KR100783856B1

KR100783856B1 - 비타민d3동족체

Info

Publication number: KR100783856B1
Application number: KR1019970020030A
Authority: KR
Inventors: 앤드류 데이비드 바쵸; 그램 핀들리 브라이스; 버나드 마이클 헤네씨; 제롬 앤토니 아이아코벨리; 밀란 라도제 우스코코비치
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 1996-05-23
Filing date: 1997-05-22
Publication date: 2008-05-09
Also published as: UY24561A1; AU2357797A; DE69730774T2; SG70009A1; YU20197A; EP1464640A3; EP1464640A2; CO4950531A1; HU9700926D0; NO972304L; ES2227635T3; MA24251A1; CN1176072C; ZA974336B; CA2205275A1; CZ157897A3; NO972304D0; NZ314839A; CA2205275C; IL120843A0

Abstract

하기 화학식 1의 화합물은 과증식성 피부 질환, 종양 질환, 피지선 질환, 및 광손상된 피부와 관련된 증상의 치료에 유용하다:

[화학식 1]

상기식에서,

R은 수소, 불소 또는 하이드록시이고,

R₂는 수소, 저급 알킬 또는 할로겐이고,

X는 =CH₂이거나, 상기 R이 하이드록시인 경우 X는 (H,H) 또는 =CH₂이고,

A는 -C≡C-,

또는 -CH₂-CH₂-이다.

Description

비타민 D3 동족체{VITAMIN D3 ANALOGS}

본 발명은 비타민 D₃동족체, 특히 화학식 1을 갖는 비타민 D₃의 20-에피-16-엔 동족체에 관한 것으로, 과증식성 피부 질환, 종양 질환, 피지선 질환, 및 광손상된 피부와 관련된 증상의 치료에 유용하다.

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본 발명은 비타민 D₃ 동족체, 특히 하기 화학식 1을 갖는 비타민 D₃의 20-에피-16-엔 동족체에 관한 것이다:

화학식 1

상기식에서,

R은 수소, 불소 또는 하이드록시이고,

R₂는 수소, 저급 알킬 또는 할로겐이고,

X는 =CH₂이거나, 상기 R이 하이드록시인 경우 (H,H) 또는 =CH₂이고,

A는 -C≡C-,

또는 -CH₂-CH₂-이며,

상기 A가 -CH₂-CH₂-인 경우 R₂는 수소 또는 저급 알킬이다.

본 발명에 사용된 "저급 알킬" 은 탄소수 1 내지 4를 갖는 직쇄 또는 측쇄 알킬 그룹, 예를들어 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, t-부틸 등을 나타낸다. 바람직하게 저급 알킬은 메틸 또는 에틸이다. 할로겐은 불소, 요오드, 브롬 또는 염소, 바람직하게 불소를 의미한다.

화학식 1의 화합물은 다양한 피부 및 암세포주의 분화 및 증식 억제를 유도한다. 따라서, 화학식 1의 화합물은 과증식성 피부 질환, 예를들어 건선의 치료제로서 유용하다. 화학식 1의 화합물은 또한 종양 질환, 예를들어 백혈병 또는 유방암, 및 피지선 질환, 예를들어 여드름 또는 지루성 피부염의 치료에 유용하다. 화학식 1의 화합물, 특히 1α-플루오로-25-하이드록시-16,23E-디엔-26,27-비스호모-20-에피-콜레칼시페롤은 골다공증의 치료에 유용하다.

더우기, 화학식 1의 화합물을 환자의 피부에 국소적용시켰을 때 광손상과 관련된 증상들이 역전된다. 따라서, 화학식 1의 화합물을 일광 노출을 통해 손상된 환자의 피부에 국소 적용시킴으로써, 주름, 탄력섬유증 및 조기 노화의 효과를 역전시켜 피부의 외관을 개선시킬 수 있다. 즉, 화학식 1 화합물의 국소 투여를 통해, 피부 손상의 복구가 가속화되어 보다 매끄럽고 보다 젊은 외관을 갖는 피부를 제공하게 된다.

본 발명은 또한 화학식 1의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 이러한 조성물을 피부 및 암세포주의 분화 및 증식 억제를 유발하는데 사용할 수 있으며, 특히 과증식성 피부 질환, 예를들어 건선; 종양 질환; 예를들어 백혈병; 및 피지선 질환, 예를들어 여드름의 치료 뿐아니라; 광손상과 관련된 증상의 역전, 특히 일광 노출을 통해 손상된 피부의 주름, 탄력섬유증 및 조기 노화 작용의 국소적인 치료에 사용할 수 있다. 본 발명은 또한 상기 언급한 질환 및 증상들의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서 상기 화학식 1 화합물의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화학식 1의 화합물 및 화학식(XII)의 중간체의 제조 방법에 관한 것이다.

바람직한 실시태양으로, R은 하이드록시이다. 화학식 1의 화합물에서, R₂는 바람직하게 수소 또는 불소이다. 화학식 1의 바람직한 화합물들은 하기와 같다:

1,25-디하이드록시-16-엔-23-인-20-에피-콜레칼시페롤;

1,25-디하이드록시-16-엔-20-에피-콜레칼시페롤;

1,25-디하이드록시-16-엔-23-인-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤;

1α-플루오로-25-하이드록시-16,23Z-디엔-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤;

1α-플루오로-25-하이드록시-16-엔-23-인-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤;

1,25-디하이드록시-16,23E-디엔-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤;

1,25-디하이드록시-16,23Z-디엔-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤;

1,25-디하이드록시-16,23Z-디엔-19-노르-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤.

화학식 1의 화합물을 이후에 개시하는 반응식 1 내지 5 및 실시예에 따라 제조한다.

화학식 1 화합물의 제조 방법에서 최종 단계는 실릴 보호된 하이드록시 그룹을 함유하는 상응하는 화합물을 탈보호시킴을 포함한다.

[반응식 1]

상기식들에서, R₂는 상기 개시된 바와 같다.

[반응식 2]

상기식들에서, R, X 및 R₂는 상기 개시한 바와 같다.

[반응식 3]

상기식들에서, R 및 X는 상기 개시한 바와 같고, R₂는 수소 또는 저급 알킬이다.

[반응식 4]

상기식들에서, R, X 및 R₂는 상기 개시한 바와 같다.

[반응식 5]

상기식들에서, R, X 및 R₂는 상기 개시한 바와 같다.

상기 반응식 1에서, 화학식(II)의 화합물은 공지된 화합물(B.M. Trost, P.R. Bernstein, P.C. Funfschilling, J. American Chemical Society 101, 4378(1979))로, 염소화된 탄화수소 용매, 예를들어 디클로로메탄중에서 아세트산 무수물, 피리딘 및 디메틸아미노피리딘과의 반응에 의해 화학식(III)의 화합물로 전환된다. 상기 반응을 바람직하게 아르곤 분위기하에 0 내지 50 ℃, 바람직하게 실온에서 수행한다.

화학식(III)의 화합물을 바람직하게 아르곤 분위기하에 알콜 용매, 예를들어 메탄올중에서 염기, 예를들어 탄산 나트륨과의 반응에 의해 화학식(IV)로 전환시킨다.

화학식(IV)의 화합물을 아르곤 분위기하에서 염소화된 탄화수소 용매, 예를들어 디클로로메탄중에서 옥살릴 클로라이드 및 디메틸설폭사이드와의 반응에 의해 화학식(V)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(V)의 화합물을 목탄상 팔라듐 촉매의 존재하에 벤잘아세톤과의 반응에 의해 화학식(VI)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(VI)의 화합물을 디클로로메탄과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 3-트리메틸실릴프로피날 및 루이스산, 예를들어 디메틸알루미늄 클로라이드와의 반응에 의해 화학식(VII)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(VII)의 화합물을 톨루엔중에서 트리-n-부틸틴 하이드라이드 및 트리에틸보란과 상응하는 페닐티오노카보네이트와의 반응에 의해 화학식(VIII)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(VIII)의 화합물을 에탄올과 같은 알콜 용매중에서 수산화 나트륨과 같은 염기와의 반응에 의해 화학식(IX)의 화합물로 전환시킨다. 상기 반응을 50 내지 100 ℃ 범위의 온도, 바람직하게 80 ℃에서 수행한다.

화학식(IX)의 화합물을 무수 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 1-(트리메틸실릴)이미다졸과의 반응에 의해 화학식(X)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(X)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에서 화학식

(여기에서 R₂'는 수소 또는 저급 알킬이다)의 상응하는 화합물과의 반응에 의해 화학식(XI)의 화합물로 전환시킨다. 상기 반응을 바람직하게 -78 ℃에서 수행한다.

R₂가 할로겐인 화학식 1의 화합물을 제조하는 경우, 화학식(X)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에서 헥사플루오로아세톤과 같은 할로겐화된 아세톤과 반응시킨다.

화학식(XI)의 화합물을 테트라하이드로푸란과 같은 에테르 용매중에서 테트라부틸암모늄 플루오라이드와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XII)의 화합물로 전환시킨다.

반응식 2에 나타낸 바와 같이, 화학식(XII)의 화합물을 염소화된 탄화수소용매, 예를들어 무수 염화 메틸렌중에서 산화제, 예를들어 피리디늄 디크로메이트와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XIII)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XIII)의 화합물을 무수 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 1-(트리메틸실릴)이미다졸과의 반응에 의해 상응하는 화학식(XIV)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XIV)의 화합물을 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해 상응하는 화학식(Ia)의 화합물(이때 R은 하이드록시이고, X는 =CH₂이다)로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XIV)의 화합물을 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [5S,Z]-2-[2-[2-메틸렌-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 수소인 상응하는 화학식(Ia)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XIV)의 화합물을 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [3S-(3α,5β2,Z)]-2-[2-[2-메틸렌-3-플루오로-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀옥사이드와의 반응에 의해, R이 불소인 상응하는 화학식(Ia)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XIV)의 화합물을 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [3R-(3α,5β,Z)]-3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 하이드록시이고 X가 수소인 상응하는 화학식(Ia)의 화합물로 전환시킨다.

상기 반응식 3에서, 화학식(XII)의 화합물을 퀴놀린의 존재하에 유기 용매, 예를들어 에틸 아세테이트, 헥산 및 에탄올의 혼합물중에서 수소 및 린들라(Lindlar) 촉매와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XV)의 화합물로 환원시킨다.

