TW202110424A

TW202110424A - 沉默調節蛋白1 活化劑和用於活化沉默調節蛋白1 的皮膚化妝品

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Publication number: TW202110424A
Application number: TW109116600A
Authority: TW
Inventors: 田部早巳; 藤田晃人; 小谷麻由美; 杉脇秀美
Original assignee: 日商布倫克蕾喜股份有限公司
Priority date: 2019-05-22
Filing date: 2020-05-19
Publication date: 2021-03-16
Also published as: JP7301347B2; KR102573074B1; JP2020189802A; SG10202004623QA; CN111973505A; KR20200135198A; US20200368143A1

Abstract

提供一種沉默調節蛋白1活化劑，該沉默調節蛋白1活化劑包括具有高安全性的天然提取物作為活性成分，以及用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品。本發明的沉默調節蛋白1活化劑包括奇異果和/或朱蕉的提取物。此外，將本發明的用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品與奇異果和/或朱蕉的提取物混合。

Description

沉默調節蛋白1活化劑和用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品

本發明涉及包含作為活性成分的奇異果(キウイ)和/或朱蕉(センネンボク）的提取物的沉默調節蛋白1(サーチュイン1）活化劑以及用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品。

在衰老控制的研究中，已經發現將卡路里限制到一定程度，以使古細菌、酵母、線蟲和人類不會陷入低營養狀態，賦予了抗衰老和長壽效果。Sir2已被確定為參與這些效果的分子之一。在哺乳動物同源物中，有七個沉默調節蛋白家族成員。其中，與Sir2的結構和功能最相似的沉默調節蛋白1引起了注意。

沉默調節蛋白1具有NAD依賴性去乙醯基酶活性和ADP核糖基轉移酶活性，並且在生物體內起重要作用。例如，在表達高水平沉默調節蛋白1的小鼠的情況下，已經認識到身體能力的增強、生殖期的延長以及糖代謝、膽固醇代謝和脂肪代謝的改善。此外，已經觀察到甚至儘管高脂飲食也改善了葡萄糖耐受並抑制了脂肪肝。換句話說，認為沉默調節蛋白1的活化對於預防或治療代謝疾病或從代謝疾病中恢復是有用的（非專利文獻1）。

此外，沉默調節蛋白1的活化使轉錄因子NF-κB（核因子-κB）的p65亞基去乙醯化，且因此NF-κB活性減弱，從而明顯抑制炎症。認為該抗炎作用能夠用於預防或治療炎性疾病或從炎性疾病中恢復（非專利文獻1）。此外，在小鼠中，可以看到，通過阻斷NF-κB基因可以增強皮膚的生殖完整性，並且認為沉默調節蛋白1的活化有助於增強皮膚的生殖完整性（非專利文獻2）。

沉默調節蛋白1使FOXO、p53、p73、Ku70和Smad7去乙醯化，且因此誘導了抗氧化應激並抑制細胞死亡。認為其表型誘導有助於實現抗衰老和延長壽命的作用（非專利文獻1）。

細胞衰老變性是由暴露于外部應力（諸如紫外線）引起的。細胞衰老變性是一種細胞週期被永久停止的現象。已經發現，沉默調節蛋白1調節TERT（端粒逆轉錄酶）的表達，因此組蛋白被去乙醯化，從而保持了端粒的穩定性，而修復蛋白（如WRN）被去乙醯化，從而促進了DNA的修復，從而保持了基因組的穩定性以及這些功能抑制了細胞衰老變性（非專利文獻3）。

如上所述，已發現沉默調節蛋白1具有多種功能，例如代謝疾病恢復作用，炎症疾病恢復作用，細胞衰老變性抑制作用，糖尿病恢復作用，心血管保護作用，腎臟疾病恢復作用和神經保護作用。因此，沉默調節蛋白1的活化被認為可用於預防或治療各種疾病，或從各種疾病中恢復，例如代謝性疾病、炎性疾病、細胞衰老變性、糖尿病、心血管疾病、腎臟疾病和神經系統疾病。

