TW536391B - Additives containing fucoidan for foods or drinks, and foods or drinks containing fucoidan - Google Patents

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TW536391B TW086106734A TW86106734A TW536391B TW 536391 B TW536391 B TW 536391B TW 086106734 A TW086106734 A TW 086106734A TW 86106734 A TW86106734 A TW 86106734A TW 536391 B TW536391 B TW 536391B
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Yoshihisa Umeda
Hiroshi Kihara
Katsushige Ikai
Ikunoshin Kato
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Takara Shuzo Co
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536391 A7 B7 五、發明説明( 而 分 成 成 構 為 η a d ο 01料 U 飲 (F或 糖品 多食 藻之 域岩果 領以效 術於上 技關理 之係生 靨明異 所發優 明本有 發 具 酸 硫 糖0 岩 有 含 1 種 1 之參 海 或0 海 在 含 包 係 術糖 技多 之藻 有岩 既 積 有 未 且 糖 多0 岩視 ill S 曾 未。 中料 術歆 技或 之品 去食 過在 在用 〇 使 糖試 多嘗 之極 ,利品 , 食 料的 原用 之作 fc§ mil 糖理 多生 藻用 岩有 有有 含具 供上 提康 於健 在在 題旨佳 課,味 之的風 決目供 解之提 欲明料 所發原 明本該 發 用 於品 關食 有之 係徵 的特 目為 1 糖 第多 之藻 明岩 發之 本物 即有 , 含 述糖 段槪多 手 K 藻 之予岩 需明自 。 所發來 者題本有 料課將含 歆決如種 或解 一 藻為 岩糖 自多 來藻 將岩 可有 有含 含之 除 一 去 於或 II低 係減 的Μ 目予 2 類 第酸 ,之朊 明藻 。 發之 者本有 料,含 歆又糖 或 多 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝- 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 糖徵 多特 藻為 岩糖 自多 來藻 種岩 一 量 於效 關有 有有 係含 的之 目性 3 導 。 第誘 料之化 歆明理 或發藥 品本有 食 ,具 之者物 徵再有 特 含 來除 . 去 或 低 減 -*f Μ 種 1 於 關 。 有 者係 料 的 歆目 或 4 品第 食 之 性明 導發 誘本 化, 理次 藥其 之 之歆 性或 導品 誘食 化性 理導 藥誘 有化 具理 而藥 類之 酸徵 朊特 藻其 之為 中糖 物多 有藻 含岩 糖量 多效 藻有 岩有 自含 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X297公釐) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明(2 ) 料者。 在說明書中,所謂之藻朊酸類乃藻朊酸及其鹽或酯或 為其分解物之總稱。 圖面之簡單說明: 第1圖係表示岩藻多糖-U及岩藻多糖-F之沈澱形成率。 第2圖係表示來自海藻萃取物(0.2 mg/ml)之藥理化誘 導作用。 第3圖係表示來自海藻萃取物(0.5mg/ml)之藥理化誘 導作用。 第4圖係表示來自海藻萃取物(lmg/Hil)之藥理化誘 導作用。 第5圖係表示岩藻多糖-U,岩藻多糖-F之藥理化誘導 作用。 發明之實施形態 Μ下,具體說明本發明。 由海藻,海參可調製岩藻多糖,本發明係可使用此等 岩藻多糖。在本發明中最好係使用含有高岩藻多糖之海 藻,海參之岩藻多糖。 本發明之岩藻多糖,有已純化及/或岩藻多糖含有物。 岩藻多糖含有物,例如包含岩藻多糖萃取物。 岩藻多糖萃取物,包含從來自岩藻多糖含有物乏原料 之萃取物,該萃取物之處理物,最好含有高岩藻多糖萃 取物。 該含有岩藻多糖萃取物,例如為海藻萃取物時,例示 -4 一 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 訂 _線- 本紙張尺度適用中國國家標率(C NS ) Λ4说格(210X 297公釐) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明(5 ) 有在鈣鹽的存在下萃取海藻所獲得之萃取物,而使用氯 化鈣做為鈣鹽。 又,該海藻萃取物,係在鹼性溶液進行海藻之萃取, 在萃取液,例示添加鈣鹽而獲得之可溶性物,可使用碳 酸納溶液做為鹼性溶液,而如為鈣鹽時則可使用氯化鈣。 更且該海藻萃取物,係在鹼性溶液進行海藻之萃取, 將萃取物作成酸性後,例示所獲得之可溶性物,如為鹼 性溶液則可使用碳酸納溶液。 從來自岩藻多糖含有物原料之溫度及時間,係因應其 目的而可選擇40〜20〇υ, 1〜360分鐘έ範圍,而最好係 選擇在50〜1301, 10〜180分鐘的範圍内進行。 本發明所用岩藻多糖之一種實例,比較來自岩藻多糖 含有物為原料之水萃取物,有高岩藻多糖含有率之物質 ,更且,實質上係包括減低或去除藻朊酸類含量之物。 此時因無具有來自藻朊酸類影響既有食品或歆料之高黏 性,酸凝固性,多價金屬離子而形成膠化等性質,而提 供對欽食之固有物性無有影響之原料。 又,海藻萃取物之特別活性碳處理物,因可將海藻之 異味選擇除去,故無有海藻特有之異味,因此使用於食 品或歆料則格外為優異。 本發明之食品或歆料,雖無特別之限定,惟其你包括 有,例如榖類加工品(小麥粉加工品,澱粉類加工品, 預先混合物加工品,麵類,通心粉類,麵包類,餡類, 麵條類,麩,米粉,粉條,包裝餅等),油脂加工品 -5- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 一線_ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 A7 B7 五、發明説明(4 ) (可塑性油脂,油炸油,沙拉油,調味醬汁,調味料等) ,大豆加工品(豆腐類,豆醬,蒸醱之大豆等),肉類 加工品(火腿,臘豬肉,燻製的香腸,香腸等),水產 製品(冷凍碎魚肉,魚糕,竹輪,魚肉山芋九,薩摩炸 ,筋,魚火腿,魚香腸,木魚,魚卵加工品,水產罐類 ,佃煮等),乳品(原料乳,乳漿,醱酵乳,乳酪,起 司,練乳,奶粉,冰淇淋等),蔬菜,水果加工品(果 汁,果醬,蜜餞,水果飲料,蔬菜歆料,綜合飲料等) ,糖果類(巧克力,餅乾類,水果麵包類,糕餅,糖果 ,米果類等),酒精飲料(日本酒,中國酒,酒類,威 士忌酒,燒酒,伏加酒,白蘭地酒,杜松子酒,蘭姆酒 ,啤酒,清涼酒精歆料,水果酒,甜香酒等),嗜好飲 料(綠荼,紅茶,鳥龍茶,咖啡,清涼飲料,乳酸歆料 等),調味料(醬油,辣醬油,醋,料酒等),罐頭, 瓶罐,袋裝食品(牛鈑,鍋鈑,炒飯,咖喔飯,其他各 種經調理之食品),半乾燥或濃縮食品(肝醬,其他之 塗抹用食品,麵條,切麵汁,濃湯類),乾燥食品(泡 麵類,速食咖喱,速食咖啡,粉末果汁,粉末湯,速速 豆醬,調理過之食品,調理好之飲料,調理湯汁等), 冷凍食品(火鍋,碗蒸,鰻燒,漢堡牛排,燒賣,水餃 ,各種燒排,雞尾酒等),固體食品,液體食品7湯汁 等),香辣味等之農林產加工品,畜產加工品,水產加 工品等。 製造本發明之歆食品方法,雖無特別限制,但可包括 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(2丨〇 , 公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝_ 線 536391 A7 B7 五、發明説明(5 ) 調理,加工Μ及一般所用食品或歆料製法所製造之食品 ,在所製造之食品或歆料包含Μ岩藻多糖即可,又在食 品或歆料中含Κ有效量之具有藥理化誘導性岩藻多糖而 可提供藥理化誘導性之食品或歆料者。 關於調理及加工,可在調理或加工前,調理或加工時 ,以及在調理或加工後添加岩藻多糖,將岩藻多糖加入 於調理及加工品或其材料,並可稀釋岩藻多糖。在食品 或歆料之製程中,於任何步驟均可添加岩藻多糖,在食 品或歆料Μ及其原料添加岩藻多糖,將岩藻多糖予Μ稀 釋,使其包含在食品或飲料中。又,可分做一次或數次 添加。如此,可簡便地製造新穎食品或飲料,以及含有 有效量岩藻多糖並具有藥理化誘導作用之藥理化誘導性 食品或飲料。本發明之食品或飲料,可將其定義為,無 論在任何步驟中,經添加及/或稀釋而含有岩藻多糖所 生成之食品或歆料,Μ及經由添加及/或稀釋岩藻多糖 而含有有效量岩藻多糖之恢復疲勞誘導性食品或飲料。 其次玆Κ食品中岩藻多糖之添加量為典型飲料逐加檢 討如次。 檢討例1 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 因進行歆料之典型試驗,使用ΡΗ3.8之0.01Μ乳酸緩衝 液,將市售蔗糖溶解成5^/以調製成蔗糖溶液。使< 用實 施例1之岩藻多糖H,分別添加0 (對照),0 . 1 , 0 · 5, 1 · 5 , 1 0,2 0 , 3 0 , 4 0 , 5 0 , 1 0 0 , 1 5 0 及 2 0 0 m g w / ν % 岩藻 多糖,從舌頭接觸之圓潤,滑溜,潤喉感以及味覺平衡 -7- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X29?公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(6 ) 的食感面做官能評估,M20位品審員分做5階段實施評 估(5好,1差),其结果之平均值如表1所示。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 表1 典型飲料之官能評估 岩藻多糖 添加量 (mg w/v ^) 舌頭接觸感 潤喉感 味道之 平 衡 食感之 綜 合 潤滑 滑溜 0 1 . 2 1 . 4 1 . 6 1 . 5 1.4 0.1 1,6 1 . 7 1.7 1 . 6 1 · 6 0.5 2·0 1 . 9 1 . 8 1.7 1 · 8 1 2.1 2.2 2.0 1,9 2.0 5 2.5 2.6 2.7 2.8 2.6 10 3.5 3.6 3.4 3.8 3·6 20 4.0 4.2 4. 1 4. 5 4.2 30 4.5 4.7 4· 3 4. 5 4· 5 40 4.6 4.7 4.3 4.6 4.6 50 4.7 4*7 4.5 4· 8 4.7 100 4.3 4.6 4.6 4.8 4.6' 150 4.0 3.9 3.2 3.8 3 . 7 200 3 . 8 3.6 3 . 1 3 . 6 3 . 5 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· •訂 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公麈) 536391 A7 B7 五、發明説明(7 ) 從表1 ,依官能評估之舌頭接觸感,潤喉感,味覺之 平衡曆面考量,如添加有岩藻多糖,即加入O.lnigv/vX Μ上時則認為具有效果。 檢討例2 在典型飲料中添加Μ實施例1之30mgW/VS^藻多糖, 再分別添加來自海藻之藻朊酸0 (對照),5, 10, 20, 30, 40, 60, 80, 100, 150 及 200mgw/v!K,針對岩藻多 糖及藻朊酸的存在比對食感之影響,仿檢討例1方法進 行官能評估,其结果之平均值如表2所示。