TW201427716A - 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 - Google Patents
包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 Download PDFInfo
- Publication number
- TW201427716A TW201427716A TW102140249A TW102140249A TW201427716A TW 201427716 A TW201427716 A TW 201427716A TW 102140249 A TW102140249 A TW 102140249A TW 102140249 A TW102140249 A TW 102140249A TW 201427716 A TW201427716 A TW 201427716A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- long
- acting
- phytate
- conjugate
- acid
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/605—Glucagons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
Abstract
本發明係有關不含白蛋白之液態製劑,其包含長效型調酸素接合物,其中包含調酸素之衍生物、變異體、前體或片段之調酸素胜肽係連接於免疫球蛋白Fc區,相較於天然調酸素,可增加該長效型調酸素接合物生理活性之持續時間及長時期維持其體內穩定性;以及製備該液態製劑之方法。該液態製劑包含緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑,不含人血清白蛋白及潛在有害人體之因子,因此不易遭病毒感染。此外,本發明之調酸素接合物包含連接於免疫球蛋白Fc區之調酸素,因此,相較於天然調酸素,具有較大之分子量、延長之生理活性、及優異之貯存穩定性。
Description
本發明係有關不含白蛋白之液態製劑,其包含長效型(long-lasting)調酸素接合物,其中包含調酸素之衍生物、變異體、前體或片段之調酸素胜肽連接於免疫球蛋白Fc區,相較於天然(native)調酸素,可增加該長效型調酸素接合物生理活性之持續時間及長時期維持其活體內穩定性。本發明亦有關製備該液態製劑之方法。
肥胖症被界定為可能損害健康之異常或過量脂肪蓄積之症狀,係由於能量攝取超過能量消耗之能量不平衡而產生。以往,肥胖症並非嚴重之健康問題,惟隨著經濟成長,肥胖人口隨著經濟富裕之增長而日益增加,與肥胖症相關的各種疾病人數亦越來越多。根據世界衛生組織(WHO)報告,全世界超過15億成年人過重,其中超過5億人肥胖,於1980與2008年之間,肥胖症人口增加約兩倍(World Health Organization,Fact sheet on obesity and
overweight,2011)。不僅於高所得國家,於低所得國家,肥胖人口比例也正在增加。過重與肥胖症為血壓與膽固醇量升高之原因,並引起或導致各種疾病惡化。此外,肥胖症問題於兒童或青少年更為嚴重,提高糖尿病、心臟疾病、高血壓或高脂血症之發生率,也會導致死亡或能力喪失。
如上述,肥胖症為全球性疾病及社會問題,惟以往一般相信肥胖症可經由個人努力予以克服,因此並未特別重視肥胖症之治療。然而,由於肥胖症係與食慾控制及能量代謝等機制相關之複雜疾病,不容易治療。因此,肥胖症之治療不僅需要病患自己努力,亦要有能處理與食慾控制及能量代謝相關之機制異常之方法。因此,業界一直致力於開發治療肥胖症之藥物。
如此努力之結果,已開發包括利莫那班(Rimonabant,Sanofi-Aventis)、西布曲明(Sibutramine,亞培(Abbott))、Contrave(武田(Takeda))、奧利司他(Orlistat,羅氏(Roche))等藥物;惟該等藥物具有顯現胎兒副作用或對治療肥胖症效果不充分之缺點。據報導,給藥一年後,利莫那班(Sanofi-Aventis)顯現中樞神經系統疾患,西布曲明(Abbott)與Contrave(Takeda)顯現心血管副作用,及奧利司他(Roche)顯現僅約4公斤之減重效果。因此,目前很少或幾乎沒有可安全開處方給肥胖症病患使用之肥胖症治療劑。
近來,升糖素衍生物已備受關注。升糖素係因藥物治療、疾病、激素或酵素缺乏等,使血糖值(blood
glucose levels)開始下降時,由胰臟產生。升糖素具有刺激肝臟細胞分解貯存之肝醣成為葡萄糖,然後釋放到血液中,以提高血糖值至正常量之功能。除了提高血糖值之作用外,據報導升糖素可壓制食慾及活化脂肪細胞之激素敏感性脂酶(HSL),促進脂質分解,從而顯現抗肥胖症效果。於升糖素衍生物中,正開發升糖素樣肽-1(GLP-1)作為用於降低糖尿病患高血糖之治療劑,有效用於刺激胰島素之合成與分泌、抑制升糖素分泌、壓制胃排空、增強葡萄糖利用及抑制攝食量;已知從蜥蜴毒液單離之艾塞那肽-4(exendin-4)具有與GLP-1約50%之胺基酸同源性,其於糖尿病患中活化GLP-1受體以降低高血糖。然而,據報導,包括GLP-1之肥胖症治療藥物會引起例如嘔吐與噁心之副作用。
因此,作為GLP-1之替代物,能與兩種胜肽(GLP-1與升糖素)之受體結合之調酸素正受到關注。調酸素係自前升糖素(升糖素前體)製得之胜肽,由於其像GLP-1一樣,可抑制攝食量、促進飽足感,又像升糖素一樣,顯現解脂活性,因此為強效之抗肥胖症劑。
基於調酸素胜肽之雙重功能,治療肥胖症藥物之開發研究已積極進行。例如,韓國專利註冊案No.925017揭示一種用於治療人類肥胖症之口服、非經腸、經黏膜、直腸、皮下或經皮之醫藥組成物,其包含調酸素作為活性成分。然而,據報導,包含調酸素之肥胖症治療劑,其活體內半衰期短,即使於一天投予三次之高劑量下,
對治療肥胖症亦顯現低效果。因此,業界致力於藉由修飾調酸素以增加調酸素之活體內半衰期或肥胖症治療效力。
舉例而言,藉由以D-絲胺酸置換調酸素位置2胺基酸之L-絲胺酸,增加對二肽基肽酶-IV(DPP-IV)之抗性,及藉由使膽固醇基團依附於C端而增長血液半衰期,而得到雙重促效劑調酸素(Merck);藉由以D-絲胺酸置換調酸素位置2胺基酸之L-絲胺酸增加對DPP-IV之抗性、以丙胺酸置換位置17胺基酸之精胺酸增加對蛋白酶之抗性、以離胺酸置換位置27胺基酸之甲硫胺酸增加氧化穩定性、及分別以天冬胺酸、丙胺酸與絲胺酸置換位置20與24胺基酸之麩醯胺酸及位置28胺基酸之天冬醯胺增加脫醯胺化穩定性而得到ZP2929(Zealand)。該雙重促效劑調酸素(Merck)具增長之1.7小時活體內半衰期,雖較天然調酸素之半衰期(8至12分鐘)長,惟仍為非常短之活體內半衰期,而以每公斤數毫克之極高劑量投予。因此,調酸素或其衍生物具有兩大缺點,亦即,半衰期短及醫藥效力低;由於該等缺點而必須每天以高劑量投予。為了克服該等缺點,乃研究增長調酸素之血液半衰期,同時維持其活體內活性之方法,結果開發出調酸素衍生物。此外,使用此技術,將載劑接合於該調酸素衍生物而製備非肽基聚合物,發現由於增長其血液半衰期同時維持活體內活性,因此該蛋白質接合物可顯現較佳之抗肥胖症效力(韓國專利申請案No.10-2012-0064110)。
通常,蛋白質及胜肽具有非常短之半衰
期,於暴露於例如不適宜溫度、水空氣界面、高壓、物理/機械應力、有機溶劑與微生物污染等各種因素下,會進行變性例如單體聚集而沈澱、吸附於容器表面等。此變性作用不可逆,因此變性之蛋白質及胜肽喪失固有物理化學特性及生理活性效應。此外,蛋白質及胜肽不穩定且容易受例如溫度、濕度、氧、紫外線等外在因素影響而進行包括結合、聚合或氧化之物理或化學變化,導致活性大量喪失(韓國專利註冊案No.10-0389726)。
再者,經吸附之蛋白質及胜肽容易藉由變性過程聚集,該變性蛋白質及胜肽投予人體時,即成為於人體中形成抗體之起因;基於此,蛋白質及胜肽必須以足夠穩定之形式投予。因此,防止蛋白質及胜肽於溶液中變性之各種方法已被研究(John Geigert,J.Parenteral Sci.Tech.,43,No5,220-224,1989;David Wong,Pharm.Tech.October,34-48,1997;Wei Wang.,Int.J.Pharm.,185,129-188,1999;Willem Norde,Adv.Colloid Interface Sci.,25,267-340,1986;Michelle et al.,Int.J.Pharm.120,179-188,1995)。
欲達到穩定性目標,應用冷凍乾燥於若干蛋白質及胜肽藥物。然而,使用凍乾產品時,必須再溶解於注射用水中,並不方便。此外,於冷凍乾燥情況下,由於生產程序中包括冷凍乾燥過程,因此需要大容量冷凍乾燥機或類似設備之大量投資。再者,使用噴霧乾燥機生產粉末狀蛋白質及胜肽之方法亦正被使用中,惟於此情況下,由於收率低導致經濟效率下降,且暴露於高溫對蛋白
質穩定性會有不利影響。
為了克服此類限制,業界已進行研究,將安定劑添加於蛋白質及胜肽溶液中,以壓制蛋白質及胜肽之物理化學變化,同時即使長期貯存,仍可維持其活體內效應。人血清白蛋白,其為一種蛋白質,已被廣泛使用作為各種蛋白質藥物之安定劑,且其成果已被證實(Edward Tarelli et al.,Biologicals(1998)26,331-346)。
純化人血清白蛋白之程序包括鈍化例如黴漿菌、普利昂(prion)、細菌與病毒等生物污染物,及篩選或檢驗一或多種生物污染物或病原體。然而,病患將被暴露於未完全移除或鈍化之生物污染物中之風險總是存在。舉例而言,篩選程序包括檢驗捐贈者之血液是否含有特定病毒,惟此程序並不一定可靠。特別是,無法檢測出存在極少數捐贈者中之特定病毒。
貯存期間,不同條件下,由於化學差異性,不同蛋白質可能以不同速率逐漸失活。亦即,就不同蛋白質而言,藉由安定劑延伸之貯存期限並不相同。基於此,用於提供貯存穩定性之安定劑之適當比例、濃度與種類,將視標的蛋白質之物理化學特性而定。組合使用安定劑時,由於彼此間之競爭與相互作用,可能導致與預期效果不同之不利作用。再者,由於貯存期間蛋白質之性質或濃度可能改變,所用安定劑可能顯現與預期不同之效應。因此,使溶液中之蛋白質穩定需要大量之努力與警惕。
詳言之,調酸素與免疫球蛋白Fc之接合
物,係由生理活性肽之調酸素連接於免疫球蛋白Fc區而成之接合物。由於接合物之分子量與容量必定與天然調酸素者不同,所以欲穩定蛋白質,需要獨特之組成物。
再者,由於調酸素(即生理活性肽)及免疫球蛋白Fc區係具不同物理化學特性之胜肽或蛋白質,應同時被穩定。然而,如上述,貯存期間,不同條件下,由於化學差異性,不同胜肽或蛋白質可能以不同速率逐漸失活;及組合使用適於蛋白質或胜肽之安定劑時,由於彼此間之競爭與相互作用,可能導致與預期效果不同之不利作用。因此,於長效型調酸素接合物之情況下,非常難以找到同時穩定生理活性肽之調酸素及免疫球蛋白Fc區之組成物。
於此情況下,本發明人等進行廣泛努力以提供可長時期貯存而不擔心病毒污染之穩定液態製劑,結果已發現包含緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑,並可進一步包含例如等滲劑或胺基酸之添加劑及防腐劑之可重覆使用的安定劑,可增加長效型調酸素衍生物之穩定性,使用該安定劑可製備具成本效益且穩定之液態製劑,從而完成本發明。
本發明之目的在於提供長效型調酸素接合物之液態製劑,其包含藥理有效量之長效型調酸素接合物,其中為生理活性肽之調酸素係連接於免疫球蛋白Fc區;與不含白蛋白之安定劑。
本發明之另一目的在於提供製備上述液態製劑之方法。
本發明之又另一目的在於提供預防或治療肥胖症或糖尿病之組成物,其包含含有連接於免疫球蛋白Fc區之生理活性肽調酸素之液態調酸素接合物製劑。
本發明之又另一目的在於提供預防或治療肥胖症或糖尿病之方法,該方法包括投予患者上述液態製劑。
欲達上述目的,於一態樣中,本發明提供長效型調酸素接合物之液態製劑,其包含藥理有效量之長效型調酸素接合物,其中為生理活性肽之調酸素係連接於免疫球蛋白Fc區;與不含白蛋白之安定劑,其中該安定劑含有緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑。
本文所用之“液態製劑”一詞係指加工成為液態形式之藥物製劑,並擬包括所有供內服之液態製劑與供外用之製劑。於先前技術中,包含連接於免疫球蛋白Fc功能區的調酸素之適用於藥理有效量調酸素接合物之本發明液態製劑並未見報導。因此,本發明液態製劑可包含藥理有效量之包含調酸素連接於免疫球蛋白Fc功能區的調酸素接合物,與不含白蛋白之安定劑,其中該安定劑含有緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑。此外,本發明之液態製劑可進一步包含防腐劑。
於本發明中,安定劑可進一步包含選自包
括等滲劑、糖類、多元醇、與胺基酸之組群之一或多種成分。糖醇可為選自包括甘露糖醇、山梨糖醇與甘油之組群之一或多者,於液態製劑中之糖醇濃度可為2至15%(w/v)。再者,緩衝劑可為選自包括檸檬酸鹽、乙酸鹽、組胺酸與磷酸鹽緩衝劑之組群之一或多者,及可具有範圍從4.5至7.0之pH。等滲劑可為氯化鈉,非離子性界面活性劑可為聚山梨醇酯或泊洛沙姆(poloxamer)及可以0.001至0.1%(w/v)之濃度存在。胺基酸可為甲硫胺酸。因此,本發明液態製劑可包含安定劑,其含有pH範圍從4.8至6.0之緩衝劑、選自包括甘露糖醇與山梨糖醇之組群之一或多種糖醇、與聚山梨醇酯20。
此外,本發明液態製劑可進一步包含選自包括間甲酚、酚(phenol)與苄醇之組群之一或多種防腐劑。於液態製劑中之防腐劑濃度可為0.001至1%(w/v)。
詳言之,本發明液態製劑可包含藥理有效量之長效型調酸素接合物、5至50mM組胺酸、2至15%(w/v)之甘露糖醇、0.01至1mg/mL之甲硫胺酸與0.001至0.1%(w/v)之聚山梨醇酯20。除了該等成分之外,液態製劑可進一步包含0.001至1%(w/v)之間甲酚。
本文所用之“安定劑”一詞係指可穩定地維持成分,例如活性成分,達一特定期間之物質。就本發明之目的而言,該術語係指能使長效型調酸素接合物被穩定貯存之物質。例如長效型調酸素接合物之蛋白質之貯存穩定性,重要的是不僅要保證精確劑量,亦要抑制調酸素
衍生物接合物之抗原性物質產生之可能。
本發明中之安定劑較佳為包含緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑,以賦予長效型調酸素接合物穩定性。此外,安定劑較佳為可進一步包含選自包括等滲劑、糖類、多元醇與胺基酸之組群之一或多種成分。
緩衝劑具有維持液態製劑pH之功能,使液態製劑之pH不會急遽變化,俾使長效型調酸素接合物穩定。緩衝劑之實例可包括醫藥上可接受之pH緩衝劑,包括鹼金屬鹽(磷酸鈉、磷酸鉀、或其等之氫或二氫鹽)、檸檬酸鈉、檸檬酸、乙酸鈉、與組胺酸,或亦可使用該等緩衝劑之混合物。緩衝劑較佳為檸檬酸鹽或組胺酸緩衝劑,更佳為組胺酸緩衝劑。緩衝劑之濃度較佳為5至100mM,更佳為5至50mM。緩衝劑之pH較佳為4.0至8.0,更佳為4.5至7.0,及又更佳為5.0至6.0。
於本發明之一實施例中,係根據液態製劑之緩衝劑pH,測定長效型調酸素接合物之穩定性。亦即於25℃,在改變緩衝劑之pH下,將長效型調酸素接合物貯存0至4週後,分析接合物之殘留量;結果顯示,調酸素接合物於pH 5.6、pH 5.8與pH 6.0時較為穩定(實施例3,表2至5;實施例7,表18至21;及實施例8,表22至25)。因此,發現本發明中最穩定之緩衝劑pH範圍為從5.0至6.0。於本發明之一實施例中,係根據液態製劑之緩衝劑種類,測定長效型調酸素接合物之穩定性。具體而言,使調酸素接合物與0.02%聚山梨醇酯20、0.1mg/mL甲硫胺酸及
5%甘露糖醇,於25℃貯存0至4週後,分析接合物之殘留量。SE-HPLC分析結果顯示,相同pH下,接合物之殘留量於相同pH之緩衝劑間並無極大差異。IE-HPLC或RP-HPLC分析結果顯示,於相同pH下,組胺酸最為穩定(實施例8與表22至25)。
糖醇具有增加長效型調酸素接合物穩定性之功能。於本發明中,糖醇可為選自包括甘露糖醇、山梨糖醇與甘油之組群之一或多者。較佳者,糖醇可為甘露糖醇。液態製劑中之糖醇濃度較佳為1至20%(w/v),更佳為2至15%(w/v)。
於本發明之一實施例中,係分析安定劑糖醇之種類對長效型調酸素接合物穩定性之影響。具體而言,於25℃,使調酸素接合物於檸檬酸鹽緩衝液(pH 5.6)中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。結果,接合物於甘露糖醇或山梨糖醇存在下比於相同濃度之甘油存在下更穩定。RP-HPLC分析結果顯示,接合物於甘露糖醇存在下比於山梨糖醇存在下稍微更穩定些(實施例4與表6至9)。換言之,證明添加甘露糖醇或山梨糖醇顯現優異之穩定性,惟接合物於甘露糖醇存在下最穩定。
