TW445252B - Vitamin D3 analogs - Google Patents

Description

Α7 Β7 4 4 號專利申請案 中文說明書修正頁(89年6月） 五、發明説明（！） 本發明係關於維生素D 3類似物，特別是下式之維生素D 3 之20-表（epi)-1 6烯類似物

式中R為氫，氟，或羥基，R2為氫，低烷基，或鹵素，X 為= CH2，或當R為趣基時，X為（H，H)或= CH2， 及A爲-ce c—

-CH2-CH2-，但當Α為-CH2-CH2-時，尺2為氫或低坡基。 如本文中所用’ 「低烷基」表含有1至4個碳原子之直鏈 或分支鏈烷基，例如甲基，乙基-，丙基，異丙基，丁基， 第三丁基，等。低烷基較佳為曱基或乙基。齒素意為氟， 琪’溴’或氣’較佳為氟。 維生素D 3衍生物係用於治療因維生素〇缺乏所引起之疾 -4 - 本紙張尺度適用中國國家櫺準（CNS)A4規格（210X297公餐） 4 4 b 2 〇 ^ 第86106731號專利申請案 中文說明書修正頁(89年6月） Α7 Β7 五、發明説明（ 1a

病。例如，EP 0 325 279號案所揭示之"天然”維生素D3類似 物，然而WO 92/03414及JP 7188281號案係揭示於第16位置上 無雙鍵之20-表（epi)-1,25-二羥基維生素D3衍生物。 ί請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-IT 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 -4a - 本紙張尺度適用中國國家標準（CMS ) Α4規格（210X297公釐） A7 B7 2 五、發明説明（ 式I化合物引發各種皮膚及癌細胞株之分化及增殖抑制。 因此，式I化合物可用作治療過度增生之皮膚病（如牛皮癬） 之藥劑。式I化合物亦可用於治療贅生性疾病，如白血病或 乳癌，及皮脂腺疾病，如痤瘡或皮脂漏皮膚炎。式I化合 物，特別是1 α -氟- 25-輕基-16,23E-二烯-26,27-雙高- 20- 表-膽#5化固醇（cholecalciferol)，可用於治療骨質疏鬆症。 此外’當局部施用於病人之皮膚時，式]化合物可逆轉光 損傷有關之症狀。因此，由局部施用式I化合物於已經由暴 露太陽而損傷之病人之皮膚’敏纹，彈力組織變性及過早 老化之效果可逆轉，改良皮膚之外表。換言之，經由局部 施用式I化合物’可加速皮膚損傷之修補，而提供皮膚較平 滑及較年輕之外表。 本發明亦關於一種包括式I化合物及醫藥可接受載劑之醫-藥组合物。該组合物可用於引發皮膚及癌細胞株之分化及 增殖抑制，特別是用於治療過度增生之皮膚病，如牛皮 癖；贊生性疾病’如白血病；及皮脂腺疾病，如痤瘡；及 逆轉光損傷有關之症狀，特別是局部治療經由暴露太陽而 受損之皮膚，縐紋，彈力组織變性，及過早老化之效果。 本發明亦關於式Ϊ化合物用於製造治療上述疾病及症狀之藥 物之用途。本發明亦關於一種製備式！化合物及式ΧΠ中間 物之方法。 在較佳具體實施例中，R爲短基。在式I化合物中，R 2較 佳爲氫或氟。較佳之式I化合物爲： 1，25-二羥基-16-烯-23-炔-20-表·膽鈣化固醇 ---5- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公慶） I.--------裝------訂------線 - (請先閱讀背面之注意事項再镇f本頁} 經濟部中央榡準局員工消費合作社ίρ製 U 445 2 α 2 A7 B7 五、發明説明（3 ) (cholecalciferol); 1.25- 二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化固醇； 1，25 -二羥基-16 -烯- 23 -炔- 26,27-六氟- 20 -表-膽鈣化固 醇； 1 λ -氟-25-羥基-16,23Z-二烯-26,27-六氟-20-表-膽鈣化 固醇； 1 α -氟_25-羥基-16-烯-23-炔-26,27-六氟-20-表-膽鈣化 固醇； ' 1,2 5-二羥基-16,23Ε-二烯- 26,27-六氟- 20 -表-膽鈣化固 醇； 1，25 -二羥基-16,23Ζ-二烯- 26,27-六氟- 20 -表-膽鈣化固 醇： 1.25- 二羥基-16,23Ζ-二烯-19-去甲（^0-26,27-六氟-20」 表-膽好化固醇。 式I化合物係如下圖I-V及實例中所述製備。 式I化合物製備方法之最後步驟包括將含有矽烷基保護羥 基之對應化合物去保護。 -----------抑衣------、玎------^ (請先^-讀背面，<-'注1^項再填，.>4頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 張 紙 本 A S N C 一準 標 -家 -圉 -國 I中 用 適 6 X ο :u Α7 Β7 五、發明説明（

0H

AcO

OH

Η

OH

— 裝 訂 線 (請先"讀背面t注意事項再填.本頁) 經濟部中夬標準局負工消費合作社印製

其中如上述 本紙張尺度適用中国國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） t 4 ^ A7 B7 五、發明説明（5 ) 圖]1

(請先W讀背面之注意事項再填？本頁) 經濟部中夬標準局員工消費合作社印裂

其中R，X及R2如上述。 -8- 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS } A4規格（210X297公釐） d 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製4 A7 B7 五、發明説明 圖m c^h^( C(R2)3

C(R^ C(R2)j OH C(R2)3 HO 其中R，X如上述，R2爲氫或低烷基 -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐） 批衣 訂 線 (.請先閱讀背面之注意事項再填：本頁) 44525 2 A7 B7 五、發明説明（7 )

圖IV

0 {請先閱讀背面之注意事項再填5本頁) 裝 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

-C(R2)3 OH 其中R，X及R2如上述 10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2]0X297公釐） 五、發明説明（ Α7 Β7 圖v 經濟中央標準局員工消費合作社印製

C(K2h HO R 其中R，X及R2如上述。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 2?7公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填Vv本頁) 445 2 5 2 A7 B7 經濟部中央標準局負工消費合作社印裝 五、發明説明（9 ) 在上圖I中，式II化合物，爲已知化合物（B. M_ Trost，P. R. Bernstein, P. C. Funfschilling, J. American Chemical Society 101. 4378 (1979))，由與醋酸，》比淀及二曱胺基 吡啶在氯化烴溶劑（如二氣甲烷）中反應，轉化爲式III化合 物。此反應係在0ec至5 (TC，較佳在室溫，較佳在氬氣整 下進行。 式III化合物係與驗（如碳酸納）於醇溶劑（如曱醇）中，較 佳在氬氣壓下反應，轉化爲式IV化合物。 .式IV化合物係與草醯氣及二甲亞颯於氣化烴溶劑（如二 氣甲烷）中，在氬氣壓下反應，轉化爲式V化合物。 式V化合物係與笨亞曱基丙酮於鈀/炭催化劑存在下反 應，轉化爲式VI化合物。 式VI化合物係與3 -三甲基矽烷丙炔趁及Lewis酸（如氣化- 二甲基鋁）於氣化烴溶劑（如二氣甲烷）中反應，轉化爲式 VII化合物。 式VII化合物係由對應之苯基硫羰基碳酸酯與氫化三正丁 基錫及三乙基硼烷於曱苯中反應，轉化爲式VIII化合物。 式VIII化合物係與鹼（如氫氧化鈉）於醇溶劑（如乙醇）中反 應，轉化爲式IX化合物。反應係在5〇。(：至100X範圍内溫 度，較佳在8 〇 °C進行。 式ΪΧ化合物係與1 _(三甲基矽烷基）咪唑於氣化烴溶劑 (如無水二氣曱烷）中反應，轉化爲式X化合物。 式X化合物係與下式之對應化合物 -12-

本紙張繼用中國國冢標準（CNSM^F^0X297^¥T ---------¾.------1T------^ (請先除讀背面之注意事項再填，本頁) 44025 2 A7 B7 五、發明説明（ 10 ,C(R2，)3 〇

C 經濟部中央標準局員工消費合作社印褽 c〇v)3 其中R2'爲氫或低娱；基，在鹼（如正丁基鋰）存在下反應，轉 化爲式XI化合物。 反應較佳在-7 8 °C進行。 當式I中R2爲鹵素之化合物製備時，式X化合物與鹵化丙 胴（如六氟丙酮）在鹼（如正丁基鋰）存在下反;i。 式XI化合物係與氟化四丁基铵於酿溶劑（如四氫I»失喃）中 反應，轉化爲對應之式XII化合物。

