TWI380830B

TWI380830B - 苯達莫司汀醫藥組成物

Info

Publication number: TWI380830B
Application number: TW095101383A
Authority: TW
Inventors: Jason Edward Brittain; Joe Craig Franklin
Original assignee: Cephalon Inc
Priority date: 2005-01-14
Filing date: 2006-01-13
Publication date: 2013-01-01
Also published as: US8609863B2; JP2013056902A; AR052877A1; US20130123316A1; MX2007008562A; EP1863452A2; MY157661A; NO343659B1; CN102078305B; BRPI0606332A2; IL184394A0; WO2006076620A2; US20150374671A1; US20200237726A1; US8895756B2; KR101648495B1; KR20070094848A; CN102078305A; EA013324B1; US20180296534A1

Description

苯達莫司汀醫藥組成物

本發明係關於用於治療各種病況，特別是致瘤性疾病與自體免疫疾病之醫藥組成物的領域。尤其，本發明關於包含氮芥(特別是氮芥苯達莫司汀，例如苯達莫司汀HCl)之醫藥調配物。

發明背景

本發明主張美國申請案序號60/644,354(申請日2005年1月14日，發明名稱“苯達莫司汀醫藥組成物”)之權益與優先權，其完整內容(包括圖式及申請專利範圍)以引用方式併入本文中。

以下敘述包括可用以瞭解本發明之資訊。其並非認可此類資訊係作為或與本發明相關之先前技藝，或者任何特別或隱含地引用參考之公開文獻為先前技藝。

氮芥因為在水溶液中具有高反應性，故難以調配成醫藥品，且往往係呈一種需要在投藥前先由純熟的醫護人員復原(reconstitution)(通常於水中)的凍乾形式提供用於投藥。一旦溶於水溶液中，氮芥便因水解作用而進行降解，因此，經復原之產品必須在其復原後盡快地投藥予患者。

苯達莫司汀(bendamustine)(4-{5-[雙(2-氯乙基)胺基]-1-甲基-2-苯并咪唑基}丁酸)為一種具有苯并咪唑環之不定形結構，其結構包括一個活性氮芥(參見式I，其列示苯達莫司汀鹽酸鹽)。

苯達莫司汀最初係於1963年於東德(GDR)合成，並於1971至1992年間於該國境內以Cytostasan®之商品名販售。從此，其已經以Cytostasan®之商品名銷售於德國。在德國其已被廣泛用於治療慢性淋巴球性白血病、霍奇金氏(Hodgkin's)症、非-霍奇金氏淋巴瘤、多發性骨髓瘤及乳癌。

由於苯達莫司汀會於水溶液中降解(類似其他氮芥)，故其係以凍乾產品提供。現今使用之苯達莫司汀凍乾調配物(Ribomustin®)含有苯達莫司汀鹽酸鹽與甘露糖醇，以一種呈白色粉末之滅菌凍乾形式，於復原後供靜脈內注射使用。所完成之凍乾產品當暴露至光時為不穩定。因此，需將產品儲放於棕色或琥珀色玻璃瓶中。現存之苯達莫司汀凍乾調配物含有可能在藥物製造期間，及/或於製造最終藥品之凍乾處理期間所產生的降解產物。

目前，係將苯達莫司汀調配呈供以每50 mL藥瓶100 mg藥物，或以每20 mL藥瓶25 mg藥物進行注射之凍乾粉末。儘可能在接近患者投藥時間，才將藥瓶開封並加以復原。將產品以40 mL(用於100 mg形式)或10 mL(用於25 mg形式)之注射用滅菌水復原。進而將經復原之產品稀釋成500 mL(q.s.)0.9%注射用氯化鈉溶液。投藥途徑為經由靜脈內灌流，歷時30至60分鐘。

在以40 mL注射用滅菌水復原之後，苯達莫司汀藥瓶可於室溫下儲放7小時，或於2-8℃下儲放6天仍保持安定。而該500 mL混合溶液必須在藥瓶復原7小時(假設該混合物是儲放於室溫)內投藥予患者。

現有之苯達莫司汀凍乾粉末的復原相當困難。來自臨床之報導指出復原可能需要至少十五分鐘，且可能需要長達三十分鐘。除了對負責復原該產品之醫護專業人員而言是繁重且耗時之外，在復原過程中苯達莫司汀長期暴露至水會增加其喪失功效，以及由於該產品被水水解而形成雜質的可能性。

因此，需要發展較容易進行復原，且較現存之苯達莫司汀凍乾(凍乾粉末)調配物具有更佳雜質分布之苯達莫司汀凍乾調配物。

德國(GDR)專利案號34727揭示一種製備於1-位置經取代之ω-[5-雙-(β-氯乙基)-胺基-苯并咪唑基-(2)]-烷羧酸的方法。

德國(GDR)專利案號80967揭示一種γ-[1-甲基-5-雙-(β-氯乙基)-胺基-苯并咪唑基-(2)]-丁酸氫氯化物之可注射製劑。

德國(GDR)專利案號159877揭示一種用於製備4-[1-甲基-5-雙-(β-氯乙基)-胺基-苯并咪唑基-2]-丁酸之方法。

德國(GDR)專利案號159289揭示一種苯達莫司汀之可注射溶液。

Ribomustin®苯達莫司汀產品專題論文(已更新 1/2002)http：//www.ribosepharm.de/pdf/ribomustinbedamustin/productmonograph.pdf提供關於Ribomustin®之資訊，包括產品描述。

Ni等人報導亞硝基尿SarCNU在純第三丁醇中較於純乙酸、二甲亞碸、甲醇、水或於TBA/水混合物中安定(Ni等人(2001)Intl.J.Phamaceutics 226：39-46)。

凍乾之環磷醯胺為該項技藝中已知，參見(例如)美國專利案號5,418,233；5,413,995；5,268,368；5,227,374；5,130,305；4,659,699；4,537,883及5,066,647。

凍乾之氮芥異環磷醯胺係揭示於國際專利公開案號WO 2003/066027；美國專利案號6,613,927；5,750,131；5,972,912；5,227,373及5,204,335。

Teagarden等人揭示藉由將PGE-1溶解於含乳糖與第三丁醇之溶液中，而製得的前列腺素E-1之凍乾調配物(美國專利案號5,770,230)。

本發明係關於氮芥(尤其是凍乾之苯達莫司汀)的安定醫藥組成物，及其用於治療各種病況，特別是致瘤性疾病與自體免疫疾病的用途。

本發明之一項具體態樣為一種含有不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1(如式II所示)的苯達莫司汀醫藥組成物，式II

其中HP1之量為於釋出時，或於復原如本發明所述之苯達莫司汀凍乾醫藥組成物後在時間點0所存在的HP1量。較佳具體態樣為一種含有不多於約0.45%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1，較佳地不多於約0.40%，更佳地不多於約0.35%，更佳地不多於約0.30%，甚至更佳地不多於約0.25%之苯達莫司汀醫藥組成物。

本發明之另一具體態樣為，一種含有於釋出時或於復原後之時間點0不多於約0.1%至約0.3%苯達莫司汀雙體(如式III所示)的苯達莫司汀凍乾製劑

本發明之又另一具體態樣為，一種含有於釋出時或於復原後之時間點0不多於約0.5%(較佳地0.15%至約0.5%)苯達莫司汀乙酯(如式IV所示)的苯達莫司汀凍乾製劑

本發明之又另一具體態樣為，一種苯達莫司汀凍乾製劑，其中苯達莫司汀乙酯(如式IV所示)的濃度不多於約0.2%(較佳地0.1%)，大於被用於製造凍乾製劑之藥物本體中所存在的苯達莫司汀乙酯濃度。

本發明之另一具體態樣為，一種含有於藥品釋出時不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1的苯達莫司汀凍乾製劑。較佳具體態樣為一種含有不多於約0.45%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1，較佳地不多於約0.40%，更佳地不多於約0.35%，更佳地不多於約0.30%，甚至更佳地不多於約0.25%之苯達莫司汀凍乾製劑。本具體態樣之一方面為含有於藥品釋出時不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1的苯達莫司汀凍乾製劑，其中係將該凍乾製劑包裝於小藥瓶或其他醫藥上可接受之容器中。

於本發明之又另一方面，關於該HP1含量，苯達莫司汀凍乾製劑可於儲放在約2℃至約30℃下時保持安定達至少約6個月(較佳地12個月，較佳地24個月)至約36個月或更多。較佳之儲放溫度為約5℃及約室溫。

本發明之另一具體態樣為，一種其包括含有於不多於約0.5% HP1，較佳地不多於約0.45%，較佳地不多於約0.40%，更佳地不多於約0.35%，更佳地不多於約0.30%，甚至更佳地不多於約0.25%之苯達莫司汀醫藥組成物的醫藥劑量形式，其中HP1為於釋出時，或於復原本發明苯達莫司汀凍乾製劑後之最初時間點所存在的HP1量。於本發明之較佳方面，該劑量形式可為約5至500 mg苯達莫司汀，約10至300 mg苯達莫司汀，約25 mg苯達莫司汀，約100 mg苯達莫司汀，及約200 mg苯達莫司汀。

本發明之另一具體態樣為一種其包括含有於不多於約0.5% HP1之苯達莫司汀凍乾製劑的醫藥劑量形式。較佳之劑量形式可為約5至500 mg苯達莫司汀，約10至300 mg苯達莫司汀，約25 mg苯達莫司汀，約100 mg苯達莫司汀，及約200 mg苯達莫司汀。

於又另一具體態樣中，本發明包括一種其包括含有不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)，較佳地不多於約0.45%，較佳地不多於約0.40%，更佳地不多於約0.35%，更佳地不多於約0.30%，甚至更佳地不多於約0.25% HP1之苯達莫司汀，及微量之一或多種有機溶劑的苯達莫司汀醫藥組成物，其中該HP1為於釋出時，或於復原如本發明所揭示之苯達莫司汀凍乾醫藥組成物後之時間點0所存在的HP1量。於本具體態樣之不同方面，該有機溶劑係選自一或多種第三丁醇、正丙醇、正丁醇、異丙醇、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、乙腈、二氯甲烷、甲基乙基酮、甲基異丁基酮、1-戊醇、乙酸甲酯、四氯化碳、二甲亞碸、六氟丙酮、氯丁醇、二甲基碸、醋酸與環己烷。較佳之有機溶劑包括一或多種乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、異丙醇及第三丁醇。更佳之有機溶劑為第三丁醇，已知亦稱作TBA、t-丁醇、tert-丁醇或叔丁醇。

本發明涵括一種用以獲得苯達莫司汀產品之管理當局許可的方法，其改良包括將苯達莫司汀降解物之釋出規範設定為少於約4.0%，較佳地約2.0%至約4.0%(以苯達莫司汀之面積百分比)，或不然以達成本發明所述之醫藥組成物。本具體態樣之一方面為一種用於獲得苯達莫司汀產品之管理當局許可的方法，其包括將HP1之釋出規範設定為少於或等於1.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)。本文中之苯達莫司汀產品含有於釋出時不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1。