作為用於活化沉默調節蛋白1的材料，已知在紅葡萄皮中大量含有白藜蘆醇。近來，也已經報導了如專利文獻1中所述的源自黑薑提取物的沉默調節蛋白活化劑（專利文獻1）。

現有技術文獻

專利文獻

（專利文獻）：日本早期公開專利申請第2018-199680號

非專利文獻

（非專利文獻1）：Chemistry and Biology，2009，第47卷，第8期，第531-537頁

（非專利文獻2）：Aging cell，2010，9，第285-290頁

（非專利文獻3）：BMB Reports，2019，52(1)，第24-34頁

因此，考慮到現有技術中存在的上述問題做出了本發明，並且本發明的目的是從具有高安全性的天然提取物中找到具有活化沉默調節蛋白1的作用的材料，並提供一種包含作為活性成分的該材料的沉默調節蛋白1活化劑和一種用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品。

為了實現上述目的，本發明的沉默調節蛋白1活化劑包含奇異果和/或朱蕉的提取物作為活性成分。此外，本發明的用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品混合有奇異果和/或朱蕉的提取物。

本發明的沉默調節蛋白1活化劑包含是天然產物的奇異果和/或朱蕉的提取物作為活性成分。因此，可以提供不僅具有優異活性而且具有高安全性的沉默調節蛋白1活化劑。

此外，可以提供用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品，其混合有奇異果和/或朱蕉的提取物，從而具有優異的活性和高安全性。

在下文中，將描述本發明的實施方式。

[沉默調節蛋白1活化劑]。

本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑包含作為活性成分的奇異果（學名：中華獼猴桃Actinidia chinensis Planch.（獼猴桃科Actinidiaceae））和/或朱蕉（學名：朱蕉Cordyline terminalis）的提取物。

在本實施方式中的“提取物”的實例包括從用作提取原料的奇異果（中華獼猴桃Actinidia chinensis Planch.（獼猴桃科Actinidiaceae））或朱蕉（朱蕉Cordyline terminalis）獲得的提取液、提取液的稀釋液或濃縮液、通過乾燥提取液獲得的乾燥物質以及其粗純化的物質或純化物質。

奇異果（中華獼猴桃Actinidia chinensis Planch.（獼猴桃科Actinidiaceae））表示屬獼猴桃科的獼猴桃屬的一種落葉灌木。其果實在日本各地都有栽培，因此很容易從這些地區獲得。用作提取原料的奇異果的組成部分的實例可以包括地上部分，例如葉部分、莖部分、花部分或果實部分、根部分或其混合部分，優選果實部分，並且特別優選修剪的果實部分。此外，在本發明中，可以用作提取原料的奇異果（中華獼猴桃Actinidia chinensis Planch.（獼猴桃科Actinidiaceae））的栽培品種沒有特別限制，但是彩虹紅（レインボーレッド）、蘋果奇異果（アップルキウイ）、紅心、金色國王（ゴールデンキング）、Zespri金（ゼスプリゴールド）、小林39、觀看者國家（ビュアカントリー）、第一帝王（ファーストエンペラー）、淚珠（ティアドロップ）、紅鮮、奇異果葡萄（グレープキウイ）、Sanuki金（さぬきゴールド）、豊蜜可能非常合適。

在本實施方式中，在奇異果的情況下，“修剪的果實”是指為了在奇異果的栽培過程中將要生長的奇異果的糖含量和尺寸增加到期望範圍內而修剪的果實。奇異果的糖含量優選為3.0至7.0%，並且更優選為4.0至5.5%。奇異果的尺寸（長徑）優選為1至4cm，並且更優選為2至3cm。