如圖II中所述，式XII化合物係與氧化劑（如二絡酸吡啶） 於氯化烴溶劑（如無水二氣甲烷）中反應，轉化爲式XIII化 合物。 I 式XIII化合物係與1 -(三甲基矽烷基）咪唑於氣化烴溶劑 (如無水二氣甲烷）中反應，轉化爲對應之式XIV彳匕合物。 式XIV化合物係與[3S-(1Z,3 α，5/? )]-[2-[3,5-雙[[(1，1_二 甲基乙基）-二甲基矽烷基]氧基]-2-亞曱基亞環己基]乙基] 二苯膦氧化物於醚類溶劑（如四氫吱喃）中在正丁基經檢存 在下反應，轉化爲對應之式la中R爲羥基及X爲=(：112之化 合物。 或者，式XIV化合物係與[5S-Z]-2-[2-[2 -亞甲基-5-[[(1，1·二甲基乙基）二;f基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基] 二苯膦氧化物於醚類溶劑（如四氫咬哺）中在正丁基趣絵存 在下反應，轉化爲對應之式la中R爲氫乏化合物。 -13- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4g ( 2lOX297公釐） ---------种衣------.訂------0 (讀先閱讀背面之注意事項再填，.本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（n ) 或者，式XIV化合物係與[3S-(3ff，5y5，Z)]-2-[2-[2-亞甲 基-3-氟-5-[[(l，l-二甲基乙基）-二甲基矽烷基]氧基]亞環己 基]乙基]二苯膦氧化物於醚類溶劑（如四氫呋喃）中在正丁 基鋰鹼存在下反應’轉化爲對應之式la中R爲氟之化合 物。 _ 或者，式XIV化合物係與[3R-(3 α，5冷，Ζ)·3,5-雙[[(1，卜 二甲基乙基）-二曱基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二苯膦 氧化物於醚類溶劑（如四氫呋喃）中在正丁基鋰鹼存在下反 應，轉化爲對應之式la中R爲羥基及X爲氫之化合物。 在上述圖ΙΠ中，式XII化合物與氫及Lindlar催化劑於有機 溶劑（如醋酸乙酯、己烷及乙醇之組合）中在喳啉存在下反 應，還原成對應之式XV化合物。 式X V化合物係與氫在催化劑（如1,4 -雙（二苯膦基）丁烷 1 , 5 -環辛二烯铑四氟硼酸鹽）及汞存在下在氣化烴溶劑（如 二氯甲烷）中反應，轉化爲對應之式XVI化合物。 式XVI化合物係與二鉻酸吡錠於氯化烴溶劑（如二氣曱烷） 中反應，轉化爲式χνπ化合物。 式XVII化合物係與1 -(三甲基矽烷基）咪唑於氣化烴溶劑 (如二氣曱烷）中反應，轉化爲對應之式XVIII化合物。 式 XVIII化合物係與[3S-(1Z，3 α，5/Π]-[2-[3,5-雙[[(1，1-二 甲基乙基）-二甲基矽烷基]氧基]-2-亞曱基亞環己基]乙基] 二苯膦氧化物在正丁基鋰鹼存在下，較佳於-7 8 °C之溫 度，在無水四氫呋喃溶劑中反應，轉化爲對應之式lb中R 爲羥基及X爲=CH2之化合物。 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210X297公釐） ----------^------1Τ------^ (請先Μ-讀背面之注意事項再^_本頁) 4452 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（12 ) 或者’式XVIII化合物係與[3R-(3 a，5 y3，Z)]-3,5-雙 [[(1，1-一曱基乙基）_二甲基石夕垸基】氧基]亞環己基]乙基]二 表膦氧化物在正丁基經驗存在下於無水四氫味喃溶劑中反 應’轉化爲對應之式lb中R爲羥基及X爲氫之化合物。 或者’式XVIII化合物係與[3 S - ( 3 a，5 ，Z )]-2-[2-[2-亞曱 基-3-氟-5-[[(l，l-二曱基乙基）-二曱基矽烷基]氧基]亞環己 基]乙基]二苯膦氧化物在正丁基鋰鹼存在下於無水四氫吱 喃溶劑中在-78°C之溫度反應，轉化爲對應之式Ib中以爲氟 之化合物。 或者，式XVIII化合物係與[5S，Z]-2-[2-[2-亞甲基-5-[[(l,l-二曱基乙基）-二甲基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二苯騰 氧化物在正丁基鋰鹼存在下於無水四氫呋喃溶劑中在-78 °C之溫度反應，轉化爲對應之式lb中R爲氫之化合物。 、 在上述圖IV中，式XII化合物係與還原劑（如氫化鋁鋰）於 醚溶劑（如四氫呋喃）中在甲醇鈉鹼存在下反應，轉化爲對 應之XIX化合物。 式XIX化合物係與氧化劑（如二絡酸ρ比淀）於氣化烴溶劑 (如二氣甲烷）中反應，轉化爲對應之式XX化合物〇 式XX化合物係與1 -(三甲基碎坑基）咪峻於氣化烴溶劑 (如二氣甲烷）中反應，轉化爲對應之式XXI化合物。 式XXI化合物係與[3S-(1Z,3 a，5y5 )]-[2-[3,5-雙[[(1，1_二 甲基乙基）-二曱基矽烷基]氧基]-2 -亞甲基亞環己基]乙基] 二苯膦氧化物於醚溶劑（如四氫呋喃）中在鹼（如正丁基鋰） 存在下反應，轉化爲對應之式1爲羥基及X爲=CH2之 -15- 本紙張尺度適用中國國家操準（CNS > A4規格（2丨Ο X 297公釐） ----------¾------1T------^ ' (請先閔讀背面之注意事項再填^冬頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 44b2o ^ A7 ____B7 五、發明説明（13 ) 化合物。 或者，式 XXI化合物係與[3R-(3 a，5 /5，Z)]-3,5-雙[[(1，1· 二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二苯膦氧 化物於醚溶劑（如四氫呋喃）中在鹼（如正丁基鋰）存在下反 .應，轉化爲對應之式Ic中R爲羥基及X爲氫之化合物。 或者’式XXI化合物係與[5S，Z]-2-[2-[2-亞甲基-5-[[(l,l- 二甲基乙基）一甲基5夕娱•基]乳基]亞環己基]乙基]二苯膦氧 化物於醚類溶劑（如四氫呋喃）中在鹼（如正丁基鋰）存在下 反應，轉化爲對應之式I c中R爲氫之化合物。 或者，式XXI化合物係與[3 S-(3 α，5 ，Z)]-2-[2-[2-亞曱 基-3-氟-5-[[(l，l-二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基】 乙基]二苯膦氧化物於醚類溶劑（如四氫呋喃）中在鹼（如正 丁基鋰）存在下反應，轉化爲對應之式1C中R爲氟之化合-物。 如圖V中所述，式XII化合物以Lindlar催化劑在》套《•林存在 下於溶劑之混合物（如醋酸乙酯、己烷及乙醇之组合）中氣 化，轉化爲對應之式XXII化合物。 式XXII化合物係與氧化劑（如二鉻酸吡錠）於氣化烴溶劑 (如二氯甲烷）中反應，轉化爲對應之式ΧΧΙΠ化合物。 式XXIII化合物係與1 -(三甲基矽烷基）咪唑氣化烴溶劑 (如二氣甲烷）中反應，轉化爲對應之式XXIV化合物。 式 XXIV化合物係與[3 S-(1Z，3 e，5/? 甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-2-亞甲基亞環己基]乙基] 二苯膦氧化物於醚溶劑（如四氫呋喃）中在鹼（如正丁基赶） -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2!0X297公釐） ----------扣衣------ΐτ------0 <請先Μ-讀背面之注意事項再填_尽頁) 445252 經濟部中央標準局貞工消费合作社印裳 A7 B7 五、發明説明（14 ) 存在下反應，轉化爲對應之式Id中R爲羥基及X爲(：112之化 合物。 或者，式XXIV化合物係與[3R-(3 α，5 θ，Z)]-3,5-雙 [[(1,1-二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二 苯膦氧化物於如四氫吱喃中在鹼（如正丁基鋰）存在下反 應，轉化爲對應之式I d中R爲羥基及X爲氫之化合物。 或者’式XXIV化合物係與[5S，Z]-2-[2-[2-亞甲基-5-[[(l,l-二曱基乙基）二曱基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二苯膦氧 .化物於醚類溶劑（如四氫呋喃）中在檢（如正丁基鋰）存在下 反應’轉化爲對應之式Id中R爲氫之化合物。 或者，式XXIV化合物係與[3S-(3or,5/?，Z)]-2-[2-[2jT 基-3-氟-5-[[(1，卜二曱基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基] 乙基]二苯膦氧化物於醚類溶劑（如四氫咬喃）中在驗（如正 丁基鐘）存在下反應，轉化爲對應之式Id中R爲氟之化合 物。 式I化合物可經口施用，例如呈錠，包衣錠，糖衣丸 (dragees)，硬及軟明膠膠囊’溶液，乳液，或懸浮液之形 式。然而，亦可經直腸施用，例如呈栓劑之形式；或非經 腸施用’例如呈注射溶液之形式。 依據本發明之組合物可以醫藥惰性無機或有機賦形劑處 理以製造錠，包衣錠，糖衣丸，硬明膠膠囊。乳糖，玉米 澱粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其鹽等可用作例如錠， 糖衣丸，及硬明膠膠囊之賦形劑。軟明膠膠囊之適合賦形 劑爲例如植物油，蠟，脂肪，半固體及液體多元醇等；依 本紙張am财目 ----^ — (請先59*讀背面之注項再填.本頁) 丁 -s , I m· - _ 經濟部中央橾準局員工消費合作社印裝 4452 υ ^ Α7 ----------Β7 五、發明説明（15 ) 活性成份之本質而定。然而，软明膠膠囊一般無需賦形 劑。製備溶液及糖漿之適合賦形劑爲例如水，多元醇，蔗 糖，轉化糖，葡萄糖，等。 、 '/王射溶液之適合賦形劑爲例如水，酵，多元醇，甘油， 植物油，等。 栓劑之適合賦形劑爲例如天然或硬化油，蠟，脂肪，丰 固體及液體多元醇，等。 另外，醫藥製劑可含有防腐劑，溶解劑，安定劑，濕澗 剎，乳化劑，甜化劑，著色劑，調味劑，改變滲透壓之 鹽，緩衝液，遮蓋劑，或抗氧化劑。 上述式I化合物可口服或注射施用於需要治療之溫血動 物’以治療贊生性疾病，如白血$。上述式Ζ化合物特別可 口服把用於成人炙劑量在每天約〇 25至5〇微克範圍内，以 治療贅生性疾病’如白血病或乳癌。 上述式I化合物可口服施用於需要治療之溫血動物，以治 療過度增生之皮膚病，如牛皮癬，基細胞癌，角質化疾 病及角化病。上述式1化合物特別可口服施用於成人之劑 量在每天約0.25至50微克範圍内’以治療過度增生之皮膚 病，如牛皮癬，基細胞癌，角質化疾病，及角化病。這些 化合物可口服施用於人之劑量在每天約〇 25至5〇微克範圍 内，較佳爲每天0.5至5微克範圍内，以治療痤瘡。 上述式I化合物可局部施用於需要治療之溫血動物，以治 療過度增生之皮膚病’如牛皮癬，基細胞癌，角質化疾 病，及角化病。上述式！化合物特別可局部施用之劍量在每 ______ -18- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α视fg· ( 210X297公f' 抑衣 1 、1TJ-----0 遽 * (諳先閎讀背面之注意事項再填，本頁} 4 45252 A7 B7 五、發明説明（16 ) 天每克局部調配物約〇.5至約1〇〇微克範圍内，以治療過度 增生之皮膚病，如牛皮癬，基細胞癌，角質化疾病，及角 化病。 上述式I化合物亦可局部施用以治療皮脂腺疾病，如痤瘡 -或皮脂漏皮膚炎。 式I化合物用作治療贅生性疾病藥劑之有用活性可以下列 試驗程序證明。 HL-60細胞分化 HL-60細胞分化乏引發係經由硝基藍四唑（NBT)之還原測 量細胞之氧化突發潛力（burst potentiai)而分析。 經濟部中央榇準局員工消費合作衽印製 HL-60細胞維持在RPMi 164〇培養基補充1〇c/。胎牛血清 (FCS) ’ 2mM L-麩醯胺，imM丙酮酸鋼，1 %非必要胺基 酸’ 50 U/毫升青黴素’及50微克/毫升鏈黴素（rpmucs) 中。HL-60細胞（30,000個細胞/90微升RPMI/補充之培養基） 接種於平底微滴定井中。在接種後，於補充1?^%1培養基中 稀釋之10微升試驗化合物同時加入各井中，獲得最終濃度 在1〇-1〗至10·6Μ之間（由儲備溶液i〇-2m於乙醇中貯存在-2 0 °C並保護免於光線開始）。在3天後，培養基以多道吸管 由各井中移除，以100微升NBT溶液（1毫克/毫升於磷酸鹽 緩衝食鹽水（PBS)及200nM佛波醇（ph〇rbol)肉豆蔻酸醋酸乙 酯（PMA)中）替代。在3 7。(：培養1小時後，NBT溶液移除， 100微升10%十二基硫酸鈉（SDS)於0.01NHC1中加入。還原 NBT之量係以光度計在540nm使用自動板讀取機定量。計 算3井之平均。s.E.M.係在5至10%之間。該値係以100- 二 _____________ 19 -_ 本紙張尺度it财ϋ时料（CNS) A4^ (21()><297公楚） 445252 經濟部中央榡準局貝工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（17 ) ΙΟΟΟηΜ鈣三醇（calcitriol)於相同實驗中所獲得之最大分化 之百分比表示。產生此最大値50%之濃度（nM)係以圖形決 定，以ED50示於表I中。

AL 化合物 ED5〇(nM) 1,25-二羥基-膽鈣化固醇 6.0 1,25-二羥基-16-烯-23-炔-26,27-六氫-20-表-膽鈣 化固醇 2.0 1，25-二羥基-16,23£-二烯-26,27-六氫-20-表-膽鈣 化固醇 0.37 1，25-二羥基-16,23Ζ-二烯-26,27-六氫-20-表-膽鈣 化固醇 2.3 I,25-二羥基-16-烯-23-炔-20-表-膽鈣化固醇 15.0 1,2 5-二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化固醇 2.5 1 以氟-25•喪基·16,23Ζ·二缔-26,27-六氬-20-表· 贍鈣化固醇 20.0 1,25-二羥基-16,23Ζ-二烯-26,27-六氫-20-表-19- 去甲·膽鈣化固醇 4.5 於T47-D及MCF-7乳癌細胞中抗增殖活性 這些實驗中所用之二種細胞株及其生長要件示於下列： 1 . T47-D乳癌細胞生長於RPMI 1640培養基補充1〇微克/毫 升牛胰島素及10%胎牛血清。 _ -20- 本紙張適用中國國家標準（CNS ) A4iUM 210Χ：297公董） -----------^— {請先以讀背面一之注意事項再埴本頁) -訂. -線 445 Α7 Β7 五、發明説明（ 18 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 2 · MCF-7乳癌細胞生長於MEM (Eagles)補充非必要胺基 酸’ ImM丙酮酸鈉，1 〇微克/毫升牛胰島素及1 〇%胎牛血清。 細胞生長於適合培養基中至晚對數期（約80%融合）。然 後T47-E)及MCF-7細胞以胰蛋白酶處理，分別以4000或2000 個細胞/井接種。在接種後2 4小時，乙醇溶解藥物之一系 列稀釋於相同培養基中製備，以最終濃度1,0〇0至O.i nM及 0.1 %乙醇加入三组井中。在藥物加入後3至7天，50微升之 5毫克/毫升MTT溶液（溴化3 - (4，5 -二曱基嘍唑-2 -基）-2，5 -二苯基四唑於磷酸鹽緩衝之食鹽水中）加入各井中，在37»c 繼續培養2_5小時。然後各板短暫旋轉，在80〇 xg離心5分 鐘’培養基由各井吸出，50微升乙醇/井加入以溶解在 MTT培養期間所形成之甲腊（f0;rniazan)。在搖動1 5分鐘 後，於自動板讀取機中在570及660 nm測定各井之光學密 度。細胞生長之抑制百分比係由比較試驗化合物處理之細 胞之光學密度與僅以0.1%乙醇處理之細胞之光學密度而計 算。1C 5。値係基於 Reed and Muench式決定（Reed，L. J and H. Muench, A simple method of estimating fifty percent endpoint. Am. J. Hyg. 27 : 493-497 (1938))，結果示於下表 II中。 裝------1Τ------線 <請先閲讀背面之注意事項再填：本頁) -21 - 4452υ„ Α7 ______________Β7 五、發明説明（19 )

表II 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 化合物 T47-D MCF-7 1;25-二羥基-膽鈣化图β聿 81.0 149 1,25-二羥基-16-烯-23-炔-26,27-六氟 -20-表·膽鈣化固醇 6.7 0.95 1，25-二羥基-16,23Ε-二烯 _26,27_六 翁,-2〇·表-膽鈣化固醇 10.0 ND 1 没-氟-25·羥基-16、烯-23·块-26,27-六氟-20-表·膽雀弓化固醇 11 1 π -氟-25-羥基-16,23Ε-二烯-26,27- 六氣-20-表-膽鈣化固醇 -------- · 9 1，25-二羥基-16-烯-23-炔 _26,27-雙高 -20-表-膽鈣化固醇 11 1，25-二羥基-16-烯-23·炔-26,27-雙高 • 19-去甲-20-表-膽舞化固醇 12 !找-氟-25-二羥基-16,23Ε-決-26,27-譬高-20-表-膽鈣化固醇 30 式I化合物用作治療過度增生皮膚病之藥劑之有用活性可 以下列證明。 角質化細胞增殖之抑制 HaCaT細胞株使用不死之人類細胞株HaCeT。在試驗化 合物存在下培養6天後，測量指數生長之培養物中所併~

---i . 裝 ^ J3 I n 線 - (請先聞讀背面之注意事項再填，Γ不頁〕 本紙張尺度適用中國囷家標率（CNS ) A4说格（2iOX297公嫠） 經濟部中央橾準局員工消费合作社印製 ___B7 五、發明説明（2〇 ) 之3Η·胸苷。 細胞培養- HaCaT細胞培養於Dulbecco改良之Eagle培養基 (DMEM)及營養混合物Ham's F12(F12)，3 : 1(體積/體積， ICN)，含有4.5克/升葡萄糖，及補充10%胎牛血清（Gibco， FCS)，L-麩醯胺（Gibco，2mM)，青黴素（Gibco，50 UI/毫 升）.，鏈黴素（Gibco，50微克/毫升），EGF(10毫微克/毫 升），氫皮質酮（400毫微克/毫升），霍亂毒素（8.5毫微克/毫 升），及胰島素（5毫微克/毫升）中。細胞維持在潮濕大氣含 '有5% C02及95%空氣中，每3-4天繼代培養。 3 Η -胸站吸收之抑制-HaCaT細胞（250個細胞於完全培養 基中）接種於9 6井培養斑中，在3 7 °C於5% C02及95%空氣 中培養6天。抑制劑以1 Ox濃度溶於1 %乙醇中，在分析開始 時立即加入。3Η·胸甘（5Ci/毫莫耳，Amersham)以1 μ Ci/井' 之濃度加入，細胞在生長期間之最後6小時經脈衝標示 (pulse-labeled)。然後細胞在3 7°C於劇烈攪動下以胰蛋白酶 處理1 0分鐘’使用Micro Mate 196細胞收集器（Packard)收 集在96井GF/C濾器板（Uni Filter, Packard)上。在40 °C於眞 空下乾燥20-30分鐘後，20微升Micro Scint 0閃躁劑 (Packard)加入’結合於濾器上之放射活性係在TOP COUNT (Packard)上計數。結果示於表III中。 _-23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )A4規格（ 210X297公釐） ---------^------IX------0 * · (請先聞讀背面之注意事項再填：本頁〕 44b Α7 Β7 五 '發明説明（21 ) 表III 化合物 EDso(nM) 1,2 5-二經基-膽鈣化固醇 4 --1 一 55.0 1,25-—輕基-16-晞-23-块-26,27-六氣-20-表-膽句 50.0 化固醇 1,25-二羥基-16,23E_ 二烯-26,27-六氟-20-表-膽鈣 0.7 化固醇 1,25-二羥基-16,232-二埽_26,27-六敦-20-表-膽鈣 ND 化固醇 1,25-二喪基-16-晞-23-炔-20-表-膽約化固醇 93.0 1,25 -二起基-16 -晞_20 -表-膽舞化固醇 4.0 ----^-- (請先M-讀背面之注意事項再填本頁)

