CN114732752B - 用于皮肤美白的组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种用于皮肤美白的组合物，其包含作为有效成分的以下物质：欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸。本发明通过将欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸按进行组合，通过在多个靶点进行协同作用，达到抑制黑素细胞活性，减少黑色素沉积，实现肌肤的美白提亮效果。
Description
技术领域
涉及皮肤外用剂领域，具体涉及一种用于皮肤美白的组合物及其用途。
背景技术
白皙均匀的肤色在全球大多数地方都被视为美的标志。欧美消费者主要利用美白化妆品来减轻老年斑、黄褐斑等色素沉积。东方人希望通过使用美白化妆品而得到白皙、光洁的皮肤。黑色素是决定皮肤颜色的主要因素。概括来说，美白是通过抑制黑色素的生成，阻断黑色素的运输，加快表皮细胞代谢速度，阻断黑色素生成过程中的信号通路等途径，从而减少角质细胞中黑色素的含量，达到美白肌肤的效果。2013年发生的佳丽宝的杜鹃醇导致皮肤白斑的事件，使消费者意识到美白祛斑化妆品的安全性至关重要。天然植物来源、或者生物发酵来源的美白祛斑成分，具有安全性和温和性的天然优势，日益成为人们关注的焦点。WO200506319A1公开了制备雏菊(Bellis perennis L.)提取物的方法及该提取物对黑色素生成的抑制作用。US20060280704A1公开了用于化妆品和医药用途的对人体皮肤具有脱色效果的局部制剂，含有水萃取(包括分馏和电解液交换)生产雏菊花提取物。目前已经发现的天然植物中的美白成分，有的活性物在植物中含量低提取困难，有的美白成分功效活性不高，无法满足消费者对美白功效的需求。
为了解决以上问题，需要提供一种天然来源为主，能够影响黑色素生成多个靶点的美白组合物，成分安全温和，又能实现协同抑制黑色素的合成和转运，提高美白功效。
发明内容
欧囊链藻(Cystoseira tamariscifolia)属于链藻属的一种棕色海藻。它是一种源自深海，可发出蓝色炫光，会变色的海藻，被称为“海洋蓝宝石”。这种独特的海藻被淹没在水中或潮湿条件下会发出明显绿色或蓝色的光彩。欧囊链藻提取物美白作用机理包括抑制a-MSH与细胞受体结合，抑制酪氨酸酶，减少黑素细胞生成黑色素。
雏菊(Bellis perennis L.)，又称延命菊、春菊，是菊科雏菊属多年生或一年生葶状草本植物，原产欧洲，是意大利的国花，现在我国各地栽培为重要观赏植物。雏菊提取物的美白作用机理是抑制由紫外线刺激引发的黑色素生成，降低a-MSH与细胞受体的亲和力，下调酪氨酸酶活性，减少黑色素生成和向角质细胞转移，并使色素更加均匀分布，淡化色斑。
羟乙基哌嗪乙烷磺酸是一种两性离子缓冲液，能够在化学反应过程中保持pH恒定，广泛应用于细胞培养基，在化妆品中具有作为去角质，也是促进皮肤表面新陈代谢的有效成分。羟乙基哌嗪乙烷磺酸美白作用机理是促进美白成分的渗透作用。
基于以上机理，第一方面，本发明提供一种用于皮肤美白的组合物，其包含作为有效成分的以下物质：欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸。
本发明通过将欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸按进行组合，通过在多个靶点进行协同作用，达到抑制黑素细胞活性，减少黑色素沉积，实现肌肤的美白提亮效果。
在本发明一些实施方式中，所述的欧囊链藻提取物含有0.05～0.30g/kg的总多酚和0.07～3.2mg/g的总糖；在本发明一些具体实施方式中，可以直接购买获得欧囊链藻提取物；也可以通过醇提欧囊链藻获得欧囊链藻提取物；在一些具体实施例中，取欧囊链藻嫩叶，用乙醇水溶液提取一段时间，将提取物离心，过滤，将滤液真空干燥，用去离子水配制成含1％欧囊链藻的水溶液，即可；在本实施例中，采用体积分数为70％的乙醇溶液常温提取24h即可。
