SK4242002A3 - Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent - Google Patents
Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent Download PDFInfo
- Publication number
- SK4242002A3 SK4242002A3 SK424-2002A SK4242002A SK4242002A3 SK 4242002 A3 SK4242002 A3 SK 4242002A3 SK 4242002 A SK4242002 A SK 4242002A SK 4242002 A3 SK4242002 A3 SK 4242002A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- pharmaceutical composition
- nat
- mixture
- fibrolase
- zinc
- Prior art date
Links
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 78
- 108010090109 Fibrolase Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 claims abstract description 22
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 25
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 25
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 21
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 18
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 17
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 16
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical group OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 12
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 12
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 12
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 11
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 9
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 9
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 9
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 9
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 claims description 8
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 7
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims description 7
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 7
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 claims description 7
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 claims description 6
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 claims description 6
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 6
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 6
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 claims description 6
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 claims description 5
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 5
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 claims description 4
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 2
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 9
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 8
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 241000271510 Agkistrodon contortrix Species 0.000 description 4
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 4
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 4
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 PVP Chemical class 0.000 description 4
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 3
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBDMWOKJZDCFJM-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N VBDMWOKJZDCFJM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N Ala-Leu-Thr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 2
- ICZWAZVKLACMKR-CIUDSAMLSA-N Asp-His-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CN=CN1 ICZWAZVKLACMKR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- XELISBQUZZAPQK-CIUDSAMLSA-N Cys-His-Cys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N XELISBQUZZAPQK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- OXFOKRAFNYSREH-BJDJZHNGSA-N Cys-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N OXFOKRAFNYSREH-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- KRRFFAHEAOCBCQ-SIUGBPQLSA-N Glu-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KRRFFAHEAOCBCQ-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- LSQHWKPPOFDHHZ-YUMQZZPRSA-N His-Asp-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)NCC(=O)O)N LSQHWKPPOFDHHZ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 2
- QPXBPQUGXHURGP-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N QPXBPQUGXHURGP-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N Leu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N 0.000 description 2
- IZPVWNSAVUQBGP-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IZPVWNSAVUQBGP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FFOKMZOAVHEWET-IMJSIDKUSA-N Ser-Cys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O FFOKMZOAVHEWET-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WNQJTLATMXYSEL-OEAJRASXSA-N Thr-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O WNQJTLATMXYSEL-OEAJRASXSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000009615 deamination Effects 0.000 description 2
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- LZRNYBIJOSKKRJ-XVYDVKMFSA-N Ala-Asp-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N LZRNYBIJOSKKRJ-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- HQJKCXHQNUCKMY-GHCJXIJMSA-N Ala-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N HQJKCXHQNUCKMY-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- BMNVSPMWMICFRV-DCAQKATOSA-N Arg-His-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)CC1=CN=CN1 BMNVSPMWMICFRV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LXMKTIZAGIBQRX-HRCADAONSA-N Arg-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O LXMKTIZAGIBQRX-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- FLJVGAFLZVBBNG-BPUTZDHNSA-N Asn-Trp-Arg Chemical compound N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)O FLJVGAFLZVBBNG-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- KPNUCOPMVSGRCR-DCAQKATOSA-N Asp-His-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O KPNUCOPMVSGRCR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N Asp-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- HJCGDIGVVWETRO-ZPFDUUQYSA-N Asp-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(O)=O HJCGDIGVVWETRO-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- WOPJVEMFXYHZEE-SRVKXCTJSA-N Asp-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WOPJVEMFXYHZEE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N Asp-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- WZJLBUPPZRZNTO-CIUDSAMLSA-N Cys-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)N WZJLBUPPZRZNTO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- ZCFNZTVIDMLUQC-SXNHZJKMSA-N Glu-Ile-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZCFNZTVIDMLUQC-SXNHZJKMSA-N 0.000 description 1
- BDISFWMLMNBTGP-NUMRIWBASA-N Glu-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BDISFWMLMNBTGP-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- LCNXZQROPKFGQK-WHFBIAKZSA-N Gly-Asp-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LCNXZQROPKFGQK-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QPCVIQJVRGXUSA-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN QPCVIQJVRGXUSA-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N Glycyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- MDCTVRUPVLZSPG-BQBZGAKWSA-N His-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 MDCTVRUPVLZSPG-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- YOSQCYUFZGPIPC-PBCZWWQYSA-N His-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YOSQCYUFZGPIPC-PBCZWWQYSA-N 0.000 description 1
- FIMNVXRZGUAGBI-AVGNSLFASA-N His-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FIMNVXRZGUAGBI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QHUREMVLLMNUAX-OSUNSFLBSA-N Ile-Thr-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N QHUREMVLLMNUAX-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- 238000003109 Karl Fischer titration Methods 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NTRAGDHVSGKUSF-AVGNSLFASA-N Leu-Arg-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NTRAGDHVSGKUSF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- VBZOAGIPCULURB-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N VBZOAGIPCULURB-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- REPBGZHJKYWFMJ-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N REPBGZHJKYWFMJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XIZQPFCRXLUNMK-BZSNNMDCSA-N Lys-Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N XIZQPFCRXLUNMK-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- MUYQDMBLDFEVRJ-LSJOCFKGSA-N Met-Ala-His Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 MUYQDMBLDFEVRJ-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- HDNOQCZWJGGHSS-VEVYYDQMSA-N Met-Asn-Thr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HDNOQCZWJGGHSS-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- CSYVXYQDIVCQNU-QWRGUYRKSA-N Phe-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O CSYVXYQDIVCQNU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- XDMMOISUAHXXFD-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XDMMOISUAHXXFD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CTRHXXXHUJTTRZ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O CTRHXXXHUJTTRZ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- XERQKTRGJIKTRB-CIUDSAMLSA-N Ser-His-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)N)CC1=CN=CN1 XERQKTRGJIKTRB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CRJZZXMAADSBBQ-SRVKXCTJSA-N Ser-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CO CRJZZXMAADSBBQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N Ser-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- NLSNVZAREYQMGR-HJGDQZAQSA-N Thr-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NLSNVZAREYQMGR-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- LUMXICQAOKVQOB-YWIQKCBGSA-N Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O LUMXICQAOKVQOB-YWIQKCBGSA-N 0.000 description 1
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- YKRQRPFODDJQTC-CSMHCCOUSA-N Thr-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YKRQRPFODDJQTC-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 1
- HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N Trp-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- VNRTXOUAOUZCFW-WDSOQIARSA-N Trp-Val-His Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O VNRTXOUAOUZCFW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- NWEGIYMHTZXVBP-JSGCOSHPSA-N Tyr-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O NWEGIYMHTZXVBP-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000012738 dissolution medium Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002615 fibrolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 238000007496 glass forming Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 238000011141 high resolution liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Farmaceutické zmesi fibrolytického činidla
Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka nových farmaceutických zmesí fibrolytického činidla. Presnejšie, predstavovaný vynález sa týka zmrazených, kvapalných a lyofilizovaných zmesí fibrolázy a predovšetkým nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT), rovnako ako metód ich výroby a použitia.
Doterajší stav techniky
Všeobecne, polypeptidy sú obmedzene stabilné vo vodnom stave a podliehajú chemickej a fyzikálnej degradácii, ktorá vedie k strate biologickej aktivity počas výroby a skladovania. Ďalším problémom s ktorým sa môžeme stretnúť najmä vo vodných roztokoch je hydrolýza, ako napríklad deaminácia a štiepenie peptidových väzieb. Tieto javy predstavujú vážny problém pre terapeuticky aktívne polypeptidy, ktoré majú byt podávané ludom v rámci definovaných rozmedzí dávky, ktorá je založená na biologickej aktivite.
Aby sa obmedzila degradácia polypeptidov, vo vode rozpustné farmaceutické zmesi sú pred použitím spravidla uchovávané chladené alebo mrazené. Alternatívne je na stabilizáciu polypeptidov určených na dlhodobé skladovanie často využívaný proces vymrazovania, predovšetkým keď je polypeptid relatívne nestabilný vo vodných zmesiach. Lyofilizačný cyklus je zvyčajne tvorený 3 krokmi: mrazením, prvým sušením a druhým sušením; Williams a Polli, Journal of Parenteral Science and Technology, vol. 38, č. 2, Str. 48-59 (1984).
V mraziacom kroku je roztok chladený, kým nie je dostatočne zmrazený. Väčšina vody v roztoku tvorí v tomto štádiu lad. Ľad sublimuje pri prvom sušiacom štádiu, ktoré je realizované znižovaním tlaku v tlakovej komore pod tlak pary ladu, pri použití vákua. Nakoniec je adsorbovaná a naviazaná voda odstránená v druhom sušiacom štádiu zníženým tlakom v tlakovej komore a zvýšenou teplotou. Týmto postupom získame materiál známy ako lyofilizačný koláč. Potom môže byt koláč opát rozpustený tesne pred použitím.