於本發明之一實施例中,係分析安定劑糖醇之濃度對長效型調酸素接合物穩定性之影響。具體而言,於25℃,使調酸素接合物貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。結果,於2%甘
露糖醇或15%甘露糖醇存在下,產生蛋白質沈澱,於5%甘露糖醇或10%甘露糖醇存在下,接合物穩定(實施例5,表10至13;及實施例7,表18至21)。
非離子性界面活性劑具有降低蛋白質溶液表面張力,以防止蛋白質被吸附於疏水性表面或聚集之功能。可用於本發明之非離子性界面活性劑之較佳實例包括聚山梨醇酯系之非離子性界面活性劑與泊洛沙姆系之非離子性界面活性劑,其可單獨或組合二或多種使用。於液態製劑中,使用高濃度非離子性界面活性劑並不適當。本發明液態製劑含有濃度為0.2%(w/v)或更少,較佳為0.001至0.1%(w/v)之非離子性界面活性劑。
本發明之安定劑可含有胺基酸,例如甲硫胺酸。甲硫胺酸藉由,例如,抑制由蛋白質之氧化反應引起之雜質產生,而具有附加地穩定蛋白質之功能。
於本發明之一實施例中,係測試安定劑非離子性界面活性劑之濃度及胺基酸之存在與否,對長效型調酸素接合物穩定性之影響。具體而言,於25℃,使調酸素接合物於檸檬酸鹽緩衝液(pH 5.6)與10%甘露糖醇中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。結果,調酸素接合物於0.02%聚山梨醇酯20與0.1mg/mL甲硫胺酸存在下最穩定(實施例6及表14至17)。
於活體內投予溶液中之長效型調酸素接合物時,等滲劑具有維持滲透壓於適當水準之功能,同時可附加地具有進一步穩定溶液中之長效型調酸素接合物之功
能。等滲劑之代表性實例包括水溶性無機鹽,例如氯化鈉、硫酸鈉;檸檬酸鈉等。等滲劑之濃度較佳為0至200mM,其含量可適當地予以控制。
本發明之安定劑較佳為不含白蛋白。可作為蛋白質安定劑用之人血清白蛋白係以人血液製備,因此可能遭人類致病性病毒污染,而明膠或牛血清白蛋白可能引起疾病或可能於若干病患中引起過敏性反應。本發明之不含白蛋白安定劑不含例如人類或動物之血清白蛋白或純化明膠等外來蛋白質,因此不容易遭受病毒感染。
可附加地用以增加長效型調酸素接合物貯存穩定性之糖類與多元醇中,糖類之較佳實例包括單醣例如甘露糖、葡萄糖、海藻糖與木糖,及多醣例如乳糖、麥芽糖、蔗糖、棉子糖與聚葡萄糖;多元醇之較佳實例包括聚丙二醇、低分子量聚乙二醇、甘油、低分子量聚丙二醇等。該等糖類與多元醇可單獨或組合二或多種使用。
除了上述緩衝劑、等滲劑、糖醇、胺基酸與非離子性界面活性劑外,於不損害本發明效果之範圍內,本發明液態製劑可進一步包含此項技藝中已知之其他成分或物質。
本發明之長效型調酸素接合物液態製劑包含藥理有效量之包含連接於免疫球蛋白Fc區之生理活性肽調酸素之長效型調酸素接合物;與不含白蛋白之安定劑,其中該安定劑可含有pH範圍從4.8至7.0之緩衝劑、選自包括甘露糖醇與山梨糖醇之組群之一或多種糖醇、與
聚山梨醇酯20。更具體而言,安定劑可含有pH範圍從5.0至6.0之緩衝劑、甘露糖醇與聚山梨醇酯20。此外,安定劑可進一步包含選自包括等滲劑、糖類、多元醇與胺基酸之組群之一或多種成分。
含有賦予長效型調酸素接合物穩定性之高濃度長效型調酸素接合物的本發明之不含白蛋白之液態製劑,不容易遭受病毒感染,其係簡單並顯示優異之貯存穩定性,因此相較於其他安定劑或凍乾製劑,可以經濟方式提供。
此外,由於相較於天然調酸素,本發明液態製劑包含具持久時間生理活性之長效型調酸素接合物,相較於習知調酸素製劑,可於人體內保持長時期之蛋白質活性,因此可作為有效藥物製劑之用。此外,即使為高濃度之長效型調酸素接合物,本發明液態製劑亦賦予優異之穩定性。
本文所用之“調酸素”一詞係指由升糖素前體之前升糖素產生之胜肽。於本發明中,調酸素意欲包括天然調酸素及其前體、衍生物、片段與變異體。較佳為,調酸素具有SEQ ID NO:1之胺基酸序列(HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA)。
本文所用之“調酸素衍生物”一詞意欲包括於調酸素胺基酸序列中由胺基酸之加成、缺失或置換而獲得,且相較於天然調酸素,可活化更高量升糖素與GLP-1受體之胜肽、胜肽衍生物或胜肽模擬物。於本發明中,調
酸素衍生物可具有SEQ ID NOS:2至34之任一胺基酸序列;較佳為,調酸素衍生物可具有SEQ ID NO:23或25之胺基酸序列;更佳為,其可具有SEQ ID NO:25之胺基酸序列。
本文所用之“調酸素片段”一詞係指具有天然調酸素之胺基或羧基端之一或多個胺基酸之片段,其中所加入之胺基酸亦可為非天然存在之胺基酸(例如,D型胺基酸)。此調酸素片段具有於活體內調節血糖值之功能。
本文所用之“調酸素變異體”一詞係指有一或多個胺基酸殘基與天然調酸素之胺基酸序列不同,且持有活化GLP-1受體與升糖素受體功能之胜肽。調酸素變異體可利用將天然調酸素胺基酸序列中若干胺基酸加以置換、加成、缺失、修飾、或其組合之任一者予以製備。
製備調酸素變異體、衍生物與片段之方法可單獨或組合使用。例如,本發明亦包括具有一或多個胺基酸與天然調酸素不同且N端胺基酸殘基去胺基化,並具有活化GLP-1受體與升糖素受體二者之功能之胜肽。
本文中提及之胺基酸係根據IUPAC-IUB之命名規則縮寫如下:丙胺酸 A; 精胺酸 R;天冬醯胺 N; 天冬胺酸 D;半胱胺酸 C; 麩胺酸 E;麩胺醯胺 Q; 甘胺酸 G;組胺酸 H; 異白胺酸 I;
白胺酸 L; 離胺酸 K;甲硫胺酸 M; 苯丙胺酸 F脯胺酸 P; 絲胺酸 S;蘇胺酸 T; 色胺酸 W;酪胺酸 Y; 纈胺酸 V。
於本發明中,調酸素衍生物涵蓋利用SEQ ID NO:1胺基酸序列中胺基酸之置換、加成、缺失或轉譯後修飾(例如,甲基化、醯化、泛蛋白化、或分子內共價鍵結)製備之可活化升糖素與GLP-1二者之受體之任何胜肽。關於胺基酸之置換或加成,不僅可使用人類蛋白質中常見之20種胺基酸,亦可使用非典型或非天然存在之胺基酸。非典型胺基酸之商業來源包括Sigma-Aldrich、ChemPep Inc.、與Genzyme Pharmaceuticals。包含該等胺基酸之胜肽及非典型胜肽之序列可合成及購自例如American Peptide Company或Bachem(USA)或Anygen(Korea)等商業供應商。
於本發明之特定具體實例中,本發明之調酸素衍生物為包含下式1胺基酸序列之新穎胜肽:式1 R1-X1-X2-GTFTSD-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-X21-X22-X23-X24-R2其中R1為組胺酸、去胺基組胺醯基、二甲基組胺醯基(N-二甲基-組胺醯基)、β-羥基咪唑基丙醯基、4-咪唑基乙醯基、
β-羧基咪唑基丙醯基或酪胺酸;X1為Aib(胺基異丁酸)、d-丙胺酸、甘胺酸、Sar(N-甲基甘胺酸)、絲胺酸或d-絲胺酸;X2為麩胺酸或麩胺醯胺;X3為白胺酸或酪胺酸;X4為絲胺酸或丙胺酸;X5為離胺酸或精胺酸;X6為麩胺醯胺或酪胺酸;X7為白胺酸或甲硫胺酸;X8為天冬胺酸或麩胺酸;X9為麩胺酸、絲胺酸或α-甲基-麩胺酸或缺失;X10為麩胺醯胺、麩胺酸、離胺酸、精胺酸或絲胺酸或缺失;X11為丙胺酸、精胺酸或纈胺酸或缺失;X12為丙胺酸、精胺酸、絲胺酸或纈胺酸或缺失;X13為離胺酸、麩胺醯胺、精胺酸或α-甲基-麩胺酸或缺失;X14為天冬胺酸、麩胺酸或白胺酸或缺失;X15為苯丙胺酸或缺失;X16為異白胺酸或纈胺酸或缺失;X17為丙胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、離胺酸、麩胺醯胺或α-甲基-麩胺酸或缺失;X18為色胺酸或缺失;X19為丙胺酸、異白胺酸、白胺酸、絲胺酸或纈胺酸或缺
失;X20為丙胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、麩胺醯胺或精胺酸或缺失;X21為天冬醯胺或缺失;X22為丙胺酸、甘胺酸或蘇胺酸或缺失;X23為半胱胺酸或離胺酸或缺失;X24為具有包括丙胺酸、甘胺酸與絲胺酸的組合之2至10個胺基酸之胜肽或缺失;及R2為KRNRNNIA(SEQ ID NO:35)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:36)、GPSSGAPPPSK(SEQ ID NO:37)、HSQGTFTSDYSKYLD(SEQ ID NO:38)、HSQGTFTSDYSRYLDK(SEQ ID NO:39)、HGEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SEQ ID NO:40)或缺失(例外情況為其中式1之胺基酸序列與SEQ ID NO:1完全相同)。
為了增加野生型調酸素對升糖素受體與GLP-1受體之活性,本發明之調酸素衍生物可為SEQ ID NO:1胺基酸序列位置1之組胺酸以α碳缺失而得到之4-咪唑基乙醯基、N端胺基缺失得到之去胺基-組胺醯基、以兩個甲基修飾N端胺基得到之二甲基-組胺醯基(N-二甲基-組胺醯基)、以羥基置換N端胺基得到之β-羥基咪唑基丙醯基、或以羧基置換N端胺基得到之β-羧基咪唑基丙醯基加以置換。此外,GLP-1受體結合區可以增強疏水性及離子性鍵結或其組合之胺基酸置換。再者,調酸素序列之一部分可以GLP-1或艾塞那肽-4之胺基酸序列置換,以增加
GLP-1受體之活性。
此外,調酸素序列之一部分可以增強α螺旋之序列置換。較佳為,於式1胺基酸序列位置10、14、16、20、24與28之胺基酸可以已知可穩定α螺旋之由Tyr(4-Me)、Phe、Phe(4-Me)、Phe(4-Cl)、Phe(4-CN)、Phe(4-NO2)、Phe(4-NH2)、Phg、Pal、Nal、Ala(2-噻吩基)與Ala(苯并噻吩基)構成之胺基酸或胺基酸衍生物置換;擬被嵌入之穩定α螺旋之胺基酸或胺基酸衍生物之種類與數量不受限制。較佳為,於胺基酸序列位置10與14、12與16、16與20、20與24、及24與28之胺基酸亦可以麩胺酸或離胺酸置換,以形成環;擬被嵌入之環數量不受限制。最佳為,調酸素衍生物可具有選自下式2至6中之胺基酸序列。
於特定具體實例中,本發明之調酸素衍生物為包括以艾塞那肽或GLP-1之胺基酸序列置換調酸素胺基酸序列得到之具下式2胺基酸序列之新穎胜肽:式2 R1-A-R3
於另一特定具體實例中,本發明之調酸素衍生物為包括具下式3胺基酸序列之新穎胜肽,其係利用經由適當之胺基酸連接子連接調酸素胺基酸序列之一部分與艾塞那肽或GLP-1胺基酸序列之一部分而製備:式3 R1-B-C-R4
於又另一特定具體實例中,本發明之調酸素衍生物為包括下式4胺基酸序列之新穎胜肽,其中調酸素胺基酸序列之一部分以增強與GLP-1受體之疏水性結合之胺基酸置換;例如,其為位置26之Leu以可增加疏水性之胺基酸Ile或Val置換之胜肽。
式4 R1-SQGTFTSDYSKYLD-D1-D2-D3-D4-D5-LFVQW-D6-D7-N-D8-R3
於又另一特定具體實例中,本發明之調酸素衍生物為包括下式5胺基酸序列之新穎胜肽,其中天然調酸素胺基酸序列之一部分係缺失、加成、或以其他胺基酸置換,俾使增加天然調酸素活化GLP-1受體與升糖素受體之能力:式5 R1-E1-QGTFTSDYSKYLD-E2-E3-RA-E4-E5-FV-E6-WLMNT-E7-R5
於式2至5中,R1如式1中所述;A係選自包括SQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT(SEQ ID NO:41)、SQGTFTSDYSKYLDEEAVRLFIEWLMNT(SEQ ID NO:42)、SQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVAWLKNT(SEQ ID NO:43)、GQGTFTSDYSRYLEEEAVRLFIEWLKNG(SEQ ID NO:44)、GQGTFTSDYSRQMEEEAVRLFIEWLKNG(SEQ ID NO:45)、GEGTFTSDLSRQMEEEAVRLFIEWAA(SEQ ID NO:46)、與SQGTFTSDYSRQMEEEAVRLFIEWLMNG(SEQ ID NO:47)所成之組群;
B係選自包括SQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT(SEQ ID NO:41)、SQGTFTSDYSKYLDEEAVRLFIEWLMNT(SEQ ID NO:42)、SQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVAWLKNT(SEQ ID NO:43)、GQGTFTSDYSRYLEEEAVRLFIEWLKNG(SEQ ID NO:44)、GQGTFTSDYSRQMEEEAVRLFIEWLKNG(SEQ ID NO:45)、GEGTFTSDLSRQMEEEAVRLFIEWAA(SEQ ID NO:46)、SQGTFTSDYSRQMEEEAVRLFIEWLMNG(SEQ ID NO:47)、GEGTFTSDLSRQMEEEAVRLFIEW(SEQ ID NO:48)、與SQGTFTSDYSRYLD(SEQ ID NO:49)所成之組群;C為具有包括丙胺酸、甘胺酸與絲胺酸的組合之2至10個胺基酸之胜肽;D1為絲胺酸、麩胺酸或精胺酸;D2為精胺酸、麩胺酸或絲胺酸;D3為精胺酸、丙胺酸或纈胺酸;D4為精胺酸、纈胺酸或絲胺酸;D5為麩胺醯胺、精胺酸或離胺酸;D6為異白胺酸、纈胺酸或絲胺酸;D7為甲硫胺酸、精胺酸或麩胺醯胺;D8為蘇胺酸、甘胺酸或丙胺酸;E1為絲胺酸、Aib、Sar、d-丙胺酸或d-絲胺酸;E2為絲胺酸或麩胺酸;E3為精胺酸或離胺酸;E4為麩胺醯胺或離胺酸;E5為天冬胺酸或麩胺酸;
E6為麩胺醯胺、半胱胺酸或離胺酸;E7為半胱胺酸或離胺酸或缺失;R3為KRNRNNIA(SEQ ID NO:35)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:36)或GPSSGAPPPSK(SEQ ID NO:37);R4為HSQGTFTSDYSKYLD(SEQ ID NO:38)、HSQGTFTSDYSRYLDK(SEQ ID NO:39)或HGEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SEQ ID NO:40);及R5為KRNRNNIA(SEQ ID NO:35)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:36)或GPSSGAPPPSK(SEQ ID NO:37)或缺失(其中式2至5之胺基酸序列與SEQ ID NO:1完全相同者除外)。
較佳為,本發明之調酸素衍生物可為具下式6之新穎胜肽:式6 R1-X1-X2-GTFTSD-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-X21-X22-X23-X24-R2其中R1為組胺酸、去胺基組胺醯基、4-咪唑基乙醯基或酪胺酸;X1為Aib(胺基異丁酸)、甘胺酸或絲胺酸;X2為麩胺酸或麩胺醯胺;X3為白胺酸或酪胺酸;X4為絲胺酸或丙胺酸;X5為離胺酸或精胺酸;X6為麩胺醯胺或酪胺酸;
X7為白胺酸或甲硫胺酸;X8為天冬胺酸或麩胺酸;X9為麩胺酸或α-甲基麩胺酸或缺失;X10為麩胺醯胺、麩胺酸、離胺酸或精胺酸或缺失;X11為丙胺酸或精胺酸或缺失;X12為丙胺酸或纈胺酸或缺失;X13為離胺酸、麩胺醯胺、精胺酸或α-甲基麩胺酸或缺失;X14為天冬胺酸、麩胺酸或白胺酸或缺失;X15為苯丙胺酸或缺失;X16為異白胺酸或纈胺酸或缺失;X17為丙胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩胺醯胺或α-甲基麩胺酸或缺失;X18為色胺酸或缺失;X19為丙胺酸、異白胺酸、白胺酸或纈胺酸或缺失;X20為丙胺酸、離胺酸、甲硫胺酸或精胺酸或缺失;X21為天冬醯胺或缺失;X22為蘇胺酸或缺失;X23為半胱胺酸、離胺酸或缺失;X24為具有2至10個包括甘胺酸之胺基酸之胜肽或缺失;及R2為KRNRNNIA(SEQ ID NO:35)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:36)、GPSSGAPPPSK(SEQ ID NO:37)、HSQGTFTSDYSKYLD(SEQ ID NO:38)、HSQGTFTSDYSRYLDK(SEQ ID NO:39)或