화학식(XV)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 1,4-비스(디페닐포스피노)부탄 1,5-사이클로옥타디엔 로듐 테트라플루오로보레이트 및 수은과 같은 촉매의 존재하에 수소와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XVI)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XVI)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 피리디늄 디크로메이트와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XVII)의 화합물로 산화시킨다.

화학식(XVII)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 1-(트리메틸실릴)이미다졸과의 반응에 의해 상응하는 화학식(XVIII)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XVIII)의 화합물을 용매로서 무수 테트라하이드로푸란중에서 바람직하게 -78 ℃의 온도에서 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐 포스핀 옥사이드와의 반응에 의해 상응하는 화학식(Ib)의 화합물(이때 R은 하이드록시이고, X는 =CH₂이다)로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XVIII)의 화합물을 용매로서 무수 테트라하이드로푸란중에서 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 [3R-(3α,5β,Z)-3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 하이드록시이고 X가 수소인 상응하는 화학식(Ib)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XVIII)의 화합물을 -78 ℃의 온도에서 용매로서 무수 테트라하이드로푸란중에서 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 [3S-(3α,5β,Z)]-2-[2-[2-[메틸렌-3-플루오로-5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 불소인 상응하는 화학식(Ib)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XVIII)의 화합물을 -78 ℃의 온도에서 용매로서 무수 테트라하이드로푸란중에서 염기로서 n-부틸리튬의 존재하에 [5S,Z]-2-[2-[2-메틸렌-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 수소인 상응하는 화학식(Ib)의 화합물로 전환시킨다.

상기 반응식 4에서, 화학식(XII)의 화합물을 염기로서 나트륨 메톡사이드의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르 용매중에서 리튬 알루미늄 하이드라이드와 같은 환원제와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XIX)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XIX)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 피리디늄 디크로메이트와 같은 산화제와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XX)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XX)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 1-(트리메틸실릴)이미다졸과의 반응에 의해 상응하는 화학식(XXI)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XXI)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르 용매중에서 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해 상응하는 화학식(Ic)의 화합물(이때 R은 하이드록시이고, X는 =CH₂이다)로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XXI)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르 용매중에서 [3R-(3α,5β,Z)]-3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 하이드록시이고 X가 수소인 상응하는 화학식(Ic)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XXI)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [5S,Z]-2-[2-[2-메틸렌-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 수소인 상응하는 화학식(Ic)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XXI)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [3S-(3α,5β,Z)]-2-[2-[2-메틸렌-3-플루오로-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 불소인 상응하는 화학식(Ic)의 화합물로 전환시킨다.

상기 반응식 5에 나타난 바와 같이, 화학식(XII)의 화합물을 에틸 아세테이트, 헥산 및 에탄올의 혼합물과 같은 용매 혼합물중에서 퀴놀린의 존재하에 린들라 촉매를 사용한 수소화에 의해 상응하는 화학식(XXII)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XXII)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 피리디늄 디크로메이트와 같은 산화제와의 반응에 의해 상응하는 화학식(XXIII)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XXIII)의 화합물을 염화 메틸렌과 같은 염소화된 탄화수소 용매중에서 1-(트리메틸실릴)이미다졸과의 반응에 의해 상응하는 화학식(XXIV)의 화합물로 전환시킨다.

화학식(XXIV)의 화합물을 부틸 리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르 용매중에서 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해 상응하는 화학식(Id)의 화합물(이때 R은 하이드록시이고, X는 CH₂이다)로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XXIV)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란중에서 [3R-(3α,5β,Z)]-3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 하이드록시이고 X가 수소인 상응하는 화학식(Id)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XXIV)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [5S,Z]-2-[2-[2-메틸렌-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 수소인 상응하는 화학식(Id)의 화합물로 전환시킨다.

한편으로, 화학식(XXIV)의 화합물을 n-부틸리튬과 같은 염기의 존재하에 테트라하이드로푸란과 같은 에테르형 용매중에서 [3S-(3α,5β,Z)]-2-[2-[2-메틸렌-3-플루오로-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드와의 반응에 의해, R이 불소인 상응하는 화학식(Id)의 화합물로 전환시킨다.

화학식 1의 화합물을 예를들어 정제, 코팅정, 당의정, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐, 액제, 유화제 또는 현탁제의 형태로 경구적으로 투여할 수 있다. 그러나, 투여를 또한 예를들어 좌제의 형태로 직장에 의해, 또는 예를들어 주사액의 형태로 비경구적으로 수행할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물을 정제, 코팅정, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐의 제조를 위해 약학적으로 불활성인 무기 또는 유기 부형제를 사용하여 제조할 수 있다. 락토오즈, 옥수수 전분 또는 그의 유도체, 활석, 스테아르산 또는 그의 염 등을 예를들어 정제, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐에 대한 상기와 같은 부형제로서 사용할 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐에 적합한 부형제는 활성 성분의 성질에 따라 예를들어 식물성 오일, 왁스, 지방, 반고체 및 액체 폴리올 등이다. 그러나, 연질 젤라틴 캡슐의 경우에 부형제는 대개 필요하지 않다. 액제 및 시럽의 제조에 적합한 부형제는 예를들어 물, 폴리올, 사카로오즈, 전화당, 글루코즈 등이다.

주사액에 적합한 부형제의 예로는 물, 알콜, 폴리올, 글리세롤, 식물성 오일 등이 있다.

좌제에 적합한 부형제의 예로는 천연유 또는 경화유, 왁스, 지방, 반액체 또는 액체 폴리올 등이 있다.

더욱, 상기 약학 제제는 보존제, 가용화제, 안정제, 습윤제, 유화제, 감미제, 착색제, 풍미제, 삼투압 조절용 염, 완충제, 맛 차단제 또는 산화방지제를 함유할 수 있다.

상술한 화학식 1의 화합물을 백혈병과 같은 종양 질환의 치료가 필요한 온혈동물에게 상기 치료를 위해 경구 또는 주사에 의해 투여할 수 있다. 보다 구체적으로, 상술한 화학식 1의 화합물을 백혈병 또는 유방암과 같은 종양 질환의 치료를 위해 하루에 약 0.25 내지 50 ㎍ 범위의 용량으로 성인에게 경구투여할 수 있다.

상술한 화학식 1의 화합물을 과증식성 피부 질환, 예를들어 건선, 기초 세포암, 케라틴화 질환, 및 각화증의 치료를 위해 이러한 치료가 필요한 온혈 동물에게 경구 투여할 수 있다. 보다 구체적으로, 상술한 화학식 1의 화합물을 과증식성 피부 질환, 예를들어 건선, 기초 세포암, 케라틴화 질환, 및 각화증의 치료를 위해 하루에 약 0.25 내지 50 ㎍ 범위의 용량으로 성인에게 경구 투여할 수 있다. 이들 화합물을 인간의 여드름 치료를 위해 약 0.25 내지 50 ㎍/일; 바람직하게 0.5 내지 5 ㎍/일의 용량으로 경구 투여할 수 있다.

상술한 화학식 1의 화합물을 과증식성 피부 질환, 예를들어 건선, 기초 세포암, 케라틴화 질환, 및 각화증의 치료를 위해 이러한 치료가 필요한 온혈 동물에게 국소적으로 투여할 수 있다. 보다 구체적으로, 상술한 화학식 1의 화합물을 과증식성 피부 질환, 예를들어 건선, 기초 세포암, 케라틴화 질환, 및 각화증의 치료를 위해 하루에 국소 제형 g당 약 0.5 내지 약 100 ㎍ 범위의 용량으로 국소적으로 투여할 수 있다.

상술한 화학식 1의 화합물을 또한 피지선 질환, 예를들어 여드름 또는 지루성 피부염의 치료를 위해 국소적으로 투여할 수 있다.

종양 질환의 치료제로서 화학식 1 화합물의 유용한 활성을 하기 시험 과정에 의해 입증할 수 있다.

HL-60 세포 분화

HL-60 세포 분화의 유발을 니트로블루테트라졸륨(NBT)의 감소를 통해 상기 세포의 산화적인 파열 잠재성을 측정함으로써 분석하였다.

HL-60 세포를 10% 송아지 태아 혈청(FCS), 2 mM L-글루타민, 1 mM 피루브산 나트륨, 1% 불필수 아미노산, 50 U/㎖ 페니실린 및 50 ㎍/㎖ 스트렙토마이신이 보충된 RPMI 1640 배지(RPMI/FCS)에서 유지시켰다. HL-60 세포(30,000 세포/90 ㎕의 RPMI/보충 배지)를 바닥이 편평한 미세적정 웰내에 시이딩하였다. 시이딩 직후에, 보충된 RPMI 배지중에 희석된 시험 화합물 10 ㎕를 상기 웰들에 동시에 가하여 10^-11 내지 10^-6 M의 최종 농도(-20 ℃에서 보관된 에탄올중의 10^-2 M의 모액으로부터 출발하고 빛이 차단됨)를 얻었다. 3 일 후에, 상기 배지를 다채널 피펫을 사용하여 상기 웰들로부터 제거하고 NBT 용액 100 ㎕(200 nM의 포르볼 미리스테이트 아세테이트(PMA)가 보충된 인산염 완충 염수(PBS)중의 1 mg/㎖)로 대체하였다. 37 ℃에서 추가로 1 시간동안 배양한 후에, 상기 NBT 용액을 제거하고 0.01 N HCl 중의 10% 나트륨 도데실 설페이트(SDS) 100 ㎕를 가하였다. 감소된 NBT의 양을 자동화된 플레이트 판독기를 사용하여 540 nm에서 광도측정법으로 정량분석하였다. 3 개 웰의 평균을 계산하였다. S.E.M.은 5 내지 10%이었다. 값들을 동일한 실험에서 100-1000 nM 칼시트리올을 사용하여 성취한 최대 분화 %로서 나타내었다. 상기 최대 값의 50%에 달하는 농도(nM)를 그래프로 측정하여 표 1에 ED₅₀으로서 나타낸다.