另一具體態樣為一種用於獲得苯達莫司汀產品之管理當局許可的方法，其改良包括將苯達莫司汀降解物之儲放期限規範設定為少於約7.0%，較佳地約5.0%至約7.0%(以苯達莫司汀之面積百分比)，其中該產品係儲放於約2℃至約30℃下。較佳之儲放溫度為約5℃及約室溫。本文中之苯達莫司汀產品含有於釋出時不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1。

本發明之另一具體態樣為一種用於製造苯達莫司汀凍乾製劑之方法，其包括控制最終產品中苯達莫司汀降解物之濃度，以使苯達莫司汀降解物之濃度於釋出時少於約4.0%，較佳地約2.0%至約4.0%(以苯達莫司汀之面積百分比)，或不然可達成本發明所述醫藥組成物。本文中之苯達莫司汀產品含有於釋出時不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)HP1。

本發明揭示一種用於製造苯達莫司汀凍乾製劑之方法，其包含控制最終產品中苯達莫司汀降解物之濃度，以使於釋出時，HP1之濃度係少於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)，且於產品有效期屆滿時，苯達莫司汀降解物之濃度係少於約7.0%，較佳地不多於約5.0%至約7.0%；其中該產品係儲放於約2℃至約30℃下。

本發明之另一具體態樣為一種包含一或多種有機溶劑之苯達莫司汀預-凍乾溶液或分散液，其中該溶液或分散液包括至少一種使安定濃度之有機溶劑，其可降低苯達莫司汀降解程度，以使於0至24小時凍乾期間所產生的HP1總量不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)，較佳地0.45%，較佳地0.40%，更佳地0.35%，更佳地0.30%，甚至更佳地0.25%。本具體態樣之一方面為從該預-凍乾溶液或分散液所製得之凍乾粉末。

本發明之又另一具體態樣為，一種包含一或多種有機溶劑之苯達莫司汀預-凍乾溶液或分散液，其中該溶液或分散液包括至少一種使安定濃度之有機溶劑，其可降低苯達莫司汀降解程度，以使於0至24小時凍乾期間所產生的苯達莫司汀乙酯總量不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)。本具體態樣之一方面為從該預-凍乾溶液或分散液所製得之凍乾粉末。

本發明之又另一具體態樣為一種包含一或多種有機溶劑之苯達莫司汀預-凍乾溶液或分散液，其中該溶液或分散液包括至少一種使安定濃度之有機溶劑，其可降低苯達莫司汀降解程度，以使於0至24小時凍乾期間所產生的苯達莫司汀乙酯(如式IV所示)總量不多於0.2%，較佳地0.1%，大於被用於製造凍乾製劑之藥物本體中所存在的苯達莫司汀乙酯的濃度。較佳之有機溶劑為第三丁醇。

本發明亦揭示用於製備苯達莫司汀凍乾製劑之方法，其包括將苯達莫司汀溶解於使安定濃度之介於約5%至約100%(v/v醇類)的醇類溶劑中，而形成預-凍乾溶液；以及將該預-凍乾溶液進行冷凍乾燥；其中從此類方法製得之苯達莫司汀凍乾製劑含有不多於約0.5%(以苯達莫司汀之面積百分比)如式II所示之HP1，其中該HP1為於釋出時，或於復原該苯達莫司汀凍乾醫藥組成物後之時間點0所存在的HP1量。其他醇類濃度包括約5%至約99.9%，約5%至約70%，約5%至約60%，約5%至約50%，約5%至約40%，約20%至約35%。醇類之較佳濃度係介於約20%至約30%。較佳之醇類包括一或多種甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇及第三丁醇。更佳之醇類為第三丁醇。第三丁醇之較佳濃度係介於約20%至約30%，較佳地為約30%。本具體態樣之一方面係於凍乾前添加賦形劑。較佳之賦形劑為甘露糖醇。苯達莫司汀之較佳預-凍乾濃度係介於約2 mg/mL至約50 mg/mL。

於一項用於製備苯達莫司汀凍乾製劑之較佳方法中，將該預-凍乾溶液進行冷凍乾燥之程序包含i)將該預-凍乾溶液冷凍至低於約-40℃(較佳地-50℃)之溫度以形成結凍溶液；ii)使該結凍溶液維持於或低於約-40℃(較佳地-50℃)下至少2小時；iii)令該結凍溶液漸增(ramping)至介於約-40℃至約-10℃間之第一乾燥溫度，而形成乾燥溶液；iv)維持約10至約70小時；v)令該乾燥溶液漸增至介於約25 ℃至約40℃間之第二乾燥溫度；及vi)維持約5至約40小時而形成苯達莫司汀凍乾製劑。於一項更佳方法中，將該預-凍乾溶液進行冷凍乾燥之程序包含i)將該預-凍乾溶液冷凍至約-50℃以形成結凍溶液；ii)使該結凍溶液維持於約-50℃下至少2小時至約4小時；iii)令該結凍溶液漸增至介於約-20℃至約-12℃間之第一乾燥溫度而形成乾燥溶液；iv)維持於第一乾燥溫度下約10至約48小時；v)令該乾燥溶液漸增至介於約25℃至約40℃之第二乾燥溫度；及vi)維持於第二乾燥溫度下至少5小時至多達約20小時。更佳之醇類為第三丁醇。第三丁醇之較佳濃度係介於約20%至約30%，較佳地為約30%。本具體態樣之一方面係於凍乾前添加賦形劑。較佳之賦形劑為甘露糖醇。苯達莫司汀之較佳預-凍乾濃度係介於約2 mg/mL至約50 mg/mL。

本發明之另一具體態樣為，從本發明所揭示製備苯達莫司汀凍乾製劑之方法獲得的凍乾粉末或製劑。

本發明亦包含用於冷凍乾燥之苯達莫司汀調配物，其包括賦形劑與使安定濃度之有機溶劑。較佳之調配物包括濃度為約15 mg/mL之苯達莫司汀，濃度為約25.5 mg/mL之甘露糖醇，濃度為約約30%(v/v)之第三丁醇與水。本發明此具體態樣包括，從此類苯達莫司汀調配物所製得之凍乾製劑。

本發明包括治療患者體內病況之方法，其包含投藥治療上有效量之本發明醫藥組成物，而該病況係可以該醫藥組成物治療者。某些可以本發明組成物進行治療之病況包括，慢性淋巴球性白血病(CLL)、霍奇金氏症、非-霍奇金氏淋巴瘤(NHL)、多發性骨髓瘤(MM)、乳癌、小細胞肺癌、過度增生性失調症及自體免疫疾病。較佳之病況包括NHL、CLL、乳癌與MM。較佳之自體免疫疾病包括類風溼性關節炎、多發性硬化或狼瘡。

本發明包括，本發明之醫藥組成物或醫藥製劑用於製造供治療患者體內病況(如上所定義)之醫藥品的用途，其包含投藥治療上有效量之本發明醫藥組成物，而該病況係可以該醫藥組成物治療者。

本發明亦包括，其中本發明之醫藥組成物係與一或多種抗瘤劑組合的治療方法，而該抗瘤劑係於投藥本發明醫藥組成物之前、同時或之後給予。較佳之抗瘤劑為對CD20具特異性之抗體。

本發明之另一項具體態樣為一種用於製造本發明之凍乾苯達莫司汀製劑的冷凍乾燥循環。較佳之冷凍乾燥循環包括a)在約8小時期間內冷凍至約-50℃；b)維持於-50℃下約4小時；c)在歷時約3小時期間內逐漸增溫至-25℃；d)維持於-10℃下約3小時；e)在歷時約3小時期間內逐漸增溫至約25℃至約40℃或更高溫；f)維持於約25℃至約40℃之間達約25小時；g)在歷時1小時期間內降溫至約20℃；h)於約20℃下，於13.5 psi之壓力下，卸料於醫藥上可接受之容器中，其係經密封；其中遍及第一乾燥之壓力為約150微米，且遍及第二乾燥為約50微米。此循環之一方面包含，其係逐漸增溫至約30-35℃達3小時，然後逐漸增溫至40℃達5小時之步驟(e)。此具體態樣之另一方面為，從此類冷凍乾燥循環所製備得之凍乾粉末。一種更佳之冷凍乾燥循環包括i)以層架溫度為約5℃開始進行進料；ii)在歷時約8小時期間內冷凍至約-50℃；iii)維持於-50℃下約4小時；iv)在歷時約3小時期間內逐漸增溫至-20℃；v)維持於-20℃下6小時，在歷時約1小時期間內逐漸增溫至-15℃；vi)維持於-15℃下約20小時；vii)在歷時約1小時期間內逐漸增溫至-15℃；viii)維持於-15℃下約20小時；ix)在歷時約0.5小時期間內逐漸增溫至-12℃；x)維持於-12℃下約15.5小時；xi)在歷時約15小時期間內逐漸增溫至約25℃至約40℃或更高溫；xii)維持於約25℃至約40℃之間達約10小時；xiii)在歷時約1小時期間內逐漸增溫至40℃；及xiv)維持於40℃下約5小時；於約5℃下，於13.5 psi之壓力下，卸料於醫藥上可接受之容器中，其係經密封；其中遍及第一乾燥之壓力為約150微米，且遍及第二乾燥為約50微米。於一項較佳具體態樣中，步驟(xi)係在歷時約15小時期間內逐漸增溫至約30-35℃。

本發明亦包含一種含有不多於約0.5% HP1(以苯達莫司汀之面積百分比)的苯達莫司汀醫藥劑量形式，其中該劑量形式包含小藥瓶或其他醫藥上可接受之容器，其中該HP1為於復原前，或於復原該劑量形式後之最初時間點所存在的HP1量。較佳之苯達莫司汀濃度包括約10至約500 mg/容器，約100 mg/容器，約5 mg至約2 g/容器及約170 mg/ 容器。

本發明亦包括苯達莫司汀之預-凍乾醫藥組成物。較佳之預-凍乾組成物包括苯達莫司汀HCl約15 mg/mL，甘露糖醇約25.5 mg/mL，約30%(v/v)之第三丁醇與水。

本發明之此等及其他具體態樣經描述於下文，或可基於以下揭示而彰顯於習於該項技藝人士。

用於本文，術語“調配”意指製備藥物(例如苯達莫司汀)呈適合投藥予哺乳動物患者(較佳係人類)之形式。因此，“調配物”可包括添加醫藥上可接受之賦形劑、稀釋劑或載體。

用於本文，術語“凍乾粉末”或“凍乾製劑”意指任何經由冷凍乾燥，亦即將水溶液冷凍-乾燥所製得之固體物質。水溶液可含有非水性溶劑，亦即其為由水性與一或多種非水性溶劑組成的溶液。較佳地，凍乾製劑為其中該固體物質係藉由，將由水性與一或多種非水性溶劑組成的溶液進行冷凍-乾燥所製得者，更佳地該非水性溶劑為一種醇類。