在本发明一些实施方式中，所述的雏菊提取物含有0.1～2.8wt％的总黄酮；在本发明一些具体实施方式中，可以直接购买获得雏菊提取物；在本发明另一些具体实施方式中，所述的雏菊提取物从花、叶、根茎植物部位中的至少一种中提取获得；更优选地，所述的雏菊提取物为雏菊花提取物；而提取方法则现有技术中公开的即可，例如WO200506319A公开的雏菊提取物提取方法；在本发明一些具体实施例中，提供如下提取方法：将雏菊花干花用乙醇水溶液提取一段时间，得到粗提物，再用乙酸乙酯和水萃取，水相离心过滤后，将滤液真空干燥，用去离子水配制成含50％雏菊花的水溶液，即可；在本实施例中，将雏菊花干花用70％乙醇醇提取，得到粗提物，再用乙酸乙酯和水萃取，水相离心过滤后，将滤液真空干燥，用去离子水配制成含50％雏菊花的水溶液，即可。
在本发明一些具体实施例中，所述的组合物，按照重量百分比计，其含有20～40％欧囊链藻提取物、20～40％雏菊提取物、20～40％羟乙基哌嗪乙烷磺酸。
第二方面，本发明提供前述所述的组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：将欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸依次加入搅拌釜中，低速搅拌至混合均匀，降温至室温，即可。
第三方面，本发明将前述所述的组合物用于制备具有美白功效的皮肤外用剂。
在本发明一些实施方式中，所述组合物具有拮抗α-MSH和抑制酪氨酸酶活性的作用，能够减少黑色素产生，降低黑色素在皮肤沉着。
在本发明一些实施方式中，所述皮肤外用剂包含0.01～50wt％，优选为0.1～25wt％的前述所述的组合物，如此，该组合物可以起到美白的功效。
在本发明一些具体实施例中，所述皮肤外用剂包括化妆品、药品；在本实施例中，将该组合物用于制造美白、祛斑和亮肤的化妆品。
第四方面，本发明提供一种具有美白功效的皮肤外用剂，该外用剂包含前述所述的组合物；在一些具体实施例中，所述皮肤外用剂为精华液，包含如下组分：
与现有技术相比，本发明通过将欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸按照特定配比进行组合，欧囊链藻提取物美白作用机理是抑制α-MSH与细胞受体结合，抑制酪氨酸酶，减少黑素细胞生成黑色素。雏菊提取物的美白作用机理是抑制由紫外线刺激引发的黑色素生成，降低α-MSH与细胞受体的亲和力，下调酪氨酸酶活性，减少黑色素生成和向角质细胞转移，并使色素更加均匀分布，淡化色斑。羟乙基哌嗪乙烷磺酸美白作用机理是促进美白成分的渗透作用，并保持组合物体系pH恒定；通过以上多个靶点进行协同作用，达到抑制黑素细胞活性，减少黑色素沉积，实现肌肤的美白提亮效果。
进一步地，通过欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸按特定配比进行组合复配，可以协同提高酪氨酸酶抑制率和减少黑色素生成，在保持相同的美白活性下，可以降低美白组合物的用量和成本。
此外本发明制备工艺简单，操作方便。
具体实施方式
以下实施例1～3使用的欧囊链藻提取物与雏菊提取物通过如下方法制备获得：
欧囊链藻提取物提取工艺：取欧囊链藻嫩叶，在室温(20℃)下用70％乙醇提取24小时，将提取物离心，过滤，真空干燥，用去离子水配制成含1％欧囊链藻的水溶液，即可。
雏菊提取物提取工艺：将雏菊花干花用70％乙醇醇提取，得到粗提物，再用乙酸乙酯和水萃取，水相离心过滤后，真空干燥，用去离子水配制成含50％雏菊花的水溶液，即可。
实施例1
按以下各组分和配比制备美白组合物。
34wt％欧囊链藻提取物、33wt％雏菊花提取物、33wt％羟乙基哌嗪乙烷磺酸，在室温下搅拌混合均匀，即得美白组合物。其中，欧囊链藻提取物的总多酚含量为0.25g/kg，总糖含量为3.2mg/g，雏菊花提取物含有2.8wt％的总黄酮。
实施例2
按以下各组分和配比制备美白组合物。
40wt％欧囊链藻提取物、30wt％雏菊叶提取物、30wt％羟乙基哌嗪乙烷磺酸，在室温下搅拌混合均匀，即得美白组合物。其中，欧囊链藻提取物的总多酚含量为0.13g/kg，总糖含量为2.0mg/g，雏菊叶提取物含有1.9wt％的总黄酮。
实施例3
按以下各组分和配比制备美白组合物。
40wt％欧囊链藻提取物、40wt％雏菊根茎提取物、20wt％羟乙基哌嗪乙烷磺酸，在室温下搅拌混合均匀，即得美白组合物。其中，欧囊链藻提取物的总多酚含量为0.07g/kg，
总糖含量为1.2mg/g，雏菊根茎提取物含有1.3wt％的总黄酮。
实施例4黑素细胞测试
(1)B16细胞中酪氨酸酶活性抑制实验