[표 1]

T47-D 및 MCF-7 유방 암 세포에서의 증식억제 활성

본 실험에 사용된 2 개의 세포주 및 그의 생육 필요조건을 하기에 나타낸다:

1. T47-D 유방암 세포를 10 ㎍/㎖의 소 인슐린 및 10%소 태아 혈청이 보충된 RPMI 1640 배지에서 증식시켰다.

2. MCF-7 유방암 세포를 불필수 아미노산, 1 mM 피루브산 나트륨, 10 ㎍/㎖의 소 인슐린 및 10% 소 태아 혈청이 보충된 MEM(Eagles)에서 증식시켰다.

세포들을 대수기 말기까지(～80% 까지 덮이도록) 적합한 배지에서 증식시켰다. 이어서 T47-D 또는 MCF-7 세포를 트립신처리하고 각각 4000 또는 2000 세포/웰로 시이딩하였다. 후-시이딩후 24 시간째에, 일련의 에탄올-용해된 약물 희석액을 동일한 배지에서 제조하여 최종 농도 1,000 내지 0.1 nM에서 3 개의 웰과 0.1% 에탄올에 가하였다. 후-약물 첨가후 3 내지 7일째에, 5 mg/㎖ MTT 용액(인산염 완충된 염수중의 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸륨 브로마이드) 50 ㎕를 각 웰에 가하고 37 ℃에서 2.5 시간동안 계속 배양한다. 이어서 플레이트를 800 x g에서 5 분간 원심분리에 의해 간단히 회전시키고 상기 웰들로부터 배지를 흡출시키고, 에탄올 50 ㎕/웰을 가하여 MTT와 함께 배양시키는 동안 형성된 포르마잔을 용해시킨다. 15 분간 진탕시킨 후에, 자동 플레이트 판독기에서 570 및 660 nm에서 각각의 웰에 대해 흡광도를 측정한다. 시험 화합물로 처리된 세포들의 흡광도를 단지 0.1% 에탄올로만 처리된 세포들의 흡광도와 비교하여 세포 생육의 억제%를 계산한다. IC₅₀ 값을 리이드와

치의 식(Reed, L.J., 및 H. Muench, A simple method of estimating fifty percent endpoint. Am. J. Hyg. 27:493-497(1938))을 기준으로 측정하고 결과를 하기 표 2에 나타낸다.

[표 2]

과증식성 피부 질환 치료제로서 화학식 1 화합물의 유용한 활성을 하기에 의해 입증할 수 있다.

각질세포 증식의 억제

HaCaT 세포주 - 고정화된 인간 세포주 HaCaT를 사용하였다. ³H-티미딘의 결합을 시험 화합물의 존재하에서 6일간 배양한 후에 지수 증식기의 배양물에서 측정하였다.

세포 배양물 - HaCaT 세포를 둘베코의 변형된 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium)(DMEM)와 영양분 혼합물 햄 F12(Nutrient Mixture Ham's F12)(F12)[3:1(v/v, ICN), 4.5 g/ℓ의 글루코스 함유, 10% 송아지 태아 혈청(Gibco, FCS), L-글루타민(Gibco, 2 mM), 페니실린(Gibco, 50 UI㎖), 스트렙토마이신(Gibco, 50 ㎍/㎖), EGF(10 ng/㎖), 하이드로코르티존(400 ng/㎖), 콜레라 독소(8.5 ng/㎖) 및 인슐린(5 ng/㎖)이 보충됨]에서 배양시켰다. 세포들을 5% Co₂및 95% 공기를 함유하는 습한 대기에서 유지시키고 매 3 내지 4일마다 통과시켰다.

³H-티미딘 흡수의 억제 - HaCaT 세포(완전 배양 배지중의 250개의 세포)를 96-웰 배양 접시내로 시이딩시키고 37 ℃에서 5% Co₂ 및 95% 공기와 함께 6일간 배양시켰다. 1% 에탄올중에 10 배 농도로 용해된 억제제를 분석 개시 즉시 가하였다. ³H-티미딘(5 Ci/mmol, Amersham)을 1 μCi/웰의 농도로 가하고 세포들을 생육 기간의 최종 6 시간동안 + 표지하였다. 이어서 세포들을 격렬히 교반하면서 37 ℃에서 10 분간 트립신처리하고 Micro Mate 196 웰 수확기(Packard)를 사용하여 96-웰 GF/C 필터 플레이트(Uni Filter, Packard)상에 수확하였다. 40 ℃에서 진공하에 20 내지 30 분간 건조시킨 후에, Micro Scint 0 섬광제(Packard) 20 ㎕를 가하고 필터에 결합된 방사능활성을 TOP COUNT(Packard)상에서 측정하였다. 결과를 하기 표 3에 나타낸다.

[표 3]

피지선 질환 치료제로서 화학식 1 화합물의 유용한 활성을 하기에 의해 입증할 수 있다.

생체외에서 인간 지방세포 증식의 억제

피지 세포를 성인의 피지선으로부터 효소적 및 기계적 방법의 조합(Doran et al., Characterization of Human Sebaceous Cells In Vitro, J. Invest. Dermatol. 96:341-8(1991))에 의해 단리시켰다. 상기 세포를 10% 송아지 태아 혈청 및 4 ㎍/㎖의 덱사메타손을 함유하는 Iscove의 배지에서 생육이 정지된 3T3 마우스 섬유아세포의 층상에 배양시켰다. 상기 세포들을 시험 화합물이 없는 배지에 도말하고 이어서 초기 도말후 24 내지 48 시간째에 새로운 배지에 시험 화합물을 가하였다. 배양물에 시험 화합물을 함유하는 새로운 배지를 매 48 시간마다 공급하였다. 수확일에, 배양물을 PBS(인산염 완충 염수)중의 0.03% EDTA(에틸렌디아민 테트라아세트산)로 세정하여 3T3 섬유아세포만을 제거한 다음, 0.05% 트립신/0.03% EDTA에서 배양하였다. 상기 세포들을 현탁시키고 격렬히 혼합하여 단일 세포 현탁액을 제조하고 혈구계에서 수를 세었다.

화합물의 모액을 탈기된 100% 에탄올중의 10^-2 M 용액으로서 제조하고 암실에서 -20 ℃에서 보관하였다. 실험 기간동안에는 분액된 상기 용액들을 실온으로 만들어 완전 배지내에 적합한 농도로 직접 희석시킴으로써 사용하였다.

화합물들을 생체외에서 10^-6, 10^-7 및 10^-8 M에서 피지 세포 생육의 증식 억제에 대해 시험하였다. 결과를 비히클-처리된 배양물에 비해 피지 세포의 증식을 50%까지 억제하는데 필요한 화합물의 양(ED₅₀)(nM)으로서 하기 표 4에 개략한다.

[표 4]

마우스에서 칼슘 내성 시험

칼슘 항상성의 현저한 변화는 마우스의 체중 증가에 강한 영향을 미친다.

마우스(25 내지 30 g의 체중)에게 연속적으로 4 일간 화합물을 매일 피하 투여하였다. 5 일의 처리 기간직전 및 상기 기간의 끝에서 체중을 기록하였다. "최고 내성 용량" (HTD)은 상기 처리 기간동안의 체중 증가가 0인 용량이다. 결과를 하기 표 5에 나타낸다.

[표 5]

화학식 1의 화합물은 피부에 국소적용시켰을 때, 일광 노출에 의해 야기된 피부 손상이 온화되고 지연되도록 광손상과 관련된 증상을 역전시킨다. 일광 노출에 의해 야기된 손상은 조기 노화, 탄력섬유증 및 주름을 포함할 수 있다. 이러한 손상은 노인 환자들에 있어 보다 두드러진다. 화학식 1의 화합물을 광손상과 관련된 증상들을 역전시키는데 유효한 양으로 피부에 국소적용시킴으로써, 피부복구가 가속화되어 피부를 보다 매끄럽고 젊게 향상시킨다. 화학식 1의 화합물을 광손상에 의해 영향을 받거나 치료가 요구되는 피부 부분 또는 영역에 적응시켜야 한다. 본 발명에 따른 화학식 1 화합물의 사용은 노화 방지 및 주름 방지의 효과를 제공할 뿐아니라, 일광 손상된 피부의 복구를 향상시킨다.

화학식 1의 화합물 또는 이들의 배합물을 본 발명에 따라 통상적인 국소 조성물로 인간의 피부에 적용시킬 수 있다. 이들 조성물을 사용하여 화학식 1의 화합물을 인체의 피부, 특히 안면, 다리, 팔 및 손에 적용시킬 수 있다. 최상의 효과를 얻기 위해서 화학식 1의 화합물을 국소적으로 적용시키는 바람직한 방법은 30 내지 55 세의 환자(탄력섬유증이 보이기 시작하고 보다 두드러지는 시기)에서 시작하는 것이다. 그 후에, 상기 조성물을 환자에게 연속적으로 적용시켜 일광 노출과 관련된 효과 및 상처를 감소시킬 수 있다. 일반적으로, 탄력섬유증의 효과를 감소시키고 광손상의 임의의 추가적인 진전을 예방하기 위해서 환자들이 대략 30세에 이르렀을 때 이러한 치료를 시작하여 그의 일생을 통해 상기 치료를 계속하는 것이 바람직하다.

화학식 1의 화합물을 본 발명에 따라 임의의 통상적인 적합한 국소 제제중에서, 즉 국소 투여에 유용한 임의의 적합한 통상적인 담체와 함께 투여할 수 있다. 따라서, 화학식 1의 화합물을 본 발명에 따라 임의의 적합한 국소적용 조성물, 예를들어 크림, 연고, 비누, 용액, 로션, 유화액, 샴푸 등으로 투여할 수 있다. 일반적으로, 가장 효과적인 결과를 위해서, 이들 국소적용 조성물은 화학식 1의 화합물을 전체 조성물의 약 0.00001 내지 약 0.1 중량% 함유하며, 약 0.0001 내지 약 0.01 중량%가 특히 바람직하다. 경우에 따라, 보다 많은 농도를 탄력섬유증의 성질 및 정도에 따라 사용할 수도 있다.

이들 조성물의 제형화에서, 화학식 1의 화합물이 안정할 수 있는 임의의 통상적인 무독성의 피부학적으로 허용가능한 염기 또는 담체를 사용할 수 있다. 본 발명에 사용하기에 바람직한 조성물은 인간의 피부에 국소적으로 투여하여 화장 효과를 제공하는 화장학적으로 활성인 성분을 함유할 수 있는 통상적인 화장료 조성물이다. 상기 조성물에 사용할 수 있는 통상적인 화장학적으로 활성인 물질로는 선스크린제, 침투 향상제, 가습제, 계면활성제, 연화제, 착색제, 컨디셔너, 살균제, 수렴제, 세제 등이 있다. 본 발명의 국소적용 조성물은 경우에 따라 적합한 선스크린제를 함유할 수 있다. 임의의 통상적인 선스크린제를 본 발명에 따라 사용할 수 있는 화학식 1의 화합물을 함유하는 제형을 제조하는데 사용할 수 있다.

