TWI373307B - - Google Patents
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- TWI373307B TWI373307B TW095139686A TW95139686A TWI373307B TW I373307 B TWI373307 B TW I373307B TW 095139686 A TW095139686 A TW 095139686A TW 95139686 A TW95139686 A TW 95139686A TW I373307 B TWI373307 B TW I373307B
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Description
1373307 九、發明說明: 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種樟芝培養方法,其係將樟芝菌種接 種於段木,以大量栽培樟芝子實體。 【先前技術】 樟芝又稱牛樟芝或牛樟菇,屬於無褶菌目、多孔菌科、 薄孔菌屬、多年生蕈菌類,是台灣特有一種真菌, 僅生長於台灣山區海拔200-2000公尺間,寄生於牛樟木 (而momwm 开吵·)的中空心材内壁,或枯死倒 伏之牛樟樹木材潮濕表面。其學名原係( ,但牛樟木中主要芳香物係為「⑼心」而 非「」,後者為存在於香樟木之芳香物,故兹類培 植專家張東柱、周文能先生特將牛樟木之學名正名為 Antrodia cinnamomea. 0 樟芝子實體係由牛樟木的中空樹幹長出,生長最初呈 扁平形,貼生於樹幹内部表面,之後子實體生長前緣會略 捲離樹幹而翹起,呈現馬蹄形或不規則形;其生長愈久, 與樹幹接觸愈緊,且逐漸木質化或木拴化,外觀則呈現皮 狀或鍾乳狀,帶有強烈苦味。一年生或多年生之子實體上 表面呈橘紅色、橘褐色至淡肉色,之後變為褐色,表面平 滑具同心圓、其菌孔為圓形或多角形,内有孢子。子實體 之菌孔表面新鮮時呈橘紅色、橘褐色至淡肉桂色,老化時 則呈赭褐色。 1373307 由於樟芝對於食物中毒, 具解毒作用,為一極佳解 喔吐,農藥中毒等均 病有不錯之療效。惟因樟芝^樹亦被認*為其對癌症或慢性 一般真菌不能生長,僅樟芝身有濃郁香氣,可驅蟲, 上’而不會寄生於—般的樟樹台灣本土的牛樟樹 產量本就極為稀少;再加上樟芝二,樟木等類似樹種’故 育樹種,樟芝屬於牛樟樹之附屬。生長之牛樟樹為一級保 成樟芝在市場上更為供不應求、=值亦屬於禁採之列’造 灣紅寶石」之稱,僅產於苗栗南1貨:’因此素有「台 丁两反、向雄六龜等地。 一直以來,樟芝對慢性疾病 二傳頌不已’更增添了樟芝在市::的=令㈡:若 科學研究曾指出:樟芝對鼠類淋 _值事實上’ 之毒殺性,樟芝菌絲體熱水可溶多鱗癌、U _3 8 8木有明顯 液中的淋巴麵胞產生細胞激素,吊成人血 細胞;也可以增加巨嗟細胞之吞 _ 類淋巴癌 (Splenocytes)之增生以及介白素b ’八進脾臟細皰 萄球菌及鬚瘡小芽生ί外及2 =種壓牛血、解毒、益腎 痰、鎮痛、鎮靜、抗二=,= 功效廣泛的藥用真菌。 寺力此’實為一種 為了使樟芝的食用#及化,平 格,並維護牛樟樹的長期 1居问不下的市場價 產業積極尋求突破的重纟丨!裁培樟芝為相關 後,再將此菌種接二以固態方式培養菌絲體 接種於太空包,以長成樟芝 1373307 現有技術培養樟芝時’菌絲體的生長妝π 空包進行子實體室内培養時,包體較為鬆軟,也2利用太 菌。此外,以太空包培養而得之樟芝子實體相 生長雜 芝子實體薄,且三萜類之含量與野生樟芝仍^於野生樟 異。再者,太空包難為土壤所分解,將造成環其明顯差 前由生物可分解材質所製成的太空包雖已問世門續’目 偏高,在真菌、菇類的大量栽培上,無異是成,惟其價格 擔。