Štandardný opätovne rozpúštací postup pre lyofilizovaný materiál je pridanie čistej vody (typicky ekvivalent objemu, ktorý bol odstránený počas lyofilizácie), i keď riedené roztoky antibakteriálnych činidiel sú väčšinou používané pri príprave liečiv na parenterálne podávanie; Chen, Drug Development and Industrial Pharmacy, Vol. 18, č. 11 a 12, str. 1311-1354 (1992).
Lyofilizácia je považovaná za jeden z najlepších spôsobov, ako odstrániť prebytok vody z roztokov polypeptidov. Vymrazovacím procesom môžu byt získané produkty, ktoré sú stabilné a prístupné zachádzaniu pri dlhodobom skladovaní. Lyofilizované produkty môžu byť uchovávané pri izbovej teplote a preto zachádzanie s nimi a ich distribúcia po celom svete, predovšetkým na zahraničné trhy, kde chladenie nie je možné, je jednoduchšie.
Plnidlá v niektorých prípadoch hrali úlohu stabilizátorov pre vymrazené produkty; Carpenter et al., Developments in Biological Standardization, Vol. 74, str.225-239 (1991). Napríklad známe plnidlo obsahujúce polyoly (zahŕňajúce manitol, sorbitol a glycerol), cukry (zahŕňajúce glukózu a sacharózu); a aminokyseliny (zahŕňajúce alanin, glycin a kyselinu glutámovú).
Okrem toho sú tiež často používané polyoly a cukry na ochranu polypeptidov pred poškodením vyvolaným mrazením a sušením a na zvýšenie stability počas skladovania v sušenom stave. Všeobecne cukry, predovšetkým disacharidy, sú účinné ako pri vymrazovaní, tak počas skladovania. Iné triedy mo3 lekúl, vrátane nono-, disacharidov a polymérov ako je PVP, boli opísané takisto ako stabilizátory lyofilizovaných produktov .
Podstata vynálezu
Predkladaný vynález sa týka stabilných farmaceutických zmesí fibrolázy a nového polypeptidu pôsobiaceho trombolyticky (NAT), niektoré z nich sú kvapalné zmesi vhodné na skladovanie v zmrazenom stave a iné, ktoré sú vhodné na lyofilizáciu.
Vďaka fibrinolytickým vlastnostiam fibrolázy a NATu, sú zmesi v tomto vynáleze použitelné na rozpúšťanie krvných zrazenín in vivo a môžu byť podávané ako lieky na tieto účely.
Na účely tohto vynálezu termín NAT označuje metaloproteinázu, ktorá má fibrinolytickú aktivitu, ktorá je charakterizovaná SEQ ID NO:1. NAT polypeptid je kódovaný cDNA molekulou so sekvenciou SEQ ID NO:2, hoci akákolvek DNA molekula rôznej sekvencie, kódujúcej rovnaký polypeptid môže byt použi tá na expresiu a prípravu podlá metód, ktoré sú opísané ďalej
Fibroláza je známa metaloproteináza, ktorá bola opísaná vo vedeckej a patentovej literatúre; pozri Randolph et. al., Protein Science, Cambridge University Press (1992), str. 590600, A European Patent Application č. 0 323 722 (Valenzuela et. al.), publikovaná 12. júla, 1989. Typicky, fibroláza používaná v zmesiach tohto vynálezu bude mat sekvenciu SEQ ID NO:3, ktorá je kódovaná cDNA molekulou so sekvenciou SEQ ID NO:4 (alebo jej varianty, kódujúce rovnakú aminokyselinovú sekvenciu).
Fibroláza a NAT sú odlíšitelné od ostatných liečebných činidiel určených na liečbu krvných zrazenín in vivo, ako sú urokináza, streptokináza, a tPA, ktoré sú aktivátormi plazmi4 nogénu. Na rozdiel od týchto činidiel, fibroláza a NAT pôsobia priamo na zrazeninu a degradujú ako fibrín, tak fibrinogén.
Farmaceutické zmesi tohto vynálezu budú obsahovat, navyše okrem terapeuticky účinných množstiev fibrolázy alebo NATu, zinočnatý stabilizátor, a nepovinne, výplňové činidlo v kombinácii buď s, alebo bez iných základov masti vo farmaceutický prijateľných tlmivých roztokoch, ktoré poskytujú stabilné, zmrazené alebo lyofilizované produkty, skladovateiné počas predĺženého časového obdobia.
V jednom z jeho hladísk, predkladaný vynález poskytuje zmraziteínú kvapalnú liečivú zmes obsahujúcu fibrolázu alebo NAT, vo vode rozpustnú zinočnatú soí, citrátový tlmivý roztok, nepovinne ďalší stabilizátor vybraný zo skupiny skladajúcej sa z vo vode rozpustných vápenatých solí a nepovinne výplňového činidla (napríklad manitolu). Detergent, ako je Tween 80 (Basf, Gurnee, Illinois), môže byt tiež pridaný, aby zvýšil zmrazovaciu-rozmrazovaciu stabilitu.
Tris tlmivý roztok (Sigma, St.Louis, Missouri) alebo iný tlmivý roztok s tlmivou kapacitou okolo pH 7,0 môže byt pridaný, aby stabilizoval pH na alebo nad pH 7,4.
Z iného hľadiska predkladaného vynálezu, farmaceutické zlúčeniny môžu byt lyofilizovatelné alebo lyofilizované farmaceutické zmesi obsahujúce fibrolázu alebo NAT, zinočnatý sta-: bilizátor (napr. vo vode rozpustná zinočnatá sol), a citrátový tlmivý roztok, s alebo bez ďalších výplňových činidiel (napríklad manitolu, glycínu alebo im podobných). Lyofilizovaná zmes môže takisto obsahovat disacharid, ako napríklad sacharózu, alebo trehalóza, ktoré fungujú ako lyoprotektant. Detergent, ako je Tween 80, môže byt tiež pridaný, aby ochránil metaloproteinázu (fibrolázu a NAT) pred lyofilizačným stresom. pH bude udržované okolo 8,0±0,5, použitím vhodného tlmivého roztoku s pH v tomto rozmedzí (napríklad Tris).
Vynález tiež obsahuje metódu na prípravu lyofilizovaných zmesí, zahŕňajúcu kroky (i) zmiešanie fibrolázy alebo NATu s tlmivým roztokom a so zinočnatými sólami, ktoré sú vo vode rozpustné, a tiež s požadovanými doplnkovými prísadami, a (ii) lyofilizáciu tejto zmesi.
Navyše, vynález poskytuje sadu na prípravu vodnej farmaceutické zmesi, ktorá obsahuje v prvej nádobe hore uvedenú lyofilizovanú zmes a v druhej nádobe fyziologicky pŕijatelné rozpúšťadlo.
Ďalšie hladisko tohto vynálezu zahŕňa metódu obsahujúcu kroky na opätovné rozpustenie lyofilizovanej zmesi a podávanie opätovne rozpustenej zmesi pacientovi v prípade potreby rozpustenia krvnej zrazeniny.
Stručný prehlad vynálezu
Rôzne systémy hostitel-vektor môžu byt použité na expresiu kódujúcej sekvencie polypeptidú fibrolázy alebo NATu v súlade so štandardnými metódami rekombinantnej expresie, ktoré sú všeobecne známe, a tak získat fibrinolyticky aktívny polypeptid do zmesí. Také systémy obsahujú, ale nie je to obmedzené, eukaryotický bunkový systém ako je cicavčí bunečný systém infikovaný vírusom (napríklad vírus vakcínie, adenovírus, apod.); hmyzí bunkový systém infikovaný vírusom (napríklad bakulovírus); mikroorganizmy, ako sú kvasinky, obsahujúce kvasinkové vektory; alebo prokaryotický bunkový systém ako sú baktérie (napr. E. coli) transformované bakteriofágovou DNA, plazmidovou DNA alebo kozmidovou DNA. Expresné prvky týchto vektorov sa líšia silou a špecifickosťou. V závislosti od použitého systému hostitel-vektor môžu byť použité akékolvek vhodné transkripčné a translačné prvky.
Prednostne pre ich veľkú efektivitu sú na rekombinantnú expresiu používané kvasinkové expresné systémy (napr. Pichia pastoris). Podrobný opis takýchto systémov je možné nájsť v patente Spojených štátov amerických č. 4 855 231 (Stroman et al.), patente Spojených štátov amerických č. 4 512 405 (Lair et al.), patente Spojených štátov amerických č. 4 818 700 (Cregg et al.), patente Spojených štátov amerických č.
885 242 (Cregg) a patente Spojených štátov amerických č.
837 148 (Cregg), opisy týchto patentov sú začlenené v referenciách. Expresia fibrolázy v takomto systému bude typicky zahŕňať DNA molekulu so sekvenciou SEQ ID NO:5, ktorá okrem matúrovaného polypeptidu (nukleotidy 784-1392), kóduje prepo sekvenciu (nukleotidy 1-783).