朱蕉是常綠灌木，屬龍舌蘭科朱蕉屬，也被稱為“Ti”（朱蕉Cordyline terminalis“ Ti”）。朱蕉分佈在印度、澳大利亞、熱帶非洲和中國，因此很容易從這些地區獲得。可以用作提取原料的朱蕉的組成部分的實例可以包括地上部分，例如葉部分、分枝部分或莖部分，地下部分如根部或其混合部分，優選葉部分。

用於提取的原料可以乾燥、靜置或使用破碎機粉碎，並且可以使用提取溶劑提取，從而獲得上述植物的提取物。乾燥可以使用陽光進行，或者可以使用通常使用的乾燥機進行。此外，可以使用非極性提取溶劑例如己烷進行諸如脫脂的預處理，從而有效地實現利用極性溶劑的提取處理。

優選使用極性溶劑作為提取溶劑。其實例可以包括水和親水性有機溶劑，其優選在室溫下或在低於溶劑沸點的溫度下單獨使用或以其兩種或更多種的組合使用。

可以用作提取溶劑的水的實例包括純淨水、自來水、井水、礦泉水、含有礦物質的水、溫泉水，可使用的水以及經過各種處理的淡水。應用于水的處理的實例包括淨化、加熱、滅菌、過濾、離子交換、滲透壓力調節和緩衝。因此，在本實施方式中可以用作提取溶劑的水的實例包括純淨水、熱液水、離子交換水、生理鹽水、磷酸鹽緩衝液和磷酸鹽緩衝生理鹽水。

可用作提取溶劑的親水性有機溶劑的實例可以包括具有1-5個碳原子的低級脂族醇，例如甲醇、乙醇、丙醇和異丙醇；低級脂族酮，例如丙酮和甲乙酮；和具有2至5個碳原子的多元醇，例如1,3-丁二醇、丙二醇和甘油。

當使用兩種或更多種極性溶劑的混合溶液作為提取溶劑時，其混合比可以適當地調節。例如，當使用水和低級脂族醇的混合溶液作為提取溶劑時，水和低級脂族醇的混合比優選為9:1至1:9（體積比），並且更優選為7:3至2:8（體積比）。此外，當使用水與低級脂族酮的混合溶液時，水與低級脂族酮的混合比優選為9:1至2:8（體積比）。當使用水和多元醇的混合溶液時，水和多元醇的混合比優選為8:2至1:9（體積比）。

提取處理沒有特別限制，只要可以將用於提取的原料中所含的可溶性成分洗脫在提取溶劑中即可，並且可以根據典型方法進行。例如，提取原料可以以提取原料的量的1.5至30倍（質量比）的量浸入提取溶劑中，並且可溶成分可以在室溫下或者通過加熱回流，然後過濾以除去提取殘餘物來提取，從而獲得提取液。從得到的提取液中蒸餾溶劑得到糊狀的濃縮物，將濃縮物進一步乾燥，從而得到乾燥物。

可以例如使用活性炭處理、吸附樹脂處理或離子交換樹脂處理來進行純化。所獲得的提取液可以不經進一步處理而用作沉默調節蛋白1活化劑的活性成分，但是濃縮物或乾燥產物的形式易於使用。

奇異果和朱蕉的提取物具有獨特的氣味，並且可以在不損害其生物活性的範圍內進行純化以達到脫色和除臭的目的。然而，當將奇異果和朱蕉的提取物與皮膚化妝品混合時，該提取物並未大量使用，因此即使未純化提取物，該提取物實際上仍未受到阻礙。

由於如上所述獲得的奇異果和朱蕉提取物具有沉默調節蛋白1活化作用，因此該提取物可以用作沉默調節蛋白1活化劑的活性成分。

本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑可以用於藥物、醫療用品、准藥物、化妝品等廣泛的用途。

本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑可以僅包含奇異果或朱蕉的提取物，也可以通過配製奇異果或朱蕉的提取物而得到。