最重要的’由於野生樟芝的孢子:感m-大負 有明顯的宿主專一性,僅能感染牛樟木而寄生於^,係具 而長成子實體;故就現有技術而言,人工培養菌,、上’進 法感染不同樹種所鋸成的段木;僅是直接^用絲體並無 子感染的野生牛樟樹段木進行子實體培養。惟=交棒芝抱 此種人工栽培方式亦不易長成具有多量且厚,如此, 芝培養物,其三萜類及多醣體含量亦屬有限。實體的樟 從市售子實體多為單薄的一年生菌許^ 者極為少見來看,即可得知市場上對3芝=厚多年生 天然野生者又不易取得,樟芝破有極大的ϋ日竣’而 開發-種具有厚實子實體、富含三祐類的人因此, 培技術,以有效供應品質優良的樟芝,係又樟芝栽 究的技術領域。 ’值得深入研 【發明内容】 早之為口相有4菌,又名牛樟菇 牛樟木’但此樹種為保f4 f生長於台汽 空樹幹之檍芏月類植物因此,生長於牛檯士 付便極為不易、產量亦極為稀少。因政 本發明之目的係搵说 將一掉芝菌種接之固態培養方法,係 養,以形成菌絲體。。土及木屬的器皿中培 本發明之另—目的 f方法,/轉—樟芝g種接種至芝8賴之液態培 養,以形成菌絲體。 3酵母培養基的器皿中培 法,係可^目㈣提供—種樟芝子實體之典養方 段時間後即“3^^基質接種至段木‘養一 前述樟芝子實:之子實:’其係藉由 類,為深具生物利用潛力之藥用 1^成,係含有豐富三祐 ,達上述目的,本發明係提供—種樟芝菌絲體之固離 3,法,其係包含下列步驟:⑴取—含酵母之培養基二 =下發酵3-30天;(b)加入木屑於前述發酵後之培 ^士並攪拌;(c)將前述木屑及培養基置於一器皿中;(/) 前述裝有木屑及培養基之器mi減菌;及(e)取一樟芝菌 ,樓種至前述滅菌過之含有木屑及培養基之器皿中,並於 〜35°C下培養形成菌絲體。 ' 較佳地,前述步驟(a)之培養基係包含:1〜8%糖、 ^06〜1.2%酵母、0.01〜0.4%硫酸鎂及〇.〇1〜0.4%碟酸二 氣绅’該含酵母之培養基需進行7-14天之發酵。 較佳地’前述步驟(c)係於一濕度60〜90% (最佳 為80%)的器皿中進行培養。 1373307 較佳地,前述步驟(e)之樟芝菌種係在20〜30°c培養。 本發明之另一目的係提供一種樟芝菌絲體之液態培養 方法,係包含下列步驟:(a)取一含酵母之培養基,於5-35 °C下發酵3-30天;(b)將前述發酵後之培養基置於一器皿 中;(c)將裝有培養基之器JDI滅菌;及(d)取一樟芝菌 種接種至前述滅菌過之培養基中,並於5〜35°C下培養形 成菌絲體。 較佳地,前述步驟(a)之培養基係包含:糖、酵母、 硫酸鎂及磷酸二氫鉀;更佳係包含:1〜8%糖、0.06〜1.2% 酵母、0.01〜0.4%硫酸鎂及0.01〜0.4%磷酸二氫鉀,該含 酵母之培養基需進行7-14天之發酵。 較佳地,前述步驟(d)之樟芝菌種係在20〜30°C培養。 本發明之再一目的係提供一種樟芝子實體之培養方 法,其係包含下列步驟:(a)將含有樟芝菌絲體之基質接種 至一段木;(b)將前述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35 °C、濕度65〜85%之環境下培養一段時間;及(c)清除段 木上殘餘之基質後,將段木置溫度15〜35°C、濕度80〜98 %之環境下栽培一段時間後即可形成樟芝子實體。 較佳地,前述步驟(a)之含有樟芝菌絲體之基質包含 固態基質或液態基質,該固態基質係可為木屑。 較佳地,前述步驟(b)之段木之培養環境係為溫度 25〜30°C、濕度75〜85%,且至少培養一個月以上。 較佳地,前述步驟(c)之培養環境係為溫度26〜30 °C、濕度80〜98%,且至少培養三個月以上。 