화학식 1의 화합물을 함유하는 이들 국소적용 조성물은 국소적용 조성물의 제조에 흔히 사용되는 임의의 통상적인 부형제 및 첨가제를 함유할 수 있다. 본 발명에 따라 이들 화장료 조성물의 제조에 사용할 수 있는 통상적인 첨가제 또는 부형제들중에는 보존제, 증점제, 향료 등이 있다. 또한, 통상적인 산화방지제, 예를들어 부틸화된 하이드록시아니솔(BHA), 아스코빌 팔미테이트, 프로필 갈레이트, 시트르산, 부틸화된 하이드록시 톨루엔(BHT), 에톡시퀸, 토코페롤 등을 이들 조성물에 혼입시킬 수 있다. 이들 국소적용 조성물은 이들 조성물에 일반적으로 사용되는 국소 적용을 위해 통상적으로 허용되는 담체를 함유할 수 있다. 이들 조성물은 증점제, 보습제, 유화제 및 점도 안정제, 예를들어 일반적으로 사용되는 것들을 함유할 수 있다. 또한, 이들 조성물은 화장료 조성물의 제조에 통상적인 풍미제, 착색제 및 향료를 함유할 수 있다.

화학식 1의 화합물을 함유하는 국소적용 조성물을 피부에 적용시킬 수 있으며, 바람직하게 피부에 하루에 한 번 적용시켜야 한다. 피부에 매끄럽고 젊은 외관이 부여되도록 탄력섬유증을 역전시키기 위해서, 상기 국소적용 조성물을 바람직하게 6 개월간 적용시켜야 한다. 그 후에, 화학식 1의 화합물을 함유하는 조성물을 연속적으로 적용시켜 보다 젊고 매끄러운 피부 효과를 유지시켜야 한다. 이들 제제를 처방 의사의 판단에 의해 환자의 필요에 따라 적용시킬 수 있다. 어쨌든, 상기 조성물을 환자에게 적용시키기 위한 특별한 처방은 전형적으로 환자 개인의 연령, 체중 및 피부 상태에 따라 다를 것이다.

일광 노출된 피부의 광손상을 역전시키기 위한 화학식 1 화합물의 유용한 활성을 하기와 같이 측정할 수 있다:

화학식 1 화합물에 의한 털없는 마우스에서의 UVB-유발된 피부 손상의 복구

털없는 마우스(암컷, HRS/J 계통, Jackson Labs, 실험 출발시 5 내지 7 주된 것)를 황색 광하에서 수용하고, 상기 동물위 약 20 cm 높이에서 8 개의 웨스팅하우스 선램프(FS72T12 HO, 313 nm에서 피이크 조사) 뱅크를 놓고 주당 3 회 조사하였다. UVB 출력을 SEE240 검출기를 사용하여 인터내셔날 라이트 리서치 라디오미터(International Light Research Radiometer, 모델 IL 1700)상에서 측정하였다. 이러한 장치를 사용하여, 램프 출력은 대략 3.5 mW/㎠이고, 0.06 J/㎠에 대한 노출시간은 약 17 초였으며; 1 MED는 대략 0.03 J/㎠이다. 정확한 용량을 IL 844A 포토테라피 익스포져 콘트롤(Phototherapy Exposure Control)로 전달하였다. 1일 용량은 대략 4 J/㎠의 총 용량이 축적될 때까지 2 주간 0.03 J/㎠, 2 주간 0.06 J/㎠, 그후에 0.08 J/㎠이었다. 피부 손상을 복구하기 위해서, UVB 조사를 중단하고 동물들을 대략 8 개의 그룹으로 나누어 에탄올에 용해된 다양한 농도의 비타민 D 동족체로 매주 3 회 처리하였다. 모든 투여는 황색 광하에서 수행하였다. 아세톤만으로 처리한 대조용 그룹도 포함시켰다. 등쪽 피부를 2 cm의 스트립으로 조사(및 처리)된 부위를 중심으로 종방향으로 취하였다. 엘라스틴 섬유를 반 지슨(Van Gieson)에 의해 루나(Luna)의 알데히드 푹신 및 콜라겐으로 염색하였다. 이 모델에서, 복구는 압축된 엘라스틴 층 아래의 표피로부터 연장된 정상화된 진피의 외관에 의해 정의한다. 복구의 정도는 상기 대역의 너비로 반영된다. 이 연구에서, 상기 대역의 너비는 상당히 가변적이기 때문에, 조직 부위의 표준 길이상의 상기 대역의 영역을 영상 분석에 의해 측정한다. 화합물들을 3 회 용량으로 시험하고 대략적인 ED₅₀을 계산한다. 결과를 하기 표 6에 나타낸다.

[표 6]

^* P<0.05, ^** P<0.01, ^*** P<0.001 대 비히클 농도

화합물 A는 1,25-디하이드록시-16,23E-디엔-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤이다.

하기 실시예들을 본 발명을 추가로 개시하기 위해서 제공하며, 어떠한 방식으로도 상기를 제한하고자하는 것은 아니다.

실시예 1

디클로로메탄 75 ㎖중의 [1R-[1α(S^*),3aα,4β,7aβ]]-옥타하이드로-4-하이드록시-β,7a-디메틸-1H-인덴-1-에탄올의 자기 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 아세트산 무수물(33.8 g, 331 mmol) 47 ㎖을 가한 다음, 피리딘 53.3 ㎖ 및 디메틸 아미노피리딘 1.0 g을 가하였다. 3.5 시간 후에, 메탄을 25 ㎖을 가하였다. 15분 후에, 반응 혼합물을 1M 인산 750 ㎖에 붓고, 디클로로메탄 400 ㎖을 가하였다. 상들을 분리시키고 수성상을 디클로로메탄 500 ㎖로 2 회 더 추출하였다. 유기상을 물 250 ㎖로 세척한 다음 1M 중탄산 나트륨 750 ㎖로 세척하여, Na₂SO₄로 건조시키고 여과하고 증발시킨 후에 백색 고체로서 [1R-[1α(S^*),3aα,4β,7aβ]]-4-(아세틸옥시)-옥타하이드로-β,7a-디메틸-1H-인덴-1-에탄올 아세테이트 19.85 g을 수득하였다.

실시예 2

메탄을 200 ㎖중의 [1R-[1α(S^*),3aα,4β,7aβ]]-4-(아세틸옥시)-옥타하이드로-β,7a-디메틸-1H-인덴-1-에탄올 아세테이트 20.81 g(20.6 mmol)의 자기 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 탄산 나트륨 8.18 g(77.2 mmol)을 가하였다. 현탁액을 16 시간동안 교반하고 이어서 대부분의 메탄올을 감압하에 회전 증발기상에서 제거하였다. 농축물을 물 300 ㎖과 에테르 250 ㎖사이에 분배시켰다. 수성상을 에테르 250 ㎖로 3 회 더 추출하고 에테르 상을 물 300 ㎖로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 여과하고 증발시켜 조 생성물 18.02 g을 수득하였다. 중간 압력 LC(Waters 500)상에서 2:1 헥산-에틸 아세테이트로 용출시키면서 크로마토그래피시켜 1.42 g의 가수분해되지 않은 디아세테이트, 무색 오일로서 [1R-[1a(S^*),3aα,4β,7aβ]]-4-(아세틸옥시)-옥타하이드로-β,7a-디메틸-1H-인덴-1-에탄올 16.08 g(수율 90%)을 수득하였다.

실시예 3

자기 교반기, 온도계 및 적가 깔때기가 장착되고 아르곤 분위기하에서 유지되는 2 ℓ의 3 목 플라스크에 디클로로메탄 50 ㎖중의 옥살릴 클로라이드 6.62 ㎖ (75.8 mmol)을 충전시켰다. 상기 플라스크를 드라이 아이스-아세톤 욕에서 -65 ℃로 냉각시키고; 이어서 디클로로메탄 125 ㎖중의 디메틸 설폭사이드 10.7 ㎖(151 mmol)의 용액을 -62 내지 -63 ℃의 온도를 유지시키면서 20 분에 걸쳐 빠른 속도로 적가하였다. 상기 첨가후에, 반응물을 추가로 5 분간 교반하고; 이어서 디클로로메탄 200 ㎖중의 [1R-[1a(S^*),3aα,4β,7aβ]]-4-(아세틸옥시)-옥타하이드로-β,7a-디메틸-1H-인덴-1-에탄올 16.0 g(4 Å 분자체상에서 건조된 것) 용액을 -65 ℃의 온도를 유지시키면서 20 분에 걸쳐 적가하였다. 상기 첨가동안 침전물이 형성되었다. -70 ℃에서 추가로 20 분 후에, 무수 디클로로메탄 75 ㎖중의 트리에틸아민 42.1 ㎖(302 mmol) 용액을 15 분에 걸쳐 가하였다. 현탁액을 45 분간 교반하고, 냉각욕을 제거하고, 반응 혼합물을 실온에 도달하게 한다(1.5 시간). 감압하에(실온 욕) 회전 증발기상에서 대부분의 디클로로메탄을 제거하고 잔사를 물 500 ㎖ 및 에테르 750 ㎖로 평형화시켰다. 수성상을 에테르 750 ㎖로 3 회 추출하고 에테르 상을 물 500 ㎖로 역류 방식으로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 여과하고 감압하에서 증발시킨 후에 조 생성물 15.36 g을 수득하였다. 용출제로서 4:1 헥산-에테르를 사용하여 실리카겔 상에서 중간 압력 크로마토그래피시켜 무색 오일로서 [1R-[1a(S^*),3aα,4β,7aβ]]-4-(아세틸옥시)-옥타하이드로-α,7a-디메틸-1H-인덴-1-아세트알데히드 14.95 g(수율 94%)을 수득하였다.