“安定醫藥組成物”意指，任何具有足夠安定性以具有可作為醫藥產品之用途的醫藥組成物。較佳地，安定醫藥組成物具有足以能於方便溫度(較佳地介於-20℃至40℃，更佳地為約2℃至約30℃)下儲放一段合理時間的安定性，例如使產品之儲放期限可短至一個月，但代表性地為六個月或更長，更佳地為一年或更長，甚至更佳地為二十四個月或更長，且甚至更佳地為三十六個月或更長。儲放期限或有效期可為，其中活性成份降解至低於90%純度之時間點。為本發明之目的，安定醫藥組成物包括具有如本發明所述特定雜質範圍的醫藥組成物。較佳地，安定醫藥組成物為其具有最低活性成份降解作用者，亦即其經過於2-30℃下達2-3年之時間，仍保持至少約85%(較佳地至少約90%，且更佳地至少約95%)未經降解的活性成份。

“安定之凍乾製劑”意指任何具有足夠安定性，例如具有類似於本文對於安定醫藥組成物所定義之特徵，以具有可作為醫藥產品的凍乾製劑之實用性。

“經降解”意指活性成份已經進行化學結構上的變化。

術語“治療上有效量”用於本文意指，欲進行投藥化合物可減輕該受治療疾病之一或多種病徵至某種程度的量。關於腫瘤之治療，治療上有效量係指其具有(1)減少腫瘤大小，(2)抑制(亦即，減緩至某程度，較佳地停止)腫瘤轉移，(3)抑制腫瘤生長至某程度(亦即，減緩至某程度，較佳地停止)，及/或(4)減輕一或多種與該癌症相關之病徵至某程度(或較佳地消除)之功效的量。治療上有效量亦可意指，預防於可能容易罹患該疾病，但尚未經歷或呈現該疾病之病徵的動物中發生該疾病(預防性治療)。進而，治療上有效量可為增加罹患最終疾之病患者的生存希望之量。對於苯達莫司汀用以治療非-霍奇金氏淋巴瘤，之代表性治療上有效劑量可為約60-120 mg/m²，呈單位劑量形式連續給予兩天。可約每三至四週重複進行該週期。對於治療慢性淋巴球性白血病(CLL)，可於第1及2天給予劑量為約80-100 mg/m²之苯達莫司汀。可於約4週後重複進行該週期。對於治療霍奇金氏症，苯達莫司汀可用於以於第1及15天施予劑量為25 mg/m²之柔紅霉素、於第1及15天施予劑量為10 mg/m²之博萊霉素、於第1及15天施予劑量為1.4 mg/m²之長春新鹼、及於第1-5天施予劑量為50 mg/m²之苯達莫司汀進行，且約每4週重複該週期的“DBVBe療程”中。對於乳癌，可於第1及8天施予苯達莫司汀(120 mg/m²)，組合以於第1及8天施予劑量為40 mg/m²之氨甲蝶呤、及於第1及8天施予劑量為600 mg/m²之5-氟尿嘧啶，約每4週重複該週期。作為第二線乳癌療法，可於第1及2天給予劑量為100-150 mg/m²之苯達莫司汀。

用於本文“致瘤性”意指一種異常生長之腫瘤，此類生長係因為不進行一般限制生長之細胞增生而發生。用於本文“抗瘤劑”係指，任何可抑制、消除、延緩或逆轉細胞之致瘤性表型的化合物、組成物、混合物、共-混合物或摻合物。

用於本文“過度增生”係指細胞因對特別生長因子反應的過度生產。“過度增生性疾病”為其中細胞因對特別生長因子反應而過度生產之疾病。此類“過度增生性疾病”之實例包括，糖尿病性視網膜病變、牛皮顯、子宮內膜異位、癌症、黃斑變性疾病及良性生長疾病，例如前列腺肥大。

用於本文，術語“小藥瓶”意指任何可密閉容器，不論為硬式或為軟式。

“控制”用於本文意指施予適當製程控制，以助於達成欲受控制之事件。例如，於所給予之個案中，“控制”可意指有規則地或隨機地測試個別或許多樣本；將降解產物之濃度設定為釋出規範；選擇處理條件，例如於預-凍乾溶液或分散液中使用醇類及/或其他有機溶劑，以確保活性成份之降解物濃度不會無法接受地過高；等等。藉由設定降解產物量之釋出規範而控制降解物，可有助於醫藥產品獲得由管理當局(例如美國食品與藥物管理署與其他國家或區域中的類似機關(“局”))核發之管控許可。

術語“醫藥上可接受”用於本文意指其為醫藥上可接受之事物，例如醫藥組成物中之組成份(包括容器)，其不會造成無法接受之藥理活性喪失，或無法接受之副作用。醫藥上可接受之組成份實例可參見美國藥典(USP)，國家藥典(NF)，收錄於美國藥物類協定，舉行於Rockville,Md.於1990，及FDA活性成份指南1990、1996由美國食品與藥物管理署發佈(皆以引用方式納入本文作為參考，包括任何圖式)。亦可使用符合超出USP/NF限制與/或規範以外之要求的其他等級溶液或組成份。

術語“醫藥組成物”用於本文應意指係於可使其適合投藥予人類之條件下所製得組成物，例如其係於GMP條件下製得且含有醫藥上可接受之賦形劑，例如(但不限定於) 安定劑、填充劑、緩衝劑、載體、稀釋劑、載劑、助溶劑及黏合劑。用於本文醫藥組成物包括(但不限定於)預凍乾溶液或分散液，以及於凍乾製劑復原後立即用於注射或灌流之液體形式。

“醫藥劑量形式”用於本文意指於本發明所揭示存在容器中，且其量適用於進行復原及一或多次劑量(代表性地約1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-10或約1-20次劑量)之投藥的醫藥組成物。較佳地，“醫藥劑量形式”用於本文意指於本發明所揭示存在容器中，且其量適用於進行復原及一或多次劑量(代表性地約1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-10或約1-20次劑量)之遞送的醫藥組成物。醫藥劑量形式可包含小藥瓶或注射器或其他適宜之醫藥上可接受的容器。適用於注射或灌流之醫藥劑量形式可包括滅菌水溶液或分散液或滅菌粉末，其包含適於無刻意製備滅菌可注射或可灌流溶液或分散液之活性成份。總之，最終的劑量形式為滅菌、流體且於製造及儲放條件下為安定者。液態載體或載劑可為溶劑或液體分散介質，其包含(例如)水、乙醇、諸如甘油、丙二醇或液態聚乙二醇等多元醇、植物油、無毒性甘油酯類及其適宜之混合物。可藉由各種抗菌劑與抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯類、氯丁醇、酚、山梨酸、硫柳汞等防止微生物生長。

用於本文，術語“賦形劑”意指用於將活性醫藥成份(API)調配成醫藥調配物之物質；於較佳具體態樣中，賦形劑不會減低或干擾API之主要治療功效。較佳地，賦形劑為治療上惰性的。術語“賦形劑”包含載體、稀釋劑、載劑、助溶劑、安定劑、填充劑與黏合劑。賦形劑亦可為該等因製造過程之間接或不預期結果而存在醫藥調配物中的物質。較佳地，賦形劑係經許可用於，或被認為對於人類及動物投藥為安全者，亦即GRAS物質(一般認為安全)。GRAS物質由美國食品與藥物管理署列述於聯邦管理法規(CFR)之21 CFR § 182與21 CFR § 184，引用方式納入本文作為參考。較佳之賦形劑包括(但不限定於)己糖醇類，包括甘露糖醇及其類似物。

用於本文，“使安定濃度之有機溶劑”或“使安定濃度之醇類”意指該量之有機溶劑或醇類可減低苯達莫司汀之降解程度，以達到最終藥物產品中所限定的降解物濃度。例如，關於降解產物HP1，使安定濃度之有機溶劑為其量可導致HP1濃度(以苯達莫司汀之面積百分比)少於約0.5%，較佳地少於0.45%，較佳地少於0.40%，更佳地少於0.35%，更佳地少於0.30%，且甚至更佳地少於0.25%者。關於最終藥物產品之整體或總體濃度，使安定濃度之有機溶劑為其量可導致總降解物濃度(於藥物產品釋出時)少於約7%(以苯達莫司汀之面積百分比)，較佳地少於約6%，較佳地少於約5%，且甚至更佳地少於約4%者。“以苯達莫司汀之面積百分比”意指當以HPLC測定時，特定降解物(例如HP1)之量相對於苯達莫司汀之量。

術語“有機溶劑”意指一種能夠溶解其他物質之有機物質，通常為液體。

用於本文，“微量有機溶劑”意指其相當於或低於用於醫藥產品之所建議濃度，例如由ICH指標(國際和諧會議，雜質-殘餘溶劑之指標。Q3C.聯邦記錄.1997；62(247)：67377)所建議者。底限值為可被偵測到之最低量。

術語“釋出(release)”或“於釋出時(at release)”意指藥物產品已符合釋出規範，且可用於其所欲達到之醫藥目的。

A.通則

本發明提供從苯達莫司汀製備得之安定、醫藥上可接受之組成物。尤其，本發明提供用於苯達莫司汀HCl之冷凍乾燥的調配物。從此等調配物獲得之凍乾粉末，較目前可得之苯達莫司汀凍乾粉末更容易進行復原。而且，在特定雜質(特別是HP1、苯達莫司汀雙體及苯達莫司汀乙酯)方面，本發明之凍乾產品於復原前、於凍乾物儲放時或於進行復原與混合後，較Ribomustin®具有較佳的雜質分布。

本發明進一步提供用於治療致瘤性疾病之苯達莫司汀調配物。本發明所述之調配物可單獨，或與至少一種額外抗瘤劑及/或放射性療法組合進行投藥。

本發明一方面為用以於冷凍乾燥製程之前與期間，於儲放時或於復原時增進苯達莫司汀安定性的條件及方法。

可用於與本發明之調配物組合的抗瘤劑包括該等列述於默克索引11版，pp 16-17，默克股份有限公司(1989)及化學療法來源書籍(1997)者。該二書籍為習於該項技藝人士所熟知且可容易獲得。

有許多抗瘤劑以可用於商業用途、臨床評估與臨床前之研發，其可選擇用於藉由組合藥物化療所進行之腫瘤治療。此類抗瘤劑區分成數種主要大類，亦即，抗生素-類型藥劑、共價DNA-結合藥物、抗代謝物藥劑、激素類藥劑(包括糖皮質激素例如潑尼松與地塞米松)、免疫學藥劑、干擾素-類型藥劑、分化劑例如類視黃酸、前-細胞凋亡藥劑、及雜項類藥劑包括諸如反義、小干擾性RNA等化合物。或者，可使用其他抗癌劑，例如金屬基質蛋白酶(MMP)抑制劑、SOD模擬物或阿伐v貝他₃抑制劑。