Expresia NATu v takomto systému bude typicky obsahovat DNA molekulu so sekvenciou SEQ ID NO:6, ktorá okrem maturovaného polypeptidu (nukleotidy 784-1386), kóduje prepo sekvenciu (nukleotidy 1-783).
Ďalšie detaily týkajúce sa NATu a metód jeho prípravy môžu byt zistené v pridelenom patente číslo žiadosti _ (právnická referencia A-596), vyplnená súbežne s týmto, ktorý je tu začlenený v referenciách.
Ked je polypeptid (fibroláza alebo NAT) pripravený, prečistený a potom je stanovená jeho aktivita (pomocou známych postupov), môže byt formulovaný do farmaceutických zmesí podlá tohto vynálezu.
V tejto zmesi (buď zmrazenej alebo lyofilizovanej), stabilizátor (ktorý môže byt opisovaný ako sklo-tvoriace aditivum) je pridávaný ako prevencia alebo obmedzenie precipitácie a chemickej degradácie fibrolázy alebo NATu. Zahmlený alebo zakalený roztok pri izbovej teplote signalizuje, že sa polypeptid vyzrážal. Termín stabilizátor značí plnidlo schopné predchádzať agregácii alebo inej fyzikálnej degradácii, rov7 nako ako chemickej degradácii (napríklad autolýza, deaminácia, oxidácia, apod.) fibrolázy alebo NATu vo vodnom prostredí.
Bolo zistené, že použitie zinočnatého stabilizátoru a konkrétne vo vode rozpustných zinočnatých solí, zvyšuje stabilitu metaloproteinázy (fibrolázy alebo NATu) v každom type zmesi, v porovnaní s preparátmi, v ktorých sú použité anorganické alebo iné typy organických zmesí, ktoré predchádzajú agregácii a/alebo rozkladu polypeptidu.
Konkrétne, koncentrácie zinku nad 0,01 milimolárnu (mM) stabilizujú metaloproteinázu, s výnimkou koncentrácií nad lmM, ktoré signifikantne obmedzujú rozpustnost fibrolázy alebo NATu Preto je odporúčané rozmedzie od 0,0lmM do lmM. Príklady vhodných zinočnatých solí sú octan zinočnatý, síran zinočnatý a chlorid zinočnatý.
Zmrazené kvapalné zmesi podlá tohto vynálezu, môžu tiež obsahovat (ale nie nezbytne) vo vode rozpustné vápenaté soli, ako další stabilizátor. Príkladmi sú octan vápenatý, síran vápenatý a chlorid vápenatý, ktoré sú pokial je to možné prítomné v koncentrácii asi 0,001 až asi 0,02mM, a najlepšie v koncentrácii okolo 0,01±0,002mM.
Keď sú požadované ďalšie stabilizátory, ktoré sú bežne používané vo farmaceutických zmesiach, ako je sacharóza, trehalóza, alebo glycín, môžu byt použité ešte navyše k tým, ktoré sú uvedené hore. Typicky, také stabilizátory sú pridávané v menších množstvách dosahujúcich napríklad okolo 0,1% až 0,5% (w/v). Detergentové stabilizátory, ako je Tween 20 alebo Tween 80 (BASF) môžu byt tiež pridané v tradičných množstvách.
Keď je to požadované, zmrazené kvapaliny a lyofilizované zmesi môžu takisto obsahovat výplňové/osmolaritu regulujúce činidlo. Prednostne je to manitol, ktorý je pridávaný v kon8 centráciách okolo 2% až 8% hmotnosti na objem (w/v) a zvyčajne v koncentráciách okolo 5% (w/v).
Výber farmaceutický prijateľného tlmivého roztoku a pH tiež ovplyvňuje stabilitu predstavovanej zmesi. Fibroláza alebo NAT je najstabilnejšia okolo neutrálneho pH (7,0).
K významnej precipitácii metaloproteinázy dochádza pod pH 7,0, keď je zmrazená zmes rozmrazovaná a lyofilizovaná zmes je opát rozpustená. Pufrovací systém zmesi by mal byt vyberaný tak, aby bol fyziologicky kompatibilný a udržoval požadované pH v opätovne rozpustenom roztoku, rovnako ako v roztoku pred lyofilizáciou. Prednostne majú tlmivé roztoky pufrovaciu kapacitu v rozsahu od pH 7,0 do pH 8,5.
Výslovne, citrátové tlmivé roztoky (napr. kyselina citrónová alebo soľ kyseliny citrónovej) sú prednostne pridané v koncentráciách okolo 20mM až HOmM, a najlepšie okolo lOOmM v zmrazenej kvapalnej zmesi a okolo 20mM v lyofiliovanej zmesi Soli kyseliny citrónovej sú používané ako pufrovacie činidlo, ale aj ako stabilizátor v zmesi tohto vynálezu. Môže byt použitá buď kyselina alebo soľ uvedená hore, citrátový tlmivý roztok je vybraný tak, aby upravoval pH zmesi na hodnotu v požadovanom rozmedzí, ako bolo naznačené hor (v prípade lyofilizovanej zmesi, po jej opätovnom rozpustení). Prídavné pufrovacie činidlá, ako je Tris, môžu byt pridané vo vhodných účinných množstvách, tak aby udržali náležitú pufrovaciu kapacitu nad pH 7,0.
Uprednostňovaná kvapalná zmes, určená na zmrazenie obsahuje ako prídavok k rozpustenej fibroláze alebo NATu, octan zinočnatý v koncentráciách okolo 0,08mM až 0,12mM, octan vápenatý v koncentráciách od 0,008mM až 0,012mM, kyselinu citrónovú (alebo citrát sodný) v koncentráciách od 95mM až 105mM, pri pH 7,4. Iná uprednostňovaná kvapalná zmes obsahuje fibrolázu alebo NAT, octan zinočnatý v koncentrácii od 0,08mM až
0,12mM, kyselinu citrónovou (alebo citrát sodný) v koncentráciách od 18mM až 22mM, Tris v koncentráciách od 0,02mM až 0,06mM, manitol v koncentráciách od 3% do 6% (w/v) a Tween 80 v koncentráciách od 0,008% do 0,012% (w/v) pri pH 8,0.
Uprednostňovaná lyofilizovaná zmes obsahuje okrem fibrolázy alebo NATu, síran zinočnatý v koncentráciách od 0,08mM do 0,12mM, kyselinu citrónovú (alebo citrát sodný) v koncentráciách od 18mM do 22mM, Tris v koncentráciách od 3mM do 6mM, manitol v koncentráciách od 3% do 6% (w/v) a Tween 80 v koncentráciách od 0,008% do 0,012% (w/v) pri pH 8,0.
Vo všetkých zmesiach tohto vynálezu, sa fibroláza alebo NAT vyskytujú v koncentráciách od 0,1 mg/ml do 50 mg/ml, a pokial je to možné v koncentráciách 5 mg/ml až 40 mg/ml a najlepšie v koncentráciách 10 mg/ml až 15 mg/ml.
Relatívny pomer výplní v týchto zmesiach závisí od niekoľkých faktorov. Napríklad, množstvo mataloproteinázy a výplňových činidiel (napr. manitolu) má vplyv na množstvo zinku (a vápnika, ked’ je prítomný) potrebného na stabilizáciu zmesi
Množstvo stabilizátoru v zmesiach závisí od množstva potrebného na udržanie štruktúrnej integrity fibrolázy alebo NATu počas lyofilizácie alebo iných procesov alebo pri skladovaní .
Tiež ďalšie známe plnidlá môžu byt súčastou zmesi, za predpokladu, že sú fyziologicky kompatibilné a nijak neškodia fibroláze alebo NATu. Napríklad zmes môže obsahovať menšie množstvo aditiv, ako sú konzervačné látky, napätie upravujúce činidlá, antioxidanty, alebo iné polyméry (napríklad činidlá upravujúce viskozitu, alebo plnidlá). Odborníci môžu lahko určiť vhodné činidlá, ktoré môžu byť farmaceutický užitočné, na základe znalostí a skúseností s inými farmaceutickými zmesami. Pozri napríklad Reminton's Pharmaceutical Sciences (posledné vydanie), Mack Publishing Company, Easton, PA.
Tieto zmesi sú očakávané stabilné najmenej 2 roky pri -30°C pre zmrazené zmesi a 2 roky pri 2°C až 8°C pre lyofilizované zmesi. Táto dlhodobá stabilita je výhodná pre predĺženú trvanlivosť farmaceutických výrobkov a pre expedíciu na veíké vzdialenosti.
V ďalšom aspekte predkladaný vynález tiež poskytuje postup na prípravu lyofilizovanej zmesi zahŕňajúci tieto kroky:
(a) nastavenie pH zmesi, ktorá obsahuje súčasti zmesi bez fibrolázy alebo NATu medzi 7,6 a 8,2, (b) výmenu tlmivého roztoku v roztoku obsahujúcom fibrolázu alebo NAT na zmes kroku (a) a potom pridanie účinného množstva detergentu, a (c) lyofilizáciu zmesi z kroku (b).