실시예 4

에테르 10 ㎖중의 [1R-[1α(S^*),3aα,4β,7aβ]]-4-(아세틸옥시)-옥타하이드로-α,7a-디메틸-1H-인덴-1-아세트알데히드 2.0 g(7.95 mmol)의 자기 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 10% 목탄상 팔라듐 100 mg을 가하였다. 주변 온도에서 20 분 후에, 상기 현탁액을 여과하였다. 여액을 감압하에서 증발시켰다. 잔사에 벤잘아세톤 1.40 g(9.5 mmol) 및 10% 목탄상 팔라듐 200 mg을 가하였다. 상기 플라스크를 배기시키고 아르곤을 재충전시켜 상기 현탁액을 탈기시켰다. 이어서, 상기 플라스크를 230℃ 오일 욕에 30분간 부분적으로 침지시켰다. 냉각시킨 후에, 상기 플라스크의 내용물을 실리카겔 100 g상에서 플래시 크로마토그래피시켜 Δ^17E, Δ^17Z, Δ¹⁶ 및 Δ²⁰ 인덴 올레핀의 평형 혼합물(이들은 각각 65:4:27:4의 비로 존재한다)로부터 보다 극성인 벤잘아세톤 및 그의 환원 생성물(벤질아세톤)을 제거하였다. 질산은 함유 실리카겔 컬럼(2회 통과)상에서 중간압력 크로마토그래피에 의해 보다 덜 극성인 올레핀(용출순으로 Δ^17Z, Δ¹⁶ 및 Δ²⁰)으로부터 목적하는 생성물(Δ^17E)을 분리시켰다. 아세토니트릴중의 질산 은 10% 용액으로 분무하고 사용전에 공기 건조시킨 tlc 플레이트에 의해 상기 생성물을 정제시킬 수 있다. 따라서, [3aR-[1E,3aα,4β,7aβ]]-1-에틸리덴옥타하이드로-7a-메틸-1H-인덴-4-올 아세테이트 총 976 mg(수율 55%)을 무색 오일로서 수득하였다.

보다 극성인 올레핀 혼합물(420 mg, 수율 24%)을 편의상 후속적인 알데히드 단편화 반응에 첨가하여 재평형화시킬 수 있다.

실시예 5

[3aS-[3(1R^*,2R^*S^*,3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[2-하이드록시-1-메틸-4-(트리메틸실릴)-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 아세테이트

교반기, 적가 깔때기, 온도계 및 아르곤 유입구가 장착된 화염 건조된 2 ℓ 3목 플라스크를 [3aR-[1E,3aα,4β,7aβ]]-1-에틸리덴옥타하이드로-7a-메틸-1H-인덴-4-올 아세테이트 22.3 g(100 mmol) 및 무수 디클로로메탄 300 ㎖로 충전시켰다. 상기 용액을 필요에 따라 드라이 아이스를 가하여 아세톤 욕으로 -20 ℃로 냉각시켰다. 이 시점에서, 시약들을 증분적으로 가하였다. 초기에, 헥산중의 1M 디메틸-알루미늄 클로라이드 200 ㎖(200 mmol)을 5 분에 걸쳐 급속히 적가한 다음, 10 분 후에, 무수 디클로로메탄으로 260 ㎖로 희석시킨 3-트리메틸-실릴프로피날 55.5 g(500 mmol) 용액 50 ㎖을 1 시간에 걸쳐 서서히 적가하였다. 시약들의 첨가를 이러한 방식으로,헥산중의 1M 디메틸알루미늄 클로라이드 100 ㎖(100 mmol)을 급속히 가한 다음, 3-트리메틸실릴프로피날 용액 50 ㎖을 1 시간에 걸쳐 서서히 가하는 것을 4 회 더 반복하였다. TLC(CH₂Cl₂-Et₂O, 98:2)에 의해 출발 올레핀이 없음을 확인하였고, 반응 혼합물을 격렬히 교반하면서 20% 로첼 염 용액 2 ℓ에 붓고, 여기에 약 500 g의 얼음을 가하였다(최종 온도는 20 ℃이었다). 4N 수산화 나트륨 25 ㎖을 첨가하여 상기 혼합물을 알칼리성으로 만들고 에테르 1 ℓ를 가하였다. 상들을 분리시키고 에테르상을 염수 500 ㎖로 세척하였다. 수성상을 에테르 1.5 ℓ로 역류방식으로 2 회 추출하여, Na₂SO₄로 건조시킨 후에, 감압하에서 여과 및 증발시켜 오일 78 g을 수득하였다. 실리카겔상에서 중간압력 크로마토그래피는 부산물인 4-트리메틸실릴-3-부틴-2-올로부터의 생성물의 분리가 어려운점으로 인해 복잡하다. 후속적으로, 4-트리메틸실릴-3-부틴-2-올의 휘발성으로 인해 이를 상기 크로마토그래피 분획들로부터 제거할 수 있는 잇점이 있다. 따라서, 보다 극성인 순수한 주 이성체 25.54 g, 주 및 부 이성체의 87:13 혼합물(NMR에 의해 추정) 2.07 g 및 순수한 부 이성체 0.53 g을 수득하였다. 생성물의 총 수율은 79%(주 이성체의 수율 77%)이었다.

주 이성체의 분석 샘플인 [3aS-[3(1R^*,2S^*,3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[2-하이드록시-1-메틸-4-(트리메틸실릴)-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 아세테이트(융점 66-67 ℃)를 에틸 아세테이트-헥산으로부터 백색 고체로서 수득하였다.

부 이성체의 분석 샘플인 [3aS-[3(1R^*,2R^*,3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[2-하이드록시-1-메틸-4-(트리메틸실릴)-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 아세테이트를 무색 오일로서 수득하였다.

실시예 6

무수 디클로로메탄 300 ㎖ 및 무수 피리딘 23.3 ㎖중의 [3aS-[3(1R^*,2S^*,3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[2-하이드록시-1-메틸-4-(트리메틸실릴)-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 아세테이트 24.2 g(69 mmol)의 자기 교반된 용액에 페닐 클로로-티오노포르메이트 25.0 g(145 mmol)을 가하였다. 황갈색이 나타났다. 반응 혼합물을 3 시간동안 교반하고 이어서 메탄을 10 ㎖을 가하였다. 15 분 후에, 반응 혼합물을 1 ℓ의 에테르를 함유하는 분별 깔때기로 옮겼다. 에테르상을 1M 인산 2 x 250 ㎖, 물 500 ㎖ 및 1M 중탄산 나트륨 500 ㎖로 연속적으로 세척하였다. 수성상을 에테르 500 ㎖로 역류 방식으로 추출하였다. 합한 에테르상들을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에서 증발시켜 조 생성물 47 g을 수득하였다. 실리카겔 500 g상에서 플래시 크로마토그래피시켜 티오노카보네이트 에스테르 33.4 g(정량적인 수율)을 수득하였다.

톨루엔 500 ㎖중의 상기 티오노카보네이트 에스테르 33.4 g(69 mmol)이 충전된, 교반기, 적가 깔때기, 온도계 및 아르곤 유입구가 장착된 2 ℓ의 3 목 플라스크에 트리-n-부틸틴 하이드라이드 135 ㎖(500 mmol)을 5 분에 걸쳐 급속히 적가하고, 이어서 트리에틸보란 267 ㎖(276 mmol)을 15 분에 걸쳐 가하였다. 1.3 시간 후에, 추가로 15 ㎖(56 mmol)의 트리-n-부틸딘 하이드라이드를 가하였다. 50 분 후에, 반응 혼합물을 10% 중탄산 나트륨 500 ㎖에 붓고 에테르 500 ㎖을 가하였다. 수성상을 에테르 500 ㎖로 2 회 추출하였다. 에테르상을 역류방식으로 물 250 ㎖ 로 3 회 세척하고; Na₂SO₄로 건조시킨 후에, 여과하고, 감압하에서 증발시켜 조 생성물을 수득하고, 이를 실리카겔 500 g상에서 플래시 크로마토그래피시켰다. 디클로로메탄 용액중의 생성물 함유 분획을 10% 탄산 나트륨으로 세척하여 상기 반응에서 형성된 페놀을 제거하였다. 중간 압력 크로마토그래피는 부산물의 제거를 위해 수회의 통과를 필요로 하며, 상기에 의해 무색 오일로서 순수한 [3aS-[(1S^*,3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-4-(트리메틸실릴)-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 아세테이트 16.13 g(70%)을 수득하였다.

실시예 7

3aS-[(1(S^*),3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올

에탄을 50 ㎖중의 [3aS-[(1S^*,3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-4-(트리메틸실릴)-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 아세테이트 5.01 g(15 mmol) 용액에 2N 수산화 나트륨 30 ㎖(60 mmol)을 가하고 80 ℃에서 4 시간동안 가열하였다. 이어서 상기를 500 ㎖의 물-염수(1:1)로 희석하고 에틸 아세테이트로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(4:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 3.14 g(95.4%)을 수득하였다.

실시예 8

3aS-[1(S^*),3aβ,7β,7aα]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-3-부티닐]-3a-메틸-7-[(트리메틸실릴)옥시]-1H-인덴

무수 염화 메틸렌 30 ㎖중의 [3aS-[1(S^*),3aβ,7β,7aα)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-3-부티닐]-3a-메틸-1H-인덴-7-올 3.14 g(14.4 mmol) 용액에 1-(트리메틸실릴)이미다졸 4.22 ㎖(28.8 mmol)을 가하고 반응 혼합물을 실온에서 1 시간동안 교반하였다. 이어서 상기를 분쇄된 얼음을 가하고 15 분간 교반함으로써 급냉시켰다. 물 및 염수로 희석한 후에, 상기를 헥산으로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-염화 메틸렌(40:1)을 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 3.55 g(85%)을 수득하였다.

실시예 9

[1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-4-[(트리메틸실릴)옥시]-3H-인덴

무수 에테르 15 ㎖중의 3aS-[1(S^*),3aβ,7β,7aα]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-3-부티닐]-3a-메틸-7-[(트리메틸실릴)옥시]-1H-인덴 612 mg(2.10 mmol) 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 1.6 ㎖(2.52 mmol)을 가하였다. -78 ℃에서 1 시간동안 교반한 후에, 무수 아세톤 1.5 ㎖(21 mmol)을 가하고 1 시간동안 계속 교반하였다. 반응물을 물-염수(1:1)로 급냉시키고 에틸 아세테이트로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 헥산-에틸 아세테이트(9:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 분리시켜 출발 물질 166 mg(27%)을 재생성시키고, 표제 화합물 521 mg(71%)을 수득하였다.

실시예 10

[1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올

무수 테트라하이드로푸란 10 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-4-[(트리메틸실릴)옥시]-3H-인덴 521 mg(1.50 mmol)의 교반된 용액에 1M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3 ㎖(3 mmol)을 가하였다. 혼합물을 실온에서 1.5 시간동안 교반하고, 이어서 물 및 염수로 희석하고, 에틸 아세테이트로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 조 생성물은 결정성이었다. 상기를 헥산으로부터 재결정시켜 표제 화합물(융점 115-116 ℃)(헥산으로부터) 360 mg(87%)을 수득하였다.