*1T 經濟部中央標準局負工消費合作社印繁 式I化合物用作治療皮脂腺疾病之藥劑之有用活性可以下 列證明。 活體外人類皮脂細胞增殖之抑制 皮脂細胞係以酵素及機械.方法之组合（Doran et al.， Characterization of Human Sebaceous Cells In Vitro, J. Invest. Dermatol. 96:341-8 (1991))由成人皮脂腺分離。細胞 培養於Iscove培養基含有10%胎牛血清及4微克/毫升地塞米 松（dexamethasone)於一層生長停止之3T3鼠纖維母細胞上。 細胞於不含試驗化合物之培養基中平線培養，然後在最初 平碟培養後2 4 - 4 8小時給予試驗化合物於新鮮培養基中。 每4 8小時，培養物給予新鮮培養基，含有試驗化合物。在 -24- 本紙張A度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2I〇X297公釐） 445252 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 _______B7 五、發明説明（22 ) 收集時，培養物以0.03% EDTA(乙二胺四醋酸）於PBS(磷酸 鹽緩衝食鹽水）中沖洗，以僅移除3T3纖维母細胞，然後於 0.05%胰蛋白酶/0.03% ETDA中培養。細胞懸浮，劇烈混合 以製備單細胞懸浮液，於血球計中計數。 化合物之儲備溶液係於脱氣之！〇〇%乙醇中作成1〇-2Μ溶 液，貯存於-20°C黑暗中。在實驗使用期間，溶液等分， 升南至室溫，由直接於完全培養基中稀釋成適合濃度而使 用0 測試化合物於1 0 6 ’ 1 0·7 ’及1 〇·8Μ在活體外抑制皮脂 .細胞生長之增殖作用。結果以化合物抑制皮脂細胞增殖 50% (ED”）（與載劑處理之培養物比較）所需量（ηΜ)示於表 IV中。 表IV - 化合物 EDsnfnM) 1,25-二羥基-膽鈣化固醇 50 1,25-二致基-16-晞-23-块-26,27-六氣1-20-表_膽|弓 化固醇 <10 1，25-二羥基-16,23五-二烯-26,27-六氟-20-表_膽轉 化固醇 <10 1，25·二羥基-16,23Ζ-二烯-26,27-六氟-2〇-表_膽約 化固醇 ND 1，25-二起基-16-缔-23_块-20-表-膽雀弓化固酶 50 1,25-二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化固醇 ----- <1 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） ----------^------1Τ------.^ (請先»3*讀背^.之注^項再填：本頁) 544 A7 B7 五、發明説明（23 鼠體内鈣耐受性^^ {請先閱讀背面之注意事項再填本頁) 舒穩定性之顯著變化強烈影響鼠重量發展。 鼠（25-30克體重）每天經皮下施用化合物連續4天。在5 天處理期間之前及結束時，登記體重。「最高耐受劑量 (HTD)」爲在處理期間造成零增重之劑量。結果述於表v 中？

表V 化合物 HTD(微克/公斤） 1,25-二經基-膽飼化固酿 0.5 1’25-二經基-16-埽_23-炔-26,27-六氟-20-表- 膽鈣化固醇 6.0 1，25-二羥基_16,23£-二埽-26,27-六氟-20-表- 膽鈣化固醇 2.5 ' 1，25-二幾基-16,232-二烯-26,27-六氟-20-表- 膽鈣化固醇 2.5 1，25_—每基-16-晞_23_決_2〇_表-膽辟化固醇 100 1，25-二羥基-16-烯-20·表-膽鈣化固醇 30 1 α -氟-25-羥基-16,23Ζ-二烯-26,27-六氟-20- 表-膽鈣化固醇 8.0 1，25-二短基-16,23Ζ-二締-26,27-六氟-20-表- 19-去甲-膽鈣化固醇 3.0 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 當局部施用於皮膚時，式I化合物可逆轉光損傷有關之症 26- M氏張尺度適用中国國家揉準（CNS) Α4Μ ( 2丨0X297公董） 445 ά 經濟部中央標準局負工消费合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（24 ) 狀’以緩和及阻止暴露太陽所造成皮膚之損傷。暴露太陽 所造成之損傷包括過早老化，彈力组織變性，及敏紋β此 損傷在年老病人較顯著。由式I化合物以可逆轉光損傷有關 症狀之有效量局部施用於皮膚，可加速皮膚之修補，而使 皮膚有較平滑及較年輕之外表。式I化合物應施用於光損傷 所影響或欲治療皮膚之部份或區域。使用依據本發明之式工 化合物可提供抗老化及抗敏纹之效果，並增進太陽損傷皮 膚之修補。 式I化合物或式I化合物之組合物可依據本發明以習知局 部施用组合物之方式施用於人類皮膚。可利用這些组合物 施用式I化合物於身體之皮膚，特別是臉，腿，臂，及手。 式I化合物局部施用以產生最佳效果之較佳方法，於年齡在 3 0至5 5間之病人’應開始於彈力組織變性開始顯示且變得 較顯著時。然後，此组合物可連續施用於病人，以降低暴 露太陽有關之影響及傷害。一般較佳在病人之年齡達約3〇 時開始治療’繼續治療終生，以降低彈力组織變性之影響 及防止光損傷之進一步發展。 式I化合物可依據本發明以任一習知適合局部施用製劑 (即與局部施用有用之任一適合習知載劑，组合）施用。因 此，式I化合物可依據本發明以任一適合局部施用组合物如 乳霜’油膏，肥皂，溶液，洗劑，乳液，洗髮精等施用。 爲達最有效之結果，這些局部施用組合物一般含有组合物 重量之約0.00001%至約0.1%之式I化合物，以組合物重量之 约0.0001%至約0.01%特佳。若需要，可使用較高濃度，依 _ -27- 不紙淮尺度通用中國國家標準（CNS ) 格（210X297公釐） I-- (請先閲讀背面之注意事項再填.本頁) 訂 線 44b

£L 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 A7 B7 五、發明説明（25 ) 彈力组織變性之本質及程度而定。 在調配這些組合物中，可使用任何習知可安定式〗化合物 之皮膚學可接受之捭毒性基劑或載劑。用於本發明中之較 佳组合物爲習知之化粧組合物，其可含有化粧活性成份， 局部施用於人類皮膚以提供化粧效果。可用於此組合物中 之習知化粒活性成份包括遮陽劑，滲透增進劑，濕潤劑， 表面活性劑，潤滑劑，著色劑，調節劑，殺細菌劑，收歛 劑，清潔劑，等。若需要，本發明之局部施用组合物可含 .有適合遮陽劑。任何習知遮陽劑可用於調配含有式了化合物 之調配物，其可依據本發明使用。 這些含有式I化合物之局部施用組合物可含有一般用於製 備局部施用组合物之任何習知賦形劑及添加劑。可用於製 備依據本發明之化粒組合物中之習知賦形劑或添加劑爲除 腐劑，增稠劑，香水，等。此外，習知抗氧化劑如丁基化 羥基苯甲醚（BHA) ’軟脂酸抗壞血醯酯，五倍子酸丙酿， 檸檬酸，丁基化羥基曱苯（BHT)，乙氧喹（eth〇xyquin)，生 育驗等可併入這些組合物中。這些局部施用組合物可含有 一般用於這些組合物中供局部施用之習知可接受載劑。這 些组合物可含有增稠劑，濕潤劑，乳化劑，及枯度安定 劑，如一般所用者。此外’這些组合物可含有習知用於製 備化粧組合物之調味劑，著色劑，及香水。 含有式I化合物之局部施用组合物可施用於皮膚，較佳鹿 每天施於皮膚一次。爲逆轉彈力组織變性以使皮膚有較平 滑及較年輕之外表，局部施用組合物較佳應施用6個月。 1__ -28_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4规格（2丨0X297公嫠) ~ --- ----------夢------、1T------^ -# (請先聞讀背面之注意事項再填，..冬頁) 4452 A7 B7 經濟部中央標準局負工消費合作社印裝 五、發明説明（26 ) 然後，含有式I化合物之組合物應繼續施用以維持較年輕及 較平滑之皮膚。這些製劑可依據病人之需要施用，由醫生 決定。無論如何，此组合物局部施用於病人之特定方式依 年齡，重量，及皮膚狀況而定。 式I化合物逆轉暴露太陽皮膚之光損傷之有用活性可證明 如下\ 無毛鼠中UVB -引發之皮膚損傷以式I化合物修補 無毛氣（雌性，HRS/J品種，Jackson Labs，在實驗開始時 5 - 7星期大）置於黃色光線中，每星期以放在動物上約2 0公 分之一層 8 個西屋太陽燈（Westinghouse Sunlamps)(FS72T12 HO，尖峰照射在313 nm)照射三次。UVB輸出量係在 International Light Research Radiometer, IL 1700型上，使用 SEE240檢波器測量。以此裝置，燈輸出量爲約3.5毫瓦/平、 方公分，0.06焦耳/平方公分之暴露時間爲約1 7秒；1 MED 爲約0.03焦耳/平方公分。精確劑量係以IL 844A Phototherapy Exposure Control輸送。每天劑量爲 0.03 焦耳 / 平方公分歷二星期，0.06焦耳/平方公分歷二星期，然後 0.08焦耳/平方公分直到累積總劑量約4焦耳/平方公分爲 止。爲進行皮膚損傷之修補，UVB照射中止，動物分成約 8組，每星期以各種濃度維生素D類似物溶於乙醇中治療三 次。在黃色光線下進行所有劑量。包括僅以丙酮治療之對 照組。2公分之背部皮膚片係由照射（及治療）區域中心縱向 取得。彈力素（elastin)纖維以Luna搭品紅染色，藤原以Van Gieson染色。在此模式中，修補係以正常化眞皮（由表皮向 -29- ----------篆------1T------0 « - (請先閲讀背面之注意事項再填：冬頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） 4452 A7 B7 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 五、發明説明（27 ) ~--- 下延伸至壓縮彈力素層）之外表定義。修補之程度係以此區 域之寬度反映。在此研究中，因爲該區域之寬度有相當變 化，組織切片之標準長度上該區域之面積係以顯像分析測 量。化合物以三種劑量測試，計算大約之ed50。 結果示於表VI中。

