JP2009161494A

JP2009161494A - Ｓｉｒｔ１活性化剤

Info

Publication number: JP2009161494A
Application number: JP2008001968A
Authority: JP
Inventors: Itsumi Nakamura; 厳海中村; Hiroko Yoshida; 浩子吉田; Hitomi Hase; 仁美長谷
Original assignee: Noevir Co Ltd
Current assignee: Noevir Co Ltd
Priority date: 2008-01-09
Filing date: 2008-01-09
Publication date: 2009-07-23

Abstract

【課題】細胞老化の抑制等に有用と考えられるＳＩＲＴ１を活性化する新規なＳＩＲＴ１活性化剤を提供する。
【解決手段】ローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物から選択される１種または２種以上を有効成分として配合することにより、ＳＩＲＴ１活性化剤を提供することができた。
【選択図】なし

Description

本発明は、ＳＩＲＴ１活性化剤に関する。さらに詳しくは、ローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物から選択される１種または２種以上を有効成分とするＳＩＲＴ１活性化剤に関する。

ＳＩＲＴ１は、細胞核内および細胞質に存在し、ＮＡＤ＋依存性蛋白脱アセチル化酵素として機能し、細胞老化という面で重要な役割を演じている。これまでにＳＩＲＴ１を活性化することにより細胞死の予防、細胞老化の抑制、細胞の寿命延長、癌発生の予防等に有用であることが報告され、様々なＳＩＲＴ１活性化剤が検討されている。

例えば、ブルーベリー抽出物等がＳＩＲＴ１を活性化し眼疾患治療用組成物として利用されること（特許文献１参照）、レスベラトロール等がＳＩＲＴ１を活性化しインシュリン耐性障害を治療すること（特許文献２参照）等が知られているが、ＳＩＲＴ１を活性化するための更なるＳＩＲＴ１活性化剤に対する要望は強い。

特開２００６−２９８８７６号公報特表２００７−５２７４１８号公報

本発明は、上記のような課題に鑑み行われたものであって、その目的とするところは、細胞老化の抑制等に有用と考えられるＳＩＲＴ１を活性化する新規なＳＩＲＴ１活性化剤を提供することにある。

本発明者らは、種々の成分について検討を行った結果、従来はその効果が知られていなかったローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物に優れたＳＩＲＴ１活性作用が存在することを見出し、さらに検討を重ねて本発明を完成させるに至った。

すなわち、本発明は、ローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物から選択される１種または２種以上を有効成分とするＳＩＲＴ１活性化剤に関する。

本発明のＳＩＲＴ１活性化剤は、細胞死の予防、細胞老化の抑制、細胞の寿命延長、癌発生の予防等に有用である

本発明において用いられるローズ水としては、ダマスクスバラ（ＲｏｓａｄａｍａｓｃｅｎａＭｉｌｌ）の花、センティフォリアバラ（ＲｏｓａｃｅｎｔｉｆｏｌｉａＬ．）の花の水蒸気蒸留水を用いることができる。

ダマスクスバラは、１６世紀にヨーロッパに紹介されたローザガリカ（Ｒｏｓａｇａｌｌｉｃａ）とローザフェニシア（Ｒｏｓａｐｈｏｅｎｉｃｉａ）の交雑原種といわれている種類で、香料原料として栽培されている。

また、センティフォリアバラは、ダマスクスバラとシロバラ（Ｒｏｓａａｌｂａ）の自然交配雑種といわれ、フランスのグラース地区や、アフリカのモロッコや地中海沿岸各国に栽培されている。

本発明においては、バラの花を生のまま公知の水蒸気蒸留装置を用いた方法で水蒸気蒸留を行うことができる。これらの植物体は、表面のすぐ下の膜の薄い細胞内に精油を含むことから、前処理として素材を予備粉砕しなくても、充分に水蒸気蒸留することができる。一般に、微妙な精油の抽出を行う場合は、蒸留される素材が完全に水中に沈んだ状態にて煮沸処理する方法を採用するが、非常に高沸点の芳香物質を抽出したい場合は、素材を水中に浸漬させずに、上部の格子の上に置き、加熱水蒸気を通過させる方法をとることがある。本発明の水蒸気蒸留水は、どちらの方法でも採用できる。

本発明の水蒸気蒸留水は、最終的には得られた留分から分取された水層部を、ろ過することで得ることができる。必要であれば、その効果に影響のない範囲で更に、濾過、脱臭、脱色などの処理を加えてもよい。また、得られた水蒸気蒸留水は長期保存される間に腐敗しないよう、パラオキシ安息香酸エステルなどの防腐剤を用いてもよい。