Fibroláza alebo NAT a účinné množstvo plnidla sú zmiešané za podmienok, ktoré obmedzujú agregáciu sušenej fibrolázy alebo polypeptidu NATu pri opätovnom rozpustení v rozpúšťačom médie, napr. rozpúšťadlo, ktoré je kompatibilné s vybraným spôsobom podávania a negatívne neinterferuje s metaloproteinázou, ako je sterilná voda, fyziologický soíný roztok, roztok sacharózy, alebo iné vodné rozpúšťadlá (napr. alkoholy ako je etyl, n-propyl alebo izopropyl, butyl alkohol, alebo ich zmesi) a, nepovinne, iné zložky ako sú antibakteriálne činidlá.
Plnidlá môžu byť zmiešané s metaloproteinázou vo vyhovujúcom čase pred lyofilizáciou. čas potrebný na zmiešanie plnidiel a metaloproteinázy by mal byť dostatočný na prípravu vhodnej zmesi, najlepšie miešanie, ktoré bude vykonávané v čase od jednej do tridsiatich minút.
Formulovaná metaloproteináza môže byt potom lyofilizovaná, uskladnená a opätovne rozpustená použitím štandardných metód, pozri Pikal, supra. Špecifické podmienky za ktorých je fibroláza alebo NAT vymrazovaná a opätovne rozpustená nie sú kritické, za predpokladu, že vybrané podmienky nedegradujú metaloproteinázu a nie sú škodlivé pre stabilizátor. Uprednostňovaný lyofilizačný cyklus zahŕňa mrazenie zmesi pri -40°C, chladenie zmrazenej vzorky pri -12°C a vedenie primárneho sušenia pri -30°C až -35°C počas 20 až 50 hodín a sekundárne sušenie pri 20°C počas 20 až 40 hodín.
Všeobecne, opätovne rozpustená zmes bude použitá skoro po rozpustení.
Ako NAT tak aj fibrolázu je najlepšie aplikovať lokálne na miesto zrazeniny, aby bola liečba čo najefektívnejšia. Rovnako ako fibroláza, tak aj NAT je kovalentne viazaný a2 makroglobulínom v celkovom obehu. Zatial čo v komplexe s a2 makroglobulínom, ani fibroláza ani NAT nemôžu dosiahnuť cielový substrát (napr. fibrín alebo fibrinogén) a sú značne neefektívne, kým maximálne prirodzené hladiny a2 makroglobulínu nie sú prekročené. Je preto uprednostňované to, že zmesi tohto vynálezu sú podávané priamo na krvnú zrazeninu cez intraarteriálny alebo intravenózny katéter.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Nasledujúce príklady ďalej ilustrujú predstavovaný vynález
Rekombinantný NAT (SEQ ID N0:l) používaný v príkladoch 1-3 bol produkovaný expresiou v P. pastoris.
Podrobnosti ohľadne vhodného expresného systému a metódy boli opísané v Stroman et al., Lair et al., Cregg et al. a v patentoch Cregga, ktoré boli opísané hore. Všetky chemikálie boli buď analyticky čisté alebo mali kvalitu amerického liekopisu (USP).
Príklad 1
Príprava zmrazených kvapalných zmesí
Vodná zmes obsahujúca lOOmM kyselinu citrónovú, 0,01mM octan vápenatý a O,lmM síran zinočnatý je pripravovaná zmiešaním zložiek a úpravou pH na hodnotu 7,4. V roztoku, ktorý obsahuje NAT je tlmivý roztok vymenený dialýzou (prípadne ultrafiltráciou). Výsledná zmes NATu je skoncentrovaná na 10 mg/ml a uskladnená pri teplote -30°C, dovtedy, ako je použitá.
Príklad 2
Príprava lyofilizovanej zmesi
Príprava lyofilizovanej zmesi. Vodná zmes obsahujúca 5mM Tris, 20mM kyselinu citrónovú, 5 % (w/v) manitolu, 0,5 % (w/v) sacharózy a 0,lmM síran zinočnatý bola pripravená zmiešaním zložiek a pH bolo upravené na hodnotu 8,0. V roztoku, ktorý obsahoval NAT bol tlmivý roztok vymenený dialýzou (prípadne ultrafiltráciou). Výsledná zmes NATu bola skoncentrovaná na 10 mg/ml až 12 mg/ml. Tween 80 bol pridaný na konečnú koncentrciu 0,01% (w/v). Roztok bol uskladnený pri teplote 2-8°C, kým nebol pripravený na lyofilizáciu.
Vymrazovací cyklus lyofilizovaného produktu. Hore pripravená zmes bola na prvý raz zmrazená pri teplote -40°C v lyofilizátore. Chladiaca teplota bola stanovená na -12°C, primárna sušiaca teplota bola stanovená na -30°C, sekundárna sušiaca teplota bola stanovená na 20’C. Výsledný vysušený koláč vykazoval dobrú morfológiu a obsahoval menej ako 3 % vody, ako bolo detekované titračnou metódou Karla Fischera, pozri. Fischer, Angew Chemie, Volume 48, str. 394 (1935).
Po ukončení vymrazovaní bol lyofilizovaný koláč daný do skúmaviek a gumové zátky boli celkom utesnené pod vákuom stlačením horných kovových políc v lyofilizátore. Skúmavky boli potom uzatvorené 13-mm odtrhávacími hliníkovými zátkami a umiestnené do inkubátorov, ktoré sú nastavené na rôzne teploty.
Príklad 3
Analýzy opätovne-rozpustených lyofilizovaných vzoriek
Časová analýza vzorky. Skúmavky so vzorkami boli vyberané z inkubátorov vo vopred určených časových intervaloch na časovú analýzu. Lyofilizovaná vzorka bola po prvý raz opätovne rozpustená v 0,9 ml sterilnej vody, napr. voda pre injekcie (McGaw Inc., Irvine, CA). Priezračnosť opätovne rozpustenej vzorky zmesi bola vizuálne preverená. Filtrovaný roztok bol analyzovaný pomocou HPLC, UV/Vid spektroskopie a bolo vykonané stanovenie enzýmovej aktivity za účelom kvantifikácie opätovne rozpusteného NATu v týchto lyofilizovaných vzorkách.
Na základe hore uvedených analýz, viac ako 90 % NATu bolo obnovených po opätovnom rozpustení lyofilizovaného produktu.
UV/Vid absorbancia. 150-200 μΐ roztoku NATu bolo nanesených do lem kremennej sklenenej kyvety.
UV/Vid absorbancia bola meraná na diódovom poli spektrofotometru HP 8452A (Hewlett-Packard Co., Wilmington, DE). Koncentrácia NATu bola určená podlá A 0,l%=l,05 pri 280 nm, na základe výpočtu z aminokyselinového zloženia, referencia Edelhoch, Biochemistry, Volume 6, str. 1948-1954 (1967). Po rehydratácii lyofilizovaného produktu, bol pozorovaný nedetekovatelný zákal pri meraní absorbancie pri 350 nanometroch (nm).
Vysoko rozlišovacia kvapalinová chromatografia (HPLC). HPLC analýzy vzoriek NATu boli vykonávané pomocou HP 1050 kvapalinového chromatografického systému opatreného HP 3D Chemstation na zber údajov (Hewlett-Packard Co.). Druhy NATu boli detekované absorbanciou pri 280 nm a 214 nm použitím detektoru HP diódového pole.
Pri reverznej fázovej HPLC (RP-HPLC) boli vzorky nanesené na Zorbax 3005B-C8 kolónu (4,6 x 250 mm) (Hewlett-Packard Co.) do mobilnej fázy, ktorá obsahovala 51,5 % tlmivého roztoku A (2% izopropanol, 0,1% TFA) a 48,5 % tlmivého roztoku B (90% acetonitril, 2% izopropanol, 0,1% TFA) v prietokovom čase 0,6 ml/min. Tlmivý roztok B bol 6 minút zadržovaný a potom zvýšený na 51% cez 20 minút. Táto koncentrácia bola udržovaná jednu minútu, nasledovalo osemminútové zvýšenie a päť minút udržovanie na 90 %. V závere bol tlmivý roztok B zvýšený späť na
48,5 % na 3 minúty. Obnovenie NATu po lyofilizácii, ako bolo stanovené touto metódou, bolo väčšie ako 92 %.