一族可用於與本發明化合物組合之抗瘤劑，係由抗代謝物-類型藥劑所組成。適宜之抗代謝物抗瘤藥劑係選自阿拉諾新(alanosine)、AG2037(Pfizer)、5-血纖維蛋白原(5-FU-fibrinogen)、刺五加葉酸(acanthifolic acid)、胺基噻二唑、布喹那鈉(brequinar sodium)、卡莫氟(carmofur)、Ciba-Geigy CGP-30694、環戊基胞嘧啶、磷酸阿糖胞苷硬脂酸酯、阿糖胞苷(cytarabine)共軛物、Lilly DATHF、Merrel Dow DDFC、地扎胍寧(dezaguanine)、二去氧胞苷(dideoxycytidine)、二去氧鳥苷(dideoxyguanosine)、didox、吉富(Yoshitomi)DMDC、去氧氟尿苷(doxifluridine)、Wellcome EHNA、默克& Co.EX-105、法扎拉濱(fazarabine)、氟尿苷(floxuridine)、磷酸氟達拉濱(fludarabine)、5-氟尿嘧啶、N-(2'-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶、第一製藥FO-152(Daiichi Seiyaku FO-152)、異丙基吡咯啉、Lilly LY-188011、Lilly LY-264618、甲苯佐平 (methobenzaprim)、甲氨蝶呤(methotrexate)、Wellcome MZPES、去甲亞精胺(norspermidine)、NCI NSC-127716、NCI NSC-264880、NCI NSC-39661、NCI NSC-612567、Warner-Lambert PALA、噴司他丁(pentostatin)、吡曲克辛(piritrexim)、plicamycin、朝日化學PL-AC(Asahi Chemical PL-AC)、武田TAC-788(Takeda TAC-788)、硫鳥嘌呤、噻唑呋林(tiazofurin)、Erbamont TIF、三甲曲沙(trimetrexate)、酪胺酸激酶抑制劑、酪胺酸蛋白質激酶抑制劑、大鵬UFT(Taiho UFT)及優你生(unicytin)。

第二族可用於與本發明化合物組合之抗瘤劑，係由共價DNA-結合藥劑所組成。適宜之烷化-類抗瘤藥劑可選自鹽野木254-S(Shionogi 254-S)、醛-磷醯胺類似物、六甲蜜胺(altretamine)、阿那昔酮(anazirone)、Boehringer Mannheim BBR-2207、bestrabucil、布度鈦(budotitane)、和久長CA-102(Wakunaga CA-102)、卡鉑(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、Chinoin-139、Chinoin-153、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、順鉑(cisplatin)、環磷醯胺、美國氰胺CL-286558、Sanofi CY-233、cyplatate、Degussa D-19-384、住本DACHP(Myr)₂、二苯基螺默司汀(diphenylspiromustine)、細胞抑制性二鉑(diplatinum cytostatic)、Erba偏端霉素(Erba distamycin)衍生物、Chugai DWA-2114R、ITI E09、依默司汀(elmustine)、Erbamont FCE-24517、雌默司汀(estramustine)磷酸鈉、福默司汀(fotemustine)、Unimed G-6-M、Chinoin GYKI-17230、 hepsul-fam、異環磷醯胺(ifosfamide)、異丙鉑(iproplatin)、洛默司汀(lomustine)、馬磷醯胺(mafosfamide)、美佐侖(melphalan)、二溴衛茅醇(mitolactol)、日本化藥NK-121、NCI NSC-264395、NCI NSC-342215、奧沙利鉑(oxaliplatin)、Upjohn PCNU、潑尼默司汀(prednimustine)、Proter PTT-119、雷默司汀(ranimustine)、司默司汀(semustine)、SmithKline SK&F-101772、Yakult Honsha SN-22、螺默司汀(spiromustine)、田邊製藥TA-077、牛磺默司汀(tauromustine)、替莫唑胺(temozolomide)、替羅昔隆(teroxirone)、四鉑(tetraplatin)及三莫拉摩(trimelamol)。

另一族可用於與本發明化合物組合之抗瘤劑，係由抗生素-類抗瘤劑所組成。適宜之抗生素-類抗瘤劑可選自大鵬4181-A、阿克拉霉素(aclarubicin)、放線菌素D、放線菌酮(actinoplanone)、阿拉諾新(alanosine)、Erbamont ADR-456、氣普來新(aeroplysinin)衍生物、味之素AN-201-II、味之素AN-3、日本曾田茴香霉素(anisomycins)、蒽環霉素(anthracycline)、阿霉素-A、bisucaberin、Bristol-Myers BL-6859、Bristol-Myers BMY-25067、Bristol-Myers BMY-25551、Bristol-Myers BMY-26605、Bristol-Myers BMY-27557、Bristol-Myers BMY-28438、硫酸博來霉素(bleomycin sulfate)、苔蘚蟲素-1(bryostatin-1)、大鵬C-1027、calichemycin、chromoximycin、dactinomycin、柔紅霉素(daunorubicin)、Kyowa Hakko DC-102、Kyowa Hakko DC-79、Kyowa Hakko DC88A、Kyowa Hakko DC89-A1、 Kyowa Hakko DC92-B、蒽環霉素B(ditrisarubicin B)、鹽野木DOB-41、多柔比星(doxorubicin)、多柔比星-血纖維蛋白原、依沙米星-A(elsamicin-A)、表柔比星(epirubicin)、erbstatin、去羥阿霉素(esorubicin)、esperamicin-A1、esperamicin-A1b、Erbamont FCE-21954、藤沢FK-973、佛司曲辛(fostriecin)、藤沢FK-900482、滑行菌素(glidobactin)、gregatin-A、grincamycin、herbimycin、伊柔比星(idarubicin)、隱杯傘素(illudins)、kazusamycin、kesarirhodins、Kyowa Hakko KM-5539、Kirin Brewery KRN-8602、Kyowa Hakko KT-5432、Kyowa Hakko KT-5594、Kyowa Hakko KT-6149、美國氰胺LL-D49194、明治成果ME 2303、美洛格瑞(menogaril)、絲裂霉素(mitomycin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、SmithKline M-TAG、neoenactin、日本化藥NK-313、日本化藥NKT-01、SRI國際NSC-357704、氧化賴胺酸(oxalysine)、oxaunomycin、培來霉素(peplomycin)、pilatin、吡柔比星(pirarubicin)、porothramycin、吡啶霉素A(pyrindamycin A)、Tobishi RA-I、瑞帕霉素(rapamycin)、根霉素(rhizoxin)、羅多霉素(rodorubicin)、sibanomicin、siwenmycin、住友SM-5887、雪印SN-706、雪印SN-07、sorangicin-A、稀疏霉素(sparsomycin)、SS製藥SS-21020、SS製藥SS-7313B、SS製藥SS-9816B、斯堡霉素B(steffimycin B)、大鵬4181-2、泰來霉素(talisomycin)、武田TAN-868A、terpentecin、thrazine、tricrozarin A、Upjohn U-73975、Kyowa Hakko UCN-10028A、藤沢WF-3405、吉富Y-25024及佐柔比星(zorubicin)。

第四族可用於與本發明化合物組合之抗瘤劑包括雜項類抗瘤藥劑，其選自阿伐-胡蘿蔔素(alpha-carotene)、阿伐-二氟甲基-精胺酸、阿若曲丁(acitretin)、三氧化二砷、Avastin®(bevacizumab)、Biotec AD-5、Kyorin AHC-52、alstonine、氨萘非特(amonafide)、amphethinile、胺苯吖啶(amsacrine)、Angiostat、ankinomycin、抗-瘤酮A10、抗瘤酮A2、抗瘤酮A3、抗瘤酮A5、抗瘤酮AS2-1、Henkel APD、艾非地可寧甘胺酸酯(aphidicolin glycinate)、天冬醯胺酶、Avarol、baccharin、batracylin、苯氟倫(benfluron)、氨苯醯色胺(benzotript)、Ipsen-Beaufour BIM-23015、比生群(bisantrene)、Bristol-Myers BMY-40481、Vestar boron-10、溴硫磷醯胺(bromofosfamide)、Wellcome BW-502、Wellcome BW-773、卡醋胺(caracemide)、鹽酸羧甲噻唑(carmethizole hydrochloride)、味之素CDAF、氯磺喹酮(chlorsulfaquinoxalone)、Chemes CHX-2053、Chemes CHX-100、Warner-Lambert CI-921、Warner-Lambert CI-937、Warner-Lambert CI-941、Warner-Lambert CI-958、克藍氟脲(clanfenur)、利多氟酮(claviridenone)、ICN化合物1259、ICN化合物4711、Contracan、Yakult Honsha CPT-11、克雷斯托(crisnatol)、curaderm、細胞鬆弛素B(cytochalasin B)、阿糖胞苷(cytarabine)、cytocytin、Merz D-609、DABIS馬來酸酯、達卡巴(dacarbazine)、達替氯銨(datelliptinium)、didemnin-B、二血卟啉醚(dihaematoporphyrin ether)、二羥基侖哌隆(dihydrolenperone)、地那林(dinaline)、司他霉素(distamycin)、Toyo Pharmar DM-341、Toyo Pharmar DM-75、第一製藥DN-9693、elliprabin、依利醋銨(elliptinium acetate)、epothiones、津村EPMTC、erbitux、麥角胺(ergotamine)、erlotnib、伊托泊苷(etoposide)、依曲替酯(etretinate)、芬維A胺(fenretinide)、藤沢FR-57704、硝酸鍺、genkwadaphnin、Gleevec®(imatnib)、Chugai GLA-43、Glaxo GR-63178、gefitinib、奇果菌素(grifolan)NMF-5N、十六烷膽鹼磷酸、Green Cross HO-221、高三尖杉酯鹼(homoharringtonine)、羥基脲、BTG ICRF-187、茚辛(indanocine)、依莫福新(ilmofosine)、異谷胺酸、異維A酸(isotretinoin)、大塚JI-36、Ramot K-477、大塚K-76COONa、Kureha化學K-AM、MECT Corp KI-8110、美國氰胺L-623、白細胞調節素、氯尼達明(lonidamine)、Lundbeck LU-23-112、Lilly LY-186641、NCI(US)MAP、marycin、甲氟喹(mefloquine)、Merrel Dow MDL-27048、Medco MEDR-340、merbarone、份菁(merocyanine)衍生物、甲基苯胺吖啶(methylanilinoacridine)、分子遺傳學MGI-136、minactivin、米托萘胺(mitonafide)、米托喹酮(mitoquidone)、蒙匹胺醇(mopidamol)、毛曲醯胺(motretinide)、Zenyaku Kogyo MST-16、N-(視黃醯基)胺基酸、Nisshin Flour Milling N-021、N-醯化去羥基丙胺酸、萘氧唑酮(nafazatrom)、Taisho NCU-190、諾可達唑(nocodazole)衍生物、Normosang、NCI NSC-145813、NCI NSC-361456、NCI NSC-604782、NCI NSC-95580、生長抑素八肽(octreotide)、Ono ONO-112、oquizanocine、Akzo Org-10172、紫杉醇、胰抑制素、泊澤尼普定(pazelliptine)、Warner-Lambert PD-111707、Warner-Lambert PD-115934、Warner-Lambert PD-131141、Pierre Fabre PE-1001、ICRT肽D、吡羅蒽醌(piroxantrone)、聚血卟啉(polyhaematoporphyrin)、聚烯瑞尼酸(polypreic acid)、Efamol卟啉、probimane、丙卡巴肼(procarbazine)、丙谷胺(proglumide)、Invitron蛋白酶nexin I、Tobishi RA-700、雷佐生(razoxane)、Sapporo Breweries RBS、restricin-P、雷替尼卜定(retelliptine)、維A酸、Rhone-Poulenc RP-49532、Rhone-Poulenc RP-56976、Rituxan®(與其他抗CD20抗體，例如Bexxar®、Zevalin®)、SmithKline SK&F-104864、抑制素(Lipitor®等)、住本SM-108、Kuraray SMANCS、SeaPharm SP-10094、spatol、螺環丙烷衍生物、鍺螺銨(spirogermanium)、Unimed、SS製藥SS-554、strypoldine、Stypoldione、Suntory SUN 0237、Suntory SUN 2071、奧古蛋白二氮芥、沙立度胺(Thalidomide)、沙立度胺類似物、富山T-506、富山T-680、紫杉醇、Teijin TEI-0303、替尼泊苷(teniposide)、thaliblastine、Eastman Kodak TJB-29、生育三烯酚(tocotrienol)、拓撲司汀(Topostin)、Teijin TT-82、Kyowa Hakko UCN-01、Kyowa Hakko UCN-1028、ukrain、 Eastman Kodak USB-006、硫酸長春鹼、長春新鹼、長春地鹼、長春醯胺、長春瑞濱、長春曲醇、長春利定、withanolides及山之內YM-534(Zometa®)。