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(8 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 表2 岩藻多糖及藻朊酸對官能評估之影響 添加藻朊酸岩藻多糖 (mgw/vSO 岩藻多糖 比率# ⑴ 舌頭接觸感 潤喉感 味道之 平衡 食感之 綜合 滋潤 滑溜 0 30 100 4,5 4.7 4.3 4.5 4.5 5 30 85 4·5 4.6 4.2 4.5 4.4 10 30 75 4.3 4.5 4·2 4.5 4.4 20 30 60 4.2 4·4 4.1 4.5 4,3 30 30 50 4.2 4.4 4.1 4.4 4,3 40 30 43 4.0 4·1 3.7 3.9 3.9 60 30 33 3.5 3.6 3.1 3.2 3,3 80 30 27 3.2 3·3 3.2 3.1 3.2 100 30 23 3.2 3·1 3.0 3.1 3.1 稍微殘留在舌頭 150 30 17 2.9 2.8 2,5 3.0 2.8 稍微殘留在舌頭 200 30 13 2,7 2.6 2.3 2.6 2.6 稍微殘留在舌頭 #岩藻多糖/ (藻朊酸+岩藻多糖)(幻 -10- -----*---、--^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝. 訂 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 A7 B7五、發明説明(10) 岩藻糖硫酸之多糖及/或其分解物,並無特別限制。來 自裼藻植物含有岩藻糖(flicose)之多糖,則通稱為岩藻 聚糖(fucoidan),岩藻多糖(fiicoidin),富康,已知其 有多種之分子结構,而本發明之岩藻多糖則包含有此等 分子结構之物質。 岩藻多糖的分解方法包括有用酸處理等之化學分解方 法,K超音波處理等之物理分解方法,用酵素施加分解 之方法,或採用微生物予以分解之方法等,就本發明而 言係在分子中含有岩藻多糖硫酸,可使用具有藥理化誘 導作用之岩藻多糖分解物。 該岩藻多糖分子结構中含有K岩藻糖為主要成分之一 群,含有數%糖賤酸(uronic acid)在構成糖含有許多 岩藻糖或甘露糖群的分子構造。Μ下,在說明書中,將 實質上不含有糖醛酸者稱謂為岩藻多糖-F,而含有糖醛 酸者則稱做為岩藻多糖U ,而兩者的混合物則記述Κ單 純之岩藻多糖。 在本發明中可各自單獨使用岩藻多糖_F與岩藻多糖-U ,亦可併合使用。亦即,Μ純化之岩藻多糖-F ,岩藻多 糖-U為構成成分之食品或歆料均包括在内,此等岩藻多 糖,特別增加岩藻多糖-U含量之食品或飲料則愈具有很 強之健康增強效果。 < 本發明含有岩藻多糖之來自天然物的萃取物,例如包 含有如實施例4所記載方法調製成之Μ下理化性質之岩 藻多糖-ϋ。 -12 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 -線_ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(11 ) ⑴構成糖:含有糖醛酸。 ⑵由 FUvobacterilim sp. SA-0082(CCRC 910069)所生 下生 自所 選物 係合 少化 最上,K 化種 子一 分之 低物 為合 解化 分示 素所 酵} Μ 解 ί 分 , 糖} Ε 多 ί 0 , 岩I)。 之 < 者 產式成 --------裝------訂-----•線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中《阄家It卞ί CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(I2 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
0H 0
1卜) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 0H -14- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210 X 297公釐) 536391 Α7 Β7 五、發明説明(I5 )
OH (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝·
經濟部中央標準局員工消費合作社印製
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III 、1Τ •線 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Ad彳Μ 210 X 297公釐)
536391 A7 B7 五、發明説明(14 ) 本發明之含有岩藻多糖來自天然物萃取物,例如含有 依實施例5所記載方法調製成之具有以下理化性質之岩 藻多糖-F。 ⑴構成糖:實質上不含有糖醛酸。 ⑵由 Flavobacteriuro sp. SA-0082(CCRC 910069)所生 產之岩藻多糖分解酵素實質上無法將其低分子化。 將岩藻多糖Μ岩藻多糖分解性的微生物,例如Μ上岩 藻多糖分解酵素生產性的Flavobacterium sp. SA-0082 (CCRC 910069)予以處理,即可調製岩藻多糖之微生物 分解物。 又,上逑岩藻多糖-UK岩藻多糖分解酵素,例如由生 產岩藻多糖分解酵素之F 1 a V 0 b a c t e r i u in s p . S A - 0 0 8 2 (CCRC 910069)加M處理,即可調製岩藻多糖-U之酵素 分解物。並依此分解物,得Μ調製各種分解物的分子量 差示物。含有此等之岩藻多糖分解物,經添加及/或稀 釋所形成之食品或飲料亦為本發明之食品或歆料。 經濟部中央標準局員工消費合作社印繁 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 由來自海藻萃取物製造本發明之含有岩藻多糖之一實 例時,其中之海藻可適用紅藻類例如海笞,天草,髮菜 等,綠藻類如紫菜,裼藻類如裼海帶,黑海帶,海蘊, 羊栖菜,裙帶菜,各種海帶等,而本發明則特別適用於 含有高岩藻多糖之藻類。 , 本發明所使用之海藻,例如將含有高岩藻多糖之福藻 類等予Μ乾燥,粉碎後予Μ萃取,或將新鮮物细切後直 接萃取亦屬亦可行。 一 16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210Χ 297公釐) 536391 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明(15 ) 只要Μ高效率萃取岩藻多糖之任何條件不拘限於何種 之方法。 關於製造海藻萃取物而言,可包含有水洗海藻之步驟 ,用酒精或含水酒精洗淨海藻之步驟,亦可在酒精之存 在下進行海藻之萃取。 依照本發明,例如海藻之鈣鹽溶液,如Μ氯化鈣溶液 進行萃取操作,調製成海藻之氯化鈣萃取液。 萃取時對1份乾燥海藻使用1 0〜1 0 0 0份氯化鈣,而氯 化鈣的濃度最好為25 aMM上。 又,使用新鮮海藻時則對1份新鮮海藻宜用1〜1 0 0份 氯化鈣溶液進行萃取,而氯化鈣濃度最好為25mM以上。 萃取宜在50〜1301C之溫度進行10〜180分鐘。而萃取 條件,則減低萃取液中之藻朊酸類,則在任何高效率萃 取岩藻多糖的任何條件均可適用。 萃取海藻之鈣鹽後,可除去不溶性成分。除去不溶性 成分之方法,可選擇遠心分離方法,過滤方法等,從萃 取液中除去不溶性成分之鈣鹽可採用超滤方法,離子交 換方法等予Μ除去。鈣鹽之去除液可經由活性炭處理, 離子交換處理等而可更進一步地選擇除去海藻之臭味。 關於本發明,如海藻的鹼性溶液可由碳酸鈉溶液進行 萃取操作,而調製成海藻之碳酸納萃取液。其次〔在該 萃取液添加鈣鹽,如氯化鈣,除去所生成之不溶成分, 調製來自海藻萃取物的可溶性萃份。 萃取時係對1份海藻,宜Μ 1 0〜6 0 0份碳酸納溶液進 -17- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 訂 _線 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210x29’:u、^ )
536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印繁 A 7 B7五、發明説明(i6 ) 行,而宜MO.1〜5¾之碳酸納溶液進行萃取。 又,使用新鮮海藻時對1份新鲜海藻,宜使用1〜60 份碳酸鈉溶液予Μ萃取,並使用0.1〜5¾碳酸鈉濃度。 萃取時宜在50〜130 °C之範圍內進行10〜180分鐘。 至於萃取條件,Μ萃取液中的岩藻多糖可依良好效率之 萃取條件下進行即可。而說明書中之%係表示重量S:。 海藻之碳酸鈉萃取終止後,加入鈣鹽,如氯化鈣,除 去所生成之不溶性成分。氯化鈣的添加量對碳酸納萃取 液以添加至不產生藻朊酸沉澱為止之用量即可,Κ萃取 液中之藻朊酸類有高效率的沈澱條件即可。除去所生成 不溶性成分之方法,可選擇使用遠心分離方法,過濾法 等。去除不溶性成分液中之鹽類,如碳酸納,氯化鈣, 則可由超滤法,離子交換法等加以除去。去除之鹽類溶 液可經由活性碳處理,離子交換處理等進一步地選擇除 去海藻之臭味。 關於本發明,如海藻之鹼性溶液,可由碳酸納溶液進 行萃取操作,並調製海藻之碳酸納萃取液。其次,用酸 如使用稀硫酸作成酸性,而除去所生成之不溶性成分, 並調製來自海藻萃取物之可溶性物。 由海藻之碳酸納溶液所皰用之萃取則依照Κ上方法進 行。 / 終止海藻之碳酸納溶液之萃取後,在萃取液加入酸溶 液,如稀硫酸溶液,除去所生成之不溶性成分。稀硫酸 的添加量則加入至碳酸納萃取液的ρ Η值達到1〜2 . 5為止 一 1 8 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(1?) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ,將萃取液變成酸性之高效率使藻朊酸類充分沈澱之條 件下均屬可行。除去所生成不溶性成分之方法,可選擇 使用遠心分離法,過滤法等。不溶性成分去除液中之鹽 類例如可藉由超過滤方法,離子交換方法等加K除去。 鹽類去除液如有需要可進行中和處理,並將酸性溶液, 中和溶液等施予活性碳處理,離子交換處理等,則可進 一步地選擇除去海藻中的異味。 本發明之岩藻多糖宜為液狀,而固形物亦可。製造固 形物可適當選擇噴霧法,冷凍乾燥法等習知之乾燥方法。 又,通常岩藻多糖對酸或鹼之抵抗較弱,故使用酸性 溶液或鹼性溶液時容易進行低分子化。藉由調整加熱溫 度,時間,PH等,則可調製成任何之分解物,如由膠質 過濾處理,分子量示差膜處理等,則可調整分解物的平 均分子量,分子量分佈等。至於岩藻多糖之分子量及糖 組成與岩藻多糖的原料收穫期,原料之乾燥方法,原料 之保存方法而有差異,又與岩藻多糖萃取時的加熱條件 ,pH條件等有所不同。例如對岩藻多糖用酸加水分解, 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 在鹼條件下藉糖醛酸的一脫離而進行低分子化。至於 說明書中所記載岩藻多糖-11,岩藻多糖-F其分子量,分 子量分佈亦僅為一種實例,往往因岩藻多糖之處理條件 ,其分子量,分子量分佈容易發生變化。例如*在鹼性 1001下,加熱1小時施予脫鹽之際,使用孔徑為300之 分子篩膜時,可調製分子量分佈從1000至約1萬之岩藻 多糖,岩藻多糖-U,岩藻多糖-F等。且因所使用之條件 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(18 ) 而可調製任何之分子量,分子量分佈之岩藻多糖,凡此 均能用做為本發明之岩藻多糖。 如將本發明之岩藻多糖及/或其分解物加入於癌细胞 之培養液時,從添加後第1天起至數天止癌细胞則引起 分離作用。又,對於正常细胞不具有毒性。尤其來自食 用海藻之岩藻多糖及/或其分解物安全性尤高。 以下,則列舉實施例,具體說明本發明,惟本發明並 不受此等實施例之限制。 實施例1 ⑴ 籠目海帶經充分乾燥後,將20kg乾燥物由自由粉碎 機(奈良機械製作所產製)予K粉碎。於900公升自來水 溶解7.3kg之氯化鈣二水和物(日本曹達公司產製),隨 即,混合20公斤籠目海帶。吹送K蒸氣在40分鐘內將 121C溶液升高至9010液溫,其次在攪拌下保溫在90〜 951歷1小時,再予K冷卻,而獲得11〇〇公升之冷卻物。 其次使用固液分離裝置(韋氏公司產製C N A型),進行 冷卻物之固液分離,調製成約900公升之固液分離上澄 液0 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 將固液分離上澄液360公升使用大勢公司產製之FE 10 - FC-FUS0382(分劃分子量3萬),濃縮成20公升。再加 入20公升自來水,反覆進行濃縮至20公升為止之操作, 施予脫鹽處理,調製成含有高岩藻多糖之來自海藤萃取 物溶液2 5公升。 萃取物溶液之pH約6.5 ,酸度為0.06ml,糖度為0.8 1、忆汍尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明(19 ) B r· ί X ,而鈣濃度為 1 2 0 0 p p ra。 