HGEGTFTSDLSKQMEEEAVK(SEQ ID NO:40)或缺失(其中式6之胺基酸序列與SEQ ID NO:1完全相同者除外)。
更佳為,本發明之調酸素衍生物可選自包括SEQ ID NOs:2至34之胜肽組群。又更佳為,本發明之調酸素衍生物可為實施例1之表1中敘述之調酸素衍生物。
調酸素具有GLP-1與升糖素兩種胜肽之活性。GLP-1具有利用胰島素分泌而降低血糖值之作用,惟升糖素具有增加血糖值之作用。再者,GLP-1抑制攝食量及壓抑胃排空,升糖素具有利用促進脂質分解及增加能量代謝而降低體重之作用。因此,GLP-1與升糖素具有不同之生物作用。從而,於該二胜肽呈接合物存在之情況下,若二胜肽任一者之作用大於另一者,則會發生有害作用。舉例而言,若升糖素之作用大於GLP-1,則血糖值會上升;若GLP-1之作用大於升糖素,則會發生例如噁心與嘔吐之副作用。此外,此二胜肽之作用可視二胜肽活性之比例而改變。因此,調酸素衍生物及其接合物並不僅侷限於具有增加活性之衍生物。
本文所用之“調酸素接合物”一詞係指包含調酸素與另一成分之接合物。另一成分可為具有包括增長調酸素之血液半衰期或延緩調酸素釋放至腎臟等有利功能之任何物質。本發明之接合物可共價結合於調酸素或形成微球以增加調酸素之血清穩定性,或延緩調酸素釋放至腎臟,或改變調酸素對其受體之結合活性。可形成包含調
酸素之接合物之載劑可選自包括白蛋白、運鐵蛋白、抗體、抗體片段、彈性蛋白、肝素、多醣例如幾丁質、纖維結合素(fibronectin)等之組群,其可結合於調酸素以增加調酸素之血清穩定性。較佳為,該載劑係免疫球蛋白Fc區。
可用於本發明之免疫球蛋白Fc可為人類免疫球蛋白Fc、具有其類似物序列之免疫球蛋白Fc、或衍生自包括母牛、山羊、豬、小鼠、兔、倉鼠、大鼠與天竺鼠之動物之免疫球蛋白Fc。再者,免疫球蛋白Fc區可衍生自IgG、IgA、IgD、IgE、IgM、或其組合或雜合體(hybrid)。另外,本發明免疫球蛋白Fc區之各功能區可為源自選自包括IgG、IgA、IgD、IgE、與IgM之組群之不同免疫球蛋白功能區之雜合體。替代地,免疫球蛋白Fc區為由相同來源功能區組成之單鏈免疫球蛋白所組成之二聚體或多聚體。較佳為,免疫球蛋白Fc區係衍生自人血液中含量最多之IgG或IgM者。最佳為,免疫球蛋白Fc係衍生自已知可增長配體-結合蛋白質半衰期之IgG。免疫球蛋白Fc可利用以特定蛋白酶處理天然IgG或使用重組技術由轉形細胞製備;較佳為,於大腸桿菌中製備之重組人類免疫球蛋白Fc。
同時,IgG亦可次分類為IgG1、IgG2、IgG3與IgG4,於本發明中,亦可能為該等亞型之組合或雜合體。較佳為,IgG為IgG2與IgG4亞型;最佳為,其係實質上缺少例如補體依賴性細胞毒性(CDC)等效應物功能之IgG4之Fc區。換言之,於本發明中作為藥物載劑用之最佳免疫球蛋白Fc區係衍生自人類IgG4之非醣基化Fc區。
衍生自人類之Fc區比衍生自非人類之Fc區更佳,後者於人體中可能作為抗原而引起不良之免疫反應,例如產生對抗該抗原之新抗體。
於本發明中,調酸素接合物可使用非肽基聚合物或基因重組技術製備。較佳為,接合物可藉由非肽基聚合物連接調酸素於免疫球蛋白Fc區予以製備。
非肽基聚合物可連接於各調酸素與免疫球蛋白Fc區。非肽基聚合物之各末端分別可連接於免疫球蛋白Fc區及調酸素衍生物之胺或硫醇基。
本文所用之“調酸素接合物”一詞係指相較於天然調酸素,具有增加之長效作用者。長效型接合物之實例包括,惟不限於,天然調酸素胺基酸序列中之胺基酸經修飾、置換、加成或缺失所產生之調酸素衍生物連接於例如聚乙二醇(PEG)之生物可降解聚合物之接合物;具有例如白蛋白或免疫球蛋白之優異長效型性質之蛋白質連接於調酸素之接合物;具有活體內結合白蛋白能力之脂肪酸連接於調酸素之接合物;或調酸素被封裝於生物可降解之奈米粒子之接合物。
本文所用之“非肽基聚合物”一詞係指包括兩個或多個藉由代替胜肽鍵之任何共價鍵彼此連接之重複單元之生物相容性聚合物。於本發明中,非肽基聚合物可與非肽基連接子互換使用。
用於利用習知框架內融合法獲得之融合蛋白質之胜肽連接子具有於活體內容易被蛋白酶切割之缺
點,因此無法得到利用載劑增長活性藥物血清半衰期之期望作用。然而,於本發明中,類似於載劑,可使用對蛋白酶具抗性之聚合物維持胜肽之血清半衰期。因此,於本發明中,可不受限制地使用任何非肽基聚合物,只要其為具上述功能之聚合物,亦即於活體內對蛋白酶具抗性之聚合物即可。該非肽基聚合物具有介於1至100kDa範圍內,較佳為1至20kDa之分子量。連接於免疫球蛋白Fc區之本發明非肽基聚合物可為一種聚合物或不同聚合物之組合物。
用於本發明中之非肽基聚合物可具有能結合於免疫球蛋白Fc區與蛋白質藥物之反應性基團。於非肽基聚合物兩端之反應性基團較佳為選自包括反應性醛基、丙醛基、丁醛基、順丁烯二醯亞胺基與琥珀醯亞胺衍生物之組群。
琥珀醯亞胺衍生物可為丙酸琥珀醯亞胺酯,羥基琥珀醯亞胺基、琥珀醯亞胺基羧甲基、或碳酸琥珀醯亞胺酯。詳言之,當非肽基聚合物於其兩端具有反應性醛基時,非特異性反應可被最小化,生理活性多肽與免疫球蛋白可分別有效地結合於該非肽基聚合物兩端。利用還原性烷基化,以醛鍵結產生之最終產物比經由醯胺鍵結連接者更為穩定。醛反應性基團於低pH選擇性地結合於N端;於例如pH 9.0之高pH下,可與離胺酸殘基形成共價鍵。
非肽基聚合物兩端之反應性基團可相同或
不同。例如,非肽基聚合物可於一端持有順丁烯二醯亞胺基,於另一端持有醛基、丙醛基或丁醛基。使用兩端皆具反應性羥基之聚乙二醇作為非肽基聚合物時,羥基可利用已知化學反應活化成為各種反應性基團,或可使用具有市售可得經修飾之反應性基團之聚乙二醇,以製備本發明之長效型接合物。
本發明之接合物可為其中非肽基聚合物之各端分別連接於免疫球蛋白Fc區與調酸素衍生物之胺或硫醇基者。
同時,於本發明中,非肽基聚合物之兩端包含可與免疫球蛋白Fc區及蛋白質藥物結合之反應性基團。反應性基團之實例包括,惟不限於,醛基、丙醛基或丁醛基、順丁烯二醯亞胺基、琥珀醯亞胺衍生物(丙酸琥珀醯亞胺酯,羥基琥珀醯亞胺基、琥珀醯亞胺基羧甲基或碳酸琥珀醯亞胺酯)等。
於非肽基聚合物連接子兩端之反應性基團可相同或不同。例如,非肽基聚合物可於一端具有順丁烯二醯亞胺基,於另一端具有醛基、丙醛基或丁醛基。舉例而言,當非肽基聚合物於一端具有反應性醛基,及於另一端具有反應性順丁烯二醯亞胺基時,非特異性反應可被最小化,生理活性多肽與免疫球蛋白可有效地結合於非肽基聚合物之兩端。可用於本發明之非肽基聚合物可選自包括聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇/丙二醇共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多醣類、聚葡萄糖、聚乙烯乙醚、例
如PLA(聚(乳酸))與PLGA(聚乳酸-乙醇酸)之生物可降解聚合物、脂質聚合物、幾丁質類、玻尿酸、及其組合之組群。較佳為,非肽基聚合物為聚乙二醇。此外,此項技藝中已知之其衍生物及可容易地利用此項技藝中已知方法製備之衍生物均包含於本發明範圍之內。
於本發明之實施例中,藉由使用僅包含丙醛基或包含順丁烯二醯亞胺基與醛基二者之非肽基聚合物PEG,經由共價鍵結將調酸素或其衍生物連接於免疫球蛋白Fc區而合成接合物。
相較於天然調酸素,本發明之接合物具有優異之GLP-1受體與升糖素受體活性。又,其結合於Fc區而增長其活體內血液半衰期,以於活體內長時期維持其活性。
本文所用之“防腐劑”一詞係指用以預防由微生物污染引起之異常反應或分解之物質。本發明之液態製劑可進一步包含防腐劑。防腐劑通常用於最可能遭微生物污染之多劑量製劑中,惟不受此限,亦可用於凍乾製劑或單劑量製劑中,以防止微生物污染。本發明之液態製劑可包含選自間甲酚、苯酚與苄醇之一或多種防腐劑。於液態製劑中,防腐劑之濃度可為0.001至1%(w/v)。具體而言,包含於本發明液態製劑中之防腐劑較佳為間甲酚。本發明液態製劑可為多劑量製劑。
於另一態樣中,本發明提供製備長效型調酸素接合物液態製劑之方法。
具體而言,於本發明之一具體實例中,製備該液態製劑之方法可包含以下步驟:a)製備長效型調酸素接合物,及b)使已製備之長效型調酸素接合物與含有緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑之安定劑混合。
於本發明之另一具體實例中,製備該液態製劑之方法可包含以下步驟:a)製備長效型調酸素接合物,及b)使已製備之長效型調酸素接合物與含有緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及防腐劑之安定劑混合。
較佳為,步驟b)之安定劑可進一步包含選自包括等滲劑、糖類、多元醇與胺基酸之組群之一或多者。
於又另一態樣中,本發明提供包含上述液態製劑之用於預防或治療肥胖症或糖尿病之醫藥組成物。
本文所用之“預防”一詞係指可抑制或延緩形成標的疾病之所有作用。本文所用之“預防”一詞意指投予本發明接合物以抑制或延緩形成例如異常血糖值或異常胰島素分泌之糖尿病症狀,或例如體重或體脂肪增加之肥胖症狀。
本文所用之“治療”一詞係指減輕、改善或緩和形成疾病病徵之所有作用。本文所用之“治療”一詞意指投予本發明接合物以減輕、改善或緩和上述糖尿病症狀或肥胖症狀,使血糖值與胰島素分泌正常化及減少體重或體脂肪。
本文所用之“肥胖症”一詞係指體脂肪過量。身體質量指數(=體重(kg)除以身高(m)平方]為25或25
以上時界定為肥胖症。肥胖症通常由能量攝取超過能量消耗之能量不平衡所產生。肥胖症為代謝性疾病,其影響整個身體,極可能導致糖尿病與高脂血症。此外,肥胖症與性功能障礙、關節炎、與增加心血管疾病形成之風險相關,於若干情況下,亦與癌症之形成相關。
本文所用之“糖尿病”一詞係指胰島素分泌不足或無法達成正常功能之一種代謝性疾病。糖尿病之特徵在於血糖值升高,及導致各種健康問題。於糖尿病之情況下,葡萄糖與尿液一起排出。
本發明之醫藥組成物可進一步包含醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。本文所用之"醫藥上可接受"一詞意指足以展現治療效果且不引起副作用之量。本發明醫藥組成物活性成分之劑量可由熟習此項技藝人士依據疾病類型,病患年齡、體重、健康狀況、性別、與藥物敏感性、給藥途徑、給藥方式、給藥頻率、治療持續時間、與本發明組成物組合或同時使用之藥物、及醫學領域中已知之其他因素而容易地決定。
於又另一態樣中,本發明提供預防或治療肥胖症或糖尿病之方法,該方法包括投予患者液態製劑。
於本文中,液態製劑、肥胖症與糖尿病均如上文所述。
本文所用之“患者”一詞係指被懷疑可能具有肥胖症或糖尿病之對象。具體而言,該術語意欲包括人類、大鼠與家畜之哺乳動物,其具有或瀕臨形成上述疾
病之風險者。此外,患者可為可利用本發明液態製劑衍生物治療之任何病患。
本發明之治療方法可包括投予醫藥上有效量之包含液態製劑之醫藥組成物。組成物之每日總劑量可由醫師憑藉適當醫學判斷予以決定,組成物可一次或分數次投予。然而,鑑於本發明之目的,用於任何特定病患之組成物之特定有效治療劑量,可視醫學領域中悉知之各種因素而改變,包括欲達成回應之種類與程度、根據具體組成物是否與其他製劑一起使用、病患年齡、體重、健康狀況、性別與飲食,給藥時間與途徑、組成物之分泌速率、治療持續時間,與本發明組成物組合或同時使用之其它藥物,及醫學領域中已知之其他因素。
包含長效型調酸素接合物之本發明液態製劑含有緩衝劑、糖醇與非離、子性界面活性劑,不含人血清白蛋白及潛在有害人體之因子,因此不易遭病毒感染。此外,本發明之調酸素接合物包含連接於免疫球蛋白Fc區之調酸素,因此,相較於天然調酸素,具有很大之分子量、延長之生理活性、及優異之貯存穩定性。
第1a圖係顯示通過SOURCE S純化管柱純化單聚乙二醇化之調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)所得結果之曲線圖。
第1b圖係顯示通過SOURCE 15Q純化管柱純化單聚乙
二醇化之調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc之接合物所得結果之曲線圖。
第1c圖係顯示通過SOURCE ISO純化管柱純化單聚乙二醇化之調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc之接合物所得結果之曲線圖。
第2a圖係顯示實施例3中,於25℃貯存0至2週後,利用IE-HPLC,根據pH評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第2a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第2b圖係顯示實施例3中,於25℃貯存0至2週後,利用SE-HPLC,根據pH評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第2b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第2c圖係顯示實施例3中,於25℃貯存0至2週後,利用RP-HPLC,根據pH評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第2c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第3a圖係顯示實施例4中,於25℃貯存0至4週後,利用IE-HPLC,根據糖醇種類及等滲劑存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第3a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第3b圖係顯示實施例4中,於25℃貯存0至4週後,利用SE-HPLC,根據糖醇種類及等滲劑存在與否評估長效
型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第3b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第3c圖係顯示實施例4中,於25℃貯存0至4週後,利用RP-HPLC,根據糖醇種類及等滲劑存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第3c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第4a圖係顯示實施例5中,於25℃貯存0至4週後,利用IE-HPLC,根據糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第4a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第4b圖係顯示實施例5中,於25℃貯存0至4週後,利用SE-HPLC,根據糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第4b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第4c圖係顯示實施例5中,於25℃貯存0至4週後,利用RP-HPLC,根據糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第4c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第5a圖係顯示實施例6中,於25℃貯存0至4週後,利用IE-HPLC,根據界面活性劑濃度及胺基酸存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第5a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起
始值之保留百分比。
第5b圖係顯示實施例6中,於25℃貯存0至4週後,利用SE-HPLC,根據界面活性劑濃度及胺基酸存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第5b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第5c圖係顯示實施例6中,於25℃貯存0至4週後,利用RP-HPLC,根據界面活性劑濃度及胺基酸存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第5c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第6a圖係顯示實施例7中,於25℃貯存0至4週後,利用IE-HPLC,根據與糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第6a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第6b圖係顯示實施例7中,於25℃貯存0至4週後,利用SE-HPLC,根據pH與糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第6b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第6c圖係顯示實施例7中,於25℃貯存0至4週後,利用RP-HPLC,根據pH與糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第6c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第7a圖係顯示實施例8中,於25℃貯存0至4週後,
