併寡核苷酸序列產生潛在同源物庫之方式。簡併基因序列之化學合成可在自動DNA合成器中進行，且合成基因隨後接合至合適載體中以便表現。簡併寡核苷酸之合成在此項技術中眾所周知(參見例如Narang, S A (1983) Tetrahedron 39:3；Itakura等人, (1981) Recombinant DNA, Proc. 3rd Cleveland Sympos. Macromolecules, AG Walton編, Amsterdam: Elsevier 第273-289頁；Itakura等人, (1984) Annu. Rev. Biochem. 53:323；Itakura等人, (1984) Science 198:1056：Ike等人, (1983) Nucleic Acid Res. 11:477)。此類技術已用於其他蛋白質之定向進化(參見例如Scott等人, (1990) Science 249:386-390；Roberts等人, (1992) PNAS USA 89:2429-2433；Devlin等人, (1990) Science 249: 404-406；Cwirla等人, (1990) PNAS USA 87: 6378-6382；以及美國專利第5,223,409號、第5,198,346號及第5,096,815號)。或者，可利用其他形式之突變誘發產生組合庫。舉例而言，ActRIIB多肽變異體可藉由使用例如丙胺酸掃描突變誘發及其類似技術篩選(Ruf等人, (1994) Biochemistry 33:1565-1572；Wang等人, (1994) J. Biol. Chem. 269:3095-3099；Balint等人, (1993) Gene 137:109-118；Grodberg等人, (1993) Eur. J. Biochem. 218:597-601；Nagashima等人, (1993) J. Biol. Chem. 268:2888-2892；Lowman等人, (1991) Biochemistry 30:10832-10838；及Cunningham等人, (1989) Science 244:1081-1085)、藉由連接子掃描突變誘發(Gustin等人, (1993) Virology 193:653-660；Brown等人, (1992) Mol. Cell Biol. 12:2644-2652；McKnight等人, (1982) Science 232:316)、藉由飽和突變誘發(Meyers等人, (1986) Science 232:613)、藉由PCR突變誘發(Leung等人, (1989) Method Cell Mol Biol 1:11-19)或藉由隨機突變誘發，包括化學突變誘發等(Miller等人, (1992) A Short Course in Bacterial Genetics, CSHL Press, Cold Spring Harbor, N.Y.；及Greener等人, (1994) Strategies in Mol Biol 7:32-34)產生及自庫分離。連接子掃描突變誘發(尤其在組合設置中)為鑑定截短(生物活性)形式之ActRIIB多肽之有吸引力的方法。此項技術中已知各種用於篩選藉由點突變及截短製造之組合庫之基因產物，且就此而言用於針對具有某一特性之基因產物篩選cDNA庫的技術。此類技術將一般適合於快速篩選藉由ActRIIB多肽之組合突變誘發產生之基因庫。篩選大型基因庫之最廣泛使用之技術通常包含將基因庫選殖至可複製表現載體中，用所得載體庫轉型合適細胞，且在所需活性之偵測促進編碼產物經偵測之基因之載體之相對容易分離的條件下表現組合基因。較佳分析包括活化素結合分析及活化素介導之細胞信號傳導分析。在某些實施例中，ActRIIB多肽可進一步包含除任何天然存在於ActRIIB多肽中之修飾以外的轉譯後修飾。此類修飾包括(但不限於)乙醯化、羧化、糖基化、磷酸化、脂質化及醯化。因此，經修飾之ActRIIB多肽可含有非胺基酸要素，諸如聚乙二醇、脂質、多醣或單醣及磷酸鹽。此等非胺基酸要素對ActRIIB多肽之功能性之影響可藉由熟習此項技術者已知之任何方法測試。當ActRIIB多肽在細胞中藉由裂解新生形式之ActRIIB多肽產生時，轉譯後處理亦可對於蛋白質之適當摺疊及/或功能重要。不同細胞(諸如CHO、HeLa、MDCK、293、W138、NIH-3T3或HEK293)對於此等轉譯後活性具有特定細胞機制及特徵機制且可經選擇以確保ActRIIB多肽之正確修飾及處理。在某些態樣中，ActRIIB多肽之功能變異體或經修飾之形式包括具有至少一部分ActRIIB多肽及一或多個融合域之融合蛋白。此等融合域之熟知實例包括(但不限於)聚組胺酸、Glu-Glu、麩胱甘肽S轉移酶(GST)、硫氧還原蛋白、蛋白質A、蛋白質G、免疫球蛋白重鏈恆定區(Fc)、麥芽糖結合蛋白(MBP)或人類血清白蛋白。融合域可經選擇以便賦予所需特性。舉例而言，一些融合域特別適用於藉由親和性層析法分離融合蛋白質。出於親和純化之目的，使用用於親和性層析法之相關基質，諸如麩胱甘肽、澱粉酵素及鎳或鈷結合樹脂。許多此等基質可以「套組」形式獲得，諸如對(HIS6)融合搭配物適用之Pharmacia GST純化系統及QIAexpressTM系統(Qiagen)。作為另一實例，融合域可經選擇以便促進ActRIIB多肽之偵測。此等偵測域之實例包括各種螢光蛋白質(例如GFP)以及「抗原決定基標籤」，其通常為特異性抗體可用之短肽序列。特異性單株抗體容易可用之熟知抗原決定基標籤包括FLAG、流感病毒血球凝集素(HA)及c-myc標籤。在一些情況下，融合域具有蛋白酶裂解位點(諸如用於因子Xa或凝血酶)，其允許相關蛋白酶部分消化融合蛋白且藉此自其釋放重組型蛋白質。釋放之蛋白質可隨後藉由隨後層析分離自融合域分離。在某些較佳實施例中，ActRIIB多肽與活體內穩定ActRIIB多肽之域(「穩定劑」域)融合。「穩定」意謂增加血清半衰期，不論此是否由於破壞減少、腎臟清除率降低或其他藥物動力學影響之任何者。與免疫球蛋白之Fc部分融合已知賦予各種蛋白質所需藥物動力學特性。同樣地，與人類血清白蛋白融合可賦予所需特性。可選擇之其他類型之融合域包括多聚化(例如二聚、四聚)域及功能域(賦予額外生物功能，諸如視需要進一步刺激骨骼生長或肌肉生長)。應瞭解融合蛋白質之不同要素可以符合所需功能性之任何方式配置。舉例而言，ActRIIB多肽可針對異源域經置放C端，或替代地異源域可針對ActRIIB多肽經置放C端。ActRIIB多肽域及異源域在融合蛋白中無需相鄰，且額外域或胺基酸序列可經包括C端或N端至任一域或域之間。在某些實施例中，ActRIIB多肽含有能夠使ActRIIB多肽穩定之一或多種修飾。舉例而言，此等修飾增強ActRIIB多肽之活體外半衰期，增強ActRIIB多肽之循環半衰期或減少ActRIIB多肽之蛋白水解降解。此等穩定修飾包括(但不限於)融合蛋白(包括例如包含ActRIIB多肽及穩定劑域之融合蛋白)、修飾糖基化位點(包括例如添加糖基化位點至ActRIIB多肽)及修飾碳水化合物部分(包括例如自ActRIIB多肽移除碳水化合物部分)。在融合蛋白質之情況下，ActRIIB多肽融合至穩定劑域，諸如IgG分子(例如Fc域)。如本文中所使用，術語「穩定劑域」不僅指融合域(例如Fc)，如在融合蛋白質之情況下，且亦包括非蛋白性修飾，諸如碳水化合物部分，或非蛋白性聚合物，諸如聚乙二醇。在某些實施例中，自其他蛋白質分離或者實質上不含其他蛋白質之分離及/或純化形式之ActRIIB多肽可與本文所描述之方法及組合物一起使用。ActRIIB多肽將一般藉由自重組型核酸表現產生。在某些態樣中，本文中提供編碼ActRIIB多肽(例如可溶性ActRIIB多肽)中之任一者之經分離及/或重組型核酸，包括本文中所揭示之片段、功能性變異體及融合蛋白質。舉例而言，SEQ ID NO:19編碼天然存在之人類ActRIIB前驅體多肽。個體核酸可為單股或雙股。此類核酸可為DNA或RNA分子。此等核酸可例如用於製造ActRIIB多肽之方法中或用作直接治療劑(例如在基因治療方法中)。在某些態樣中，應進一步理解，編碼ActRIIB多肽之核酸包括作為SEQ ID NO:19之變異體之核酸以及編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)之變異體。變異核苷酸序列包括相差一或多個核苷酸取代、添加或缺失之序列，諸如對偶基因變異體。在某些實施例中，可使用之經分離或重組型核酸序列與SEQ ID NO:19或編碼可溶性ActRIIB多肽之核酸序列(例如編碼SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%一致性。一般熟習此項技術者將瞭解，與SEQ ID NO:19或編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)及SEQ ID NO:19或編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)之變異體互補的核酸序列可與本文中所描述之方法及組合物一起使用。在其他實施例中，核酸序列可分離、重組及/或與異源核苷酸序列融合或在DNA庫中。在其他實施例中，可使用之核酸亦包括在高嚴格度條件下與SEQ ID NO:19中指定之核苷酸序列或編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)、SEQ ID NO:19或編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO:17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)之補體序列雜交的核苷酸序列或其片段。如上文所論述，一般熟習此項技術者將易於理解，促進DNA雜交之適合的嚴格度條件可變化。一般熟習此項技術者應理解可改變促進DNA雜交之合適嚴格條件。舉例而言，吾人可在約攝氏45度下在6.0 ×氯化鈉/檸檬酸鈉(SSC)下進行雜交，接著在攝氏50度下進行2.0 × SSC之洗滌。舉例而言，洗滌步驟中之鹽濃度可選自在攝氏50度下約2.0 × SSC之低嚴格度至在攝氏50度下約0.2 × SSC 之高嚴格度。此外，洗滌步驟中之溫度可自在室溫(約攝氏22度)下之低嚴格度條件增加至在約攝氏65度下之高嚴格度條件。可改變溫度及鹽兩者，或溫度或鹽濃度可保持恆定，而改變另一變數。在一個實施例中，在室溫下在6 × SSC之低嚴格度條件下雜交，接著在室溫下在2 × SSC下洗滌之核酸可與本文所描述之方法及組合物一起使用。歸因於基因密碼中之簡併，亦可使用與如SEQ ID NO:19中所闡述之核酸或編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO：17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸)不同的經分離之核酸。舉例而言，藉由一種以上三重態指定多種胺基酸。指定相同胺基酸之密碼子或同義語(例如CAU及CAC為組胺酸之同義語)可引起不影響蛋白質之胺基酸序列之「靜默」突變。然而，吾人預期引起本發明蛋白質之胺基酸序列改變之DNA序列多形現象將存在於哺乳動物細胞中。熟習此項技術者將瞭解編碼特定蛋白質之核酸之一或多種核苷酸(多達約3-5%之核苷酸)之此等變異可由於天然對偶基因變異存在於給定物種之個體中。任何及所有此等核苷酸變異及所得胺基酸多形現象可與本文所描述之方法及組合物一起使用。在某些實施例中，重組型核酸可可操作地連接於表現構築體中之一或多個調節核苷酸序列。調節核苷酸序列將一般適合於用於表現之宿主細胞。對於多種宿主細胞，此項技術中已知許多類型之合適表現載體及適合調節序列。通常該一或多個調節核苷酸序列可包括(但不限於)啟動子序列、前導或信號序列、核糖體結合位點、轉錄起始及終止序列、轉譯起始及終止序列及強化子或活化因子序列。如此項技術中已知之組成性或誘導性啟動子可與本文所描述之方法及組合物一起使用。啟動子可為天然存在之啟動子，或組合一種以上啟動子之元件之混合啟動子。表現構築體可存在於細胞中游離基因體(諸如質體)上，或表現構築體可插入染色體中。在一個較佳實施例中，表現載體含有可選擇標記基因以允許選擇經轉型宿主細胞。可選擇標記基因為此項技術中熟知且將隨使用之宿主細胞變化。在某些態樣中，在包含編碼ActRIIB多肽且可操作地連接於至少一個調節序列之核苷酸序列之表現載體中提供本發明之核酸。調節序列為此項技術中公認的且經選擇以引導ActRIIB多肽之表現。因此，術語調節序列包括啟動子、強化子及其他表現控制元件。例示性調節序列描述於Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology, Academic Press, San Diego, Calif. (1990)中。舉例而言，當可操作地連接於DNA序列時控制其表現之廣泛多種表現控制序列中之任一者可在此等載體中使用以表現編碼ActRIIB多肽之DNA序列。此類適用之表現控制序列包括例如SV40之早期及晚期啟動子、tet啟動子、腺病毒或細胞巨大病毒立即早期啟動子、RSV啟動子、lac系統、trp系統、TAC或TRC系統、表現藉由T7核糖核酸聚合酶引導之T7啟動子、噬菌體λ之主要操縱子及啟動子區域、fd鞘蛋白之控制區域、3-磷酸甘油酸激酶或其他糖分解酶之啟動子、酸性磷酸酶之啟動子(例如Pho5)、酵母α-交配因子之啟動子、桿狀病毒系統及已知控制原核或真核細胞或其病毒基因之表現之其他序列的多面體啟動子及其各種組合。應理解表現載體之設計可視諸如欲轉型之宿主細胞之選擇及/或需要表現之蛋白質之類型的因素而定。此外，亦應考慮載體之複本數、控制該複本數之能力及藉由載體(諸如抗生素標記)編碼之任何其他蛋白質之表現。重組型核酸可藉由將選殖基因或其部分接合至適用於在原核細胞、真核細胞(酵母、禽類、昆蟲或哺乳動物)或兩者中表現之載體中來產生。用於產生重組型ActRIIB多肽之表現載體包括質體及其他載體。舉例而言，適合的載體包括以下類型之質體：pBR322衍生之質體、pEMBL衍生之質體、pEX衍生之質體、pBTac衍生之質體及pUC衍生之質體，其用於在原核細胞，諸如大腸桿菌中表現。一些哺乳動物表現載體含有促進載體在細菌中繁殖之原核序列及在真核細胞中表現之一或多個真核轉錄單位兩者。pcDNAI/amp、pcDNAI/neo、pRc/CMV、pSV2gpt、pSV2neo、pSV2-dhfr、pTk2、pRSVneo、pMSG、pSVT7、pko-neo及pHyg衍生之載體為適用於轉染真核細胞之哺乳動物表現載體之實例。此等載體中之一些用來自細菌質體，諸如pBR322之序列修飾以促進在原核細胞及真核細胞中複製及抗藥性選擇。替代地，諸如牛乳頭狀瘤病毒(BPV-1)或埃-巴二氏病毒(pHEBo、pREP衍生及p205)之病毒衍生物可用於蛋白質在真核細胞中之短暫表現。其他病毒(包括反轉錄病毒)表現系統之實例可見於以下基因療法遞送系統之描述中。質體之製備及宿主生物體之轉型中使用之各種方法在此項技術中熟知。關於原核及真核細胞之其他適合的表現系統以及一般重組程序，參見Sambrook、Fritsch及Maniatis編之Molecular Cloning A Laboratory Manual, 第3版(Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001)。在一些情況下，可能需要藉由使用桿狀病毒表現系統表現重組型多肽。此等桿狀病毒表現系統之實例包括pVL衍生之載體(諸如pVL1392、pVL1393及pVL941)、pAcUW衍生之載體(諸如pAcUW1)及pBlueBac衍生之載體(諸如含有β-gal之pBlueBac III)。在一個較佳實施例中，載體將經設計以在CHO細胞中產生本發明之ActRIIB多肽，諸如Pcmv-Script載體(Stratagene, La Jolla, Calif.)、pcDNA4載體(Invitrogen, Carlsbad, Calif.)及pCI-neo載體(Promega, Madison, Wis.)。如將顯而易見，本發明基因構築體可用於引起本發明ActRIIB多肽在於培養物中繁殖之細胞中表現例如以產生蛋白質，包括融合蛋白或變異蛋白，以便純化。本發明亦係關於經重組型基因轉染之宿主細胞，該重組型基因包括個體ActRIIB多肽中之一或多者之編碼序列(例如SEQ ID NO:19或編碼可溶性ActRIIB多肽之此等核酸序列(例如編碼SEQ ID NO：17、18、23、26、27、29、30、31、32、33、36、37、42及43之核酸))。宿主細胞可為任何原核或真核細胞。舉例而言，ActRIIB多肽可在細菌細胞(諸如大腸桿菌)、昆蟲細胞(例如使用桿狀病毒表現系統)、酵母或哺乳動物細胞中表現。其他適合之宿主細胞為熟習此項技術者已知。因此，本文中提供產生ActRIIB多肽之方法。舉例而言，用編碼ActRIIB多肽之表現載體轉染之宿主細胞可在合適條件下培養以允許ActRIIB多肽之表現發生。ActRIIB多肽可自含有ActRIIB多肽之細胞與培養基之混合物分泌及分離。替代地，ActRIIB多肽可以細胞質方式或在膜部分中保留且收集細胞，溶解且分離蛋白質。細胞培養物包括宿主細胞、培養基及其他副產物。用於細胞培養之適合培養基在此項技術中熟知。本發明ActRIIB多肽可使用此項技術中已知之用於純化蛋白質之技術自細胞培養基、宿主細胞或兩者分離，該等技術包括離子交換層析、凝膠過濾層析、超過濾、電泳、用對ActRIIB多肽之特定抗原決定基具有特異性之抗體免疫親和純化及用結合至與ActRIIB多肽融合之域之試劑親和純化(例如蛋白A管柱可用於純化ActRIIB-Fc融合物)。在一個較佳實施例中，ActRIIB多肽為含有促進其純化之域的融合蛋白質。在一個較佳實施例中，純化藉由一系列管柱層析步驟實現，該等步驟以任何順序包括例如以下中之三者或三者以上：蛋白質A層析、Q瓊脂糖層析、苯基瓊脂糖層析、尺寸排外層析及陽離子交換層析。純化可用病毒過濾及緩衝液更換完成。如本文中所展現，將ActRIIB-hFc蛋白質純化至如藉由尺寸排外層析所測定之＞98%及如藉由SDS PAGE所測定之＞95%之純度。此純度水準足以達成對小鼠中之骨骼之所需影響及在小鼠、大鼠及非人類靈長類動物中之可接受安全概況。在另一實施例中，針對純化前導序列，諸如在重組ActRIIB多肽之所需部分之N端處的聚-(His)/腸激酶裂解位點序列編碼之融合基因可允許藉由使用Ni²⁺ 金屬樹脂之親和性層析純化表現之融合蛋白質。純化前導序列可隨後藉由用腸激酶處理來隨後移除以提供純化ActRIIB多肽(例如參見Hochuli等人, (1987) J. Chromatography 411:177；及Janknecht等人, PNAS USA 88:8972)。製造融合基因之技術已為吾人所熟知。實質上，針對不同多肽序列編碼之各種DNA片段之接合根據習知技術進行，其使用用於連接之鈍端或交錯端末端、提供合適末端之限制酶消化、按需要黏端之填充、避免非所需接合之鹼性磷酸酶處理及酶促連接。在另一實施例中，融合基因可藉由包括自動DNA合成器之習知技術合成。替代地，基因片段之PCR擴增可使用錨定引子進行，該等錨定引子在可隨後黏接以產生嵌合基因序列之兩個連續基因片段之間產生互補突出物(參見例如Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel等人編, John Wiley & Sons: 1992)。 ActRIIB-Fc融合蛋白可在來自pAID4載體(SV40 ori/強化子，CMV啟動子)之穩定轉染之CHO-DUKX Bl 1細胞中使用SEQ ID NO: 8之組織纖維蛋白溶酶原前導序列表現。Fc部分可包含人類IgGl Fc序列，如SEQ ID NO:7中所示。在某些實施例中，在表現後，含有之蛋白質平均具有每分子ActRIIB-Fc融合蛋白質，在約1.5與2.5莫耳之間的唾液酸。在某些實施例中，ActRIIB-Fc融合物之長血清半衰期可為在人類個體中25-32天。另外，CHO細胞表現物質可具有比針對在人類293細胞中表現之ActRIIB-hFc融合蛋白報導之親和力高的對活化素B配位體之親和力(del Re等人, J Biol Chem. 2004 Dec 17;279(51):53126-35)。另外，不希望受理論約束，使用TPA前導序列提供比其他前導序列大之產量，且不同於用天然前導序列表現之ActRIIB-Fc，可提供高純度之N端序列。使用天然前導序列可產生ActRIIB-Fc之各具有不同N端序列之兩個主要物種。 7.9.3 其他ACTRII受體信號傳導抑制劑在某些實施例中，本文中所描述之組合物及方法中使用之ActRII受體之信號傳導抑制劑為核酸化合物。抑制ActRII受體之核酸化合物之類別之實例包括反義核酸、siRNA或RNAi構築體及催化核酸構築體。核酸化合物可為單股或雙股。雙股化合物亦可包括突出物或非互補之區域，其中股中之一者或另一者為單股。單股化合物可包括自互補之區域，意謂化合物可形成具有雙螺旋結構區域之所謂「髮夾」或「莖-環」結構。在某些實施例中，抑制ActRII受體之核酸化合物可包含與由不超過全長ActRII受體核酸序列或活化素核酸序列(例如活化素A或活化素B子單位，亦稱為βA或βB之核酸序列)之1000個、不超過500個、不超過250個、不超過100個或不超過50個、35個、30個、25個、22個、20個或18個核苷酸組成之區域互補的核苷酸序列。在特定實施例中，互補區將為至少8個核苷酸，且視情況至少10個或至少15個核苷酸，且視情況15與25個核苷酸之間。互補區可屬於標靶轉錄物之內含子、編碼序列或非編碼序列，諸如編碼序列部分。一般而言，抑制ActRII受體之核酸化合物之長度將為約8至約500個核苷酸或鹼基對，且視情況長度將為約14至約50個核苷酸。抑制ActRII受體之核酸化合物可為DNA (尤其用作反義)、RNA或RNA:DNA雜交物。任一股可包括DNA與RNA之混合物以及不能容易地分類為DNA或RNA之修飾形式。同樣地，雙股核酸化合物可為DNA:DNA、DNA:RNA或RNA:RNA，且任一股亦可包括DNA與RNA之混合物，以及不能容易地分類為DNA或RNA之修飾形式。抑制ActRII受體之核酸化合物可包括多種修飾中之任一者，包括對主鏈(天然核酸中之糖-磷酸酯部分，包括核苷酸間鍵)或鹼基部分(天然核酸之嘌呤或嘧啶部分)之一種或修飾。在某些實施例中，反義核酸化合物之長度將為約15至約30個核苷酸且將通常含有一或多種修飾以改善某些特徵，諸如在血清中之穩定性、在細胞中之穩定性或在其中可能遞送化合物之位置(諸如在經口遞送化合物之情況下為胃及對於吸入化合物為肺)中之穩定性。在RNAi構築體之情況下，與標靶轉錄物互補之股將一般為RNA或其修飾。另一股可為RNA、DNA或任何其他變體。雙股或單股「髮夾」RNAi構築體之雙螺旋部分之長度為可在某些實施例中為18至40個核苷酸且視情況長度為約21至23個核苷酸，只要其充當Dicer基質。催化或酶促核酸可為核糖核酸酶或DNA酶且亦可含有經修飾之形式。在某些實施例中，抑制ActRII受體之核酸化合物在生理條件下及在其中無義或有義控制具有極少影響或無影響之濃度下可將其目標之表現抑制約50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或99%以上。測試核酸化合物之效果之濃度包括1、5、10微莫耳或10微莫耳以上。在其他實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII受體之信號傳導抑制劑為抗體。此等抗體包括結合至活化素(尤其活化素A或B子單位，亦稱為βA或βB)且破壞ActRII受體結合之抗體；及結合至ActRII受體多肽(例如可溶ActRIIA或可溶ActRIIB多肽)且破壞活化素結合之抗體。藉由使用衍生自ActRII受體多肽或活化素多肽之免疫原，抗蛋白質/抗肽免疫血清或單株抗體可藉由標準方案製造(參見例如Harlow及Lane編之Antibodies: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Press: 1988))。諸如小鼠、倉鼠或兔之哺乳動物可用免疫原性形式之ActRII受體多肽、能夠引發抗體反應之抗原片段或融合蛋白質免疫。賦予蛋白質或肽免疫原性之技術包括與載體結合或此項技術中熟知之其他技術。ActRII受體或活化素多肽之免疫原性部分可在佐劑存在下投與。免疫接種之進程可藉由偵測血漿或血清中之抗體效價監測。標準ELISA或其他免疫分析可與作為抗原之免疫原一起使用以評估抗體含量。在用ActRII受體多肽之抗原製劑將動物免疫接種之後，可獲得免疫血清且若需要可自血清分離多株抗體。為了產生單株抗體，可自免疫動物收集產生抗體之細胞(淋巴細胞)且藉由標準體細胞融合程序用諸如骨髓瘤細胞之永生化細胞融合以產生融合瘤細胞。此類技術在此項技術中熟知，且包括例如融合瘤技術(最初由Kohler及Milstein, (1975) Nature, 256: 495-497發展)、人類B細胞融合瘤技術(Kozbar等人, (1983) Immunology Today, 4: 72)及產生人類單株抗體之EBV融合瘤技術(科爾等人, (1985) Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc. 第77-96頁)。融合瘤細胞可以免疫化學方式篩選以便產生與ActRII受體多肽特異性反應之抗體及自包含此等融合瘤細胞之培養物分離之單株抗體。如本文所用之術語「抗體」意欲包括亦與本發明多肽特異性反應之其片段。可使用習知技術將抗體分成片段，且以與上文針對整個抗體所描述相同之方式對片段進行效用篩選。舉例而言，F(ab)2片段可藉由用胃蛋白酶處理抗體而產生。可對所得F(ab)2片段進行處理以還原二硫橋鍵，產生Fab片段。抗體進一步意欲包括具有由抗體之至少一個CDR區賦予之對ActRII受體或活化素多肽之親和力的雙特異性、單鏈、嵌合、人類化及完全人類分子。抗體可進一步包含連接至其且能夠經偵測之標籤(例如標籤可為放射性同位素、螢光化合物、酶或酶輔因子)。在某些實施例中，抗體為重組抗體，該術語包涵部分藉由分子生物學技術產生之任何抗體，包括CDR移植或嵌合抗體、自庫選擇之抗體域組裝的人類或其他抗體、單鏈抗體及單域抗體(例如人類VH蛋白或駱駝VHH蛋白質)。在某些實施例中，抗體可為單株抗體，且在某些實施例中。舉例而言，用於產生特異性結合於ActRII受體多肽或活化素多肽之單株抗體之方法可包含投與小鼠一定量的包含可有效地刺激可偵測之免疫反應之抗原多肽的免疫原性組合物，自小鼠獲得抗體產生細胞(例如來自脾之細胞)及使抗體產生細胞與骨髓瘤細胞融合以獲得抗體產生融合瘤，及測試該抗體產生融合瘤以鑑別產生特異性結合於抗原之單株抗體之融合瘤。在獲得後，融合瘤可在細胞培養物中視情況在其中融合瘤衍生細胞產生特異性結合至抗原之單株抗體的培養條件中繁殖。可自細胞培養物純化單株抗體。如關於抗體使用之形容詞「對……具有特異性反應性」係如此項技術中一般所理解，意指抗體在相關抗原(例如ActRII受體多肽)與其他不相關抗原之間具有充分選擇性，以使該抗體至少適用於偵測特定類型之生物樣品中該相關抗原之存在。在使用抗體之某些方法(諸如治療應用)中，可能需要較高程度之結合特異性。單株抗體(與多株抗體相比)一般比較容易有效區分所需抗原與交叉反應多肽。影響抗體:抗原相互作用之特異性之一個特徵為抗體對抗原之親和力。儘管可在不同親和力範圍內達成所需特異性，一般而言較佳抗體之親和力(解離常數)將為約10^-6 、10^-7 、10^-8 、10^-9 或10^-9 以下。若活化素與ActRII受體之間的結合非常緊密，則可預期中和抗活化素或抗ActRII受體抗體之解離常數一般將為10^-10 或10^-10 以下。此外，用於篩選抗體以便鑑定所需抗體之技術可能影響所得抗體之特性。舉例而言，若抗體用於在溶液中結合抗原，則可能需要測試溶液結合性。有多種不同技術可用於測試抗體與用於判別特定所需抗體之抗原之間的相互作用。此等技術包括ELISA、表面電漿子共振結合分析(例如Biacore.TM.結合分析, Biacore AB, Uppsala, Sweden)、夾心分析(例如IGEN International, Inc., Gaithersburg, Md.之順磁珠粒系統)、西方墨點、免疫沈澱分析及免疫組織化學。在某些實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII信號傳導抑制劑包括活化素之替代形式，尤其具有I型受體結合域中之變化之彼等可結合於II型受體且未能形成活性三元複合物。在某些實施例中，抑制活化素A、B、C或E或尤其ActRII受體表現之核酸(諸如反義分子、siRNA或核糖核酸酶)可用於本文所描述之組合物及方法中。在某些實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII受體信號傳導抑制劑相對於TGF-β家族之其他成員，尤其相對於GDF8及活化素，展示對抑制GDF11介導之信號傳導之選擇性。在其他實施例中，用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII受體之信號傳導抑制劑為具有ActRII受體拮抗劑活性之非抗體蛋白，包括抑制素(亦即抑制素α子單位)、卵泡抑素(例如卵泡抑素-288及卵泡抑素-315)、賽貝魯斯(Cerberus)、卵泡抑素相關蛋白(「FSRP」)、內皮因子、活化素C、α(2)-巨球蛋白及M108A (在位置108處甲硫胺酸至丙胺酸變化)突變活化素A。在一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII受體信號傳導抑制劑為拮抗活化素生物活性及/或結合至活化素之卵泡抑素多肽。術語「卵泡抑素多肽」包括包含卵泡抑素之任何天然存在之多肽以及保留適用活性之其任何變異體(包括突變體、片段、融合物及肽模擬物形式)之多肽，且進一步包括卵泡抑素之任何功能單體或多聚物。保留活化素結合特性之卵泡抑素多肽之變異體可基於涉及卵泡抑素及活化素相互作用之先前研究鑑定。舉例而言，以全文引用之方式包括在本文中之WO2008/030367揭示顯示對於活化素結合重要之特異性卵泡抑素域(「FSD」)。卵泡抑素多肽包括衍生自具有與卵泡抑素多肽之序列具有至少約80%一致，且視情況至少85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或99%以上一致性之序列的任何已知卵泡抑素之序列的多肽。卵泡抑素多肽之實例包括如例如以全文引用之方式包括在本文中之WO2005/025601中所描述之成熟卵泡抑素多肽或人類卵泡抑素前驅體多肽之較短同功異型物或其他變異體。在一特定實施例中，欲用於本文所描述之組合物及方法中之ActRII受體信號傳導抑制劑為拮抗活化素生物活性及/或結合至活化素之卵泡抑素樣相關基因(FLRG)。術語「FLRG多肽」包括包含FLRG之任何天然存在之多肽以及保留適用活性之其任何變異體(包括突變體、片段、融合物及肽模擬物形式)的多肽。保留活化素結合特性之FLRG多肽之變異體可使用FLRG及活化素相互作用之常規方法鑑定。參見例如美國專利第6,537,966號，其以全文引用的方式包括於本文中。FLRG多肽包括衍生自具有與FLRG多肽序列至少約80%一致，且視情況至少85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或99%以上一致性之序列的任何已知FLRG序列之多肽。在某些實施例中，卵泡抑素多肽及FLRG多肽之功能變異體或經修飾之形式包括具有至少一部分卵泡抑素多肽或FLRG多肽及一或多個融合域，諸如促進多肽之分離、偵測、穩定化或多聚合之域的融合蛋白質。適合之融合域以上參考ActRIIA及ActRIIB多肽詳細地論述。在一個實施例中，ActRII信號傳導抑制劑為包含融合至Fc域之卵泡抑素多肽之活化素結合部分的融合蛋白質。在另一實施例中，ActRII受體信號傳導抑制劑為包含融合至Fc域之FLRG多肽之活化素結合部分的融合蛋白質。 7.10 分析可測試各種ActRII多肽變異體或可溶ActRII多肽變異體之抑制ActRII之能力。此外，可測試化合物抑制ActRII之能力。在確認ActRII活性之信號傳導抑制劑後，此等化合物可與本發明之方法一起使用。