使用糊精或環糊精的藥學上可接受的載體和根據典型方法的任何其他輔助劑，可以將本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑配製成粉末相、顆粒相、片劑相、液相等各種製劑。輔助劑的實例可包括賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、穩定劑和風味劑。沉默調節蛋白1活化劑可以與其他組合物（如皮膚化妝品和食品）組合使用，並且可以用作軟膏、外用液體藥物或薄片劑。

當配製本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑時，奇異果或朱蕉提取物的含量沒有特別限制，並且可以根據目的適當設定。

同時，如果需要的話，本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑可以通過將具有沉默調節蛋白1活化作用的其他天然提取物與奇異果或朱蕉的提取物混合而用作活性成分。

將本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑施用至患者的方法的示例可以包括透皮給藥和口服給藥，但是可以根據疾病的種類適當選擇適合於預防和治療的方法。此外，本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑的劑量可以根據疾病的種類或嚴重程度、患者之間的個體差異、給藥方法和給藥時間適當地增加或減少。

本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑可以用於預防或治療諸如代謝性疾病、炎性疾病、細胞衰老變性、糖尿病、心血管疾病、腎臟疾病和神經系統疾病的各種疾病或從這些疾病中恢復的目的，以及進一步用於與涉及沉默調節蛋白1的各種現象有關的目的，例如由於奇異果或朱蕉提取物的沉默調節蛋白1活化作用而產生的抗衰老或延長壽命的作用。但是，本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑除了上述用途以外，還可以用於對發揮沉默調節蛋白1活化作用具有重要意義的所有目的。

奇異果和朱蕉的提取物具有沉默調節蛋白1活化作用，並且在施用于皮膚時也具有出色的可用性或安全性，因此，這些提取物非常適合用作混合時皮膚外用製劑中的成分。在皮膚外用劑的情況下，可以在不進行處理的情況下將奇異果或朱蕉的提取物混合其內，或者可以將由奇異果或朱蕉的提取物配製的沉默調節蛋白1活化劑混合其內。可以將奇異果或朱蕉的提取物或由奇異果或朱蕉的提取物配製的沉默調節蛋白1活化劑混合到皮膚外用劑中，從而賦予其沉默調節蛋白1活化作用。

皮膚外用製劑的類型不受限制，其實例包括各種各樣的產品，例如稍後將描述的皮膚化妝品，以及在皮膚上使用的准藥物和藥品以及醫療用品。

此外，由於本實施方式的奇異果和朱蕉的提取物具有優異的沉默調節蛋白1活化作用，因此該提取物可以適合用作研究其作用機理的試劑。

另外，本實施方式的沉默調節蛋白1活化劑適用於人，但只要表現出活性，也可以適用於人以外的動物。

[用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品]

由於根據上述實施方式的奇異果和朱蕉的提取物具有優異的沉默調節蛋白1活化作用，因此該提取物適合與皮膚化妝品混合。在這種情況下，可以將用於活化沉默調節蛋白1的成分的奇異果或朱蕉的提取物混合而無需進行任何處理，或者可以混合由奇異果或朱蕉的提取物配製的沉默調節蛋白1活化劑。

對可以與奇異果或朱蕉的提取物混合的皮膚化妝品的種類沒有特別的限制，其實例可以包括軟膏、乳膏、乳狀洗劑、洗劑、包裝和粉底。

當將奇異果或朱蕉的提取物與皮膚化妝品混合時，奇異果或朱蕉的提取物混合在其內的量可以根據皮膚化妝品的類型適當地調節。然而，合適的混合比例為0.0001至10質量%（以固體含量計），並且特別合適的混合比例為0.001至1質量%（以固體含量計）。