將該溶液1公升冷凍乾燥,得13克乾燥物,在冷凍乾 燥物中含有65%岩藻多糖,33¾岩藻多糖_1)。 岩藻多糖-11含量以實施例4所調製成之岩藻多糖-U做 為標準物質用HPLC予Μ測定。 又,岩藻多糖含量係Μ實施例5所調製岩藻多糖標準 物質之水溶液(〇.4mg/ml)做為標準液,由以下所示硫酸 -半胱氨酸法逕予計算。 用試驗管汲取200 // 1被檢液,在冰冷中於冷卻狀態下 加入900/il之濃硫酸:水=6:1溶液,經充分冷卻後,予 Μ攪拌。在約20 C保持30分鐘後,置於沸騰水浴中加熱 10分鐘。加熱後放置在冰水中冷卻,加入20// 1之3¾半 胱氨酸-硫酸,並攪拌之(發色區)。另一則加入20// 1水 ,並充分攪拌(空白試驗),做為對照。攪拌後放置1小 時分別測定400nin, 460nm之吸光度。 被檢液中之岩藻多糖含量即由下式算出。 含量(iog/nil)=被檢液[發色區(A4C)()-A 4b())-空白(A4C)()-A46〇)]/標準液[發色區(A柳-A46〇)-空白 (A 400 _ Α 4·6〇 )]X 稀釋倍數 Χ 2〇·4 在式中,Α斗⑻為400ηπι之吸光度,A 460為460πιπ之吸光 度。 , 用pH計測定pH值,酸度為將ΙΟπιΙ試料溶液中和至pH 7.0所需之0.1N NaOH用量(ml)。至於糖度即用Brix糖度 計加Μ測定。而C a濃度係由原子吸光分析法測定。 一 21- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 A7 B7 五、發明説明(2〇 ) 其次在高岩藻多糖含量來自海藻萃取溶液加入2¾活性 碳(白鹭:食品添加物用)處理30分鐘後,進行0.8wm之 過滤處理的粗滤,調製過滤器處理滤液(岩藻多糖1 )。 其次將此滤液之一半量在1201C下加壓加熱處理60分鐘, 調製成熱處理液(岩藻多糖I)。 將過滤處理液予Μ冷凍乾燥,並將此乾燥物lOrog分別 懸浮在10ml之UNa2C〇3 , 10 0ΙΠΜ CaCl2 。此兩溶液中 之乾燥物則完全溶解,而無有藻朊酸的掺入。 ⑵ 籠目海帶經充分乾燥後,將20kg乾燥物用粉碎機 (细川微磨機公司產製:飛珠磨)加K粉碎。 用400公升自來水溶解7 . 2kg氯化鈣二水合物(日本曹 達公司產製),然後混合20kg籠目海帶。在攪拌下,吹 送Μ蒸氣M95分鐘的時間將281C液溫升高至951C液溫, 攪拌將溫度保持在95¾歷2小時,隨著冷卻,得500公 升冷卻物。 使用固液分離裝置(田邊良技公司產製),進行冷卻物 之固液分離,調製約450公升之固液分離上澄液。 將此固液分離上澄液用大勢公司產製之FE10-FC-FUS0382 (分劃分子量3萬),濃縮至40公升。其次M40〜60A/hr 之流速連續加入無菌濾水,使導電率到達1.0 ms/cm2為 止進行脫鹽處理,調製含有高岩藻多糖之40公升來自海 藻萃取物溶液。 其次在含有高岩藻多糖來自海藻萃取液加入西拉托 It54(氟鎂石公司產製)0.4公斤以及矽石tf600-s(中央矽 本紙張尺度遢凡中W K家標準(CNS ) A4規格(210 X 297公釐) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝·
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536391 A7 B7 五、發明説明(21 ) 石公司產製)0 . 4公斤,再加0 . 1公斤西拉托# 5 4 5 Μ及0 . 1 公斤矽石H 600-S做為助滤劑用預塗之小型過滤器(6英 时16段,滤紙ADVANTEC#327)進行過滤。 所獲得之滤液K板狀加熱器(日阪製作所產製)進行連 續瞬間加熱處理(98 1C , 60秒)後,予Μ冷卻,調製成 46公升含有高岩藻多糖之來自海藻萃取物溶液(岩藻多 糖V ) 〇 該萃取物溶液之pH為約7 ,酸度為0ml,糖度為1.2 B r i X S; , C a濃度為9 2 0 p p b ,固形分1 . 2 % ,而岩藻多糖含 量為17mg/rol。溶液中無有檢出藻朊酸,碘。 藻朊酸含量係以市售之藻朊酸做為標準物質用HPLC予 Μ測定。 岩藻多糖含量Κ實施例5所調製之岩藻多糖標準物質 之水溶液(0.4mg/ml)做為標準液由硫酸-半胱氨酸法加 Μ計算。 導電率則由導電率計測定。用溴分離碘,滴定Μ硫代 硫酸鈉。固形分則由蒸發器(60 Ό , 18小時)處理後的乾 燥重量所求算。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ⑶ 籠目海帶充分乾燥後,將20kg乾燥物Μ粉碎機(细 川研磨機公司產製:飛珠磨)加以粉碎。 用400公升自來水溶解7.3kg氯化鈣二水和物(白本曹 達公司產製),再混合Μ 2 0 k g籠目海帶。在攪拌下,吹 送Μ蒸氣歷95分鐘使281C液溫升高至95¾液溫,接著撹 拌在9 5 1C保溫2小時。其次予K冷卻,得5 0 0公升冷卻 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) f36391 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明(22) 物。 使用固液分離裝置(田邊良技公司產製),進行冷卻物 之固液分離,調製約450公升之固液分離上澄液。 固液分離上澄液以大勢公司製之FE10-FC-FUS0382 (分劃分子量3萬),濃縮至40公升。其次以30Jl/hr流 速連續加入無菌過漶水,進行脫鹽處理至導電率為1.0 rns/cm2為止,調製成34公升含有高岩藻多糖來自海藻 萃取物溶液。 其次將1.1kg果膠(均果膠LM-13CG:哈求力斯公司製) 加入於20A自來水,吹送水蒸氣35分鐘將28TC液溫升高 至1201C液溫為止,其次在攪拌下在120 ΊΟ保溫5小時, 再予Μ冷卻,調製成28A之冷卻物。 其次將34Α之含有高岩藻多糖之來自海藻萃取溶液與 28 Α之果膠加熱處理液混合,以無水檸檬酸(扶桑化學 公司製)調製成pH為3.5。添加0.9kg西拉托#545 (氟鎂石 公司製),以及0.8kg矽石tf600-S(中央矽石公司製)做為 助濾劑,接著K0.2kg西拉托#545, K及0.2kg之矽石 600-S預塗之小型過滤器(6英吋16段,滤紙:ADVANTEC 27)進行過滤。 所獲得之滹液加入18立蒸餾水,經由板型加熱器(日 阪製作所製)進行連續瞬間加熱處理(981C, 60秒Γ後, 予K冷卻,調製80A之含有高岩藻多糖之來自海藻萃取 物溶液(岩藻多糖VI)。 該萃取物之pH約3.5 ,酸度為1.7ral,糖度為2. IBrix% -24- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 叫 裝· 訂 本紙張尺度適用中國國家標率(C NS ) Λ4况格(210X 297公釐) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明(25) ,Ca濃度為710ppm,固形分2.0¾,岩藻多糖含量為13 mg/ml,岩藻多糖-1)含量為6.61^/1111。萃取液中無有檢出藻 朊_,碘。 將1公升之萃取物溶液冷凍乾燥,得20克乾燥物。 實施例2 切细新鮮之純海帶,將所得2 0 0克切細物懸浮在6 0 0 m 1 之1 s;碳酸鈉水溶液處理1小時後,加水成為1公升。將 此溶液經由遠心分離收集上澄液加水變成4公升。 此溶液加人500mM之氯化鈣直到不產生沈澱為止,用 濾紙除去所生成之沈澱物。所獲得之滹液濃縮後,經由 微型酸化器脫鹽,調製成3.6公升脫鹽液。將其一半冷 凍乾燥得2.1克(岩藻多糖Μ)含有高岩藻多糖之來自海 藻萃取物的分萃物。其次將其餘之脫鹽酸的一半量K活 性炭處理後,在12〇υ下加壓加熱處理60分鐘,調製成 熱處理液(岩藻多糖IV)。 將以上冷凍乾燥物lOing懸浮在l%Na2 C〇3,及lOrol之 ΙΟΟπιΜ CaCl2 。此兩溶液完全將分萃物完全溶解,其中 無有藻朊酸類的混入。 實施例3 實施例1 ,2分別調製之含有高岩藻多糖之來自海藻 萃取物之藥理化誘導作用。 <
將在56 °C經處理30分鐘之半胎兒血清(JRH生物科學 公司)懸浮在於3 7 υ下培養於含有1 0 % R Ρ Μ 1 1 6 4 0培養基 (奇布可公司製)之人類前骨髓性白血病细胞HL-60UTCC 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 、?! ^36391 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製
五、發明説明(24 ) CCL-240)經由ASF 104培養基(味之素公司製)形成為5X 105個/9ml。對此懸浮液9.Oral,添加M lrol由實施例1 ,實施例分別調製成之含有高岩藻多糖之來自海藻萃取 物(岩藻多糖I ,岩藻多糖Μ)之個別之溶液〔溶解於 含有lOOmM氯化納50mM核佩斯緩衝液(PH7.2)於1211〇殺 菌20分鐘〕,在37TC, 5%二氧化碳存在下培養18小時。 將培養後各细胞經由遠心分離而分離為上澄液。所獲得 之细胞懸浮在20//1之10mM EDTAM及含有0.5¾月桂基肌 氨酸鈉之50ιοΜ之三個鹽酸媛衝液(PH7.8),加人1^1 10mg/ml之核糖核酸酶(Sigma公司製)在5〇υ處理30分鐘 後,添加1//1蛋白酶Κ在501C下處理1小時。將處理後 之细胞做為試樣,使用2Χ之瓊脂糖膠在100V之定電壓下 做電泳動。此凝膠浸漬在二溴乙烷溶液30分鐘後使用氨 基轉移酶檢査器確認凝膠中DNN狀態,碓認理想化特有 之DNA梯形。 由此结果,顯然可知從實施例1 ,實施例2分別調製 之含有高岩藻多糖來自海藻萃取物有藥理化誘導作用。 又,將實施例1 ,實施例2分別調製成之含有高岩藻 多糖之來自海藻萃取物(岩藻多糖Ε ,岩藻多糖IV)溶 解於生理食鹽水使之形成為5mg/ml,在1211C下經殺菌 處理2 0分鐘後的溶液用做為被檢液,依照K上方法測定 藥理化誘導作用,對於各該檢液確認有相同之效果。 其次,將在561C下處理30分鐘之牛胎兒血清(JRH生物 科學公司)於含有R Ρ Μ 1 1 6 40培養基(奇姆哥公司製)在3 7 1C (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝_ 訂 _線 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(::丨ϋ 29了么、釐) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明(25 ) 培養之人類前骨髓性白血病细胞HL-60懸浮在ASF104培 養基(味之素公司製)使之形成為2.5X 105個/ 4.5ml。在 此懸浮液4.5ml分別添加0.5ml之由實施例1 ,實胞例2 各別調製成之含高岩藻多糖之來自海藻萃取物(岩藻多 糖I,岩藻多糖Μ)〔溶解於含有lOOmM氯化納分別形 成為2mg/inl, 5mg/rol, lOmg/ml之50πιΜ核佩斯媛衝液 (ΡΗ7.2),在121¾下殺菌20分鐘者〕,於37υ在5%C〇2 存在下予Μ培養。開始培養24小時及44小時取0. 5 ml培 養液試樣,依「組織培養技術」(第2版)(朝倉出版, 日本組織培養學會編,1990年11月1日發行,第26〜28 頁)所記載之方法測計培養基中之生细胞數。亦即依照 血球計算板上的錐蟲藍(trypan blue)染色方法加Μ測 計。 所得之结果如第2〜4圖所示,第2圖係表示各岩藻 多糖在0.2nig/ml存在下細胞之增殖圖,縱軸為培養液每 lml之生细胞數(X104個/ ml,以下相同),横軸係表 示培養時間(小時)。第3圖係表示各岩藻多糖在0 . 5 mg/ml 存在下细胞之增殖圖,縱軸為培養液每lml之生细胞 數,橫軸則表示培養時間(小時)。第4圖係表示各岩藻 多糖在lmg/inl存在下细胞之增殖圖,縱軸為培養液每 1 m 1之生细胞數,橫軸則表示培養時間(小時)◦在各圖 表中白三角形標記為由實施例1所調製成之含有高岩藻 多糖之來自海藻萃取物(岩藻多糖I)存在下各時間之 生细胞數,白四角形標記為由實施例2調製之含有高岩 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) • -ϋϋ ϋϋ ·ϋϋ 11 i^n min-i-i —ϋ -線_ 536391 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明(26 ) 藻多糖之來自海藻萃取物(岩藻多糖Μ)存在下各時間 内培養液中之生细胞數。又對照(試料中無添加)之培 養液中的生细胞數於培養2 4小時後為1 . 