ActRII可為ActRIIA或ActRIIB。以下分析針對ActRIIA所描述但可類似地針對ActRIIB進行。此等分析可用於(i)鑑別個體中之貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或至增生性CMML個體子群；(ii)診斷個體中之貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或非增生性CMML個體；(iii)監測個體中之貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或非增生性CMML疾病接續及/或進程；(iv)監測個體中之本文所提供之用於治療個體中之貧血、需要RBC輸注之貧血、MDS及/或非增生性CMML之方法的功效；及/或(v)監測本文中所描述之ActRII信號傳導抑制劑在個體中之功效。 7.10.1 參考群體在某些實施例中，參考群體之尺寸可為約1、5、10、25、50、75、100、200、250、300、400、500或1000個個體。在某些實施例中，參考群體由隨機志願者組成。在某些實施例中，參考群體由健康人類組成。在某些實施例中，參考群體由年齡、體重及/或性別與如章節7.8中所描述之患者群體相同之人類組成。在某些實施例中，參考群體由無血液相關病症之人類組成。在某些實施例中，參考群體由患有血液相關病症之人類組成，其中參考群體中之人類不具有環形含鐵胚血球。在某些實施例中，參考群體由患有血液相關病症之人類組成，其中該人類中小於15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或1%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，參考群體由患有血液相關病症之人類組成，其中該人類中小於15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球。在某些實施例中，血液相關病症為如章節7.8中所描述之血液相關病症。在某些實施例中，參考群體由無貧血之人類組成。在某些實施例中，參考群體由無需要RBC輸注之貧血的人類組成。在某些實施例中，參考群體由無MDS之人類組成。在某些實施例中，參考群體由無非增生性CMML之人類組成。 7.10.2 環形含鐵胚血球環形含鐵胚血球為異常紅血球母細胞。此外，某些與MDS相關之體細胞突變引起環型含鐵胚血球形成及無效的紅血球生成。編接因子3B1 (SF3B1)中之主要突變與環形含鐵胚血球之形成相關。如本文中所使用，「RS+」係指其中個體中至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之個體。在某些實施例中，環形含鐵胚血球之百分比為成為環形含鐵胚血球之紅血球母細胞之百分比。在某些實施例中，環形含鐵胚血球之百分比為成為環形含鐵胚血球之紅細胞前驅體之百分比。環形含鐵胚血球為紅血球母細胞，其中存在覆蓋細胞核之至少三分之一周邊的最少五個含鐵(鐵質沉著性)顆粒。關於樣品中環形含鐵胚血球之鑑別之說明，參見Mufti等人, 2008, Haematologica, 93(11):1712-7。在環形含鐵胚血球中，當用普魯士藍染色時，以藍色顆粒之核周環形式觀測鐵負載之粒線體。可在末梢血液及/或骨髓穿刺塗片中偵測到環形含鐵胚血球。在本文所提供之方法之特定態樣中，環形含鐵胚血球在骨髓抽出物中。 7.10.3 篩檢分析可測試各種ActRII多肽變異體或可溶ActRII多肽變異體之抑制ActRII之能力。此外，可測試化合物抑制ActRII之能力。在確認ActRII活性之信號傳導抑制劑後，此等化合物可與本文所提供之方法一起使用。ActRII可為ActRIIA或ActRIIB。以下分析針對ActRIIA所描述但可類似地針對ActRIIB進行。舉例而言，可評估ActRIIA多肽變異體對參與骨骼產生或骨骼破壞之基因之表現的影響。視需要，此可在一或多種重組型ActRIIA配位體蛋白質(例如活化素)存在下進行，且細胞可經轉染以產生ActRIIA多肽及/或其變異體及視情況存在之ActRIIA配位體。同樣地，可向小鼠或其他動物投與ActRIIA多肽，且可評估一或多種骨骼特性，諸如密度或體積。亦可評估骨折之癒合速率。雙能量x射線吸光測定法(DEXA)為評估動物中之骨密度的公認非侵襲性定量技術。在人類中，可使用中心DEXA系統評估脊椎及骨盆中之骨密度。此等為整體骨密度之最佳預測因子。可使用外周DEXA系統評估外周骨(包括例如手、手腕、踝及腳之骨骼)中之骨密度。可使用包括CAT掃描之傳統x射線成像系統評估骨骼生長及骨折癒合。此外，可使用定量電腦斷層攝影術(qCT)量測骨密度。亦可評估骨骼之機械強度。在某些態樣中，本文中提供ActRIIA多肽(例如可溶性ActRIIA多肽)及活化素多肽之用途，其係用於鑑別作為活化素-ActRIIA信號傳導路徑之促效劑或拮抗劑的化合物(試劑)。經由此篩選鑑定之化合物可經測試以評估其活體外調節骨骼生長或礦化之能力。視情況，此等化合物可進一步在動物模型中測試以評估其活體內調節組織生長之能力。存在許多篩選用於藉由靶向活化素及ActRIIA多肽調節組織生長之治療劑的方法。在某些實施例中，可進行化合物之高通量篩選以鑑定干擾活化素或ActRIIA介導之對骨骼之影響的試劑。在某些實施例中，進行分析以篩選及鑑定特異性抑制或減少ActRIIA多肽與活化素之結合的化合物。替代地，分析可用於鑑定增強ActRIIA多肽與活化素之結合之化合物。在另一實施例中，化合物可藉由其與活化素或ActRIIA多肽相互作用之能力鑑定。多種分析形式將滿足且鑒於本發明，本文未明確描述之彼等將仍然為一般熟習此項技術者理解。如本文所描述，本文所用之測試化合物(試劑)可藉由任何組合化學方法產生。替代地，本發明化合物可為活體內或活體外合成之天然存在之生物分子。待測試其充當組織生長調節劑之能力之化合物(試劑)可例如藉由細菌、酵母、植物或其他有機體(例如天然產品)產生，以化學方式產生(例如小分子，包括肽模擬物)或以重組方式產生。本文中涵蓋之測試化合物包括非肽基有機分子、肽、多肽、肽模擬物、糖、激素及核酸分子。在一特定實施例中，測試試劑為分子量小於約2,000道爾頓之小型有機分子。測試化合物可以單一、離散實體形式提供或以具有較大複雜性之文庫(諸如藉由組合化學方法產生)提供。此等庫可包含例如醇、烷基鹵化物、胺、醯胺、酯、醛、醚及其他類別之有機化合物。測試化合物至測試系統之呈遞可呈分離形式或以化合物之混合物形式，尤其在初始篩選步驟中。視情況，化合物可用其他化合物衍生且具有促進化合物分離之衍生基團。衍生基團之非限制性實例包括生物素、螢光素、洋地黃毒苷、綠色螢光蛋白、同位素、聚組胺酸、磁性珠粒、麩胱甘肽S轉移酶(GST)、光可活化交聯劑或其任何組合。在測試化合物及天然提取物庫之許多藥物篩選程序中，高通量分析為所需的以便使在給定時間期內調查之化合物數目最大化。在無細胞系統(諸如可用純化或半純化蛋白質衍生)中進行之分析通常作為「初步」篩選較佳，因為其可經產生以准許快速發展及相對容易偵測分子標靶中藉由測試化合物介導之變化。此外，測試化合物之細胞毒性或生物可用性之影響可一般在活體外系統中忽略，分析替代地主要集中於藥物對分子標靶之影響，如可在ActRIIA多肽與活化素之間的結合親和力變化中顯現。僅為了說明，在例示性篩選分析中，使相關化合物與通常能夠結合至活化素之分離及純化ActRIIA多肽接觸。隨後向化合物與ActRIIA多肽之混合物中添加含有ActRIIA配位體之組合物。ActRIIA/活化素複合物之偵測及定量提供用於測定化合物在抑制(或增強)ActRIIA多肽與活化素之間的複合物形成方面之功效的方式。化合物之功效可藉由自使用各種濃度之測試化合物獲得之資料產生劑量反應曲線評估。此外，亦可進行對照分析以提供用於比較之基線。舉例而言，在對照分析中，將分離及純化活化素添加至含有ActRIIA多肽之組合物中，且在不存在測試化合物之情況下將ActRIIA/活化素複合物之形成定量。應瞭解通常，反應物可摻合之次序可變化，且可同時摻合。此外，代替純化蛋白質，可使用細胞提取物及溶解物呈現適合之無細胞分析系統。 ActRIIA多肽與活化素之間的複合物形成可藉由多種技術偵測。舉例而言，複合物形成之調節可使用例如可偵測地標記之蛋白質，諸如放射性標記(例如32P、35S、14C或3H)、螢光標記(例如FITC)或以酶促方式標記之ActRIIA多肽或活化素，藉由免疫分析或藉由層析偵測定量。在某些實施例中，本文中涵蓋螢光偏振分析及螢光共振能量轉移(FRET)分析在直接或間接量測ActRIIA多肽與結合蛋白之間的相互作用程度中之用途。此外，其他偵測模式，諸如基於光波導(PCT公開案WO 96/26432及美國專利第5,677,196號)、表面電漿子共振(SPR)、表面電荷感測器及表面力感測器之偵測模式與本文中所描述之多種實施例相容。此外，亦稱為「雙雜交分析」之相互作用捕捉分析可用於鑑定破壞或增強ActRIIA多肽與其結合蛋白之間的相互作用之試劑。參見例如美國專利第5,283,317號；Zervos等人(1993) Cell 72:223-232；Madura等人(1993) J Biol Chem 268:12046-12054；Bartel等人(1993) Biotechniques 14:920-924；及 Iwabuchi等人(1993) Oncogene 8:1693-1696)。在一個特定實施例中，本文中涵蓋逆向雙雜交系統用於鑑定分解ActRIIA多肽與其結合蛋白質之間的相互作用之化合物(例如小分子或肽)之用途。參見例如Vidal及Legrain, (1999) Nucleic Acids Res 27:919-29；Vidal及Legrain, (1999) Trends Biotechnol 17:374-81；及美國專利第5,525,490號；第5,955,280號；及第5,965,368號。在某些實施例中，本發明化合物藉由其與ActRIIA或活化素多肽相互作用之能力鑑定。化合物與ActRIIA或活化素多肽之間的相互作用可為共價或非共價。舉例而言，此類相互作用可在蛋白質層級下使用活體外生物化學方法，包括光交聯、放射性標記之配位體結合及親和性層析法(Jakoby W B等人, 1974, Methods in Enzymology 46: 1)鑑定。在某些情況下，化合物可在基於分析(諸如偵測結合於活化素或ActRIIA多肽之化合物之分析)的機制中篩選。此可包括固相或流體相結合作用。替代地，編碼活化素或ActRIIA多肽之基因可用報導子系統(例如β-半乳糖苷酶、螢光素酶或綠色螢光蛋白)轉染至細胞中且較佳藉由高通量篩選或用庫之個別成員對庫進行篩選。可使用其他基於機制之結合分析，例如偵測自由能變化之結合分析。結合分析可用固定至孔、珠粒或晶片或藉由固定抗體捕獲或藉由毛細電泳法解析之目標進行。結合化合物可通常使用比色或螢光或表面電漿子共振偵測。在某些態樣中，本文中提供調節(刺激或抑制)骨骼形成及增加骨質量之方法及試劑。因此，任何鑑定之化合物可在整個細胞或組織中，活體外或活體內測試以確認其調節骨骼生長或礦化之能力。出於此目的，可利用此項技術中已知之各種方法。特定言之，可測試化合物增加骨骼轉換之能力。舉例而言，ActRIIA或活化素多肽或測試化合物對骨骼或軟骨生長之影響可藉由在基於細胞之分析中量測Msx2之誘導或骨原細胞至骨母細胞之分化測定(參見例如Daluiski等人, Nat Genet. 2001, 27(1):84-8；Hino等人, Front Biosci. 2004, 9:1520-9)。基於細胞之分析之另一實例包括分析本發明ActRIIA或活化素多肽之成骨活性且在間葉細胞祖細胞及骨母細胞中測試化合物。為了說明，可構築表現活化素或ActRIIA多肽之重組型腺病毒以感染多能間葉細胞祖細胞C3H10T1/2細胞、骨母細胞前體C2Cl2細胞及骨母細胞TE-85細胞。成骨活性隨後藉由量測鹼性磷酸酶、骨鈣化素及基質礦化之誘導測定(參見例如Cheng等人, J bone Joint Surg Am. 2003, 85-A(8): 1544-52)。本文亦提供量測骨骼或軟骨生長之活體內分析。舉例而言，Namkung-Matthai等人, Bone, 28:80-86 (2001)揭示在骨折之後的早期時段期間骨修復經研究之大鼠骨質疏鬆模型。Kubo等人, Steroid Biochemistry & Molecular Biology, 68:197-202 (1999)亦揭示在骨折之後的後期期間骨修復經研究之大鼠骨質疏鬆模型。Andersson等人, J. Endocrinol. 170:529-537描述小鼠骨質疏鬆模型，其中小鼠經切除卵巢，此使得小鼠失去實質上骨礦物質含量及骨礦物質密度，小樑骨損失大約50%骨礦物質密度。骨骼密度可藉由投與諸如副甲狀腺激素之因子在切除卵巢的小鼠中增加。在某些態樣中，可使用此項技術中已知之骨折癒合分析。此等分析包括骨折技術、組織學分析及生物力學分析，其描述於例如美國專利第6,521,750號中，該美國專利為了其用於引起以及量測骨折程度之實驗方案及修復方法之揭示以全文引用的方式併入本文中。 7.11 醫藥組合物在某些實施例中，活化素-ActRII拮抗劑(例如ActRII多肽)用與本文所提供之方法一起使用之藥學上可接受的載劑調配。舉例而言，ActRII多肽可單獨或作為醫藥調配物(治療組合物)之組分投與。本發明化合物可以用於人類或獸醫學之任何便利方式調配以便投與。ActRII可為ActRIIA或ActRIIB。在某些實施例中，本發明之治療方法包括以植入物或裝置方式全身性或局部投與組合物。當投與時，本發明中使用之治療組合物當然呈無熱原質、生理學可接受形式。除ActRII拮抗劑外之亦可視情況包括於如上文所描述之組合物中之治療適用試劑可與本發明化合物(例如ActRII多肽，諸如ActRIIA及/或ActRIIB多肽(參見章節7.9))同時或依序投與。通常ActRII拮抗劑將非經腸投與。適用於非經腸投與之醫藥組合物可包含一或多種ActRII多肽以及一或多種醫藥學上可接受之無菌等張水性或非水性溶液、分散液、懸浮液或乳液，或可在即將使用之前復原成無菌可注射溶液或分散液之無菌粉末，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑、溶質(其使調配物與預期接受者之血液等張)或懸浮劑或增稠劑。可用於本發明之醫藥組合物之適合的水性及非水性載劑之實例包括水、乙醇、多元醇(諸如甘油、丙二醇、聚乙二醇及其類似物)及其適合的混合物、植物油(諸如橄欖油)及可注射有機酯(諸如油酸乙酯)。可例如藉由使用包衣材料(諸如卵磷脂)、維持所需粒度(在分散液之情況下)及使用界面活性劑來維持適當流動性。此外，組合物可以用於遞送至目標組織位點(例如骨骼)之形式囊封或注射。在某些實施例中，本文中提供之組合物可包括能夠將一或多種治療化合物(例如ActRIIA多肽)遞送至目標組織位點(例如骨)之基質，從而提供用於產生組織且最佳能夠吸收入體內之結構。舉例而言，基質可提供ActRIIA多肽之緩慢釋放。此等基質可由目前用於其他植入醫學應用中之材料形成。基質材料之選擇係基於生物相容性、可生物降解性、機械特性、裝飾性外觀及界面特性。本發明組合物之特定應用將限定合適調配物。用於組合物之潛在基質可為可生物降解及化學限定之硫酸鈣、磷酸三鈣、羥磷灰石、聚乳酸及聚酸酐。其他潛在材料為可生物降解的且生物學上充分限定，諸如骨骼或皮膚膠原蛋白。其他基質由純蛋白質或細胞外基質組分構成。其他潛在基質為不可生物降解的且以化學方式限定，諸如燒結羥基磷灰石、生物玻璃、鋁酸鹽或其他陶瓷。基質可由上述類型之材料(諸如聚乳酸及羥磷灰石或膠原蛋白及磷酸三鈣)中之任一者之組合構成。生物陶瓷可在組合物中，諸如在鈣-鋁酸鹽-磷酸鹽及處理中改變以改變微孔尺寸、粒徑、粒子形狀及可生物降解性。在某些實施例中，本發明之方法可經口投與，例如呈膠囊、扁囊劑、丸劑、錠劑、口含錠(使用調味基質，通常為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)、散劑、顆粒之形式，或水性或非水性液體中之溶液或懸浮液形式，或水包油或油包水之液體乳液形式，或酏劑或糖漿形式，或片劑(使用惰性基質，諸如明膠及丙三醇，或蔗糖及阿拉伯膠)及/或漱口劑形式及其類似形式，各含有預定量之試劑作為活性成分。試劑亦可以藥團、舐劑或糊劑形式投與。在用於經口投與之固體劑型(膠囊、錠劑、丸劑、糖衣藥丸、散劑、顆粒及其類似物)中，本文提供之一或多種治療化合物可與一或多種醫藥學上可接受之載劑(諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣)及/或以下中之任一者混合：(1)填充劑或增量劑，諸如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇及/或矽酸；(2)黏合劑，諸如羧甲基纖維素、褐藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及/或阿拉伯膠；(3)保濕劑，諸如甘油；(4)崩解劑，諸如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、褐藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉；(5)溶液延遲劑，諸如石蠟；(6)吸收加速劑，諸如第四銨化合物；(7)濕潤劑，諸如鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯；(8)吸附劑，諸如高嶺土及膨潤土；(9)潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及其混合物；及(10)著色劑。在膠囊、錠劑及丸劑之情況下，醫藥組合物亦可包含緩衝劑。亦可採用諸如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇及其類似物之賦形劑將類似類型之固體組合物用作軟填充明膠膠囊及硬填充明膠膠囊中之填充劑。用於口服投與之液體劑型包括醫藥學上可接受之乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除活性成分之外，液體劑型可含有常用於此項技術中之惰性稀釋劑(諸如水或其他溶劑)、增溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(尤其為棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇及脫水山梨糖醇之脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀釋劑外，口服組合物亦可包括佐劑，諸如濕潤劑、乳化劑及懸浮劑、甜味劑、調味劑、著色劑、芳香劑及防腐劑。除活性化合物之外，懸浮液亦可含有懸浮劑，例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧化乙烯山梨糖醇及脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂-瓊脂及黃蓍及其混合物。本發明之組合物亦可含有佐劑，諸如防腐劑、濕潤劑、乳化劑及分散劑。可藉由包括各種抗菌及抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸及類似物來預防微生物作用。亦可能需要在組合物中包括等張劑，諸如糖、氯化鈉及其類似物。此外，可注射醫藥形式之延長吸收可藉由包括延遲吸收劑(諸如單硬脂酸鋁及明膠)來達成。應瞭解給藥方案將由主治醫師考慮改變本發明之標的化合物(例如ActRII多肽，諸如ActRIIA及/或ActRIIB多肽(參見章節7.9))之作用的各種因素確定。各種因素包括(但不限於)需要形成之骨骼重量之量、骨密度損失程度、骨骼破壞位點、損傷骨骼之狀況、個體之年齡、性別及飲食、可促成骨質流失之任何疾病之嚴重性、投與時間及其他臨床因素。視情況，劑量可隨用於復原之基質類型及組合物中之化合物類型變化。其他已知生長因子至最終組合物中之添加亦可影響劑量。可藉由骨骼生長及/或修復之週期評估，例如X射線(包括DEXA)、組織形態學測定及四環素標記監測進程。在某些實施例中，本文中提供用於活體內產生ActRII多肽之基因療法。此類療法將藉由引入ActRII多核苷酸序列至細胞或具有如上文所列之病症之組織中來實現其治療效果。ActRII多核苷酸序列之遞送可使用重組型表現載體(諸如嵌合病毒)或膠體分散系統實現。對於ActRII多核苷酸序列之治療遞送較佳為使用靶向脂質體。ActRII多肽可為ActRIIA及/或ActRIIB多肽(參見章節7.9))。可用於如本文中教示之基因療法之各種病毒載體包括腺病毒、疱疹病毒、牛痘，或較佳地RNA病毒，諸如反轉錄病毒。較佳地，反轉錄病毒載體為鼠或禽類反轉錄病毒之衍生物。其中可插入單一異體基因之反轉錄病毒載體之實例包括(但不限於)：莫洛尼鼠白血病病毒(Moloney murine leukemia virus，MoMuLV)、哈威鼠肉瘤病毒(Harvey murine sarcoma virus，HaMuSV)、鼠乳腺腫瘤病毒(MuMTV)及勞斯肉瘤病毒(Rous Sarcoma Virus，RSV)。多種額外反轉錄病毒載體可併入有多種基因。所有此等載體可轉移或併入針對可選擇標記之基因以使得可鑑定及產生轉導細胞。反轉錄病毒載體可藉由連接例如糖、糖脂或蛋白質製成目標特異性。較佳靶向藉由使用抗體實現。熟習此項技術者將認識到特異性多核苷酸序列可插入反轉錄病毒基因組中或連接至病毒包膜以允許含有ActRII多核苷酸之反轉錄病毒載體之標靶特異性遞送。在一個較佳實施例中，載體靶向骨骼或軟骨。替代地，組織培養細胞可藉由習知磷酸鈣轉染，直接用編碼反轉錄病毒結構基因gag、pol及env之質體轉染。此等細胞隨後用含有相關基因之載體質體轉染。所得細胞將反轉錄病毒載體釋放至培養基中。 ActRII多核苷酸之另一靶向遞送系統為膠體分散系統。膠體分散系統包括大分子複合物、奈米囊劑、微球、珠粒及包括水包油乳化液、微胞、混合微胞及脂質體之基於脂質之系統。本發明之較佳膠態系統為脂質體。脂質體為適用作活體外及活體內遞送媒劑之人造膜囊泡。RNA、DNA及完整病毒粒子可囊封在水性內部內且以生物學上活性形式遞送至細胞(參見例如Fraley等人, Trends Biochem. Sci., 6:77, 1981)。使用脂質體媒劑有效基因轉移之方法在此項技術中已知，參見例如Mannino等人, Biotechniques, 6:682, 1988。脂質體之組成通常為磷脂之組合，通常與類固醇，尤其膽固醇組合。亦可使用其他磷脂或其他脂質。脂質體之物理特徵視pH值、離子強度及二價陽離子之存在而定。適用於脂質體產生之脂質之實例包括磷脂醯基化合物，諸如磷脂醯甘油、磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯乙醇胺、鞘脂、腦苷脂及神經節苷脂。說明性磷脂包括卵磷脂醯膽鹼、二軟脂醯基磷脂醯膽鹼及二硬脂醯基磷脂醯膽鹼。基於例如器官特異性、細胞特異性及細胞器特異性，脂質體之靶向亦為可能的且在此項技術中已知。在某些實施例中，ActRII信號傳導抑制劑在醫藥組合物中為實質上純。特定言之，醫藥組合物中之至多20%、10%、5%、2.5%、1%、0.1%或至多0.05%化合物為除ActRII信號傳導抑制劑及醫藥學上可接受之載體外的化合物。在一個較佳實施例中，醫藥組合物經調配用於皮下投藥。 8. 實例 8.1 實例1 8.1.1 ActRIIA-Fc融合蛋白質提供具有與人類或小鼠Fc域融合之人類ActRIIA之細胞外域及其間之最小連接子的可溶性ActRIIA融合蛋白質。構築體分別稱為ActRIIA-hFc及ActRIIA-mFc。以SEQ ID NO:7形式提供ActRIIA-hFc。 ActRIIA-hFc及ActRIIA-mFc蛋白質表現於CHO細胞株中。考慮三種不同前導序列： (i) 蜜蜂蜂毒肽(HBML)：SEQ ID NO:8 (ii) 組織纖維蛋白溶酶原活化因子(TPA)：SEQ ID NO:9 (iii) 原生ActRIIA：SEQ ID NO:10 所選擇之形式使用TPA前導子且具有以下SEQ ID NO:13中所闡述之未經處理之胺基酸序列。此多肽由SEQ ID NO:14編碼。 8.1.2 ActRIIB-Fc融合蛋白質與人類Fc域及活化素融合之人類ActRIIB之細胞外域之晶體結構未展示任何對配位體結合中細胞外域之最後(C端)15個胺基酸(本文中稱為「尾端」)之作用。此序列未能在晶體結構解析，表明此等殘基存在於晶體中未均勻封裝之可撓性環中。Thompson等人 EMBO J. 2003年4月1日; 22(7):1555-66。此序列亦在ActRIIB與ActRIIA之間具有弱保守性。因此，在鹼性或背景、ActRIIB-Fc融合構築體中省略此等殘基。此外，背景形式中之位置64由丙胺酸佔據，儘管天然產生A64R對偶基因，但其通常視為「野生型」形式。因此，背景ActRIIB-Fc融合物具有如SEQ ID NO:21揭示之序列。意外的是，發現C端尾端增強活化素及GDF-11結合，因此ActRIIB-Fc之較佳版本具有序列SEQ ID NO:20。可根據本文所描述之方法使用之多種ActRIIB變異體描述於國際專利申請公開案WO2006/012627 (參見例如第59-60頁)中，其以全文引用之方式併入本文中。 8.2 實例2：具有低或中等-1 (Int -1)-風險型MDS或非增生性CMML及需要RBC輸注之貧血之個體中ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)之開放標記、2期、劑量發現研究 8.2.1 說明貧血(MDS之標誌)對治療(尤其在紅血球生成刺激劑(ESA)失敗之後)具有挑戰性。ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7；「索塔西普」)為IIA型活化素受體融合蛋白質，其對晚期紅血球生成起作用以增加釋放至循環中之成熟紅血球(Carrancio等人 Br J Haematol 2014;165:870-82)。用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療個體可刺激紅血球生成且顯著增加健康個體中之血紅蛋白(Hb)含量(Sherman等人 J Clin Pharmacol 2013;53:1121-30)，支持其用於治療具有較低風險型MDS之個體中之貧血的臨床研究。 8.2.2 材料及方法此實例之主要目標為測定在患有貧血及IPSS定義之低或Int-1-風險型MDS或非增生性CMML(白血球＜13,000個/µL)之個體引起紅血球血液學改善(HI-E；經改善之IWG 2006準則)之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)之安全、可耐受及有效劑量。第二目標包括大於或等於8週之RBC輸注非依賴性(RBC-TI)之比率。符合條件的個體患有貧血(在登記Hb小於或等於9.0 g/dL之前，在12週內具有大於或等於2個RBC單位輸注需求)且對ESA不起反應、具有反應缺失或低反應機率(血清紅血球生成素[EPO]大於500 mIU/mL)。關於此實例中所研究之個體之說明，參見表1。個體每3週一次以0.1、0.3、0.5或1.0 mg/kg之劑量皮下接收ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)。關於研究設計之概述，參見圖1。 8.2.3 結果研究總共54名MDS個體：ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)0.1、0.3、0.5及1.0 mg/kg劑量組分別具有7、6、21及20名。中值年齡為71歲(範圍56-86歲)且距診斷之中值時間為4年(範圍0-31年)；大部分個體為男性(70%)。個體在治療開始之前，在8週內接收平均6個RBC單位(範圍0-18)。四十五名個體(83%)在治療開始之前，在8週內接收大於或等於4個RBC單位(高輸注負擔；HTB)，且9名個體(17%)在治療開始之前，8週內接收小於個4單位(低輸注負擔；LTB)。十九名個體(35%)具有IPSS Low且34名個體(63%)具有IPSS Int-1-風險型MDS；1名患者之IPSS風險資料缺失。五十一名個體(94%)先前已用ESA治療，30名(56%)用低甲基化劑治療，26名(48%)用來那度胺治療且26名(48%)經歷其他MDS治療；15名個體(28%)之血清EPO＞500 mIU/mL。在可評估功效之53名個體中，在總共21名個體(40%)中觀測HI-E：ActRIIA-hFc (SEQ ID NO: 7)0.1、0.3、0.5及1.0 mg/kg劑量組中分別有0、4 (67%)、8 (40%)及9 (45%)名個體。44名HTB個體中之十九名以大於或等於4個RBC單位/8週輸注負擔降低形式回應；輸注反應之持續時間似乎為劑量依賴性。關於在用ActRIIA-hFc治療之後獲得大於56第天之RBC-TI的例示性HTB個體，參見圖3。參見圖4，其說明在用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療後，HTB反應者中輸注負擔反應之最大持續時間。五名HTB個體實現RBC-TI大於或等於8週，其中RBC-TI持續時間在59-345+天範圍內。參見圖5，其說明在用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療後，實現至少56天之RBC-TI之HTB個體中RBC-TI反應之最大持續時間。亦參見表2。實現RBC-TI大於或等於8週之HTB個體之子集具有增加之紅血球母細胞百分比，該等紅血球母細胞在用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之前為環形含鐵胚血球。 9名LTB個體中之八名展示Hb增加，不受輸注影響，在1.3-3.8 g/dL範圍內。其中，2名個體具有大於或等於1.5 g/dL之Hb增加持續大於或等於8週。具有大於11.0 g/dL之Hb之個體根據方案經歷給藥延遲，其可影響Hb增加持續性。在6名LTB個體中實現大於或等於8週之RBC-TI。參見圖6，說明在用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療後，實現至少56天之RBC-TI及至少1.5 g/dL之平均Hb增加之LTB個體之比例。參見圖7，說明在用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療後，實現至少56天之RBC-TI及至少1.5 g/dL之平均Hb增加之LTB中RBC-TI反應之最大持續時間。分別在具有基線血小板減少之個體及具有基線嗜中性白細胞減少症之個體中發現血小板及嗜中性白血球含量之增加。 ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)通常良好耐受。二十個名個體(37%)報導大於或等於1例疑似治療相關不良事件(AE)；疲乏(11%)、頭痛(9.3%)、食慾降低(7.4%)及噁心(7.4%)為最常見的。在停止治療之35名個體(65%)中，28名由於治療作用不足且4名由於AE而停止。在此等引起停止之AE中，3例懷疑為治療相關：在ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)0.3、0.5及1.0 mg/kg劑量組中分別存在1名患者具有2級溶血性貧血，1名患者具有3級高血壓且1名患者具有2級肌肉衰弱。其他停止原因為同意戒斷(n=2；4%)及患者決策(n=1；2%)。 8.2.4 結論 ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)在較低風險型MDS個體中在測試劑量下良好耐受，有希望存在證據表明ESA難治性、貧血、較低風險型MDS個體之此大部分HTB群組中之臨床活性。此外，此等資料表明用ActRII抑制劑(例如ActRIIA-hFc(SEQ ID NO:7))治療之前個體中存在環形含鐵胚血球可為長期治療、RBC輸注非依賴性及血紅蛋白含量長期增加之指示。表 1 . 個體基線特徵.