只要不阻礙奇異果和朱蕉提取物的沉默調節蛋白1活化作用，本實施方式的皮膚化妝品可以與主劑、助劑或其他成分例如製造典型的皮膚化妝品中使用的收斂劑、殺菌劑/抗微生物劑、紫外線吸收劑、保濕劑、細胞增效劑、消炎劑/抗過敏藥、抗氧化劑/活性氧去除劑、油脂、蠟、烴、脂肪酸、醇、酯、表面活性劑和風味劑。通過以這種方式一起使用它們，皮膚化妝品成為更普通的產品，並且與它們組合使用的上述成分之間的協同作用導致使用效果優於通常預期的效果。

該皮膚化妝品具有高安全性，並且可以用於預防或治療諸如代謝疾病、炎性疾病、細胞衰老變性、糖尿病、心血管疾病、腎臟疾病和神經系統疾病等各種疾病或從這些疾病中恢復的目的，以及進一步涉及沉默調節蛋白1的各種現象的目的，例如由於其對沉默調節蛋白1的活化作用而具有抗衰老和延長壽命的作用。

[用於活化沉默調節蛋白1的食品]

奇異果和朱蕉的提取物具有沉默調節蛋白1活化作用，並且具有極好的安全性，因此該提取物適合與食品混合。在食品的情況下，可以不進行任何處理就混合奇異果或朱蕉的提取物，或者可以混合由奇異果或朱蕉的提取物配製的沉默調節蛋白1活化劑。奇異果或朱蕉的提取物或由奇異果或朱蕉的提取物配製的沉默調節蛋白1活化劑可以混合以使食品具有沉默調節蛋白1活化作用。

食品是指在正常的社會生活中通過口服或消化道施用不會危害人體健康的產品。根據行政分類，食品不限於食品、藥物和醫療用品以及准藥物的類別。因此，在本實施方式中，術語“食品”包括多種食品，例如普通食品、保健食品（功能食品）、保健功能食品（特定健康食品、營養功能食品）准藥物和藥物以及口服的醫療用品。

當將奇異果或朱蕉的提取物與食品混合時，其活性成分的混合量可以根據使用目的、症狀和性別而適當地變化。然而，考慮到要添加的食品的一般攝入量，優選每位成年人的提取物的攝入量為每天約1至1000mg。此外，當要添加的食物產品是粒狀、片狀或膠囊食物時，奇異果或朱蕉的提取物的添加量通常為基於要添加的食品量的0.1至100質量%，並且優選為5至100質量%。

本實施方式的食品可以與不妨礙奇異果或朱蕉提取物的活性的任何食品混合，或者可以是以奇異果或朱蕉的提取物為主要成分的營養補品。

當製造本實施方式的食品時，可以向其中加入例如任意的輔助劑，如，諸如糊精或澱粉的糖，諸如明膠、大豆蛋白或玉米蛋白的蛋白質，諸如丙氨酸、穀氨醯胺或異亮氨酸的氨基酸，多糖如纖維素或阿拉伯樹膠，以及脂和油，如大豆油或中鏈脂肪酸甘油三酸酯，從而獲得預定形式的食品。

與奇異果或朱蕉的提取物混合的食品沒有特別限制。然而，其具體示例可以包括飲料，例如軟飲料、碳酸飲料、營養飲料、果汁飲料和乳酸飲料（包括飲料的濃縮粗制液體和用於調節的粉末）；以及冰糕例如冰淇淋、冰沙和冰片；麵條，諸如蕎麥面、烏冬面、玻璃紙面、餃子皮、小米卷、中式面、方便面等；甜食諸如韓國硬太妃糖、口香糖、糖果、口香糖、巧克力、正果、點心、餅乾、果凍、果醬、奶油和烤制餅乾；加工的海鮮和牲畜食品，例如魚糕、火腿和香腸；乳製品，例如加工乳和發酵乳；脂和油和以油脂為基礎的加工食品，例如色拉油、煎炸油、人造黃油、蛋黃醬、起酥油、生奶油和調料；調味料例如醬汁和醃泡汁；湯、燉菜、色拉、配菜、鹹菜、各種其他健康和營養補品、片劑、膠囊和健康飲料。將奇異果或朱蕉的提取物與食品混合時，也可以使用常用的輔助原料或添加劑。