表VI 化合物 劑量（微 修補區域（平方毫米） 對照組 0.0028±0.〇〇〇8 化合物A 0.1 〇.0282±〇.〇〇92*** 0.5 0.0102 土 0.0067* *P<0.(35, “PM.oi ’ ⑼1(相對於載劑對照組） 化合物A爲1,25-二羥基-16,23E-二缔-26J7-六氟-20-表二 膽約化固醇。 下列實例係用以進一步説明本發明，並非用以限制。 .實例1 在 H.06克（25 毫莫耳HIR-H a(s”，3aff 八氫-4-¾基-々7a_二甲基_ 1H，茚_丨乙醇於75毫升二氣 甲烷中在氬氣壓下以磁力攪拌之溶液内加入47毫升（338 克，331毫莫耳）醋酸酐，然後加入毫升吡啶及1〇克二 甲胺基吡啶。在3.5小時後，25毫升曱醇加入。在15分鐘 後，反應混合物倒入75 0毫升1 Μ靖酸中，4〇〇毫升二氣甲貌 加入。各相分離，水相以500毫升二氣甲烷萃取二次。有機 ____-30- 本紙張尺度適用申國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公;^ ---- I----------^-- •- (請先閏讀背面之注意事項再填，冬頁) -55 線 445 445 經濟部中央標準局貞工消资合作社印裝 A7 B7 五、發明説明（28 ) 相以250毫升水洗’然後以750毫升1 Μ碳酸氫鈉洗，在以 NajC»4乾燥’過遽及蒸發後，獲得H85克（定量產量） [1R-[1 a (S*)，3aa，4/?，7a/?]]-4-(乙醯氧基）_ 八氫· 万，7a -一曱基-1H -印乙醇醋酸醋，呈白色固體。 實例2 在 20.81 克（20.6毫莫耳，4卢，7a々]]-4-(乙醯氧基）-八氫- y?,7a -二甲基-1H·茚-1-乙醇醋酸酯於 200毫升甲醇中在氬氣壓下以磁力攪拌之溶液内加入8.18克 (77.2毫莫耳）碳酸鈉。懸浮液攪拌16小時，然後大部份甲 醇在減壓下於旋轉蒸發器上移除。濃縮物分配於3〇〇毫升水 及250毫升醚之間。水相以250毫升醚萃取3次，醚相以300 毫升水洗，以NaJO4乾燥，過濾，蒸發’獲得ι8 〇2克粗產 物。在中壓LC(Waters 500)上層析，以2 : 1己烷·醋酸乙醋、 溶離’獲得1_42克未水解之二醋酸酯，16 〇8克（9〇%產 率）[lR-[la(S*)，3aα，4/?，7a冷]]-4-(乙醯氧基）_八氫-y3,7a-二甲基-lH-節-l-乙醇，呈無色油。 實例3 二升之三頸燒瓶裝設有磁力攪拌器，溫度計，及滴液漏 斗’维持在氬氣壓下，裝入6.62毫升（75.8毫莫耳）草酿氣於 50毫升一乳甲規中。燒瓶於乾冰-丙酮浴中冷卻至; 然後10.7毫升（151毫莫耳）二甲亞砜於125毫升二氣甲烷中之 溶液於2 0分鐘内以迅速速率逐滴加入，溫度維持在6 2至 -63°C。在加入後，反應混合物再攪拌5分鐘；然後〇克 [1R-[1 e (S*)’3atar，4々]]-4-(乙醯氧基）_八氫_ -31 - 本紙依尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -------- I. 幕------ix------0 (請先k讀背面之注意事項再敁.本I) 6 4 4 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 A7 ______ B7 ___ 五、發明説明（29 ) 卢，7a-二曱基-1H-茚-1-乙醇於2〇〇毫升二氯甲烷中之溶液 (於4又分子篩上乾燥）於20分鐘内逐滴加入，溫度維持在 -6 5 °C。在加入期間，沉澱物形成。在-7 0 °C歷2 0分鐘後， 42.1毫升（302毫莫耳）三乙胺於75毫升無水二氣曱烷中之溶 液於1 5分鐘内加入。懸浮液攪拌4 5分鐘，冷卻浴移除，使 反應混合物達室溫（1.5小時）^大部份二氣甲烷在減壓下 (室溫浴）於旋轉蒸發器上移除，殘餘物以500毫升水及750 毫升醚平衡。水相以750毫升醚萃取3次，醚相以500毫升 水以逆流方式洗，在以Na2S04乾燥，過濾，及在減壓下蒸 發後，獲得15.3 6克粗產物。在沙膠上中饔層析，使用4 : 1 己烷-醚作爲溶離劑（在氮氣壓下收集溶離份），獲得14.95 克（94%產率）[1R-[1 a (S*),3aa，4 卢，7a/? ]]-4-(乙醯氧 基）.-八氫- £r，7a -二甲基- lH-tp-l -乙路，呈無色油。 ' 實例4 在2.0克（7.95毫莫耳）[1R-[1 a (S*)，3aa，4々，7a/5 ]]·4- (乙驢氧基）-八氫-α，7a -二甲基-1Η -印-1-乙越於ι〇毫升 醚中在氬氣壓下以磁力攪拌之溶液内加入100毫克10%鈀/ 炭。在2 0分鐘後，在周圍溫度，懸浮液過濾。濾液在減| 下蒸發。在殘餘物中加入1.40克（9.5毫莫耳）苯亞甲基丙酮 及200毫克1 〇%鈀/炭。懸浮液由燒瓶抽空及再裝入氬而脱 氣。然後燒瓶部份浸入230°C油浴中歷3 0分鐘。在冷卻 後，燒瓶之内容物在1〇〇克矽膠上急驟層析，以由Δ17Ε， △ ]7Ζ，Λ16及Λ20茚烯（彼等分別以65 H7 : 4之比例存 在）之平衡混合物移除極性苯亞甲基丙酮及其還原產物（苯 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----------^------IT------^ (請先K讀背面之注意事項再：本頁) 2〜 2〜 4 經濟部中央橾隼局貝工消費合作社印装 4 A7 ----------B7 五、發明説明（30 ) 甲基丙酮）。在硝酸銀浸潰之矽膠管柱上中壓層析（二次）而 由較低極性，△“及溶離次序）烯分離所欲產物 (△)。然後可以tic板純化，該板以硝酸銀於乙腈中之 1 〇%洛液噴灑並在使用前空氣乾燥。因此獲得總共976毫 克（55%產率）[3aR-(lE，3aa t4y3，7ap )卜卜亞乙基八氫·7a_ 甲基-1 Η -茚-4 -醇醋酸酯，呈無色油。 較極性烯之混合物（420毫克，24%產率）可方便由加入以 後醛片段反應中再平衡。 [3aS-[3(lR*，2R*S*，3a/?，7ac〇]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-3_ [2 -羥基-1-甲基- 4- (三甲基矽烷基）_3_ 丁炔基]·3a_甲基_ 1 Η -茚-7 -醇醋酸酯 火燄—乾燥之二升三頸燒瓶裝設有攪拌器，滴液漏斗，溫、 度計，及氬入口管，裝入22.3克（1〇〇毫莫耳）[3汉-(1£，33 a s4/5，7a;3 )]-1-亞乙基八氫-7a -甲基-1Η -茚-4-醇醋酸酯 及300毫升無水二氣甲烷。溶液以丙酮浴加入乾冰（若需要） 冷卻至-20 °C。此時，試劑増量加入。最初，200毫升（2〇〇 毫莫耳）1 Μ氣化二甲基鋁於己烷中於5分鐘内迅速逐滴加 入，1 0分鐘後，於1小時内緩慢逐滴加入55.5克（500毫莫 耳）3 -三甲基-矽烷基丙炔醛以無水二氣甲烷稀釋至260毫升 之5 0毫升溶液。試劑以此方式重複加入4次，使用1 〇〇毫升 (100毫莫耳）1Μ氣化二甲基鋁於己烷中迅速加入，然後3-三甲基-矽燒基丙块搭之5 0毫升溶液於1小時内缓慢加入。 在最後加入後，TLC(CH2C丨2-Et20，98 : 2)顯示無起始之 -33- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X2^7公釐） ----------^-------訂------.^ (請先k讀背面之注意事項再泣本頁) 4 r'·

A7 B7 五、發明说明（31 烯存在，反應混合物倒入2升20% Rochelle鹽溶液中，其中 加入約500克冰（最後溫度爲約20° )，並劇烈攪拌。混合物 由加入2 5毫升4 N藏氧化鈉作成驗性，1升醚加入。各相分 離，鲢相以500毫升鹽水洗。水相以逆流方式以1,5升鍵萃 取二次，在以Na2S〇4乾燥，過濾，及在減壓下蒸發後，獲 得7.8克油。在妙膠上中壓層析甚爲複雜，由副產物4 -三甲 基碎抗基-3-丁炔-2,醇分離產物不易。然後，利用4 -三甲 基碎燒基-3-丁炔-2 -醇之揮發性由層析溶離份移除。因 此，獲得25.54克較極性之純主要異構物，主要及次要異構 物之87 : 1 3混合物（以NMR測得）2.07克，及0.53克純次要 異構物。產物之總產率爲79%(主要異構物77%產率）。 主要異構物之分析樣品，[3aS-[3(lR*，2S*，3a,7 0 ,7a a )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-3-[2-羥基-1-甲基-4-(三甲基矽娱; 基）-3 -丁块基]-3a -甲基-1H -茚-7-醇醋酸酯，由醋酸乙酯 -己烧獲得，呈白色固體，溶點6 6 - 6 7 °C。 經濟部中央樣隼局負工消费合作社印家 (請先閲讀背面之注意事項再域：本頁) 次要異構物之分析樣品，[3aS-[3(lR*，2R*，3a/9 ,70 ,7a β )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-3-[2-羥基-1-甲基-4-(三甲基矽烷 基）-3-丁炔基]-3a-甲基-1H-茚-7-醇醋酸酯，獲得呈無色 油。 實例6 在 24.2 克（69 毫莫耳）[335-[3(1尺*，23*，3 3/5,7;5,73£〇]-3冱，4,5,6,7,7压-六氫-3-[2-經基_1_甲基-4-(三甲基矽虎基）-3-丁块基]-3a-甲基-1H-茚-7-醇醋酸酯於300毫升無水二 氣甲燒及23·3毫升無水吡啶中以磁力授拌之溶液内加入 -34- 本紙張尺度通用宁囡國家標準（CNS ) A4規格（2丨〇χ297公釐） A7 B7 32 五、發明説明（ 25.0克（145毫莫耳）氣硫羰基甲酸苯酯。產生黃琥珀色。反 應混合物攪拌3小時，然後1 0毫升甲醇加入。在丨5分鐘 後’反應混合物移入含有1升醚之分液漏斗中。醚相繼以 2x250毫升1M磷酸，500毫升水，及500毫升1M碳酸氫鈉 洗。水相以逆流方式以5〇〇毫升醚萃取。合併之醚相以