較佳地,前述步驟(b )及(c )係在二氧化碳濃度低 於2%之環境下培養。 本發明之又一目的係提供一種樟芝之培養方法,其係 包含下列步驟:(a)取一含酵母之培養基,於5-35°C下發 酵3-30天;(b)加入木屑於前述發酵後之培養基並授拌; (c)將前述木屑及培養基置於一器皿中;(d)將前述裝有 木屑及培養基之器皿滅菌;及(e)取一樟芝菌種接種至前 述滅菌過之含有木屑及培養基之器皿中,並於5〜35°C下 培養形成菌絲體;(f)將前述含有樟芝菌絲體之木屑接種 至一段木;(g)將前述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35 °C、濕度65〜85%之環境下培養一段時間;及清除段 木上殘餘之木屑後,將段木置溫度15〜35°c、濕度8〇〜 98%的環境下栽培一段時間後即可形成樟芝子實體。 較佳地’前述步驟(c)之器皿中的濕度為60〜90%, 更佳係為80%。 較佳地’前述步驟(g)之段木培養環境係為溫度25 〜3〇°C、濕度75〜85%,且二氧化碳濃度低於2%。 較佳地,前述步驟(h)之段木培養環境係為溫度26 〜3〇 C、濕度90〜98%且二氧化碳濃度低於2%。 較佳地,前述步驟(g)之段木培養時間係為至少一 個月以上。 較佳地’前述步驟(h)之樟芝子實體之栽培時間係為 1373307 至少三個月以上。 本發明之又一目的係提供一種樟芝子實體,其係藉由 前述樟芝培養方法所培養而成。 综上可知,本發明所提供之樟芝培養方法,係可利用 人工發酵培養基所培養之樟芝菌絲體接種至多種樹種所鋸 成的段木上;藉由突破其寄生宿主的專一性而達到大量栽 培樟芝子實體之目的,以因應市場上對樟芝的迫切需求、 增加其在生技醫藥應用的範圍。 【實施方式】 本發明利用樟芝菌絲體人工接種段木之方式,提高於 段木上出菇的機會,以大量培育活性與成分同於或優於野 生樟芝之厚實子實體。尤其天然牛樟芝僅生長於牛樟木, 若能使樟芝菌種成功接種於不同樹種所裁切而成的段木, 則對於人工段木栽培技術而言,不啻為一項重大的突破。 本發明提供一種樟芝菌絲體之培養方法,包含下列步 驟:取一含酵母之培養基,於5-35°C下發酵3-30天,由於 經過發酵,可使培養基中的微生物進行轉化,有助於後續 樟芝培養物對於營養成分之利用;再加入木屑於前述發酵 後之培養基並攪拌;將前述木屑及培養基置於一器孤中; 將前述裝有木屑及培養基之器孤滅菌;最後,取一樟芝菌 種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養基之器皿中,並於5 〜35°C下培養形成活性強之菌絲體。 1373307 ^本發明係提供一種色像養方法,包含下列 步驟:先將堂#樟芝—菌身-體段杳;再將前 述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35 °C、濕度65〜85%且二 氧化碳濃度低於2%之環境下培養一段時間之後,清除^ 木上殘餘之基質後,將段木置溫£\5〜35ΐ:、濕度80二^ %且一氧化奴添竺的環境下栽培一段時間後即可形 成樟芝子實體。前述含有樟芝菌絲體之基質可為固態或‘ 態基質。 / 因此,本發明進一步提供一種樟芝子實體之培養方 法,包含下列步驟:先取一含酵母之培養基,於5 35ΐ下 發酵3-30天;加入木屑於前述發酵後之培養基並攪拌; 前述木屑及培養基置於-H皿中;將前述裝有木屑及培 基之器皿滅菌;取-樟芝H種接種至前述滅菌過之含 f及培養基之器皿中,並於5〜35ΐ下培養形成g = =====已接種 了之環境下培養-段時間;W除❶段:上= t屑後,將段木置溫度15〜35ΐ、濕度8G〜 戈2 石^濃度低於2%的環境下栽培—段時間後即可形成樟i二 適用於本發明樟芝子實體培養方法 但不限於:牛樟、樟樹(如:香:H包含, 例如:相思樹、土肉桂、杉木、 土樟或雜木, 木科 樹種為佳 、金縷梅科、殼斗科等馳* :畨、華 之 饤寻树種,尤以木頭材質堅硬者 1373307 本發明之方法可適用於任何樟芝菌種,例如已寄存於食 口口科學研究所之编號:BCRC 35396、BCRC 35716、BCRC 35398或BCRC 36401等可自由分讓之樟芝菌種皆可。 