[實施例]

在下文中，將參考實施例具體描述本發明，但是本發明不限於以下實施例。

[實施例1]修剪後的奇異果提取液的製備

將400mL提取溶劑（純淨水）添加到200g修剪過的奇異果果實（中華獼猴桃Actinidia chinensis Planch.（獼猴桃科Actinidiaceae），彩虹紅物種）的粉碎產品中（糖含量：4.3%；長徑：2釐米），然後通過在30°C加熱1小時進行提取，然後進行熱過濾。類似地，將殘餘物進行提取處理。收集獲得的提取物溶液，減壓下濃縮，並進一步乾燥，從而獲得5.5g被修剪的奇異果提取物。30%BG（丁二醇）用於製備0.43%提取物。

[實施例2]朱蕉提取液的製備

將朱蕉藤的乾葉20g（Ogasawarashodo，東京）與4kg50%BG（1,3-丁二醇，Hisugacane BG，由Kokyu Alcohol Kogyo Co., Ltd製造）混合，然後浸入其中持續七天。使用ADVANTEC定性濾紙（No.2，由Toyo Roshi Kaisha，Ltd.製造）和膜（0.45）進行過濾，並獲得朱蕉葉部分的提取物（固體含量：1.76質量%）作為過濾物。

[比較實施例1]NMN（煙鹼醯胺單核苷酸）溶液的製備

NMN（煙鹼醯胺單核苷酸）購自東京化學工業株式會社（Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.），並且使用磷酸鹽緩衝溶液（PBS（1），由Sigma-Aldrich Co. LLC.）製造）製備0.43%的NMN溶液。

[測試實施例1] 沉默調節蛋白1基因的表達測試

對實施例1的修剪的奇異果果實的提取液、實施例2的朱蕉的葉部分的提取液以及比較實施例1的NMN溶液進行沉默調節蛋白1基因的表達測試。

使用含有10%胎牛血清（FBS）的Dulbecco's Modified Eagle培養基（DMEM，由Thermo Fisher Scientific Inc.製造）在37°C下於5%CO₂ 下預培養人類新生兒包皮來源的成纖維細胞（繼代數為3）（由Thermo Fisher Scientific Inc.製造），並通過用0.25%胰蛋白酶（由Sigma-Aldrich Co. LLC.製造）處理收集細胞。回收的細胞用10%FBS/DMEM稀釋至3×10⁴ 細胞/ml的濃度，然後在50個燒瓶中每個以5mL的量播種以培養細胞（由Sumitomo Bakelite Co., Ltd.製造），然後培養2小時。之後，向其加入10μL的實施例1（樣品濃度為8.6μg/ mL）、2.4μL的實施例2（樣品濃度為8.6μg/ mL）、10μL（樣品濃度為8.6μg/ mL）和50μL的比較實施例1（樣品濃度43.6μg/mL），然後培養三天。

確認無細胞毒性後，除去培養基，用磷酸鹽緩衝液（PBS（1），Sigma-Aldrich Co. LLC.製造）洗滌和向其中加入1mL的1%SDS溶液（NIPPON GENE CO.，LTD.製造），以回收細胞。使用渦旋充分攪拌細胞懸液後，取樣180μL細胞懸液。向其中加入1μL的1%KOH（由NACALAI TESQUE，INC.製造）和20μL的蛋白酶K溶液（由Thermo Fisher Scientific Inc.製造），然後攪拌，然後在37°C下溫育15分鐘。溫育後，將100μL的RNA Clean XP（由Beckman Coulter，Inc.製造）加入其中，攪拌，並在磁力架上放置5分鐘。去除上清液，使用85%乙醇洗滌兩次，乾燥10分鐘，並且向其中添加30μL的無核酸酶的水（由Thermo Fisher Scientific Inc.製造）。將所得物質在磁力架上放置5分鐘，並使用RNA溶液進行上清液處理。