NaJO4乾燥，過濾，及在減壓下蒸發，獲得47克粗產物。 在500克矽膠上急驟層析，獲得33 4克（定量產率）硫羰基 酯- 在二升之三頸燒瓶裝設有攪拌器，滴液漏斗，溫度計， 及氯入口管中裝入33.4克（69毫莫耳）上述硫羰基碳酸酯於 500¾升甲苯中，於5分鐘内迅速逐滴加入135毫升（5〇〇毫莫 耳）氫化二正丁基錫，然後於丨5分鐘内加入276毫升（276毫 莫耳）二乙基硼烷。在13小時後，15毫升（56毫莫耳）氫化三-正丁基踢加入。在5 0分鐘後，反應混合物倒入500毫升丨〇% 碳酸氫鈉中’ 500毫升醚加入。水相以5〇〇毫升醚萃取二 次。醚相以逆流方式以250毫升水洗三次；在以Na2S〇4乾 燥’過濾’及在減壓下蒸發後’獲得粗產物，其在5〇〇克矽 膠上急驟層析。含產物之溶離份於二氣甲烷中之溶液以 10%碳酸鈉洗，以移除反應中所形成之酚。中壓層析需進 行數次，以移除副產物，獲得10 13克（7〇%)純[3aS_[(ls*，3a 点 ’7/?，7a e )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫 甲基-4-(三甲基矽 燒基）-3· 丁炔基]-3a -甲基-1H-茚-7-醇醋酸酯，呈無色 油。 tjH 7 -35- 本紙張尺度適用宁國國家標準（CNS) A4規格（210X297公楚） ----------------iT------^ • - (请先閲讀背面之注意事項再栌：本頁) 經濟部中央橾率局負工消費合作社印裝 經濟部中夬標率局員工消費合作社印製 .•*^44b . <C.、 A7 «_ B7 五、發明説明（33 ) [3aS-[(l(S*)，3a冷，7卢，7aa )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-3-[l-甲基 -3-丁炔基]-3 a-甲基-1H-茚-7-醇 在 5,01 克（15 毫莫耳）[3#-[(18*，33/?，7/5,7&£〇]_ 33,4,5,6,7,73-六氫-3-[1-甲基-4-(三甲基矽烷基）_3_丁炔 基]-3a -甲基-1H·茚-7-醇醋酸酯於50毫升乙醇中之容液 内加入:)0¾升（60毫莫耳）2NSL氧化納，在8〇。〇加熱4小 時。然後以500毫升水-鹽水（1 : 1 )稀釋，以醋酸乙酯徹底 萃取。合併之萃取物以水及鹽水洗’以硫酸鈉乾燥，蒸發 至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯（4 : 1)急驟層析純化，獲 得3.14克（95.4%)標題化合物。 實例8 [3aS-[l(S*)，3a々，了万，7ae )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫.-3-[l -甲基_ 3 -丁炔基]-3a -曱基_7_[(三甲基矽烷基）氧基卜iH-茚 、 在 3.14 克（14.4 毫莫耳）[3&8-[1(5*)，：^；5,7;5,73江]]-3冱，4,5,6,7,73-六氫-3-[1-甲基-3-丁块基]-33-甲基-11£-茚 -7·醇於30毫升無水二氣曱烷中之溶液内加入4.22毫升(28.8 毫莫耳）1-(三甲基矽烷基）咪唑，反應混合物在室溫攪拌1 小時。然後由加入碎冰淬火及攪拌1 5分鐘淬火。在水及鹽 水稀釋後’以己烷徹底萃取。合併之萃取物以水及鹽水 洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己院-二氣甲烷 (40 : 1)急騍層析純化，獲得3.55克(85%)標題化合物。 實例9 [l(S*)，3aR-(3ae，4 0，7a/? )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-1 - (1,5-二 甲基-5-羥基-3 -己炔基）_7a•曱基-4·[(三甲基矽烷基）氧 ___ -36-_ 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----------------ΐτ------^ (請先閲讀背面之注意事項再硪：本頁) 4 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印製 4 A7 _________B7 五、發明説明（34 ) 基]-3H-茚 在612 .毫克（2.10 33,4,5,6,7,73-六氫-3-[1_甲基-3-丁炔基]_33-甲基-7-[(三 甲基矽烷基）氧基]-1H -茚於15毫升無水醚中在-78。(：之溶 液内加入1.6毫升（2.52毫莫耳）1,6M正丁基鋰於己烷中之溶 液在氫氣壓下。在-7 8 °C攪拌1小時後，1 · 5毫升(2 1毫莫耳） 無水丙酮加入’繼續攪拌1小時β反應以水-鹽水（丨：）淬 火’以醋酸乙酷徹底萃取。合併之萃取物以水及鹽水洗， '以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。以己烷-醋酸乙酯（9 :丨）急驟 層析分離，獲得166毫克(27%)起始物質，產生521毫克(71%) 標題化合物。 實例1 0 [1(8*)，3&尺-(33£^，4 0，73点）卜3&，4,5,6,7,73-六氫-1-(1，5-二· 甲基-5-羥基-3-己炔基）-7a -曱基- 3H -茚-4-醇 在 521 毫克（1.50毫莫耳）[l(S*)，3aR-(3a a，4/? ,7a0 )]-3&，4,5,6,7,73-六氫-1-(1，5-二甲基-5-羥基-3-己炔基卜7狂· 甲基-4-[(三曱基矽烷基）氧基]-3H -茚於10毫升無水四氫 呋喃中之攪拌溶液内加入3毫升（3毫莫耳）1M氟化四丁基 銨。混合物在室溫攪拌1 ·5小時，然後以水及鹽水稀釋，以 醋酸乙酯徹底萃取。合併之萃取物以水及鹽水洗，以硫酸 鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物結晶。其中己烷中再結晶，獲 仔360毫克（87%)標題化合物，稼點Π 5-116°C (由己虎中）。 實例1 1 [1(8*)，3汪尺-(3&〇^，7&/?)]-3,3&，5,6,7,7压-六氩-1-(1，5-二甲基 i紙張尺ϋ用中國國家標辛（CNS) A4胁（21〇><297公4 ) ---------t-------ίτ------ii (請先閲讀背面之注意事項再填：本頁) 4 45 Α7 Β7 35 五、發明説明（ -5 -經基-3-己炔基）-7a -甲基- 4H -印-4-酮 在 240 毫克（0.868 毫莫耳）[1(3*)，3311-(33江，4/?，73/?)]-3丑，4,5,6,7,7心六氫-1-(1，5-二甲基-5-經基-3-己炔基）-73-甲基- 3H -茚-4-醇於7毫升無水二氣甲烷之溶液内加入980 毫克（2.6毫莫耳）二鉻酸吡啶。此混合物在室溫攪拌2小 時，.然後500毫克（1.33毫莫耳）二鉻酸毗啶加入，繼續攪拌 2.25小時。在加入3 0毫升醚及揽拌1 5分鐘後，混合物經 Celite過濾’ Celite墊以3 x5 0毫升醋酸乙酯洗。合併之濾液 以2 0毫升IN HC1，水’ 40毫升2N碳酸氫鉀，及水及鹽水 之1 : 1混合物洗a水層再以2 X100毫升醋酸乙酯萃取。合 併之有機層以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物之己烷-醋酸 乙酯2 : 1急驟層析純化，獲得214毫克(89%)標題化合物。 實例1 2 、 [l(S*)，3aR-(3aa，7a/9 )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-1 - (1 , 5 -二甲基 -5-、[(三甲基矽烷基）氧基]-3 -己炔基）-7a·甲基- 4H -茚-4- 鋼 在 214 毫克（0.78 毫莫耳）[l(S*),3aR-(3a a，7a 々小 3,3a，5,6,7,7a-ri 虱- l- (l，5-二甲基-5-經基-3-己炔基）-7a- 甲基-4H-茚-4-酮於7毫升無水二氣甲烷中之溶液内加入 750毫克（4.7毫莫开）1-(三甲基矽烷基）咪唑。混合物在室 溫於氬氣壓下攪拌17小時，然後以5毫升水淬火，攪拌2〇 分鐘。然後以3x100毫升醋酸乙醋萃取。萃取物合併，以 5 χ5 0毫升水及鹽水混合物洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。 粗產物以已娱•-醋酸乙醋（1 2 : 1)急驟層析純化，獲得2 5 5 ______-38- 本紙浪尺]Ϊ逋用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公i ' ----------參------1Τ------.^ ·j (請先閱讀背面之注意事項再填：本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 經濟部令央標準局貝工消費合作社印繁 A7 B7 五、發明説明（36 ) 毫克（94%)標題化合物。 實例1 3 1,25-二輕基-1 6 -烯-23 -決- 20 -表-膽鈣化固醇 在 730宅克（1.25¾ 莫耳）[3S-(1Z，3 α，5 点）]-[2-[3,5-雙 [[(1，卜二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-2-亞甲基亞環己 基].乙基]二苯膦氧化物（已知化合物）於7毫升無水四氫呋喃 中之揽拌溶液内在-78 C於氛氣壓下逐滴加入0.78毫升 (1.25毫莫耳）1·6Μ正丁基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘 後，於所獲得之紅色溶液中逐滴加入255毫克(0.736毫莫耳） [l(S*)，3aR-(3aa，7a/? )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-1-(1，5-二甲基 -5-[(三甲基砂貌基）氧墓]-3 -己块基）-7a-甲基-4Η -印- 4-酮於4.5毫升無水四氫呋喃中之溶液在1〇分鐘内，反應混合 物在-78 C授掉90分鐘。然後反應由加入2N Rochelle鹽及' 2N碳酸氫却之1 : 1混合物10毫升淬火，加熱至室溫。3〇 毫升Rochelle鹽/碳酸氫钟溶液再加入，反應混合物以 3 X1 〇〇毫升醋酸乙酯萃取。萃取物以鹽水洗三次，以硫酸 鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯4 0 : 1急驟層 析純化，獲得467毫克（89%)三矽烷基化中間物。在三矽烷 化中間物（467毫克）於4.5毫升無水四氫吃喃中之溶液内加入 7毫升（7毫莫耳）1 Μ氟化四丁基銨於四氫咬喃中，此混合 物在室溫於氬氣壓.下攪拌1 7小時。然後反應由加入5毫升 水及攪捍20分鐘淬火。然後四氫呋喃在眞空中移除，殘餘 物以水稀釋，以3 X100毫升醋酸乙酯萃取。萃取物以水及 鹽水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙 __: -39- 本紙張^度適用中国國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） ----------蔡------1T------線 ·- {請先閲讀背面之注意事項再填：本頁) 44b2 A7 B7 五、發明説明（ 37 經濟部中央桴準局貝工消費合作社印裝 酯1 : 5急驟層析純化，獲得25〇毫克（83%)結晶標題化合 物。其由1.5毫升四氫呋喃中加入7毫升甲酸甲酯再結晶； 熔點 148-149°C。 實例1 4 [l(S*),3aR-(3a〇r，4汐，7a/? )]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-1-(1，5-二 甲基-5-經基- 3Z -己缔基）_7a -甲基- 3H -菲'-4-Sf· 1.02 克（3.6 毫莫耳 HusqsaR-Pa α ,4 ，7a /? )l· 3a，4,5,6,7,7a-六氫l-(l}5-二曱基-5-羥基-3-己块基）-7a-曱基-3H -茚-4-醇，13.5毫升醋酸乙酯，34毫升己烷，I-3 毫升絕對乙醇，0.067毫升哇啉及225毫克Lindlar催化劑之 混合物在室溫氫化3.5小時。反應混合物經Celite墊過濾， 然後以醋酸乙酯洗。合併之濾液以IN HC1，水，2N碳酸氫 鉀’水’及鹽水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以' 製備性HPLC ’使用矽膠，以己烷-醋酸乙酯3 : 2純化。獲 得954毫克（92.6%)標題化合物。熔點88-90°C (由CH2C12-己烷中）。 實例1 5 [l(S*)，3aR-(3aa，4/?，7a/n]-3a,4,5,6,7,7a-六氫-i_(1,5-二 甲基-5-羥基-己基）-7a-甲基-3H-茚-4 -醇 在 601 毫克（2.16 毫莫耳）[l(S*)，3aR-(3a a，4/3)]_ 3 a，4,5,6,7,7a-六氫-1-(1,5 -二甲基-5 -輕基- 32 -己晞基）_ 7 a-甲基-3H-茚-4-醇於35毫升無水二氣曱烷中之溶液内 加入120毫克1，4-雙（二苯膦基）丁烷1，5-環辛二烯錢四氟爛 酸鹽及一滴汞，然後使用Paar裝置在室溫及5〇p_si壓力^ 40- 冬紙張Λ度遍用中國國家標準（CNS ) A4%格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填本育) 裝. ,ιτ 4452> A7 B7 輕濟部中夬標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（38 ) 匕1.25小時。TLC(己燒-醋酸乙酯，3 : 2)顯示反應完全。 反應混合物經Celite墊過濾，然後以醋酸乙酯洗。合併之濾 液蒸發至乾。以己烷-醋酸乙酯3 : 2急驟層析，及然後以 氣備性HPLC，使用砂膠管柱，以己垸·醋酸乙醋3 : 2，100 毫升/分鐘純化。獲得5 5 0毫克（91 %)結晶標題化合物。 . 實例1 6 [l(S*)，3aR-(3aa，7af )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-l-(i，5-二甲基 •5-羥基-己基）-7a-曱基-4Η -印-4-酮 在 270 毫克（0.963 毫莫耳）[1(3*)，3&尺-(3&“，4/5,73/?)]· 3a，4,5,6,7,7a-六氫-l-(lt5-二甲基-5-羥基-己基）-7a·甲基 -3H -茚-4-醇於7毫升無水二氣曱烷中之溶液内加入158克 (4.2毫莫耳）二鉻酸吡啶。反應混合物在室溫攪拌4 75小 時。然後以25毫升醚稀釋，再攪拌15分鐘，經Celite墊過、 濾。該|以3 x5 0毫升醚洗。合併之濾液以4 〇毫升2N碳酸 氫鉀及水-鹽水混合物洗。水層以2 x9 0毫升醋酸乙酯萃 取。合併之有機層以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己 烷-醋酸乙酯（2 : 1)急驟層析純化，獲得254毫克（9 5%)標 題化合物。 實例1 7 [1(8*)，3311(33(?，73/5)]-3,33,536,7,73-六氫-1-(1，5-二甲基 -5-[(三甲基矽烷基）氧基卜己基）-7a-甲基-4H-茚-4-酮 在 254 毫克（0.912 毫莫耳）[1(5*)，33尺-(3&“，73/?)]-3,3\5,6,7,73-六氫-1-(1，5-二曱基-5-羥基-己基）-73-甲基 -4H -茚-4-酮於6毫升無水二氯甲烷中之溶液内加入0.8毫 _ -41 - 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（2IOX：297公釐） ---------1------tr------it (請先閱讀背面之注意事項再嗔.本頁) b. # A f- A7 --------— B7 五、發明説明（） 39 7 (請先閲讀背面之注意事項再填广尽頁) 升（5,45毫莫耳）〗_ (三甲基矽烷基）咪唑。反應混合物在室 溫於氯下檀拌4.25,丨、時。然後由加入5亳升水及攪拌20分 鐘洋火’以3x90毫升醋酸乙酯萃取。萃取物以水及鹽水 洗’以硫酸納乾燥’蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯 (12 : 1)急驟層析純化，獲得308毫克（96%)標題化合物。 ' 實例1 8 1’25_二羥基-16-烯-20-表-膽鈣化固醇 在 8 50 毫克（1‘46 毫莫耳）[3S-(1Z，3 α，5 冷）]-[2-[3,5-雙 [[(1，1-二曱基乙基）二甲基矽烷基]氧基]_2•亞甲基亞環己 基]乙基]—表膦氧化物於9毫升無水四氫u夫喃中之授拌溶液 内在-78°C於氬氣壓下逐滴加入〇 9〗毫升（丨46毫莫耳η 6Μ 正丁基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，於所獲得之 紅色溶液中逐滴加入308毫克（0.878毫莫耳）[l(S*)，3aR-(3d a ,7a )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-1 - (1，5 -二甲基-5 -[(三甲基 經濟部中央樣準局員工消費合作社印褽 梦燒基）氧基]-己基）-7a-甲基- 4H -印-4-酮於4_5毫升無水 四氫呋喃中之溶液在1 0分鐘内，反應混合物在-7 8。〇授拌2 小時。然後由加入2N Rochelle鹽及2N破酸氫辦之1 : 1混 合物10毫升淬火’加熱至室溫》在加入30毫升R〇chelle./ 碳酸氫鉀後，混合物以3 X100毫升酷酸乙酯萃取^合併之 萃取物以鹽水洗，以疏酸納乾燥，蒸發至乾。殘餘物以己 烷-醋酸乙酯5 0 ·· 1急驟層析純化，獲得541毫克妙燒基化 中間物。 在此中間物於5毫升無水四氫吱喃中之滚液内加入5.5毫 升（5.5毫莫耳）1M氟化四丁基铵於四氫吱喃中，此落液在 __-42-__ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4*ϊ格（21〇'〆297公釐） ~ ' 4 4 A7 B7 40 五'發明説明（ (請先閲讀背面之注意事項再填f本頁) 室溫於氬下攪拌23小時。反應由加入5毫升水及攪拌20分 鐘淬火。在加入25毫升鹽水後，以3x100毫升醋酸乙酯萃 取。合併之萃取物以水及鹽水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至 乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯（1 : 9 )急騍層析及然後以醋 酸乙酯HPLC(矽膠管柱）純化，獲得296毫克（81%)結晶標題 化合物，熔點124-125°C(甲酸曱酯）。 實例1 9 [3aR-l(S*)，(3aa，4/5 ,7a々 ]]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基）-3 -己炔基]-4-[(三甲基矽烷基）氧基卜3H-茚 在100毫升心形燒瓶裝設一氣體入口管中放入1克（3.44毫 莫耳）[3aS-[l(S*)，3ay? ,7万，7aa ]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-3-Π- 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 甲基-3-丁炔基]-3a-曱基-7·[(三甲基矽烷基）氧基]-lH-、 茚於25毫升無水四氫呋喃中之溶液。在-78 °C冷卻後，3.2 毫升（5.16毫莫耳）1.6M正丁基鋰於己烷中之溶液於10分鐘 内逐滴加入，生成之混合物攪拌3 0分鐘。在加入10毫升無 水四氫呋喃後，六氟丙酮流冒泡通入混合物中1分鐘。在 攪拌1小時1 5分鐘後，TLC顯示反應完成約70%。此時，反 應由加入2 5毫升飽和鹽水淬火，然後加熱至室溫=»然後以 己烷萃取。合併之有機萃取物以鹽水洗，以硫酸鈉乾燥， 蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯（1 0 : 1 )急驟層析純 化。獲得270毫克（27%)起始物質及1.15克（73%)標題化合 物0 在第二實驗中，起始之乙炔1.38克(4.75毫莫耳）於20毫升 -43- 私紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八蝴私（210X297公董）