Pri iónomeničovéj HPLC (IEX-HPLC), boli vzorky nanesené na Tosohaas DEAE-5PW kolónu (7,5 x 75 mm) (Tosohaas, Montgomeryville, Alabama) do mobilnej fázy, ktorá obsahovala 90 % tlmivého roztoku A (20mM Tris, pH 8,5) a 10 % tlmivého roztoku B (20mM Tris, 250mM NaCl, pH 8,5) pri prietoku 0,5 ml/min. Potom bol aplikovaný gradient, rastúci od 10 % tlmivého roztoku B do 75 % tlmivého roztoku B počas 20 minút, potom 75 %
B do 90 % tlmivého roztoku B počas 1 minúty. Tlmivý roztok B bol potom udržovaný 5 minút a nasledovalo zníženie na 10% tlmivý roztok B v štyroch minútach. Obnovenie NATu po lyofilizácii stanovené touto metódou bolo vyššie ako 90 %.
Pri veľkostne vylučujúcej HPLC (SEC-HPLC) boli vzorky nanesené na Tosihaas G-2000 SWXL kolónu (300 x 7,8 mm). Izokratická elúcia bola aplikovaná pri prietoku 0,8 ml/min pri použití tlmivého roztoku, ktorý obsahoval 15mM fosfát sodný, pH 7,0 a 0,140M chlorid sodný. Obnovenie NATu po lyofilizácii stanovené touto metódou bolo väčšie ako 95 %.
Bio stanovenie. Pri vzorkách bola preverená ich aktivita na fibrínových zrazeninách. Malé podiely série riedenia NATu od 0,01 do 1,0 mg/ml boli nanesené na pripravené fibrínové zrazeniny v 96-jamkových doštičkách.
Vzorky boli inkubované 18 hodín a lýza zrazeniny bola kvantifikovaná absorbanciou pri 500 nm. Graf vynesenej absorbancie proti koncentrácii NATu pre rôzne formulácie bol porovnaný s pripravenými štandardami NATu a bola vyhodnotená relatívna aktivita. Nebol nameraný rozdiel vo fibrinolytickej aktivite NATu po lyofilizácii a kontrolných nelyofilizovaných vzorkách.
Rovnaké výsledky boli tiež získavané so zmrazenými vodnými zmesami, ktoré sa rozmrazia pri 4°C a testujú použitím rovnakých protokolov.
Predchádzajúci vynález bol opísaný detailne za účelom jasnosti a pochopitelnosti. Je tiež zrejmé, že rôzne iné kombinácie úprav a detailov môžu byt vykonané bez odchýlenia sa od rozsahu vynálezu, ako je definované v priložených nárokoch
Príklad 4
Postupy z príkladov 1 a 2 sú opakované s rekombinantnou fibro lázou namiesto NATu, za účelom prípravy rovnakých zmrazených lyofi1izovaných zmesí.
Zoznam sekvencií <110> Kendrick, Brent S.
Peterson, Brian A.
<120> FARMACEUTICKÉ ZMESI FIBROLYTICKÉHO ČINIDLA <130> A-578 <140> N/A <141> 1999-10-01 <160> 6 <170> Patentln Ver. 2.0 <210> 1 <211> 201 <212> PRT <213> Umelá sekvencia <220>
<223> Opis umelej sekvencie: NAT (analóg fibrolázy z Agkistrodon contortrix) <400> 1
| Ser 1 | Phe | Pro | Gin | Arg 5 | Tyr | Val | Gin | Leu | Val 10 | íle | Val | Ala | Asp | His Arg 15 . |
| Met | Asn | Thr | Lys 20 | Tyr’ | Asn | Gly | Asp | Ser 25 | Asp | Lys | íle | Arg | Gin 30 | Trp Val |
| His | Gin | íle 35 | Val | Asn | Thr | íle | Asn 40 | Glu | íle | Tyr | Arg | Pro 45 | Leu | Jle |
| Gin | Phe . 50 | Thr | Leu | Val | Gly | Leu 55 | Glu | íle | Trp | Ser | Asn 60 | Gin | Asp | Leu íle |
| Thr 65 | Val | Thr | Ser | Val | Ser 70. | His | Asp | Thr | Leu | Ala 75 | Ser | Phe | Gly | Asn Trp 80 |
| Arg | Glu | Thr | Asp | Leu 85 | Leu | Arg | Arg | Gin | Arg 90 | His | Asp | Asn ».« | Ala | Gin Leu 95 |
| Leu | Thr | Ala | íle 100 | Asp | Phe | Asp | Gly | Asp 105 | Thr | Val | Gly | Leu | Ala 110 | Tyr Val |
| Gly | Gly | Met 11$ | Cys | Gin | Leu | Lys | His .120 | Ser | Thr | Gly | Val | íle 125 | Gin | Asp His |
| Ser | Ala 130 | íle | Asn | Leu | Leu | Val 135 | Ala | Leu | Thr | Met | Ala 140 | His | Glu | Leu Gly |
| His 145 | Asn | Leu | Gly | Met | Asn 15Q | His | Asp | Gly | Asn | Gin 155 | cys | His | cys | Gly Ala 160 |
| Asn | Ser | Cys | Val | Met | Ala | Ala | Met | Leu | Ser Asp | Gin | Pro Ser | Lys | Leu |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||
| Phe | Ser | Asp | Cys | Ser | Lys | Lys | Ásp | Tyr | Gin *Thr | Phe | Leu.Thr | Val | Asn |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||
| Asn | Pro | Gin | Cys | íle | Leu | Asn | Lys | Pro | |||||
| 195 | 200 |
<210> 2 <211> 603 <212> DNA <213> Umelá sekvencia <220>
<223> Opis umelej sekvencie: Kódujúci NAT (analóg fibrolázy) <400> 2 tctttcccac aaagatacgt acagctggtt atcgttgctg accaccgtat gaacactaaa '60 tacaacggtg actctgacáa aatccgtcaa tgggtgcacé aaatcgtcaa caccattaac 120 gaaatctaca gaccactgaa catccaattc actttggttg gtttggaaat ctggtccaac 180 caagatttga tcaccgttac. ttctgtatcc cacgacactc tggcatcctt cggtaactgg 240 cgtgakaccg acctgctgcg tcgccaacgt catgataacg ctcaactgct gaccgctatc 300 gacttcgacg gtgatactgt tggtctggct tacgttggtg gcatgtgtca actgaaacat 360 tctactggtg ttatccagga ccactccgct attaacctgc tggttgctct gaccatggca 420 cacgaactgg gtcataacct gggtatgaac cacgatggca accagtgtca ctgrcggtgca 480 aactcctgtg ttatggctgc tatgctgtcc gatcaaccat ccaaactgtt ctccgactgc 540 tctaagaaag a.ctaccagac cttcctgacc gttaacaacc cgcagtgtat cctgaacaaa 600 .ccg 603 <210> 3 <211> 203 <212> PRT <213> Agkistrodon contortrix <220> ' <223> Natívna fibroláza z Agkistrodon contortrix <400> 3
| Gin 1 | Gin | Arg | Phe Pro 5 | Gin | Arg | Tyr | Val | Gin 10 | Leu | Val | íle | Val | Ala. 15 | .Asp |
| His | Arg | Met | Asn Thr 20 | Lys | Tyr | Asn | Gly 25 | Asp | Ser | Asp | •Lys | íle 30 | Arg | Gin |
| Trp | Val | His . 35 | Gin' íle | Val | Asn | Thr 40 | íle | Asn | Glu | íle | Tyr 45 | Arg | Pro | Leu |
| Asn | íle 50 | Gin | Phe Thr | Leu | Val 55 | Gly | Leu | Glu | íle | Trp . 60 | Šer | Asn | Gin | Asp |
| Leu 65 | íle | Thr | Val Thr | Ser 70 | Val | Ser | His | Asp | Thr 75 | Leu | Ala | Ser | Phe | Gly 80 |
| Asn | Trp | Arg | Glu | Thr | Asp | Leu | Leu | Arg | Arg | Gin | Arg | His | Asp | Asn | Ala |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Gin | Leu | Leu | Thr | Ala | íle | Asp | Phe | Asp | Gly | 'Asp | Thr | Val | Gly | Leu | Ála |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Tyr | Val | Gly | Gly | Met | Cys | Gin | Leu | Lys | His | Ser | Thr | Gly | Val | íle | Gin |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| Asp | His | Ser | Ala | íle | Asn | Leu | Leu | Val | Ala | Leu | Thr | Met | Ala | His | Glu |
| 130. | 135 | 140 | |||||||||||||
| Leu | Gly | His | Asn | Leu | Gly | Met | Asn | His | Asp | Gly | Asn | Gin | Cys | His | Cys |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Gly | Ala | Asn | Ser | Cys | Val | Met | Ala | Ala | Met | Leu | Ser | Asp | Gin | Pro | Ser |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Lys | Leu | Phe | Ser | Asp | Cys | Ser | Lys | Lys | Asp | Tyr | Gin | Thr | Phe | Leu | Thr |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Val | Asn | Asn | Pro | Gin | Cys | íle | Leu | Asn | Lys | Pro |