進行製備，以使在200μL的PCR管（由Bio-Rad Laboratories Inc.製造，透明，圓頂蓋）中，在0°C下Super Script^TM IV VILO^TM Master Mix（由Thermo Fisher Scientific Inc.製造）與無核酸酶的水之比為1:2.5，然後使用渦旋攪拌並以14.0μL的量分配到另一個PCR管中。製備NRT樣品，以使Super Script^TM IV VILO^TM 無RT對照（由Thermo Fisher Scientific Inc.製造）與無核酸酶的水的比例為1:2.5，然後分配。將如上所述獲得的RNA溶液以6.0μL的量添加至其中，然後使用熱循環儀（由Bio-Rad Laboratories Inc.製造，T100^TM 熱循環儀）在25℃溫育10分鐘，50℃溫育10分鐘，然後在85℃溫育5分鐘，從而獲得cDNA樣品和NRT樣品。

進行製備，以使Taqman^（ ^R ^）基因表達測定（ACTB Hs99999903_m1或SIRT1 Hs01009006_m1，由Thermo Fisher Scientific Inc.製造）、TaqPath^TM qPCR Master Mix，CG（由Thermo Fisher Scientific Inc.製造）和無核酸酶的水的比例為1:10:5。將得到的樣品置於無核酸酶的試管中，用渦旋攪拌，然後離心。將所得物質以16.0μL的量分配到PCR管（由Bio-Rad Laboratories Inc.生產，白色，平蓋）中，並分別以4.0μL的量添加cDNA樣品和NRT樣品，然後移液並使用渦旋進行攪拌，然後旋轉。

使用上述樣品進行實時PCR（由Bio-Rad Laboratories Inc.製造，C1000 Touch^TM 熱循環儀）。PCR在25°C 2分鐘、95°C 20秒，95°C 3秒（1）和60°C 30秒（2）（1→2 40個循環）的PCR條件下進行。

結果列於表1。 [表1]

	樣品濃度	沉默調節蛋白 1 Cq	β-肌動蛋白 Cq	△Cq	比*1000	相對比
對照未處理的	0 μg/mL	29.04	21.86	7.18	6.89	1
實施例1	8.6 μg/mL	29.44	22.98	6.46	11.40	1.65
實施例2	8.6 μg/mL	30.28	25.56	4.72	38.01	1.64
對比實施例1	8.6 μg/mL	26.66	19.28	7.38	6.00	0.87
對比實施例2	43.6 μg/mL	24.63	18.99	5.64	20.00	2.90

Cq：上升和下降曲線與臨界值交叉的循環數 β-肌動蛋白：內隱控制 △Cq：沉默調節蛋白 Cq-β-肌動蛋白Cq 比例* 1000：2^（ ^- ^△ ^Cq ^） ×1000

當樣品濃度為8.6μg/mL時，實施例1中的沉默調節蛋白1基因的表達被確認為是未處理的對照的1.65倍，實施例2中的是未處理的對照的1.64倍，但在比較實施例1中，在相同濃度下未觀察到沉默調節蛋白1基因的表達。在樣品濃度為43.6μg/mL，沉默調節蛋白1基因的活化在比較實施例1中被認為是未處理對照的2.9倍。根據以上結果，發現在實施例1和2中，沉默調節蛋白1基因的活性強於比較實施例1。

[配合實施例1]