特徵	ActRIIA 抑制劑 (SEQ ID NO:7) 劑量組	總數 (N = 54)
0.1 mg/kg (n = 7)	0.3 mg/kg (n = 6)	0.5 mg/kg (n = 21)	1.0 mg/kg (n = 20)
年齡，中值(範圍)，週歲	65 (58-79)	73 (66-86)	69 (56-82)	74 (60-84)	71 (56-86)
女性，n (%)	3 (42.9)	0	4 (19.0)	9 (45.0)	16 (29.6)
距初始診斷之時間，中值(範圍)，年	4 (1-6)	7 (4-8)	6 (0-31)^a	3 (0-20)^a	4 (0-31)^a
RBC輸注負擔，中值(範圍)單位/8週	9 (4-10)	8 (6-11)	6 (2-18)	6 (0-14)	6 (0-18)
RBC輸注狀況，n (%)
HTB^b	7 (100)	6 (100)	18 (85.7)	14 (70.0)	45 (83.3)
LTB^c	0	0	3 (14.3)	6 (30.0)	9 (16.7)
IPSS風險，n (%)
低	3 (42.9)	4 (66.7)	5 (23.8)	8 (40.0)	20 (37.0)
Int-1	4 (57.1)	2 (33.3)	16 (76.2)	12 (60.0)	34 (63.0)
血清EPO含量，n (%)
≤ 500 mIU/mL	4 (57.2)	5 (83.4)	7 (33.4)	13 (65.0)	29 (53.7)
＞ 500 mIU/mL	3 (42.9)	1 (16.7)	6 (28.6)	5 (25.0)	15 (27.8)
缺失	0	0	8 (38.1)	2 (10.0)	10 (18.5)
先前使用ESA，n (%)	6 (85.7)	6 (100.0)	20 (95.2)	19 (95.0)	51 (94.4)
先前使用低甲基化劑，n (%)	6 (85.7)	6 (100.0)	13 (61.9)	5 (25.0)	30 (55.6)
先前使用來那度胺，n (%)	5 (71.4)	5 (83.3)	10 (47.6)	6 (30.0)	26 (48.1)
先前使用其他MDS治療，n (%)^d	6 (85.7)	5 (83.3)	9 (42.9)	6 (30.0)	26 (48.1)