5 X 1 0 5個/ πι 1 , 4 4小時後則為3 . 1 X 1 0 5個/ m 1。 如第2〜4圖所示,含有高岩藻多糖之來自海藻萃取物 其在培養基中之濃度最少在200/ig/mlW上時,HL-60细 胞在2天以内因藥理化而可Μ使之死滅。 又,將由實施例1 ,實施例2分別調製之含有高岩藻 多糖之來自海藻萃取物(岩藻多糖Ε ,岩藻多糖IV,岩 藻多糖V,岩藻多糖VI)溶解於生理食鹽水而形成為2 〜lOing/ml,在1211C做20分鐘殺菌處理後之溶液用做為 被檢液,依照Μ上方法測定藥理化誘導作用,對於各被 檢液確認有相同之效果。 實施例4 岩藻多糖-II之調製 籠目海帶充分乾燥後,取2公斤經由自由粉碎機(奈 良機械製作所製)予以粉碎,所獲得之乾燥粉末懸浮在 9公升的8 0 $乙醇,在8 0 1C下處理2小時。從處理後之 濾紙獲得過滹殘渣。對此殘渣洗淨以上乙醇,反覆作3 次過濾操作獲得洗淨乙醇之殘渣。將此殘渣懸浮在36 1 之0.2 Μ醋酸鈣溶液後,在95 1C下處理2小時,再予Μ過 濾。將殘渣Κ 4 Α之0 · 2 Μ醋酸鈣溶液洗淨,得3 6 籠目 海帶之岩藻多糖萃取液。 此濾液經由裝著有排除10萬分子量超遽膜之超濾器濃 縮為2 A ,其次,加入食鹽使最終濃度成為1 . 5 Μ ,再添 一 2 8 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 ▼線 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 __B7_ 五、發明説明(27 ) 加5¾之十六烷基吡啶鐵氯直至不再產生沈澱為止。所生 成之沈澱用遠心分離予以去除。所獲得之上澄液藉由超 濾濃縮為加入4义乙醇,K遠心分離收集所生成之 沈澱。此沉澱再添加100ml 4M之食鹽水,經充分攪拌後 加乙醇直到形成8 0 %為止,攪拌後由遠心分離而獲得沈 澱。將此沈澱物懸浮在8 0 %乙醇經由遠心分離操作,反 覆至上澄液中之260nm吸光度消失為至。M2A之2M食鹽 水溶解此沈澱,用遠心分離除去不溶物後,加入50ml之 DEAE-賽路玢A-800 (生化學工業公司製),攪拌後,經由 過濾除去加入之樹脂。將滤液置於由2M食鹽水平衡後之 DEAE-賽路玢A-800管柱非吸著份Μ具備有分子量10萬K 下空心纖維之超過滹裝置予Μ超過滹,完全除去著色物 質及食鹽後,經由遠心分離及過滤除去不溶性物質,冷 凍乾燥,調製成岩藻多糖-U冷凍乾燥岩藻多糖_υ之重量 Ο 為15克。 此岩藻多糖-UM及由Μ下實施例5所調製岩藻多糖-F 之各氯化納濃度,在過量十六烷基吡啶_氯存在下的沈 澱形成性係如第1圖所示。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 第1圖之縱軸係表示沈澱形成率(% ),橫軸則表示氯 化納濃度(Μ)。在第1圖中,實線及白圓點表示本發明 岩藻多糖-U各氯化納濃度之沈澱形成率,第1圖中,點 線及白三角形標記係代表岩藻多糖-F之各氯化納濃度(Μ) 之沈澱形成率。 沈澱形成率之測定,溶液溫度在3 7 1C ,由Μ下方法作 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明(28) 成。 將各自為2¾濃度之岩藻多糖_U及岩藻多糖-F溶解於水 及4M之氯化鈉,並藉由各種不同之混合比例分別調製 125α 1之溶解於不同氯化鈉濃度之岩藻多糖-U及岩藻多 糖-F溶液。其次,將2.5¾濃度之十二烷基吡啶_溶解於 水及4M之氯化鈉,並將其混合調製成溶解於各種氯化鈉 濃度之1.25¾十二烷基吡啶鐵溶液。 溶解於水之2¾岩藻多糖-U及岩藻多糖-F使之完全沈澱 在1.25¾十二烷基毗啶錨氯所需之容量為3.2倍。其中, 對於溶解在各濃度氯化納之125/i 123:之岩藻多糖-U及 岩藻多糖-F加入400// 1溶解於各濃度氯化鈉之十二烷基 毗啶_溶液後,充分攪拌,放置30分鐘後,遠心分離將 上溶液中之糖含量由酚-硫酸法(分析化學,第28卷,第 350頁(1956 )〕予K測定,計算在各氯化鈉濃度下之各 岩藻多糖之沈澱形率率。 使用纖丙烯S-500凝膠過滤法求出岩藻多糖-U之分子 量,表示約19萬為中心之分子量分佈。 其次,分析岩藻多糖-U之成分。 依照 Journal of Biological Chemistry第 175卷,第 595頁(1948)所記載之方法定量岩藻糖含量。 其次,將所獲得岩藻多糖-U之乾燥標品溶解在¢.5%濃 度硫酸,在11010處理2小時,加水分解單糖構成。其 次,使用 Glyco TAG及 Glycotag Reagent Kit (均為寶 酒造公司製)經加水分解所獲得單糖之還原性末端予Μ I --Ί 叫 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 、1Τ I線 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS )八4規格(210X2W公璿) 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 A7 B7五、發明説明(29 ) 吡啶基-(2)-胺基化(PA化),由HPLC調查構成糖比率。 其次,依照生化學分析第4卷,第3 8 0頁(1 9 6 2 )所記 載之方法定量糖醛酸, 再依 Biochemical Journal,第 84卷,第 106頁(1962) 所記載之方法定量硫酸含量。 由K上结果可知,岩藻多糖-U之構成糖為岩藻糖,甘 露糖,半乳糖,葡萄糖,鼠李糖,木糖,糖醛酸。 實質上不含有其他之中性糖。主要成分之岩藻糖:甘 露糖之半乳糖之糖醛酸:硫酸基莫耳比約1 〇 : 7 : 4 ·· 5 : 20。 岩藻多糖-U之構造決定如下, Μ具有分解岩藻多糖能力之分解酵素分解岩藻多糖-U 及分解物之精製。 精製之岩藻多糖-U使Μ下橋接型岩藻多糖分解酵素作 用進行分解物之精製。 即,將16ml U之岩藻多糖-U溶液,12ml SOmM之磷酸 緩衝液(PH8.0)與4ml 4M之氯化納和8ml 之下 述橋接型岩藻多糖分解酵素溶液混合,在251C下反應48 小時。確認在反應進行之同時增加230nro之吸光度,據 此而判明由本酵素分解岩藻多糖-11。 此反應液由微酸化劑-G3(旭化成公司製)脫鹽後,經 DEAE -賽路玢FF分離精製為U), (b)及(c)3種劃分。 又,Μ上之橋接型岩藻多糖分解酵素可由Μ下方法加 Κ調製。 生產該橋接型岩藻多糖分解酵素用之菌株,Μ具有生 -3 1- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 訂 寶線- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 36391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明(如) 產橋接型岩藻多糖分解酵素能力之菌株即可對於所用菌 株並無限制,具體而言,包括有,如Flavobacteriuro sp . SA-0082 (CCRC910069) 〇 本菌株係從青森縣海水中新檢索所獲得之菌株,此菌 株命名為 Flavobacterium sp. SA-0082,於平成 7 年 3 月29日MFERN P-14872號寄托在通商產業省工業技術院 生命工學工業技術研究所[日本國茨城縣^ <辻市東1 丁目1番3號(郵局遞號305)]而上述通商產業省工業技 術院生命工學工業技術研究所之國際寄托編號為FER Μ BP-5402(國際寄托移管申請日:平成8年2月15日), 且於1996年12月24日MCCRC第910069號寄托在貴國食品 工業發展研究所菌種保存及研究中心。 加在本菌株培養基之營養源即被使用菌株所利用,而 Μ可生產橋接型岩藻多糖分解酵素即可,做為碳源例如 可利用岩藻多糖,海藻粉末,藻朊酸,岩藻糖,葡萄糖 ,甘露糖醇,甘油,蔗糖,甘露糖,乳糖,澱粉等,而 適當之氮源,有酵母汁,腺,酪蛋白水解物,玉米膏, 肉汁,脫脂大豆,硫銨,氯化銨等。其他尚可加入納鹽 ,磷酸鹽,鉀鹽,鎂鹽,鋅鹽等無機物Μ及金屬鹽類。 在培養橋接型岩藻多糖分解酵素的生產菌時,生產量 依其培養條件而有變動,通常之培養溫度為1 5 1C二3 0 1C ,培養基的ρ Η值為5〜9 ,在通氣攪拌培養5〜7 2小時可 到達橋接型岩藻多糖分解酵素的最高生產量。培養條件 係因應菌株,培養基組成,設定在最大之橋接型岩藻多 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X 297公釐) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 訂 736391 A7 B7 五、發明説明(51 ) 糖分解酵素生產量。 本橋接型岩藻多糖分解酵素係存在於菌株中及培養物 上澄清液中。 將Μ上Flavobacterium sp. SA-0082菌株培養在適當 之培養基,收集該菌體,使用一般之破壞细胞手段,例 如,超音波處理等將菌體破壞而得無細胞之萃取液。 其次,從該萃取液採一般之精製手段而可獲得精製酵 素樣品。例如經由鹽析,離子交換管柱層析,疏水结合 管柱層析法,凝膠過濾等予K精製,如此可獲得不含有 其他岩藻多糖分解酵素之純化橋接型岩藻多糖分解酵素。 又,Μ上從培養液除去菌體之培養液上澄清液中由於 存在有大量之本酵素(菌體外酵素),此酵素可由菌體内 酵素相同之精製手段加Κ精製。 玆表示橋接型岩藻多糖分解酵素之精製例如下。 將 Flavobacterium sp, SA_0082(CCRC910069)接種在 注入M600ml含有0.25¾葡萄糖,1.0¾腺,0.05¾酵母汁 之人工海水(賈瑪琳拉勃拉托里公司製)而P Η為7 · 5之培 養基於經殺菌(120 1C , 20分鐘)之2公升三角瓶,在24Ό 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 下培養24小時做為種培養液。在30JI容積之醱酵瓶置入 20Α含有0.25¾葡萄糖,1.0¾腺,0.05¾酵母汁及0.01¾ 消泡萷(信越化學工業公司製KM70)人工海水(賈瑪琳拉 勃拉托里公司製)而pH為7.5之培養基在1201C下殺菌20 分鐘。冷卻後,接種Μ上述600ml種培養液,在241C下 Μ每分鐘10 Α之通氣量與每分鐘125回轉之搅拌速度條 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 A7 B7 五、發明説明(55 ) 管柱,吸著物Μ相同緩衝液充分洗淨後,從250mM至450ΙΠΜ 之食鹽梯度溶出,收集活性劃分,得精製酵素。Μ上之 精製步驟如表3所示。 表3 工程 總蛋白量 總活性 (毫單位) 比活性 (毫單位/mg) 收率 ⑴ 菌體萃取液 61,900 101,000 1.63 100 硫銨鹽析 33,800 88,600 2.62 87.7 DEAE-纖華素FF 2,190 40,400 18.4 40.4 苯纖華素 48.2 29,000 610 28.7 CL-4B 纖克力S-300 7.24 19,600 2,710 19.4 單Q 0.824 15,000 18,200 14.9 本酵素之活性測定如下所述。 混合50 2.5!»:來自籠目海帶之岩藻多糖溶液,10// 1 酵素及60// 1含有667mM氯化納之83mMpH7之磷酸緩衝液, 在371C下反應3小時後,混合攪拌105/ul反應液與2ml 本紙张尺度遢用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) -----f--.--裝------訂-----線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 f36391 A7 B7 五、發明説明(54 ) 水,測定其相關230nm之吸光度(AT)。僅溶解有本酵,素 之上述緩衝液在相同條件下屎應者,代替本酵素,而Μ 僅水用進行反應者代替岩藻多糖溶液,同樣地各自測定 其吸光度(AB i及ΑΒ 2 )。 1單位之酵素,為在上述反應系中在1分鐘内使1/i mol 之甘露糖與糖醛酸之間的配糖物结合予Μ脫離切斷之酵 素量。被切斷结合之定量,係在脫離反應之際,將所生 成不飽和糖醛酸的毫莫耳分子吸光係數做為5.5而逕加 計算者。又,酵素的活性則由下式算出。 (ΑΤ-ΑΒ 1 -ΑΒ2 ) X 2 . 1 0 5 X 1 20/5 . 5 x 1 05 x 0 . 0 1 x 1 80 = U/ml 2 . 1 0 5 :測定吸光度試樣之液量(m 1 ) 120:酵素反應液之液量U1) 5.5:不飽和糖醛酸在230ηιπ時之毫莫耳分子吸光係 數(/mM) 105:稀釋所用反應液之液量U1) 〇.〇1:酵素液量(ml) 1 8 0 :反應時間(分鐘) 蛋白質的定量,係從測定酵素液28〇nm之吸光度時所 進行。此時將lmg/ml之蛋白質的吸光度計算為1.0。 至於基質之來自籠目海帶的岩藻多糖係由K下方法予 Μ調製。 < 將乾燥籠目海帶用自由粉碎機Μ-2型(奈良機械製作所 製)加Κ粉碎,以10倍量之85¾甲醇在701C處理2小時後 ,過濾,將殘渣在10倍量之701甲醇中處理2小時,然 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐)