本発明において用いられるエイジツ抽出液としては、ノイバラ（ＲｏｓａｍｕｌｔｉｆｌｏｒａＴｈｕｎｂｅｒｇ）の果実から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。ノイバラは北海道から本州、四国、九州までの川岸の茂み、原野等に生え、朝鮮半島や中国にも分布する。エイジツ（営実）はノイバラの果実である。

本発明において用いられるシモツケソウ抽出物としては、セイヨウナツユキソウ（ＦｉｌｉｐｅｎｄｕｌａｕｌｍａｒｉａＭａｘｉｍｏｗｉｃｚ）の花序から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。

本発明において用いられるワレモコウ抽出物としては、ワレモコウ（ＳａｎｇｕｉｓｏｒｂａｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ．）の根及び根茎から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。

本発明において用いられるセイヨウサンザシ抽出物としては、セイヨウサンザシ（ＣｒａｔａｅｇｕｓｏｘｙａｃａｎｔｈａＬ．）の花、葉、又は果実から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。

本発明において用いられるノバラ抽出物としては、ロサカニナ（ＲｏｓａｃａｎｉｎａＬ．）の果実から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。ヨーロッパで野生バラといったとき第一に名が出るのが、ロサカニナで、ヨーロッパ南部から北緯６２度までのヨーロッパの広い範囲に分布する。

本発明において用いられる真珠タンパク抽出物としては、真珠母貝（アコヤガイ）（Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ）の真珠層に含まれる硬たん白質であるコンキオリンを加水分解したものの水溶液に、１，３−ブチレングリコールを加え５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にした抽出物を用いることができる。

本発明において用いられるユリ抽出物としては、ユリ（マドンナリリー）（Ｌｉｌｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ）の球根から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。

本発明において用いられるタイソウ抽出物としては、ナツメ（ＺｉｚｙｐｈｕｓｊｕｊｕｂａＭｉｌｌｅｒｖａｒ．ｉｎｅｒｍｉｓＲｅｈｄｅｒ）の果実から５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液にて抽出した抽出物を用いることができる。

本発明のローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物から選択される１種または２種以上は、優れたＳＩＲＴ１活性作用を有し、ＳＩＲＴ１活性化剤として利用することができる。

本発明のＳＩＲＴ１活性化剤は、細胞死の予防、細胞老化の抑制、細胞寿命延長、癌細胞発生の予防等に利用することができる。

本発明のＳＩＲＴ１活性化剤は、ローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物から選択される１種または２種以上を、そのまま用いてもよいが、その形態およびその他成分の配合の有無等については、何ら制限されない。形態については、液状、ペースト状、ゲル状、固体状、粉末状等の任意の形態を、その用途等に応じて選択でき、その形態とするために必要な各種賦形剤、結合剤、溶剤、その他の一般的な添加剤（酸化防止剤、着色剤、分散剤等）を適宜用いることができる。

以下にローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物の調製例、ＳＩＲＴ１活性作用を評価するための試験方法及び結果についてさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれによってなんら限定されるものではない。

［調整方法１（ローズ水）］
センティフォリアバラ（ＲｏｓａｃｅｎｔｉｆｏｌｉａＬ．）の新鮮な生花の花弁５００ｇを準備し、精製水２リットルを加えて２時間浸漬した後、水中に沈んだこのままの状態で水蒸気蒸留を行い、得られた留分から分取された水層部をさらにろ過し、１０００ｍＬの水蒸気蒸留水を得、これをローズ水とした。

［調製方法２（エイジツ抽出物）］
ノイバラの果実１Ｋｇを粉砕し、これに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液５０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて５０Ｋｇのエイジツ抽出物を得た。

［調製方法３（シモツケソウ抽出物）］
セイヨウナツユキソウ（ＦｉｌｉｐｅｎｄｕｌａｕｌｍａｒｉａＭａｘｉｍｏｗｉｃｚ）の花序１Ｋｇに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液５０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて５０Ｋｇのシモツケソウ抽出物を得た。

［調整方法４（ワレモコウ抽出物）］
ワレモコウ（ＳａｎｇｕｉｓｏｒｂａｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ．）の根１Ｋｇを粉砕し、これに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液５０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて５０Ｋｇのワレモコウ抽出物を得た。