^a 0年指示距初始診斷＜1年；^b RBC輸注負擔≥4個單位/8週之個體；^c RBC輸注負擔＜4個單位/8週之個體；^d MDS之非ESA、非低甲基化及非來那度胺治療；EPO，紅血球生成素；ESA，紅血球生成刺激劑；Hb，血紅蛋白；HTB，高輸注負擔；Int，中間物；IPSS，國際預後評分系統；LTB，低輸注負擔；MDS，骨髓發育不良症候群；RBC，紅血球。表 2. HTB個體(n=44)中之輸注反應

	ActRIIA 抑制劑 (SEQ ID NO:7) 劑量組	總數 (N = 54)
特徵	0.1 mg/kg (n = 7)	0.3 mg/kg (n = 6)	0.5 mg/kg (n = 17)	1.0 mg/kg (n = 14)
輸注負擔降低≥4個RBC單位/8週，n (%)	0	4 (66.7)	7 (41.2)	8 (57.1)	19 (43.2)
最長反應之持續時間，中值(範圍)(天)	N/A	67.5 (62-144)	150 (83-345)	87.5 (62-154)	106.0 (62-345+)
RBC-TI ≥ 56天，n (%)	0	1 (16.7)	2 (11.8)	2 (14.3)	5 (11.1)