Hi-—- ϋϋ II ϋ9^ ml 11__ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝----- 訂-----^線 536391 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 A7 _ B7五、發明説明(55 ) 後加K過滤。於殘渣添加20倍量水,並在ΐοου處理3 小時過處而獲得萃取液。萃取液之鹽濃度與400mM之氯 化納溶液相同之後,添加十二烷基吡啶銷氯及至不再生 成沈澱為止,予K遠心分離。將此沈澱以甲醇充分洗淨 ,待完全除去十二烷基吡啶鏺氯後由超滤器(滤膜之排 除分子量10萬)(阿米康公司製)進行脫鹽及除去低分子, 並用遠心分離除去沈澱。將上澄液冷凍乾燥而獲得精製 籠目海帶岩藻多糖。 酵素反應生成物之構造解析 上述橋接型岩藻多糖分解酵素,係屬一種可將存在於 複合多糖中D-甘露糖與D-葡糖醛酸之間之1->4结合予K 脫離分解之酵素,與岩藻多糖作用時則可生成具有以上 式(I), (E)及(I)構造之寡糖。 其中,W上述DEAE-纊華素FF分離精製之3個劃分U) ,(b)及(c)各自使用部分之 GycoTAG 及 GlgcoTAG Reagent Kit(均為寶酒造公司製)將還原性末端吡啶基- (2)-氨基 化(PA化),得各種 PA化糖(PAi) , (PA-b),及(PA-c)。 由 HPLC 分析(PAi), (PA-b),及(PA-c),調查上式(I) ,(E)及(Μ)所代表3種寡糖之PA化物的不同性。 又,Η P L C之條件係如下述。 (一)使用分子量分劃管柱之HPLC分析 裝置:L-6 200型(日立製作所產製) 管柱·· SHODEX SB-803(4.6x 250min)(昭和電工公司製) 溶離液:0.2M氯化納:二甲基亞硪=9:1 (請先閱讀背面之注意事_ 4 >項再填· 裝— :寫本頁) 訂 军 本紙張尺度適用中國K本螵窣(CNS ) Λ4規格(210X297公釐) Ψ 6391 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明(56) 檢出·· Μ螢光檢出器F-1150(日立製作所製)在勵起波 長320nm,發光波長400nm下檢出 流速:1 m 1 /分 管柱溫度:5 0 t (二)使用逆相管柱之HPLC分析 裝置:L-6200型(日立製作所產製) 管柱:L-管柱(4· 6 X 250 in m)[(財)化學藥品檢査協會] 溶離液:50ιπΜ醋酸-三乙胺(ρΗ5·5) 檢出:Μ螢光檢出器F-1150(日立製作所製)在勵起波 長320nia,蠻光波長400nffl下檢出 流速:1 m 1 /分 管柱溫度:4 0 ΊΟ K上2種HPLC分析結果,岩藻多糖-UW上述橋接型岩 藻多糖分解酵素分解所獲得之3種寡糖與上式(I), (I )及(BI )所代表之3種寡糖係為同一物質。 然而U)在還原末端殘基之D-甘露糖持有结合D-葡 糖醛酸與硫酸基之L-岩藻糖结合構造,(b)則在结合硫 酸基還原末端殘基之D-甘露糖结合有D-葡糖醛酸與2個 硫酸基之L-岩藻糖結合構造,(c)在遷原末端殘基之D-甘露糖結合有連結硫酸基之L-岩藻糖,在其D-葡糖醛酸 结合D-甘露糖,更且在D-甘露糖持有结合不飽和葡糖 醛酸與連結硫酸基之L-岩藻糖结合構造。 Μ上所獲得之岩藻多糖-U,具有D-葡糖醛酸與D-甘露 -糖交互结合之構造,至少在一個以上D -甘露糖具有结 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 A7 B7 五、發明説明(57 ) 合L-岩藻糖之構造。 又,具有由K下一般式(IV)所代表之部分構造(但, 式中之至少一個醇性羥基係硫酸酯化,且η係表示1 Μ 上之整數)。
如將Μ上之岩藻多糖-U使與上述之橋接型岩藻多糖分 解酵素作用時,則生成如上述式(I), (Ε)及U)所代 表之寡糖。 由高速•高感度旋光計SEP A-300(堀場製作所製)測定 此岩藻多糖-U之冷凍乾燥物的比旋光度時,為-53.6度。 實施例5 ⑴調製岩藻多糖標準品,岩藻多糖-F,岩藻多糖-U 籠目海帶經充分乾燥後,取2kg經由自由粉碎機(奈 良機械製作所製)予Μ粉碎,所得之乾燥粉末懸浮在9A ,8〇υ之80%乙醇,處理2小時。處理後由滤紙加以過 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Λ4逯格i 21G < 297公釐) -----*—_—裝------訂-----線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 Α7 Β7 五、發明説明(58 ) 滹而得殘渣。用上述乙醇洗淨此殘渣,重覆操作3次過 滤而獲得用乙醇洗淨之殘渣。此殘渣懸浮在36JI之0.2M 醋酸鈣溶液後,在9510處理2小時,予Μ過濾。殘渣用 4JI之0.2Μ醋酸鈣溶液洗淨,獲得36JI之籠目海帶之岩 藻多糖萃取液。於所獲得之滤液添加5¾十二烷基吡啶鐵 氯直至不生成沈澱為止由遠心分離收集沉澱。此沉澱懸 浮在3JI之0.4M食鹽水後遠心分離,並予K洗淨。重複 3次洗洗操作後在沉澱添加1Λ之4M食鹽水充分攪拌後 加入乙醇至成為8〇χ為止,攪拌後由遠心分離而獲得沉 澱。將此沉澱物懸浮在8 0¾乙醇中施予遠心分離操作, 重覆至上澄液中之26 On®吸光度消失為止。將此沉澱溶 解於3A2H之食鹽水,遠心分離除去不溶物後,加入100 祖1之DEAE-纖華素A-800(生化學工業公司製),攪拌後, 經由過濾除去所添加之樹脂。將滤液置於由2M之食鹽水 平衡化後之DEAE-纖華素A-800管柱非吸著分Μ排除分子 量10萬Κ下具備有中空纖維之超滤裝置予Κ超滤,將著 色性物質及食鹽完全去除後,由遠心分離及過濾除去不 溶性物質,冷凍乾燥後,調製岩藻多糖標準物質。 該冷凍乾燥岩藻多糖標準物質之重量為90克。 秤置7克此種岩藻多糖標準物質的冷凍乾燥物,溶解 在0.2Μ之氯化鈣。其次,將4000ml之DEAE -纖華素<FF之 管柱Μ 0 . 2 Μ之氯化鈣加Μ平衡。將溶解於0 . 2 Μ氯化鈣之 岩藻多糖標準物質置於DEAE-纖華素FF之管柱,用0.2Μ 之氯化鈣充分洗淨,其次,Μ 0〜4 Μ之氯化鈉的梯度加 一 40- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝. 、11 536391 A7 B7 五、發明説明(59 ) 以溶出。收集溶出劃分之氯化鈉濃度為0.05〜0.8M之劃 分經由透析脫鹽後冷凍乾燥,獲得實質上與岩藻多糖-F 分離之2.1克岩藻多糖-U。 又,收集Μ上溶出劃分氯化納濃度為0 . 9〜1 . 5 Μ之劃 分經由透析脫鹽後冷凍乾燥,獲得4.7克實質上與岩藻 多糖-U分離之岩藻多糖-F。 岩藻多糖-F之分子量由使用纖克力S-5〇〇之凝膠濾法 求算结果,顯示Κ約19萬為中心之分子量分佈。 依照實施例4所記載之方法分析岩藻多糖-F之成分。 此岩藻多糖-F之構成糖為岩藻糖,半乳糖,其莫耳比 為約10:1。實質上不含有糖醛酸Μ及其他之中性糖。又 ,岩藻糖與硫酸基之莫耳比約1:2 。 混合16ral 1¾之岩藻多糖-F溶液,12ml 50mM之磷酸媛 衝液(PH8.0)與4ml 4M之氯化鈉和8ial 32mU/nil之上述撟 接型岩藻多糖分解酵素溶液,在2510下反應48小時。因 不認出有反應生成物,故不認有岩藻多糖-F之低分子化。 其次,以高速·高感度旋光計SEPA_300(堀場製作所 製)測定該岩藻多糖-F冷凍乾燥物的比旋光度,為-135 度。 ⑵ 使用Μ上實施例1 -⑶記載之岩藻多糖VI之冷凍乾燥 物做為岩藻多糖,由下述方法調製岩藻多糖微生物分解 物。 秤置60克Μ上岩藻多糖VI之冷凍乾燥物,溶解於20义 之人工海水(賈瑪琳拉伯拉托里公司製)後加入1 0 0克腺 一 41- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4g ( 210 Α公蠖, (請先閲讀背面之注意事 •項再填· :寫本頁} 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 A7 B7 五、發明説明(4〇 ) 與2克酵母汁,置入於30A醱酵罐殺菌後,接種Μ f 1 a ν 〇 b a c t e r i u in s ρ · S A - 0 0 8 2 ( C C R C 9 1 0 0 6 9 )在 2 4 t 之 培養溫度,pH7,攪拌125rpm, ΙΟΑ/min通氣條件下培 養26小時。用遠心分離除去培養液菌體後,Μ排除分子 量3萬以下之具備中空纖維之超滹裝置施以超過滤,完 全除去低分子性物質後,經由遠心分離及過濾除去不溶 性物質,進行不能經由排除分子量3萬以下之中空纖維 排除之岩藻多糖微生物分解物的冷凍乾燥。而冷凍乾燥岩 藻多糖微生物分解物之重量為32克。 (3) 使用實施例1-⑶所記載之岩藻多糖VI之冷凍乾燥物 ,依照實施例5-⑴所記載方法調製岩藻多糖-II,由以下 方法調製岩藻多糖-ϋ之岩藻多糖分解酵素分解物。 秤取7克Μ上岩藻多糖VI之冷凍乾燥物,溶解於0.2Μ 之氯化鈣。其次,4000m丨之DEAE-纖維素FF之管柱Μ0.2Μ 氯化鈣加Μ平衡,接著,將上述岩藻多糖溶解物置於 DEAE_纖維素FF之管柱,Μ0.2Μ之氯化鈣充分洗淨,其 次,由0〜4M之氯化納梯度加Μ溶出。收集溶出劃分之 氯化納濃度為0.05〜0.8Μ之劃分經脫鹽後後冷凍乾燥, 得岩藻多糖-ϋ。 混合5克由此所調製之岩藻多糖-U, 250ml ΙΟΟιηΜ之 三個鹽酸媛衝液(PH8.0), 250ml 0.8M之氯化納和/由 19U/ral 之 flavobacterium sp . SA-0 082 (CCRC 9 1 0 0 6 9 ) 所生產之0.1 5 ml橋接型岩藻多糖分解酵素溶液,在25 °C 下反應8 0小時。 本紙汝尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 11Γ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 訂 536391 A7 B7 經濟部中央鞏赁二消容作社印裝 五、發明説明(41 ) 將反應液經由分子量3 0 0 0以下之中空纖維超滴裝置加 以超濾,完全除去低分子性物質後,經由遠心分離及過 濾除去不溶性物質,收集不能經由排除分子量3000以下 之中空纖維排除之岩藻多糖酵素分解物。此劃分由微 酸化劑-G3脱鹽酸後冷凍乾燥,得2克岩藻多糖-ϋ酵素 分解物之冷凍乾燥物。 ⑷岩藻多糖-U,岩藻多糖-F之藥理化誘導作用 將在56°C下處理30分鐘之牛胎兒血清(JRH生物科學 公司製)懸浮在含有10¾ RPM11640培養基(奇姆哥公司製) 於37°C所培養之人類前骨髓性白血病細胞HL-60UTCC CCL-24(〇經由ASF104培養基(味之素公司製)形成為5X 104個/ 900# 1,在FALCON公司産製6個結合板上之各 結合面分注以4·5β1。對於彼此之懸浮液,將由實施例 5-⑴所調製之岩藻多糖-F以及岩藻多糖-U以含有120ΙΠΜ 氯化鈉之3GraM核佩斯緩衝液(ρΗ7)溶解使之形成為10 Big/磁1,加1〇〇#1於121°C壓熱器處理20分鐘者,在37°C, 5 X C 0 2存在下加以培養。又,同量添加以上緩衝液做 相同培養者為對照例。依照「組織培養之技術」(第2 販)(朝倉出販,日本組織培養學會编)所記載之方法(第 2 6〜2 8頁)計測開始培養1 6小時與4 G小時後之生物細胞 數。亦即,依在血球計算板上之錐蟲藍染色之方法加以 計測。 所得之結果如第5圖所示,亦即第5圖為在HL-6G細 胞之培養液添加至岩藻多糖-U或岩藻多糖-F形成為Img/ml -4 3 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝·