利用IE-HPLC,根據pH與緩衝劑種類評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第7a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第7b圖係顯示實施例8中,於25℃貯存0至4週後,利用SE-HPLC,根據pH與緩衝劑種類評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第7b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第7c圖係顯示實施例8中,於25℃貯存0至4週後,利用RP-HPLC,根據pH與緩衝劑種類評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第7c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第8a圖係顯示實施例9中,於25℃貯存0至4週後,利用IE-HPLC,根據防腐劑存在與否及長效型調酸素濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第8a圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第8b圖係顯示實施例9中,於25℃貯存0至4週後,利用SE-HPLC,根據防腐劑存在與否及長效型調酸素接合物濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第8b圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
第8c圖係顯示實施例9中,於25℃貯存0至4週後,
利用RP-HPLC,根據防腐劑存在與否及長效型調酸素接合物濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性所得結果之圖形示意圖。第8c圖中之各圖形表示該長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。
下文中,將參照實施例更詳細說明本發明;然而,欲被瞭解的是該等實施例僅供說明用途,而不擬對本發明範圍構成侷限。
實施例1:調酸素與調酸素衍生物之合成
為了測定調酸素與調酸素衍生物於本發明液態製劑中之穩定性,乃合成具下文表1所示胺基酸序列之調酸素衍生物。
於上文表1中,以粗體字母表示之胺基酸殘基意指形成環之胺基酸,以X表示之胺基酸殘基意指非天然胺基酸之α-甲基-麩胺酸。此外,CA表示4-咪唑基乙醯基,DA表示去胺基-組胺醯基,及(d)S表示d-絲胺酸。
實施例2:包含調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc(調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)連接於免疫球蛋白Fc區)之接合物之製備
首先,為了使調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)胺基酸位置30之半胱胺酸殘基聚乙二醇MAL-10K-ALD PEG化,使調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與MAL-10K-ALD PEG以1:3之莫耳比及3mg/ml之蛋白質濃度,於室溫相互反應3小時。於此,反應係於1M胍存在下,在50mM Tris緩衝液(pH 8.0)中進行。反應完成後,將反應液施加於SOURCE S管柱,以純化於半胱胺酸單聚乙二醇化之調酸素衍生物(管柱:SOURCE S,流速:2.0ml/min,梯度:A 0→100% 50分鐘B(A:20mM檸檬酸鈉,pH 3.0+45%乙醇,B:A+1M KCl))(第1a圖)。第1a圖係顯示通過SOURCE S純化管柱純化單聚乙二醇化之調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)所得結果之曲線圖。
然後,使純化之單聚乙二醇化之調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc以1:5之莫耳比及20mg/ml之蛋白質濃度,於4℃相互反應16小時。反應於20mM SCB還原劑存在下,在100mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.0)中進行。反應完成後,將反應液施加於SOURCE 15Q純化管柱(管
柱:SOURCE 15Q,流速:2.0ml/min,梯度:A 0→4% 1分鐘B→20% 80分鐘B(A:20mM Tris-HCl,pH 7.5,B:A+1M NaCl))(第1b圖)與SOURCE ISO純化管柱(管柱:SOURCE ISO,流速:2.0ml/min,梯度:B 0→100% 100分鐘A(A:20mM Tris-HCl,pH 7.5,B:A+1.1M AS))(第1c圖),以純化包含調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc之接合物。第1b圖係顯示通過SOURCE 15Q純化管柱純化包含調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc之接合物所得結果之曲線圖,第1c圖係顯示通過SOURCE ISO純化管柱純化包含調酸素衍生物(SEQ ID NO:25)與免疫球蛋白Fc之接合物所得結果之曲線圖。
開發如上述製備之調酸素接合物,以增長調酸素之血液半衰期;其包含以特定部位(site-specific)方式互相共價連接之免疫球蛋白Fc區、非肽基聚合物與調酸素,具有顯著增長之血液半衰期。
實施例3:根據pH評估長效型調酸素接合物之穩定性
為了評估長效型調酸素接合物(於實施例2中製備)於液態製劑中之穩定性,乃於25℃,使長效型調酸素接合物於表2所示組成中貯存0至2週,然後利用離子交換-高效液相層析法(IE-HPLC)、粒徑排阻-高效液相層析法(SE-HPLC)與逆相-高效液相層析法(RP-HPLC)進行分析。關於調酸素接合物之貯存,係使用檸檬酸鹽緩衝液作為緩衝劑,甘露糖醇作為糖醇,及聚山梨醇酯20作為非離
子性界面活性劑。於下文表3、4與5中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)表示面積%/起始面積%,其表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表3顯示長效型調酸素接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表4顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表5顯示長效型調酸素接合物於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
從上文表3之IE-HPLC(%)結果可看出,調酸素接合物於較低pH較穩定。表4之SE-HPLC結果中,調酸素接合物於pH 5.2最穩定,表5之RP-HPLC結果中,調酸素接合物於pH 5.6最穩定。雖然於各分析方法間,不同pH之穩定性有差異,惟於RP-HPLC分析方法中,不同pH間之保留百分比差異最大。由以上結果顯示調酸素接合物於pH
5.6最穩定。
實施例4:根據糖醇種類及等滲劑存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性
本發明人等針對安定劑糖醇之種類與等滲劑氯化鈉存在與否對長效型調酸素接合物穩定性之影響進行檢測。具體而言,使用實施例3選定之檸檬酸鹽緩衝液(pH 5.6),25℃下,使長效型調酸素接合物於下文表6所示組成中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。於下文表7、8與9中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)意指面積%/起始面積%,表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表7顯示長效型調酸素接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表8顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表9顯示長效型調酸素接合物於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
從上文表6至9中可看出,相同濃度下,長效型調酸素接合物於甘露糖醇或山梨糖醇中比於甘油中更穩定。RP-HPLC之結果表示,長效型調酸素接合物於甘露糖醇中比於山梨糖醇中稍許穩定些。此外,於等滲劑氯化鈉存在與否之間,長效型調酸素接合物之穩定性無顯著差異。
實施例5:根據糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性
本發明人等針對安定劑糖醇之濃度對長效型調酸素接合物穩定性之影響進行檢測。具體而言,使用上述實施例中選定之檸檬酸鹽緩衝液(pH5.6)與甘露糖醇,25℃下,使長效型調酸素接合物於下文表10所示組成中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。於下文表11、12與13中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)意指面積%/起始面積%,表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表11顯示長效型調酸素
接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表12顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表13顯示長效型調酸素接合物於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
從表10至13中可看出,於5%甘露糖醇或10%甘露糖醇存在下,長效型調酸素接合物穩定。然而,於2%甘露糖醇或15%甘露糖醇存在下,則形成蛋白質沈澱。IE-HPLC或SE-HPLC結果表示,於10%甘露糖醇與5%甘露糖醇間,長效型調酸素接合物之穩定性相似。RP-HPLC結果表示,長效型調酸素接合物於10%甘露糖醇中比於5%甘露糖醇
中更穩定。
實施例6:根據界面活性劑濃度及胺基酸存在與否評估長效型調酸素接合物之穩定性
本發明人等針對界面活性劑安定劑之濃度及胺基酸存在與否對長效型調酸素接合物穩定性之影響進行檢測。使用上述實施例中選定之檸檬酸鹽緩衝液(pH5.6)與10%甘露糖醇,25℃下,使長效型調酸素接合物於下文表14所示組成中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。於下文表15、16與17中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)意指面積%/起始面積%,表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表15顯示長效型調酸素接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表16顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表17顯示長效型調酸素接合物於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
從表14至17中可看出,長效型調酸素接合物於含0.02%聚山梨醇酯20及0.1mg/mL甲硫胺酸之組成物中最穩定。
實施例7:根據pH與糖醇濃度評估長效型調酸素接合物之穩定性
本發明人等針對pH與安定劑糖醇濃度對長效型調酸
素接合物穩定性之影響進行檢測。具體而言,使用上述實施例中選定之0.02%聚山梨醇酯20與0.1mg/mL甲硫胺酸,25℃下,使長效型調酸素接合物於下文表18所示組成中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。於下文表15、16與17中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)意指面積%/起始面積%,表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表19顯示長效型調酸素接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表20顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表21顯示長效型調酸素接合物於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
從上述諸表中可看出,IE-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物之穩定性依pH 5.2,pH 5.6及pH 6.0順序遞減;RP-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物之穩定性依pH 6.0,pH 5.6及pH 5.2順序遞減;SE-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物之穩定性於pH 5.2,pH 5.6與pH 6.0間無顯著差異。換言之,IE-HPLC、RP-HPLC與SE-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物於pH 5.6很穩定。
同時,IE-HPLC與SE-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物於pH 5.6時,甘露糖醇濃度間無顯著差異。然而,於RP-HPLC結果中,長效型調酸素接合物於pH 5.6時,於5%甘露糖醇中比於10%或15%甘露糖醇中更穩定。
實施例8:根據pH與緩衝劑種類評估長效型調酸素接合物之穩定性
本發明人等針對pH與安定劑緩衝劑之種類對長效型調酸素接合物穩定性之影響進行檢測。具體而言,使用上述實施例中選定之0.02%聚山梨醇酯20、0.1mg/mL甲硫胺酸與5%甘露糖醇,25℃下,使長效型調酸素接合物於下文表22所示組成中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。於下文表23、24與25中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)意指面積%/起始面積%,表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表23顯示長效型調酸素接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表24顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表25顯示長效型調酸素接合物
於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