本發明將藉以下實施例進一步詳細說明,但該等實施例 僅係用於舉例說明,而非用於限定本發明之範疇。 實施例
實施例一 ••利用香樟木段木培養樟之子實體
取一含酵母之培養基,於28。〇:下發酵14天,由於經過 發酵,可使培養基中的微生物進行轉化,有助於後續樟芝 培養物對於營養成分之利用;再加入木屑於前述發酵後之 培養基並攪拌,再將前述木屑及培養基置於一三角瓶中, 並將前述裝有木屑及培養基之三角瓶於高溫下滅菌,最 後二取一樟芝菌種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養基 之二角瓶中,並於28。(:下培養2,5個月,即形成菌絲體。 凡再將前述培養之含有樟芝菌絲體之木屑接種於該香樟 。木段木上,再將前述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35 C、濕,65〜85%且二氧化碳濃度低於2%之環境下培養2 5 個月’待段木已感染樟芝g絲體後清除段木上殘餘之木 =再將段木置溫度〜抑、濕度⑽〜98%且二氧化碳 濃度低於2%的環境下栽培7個月後,即可形成樟芝子實 體二如第-圖所示’由第一圖可明顯看出,利用本發明之 法所培養之樟芝子實體,具有厚實的子實體,已相 田 天然野生之樟芝子實體型態,至於其三萜類成分含 13 量分析詳述如后。 麵例二:彻相細段木培養樟之子實體 取一含酵母之培養基,於28°C下發酵Η夭,由於 發酵’可使培養基中的微生物進行,有助於後續樟之 培養物對於營養成分之利用;再加人木屑於前述發錄f之 培養^並檀拌’再將前述木屑及培養基置於〆三角瓶 ^將前述料木屑及培養基之三祕於高温下.滅菌益 後:取y樟芝_接種至前述減菌過之含有木屬及培養暴 之二角瓶中’並於5〜坑下培養形成_體培養3個月。 &再將則述培養之含有樟芝菌絲體之木屑接種於該相思 f段木上’再將前述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35 C、濕度65〜85%且二氧化碳濃度低於2%之環境下培養3 ,月,待段木已感染樟芝菌絲體後清除段木上殘餘 曲二再將段木置溫度15〜35t、濕度8〇〜 氡 境下栽培6個月後,即可形成=3 體如第一圖所示,由第二圖可明顯看出 子實 培養方法所培養之樟芝子實體,且」=本發明之 當接近天然野生之樟芝子實體型H,至二,已相 量分析詳述如后。 * 莊類成分含 實施例三:利用牛樟木段木培養樟之子實體 取-含酵母之培養基,於5_35t下發酵 八,由於 1373307 經過發酵,可使培養基中的微生物進行轉化,有助於後 樟芝培養物對於營養成分之利用;再加入木屑於前述發酵 後之培養基並攪拌,再將前述木屑及培養基置於一三 中,並將前述裝有木屑及培養基之三角瓶於高溫下^菌瑕 最後’取一樟芝菌種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養 基之三角瓶中,並於5〜35t下培養2 5個月,即形成^绛 再將前述培養之含有樟芝菌絲體之木屑接種於該牛浐 。木段木上,再將前述已接種菌種之段木置於一溫度 。