실시예 11

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 7 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올 240 mg(0.868 mmol)의 용액에 피리디늄 디크로메이트 980 mg(2.6 mmol)을 가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 2 시간동안 교반하고, 이어서 추가로 피리디늄 디크로메이트 500 mg(1.33 mmol)을 가하고, 2.25 시간동안 계속 교반하였다. 에테르 30 ㎖을 가하고 15 분간 교반한 후에, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 상기 셀라이트 패드를 에틸 아세테이트 3 x 50 ㎖로 세척하였다. 합한 여액을 1N HCl 20 ㎖, 물, 2N 중탄산 칼륨 40 ㎖, 및 물과 염수의 1:1 혼합물로 세척하였다. 수성층들을 2 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 재추출하였다. 합한 유기층들을 황산 나트륨 상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(2:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 214 mg(89%)을 수득하였다.

실시예 12

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헥시닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 7 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온 214 mg(0.78 mmol)의 용액에 1-(트리메틸실릴)-이미다졸 750 mg(4.7 mmol)을 가하였다. 혼합물을 실온에서 아르곤 분위기하에 17 시간동안 교반하고, 이어서 물 5 ㎖로 급냉시키고 20 분간 교반하였다. 이어서 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 합하고 5 x 50 ㎖의 물과 염수의 혼합물로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산 에틸 아세테이트(12:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 255 mg(94%)을 수득하였다.

실시예 13

1,25-디하이드록시-16-엔-23-인-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 7 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드(공지 화합물) 730 mg(1.25 mmol)의 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 헥산 중의 1.6 M n-부틸리튬 0.78 ㎖(1.25 mmol)을 적가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기와 같이 수득된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4.5 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헥시닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온 255 mg(0.736 mmol) 용액을 10 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 -78 ℃에서 90 분간 교반하였다. 이어서 반응물을 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 추가로 30 ㎖의 로첼 염/중탄산 칼륨 용액 30 ㎖을 가하고 반응 혼합물을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(40:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 트리실릴화된 중간체 467 mg(89%)을 수득하였다. 무수 테트라하이드로푸란 4.5 ㎖중의 상기 트리실릴화된 중간체(467 mg) 용액에 테트라하이드로푸란중의 1M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 7 ㎖(7 mmol)을 가하고 이 혼합물을 실온에서 아르곤 분위기하에 17 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 물 5 ㎖을 가하고 20 분간 교반하여 급냉시켰다. 이어서 테트라하이드로푸란을 진공하에서 제거하고, 잔사를 물로 희석하고 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 건조 증발시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(1:5)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 결정성 표제 화합물 250 mg(83%)을 수득하였다. 상기를 메틸 포르메이트 7 ㎖을 가하여 테트라하이드로푸란 1.5 ㎖로부터 재결정시켰다(융점 148-149 ℃).

실시예 14

[1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3Z-헥세닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올

[1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3-헥시닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올 1.02 g(3.6 mmol), 에틸 아세테이트 13.5 ㎖, 헥산 34 ㎖, 절대 에탄올 1.3 ㎖, 퀴놀린 0.067 ㎖ 및 린들라 촉매 225 mg의 혼합물을 실온에서 3.5 시간동안 수소화시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이를 후속적으로 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 1N HCl, 물, 2N 중탄산 칼륨, 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔을 사용하여 헥산-에틸 아세테이트(3:2)로 예비 HPLC에 의해 정제시켜 표제 화합물(융점 88-90 ℃)(CH₂Cl₂-헥산으로부터) 954 mg(92.6%)을 수득하였다.

실시예 15

[1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-헥사닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올

무수 염화 메틸렌 35 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-3Z-헥세닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올 601 mg(2.16 mmol)의 용액에 1,4-비스(디페닐포스페노)부탄 1,5-사이클로-옥사디엔 로듐 테트라플루오로보레이트 120 mg 및 한 방울의 수은을 가하고 이어서 실온 및 50 psi의 압력에서 파르 장치를 사용하여 1.25 시간동안 수소화시켰다. TLC(헥산-에틸 아세테이트, 3:2)는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이어서 이를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 증발건조시켰다. 헥산-에틸 아세테이트(3:2)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시키고, 이어서 실리카겔 컬럼을 사용하여 헥산-에틸 아세테이트(3:2)(100 ㎖/분)로 예비 HPLC에 의해 정제시켜 결정성 표제 화합물 550 mg(91%)을 수득하였다.

실시예 16

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시-헥사닐)-7a-메틸-4-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 7 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시헥사닐)-7a-메틸-3H-인덴-4-올 270 mg(0.963 mmol)의 용액에 피리디늄 디크로메이트 1.58 g(4.2 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4.75 시간동안 교반하였다. 이어서 상기를 에테르 25 ㎖로 희석하고, 추가로 15 분간 교반하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 상기 패드를 3 x 50 ㎖의 에테르로 세척하였다. 합한 여액을 2N 중탄산 칼륨 40 ㎖ 및 물-염수 혼합물로 세척하였다. 수성층들을 2 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(2:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 254 mg(95%)을 수득하였다.

실시예 17

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-헥사닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 6 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-하이드록시헥사닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온 254 mg(0.912 mmol)의 용액에 1-(트리메틸실릴)-이미다졸 0.8 ㎖(5.45 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 아르곤하에 4.25 시간동안 교반하였다. 이어서 물 5 ㎖을 가하고 20 분간 교반하여 상기를 급냉시키고, 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 상기 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(12:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 308 mg(96%)을 수득하였다.

실시예 18

1,25-디하이드록시-16-엔-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 9 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌 사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 850 mg(1.46 mmol)의 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.91 ㎖(1.46 mmol)을 적가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기와 같이 수득된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4.5 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-1-(1,5-디메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]헥사닐)-7a-메틸-4H-인덴-4-온 308 mg(0.878 mmol) 용액을 10 분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 추가로 30 ㎖의 로첼 염/중탄산 칼륨 30 ㎖을 가하고 반응 혼합물을 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 헥산-에틸 아세테이트(50:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 실릴화된 중간체 541 mg을 수득하였다. 무수 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 상기 중간체 용액에 테트라하이드로푸란중의 1M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 5.5 ㎖(5.5 mmol)을 가하고 이 혼합물을 실온에서 아르곤 분위기하에 23 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 물 5 ㎖을 가하고 20 분간 교반하여 급냉시켰다. 염수 25 ㎖을 가한 후에, 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 건조 증발시켯다. 조 생성물을 먼저 헥산-에틸 아세테이트(1:9)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시키고, 이어서 에틸 아세테이트로 HPLC(실리카겔 컬럼)에 의해 정제시켜 결정성 표제 화합물 296 mg(81%)을 수득하였다(융점 124-125 ℃)(메틸 포르메이트).

실시예 19

[3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-4-[(트리메틸실릴)옥시]-3H-인덴

기체 유입구가 장착된 100 ㎖의 하트형 플라스크에 무수 테트라하이드로푸란 25 ㎖중의 [3aS-[1(S^*),3aβ,7β,7aα]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-3-[1-메틸-3-부티닐]-3a-메틸-7-[(트리메틸실릴)옥시]-1H-인덴 1 g(3.44 mmol) 용액을 넣었다. -78 ℃에서 냉각시킨 후에, 헥산중의 1.6M n-부틸리튬 3.2 ㎖(5.16 mmol)을 10 분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 30 분간 교반하였다. 무수 테트라하이드로푸란 10 ㎖을 가한 후에, 헥사플루오로아세톤의 증기를 상기 혼합물중에 1 분간 발포시켰다. 1 시간 15 분동안 교반한 후에 TLC는 반응이 약 70% 완료되었음을 나타내었다. 이 시점에서 반응물을 25 ㎖의 포화 염수를 가하고, 실온으로 가온시킴으로써 급냉시켰다. 이어서 상기를 헥산으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(10:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켰다. 이에 의해 출발 물질 270 mg(27%) 및 표제 화합물 1.15 g(73%)을 수득하였다.

두번째 실험에서, 무수 테트라하이드로푸란 20 ㎖중의 출발 아세틸렌 1.38 g(4.75 mmol)의 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 4.5 ㎖(7.2 mmol)을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 30 분간 교반한 후에, 헥사플루오로아세톤을 2 분간 느린 속도로 발포시키고, 30 분간 교반하고, 추가로 1 분간 발포시키고, 60 분간 교반하고, 최종적으로 30 초간 발포시키고 30 분간 교반하였다. 이때 TLC는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 이 실험에서, 반응물을 2N 로첼 염으로 급냉시키고, 헥산-에틸 아세테이트(14:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 1.97 g(91%)을 수득하였다.

실시예 20

[3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-3H-인덴-4-올

무수 테트라하이드로푸란 20 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-4-[(트리메틸실릴)옥시]-3H-인덴 1.17 g(2.56 mmol) 용액에 테트라하이드로푸란중의 1M 테트라부틸 암모늄 플루오라이드 7.12 ㎖(7.12 mmol)을 가하고 아르곤 분위기하에서 3.5 시간동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 물-염수 1:1 혼합물 250 ㎖로 희석하고, 에틸 아세테이트로 철저히 추출하였다. 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 건조증발시켰다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜, 헥산으로부터 재결정시킨 후에 표제 화합물 946 mg(96%)을 수득하였다: 융점 75-76 ℃.

실시예 21

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-4H-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 10 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-3H-인덴-4-올 284 mg(0.74 mmol)의 용액에 피리디늄 디크로메이트 2.15 g(5 mmol)을 나누어 가하고 반응 혼합물을 실온에서 5 시간동안 교반하였다. 에테르 50 ㎖을 가하고 15 분간 교반한 후에, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이를 후속적으로 3 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 2N HCl, 물, 2N 중탄산 칼륨, 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(3:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 결정성 표제 화합물 259 mg(91%)을 수득하였다.

실시예 22

1,25-디하이드록시-16-엔-23-인-26,57-헥사하이드로플루오로-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 10 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌 사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 987 mg(1.69 mmol)의 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 핵산중의 1.6 M n-부틸리튬 1.05 ㎖(1.69 mmol)을 적가하였다. 15 분간 교반한 후에, 상기와 같이 수득된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-4H-인덴-4-온 259 mg(0.677 mmol) 용액을 적가하고, 수득된 반응 혼합물을 -78 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 2N 로첼 염 용액을 가하고 실온으로 가온시켜 급냉시켰다. 포화 염수를 가한 후에, 상기를 에틸 아세테이트로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 헥산-에틸 아세테이트(9:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 디실릴 에테르 중간체 370 mg을 수득하였다. 무수 테트라하이드로푸란 10 ㎖중의 상기 중 간체(370 mg) 용액에 테트라하이드로푸란중의 1M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3 ㎖(3 mmol)을 가하고 수득된 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서 반응물을 물 및 염수로 희석시키고 4 x 50 ㎖의 에틸 아세테이트로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 건조 증발시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(1:4)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 포움으로서 표제 화합물 249 mg(71%)을 수득하였다.