使用典型的方法根據以下組成製造乳狀洗劑。

奇異果提取物 0.01g

荷荷芭油 4.00g

1,3-丁二醇 3.00g

熊果素 3.00g

聚氧乙烯十六烷基醚（20E.0.）2.50g

橄欖油 2.00g

角鯊烯 2.00g

鯨蠟醇 2.00g

單硬脂酸甘油酯 2.00 g

聚氧乙烯脫水山梨糖醇油酸酯（20E.0.）2.00g

對羥基苯甲酸甲酯 0.15 g

硬脂基甘草亭酸酯 0.10 g

紫雲英根提取物 0.10g

甘草酸二鉀 0.10 g

銀杏葉提取物 0.10g

貝殼硬蛋白 0.10g

黃檗提取物 0.10 g

洋甘菊提取物 0.10g

風味劑 0.05g

純淨水餘量（總量為100g）

[配合實施例2]

使用典型的方法製造具有以下組成的乳膏。

朱蕉提取物 0.01g

苦參提取物 0.1g

薑黃提取物 0.1g

液體石蠟 5.0g

白蜂蠟 4.0g

角鯊烯 10.0g

鯨蠟醇 3.0g

羊毛脂2.0g

硬脂酸1.0g

聚氧乙烯脫水山梨糖醇油酸酯（20E.0.）1.5g

單硬脂酸甘油酯3.0g

油溶性甘草提取物0.1g

1,3-丁二醇6.0g

對羥基苯甲酸甲酯1.5g

風味劑0.1g

純淨水餘量（總量為100g）

[配合實施例3]

使用典型的方法製造具有以下組成的化妝液。

奇異果提取物 0.01g

朱蕉提取物 0.01g

抗壞血酸2-葡萄糖苷 0.1g

洋甘菊提取物 0.1g

胡蘿蔔提取物 0.1g

黃原膠 0.3g

羥乙基纖維素 0.1g

羧乙烯基聚合物 0.1g

1,3-丁二醇 4.0g

甘草酸二鉀 0.1g

甘油 2.0g

氫氧化鉀 0.25g

風味劑 0.01g

防腐劑（對羥基苯甲酸甲酯）0.15g

乙醇 2.0g

純淨水餘量（總量為100g）

本發明的沉默調節蛋白活化劑可以極大地有助於實現預防或治療各種疾病或從各種疾病中恢復，例如代謝性疾病、炎性疾病、細胞衰老變性、糖尿病、心血管疾病、腎臟疾病和神經系統疾病，以及實現抗衰老和延長壽命的作用。

無

Claims

一種沉默調節蛋白1活化劑，包含：作為活性成分的一奇異果和/或一朱蕉的提取物。
如請求項1所述的活化劑，其中該奇異果和/或該朱蕉的提取物使一沉默調節蛋白1基因的活化增強約1.6倍或更多。
如請求項1所述的活化劑，其中活化該沉默調節蛋白1基因所需的該奇異果和/或該朱蕉的提取物的濃度低於活化該沉默調節蛋白1基因所需的NMN（煙鹼醯胺單核苷酸）溶液的濃度。
如請求項1所述的活化劑，其中該奇異果的提取物是從該奇異果中提取的提取物，該奇異果具有3.0%到7.0%的糖含量和1cm到4cm的長徑。
如請求項1所述的活化劑，其中該朱蕉的提取物是從該朱蕉的葉子中提取的提取物。
一種用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品，其混合有一奇異果和/或一朱蕉的提取物。
如請求項6所述的皮膚化妝品，其中該奇異果和/或該朱蕉的提取物使一沉默調節蛋白1基因的活化增強約1.6倍或更多。
如請求項6所述的皮膚化妝品，其中活化該沉默調節蛋白1基因所需的該奇異果和/或該朱蕉的提取物的濃度低於活化該沉默調節蛋白1基因所需的NMN（煙鹼醯胺單核苷酸）溶液的濃度。
如請求項6所述的皮膚化妝品，其中該奇異果的提取物是從該奇異果中提取的提取物，該奇異果具有3.0%到7.0%的糖含量和1cm到4cm的長徑。
如請求項6所述的皮膚化妝品，其中該朱蕉的提取物是從該朱蕉的葉子中提取的提取物。