、1T 線 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(& ) 時之培養時間與培養液中之生細胞數之關俗圖,橫軸 代表培養時間(小時),而縱軸則表示培養液中之生細胞 數〇添加在第5圖中培養基之含有岩藻糖硫酸多糖之種 類其中白圓圈標記偽表示岩藻多糖-U,黑色圓圈標記則 為岩藻多糖-F。又,對照例(無添加試料)之培養液中的 生細胞數經培養16小時後為7X104個/ml,4Q小時後為 1 - 4 X 10 5 個 / ffll〇 此結果可判明HL-60細胞因岩藻多糖-F及岩藻多糖-U 而可抑制因藥理作用所誘導之細胞增殖速度。 將上述實施例5-⑵,實施例5-⑶各自調製之岩藻多糖 微生物分解物,岩藻多糖-U酵素分解物溶解在含有120 mM氯化鈉之30ibM核佩斯緩衝液(pH7)各自形成為lOiag/ml ,將在121°C之壓熱器處理20分鐘者,比照上述方法測 定藥理化誘導作用,獲得與第5圖之岩藻多糖-U相同之 結果。 實施例6 使用10克緣茶葉,0.2克維生素C以及lOOOml離子交 換水,依常法調製成綠茶。本發明品1偽使用實施例1 之岩藻多糖II,於每100B1製品添加30flig岩藻多糖。而 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 訂 線_ 經濟啷中决棉準局舅工消費合作社印嚷 之 理 1 用S #ί使砠 施 性 法 實 活 —常 使※物 則::取 2 物萃 品取 , 明萃時 發水小 以 糖彳予 豸帶K: Μ海, 岩 1 後 在 熱燥 常D乾 ficp凍 與5°冷 熱 藻 海 之 取藻 萃岩 水 物^ 0 合彳 3fc 對 混 之to J 量 質用 物之 之糖 同多 相藻 用岩 s g 俊 ffl 例30 施於 實當 之相 下加 以添 0 品ηκ ο 5 _—I 率on bo b 1 糖每 多在 本紙張尺度適用中國《家螵率(CNS ) A4規格(210X297公釐) 536391 A7 __B7_ 五、發明説明(G ) 例則無有添加。由20名品審員針對舌觸感,味道之平衡 感,嘗味,以及潤喉感,分做5階段進行官能評估,其 结果之平均值如表4所示。 表4 官能評估 本發明品1 本發明品2 對照 舌觸感 圓潤 4 . 5 3.2 2 . 1 滑溜 4 . 7 2.9 2 . 0 味覺之平衡 4.2 2 · 7 2.0 嘗味 4 . 0 2 . 5 2 . 0 潤喉感 4.5 3 . 1 2 . 3 食感之總合 4.4 2 . 9 2 . 1 在表4中,本發明品1 ,2與對照品比較,其舌觸感 變佳,味感之平衡與嘗味感變佳,引起茶的香味,而有 優異之風味平衡之評估。 實施例7 經濟部中央標準局員工消費合作社印焚 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 依照表5所示之混配方式,由常法調製營養飲料。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(44) 表5 配合表 果 糖 葡 萄 糖 液 糖 150 δ 精 製 蜂 蜜 2 δ 巴 西 可 可 汁 1 ε 人 參 汁 0 .1 g 蜂 王 膠 0 .0 5 g 維 生 素 C 0 .5 g 菸 酸 醯 胺 0 .1 g 維 生 素 Β1 鹽 酸 鹽 0 .02g 維 生 素 Β6 鹽 酸 鹽 0 ♦ 0 2 g L- 苯 基 苯 胺 0 .04g L- 異 白 氨 酸 0 .Olg 擰 檬 酸 1 .5 g 香 料 2 g 離 子 交 換 水 殘 餘 合 計 1 ΟΟΟιπ 1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝.
、1T 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明品3係使用實施例4之岩藻多糖-U,於每lOOinl 製品添加40 mg岩藻多糖。而本發明品4則使用實翻例4 之岩藻多糖-U與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比 率67¾),每100ml製品添加相當於40mg岩藻多糖用量。 而對照例則無有添加。仿實施例6進行相同之官能評估 -46- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ; ΛΟΙ格(210Χ 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(45 ) 。其結果如表6所示。 表6 官能評估 本發明品3 本發明品4 對照 舌觸感 圓潤 3.0 2.5 1,8 滑溜 3 . 5 2 . 4 1.5 味覺之平衡 3 . 6 3 · 2 3 . 0 嘗味 3.8 3,0 2 . 8 潤喉感 3.7 3 . 4 3.0 食感之總合 3 . 4 2 · 9 2.4 (請先閱讀背面之注意事 砵 項再填· 裝·—I 寫本頁)
、1T 由表6可知,比較本發明品3及4與對照例,其舌觸 感,味覺平衡,嘗味,潤喉感均獲得改善,為一富有清 涼感的飲料。 實施例8 由表7所示混配方式,依常法調製濃稠型岩藻多糖之 飲料。 經濟部中央椋準局員工消費合作社印製 一 47 一 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 务明説明(A ) 表7 配合表 麥芽糖液糖(kg) 30.00 梅粉末(k g ) 0.50 1/5檸檬透明果汁(kg) 2.00 膀(kg) 3.00 無水檸檬酸(kg) 0.19 維生素C (kg) 0.20 香料(k g ) 1.20 脫離子水 殘量 計(公升) 1 0 0 0 0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝_ 訂 經濟部中央椋準局員工消费合作社印繁 ,即 糖對阽 8 VCO { 多及 S 表 &口 3口 办 ο Π 製品之PH3 . 1 本發明品5偽使用實施例1-⑵所記載之岩藻多《 於每100ml製品添加400fiig岩藻多糖。而本發明 使用岩藻多糖V與來自海藻之熱水萃取物之混合| 藻多糖比率80S;),於每100® 1製品添加相當於岩g 400fflg之含量。對照例為濃稠型之飲料,在對照1 照2則分別添加4 0 0 b g / 1 0 0 in 1修蘭樹膠及4 0 0 a g / 1 0 _樹膠,仿實施例6進行相同之官能撿査,結果$ 所示。 -4 8 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS )八4規格(210, 公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(47 ) 表8 官能評估 本發明品5 本發明品6 對照1 對照2 舌觸感 圓潤 4,0 3,7 3.5 3.4 滑溜 4.1 3.6 3.3 3.2 味覺之平衡 4.0 3.8 3.2 3·1 嘗味 3.5 3.3 3·1 3.3 潤喉感 3.7 3.6 3.2 3·3 食感之總合 4.0 3.7 3.3 3,2 -----?-----^-裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)
、1T 依表8比較本發明5 , 6K及對照1, 2 ,有優異之 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 舌觸感及味覺平衡,可製成加味濃稠型飲料之良好產品 。又使用實胞例1-⑶所記載之岩藻多糖VI,每100ml產 品添加400rog岩藻多糖,製作濃稠型飲料,亦獲得相同 之结果。又分別使用各依實施例5 -⑵,(3)所調製之分解 物,每100ml產品添加400mg分解物,製作濃稠型歆料 ,亦獲得相同之结果。 實施例9 、 由表9所示之混配,依常法調製含酒精飲料。 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(48 ) 表9 配合表 溫州冷凍柑橘濃縮果汁(Brix度45) 110 g 细糖 80 g 檸檬酸 2 g 檸檬酸鈉 0 . 5g 橘柑精 2 g 5V/VS:酒精水溶液 殘餘 合計 100ml (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝- 、τ 註:混配之飲料冷卻至51C後,經由蘇打虹吸管含存K 碳酸。 本發明品7係使用實施例1之岩藻多糖E,每100ml 產品添加35ing岩藻多糖。而本發明品8 ,則用實施例1 之岩藻多糖I與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比 率為55¾),添加相當於35nig岩藻多糖用量。對照例則使 用無有添加岩藻多糖者。仿實施例6相同方法進行官能 評估,其结果如表1 〇所示。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -50- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(49 ) 表1 0 官能評估 本發明品7 本發明品8 對照 舌觸感 圓潤 4 . 2 3 . 3 2 . 7 滑溜 4 . 3 3.1 2 . 8 味覺平衡 4.0 3.5 2 . 5 嘗味 3 . 9 3 . 0 2,7 潤喉感 3.5 2,7 2 . 1 食感總合 4 . 0 3.1 2.6 如表10所示,比較本發明品7 , 8及對照例,已知其 舌觸感,味覺平衡,嘗味,潤喉感均獲得改善。特別是 ,本發明品7之酸味減輕,可製作成熟橘柑風味之飲料。 實胞例1 0 由表1 1所示之混配方式,依常法調製蓮動歆料。 Λ 裝 訂 線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -5 1- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(50) 表11 配合表 葡萄糖 48 g 果糖 7 . 8 g 檸檬酸 1 . 4 g 檸檬酸鈉 1 . 0 g 精製鹽 0 . 3 g 乳酸鈣 0 . 1 g 鹽化氯化鎂 0 . 1 g 維生素C 0 . 2 g 維生素B1鹽酸鹽 0 . 02g 檸檬油香料 2 g 離子交換水 殘餘 合計 1 OOOg (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· >線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明品9係使用實施例4之岩藻多糖-U,每100 ίο 1 產品添加30mg岩藻多糖。而發明品10則用實施例4之岩 藻多糖-U與來自海藻之熱水萃取物之混合物(岩藻多糖 比率為75¾),添加相當於岩藻多糖30 mg含量。對照例則 使用無有添加岩藻多糖者,仿實施例6相同方法做官能 評估,结果如表1 2所示。 本紙張尺度適用中國國家標隼(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(SI ) 表1 2 官能評估 本發明品9 本發明品1 0 對照 舌觸感 圓潤 4 . 5 3 . 8 2 . 5 滑溜 4 · 3 3 . 5 2.3 味覺平衡 3 . 9 3 . 5 3.2 嘗味 3 . 7 3 . 2 2,9 潤喉感 4.0 3,5 2,8 食感總合 4 . 0 3,5 2 . 7 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 由表12,本發明品9及10比較對照例,具有較優異之 舌觸感,潤喉感K及味覺之平衡,各成分間之調和優異 ,可製作具有顯著味覺效果之產品。 實施例11 欲製作質美之梅酒,在5A之附有瓶蓋之容器裝入以 1440克75“¥»:果糖葡萄糖液糖,670ml 95ν/ν!ί;0料用酒 精,340ml水經混合後放入lkg青梅。 經濟部中央標準局員工消費合作社印繁 本發明品11,在裝入時使用實施例2之岩藻多糖Μ , 每100ml產品添加40mg岩藻多糖。而本發明品12則使用 實施例2之岩藻多糖Π[與海藻熱水萃取物之混合物(岩 藻多糖比率70¾),每100ml產品添加相當於40mg岩藻多 糖含量。對照例則無添加岩藻多糖。 4、紙认又度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(52 ) 各自封蓋後,放置於室溫,不時輕輕攪拌,將青梅浸 漬2個月。其次,追加混合1020ml 28v/vS:酒精,連續 熟成2個月而獲得梅酒。 熟成後對各該梅酒仿實施例6相同方進行官能評估, 其结果如表1 3所示。 表13 官能評估 本發明品11 本發明品12 對照 舌觸感 圓潤 4 . 