從表23至25中可看出,SE-HPLC或RP-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物之穩定性於pH 5.6與pH 5.8間無顯著差異。IE-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物於pH 5.6比於pH 5.8中更穩定。SE-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合物之穩定性於相同pH之緩衝劑間無顯著差異。此外,IE-HPLC或RP-HPLC結果顯示,長效型調酸素接合
物於相同pH之組胺酸中最穩定。
實施例9:評估防腐劑存在與否及長效型調酸素接合物濃度對長效型調酸素接合物穩定性之影響
本發明人等針對安定劑防腐劑存在與否與長效型調酸素接合物濃度對長效型調酸素接合物穩定性之影響進行檢測。具體而言,使用上述實施例中選定之組胺酸緩衝液(pH 5.6)、0.02%聚山梨醇酯20、0.1mg/mL甲硫胺酸與5%甘露糖醇,25℃下,使長效型調酸素接合物於下文表26所示組成中貯存0至4週,然後利用IE-HPLC、SE-HPLC與RP-HPLC進行分析。於下文表27、28與29中,IE-HPLC(%)、SE-HPLC(%)與RP-HPLC(%)意指面積%/起始面積%,表示長效型調酸素接合物相對於起始值之保留百分比。表27顯示長效型調酸素接合物於貯存後之IE-HPLC面積(%),表28顯示長效型調酸素接合物於貯存後之SE-HPLC面積(%),及表29顯示長效型調酸素接合物於貯存後之RP-HPLC面積(%)。
於表26至29中可看出,IE-HPLC、SE-HPLC或RP-HPLC結果顯示,即使於防腐劑存在下,長效型調酸素接合物之穩定性也不改變,且未根據其本身濃度而有所差異。
本發明較佳具體實例雖已為說明用途而敘述,惟熟習此項技藝者理解,於不偏離如隨附申請專利揭
示之本發明範圍與精神下,各種修飾、加成與置換均屬可能。
<110> 韓美藥品股份有限公司
<120> 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑
<130> OPA13128TW
<150> 10-2012-0124725
<151> 2012-11-06
<160> 49
<170> KopatentIn 2.0
<210> 1
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素
<400> 1
<210> 2
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 2
<210> 3
<211> 39
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 3
<210> 4
<211> 39
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 4
<210> 5
<211> 39
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 5
<210> 6
<211> 42
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 6
<210> 7
<211> 30
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 7
<210> 8
<211> 29
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 8
<210> 9
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<220>
<221> 變異體
<222> (20)
<223> Xaa=α-甲基-麩胺酸
<400> 9
<210> 10
<211> 40
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 10
<210> 11
<211> 43
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 11
<210> 12
<211> 38
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 12
<210> 13
<211> 30
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<220>
<221> 變異體
<222> (16)
<223> Xaa=α-甲基-麩胺酸
<220>
<221> 變異體
<222> (20)
<223> Xaa=α-甲基-麩胺酸
<400> 13
<210> 14
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<220>
<221> 變異體
<222> (20)
<223> Xaa=α-甲基-麩胺酸
<220>
<221> 變異體
<222> (24)
<223> Xaa=α-甲基-麩胺酸
<400> 14
<210> 15
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<220>
<221> 變異體
<222> (24)
<223> Xaa=α-甲基-麩胺酸
<400> 15
<210> 16
<211> 34
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 16
<210> 17
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 17
<210> 18
<211> 40
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 18
<210> 19
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 19
<210> 20
<211> 40
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 20
<210> 21
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 21
<210> 22
<211> 30
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,去胺基組胺醯基。
<400> 22
<210> 23
<211> 29
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 23
<210> 24
<211> 30
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 24
<210> 25
<211> 30
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 25
<210> 26
<211> 30
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 26
<210> 27
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 27
<210> 28
<211> 29
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 28
<210> 29
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> 此“S”係指絲胺酸之變異體,d-絲胺酸。
<400> 29
<210> 30
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<400> 30
<210> 31
<211> 37
<212> PRT
<213> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> 此“S”係指絲胺酸之變異體,d-絲胺酸。
<400> 31
<210> 32
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (1)
<223> 此“H”係指組胺酸之衍生物,4-咪唑基乙醯基。
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 32
<210> 33
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 33
<210> 34
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 調酸素衍生物
<220>
<221> 變異體
<222> (2)
<223> Xaa=胺基異丁酸
<400> 34
<210> 35
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R2基團
<400> 35
<210> 36
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R2基團
<400> 36
<210> 37
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R2基團
<400> 37
<210> 38
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R2基團
<400> 38
<210> 39
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R2基團
<400> 39
<210> 40
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R2基團
<400> 40
<210> 41
<211> 28
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 41
<210> 42
<211> 28
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 42
<210> 43
<211> 28
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 43
<210> 44
<211> 28
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 44
<210> 45
<211> 28
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 45
<210> 46
<211> 26
<212)PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 46
<210> 47
<211> 28
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> A或B基團
<400> 47
<210> 48
<211> 24
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> B基團
<400> 48
<210> 49
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> B基團
<400> 49
由於本案的圖為實驗的曲線圖,並非本案的代表圖。
故本案無指定代表圖。
Claims (31)
- 一種長效型調酸素接合物之液態製劑,其包含藥理活性量之長效型調酸素接合物及不含白蛋白之安定劑,其中為生理活性肽之調酸素係連接於免疫球蛋白Fc區,而該安定劑含有緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該安定劑進一步含有選自包括等滲劑、糖類、多元醇與胺基酸所成組群之一或多者。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該調酸素係以前升糖素,亦即升糖素前體製成之胜肽,具SEQ ID NO:1之胺基酸序列。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該調酸素為天然調酸素或其前體、衍生物、片段或變異體。
- 根據申請專利範圍第4項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該衍生物具有選自包括SEQ ID NOS:2至34所成組群之任一胺基酸序列。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該免疫球蛋白Fc區係衍生自IgG、IgA、IgD、IgE或IgM之Fc區。
- 根據申請專利範圍第6項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該免疫球蛋白Fc區之各功能區係源自選自包括IgG、IgA、IgD、IgE與IgM所成組群之不同免疫球蛋白功能區之雜合體。
- 根據申請專利範圍第6項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該免疫球蛋白Fc區係由相同來源功能區構成的單鏈免疫球蛋白所組成之二聚體或多聚體。
- 根據申請專利範圍第6項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該免疫球蛋白Fc區為IgG4 Fc區。
- 根據申請專利範圍第9項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該免疫球蛋白Fc區為人類無醣基化IgG4Fc區。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該接合物係使用非肽基聚合物或重組技術製備。
- 根據申請專利範圍第11項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該非肽基聚合物為選自包括聚丙二醇、乙二醇/丙二醇共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多醣類、聚葡萄糖、聚乙烯乙醚、包括聚乳酸(PLA)與聚乳酸-乙醇酸(PLGA)之生物可降解聚合物、脂質聚合物、幾丁質類、玻尿酸、及其組合之組群。
- 根據申請專利範圍第11項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該非肽基聚合物為聚乙二醇。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該糖醇為選自包括甘露糖醇、山梨糖醇與甘油所成組群之一或多者。
- 根據申請專利範圍第14項所述之長效型調酸素接合物 之液態製劑,其中該糖醇於液態製劑中之濃度為2至15%(w/v)。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該緩衝劑為選自包括檸檬酸鹽、乙酸鹽、組胺酸與磷酸鹽緩衝劑所成組群之一或多者。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該緩衝劑之pH範圍為4.5至7.0。
- 根據申請專利範圍第2項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該等滲劑為氯化鈉。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該非離子性界面活性劑為聚山梨醇酯或泊洛沙姆(poloxamer)。
- 根據申請專利範圍第19項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該非離子性界面活性劑於液態製劑中之濃度為0.001至0.1%(w/v)。
- 根據申請專利範圍第2項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該胺基酸為甲硫胺酸。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該安定劑含有pH範圍為4.8至6.0之緩衝劑、選自包括甘露糖醇與山梨糖醇、及聚山梨醇酯20所成組群之一或多種糖醇。
- 根據申請專利範圍第1項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其進一步包含選自包括間甲酚、苯酚(phenol)與苄醇所成組群之一或多種防腐劑。