195 200 <210> 4 <211> 609 <212> DNA <213> Agkistrodon contortrix <220>
<223> Kóduje natívnu fibrolázu z Agkistrodon contortrix <400> 4 caacaaagat tcccacaaag atacgtacag ctggttatcg ttgctgacca ccgtatgaac 60 actaaataca acggtgactc tgacaaaatc cgtcaatggg tgcaccaaat cgtcaacacc 120 attaacgaaa tctacagacc actgaacatc caattcactt tggttggttt ggaaatctgg 180 tccaaccaag atttgatcac cgttacttct gtatcccacg acactctggc. atccttcggt 240 aactggcgtg aaaccgacct gctgcgtcgc caacgtcatg ataacgctca- actgctgacc 30Ú gctatcgact tcgacggtga .tactgttggt ctggcttacg ttggtggcat gtgtcaactg 360 aaacattcta ctggtgttat ccaggaccac tccgctatta acctgctggt tgctctgacc 420 atggcacacg aactgggtca taacctgggt atgaaccacg atggcaacca gtgtcactgc 480 ggtgcaaact cctgtgttat ggctgctatg ctgtccgatc aaccatccaa actgttctcc 540 gactgctcta agaaagacta ccagaccttc ctgaccgtta acaacccgca gtgtatcctg 600 áacaaaccg 609 <210> 5 <211> 1392 <212> DNA <213> Agkistrodon contortrix · <220>
<223> Natívna profibroláza z Agkistrodon contortrix <400> 5 atgagatttc cttcaatttt tactgctgtt ttattcgcag catcctccgc attagctgct 60 ccagtcaaca ctacaacaga agatgaaacg gcacaaattc cggctgaagc tgtcatcggt tactcagatt tagaagggga tttčgatgtt gctgttttgc cattttccaa cagcacaaat aacgggttat tgtttataaa tactactatt gccagcattg ctgctaaaga agaaggggta tctctcgaga aaagagaggc tgaagcttct tctattatct tggaatctgg taacgctaac gattacgaag ttgtttatcc aagaaaggCC actccagttc ctaggggtgc tgttcaacca aagtacgaag atgccatgca atacgaattc aaggttaaca gtgaaccagt tgtcttgcac ttggaaaaaa acaaaggttt gttctctgaa gattactctg aaactcatta ctccccagat ggtagagaaa ttactactta cccattgggt gaagatcact gttactacca tggtagaatc gaaaacgatg ctgactccac tgcttctatc tctgcttgta acggtttgaa gggtcátttc aagttgcaag gtgaaatgta cttgattgaa ccattggaat tgtccgactc tgaagcccat gctgtctaca agcacgaaaa cgtcgaaaag gaagatgaag ccccaaagat gtgtggtgtt acccaaaact gggaatcata tgaaccaatc aagaaggcct tccaattaaa cttgactaag agacaacaaa gattcccaca aagatacgta cagctggtta tcgttgctga ccaccgtatg aacactaaat ačaacggtga ctctgacaaa atccgtcaat. gggtgcacca aatcgtcaac accattaacg aaatctacag accactgaac atccaatcca ctttggttgg tttggaaatc tgígtccaacc aagatttgat caccgttact tctgtatccc acgacactct ggcatccttc ggtaactggc gtgaaaccga cctgctgcgt cgccaacgtc atgataacgc tcaactgctg accgccatcg acttcgacgg tgatactgtt ggtctggctc acgttggtgg catgtgtcaa ctgaaacatt ctactggtgt tatccaggac čactccgcta ttaacctgct ggttgctctg accatggcac acgaactggg ccataacctg ggtatgaacc acgatggcaa ccagtgtcac tgcggtgcaa actcctgtgt tatggctgct acgctgtccg atcaaccatc caaactgctc tccgactgct ctaagaaaga ctaccagacc ttcetgaccg Ctaacaaccc gcagtgtacc ctgaacaaac cg <21O> 6 <211> 1386 <212> DNA <213> Umelá sekvencia <220>
<223> Opis umelej sekvencie: proNAT (analóg profibrolázy z Jkgkistrodon contortrix).
<400> 6 atgagatttc cttcaatttt tactgctgtt ttattcgcag catcctccgc attagctgct ccagtcaaca ctacaacaga agatgaaacg gcačaaattc cggctgaagc tgtcatcggt tactcagatc tagaagggga tttčgatgtt gctgtttcgc cattttccaa cagcacaaat aacgggttat tgtttataaa tactactatt gccagcattg ctgctaaaga' agaaggggta tctctcgaga aaagagaggc tgaagcttct tctattatct tggaatctgg taacgttaäc gattacgaag ttgtttatcc aagaaaggtc actccagttc ctaggggtgc tgttcaacca aagtacgaag atgccatgca atacgaattc aaggttaaca gtgaaccagt tgtcttgcac ttggaaaaaa acaaaggttt gttctctgaa gattactctg aaactcatta ctccccagat ggtagagaaa. ttactactta cccattgggt gaagatcact gttactacca tggtagaatc gaaaacgatg ctgaccccac tgcttctatc tctgcttgta acggtttgaa gggtcátttc aagttgcaag gtgaaatgta cttgattgaa ccattggaat tgtccgactc tgaagcccat gctgtctaca agcacgaaaa cgtcgaaaag gaagatgaag ccccaaagat gtgtggtgtt acccaaaact gggaatcata tgaaccaatc aagaaggcct tccaattaaa cttgactaag a’gatctttcc cacaaagata cgtacagctg gttatcgttg ctgaccáccg tatgaacact aaatacaacg gtgactctga caaaatccgt caatgggtgc accaaatcgt caacaccatt aacga'aatct acagaccact gaacatccaa ttcactttgg ttggtttgga aatctggtcc aaccaagatt tgatcaccgt tacttctgta tcccacgaca ctctggcatc cttcggtaac tggcgtgaaa ccgacctgct gcgtcgccaa cgtcatgata acgctcaact gctgaccgct atcgacttcg acggtgatac tgttggtctg gcttacgttg gtggcatgtg tcaactgaaa cattctactg gtgttatcca ggaccactcc gctattaacc tgctggttgc tctgaccatg gcacacgaac tgggtcataa cctgggtatg aaccacgatg gcaaccagtg tcactgcggt
120
ISO
240
300
360
420
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020
1080
1140
1200
1260
1320
1380
1392
120
180
240
300
360
420
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020
1080
1140
1200
1260 gcaaacccct gtgttacggc tgctatgctg tccgatcaac catccaaact gttccccgac 1320 tgcrctaaga aagactacca gaccctcctg accgttaaca acccgcagtg tatcctgaac 1380 aaaccg- 1386
Claims (21)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Farmaceutická zmes obsahujúca metaloproteinázové fibrinolytické činidlo vybrané zo skupiny skladajúcej sa z fibrolázy, a nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT), zinočnatého stabilizátoru a výnimočne, vyplňovacieho činidla vo farmaceutický prijatelnom tlmivom roztoku.
- 2. Farmaceutická zmes z nároku 1, kde zinočnatý stabilizátor je vo vode rozpustná zinočnatá sol vybraná zo skupiny skladajúcej sa zo síranu zinočnatého, octanu zinočnatého a chloridu zinočnatého.
- 3. Farmaceutická zmes z nároku 1, kde kyselina citrónová alebo vo vode rozpustná trónovej.tlmivý roztok je sol kyseliny ci
- 4. Farmaceutická zmes z nároku 1, kde výplňové činidlo je manitol.
- 5. Farmaceutická zmes z nároku 1, ktorá má pH v rozmedzí od 6,5 do 8,5.
- 6. Farmaceutická zmes, z nároku 1, ktorá je vo forme zmrazenej kvapaliny.
- 7. Farmaceutická zmes z nároku 6, ktorá nepovinne obsahuje vo vode rozpustnú vápenatú sol.
- 8. Farmaceutická zmes z nároku 7, v ktorej je vo vode rozpustná vápenatá sol vybraná zo skupiny skladajúcej sa z octanu vápenatého, síranu vápenatého a chloridu vápenatého.
- 9. Farmaceutická zmes z nároku 1, ktorá je lyofilizovaná.
- 10. Farmaceutická zmes z nároku 1, kde metaloproteináza má aminokyselinovú sekvenciu SEQ ID N0:l.
- 11. Vodná farmaceutická zmes obsahujúca od 0,1 do 50 mg/ml metaloproteinázového fibrinolytického činidla vybraného zo skupiny skladajúcej sa z fibrolázy a nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT), od 0,08 do 0,12 mM síranu zinočnatého, od 0,008 mM do 0,012 mM acetátu vápenatého a od 95 do 110 mM kysliny citrónovej alebo citrátu sodného, a pH uvedené zmesi je 7,4.
- 12. Farmaceutická zmes podľa nároku 11, obsahujúca 10 mg/ml metaloproteinázy vo vodnom roztoku obsahujúcom 100 mM kyseliny citrónovej, 0,01 mM octanu vápenatého a 0,1 mM síranu zinočnatého.