실시예 23

[3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ]]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3E-헥세닐]-3H-인덴-4-올

무수 테트라하이드로푸란 15 ㎖중의 리튬 알루미늄 하이드라이드 165 mg(4.34 mmol)의 아르곤하에서 교반된 현탁액(얼음욕에서 냉각)에 먼저 고체 나트륨 메톡사이드 235 mg(4,34 mmol)을 가하고, 이어서 무수 테트라하이드로푸란 10 ㎖중에 용해된 [3aR-[1(S^*),3aα,4,7aβ]]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-3H-인덴-4-올 334 mg(0.87 mmol)을 적가하였다. 수득된 반응 혼합물을 2.5 시간동안 가열환류(80 ℃)시키고, 이때 TLC는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 혼합물을 얼음-욕에서 냉각시키고, 이어서 물 1 ㎖ 및 2N 수산화 나트륨 1 ㎖로 조심스럽게 급냉시켰다. 에테르 20 ㎖을 가한 후에, 상기를 0.5 시간동안 교반하고, 황산 마그네슘 2.2 g을 가하고, 0.5 시간동안 교반하고, 여과하고 증발건조시켜 결정성 표제 화합물(TLC순수함) 335 mg(100%)을 수득하였다.

실시예 24

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3E-헥세닐]-4H-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 10 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ)]-3a,4,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3E-헥세닐]-3H-인덴-4-올 256 mg(0.66 mmol)의 용액에 피리디늄 디크로메이트 1.12 g(3 mmol)을 나누어 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 4 시간동안 교반하였다. 에테르 25 ㎖을 가하고 15 분간 교반한 후에, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이를 후속적으로 3 x 20 ㎖의 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 여액을 2N 중탄산 칼륨, 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 증발건조시켰다. 조 생성물을 염화 메틸렌-에틸 아세테이트(9:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 결정성 표제 화합물 230 mg(90%)을 수득하였다.

실시예 25

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-(트리메틸실릴)옥시-1-메틸-5-트리플루오로메틸-3E-헥세닐]-4H-인덴-4-온

실온에서 무수 염화 메틸렌 8㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3E-헥세닐]-4H-인덴-4-온 268 mg(0.697 mmol)의 교반된 용액에 1-(트리메틸실릴)-이미다졸 0.92 ㎖(6.27 mmol)을 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 물로 희석하고 헥산으로 철저히 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 중성으로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(9:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물 310 mg(97%)을 수득하였다.

실시예 26

1,25-디하이드록시-16,23E-디엔-26,57-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 15 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌 사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 725 mg(1.24 mmol)의 교반된 용액에 아르곤 분위기하에서 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.78 ㎖(1.24 mmol)을 적가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기와 같이 수득된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 9 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-(트리메틸실릴)옥시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3E-헥세닐]-4H-인덴-4-온 307 mg(0.672 mmol) 용액을 적가하고, 수득된 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2.5 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 물로 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 물로 추가로 희석한 후에, 상기를 3 x 30 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 수득된 디실릴에테르 중간체를 헥산-에틸 아세테이트(9:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 순수한 중간체(반응 도중 25-실릴옥시 그룹이 가수분해됨) 449 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 10 ㎖중의 상기 중간체(449 mg) 용액에 테트라하이드로푸란중의 1M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3.6 ㎖(3.6 mmol)을 가하고 수득된 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서 반응물을 얼음으로 급냉시키고, 15 분간 교반하고, 물 및 염수로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 물로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 건조 증발시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(1:2)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 포움으로서 표제 화합물 291 mg(83%)을 수득하였다.

실시예 27

[3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3Z-헥세닐]-3H-인덴-4-올

[3aR-[1(S^*)-3aα,4β,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-3H-인덴-4-올 1.62 g(4.21 mmol), 에틸 아세테이트 16 ㎖, 헥산 40 ㎖, 절대 에탄올 1.6 ㎖, 퀴놀린 0.080 ㎖ 및 린들라 촉매 320 mg의 혼합물을 수소 분위기하에 실온에서 70 분간 교반하였다. 이어서 상기를 셀라이트상에서 여과하고 필터 케이크를 3 x 60 ㎖의 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 1N HCl 25 ㎖로 세척하고, 물과 염수의 혼합물로 4 회 세척하였다. 수성층을 2 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(3:1)(100 ㎖/분)로 HPLC에 의해 정제시켜 백색 고체로서 표제 화합물 1.51 g(93%)을 수득하였다.

실시예 28

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3Z-헥세닐]-4H-인덴-4-온

염화 메틸렌 14 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,4β,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3Z-헥세닐]-3H-인덴-4-올 750 mg(1,94 mmol)의 용액에 피리디늄 디크로메이트 3.64 g(9.68 mmol)을 나누어 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5 시간동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물에 에테르 30 ㎖을 가하고, 15 분간 교반하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고 상기 패드를 3 x 50 ㎖의 에테르로 세척하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 2 x 100 ㎖로 추출하였다. 합한 여액을 2N 중탄산 칼륨(50 ㎖)으로 세척하고 물 및 염수(1:1)로 3 회 세척하였다. 합한 유기층들을 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 고체로서 표제 화합물 720 mg(96.5%)을 수득하였다.

실시예 29

[1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-트리메틸실릴옥시-1-메틸-5-트리플루오로메틸-3Z-헥세닐]-4H-인덴-4-온

무수 염화 메틸렌 13 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-트리플루오로메틸-3Z-헥세닐]-4H-인덴-4-온 720 mg(1.87 mmol)의 교반된 용액에 실온에서 1-트리메틸실릴-이미다졸 1.86 ㎖(12.68 mmol)을 가하고, 반응 혼합물을 아르곤 분위기하에서 17 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 물 7 ㎖로 급냉시키고, 15 분간 교반하고, 염수 20 ㎖을 가하고 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 염수로 5 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(9:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 비결정성 표제 화합물 825 mg(96.5%)을 수득하였다.

실시예 30

1,25-디하이드록시-16,23Z-디엔-26,57-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 6 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 555 mg(0.952 mmol)의 교반된 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 핵산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.595 ㎖(0.952 mmol)을 적가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기와 같이 수득된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-트리메틸실릴옥시-1-메틸-5-트리플루오로메틸-3Z-헥세닐]-4H-인덴-4-온 270 mg(0.591 mmol) 용액을 적가하고, 수득된 반응 혼합물을 -78 ℃에서 1.75 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 2N 로첼염 10 ㎖을 가하고 실온으로 가온시켜 급냉시켰다. 이어서 상기를 2N 로첼염 30 ㎖로 희석하고 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 실릴화된 조 중간체를 헥산-에틸 아세테이트(10:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 순수한 중간체 355 mg을 수득하였다. 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 상기 중간체 용액에 테트라하이드로푸란중의 1M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3.8 ㎖(3.8 mmol)을 아르곤하에서 가하고 반응 혼합물을 실온에서 19 시간동안 교반하였다. 이어서 반응물을 물 5 ㎖로 급냉시키고 15 분간 교반하였다. 염수 20 ㎖로 희석한 후에, 상기를 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 물과 염수의 혼합물로 4 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 건조 증발시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸 아세테이트(1:3)를 사용하여 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜(테트라하이드로푸란-메틸 포르메이트 재결정으로부터) 결정성 표제 화합물 237 mg(77%)을 수득하였다; 융점 120-122 ℃.

실시예 31

1,25-디하이드록시-16,23Z-디엔-26,57-헥사플루오로-20-에피-19-노르-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 7 ㎖중의 [3R-(3α,5β,Z)-3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 700 mg(1.23 mmol)의 용액을 드라이 아이스 욕에서 -78 ℃로 냉각시키고, 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.77 ㎖(1.23 mmol)로 처리하고 아르곤 분위기하에서 5 분간 교반하였다. 여기에 10 분에 걸쳐 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-트리메틸실릴옥시-1-메틸-5-트리플루오로메틸-3Z-헥세닐]-4H-인덴-4-온 277 mg(0.607 mmol)의 용액을 적가하였다. 수득된 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 2N 로첼 염 10 ㎖을 가한 후에, 상기를 실온으로 가온시켰다. 2N 로첼염 25 ㎖로 추가로 희석한 후에, 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층들을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(10:1)에 이어서 헥산-에틸 아세테이트(1:3)로 용출시키면서 크로마토그래피시켜 고리 A 전구체를 회수하고, 이로부터 고리 A 디실릴화된 표제 화합물 329 mg를 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 2.5 ㎖중의 디실릴화된 표제 화합물 329 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 4.4 ㎖(4.4 mmol)을 가하고, 반응 혼합물을 65 시간동안 실온에서 교반하였다. 이어서 상기를 물 10 ㎖로 급냉시키고, 15 분간 교반하고, 염수 20 ㎖을 가하고 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 먼저 헥산-에틸 아세테이트(1:8)로 플래시 크로마토그래피시키고, 이어서 실리카겔 컬럼상에서 HPLC에 의해 정제시켜 백색 포움으로서 표제 화합물 210 mg(68%)을 수득하였다.

실시예 32

1α-플루오로-25-하이드록시-16,23Z-디엔-26,57-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 6 ㎖중의 [3S-(3α,5β,Z)]-2-[2-[2-메틸렌-3-플루오로-5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 460 mg(0.977 mmol)의 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.61 ㎖(0.976 mmol)을 가하였다. 5 분간 교반한 후에, 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 [1(S^*),3aR-(3aα,7aβ)-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-트리메틸실릴옥시-1-메틸-5-트리플루오로메틸-3Z-헥세닐]-4H-인덴-4-온 277 mg(0.607 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 이어서 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 상기를 2N 로첼 염 10 ㎖로 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 2N 로첼염 30 ㎖로 추가로 희석한 후에, 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층들을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켜 조 중간체 630 mg을 수득하였다. 상기를 헥산-에틸 아세테이트(10:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 디실릴화된 표제 화합물 220 mg을 수득하였다. (25-실릴 에테르는 상기 공정중에 가수분해된다). 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 디실릴화된 중간체 220 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 2.5 ㎖(2.5 mmol)을 아르곤하에서 가하고, 이어서 실온에서 18 시간동안 교반하였다. 이때, 물 5 ㎖을 가하고 15 분간 교반한 다음, 염수 20 ㎖을 가하고, 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층들을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 먼저 헥산-에틸 아세테이트(2:1)로 플래시 크로마토그래피시켜 백색 포움으로서 표제 화합물 170 mg(53%)을 수득하였다.