4 d.O 4 d.O 經濟部中央標準局負工消費合作社印裝 A7 B7 五、發明説明（41 ) 無水四氫呋喃中之溶液在_78。〇於氬氣壓下於10分鐘内逐 滴加入4.5毫升（7.2毫莫耳）1,6M正丁基鋰於己烷中之溶 液。在攪拌30分鐘後，六氟丙酮以緩慢速率冒泡通入2分 鐘’攪拌3 0分鐘，冒泡通入1分鐘，攪拌60分鐘，最後冒 泡通入3 0秒’攪拌3 〇分鐘。此時，TLC顯示反應完成。在 此實驗中，反應以2N Rochelle鹽淬火，以己烷-醋酸乙酯 (14 : 1)急驟層析純化。獲得1.97克（91%)標題化合物。 實例2 0 [3aR-[l(S*)，3aa，4点，7a/5 ]]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟曱基）-3-己炔基]-3H-茚-4-醇 在 1,17 克（2_56 毫莫耳）[3aR-[l(S*)，3a α，4 ,7a 点]]- 3,33,5,6,7,7&-六氫-7a-曱基-l-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基 -5-(三氟曱基）-3 -己炔基]-4-[(三曱基矽烷基）氧基]-3H-布於2 0毫升無水四氫咬喃中之溶液内加入7.12毫升（7.12毫 莫耳）1 Μ氣化四丁基按於四氫p夫喃中之溶液，於氛氣壓下 攪拌3.5小時。然後反應混合物以250毫升水-鹽水1 : 1混合 物稀釋，以醋酸乙酯徹底萃取。萃取物以水及鹽水洗，以 硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以急驟層析純化，獲得946 毫克（96%)標題化合物；在由己烷中再結晶後熔點75-76 X。 實例2 1 [l(S*)，3aR-(3a a，7a )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-1 - [6,6,6-三氟-5-經基-1-甲基-5-(三氟甲基）-3-己炔基]· -44 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公着) "" I ^------1------^ ** (請先閣讀背面之注意事項再填f'本頁) 經濟部令央棣準局員工消費合作社印裝 -45- 44525Ξ 五、發明説明（42 ) 4H -葬-4-嗣 在 248 毫克（0.74 毫莫耳）[3aR-[l(S*),3a α，4 ，7a 卢]]- 3,3阻，5,6,7,73-7^虱-73-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-經基-1-甲基 -5-(三氟甲基).-3 -己炔基]-3H-茚-4-醇於10毫升無水二氯 -甲烷中之溶液内逐份加入2.1 5克（5毫莫耳）二鉻酸吡啶，反 應混合物在室溫攪拌5小時。在加入50毫升醚及攪拌15分 鐘後，反應混合物經Celite墊過濾，然後以3 x5 0毫升醋酸 乙酯洗。合併之濾液以2N HC1，水，2 N碳酸氫鉀，水及鹽 +水洗’以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯 (3 ·· 1)急騍層析純化，獲得259毫克（91%)結晶標題化合 物。 實例2 2 1，25-二羥基-1 6-烯-23-炔-26,27-六氟-20-表-膽鈣化因醇' 在 987 毫克（1.69 毫莫耳）[3S-(1Z，3 λ，5 /3 )]-[2-[3,5-雙 [[(1,1-二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-2-亞曱基亞環己 基]乙基]二苯膦氧化物於10毫升無水四氫呋喃中之攪拌溶 液内在-78 °C於氬氣壓下逐滴加入〇5毫升（1.69毫莫 耳）1·6Μ正丁基鋰於己烷中之溶液。在攪拌15分鐘後，於 所獲得之紅色溶液中逐滴加入259毫克（0.677毫莫耳） [l(S*)，3aR-(3a a，7a y? )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-Ι-ΐ^,ό,ό-三氟-5-藉基-1- 曱基-5-(三 氟甲基）-3- 己炔基]-4 Η -茚-4 -酮於5毫升無水四氫呋喃中之溶液，所獲得之反 應混合物在-7 8 °C攪拌1小時《然後反應由加入2Ν Rochelle 鹽容液淬火’加熱至室溫。在加入飽和鹽水後，以醋酸乙 _張尺度適财關家梯準*7^·^祕（2獻297公^· ----------^------tr------^ Λ (請先閱讀背面之注意事項再填，本頁) A7 B7 經濟部中央標準局舅工消費合作社印製 五、發明説明 酯徹底萃取。合併之萃取物以水及鹽水洗’以硫酸納乾 燥，蒸發至乾。殘餘物以己烷-醋酸乙酯（9 : 1)急骤層析 純化’獲得3 7 〇毫克二石夕烷基醚中間物。 在此中間物（370毫克）於丨0毫升無水四氫呔喃中之溶液内加 入3毫升（3毫^耳）1M氟化四丁基銨於四氫呋喃中，所獲 得之反應混合物在室溫攪拌過夜》然後以水及鹽水稀釋’ 以4x50毫升醋酸乙酯徹底萃取。合併之萃取物以水及鹽水 洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。卸產物以己烷-醋酸乙酯 + (1 : 4)急驟;忿it，獲得249毫克（71%)標題化合物，呈 泡泳。 實例2 3 [3aR-[l(S*)，3aa ,4/3，7ay3 ]]-3a，4,5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基）-3£-己烯 基]-3 Η -莽-4 -醇 165毫克(4.34毫莫耳）氫化鋁鋰於15毫升無水四氫呋喃中 在氬下之攪拌懸浮液於冰浴中冷卻，在其中先加入235毫克 (4.34毫莫耳）固體甲醇鈉，然後逐滴加入溶於1 0毫升無水 四氫呋喃中之334毫克（0,87毫莫耳）[3aR-l(S*),(3aa，4；3 ,7a /3 )]-33,4,5,6,7,73-六氫-73-曱基-1-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-曱基- 5- (三氟曱基）-3 -己決基]-3H -印-4 -醇。所獲得之反 應混合物在回流（8 0 °C )下加熱2.5小時，此時TLC顯示反應 完全。混合物於冰浴中冷卻’然後小心以1毫升水及1毫升 2N氫氧化鈉淬火。在加入2〇毫升醚後’攪拌0.5小時，2.2 克硫酸鎂加入，攪拌小時’過濾，蒸發至乾。獲得335 -46 - ^1T------^ (請先閲讀背面之注意事項再^本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS 規格（2f〇X297公釐） A7 B7 五、發明説明（44 ) 毫克（100%)結晶標題化合物（TLC純）。 實例2 4 [l(S*)，3aR-(3a a，7a )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-1- [6,6,6-三氟-5-羥基·ΐ_甲基_5_(三氟甲基）·3Ε -己烯基]-4H·印-4-嗣 在 256 毫克（0.66 毫莫耳）[3aR-[l(S*)，3a π，4 々，7a /5 ]]- 3a，4,5,6,7,7a-六氫-7a -甲基-l-[6,6,6-三氟-5-輕基-1-甲基 -5-(三氟曱基）-3E -己烯基]-3H -茚-4-醇於10毫升無水二 氣甲烷中之溶液内逐份加入1.12克（3毫莫耳）二鉻酸吡啶， 反應混合物在室溫擾掉4小時。在加入25毫升酿及授掉15 分鐘後，反應混合物經Celite墊過濾，然後以3 x2 0毫升醋 酸乙酯洗。合併之濾液之2 N碳酸氫鉀，水及鹽水洗，以硫 酸鈉乾燥’蒸發至乾。粗產物以二氣甲烷-醋酸乙酯（9 : 1) 急驟層析純化’獲得230毫克（90%)結晶標題化合物。 實例2 5 [l(S*)，3aR-(3a a，7a；5 )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-曱基l· 經濟部中央標準局貞工消費合作社印袋 [6,6,6-三氟-5-(三甲基矽烷基）-氧基-レ曱基-5-(三氟曱 基）-3E-己烯基]-4H-茚-4-酮 在 268 毫克（0.697 毫莫耳）[(1卩*)，3&11-(3&^，73点）]-3,3〇,6,7,73-六氫-73-曱基-1-[6,6,6-三象-5-經基-1-甲基 -5-(三氟甲基）-3E -己稀基]-4H -印-4-嗣於8毫升無水二氣 甲烷中在室溫之攪拌溶液内加入0.92毫升（6.27毫莫耳）i_ (三曱基矽烷基）咪唑，反應混合物在室溫攪拌過夜。然後 反應混合物以水稀釋，以己烷徹底萃取。合併之萃.取物以 -47- 本紙張適用中國國家棣準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 445 2 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 五、發明説明（奶） 水及鹽水洗至中性，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以 己烷-醋酸乙酯（9 : n急驟層析純化，獲得31〇毫克（97%) 標題化合物。 實例2 6 1，25-二羥基-16,23E-二烯·26,27•六氟_2〇_表-膽鈣化固醇 在 725 笑；克（1.24¾ 莫耳）[3S-(1Z,3 α，5 /3 )]_[2-[3,5-雙 [[(1,1-二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-2_亞甲基亞環己 基]乙基]一革·麟氧化物於15¾升無水四氫ρ夫喃中之授掉溶 液内在- 78°C於氬氣壓下逐滴加入〇 78毫升（〗24毫莫 耳）1.6M正丁基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，於所 獲得之紅色溶液中逐滴加入3〇7毫克（0.672毫莫耳） [l(S*)，3aR-(3a or，7a 点）]3,3压，5,6,7>73-六氫-73-甲基-1_ [6，6,6-二氟- 5- (二甲基石夕燒基）氧基-1-曱基巧_(三氟甲、 基）-3E -己烯基]-4H -茚-4-酮於9毫升無水四氫呋喃中之 ί谷液。反應混合物在-7 8 C撥掉2.5小時，然後以水泮火， 加熱至室溫。在以水稀釋後，以3 χ3 0毫升醋酸乙酯萃取。 合併之萃取物以水及鹽水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。 所獲得之二矽烷基醚中間物以已烷-醋酸乙酯（9 : 1 )急驟 層析純化，獲得449毫克純中間物（25-矽烷氧基在反應期 間水解）。 在此中間物（449毫克）於10毫升無水四氫吱喃中之溶液内 加入3.6毫升（3.6毫莫耳）1Μ氟化四丁基按於四氫呋喃中， 所獲得之反應混合物在室溫授掉過夜β然後以冰淬火，挽 拌1 5分鐘，以水及鹽水稀釋，以醋酸乙酯萃取。合併之萃 —_ _______-48- 本紙張尺度適用中國國家標準{ CNS ) Α4& ( 210 X 297公釐） --— 裂 訂 線 武 A (請先閱讀背面之注項再填V,冬頁} 445 i 經濟部中央樣準局員工消費合作社印裂 五 kl B7 發明説明（46 取物以水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷·醋 酸乙醋（1 : 2 )急驟層析純化，獲得標题化合物，呈白色泡 沫，291 毫克（83%)。 實例2 7 [3aR-[l(S*)，3a«，4/?，7aW ]]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基- 1 - [,6,6,6-三氟-5-羥基-甲基_5_(三氟甲基卜3Z_己烯 基]-3 H-茚-4-醇 1.62 克（4.21 毫莫耳）[3aR-[1(S*)，3aa，4/?,7a/?]]_ 3,33,5,6,7,7&-六氫-73-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基 -5-(三氟曱基）-3 -己炔基]-3H -茚-4-醇，16毫升醋酸乙 酯，40毫升己烷，1,6毫升絕對乙醇，0.080毫升哇啉及320 毫克Lindlar催化劑之混合物在室溫於氫氣壓下攪拌7 0分 鐘。然後經Celite過濾：濾餅以3 0毫升醋酸乙酯洗 <'濾 液以2 5毫升IN HC1洗，及以水及鹽水之混合物洗四次。水 層以2x90毫升醋酸乙酯萃取。合併之有機層以硫酸鈉乾 燥，蒸發至乾。粗產物以HPLC在矽膠管柱上以己烷-醋酸 乙酯（3 : 1)流率1〇〇毫升/分鐘純化，獲得1.51克（93%)標題 化合物，呈白色固體。 實例2 8 [l(S*)，3aR-(3a a，7ay5 )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫- 7a-曱基·卜 [6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基-5-(三氟甲基）-32-己烯基]- 4H-^p-4-SR 在 750 毫克（1.94 毫莫耳）[3aR-[l(S*)，3a α，4 々，7a 々]- 3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a -甲基-bt6,6,6-三氟·5_羥基-1·甲基 請 先 閱 讀 背 面 之 注 意 事 項 再 i 裝 訂 線 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X 297公釐） A7 _______B7 _____ 五、發明说明Q7 ) -5-(三氟曱基）-3Z -己烯基]·3Η -莽-4-醇於14毫升二氣甲 烷中之溶液内逐份加入3.64克（9.68毫莫斗）二鉻酸毗峻’反 應混合物在室溫攪拌5小時。然後在反應混合物中加入3 0 毫升醚，撥拌15分鐘，經Celite整過遽，此整以3x5〇笔升 醚洗。合併之i液以2N碳酸氫鉀（5 0毫升）洗’以水及鹽水 1 :,1洗三次。水層以2x100毫升醋酸乙酯萃取。合併之有 機層以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙醋急 驟層析純化，獲得720毫克（96.5%)標題化合物’呈白色固 體。. . 實例2 9 [l(S*)，3aR-(3a a，7a /3 )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫- 7a-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-三曱基矽烷基氧基-1-甲基-5-(三氟甲基）-3Z-己烯基]-4H-茚-4-酮 、 經濟部中央標準局MB；工消費合作社印裝 裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填广.冬頁) 線· 在 720 毫克（1.87 毫莫耳）[l(S*)，3aR-(3a a，7a ;?)]-3,3a,5,6,7,7a-六氫-7a-曱基-l-[6,6,6-三氟-5-羥基-1-甲基 -5 -三氟甲基- 3Z -己烯基]-4H -茚-4-酮於13毫升無水二氣 甲烷中在室溫之攪拌溶液内加入1.86毫升（12.68毫莫耳）1-三甲基矽烷基-咪唑，反應混合物在氬下攪拌17小時。然 後反應混合物以7毫升水淬火，攪拌1 5分鐘’ 2 0毫升鹽水 加入，以3 X100毫升醋酸乙酯萃取。合併之萃取物以水及 鹽水洗五次，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷·醋 酸乙酯（9 : 1)急驟層析純化，獲得825毫克（96.5%)不定形 標題化合物。 實例3 0 ______ -50- 本紙張尺度朝巾目®家縣 (CNS ) A4雜（2數297公嫠） d45252 A7 B7 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 五、發明説明（48 ) 1，25-二羥基-16,23Z -二烯- 26,27-六氟- 20 -表-膽鈣化固醇 在 555 毫克（0.952毫莫耳）[3S-(1Z，3 α，5 々）]-[2·[3,5-雙 [[(1,1-二曱基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-2-亞曱基亞環己 基]乙基]二苯膦氧化物於6毫升無水四氫呋喃中之攪拌溶液 内在-78 °C於氬氣壓下逐滴加入〇,595毫升（〇.952毫莫 耳）.1·6Μ正丁基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，於所 獲得之紅色溶液中逐滴加入270毫克（0.591毫莫耳） [l(S*)，3aR-(3a or，7a)]-3,3a，5,6,7,7a-六氫甲基-1-[6,6,6-三氟-5-三曱基矽烷基氧基-1-甲基-5-三氟曱基_ 3Ζ -己締基]-4Η-辟-4-嗣於4毫升無水四氫吱喃中之溶液 於1 0分鐘内。反應混合物在-7 8 C揽拌1.75小時，然後由 加入1 0毫升2Ν Rochelle鹽淬火，加熱至室溫。然後以3 〇毫 升2N Rochelle鹽稀釋，以3 xlOO毫升醋酸乙酯萃取。合併 之萃取物以鹽水洗三次，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗石夕 烷基化中間物以己烷-醋酸乙酯（10 : 1)急驟層析純化，獲 得355毫克純中間物。 在此中間物於4毫升無水四氫呋喃中之溶液内在氬下加入 3_8毫升（3.8毫莫耳）1M氟化四丁基錄於四氫吱喃中，反應 混合物在室溫攪拌19小時。然後反應以5毫升水淬火，攪 拌15分鐘。在以20毫升鹽水稀釋後，以3x90毫升醋酸乙 醋萃取。合併之萃取物以水及鹽水之混合物洗四次，以硫 酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯（丨：3 )急 驟層析純化，獲得237毫克（77%)結晶標題化合物；熔點〖20-I22°C (由四氫呋喃-甲酸甲酯中再結晶）。 __ -51 - Ϊ紙張尺度適财HD家縣（CNS ) A4^ ( 2獻297公疫） L 夢------ΐτ------^ t - 1 (请先閱讀背面之注意事項存填Γ本頁) 4452 5 五、發明説明（) Α7 Β7

