TWI577797B - Studies on the Culture Methods and Culture Substrate of - Google Patents

Description

牛樟芝菌體培養方法及培養基底成份

本發明係為一種牛樟芝菌體培養方法及培養基底成份，尤指一種使用培養容器培養牛樟芝菌體之培養方法與培養基底成份。

牛樟樹是台灣特有植物，受到極度的重視，並列為保育類植物，而牛樟芝菌(Antrodia comphorata)又只長於牛樟樹，其他樹木無法長出牛樟芝，牛樟芝對抑制癌症、預防癌症的轉移、B型肝炎、糖尿病、高血壓等疾病具有功效，並在抗氧化、抗血液中凝血、及腸胃疾病上也有相當的功效，牛樟芝的成份複雜，其中重要成份包括有：三萜類化合物(Triterpenoids)、超氧歧化酵素(SOD：Superoxide Dismutase)、腺甘(Adenosine)、β-D-葡聚醣(β-D-glucan)等營養成份；其中三萜類化合物是牛樟芝最重要的化學成份之一，也是牛樟芝之萃取物中苦味成份的來源。以目前的研究結果得知，在每種靈芝內的三萜類含量約1~3%，而單牛樟芝一種就擁有15~45%的三萜類含量，三萜類的主要功能有抑制癌細胞的生長、抑制組織胺的釋放，防止過敏、促進肝功能、促進血小板凝集、以及降血脂等作用，因此三萜類的含量及種類愈多，則愈有醫療價值，實驗證實：三萜類化合物能有效的抑制血管收縮素轉化脢酵素(ACE：Angiotensin Converting Enzyme)的活性，進而降低血壓，另外三萜類也具有抗發炎之功用。

但是牛樟芝菌在生長上為實體屬多年生，具有強烈樟樹香味，外型呈板狀或鐘狀，新鮮者表面呈鮮紅橘色，成熟後顏色呈桔色或黃色，菌蓋半圓形，牛樟芝只寄生在野生牛樟樹洞中，牛樟樹為台灣特有的木，生長於海拔450~2000公尺的山區，近年來因為大幅採發後牛樟木已顯得非常稀有，列為生態保護的樹種；過去以人工培養牛樟芝菌的方式為在加工切塊後的牛樟樹段木上植菌，並透過環境控制使其長成後再取出成熟的牛樟芝菌進行加工製作成營養食品；然而在市場大量需求狀況下，業者必須大量培養牛樟芝菌，但是在牛樟樹段木取得困難且成本過高的狀況下，遂有業者開發出固態培養法及液態培養法兩種主要技術；其中在固態培養法為將牛樟芝菌種以包裝容器進行菌絲體培養，內含有纖維物、醣類、五穀雜糧類等培養基底，促使該牛樟芝菌能獲得與野生牛樟芝相近的成份，培養時間約三個月以上，其成份中之多糖體與三帖類會因培養基的內容物而改變；另一種液態培養法，其技術手段為在液體發酵容器中進行菌種液體發酵以收取菌絲體，培養時間較短、成本較低，但同時液態培養法製造出來的牛樟芝菌絲體之營養成份相對上較低。

前述之牛樟芝菌取代培養方式，其雖然可以減低對牛樟樹段木的依賴及需要，但是轉植後卻因為牛樟芝菌後續成長中缺乏牛樟木所含有三帖類成份的吸收，反致使轉植後的牛樟芝菌所含的三萜類化合物等成份比率降低或者根本不存在。

本發明係為一種牛樟芝菌體培養方法及培養基底成份，其培養方法主要特徵在於包括有以下步驟：1)初菌培養步驟：將野生牛樟芝菌 移植到培養皿中，其中該培養皿置放有培養基底；2)轉植培養步驟：至將野生牛樟芝菌轉植到容積較培養皿更大的培養容器中培養，此一階段培養容器內附有培養液；3)轉化培養步驟：當牛樟芝菌體之菌絲於培養容器中至更飽滿時，於培養容器中加入沉香木屑驅使菌絲在成長過程中，充分吸收沉香之三萜類化合物成份。