8.3 實例3：ActRIIB-hFc在低或中等-1風險型MDS之個體中增加血紅蛋白及降低輸注負擔：來自2期研究之初步結果 8.3.1 說明 ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25；亦稱為盧帕西普)，一種重組型含有經修飾之IIB及IgG Fc型活化素受體之融合蛋白質用於治療由於無效紅血球生成，諸如MDS引起之貧血。MDS個體通常具有升高之紅血球生成素(EPO)含量且可能對紅血球生成刺激劑(ESA)不起反應或具有難治性。MDS個體亦展示在骨髓中具有增加之血清GDF11含量(Suragani R等人, Nature Medicine 2014)及增加之Smad 2/3信號傳導(Zhou L等人, Blood 2008)。ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)結合於TGF-β超家族中之配位體，包括GDF11，抑制Smad 2/3信號傳導且經由不同於ESA之機制促進晚期紅細胞分化。在MDS之小鼠模型中，mActRIIB-Fc (ActRIIB-hFc之鼠類版本(SEQ ID NO:25))降低Smad 2信號傳導、增加血紅蛋白(Hb)含量及降低骨髓紅細胞增生(Suragani R等人, Nature Medicine 2014)。在健康志願者研究中，ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)良好耐受且增加Hb含量(Attie K等人, Am J Hematol 2014)。 8.3.2 材料及方法此實例呈現劑量發現資料以評估ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)對患有低或Int-1風險型MDS之個體(參見表3及表4)(具有高輸注負擔(HTB，定義為在基線之前大於或等於4個單位RBC/8週)或低輸注負擔(LTB，定義為在基線之前小於4個單位RBC/8週))中之貧血。結果包括紅細胞反應(LTB個體中Hb增加或HTB個體中降低之輸注負擔)、安全性、耐受性、PK及PD生物標記。包涵準則包括低或Int-1風險MDS，年齡至少18週歲，貧血(定義為HTB個體或LTB個體中之基線Hb小於10.0 g/dL)，EPO大於500 U/L或對ESA不起反應/難治性，先前未使用阿紮胞苷或地西他濱，且當前未用ESA、G-CSF、GM-CSF或來那度胺治療。在劑量遞增階段中，在7個依序群組(n=3-6)中每3週每一以0.125、0.25、0.5、0.75、1.0、1.33及1.75 mg/kg之劑量藉由皮下(SC)注射投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)在隨後3個月內保持至多5個劑量。規劃擴展群組(n=30)，且所有完成此研究之個體可參與12個月擴展研究。關於實驗設計及給藥方案之說明，參見圖8。 8.3.3 結果可獲得26名個體(7名LTB/19名HTB)之資料。中值年齡為71週歲(範圍：27-88週歲)，50%為雌性，54%先前使用EPO療法及15%先前使用來那度胺。69%為WHO次型RCMD，且其餘個體為del(5q)、RARS或RAEB-1。LTB個體(n=7)之平均(SD)基線Hb為9.1 (0.4)g/dL。LTB個體在治療之前8週輸注之平均(SD)單位RBC為0.9 (1.1)個單位且HTB個體為6.3 (2.4)個單位。參見表3及4。與基線相比，7名LTB個體中之兩名在8週內具有平均Hb增加≥1.5 g/dL。在0.125 (n=1)、0.25 (n=1)、0.75 (n=3)及1.75 (n=2)mg/kg劑量組，LTB個體中之平均最大Hb增加分別為0.8、1.0、2.2及2.7 g/dL。參見圖9，說明在用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療後，LTB個體中之最大血紅蛋白增加。投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之LTB個體呈現增加之網狀紅血球及血紅蛋白含量。參見圖10-12及表5。在研究期間，7名LTB個體中之六名在≥8週內獲得RBC輸注非依賴性(RBC-TI)。與治療之前8週相比，在治療週期期間，19名HTB個體中之六名在8週區間內具有≥4個單位或輸注之RBC單位≥50%降低；此等6名個體中之五名在研究期間(範圍71-152天)獲得RBC-TI≥8週。在投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之HTB個體中觀測到血紅蛋白含量增加。參見例如圖13。觀測一些個體中在研究藥物投藥之後嗜中性白血球計數之增加。實現RBC-TI大於或等於8週之個體之子集具有增加之紅血球母細胞之百分比，該等紅血球母細胞在用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療個體之前為環形含鐵胚血球。參見表7。 ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)通常良好耐受。與因果關係無關，最常見不良事件為：腹瀉(n=4，1/2級)、骨痛、疲乏、肌肉痙攣、肌痛及鼻咽炎(各n=3，1/2級別)。表 3 . 基線特徵

參數	N=26
年齡 ( 週歲 ) ，中值 ( 範圍 )	71 (27-88)
性別，男性 (%)	13 (50%)
先前 ESA 治療， n (%)	14 (54%)
先前來那度胺治療， n (%)	5 (19%)
低輸注負擔 (LTB)	N = 7 (27%)
血紅蛋白，g/dL，中值(範圍)	9.1 (8.3-9.7)
單位RBC/8週，中值(範圍)	0 (0-2)
高輸注負擔 (HTB)	N = 19 (73%)
單位 RBC/8 週，中值 ( 範圍 )	6 (4-13)

表 4 . 用所指示劑量之ActRIIB (SEQ ID NO:25)治療之個體中HI-E反應率之功效概述

個體子群	0.125-0.5 mg/kg (N=9) n (%)	0.75-1.75 mg/kg (N=17) n (%)
LTB 個體 (N=7)	0/2 (0%)	2/5 (40%)
HTB 個體 (N=19)	2/7 (29%)	5/12 (42%)
所有個體 (N=26)	2/9 (22%)	7/17 (41%)

表 5 . LTB個體中之血紅蛋白反應

反應準則	0.125-0.5 mg/kg (N=2) n (%)	0.75-1.75 mg/kg (N=5) n (%)
LTB 個體 (N=7)	0	4 (80%)
HTB 個體 (N=19)	0	2 (40%)

表 6 . 用所指示劑量之ActRIIB (SEQ ID NO:25)治療之HTB個體中之輸注反應

反應準則 (8 週 ) ， n (%)	0.125-0.5 mg/kg (N=7) n (%)	0.75-1.75 mg/kg (N=12) n (%)
LTB 個體 (N=7)	3 (43%)	5 (42%)
HTB 個體 (N=19)	2 (29%)	5 (42%)
RBC-TI	1 (14%)	3 (25%)

表 7 . 藉由環形含鐵胚血球(RS)形態及突變分析獲得之IWG反應率

反應 + 比率 (IWG)	群組 4-7^a ， n=17 ； 0.75-1.75 mg/kg ； n (%)
所有個體	7/17 (41%)
環形含鐵胚血球大於或等於 15%
環形含鐵胚血球陽性	7/13 (54%)
環形含鐵胚血球陰性	0/4 (0%)
突變分析
SF3B1+	6/9 (67%)^b
SF3B1-	1/8 (13%)

^a 群組4：0.75 mg/kg (n=3)；群組5：1.0 mg/kg (n=3)；群組6：1.33 mg/kg(n=6)；群組7：1.75 mg/kg (n=2)；^b 包括3名變成輸注非依賴性之個體。 8.3.4 結論基於低或Int-1 MDS個體中之基本資料，每3週皮下投與之ActRIIB-hFc(SEQ ID NO:25)(保持至多5個劑量)在有利安全概況下增加Hb含量或降低輸注需求。此等資料有力支持患有具有ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之MDS之個體之更長期治療之進一步評估。 8.4 實例4：ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)增加低或中等-1風險型MDS之個體中之血紅蛋白且降低輸注負擔：來自2期PACE-MDS研究之初步結果 8.4.1 說明 ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)為融合蛋白質(經修飾之活化素受體IIB/IgG Fc)，當前研究具有無效紅血球生成之貧血之治療。MDS個體在骨髓中具有增加之GDF11含量(Suragani，Nat Med 2014)及異常Smad2、3信號傳導。ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)結合TGF-β超家族配位體，包括GDF11、活化素B及BMP6，抑制Smad2、3信號傳導及促進晚期紅細胞分化，與ESA不同。在健康志願者研究中，ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)良好耐受且增加Hb含量(Attie K等人, Am J Hematol 2014)。 8.4.2 目標此實例中呈現之資料來自正在進行中的2期、多中心、開放標記、劑量發現研究，其用於評估ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)對具有輸注依賴性(TD)或非輸注依賴性(NTD)低或int-1風險型MDS之個體中貧血之作用。研究結果包括紅細胞反應、安全性、耐受性、藥物動力學生物標記及藥效學生物標記。在低輸注負擔(LTB)個體中，紅細胞反應定義為血紅蛋白濃度之增加。在高輸注負擔(HTB)個體中，紅細胞反應定義為降低之輸注負擔。 8.4.3 方法包涵準則包括低或int-1風險型MDS，年齡≥18週歲，貧血定義為Hb＜10.0 g/dL (LTB，定義為基線之前＜4個單位RBC/8週)或基線之前≥4個單位RBC/8週(HTB)，EPO＞500 U/L或對ESA不起反應/具有難治性，先前未使用阿紮胞苷或地西他濱，且當前未用ESA、G-CSF、GM-CSF或來那度胺治療。在隨後3個月內，在時序群組(各n=3-6)中每3週一次以0.125至1.75 mg/kg之劑量範圍藉由皮下(SC)注射投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)保持至多5個劑量。擴展群組(n=30)正在進行中，其中個別個體劑量滴定以允許反應。完成此研究之個體可參與12個月擴展研究。 8.4.4 結果此實例提供58名參與II期研究之個體中44名個體(19名女性，25名男性；15名LTB個體，29名HTB個體)之初步安全性及功效資料。個體之中值年齡為71週歲。61%個體有先前EPO療法。21%個體有先前來那度胺療法。73%個體具有RARS或RCMD-RS。80%個體在骨髓中具有大於15%環形含鐵胚血球。用0.75 mg/kg與1.75 mg/kg之間的ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之LTB個體(n=13)對主要終點具有77%反應率(Hb增加≥1.5 g/dL保持≥2週)及62% IWG HI-E (國際工作組紅血球血液學改善)反應率(Hb增加≥1.5 g/dL保持≥8週)。血紅蛋白之平均(標準偏差)最大變化在較高劑量組中為2.7 (標準偏差：1.1) g/dL，與此相比，在較低劑量組中為0.9 (標準偏差：0.1) g/dL。用0.75 mg/kg與1.75 mg/kg之間的ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之HTB個體(n=13)具有50% HI-E反應率(≥4個RBC單位/8週降低)。對具有≥15%環形含鐵胚血球之個體(n=30)，HI-E反應率為63%，且對於具有SF3B1突變之個體(n=10)，HI-E反應率為80%。ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)通常耐受良好。不論因果關係，最常見不良事件為腹瀉、鼻咽炎、肌痛、骨痛、支氣管炎、頭痛及肌肉痙攣。 8.4.5 結論基於低/Int-1 MDS個體中之初步資料，以治療劑量ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療3個月引起HI-E反應，54%個體中Hb含量增加及/或輸注需求降低，於有利安全概況。在具有環形含鐵胚血球及SF3B1突變之個體中觀測到較高反應率。此等資料強力支持使用環形含鐵胚血球含量及SF3B1突變盛行率作為患有MDS個體使用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)有效治療之生物標記。 8.5 實例5：具有低或中等-1 (Int-1)-風險型MDS或非增生性CMML及需要RBC輸注之貧血之個體中ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)之開放標記、2期、劑量發現研究 8.5.1 說明參見實例2(章節8.2)之說明(章節8.2.1)以及材料及方法(章節8.2.2)。此實例呈現來自實例2 (章節8.2)之其他資料，在2期研究中之稍後日期獲得。 8.5.2 結果總共59名MDS個體用0.1 mg/kg、0.3 mg/kg、0.5 mg/kg、1.0 mg/kg或2.0 mg/kg之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療。表8提供各治療組之個體之基線特徵。在可評估功效之53名個體中，在總共23名個體(43%)中觀測HI-E：ActRIIA-hFc (SEQ ID NO: 7)0.1、0.3、0.5及1.0 mg/kg劑量組中分別有0、4 (67%)、9 (45%)及10 (50%)名個體。此外，用少至0.3 mg/kg之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療HTB個體產生大於或等於4個RBC單位/8週輸注負擔降低(參見表9)。輸注反應之持續時間似乎為劑量依賴性。此外，在45名可評估HTB個體中，6名(13)獲得RBC-TI保持至少8週(參見表9)。關於在用1.0 mg/kg之劑量之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療起始之後獲得RBC-TI保持至少337天之例示性HTB個體，參見圖13。表 8 . 個體基線特徵

特徵	ActRIIA 信號傳導抑制劑 (SEQ ID NO:7) 劑量組	總數 (N = 59)
0.1 mg/kg (n = 7)	0.3 mg/kg (n = 6)	0.5 mg/kg (n = 21)	1.0 mg/kg (n = 20)	2.0 mg/kg (n = 5)
年齡，中值 ( 範圍 ) ，週歲	65 (58-79)	73 (66-86)	69 (56-82)	74 (60-84)	73 (47-81)	71 (47-86)
女性， n (%)	3 (42.9)	0	4 (19.0)	9 (45.0)	4 (80)	20 (34)
距初始診斷之時間，中值 ( 範圍 ) ，年	4 (1-6)	8 (4-10)	6 (0-31)^a	3 (0-20)^a	2 (0-5)	4 (0-31)^a
RBC 輸注負擔，中值 ( 範圍 ) 單位 /8 週	9 (4-10)	8 (6-11)	6 (2-16)	6 (0-10)	4(3-8)	6 (0-16)
RBC 輸注狀況， n (%)
HTB^b	7 (100)	6 (100)	18 (86)	15 (75)	4 (80)	50 (85)
LTB^c	0	0	3 (14)	5 (25)	1 (2)	9 (15)
IPSS 風險， n (%)
低	4 (57)	4 (67)	5 (24)	7 (35)	0	20 (34)
Int-1	3 (43)	2 (33)	16 (76)	13 (65)	5 (100)	39 *66)
血清 EPO 含量， n (%)
≤ 500 mIU/mL	4 (57)	5 (83)	11 (52)	13 (65)	2 (40)	35 (59)
＞ 500 mIU/mL	3 (43)	1 (17)	8 (38)	6 (30)	1 (20)	19 (32)
缺失	0	0	2 (10)	1 (5)	2 (40)	5 (9)
先前使用 ESA ， n (%)	6 (86)	6 (100)	20 (95)	20 (100)	4 (80)	56 (95)
先前使用低甲基化劑， n (%)	6 (86)	6 (100)	13 (62)	6 (30)	0	31 (53)
先前使用來那度胺， n (%)	5 (71)	5 (83)	10 (48)	6 (30)	1 (20)	27 (46)
先前使用其他 MDS 治療， n (%)	6 (86)	5 (83)	8 (38)	7 (35)	0	26 (44)

^a 0年指示距初始診斷＜1年；^b RBC輸注負擔≥4個單位/8週之個體；^c RBC輸注負擔＜4個單位/8週之個體；^d MDS之非ESA、非低甲基化及非來那度胺治療；EPO，紅血球生成素；ESA，紅血球生成刺激劑；Hb，血紅蛋白；HTB，高輸注負擔；Int，中間物；IPSS，國際預後評分系統；LTB，低輸注負擔；MDS，骨髓發育不良症候群；RBC，紅血球。表 9. HTB個體(n=45)中之輸注反應

特徵	ActRIIA 信號傳導抑制劑 (SEQ ID NO:7) 劑量組	總數 (N = 45)
0.1 mg/kg (n = 7)	0.3 mg/kg (n = 6)	0.5 mg/kg (n = 17)	1.0 mg/kg (n = 15)
輸注負擔降低 ≥4 個 RBC 單位 /8 週， n (%)	0	4 (67)	8 (47)	6 (40)	18 (40)
最長反應之持續時間，中值 ( 範圍 )( 天 )	NA	68 (62-173)	109 (83-345+)	123 (62-353+)	99 (62-345+)
RBC-TI ≥ 56 天， n (%)	0	1 (17)	2 (12)	3 (20)	6 (13)
RBC-TI 之持續時間 ≥8 週，中值 ( 範圍 ) ，天	NA	124 (124-124)	347 (154-540)	78 (59-353)	139 (59-540)

此外，在8名用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之LTB個體中，5名(63%)獲得RBC-TI，其中在任何8週無輸注週期內平均Hb增加至少1.5 g/dL。特定言之，33%用0.5 mg/kg之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之LTB個體及80%用1.0 mg/kg之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之LTB獲得RBC-TI，其中在任何8週無輸注週期內平均Hb增加至少1.5 g/dL。用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之經治療之LTB個體中之最大平均Hb增加介於1.45 g/dL與4.44 g/dL之間。用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之LTB個體中RBC-TI之持續時間在76至472天範圍內。Hb含量大於11.0 g/dL之LTB個體經歷給藥延遲，其可對Hb含量增加之持續時間之評估具有影響。關於在用1.0 mg/kg之劑量之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療起始之後獲得RBC-TI及血紅蛋白含量持續增加保持至少358天之例示性LTB個體，參見圖14。此外，評估基線處治療功效與存在環形含鐵胚血球(RS)之間的關聯性(參見表10)。在50%RS陽性個體中實現HI-E。相比之下，在僅10% RS陰性個體中實現HI-E。表 10. 用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之個體中環形含鐵胚血球之狀況

RS 狀況 ^a	基線處之平均 EPO 含量 (mIU/mL)	基線處之平均輸注負擔 (RBC 單位 /8 週，第一次給藥之前 )	ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7) 劑量組及 RS 狀況 n/N (%) 之 HI-E
0.1 mg/kg	0.3 mg/kg	0.5 mg/kg	1.0 mg/kg	總數
RS陽性^b	346.53	7.04	0/6 (0)	4/4 (100)	5/9 (56)	5/9 (56)	14/28 (50)
RS陰性^c	1447.40	6.40	0/1 (0)	0/3 (0)	0/2 (0)	1/5 (20)	1/10 (10)

^a RS狀況來自可使用之基線及以其他方式來自後基線；16名個體之RS狀況未知；^b ＞ 15% RS；^c ≤ 15% RS ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)通常良好耐受。參見表11。四名個體由於疑似治療相關不良事件而停止治療：個體A (0.3 mg/kg劑量組)，2級溶血性貧血；個體B (0.5 mg/kg劑量組)，3級高血壓；個體C (1.0 mg/kg劑量組)，2級肌肉衰弱；個體D (2.0 mg/kg劑量組)及伴有2級腹瀉之2級血壓升高。 8.5.3 結論 ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)在較低風險型MDS個體中在測試劑量下良好耐受，有希望存在證據表明ESA難治性、貧血、較低風險型MDS個體之此大部分HTB群組中之臨床活性。此外，此等資料表明用ActRII信號傳導抑制劑(例如ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7))治療之前個體中存在環形含鐵胚血球可為長期治療RBC輸注非依賴性、血紅蛋白含量長期增加及治療之增強之功效之指示。表 11. 用所指示之劑量之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療之個體中之不良事件

	ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7) 劑量組	總數 (N = 59)
0.1 mg/kg (n = 7)	0.3 mg/kg (n = 6)	0.5 mg/kg (n = 21)	1.0 mg/kg (n = 20)	2.0 mg/kg (n = 5)
具有≥1 TEAE之個體	6 (86)	3 (50)	20 (95)	19 (95)	4 (80)	52 (88)
TEAE≥10%之個體
疲乏/乏力^a	0	1 (17)	10 (48)	12 (60)	1 (20)	24 (41)
周邊水腫	2 (29)	2 (33)	4 (19)	4 (20)	0	12 (20)
腹瀉	0	3 (50)	11 (52)	8 (40)	2 (40)	12 (20)
噁心	0	1 (17)	4 (19)	4 (20)	1 (20)	10 (17)
便秘	0	1 (17)	6 (29)	2 (10)	0	9 (15)
嘔吐	0	1 (17)	2 (10)	3 (15)	1 (20)	6 (10)
食慾降低	0	0	3 (14)	3 (15)	0	6 (10)
肢端疼痛	0	1 (17)	2 (10)	3 (15)	1 (20)	6 (10)
頭痛	3 (43)	1 (17)	2 (10)	2 (10)	1 (20)	9 (15)
眩暈	1 (14)	1 (17)	5 (24)	6 (30)	0	6 (10)
咳嗽	1 (14)	1 (17)	2 (10)	5 (25)	0	9 (15)
呼吸困難	0	1 (17)	4 (19)	2 (10)	0	7 (12)
3-4級TEAE	1 (14)	1 (17)	9 (43)	5 (25)	2 (40)	18 (31)

8.6 實例6：ActRIIB-hFc在低或中等-1風險型MDS之個體中增加血紅蛋白及降低輸注負擔：來自2期研究之初步結果 8.6.1 說明參見實例3 (章節8.3)之說明(章節8.3.1)以及材料及方法(章節8.3.2)。此實例呈現來自實例3 (章節8.3)之其他資料，在2期研究中之稍後日期獲得。 8.6.2 結果可獲得44名個體(15名LTB/29名HTB)之資料。表12提供此實例中研究之個體之基線特徵。評估用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中之紅細胞反應。對於LTB個體，主要終點為血紅蛋白增加至少1.5 g/dL保持至少2週。對於HTB個體，主要終點為在8週內RBC輸注之至少4個單位或至少50%降低。33%(3/9)投與較低劑量(0.125-0.5 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得主要終點，而63% (22/35)投與較高劑量(0.75-1.75 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得主要終點。此外，評估IWG HI-E。對於LTB個體，IWG HI-E為血紅蛋白增加至少1.5 g/dL保持至少8週。對於HTB個體，IWG HI-E為在8週內RBC輸注降低至少4個單位。22% (2/9)投與較低劑量(0.125-0.5 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得IWG HI-E，而54% (19/35)投與較高劑量(0.75-1.75 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得IWG HI-E。環形含鐵胚血球為異常紅血球母細胞。此外，某些與MDS相關之體細胞突變引起環型含鐵胚血球形成及無效的紅血球生成。編接因子3B1 (SF3B1)中之主要突變與環形含鐵胚血球之形成相關。如本文中所使用，「RS+」係指至少15%環形含鐵胚血球。因此，在用較高劑量(0.75 mg/kg-1.75 mg/kg)之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中評估存在環形含鐵胚血球、體細胞突變及無效紅血球生成與紅細胞反應及輸注非依賴性之間的關聯性(參見表13及表14)。用ActRIIB-hFc治療之個體獲得IWG HI-E及輸注非依賴性(參見表13、表14及圖16)。此等資料指示當個體為RS+及/或具有SF3B1突變時，用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中存在增加之紅細胞反應。表 12 . 用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體之基線特徵

參數	N=44
年齡 ( 週歲 ) ，中值 ( 範圍 )	71 (27-88)
性別，男性 (%)	25 (57%)
先前 ESA 治療， n (%)	27 (61%)
先前來那度胺治療， n (%)	9 (21%)
低輸注負擔 (LTB)	N = 15 (34%)
血紅蛋白，g/dL，中值(範圍)	9.0 (6.8-10.1)
單位RBC/8週，中值(範圍)	2 (所有個體)
高輸注負擔 (HTB)	N = 19 (73%)
單位RBC/8週，中值(範圍)	6 (4-14)
IPSS	N = 44; n (%)
低	22 (50%)
Int-1	20 (46%)
Int-2	2 (4%)
IPSS-R	N = 44; n (%)
極低	2 (4.5%)
低	25 (57%)
中等	14 (32%)
高	3 (7%)
環形含鐵胚血球 (RS)	N = 44; n (%)
RS+	35 (80%)
RS-	8 (18%)
RS不可評估	1 (2%)
編接突變 (SF3B1)	N = 44; n (%)
SF3B1+ (存在突變)	25 (57%)
SF3B1- (不存在突變)	18 (41%)
SF3B1不可評估	1 (2%)

表 13 . RS+及SF3B1突變陽性個體中之紅細胞反應。對於LTB個體，IWG HI-E為血紅蛋白增加至少1.5 g/dL保持至少8週。對於HTB個體，IWG HI-E為在8週內RBC輸注降低至少4個單位。

患者群體	IWG HI-E
所有患者(N=35)	19/35 (54%)
RS+患者(N=30)	19/30 (63%)
RS-患者(N=5)	0/5 (0%)
SF3B1+患者(N=22)	16/22 (73%)
SF3B1-患者(N=13)	3/13 (23%)

表 14 . RS+及SF3B1突變陽性個體中之輸注非依賴性。輸注非依賴性係指在治療後在至少8週內無RBC輸注。

患者群體	輸注非依賴性
所有患者(N=28)	10/28 36%)
RS+患者(N=23)	9/23 (39%)
RS-患者(N=4)	1/4 (25%)
SF3B1+患者(N=17)	7/17 (41%)
SF3B1-患者(N=11)	3/11 (27%)

8.6.3 結論每三週皮下投與MDS個體ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)通常為安全及良好耐受的。在54%以至少0.75 mg/kg之劑量之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中獲得紅細胞反應(IWG HI-E)。此外，在具有環形含鐵胚血球或SF3B1中之突變的個體中發現較高比率之紅細胞反應。此外，在36%用至少0.75 mg/kg之劑量之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中獲得輸注非依賴性。 8.7 實例7：具有較低風險型MDS及需要輸注之貧血之患者中ActRIIA-hFC (SEQ ID NO:7)之2期、劑量發現研究參見實例2(章節8.2)之說明(章節8.2.1)以及材料及方法(章節8.2.2)。此實例呈現來自實例2 (章節8.2)之其他資料，在2期研究中之稍後日期獲得。此外，進一步評估基線處治療功效與存在環形含鐵胚血球(RS)之間的關聯性(參見表15)。在任何8週週期內實現RBC-TI (對於LTB患者，平均Hb增加≥1.5 g/dL)展示於圖17中。表 15 . 紅細胞反應：用ActRIIA-hFC融合物(SEQ ID NO:7)治療之個體中鐵粒幼細胞性對比非鐵粒幼細胞性MDS。在索塔西普1.0 mg/kg劑量組中，在64%鐵粒幼細胞性及20%非鐵粒幼細胞性患者中獲得HI-E (卡方測驗(Chi-square test)P=0.11)。

環形含鐵胚血球 ^a	索塔西普劑量組及 RS 狀況之 HI-E ， n/N (%)
0.1 mg/kg	0.3 mg/kg	0.5 mg/kg	1.0 mg/kg	2.0 mg/kg
≥ 15%	0/6	4/4 (100)	7/13 (54)	7/11 (64)	2/3 (67)
＜ 15%	0/1	0/2	2/6 (33)	1/5 (20)	0/2
^a 來自可用基線之RS狀況；6名患者之RS狀況未知。

8.8 實例8：ActRIIB-hFc在低或中等-1風險型MDS之個體中增加血紅蛋白及降低輸注負擔：來自2期研究之初步結果(續) 8.8.1 說明參見實例3 (章節8.3)之說明(章節8.3.1)以及材料及方法(章節8.3.2)。此實例呈現來自實例3 (章節8.3)之其他資料，在2期研究中之稍後日期獲得。 8.8.2 結果總共研究49名MDS個體。49名MDS個體中之27名參與3個月ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)劑量遞增研究(0.125 mg/kg-1.75 mg/kg)，且22名個體參與後續擴展研究，如表16中所示。表17提供此實例中研究之個體之基線特徵。 3 個月 劑量遞增研究 評估用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中之紅細胞反應。參見表18。對於LTB個體，主要終點為血紅蛋白增加至少1.5 g/dL保持至少2週。對於HTB個體，主要終點為在8週內RBC輸注之至少4個單位或至少50%降低。33%(3/9)投與較低劑量(0.125-0.5 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得主要終點，而58% (23/40)投與較高劑量(0.75-1.75 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得主要終點。此外，評估IWG HI-E。參見表18。對於LTB個體，IWG HI-E為血紅蛋白增加至少1.5 g/dL保持至少8週。對於HTB個體，IWG HI-E為在8週內RBC輸注降低至少4個單位。22% (2/9)投與較低劑量(0.125-0.5 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得IWG HI-E，而48% (19/40)投與較高劑量(0.75-1.75 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得IWG HI-E。此外，評估輸注非依賴性。參見表18。對於在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)療法之前接收至少兩個RBC單位之個體，輸注非依賴性定義為在接收ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療時實現至少8週無輸注。14% (1/7)投與較低劑量(0.125-0.5 mg/kg之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25))之個體獲得輸注非依賴性，而37% (11/30)投與較高劑量(0.75-1.75 mg/kg之ActRIIB-hFc(SEQ ID NO:25))之個體獲得輸注非依賴性。4/6 LTB個體及7/24 HTB個體獲得輸注非依賴性。11名輸注非依賴性患者中之10名在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之第一個6週內發作。評估用較高劑量(0.75 mg/kg-1.75 mg/kg)之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中存在環形含鐵胚血球、體細胞突變及無效紅血球生成與紅細胞反應及輸注非依賴性之間的關聯性。參見表19。較高劑量組中所有個體中之19/40(48%)獲得IWG HI-E。19/35 (54%)環形含鐵胚血球(RS)陽性個體(定義為在其骨髓中具有至少15%紅細胞前驅體)獲得IWG HI-E且0/4 (0%)RS陰性個體獲得IWG HI-E。EPO含量低於200 mU/mL之14/23(61%)RS陽性個體獲得IWG HI-E且EPO含量低於200 mU/mL之5/12 (42%)RS陽性個體獲得IWG HI-E。16/26 (62%)具有SF3B1突變之個體及3/13 (23%)不具有SF3B1突變之個體獲得IWG HI-E。總而言之，此實例中呈現之結果表明ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療引起穩固紅細胞反應及輸注非依賴性，尤其在較高劑量組中之個體中。此外，在RS+陽性及SF3B1突變陽性個體中發現富集之紅細胞反應。 ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)通常良好耐受。參見表20。大部分不良事件(AE)為1或2級。觀測到兩個可能相關嚴重不良事件(SAE)：3級肌肉疼痛(第90天發作)及3級一般病狀惡化(第44天發作，第66天復發，不相關)。觀測到胚細胞計數之一個可能相關非嚴重3級AE。表 16 . 用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體之給藥時程

	劑量遞增	擴增
劑量程度 (mg/kg)	0.125	0.25	0.5	0.75	1.0	1.33	1.75	1.0^a
個體數目	3	3	3	6	3	6	3	22

^a 起始劑量程度；劑量程度在8名個體中增加至1.33 mg/kg且在2名個體中增加至1.75 mg/kg。表 17 . 用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體之基線特徵

參數	N=44
年齡 ( 週歲 ) ，中值 ( 範圍 )	71 (27-88)
性別，男性 (%)	27 (55%)
先前 ESA 治療， n (%)	30 (61%)
先前來那度胺治療， n (%)	9 (18%)
距診斷之時間，年，中值 ( 範圍 )	2.8 (0.2-13.6)
低輸注負擔 (LTB)	N = 17 (35%)
血紅蛋白，g/dL，中值(範圍)	8.7 (6.8-10.1)
單位RBC/8週，中值(範圍)	2 (2-2) (n=6)
高輸注負擔 (HTB)	N = 32 (65%)
單位RBC/8週，中值(範圍)	6 (4-14) (n=32)
IPSS	N = 49 ； n (%)
低	27 (55%)
Int-1	20 (41%)
Int-2	2 (4%)
IPSS-R	N = 44; n (%)
極低	2 (4.5%)
低	30 (61%)
中等	14 (29%)
高	3 (6%)
環形含鐵胚血球 (RS)	N = 48 ； n (%)
RS+	40 (83%)
SF3B1+ (存在突變)	29 (73%)
SF3B1- (不存在突變)	11 (27%)
RS-	8 (17%)

表 18 . 用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中之紅細胞反應及輸注非依賴性

反應準則	較低劑量組 0.125-0.5 mg/kg N=9 n%	較高劑量組 0.75-0.175 mg/kg N=40 n (%)
主要功效終點	3 (33%)	23 (58%)
IWG HI-E	2 (22%)	19 (48%)
輸注非依賴性	1/7 (14%)	11/30 (37%)*
		LTB HTB
		4/6 7/24

* 11名輸注非依賴性患者中之10名在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之第一個6週內發作。表 19 . 用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中之紅細胞反應及輸注非依賴性

患者群體	IWG HI-E
所有患者	19/40 (48%)
RS陽性	19/35 (54%)
EPO ＜ 200	14/23 (61%)
EPO ≥ 200	5/12 (42%)
存在SF3B1突變	16/26 (62%)
存在SF3B1突變	3/13 (23%)

表 20 . 在≥4個用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之個體中報導之不良事件(所有等級)，與因果關係無關：

較佳術語 N (%)	較低劑量組 0.125-0.5 mg/kg N=9 n%	較高劑量組 0.75-0.175 mg/kg N=40 n (%)	總數 N-49
肌痛	2 (22)	5 (13)	7 (14)
腹瀉	2 (22)	4 (10)	6 (12)
鼻咽炎	1 (11)	5 (13)	6 (12)
頭痛	0	5 (13)	5 (10)
上腹痛	1 (11)	3 (8)	4 (8)
骨痛	1 (11)	3 (8)	4 (8)
支氣管炎	0	4 (10)	4 (8)
疲乏	0	4 (10)	4 (8)
高血壓	0	4 (10)	4 (8)
肌肉痙攣	2 (22)	2 (5)	4 (8)