— - -I I 經濟部中央標率局員工消費合作社印繁 實例3 1 1，25_ 二趨基 _16,23Z_ 二晞_26,27_六氟-2〇_表_19_去甲-膽 鈣化固醇 7〇〇 毫克（1.23 毫莫耳）[3R-(3«，5/?，乙）-3,5-雙[[(1，1_二 甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二笨膦氧化 物於7毫升無水四氫呋喃中之溶液在乾冰浴中冷卻至_78 C 以〇,77愛升（1.23¾莫耳）l‘6M正丁基鐘於己燒中之溶 液處理’於氬氣壓下攪拌5分鐘。在其中於1〇分鐘内逐滴 加入 277 毫克（0-607 毫莫耳）[i(s*)，3aR-(3a a ,7a /3 )]-3,33,5,6,7,73-六氫-7&-甲基-1-[6,6,6-三氟-5_三甲基矽烷 基氧基-1-甲基_5_三氟甲基- 3Z -己烯基]-4H-茚-4-酮於4 毫升播水四氫吱喃中之溶液。所獲得之反應混合物在_ 7 8 C檀拌2小時。在加入1〇毫升2N Rochelle鹽後，加熱至室 溫。在以2 5毫升2N Rochelle鹽稀釋後，以水3 xlOO毫升醋 酸乙酯萃取。有機層以鹽水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至 乾。殘餘物在矽膠管柱上層析，以己烷-醋酸乙酯（1 0 : 1 ) 及然後以己烷-醋酸乙酯（1 : 3 )溶離，回收環A前驅物。獲 得329毫克環A二矽烷基化標題化合物。 在329毫克二矽烷基化標題化合物於2.5毫升無水四氫呋喃 中之溶液内加入4.4毫升（4.4毫莫耳）1 Μ氟化四丁基銨於四 氫呋喃中，反應混合物在室溫攪拌65小時。然後以1〇毫升 水淬火，攪拌1 5分鐘，2 0毫升鹽水加入’以3 χ9 0毫升醋 酸乙酯萃取。合併之有機層以水及鹽水洗’以硫酸鈉乾 燥，蒸發至乾。粗產物先以己烷-醋酸乙醋（1 : 8)急骤層 -52- 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） · 夢---- V - (請先閲讀背面之注意事項再填丨枣頁) 線 44525 Α7 Β7 五、發明説明（5丨 析’然後在矽膠管柱上以HPLC純化，獲得210毫克(68%)標 題化合物，呈白色泡沫。 實例3 2 1 α -敗-25-羥基-16,232_二烯·26,27·六氟_2〇_表-膽鈣化固 醇 ' 經濟部中央標準局t®;工消費合作社印装 在460毫克(0.977毫莫耳）[3S-(3 α，5/?，Ζ)]-2-[2-[2-亞甲基-3_5_[[( 1，1-二Τ基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基]乙 基]二苯膦.氧化物於6毫升無水四氫呋喃中之溶液内在_ 7 8 °c於氬氣壓下逐滴加入0 61毫升（0 976毫莫耳μ 6Μ正丁基 链於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，277毫克（0.607毫莫 耳）[l(S*)，3aR-(3aa，7a0 )]-3,3a，5,6,7,7a-六氫-7a-甲基-1-[6,6,6-三氟-5-(三甲基矽烷基）氧基-1-甲基-5_(三氟甲 基）-3Z -己晞基]_4Η·茚-4-酮於4毫升無水四氫呋喃中之 溶液於10分鐘内逐滴加入。然後反應混合物在_78〇c攪拌2 小時。然後以1 〇毫升2N Rochelle鹽淬火，加熱至室溫。在 以30毫升2N Rochelle鹽稀釋後，以3x100毫升醋酸乙醋萃 取。合併之有機層以鹽水洗，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾， 獲得630毫克粗中間物。其以己烷-醋酸乙酯（〗〇 :）急驟 層析純化，獲得220毫克二矽烷基化標題化合物。5_珍 烷基醚在此程序期間水解）。 在2 2 0毫克二硬燒基化中間物於4毫升無水四氫吱喃中之溶 液内加入2.5毫升（2.5毫莫耳）1 Μ氟化四丁基銨於四氫吱喃 中於氬下，然後在室溫攪拌1 8小時。此時，5毫升水加 入’攪拌1.5分鐘，然後20毫升鹽水加入，以3x90毫升醋 ___ -53- 本紙張尺度適用中圉國家標準（CNS )厶4%格（2丨0X297公董） 4452ο •ά A7 B7 51 五、發明説明（ 酸乙酯萃取。合併之有機層以水及鹽水洗，以硫酸鈉乾 燥，蒸發至乾。粗產物以己烷-醋酸乙酯（2 : 1 )急驟層析 純化，獲得1 7〇毫克（53%)標題化合物，呈白色泡沫。 ， 實例3 3 1氟-25-羥基-16-蟬-23-炔-26,27-六氟-20-表-膽鈣化固 醇， 在740毫克（1.57毫莫耳）[3 S-( 1Ζ，3 α，5 )]-[2_[5-[[( 1，卜 二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-3-氟-2-亞甲基亞環己基] 乙基]二苯膦氧化物於8毫升無水四氫ρ夫喃中之溶液内在-78 °C於氬下攪拌逐滴加入0.98毫升（1.57毫莫耳）1.6Μ正丁 基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，於所形成之紅色 溶液中逐滴加入262毫克（0.685亳莫耳）[3aR-[l(S'3aa ,7a /? ]_3,33,5,6,7,73-六氫-7卜甲基-1-[6,6,6-三氟-5-經基-1-甲.基- 5- (二鼠甲基）-3 -己決基]-4H -印-4-嗣於5毫升四氫 呋喃中之溶液於1 0分鐘内。然後反應混合物在-7 8。(：授掉2 小時。然後由加入2NRochelle鹽及2N碳酸氫_之1 : 1混合 物1 5毫升淬火，然後加熱至室溫。在3 0毫升相同鹽混合物 加入後’以3x100毫升醋酸乙酯萃取。合併之有機層以水 及鹽水洗三次，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。殘餘物在碎勝 管柱上以己燒I -醋酸乙酯（5 : 1 )急驟層析純化，獲得2 5 〇毫 克一矽烷基化標題化合物。 在250毫克矽烷基中間物於3毫升無水四氫呋喃中之;容;夜& 加入2.8毫升（2.8毫莫耳）1M氟化四丁基銨於四氧味喃中於 氬下。反應混合物在室溫攪拌1 8小時。1 〇毫升水加入，授 -54- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)六4说格（21〇Χ297公釐） t------ΐτ------線’ Μ - ' (請先閲讀背面之注意事項再填f本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 4452&2 A7 B7 52 五、發明说明（ 拌15分鐘，然後以20毫升鹽水稀釋，以3χ9〇毫升醋酸乙 醋萃取。有機層以水及鹽水洗四次，以硫酸鈉乾燥，^蒸發 至乾。粗產物在砂膠管柱上以己烷-醋酸乙酯（2 : 〇急攝 層析及在矽膠管柱上以HPLC純化。獲得175毫克（49%)^定 形標題化合物。 . 實例3 4 Ια -氟-25-羥基-16,23E-二烯-26,27-六氟-20-表-膽鈣化固 醇 在350毫克（0.744毫莫耳）[3S_(1Z，3iV，5夕）H2_[5_[[(11-二甲基乙基）一甲基沙燒基]氧基]_3_氣_2 -亞甲基亞環己基] 乙基]二苯膦氧化物於5毫升無水四氫吱喃中之授拌溶液内 在- 78°C於氬下逐滴加入0.463毫升（0.74毫莫耳）ι 6Μ正丁 基經於己燒中之溶液。在授掉5分鐘後，於所形成之紅色， 溶液中逐滴加入230毫克（0.503毫莫耳）[3aR-[l(S*，3E)，3a 〇;，73々]]-3,33,5,6,7,73-六氫-73-甲基-1-[6,6,6-三氟-1_甲 基-5-三氟曱基-5-[(三甲基矽烷基）氧基]-3 -己烯基]-4H-茚-4-酮於4.5毫升無水四氫呋喃中之溶液於1〇分鐘内。反 應混合物在-7 8°C攪拌2小時。然後由加入2N Rochelle鹽及 2N碳酸氫鉀之1 : 1混合物1 0毫升淬火，加熱至室溫《在 3 0毫升相同鹽混合物加入後，以3 xlOO毫升醋酸乙酯萃 取。合併之有機層以水及鹽水洗三次，以硫酸鈉乾燥，蒸 發至乾。殘餘物在矽膠管柱上以己烷·醋酸乙酯急驟層析純 化，獲得236毫克二矽烷基化標題化合物。 在236毫克二矽烷基中間物於3,5毫升無水四氫呋喃中之溶 -55- 本紙張尺渡適用中國國家標準（CNS ) Α4规格（210Χ297公釐） ---a------^------iT------^ 1 • - <請先閲讀背面之注意事項再填V.λ頁) 經濟部令央操準局員工消費合作社印裝 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 AAb c.,：. A7 ____- B7 五、發明説明（53 ) ~ ' 液内加入3毫升（3¾莫耳）im氟化四丁基銨於四氫p夫喃中 於氬下，反應混合物在室溫攪拌i 8小時。由加入5毫升水 及攪拌10分鐘淬火。在以20毫升鹽水稀釋後，混合物以 3x90毫升醋酸乙酯革取。合併之有機層以水及鹽水洗，以 硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。粗產物在矽膠管柱上以己烷醋酸 乙酯（2 : 1)急驟層析及在矽膠管柱上以hplc純化，獲得 140毫克（53%)不定形標題化合物。 實例3 5 1，25-二羥基-16-晞-23-炔-26,27-雙高-20-表-膽鈣化固醇 在 435 毫克（0.746 毫莫耳）[3S-(1Z，3 a，5 yS )]-[2_[3,5-雙 [U1，1-二甲基乙基）二甲基石夕燒基]氧基]-2 -亞甲基亞環己 基]乙基]二表騰氧化物於5宅升無水四氫咬喃中之授拌溶液 内在-7 8 °C於氬下逐滴加入0.465毫升（0.744毫莫耳）1.6Mj£-丁基赶於己娱*中之ί谷液。在授掉5分鐘後，於所獲得之紅 色溶液中逐滴加入169毫克（0.451毫莫耳）[3aR-[l(S*),3a ]]-l-[5-乙基-1-甲基-5-[(三甲基石夕垸基）氧基]_3_庚炔 基]-3,3a, 5,6,7,7a-7T氮- 7a-甲基- 4H -節-4-萌於4毫升無水 四氫呋喃中之溶液於1 〇分鐘内。反應混合物在-7 8 *C授拌 2.5小時，然後由加入2N Rochelle鹽及2 N碳酸氫鉀之！ ： i 混合物1 0毫升淬火，加熱至室溫。在2 5毫升相同鹽混合物 加入後，以3x90毫升醋酸乙酯萃取。合併之有機層以水及 鹽水洗三次，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。殘餘物在矽膠管 柱上以己炫《醋酸乙醋（40 : 1)急驟層析純化，獲得260毫 克三矽烷基化標題化合物。 -56- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） ! 抑衣------1T------^ β - (請先閱讀背面之注意事項再填頁) 445^ A7 B7 張 紙 ___I_ 本 經濟部中央標準局負工消費合作社印装 五、發明説明（54 ) 在260毫克三矽烷基化中間物於3毫升無水四氫呋喃中之溶 液内加入3毫升（3毫莫耳）1M氟化四丁基按於四氫吱喃中在 氬氣壓下。反應混合物在室溫揽拌1 7小時，然後由加入1 0 毫升水及攪拌1 〇分鐘淬火。在以2 0毫升水及鹽水稀釋後， 以3x80毫升醋酸乙酯萃取。合併之有機層以水及鹽水洗四 次’.以硫酸鈉乾燥’蒸發至乾。粗產物在矽膠管柱上以己 燒-醋酸乙酯（1 : 3)急驟層析純化，獲得158毫克（80°/。)標題 化合物，其由甲酸甲酯中結晶，溶點103-1 〇5°C。 實例3 6 1,25-二羥基-1 6-埽-23-炔-26,27-雙高-19-去甲- 20-表-膽 鈣化固醇 在 300毫克（0,525 毫莫耳）[3R-反式-[2-[3,5-雙[[(1，1-二甲 基乙基）二甲基矽烷基]氧基]亞環己基]乙基]二苯膦氧化物 於4毫升無水四氫呋喃中之攪拌溶液内在-7 8 °C於氬下逐滴 加入0,3 25毫升（0.520毫莫耳）1.6M正丁基鋰於己烷中之溶 液。在揽拌5分鐘後，於所獲得之紅色溶液中逐滴加入7 7 毫克(0.205毫莫耳）[3aR-[l(S*)，3aa，7a/5 ]]-1-[5-乙基-1-甲基-5-[(三甲基矽烷基）氧基]-3-庚炔基]-3,3&，5,6,7,7&-六氫-73-甲 基- 4H -茚-4-酮於2.5毫升無水四氫呋喃中之溶液在5分鐘 内。反應混合物在-7 8 °C攪拌2.5小時，然後由加入2N Rochelle鹽及2N碳酸氫鉀之1 : 1混合物10毫升淬火，加熱 至室溫。在以2 5毫升相同鹽混合物稀釋後，以3 x75毫升醋 酸乙酯萃取。合併之有機層以水及鹽水洗三次，以硫酸鈉 乾燥，蒸發至乾。殘餘物在矽膠管柱上以己烷-醋酸乙酯急 -57- M適用中國國家榡準（CNS ) ( 2丨0X297公釐） . 参------1T------線. *- (请先閱讀背面之注意事項再填V, V頁) 445252 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（55 ) 驟層析純化，獲得5 8毫克三矽規基化標題化合物。 在124毫克三矽烷基化中間物（由上述二偶合反應獲得）於2.5 毫升無水四氫吱喃中之溶液内加入2.5毫升（2.5毫莫耳）im 氟化四丁基銨於四氫吱喃中在氬下。反應混合物在室溫携 拌4 0小時。然後由加入1 〇毫升水及攪拌1 5分鐘淬火。在 以2.0毫升水產鹽水稀釋後，以3 x70毫升醋酸乙酯萃取。合 併之有機層以水及鹽水洗四次，以硫酸鈉乾燥，蒸發至 乾。粗產物在矽膠管柱上以己烷-醋酸乙酯（1 : 7)急驟層 析純化，獲得74毫克(25.3%)標題化合物，其由甲酸甲酯中 再結晶，熔點130-132°C。 實例3 7 1 α -氟!-25 -輕基-16 -烯- 23 -決-26,27 -雙高-20 -表-膽碎化固 醇 ' 在 390 毫克（0.829 毫莫耳）[3S-(1Z,3 α，5 θ )]-[2·[3,5-[[(1,1-二甲基乙基）二曱基矽烷基]氧基]-3-氟-2-亞甲基 亞環己基]乙基]二苯膦氧化物於5毫升無水四氫吱喃中之攪 拌溶液内在- 78°C於氬下遂滴加入〇.53毫升（0.848毫莫 耳）1·6Μ正丁基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，於所 獲得之紅色溶液中逐滴加入200毫克（0.534毫莫耳）[3aR-[l(S*)，3aα,7ay3]]-l-[5-乙基-レ曱基-5-[(三甲基矽烷基）氧基]-3 -庚決基]-3,3a，5,6,7,7a-7Τ 氫- 7a -曱基- 4Η -雖-4-嗣於4.5毫 升無水四氫呋喃中之溶液在1 〇分鐘内。然後反應混合物在 -7 8 °C攪拌2小時，由加入2N Rochelle鹽及2N碳酸氫鉀之 1 : 1混合物1 0毫升淬火，加熱至室溫。在以3 0毫升相同 ：___-58- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS } A4規格（210x297公爱) ^ " -I' 私衣------"------Μ % Γ請先聞讀背面之注意事項再填Γ冬耳j 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 ^ 3 2 5 2 Α7 |_________Β7 五 '發明説明（56 ) 鹽混合物稀釋後，以3 xl 〇〇毫升醋酸乙酯萃取。合併之有 機層以水及鹽水洗三次，以硫酸鈉乾燥，蒸發至乾。殘餘 物在矽膠管柱上以己垸-醋酸乙酯（30 : 1)急驟層析純化， 獲得2 5 4毫克二矽烷基化標題化合物。 在254毫克一梦炫基中間物於3.5¾升無水四氫咬喃中之溶 液内加入3,5毫升（3.5毫莫耳）1M氟化四丁基銨於四氫呋喃 中在氬下。反應混合物在室溫攪拌1 8小時，然後由加入1 〇 毫升水及攪拌1 5分鐘淬火。在以2 0毫升水及鹽水稀釋後， 以3x80毫升醋酸乙酯萃取。合併之有機層以水及鹽水洗四 次，以硫酸鈉乾燥’蒸發至乾。粗產物在矽膠管柱上以己 烷-醋酸乙酯（7 : 4 )急驟層析及矽膠管柱上己烷-醋酸乙酯 (3 : 2)HPLC純化，獲得I%毫克（67·6%)不定形標題化合 物_。 、 實例3 8 1 α -氟-25-羥基-1 6-23E-二烯-26,27-雙高-20-表-膽鈣化固 醇. 在 240 毫克（0.51毫莫耳）[3S-(1Z,3 α，5/5 )]-[2-[5-[[(1，卜 二甲基乙基）二甲基矽烷基]氧基]-3 -氟-2-亞甲基亞環己基] 乙基]二苯膦氧化物於5毫升無水四氫呋喃中之攪拌溶液内 在- 7 8Χ：於氬下逐滴加入〇_319毫升（0.51毫莫耳）1.6Μ正丁 基鋰於己烷中之溶液。在攪拌5分鐘後，於所獲得之紅色 溶液中逐滴加入103毫克（0.273毫莫耳）[3aR-[l(S*，3E)，3a a，7ay5 ]]-1-[5-乙基-1-甲基-5-[(三曱基矽烷基）氧基]_3-庚炔 基]-3,3 3,5,6,7,73-六氫-73-甲基-411-茚-4，酮於4毫升無水 _____-59- 本紙張尺度適用中國國家標準（〇\5)八4規格（210父297公爱·) . ^------1Τ------線’ » « (請先閱讀背面之注意事項再填f4頁) 445 2 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（57 ) 四氫呋喃中之溶液在1 〇分鐘内》反應混合物在-7 8 °C攪拌2 小時，然後放入冷凍器（-20 °C )中1小時，由加入2N Rochelle鹽及2N碳酸氫鉀之1 : 1混合物10毫升淬火，加熱 至室溫。在以2 5毫升相同鹽混合物稀釋後，以3 x90毫升醋 酸乙酯萃取。合併之有機層以水及鹽水洗三次，以硫酸鈉 乾燥’蒸發至乾。殘餘物在矽膠管柱上以己烷-醋酸乙酯 (1 : 4 )急驟層析純化，獲得丨45毫克二矽烷基化標題化合 物。 在145毫克二矽烷基中間物於3毫升無水四氫呋喃中之溶液 内加入1.7毫升（1.7毫莫耳）1M氟化四丁基銨於四氫呋喃中 在氬下。反應混合物在室溫攪拌1 8小時，然後由加入1 〇毫 升水及攪拌1 5分鐘淬火。以2 0毫升水及鹽水稀釋，以 3 x80毫升醋酸乙酯萃取。有機層以水及鹽水洗四次，以硫 酸鉀乾燥，蒸發至乾。粗產物在3〇毫米χ5吋矽膠管柱上以 己烷-醋酸乙酯（3 : 2)急驟層析及在矽膠管柱上己烷-醋酸 乙酯（1 : 1)HPLC純化。獲得90毫克（74%)標題化合物；落 點9 1 - 9 2 °C，由醋酸曱酯-己烷中結晶。 含有各成份在下列實例A至C中所述比例之乳霜 (creams) ’凝膠’及溶液可以習知方式調配。在這些實例中 之化合物A爲1,25-二羥基-16,23E-二烯-26,27,六氟-20-表 -膽鈣化固醇，其爲任一申請專利範圍化合物之例示。 60 本紙張尺度適用中國國家榡準.（CNS ) A4規格（2ι〇χ297公楚） .丨裂 訂-------線丨 f請先閲讀背面之注項再填V. >4頁j 445 2 ο 經濟部中央標準局身工消費合作社印製 Α7 ______Β7 五、發明説明（58 ) 實例A 乳霜 成份 %重量/重量 化合物A 0.00001-0.10 鯨蠟醇 1.50 硬脂醇 2.50 一硬脂酸山梨糖醇酐酯（Span 60) 2.00 礦油 2.00 一硬脂酸甘油自旨及聚氧基乙二醇硬脂酸酯摻合物 4.00 (Arlacel 165) 聚山梨:酸醋;60(Tween 60) 1.00 辛酸/癸酸三酸甘油酯 5.00 山梨糖醇溶液 4.00 乙二胺四乙酸二鈉 0.10 丁基化羥基苯甲醚(BHA) 0.02 山梨酸 0.20 山梨酸鉀 0.1-0.2 水 適量至 100.00 裝 訂 線 {請先閲讀背面之注意事項再填/表頁) -61 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 445^五、發明説明（59 ) A7 B7