- 13. Vodná farmaceutická zmes obsahujúca od 0,1 do 50 mg/ml metaloproteinázového fibrolytického činidla vybraného zo skupiny skladajúcej sa z fibrolázy a nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT), od 0,08 do 0,12 mM octanu zinočnatého, od 18 do 22 mM kyseliny citrónovej alebo citrátu sodného, od 0,02 do 0,06 mM Tris, od 3 do 6 % (w/v) manitolu, od 0,008 do 0,012 % (w/v) Tweenu 80, a pH uvedenej zmesi je 8,0.
- 14. Vodná farmaceutická zmes vhodná na lyofilizáciu, obsahujúca od 0,1 do 50 mg/ml metaloproteinázového fibrinolytického činidla vybraného zo skupiny skladajúcej sa z fibrolázy a nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT), od 0,08 do 0,12 mM octanu zinočnatého, od 18 do 22 mM kyseliny citrónovej alebo citrátu sodného, od 3 do 6 mM Tris, od 3 do 6 % (w/v) manitolu, od 0,008 do 0,012 % (w/v) Tweenu 80, nepovinne od 0,1 do 0,5 % (w/v) sacharózy, a pH uvedenej zmesi je 8,0.
- 15. Farmaceutická zmes z nároku 14, obsahujúca 12 mg/ml metaloproteinázy, 5 mM Trisu, 20 mM kyseliny citrónovej, 5 % (w/v) manitolu, 0,5 % (w/v) sacharózy, 0,01 % (w/v) Tweenu 80 a 0,1 mM síranu zinočnatého a pH uvedenej zmesi je asi 8,0.
- 16. Metóda na prípravu lyofilizovanej zmesi, zahŕňajúca tieto kroky:(a) vytvorenie zmesi metaloproteinázového fibrinolytického činidla vybraného zo skupiny skladajúcej sa z fibrolázy a nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT), zinočnatej soli, výplňového činidla a stabilizačného disacharidu a detergentu v tlmivom roztoku a (b) lyofilizáciu zmesi z kroku (a).
- 17. Metóda z nároku 16, kde pH uvedenej zmesi je upravené na rozmedzie 7,8 a 8,2 pred lyofilizáciou.
- 18. Metóda z nároku 16, zahŕňajúca kroky:(a) úpravu pH roztoku, ktorý obsahuje zinočnatú sol, výplňové činidlo a stabilizačný disacharid na pH medzi 7,6 a 8,2.(b) výmenu tlmivého roztoku v roztoku obsahujúcom metaloproteinázu na roztok z kroku (a) a potom pridanie účinného množstva detergentu a (c) lyofilizáciu zmesi z kroku (b).
- 19. Lyofilizovaná farmaceutická zmes pripravená metódou z nároku 18.
- 20. Metóda zahŕňajúca kroky opätovného rozpustenia vodnej farmaceutickej zmesi z nároku 1, ktorá bola lyofilizovaná a podávanie opätovne rozpustenej zmesi pacientovi pri potrebe lýzy krvnej zrazeniny.
- 21. Sada na prípravu vodnej farmaceutickej zmesi obsahujúca prvú nádobu lyofilizovanej zmesi metaloproteinázového fibrinolytického činidla vybraného zo skupiny skladajúcej sa z fibrolázy a nového aktívneho trombolytického polypeptidu (NAT) a druhá nádoba obsahuje vhodné rozpúšťadlo pre lyofilizovanú zmes.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US09/411,335 US6440414B1 (en) | 1999-10-01 | 1999-10-01 | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent |
| PCT/US2000/027022 WO2001024817A2 (en) | 1999-10-01 | 2000-09-29 | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK4242002A3 true SK4242002A3 (en) | 2003-08-05 |
Family
ID=23628514
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK424-2002A SK4242002A3 (en) | 1999-10-01 | 2000-09-29 | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US6440414B1 (sk) |
| EP (2) | EP1438967A3 (sk) |
| JP (1) | JP2003510369A (sk) |
| KR (1) | KR100717435B1 (sk) |
| CN (2) | CN101209347A (sk) |
| AT (1) | ATE262923T1 (sk) |
| AU (1) | AU769313B2 (sk) |
| BG (1) | BG106578A (sk) |
| BR (1) | BR0014420A (sk) |
| CA (1) | CA2385966A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ20021033A3 (sk) |
| DE (2) | DE60009529T2 (sk) |
| DK (1) | DK1220685T3 (sk) |
| EA (2) | EA004627B1 (sk) |
| ES (2) | ES2224917T1 (sk) |
| HK (1) | HK1049112B (sk) |
| HU (1) | HUP0202654A3 (sk) |
| IL (1) | IL148842A0 (sk) |
| MX (1) | MXPA02003197A (sk) |
| NO (1) | NO20021500L (sk) |
| NZ (4) | NZ540967A (sk) |
| PL (1) | PL355016A1 (sk) |
| PT (1) | PT1220685E (sk) |
| SG (1) | SG148823A1 (sk) |
| SK (1) | SK4242002A3 (sk) |
| WO (1) | WO2001024817A2 (sk) |
| YU (1) | YU23302A (sk) |
| ZA (1) | ZA200202400B (sk) |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5149470B2 (ja) | 1999-02-22 | 2013-02-20 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | 新規のアルブミンを含有していない第ｖｉｉｉ因子処方物 |
| US6261820B1 (en) | 1999-10-01 | 2001-07-17 | Amgen Inc. | Fibronolytically active polypeptide |
| US6440414B1 (en) | 1999-10-01 | 2002-08-27 | Amgen Inc. | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent |
| US6455269B1 (en) * | 1999-12-17 | 2002-09-24 | Amgen, Inc. | Method for localized administration of fibrinolytic metalloproteinases |
| US7033776B2 (en) | 1999-12-17 | 2006-04-25 | Amgen Inc. | Method for treatment of indwelling catheter occlusion using fibrinolytic metalloproteinases |
| DE10149030A1 (de) * | 2001-10-05 | 2003-04-10 | Viscum Ag | Stabile galenische gefriergetrocknete Arzneimittelzubereitung von rViscumin |
| US20050239746A1 (en) * | 2002-02-01 | 2005-10-27 | Penkler Lawrence J | Pharmaceutical composition |
| WO2003068805A2 (en) * | 2002-02-14 | 2003-08-21 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Formulation strategies in stabilizing peptides in organic solvents and in dried states |
| US6803046B2 (en) * | 2002-08-16 | 2004-10-12 | Bracco International B.V. | Sincalide formulations |
| JP5201992B2 (ja) * | 2004-12-15 | 2013-06-05 | バイオビトラム・アクテイエボラーグ（パブリツク） | ケラチノサイト増殖因子の治療用製剤 |
| KR20080076907A (ko) * | 2005-11-18 | 2008-08-20 | 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 | 신나미드 유도체의 제조 방법 |
| US8158152B2 (en) * | 2005-11-18 | 2012-04-17 | Scidose Llc | Lyophilization process and products obtained thereby |
| KR100807692B1 (ko) * | 2006-11-08 | 2008-02-28 | 신라대학교 산학협력단 | 혈전용해성 메탈로프로테아제 및 이를 포함하는 조성물 |
| EP1958618A1 (de) | 2007-02-15 | 2008-08-20 | Octapharma AG | Verfahren zur Gefriertrocknung mit optimierter Rekonstitution von Biopolymeren |
| CA2742328C (en) | 2008-11-07 | 2019-02-26 | Baxter International Inc. | Factor viii formulations |
| KR20120050442A (ko) * | 2009-07-10 | 2012-05-18 | 쓰롬보제닉스 엔.브이. | 플라스미노겐 및 플라스민의 변이체 |
| CN102000022A (zh) * | 2010-11-23 | 2011-04-06 | 郑州大学 | 注射用重组双功能纤溶酶冻干制剂及其制备方法 |
| CA2823491A1 (en) | 2011-01-05 | 2012-07-12 | Thrombogenics Nv | Plasminogen and plasmin variants |
| US9644196B2 (en) | 2011-08-12 | 2017-05-09 | Thrombogenics Nv | Plasminogen and plasmin variants |
| US20140212405A1 (en) | 2013-01-28 | 2014-07-31 | 2294719 Ontario Limited | Fibrinolytic/Proteolytic Treatment of Myofacial and Neuropathic Pain and Related Conditions |
| US11137409B2 (en) * | 2014-11-06 | 2021-10-05 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Identification of novel disease states using viscoelastic analysis in the presence of a thrombolytic agent |
| CN113382714A (zh) * | 2019-01-06 | 2021-09-10 | 恩多全球美学有限公司 | 胶原酶制剂及其制备方法 |
Family Cites Families (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2310133A2 (fr) | 1975-05-05 | 1976-12-03 | Fabre Sa Pierre | Nouveau medicament comportant un activateur du plasminogene perfectionne |
| JPS57500844A (sk) * | 1980-06-27 | 1982-05-13 | ||
| US4447236A (en) * | 1982-02-05 | 1984-05-08 | Cordis Corporation | Infusion catheter system |
| US4610879A (en) | 1984-01-06 | 1986-09-09 | University Of Southern California | Fibrinolytic enzyme from snake vernom |
| CA1237482A (en) * | 1984-03-09 | 1988-05-31 | Frank B. Stiles | Catheter for effecting removal of obstructions from a biological duct |
| US4755167A (en) * | 1984-04-10 | 1988-07-05 | Research Corporation | In vivo method for distribution and stirring of therapeutic agents |
| US4885242A (en) * | 1984-10-30 | 1989-12-05 | Phillips Petroleum Company | Genes from pichia histidine pathway and uses thereof |