실시예 33

1α-플루오로-25-하이드록시-16-엔-23-인-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 8 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-3-플루오로-2-메틸렌사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 740 mg(1.57 mmol)의 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.98 ㎖(1.57 mmol)을 적가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기 형성된 적색 용액에 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-5-하이드록시-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-3-헥시닐]-4H-인덴-4-온 262 mg(0.685 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 이어서 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 상기를 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 15 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 동일한 염 혼합물 30 ㎖을 가한 후에, 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(5:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 모노실릴화된 표제 화합물 250 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 3 ㎖중의 실릴 중간체 250 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 2.8 ㎖(2.8 mmol)을 아르곤하에서 가하고, 이어서 반응 혼합물을 실온에서 18 시간동안 교반하였다. 물 10 ㎖을 가하고 15 분간 교반한 다음, 염수 20 ㎖로 희석하고, 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층들을 물 및 염수로 4 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(2:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 비결정성 표제 화합물 175 mg(49%)을 수득하였다.

실시예 34

1α-플루오로-25-하이드록시-16,23E-디엔-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-3-플루오로-2-메틸렌사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 350 mg(0.744 mmol)의 교반된 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.463 ㎖(0.74 mmol)을 가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기 형성된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4.5 ㎖중의 [3aR-[1(S^*,3E),3aα,7aβ]]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-1-[6,6,6-트리플루오로-1-메틸-5-(트리플루오로메틸)-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헥세닐]-4H-인덴-4-온 230 mg(0.503 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 이어서 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 이어서 상기를 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 동일한 염 혼합물 30 ㎖을 가한 후에, 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 디실릴화된 표제 화합물 236 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 3.5 ㎖중의 디실릴 중간체 236 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3 ㎖(3 mmol)을 아르곤하에서 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18 시간동안 교반하였다. 물 5 ㎖을 가하고 10 분간 교반하여 급냉시켰다. 염수 20 ㎖로 희석한 후에, 상기 혼합물을 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(2:1)로 플래시 크로마토그래피시키고 실리카 컬럼상에서 HPLC에 의해 정제시켜 비결정성 표제 화합물 140 mg(53%)을 수득하였다.

실시예 35

1,25-디하이드록시-16엔-23-인-26,27-비스호모-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-2-메틸렌사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 435 mg(0.746 mmol)의 교반된 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.465 ㎖(0.744 mmol)을 가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기 형성된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,7aβ]]-1-[5-에틸-1-메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헵티닐]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-4H-인덴-4-온 169 mg(0.451 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 이어서 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2.5 시간동안 교반하였다. 상기를 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 동일한 염 혼합물 25 ㎖을 가한 후에, 상기를 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨 상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(40:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 트리실릴화된 표제 화합물 260 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 3 ㎖중의 트리실릴화된 중간체 260 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3 ㎖(3 mmol)을 아르곤 분위기하에서 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 17 시간동안 교반하였다. 이어서 물 10 ㎖을 가하고 10 분간 교반하여 급냉시켰다. 20 ㎖의 물 및 염수로 희석한 후에, 상기 혼합물을 3 x 80 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층들을 물 및 염수로 4 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(1:3)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시키고, 이를 메틸 포르메이트로부터 결정화시켜 표제 화합물 158 mg(80%)을 수득하였다; 융점 103-105 ℃.

실시예 36

1,25-디하이드록시-16-엔-23-인-26,27-비스호모-19-노르-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 [3R-트랜스-[2-[3,5-비스[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 300 mg(0.525 mmol)의 교반된 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.325 ㎖(0.520 mmol)을 가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기 형성된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 2.5 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,7aβ]]-1-[5-에틸-1-메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헵티닐]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-4H-인덴-4-온 77 mg(0.205 mmol)의 용액을 5 분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2.5 시간동안 교반하였다. 이어서 상기를 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 동일한 염 혼합물 25 ㎖로 추가로 희석한 후에, 상기를 3 x 75 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 핵산-에틸 아세테이트로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 트리실릴화된 표제 화합물 58 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 2.5 ㎖중의 트리실릴 중간체(2 개의 선행 커플링 반응으로부터 수득) 124 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 2.5 ㎖(2.5 mmol)을 아르곤하에서 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 40 시간동안 교반하였다. 이어서 물 10 ㎖을 가하고 15 분간 교반하여 급냉시켰다. 20 ㎖의 물 및 염수로 희석한 후에, 상기 혼합물을 3 x 70 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층들을 물 및 염수로 4 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(1:7)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시키고, 메틸 포르메이트로부터 재결정시켜 표제 화합물 74 mg(25.3%)을 수득하였다; 융점 130-132 ℃.

실시예 37

1α-플루오로-25-하이드록시-16-엔-23-인-26,27-비스호모-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-3-플루오로-2-메틸렌사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 390 mg(0.829 mmol)의 교반된 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.53 ㎖(0.848 mmol)을 가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기 형성된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4.5 ㎖중의 [3aR-[1(S^*),3aα,7aβ]]-1-[5-에틸-1-메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헵티닐]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-4H-인덴-4-온 200 mg(0.534 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 이어서 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 상기를 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하고 실온으로 가온시켜 급냉시켰다. 동일한 염 혼합물 30 ㎖을 가한 후에, 상기를 3 x 100 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(30:1)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 디실릴화된 표제 화합물 254 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 3.5 ㎖중의 디실릴 중간체 254 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 3 5 ㎖(3.5 mmol)을 아르곤하에서 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18 시간동안 교반하였다. 이어서 물 10 ㎖을 가하고 15 분간 교반하여 급냉시켰다. 20 ㎖의 물 및 염수로 희석한 후에, 상기 혼합물을 3 x 80 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층들을 물 및 염수로 4 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(7:4)로 플래시 크로마토그래피시키고 실리카 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(3:2)로 HPLC에 의해 정제시켜 비결정성 표제 화합물 159 mg(67.6%)을 수득하였다.

실시예 38

1α-플루오로-25-하이드록시-16-23E-디엔-26,27-비스호모-20-에피-콜레칼시페롤

무수 테트라하이드로푸란 5 ㎖중의 [3S-(1Z,3α,5β)]-[2-[5-[[(1,1-디메틸에틸)디메틸실릴]옥시]-3-플루오로-2-메틸렌-사이클로헥실리덴]에틸]디페닐포스핀 옥사이드 240 mg(0.51 mmol)의 교반된 용액에 -78 ℃에서 아르곤 분위기하에 헥산중의 1.6 M n-부틸리튬 0.319 ㎖(0.51 mmol)을 가하였다. 5 분간 교반한 후에, 상기 형성된 적색 용액에 무수 테트라하이드로푸란 4 ㎖중의 [3aR-[1(S^*,3E),3aα,7aβ]]-1-[5-에틸-1-메틸-5-[(트리메틸실릴)옥시]-3-헵티닐]-3,3a,5,6,7,7a-헥사하이드로-7a-메틸-4H-인덴-4-온 103 mg(0.273 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2 시간동안 교반하고, 이어서 냉동기(-20 ℃)에 1 시간동안 두고, 2N 로첼 염 및 2N 중탄산 칼륨의 1:1 혼합물 10 ㎖을 가하여 급냉시키고 실온으로 가온시켰다. 추가로 동일한 염 혼합물 25 ㎖로 희석한 후에, 상기를 3 x 90 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층들을 물 및 염수로 3 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(1:4)로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 디실릴화된 표제 화합물 145 mg을 수득하였다.

무수 테트라하이드로푸란 3 ㎖중의 디실릴 중간체 145 mg의 용액에 테트라하이드로푸란중의 1 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 1.7 ㎖(1.7 mmol)을 아르곤하에서 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18 시간동안 교반하였다. 이어서 물 10 ㎖을 가하고 15 분간 교반하여 급냉시켰다. 20 ㎖의 물 및 염수로 희석한 후에, 상기 혼합물을 3 x 80 ㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층들을 물 및 염수로 4 회 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발건조시켰다. 조 생성물을 30 mm x 5" 실리카겔 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(3:2)로 플래시 크로마토그래피시키고 실리카 컬럼상에서 헥산-에틸 아세테이트(1:1)로 HPLC에 의해 정제시키고, 메틸 아세테이트-헥산으로부터 재결정시켜 표제 화합물(융점 91-92℃) 90 mg(74%)을 수득하였다.

하기 실시예 A 내지 C에 열거된 성질들을 갖는 성분들을 함유하는 크림, 겔 및 액제를 통상적인 수단에 의해 제형화할 수 있다. 이들 실시예에서 특허청구된 화합물들중 임의의 것으로 화합물 A(1,25-디하이드록시-16,23E-디엔-26,27-헥사플루오로-20-에피-콜레칼시페롤)를 예시한다.

실시예 A: 크림

[표 7]

실시예 B: 겔

[표 8]

실시예 C: 국소적용 용액

[표 9]

본 발명의 화학식 1의 화합물을 환자의 피부에 국소적용시켰을 때 광손상과 관련된 증상들이 역전된다. 따라서, 화학식 1의 화합물을 일광 노출을 통해 손상된 환자의 피부에 국소 적용시킴으로써, 주름, 탄력섬유증 및 조기 노화의 효과를 역전시켜 피부의 외관을 개선시킬 수 있다. 즉, 화학식 1 화합물의 국소 투여를 통해, 피부 손상의 복구가 가속화되어 보다 매끄럽고 보다 젊은 외관을 갖는 피부를 제공하게 된다.

Claims

하기 화학식 1a의 화합물:

[화학식 1a]

상기식에서,

R₂는 수소, C_1-4-알킬 또는 할로겐이고,

X는 =CH₂이고,

A는 -C≡C-,
또는 -CH₂-CH₂-이고, 단 A가 -CH₂-CH₂-이면 R₂는 수소 또는 C_1-4-알킬이다.
제 1 항에 따른 화학식 1a의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 전선, 기초 세포암, 케라틴화 질환, 각화증, 백혈병, 유방암, 여드름, 지루성 피부염, 및 일광 노출에 의해 야기된 조기 노화, 탄력섬유증 및 주름으로 이루어진 군으로부터 선택된 질환을 치료하기 위한 약학 조성물.
하기 화학식 2의 1α-플루오로-25-하이드록시-16,23E-디엔-26,27-비스호모-20-에피-콜레칼시페롤.

[화학식 2]