将处于对数生长期的B16细胞接种于96孔板，置37℃、5％CO2培养箱孵育。待细胞密度约90％时，用含不同浓度活性物的完全培养基处理细胞，以50μg/mLVc做阳性对照。24h后，加入TritonX-100、L-DOPA、MBTH的混合工作液，放培养箱继续孵育。3h后，用酶标仪检测OD490nm，并进行统计学分析。
(2)人原代黑素细胞中酪氨酸酶活性抑制实验
将处于对数生长期的人原代黑素细胞接种于24孔板，置37℃、5％CO2培养箱孵育，培养过程中始终添加α-MSH。待细胞密度约90％时，用含不同浓度活性物的完全培养基处理细胞，以0.5mM的α-熊果苷为阳性对照。24h后，加入TritonX-100、L-DOPA、MBTH的混合工作液，放培养箱继续孵育。3h后，用酶标仪检测OD490nm，并进行统计学分析。
实验结果如表1所示。
表1 黑素细胞酪氨酸酶抑制率测试
结果显示，欧囊链藻提取物和羟乙基哌嗪乙烷磺酸按0.1wt％，1wt％浓度作用于B16和人原代黑素细胞后，有拮抗α-MSH和抑制酪氨酸酶活性的美白作用，相同浓度的雏菊花提取物作用于人原代黑素细胞后，没有抑制酪氨酸酶活性作用。欧囊链藻提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸、雏菊花提取物的美白组合物按相同浓度0.1wt％，1wt％作用于细胞后，有拮抗α-MSH和抑制酪氨酸酶活性的美白作用。欧囊链藻提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸、雏菊花提取物的美白组合物在相同浓度下，抑制酪氨酸酶活性作用数值均高于单独欧囊链藻提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸和雏菊花提取物，而且对人原代黑素细胞酪氨酸酶抑制率高于阳性对照0.5mMα-熊果苷，说明欧囊链藻提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸、雏菊花提取物的复配物具有美白作用，且优于三者单独作用于细胞时。
实施例5美白化妆品制备之精华液A
按照实施例1制备的美白组合物，加入到精华液A中，精华液A由以下质量百分比的组分制成：
表2 精华液A组成成分表
制备方法如下：
(1)将A组分混合加热到75℃至溶解完全；
(2)将B组分混合，加热至75℃，搅拌至溶解完全；
(3)在搅拌下，将A组分缓缓加到B中，均质均匀后降温，温度降至40℃后加入C、D组分，搅拌均匀即可。
实施例6稳定性测试
将实施例5制备的美白精华液A，进行耐热、耐寒、交变、光照等稳定性测试。
其中，耐热测试条件为：45±1℃，恒温避光，3个月。耐寒测试条件为：-20±1℃，恒温避光，3个月。交变测试条件为：-20℃恒温3.5天转至45℃恒温3.5天，避光，3个月。光照测试条件为：光照恒温恒湿试验箱(1.47×106Lux·hr，7d)。低温性能测试条件为：4±1℃，恒温避光，3个月。
由本申请提供的美白美容组合物所制成的美白精华液，在测试前后未出现变色、分层、异味等外观性状改变，具有优良的稳定性。
实施例7人体美白功效评价
按照实施例5制备的精华液样品，进行产品使用前后的美白功效评价。
志愿者：67名25-55岁女性健康受试者，入选标准包括脸部肌肤暗沉伴有色斑、色素沉着、瑕疵斑点、细纹等症状，脸部至少有一个色素沉着区，色素沉着区不能是雀斑、严重黄褐斑等临床认为很难去除的色斑，测试部位色素沉着区皮肤和周围邻近皮肤的ITA°差值大于10。其中组A使用实施例5制备的精华液样品有33名女性完成测试，组NT为对照组使用对比例1制备的精华液样品有34名女性完成测试；
测试区域：面部；
使用方法：志愿者每天早晚各使用一次，取2滴管精华液(每次滴管吸到底为1滴管)，约0.8～1g，均匀涂抹于全脸至吸收，注意眼周部位也要涂抹；
使用周期：28天；
使用频率：早晚各使用一次；
测试周期：在产品使用前(0周)以及连续使用后的2周、4周、8周及12周，使用无创性皮肤测试仪器对脸部肌肤的参数进行采集并全脸拍照；
测试参数：皮肤水分含量(Corneometer CM825)，经皮水分流失(Vapometer)，血红素、黑色素含量(MX18)，皮肤纹理(VC20_SEw)，图像分析(VISIA-CR)；专家评估；消费者问卷评估；
使用前：志愿者清洁面部，在温度(21±1℃)、相对湿度(50％±10％)的实验室中等候30min，进行面部图像采集，测试皮肤角质层水分含量、经皮水分流失、血红素、黑色素含量、皱纹等，根据使用说明自行使用测试样品；