| US4855231A (en) * | 1984-10-30 | 1989-08-08 | Phillips Petroleum Company | Regulatory region for heterologous gene expression in yeast |
| US4837148A (en) * | 1984-10-30 | 1989-06-06 | Phillips Petroleum Company | Autonomous replication sequences for yeast strains of the genus pichia |
| US4818700A (en) * | 1985-10-25 | 1989-04-04 | Phillips Petroleum Company | Pichia pastoris argininosuccinate lyase gene and uses thereof |
| US4812405A (en) * | 1986-02-18 | 1989-03-14 | Phillips Petroleum Company | Double auxotrophic mutants of Pichia pastoris and methods for preparation |
| US5000185A (en) * | 1986-02-28 | 1991-03-19 | Cardiovascular Imaging Systems, Inc. | Method for intravascular two-dimensional ultrasonography and recanalization |
| US4848700A (en) * | 1987-04-16 | 1989-07-18 | Lockheed John A | Canard control system for aircraft |
| ZA889415B (en) | 1987-12-18 | 1989-09-27 | Chiron Corp | Compositions and method for recombinant production of crotalidus venum fibrolase |
| WO1990007352A1 (en) | 1989-01-04 | 1990-07-12 | Boston Scientific Corporation | Angioplasty catheter |
| US5222941A (en) * | 1990-01-12 | 1993-06-29 | Don Michael T Anthony | Method of dissolving an obstruction in a vessel |
| ES2180528T3 (es) | 1990-01-16 | 2003-02-16 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Metodo de expresion de genes heterologos en la levadura pichia pastoris, vectores de expresion y microorganismos transformados. |
| US5709676A (en) * | 1990-02-14 | 1998-01-20 | Alt; Eckhard | Synergistic treatment of stenosed blood vessels using shock waves and dissolving medication |
| US5250034A (en) * | 1990-09-17 | 1993-10-05 | E-Z-Em, Inc. | Pressure responsive valve catheter |
| US5167628A (en) * | 1991-05-02 | 1992-12-01 | Boyles Paul W | Aortic balloon catheter assembly for indirect infusion of the coronary arteries |
| US5380273A (en) * | 1992-05-19 | 1995-01-10 | Dubrul; Will R. | Vibrating catheter |
| EP0624642B1 (en) | 1993-05-12 | 1999-01-20 | Indian Council For Medical Research | Novel thrombolytic agent, process for preparing same and its use for the preparation of a thrombi dissolving medicament |
| US5370653A (en) * | 1993-07-22 | 1994-12-06 | Micro Therapeutics, Inc. | Thrombectomy method and apparatus |
| AU692497B2 (en) | 1993-12-17 | 1998-06-11 | Asahi Kasei Pharma Corporation | Soluble thrombomodulin-containing pharmaceutical composition |
| US5626564A (en) * | 1995-03-31 | 1997-05-06 | Creighton University | Adjustable sideholes catheter |
| US6020181A (en) * | 1995-05-17 | 2000-02-01 | New York Blood, Inc. | Inhibition of thrombus formation by medical related apparatus comprising treating with fibrinolytic matrix metalloproteinase |
| US5830468A (en) * | 1995-05-17 | 1998-11-03 | The New York Blood Center, Inc. | Fibrin(ogen) degradation by fibrinolytic matrix metalloproteinase |
| US5741779A (en) * | 1996-05-10 | 1998-04-21 | Xoma Corporation | Antithrombotic materials and methods |
| WO1997045105A1 (en) | 1996-05-24 | 1997-12-04 | Angiotech Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating or preventing diseases of body passageways |
| US5951981A (en) | 1996-12-02 | 1999-09-14 | Diatide, Inc. | Thrombolytic agents with antithrombotic activity |
| US6413760B1 (en) | 1997-04-15 | 2002-07-02 | Genetics Institute, Inc. | Highly purified mocarhagin cobra venom protease polynucleotides endcoding same and related proteases and therapeutic uses thereof |
| US6261820B1 (en) | 1999-10-01 | 2001-07-17 | Amgen Inc. | Fibronolytically active polypeptide |
| US6440414B1 (en) | 1999-10-01 | 2002-08-27 | Amgen Inc. | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent |
| US6455269B1 (en) * | 1999-12-17 | 2002-09-24 | Amgen, Inc. | Method for localized administration of fibrinolytic metalloproteinases |
| US20020081685A1 (en) | 2000-08-03 | 2002-06-27 | Fox Brian A. | Disintegrin homologs, ZSNK10, ZSNK11, and ZSNK12 |
-
1999
- 1999-10-01 US US09/411,335 patent/US6440414B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-09-28 NZ NZ540967A patent/NZ540967A/en unknown
- 2000-09-29 EA EA200200396A patent/EA004627B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-09-29 NZ NZ550200A patent/NZ550200A/en unknown
- 2000-09-29 ES ES04007657T patent/ES2224917T1/es active Pending
- 2000-09-29 PT PT00967197T patent/PT1220685E/pt unknown
- 2000-09-29 AU AU77430/00A patent/AU769313B2/en not_active Ceased
- 2000-09-29 AT AT00967197T patent/ATE262923T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-09-29 SK SK424-2002A patent/SK4242002A3/sk unknown
- 2000-09-29 EP EP04007657A patent/EP1438967A3/en not_active Withdrawn
- 2000-09-29 NZ NZ530959A patent/NZ530959A/en unknown
- 2000-09-29 NZ NZ518007A patent/NZ518007A/en unknown
- 2000-09-29 DE DE60009529T patent/DE60009529T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-29 HU HU0202654A patent/HUP0202654A3/hu unknown
- 2000-09-29 EA EA200400182A patent/EA006600B1/ru unknown
- 2000-09-29 CA CA002385966A patent/CA2385966A1/en not_active Abandoned
- 2000-09-29 JP JP2001527816A patent/JP2003510369A/ja not_active Withdrawn
- 2000-09-29 YU YU23302A patent/YU23302A/sh unknown
- 2000-09-29 DK DK00967197T patent/DK1220685T3/da active
- 2000-09-29 DE DE2004007657 patent/DE04007657T1/de active Pending
- 2000-09-29 KR KR1020027004128A patent/KR100717435B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-09-29 IL IL14884200A patent/IL148842A0/xx unknown
- 2000-09-29 ES ES00967197T patent/ES2218228T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-29 SG SG200400542-7A patent/SG148823A1/en unknown
- 2000-09-29 PL PL00355016A patent/PL355016A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2000-09-29 WO PCT/US2000/027022 patent/WO2001024817A2/en active IP Right Grant
- 2000-09-29 CN CNA2007101529313A patent/CN101209347A/zh active Pending
- 2000-09-29 MX MXPA02003197A patent/MXPA02003197A/es active IP Right Grant
- 2000-09-29 CN CNB008163790A patent/CN100353999C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-29 EP EP00967197A patent/EP1220685B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-29 CZ CZ20021033A patent/CZ20021033A3/cs unknown
- 2000-09-29 BR BR0014420-7A patent/BR0014420A/pt not_active Application Discontinuation
-
2002
- 2002-03-26 ZA ZA200202400A patent/ZA200202400B/en unknown
- 2002-03-26 NO NO20021500A patent/NO20021500L/no not_active Application Discontinuation
- 2002-04-04 BG BG106578A patent/BG106578A/bg unknown
- 2002-08-23 US US10/226,408 patent/US7138114B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-01-10 HK HK03100282.4A patent/HK1049112B/zh not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-06-29 US US11/479,214 patent/US7311908B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-07-28 US US11/495,487 patent/US7244426B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK4242002A3 (en) | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent | |
| US20230355723A1 (en) | Non-protein clostridial toxin compositions | |
| KR100457485B1 (ko) | 안정한 트란스글루타미나제 제형 및 이의 제조 방법 | |
| KR20120112248A (ko) | 보톨리눔 독소의 동결건조제제 | |
| KR19990028819A (ko) | Hgf 동결 건조 제제 | |
| SK282827B6 (sk) | Farmaceutický prípravok obsahujúci aktivátory plazminogénu a spôsob jeho výroby | |
| AU2006200638B2 (en) | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent | |
| AU2004201694B2 (en) | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent | |
| BRPI0613001B1 (pt) | Composições farmacêuticas de toxina clostrídica estabilizada por uma não-proteína |