可用於與本發明之化學療法組合的放射性藥劑實例為AD-5、adchnon、氨磷丁類似物、detox、dimesna、1-102、MM-159、N-醯化去羥基丙胺酸、TGF-Genetech、替羅替模(tiprotimod)、amifostine、WR-151327、FUT-187、經皮酮基布洛芬(ketoprofen transdermal)、nabumetone、過氧化物歧化酶(Chiron與Enzon)。

用於製備上述抗瘤劑之方法可見於文獻。例如，製備多柔比星(doxorubicin)之方法，經描述於美國專利案號3,590,028及4,012,448。用於製備金屬蛋白酶抑制劑之方法經描述於EP 780386。用於製備阿伐v貝他₃抑制劑之方法經描述於WO 97/08174。

較佳之抗瘤劑包括(但不限定於)柔紅霉素(daunorubicin)、博來霉素(bleomycin)、長春新鹼(vincristine)、多柔比星(doxorubicin)、達卡巴肼(dacarbazine)、潑尼松隆(prednisolone)、米托蒽醌(mitoxantrone)、潑尼松(prednisone)、甲氨蝶呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶、地塞米松(dexamethasone)、沙立度胺(thalidomide)、沙立度胺衍生物、2ME2、Neovastat、R 11 5777、三氧化二砷、bortezomib、他莫昔芬(tamoxifen)、G3139(反義)與SU5416、絲裂霉素、抗-CD20抗體例如Rituxan®及R-etodolac其中一或多種。

可用於與本發明調配物結合，或替換其中一或多種組成份之較佳藥物療程包括(但不限定於)ABDV(多柔比星、博來霉素、長春新鹼、達卡巴肼)、DBV(柔紅霉素、博來霉素、長春新鹼)、CVPP(環磷醯胺、長春鹼、丙卡巴肼、潑尼松隆)、COP(環磷醯胺、長春新鹼、潑尼松隆)、CHOP(環磷醯胺、多柔比星、長春新鹼與潑尼松)及CMF(環磷醯胺、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶)。其他療程列示於下表A。

如本文所述，苯達莫司汀之凍乾調配物係於去除水中之有機溶劑後而達成。用於製備此類調配物之溶劑的最具代表性實例為第三丁醇(TBA)。其他可使用之有機溶劑包括乙醇、正-丙醇、正-丁醇、異丙醇、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、乙腈、二氯甲烷、甲基乙基酮、甲基異丁基酮、丙酮、1-戊醇、乙酸甲酯、甲醇、四氯化碳、二甲亞碸、六氟丙酮、氯丁醇、二甲基碸、醋酸、環己烷。此等前述溶劑可個別地或組合使用。可用之溶劑必須與苯達莫司汀形成安定溶液，且必須不會有些許降解或去活化API。苯達莫司汀於所選擇溶劑中之溶解度必須夠高，以形成該藥物溶於溶劑之商業上可利用濃度。此外，該溶劑應能夠容易地從該藥物產品之水性分散液或溶液中去除，例如藉由冷凍乾燥或真空乾燥。較佳地，係使用具有濃度為約2-80 mg/mL，較佳地約5至40 mg/mL，更佳地5-20 mg/mL，且甚至更佳地12至17 mg/mL苯達莫司汀之溶液。

可將醫藥上可接受之冷凍乾燥賦形劑溶解於水相中。可用於本發明之賦形劑實例包括(但不限定於)磷酸鈉或鉀、檸檬酸、酒石酸、明膠、甘胺酸及碳氫化合物，例如乳糖、蔗糖、麥芽糖、甘油、右旋糖、糊精、海藻糖與羥乙基澱粉。甘露糖醇係較佳的賦形劑。若希望可使用其他賦形劑，包括抗氧化劑例如(不限定於)抗壞血酸、乙醯基半胱胺酸、半胱胺酸、硫酸氫鈉、丁基-羥基茴香醚、丁基-羥基甲苯或醋酸阿伐-生育酚、或螯合劑。

根據本發明可使用之代表性調配物，與冷凍乾燥循環經列述於下文。冷凍乾燥可使用如用於冷凍乾燥或真空乾燥之標準裝置完成。循環可視用於裝填/完成之裝置及設備而有所變化。

根據本發明之一項代表性具體態樣，係首先將預-凍乾水溶液或分散液調配於醫藥上可接受之混合容器中。將溶液以無菌過濾至滅菌容器中，充填入適當大小之小藥瓶內，將其一部份塞住並裝入冷凍乾燥器中。使用本發明所述之冷凍乾燥技術，將溶液凍乾直到水分含量達到約0.1至約8.0%之範圍內。所成之凍乾粉末於約5℃至約25℃下安定呈一種凍乾粉末達約6個月至大於約2年，較佳地大於約3年，且可容易地以注射用滅菌水(或其他適宜之載體) 進行復原，以提供適於例如藉由非經腸道注射之內部投藥的苯達莫司汀液體調配物。對於靜脈內投藥，經復原之液體調配物(亦即，醫藥組成物)較佳為溶液。

一般，首先將預-凍乾溶液或分散液調配於醫藥上可接受之容器中，其係藉由：1)於包圍溫度下伴隨混合，將賦形劑例如甘露糖醇(約0至約50 mg/mL)加至水(約佔總體積之65%)中，2)於約20-35℃下伴隨混合，將有機溶劑(0.5-99.9% v/v)例如TBA加至該水溶液中，4)伴隨混合，將苯達莫司汀HCl加至所希望濃度，5)加水達到體積，及6)將溶液冷卻至約1℃至約30℃(較佳地約5℃)。雖然前述等步驟係以特定順序表示，習於該項技藝人士應瞭解，若需要可改變該等步驟之順序與量值。量值亦可以重量為基準。

可於冷凍乾燥前，先將預-凍乾溶液或分散液進行滅菌，滅菌通常係藉由無菌操作過濾，例如通過0.22微米或更小之濾膜而完成。可藉由該項技藝中已知之其他方法，例如輻射而達成溶液或分散液之滅菌。

於此個案中，經滅菌後，立即將溶液或分散液進行冷凍乾燥。一般，係將經過濾之溶液導入無菌接收容器中，然後再轉移至任何於其中可將調配物有效進行凍乾之適宜容器。通常係將調配物置於所成產品欲於其中銷售之容器，例如(但不限定於)如本發明所述且如該項技藝已知之小藥瓶中，有效地進行冷凍乾燥。

用於將預-凍乾溶液或分散液冷凍乾燥之代表性程序經列述於下文。然而，習於該項技藝人士應瞭解，可視諸如(但不限定於)預-凍乾溶液或分散液及冷凍乾燥裝置等物件，而對該程序或方法加以變更。

起初，將產物置於設定溫度下之冷凍乾燥室中，然後降至低於該產物之凝固點許多的溫度，一般達數個小時。較佳地，該溫度為或低於約-40℃達至少2小時。待完成冷凍後，將冷凍室與冷凝管通過真空幫浦抽真空，該冷凝管表面已經預先以循環冷凍劑冷卻。較佳地，該冷凝管已經預先冷卻低於該溶液之凝固點，較佳地冷卻至約-40℃，更佳地至約-50℃或更低，甚至較佳地至約-60℃或更低。此外，應持續將冷凍室抽真空直到獲得約10至約600微米，較佳地約50至約150微米之壓力。

然後將產物組成物於真空下，於該冷凍室與冷凝管中進行加溫。此通常係藉由於介於約10至約600微米之壓力下，將冷凍乾燥器內於冷凍乾燥製程中其上放置產物之層架進行加溫而完成。加溫程序應最適地非常漸進地進行，歷經數小時之時間。例如，產物溫度最初應從約-30℃增加至約-10℃，並維持約10-70小時。此外，可將產物溫度從凝固溫度歷時30-192小時增加至約25℃-40℃。為防止凍乾產物之粉末從小藥瓶噴出，應在最初的乾燥階段期間，將有機溶劑與水完全去除。可藉由真空安定化、冷凝管溫度及產物層架溫度確定完全乾燥。待經最初乾燥後，應將產物溫度增加至約25℃-40℃，並維持約5-40小時。

一旦完成乾燥循環後，可將冷凍室內之壓力以滅菌、乾燥氮氣(或同等氣體)緩慢地釋放至大氣壓力(或稍微較低)。若產物組成物已於容器(例如小藥瓶)中凍乾，則可將藥瓶塞住、取出並密封。可取出數個代表性樣本，以供進行各種物理、化學及微生物學測試而分析產物之品質。