5 3.2 2 . 5 滑溜 4,2 3.3 2 . 6 味覺平衡 4,6 4,0 2 . 4 嘗味 3.8 3 . 5 2 . 7 潤喉感 [2 3.4 2,8 食感總合 4. 3 3 . 5 2 . 6 由表13,本發明品11及12與對照例比較,有優異之舌 觸感,潤喉感並發琨有長期熟成所能達成之味感及味覺 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 之平衡效果。 實施例1 2 ^ 使用一般性之均質牛奶(水份8 8 , 6 w / v % ,蛋白質2 . 8 w/v%,脂肪 3.5w/v%,乳糖 4.5w/v%,灰分 0.8w/v%),本發 明品1 3係使用實施例1之岩藻多糖I ,每1 0 0 m 1產品添 -54- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7五、發明説明(55 ) 加30mg岩藻多糖。至於本發明品14係用實施例1之岩藻 多糖I與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比率80¾), 添加相當於30 mg岩藻多糖含量。對照例則無有添加。仿 實胞例6相同方法進行官能評估,结果如表1 4所示。 表1 4 官能評估 本發明品13 本發明品14 對照 舌觸感 圓潤 3 . 6 3 . 0 2,1 滑溜 3.5 2,9 2.5 味覺平衡 4 . 0 3,6 3 . 0 嘗味 4,2 2 . 8 2 . 4 潤喉感 3 . 9 3,3 2 . 1 食感總合 3 . 8 3 . 1 2 . 4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 從表14,將本發明品13及14與對照例比較,其舌觸感 ,味覺平衡概獲致改善,有關於牛奶滯留在舌内之食感 ,亦即嘗味不佳之情形均能獲得改善,使牛奶變成易於 飲用。 實施例1 3 依照一般方法,從大豆製作豆漿,用凝固劑予K凝固 ,調製通常之木棉般之豆腐。 本發明品15係使用實施例2之岩藻多糖IV,每100克 -55 - 军 本紙張尺度逷圮中W成家標隼(cns ) A4規格(210 X 297公釐) 536391 Α7 Β7 五、發明説明(54) 產品添加40 nig岩藻多糖。而本發明品16則使用實施例2 之岩藻多糖IV與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比 率60%),每100克產品相當於40mg岩藻多糖含量,而對 照例係使用無添加者,仿實施例6相同方法進行官能評 估,其結果如表1 5所示。 表1 5 官能評估 本發明品1 5 本發明品1 6 對照 舌觸感 圓潤 4. 0 3 . 2 2 . 8 滑溜 3.8 3.1 2 . 5 質地 3*6 3,2 2 . 8 食感總合 3 . 8 3.2 2 · 7 在表15中,比較本發明品15, 16與對照例,其舌觸感 獲致改善,雖為木棉般之豆腐,然會產生如锻絹般豆腐 之舌觸食感,其綜合食感有顯著提高。 實施例14 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 試作巧克力乳賂,糖果K及橘子凍點心類。 由2個蛋黃,125«11牛奶,1(^小麥粉,3(^砂糖'加 溫混練調製成巧克力乳駱。 由i.2kg砂糖與o.8kg麥芽糖μ溶解機(ιιου)予以溶 解混合後,用煮沸機蒸煮至1 2 0〜1 3 0 1C ,使水份含量在 一 56- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210Χ 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(W ) 2%以下,添加16.3克乳酸(50重量S:溶液),10·1克蘋果 酸,5.0克碳酸鈣以及適當香料調製成糖果。 將9克鹿角藥混合180克细粒糖,加800ml水,混合 加熱溶解,並添加10克溫州橘子濃縮果汁,2克檸檬酸 ,1.5克檸檬酸鈉,2克橘子腈,1克香料調製成橘子 凍。 本發明品17(巧克力乳賂),18(糖果),19(橘子凍)係 各自使用實施例4之岩藻多糖-U,每100克產品添加 20nig岩藻多糖,而本發明品20(巧克力乳糖),21(糖果) ,22 (橘子凍)係使用實施例4之岩藻多糖-U與海藻熱水 萃取物之混合物,每100克產品添加相當於20 mg岩藻多 糖用量。對照例則用無添加者,仿實施例6相同方法進 行官能評估,其結果如表1 6所示。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 、?τ 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -57- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ),八4此格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(56) 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 表16 官能評估 舌 觸 感 質 地 食感之總合 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 17 20 17 20 17 20 巧克力 乳賂 3.5 2.9 2.4 3·7 3.2 2.6 3.6 3.0 2.5 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 18 21 18 21 18 21 糖果 3.8 3.1 2.3 3.6 3.2 2.4 3.7 3.1 2.3 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 19 22 19 22 19 22 橘子凍 4.2 3.0 2.2 4.1 2.9 2.3 4.1 2.9 2.2 —58 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210 X 297公釐) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 536391 A7 B7 五、發明説明(57 ) 由表16,將本發明品17, 18, 19以及20, 2 1, 22各與 對照例比較,其舌觸感之滑溜均可獲致改善,成為具有 軟甜般的食感,綜合評估甚為優越。 實施例1 5 使用魚肉試作魚禚及使用畜肉試作香腸之混練產品。 魚糕係將lkg磨碎的魚肉(SA级)添加100g水,20g食 鹽,將可在15分鐘内凝结之各40克封裝在塑膠袋內,於 5 ΊΟ保存一晚上後,在常壓下蒸煮1 5分鐘而獲得蒸魚糕。 香腸係將2kg豬肉,700g豬脂肪以5fflin孔目之搾肉機 搾碎,混合7g五番,3g山艾,lg肉莖蔻,切割後用直徑 2cm之豬腸灌裝。經蒸煮15分鐘而獲得香腸。 魚糕在凝固Μ前,Μ及切斷香骑前,本發明品23 (魚 糕)及24 (香腸)係使用實施例1之岩藻多糖I ,每100g 產品添加50mg岩藻多糖。本發明品25 (魚糕)及26 (香腸) 則用實施例1之岩藻多糖I與海藻熱水萃取物之混合物 (岩藻多糖比率673;),於每100g產品添加相當於50mg岩 藻多糖用量。對照例則使用無添加者。仿實施例6相同 方法進行官能評估,其結果如表1 7所示。 -59 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(21ϋ 37公釐) -----r--4— ~ 裝------訂----線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 536391 A7 B7 五、發明説明(58 ) 表17 官能評估 舌 觸 感 質 地 食感之總合 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 23 25 23 25 23 25 魚 糕 3.8 3.4 2.7 3.7 3.0 2,6 3.7 3.2 2.6 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 24 26 24 26 24 26 香 腸 3.8 3.1 2.8 3.6 3.1 2,5 3.7 3.1 2.6 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 _線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 從表1 7中,將本發明品2 3 , 2 5 (魚糕)及本發明2 4 , 2 6 (香腸)分別與對照例比較,舌觸感之食感則變為柔和, 而質地之彈性亦有提高之趨勢。 實施例1 6 試作拉麵等麵類食物。即將4 k g之拉麵專用粉(含有 鹼水之小麥粉)添加25.4g乳酸納(50w/wS:溶液),9.4g蘋 -60- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(59 ) 果酸納,l〇g碳酸納,再加入1.6义水,混合成濕潤狀 ,經由家庭用製麵機[三洋電氣公司製]予Μ製麵。 本發明品27係使用實施例1之岩藻多糖Ε,於每100g 產品添加4 0 m g岩藻多糖。而本發明品2 8則用實施例1之 岩藻多糖E與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比率 60S:),在加水Μ前每100g產品添加混合相當於40mg岩藻 多糖之用量。對照例則用無有添加者。 使用各自所得之拉麵,依常法加K調理。仿實施例6 相同方法進行官能評估,其結果如表1 8所示。 表1 8 官能評估 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 本發明品2 7 本發明品2 8 對照 舌觸感 3,8 3 . 2 2 . 5 質地 3.5 3 . 0 2 . 8 食感之總合 3.6 3 . 1 2 . 6 、?τ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 於表ί8中,如將本發明品27及28與對照例相比,舌觸 感提高,質地亦富有彈性,口咬感亦佳,承受很高之綜 合評估。 實施例1 7 依常法試作食用麵包及饅頭之麵包類。 將麵包及饅頭皮的混合調製條件,各自例示於表1 9及 表20。 -6 1 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210 X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(W ) 表19 (中種配合) 小麥粉 酵母 酵母食物 水 (混捏配合) 小麥粉 砂糖 食鹽 鬆脆油 酪蛋白 水 (調製條件) 醱酵時間 焐爐時間 燒成時間 麵包之混配比例及調製條件 7 0重量份 2 0 · 1 40 3 0重量份 5 2 5 0 . 5 25 4小時(溫度2 7 °C,濕度7 5 5Π 40分鐘(溫度38°C,濕度8550 3 5分鐘(溫度2 1 0 °C ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 訂 -線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -62- 本紙張尺度遢用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 _ B7五、發明説明(6工) 表20 饅頭皮之混配比例及調製條件 (混配比例) 100重量份 15 0 . 8 1 5 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 小麥粉 砂糖 食鹽 酵粉 豬油 酵母 3.5 水 4 3 · 5 (調製條件) 焙爐時間 90分鐘(溫度4510,濕度75¾) 蒸煮時間 1 5分鐘 在每100克食用麵包及饅頭皮,即於本發明品29 (食 用麵包)及30 (饅頭皮),係使用實施例1之岩藻多糖IV ,添加35rog岩藻多糖。而本發明品31(食用麵包)及32 (饅頭皮)即用實施例2之岩藻多糖IV與海藻熱水萃取物 之混合物(岩藻多糖比率80¾),在混配原料時分別添加 相當於35rog岩藻多糖之用量。彼此之對照例則使用無添 加者。 所得之食用麵包及饅頭用薩綸捲包覆,在5 °C下放置 2 4小時,用放置後之含用麵包及饅頭仿實施例6相同方 法進行官能評估,其结果如表2 1所示。 63- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 訂 536391 A7 B7 五、發明説明(62 ) 表21 官能評估 舌 觸 感 質 地 食感之總合 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 29 31 29 31 29 31 食用麵包 3.3 2.0 1.5 3.0 1.8 1·3 3.1 1.9 1.4 本發明品 對照 本發明品 對照 本發明品 對照 30 32 30 32 24 26 饅頭皮 2.8 2.1 1.6 3.4 1.7 1·1 3.1 1.9 1.3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 、τ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 將麵包類放置在低溫時,潮濕感變差,而成為可致散 落之食感,如表2 1所示,將本發明品2 9 , 31以及3 0,3 2 各與對照例相比,經放置後其舌觸感或質地之食感較為 優異,並可防止舌觸感或質地食感的劣化,可知其有很 高的食感保持作用效果。 -64- 本紙張尺度適用中國國家榡,U NS ) Λ4規格(210Χ 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(65 ) 實施例1 8 依常法使用調製用清酒,本發明品33係使用實施例4 之岩藻多糖_1),每100ml製品添加25mg岩藻多糖。而本 發明品34則用實施例4之岩藻多糖-U與海藻熱水萃取物 之混合物(岩藻多糖比率70%),每lOOiul製品添加相當於 25mg岩藻多糖之用量。對照例係採用無添加者。 仿實施例6相同方法進行官能評估。並追加味覺,香 味評估項目,其结果如表2 2所示。 表22 官能評估 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明品3 3 本發明品34 對照 味覺 3 · 1 3.0 3.0 香味 2 . 9 2.8 2 . 9 舌觸感 圓潤 3 . 9 3 . 2 2 . 5 滑溜 4 . 2 3,5 2.8 味覺平衡 3 . 5 3 ] 2.9 嘗味 3,6 3.2 2 . 7 潤喉感 3 . 8 3 . 0 2.6 總合 3 . 7 3 . 1 2 . 8 從表22,將本發明品33及34與對照例相比,其中舌觸感 特別有關於滑溜感顯示有特別優異,可改善嘗味,潤喉感 -65- 訂 線_ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(64 ) ,發現改善嗜好品的食感格外有效。 實施例19 使用依常法調製之料酒及醱酵調味料,本發明品35 (料酒)及37(醱酵調味料)係用實施例2之岩藻多糖Μ, 於每lOOrol製品添加30mg岩藻多糖。又,本發明品36 (料酒)K及38 (醱酵調味料)即用實施例2之岩藻多糖Μ 與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比率67¾),於每 100ml製品當中添加相當於30ing岩藻多糖之用量。而對 香 覺 味 加 追 並 ο 估 評 。 能示 官所 行23 進表 法如 。 方果 者同结 加相其 添 6 , 無例目 用施項 即實估 例仿評 照 味
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、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -66 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4况格(:;〇,_ :Ν7公釐) 536391 A7 B7 五、發明説明(Μ ) 表23 官能評估 料 酒 醱酵調味料 本發明品 對照 本發明品 對照 35 37 36 38 味覺 2 . 9 2 . 8 2.8 2 · 7 2 . 6 2 . 7 香味 2.7 2 . 4 2 . 7 2 . 4 2.1 2 . 4 舌觸感 圓潤 3.9 3.0 2,5 3,7 2 . 8 2 . 6 滑溜 4 . 1 3 . 2 2 . 7 3.8 2,9 2 . 4 味覺平衡 3.4 3.2 3 . 1 2 . 9 2 . 5 2 . 4 嘗味 3.5 3,1 3 . 0 3 . 2 2 . 8 2.3 總合 3 · 4 3 · 0 2 . 8 3 . 1 2 . 6 2 . 5 (請先閲讀背面之注意事- >項再填· 裝II :寫本頁) 訂 在表23中,將本發明之料酒35, 37 Μ及醱酵調味料36 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ,3 8各與對照例相比,其舌觸感尤其關於滑溜,圓潤, 味覺平衡方面顯示有改善效果,做為相關調理用調味料 可致改善食材之食感。 實施例2 0 混合4.7kg魚粉,0.8kg海苔,2,5kg芝麻,1.0kg食鹽 ,0 . 5 k g麩氨酸納,依常法造粒調製成撒用調味品。 -67- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) 536391 Α7 Β7 五、發明説明(66 ) 請 先 閱 讀 背 之 注 意 事 本 頁 本發明品39係使用實施例4之岩藻多糖-U,於每100g 製品添加1 000m g岩藻多糖。而本發明品40則用實施例4 之岩藻多糖-U與海藻熱水萃取物之混合物(岩藻多糖比 率 60%),於每100g製品添加相當於l〇〇〇mg岩藻多糖之 用量。而對照例則用無添加者。將此撒用調味品撒在飯 米上,仿實施例6相同方法進行官能評估。 结果,將本發明品39及40與對照例相比,含在口中時 ,同米飯的融合良好,舌觸感佳,無有粗澀感,已知可 綜合改善撒用調味品的品質。 發明之效果 本發明之食品或飲料係含有多量具有生理活性之岩藻 多糖及/或其分解物,並經由該岩藻多糖所具有之藥理 誘導作用,其係為一種因攝取而有預防產生癌症,抑 制癌症效果等之健康食品或飲料,尤其屬於一種可保持 胃腸健康之摻入有用機能性海洋纖維之食品或歆料。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明之岩藻多糖,特別是海藻之岩藻多糖係Μ食用 之海藻植物,亦即食用物質為原料,可由低廉之價格大 量供應,且有高度安全性為其特點者。又,本發明係提 供一種減低藻朊酸含量或除去藻朊酸之岩藻多糖,而該 岩藻多糖並不損及歆食品原有之物性,並可改善舌觸感 ,嘗味,味覺習慣Κ及質地等食感,因有保持食感面之 良好物性效果,堪稱一種製造飲食品時有用物質。 一 68- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) Α4規格(210X 297公釐)

Claims (1)

  1. 536391
    第86 1 06734號「含有岩冑多糖之食品或飮料用添加劑 及含有岩藻多糖之食品或飲料 A申請專利範圍: 專利案 (92年4月丨0曰修正) 1 . 一種食品或飮料用添加劑,其係添加到榖類加工品、 油脂加工品、大豆加工品、肉類加工品、乳製品、蔬 菜、水果加工品、餅乾糖果類、酒精飮料、嗜好飮 料、調味料、或香辛料,其特徵爲含有得自海藻或海 參之已降低或去除藻朊酸類之岩藻多糖,相對於藻朊 酸及岩藻多糖總重,岩藻多糖之重量比爲43%以上。 2 ·如申g靑專利範圍第1項之食品或飮料用添加劑,其含 有有效量之得自海藻或海參之已降低或去除藻朊酸類 之岩藻多糖,該岩藻多糖爲具有藥理化誘導性者。 3 ·如申請專利範圍第1或2項之食品或飮料用添加劑, 其中之岩藻多糖爲含有岩藻多糖之萃取物者。 4 ·如申請專利範圍第3項之食品或飮料用添加劑,其中 含有岩藻多糖之萃取物係在耗鹽之存在下從海藻或海 參萃取所得之物質者。 5 .如申請專利範圍第4項之食品或飮料用添加劑,其中 之鈣鹽爲氯化鈣者。 6 ·如申請專利範圍第3項之食品或飮料用添加劑,其中 含有岩藻多糖萃取物係從海藻或海參以鹼性溶液予以$耳又 並在萃取液添加鈣鹽後所獲得之可溶性物者。 536391 六、申請專利範圍 7 ·如申I靑專利範圍第6項之食品或飮料用添加劑,其中 之鹼性溶液爲碳酸鈉者。 8 ·如申請專利範圍第6項之食品或飮料用添加劑,其中 之鈣鹽爲氯化鈣者。 9 .如申I靑專利範圍第3項之食品或飮料用添加劑,其中 含有岩澡多糖之萃取物係從海藻或海參以驗性溶 '液予 以萃取,將萃取液做成酸性後所獲得之可溶性物者。 1 0 .如申請專利範圍第9項之食品或飮料用添加劑,其 中之鹼性溶液爲碳酸鈉溶液者。 1 1 ·如申請專利範圍第1或2項之食品或飮料用添加 劑,其中之岩藻多糖爲海藻之岩藻多糖者。 1 2 ·如申請專利範圍第1或2項之食品或飮料用添加 劑,其中之岩藻多糖爲具有以下理化性質之岩藻多糖 -U及/或岩藻多糖-F者, 岩藻多糖-U之理化性質: ⑴構成糖:含有糖醛酸, ⑵可由 Flavobacterium sp. SA-0082(CCRC 910069) 所生產之岩藻多糖分解酵素低分子化,至少係生成 有選自下式(I ),( Π ),(瓜)所代表之至少一種以 上之化合物者, 536391 六、申請專利範圍
    536391 六、申請專利範圍
    536391 六、申請專利範圍 岩藻多糖-F之理化性質: ⑴構成糖:實質上不含有糖醛酸, ⑵實質上不被由 Flavobacterium sp. SA-0082(CCRC 910069)生產之岩藻多糖分解酵素低分子化。 1 3 .如申請專利範圍第1或2項之食品或飮料用添加劑, 其中之岩藻多糖爲岩藻多糖分解物者。 1 4 .如申請專利範圍第1或2項之食品或飮料用添加 劑’其中岩藻多糖含量換算成岩藻糖重量爲 0 · 001 w/w% 以上者。 1 5 · —種食品或飮料,其特徵爲榖類加工品、油脂加工 品、大豆加工品、肉類加工品、乳製品、蔬菜、水果 加工品、讲乾糖果類、酒精飮料、嗜好飮料、調味 料、或香辛料中含有得自海藻或海參之已降低或去除 藻脫酸類之岩藻多糖’相對於藻脫酸及岩藻多糖總 重,岩藻多糖之重量比爲43%以上。 16.如申gpg專利圍弟15項之食品或飮料,其含有有效 量之得自海藻或海參之已降低或去除藻朊酸類之岩藻 多糖,該岩藻多糖爲具有藥理化誘導性者。 1 7 .如申請專利範圍第1 5或1 6項之食品或飮料,其中 之岩藻多糖爲含有岩藻多糖之萃取物者。 1 8 ·如申請專利範圍第1 7項之食品或飮料,其中含有岩 藻多糖之萃取物係在鈣鹽之存在下從海藻或海參萃取 所得之物質者。 536391 、申請專利範圍 1 9 .如申請專利範圍第1 8項之食品或飮料,其中之弼鹽 爲氯化齡者。 2 0 .如申請專利範圍第1 7項之食品或飮料,其中含有岩 藻多糖萃取物係從海藻或海參以鹼性溶液予以萃取, 並在萃取液添加鈣鹽後所獲得之可溶性物者。 2 1 .如申請專利範圍第20項之食品或飮料,其中之驗性 溶液爲碳酸鈉者。 22 .如申請專利範圍第20項之食品或飮料,其中之鹽 爲氯化鈣者。 2 3 ·如申請專利範圍第1 7項之食品或飲料,其中含有岩 藻多糖之萃取物係從海藻或海參以驗性溶、液予以萃 取,將萃取液做成酸性後所獲得之可溶性物$。 2 4 .如申請專利範圍第2 3項之食品或飮料,其中之鹼性 溶液爲碳酸鈉溶液者。 2 5 ·如申請專利範圍第1 5或1 6項之食品或飮料,其中 之岩藻多糖爲海藻之岩藻多糖者。 26·如申請專利範圍第15或16項之食品或飮料,其中 之岩藻多糖爲具有以下理化性質之岩藻多糖及/ 或岩藻多糖-F者, 岩藻多糖-U之理化性質: ⑴構成糖:含有糖醛酸, ⑵可由 Flavobacterium sp. SA-0〇82(CCRC 9 1 0069 ) 所生產之岩藻多糖分解酵素低分子化,至少係生成 有選自下式(I ),( π ),( m )所代表之至少一種以 上之化合物者, 536391 、申請專利範圍
    ο 11 Η •ο1SIο 11ο
    0H 0
    0H 11 536391 六、申請專利範圍
    536391 六、申請專利範圍 岩藻多糖-F之理化性質: ⑴構成糖:實質上不含有糖醛酸, ⑵實質上不被由 Flavobacterium sp. SA- 0082( CCRC 910069)生產之岩藻多糖分解酵素低分子化。 2 7 .如申請專利範圍第1 5或1 6項之食品或飮料,其中 之岩藻多糖爲岩藻多糖分解物者。 28.如申請專利範圍第15或16項之食品或飮料,其中 石?架夕糖曰里換算成岩藻糖重量爲〇.QQlw/w%以上 者0
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