本發明之培養基底成份特徵在於：一種牛樟芝菌體培養基底成份，其使用於牛樟芝菌轉植培養容器內，其成份包含培養液及增長基底，其特徵在於該增長基底包含有三萜類化合物成份；其中該增長基底為沉香木屑。

圖1：係本發明之實施步驟流程圖。

請參照圖1，本發明係為一種牛樟芝菌體培養方法及培養基底成份，尤可藉由特殊培養基底的選用，使牛樟芝菌體更富含有更多的三萜類化合物(Triterpenoids)，主要包括有以下步驟：

1.初菌培養步驟：在進行培養過程前，先採集野生牛樟芝菌，再將野生牛樟芝菌移植到培養皿中，其中該培養皿置放有培養基底，該些培養基底包括有：酵母萃取物、葡萄糖、蒟蒻粉、糖蜜、馬鈴薯萃取物，其中該酵母萃取物性質上為提供野生牛樟芝菌繁衍的營養主劑使用，而蒟蒻粉提供凝聚結合而提供增加野生牛樟芝菌附著生長的功效，搭配葡萄糖、糖蜜、馬鈴薯萃取物等物質，提供野生牛樟芝菌初期生長時吸收的養分，並增加富含的養分。

2.轉植培養步驟：牛樟芝菌植入培養皿後成長面積至培養皿70%~80%面積時，將牛樟芝菌轉植到容積較培養皿更大的培養容器中培養，此一階段培養容器內附有培養液，該培養液之成份包括有：酵母萃取物、葡萄糖、糖蜜、馬鈴薯萃取物及牛樟樹木屑，該牛樟木屑可使牛樟芝菌體之菌絲成長更佳。

3.轉化培養步驟：當牛樟芝菌體之菌絲於培養容器中至更飽滿時，於培養容器中加入一增長基底成份及五穀類為本發明重要的技術特徵，在本實施例中該增長基底為沉香木屑，主要在於沉香木屑含有三萜類化合物(Hydroxyhopanone)．透過此一培養技術可驅使菌絲在成長成牛樟芝成菌過程中，充分吸收沉香之三萜類化合物成份，促使其更具更高比例的三萜類化合物成份，使之經濟效益更高，而沉香木屑中更富含有沉香醇(Linalool)之香料成份，更可促使牛樟芝菌在此一程序培養後散發出獨特的香氣，使其在採集後製作成營養食品時添加氣味，增進使用者在食用時的味覺效果；在此步驟的加入三萜類化合物成份的增長基底不以沉香木屑為限，其他含有三萜類化合物成份之植物成份皆屬可應用之範疇。

自前述步驟中可知，本發明主要的技術重點在於本發明透過特殊培養步驟及培養基底的組成，使原本轉植培養導致牛樟芝菌內含三萜類化合物等有效成份偏低的狀況獲得較佳的改善，在不大量使用牛樟樹段木又可獲得更高營養成份比率的功效下，對於環境保護改善及促進人體健康兩個需求上獲得相輔相成的效果。

Claims (3)

1. 一種牛樟芝菌體培養方法，其依序有以下步驟：初菌培養步驟：將野生牛樟芝菌移植到培養皿中，其中該培養皿置放有培養基底；轉植培養步驟：野生牛樟芝菌移植到培養皿中培養至預設面積比率後，將牛樟芝菌轉植到容積較培養皿更大的培養容器中培養，此一階段培養容器內附有培養液，其中該野生牛樟芝菌移植到培養皿中培養之預設面積比率為培養面積至培養皿70%~80%面積；轉化培養步驟：當牛樟芝菌體之菌絲於培養容器中至更飽滿時，於培養容器中加入包含有三萜類化合物成份之沉香木屑，驅使菌絲在成長過程中吸收增長基底之三萜類化合物成份，沉香木屑中沉香醇之香料成份，使牛樟芝菌在此一程序培養後散發出獨特的香氣。
2. 如申請專利範圍第1項所述之牛樟芝菌體培養方法，其中該初菌培養步驟之培養基底加入有蒟蒻粉提供凝聚結合而提供增加野生牛樟芝菌附著生長的功效。
3. 如申請專利範圍第1項所述之牛樟芝菌體培養方法，其中該轉植培養步驟之培養液成份至少包括有牛樟樹木屑使牛樟芝菌體之菌絲成長更佳。