凍乾之苯達莫司汀調配物代表性地係以醫藥劑量形式販售。本發明之醫藥劑量形式(雖然係呈小藥瓶形式)可為任何能夠保持滅菌環境的適宜容器，例如安瓿、注射器、共-藥瓶。此類容器可為玻璃或塑膠製，只要其材料不會與苯達莫司汀調配物相互作用。密封物代表性地為塞子，最代表性地為橡膠塞子，較佳為溴丁基橡膠塞子，其供給密封性封蓋。

待冷凍乾燥後，可將苯達莫司汀凍乾粉末充填入容器(例如小藥瓶)中，或另供選擇地可將預-凍乾溶液充填入此類藥瓶並於其中進行凍乾，形成直接含有凍乾苯達莫司汀調配物之小藥瓶。於其中充填或凍乾溶液後，將此類藥瓶以塞子密封，而提供密封、滅菌之醫藥劑量形式。代表性地，一個小藥瓶將含有包括約10-500 mg/藥瓶(較佳地約100 mg/藥瓶)苯達莫司汀與約5 mg-2 g/藥瓶(較佳地約170 mg/藥瓶)甘露糖醇之凍乾粉末。

本發明之凍乾調配物可以水(較佳係注射用滅菌水)或其他諸如共溶劑之滅菌液體進行復原，而提供適用於再進一步稀釋於適當靜脈內混合溶液，例如正常食鹽水之後例如經由非經腸道注射投藥的苯達莫司汀溶液。

B.溶解度

藉由目測法測定苯達莫司汀HCl(苯達莫司汀)溶於水(單獨)及與各種不同量慣用於冷凍乾燥之醇類，例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇及第三丁醇(TBA)中的溶解度。於室溫下製備得其量為15 mg/mL之苯達莫司汀與量為25.5 mg/mL甘露糖醇，溶於10 mL所指定醇類溶液中之組合物(參見表1)。然後將樣本置於5℃下冷藏，並於0、3、6及24小時後檢視是否出現顆粒與/或沈澱。

列示於表1之結果顯示，苯達莫司汀溶解度係取決於溫度及水溶液中醇類之量。關於所測試之醇類，苯達莫司汀之溶解度隨著醇類濃度增加而增加。沈澱物之形成亦取決於溫度與時間。與任一種醇類，苯達莫司汀不會立刻發生沈澱，但是在儲放於5℃下之後便結晶化。各醇類對溶解度之影響各有差異。無意受限於任何特定理論，諸如甲醇及乙醇等較小分子醇類，當與較大分子醇類(第三-丁醇及正-丁醇)比較時，對溶解度具有較少影響。然而，醇類之形狀亦很重要。例如，經發現於此系統中正-丙醇在預防沈澱方面較異丙醇佳。對於溶解度具有最大影響之二種醇類，為正-丙醇與第三-丁醇。

CCS表示澄清無色溶液

用於在各種溫度下定量測定三種不同溶液中苯達莫司汀溶解度之實驗，經摘要概述於圖1與表2中。用於該實驗之TBA之量(20%(v/v)及30%(v/v))係基於溶解度研究(結果敘述於下文)。對於受測試之兩種溶液，苯達莫司汀之溶解度隨著溫度從25℃至0℃而呈線性遞減。本實驗確定表1所列示之數據，並強調對於20%與30% TBA溶液在苯達莫司汀溶解度之差異。

C.溶解度

因為苯達莫司汀會被水解而在水溶液中不安定，故其需要進行冷凍乾燥以製得適用於醫藥用途之產品。然而，在製造凍乾藥物產品期間，通常於凍乾之前需要將水溶液進行裝填。因此，在苯達莫司汀及其他氮芥類之混合與裝填期間使用水溶液，會導致藥物產品降解。所以，評估各種不同醇類對於苯達莫司汀降解之影響，以決定是否能發現可允許較長裝填-完成時間，提供能較現有Ribomustin®調配物更快被復原之凍乾粉末，且/或提供較Ribomustin®具有更佳關於特定雜質(例如HP1及BM1雙體)之雜質分布的苯達莫司汀凍乾製劑之調配物。

較佳地，本發明之凍乾製劑關於HP1為安定，亦即HP1之量當儲放在約2℃至約30℃(較佳地5℃)下時，不會有些許增加(不超過儲放-半衰期規範)達6個月，更佳地12個月，且甚至更佳地多於24個月，例如36個月。

表3列示苯達莫司汀於有或無添加醇類之水中，於5℃下歷時24小時之安定性結果。苯達莫司汀於單獨水中快速降解，並顯著地形成水解產物HP1(單羥基苯達莫司汀)。

於此研究及其他長期安定性研究期間，所觀察到之另一主要降解物為苯達莫司汀之雙體。

於Ribomustin凍乾產物中獲得之其他降解物為苯達莫司汀乙酯(BMIEE)(式IV)與BMIDCE(式V)。當苯達莫司汀與乙醇反應時會形成BMIEE。

圖2概述將苯達莫司汀於5℃下，培育於各種不同醇類中達24小時後之HPLC分析的純度結果。結果係以總波鋒面積之面積百分比表示。對應圖2之數值列示於表3-9中。在含有較高濃度醇類之溶液中純度最高，而不論該醇類為何。於所評估之醇類中，存在含有約30%(v/v)TBA之溶液中的苯達莫司汀降解最少。於大約10%及約20%醇溶液中，正丁醇有效防止苯達莫司汀降解。於20%與30%(v/v)之下，由於正丁醇在此等濃度下不溶於水，故水中的正丁醇造成一種雙相系統。

圖3與4列示藉由HPLC(如本文所述)定量HP1與雙體形成，而測量得之苯達莫司汀降解量。HP1與雙體形成隨著醇類濃度減低而增加，不論該醇類為何。此雜質之增加依所預期之時間依賴性而發生(參見表3-9)。第三-丁醇與正丁醇顯示，在防止產物降解方面較其他醇類優異。如表10所示，甘露糖醇對於以TBA安定苯達莫司汀不具有任何影響。

a-二溶液於小藥瓶中皆具有2層/相液體。在樣本製備前，先將溶液渦動攪拌。

表1-9中之結果顯示，苯達莫司汀HCl與HP1及雙體之安定性隨著醇類濃度增加而獲改善。

D.冷凍乾燥循環進行過程

於苯達莫司汀、甘露糖醇與醇類溶於水之各種濃度下，製備得不同預-凍乾調配物。於各步驟變更循環進行過程，並如本文所述最適化其冷凍(快對慢)、第一次乾燥(溫度與壓力)及第二次乾燥。

基於所有上述對於溶解度、安定性與冷凍乾燥之溶液度的詳細資訊，較佳之調配物包括下列：水，適量至所希望體積

其中該醇類係選自甲醇、正丙醇或異丙醇。

實施例

以下實施例係用以例舉說明本發明之特定方面，並協助習於該項技藝人士實施本發明。此等實施例絕不被認為係用於以任何方式限制本發明之範圍。

材料：

苯達莫司汀HCl，(Degussa，批號0206005與0206007)

甘露糖醇，NF或同等物(Mallinckrodt)

脫水乙醇(200驗證)，USP或同等物(Spectrum)

第三-丁醇，ACS(EM科學)

甲醇(Spectrum與EMD)

丙醇(Spectrum)

異丙醇(Spectrum)

丁醇(Spectrum)

水，HPLC等級或同等物(EMD)

乙腈，HPLC等級或同等物(EMD)

三氟乙酸，J.T.Baker

甲醇，HPLC等級或同等物(EM科學，Cat# MX0488P-1)

三氟乙酸，HPLC等級或同等物(JT Baker，Cat# JT9470-01)

裝置：

Waters 2695 Alliance HPLC系統備有光二極管射線偵測器

Waters 2795 Alliance HPLC系統備有雙波長偵測器

分析天平(Mettler AG285,ID#1028)及(Mettler XS205)

VirTis冷凍乾燥機AdVantage

Agilent Zorbax SB-C18 5μm 80Å 4.6×250 mm管柱， Cat# 880975-902

實施例1-HPLC程序 方法1

流動相A：0.1% TFA；H₂O

流動相B：0.1% TFA；50% ACN：50% H₂O

UV：230 nm

流速：1.0 mL/分鐘

管柱溫度：30℃

管柱：Zorbax SB-C18 5μm 80Å 4.6×250 mm

樣本溫度：5℃

樣本濃度：0.25 mg/mL溶於MeOH

梯度：20%B達1分鐘20-90%B於23分鐘內90%B達6分鐘回至20%B於1分鐘內維持於20%B達4分鐘

進行時間：30分鐘

後進行時間：5分鐘

方法2

流動相A：0.1% TFA；H₂O：CAN(9：1)

流動相B：0.1% TFA；H₂O：CAN(5：5)

UV：230 nm

流速：1.0 mL/分鐘

管柱：Zorbax SB-C18 5μm 80Å 4.6×250 mm

管柱溫度：30℃

樣本溫度：5℃

注入體積：10 μL

樣本濃度：0.25 mg/mL溶於MeOH

梯度：0%B達3分鐘0-50%B於13分鐘內50-70%B於17分鐘內70-90%B於2分鐘內90%B達5分鐘回至0%B於1分鐘內維持於0%B達4分鐘

進行時間：40分鐘

後進行時間：5分鐘

方法3

流動相A：HPLC等級水含0.1% TFA(v/v)

流動相B：HPLC等級CAN/水(1：1 v/v)含0.1% TFA

UV：254 nm

流速：1.0 mL/分鐘

管柱：Zorbax SB-C18 5μm 80Å 4.6×250 mm

管柱溫度：30℃

樣本溫度：5℃

注入體積：5 μL

取數時間：30分鐘

後進行時間：9分鐘

稀釋劑：甲醇

梯度：

樣本製備-將藥物產品以200 mL MeOH溶解。超音波震盪6分鐘。該溶液可直接注入HPLC(ca.0.5 mg/mL)中。

方法4

流動相A：HPLC等級水含0.1% TFA(v/v)

流動相B：HPLC等級CAN含0.1% TFA(v/v)

UV：254 nm

流速：1.0 mL/分鐘

管柱：Zorbax Bonus RP-C14 5μm 4.6×150 mm

管柱溫度：30℃

樣本溫度：5℃

注入體積：2 μL

取數時間：31分鐘

後進行時間：5分鐘

稀釋劑：NMP/0.1% TFA於水中(50：50 v/v)

梯度：

用於方法4之樣本製備-將藥物產品以已知量稀釋劑溶解，以達到濃度為4.2 mg/mL供直接注入HPLC。可能需要進行第二次稀釋(100 mg/小藥瓶之劑量形式)以獲得4.2 mg/mL樣本濃度。

結果

對於某些苯達莫司汀雜質使用上述HPLC方法1之滯留時間列示於表11。對於Ribomustin®使用本文所述HPLC程序之HPLC層析圖譜，列示於圖6。

雖然HPLC方法1能夠解析發現於苯達莫司汀中之雜質，但其不能分離於分析期間所形成的可能雜質，即苯達莫司汀之甲基酯(BM1ME)。BM1ME與BM1雙體間之滯留時間差異只有0.3分鐘。為解析BM1雙體，遂發展出另一種HPLC方法(#2)。HPLC方法#2能分離所有雜質，但是需要較長進行時間為45分鐘(表12)。