(:、濕度65〜85%且二氧化碳濃度低於2%之環境下^養 個月,待段木已感染樟芝菌絲體後清除段木上° 土 屑,再將段木置溫度15〜35t、濕度8〇〜98%且二氧化石山 3度環境下栽培8個月後,即可形成樟芝子ί :養ίί:::示’由第三圖可明顯看出,利用本發明之 :接近天之樟芝子實體’具有厚實的子實體,已相 ==如戶,芝子實體型態,至於其三刪分含 魅细: 明培養之掉芝、野生掉芝以及市售樟 之之成分含量 利用高壓液相層析(hpl 係基於同品種具有相间出八七析各檢〇〇之私紋圖谱, 比對各檢品之間的物種原則,而使用此一指紋圖譜 以進行品質評價評原性’並分析比對成分總含量’ 檢液製備: 樟芝市售品膠囊内含 本實驗係針對野生樟芝子實體、 1373307 發明培養方法於三種不同段木-牛掉木 等 ^^二人卫栽培樟芝子實體(前述實施例-至 :)等五種檢體進仃为析。首先,將上述五種檢品細切或研 汾,置於60C恆溫烘箱連續乾燥 Γ=:各檢品精確科量_毫克二毫升定= 中,並精確加入15毫升甲酸,笨执.,一 震盪器内震盪抽取3小時,並將。之彳 超音波 徭,敗锃夕欢.主汸粬日吁並將抽取液經〇·45μΐη濾膜過濾 後取传之也 液體即可作為分析用檢液。 高壓液相層析: 本为析使用之㊉壓液相層析儀為mTACm D. 列:幫浦:L-7100、偵測儀(Detect〇r) · L 742〇、自動進樣 器(Aut〇Sampler) : L_7200 ;其巾,層析管 Rp_i8 管】 250 mm,内徑 4.6mm (粒徑 5μΐη)。 分析條件為流速每分鐘i mw貞測吸光波長為υν2ΐ〇 nm,注入體積25 μί,分析終止之時間為19〇分鐘。移動相 係使用兩種溶媒系統做梯度沖提(Gradient):移動相Α : 10%乙腈(内含1%磷酸)’移動相B : 1〇〇%乙腈(内 % 罐酸)’梯度沖提條件如表一所示。 表一:HPLC移動相梯度沖提條件
Time (min) Mobile phase Mobile phase Flow 0.0 A —— B _ (mL/min) 100.0 0.0 1 .〇〇〇〇 5.0 100.0 0.0 1.0000 10.0 70.0 30.0 1 .〇〇〇〇 _15.0 _55.0 — _ 45.0
40.0 20.0 0.0 0.0 100.0 100.0 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 45.0 50.0 50.0 60.0 60.0 80.0 100.0 100.0 0.0 0.0 吸吸收蜂面積(Peak Area)由内建軟體自動計算,其中’ 且 面積剔除值(Peak rejection level)設定為 200,000, 計及收峰面積未達200,00〇者視為雜訊,將捨棄不予列入 ,吸收峰面積達到200,0⑻而吸收峰呈現不規則形狀 ,亦經人工篩選而捨棄之;最後將各分析用檢液可信賴 的吸收峰面積加總,並互相比較,以進行品質評估。 如下列表二所示,野生樟芝子實體之吸收峰總面 分值為139,983,37〇,相思樹段木人工栽培樟芝子實體 面積積分值為76,165,715,香樟木段木人工栽培樟 = 之總面積積分值為m,356,2G6,牛樟木段木人 ^ 子實體之總面積積分值為152,76〇,267 ;而樟 = 之總面積積分值為2U26,138,與上述_1^=囊 表二:不同種類之人工栽培樟芝子實體檢液之吸收峰面積 1373307 波長:210nm
雜木(相思樹)人工栽培樟芝 牛樟樹人工栽培樟芝