實例B 凝膠 成份 %重量/重量 化合物A 0.00001-0.10 丁基化羥基苯曱醚(BHA) 0.02 羥基丙基纖維素 3.00 乙醇，USP 45.00 水 適量至 100.00 (請先閱讀背面之注意事項再填f本頁) -裝-

實例C 局部施用溶液 成份 %重量/重量 化合物A 0.00001-0.10 丙二醇 10.00 辛酸/癸酸三酸甘油酯 30,00 丁基化羥基苯甲醚(BHA) 0.02 絕對乙醇 適量至 100.00 、vs 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 -62 - 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐}

Claims (1)

1. 4· 4 5 2今令6106731號專利申請案 中文申請專利範圍修正本(89年1£_ A8. 本Γ 修正 申請專利範圍 1.下式之化合物

   R {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Η 式中R為氫，氟，或經基，為氫，CU4規基，或_ 素，X為=CH2，或當R為羥基時，X為（H，H)或= CH2，

   經濟部中央標準局員工消費合作社印装 -CH2-CH2-，但當 A為-CH2-CH2·時，R2為氫或Cm烷 基。 2. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R為羥基。 3. 根據申請專利範圍第2項之化合物，其中A為-C ξ C-。 4. 根據申請專利範圍第2項之化合物，其中A為 本紙伕尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 445^六、申請專利範圍 -ch2-ch2- A8 B8 C8 DS 5.根據申請專利範圍第2項之化合物，其中A為 Η C — C c= c Η 或 Η Η 經濟部中央椟率局WK：工消費合作社印製 6. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R2為氟。 7. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R2為氫。 8. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R2為甲基或乙 基。 9. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R為氟。 10. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中X為（Η,Η)。 11. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其為 1，25 -二羥基-16-烯-23 -炔-20-表-膽鈣化固醇 (cholecalciferol) *. 1，2 5 -二羥基-1 6 -烯-2 0 -表-膽鈣化固醇； 1 ,25-二羥基-16-烯-23·炔-26,27-六氟-20-表-膽鈣化 固醇； 1 ,25-二羥基-〖6,23 E-二烯-26,27-六氟-20-表-膽鈣化 固醇； 1,25-二羥基-I6,23Z-二烯-26,27-六氟-20-表-膽鈣化 固醇； -2 - 本紙張尺度適用中國國家標準（cns ) A4说格（nox297公簸） (請先K讀背面之注意ί項再填寫本頁) 11T 4452^ Α8 BS C8 D8 六、申請專利範圍 I，25 -二羥基-16,23Z -二晞- 26,27-六氟-2 0-表-1 9 -去 甲（nor)-膽鈣化固醇； 1 α ·氟-2 5-經基-16,23Z-二烯-26,27-六氟-20-表-膽转 化固醇； 1 α -氟-25-羥基-16-烯-23 -決-26,27-六氟- 20 -表-膽 鈣化固醇； 1 α -氟-25-經基-16,23Ε-二婦-26,27-六氟-20-表-膽转 化固醇； 1，2 5 -二羥基-1 6-埽-2 3 -炔-26,27-雙高-2 0 -表-膽鈣化 固醇； 1，25 -二捏基-16-埽- 23 -炔-26，2 7-雙高-19 -去甲- 20- 表-膽鈣化固醇； 1 <2 -氟-25-經基-16·烯- 23-炔-26,27-雙高-20 -表-膽鈣 化固醇； 1 α -氟-25 -羥基-16,23Ε-二缔-2ό，27-雙高-20 -表-膽鈣 化固醇》 經清部中央標準局身工消費合作社印笨 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 12- —種用於引發皮膚及癌細胞株之分化及増殖抑制 '用於 逆轉光損傷有關之症狀及用於治療骨質疏鬆症之醫藥組 合物，包括有效量之根據申請專利範圍第丨項之式丨化合 物及醫藥可接受載劑。 13. —種製造式I化合物之方法， -3- 本紙張尺度逋用t國囷家揉準（CNS) Α4规格（2!0Χ297公釐） 4452^ ^ A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍

   H〇々' R 式中R為氫’氟，或羥基，尺2為氫，Cl.4烷基’或画 素，X為= CH2，或當r為羥基時，χ為（HH)或= CH2， Η (請先閱讀背面之法意事項再填寫本頁) H H C^=c 或 H 1-4 經濟部中央棣率局貝工消費合作社印製 CH2-CH2- ’ 但當 A為-CH2-CH2 -時，r2為氫或c 基 其包括在四氫呋喃中有氣化四丁基銨存在下將含有矽淀 基保護羥基之對應化合物去保護 *· 4 - _u u， ·* ff! 士晡面宏揉壤i CNS 1 A4娟放f 2!0乂 297公螫 ΪΡ- 4 ? I ra τ ζ m J t ABCD '申請專利範圍 FT。·1'、^^· ccj 其中A與R2如上所定義， [為氩，氟或矽烷基保護羥基；且 R"為矽烷基保護基。 14.根據申請專利範圍第1項之式I化合物， 再係用於引發皮 膚及癌細胞株之分化及增殖抑制，特別是用於治療過度 增生之皮膚#，如牛皮癬；贅生性疾病，如白血病；及 皮脂腺疾病，如痤瘡。 ϋ根據申凊專利範圍第1項之式I化合物，其係用於逆轉光 損傷有關之症狀’特別是用於局部治療暴露太陽而損傷 之皮膚’皺紋，彈力組織變性，及過早老化之效果。 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局負工消費合作社印I 本紙珉尺度適用中國國家揉率（CNS〉A4規格（210X297公釐）

   Α7 Β7 4 4 號專利申請案 中文說明書修正頁(89年6月） 五、發明説明（！） 本發明係關於維生素D 3類似物，特別是下式之維生素D 3 之20-表（epi)-1 6烯類似物

   式中R為氫，氟，或羥基，R2為氫，低烷基，或鹵素，X 為= CH2，或當R為趣基時，X為（H，H)或= CH2， 及A爲-ce c—

   -CH2-CH2-，但當Α為-CH2-CH2-時，尺2為氫或低坡基。 如本文中所用’ 「低烷基」表含有1至4個碳原子之直鏈 或分支鏈烷基，例如甲基，乙基-，丙基，異丙基，丁基， 第三丁基，等。低烷基較佳為曱基或乙基。齒素意為氟， 琪’溴’或氣’較佳為氟。 維生素D 3衍生物係用於治療因維生素〇缺乏所引起之疾 -4 - 本紙張尺度適用中國國家櫺準（CNS)A4規格（210X297公餐） 4 4 b 2 〇 ^ 第86106731號專利申請案 中文說明書修正頁(89年6月） Α7 Β7 五、發明説明（ 1a

   病。例如，EP 0 325 279號案所揭示之"天然”維生素D3類似 物，然而WO 92/03414及JP 7188281號案係揭示於第16位置上 無雙鍵之20-表（epi)-1,25-二羥基維生素D3衍生物。 ί請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -IT 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 -4a - 本紙張尺度適用中國國家標準（CMS ) Α4規格（210X297公釐）