各種不同批苯達莫司汀使用HPLC方法3之雜質分布，列示於表13。

實施例2-溶解度

藉由目測法測定苯達莫司汀HCl(苯達莫司汀)於水中(單獨)及與不同量之甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇及第三-丁醇(TBA)的溶解度。將濃度為15 mg/mL之苯達莫司汀、濃度為25.5 mg/mL之甘露糖醇，於室溫下製備於10毫升所指定醇類溶液中(表1)。然後將樣本冷藏於5℃下，並經0、3、6及24小時後目測觀察有無顆粒及/或沈澱物。

概述於表1之結果顯示，苯達莫司汀溶解度係取決於溫度及水溶液中醇類之存在量。對於醇類，苯達莫司汀之溶解度隨著醇類濃度增加而增加。沈澱之形成與否亦視溫度與時間而定。

亦於含有25.5 mg/mL甘露糖醇之20%(v/v)TBA水溶液，及含有25.5 mg/mL甘露糖醇之30%(v/v)TBA水溶液中測定苯達莫司汀溶解度(圖1)。將苯達莫司汀伴隨混合加至4 mL各溶液中，直到其不再溶解為止。令該飽和溶液於-8℃、0℃、5℃或25℃下進行混合1小時。將樣本離心並置回原溫度下達至少30分鐘。將-8℃樣本置入含有氯化鈉(用以使冰浴溫度降低)之冰浴中，並在取出樣本進行分析時測量溫度。採集等量之各樣本並經製備用於HPLC分析。

此等實驗之結果列示於圖1與表2。用於該實驗之TBA之量(20%(v/v)及30%(v/v))(圖1)係基於本文所述之安定性研究。

如圖1所示，苯達莫司汀溶解度隨著溫度(25℃至0 ℃)而呈線性遞減。苯達莫司汀溶解度為溫度依賴性，而不論其是否單獨或與醇類溶於水中。由於苯達莫司汀之安定性與溶解度，20%(v/v)TBA似乎可為製造有效力醫藥所需的下限。含15 mg/mL苯達莫司汀之裝填溶液接近17.2 mg/mL苯達莫司汀於5℃下之飽和極限，但高於0℃下之極限。30%(v/v)TBA為用於最終調配物之建議TBA濃度，且十分符合溶解度限制，與溫度無關。

實施例3-安定性 A.於水中之安定性

於室溫下製備得苯達莫司汀(15 mg/mL)與甘露糖醇(25.5 mg/mL)溶於水之溶液，並立刻置於冰浴中(用以將溫度快速降低至約5℃)10分鐘，然後冷藏於5℃。經儲放於5℃下0、3、6及24小時後，藉由使用本文所述方法之HPLC分析各調配物樣本。

B.於醇類中之安定性

於室溫下製備得含有15 mg/mL苯達莫司汀、25.5 mg/mL甘露糖醇與1.9%、5%、10%、20%或30%(v/v)乙醇溶於水，或5%、10%、20%或30%(v/v)TBA、甲醇、丙醇、異丙醇或丁醇溶於水之溶液，並立刻置於冰浴中10分鐘，然後冷藏於5℃。經儲放於5℃下0、3、6及24小時後，藉由使用本文所述方法之HPLC分析各調配物樣本。

C.安定性結果

表3列示苯達莫司汀溶於無添加醇類之水中，於5℃下歷時24小時的安定性結果。苯達莫司汀於水中快速降解，但是苯達莫司汀之安定性隨著醇類濃度增加而增加(圖2、3及4)。雖然醇類常使用於冷凍乾燥協助解決溶解度問題，醇類對苯達莫司汀安定性之作用係獨特、無法預期且有用於製造具有較少雜質之苯達莫司汀，因為可使用水溶液而仍維持苯達莫司汀之安定性。TBA經發現為六種受測試醇類中之最佳安定劑(圖2、3與4)。儲放於5℃下達至多24小時，所有醇類於30%(v/v)下皆可減少雜質HP1與雙體形成。關於TBA，儲放於5℃下達至多24小時，HP1僅達到約0.4%。較低濃度醇類可能不具功效，因為當以15 mg/mL苯達莫司汀調配並儲放於5℃下時，會有苯達莫司汀沈澱與雜質形成。

實施例4-調配物最適化

在已測定苯達莫司汀之溶解度及安定性後，最適化用於冷凍乾燥之調配物。因為於30% TBA/水飽和溶液中之苯達莫司汀濃度相較於其他醇類溶液高，預期用於裝填100 mg苯達莫司汀之所需之藥瓶尺寸可較現今Ribomustin®商品略小。雖然於0℃下苯達莫司汀之飽和溶液含有18 mg/mL，選擇15 mg/mL之濃度進行調配，以補償由於因批份不同導致整體API純度差異，而在API溶解度上造成之些許差異。15 mg/mL苯達莫司汀之濃度需要6.67 mL，以於每藥瓶中裝填100 mg苯達莫司汀HCl。

表面(昇華)面積對體積之比例，對於製造具有快速冷凍乾燥之良好外觀的凍乾產品而言很重要。一般，凍乾產物佔小藥瓶體積之30%至50%。具有6.67 mL之20 mL 藥瓶含有佔其容量之約30%，且具有表面積比例為0.796 cm²/mL。

選擇甘露糖醇作為填充劑，亦使調配物保持類似於Ribomustin®。進行研究評估甘露糖醇對苯達莫司汀溶解度及產物外觀之影響。甘露糖醇於乙醇及TBA水溶液中皆減低苯達莫司汀(濃度為15 mg/mL)之溶解度。例如，含有5%及10%乙醇與TBA而不含甘露糖醇之溶液歷經24小時後不會沈澱。然而，對於含有甘露糖醇之樣本(表1)，於24小時內觀察到沈澱。而含有30%(v/v)TBA、15 mg/mL苯達莫司汀與25.5 mg/mL甘露糖醇之水溶液無沈澱發生。為了於操作期間使已相當成形之藥餅不會碎裂，需要134 mg/藥之瓶甘露糖醇，而於多達200 mg/藥瓶甘露糖醇之小藥瓶並未觀察到差異。

所有受測試醇類皆可增加苯達莫司汀之安定性及溶解度。然而，需要有意義的莫耳分率來影響裝填溶液之安定性及製造容易度。較小之醇類具有會降低整體溶液凝固點的不欲作用，而因此於低溫下需要長的冷凍乾燥循環。較高濃度之甲醇與乙醇製出難以復原之不受人注意的藥餅。製備得含有苯達莫司汀(15 mg/mL)、甘露糖醇(25.5 mg/mL)之10%乙醇、20%乙醇、10%異丙醇、20%異丙醇、或30%(v/v)TBA水溶液並進行冷凍乾燥。裝填10%乙醇、20%乙醇、10%異丙醇、20%異丙醇溶液之凍乾藥瓶，產生已崩塌的藥餅或薄膜殘餘物。唯一產生可接受藥餅之溶劑系統為30% TBA。此外，10%乙醇、20%乙醇、10%異丙醇、 20%異丙醇之經凍乾藥瓶的復原困難，且直到>45分鐘仍未完全溶解。

可使用較小藥瓶之能力係受限於，苯達莫司汀於水性/有機溶液中的濃度或溶解度。於較低濃度之乙醇、甲醇、異丙醇及正丙醇(其產生可接受之藥餅外觀)下，由於溶解度之限制而需要較稀的苯達莫司汀溶液。為保持每藥瓶呈現100 mg苯達莫司汀，將需要大於50 mL之藥瓶。又，本文所述之安定性研究顯示於較低濃度下，化學安定性不足以允許進行可接受之裝填時間。

其中一項影響復原容易度之因子為凍乾物之孔隙率。一般，具有少表面積之非晶形沈澱的固體較難溶解。大多數含有甘露糖醇之凍乾物會於3-5分鐘內復原，只要其在冷凍乾燥期間不形成沈澱，常係由於液體蒸發所造成(熔回，melt back)。基於吾等以數種冷凍乾燥溶劑系統進行之實驗，且無意受限於任何特定理論，關於Ribomustin®復原之問題可能與因凍乾期間之熔回所造成的沈澱有關。大多數有機溶劑無法有效進行凍乾，且會因為其熔點低而導致熔回。TBA(第三丁醇)相較於水具有高熔點及相似的蒸汽壓。TBA係經由昇華(而非蒸發)，以與水大約相同的速率被去除。以30%(v/v)TBA根據本發明所製得之凍乾物可於3-10分鐘內復原，相較於市售可得之Ribomustin®則可能耗時30-45分鐘。

基於溶解度、安定性、復原之容易度及製造考量，下述為本發明之較佳預凍乾調配物：苯達莫司汀HCl約15 mg/mL、甘露糖醇約25.5 mg/mL、約30%(v/v)第三丁醇，且使用注射用水調整體積。然後於5℃下將調配物使用6.67 mL裝填於琥珀色20 mL、20 mm小藥瓶中，並以溴丁基塞子部份密封，再裝入預先冷卻之冷凍乾燥機中。

實施例5-雜質分析

於Ribomustin®製造、混合、裝填與冷凍乾燥程序期間所導入之主要雜質，當以HPLC分析測定時(圖6)，為苯達莫司汀之水解產物HP1、雙體與乙基酯(BM1EE)。BM1EE可能於藥物製造期間，例如於再結晶及/或純化製程中形成。BM1EE已知為較苯達莫司汀更有效之細胞毒性藥物。進行實驗測定使用30%(v/v)TBA裝填水溶液是否會導致形成苯達莫司汀第三-丁基酯。

實驗係使用供形成苯達莫司汀第三-丁基酯之傳統Fisher酯化反應條件完成。將苯達莫司汀於60℃ TBA中與HCl加熱20小時。未觀察到有任何反應發生。此結果表示，再裝填/完成過程中將很難形成苯達莫司汀之第三-丁基酯。截至目前的安定性研究中，在從TBA所製得之藥劑產物中未觀察到新雜質。

為助於測試藥劑產品，遂研發出使用更具反應性之第三-丁基部份來源的合成途徑。另一項製造第三-丁基酯之意圖係藉由形成苯達莫司汀之醯基氯化物而完成。將苯達莫司汀存於二氯甲烷中之懸浮液以草醯氯及N,N-二甲醯胺處理。待形成醯基氯化物後，將溶劑濃縮。將殘餘物加至二氯甲烷、第三-丁醇、三乙胺及4-二甲基胺基吡啶，並將混合物於室溫下攪拌過夜。於將所有溶劑加入並經純化後，得到未知化合物。LC-MS不符合苯達莫司汀第三-丁基酯之分子量，且質子NMR未顯示對應第三-丁基之波鋒。因此，使用TBA作為共溶劑具有不會從該醇形成酯類之額外助益。