擴展研究 完成3個月劑量遞增研究之個體符合參與後續12個月擴展研究之條件。對於治療中斷超過3個月之個體，ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之起始劑量為1.0 mg/kg。對於ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療未間斷之個體，以與其3個月治療方案中之最後劑量相同之劑量程度繼續其治療。總共58名個體參與3個月治療研究。其中，22名個體參與12個月擴展研究，9名低輸注負擔患者及13名高輸注負擔患者。在擴展研究中，17/22名個體繼續其未間斷的ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療且5/22名個體在中斷＞3個月之後進入。對於9名低輸注負擔患者，一個月之平均血紅蛋白增加為約2 g/dL，增加至2.5與3.0 g/dL之間且保持6個月週期以便可獲得其資料。對於13名高輸注負擔患者，43%獲得輸注非依賴性，其中若干患者保持此輸注非依賴性超過6個月，其中最長的進行中輸注非依賴性患者為幾乎8個月。所有此等患者保持研究。圖18展示例示性個體之結果。RS陽性HTB個體在初始3個月治療研究中用0.75 mg/kg ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之劑量治療且在11個月ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療中斷之後參與12個月擴展研究，在擴展研究期間個體接收EPO。在LTB個體中觀測到持久的血紅蛋白反應。8/9個體獲得IWG HI-E。圖19展示例示性個體之血紅蛋白反應。 12個月擴展研究中之個體展示持久的輸注非依賴性反應。圖20說明6名個體之結果。5名個體在接收1.0 mg/kg (4名個體)及1.75 mg/kg (1名個體)之劑量之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療時，在2-7個月之後展示持續輸注非依賴性反應。一名個體(圖20中最後一列)接收1.0 mg/kg至1.33 mg/kg及1.75 mg/kg之兩種劑量滴定。此後一個體間歇地經歷輸注非依賴性保持約2個月且持續實現IWG HI-E反應。總之，此實例中呈現之結果表明用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療之較低風險RS-陽性MDS個體顯示穩固血液學改善，尤其在以≥0.75 mg/kg之劑量治療時。ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)治療通常良好耐受。用ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)進行之更長期治療顯示血紅蛋白含量之持續增加及保持性輸注非依賴性。 8.9 實例9：用於治療由IPSS-R極低、低或中等風險MDS引起之貧血之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之III期研究此實例提供3期、雙盲、安慰劑對照、多中心、隨機研究之概述，該研究測定用於治療需要RBC輸注之具有環形含鐵胚血球(至少15%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球)之個體中由IPSS-R極低、低或中等風險型MDS引起之貧血之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)的功效及安全性。貧血視為骨髓發育不良症候群患者中最流行的血球減少症之一，其為用於描述與紅血球、白血球及/或血小板之無效製備相關之病症的涵蓋性術語。嚴重度等級自輕度(無徵狀)至重度，貧血可引起患者需要RBC輸注，其可引起由鐵過載引起之其他併發症。此研究之目標為評估具有環形含鐵胚血球存在且需要恆定RBC輸注之分類為IPSS-R極低、低或中等風險型MDS之貧血患者中ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)對比安慰劑之安全性及功效。研究之設計將允許將患者初始隨機化為ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)或安慰劑組之週期，接著為雙盲治療週期且接著進行MDS疾病評估訪問。對於此等確定經歷臨床權利之患者(如由研究研究者藉由此疾病評估訪問判定)，其將允許進入研究之雙盲擴展階段。一旦患者停止研究治療，其將進入治療後之後續週期。 8.9.1 研究設計每三週一次皮下投與個體1.0 mg/kg之初始劑量之ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)。每三週一次皮下投與對照個體安慰劑。 (a) 包涵準則參與此研究之個體之包涵準則包括：(1)個體在簽署知情同意書時之年齡≥18週歲；(2)個體具有符合極低、低或中等風險疾病之經修改之國際預後評分系統(IPSS-R)分類之MDS診斷且具有：(a)骨髓中大於15%紅細胞前驅體為環形含鐵胚血球及(b)骨髓中少於5%母細胞；(3)個體在8週週期內需要紅血球輸注＞2個單位；(4)東部腫瘤協作組(Eastern Cooperative Oncology Group；ECOG)評分為0、1或2；(5)個體對先前ESA治療具有難治性/不耐受/不合格；對先前ESA治療之難治性需要不起反應或不再保持對先前含有ESA之療程(呈單一藥劑或組合(例如與G-CSF)形式)之反應的文檔；ESA療程必須為(a)大於40,000 IU/週之重組型人類紅血球生成素保持至少8個劑量或等效物，或(b)每三週一次大於500 μg之達貝泊汀α保持至少4個劑量或等效物；對先前ESA治療不耐受需要在引入之後的任何時間由與不耐受性或不良事件而停止先前含有ESA之療程(呈單一藥劑或組合(例如與G-CSF)形式)的文檔；對於先前未用ESA治療之個體，ESA不合格需要基於大於200 U/L之內源性血清紅血球生成素含量之對ESA之反應之低機率。 (b) 排除標準存在以下中之任一者將禁止個體參與研究：(1)使用用於潛在MDS疾病改善劑(例如免疫調節藥物、低甲基化劑或免疫抑止療法)或實驗藥劑之先前療法；(2)與del 5q細胞遺傳學異常相關之MDS；(3)二級MDS，亦即已知由於化學損傷或使用用於其他疾病之化學療法及/或輻射進行之治療而出現MDS；(4)由鐵、維生素B12或葉酸不足引起之已知臨床顯著貧血，或自體免疫性或遺傳性溶血性貧血，或胃腸道出血；藉由針對用於鐵之骨髓抽吸染色、所計算之運鐵蛋白飽和度(鐵/總鐵結合能力)≤20%或血清鐵蛋白≤15 μg/L測定鐵不足；(6)先前同種異體或自體幹細胞移植；(7)已知急性骨髓白血病(AML)之診斷史；(8)在隨機化之前5週內使用以下中之任一者：抗癌細胞毒性化學治療劑或治療、皮質類固醇(除用於除MDS以外的醫學病況之在隨機化之前≥1週之穩定或遞減劑量之個體以外)、鐵螯合劑(除在隨機化之前至少8週之穩定或遞減劑量之個體以外)、其他RBC造血生長因子(例如介白素-3)；(9)先前惡性病史，除MDS以外，除非個體已在≥5年時間內無疾病；允許具有以下病史/並行病狀之個體：皮膚之基底或鱗狀細胞癌、原位子宮頸癌瘤、原位乳房癌瘤、前列腺癌之偶然組織學表現(使用腫瘤、結節、轉移臨床分級系統之T1a或T1b)；或(10)在隨機化之前8週內進行重大手術；個體在隨機化之前必須自任何先前手術完全恢復。 (c) 結果量測結果此研究之主要量測結果為測定在任何連續的56天週期內成為RBC輸注非依賴性(亦即無需RBC輸注)之投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體之比例。第二量測結果包括測定在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)投藥之後，在任何連續84天週期內具有RBC輸注非依賴性(亦即無需RBC輸注)之投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體的比例。亦測定在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)投藥之後，在16週週期內具有輸注之RBC單位之數目降低之投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體的比例。此外，亦測定投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體中RBC輸注非依賴性之最大持續時間。最終，亦測定投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體實現RBC輸注非依賴性所需之時間；實現RBC輸注非依賴性之時間定義為隨機化與第一次觀測到輸注非依賴性之日期(例如56天無任何RBC輸注中之第1天)之間的時間。亦測定在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)投藥之後，在連續56天週期內實現經改善之紅血球血液學改善之投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體之比例。在某些態樣中，紅血球血液學改善由IWG定義。在某些態樣中，紅血球血液學改善如由經修改之2006 IWG所定義。在某些態樣中，低輸注負擔患者之紅血球血液學改善為患者中之血紅蛋白濃度增加至少1.5 g/dL保持至少8週。在某些態樣中，高輸注負擔患者之紅血球血液學改善為RBC輸注降低至少4個單位保持8週。將測定在不存在RBC輸注之情況下，投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)且在任何連續56天週期內實現血紅蛋白增加至少1.0 g/dL(與投與個體ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之前個體中之血紅蛋白濃度相比)之個體之比例。將測定投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體中之血清鐵蛋白含量與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)投藥之前之血清鐵蛋白含量相比之平均降低。將使用共變分析(ANCOVA)比較各組之間的治療差異，其中層別因子及基線(預先ActRIIB-hFC (SEQ ID NO:25)投藥)血清鐵蛋白值作為共變量。將測定投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體中之使用鐵螯合療法與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)投藥之前使用之螯合療法相比之平均降低。各個體之每日鐵螯合療法劑量之變化計算為基線後平均日劑量與基線平均日劑量之差。使用共變分析(ANCOVA)比較各組之間的治療差異，其中使用層別因子及基線鐵螯合療法值及共變量。亦測定在ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)投藥之後，在任何連續56天週期內實現嗜中性白血球血液學改善之投與ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之個體之比例。在某些態樣中，嗜中性白血球血液學改善由IWG定義。在某些態樣中，嗜中性白血球血液學改善為在投與個體ActRIIB-hFc (SEQ ID NO:25)之後，個體在56個連續日週期內嗜中性白血球增加至少100%且大於500個/微升。亦測定經歷急性骨髓白血病之個體之比例。亦使用及評估癌症研究及治療組織之生活質量調查表(European Organization for Research and Treatment of Cancer Quality of Life Questionnaire)。亦評估不良事件、總存活率、群體藥物動力學及不良事件。 9. 序列說明表 21 . 序列資訊

SEQ ID NO	說明	序列
1	人類ActRIIA前驅體多肽	MGAAAKLAFAVFLISCSSGAILGRSETQECLFFNANWEKDRTNQTGVEPCYGDKDKRRHCFATWKNISGSIEIVKQGCWLDDINCYDRTDCVEKKDSPEVYFCCCEGNMCNEKFSYFPEMEVTQPTSNPVTPKPPYYNILLYSLVPLMLIAGIVICAFWVYRHHKMAYPPVLVPTQDPGPPPPSPLLGLKPLQLLEVKARGRFGCVWKAQLLNEYVAVKIFPIQDKQSWQNEYEVYSLPGMKHENILQFIGAEKRGTSVDVDLWLITAFHEKGSLSDFLKANVVSWNELCHIAETMARGLAYLHEDIPGLKDGHKPAISHRDIKSKNVLLKNNLTACIADFGLALKFEAGKSAGDTHGQVGTRRYMAPEVLEGAINFQRDAFLRIDMYAMGLVLWELASRCTAADGPVDEYMLPFEEEIGQHPSLEDMQEVVVHKKKRPVLRDYWQKHAGMAMLCETIEECWDHDAEARLSAGCVGERITQMQRLTNIITTEDIVTVVTMVTNVDFPPKESSL
2	人類ActRIIA可溶(細胞外)，經處理之多肽序列	ILGRSETQECLFFNANWEKDRTNQTGVEPCYGDKDKRRHCFATWKNISGSIEIVKQGCWLDDINCYDRTDCVEKKDSPEVYFCCCEGNMCNEKFSYFPEMEVTQPTSNPVTPKPP
3	C端15個胺基酸缺失之人類ActRIIA可溶(細胞外)、經處理多肽序列	ILGRSETQECLFFNANWEKDRTNQTGVEPCYGDKDKRRHCFATWKNISGSIEIVKQGCWLDDINCYDRTDCVEKKDSPEVYFCCCEGNMCNEKFSYFPEM
4	編碼人類ActRIIA前驅蛋白之核酸序列	ATGGGAGCTGCTGCAAAGTTGGCGTTTGCCGTCTTTCTTATCTCCTGTTCTTCAGGTGCTATACTTGGTAGATCAGAAACTCAGGAGTGTCTTTTCTTTAATGCTAATTGGGAAAAAGACAGAACCAATCAAACTGGTGTTGAACCGTGTTATGGTGACAAAGATAAACGGCGGCATTGTTTTGCTACCTGGAAGAATATTTCTGGTTCCATTGAAATAGTGAAACAAGGTTGTTGGCTGGATGATATCAACTGCTATGACAGGACTGATTGTGTAGAAAAAAAAGACAGCCCTGAAGTATATTTTTGTTGCTGTGAGGGCAATATGTGTAATGAAAAGTTTTCTTATTTTCCAGAGATGGAAGTCACACAGCCCACTTCAAATCCAGTTACACCTAAGCCACCCTATTACAACATCCTGCTCTATTCCTTGGTGCCACTTATGTTAATTGCGGGGATTGTCATTTGTGCATTTTGGGTGTACAGGCATCACAAGATGGCCTACCCTCCTGTACTTGTTCCAACTCAAGACCCAGGACCACCCCCACCTTCTCCATTACTAGGGTTGAAACCACTGCAGTTATTAGAAGTGAAAGCAAGGGGAAGATTTGGTTGTGTCTGGAAAGCCCAGTTGCTTAACGAATATGTGGCTGTCAAAATATTTCCAATACAGGACAAACAGTCATGGCAAAATGAATACGAAGTCTACAGTTTGCCTGGAATGAAGCATGAGAACATATTACAGTTCATTGGTGCAGAAAAACGAGGCACCAGTGTTGATGTGGATCTTTGGCTGATCACAGCATTTCATGAAAAGGGTTCACTATCAGACTTTCTTAAGGCTAATGTGGTCTCTTGGAATGAACTGTGTCATATTGCAGAAACCATGGCTAGAGGATTGGCATATTTACATGAGGATATACCTGGCCTAAAAGATGGCCACAAACCTGCCATATCTCACAGGGACATCAAAAGTAAAAATGTGCTGTTGAAAAACAACCTGACAGCTTGCATTGCTGACTTTGGGTTGGCCTTAAAATTTGAGGCTGGCAAGTCTGCAGGCGATACCCATGGACAGGTTGGTACCCGGAGGTACATGGCTCCAGAGGTATTAGAGGGTGCTATAAACTTCGAAAGGGATGCATTTTTGAGGATAGATATGTATGCCATGGGATTAGTCCTATGGGAACTGGCTTCTCGCTGTACTGCTGCAGATGGACCTGTAGATGAATACATGTTGCCATTTGAGGAGGAAATTGGCCAGCATCCATCTCTTGAAGACATGCAGGAAGTTGTTGTGCATAAAAAAAAGAGGCCTGTTTTAAGAGATTATTGGCAGAAACATGCTGGAATGGCAATGCTCTGTGAAACCATTGAAGAATGTTGGGATCACGACGCAGAAGCCAGGTTATCAGCTGGATGTGTAGGTGAAAGAATTACCCAGATGCAGAGACTAACAAATATTATTACCACAGAGGACATTGTAACAGTGGTCACAATGGTGACAAATGTTGACTTTCCTCCCAAAGAATCTAGTCTATGA
5	編碼人類ActRIIA可溶(細胞外)多肽之核酸序列	ATACTTGGTAGATCAGAAACTCAGGAGTGTCTTTTCTTTAATGCTAATTGGGAAAAAGACAGAACCAATCAAACTGGTGTTGAACCGTGTTATGGTGACAAAGATAAACGGCGGCATTGTTTTGCTACCTGGAAGAATATTTCTGGTTCCATTGAAATAGTGAAACAAGGTTGTTGGCTGGATGATATCAACTGCTATGACAGGACTGATTGTGTAGAAAAAAAAGACAGCCCTGAAGTATATTTTTGTTGCTGTGAGGGCAATATGTGTAATGAAAAGTTTTCTTATTTTCCAGAGATGGAAGTCACACAGCCCACTTCAAATCCAGTTACACCTAAGCCACCC
6	包含融合至Fc域之ActRIIA之可溶細胞外域的融合蛋白質	THTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVD(A)VSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCK(A)VSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGPFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN(A)HYTQKSLSLSPGK*
7	融合至人類Fc域之人類ActRIIA之細胞外域	ILGRSETQECLFFNANWEKDRTNQTGVEPCYGDKDKRRHCFATWKNISGSIEIVKQGCWLDDINCYDRTDCVEKKDSPEVYFCCCEGNMCNEKFSYFPEMEVTQPTSNPVTPKPPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
8	蜜蜂蜂毒肽(HBML)之前導序列	MKFLVNVALVFMVVYISYIYA
9	組織纖維蛋白溶酶原活化因子(TPA)之前導序列	MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSP
10	原生ActRIIA	MGAAAKLAFAVFLISCSSGA
11	ActRIIA-hFc及ActRIIA-mFc N端序列	ILGRSETQE
12	ActRIIA之細胞外域之C端15個胺基酸缺失之ActRIIA-Fc蛋白質	ILGRSETQECLFFNANWEKDRTNQTGVEPCYGDKDKRRHCFATWKNISGSIEIVKQGCWLDDINCYDRTDCVEKKDSPEVYFCCCEGNMCNEKFSYFPEMTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
13	具有TPA前導序列之未經處理之ActRIIA-hFc	MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPGAAILGRSETQECLFFNANWEKDRTNQTGVEPCYGDKDKRRHCFATWKNISGSIEIVKQGCWLDDINCYDRTDCVEKKDSPEVYFCCCEGNMCNEKFSYFPEMEVTQPTSNPVTPKPPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
14	編碼具有TPA前導序列之未經處理之ActRIIA-hFc的核酸序列	ATGGATGCAATGAAGAGAGGGCTCTGCTGTGTGCTGCTGCTGTGTGGAGCAGTCTTCGTTTCGCCCGGCGCCGCTATACTTGGTAGATCAGAAACTCAGGAGTGTCTTTTTTTAATGCTAATTGGGAAAAAGACAGAACCAATCAAACTGGTGTTGAACCGTGTTATGGTGACAAAGATAAACGGCGGCATTGTTTTGCTACCTGGAAGAATATTTCTGGTTCCATTGAATAGTGAAACAAGGTTGTTGGCTGGATGATATCAACTGCTATGACAGGACTGATTGTGTAGAAAAAAAAGACAGCCCTGAAGTATATTTCTGTTGCTGTGAGGGCAATATGTGTAATGAAAAGTTTTCTTATTTTCCGGAGATGGAAGTCACACAGCCCACTTCAAATCCAGTTACACCTAAGCCACCCACCGGTGGTGGAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGTCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAATGAGAATTC
15	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端4個胺基酸缺失(SEQ ID NO:28之胺基酸25-130)且具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	ETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPP
16	人類ActRIIB前驅蛋白序列(A64)	MTAPWVALALLWGSLWPGSGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTLLTVLAYSLLPIGGLSLIVLLAFWMYRHRKPPYGHVDIHEDPGPPPPSPLVGLKPLQLLEIKARGRFGCVWKAQLMNDFVAVKIFPLQDKQSWQSEREIFSTPGMKHENLLQFIAAEKRGSNLEVELWLITAFHDKGSLTDYLKGNIITWNELCHVAETMSRGLSYLHEDVPWCRGEGHKPSIAHRDFKSKNVLLKSDLTAVLADFGLAVRFEPGKPPGDTHGQVGTRRYMAPEVLEGAINFQRDAFLRIDMYAMGLVLWELVSRCKAADGPVDEYMLPFEEEIGQHPSLEELQEVVVHKKMRPTIKDHWLKHPGLAQLCVTIEECWDHDAEARLSAGCVEERVSLIRRSVNGTTSDCLVSLVTSVTNVDLPPKESSI
17	人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸19-134)	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPT
18	C端15個胺基酸缺失之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸19-119)	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEA
19	編碼人類ActRIIB (A64)前驅蛋白之核酸序列	ATGACGGCGCCCTGGGTGGCCCTCGCCCTCCTCTGGGGATCGCTGTGGCCCGGCTCTGGGCGTGGGGAGGCTGAGACACGGGAGTGCATCTACTACAACGCCAACTGGGAGCTGGAGCGCACCAACCAGAGCGGCCTGGAGCGCTGCGAAGGCGAGCAGGACAAGCGGCTGCACTGCTACGCCTCCTGGGCCAACAGCTCTGGCACCATCGAGCTCGTGAAGAAGGGCTGCTGGCTAGATGACTTCAACTGCTACGATAGGCAGGAGTGTGTGGCCACTGAGGAGAACCCCCAGGTGTACTTCTGCTGCTGTGAAGGCAACTTCTGCAACGAGCGCTTCACTCATTTGCCAGAGGCTGGGGGCCCGGAAGTCACGTACGAGCCACCCCCGACAGCCCCCACCCTGCTCACGGTGCTGGCCTACTCACTGCTGCCCATCGGGGGCCTTTCCCTCATCGTCCTGCTGGCCTTTTGGATGTACCGGCATCGCAAGCCCCCCTACGGTCATGTGGACATCCATGAGGACCCTGGGCCTCCACCACCATCCCCTCTGGTGGGCCTGAAGCCACTGCAGCTGCTGGAGATCAAGGCTCGGGGGCGCTTTGGCTGTGTCTGGAAGGCCCAGCTCATGAATGACTTTGTAGCTGTCAAGATCTTCCCACTCCAGGACAAGCAGTCGTGGCAGAGTGAACGGGAGATCTTCAGCACACCTGGCATGAAGCACGAGAACCTGCTACAGTTCATTGCTGCCGAGAAGCGAGGCTCCAACCTCGAAGTAGAGCTGTGGCTCATCACGGCCTTCCATGACAAGGGCTCCCTCACGGATTACCTCAAGGGGAACATCATCACATGGAACGAACTGTGTCATGTAGCAGAGACGATGTCACGAGGCCTCTCATACCTGCATGAGGATGTGCCCTGGTGCCGTGGCGAGGGCCACAAGCCGTCTATTGCCCACAGGGACTTTAAAAGTAAGAATGTATTGCTGAAGAGCGACCTCACAGCCGTGCTGGCTGACTTTGGCTTGGCTGTTCGATTTGAGCCAGGGAAACCTCCAGGGGACACCCACGGACAGGTAGGCACGAGACGGTACATGGCTCCTGAGGTGCTCGAGGGAGCCATCAACTTCCAGAGAGATGCCTTCCTGCGCATTGACATGTATGCCATGGGGTTGGTGCTGTGGGAGCTTGTGTCTCGCTGCAAGGCTGCAGACGGACCCGTGGATGAGTACATGCTGCCCTTTGAGGAAGAGATTGGCCAGCACCCTTCGTTGGAGGAGCTGCAGGAGGTGGTGGTGCACAAGAAGATGAGGCCCACCATTAAAGATCACTGGTTGAAACACCCGGGCCTGGCCCAGCTTTGTGTGACCATCGAGGAGTGCTGGGACCATGATGCAGAGGCTCGCTTGTCCGCGGGCTGTGTGGAGGAGCGGGTGTCCCTGATTCGGAGGTCGGTCAACGGCACTACCTCGGACTGTCTCGTTTCCCTGGTGACCTCTGTCACCAATGTGGACCTGCCCCCTAAAGAGTCAAGCATCTAA
20	包含融合至Fc域之ActRIIB (A64；SEQ ID NO:17)之可溶細胞外域的融合蛋白質	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
21	包含融合至Fc域，C端15個胺基酸缺失(SEQ ID NO:18)之ActRIIB (A64)之可溶細胞外域的融合蛋白質	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
22	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端5個胺基酸缺失(SEQ ID NO:28之胺基酸25-129)且具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	ETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPP
23	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端3個胺基酸缺失(SEQ ID NO:28之胺基酸25-131)且具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	ETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPT
24	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端3個胺基酸缺失(SEQ ID NO:28之胺基酸25-131)且具有L79D突變且具有TPA前導序列之未經處理之ActRIIB-Fc融合蛋白質	MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPGAAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
25	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端3個胺基酸缺失(SEQ ID NO:28之胺基酸25-131)且具有L79D突變之經處理之ActRIIB-Fc融合蛋白質	ETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
26	人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸20-134)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPT
27	C端15個胺基酸缺失之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸20-119)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEA
28	人類ActRIIB前驅蛋白序列(R64)	MTAPWVALALLWGSLWPGSGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTLLTVLAYSLLPIGGLSLIVLLAFWMYRHRKPPYGHVDIHEDPGPPPPSPLVGLKPLQLLEIKARGRFGCVWKAQLMNDFVAVKIFPLQDKQSWQSEREIFSTPGMKHENLLQFIAAEKRGSNLEVELWLITAFHDKGSLTDYLKGNIITWNELCHVAETMSRGLSYLHEDVPWCRGEGHKPSIAHRDFKSKNVLLKSDLTAVLADFGLAVRFEPGKPPGDTHGQVGTRRYMAPEVLEGAINFQRDAFLRIDMYAMGLVLWELVSRCKAADGPVDEYMLPFEEEIGQHPSLEELQEVVVHKKMRPTIKDHWLKHPGLAQLCVTIEECWDHDAEARLSAGCVEERVSLIRRSVNGTTSDCLVSLVTSVTNVDLPPKESSI
29	人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸19-134)	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPT
30	C端15個胺基酸缺失之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸19-119)	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEA
31	人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸20-134)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPT
32	C端15個胺基酸缺失之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸20-119)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEA
33	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端3個胺基酸缺失(SEQ ID NO:16之胺基酸25-131)且具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	ETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPT
34	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端3個胺基酸缺失(SEQ ID NO:16之胺基酸25-131)且具有L79D突變且具有TPA前導序列之未經處理之ActRIIB-Fc融合蛋白質	MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPGAAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
35	EC域之N端6個胺基酸缺失且EC域之C端3個胺基酸缺失(SEQ ID NO:16之胺基酸25-131)且具有L79D突變之經處理之ActRIIB-Fc融合蛋白質	ETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
36	具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸20-134)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPT
37	具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸20-134)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPT
38	具有融合至具有GGG連接子之Fc域的L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸20-134)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
39	具有融合至Fc域的L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸20-134)	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
40	具有融合至Fc域的L79D突變且具有TPA前導序列之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:28之胺基酸20-134)	MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPGASGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
41	具有融合至Fc域的L79D突變且具有TPA前導序列之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列(SEQ ID NO:16之胺基酸20-134)	MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPGASGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWANSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
42	具有變異C端序列(揭示於WO2007/053775中)之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEGPWASTTIPSGGPEATAAAGDQGSGALWLCLEGPAHE
43	具有變異C端序列(揭示於WO2007/053775中)，具有L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEGPWASTTIPSGGPEATAAAGDQGSGALWLCLEGPAHE
44	具有變異C端序列(揭示於WO2007/053775中)，具有融合至具有TGGG連接子之Fc域的L79D突變之人類ActRIIB可溶(細胞外)、經處理之多肽序列	GRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWDDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEGPWASTTIPSGGPEATAAAGDQGSGALWLCLEGPAHETGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
45	編碼SEQ ID NO:24之核酸序列	ATGGATGCAATGAAGAGAGGGCTCTGCTGTGTGCTGCTGCTGTGTGGAGCAGTCTTCGTTTCGCCCGGCGCCGCCGAAACCCGCGAATGTATTTATTACAATGCTAATTGGGAACTCGAACGGACGAACCAATCCGGGCTCGAACGGTGTGAGGGGGAACAGGATAAACGCCTCCATTGCTATGCGTCGTGGAGGAACTCCTCCGGGACGATTGAACTGGTCAAGAAAGGGTGCTGGGACGACGATTTCAATTGTTATGACCGCCAGGAATGTGTCGCGACCGAAGAGAATCCGCAGGTCTATTTCTGTTGTTGCGAGGGGAATTTCTGTAATGAACGGTTTACCCACCTCCCCGAAGCCGGCGGGCCCGAGGTGACCTATGAACCCCCGCCCACCGGTGGTGGAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCCCCGGGTAAATGA
46	包含融合至Fc域之ActRIIB(R64；SEQ ID NO:29)之可溶細胞外域的融合蛋白質	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGPEVTYEPPPTAPTGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
47	包含融合至Fc域，C端15個胺基酸缺失(SEQ ID NO:30)之ActRIIB (R64)之可溶細胞外域的融合蛋白質	SGRGEAETRECIYYNANWELERTNQSGLERCEGEQDKRLHCYASWRNSSGTIELVKKGCWLDDFNCYDRQECVATEENPQVYFCCCEGNFCNERFTHLPEAGGGTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPVPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