- 根據申請專利範圍第23項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該防腐劑於液態製劑中之濃度為0.001至1%(w/v)。
- 根據申請專利範圍第23項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該防腐劑為間甲酚。
- 根據申請專利範圍第23項所述之長效型調酸素接合物之液態製劑,其中該製劑係供多劑量給藥用。
- 一種長效型調酸素接合物之液態製劑,其包含藥理有效量之長效型調酸素接合物,其中為生理活性肽之調酸素係連接於免疫球蛋白Fc區;5至50mM之組胺酸;2至15%(w/v)之甘露糖醇;0.01至1mg/mL之甲硫胺酸;及0.001至0.1%(w/v)之聚山梨醇酯20。
- 如申請專利範圍第27項所述之液態製劑,其進一步包含0.001至1%(w/v)之間甲酚。
- 一種用於製備申請專利範圍第1至22及27項中任一項所述之液態製劑之方法,該方法包括以下步驟:a)製備長效型調酸素接合物;及b)使步驟a)製備之長效型調酸素接合物,與含有緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑之安定劑混合。
- 一種用於製備申請專利範圍第23至26及28項中任一項所述之液態製劑之方法,該方法包括以下步驟:a)製備長效型調酸素接合物;及b)使步驟a)製備之長效型調酸素接合物,與含有緩衝劑、糖醇與非離子性界面活性劑之安定劑,以防腐 劑混合。
- 如申請專利範圍第29或30項所述之方法,其中該安定劑進一步含有選自包括等滲劑、糖類、多元醇與胺基酸所成組群之一或多者。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR20120124725 | 2012-11-06 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW201427716A true TW201427716A (zh) | 2014-07-16 |
TWI602583B TWI602583B (zh) | 2017-10-21 |
Family
ID=50684883
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW102140249A TWI602583B (zh) | 2012-11-06 | 2013-11-06 | 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 |
TW106126398A TWI652071B (zh) | 2012-11-06 | 2013-11-06 | 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 |
TW108101828A TWI816739B (zh) | 2012-11-06 | 2013-11-06 | 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW106126398A TWI652071B (zh) | 2012-11-06 | 2013-11-06 | 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 |
TW108101828A TWI816739B (zh) | 2012-11-06 | 2013-11-06 | 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑 |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9724420B2 (zh) |
EP (2) | EP3610856B1 (zh) |
JP (2) | JP6363612B2 (zh) |
KR (2) | KR102311517B1 (zh) |
CN (1) | CN104884045B (zh) |
AR (2) | AR093387A1 (zh) |
AU (3) | AU2013342321B2 (zh) |
BR (1) | BR112015010235B1 (zh) |
CA (1) | CA2890324C (zh) |
CL (1) | CL2015001206A1 (zh) |
DK (1) | DK2916819T3 (zh) |
EA (3) | EA031852B1 (zh) |
ES (1) | ES2748158T3 (zh) |
HK (1) | HK1210044A1 (zh) |
IL (2) | IL238626B (zh) |
MX (2) | MX2015005698A (zh) |
MY (2) | MY197849A (zh) |
NZ (3) | NZ708103A (zh) |
PE (1) | PE20151421A1 (zh) |
PH (2) | PH12018501454A1 (zh) |
PL (1) | PL2916819T3 (zh) |
PT (1) | PT2916819T (zh) |
SG (2) | SG11201503370WA (zh) |
TW (3) | TWI602583B (zh) |
UA (2) | UA126651C2 (zh) |
WO (1) | WO2014073842A1 (zh) |
ZA (1) | ZA201503998B (zh) |
Families Citing this family (40)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2968043T3 (es) | 2011-06-10 | 2024-05-06 | Hanmi Science Co Ltd | Nuevos derivados de oxintomodulina y composición farmacéutica para el tratamiento de la obesidad que comprende la misma |
KR101577734B1 (ko) | 2011-06-17 | 2015-12-29 | 한미사이언스 주식회사 | 옥신토모듈린과 면역글로불린 단편을 포함하는 결합체 및 그의 용도 |
KR20130049671A (ko) | 2011-11-04 | 2013-05-14 | 한미사이언스 주식회사 | 생리활성 폴리펩타이드 결합체 제조 방법 |
AR090281A1 (es) | 2012-03-08 | 2014-10-29 | Hanmi Science Co Ltd | Proceso mejorado para la preparacion de un complejo polipeptidico fisiologicamente activo |
KR101968344B1 (ko) | 2012-07-25 | 2019-04-12 | 한미약품 주식회사 | 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 고지혈증 치료용 조성물 |
UA116217C2 (uk) | 2012-10-09 | 2018-02-26 | Санофі | Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону |
KR101993393B1 (ko) | 2012-11-06 | 2019-10-01 | 한미약품 주식회사 | 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 당뇨병 또는 비만성 당뇨병 치료용 조성물 |
SG11201503370WA (en) | 2012-11-06 | 2015-05-28 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Liquid formulation of protein conjugate comprising the oxyntomodulin and an immunoglobulin fragment |
ES2688367T3 (es) | 2012-12-21 | 2018-11-02 | Sanofi | Derivados de exendina-4 como agonistas duales de GLP1/GIP o trigonales de GLP1/GIP/glucagón |
TW201609795A (zh) | 2013-12-13 | 2016-03-16 | 賽諾菲公司 | 作為雙重glp-1/gip受體促效劑的艾塞那肽-4(exendin-4)胜肽類似物 |
WO2015086733A1 (en) | 2013-12-13 | 2015-06-18 | Sanofi | Dual glp-1/glucagon receptor agonists |
EP3080152A1 (en) | 2013-12-13 | 2016-10-19 | Sanofi | Non-acylated exendin-4 peptide analogues |
EP3080154B1 (en) | 2013-12-13 | 2018-02-07 | Sanofi | Dual glp-1/gip receptor agonists |
MA46146A1 (fr) | 2014-01-20 | 2020-12-31 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Insuline a action prolongée et utilisation associée |
SG10202107752PA (en) * | 2014-03-31 | 2021-09-29 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | Method for improving solubility of protein and peptide by using immunoglobulin fc fragment linkage |
TW201625670A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自exendin-4之雙重glp-1/升糖素受體促效劑 |
TW201625669A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自艾塞那肽-4(Exendin-4)之肽類雙重GLP-1/升糖素受體促效劑 |
TW201625668A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 作為胜肽性雙重glp-1/昇糖素受體激動劑之艾塞那肽-4衍生物 |
AR100639A1 (es) | 2014-05-29 | 2016-10-19 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Composición para tratar diabetes que comprende conjugados de análogos de insulina de acción prolongada y conjugados de péptidos insulinotrópicos de acción prolongada |
AR100695A1 (es) * | 2014-05-30 | 2016-10-26 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Composición para el tratamiento de diabetes mellitus que comprende insulina y un agonista dual glp-1 / glucagón |
US9932381B2 (en) | 2014-06-18 | 2018-04-03 | Sanofi | Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists |
TWI802396B (zh) | 2014-09-16 | 2023-05-11 | 南韓商韓美藥品股份有限公司 | 長效glp-1/高血糖素受體雙促效劑治療非酒精性脂肝疾病之用途 |
CN112656939B (zh) * | 2014-09-22 | 2023-12-08 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 一种针对血管内皮生长因子的人源化抗体的药物组合物 |
MY185334A (en) | 2014-12-30 | 2021-05-06 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Glucagon derivatives with improved stability |
KR102418477B1 (ko) | 2014-12-30 | 2022-07-08 | 한미약품 주식회사 | 글루카곤 유도체 |
AR105319A1 (es) | 2015-06-05 | 2017-09-27 | Sanofi Sa | Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico |
BR112017028517A2 (pt) * | 2015-06-30 | 2018-08-28 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | ?composição farmacêutica, vetor, peptídeo, polinucleotídeo e conjugado isolado e composição? |
TW201706291A (zh) | 2015-07-10 | 2017-02-16 | 賽諾菲公司 | 作為選擇性肽雙重glp-1/升糖素受體促效劑之新毒蜥外泌肽(exendin-4)衍生物 |
UY36870A (es) | 2015-08-28 | 2017-03-31 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Análogos de insulina novedosos |
AU2015416589B2 (en) * | 2015-12-10 | 2021-04-01 | Menicon Co., Ltd. | Peptide composition |
AU2016382394B2 (en) | 2015-12-31 | 2019-07-04 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Long-acting conjugate of triple glucagon/GLP-1/GIP receptor agonist |
TWI757305B (zh) | 2016-06-29 | 2022-03-11 | 南韓商韓美藥品股份有限公司 | 升糖素衍生物、其接合物、及包含其之組成物、及其醫療用途 |
JP7158378B2 (ja) | 2016-09-23 | 2022-10-21 | ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド | インスリン受容体との結合力が減少された、インスリンアナログ及びその用途 |
JOP20190097A1 (ar) * | 2016-10-27 | 2019-04-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | الجلوبولينات المناعية واستخداماتها |
CN108299553B (zh) * | 2017-01-13 | 2021-07-16 | 博瑞生物医药(苏州)股份有限公司 | 胃泌酸调节素修饰物 |
US11752216B2 (en) | 2017-03-23 | 2023-09-12 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Insulin analog complex with reduced affinity for insulin receptor and use thereof |