實施例6-冷凍乾燥循環研發

進行許多冷凍乾燥循環以評估冷凍乾燥之重要階段，並達成最有效率之乾燥循環。完成實驗評估冷凍速率、第一乾燥溫度、時間及壓力對產物之影響。

A.冷凍速率

文獻報導TBA視冷凍速率而選擇不同結晶形式。於某些TBA溶液中，產物冷凍速率越慢，其越快乾燥。於慢速冷凍期間形成之較大結晶產生較大孔隙，而使能更有效昇華。然而，在以苯達莫司汀進行研究時，經發現冷凍速率當於2及8小時進行評估時並非決定性處理參數。

B.第一及第二乾燥

於第一次欲從30% TBA溶液進行冷凍乾燥之期間，凍乾餅塊破碎且粉末從藥瓶中噴出。此等餅塊似乎於凍乾物內含有非晶形顆粒，表示有熔回發生。此現象具有可再現性且發生於產物達約-10℃時(參見圖5)，而與加溫速度無關。測試數項可變數以決定成因並解決粉末噴出之問題。在第一乾燥期間壓力從50μm升至150μm，但仍觀察到粉末噴出，但噴出程度較少。然後重複本實驗，惟將冷凍速率從2小時延長至8小時。此改變並無影響。

接著評估第一乾燥之長度。例如，評估下列非常緩慢之乾燥循環：於八小時內從+25℃至-50℃進行冷凍；維持於-50℃下5小時，於七小時內從-50℃至-25℃進行加溫及乾燥；維持於-25℃下二十小時，於兩小時內從-25℃至-15℃進行加溫及乾燥，並維持於-15℃下二十小時；於六小時內從-15℃至40℃進行加溫及乾燥，並維持於40℃下二十小時，同時在乾燥全程中將乾燥室壓力保持為150μm。無觀察到粉末噴出(圖5)。此循環產生可容易進行復原之無破碎、已相當成形的藥餅。無意受限於特定理論，關於藥粉噴出及難以復原等問題，可能是由於太快將凍乾物乾燥，因此導致強烈蒸汽流出藥餅且發生熔回。隨著使用較不激進的乾燥循環，可再現性地形成美觀、安定且容易復原之藥餅。因此，在進行第二乾燥前先將所有未結合之水與第三丁醇去除，可防止發生熔回以及粉末噴出。於此等溫和條件下將冷凍乾燥循環進一步最適化(圖5)。於40℃下乾燥達至多20小時，結果沒有立即降解產物存在。

實施例7-冷凍乾燥循環

可在不須過度實驗下依據本發明揭示，完成及實施本發明所揭示之所有組成物與方法，及其申請專利範圍。雖然已關於最佳實施態樣描述本發明之組成物與方法，習於該項技藝人士應顯而易知，可在不偏離本發明精神與範圍下，對本發明之組成物與方法及所描述方法中之步驟與步驟順序進行變更。更精確地，顯然某些與本發明所述溶劑在化學及物理上相關之溶劑可取代本文所描述之溶劑，而能達到相同或類似的結果。所有此類對習於該項技藝人士為顯而易知的相似性取代與修飾，被視為包含於本發明如由申請專利範圍所定義之精神與範圍內。

所有於本說明書中提及之專利、專利申請案與公開案表示為習於本發明所屬技藝人士之水準。所有專利、專利申請案與公開案係以引用方式納入本文，達到與各別申請案係特別且獨立地以引用方式納入本文之程度。

於本文所例舉性敘述之本發明，可適當地在無任何於本文未特別揭示之元件存在下實施。因此，例如，於本文之各實例中任何術語“包含”、“實質上包含”及“由...組成”可與該其他二術語互相置換。已使用之術語及辭句係用於敘述而非限制，且無意於使用此等術語及辭句來排除所示與所述特性或其部份之任何同等物，而是認為於本發明所宣示之範圍內可能進行各種變更。因此，應了解雖然已經由較佳具體態樣及視需要之特性特別地揭示本發明，對本發明所揭示概念之修飾與變更對習於該項技藝人士而言卻是可採取的手段，且應了解此類修飾與變更被視為包含於本發明如由附屬之申請專利範圍所定義的範圍內。

圖1列示對於苯達莫司汀溶於第三丁醇中之兩種不同溶液，於各種溫度下苯達莫司汀的溶解度。

圖2列示苯達莫司汀培育於各種醇類中經於5℃下24小時後之HPLC分析純度結果。結果以苯達莫司汀波峰之面積百分比表示。

圖3列示於各種醇類/水共溶劑中經於5℃下24小時後之HP1(式II)形成。

圖4列示於各種醇類/水共溶劑中經於5℃下24小時後之雙體(式III)形成。

圖5列示對於苯達莫司汀使用TBA/水共溶劑之冷凍乾燥循環。

圖6列示對於Ribomustin®使用HPLC方法No.1之層析圖譜。

Claims

一種製備苯達莫司汀或苯達莫司汀鹽酸鹽凍乾製劑(lyophilized preparation)之方法，其包含a)將苯達莫司汀或苯達莫司汀鹽酸鹽溶解於使安定濃度之包含介於約20%至30%(v/v)之一或多種甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇及第三丁醇的醇類溶劑中，而形成預-凍乾溶液(pre-lyophilization solution)；以及b)將該預-凍乾溶液進行冷凍乾燥；其中該苯達莫司汀凍乾製劑含有不多於約0.5面積%之HP1，其中該HP1為於釋出時的HP1量。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中該醇類為乙醇。
根據申請專利範圍第2項之方法，其中該乙醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中該醇類為第三丁醇。
根據申請專利範圍第4項之方法，其中該第三丁醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中係於進行冷凍乾燥前添加賦形劑。
根據申請專利範圍第6項之方法，其中該賦形劑為甘露糖醇。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中該苯達莫司汀濃度為約2至50 mg/mL。
根據申請專利範圍第8項之方法，其中該醇類為第三丁醇。
根據申請專利範圍第9項之方法，其中該第三丁醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第8項之方法，其中該醇類為乙醇。
根據申請專利範圍第11項之方法，其中該乙醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中該步驟b)包含：i)將該預-凍乾溶液冷凍至低於約-40℃之溫度以形成結凍溶液；ii)使該結凍溶液保持於或低於約-40℃下至少2小時；iii)令該結凍溶液漸增(ramping)至介於約-40℃至約-10℃間之第一乾燥溫度(primary drying temperature)而形成乾燥溶液；iv)維持約10至約70小時；v)令該乾燥溶液漸增至介於約25℃至約40℃間之第二乾燥溫度(secondary drying temperature)；及vi)維持約5至約40小時而形成苯達莫司汀凍乾製劑。
根據申請專利範圍第13項之方法，其中該醇類為乙醇。
根據申請專利範圍第14項之方法，其中該乙醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第13項之方法，其中該醇類為第三丁醇。
根據申請專利範圍第16項之方法，其中該第三丁醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中該步驟b)包含：i)將該預-凍乾溶液冷凍至約-50℃以形成結凍溶液；ii)使該結凍溶液保持於約-50℃下至少2小時至約4小時；iii)漸增至介於約-20℃至約-12℃間之第一乾燥溫度而形成乾燥溶液；iv)維持於第一乾燥溫度下約10至約48小時；v)令該乾燥溶液漸增至介於約25℃至約40℃間之第二乾燥溫度；及vi)維持於第二乾燥溫度下至少5小時至多達約20小時。
根據申請專利範圍第18項之方法，其中該醇類為乙醇。
根據申請專利範圍第19項之方法，其中該乙醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第18項之方法，其中該醇類為第三丁醇。
根據申請專利範圍第21項之方法，其中該第三丁醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第1項之方法，其中該步驟b)包含：i)以層架(shelf)溫度為約5℃開始進行進料；ii)在歷時約8小時期間內冷凍至約-50℃；iii)維持於-50℃下約4小時；iv)在歷時約3小時期間內逐漸增溫至約-20℃；v)維持於約-20℃下6小時；vi)在歷時約1小時期間內逐漸增溫至約-15℃；vii)維持於-15℃下約20小時；viii)在歷時約0.5小時期間內逐漸增溫至-12℃；ix)維持於約-12℃下約15.5小時；x)在歷時約15小時期間內逐漸增溫至介於約25℃至約40℃間或更高溫；xi)維持於約25℃至約40℃之間達約10小時；xii)在歷時約1小時期間內逐漸增溫至約40℃；xiii)維持於約40℃下約5小時；以及xiv)於約5℃下，於約13.5 psi之壓力下，卸料於醫藥上可接受之容器中，其係經密封；其中遍及第一乾燥步驟iv，v，vi，vii，viii及ix之壓力為約150微米，且遍及第二乾燥步驟x，xi，xii及xiii為約50微米。
根據申請專利範圍第23項之方法，其中步驟(xi)係逐漸增溫至約30-35℃達約15小時。
根據申請專利範圍第24項之方法，其中該醇類為第三丁醇。
根據申請專利範圍第25項之方法，其中該第三丁醇之濃度為約30%。
根據申請專利範圍第24項之方法，其中該醇類為乙醇。
根據申請專利範圍第27項之方法，其中該乙醇之濃度為約30%。
一種用於冷凍乾燥之調配物，其包含濃度為約15 mg/mL之苯達莫司汀，濃度為約25.5 mg/mL之甘露糖醇，濃度約30%(v/v)之第三丁醇與水。
一種用於冷凍乾燥之調配物，其包含濃度為約15 mg/mL之苯達莫司汀，濃度為約25.5 mg/mL之甘露糖醇，濃度約30%(v/v)之乙醇與水。
一種根據申請專利範圍第1至28項中任一項之方法所製備之凍乾製劑之用途，其係用於製備治療患者之醫學病況之藥劑。
一種根據申請專利範圍第29或30項之調配物之用途，其係用於製備治療患者之醫學病況之藥劑。
根據申請專利範圍第31或32項之用途，其中該病況係選自慢性淋巴球性白血病、霍奇金氏症、非-霍奇金氏淋巴瘤、多發性骨髓瘤、乳癌、小細胞肺癌及自體免疫疾病。
根據申請專利範圍第33項之用途，其中該病況為非-霍奇金氏淋巴瘤。
根據申請專利範圍第33項之用途，其中該病況為慢性淋巴球性白血病。
根據申請專利範圍第33項之用途，其中該病況為多發性骨髓瘤。
根據申請專利範圍第31或32項之用途，其中該藥劑進一步包含一或多種抗瘤劑。
根據申請專利範圍第37項之用途，其中該抗瘤劑為對CD20具特異性之抗體。
根據申請專利範圍第33項之用途，其中該自體免疫疾病為類風溼性關節炎、多發性硬化或狼瘡。
根據申請專利範圍第31或32項之用途，其中該醫學病況為過度增生性失調症。