吸光強度:1300mV 總吸收峰面積^ 21,126,138 139,983,370 111,356,206 76,165,715 152,760,267 制:;80 分鐘 結果 _ 將五種檢品以相同吸光強度(Intensity,1300 mV)、相 同滞留時間(180分鐘)’進行圖譜分析。其中,香樟木、 相思樹及牛樟木個別之肌c分析圖譜,分別如第四圖、 第五圖及第六圖所示。 野生^及ίΓ上述五,品’將樟芝市售品(膠囊) 推-人U用二種不同段木—牛樟木、香樟木、相思4 工栽坧的樟芝子實體之指紋圖譜經由疊圖加以比對 =第七圖所示。由此疊圖可觀察到前述三種人捭 樟之子實體均與野生樟芝子實體之指紋圖譜在 ^即^目同的滯留時間)呈現相同的吸光集團,僅^光; f互有差異而已;而樟芝市售品之指紋圖譜與上 =之指紋圖譜有日_的差異,且吸光強度極1微弱 3 J析比較的結果,非常清楚的顯示出,利用二 香樟木、相思樹所人工栽培出的樟芝子實體與野 1373307 實體具有同源性,表示本發明使用不同段木所栽培的樟芝 子實體係具有與野生樟芝子實體相類似之三银類成分和相 同之生理活性及用途。 由上述分析結果可知,本發明係提供一種可大量人工 栽培樟芝子實體的方法,且所培養出來的樟芝子實體厚 實,其活性與成分同於或優於野生樟芝或市售人工培養芝 樟,係為人工培養樟芝子實體技術的一大突破。 其他實施態樣 雖然本發明已以較佳實施例揭露如上,然其並非用以 限定本發明,任何熟悉此技藝者,在不脫離本發明之精神 和範圍内,當可作各種之更動與潤飾,因此,本發明之保 護範圍,當以後附之申請專利範圍所界定者為準。 19 1373307 ' 【圖式簡單說明】 第一圖係為本發明利用香樟木段木培養樟芝子實體之 影像圖。 第二圖係為本發明利用相思樹段木培養樟芝子實體之 影像圖。 第三圖係為本發明利用牛樟木段木培養樟芝子實體之 影像圖。 - 第四圖係為本發明利用香樟木段木培養樟芝子實體之 HPLC分析圖譜。 φ 第五圖係為本發明利用相思樹段木培養樟芝子實體之 HPLC分析圖譜。 第六圖係為本發明利用牛樟木段木培養樟芝子實體之 HPLC分析圖譜。 第七圖係為樟芝市售品(膠囊)、野生樟芝與本發明利用 香樟木段木、相思樹段木、牛樟木段木培養樟芝子實體之 HPLC分析圖譜疊圖比對。 【主要元件符號說明】 無 20
Claims (1)
1373307 1373307 年 中
既修^更)正本 民國10丨年8月21曰 ι· 一 ^樟芝菌絲體之培養方法’其係包含下列步驟: 含酵母菌(cerev/s/ae )之;μζ·暮 t : 〇〇, CT#^ ^ 填酸二氫鉀U%_母菌、⑽1〜_硫酸鎮及GG1〜0.4% jb)加入木屑於前述發酵後之培養基並攪拌; (〇將前述木屑及培養基置於一器孤中; (d)將則述襞有木屑及培養基之器皿滅菌;及 ^ t取知之卤種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養 基之,皿中,並於5〜35乞下培養形成菌絲體。 。 2·如申請專利範圍第1項所述之培養方法,其係為一種固 態培養方法。 3·如申請專利範圍第1項所述之培養方法,其中前述步驟(a) 係發酵3-30天。 4. 如申請專利範圍第1項所述之培養方法,其中前述步驟 (Ο之器皿的濕度為6〇〜90%。 5. 如申請專利範圍第4項所述之培養方法,其中前述步驟 (Ο之器皿的濕度為80%。 6. —種樟芝菌絲體之培養方法,其係包含下列步驟: (a) 取一含酵母菌(saccharomyces cerevisiae )之培養 基,於5-35°C下發酵,且前述培養基成分係包含:1〜8% 糖、0.06〜1.2%酵母菌、0.01〜0.4%硫酸鎂及〇·〇1〜0.4% 磷酸二氫鉀; (b) 將前述發酵後之培養基置於一器皿中; (c) 將裝有培養基之器加·滅菌;及 (d) 取一樟芝菌種接種至前述滅菌過之培養基中,並於 21 V ^/3307 民國101年8月21日 其係為一種液 5〜35 C下培養形成菌絲體。 7 ,申請專利範圍第6項所述之培養方法 態培養方法。 8‘如申4專利範圍第6項所述 養 係發酵3-30天。 -香万沄其中刖述步驟(a) 9. 專利_第丨項或第6項所述之培養方法,巧 剛迹步驟(a)係發酵7-14天。 、 10 申叫專利範圍第丨項或第6項所述之培養方法,其 前述樟芝菌種係在20〜3(TC培養。 、