数据统计：数据使用SPSS19.0进行统计，应用配对T检验进行比较，其显著性差异水平均为P<0.05。
实验结果显示：
1)与基础值相比，连续使用实施例1美白精华液A后2周、4周、8周和12周，皮肤水分含量、经表皮水分流失均显著好于基础值，水分含量分别提升26.12％，29.02％，34.80％和42.65％，经表皮水分流失分别改善18.46％，19.84％，31.12％和35.53％。
2)与基础值相比，连续使用实施例1美白精华液A后8周，眼角皱纹和眼下皱纹显著好于基础值，使用后8周眼角皱纹改善9.35％，眼下皱纹改善10.45％。
3)与基础值相比，连续使用实施例1美白精华液A后8周和12周，黑色素含量显著好于基础值，分别减少18.11％和24.90％。使用后2周、4周、8周和12周，红色素含量显著好于基础值，分别减少8.49％，15.18％，19.29％和28.45％。
4)与基础值相比，连续使用实施例1美白精华液A后8周和12周，肤色明度、红度显著好于基础值，明度分别提升3.70％和5.02％；肤色红度分别降低14.77％和23.47％。连续使用实施例1美白精华液A后12周，肤色黄度显著差于基础值，增加7.96％。连续使用实施例1美白精华液A后4周、8周和12周，肤色白皙度显著好于基础值，分别提升4.45％，15.46％和16.13％。
5)与基础值相比，连续使用实施例1美白精华液A后2周、4周和12周，色斑面积和色斑面积占比显著好于基础值，色斑面积分别减少4.06％，3.04％和5.76％，色斑面积占比分别减少4.06％，3.04％和5.66％。
6)受试者连续使用实施例1美白精华液A后8周和12周，对如下指标给予好评(TOP2BOX>80％)：认为肤色变白皙了(使用后8周、12周)、认为肤色变均匀了(使用后8周、12周)、认为皮肤变透亮了(使用后12周)、认为皮肤暗沉有所改善(使用后8周、12周)、认为皮肤泛黄有所改善(使用后12周)、认为皮肤变得水润了(使用后12周)、认为皮肤变得更有弹性了(使用后12周)、认为皮肤变得细腻/平滑了(使用后8周、12周)
由上述结果可知，本发明的美白组合物应用于美白化妆品的制备，可以增加皮肤角质层含水量，减少皮肤水分流失，减轻皱纹，减少皮肤色素沉积，改善肤色黄度，提升肤色白皙度，改善皮肤色斑，消费者对产品美白效果满意度高，产品安全好，使用过程中未发生任何不良反应。
Claims (9)
1.一种用于皮肤美白的组合物，其特征在于，按照重量百分比计，其包含作为有效成分的以下物质：20~40wt%欧囊链藻提取物、20~40wt%雏菊提取物、20~40wt%羟乙基哌嗪乙烷磺酸；所述的欧囊链藻提取物含有0.05~0.30g/kg的总多酚和0.07~3.2mg/g的总糖；
所述的雏菊提取物含有0.1~2.8wt%的总黄酮；所述的雏菊提取物为雏菊花提取物。
2.如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：将欧囊链藻提取物、雏菊提取物、羟乙基哌嗪乙烷磺酸依次加入搅拌釜中，低速搅拌至混合均匀，降温至室温，即可。
3.如权利要求1所述的组合物在制备具有美白功效的皮肤外用剂中的用途。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述组合物具有拮抗α-MSH和抑制酪氨酸酶活性的作用。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述皮肤外用剂包含0.01~50wt%所述的组合物。
6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述皮肤外用剂包含0.1~25wt%所述的组合物。
7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述皮肤外用剂包括化妆品、药品。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的化妆品为用于美白、祛斑和亮肤的化妆品。
9.一种具有美白功效的皮肤外用剂，其特征在于，该外用剂包含权利要求1所述的组合物。
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