EP3823659A4 (en) * | 2018-07-19 | 2022-06-22 | D&D Pharmatech Inc. | PHARMACEUTICAL COMPOSITION WITH A POLYPEPTIDE |
US20200262887A1 (en) | 2018-11-30 | 2020-08-20 | Opko Ireland Global Holdings, Ltd. | Oxyntomodulin peptide analog formulations |
EP3939990A4 (en) * | 2019-02-15 | 2023-05-24 | Hanmi Fine Chemical Co., Ltd. | NEW INTERMEDIATE USED FOR A BIOLOGICALLY ACTIVE POLYPEPTIDE AND METHOD FOR PREPARING IT |
WO2021235915A1 (ko) | 2020-05-22 | 2021-11-25 | 한미약품 주식회사 | 액상 제제 |
Family Cites Families (83)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6096871A (en) | 1995-04-14 | 2000-08-01 | Genentech, Inc. | Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life |
WO1997034631A1 (en) | 1996-03-18 | 1997-09-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobin-like domains with increased half lives |
AU749815B2 (en) | 1998-03-06 | 2002-07-04 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Protein-free preparations |
US6660843B1 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
US6677136B2 (en) | 2000-05-03 | 2004-01-13 | Amgen Inc. | Glucagon antagonists |
GB0121709D0 (en) | 2001-09-07 | 2001-10-31 | Imp College Innovations Ltd | Food inhibition agent |
US7217845B2 (en) | 2002-11-25 | 2007-05-15 | Sun Bio, Inc. | Bifunctional polyethylene glycol derivatives |
GB0300571D0 (en) | 2003-01-10 | 2003-02-12 | Imp College Innovations Ltd | Modification of feeding behaviour |
CA2513213C (en) | 2003-01-22 | 2013-07-30 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
US7772188B2 (en) | 2003-01-28 | 2010-08-10 | Ironwood Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders |
US20050176108A1 (en) | 2003-03-13 | 2005-08-11 | Young-Min Kim | Physiologically active polypeptide conjugate having prolonged in vivo half-life |
WO2005035761A1 (en) | 2003-10-16 | 2005-04-21 | Compugen Ltd. | Splice variants of preproglucagon, glucagon-like peptide-1 and oxyntomodulin |
KR101135244B1 (ko) | 2007-11-29 | 2012-04-24 | 한미사이언스 주식회사 | 인슐린 분비 펩타이드 결합체를 포함하는 비만 관련질환 치료용 조성물 |
BRPI0406605B8 (pt) | 2003-11-13 | 2021-05-25 | Hanmi Holdings Co Ltd | conjugado de proteína, método para a preparação do mesmo e composição farmacêutica para intensificar a duração e estabilidade in vivo de um polipeptídeo fisiologicamente ativo |
US20090238838A1 (en) | 2003-11-13 | 2009-09-24 | Hanmi Pharm. Ind. Co. Ltd. | Insulinotropic peptide conjugate using an immunoglobulin fc |
US8263084B2 (en) * | 2003-11-13 | 2012-09-11 | Hanmi Science Co., Ltd | Pharmaceutical composition for treating obesity-related disease comprising insulinotropic peptide conjugate |
JP5185624B2 (ja) | 2004-12-02 | 2013-04-17 | ドマンティス リミテッド | 血清アルブミンおよびglp−1またはpyyを標的とする二重特異性抗体 |
US20090286723A1 (en) | 2005-02-11 | 2009-11-19 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid Polypeptides with Selectable Properties |
CA2597649A1 (en) | 2005-02-11 | 2006-08-17 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Gip analog and hybrid polypeptides with selectable properties |
KR100754667B1 (ko) | 2005-04-08 | 2007-09-03 | 한미약품 주식회사 | 비펩타이드성 중합체로 개질된 면역글로불린 Fc 단편 및이를 포함하는 약제학적 조성물 |
AU2006258841B2 (en) | 2005-06-13 | 2012-05-03 | Imperial Innovations Limited | Oxyntomodulin analogues and their effects on feeding behaviour |
GB0511986D0 (en) | 2005-06-13 | 2005-07-20 | Imp College Innovations Ltd | Novel compounds and their effects on feeding behaviour |
WO2007030375A2 (en) | 2005-09-08 | 2007-03-15 | Children's Hospital Medical Center | Lysosomal acid lipase therapy for nafld and related diseases |
EP2471810A1 (en) | 2006-02-22 | 2012-07-04 | Merck Sharp & Dohme Corporation | Oxyntomodulin derivatives |
AU2007258609B2 (en) | 2006-06-07 | 2013-01-24 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
TWI428346B (zh) | 2006-12-13 | 2014-03-01 | Imp Innovations Ltd | 新穎化合物及其等對進食行為影響 |
GB0624868D0 (en) | 2006-12-13 | 2007-01-24 | Imp Innovations Ltd | Novel compounds and their effects on feeding behaviour |
US20090098130A1 (en) | 2007-01-05 | 2009-04-16 | Bradshaw Curt W | Glucagon-like protein-1 receptor (glp-1r) agonist compounds |
JP2008169195A (ja) | 2007-01-05 | 2008-07-24 | Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体 |
US8454971B2 (en) | 2007-02-15 | 2013-06-04 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists |
WO2009009562A2 (en) * | 2007-07-10 | 2009-01-15 | Eli Lilly And Company | Glp-1-fc fusion protein formulation |
JP5345617B2 (ja) | 2007-07-27 | 2013-11-20 | バイエル・クロップサイエンス・アーゲー | 三元活性化合物組合せ |
CA2699065A1 (en) | 2007-09-11 | 2009-04-02 | Mondobiotech Laboratories Ag | Use of a peptide as a therapeutic agent |
JP5771005B2 (ja) | 2007-10-30 | 2015-08-26 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションIndiana University Research And Technology Corporation | グルカゴンアンタゴニスト及びglp−1アゴニスト活性を示す化合物 |
US20090181037A1 (en) | 2007-11-02 | 2009-07-16 | George Heavner | Semi-Synthetic GLP-1 Peptide-FC Fusion Constructs, Methods and Uses |
CN101983066B (zh) | 2008-01-30 | 2016-06-29 | 印第安那大学科技研究公司 | 基于酯的胰岛素前药 |
JP5753779B2 (ja) | 2008-06-17 | 2015-07-22 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションIndiana University Research And Technology Corporation | 生理学的pHの緩衝液中で向上した溶解性及び安定性を示すグルカゴン類縁体 |
US8546327B2 (en) | 2008-06-17 | 2013-10-01 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists |
WO2010013012A2 (en) | 2008-08-01 | 2010-02-04 | Lund University Bioscience Ab | Novel polypeptides and uses thereof |
WO2010033240A2 (en) | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Nektar Therapeutics | Carbohydrate-based drug delivery polymers and conjugates thereof |
WO2010033220A2 (en) | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Nektar Therapeutics | Modified therapeutics peptides, methods of their preparation and use |
CN102282166B (zh) | 2008-12-15 | 2015-04-01 | 西兰制药公司 | 胰高血糖素类似物 |
KR20110110174A (ko) | 2008-12-19 | 2011-10-06 | 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 | 아미드 기반 글루카곤 슈퍼패밀리 펩티드 프로드럭 |
WO2010096052A1 (en) | 2009-02-19 | 2010-08-26 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Oxyntomodulin analogs |
US8734796B2 (en) | 2009-03-20 | 2014-05-27 | Amgen Inc. | Carrier immunoglobulins |
KR101164453B1 (ko) | 2009-03-20 | 2012-07-11 | 한미사이언스 주식회사 | 위치특이적 생리활성 폴리펩타이드 결합체의 제조방법 |
MX2011013625A (es) | 2009-06-16 | 2012-01-20 | Univ Indiana Res & Tech Corp | Compuestos glucagon activo de receptor de gip. |
SG177609A1 (en) | 2009-07-13 | 2012-02-28 | Zealand Pharma As | Acylated glucagon analogues |
US20120294855A1 (en) | 2009-11-03 | 2012-11-22 | Eli Lilly & Company | Glp-1 receptor agonist compounds for obstructive sleep apnea |
WO2011071957A1 (en) | 2009-12-07 | 2011-06-16 | Sea Lane Biotechnologies, Llc | Conjugates comprising an antibody surrogate scaffold with improved pharmacokinetic properties |
WO2011075393A2 (en) * | 2009-12-18 | 2011-06-23 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon/glp-1 receptor co-agonists |
AR079344A1 (es) | 2009-12-22 | 2012-01-18 | Lilly Co Eli | Analogo peptidico de oxintomodulina, composicion farmaceutica que lo comprende y uso para preparar un medicamento util para tratar diabetes no insulinodependiente y/u obesidad |
AR079345A1 (es) | 2009-12-22 | 2012-01-18 | Lilly Co Eli | Analogo peptidico de oxintomodulina |