U.種樟芝子實體之培養方法,其係包含下列步驟: (Ο將含有如申請專利範圍第丨項或第6項所述之方法 所培養之樟芝菌絲體之基質接種至一段木; ' (b)將前述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35〇c、濕 度65〜85%的環境下培養一段時間;及 … (Ο清除段木上殘餘之基質後,將段木置溫度15〜35 °C、濕度80〜98%的環境下栽培一段時間後即可形成樟 芝子實體。
12.如申請專利範圍第u項所述之培養方法,其中前述步驟 (a)之含有樟芝菌絲體之基質包含固態基質或液態基質。 13_如申請專利範圍第12項所述之培養方法,其中前述固態 基質係為木屑。 14_如申請專利範圍第丨丨項所述之培養方法,其中前述步驟 (b)之段木係在溫度25〜3〇°C、濕度75〜85%之環境中 培養。 15.如申請專利範圍第η項所述之培養方法,其中前述步驟 (c)之段木係在溫度26〜3〇 C、濕度90〜98%的環境下 栽培。 22 1373307 民國101年8月21日 16.如申請專利範圍第n項所述之培養方法,其中前述步騾 (b) 之培養時間係為至少一個月以上。 17·如申請專利範圍第11項所述之培養方法,其中前述步驟 (c) 之樟芝子實體之栽培時間係為至少三個月以上。 18.—種樟芝子實體之培養方法’其係包含下列步驟: (a)取一含酵母菌(少 ces cere νζϋβ )之培養 基於5 35C下發酵,且前述培養基成分係包含:1〜8% 糖、0.06〜1.2%酵母菌、〇 〇1〜〇·4%硫酸鎂及〇 〇1〜〇 4/ 磷酸二氫卸; 〇
(b) 加入木屑於前述發酵後之培養基並攪拌; (c) 將前述木屑及培養基置於一器皿中; (d) 將前述裝有木屑及培養基之器孤滅菌;及 (e) 取一樟芝菌種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養 基之器皿中,並於5〜35°C下培養形成菌絲體; 。 (f) 將前述含有樟芝菌絲體之木屑接種至一段木; (g) 將刖述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35°C、、、尋 度65〜85%的環境下培養一段時間;及 ‘、 (h) 清除段木上殘餘之木屑後,將段木置溫度15〜35 。80〜98%的環境下栽培—段時間後即可形成樟 專利範圍第18項所述之培養方法,其中前述步驟 (a)係發酵3-3〇天。 二請專利範圍第18項所述之培養方法,其中前 (c)之器皿中的濕度為60〜90%。 21二請專利範圍第20項所述之培養方法,其中前 kc)之器皿的濕度為8〇%。 22.如申請專利範圍第18項所述之培養方法,其中前述步驟 23 1373307 民國101年8月21曰 (g) 之段木係在溫度25〜30°C、濕度75〜85%之環境中 培養。 23. 如申請專利範圍第18項所述之培養方法,其中前述步驟 (h) 之段木係在溫度26〜30°C、濕度90〜98%的環境 下栽培。 24. 如申請專利範圍第18項所述之培養方法,其中前述步驟 (g) 之培養時間係為至少一個月以上。 25. 如申請專利範圍第18項所述之培養方法,其中前述步驟 (h) 之樟芝子實體之栽培時間係為至少三個月以上。
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