［調整方法５（セイヨウサンザシ抽出物）］
セイヨウサンザシ（ＣｒａｔａｅｇｕｓｏｘｙａｃａｎｔｈａＬ．）の果実１Ｋｇを粉砕し、これに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液５０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて５０Ｋｇのセイヨウサンザシ抽出物を得た。

［調整方法６（ノバラ抽出物）］
ロサカニナ（ＲｏｓａｃａｎｉｎａＬ．）の果実１Ｋｇを粉砕し、これに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液５０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて５０Ｋｇのノバラ抽出物を得た。

［調整方法７（真珠タンパク抽出物）］
真珠母貝（アコヤガイ）（Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ）の真珠層に含まれる硬たん白質であるコンキオリンを加水分解したものの水溶液に、１，３−ブチレングリコールを加え５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液とし、真珠タンパク抽出物を得た。

［調整方法８（ユリ抽出物）］
ユリ（Ｌｉｌｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ）の球根１Ｋｇを粉砕し、これに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液５０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて５０Ｋｇのユリ抽出物を得た。

［調整方法９（タイソウ抽出物）］
ナツメ（ＺｉｚｙｐｈｕｓｊｕｊｕｂａＭｉｌｌｅｒｖａｒ．ｉｎｅｒｍｉｓＲｅｈｄｅｒ）の果実１Ｋｇを粉砕し、これに５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液１０Ｌを加え、ときどきかき混ぜながら４８時間冷浸したのち、ろ過する。ろ液を約１週間冷所に放置して熟成させ、この工程で生じるオリや沈殿をろ過して除去すると同時に更に５０質量％１，３−ブチレングリコール水溶液を加えて１０Ｋｇのタイソウ抽出物を得た。

上記抽出物を用いて、ＳＩＲＴ１活性作用の評価を行った。

＜ＳＩＲＴ１活性作用の評価１（ヒト真皮線維芽細胞におけるＳＩＲＴ１ｍＲＮＡの測定＞
ＳＩＲＴ１活性作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、調製方法１、調製方法２、調製方法３、調製方法４により調製した抽出物を用いた。

正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当り２．０×１０^４個となるように、９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には５質量％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。２４時間後、５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地にて任意の濃度に調整したサンプル培養液に交換し、さらに２４時間培養した。ＳＩＲＴ１ｍＲＮＡの定量にはＱｕａｎｔｉＧｅｎｅ（ｐａｎｏｍｉｃｓ社製キット）を使用した。ＳＩＲＴ１ｍＲＮＡに特異的に設計されたプローブセットを用いて細胞溶解液中のｍＲＮＡをプレートに結合、増感標識し、化学発光を測定した。同様に各ウェルのＧＡＰＤＨｍＲＮＡを測定し、ＳＩＲＴ１ｍＲＮＡ／ＧＡＰＤＨｍＲＮＡを求めた。評価結果を試料無添加のコントロールにおけるＳＩＲＴ１ｍＲＮＡ／ＧＡＰＤＨｍＲＮＡを１００とした相対値にて表１に示す。

表１の結果より明らかなように、実施例１、２、３、４の抽出物には優れたＳＩＲＴ１活性作用が認められた。

＜ＳＩＲＴ１活性作用の評価１（ＳＩＲＴ１酵素活性測定）＞
ＳＩＲＴ１ＦｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃＤｒｕｇＤｉｓｃｏｖｅｒｙＫｉｔ（ＢＩＯ−ＭＯＬ社製キット）を使用した。任意の濃度に調整した試料に０．０２Ｕ／ｍＬＳＩＲＴ１酵素、２５μＭＮＡＤ＋、２５μＭ蛍光標識された基質を添加し、３７℃にて６０分間インキュベートした。励起波長３５５ｎｍ、発光波長４６０ｎｍにて蛍光を測定した。評価結果を試料無添加のコントロールにおけるＳＩＲＴ１酵素活性を１００とした相対値にて表２に示す。なお各評価結果に記載した＊及び＊＊は、ｔ検定における有意確率Ｐ値に対し、有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を＊で、有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を＊＊でそれぞれ表したものである。

表２の結果より明らかなように、実施例５、６、７、８、９の抽出物には優れたＳＩＲＴ１活性作用が認められた。

以上のことから、ローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物、タイソウ抽出物は優れたＳＩＲＴ１活性化剤であることがわかった。

Claims

ローズ水、エイジツ抽出物、シモツケソウ抽出物、ワレモコウ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、ノバラ抽出物、真珠タンパク抽出物、ユリ抽出物及びタイソウ抽出物から選択される１種または２種以上を有効成分とするＳＩＲＴ１活性化剤。