RU2012136450A (ru) | 2010-01-27 | 2014-03-10 | Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн | Конъюгаты антагонист глюкагона - агонист gip и композиции для лечения метаболических расстройств и ожирения |
RU2559320C2 (ru) | 2010-03-26 | 2015-08-10 | Ново Нордиск А/С | Новые аналоги глюкагона |
AR081066A1 (es) | 2010-04-02 | 2012-06-06 | Hanmi Holdings Co Ltd | Conjugado de insulina donde se usa un fragmento de inmunoglobulina |
KR20130111923A (ko) | 2010-05-13 | 2013-10-11 | 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 | G-단백결합 수용체 활성을 나타내는 글루카곤 슈퍼패밀리 펩티드 |
CA2796894A1 (en) | 2010-06-24 | 2011-12-29 | Indiana University Research And Technology Corporation | Amide based glucagon superfamily peptide prodrugs |
KR101314865B1 (ko) * | 2010-07-06 | 2013-10-04 | 김덕중 | 모바일 환경에서 tv 화면과 연동하는 증강 현실을 제공하는 방법, 이를 위한 부가 서비스 서버 및 방송 시스템 |
KR101337797B1 (ko) * | 2010-07-14 | 2013-12-06 | 한미사이언스 주식회사 | 지속형 인간 성장 호르몬 결합체 액상 제제 |
KR101382593B1 (ko) | 2010-07-21 | 2014-04-10 | 한미사이언스 주식회사 | 신규한 지속형 글루카곤 결합체 및 이를 포함하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물 |
WO2012032567A1 (ja) | 2010-09-06 | 2012-03-15 | パナソニック株式会社 | 表示装置及びその制御方法 |
CN101974077A (zh) | 2010-09-15 | 2011-02-16 | 南京瑞年天平医药科技有限公司 | 一种新颖的多肽化合物 |
KR101303388B1 (ko) * | 2010-10-26 | 2013-09-03 | 한미사이언스 주식회사 | 지속형 인터페론 알파 결합체의 액상 제제 |
KR101767570B1 (ko) * | 2010-10-26 | 2017-08-14 | 한미사이언스 주식회사 | 항 비만 펩타이드의 지속형 결합체 |
CN102010473A (zh) * | 2010-11-10 | 2011-04-13 | 曹鹏 | 重组胃泌酸调节素融合蛋白及其制备和应用 |
AR084558A1 (es) | 2010-12-22 | 2013-05-22 | Marcadia Biotech | Metodos para tratar trastornos metabolicos y obesidad con peptidos basados en glucagon activos para el receptor de peptido insulinotropico dependiente de glucosa (gip)/peptido-1 similar al glucagon (glp-1) |
JP6118500B2 (ja) | 2011-02-28 | 2017-04-19 | ローム アンド ハース エレクトロニック マテリアルズ エルエルシーRohm and Haas Electronic Materials LLC | フォトレジスト組成物、およびフォトリソグラフィパターンを形成する方法 |
KR101161526B1 (ko) | 2011-05-16 | 2012-07-02 | 숭실대학교산학협력단 | 연료전지용 촉매전극을 위한 코어/쉘 구조의 나노 지지체 및 그 제조방법 |
ES2968043T3 (es) | 2011-06-10 | 2024-05-06 | Hanmi Science Co Ltd | Nuevos derivados de oxintomodulina y composición farmacéutica para el tratamiento de la obesidad que comprende la misma |
KR101577734B1 (ko) | 2011-06-17 | 2015-12-29 | 한미사이언스 주식회사 | 옥신토모듈린과 면역글로불린 단편을 포함하는 결합체 및 그의 용도 |
CN103748109A (zh) | 2011-06-22 | 2014-04-23 | 印第安纳大学研究及科技有限公司 | 胰高血糖素/glp-1受体共同激动剂 |
KR101665009B1 (ko) | 2012-03-09 | 2016-10-11 | 한미사이언스 주식회사 | 비알콜성 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
CN104487082A (zh) | 2012-04-19 | 2015-04-01 | 奥普科生物制品有限公司 | 长效胃泌酸调节素变体及其生产方法 |
RU2015101697A (ru) | 2012-06-21 | 2016-08-10 | Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн | Аналоги глюкагона, обладающие активностью рецептора gip |
KR101373563B1 (ko) | 2012-07-25 | 2014-03-12 | 전북대학교산학협력단 | Tof-mra를 이용한 혈류특성 및 mr-신호강도구배(전단율) 유도방법 |
KR101968344B1 (ko) | 2012-07-25 | 2019-04-12 | 한미약품 주식회사 | 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 고지혈증 치료용 조성물 |
AR092873A1 (es) | 2012-09-26 | 2015-05-06 | Cadila Healthcare Ltd | Peptidos como agonistas triples de los receptores de gip, glp-1 y glugagon |
KR101993393B1 (ko) | 2012-11-06 | 2019-10-01 | 한미약품 주식회사 | 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 당뇨병 또는 비만성 당뇨병 치료용 조성물 |
SG11201503370WA (en) | 2012-11-06 | 2015-05-28 | Hanmi Pharm Ind Co Ltd | Liquid formulation of protein conjugate comprising the oxyntomodulin and an immunoglobulin fragment |
JP6137046B2 (ja) | 2014-05-09 | 2017-05-31 | 信越化学工業株式会社 | 単量体、高分子化合物、レジスト材料及びパターン形成方法 |
TWI802396B (zh) | 2014-09-16 | 2023-05-11 | 南韓商韓美藥品股份有限公司 | 長效glp-1/高血糖素受體雙促效劑治療非酒精性脂肝疾病之用途 |
WO2019171352A2 (en) | 2018-03-08 | 2019-09-12 | Janssen Pharmaceutica Nv | Methods of treating severe non-diabetic obesity |
-
2013
- 2013-11-06 SG SG11201503370WA patent/SG11201503370WA/en unknown
- 2013-11-06 PH PH12018501454A patent/PH12018501454A1/en unknown
- 2013-11-06 TW TW102140249A patent/TWI602583B/zh active
- 2013-11-06 PT PT138531181T patent/PT2916819T/pt unknown
- 2013-11-06 SG SG10201602801YA patent/SG10201602801YA/en unknown
- 2013-11-06 EP EP19180160.4A patent/EP3610856B1/en active Active
- 2013-11-06 BR BR112015010235-2A patent/BR112015010235B1/pt active IP Right Grant
- 2013-11-06 TW TW106126398A patent/TWI652071B/zh active
- 2013-11-06 NZ NZ708103A patent/NZ708103A/en unknown
- 2013-11-06 MY MYPI2018703890A patent/MY197849A/en unknown
- 2013-11-06 ES ES13853118T patent/ES2748158T3/es active Active
- 2013-11-06 PL PL13853118T patent/PL2916819T3/pl unknown
- 2013-11-06 WO PCT/KR2013/009986 patent/WO2014073842A1/en active Application Filing
- 2013-11-06 NZ NZ73906313A patent/NZ739063A/en unknown
- 2013-11-06 UA UAA201711010A patent/UA126651C2/uk unknown
- 2013-11-06 EA EA201590758A patent/EA031852B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-11-06 MY MYPI2015001169A patent/MY168536A/en unknown
- 2013-11-06 PE PE2015000593A patent/PE20151421A1/es unknown
- 2013-11-06 TW TW108101828A patent/TWI816739B/zh active
- 2013-11-06 CA CA2890324A patent/CA2890324C/en active Active
- 2013-11-06 AU AU2013342321A patent/AU2013342321B2/en active Active
- 2013-11-06 CN CN201380069534.3A patent/CN104884045B/zh active Active
- 2013-11-06 EA EA201992760A patent/EA039082B1/ru unknown
- 2013-11-06 MX MX2015005698A patent/MX2015005698A/es active IP Right Grant
- 2013-11-06 EP EP13853118.1A patent/EP2916819B1/en active Active
- 2013-11-06 NZ NZ731658A patent/NZ731658A/en unknown
- 2013-11-06 UA UAA201504473A patent/UA116364C2/uk unknown
- 2013-11-06 DK DK13853118.1T patent/DK2916819T3/da active
- 2013-11-06 EA EA201791143A patent/EA034499B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-11-06 US US14/440,422 patent/US9724420B2/en active Active
- 2013-11-06 JP JP2015540613A patent/JP6363612B2/ja active Active
- 2013-11-06 AR ARP130104071A patent/AR093387A1/es not_active Application Discontinuation
- 2013-11-06 KR KR1020130134412A patent/KR102311517B1/ko active IP Right Grant
-
2015
- 2015-05-04 IL IL238626A patent/IL238626B/en active IP Right Grant
- 2015-05-06 MX MX2020004114A patent/MX2020004114A/es unknown
- 2015-05-06 PH PH12015501008A patent/PH12015501008A1/en unknown
- 2015-05-06 CL CL2015001206A patent/CL2015001206A1/es unknown
- 2015-06-04 ZA ZA2015/03998A patent/ZA201503998B/en unknown
- 2015-11-05 HK HK15110919.0A patent/HK1210044A1/zh unknown
-
2017
- 2017-06-29 US US15/637,583 patent/US10279041B2/en active Active
- 2017-12-18 AU AU2017279583A patent/AU2017279583B2/en active Active
-
2018
- 2018-06-28 JP JP2018123264A patent/JP6694013B2/ja active Active
-
2019
- 2019-01-21 IL IL26436019A patent/IL264360B/en active IP Right Grant
- 2019-03-18 US US16/356,319 patent/US11071785B2/en active Active
-
2020
- 2020-01-29 AU AU2020200626A patent/AU2020200626B2/en active Active
-
2021
- 2021-04-26 AR ARP210101118A patent/AR121939A2/es unknown
- 2021-09-30 KR KR1020210129977A patent/KR102434280B1/ko active IP Right Grant
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11071785B2 (en) | Liquid formulation of long-lasting protein conjugate comprising the oxyntomodulin and an immunoglobulin Fc region | |
JP6345216B2 (ja) | オキシントモジュリンと免疫グロブリン断片とを含む結合体及びその用途 | |
US20230192800A1 (en) | Liquid formulation of long-acting conjugate of glucagon derivative |