10. 等效物儘管本發明參考其特定實施例詳細描述，應瞭解功能上等效之變化在本發明之範疇內。當然，除本文中所現實及描述之彼等外，對熟習此項技術者而言，本發明之各種修改將自先前描述及隨附圖式而變得顯而易見。此類修飾意欲屬於隨附申請專利範圍之範疇內。熟習此項技術者頂多使用常規實驗即可識別或能夠確定本文中所述之本發明的特定實施例的許多等效物。此類等效物欲由隨附申請專利範圍所涵蓋。本說明書中所提及之所有公開案、專利及專利申請案在本文中以引用之方式併入本說明書中，程度如同各個別公開案、專利或專利申請案專門且單獨地指示為以全文引用之方式併入本文中一般。

圖 1 描述實例2之給藥方案及研究設計。參見章節8.2‎。ActRIIA-I係指ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)。圖 2 描述對於高輸注負擔(HTB)個體，實現大於或等於56天之RBC輸注非依賴性(RBC-TI)之個體比例，或對於低輸注負擔(LTB)個體，實現大於或等於56天之RBC-TI且在8週無輸注週期內平均血紅蛋白(Hb)增加大於或等於1.5 g/dL之個體比例。ActRIIA-I係指ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)。圖 3 描繪由接收1.0 mg/kg劑量之ActRIIA (SEQ ID NO:7)之例示性HTB個體接收之RBC輸注單位之血紅蛋白含量(Hb，g/dL)及數目。圖3說明例示性HTB個體實現RBC-TI超過56天。圖 4 說明在用所指示劑量之ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)治療後，HTB反應者(n=19)之輸注負擔反應之最大持續時間。ActRIIA-I係指ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)。圖 5 說明在用所指示劑量之ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)治療後，實現大於或等於56天之RBC-TI之HTB個體(n=5)之RBC-TI反應之最大持續時間。ActRIIA-I係指ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)。圖 6 說明在用所指示劑量之ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)治療後，實現大於或等於56天之RBC-TI及大於或等於1.5 g/dL之平均Hb增加之LTB個體(n=9)之比例。ActRIIA-I係指ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)。圖 7 說明在用所指示劑量之ActRIIA (SEQ ID NO:7)治療後，實現大於或等於56天之RBC-TI及大於或等於1.5 g/dL之平均Hb增加之LTB個體(n=5)之RBC-TI反應之最大持續時間。ActRIIA-I係指ActRIIA信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:7)。圖 8 描述實例2之給藥方案及研究設計。參見章節8.3。BL=基線。ActRIIB-I係指ActRIIB信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:25)。圖 9 描述在用所指示劑量之ActRIIB信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:25)治療後，LTB個體中之最大血紅蛋白增加。圖 10 描述在用所指示劑量之ActRIIB信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:25)治療後，LTB個體中之網狀紅血球之增加。圖 11 描述以所指示劑量且根據所指示治療方案投與ActRIIB信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:25)之例示性LTB個體中之血紅蛋白含量。BL=基線。圖 12 描述以所指示劑量且根據所指示治療方案投與ActRIIB信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:25)之例示性LTB個體中之血紅蛋白含量。BL=基線。圖 13 描述以所指示劑量且根據所指示治療方案投與ActRIIB信號傳導抑制劑(SEQ ID NO:25)之例示性HTB個體中之血紅蛋白含量。BL=基線。圖 14 描繪由接收1.0 mg/kg劑量之ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)之例示性HTB個體接收之RBC輸注單位之血紅蛋白含量(Hb，g/dL)及數目。圖14說明在開始用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療後，例示性HTB個體實現RBC-TI持續至少337天。圖 15 描繪由接收1.0 mg/kg劑量之ActRIIA (SEQ ID NO:7)之例示性LTB個體接收之RBC輸注單位之血紅蛋白含量(Hb，g/dL)及數目。圖15說明在開始用ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療後，例示性LTB個體實現Hb含量之持續增加達至少337天。圖 16 描繪適合實現輸注非依賴性之個體中之輸注負擔。用0.75 mg/kg與1.75 mg/kg之間的ActRIIB-hFc治療個體。圖 17 描述在接收ActRIIA-hFC融合物(SEQ ID NO:7)之患者中，在任何8週週期內實現RBC輸注非依賴性(RBC-TI)及LTB患者之平均血紅蛋白增加等於或大於1.5 g/dL之個體之比例。深灰色陰影表示HTB患者且淺灰色陰影表示LTB患者。圖 18 說明在12個月ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療擴展研究過程中，例示性HTB個體之血紅蛋白反應。第一及最後一次治療劑量由箭頭表示。輸血事件由條柱表示。針對時間(天)標繪血紅蛋白(Hgb)結果(g/dL)。圖 19 說明在12個月ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療擴展研究過程中，例示性LTB個體之血紅蛋白反應。針對時間(月)標繪Hgb (g/L)之平均變化。圖 20 說明在12個月ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療擴展研究過程中，在接收1.0 mg/kg (由下部四個條柱表示之個體)及1.75 mg/kg (由上部條柱表示之個體)之劑量的ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療時，在六名個體中觀測到的輸注非依賴性反應。四名患者在整個研究期間經歷持續輸注非依賴性(中間4個條柱)。一名患者在約一個月的ActRIIA-hFc (SEQ ID NO:7)治療(上部條柱)之後獲得輸注非依賴性。一名患者在約2個月內經歷間歇性輸注非依賴性(下部條柱)。

Claims

一種II型活化素受體(ActRII)信號傳導抑制劑之用途，其係用以製備治療個體之貧血之藥物，其中該治療包含：(a)測定該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之百分比；及(b)若該個體中至少15%之紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則投與該個體介於0.1mg/kg與2.0mg/kg之間的醫藥學有效劑量之ActRII信號傳導抑制劑；其中該ActRII信號傳導抑制劑為多肽，其包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：(1)與SEQ ID NO：25具有90%一致性之胺基酸序列；(2)與SEQ ID NO：25具有95%一致性之胺基酸序列；(3)與SEQ ID NO：25具有98%一致性之胺基酸序列；及(4)具SEQ ID NO：25之胺基酸序列。
如請求項1之用途，其中該治療達成：(a)與該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之初始百分比相比，該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之百分比長期降低；其中該長期降低係在該ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，紅血球母細胞之百分比降低持續至少6、12、18或24個月；及/或(b)與該個體之初始血紅蛋白含量相比，該個體之血紅蛋白含量長期增加，其中該個體之該初始血紅蛋白含量為在投與該個體初始劑量之該ActRII信號傳導抑制劑之一段時間期前該個體之血紅蛋白含量；其中該長期增加係在該ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，血紅蛋白含量增加持續至少3、4、5、6、12、18或24個月。
如請求項1或2之用途，其中該ActRII信號傳導抑制劑係於短時間期內投與，且該短時間期為1、2、3、4或5個月。
如請求項1或2之用途，其中該治療進一步包含：在一時間期之後測定該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之第二百分比。
如請求項4之用途，其中：在1、2、3、4、5或6個月之後測定該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之第二百分比；及/或該治療進一步包含將經調整劑量之該ActRII信號傳導抑制劑投與該個體。
如請求項1或2之用途，其中該治療進一步包含：(a)在投與該個體該ActRII信號傳導抑制劑之後測定該個體之血紅蛋白含量；及(b)若該個體之血紅蛋白含量為至少11g/dL，則中斷投與該個體該ActRII信號傳導抑制劑。
如請求項6之用途，其中該血紅蛋白含量在投與該個體該ActRII信號傳導抑制劑之後6、12、18及/或24個月內測定。
如請求項1之用途，其中在投與該個體醫藥學有效劑量之該ActRII信號傳導抑制劑之1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、3個月、4個月、5個月或6個月內測定該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之百分比。
如請求項2之用途，其中該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之百分比之長期降低係：在該ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，較該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之初始百分比低至少1.5、2.5、5.0、7.5或10.0倍並持續至少6、12、18或24個月。
如請求項2之用途，其中該個體中血紅蛋白含量之長期增加係：在該ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後，持續至少3、4、5、6、12、18或24個月之介於約11g/dL與18g/dL之間之該個體血紅蛋白含量。
如請求項3之用途，其中：(a)在該ActRII信號傳導抑制劑投藥之該短時間期後，在該短時間期內經投與該ActRII信號傳導抑制劑之該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之百分比降低至小於10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小於1%並持續至少6、12、18或24個月，及/或(b)在該ActRII信號傳導抑制劑投藥之該短時間期後至少3、4、5、6、12、18或24個月，在該短時間期內經投與該ActRII信號傳導抑制劑之該個體中血紅蛋白含量在約11g/dL與18g/dL之間。
如請求項1、2及8至10中任一項之用途，其中若與個體中至多15%之紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之個體相比，該個體中至少15%、16%、17%、18%、19%或20%紅血球母細胞為環形含鐵胚血球，則該個體之一或多種血液學參數恢復正常的可能性提高。
如請求項12之用途，其中該血液學參數為血紅蛋白含量、血容比、紅血球計數或該個體中紅血球母細胞為環形含鐵胚血球之百分比。
如請求項2之用途，其中在該ActRII信號傳導抑制劑投藥時間期之後至少3、4、5、6、12、18或24個月，該個體無需紅血球輸注。
如請求項1、2、8至10及14中任一項之用途，其中該ActRII信號傳導抑制劑係： (a)(i)每三週投與一次；(ii)每28天投與一次；或(iii)每42天投與一次；及/或(b)經注射投與，其中該注射為皮下注射。
如請求項1、2、8至10及14中任一項之用途，其中該ActRII信號傳導抑制劑為多肽，其包含：(a)ActRIIB之細胞外域之片段，其中該片段由SEQ ID NO：23之胺基酸序列組成；(b)連接子；及(c)IgG之Fc。
如請求項1、2、8至10及14中任一項之用途，其中該ActRII信號傳導抑制劑為包含SEQ ID NO：25之胺基酸序列之多肽。
如請求項1、2、8至10及14中任一項之用途，其中該個體為人類。